KR20130092256A

KR20130092256A - 발모 및 육모 촉진용 조성물

Info

Publication number: KR20130092256A
Application number: KR1020120013879A
Authority: KR
Inventors: 조인식; 지경엽; 김한영; 김근회
Original assignee: 애경산업(주)
Priority date: 2012-02-10
Filing date: 2012-02-10
Publication date: 2013-08-20

Abstract

본 발명은 구절초(Chrysanthemum zawadskii, Chrysanthemum indicum) 추출물 및 미녹시딜(Minoxidil, 2,4-디아미노-6-피페리디노피리미딘-3-옥사이드, 2,4-diamino-6-piperidinopyrimidine-3-oxide)을 포함하는 발모 및 육모 촉진용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 조성물은 휴지기에서 성장기로 이행되는 주기를 단축시켜 모발의 성장을 촉진시키므로 발모 및 유모 촉진 효과가 우수할 뿐만 아니라 부작용이 거의 없고 사용감이 우수하다.

Description

발모 및 육모 촉진용 조성물 {Composition for promoting hair growth and restoration}

본 발명은 발모 및 육모 촉진용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 구절초(Chrysanthemum zawadskii, Chrysanthemum indicum) 추출물 및 미녹시딜(Minoxidil, 2,4-디아미노-6-피페리디노피리미딘-3-옥사이드, 2,4-diamino-6-piperidinopyrimidine-3-oxide)을 포함하는 발모 및 육모 촉진용 조성물에 관한 것이다.

탈모는 유전적 요인이 가장 주요한 원인으로 작용하며 이외에도 스트레스가 탈모인구 증가의 주요 원인으로 작용하고 있다. 최근 사회적 스트레스의 증가와 더불어 환경오염 및 인스턴트식품 등 서구화된 식습관, 잦은 파마와 염색, 잘못된 두피관리들로 인하여 탈모 인구가 점차 증가하고 있다.

모발은 성장기(Anagen), 퇴화기(Catagen), 휴지기(Telogen)의 주기를 돌며 발모와 탈모를 반복하며 유지되고 있다. 상세하게는, 모발을 성장시키는 성장기(anagen), 성장을 종료하고 모구부가 축소하는 시기인 퇴화기(catagen), 모유두가 활동을 멈추고 모발을 두피에 머무르게 하는 시기인 휴지기(talogen), 모유두가 활동을 시작하거나 또는 새로운 모발을 발생시켜 오래된 모발을 탈모시키는 시기인 발생기로 나눌 수 있다.

모발의 성장기는 남성 3~5년, 여성이 4~6년 정도로 그 후 퇴화기 30~45일 정도, 휴지기가 3~4개월 정도 지나 자연적으로 탈모가 된다. 그리고 휴지기의 마지막이 되면 새로운 모발이 생성되는 발생기가 시작된다.

탈모는 정상적인 현상이나 정상인 사람이 성장기 상태의 모발이 많은 데 비해 보통 탈모증(Alopecia)인 사람은 휴지기 상태의 모발이 많아 눈으로 보이는 탈모현상이 나타내게 된다.

탈모증을 나타내는 사람들의 특징은 모발의 소형화에 있다. 탈모가 진행될수록 성장기의 기간이 짧아지고 이로 인하여 모발은 점점 소형화된다. 따라서 탈모의 치료를 위해서는 휴지기 상태의 모낭을 성장기로 빨리갈 수 있도록 하고, 짧아진 성장기를 늘려주는 것이 중요하다.

처음으로 모낭(hair follicle)의 형성은 베타-카테닌(β-catenin)의 작용에 의해 기원판(placode)이 형성되면(Laura C. 2003), 형성된 기원판로부터 모낭이 완성되고 모낭 내부의 모유두세포(Dermal papilla cell)에 의해 모발이 생성된다. 이렇게 모발이 자라는 시기를 성장기라 한다. 처음 생성된 모발은 성장기 시기를 거쳐 휴지기로 들어가며, 이는 퇴화기를 거쳐 탈모되며 다시 성장기로 들어가는 주기를 돈다.

성장기(Anagen Stage; 2~7년)는 모발이 성장하는 기간이다. 성장기 단계는 다시 2단계로 나누어진다. 모발이 모구로부터 모포로 나가려는 모발 생성 단계와 딱딱한 케라틴이 모낭 안에서 만들어지는 단계이다. 퇴행기까지 자가성장을 계속한다. 성장기의 수명은 2~7년이며 전체 모발(10~15만개)의 89~90%를 차지하고 생장기 단계에서 모발은 한 달에 1~1.5cm정도 자란다. 음식물, 호르몬, 비타민의 영향에 의해 변화될 수 있다.

퇴행기(Catagen Stage; 2~3주)는 성장기가 끝나고, 모발의 형태를 유지하면서 대사과정이 느려지는 시기이다. 이 단계에서는 케라틴을 만들어 내지는 않는다. 퇴화기의 수명은 2~3주이며 전체 모발의 1%를 차지한다. 모구부가 수축하여 모유두로 나눠지며 모낭에 둘러싸여 위쪽으로 올라간다. 이때 세포분열은 정지하고 있다.

휴지기(Talogen Stage; 3개월)는 모유두가 위축되고 모낭은 차츰 쪼그라들며, 모근은 위쪽으로 밀려 올라가 빠진다. 모발이 없어지는 시기로서 다음 생장기 단계가 시작될 때까지의 수명은 3~4개월이다. 전체 모발의 4~14% 해당(분만 후 30~40%)되며 이 시기의 모발은 강한 브러싱에 의해서도 쉽게 탈모된다.

안드로겐성 탈모증(androgenetic alopecia)은 크게 남성형 탈모증(male pattern alopecia), 여성용 탈모증(female pattern hair loss)나눌 수 있으며, 그 밖에 탈모증으로는 원형탈모증(alopecia areata), 기타원인에 의한 탈모증으로 나눌 수 있다.

남성형 탈모증은 남성의 성징을 나타나게 하며 사춘기에 근육의 발달, 남성 기관의 발달 등에 작용하는 호르몬인 테스토스테론(Testosterone)이라는 남성호르몬에 의해 나타나는 현상으로 이 테스토스테론이 5 알파-리덕타아제(α-reductase)라는 효소에 의해 더 강력한 호르몬인 디히드로테스토스테론 (Dihydrotestosterone, DHT)으로 바뀌게 되면, 이 호르몬이 모낭에 작용하여 모낭을 성장기 단계에서 퇴화기 단계로 유도하여 탈모가 일어나게 한다. 따라서, 이러한 원인에 의한 탈모증을 치료하기 위하여 5 알파-리덕타아제에 의한 DHT의 생성을 억제하는 방법이 주로 사용되고 있다.

여성형 탈모증은 주로 폐경기 이후 에스트로겐 양의 감소에 의해 발생한다.여성의 탈모증은 남성형 탈모증의 모양과는 좀 다르게 머리 앞부분은 빠지지 않고 중간 부분의 머리만이 주로 탈모된다. 여성의 탈모증은 5 알파-리덕타아제와의 연관 관계가 남성보다 적다. 따라서 5 알파-리덕타아제를 억제시키는 약물은 폐경기 이후의 탈모증 여성에게는 별로 효과가 없다. 이러한 탈모증을 위한 치료제로는 주로 미녹시딜이나 에스트로겐이 사용되고 있다.

원형 탈모증은 자가면역질환이나 정신적 스트레스, 유전적 소인에 의해 발생한다. 원형 또는 난원형의 탈모가 일어나며, 두부 백선이나 발모벽이 생기는 특징을 갖고 있다. 이러한 원형 탈모증은 안드로겐성 탈모증과는 근본적으로 원인이 다르며, 치료법 또한 달라서 부신피질 호르몬제를 처리하는 방법을 사용하거나, 미녹시딜을 환부에 바르거나 인위적으로 환부에 자극을 유발하는 방법을 사용한다.

이처럼 다양하고 복잡한 탈모 원인에 대하여, 혈액 순환 촉진, 남성 호르몬 작용 억제, 모근 기능 강화 등을 목적으로 하는 성분등이 시중에 제품으로 판매되고 있으나, 뚜렷한 효과를 지닌 것은 아직까지 없는 상태이고 부작용의 문제가 제기되기도 한다. 이러한 발모제로, 처음에는 혈액 순환 촉진을 위한 용도로 개발되어 사용되다가 이를 사용하는 환자들 사이에서 부작용으로 발모 효과를 나타내는 것으로 알려져, 이후, 발모용 원료로 미국식품의약품안전청(FDA)에서 승인받아 발모 치료제로 사용되어진 미국특허 제 3,382,247의 미녹시딜(2,4-diamino-6-piperidinopyrimidine-3-oxide)은 현재에도 발모용 치료제로 사용되고 있다. 미국특허 제 5,215,894호에서 언급된 머크사의 피나스테라이드(finasteride)는 처음에는 남성의 전립선 치료제로 사용되던 성분이었으나, 역시 인체 내 투여량을 조절하여 남성형 탈모증 치료제로 탄생하게 되었다.

그러나, 미녹시딜의 경우 끈적이는 사용감과 피부에 자극을 유발하는 부작용이 보고된 바 있으며, 피나스테라이드의 경우 현재 경구투여용 제제로 사용되어지고 있으나, 이의 섭취에 따라 성기능 장애 등의 부작용이 보고된 일도 있을 뿐 아니라, 탈모에 대해서도 꾸준한 복용이 이루어져야만 효과가 있으며, 이들의 5 알파-리덕타아제 활성 억제 작용은 도포에 의한 효과를 기대하기 어렵고, 경구복용에 의해서만 효과를 기대할 수 있어서 사용상에 많은 불편함이 있다.

이상과 같은 문제점에 착안하여, 본 발명자들은 다양한 인체 안전성이 확보된 천연 추출물을 대상으로 스크리닝을 실시하였고, 우수한 발모력을 나타내는 선별된 천연물과 미녹시딜의 상승 효과를 규명하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 인체에 안전하고 부작용이 없으면서도 발모 및 육모 효과가 우수한 발모 및 육모 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 일 구체예에서, 구절초 추출물; 및 하기 화학식 1로 표시되는 미녹시딜(Minoxidil, 2,4-디아미노-6-피페리디노피리미딘-3-옥사이드, 2,4-diamino-6-piperidinopyrimidine-3-oxide)을 포함하는 발모 및 육모 촉진용 조성물을 제공한다.

[화학식 1]

본 발명의 일 구체예에서, 상기 조성물은 초산토코페롤, 살리실산, 디판테놀, 니코틴산아미드, 비오틴, 펜타데칸글리세리드, 히노키티올, 아연피리치온 및 클림바졸로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 혼합물을 추가로 포함한다.

본 발명의 일 구체예에서, 상기 구절초는 원구절초(Chrysanthemum zawadskii) 또는 가구절초(Chrysanthemum indicum)이고, 구절초 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.0001~50 중량% 포함되며, 바람직하게는 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 10.0 중량% 포함되는데, 0.0001 중량% 미만에서는 모발의 성장 유도 촉진 효과가 미미하고, 50 중량% 초과의 농도에서는 제형의 안정성이 떨어져서 바람직하지 않기 때문이다.

본 발명의 일 구체예에서, 상기 미녹시딜은 조성물 총 중량에 대하여 0.01~20 중량% 포함되고, 상기 미녹시딜은 조성물 총 중량에 대하여 0.1~10 중량% 포함된다.

또한, 본 발명에 따른 구절초 추출물은 유기용매를 통한 추출물 및 물을 이용한 수추출, 초임계추출을 통한 추출을 포함한 구절초를 이용한 모든 추출물을 포함하고, 본 발명에 따른 구절초 추출물은 구절초를 물을 이용한 추출보다는 유기용매를 이용한 추출이 바람직하다. 구절초 추출물의 추출을 위해 사용되는 추출 용매의 예로는 정제수; 메탄올, 에탄올, 이소프로필알코올, 부탄올 등의 저급 알코올; 글리세롤, 에틸렌글리콜, 프로필렌 글리콜, 1, 3-부틸렌 글리콜 등의 다가 알코올; 및 석유에테르, 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 벤젠, 헥산, 메틸렌클로라이드, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 클로로포름의 등의 탄화수소계 용매 등이 있고, 이들 중에서 하나 또는 두 종류 이상의 용매를 혼용할 수 있다.

본 발명의 일 구체예에서, 상기 발모 및 육모 조성물을 포함하는 외용액제, 크림제, 연고제, 페이스트, 에어로솔제, 겔제, 또는 왁스제 형태의 두피 및 피부에 적용시킬 수 있는 국소 도포형 발모제를 제공한다.

본 발명의 일 구체예에서, 상기 발모 및 육모 조성물을 포함하는 샴푸, 린스, 앰플, 또는 트리트먼트 형태의 모발에 적용시킬 수 있는 모발용 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물은 구절초 추출물과 미녹시딜을 포함하여 미녹시딜 단독 사용시 보다 두 가지 성분의 높은 상승 효과에 의하여 모발의 성장주기 중 휴지기에서 성장기로 이행되는 주기를 단축시켜 모발의 성장을 촉진시키므로 발모 및 육모 촉진 효과가 우수하고, 미녹시딜의 사용량을 줄임으로써 기존에 알려진 미녹시딜에 의한 부작용 및 끈적임에 의한 사용감의 저하를 최소화 할 수 있다.

본 발명을 더욱 상세히 설명하면 다음과 같다.

본 발명의 발모 및 육모 촉진용 조성물은 구절초 추출물을 포함한다. 상기 구절초 추출물은 모발의 성장을 촉진시켜 발모 및 육모 촉진 효과를 나타내며, 천연 추출물로서 장기간 사용하더라도 인체에 안정하고 부작용이 거의 없다.

상기 구절초는 원구절초(Chrysanthemum zawadskii)와, 가구절초 (Chrysanthemum indicum)의 종이 포함되며 가을에 피는 대표적인 자생화로 5 월 단오에는 줄기가 5 마디가 되고, 9 월 9 일(음력)이 되면 9 마디가 된다 하여 구절초(九節草)라 불린다. 또한 구절초는 줄기끝에 한 송이 꽃이 피는데 흰 꽃이 신선보다 더 돋보인다 하여 선모초(仙母草)라 불린다. 바닷가를 제외한 전국에 자생하며 특히 높고 깊은 산에서 군락을 형성하여 자란다. 구절초는 종(種)으로는 단일종(單一種)이지만 품종은 몇 가지가 있다. 산구절초는 높이 10~60 ㎝, 꽃 직경 3~6 ㎝이며, 바위 구절초는 중북부지방의 깊은 산에서 자라는 한국 특산 식물로 높이 20 ㎝, 꽃 직경 2~4 ㎝이다. 포천 구절초는 한탄강 지역에 자생하며 꽃색이 분홍색이 돈다. 우리 자생식물 중 원예가치가 높은 꽃 중 하나인 구절초는 국화과의 여러해살이 풀로 땅 속의 뿌리가 옆으로 길게 뻗어가면서 번식하며 번식력도 대단히 강하다. 그래서 가을에 외래 식물인 코스모스에 경쟁할 만한 우리 꽃이다. 한방에서 구절초는 부인병, 보온에 특효가 있다. 특히, 월경장애에 효과가 있다. 꽃은 술을 담그거나 말려서 베게 속에 넣으면 두통에 효과가 있고 머리칼이 희게 되는 것을 방지한다고 알려져 있다. 어린 싹은 나물로 무쳐먹고 잎은 떡을 찔 때 넣으면 향기를 내준다.

상기 구절초 추출물은 구절초의 다양한 기관 또는 부분, 즉, 잎, 꽃, 열매, 줄기, 뿌리, 가지 및 껍질 등을 추출하여 얻을 수 있고, 바람직하게는 줄기과 잎을 추출하여 얻은 추출물일 수 있다.

상기 구절초 추출물은 당업계에 공지된 통상적인 추출 방법으로 얻을 수 있으며, 구체적으로는 유기용매 추출, 물을 이용한 수 추출 또는 초임계 추출로 얻을 수 있다. 바람직하게는 유기용매 추출로 얻을 수 있다. 상기 유기용매는 당업계에 공지된 것이 제한없이 사용될 수 있으며, 구체적으로는 정제수; 메탄올, 에탄올, 이소프로필알코올, 부탄올 등의 저급 알코올; 글리세롤, 에틸렌글리콜, 프로필렌 글리콜, 1, 3-부틸렌 글리콜 등의 다가 알코올; 및 석유에테르, 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 벤젠, 헥산, 메틸렌클로라이드, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 클로로포름등의 탄화수소계 용매로 이루어진 군으로부터 선택된 단독 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있다. 바람직하게는, 비극성 또는 에틸아세테이트 이하의 극성을 갖는 유기용매를 사용할 수 있다.

상기 구절초 추출물은 총 조성물 100 중량부에 대하여 0.0001 내지 50 중량부로 포함될 수 있다. 바람직하게는 0.1 내지 10.0 중량부로 포함될 수 있다. 0.0001 중량부 미만으로 포함되면 모발의 성장 유도 촉진 효과가 나타나지 않고, 50 중량부를 초과하여 첨가되면 구절초 추출물의 조성물내에서의 용해가 어려워 제형화가 용이하지 않으며 구절초 특유의 향으로 조성물 전체의 향이 나쁠 수 있어 효과에 비해 불편함이 크게 나타나 바람직하지 않다.

또한, 본 발명의 발모 및 육모 촉진용 조성물은 미녹시딜을 포함한다. 상기 미녹시딜은 미국 FDA에 의약품으로 승인된 탈모를 치료하는 치료제로서, 상기 구절초 추출물과 조합하여 사용하는 경우 모발의 성장 촉진 효과가 눈에 띄게 상승한다.

상기 피롤리디닐 디아미노피리미딘 옥사이드는 발모 및 육모 촉진용 조성물 100 중량%에 대하여 0.01 내지 20 중량%로 포함될 수 있다. 바람직하게는 0.1 내지 5 중량%로 포함될 수 있다. 0.1 중량% 미만으로 포함되면 모발의 성장을 촉진시키는 상승 효과가 미미하며, 10 중량%를 초과하여 포함되면 두피에 자극이 있을 수 있고, 조성물에서 석출되어 안정성에 영향을 미칠 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물에는 상기 성분들외에 부가적인 기능 부여를 위해 당업계에서 통상적으로 사용되는 보조 성분이 포함될 수 있다. 예를 들어, 비듬 방지제, 모근 강화제, 모발 보수제, 두피 보호제, 청량제, 보습제, 유연제 등의 보조 성분들이 포함될 수 있으며, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 보조 성분들은 본 발명의 목적을 해치지 않는 범위내에서 당업자에 의해 적절한 비율로 배합될 수 있다.

본 발명의 발모 및 육모 촉진용 조성물은 당업계에 공지된 다양한 형상으로 제형화될 수 있으며, 예를 들어, 외용액제, 크림제, 연고제, 페이스트, 에어로솔제, 겔제, 왁스제, 마스카라 등의 두피 및 눈썹에 적용시킬 수 있는 국소 도포형과 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 샴푸, 린스, 앰플 및 트리트먼트등의 두피 및 피부에 적용할 수 있는 형태로 제형화될 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 더욱 구체적으로 설명한다.　 그러나 이들 실시예 및 실험예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위를 제한하고자 하는 것은 아니다.

실시예 1. 구절초 추출물의 제조

구절초의 줄기와 잎을 세절하여 불순물을 걸러낸 후, 대한약전에 수재된 기준에 따른 에탄올과 정제수를 약 4 ~ 10 배량 가하여 5 일간 실온에서 냉침하였다. 추출된 원액을 와트만 #3 여과지를 사용하여 여과하고, 여과된 추출물을 감압농축기를 이용하여 45 ℃에서 추출 용매를 완전히 증발시켜 건조된 추출물을 얻었다.

실시예 2. 발모 및 육모 촉진용 조성물의 제조

상기 실시예 1에서 제조된 구절초 추출물로부터 0.5 중량부의 미녹시딜을 포함하는 발모 및 육모 촉진용 조성물을 당업계에 공지된 통상의 방법으로 제조하였다.

실시예 3. 발모 및 육모 촉진용 조성물의 제조

상기 실시예 1에서 제조된 구절초 추출물로부터 1 중량부의 미녹시딜을 포함하는 발모 및 육모 촉진용 조성물을 당업계에 공지된 통상의 방법으로 제조하였다.

실시예 4. 발모 및 육모 촉진용 조성물의 제조

상기 실시예 1에서 제조된 구절초 추출물로부터 3 중량부의 미녹시딜을 포함하는 발모 및 육모 촉진용 조성물을 당업계에 공지된 통상의 방법으로 제조하였다.

비교예 1 내지 3

하기 표 1 과 같은 조성으로 상시 실시예 2 내지 4와 동일한 방법으로 비교예 1 내지 3의 조성물을 제조하였다.

성 분 명	비교예 1	비교예 2	비교예 3	실시예 2	실시예 3	실시예 4
에탄올	40	40	40	40	40	40
1,3-부틸렌 글리콜	10	10	10	10	10	10
구절초 추출물	-	3	-	3	3	3
미녹시딜	-	-	3	0.5	1	3
정제수	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량

실험예 1. 마우스 C57BL /6를 이용한 in vivo 발모력 시험

발모 및 육모 효과 연구에 주로 이용되는 실험법으로는 실험동물을 이용한 in vivo 평가와 모유두세포(Dermal Papilla cell)의 조직 배양을 이용한 in vitro 평가 등이 주로 이용되고 있으며, 현재에도 여러 가지 생화학적, 분자생물학적 실험 기법 등을 이용한 발모 및 육모 관련 실험 방법과 평가 방법 등의 연구가 활발히 진행되고 있다.

본 발명에서는 실시예 1에 따라 얻어진 구절초 추출물과 미녹시딜을 표 1의 비교예 및 실시예에 기재된 조성물을 사용하여 마우스 C57BL/6를 이용한 In vivo 발모력 실험을 실시하였다.

C57BL/6 마우스는 출생 후 6주령부터 털이 퇴화기로 되며, 7주령부터 휴지기으로 되었다가 12주령이 되면 다시 성장기으로 돌아가는 특징적인 주기를 갖는 마우스이다. 이러한 이유로 발모시험의 용도로 가장 많이 사용되는 in vivo 동물모델이다.

출생일로부터 3일 이내의 몸무게가 비슷한 개체들로 선별하여 6주령된 마우스 C57BL/6 암컷을 구매하였다. 25℃, 습도 50% 사육조건에서 1주일간의 적응기를 갖고, 7주령이 되는 주에 실험을 실시하였다.

마우스를 에테르가 들어있는 데시케이터에 넣고 1분간 마취시킨 후, 마우스의 등부분을 제모기를 이용하여 털을 제거하였다. 1일 후 등 부위에 상처가 없는 마우스를 대상으로 시료를 도포 하였다.

시료의 도포는 1일 1회 100ul씩 도포하였으며, 5일 간격으로 하기 표 2에서 기재된 판정 기준에 판정하여 발모 정도를 판정하였다.

판정 기준	판정 점수
마우스 등판의 색깔 변화가 없음	-
제모부위 약 50% 미만의 국소적인 회색 또는 약 1/4 이하의 육안적으로 확연히 구분되는 국소적인 모발성장	+
제모부위 약 50% 이상의 회색 또는 약 2/4 이하의 육안적으로 확연히 구분되는 국소적인 모발성장	++
제모부위 전체의 짙은 회색 또는 약 3/4 이하의 육안적으로 확연히 구분되는 모발성장	+++
제모부위 약 3/4 을 초과하는 육안적으로 확연히 구분되는 모발성장	++++

각 시료는 비교예 1 내지 3 및 실시예 2 내지 4에 따라 제조된 시료를 실험에 사용하였다. 그 결과를 각각 표 3 에 나타내었다.

시료명	시료도포후 경과 일수 (일)
시료명	5	10	15	20	25	30	35	40
비교예1	-	-	-	-	-	-	+	+
비교예2	-	-	+	++	+++	++++	++++	++++
비교예3	-	+	+	++	+++	++++	++++	++++
실시예2	-	+	++	+++	++++	++++	++++	++++
실시예3	-	+	+++	+++	++++	++++	++++	++++
실시예4	-	++	+++	++++	++++	++++	++++	++++

표 3의 결과에서 볼 수 있듯이 구절초 추출물 및 미녹시딜을 포함하지 않거나 단독으로 사용한 비교예보다 이들을 조합한 조성물인 실시예 3의 조성물이 가장 높은 발모 활성을 나타내었다.

상기 결과로 보아 구절초 추출물과 미녹시딜은 자체로도 발모력을 나타내지만 이들을 병행하여 사용시 상승작용에 의해 더 우수한 발모력을 나타내는 것을 확인 할 수 있었다.

실험예 2. 모낭세포의 활성도 평가

세포주는 인간 모유두세포(Human Dermal papilla cell)을 이용하였다. 세포배양은 DMEM 배지에 5% FBS를 넣어 배양액으로 사용했으며 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였다.

세포생장 촉진 효과를 알아보기 위해 MTT 분석법을 수행하였다. MTT 분석법은 다음과 같은 방법으로 수행하였다.

우선 100 디쉬(dish)에 전배양한 인간 모유두세포를 트립신을 이용하여 떼어낸 후, 혈색소계(Hemacytometer)를 이용하여 세포수를 세어 10⁵cell/ml이 되도록 맞췄다. 96 웰 플레이트(well plate)에 세포액 100ul (Well당 104cell)를 넣고, 1일간 배양했다.

1일간 배양 후 각각의 시험시료를 DMEM 배지에 최종 시료 농도의 2배가 되도록 희석한 후, 각 시료액을 1일간 배양한 세포가 있는 96 웰에 100ul씩 첨가하여 시료의 최종 농도가 표4에 기재된 농도가 되도록 하였다.

시료를 처리한 96 웰을 37℃, 5% CO2하에서 1일간 배양한 후, 0.1mg(20㎕ of 5mg/ml)의 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide)용액을 모든 웰에 첨가하였다. 37℃에서 4시간 더 배양한 후, 플레이트를 1000rpm에서 5분간 원심분리 후 배지를 모두 제거하였다. 각각의 웰에 DMSO 200㎕씩을 가하여, 생성된 포르마잔 염(formazan salt)이 완전히 녹을 수 있도록 했다. 마이크로플레이트 판독기(Microplate reader)로 570nm에서 흡광도를 측정한 후, 세포의 생장 정도를 판단하였다.

각 웰 컬럼의 평균 OD₅₇₀값을 구하여 대조군의 평균 OD₅₇₀ 값에 대한 백분율 값을 산출한다. 이 백분율은 대조군과 비교한 시험군의 세포 생존율에 해당하는 값이다. 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.

시료내역	처리 농도(%)	모유두 세포 증식능(%)
비교예 1	0.01	100
비교예 2	0.01	115
비교예 3	0.01	126
실시예 2	0.01	132
실시예 3	0.01	141
실시예 4	0.01	154

상기 표 4에서 나타난 바와 같이 구절초 추출물과 미녹시딜을 모두 포함한 실시예 2 내지 4가 구절초 추출물과 미녹시딜을 각각 단독으로 사용한 비교예 2 내지 3보다 상승효과에 의하여 높은 모유두 세포의 생장 촉진력을 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

실험예 3. 탈모환자 대상 임상 실험

탈모환자에 대한 효과를 알아보기 위하여 탈모증이 있는 환자를 대상으로 임상 시험을 실시하였다.

피실험자로서 만 20세 이상의 성인 남녀 중 남성형 탈모증이 있는 사람을 대상으로 하여, 각각의 시료당 5명씩 탈모 부위에 1일 2~3 회 분무하는 방식으로 실시하였으며, 최소 2 개월에서 최대 4개월까지 실시하였다.

효과의 판정은 사진 판정 소견 및 자각 증상 개선 정도를 다음의 평가 척도에 따라 5 단계로 평가하였다(표 5). 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다.

단계	육안판정	자각증상
1	악화 되었다	악화 되었다
2	변화가 없다	변화가 없다
3	약간 개선되었다	약간 개선되었다
4	개선되었다.	개선되었다.
5	현저하게 개선되었다	현저하게 개선되었다

구분	육안판정	자각증상
비교예 1	1.9	2.1
비교예 2	3.2	3.1
비교예 3	3.8	3.8
실시예 2	4.0	3.9
실시예 3	4.4	4.1
실시예 4	4.8	4.7

상기 표 6의 결과에 의하면 구절초 추출물이나 미녹시딜만을 포함한 비교예 2 내지 3의 조성물보다 구절초 추출물 및 피롤리디닐 디아미노피리미딘 옥사이드를 모두 포함한 실시예 2 내지 4의 조성물이 발모 및 육모 촉진 효과가 상호간의 상승효과에 의하여 현저히 증가함을 알 수 있다.

또한, 구절초 추출물 및 미녹시딜을 포함하지 않는 비교예 1의 조성물은 이러한 효과가 관찰되지 않았다. 또한, 임상시험에서의 사용기간 동안 실시예의 조성물을 사용한 대상자 전원에게서 어떠한 부작용도 발견되지 않아 인체에도 안전한 것으로 나타났고, 사용감도 우수한 것으로 판정되었다.

이상의 결과를 종합하여 보면, 구절초 추출물과 미녹시딜을 조합하여 사용한 조성물은 각각의 시료를 단독으로 사용하는 조성물에 비하여 동물실험 모델에서 더 우수한 모발 성장기 유도 촉진 효과를 나타내었고, 모낭세포를 이용한 활성 평가 실험 및 탈모 환자를 대상으로 한 임상시험에서도 매우 우수한 효과를 나타내었다. 따라서, 구절초 추출물과 미녹시딜을 조합하여 사용한 조성물은 각각의 시료를 단독으로 사용한 조성물에 비하여 높은 상승 작용에 의하여 우수한 발모 및 육모 효과를 나타냄을 알 수 있다. 또한, 종래 발모제로 사용되는 미녹시딜의 단점인 피부에 대한 자극과 끈적이는 사용감을 본 발명의 조성물은 미녹시딜의 함량을 줄이고 인체 친화적인 천연물인 구절초 추출물을 사용함으로서, 높은 상승 효과를 나타냄과 동시에 미녹시딜의 단점을 보완하여 두피에 자극을 최소화 하고 높은 사용감을 구현할 수 있었다.

실시예 5 내지 7. 샴푸 형태의 모발 및 두피 적용 조성물의 제조

상기 실시예 1에 따라 수득한 구절초 추출물과 미녹시딜 및 다른 성분을 추가적으로 포함하는 샴푸 형태의 모발 및 두피 적용 조성물을 제조하였다.

성 분 명	실시예 5	실시예 6	실시예 7
라우릴황산나트륨	10	10	10
코카미도프로필베타인	3		3
카르복실비닐폴리머	0.3	0.3	0.3
폴리쿼터늄-10	0.2	0.2	0.2
향	0.7	0.7	0.7
메틸파라벤	0.2	0.2	0.2
세틸트리메틸암모늄클로라이드	0.1	0.1	0.1
구절초추출물	3	2	1
미녹시딜	0.5	0.5	0.1
정제수	잔여량	잔여량	잔여량

실시예 8 내지 9. 린스 형태의 모발 및 두피 적용 조성물의 제조

상기 실시예 1에 따라 수득한 구절초 추출물과 미녹시딜 및 다른 성분을 추가적으로 포함하는 린스 형태의 모발 및 두피 적용 조성물을 제조하였다.

성 분 명	실시예 8	실시예 9
세틸알콜	2	2
스테아릴알콜	2.5	2.5
베헤닐알콜	0.5	0.5
향료	0.4	0.4
실리콘에멀젼	0.4	0.4
사이클로메티콘	1.0	1.0
디메틸디스테아릴암모늄클로라이드	0.1	0.1
시트릭산	pH 3~7로 조절가능한 양	pH 3~7로 조절가능한 양
구절초추출물	3	5
미녹시딜	0.5	1
정제수	잔여량	잔여량

실시예 10. 앰플 형태의 모발 및 두피 적용 조성물의 제조

상기 실시예 1에 따라 수득한 구절초 추출물과 미녹시딜 및 다른 성분을 추가적으로 포함하는 앰플 형태의 모발 및 두피 적용 조성물을 제조하였다.

성 분 명	실시예 10
에탄올	30
프로필렌글리콜	20
1.3-부틸렌글리콜	10
세틸트리메틸암모늄클로라이드	3
디메틸디스테아릴암모늄클로라이드	0.1
라우릴알콜	3
미리스틸알콜	5
세틸알콜	1
향	0.5
염료	적당량
구절초추출물	0.5
미녹시딜	1
정제수	잔여량

실시예 11 내지 12. 토닉 형태의 모발 및 두피 적용 조성물의 제조

상기 실시예 1에 따라 수득한 구절초 추출물과 미녹시딜 및 다른 성분을 추가적으로 포함하는 토닉 형태의 모발 및 두피 적용 조성물을 제조하였다.

성분명	실시예 11	실시예 12
에탄올	40	40
프로필렌글리콜	10	10
Polysorbate 20	5	5
향	0.5	0.5
염료	적당량	적당량
구절초 추출물	0.3	3
미녹시딜	1	0.5
정제수	잔여량	잔여량

지금까지 예시적인 실시 태양을 참조하여 본 발명을 기술하여 왔지만, 본 발명의 속하는 기술 분야의 당업자는 본 발명의 범주를 벗어나지 않고서도 다양한 변화를 실시할 수 있으며 그의 요소들을 등가물로 대체할 수 있음을 알 수 있을 것이다. 또한, 본 발명의 본질적인 범주를 벗어나지 않고서도 많은 변형을 실시하여 특정 상황 및 재료를 본 발명의 교시내용에 채용할 수 있다. 따라서, 본 발명이 본 발명을 실시하는데 계획된 최상의 양식으로서 개시된 특정 실시 태양으로 국한되는 것이 아니며, 본 발명이 첨부된 특허청구의 범위에 속하는 모든 실시 태양을 포함하는 것으로 해석되어야 한다.

Claims

구절초 추출물; 및
하기 화학식 1 로 표시되는 미녹시딜(Minoxidil, 2,4-디아미노-6-피페리디노피리미딘-3-옥사이드, 2,4-diamino-6-piperidinopyrimidine-3-oxide)을 포함하는 발모 및 육모 촉진용 조성물.
[화학식 1]
제1항에 있어서,
상기 조성물은 초산토코페롤, 살리실산, 디판테놀, 니코틴산아미드, 비오틴, 펜타데칸글리세리드, 히노키티올, 아연피리치온 및 클림바졸로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 혼합물을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 발모 및 육모 촉진용 조성물.
제1항에 있어서,
상기 구절초는 원구절초(Chrysanthemum zawadskii) 또는 가구절초(Chrysanthemum indicum)인 것을 특징으로 하는 발모 및 육모 촉진용 조성물.
제1항에 있어서,
상기 구절초 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.0001~50 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 발모 및 육모 촉진용 조성물.
제1항에 있어서,
상기 구절초 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 10.0 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 발모 및 육모 촉진용 조성물.
제1항에 있어서,
상기 미녹시딜은 조성물 총 중량에 대하여 0.01~20 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 발모 및 육모 촉진용 조성물.
제1항에 있어서,
상기 미녹시딜은 조성물 총 중량에 대하여 0.1~10 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 발모 및 육모 촉진용 조성물.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 발모 및 육모 조성물을 포함하는 외용액제, 크림제, 연고제, 페이스트, 에어로솔제, 겔제, 또는 왁스제 형태의 두피 및 피부에 적용시킬 수 있는 국소 도포형 발모제.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 발모 및 육모 조성물을 포함하는 샴푸, 린스, 앰플, 또는 트리트먼트 형태의 모발에 적용시킬 수 있는 모발용 조성물.