KR20130055612A

KR20130055612A - 항-바이러스 화합물

Info

Publication number: KR20130055612A
Application number: KR1020127030544A
Authority: KR
Inventors: 션 피. 이아도네이토; 크리스틴 베다드
Original assignee: 키네타, 인크.
Priority date: 2010-04-23
Filing date: 2011-04-20
Publication date: 2013-05-28
Also published as: IL222633A0; TW201139419A; AU2011242689A1; MX2012012354A; BR112012026644A2; JP2013527159A; EP2560652A4; US9408826B2; CA2798209A1; EP2560652A2; AU2011242689B2; US20110262482A1; WO2011133728A3; WO2011133728A2; CN102946881A

Abstract

본 발명에는 RNA 바이러스 감염을 비롯한 바이러스 감염의 치료를 위한 화합물 및 관련된 조성물, 그리고 RIG-I 경로를 활성화시킬 수 있는 화합물을 비롯하여, 척추동물 세포에서 RIG-I 경로를 조정할 수 있는 화합물이 개시된다.

Description

항-바이러스 화합물{ANTI-VIRAL COMPOUNDS}

본 발명의 기술 분야

본 명세서에서 개시된 화합물과 방법은 RNA 바이러스 감염을 비롯하여, 척추동물에서 바이러스 감염을 치료하는데 유용하다.

본 발명의 배경 기술

한 그룹으로서, RNA 바이러스는 미국 및 전세계에서 심각한 공중 보건 문제를 대표한다. 널리 공지된 RNA 바이러스에는 인플루엔자 바이러스(조류와 돼지 분리물 포함), C형 간염 바이러스(HCV), 웨스트 나일 바이러스, SARS-코로나바이러스, 호흡기 합포체 바이러스(RSV), 그리고 인간 면역결핍 바이러스(HIV)가 포함된다.

전세계적으로 170백만 명 이상이 HCV로 감염되고, 그리고 이들 중에서 130백만 명이 만성 간 질환(간경변, 암종, 그리고 간부전)의 발병 위험에 처해있는 만성 보균자이다. 따라서 HCV는 선진국에서 모든 간 이식 중에서 2/3을 차지한다. 최근의 연구는 HCV 감염으로 인한 사망률이 만성적으로 감염된 환자의 연령 증가로 인하여 상승하고 있다는 것을 보여준다. 유사하게, 계절 독감(seasonal flu)은 전체 인구의 5 - 20%를 감염시켜 매년 200,000명의 입원 및 36,000명의 사망을 유발한다.

인플루엔자 및 HCV와 비교하여, 웨스트 나일 바이러스는 2010년에 미국에서 981건으로 가장 적은 숫자의 감염을 유발하였다. 감염된 환자 중에서 20%는 상기 질환의 중증도 형태가 발병하고 4.5% 사망률이 발생한다. 인플루엔자 및 HCV와 달리, 웨스트 나일 바이러스 감염의 치료를 위한 승인된 요법이 없으며, 그리고 웨스트 나일 바이러스는 생물테러 무기(bioterrorist agent)로서 잠재력으로 인하여 약물 개발이 우선적으로 요구되는 병원체이다.

열거된 RNA 바이러스 중에서, 백신은 인플루엔자 바이러스에 대해서만 존재한다. 따라서 이들 바이러스와 연관된 유의미한 이환(morbidity)과 사망(mortality)을 완화시키는 약물 요법이 필수적이다. 유감스럽게도, 항바이러스 약물은 숫자가 제한되고, 대부분은 효과가 불량하고, 그리고 거의 모두 바이러스 내성의 급속한 전개 및 작용의 제한된 스펙트럼으로 인하여 무력화된다. 게다가, 급성 인플루엔자와 HCV 감염에 대한 치료제는 단지 중간 정도로 효과적이다. HCV 감염에 대한 표준 치료제, PEG화된 인터페론과 리바비린은 환자 중에서 단지 50%에서만 효과적이고, 그리고 복합 요법과 연관된 다수의 용량-제한 부작용(dose-limiting side effect)이 존재한다. 양쪽 부류의 급성 인플루엔자 항바이러스제, 아다만탄(adamantane) 및 뉴라미니다아제(neuraminidase) 저해제는 감염후 첫 48시간 이내에만 효과적이고, 따라서 치료를 위한 기회의 창(window of opportunity)이 제한된다. 아다만탄에 대한 높은 내성은 그들의 용도를 이미 제한하고, 그리고 뉴라미니다아제 저해제의 대량 비축은 궁극적으로, 남용 및 인플루엔자 내성 균주의 출현을 유발할 것이다.

이들 바이러스에 대한 대부분의 약물 개발 노력은 바이러스 단백질을 표적으로 한다. 이것은 현재의 약물이 좁은 스펙트럼을 갖고 바이러스 내성(viral resistance)이 출현하기 쉬운 이유의 상당한 부분을 차지한다. 대부분의 RNA 바이러스는 작은 유전체를 갖고, 그리고 많은 수가 12개 이하의 단백질을 인코딩한다. 이런 이유로, 바이러스 표적이 제한된다. 전술한 것에 기초하여, 바이러스 감염에 효과적인 치료제가 매우 긴급하게 요구된다.

본 발명의 요약

본 명세서에서 개시된 화합물과 방법은 바이러스 약물 개발의 초점을 바이러스 단백질의 표적화로부터, 숙주의 선천성 항바이러스 반응을 표적으로 하고 증강시키는 약물의 개발로 변경한다. 이런 화합물과 방법은 아마도 더욱 효과적이고, 바이러스 내성의 출현에 덜 민감하고, 더욱 적은 부작용을 유발하고, 그리고 넓은 범위의 상이한 바이러스에 대해 효과적이다(1).

RIG-I 경로는 RNA 바이러스 감염에 대한 선천적 면역 반응을 조절하는데 깊이 관여한다. RIG-I 작동약은 HCV, 인플루엔자, 그리고 웨스트 나일 바이러스가 포함되지만 이들에 국한되지 않는 많은 바이러스의 치료에 유용할 것으로 기대된다. 따라서 본 발명은 RNA 바이러스에 의한 감염을 비롯한 바이러스 감염을 치료하기 위한 화합물과 방법에 관계하고, 여기서 이들 화합물은 RIG-I 경로를 조정할 수 있다.

한 구체예는 하기 구조를 갖는 화합물을 포함하는 제약학적 조성물을 포함한다:

여기서 R¹과 R²는 각각 독립적으로, H, 저급 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 알킬아릴, 아릴알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알콕시, 알콕시알킬아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 환상 헤테로알킬, 아실, NH₂, OH, CN, NO₂, OCF₃, CF₃, Br, Cl, F, 1-아미디노, 2-아미디노, 알킬카르보닐, 모르폴리노, 피페리디닐, 디옥사닐, 피라닐, 헤테로아릴, 푸라닐, 티오페닐, 테트라졸로, 티아졸, 이소티아졸로, 이미다졸로, 티아디아졸, 티아디아졸 S-산화물, 티아디아졸 S,S-이산화물, 피라졸로, 옥사졸, 이속사졸, 피리디닐, 피리미디닐, 퀴놀린, 이소퀴놀린, SR⁴, SOR⁴, SO₂R⁴, CO₂R⁴, COR⁴, CONR⁴R⁵, CSNR⁴R⁵ 또는 SO_mNR⁴R⁵에서 선택되고;

R³은 H, 저급 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 알킬아릴, 아릴알킬, 알콕시알킬아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 환상 헤테로알킬, 아실, 알킬설포닐, 아릴설포닐 또는 헤테로환상알킬알킬이고;

Z¹, Z²와 Z³은 각각 독립적으로, C, O, NH S, C=O, S=O 또는 SO₂에서 선택되고;

Y¹, Y²와 Y³은 각각 독립적으로, C 또는 N에서 선택되고;

W는 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로알킬, 치환된 헤테로알킬, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 아릴알킬 또는 헤테로아릴 알킬이고;

R⁴와 R⁵는 각각 독립적으로, H, 저급 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 알킬아릴, 아릴알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알콕시, 알콕시알킬아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 환상 헤테로알킬, 아실, NH₂, OH, CN, NO₂, OCF₃, CF₃, Br, Cl, F, 1-아미디노, 2-아미디노, 알킬카르보닐, 모르폴리노, 피페리디닐, 디옥사닐, 피라닐, 헤테로아릴, 푸라닐, 티오페닐, 테트라졸로, 티아졸, 이소티아졸로, 이미다졸로, 티아디아졸, 티아디아졸 S-산화물, 티아디아졸 S,S-이산화물, 피라졸로, 옥사졸, 이속사졸, 피리디닐, 피리미디닐, 퀴놀린 또는 이소퀴놀린에서 선택되고;

파선은 이중 결합의 존재 또는 부재를 나타내고;

m은 1 또는 2이고;

n은 0, 1, 2 또는 3이고; 그리고

o는 0, 1, 2, 또는 3이다.

다른 구체예는 앞서 기술된 화합물, 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염, 호변체, 이성질체 및/또는 프로드러그를 포함하는 제약학적 조성물을 포함한다.

다른 구체예에서, 1개의 R¹ 및 1개의 R³은 서로 합쳐 아릴, 시클로알킬, 메틸렌디옥소, 에틸렌디옥소, 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬 기를 형성한다.

다른 구체예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

여기서 각 R⁶은 독립적으로, H, 저급 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 알킬아릴, 아릴알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알콕시, 알콕시알킬아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 환상 헤테로알킬, 아실, NH₂, OH, CN, NO₂, OCF₃, CF₃, Br, Cl, F, 1-아미디노, 2-아미디노, 알킬카르보닐, 모르폴리노, 피페리디닐, 디옥사닐, 피라닐, 헤테로아릴, 푸라닐, 티오페닐, 테트라졸로, 티아졸, 이소티아졸로, 이미다졸로, 티아디아졸, 티아디아졸 S-산화물, 티아디아졸 S,S-이산화물, 피라졸로, 옥사졸, 이속사졸, 피리디닐, 피리미디닐, 퀴놀린, 이소퀴놀린, SR⁴, SOR⁴, SO₂R⁴, CO₂R⁴, COR⁴, CONR⁴R⁵, CSNR⁴R⁵ 또는 SO_mNR⁴R⁵에서 선택되고;

X¹, X², X³, X⁴와 X⁵는 각각 독립적으로, C 또는 N에서 선택되고;

파선은 이중 결합의 존재 또는 부재를 나타내고;

p는 0, 1, 2, 3 또는 4이고; 그리고

여기서 2개의 R⁶ 기는 서로 합쳐 아릴, 시클로알킬, 메틸렌디옥소, 에틸렌디옥소, 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬 기를 형성한다.

다른 구체예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

여기서 각 R¹, R²와 R⁶은 독립적으로, H, 저급 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 알킬아릴, 아릴알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알콕시, 알콕시알킬아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 환상 헤테로알킬, NH₂, OH, CN, NO₂, OCF₃, CF₃, Br, Cl, F, 알킬카르보닐 또는 알킬설포닐에서 선택되고;

Z₁은 O, NH, NR 또는 S이고;

Z₃은 O, NH, NR, S, C=O, S=O 또는 SO₂이고;

파선은 이중 결합의 존재 또는 부재를 나타내고; 그리고

여기서 1개의 R¹ 및 1개의 R³ 또는 2개의 R⁶ 기는 서로 합쳐 아릴, 시클로알킬, 메틸렌디옥소, 에틸렌디옥소, 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬 기를 형성한다.

다른 구체예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

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다른 구체예에서, 화합물은 하기와 같이 구성된 군에서 선택되는 구조를 갖는다:

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다른 구체예는 척추동물에서 바이러스 감염을 치료하거나 예방하는 방법을 포함하고, 상기 방법은 앞서 기술된 화합물을 포함하는 제약학적 조성물을 척추동물에게 투여하는 단계를 포함한다.

다른 구체예에서, 바이러스 감염은 하기 과(family) 중에서 하나 또는 그 이상으로부터 바이러스에 의해 유발된다: 아레나바이러스과(Arenaviridae), 아스트로바이러스과(Astroviridae), 버나바이러스과(Birnaviridae), 브로모바이러스과(Bromoviridae), 부니아바이러스과(Bunyaviridae), 칼리시바이러스과(Caliciviridae), 클로스테로바이러스과(Closteroviridae), 코모바이러스과(Comoviridae), 시스토바이러스과(Cystoviridae), 플라비바이러스과(Flaviviridae), 플렉시바이러스과(Flexiviridae), 헤페바이러스(Hepevirus), 레비바이러스과(Leviviridae), 루테오바이러스과(Luteoviridae), 모노네가바이러스(mononegavirales), 모자이크 바이러스(Mosaic Virus), 니도바이러스(Nidovirales), 노다바이러스과(Nodaviridae), 오르토믹소바이러스과(Orthomyxoviridae), 피코비르나바이러스(Picobirnavirus), 피코르나바이러스과(Picornaviridae), 포티바이러스과(Potyviridae), 레오바이러스과(Reoviridae), 레트로바이러스과(Retroviridae), 세쿠이바이러스과(Sequiviridae), 테뉴이바이러스(Tenuivirus), 토가바이러스과(Togaviridae), 톰부스바이러스과(Tombusviridae), 토티바이러스과(Totiviridae), 티모바이러스과(Tymoviridae), 헤파드나바이러스과(Hepadnaviridae), 허피스바이러스과(Herpesviridae), 파라믹소바이러스과(Paramyxoviridae) 또는 파필로마바이러스과(Papillomaviridae).

다른 구체예에서, 바이러스 감염은 인플루엔자 바이러스(influenza virus), C형 간염 바이러스(Hepatitis C virus), 웨스트 나일 바이러스(West Nile virus), SARS-코로나바이러스(SARS-coronavirus), 소아마비 바이러스(poliovirus), 홍역 바이러스(measles virus), 뎅기열 바이러스(Dengue virus), 황열병 바이러스(yellow fever virus), 진드기 매개 뇌염 바이러스(tick-borne encephalitis virus), 일본 뇌염 바이러스(Japanese encephalitis virus), 세인트루이스 뇌염 바이러스(St. Louis encephalitis virus), 머레이 계곡 바이러스(Murray Valley virus), 포와센 바이러스(Powassan virus), 로시오 바이러스(Rocio virus), 루우핑 일 바이러스(louping-ill virus), 방지 바이러스(Banzi virus), 일레우스 바이러스(Ilheus virus), 코코베라 바이러스(Kokobera virus), 쿤진 바이러스(Kunjin virus), 알푸이 바이러스(Alfuy virus), 소 설사 바이러스(bovine diarrhea virus), 키야사나 삼림병 바이러스(Kyasanur forest disease virus) 또는 인간 면역결핍 바이러스(human immunodeficiency virus, HIV)이다.

이들 방법의 다른 구체예에서, 화합물은 하기와 같이 구성된 군에서 선택되는 구조를 갖는다:

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이들 방법의 다른 구체예에서, 제약학적 조성물은 예방적 또는 치료적 백신을 위한 어쥬번트로서 투여된다.

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이들 방법의 다른 구체예에서, 상기 방법은 인플루엔자 바이러스, C형 간염 바이러스, 웨스트 나일 바이러스, SARS-코로나바이러스, 소아마비 바이러스, 홍역 바이러스, 뎅기열 바이러스, 황열병 바이러스, 진드기 매개 뇌염 바이러스, 일본 뇌염 바이러스, 세인트루이스 뇌염 바이러스, 머레이 계곡 바이러스, 포와센 바이러스, 로시오 바이러스, 루우핑 일 바이러스, 방지 바이러스, 일레우스 바이러스, 코코베라 바이러스, 쿤진 바이러스, 알푸이 바이러스, 소 설사 바이러스, 키야사나 삼림병 바이러스 또는 인간 면역결핍 바이러스 (HIV)에 대한 백신을 추가로 투여함에 의해 척추동물에게 예방접종하는 단계를 포함한다.

다른 구체예는 진핵 세포에서 선천적 면역 반응(innate immune response)을 조정하는 방법을 포함하고, 상기 방법은 앞서 기술된 화합물을 세포에 투여하는 단계를 포함한다.

진핵 세포에서 선천적 면역 반응을 조정하는 다른 구체예에서, 화합물은 하기와 같이 구성된 군에서 선택되는 구조를 갖는다:

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상세한 설명

본 발명에서는 바이러스 치료제의 초점을 바이러스 단백질의 표적화로부터, 숙주(환자)의 선천성 항바이러스 반응을 표적으로 하고 증강시키는 약물의 개발로 변경하는 화합물과 방법을 제시한다. 이런 화합물과 방법은 아마도 더욱 효과적이고, 바이러스 내성의 출현에 덜 민감하고, 더욱 적은 부작용을 유발하고, 그리고 넓은 범위의 상이한 바이러스에 대해 효과적이다(1).

RIG-I 경로는 RNA 바이러스 감염에 대한 선천적 면역 반응을 조절하는데 깊이 관여한다. RIG-I은 넓은 범위의 RNA 바이러스에 대한 면역(immunity)을 유인하는데 필수적인 세포질 병원체 인식 수용체이다(5-8). RIG-I는 우리딘의 동종중합성 스트레치 또는 중합성 U/A 모티프로 특징되는 RNA 바이러스 유전체 내에 모티프에 결합하는 이중-가닥 RNA 헬리카제이다(9). RNA에 결합은 자기조직 억제제 도메인에 의한 RIG-I 신호전달 억제를 경감시키는 형태 변화(conformation change)를 유도하고, 따라서 RIG-I가 탠덤 카스파제 활성화와 동원 도메인(CARD)을 통해 하류에 신호할 수 있도록 한다(4). RIG-I 신호전달은 이의 NTPase 활성에 의존하지만, 헬리카제 도메인을 필요로 하지 않는다(10, 11). RIG-I 신호전달은 휴지기 세포에서 침묵하고, 그리고 억제제 도메인은 바이러스 감염에 응하여 신호전달을 지배하는 온-오프 스위치(on-off switch)로서 기능한다(8).

RIG-I 신호전달은 외부 미토콘드리아 막 내에 체류하는 필수 어댑터 단백질인 IPS-1(일명, Cardif, MAV, 그리고 VISA)을 통해 도입된다(12-15). IPS-1은 감염을 제어하는 I형 IFN 및 바이러스-반응성 유전자(virus-responsive gene)의 발현을 유도하는 전사 인자인 IRF-3의 하류 활성화를 자극하는 거대분자 신호전달 복합체를 동원한다(16). IRF-3을 비롯하여, RIG-I 신호전달을 직접적으로, 또는 RIG-I 경로 성분의 조정을 통해 유인하는 화합물은 항바이러스제 또는 면역조절제로서 매력적인 치료적 적용을 제공한다.

고처리량 스크리닝 접근법(high-throughput screening approach)은 RNA 바이러스 감염에 대한 세포 선천적 면역 반응의 핵심적인 조절자인 RIG-I 경로를 조정하는 화합물을 확인하는데 이용되었다. RIG-I 작동약 선도 화합물은 인터페론 조절 인자-3(IRF-3)를 특이적으로 활성화시키는 것으로 밝혀졌다. 추가의 구체예에서, 이들은 하기 중에서 하나 또는 그 이상을 나타낸다: 이들은 인터페론-자극된 유전자(ISG)의 발현을 유도하고, 세포-기초된 분석평가에서 낮은 세포독성을 갖고, 유사체 개발 및 QSAR 연구에 적합하고, 약물-유사 이화학적 성질을 갖고, 그리고 인플루엔자 A 바이러스 및/또는 C형 간염 바이러스(HCV)에 대한 항바이러스 활성을 갖는다. 일정한 구체예에서, 이들 화합물은 이들 특징 모두를 나타낸다.

하기에 논의된 바와 같이, 이들 화합물은 잠재적 항바이러스 치료제의 새로운 부류를 대표한다. 비록 본 발명이 생체내에서 이들 화합물의 특정한 작용 기전에 의해 한정되진 않지만, 이들 화합물은 그들의 RIG-I 경로 조정에 대해 선별된다. 일정한 구체예에서, 조정은 RIG-I 경로의 활성화이다. 본 명세서에서 개시된 화합물과 방법은 HCV 및/또는 인플루엔자 바이러스의 세포 배양 모델에서 바이러스 단백질, 바이러스 RNA, 그리고 감염성 바이러스 중에서 하나 또는 그 이상을 감소시키는 기능을 한다. 한 구체예에서, 본 발명은 하기 구조를 갖는 화합물 부류에 관계한다:

여기서 R₁과 R²는 각각 독립적으로, H, 저급 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 알킬아릴, 아릴알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알콕시, 알콕시알킬아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 환상 헤테로알킬, 아실, NH₂, OH, CN, NO₂, OCF₃, CF₃, Br, Cl, F, 1-아미디노, 2-아미디노, 알킬카르보닐, 모르폴리노, 피페리디닐, 디옥사닐, 피라닐, 헤테로아릴, 푸라닐, 티오페닐, 테트라졸로, 티아졸, 이소티아졸로, 이미다졸로, 티아디아졸, 티아디아졸 S-산화물, 티아디아졸 S,S-이산화물, 피라졸로, 옥사졸, 이속사졸, 피리디닐, 피리미디닐, 퀴놀린, 이소퀴놀린, SR⁴, SOR⁴, SO₂R⁴, CO₂R⁴, COR⁴, CONR⁴R⁵, CSNR⁴R⁵ 또는 SO_mNR⁴R⁵에서 선택되고;

Y¹, Y²와 Y³은 각각 독립적으로, C 또는 N에서 선택되고;

파선은 이중 결합의 존재 또는 부재를 나타내고;

m은 1 또는 2이고;

n은 0, 1, 2 또는 3이고; 그리고

o는 0, 1, 2, 또는 3이다.

상기 화합물의 제약학적으로 허용되는 염, 호변체, 이성질체 및 프로드러그는 본 발명의 범위 내에 있는 것으로 간주된다.

한 구체예에서, 1개의 R¹ 및 R³은 서로 합쳐 아릴, 시클로알킬, 메틸렌디옥소, 에틸렌디옥소, 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬 기를 형성한다.

다른 구체예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

파선은 이중 결합의 존재 또는 부재를 나타내고;

p는 0, 1, 2, 3 또는 4이고; 그리고

또 다른 구체예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

Z₁은 O, NH, NR 또는 S이고;

Z₃은 O, NH, NR, S, C=O, S=O 또는 SO₂이고;

파선은 이중 결합의 존재 또는 부재를 나타내고; 그리고

여기서 1개의 R¹ 및 R³ 또는 2개의 R⁶ 기는 서로 합쳐 아릴, 시클로알킬, 메틸렌디옥소, 에틸렌디옥소, 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬 기를 형성한다.

또 다른 구체예에서, 화합물은 하기 구조를 갖는다:

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다른 예시적인 화합물은 하기 구조를 갖는다:

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또는

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다른 실례 구체예에서, 본 명세서에서 기술된 화합물은 하기 구조를 가질 수 있다:

또는

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예시적인 화합물에는

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가 포함된다.

또 다른 구체예에서, 화합물은 하기 구조를 가질 수 있다:

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본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "알킬옥시" 또는 "알콕시"는 알킬 에테르 기를 포함하는 기능 기를 지칭한다. 알콕시의 실례에는 제한 없이, 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, 이소-부톡시, sec-부톡시, tert-부톡시 등이 포함된다.

용어 "알킬", "알케닐", 그리고 "알키닐"은 치환된 및 치환되지 않은 알킬, 알케닐 및 알키닐을 지칭한다. 용어 "알킬"은 단일 결합으로만 연결된 1개 내지 20개 탄소 원자를 내포하고 임의의 환상 구조를 갖지 않는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소를 포함하는 기능 기를 지칭한다. 알킬 기는 본 명세서에서 정의된 바와 같이 임의적으로 치환될 수 있다. 알킬 기의 실례에는 제한 없이, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 이소-아밀, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노일, 데실, 운데실, 도데실, 트리데실, 테트라데실, 펜타데실, 헥사데실, 헵타데실, 옥타데실, 노나데실, 에이코실 등이 포함된다.

치환된 알킬, 알케닐과 알키닐은 H, 저급 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 아릴알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알콕시, 알콕시알킬아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, NH₂, OH, CN, NO₂, OCF₃, CF₃, F, 1-아미딘, 2-아미딘, 알킬카르보닐, 모르폴리닐, 피페리디닐, 디옥사닐, 피라닐, 헤테로아릴, 푸라닐, 티오페닐, 테트라졸로, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 이미다졸릴, 티아디아졸릴, 티아디아졸 S-산화물, 티아디아졸 S,S-이산화물, 피라졸로, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, SR, SOR, SO₂R, CO2R, COR, CONR'R", CSNR'R", SOnNR'R"을 포함하는 군으로부터 1개 내지 5개 치환기로 치환된 알킬, 알케닐과 알키닐을 지칭한다.

본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "알키닐"은 2개 내지 20개 탄소 원자를 내포하고, 하나 또는 그 이상의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖고, 그리고 임의의 환상 구조를 갖지 않는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소를 포함하는 기능 기를 지칭한다. 알키닐 기는 본 명세서에서 정의된 바와 같이 임의적으로 치환될 수 있다. 알키닐 기의 실례에는 제한 없이, 에티닐, 프로피닐, 히드록시프로피닐, 부티닐, 부틴-1-일, 부틴-2-일, 3-메틸부틴-1-일, 펜티닐, 펜틴-1-일, 헥시닐, 헥신-2-일, 헵티닐, 옥티닐, 노니닐, 데시닐, 운데시닐, 도데시닐, 트리데시닐, 테트라데시닐, 펜타데시닐, 헥사데시닐, 헵타데시닐, 옥타데시닐, 노나데시닐, 에이코시닐 등이 포함된다.

본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "알킬렌"은 2개 또는 그 이상의 위치에서 부착된 직쇄 또는 분지쇄 포화된 탄화수소로부터 유래된 포화된 지방족 기, 예를 들면, 메틸렌(-C2-)을 지칭한다. 달리 명시되지 않으면, 용어 "알킬"은 "알킬렌" 기를 포함할 수도 있다.

본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "알킬카르보닐" 또는 "알카노일"은 카르보닐 기를 통해 부모 분자 모이어티에 부착된 알킬 기를 포함하는 기능 기를 지칭한다. 알킬카르보닐 기의 실례에는 제한 없이, 메틸카르보닐, 에틸카르보닐 등이 포함된다.

용어 "알키닐렌"은 2개 위치에서 부착된 탄소-탄소 삼중 결합, 예를 들면, 에티닐렌(-C:::C-, -C≡C-)을 지칭한다. 달리 명시되지 않으면, 용어 "알키닐"은 "알키닐렌" 기를 포함할 수 있다.

본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "아릴", "히드로카르빌 아릴", 또는 "아릴 탄화수소"는 3개 내지 12개 탄소 원자의 접합된 환상 분자 고리 구조를 갖는 치환된 또는 치환되지 않은 방향족 탄화수소를 포함하는 기능 기를 지칭한다. 아릴 기는 단일환상, 이중환상 또는 다중환상일 수 있고, 그리고 임의적으로 1개 내지 3개의 추가적인 고리 구조, 예를 들면, 시클로알킬, 시클로알케닐, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알케닐, 또는 헤테로아릴을 포함할 수도 있다. 용어 "아릴"에는 제한 없이, 페닐(벤제닐), 티오페닐, 인돌릴, 나프틸, 토틸, 크실릴, 안트라세닐, 페난트릴, 아줄레닐, 비페닐, 나프탈레닐, 1-m메틸나프탈레닐, 아세나프테닐, 아세나프틸레닐, 안트라세닐, 플루오레닐, 페날레닐, 페난트레닐, 벤조[a]안트라세닐, 벤조[c]페난트레닐, 크리세닐, 플루오란테닐, 피레닐, 테트라세닐(나프타세닐), 트리페닐레닐, 안트안트레닐, 벤조피레닐, 벤조[a]피레닐, 벤조[e]플루오란테닐, 벤조[ghi]페릴레닐, 벤조[j]플루오란테닐, 벤조[k]플루오란테닐, 코란눌레닐, 코로네닐, 디코로닐레닐, 헬리세닐, 헵타세닐, 헥사세닐, 오발레닐, 펜타세닐, 피세닐, 페릴레닐, 그리고 테트라페닐레닐이 포함된다. 치환된 아릴은 H, 저급 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 아릴알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알콕시, 알콕시알킬아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, NH₂, OH, CN, NO₂, OCF₃, CF₃, Br, Cl, F, 1-아미디노, 2-아미디노, 알킬카르보닐, 모르폴리노, 피페리디닐, 디옥사닐, 피라닐, 헤테로아릴, 푸라닐, 티오페닐, 테트라졸로, 티아졸, 이소티아졸로, 이미다졸로, 티아디아졸, 티아디아졸 S-산화물, 티아디아졸 S,S-이산화물, 피라졸로, 옥사졸, 이속사졸, 피리디닐, 피리미디닐, 퀴놀린, 이소퀴놀린, SR , SOR , SO₂R, CO₂R, COR, CONRR, CSNRR, SOnNRR을 포함하는 군으로부터 1개 내지 5개 치환기로 치환된 아릴을 지칭한다.

본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "저급 아릴"은 3개 내지 6개 탄소 원자의 접합된 환상 분자 고리 구조를 갖는 치환된 또는 치환되지 않은 방향족 탄화수소를 포함하는 기능 기를 지칭한다. 저급 아릴 기의 실례에는 제한 없이, 페닐 및 나프틸이 포함된다.

본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "카르복실" 또는 "카르복시"는 기능 기 -C(=O)OH 또는 상응하는 "카르복실레이트" 음이온 -C(=O)O-를 지칭한다. 실례에는 제한 없이, 포름산, 아세트산, 옥살산, 벤조산이 포함된다. "O-카르복실" 기는 일반식 RCOO(여기서 R은 유기 모이어티 또는 기)를 갖는 카르복실 기를 지칭한다. "C-카르복실" 기는 일반식 COOR(여기서 R은 유기 모이어티 또는 기)을 갖는 카르복실 기를 지칭한다.

본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "시클로알킬", "탄소환상알킬", 그리고 "탄소환알킬"은 탄소 고리 구조 내에서 탄소-탄소 단일 결합으로만 연결된 3개 내지 12개 탄소 원자의 비-접합된 환상 분자 고리 구조를 갖는 치환된 또는 치환되지 않은 비-방향족 탄화수소를 포함하는 기능 기를 지칭한다. 시클로알킬 기는 단일환상, 이중환상 또는 다중환상일 수 있고, 그리고 1개 내지 3개의 추가적인 고리 구조, 예를 들면, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알케닐, 헤테로시클로알킬, 또는 헤테로시클로알케닐을 임의적으로 포함할 수도 있다.

본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "저급 시클로알킬"은 탄소 고리 구조 내에서 탄소-탄소 단일 결합으로만 연결된 3개 내지 6개 탄소 원자의 비-접합된 환상 분자 고리 구조를 갖는 단일환상 치환된 또는 치환되지 않은 비-방향족 탄화수소를 포함하는 기능 기를 지칭한다. 저급 시클로알킬 기의 실례에는 제한 없이, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 그리고 시클로헥실이 포함된다.

본 명세서에서, 용어 "기능 기"는 분자의 특징적인 화학 반응을 주도하는, 이들 분자 내에 원자의 특정 기를 지칭한다.

본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "헤테로알킬"은 단일 결합만으로 연결된 1개 내지 20개 원자를 내포하는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소를 포함하는 기능 기를 지칭하고, 여기서 사슬 내에 적어도 하나의 원자는 탄소이고, 그리고 사슬 내에 적어도 하나의 원자는 O, S, N, 또는 이들의 임의의 조합이다. 헤테로알킬 기는 완전하게 포화되거나, 또는 1개 내지 3개 정도의 불포화를 내포할 수 있다. 비-탄소 원자는 헤테로알킬 기의 임의의 내부 위치에 존재할 수 있고, 그리고 최대 2개의 비-탄소 원자가 연속할 수 있다(가령, -CH2-NH-OCH3). 이에 더하여, 비-탄소 원자는 임의적으로 산화될 수 있고, 그리고 질소는 임의적으로 4가화(quaternization)될 수 있다.

본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "헤테로아릴"은 3개 내지 12개 원자의 접합된 환상 분자 고리 구조를 갖는 치환된 또는 치환되지 않은 방향족 탄화수소를 포함하는 기능 기를 지칭하고, 여기서 고리 구조 내에 적어도 하나의 원자는 탄소이고, 그리고 고리 구조 내에 적어도 하나의 원자는 O, S, N, 또는 이들의 임의의 조합이다. 헤테로아릴 기는 단일환상, 이중환상 또는 다중환상일 수 있고, 그리고 임의적으로 1개 내지 3개의 추가적인 고리 구조, 예를 들면, 아릴, 시클로알킬, 시클로알케닐, 헤테로시클로알킬, 또는 헤테로시클로알케닐을 포함할 수도 있다. 헤테로아릴 기의 실례에는 제한 없이, 아크리디닐, 벤지돌릴, 벤즈이미다졸릴, 벤즈이속사졸릴, 벤조디옥시닐, 디히드로벤조디옥시닐, 벤조디옥솔릴, 1,3-벤조디옥솔릴, 벤조푸릴, 벤조이속사졸릴, 벤조피라닐, 벤조티오페닐, 벤조[c]티오페닐, 벤조트리아졸릴, 벤족사디아졸릴, 벤족사졸릴, 벤조티아디아졸릴, 벤조티아졸릴, 벤조티에닐, 카르바졸릴, 크로모닐, 신놀리닐, 디히드로신놀리닐, 코우마리닐, 디벤조푸라닐, 푸로피리디닐, 푸릴, 인돌리지닐, 인돌릴, 디히드로인돌릴, 이미다졸릴, 인다졸릴, 이소벤조푸릴, 이소인돌릴, 이소인돌리닐, 디히드로이소인돌릴, 이소퀴놀릴, 디히드로이소퀴놀리닐, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 페난트롤리닐, 페난트리디닐, 푸리닐, 피라닐, 피라지닐, 피라졸릴, 피리딜, 피리미디닐, 피리다지닐, 피롤리닐, 피롤릴, 피롤로피리디닐, 퀴놀릴, 퀴녹살리닐, 퀴나졸리닐, 테트라히드로퀴놀리닐, 테트라졸로피리다지닐, 테트라히드로이소퀴놀리닐, 티오페닐, 티아졸릴, 티아디아졸릴, 티에노피리디닐, 티에닐, 티오페닐, 트리아졸릴, 잔테닐 등이 포함된다.

본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "저급 헤테로아릴"은 3개 내지 6개 원자의 접합된 환상 분자 고리 구조를 갖는 단일환상 또는 이중환상, 치환된 또는 치환되지 않은 방향족 탄화수소를 포함하는 기능 기를 지칭하고, 여기서 고리 구조 내에 적어도 하나의 원자는 탄소이고, 그리고 고리 구조 내에 적어도 하나의 원자는 O, S, N, 또는 이들의 임의의 조합이다.

본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "히드록시"는 기능 기 히드록실 (-OH)을 지칭한다.

본 명세서에서, 단독으로 또는 공동으로, 용어 "옥소"는 기능 기 =O를 지칭한다.

본 명세서에서, 용어 "척추동물"은 모든 살아있는 척추동물, 예를 들면, 제한 없이, 포유동물, 인간, 새, 개, 고양이, 가축, 농장 동물, 방목된 짐승 무리 등이 포함한다.

본 명세서에서, "제약학적 조성물"은 선택된 투여 양식에 적합한 하나 또는 그 이상의 제약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제와 함께, 본 명세서에서 개시된 적어도 하나의 화합물을 포함한다.

제약학적 조성물은 제한 없이, 고체 형태(과립, 분말 또는 좌약 포함) 또는 액체 형태(가령, 용액, 현탁액, 또는 에멀젼)로 만들어질 수 있다. 제약학적 조성물은 전통적인 제약학적 작업, 예를 들면, 살균(sterilization)에 종속될 수 있고 및/또는 전통적인 어쥬번트, 예를 들면, 보존제, 안정제, 습윤제, 유화제, 완충제 등을 내포할 수 있다.

경구 투여를 위한 고형 제형(solid dosage form)에는 캡슐, 정제, 알약, 분말, 그리고 과립이 포함될 수 있다. 이런 고형 제형에서, 활성 화합물은 적어도 하나의 비활성 희석제, 예를 들면, 수크로오스, 락토오스, 또는 전분과 혼합될 수 있다. 이런 제형은 또한, 통상의 관례에서처럼, 비활성 희석제 이외의 추가적인 물질, 예를 들면, 스테아르산마그네슘과 같은 윤활제를 포함할 수 있다. 캡슐, 정제, 그리고 알약의 경우에, 이들 제형은 또한, 완충제를 포함할 수 있다. 정제와 알약은 부가적으로, 장용 코팅(enteric coating)으로 제조될 수 있다.

경구 투여를 위한 액상 제형에는 제약학적으로 허용되는 에멀젼, 용액, 현탁액, 시럽, 그리고 당분야에 통상적으로 이용되는 비활성 희석제, 예를 들면, 물을 내포하는 엘릭시르가 포함될 수 있다. 이런 조성물은 또한, 습윤제, 감미료, 풍미제, 그리고 방향제와 같은 어쥬번트를 포함할 수 있다. 제약학적 조성물은 본 발명의 한 가지 이상의 구체예를 내포할 수 있다. 경구 투여용 제조물은 활성 화합물의 서방(controlled release)이 제공되도록 적절하게 조제될 수 있다.

구강점막 투여의 경우에, 조성물은 전통적인 방식으로 조제된 정제 또는 마름모꼴정제의 형태를 취할 수 있다.

화합물은 주사, 예를 들면, 일시 주사 또는 주입에 의한 비경구 투여용으로 조제될 수 있다. 주사용 제제는 단위 제형, 예를 들면, 유리 앰풀 또는 복수 분량 용기, 예를 들면, 유리 바이알에 담겨 제공될 수 있다. 주사용 조성물은 유성 또는 수성 운반제에서 현탁액, 용액 또는 에멀젼과 같은 형태를 취할 수 있고, 그리고 배합제(formulatory agent), 예를 들면, 현탁제, 안정화제, 보존제 및/또는 분산제를 내포할 수 있다. 대안으로, 활성 성분은 사용에 앞서, 적절한 운반제, 예를 들면, 무균 무-발열원 물로 구성을 위한 분말 형태일 수 있다.

앞서 기술된 제제에 더하여, 화합물은 또한, 저장소 제조물(depot preparation)로서 조제될 수 있다. 이런 장기 작용 제제는 이식(implantation) 또는 근육내 주사(intramuscular injection)에 의해 투여될 수 있다.

코 또는 폐 투여, 또는 흡입에 의한 임의의 다른 투여의 경우에, 본 발명에 따라 이용되는 화합물은 적절한 추진제, 예를 들면, 디클로로디플루오르메탄, 트리클로로플루오르메탄, 디클로로테트라플루오르에탄, 이산화탄소 또는 다른 적절한 가스 또는 가스 혼합물의 이용으로, 가압된 팩 또는 분무기를 위한 에어로졸 스프레이 제공의 형태로 편의하게 전달된다.

많은 RNA 바이러스는 생화학적, 조절적, 그리고 신호전달 경로를 공유한다. 이들 바이러스에는 인플루엔자 바이러스(조류와 돼지 분리물 포함), C형 간염 바이러스, 웨스트 나일 바이러스, SARS-코로나바이러스, 소아마비 바이러스, 홍역 바이러스, 뎅기열 바이러스, 황열병 바이러스, 진드기 매개 뇌염 바이러스, 일본 뇌염 바이러스, 세인트루이스 뇌염 바이러스, 머레이 계곡 바이러스, 포와센 바이러스, 로시오 바이러스, 루우핑 일 바이러스, 방지 바이러스, 일레우스 바이러스, 코코베라 바이러스, 쿤진 바이러스, 알푸이 바이러스, 소 설사 바이러스, 그리고 키야사나 삼림병 바이러스가 포함되지만 이들에 국한되지 않는다. 본 명세서에서 개시된 화합물과 방법은 이들 바이러스를 치료하는데 이용될 수 있다.

RNA 바이러스의 관련된 분류학적 과(family)에는 제한 없이, 아스트로바이러스과(Astroviridae), 버나바이러스과(Birnaviridae), 브로모바이러스과(Bromoviridae), 칼리시바이러스과(Caliciviridae), 클로스테로바이러스과(Closteroviridae), 코모바이러스과(Comoviridae), 시스토바이러스과(Cystoviridae), 플라비바이러스과(Flaviviridae), 플렉시바이러스과(Flexiviridae), 헤페바이러스(Hepevirus), 레비바이러스과(Leviviridae), 루테오바이러스과(Luteoviridae), 모노네가바이러스(mononegavirales), 모자이크 바이러스(Mosaic Virus), 니도바이러스(Nidovirales), 노다바이러스과(Nodaviridae), 오르토믹소바이러스과(Orthomyxoviridae), 피코비르나바이러스(Picobirnavirus), 피코르나바이러스과(Picornaviridae), 포티바이러스과(Potyviridae), 레오바이러스과(Reoviridae), 레트로바이러스과(Retroviridae), 세쿠이바이러스과(Sequiviridae), 테뉴이바이러스(Tenuivirus), 토가바이러스과(Togaviridae), 톰부스바이러스과(Tombusviridae), 토티바이러스과(Totiviridae), 그리고 티모바이러스과(Tymoviridae)가 포함된다. 본 명세서에서 개시된 화합물과 방법은 제약학적으로 허용되는 약물 제제의 일부로서, 이들 바이러스 과(科) 내에 바이러스를 치료하는데 이용될 수 있다. 다른 관련된 바이러스 과에는 제한 없이, 헤파드나바이러스과(Hepadnaviridae), 허피스바이러스과(Herpesviridae), 파라믹소바이러스과(Paramyxoviridae) 및 파필로마바이러스과(Papillomaviridae)가 포함된다.

본 발명에서는 척추동물을 비롯한 동물에서 질환을 예방하거나 치료하는 목적으로, 항원과 공동으로 이들 화합물을 포함하는 백신을 제시한다. 본 명세서에서, 백신은 포함한다.

본 발명에서는 어쥬번트로서 이들 화합물의 용도를 제시한다. 본 명세서에서, 어쥬번트는 다른 투여된 치료제의 유익한 효과를 증강시키고, 강화시키고 및/또는 가속화시킨다.

본 명세서에서 개시된 화합물과 방법은 현재 개발 중에 있거나 이용되고 있는 다른 치료제에 부가적 또는 상승적일 수 있다. 가령, 리바비린과 인터페론-α는 공동으로 이용될 때 HCV 감염에 대한 효과적인 치료를 제공한다. 공동에서 그들의 효능은 단독으로 이용될 때 어느 한쪽 약물 산물의 효능을 초과할 수 있다. 본 발명의 조성물은 단독으로 또는 공동으로, 또는 인터페론, 리바비린 및/또는 바이러스 표적(바이러스 프로테아제, 바이러스 폴리메라아제, 바이러스 복제 복합체의 어셈블리) 및 숙주 표적(바이러스 가공에 요구되는 숙주 프로테아제, 바이러스 표적의 인산화에 요구되는 숙주 키나아제, 예를 들면, NS5A, 그리고 바이러스 내부 리보솜 유입 부위(internal ribosome entry site, 또는 IRES)를 효율적으로 이용하기 위해 요구되는 숙주 인자의 저해제) 둘 모두에 대해 개발되는 다양한 소형 분자와 함께 투여될 수 있다.

본 명세서에서 개시된 화합물과 방법은 제한 없이, 아다만탄 저해제, 뉴라미니다아제 저해제, 알파 인터페론, 비-뉴클레오시드 또는 뉴클레오시드 폴리메라아제 저해제, NS5A 저해제, 항히스타민제, 프로테아제 저해제, 헬리카제 저해제, P7 저해제, 유입 저해제, IRES 저해제, 면역 자극물, HCV 복제 저해제, 시클로필린 A 저해제, A3 아데노신 작동약, 그리고 microRNA 억제자와 공동으로 또는 함께 이용될 수 있다.

본 명세서에서 개시된 화합물과 방법과 공동으로 또는 함께 투여될 수 있는 사이토킨에는 제한 없이, IL-2, IL-12, IL-23, IL-27, 또는 IFN-γ이 포함된다. 본 명세서에서 개시된 화합물과 방법과 공동으로 또는 함께 잠재적 투여에 가용하거나 앞으로 가용할 새로운 HCV 약물에는 제한 없이, ACH-1625 (Achillion); 당화된 인터페론 (Alios Biopharma); ANA598, ANA773 (Anadys Pharm); ATI-0810 (Arisyn Therapeutics); AVL-181 (Avila Therapeutics); LOCTERON® (Biolex); CTS-1027 (Conatus); SD-101 (Dynavax Technologies); 클레미졸(Clemizole) (Eiger Biopharmaceuticals); GS-9190 (Gilead Sciences); GI-5005 (GlobalImmune BioPharma); 레시퀴모드(Resiquimod) / R-848 (Graceway Pharmaceuticals); 알빈테르페론(Albinterferon) 알파-2b (Human Genome Sciences); IDX-184, IDX-320, IDX-375 (Idenix); IMO-2125 (Idera Pharmaceuticals); INX-189 (Inhibitex); ITCA-638 (Intarcia Therapeutics); ITMN-191/RG7227 (Intermune); ITX-5061, ITX-4520 (iTherx Pharmaceuticals); MB11362 (Metabasis Therapeutics); 바비툭시맙(Bavituximab) (Peregrine Pharmaceuticals); PSI-7977, RG7128, PSI-938 (Pharmasset); PHX1766 (Phenomix); 니타족사니드(Nitazoxanide) / ALINIA® (Romark Laboratories); SP-30 (Samaritan Pharmaceuticals); SCV-07 (SciClone); SCY-635 (Scynexis); TT-033 (Tacere Therapeutics); 비라미딘(Viramidine)/타리바비린(taribavirin) (Valeant Pharmaceuticals); 텔라프레비르(Telaprevir), VCH-759, VCH-916, VCH-222, VX-500, VX-813 (Vertex Pharmaceuticals); 그리고 PEG-INF 람다 (Zymogenetics)가 포함된다.

본 명세서에서 개시된 화합물과 방법과 공동으로 또는 함께 잠재적 투여에 가용하거나 앞으로 가용할 새로운 인플루엔자와 웨스트 나일 바이러스 약물에는 제한 없이, 뉴라미니다아제 저해제 (페라미비르(Peramivir), 라니나미비르(Laninamivir)); 삼중 요법 - 뉴라미니다아제 저해제 리바비린, 아만타딘(amantadine) (ADS-8902); 폴리메라아제 저해제 (파비피라비르(Favipiravir)); 역전사효소 저해제 (ANX-201); 흡입 키토산 (ANX-211); 침입 / 결합 저해제 (Binding Site Mimetic, Flucide); 유입 저해제 (Fludase); 융합 저해제 (웨스트 나일의 경우에 MGAWN1); 숙주 세포 저해제 (lantibiotics); RNA 유전체의 절단 (RNAi, RNAse L); 면역 자극물 (인터페론, 알페론-LDO; Neurokinin1 작동약, 홈스페라(Homspera), 웨스트 나일의 경우에 인터페론 알페론 N); 그리고 TG21이 포함된다.

본 명세서에서 개시된 화합물과 방법과 공동으로 또는 함께 잠재적 투여에 가용한, 인플루엔자 및/또는 간염의 치료를 위한 기타 약물에는 제한 없이, 하기가 포함된다:

간염과 인플루엔자 약물

상품명	속명	승인된 징후
Pegasys	PEG인터페론 알파-2a	C형 간염, B형 간염
Peg-Intron	PEG인터페론 알파-2b	C형 간염
Copegus	리바비린	C형 간염
Rebetol	리바비린	C형 간염
-----------	리바비린	C형 간염
Tamiflu	오셀타미비르	인플루엔자 A, B, C
Relenza	자나미비르	인플루엔자 A, B, C
-----------	아만타딘	인플루엔자 A
-----------	리만타딘	인플루엔자 A

이들 작용제는 동일한 제약학적 조성물의 일부로서 함입되거나, 또는 다른 치료 일정(treatment schedule)과 동시에 또는 이러한 일정에 따라서, 본 발명의 화합물과 별개로 투여될 수 있다. 이에 더하여, 본 발명의 화합물 또는 조성물.

본 명세서에서 개시된 화합물과 방법은 백신 개발을 가능하게 하는 다른 화합물과 방법에 부가적 또는 상승적일 수 있다. 항바이러스 및 면역 증강 성질로 인하여, 이들 화합물은 예방적 또는 치료적 예방접종에 영향을 주는데 이용될 수 있다. 이들 화합물은 효과를 나타내기 위해 다른 백신 성분과 동시에 또는 공동으로 투여될 필요가 없다. 이들 화합물의 백신 적용은 바이러스 감염의 예방 또는 치료에 한정되지 않지만, 이들에 의해 유도된 면역 반응의 전반적인 성격으로 인하여 모든 치료적 및 예방적 백신 적용을 포함할 수 있다.

당업자가 인지하는 바와 같이, 백신은 바이러스, 박테리아 감염, 암 등에 대항할 수 있고, 그리고 제한 없이, 살아있는 약독화된 백신(LAIV), 비활성화된 백신(IIV; 사멸된 바이러스 백신), 아단위(분할 백신); 분편(sub-virion) 백신; 정제된 단백질 백신; 또는 DNA 백신 중에서 하나 또는 그 이상을 포함할 수 있다. 적절한 어쥬번트에는 제한 없이, 수/유 에멀젼, 비-이온성 공중합체 어쥬번트, 예를 들면, CRL 1005 (Optivax; Vaxcel Inc., Norcross, Ga.), 알루미늄 인산염(aluminum phosphate), 알루미늄 수산화(aluminum hydroxide), 알루미늄과 마그네슘 수산화물의 수성 현탁액, 박테리아 내독소, 폴리뉴클레오티드, 고분자전해질(polyelectrolyte), 친유성 어쥬번트와 합성 무라밀 디펩티드(muramyl dipeptide)(norMDP) 유사체, 예를 들면, N-아세틸-노르-무라닐-L-알라닐-D-이소글루타민, N-아세틸-무라닐-(6-O-스테아로일)-L-알라닐-D-이소글루타민 또는 N-글리콜-무라닐-LalphaAbu-D-이소글루타민 (Ciba-Geigy Ltd.) 중에서 하나 또는 그 이상이 포함된다.

본 발명의 화합물을 포함하는 제약학적 조성물은 다양한 형태, 예를 들면, 액체, 겔, 동결건조물, 또는 압축된 고체로 조제될 수 있다. 선호되는 형태는 치료되는 특정 징후에 좌우되고, 그리고 당업자에게 명백할 것이다. 한 구체예에서, 개시된 RIG-I 작동약은 간단한 의학 화학 공정을 이용하는 소형-분자 약물일 수 있는, 경구 전달을 위한 제제를 포함한다.

본 발명의 제제의 투여는 경구, 피하, 정맥내, 뇌내, 비내, 경피, 복막내, 근육내, 폐내, 경막내, 질, 직장, 안구내, 또는 임의의 다른 허용되는 방식이 포함되지만 이들에 국한되지 않는 다양한 방식으로 수행될 수 있다. 제제는 비록 일시 주사가 허용되긴 하지만, 당분야에 널리 공지된 기술, 예를 들면, 펌프(가령, 피하 삼투성 펌프(subcutaneous osmotic pump)) 또는 이식을 이용한 주입에 의해 연속적으로 투여될 수 있다. 일부 사례에서, 제제는 용액 또는 스프레이로서 직접적으로 적용될 수 있다.

제약학적 조성물의 실례는 비경구 투여용으로 설계된 용액이다. 비록 많은 경우에, 제약학적 용액 제제는 즉시 이용에 적합한 액상 형태로 제공되긴 하지만, 이런 비경구 제제는 또한, 동결된 또는 동결건조된 형태로 제공될 수 있다. 전자 경우에, 조성물은 사용에 앞서 해동되어야 한다. 후자는 종종, 더욱 다양한 보관 조건 하에 조성물 내에 포함된 활성 화합물의 안정성을 증강시키는데 이용되는데, 그 이유는 동결건조된 제조물이 일반적으로, 그들의 액상 대응물보다 훨씬 안정한 것으로 당업자에 의해 인식되기 때문이다. 이런 동결건조된 제조물은 사용에 앞서, 하나 또는 그 이상의 적절한 제약학적으로 허용되는 희석제, 예를 들면, 제한 없이, 무균 주사용수 또는 무균 생리 식염 용액의 첨가에 의해 재구성된다.

비경구 제조물은 적절한 경우에, 원하는 정도의 순도를 갖는 화합물을 당분야에 전형적으로 이용되는 하나 또는 그 이상의 제약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 안정제(이들 모두 "부형제"로 불린다), 예를 들면, 완충제, 안정화제, 보존제, 등장성제(isotonifier), 비-이온성 세정제, 항산화제 및/또는 기타 여러 첨가물과 혼합함으로써, 동결건조된 제제 또는 수성 용액으로서 보관을 위해 제조될 수 있다.

완충제는 pH를 생리 조건에 가까운 범위 내에 유지하는데 도움을 준다. 이들은 전형적으로, 약 2 mM 내지 약 50 mM 범위의 농도로 존재한다. 본 발명에 이용하기 적합한 완충제에는 이들의 유기와 무기 산과 염 둘 모두, 예를 들면, 구연산염 완충제(가령, 일나트륨 구연산염-이나트륨 구연산염 혼합물, 구연산-삼나트륨 구연산염 혼합물, 구연산-일나트륨 구연산염 혼합물 등), 숙신산염 완충제(가령, 숙신산-일나트륨 숙신산염 혼합물, 숙신산-나트륨 수산화물 혼합물, 숙신산-이나트륨 숙신산염 혼합물 등), 주석산염 완충제(가령, 주석산-나트륨 주석산염 혼합물, 주석산-칼륨 주석산염 혼합물, 주석산-나트륨 수산화물 혼합물 등), 푸마르산염 완충제(가령, 푸마르산-일나트륨 푸마르산염 혼합물, 푸마르산-이나트륨 푸마르산염 혼합물, 일나트륨 푸마르산염-이나트륨 푸마르산염 혼합물 등), 글루콘산염 완충제(가령, 글루콘산-나트륨 글루콘산염 혼합물, 글루콘산-나트륨 수산화물 혼합물, 글루콘산-칼륨 글루콘산염 혼합물 등), 옥살산염 완충제(가령, 옥살산-나트륨 옥살산염 혼합물, 옥살산-나트륨 수산화물 혼합물, 옥살산-칼륨 옥살산염 혼합물 등), 젖산염 완충제(가령, 젖산-나트륨 젖산염 혼합물, 젖산-나트륨 수산화물 혼합물, 젖산-칼륨 젖산염 혼합물 등) 및 아세트산염 완충제(가령, 아세트산-나트륨 아세트산염 혼합물, 아세트산-나트륨 수산화물 혼합물 등)가 포함된다. 인산염 완충제, 히스티딘 완충제 및 트리메틸아민 염, 예를 들면, Tris가 추가로 가능하다.

보존제는 미생물 성장을 지체시키기 위해 첨가될 수 있고, 그리고 전형적으로, 약 0.2%-1% (w/v)의 양으로 첨가된다. 본 발명에 이용하기 적합한 보존제에는 제한 없이, 페놀, 벤질 알코올, 메타-크레졸, 메틸 파라벤, 프로필 파라벤, 옥타데실디메틸벤질 암모늄 염화물, 벤잘코늄 할로겐화합물(가령, 벤잘코늄 염화물, 브롬화물 또는 요오드화물), 헥사메토늄 염화물, 알킬 파라벤, 예를 들면, 메틸 또는 프로필 파라벤, 카테콜, 레조르시놀, 시클로헥사놀 및 3-펜타놀이 포함된다.

등장성제는 액상 조성물의 등장성(isotonicity)을 담보하기 위해 첨가될 수 있고, 여기에는 제한 없이, 다가 당 알코올(polyhydric sugar alcohol), 바람직하게는 3가 또는 그 이상의 당 알코올, 예를 들면, 글리세린, 에리트리톨, 아라비톨, 자일리톨, 소르비톨 및 만니톨이 포함된다. 다가 알코올은 다른 성분의 상대적인 양을 고려하여, 중량으로 0.1% 내지 25%, 전형적으로 1% 내지 5%의 양으로 존재할 수 있다.

안정제는 증량제(bulking agent)에서부터 치료제를 용해시키거나, 또는 변성 또는 용기 벽에 부착을 예방하는데 도움을 주는 첨가제까지 기능할 수 있는 넓은 범주의 부형제를 지칭한다. 전형적인 안정제는 다가 당 알코올(앞서 열거됨); 아미노산, 예를 들면, 아르기닌, 리신, 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 알라닌, 오르니틴, L-류신, 2-페닐알라닌, 글루타민산, 트레오닌 등; 이노시톨과 같은 사이클리톨류(cyclitol)를 비롯한 유기 당류 또는 당 알코올, 예를 들면, 락토오스, 트레할로스, 스타키오스, 만니톨, 소르비톨, 자일리톨, 리비톨, 미오이니시톨, 갈락티톨, 글리세롤 등; 폴리에틸렌 글리콜; 아미노산 중합체; 황-내포 환원제, 예를 들면, 요소, 글루타티온, 티옥산, 나트륨 티오글리콜산염, 티오글리세롤, 알파-모노티오글리세롤 및 나트륨 티오황산염; 저분자량 폴리펩티드(즉, <10개 잔기); 단백질, 예를 들면, 인간 혈청 알부민, 소 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예를 들면, 폴리비닐피롤리돈; 단당류, 예를 들면, 자일로오스, 만노오스, 프럭토오스 및 글루코오스; 이당류, 예를 들면, 락토오스, 말토오스 및 수크로오스; 삼당류, 예를 들면, 라피노오스, 그리고 다당류, 예를 들면, 덱스트란일 수 있다. 안정제는 전형적으로, 활성 화합물 중량에 기초하여 중량으로 0.1 내지 10,000 분율(part)의 범위에서 존재한다.

부가적인 여러 부형제에는 증량제 또는 충전제(가령, 전분), 킬레이트화제(가령, EDTA), 항산화제(가령, 아스코르빈산, 메티오닌, 비타민 E) 및 보조용매가 포함된다.

활성 성분은 또한, 예로써 코아세르베이션(coacervation) 기술 또는 계면 중합화(interfacial polymerization)에 의해 제조된 마이크로캡슐, 예를 들면, 히드록시메틸셀룰로오스, 젤라틴 또는 폴리-(메틸메타크릴레이트) 마이크로캡슐 내에, 콜로이드성 약물 전달 시스템(가령, 리포좀, 알부민 마이크로스피어, 마이크로에멀젼, 나노-입자 및 나노캡슐) 내에, 또는 마크로에멀젼 내에 포획될 수 있다. 이런 기술은 Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 21^st Ed., Lippincott Williams & Wilkins, A Wolters Kluwer Company, 2005에서 개시된다.

생체내 투여에 이용되는 비경구 제제는 일반적으로, 무균이다. 이것은 예로써, 무균 여과 막을 통한 여과에 의해 쉽게 달성된다.

지속 방출 제조물(sustained-release preparation)의 적절한 실례에는 화합물 또는 조성물을 내포하는 고형 소수성 중합체의 반-투과성 매트릭스(semi-permeable matrix)가 포함되는데, 이들 매트릭스는 필름 또는 마이크로캡슐과 같은 적절한 형태를 갖는다. 지속 방출 매트릭스의 실례에는 폴리에스테르, 히드로겔(가령, 폴리(2-히드록시에틸-메타크릴레이트) 또는 폴리(비닐알코올)), 폴리락티드, L-글루타민산과 에틸-L-글루타민산염의 공중합체, 비-분해성 에틸렌-비닐 아세트산염, 분해성 젖산-글리콜산 공중합체, 예를 들면, PROLEASE® 기술 또는 LUPRON DEPOT® (젖산-글리콜산 공중합체 및 류프롤리드 아세트산염으로 구성되는 주사가능 마이크로스피어), 그리고 폴리-D-(-)-3-히드록시부티르산이 포함된다. 에틸렌-비닐 아세트산염 및 젖산-글리콜산과 같은 중합체는 긴 기간, 예를 들면, 100일까지 또는 100일 이상 동안 분자를 방출할 수 있는 반면, 일정한 히드로겔은 더욱 짧은 기간 동안 화합물을 방출한다.

화합물과 조성물의 경구 투여는 본 발명의 한 가지 의도되는 실시이다. 경구 투여를 위해, 제약학적 조성물은 고형 또는 액상 형태, 예를 들면, 캡슐, 정제, 분말, 과립, 현탁액, 에멀젼 또는 용액의 형태일 수 있다. 제약학적 조성물은 바람직하게는, 활성 성분을 소정의 양으로 내포하는 투약 단위(dosage unit)의 형태로 만들어진다. 인간 또는 다른 척추동물에 대한 적절한 하루 복용량은 환자의 상태 및 기타 인자에 따라 폭넓게 변할 수 있지만, 일과적인 방법을 이용하여 당업자에 의해 결정될 수 있다.

고형 제형에서, 활성 화합물은 적어도 하나의 비활성 희석제, 예를 들면, 수크로오스, 락토오스, 또는 전분과 혼합될 수 있다. 이런 제형은 또한, 통상의 관례에서처럼, 추가적인 물질, 예를 들면, 스테아르산마그네슘과 같은 윤활제를 포함할 수 있다. 캡슐, 정제, 그리고 알약의 경우에, 이들 제형은 또한, 완충제를 포함할 수 있다. 정제와 알약은 부가적으로, 장용 코팅(enteric coating)으로 제조될 수 있다.

화합물 또는 조성물은 어쥬번트, 예를 들면, 락토오스, 수크로오스, 전분 분말, 알칸산의 셀룰로오스 에스테르, 스테아르산, 활석, 스테아르산마그네슘, 마그네슘 산화물, 인산과 황산의 나트륨과 칼슘 염, 아카시아, 젤라틴, 나트륨 알긴산염, 폴리비닐-피롤리딘, 및/또는 폴리비닐 알코올과 혼합될 수 있고, 그리고 전통적인 투여를 위해 정제화되거나 캡슐화될 수 있다. 대안으로, 이들은 염수, 물, 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 에탄올, 오일(가령, 옥수수 오일, 땅콩 오일, 목화씨 오일 또는 참깨 오일), 트래거캔스 검, 및/또는 다양한 완충제에 용해될 수 있다. 다른 어쥬번트 및 투여 양식은 약학 분야에 널리 공지되어 있다. 담체 또는 희석제에는 단독으로, 또는 왁스 또는 당분야에 널리 공지된 기타 물질과 함께, 시간 지연 물질(time delay material), 예를 들면, 글리세릴 모노스테아르산염(glyceryl monostearate) 또는 글리세릴 디스테아르산염(glyceryl distearate)이 포함될 수 있다.

하기 실시예에서는 개시된 화합물의 성질을 기술한다. 이들 실시예는 본 발명의 특정 구체예를 증명하기 위해 포함된다. 당업자가 인지하는 바와 같이, 실시예에서 개시된 기술은 본 발명의 실시에서 충분히 기능하는 것으로 본 발명자들에 의해 밝혀진 기술과 조성물을 대표하고, 따라서 본 발명의 실시를 위한 바람직한 양식을 구성하는 것으로 간주될 수 있다. 하지만, 당업자는 본 발명에 비추어, 개시된 특정 구체예에서, 본 발명의 기술적 사상과 범위를 벗어나지 않으면서 여전히 유사한 결과를 획득하는 많은 변화가 만들어질 수 있다는 것을 인지할 것이다. 가령, 하기 실시예에서는 본 발명의 화합물을 시험하기 위한 시험관내 방법을 제시한다. 다른 시험관내 바이러스 감염 모델에는 플라비바이러스, 예를 들면, 소 설사 바이러스, 웨스트 나일 바이러스, 그리고 GBV-C 바이러스, 기타 RNA 바이러스, 예를 들면, 호흡기 합포체 바이러스, 그리고 HCV 레플리콘 시스템이 포함되지만 이들에 국한되지 않는다(32). 게다가, 바이러스 복제에 적격인 임의의 적절한 배양된 세포는 항바이러스 측정에 이용될 수 있다.

도면의 간단한 설명
도 1에서는 KIN100에 대한 구조적 유사물 및 제안된 유사체를 도시한다.
도 2는 HCV 병소-형성 분석평가의 그래프이다. Huh7 세포는 24시간 동안 KIN100로 전-처리되고, 그리고 0.5의 감염 다중도(MOI)에서 48시간 동안 HCV2a로 감염되었다. HCV 단백질은 바이러스-특이적 혈청으로 면역형광 염색에 의해 검출되고, 그리고 병소는 약물 처리되지 않은 음성 대조 세포(1에 대응함)에 대해 정상화(normalization)되었다.
도 3A와 3B에서는 뮤린 뇌심근염 바이러스(EMCV)로 감염 이후에, 세포 생존능에 대한 KIN101 및 양성 대조의 효과를 도시한다.

하기 실시예에서, KIN100 및 KIN101에 대한 언급은 각각, 하기 화합물을 지칭한다:

실시예 1. 7-히드록시-3-(2- 피리딜 ) 크로멘 -4-온의 합성

레조르시놀은 2-(2-피리딜)아세틸 염화물과 반응되어 산물 1-(2,4-디히드록시페닐)-2-(2-피리딜)에타논이 형성된다. 이런 반응은 Chemistry of Heterocyclic Compounds (NY, NY, USA) 1977 Vol., 13, p. 948-953에서 기술된다. 상기 산물은 트리에틸오르토 포름산염과 반응되어 7-히드록시-3-(2-피리딜)크로멘-4-온(화합물 1)이 형성되고, 이것은 당업자에 의해 반응되어 본 명세서에 따른 화합물이 형성될 수 있다.

실시예 2. [4-옥소-6-프로필-3-(2- 피리딜 ) 크로멘 -7-일] 아세트산염의 합성

4-프로필벤젠-1,3-디올은 2-(2-피리딜)아세틸 염화물과 반응되어 산물 1-(2,4-디히드록시-5-프로필-페닐)-2-(2-피리딜)에타논이 형성된다. 이런 반응은 Chemistry of Heterocyclic Compounds (NY, NY, USA) 1977 Vol., 13, p. 948-953에서 기술된다. 상기 산물은 트리에틸오르토 포름산염과 반응되어 7-히드록시-6-프로필-3-(2-피리딜)크로멘-4-온이 형성되고, 이것은 아세트산 무수물 및 염기와 반응되어 [4-옥소-6-프로필-3-(2-피리딜)크로멘-7-일] 아세트산염이 형성될 수 있다.

실시예 3. [4-옥소-6-프로필-3-(2- 피리딜 ) 크로멘 -7-일] 아세트산염의 합성

레조르시놀은 2-(4-브로모페닐)아세틸 염화물과 반응되어 산물 2-(4-브로모페닐)-1-(2,4-디히드록시페닐)에타논이 형성된다. 이런 반응은 Chemistry of Heterocyclic Compounds (NY, NY, USA) 1977 Vol., 13, p. 948-953에서 기술된다. 상기 산물은 트리에틸오르토 포름산염과 반응되어 3-(4-브로모페닐)-7-히드록시-크로멘-4-온이 형성되고, 이것은 메탄 설포닐 염화물 및 염기와 반응되어 [3-(4-브로모페닐)-4-옥소-크로멘-7-일] 메탄설폰산염이 형성될 수 있다.

실시예 4. 3-(3,4- 디메톡시페닐 )-7-히드록시- 크로멘 -4-온의 합성

3-요오드-7-테트라히드로피란-2-일옥시-크로멘-4-온은 (3,4-디메톡시페닐)붕산과 반응된다. 커플링 반응(coupling reaction) 및 후속 가수분해후, 3-(3,4-디메톡시페닐)-7-히드록시-크로멘-4-온(화합물 2)이 형성된다. 이와 같은 반응은 예로써, Tetrahedron, Vol 63, 2007 pg. 3010-3016에서 찾아볼 수 있다. 화합물 2는 당업자에 의해 반응되어 본 명세서에 따른 화합물이 형성될 수 있다.

실시예 5. KIN100 의 생물학적 활성

KIN100은 표 2에서 도시된 바와 같이 생물학적 활성에 대해 조사되고, 그리고 하기 특성을 갖는 것으로 밝혀졌다: 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 활성, 낮은 세포독성, 그리고 10 이상의 치료 지수(therapeutic index). KIN100의 항바이러스 활성의 요약은 하기와 같다: 표 2에 도시된 바와 같이, HCV 병소-형성 분석평가 (FFA) (IC50) 값은 1.2 μM이고; 인플루엔자 핵단백질(NP) ELISA (IC50) 값은 >50 μM이고; 세포독성 (CC50) 값은 >50 μM이고; 그리고 치료 지수 (TI) (CC50 / IC50)은 42이었다. 항-바이러스 활성에 대한 이들 분석평가 및 다른 분석평가는 하기에 상세하게 기술된 바와 같이 수행된다.

KIN100 항-바이러스 활성

HCV 병소-형성 분석평가 (FFA) (IC₅₀)	1.2 μM
인플루엔자 핵단백질 (NP) ELISA (IC₅₀)	>50 μM
세포독성 (CC₅₀)	>50 μM
치료 지수 (TI) (CC₅₀ / IC₅₀)	42

세포독성을 측정하기 위한 MTS 분석평가. 배양된 인간 Huh7 세포는 세포 생존능에 대한 효과를 확인하기 위해, 증가하는 양의 화합물, 또는 24시간 동안 배지에서 희석된 동등한 양의 DMSO로 처리된다. 생존 세포의 비율은 생존 세포에서 테트라졸륨 화합물 [3-(4,5-디메틸-2-일)-5-(3-카르복시메톡시페닐)-2-(4-설포페닐)-2H-테트라졸륨, 내부 염; MTS]의 착색된 포르마잔 화합물로의 전환을 측정하는 세포 생존능 검사를 이용하여 계산된다. MTS의 포르마잔으로의 전환은 96-웰 마이크로역가 평판 판독기에서 검출되고, 그리고 결과의 광학 밀도(optical density)는 세포 생존능을 평가하기 위해 직접적으로 플롯팅(plotting)될 수 있다. Cell Titer One (Promega)은 제조업체의 프로토콜에서 제안된 바와 같이 이용되는 일단계 시약이고, 그리고 세포는 O.D. 판독이 수행되기 전에 시약의 존재에서 3시간 동안 배양된다. 화합물은 0.5% DMSO를 내포하는 배지에서 0, 5, 10, 20, 그리고 50 μM의 최종 농도로 희석되었다. 음성 대조 웰은 화합물을 내포하지 않고, 그리고 세포독성에 대한 양성 대조는 100% 세포변성 효과(cytopathic effect)를 유발하는 EMCV 감염을 이용하여 조사된다. 각 화합물 농도 및 대조는 오차 막대(error bar)를 산출하기 위해 삼중 웰에서 수행된다.

인플루엔자 A 바이러스 ELISA 분석평가. A549 세포는 96웰 평판에 접종된다; 1X10⁴개 세포/웰. 세포는 16시간 동안 성장되고, 그리고 0.5% DMSO를 내포하는 배지에서 5, 10, 20, 50 μM로 희석된 화합물이 각 웰에 첨가된다. 세포는 6시간 동안 배양되고, 이후 250 pfu 인플루엔자 WSN 균주로 감염되었다. 희석된 바이러스가 웰에 직접 첨가되고, 그리고 화합물이 제거되지 않는다. 감염된 세포는 화합물 처리후 총 24시간 동안 성장되고, 이후 고정된다. WSN 인플루엔자 ELISA 프로토콜은 하기와 같이 수행된다: 세포는 PBS로 세척되고, 메탄올:아세톤으로 10분 동안 고정되고, 그리고 PBS로 다시 한 번 세척된다. 세포는 Triton X-100의 존재에서 말 혈청과 BSA로 차단된다. 1:3000 희석도에서 이용된 일차 항체는 생쥐 항-인플루엔자 A 핵단백질 단클론 항체 (Chemicon)이다. 이용된 이차 항체는 염소 항-생쥐 IgG-HRP (Pierce)이고, 이것 역시 1:3000 희석된다. 반응은 제안된 바와 같이, TMBK BioFX 시약을 이용하여 진전된다. 시약 첨가 이후에, 이들 세포는 실온에서 2-5분 동안 배양되고, 그리고 반응을 중단시키기 위해 2N HCl이 이용된다. 평판은 450nM에서 판독된다.

실시예 6. EMCV 항바이러스 분석평가

Huh7 세포는 정상적인 성장 조건 하에 성장되고 0.5% DMSO를 내포하는 배지에서 지시된 양의 약물로 처리되었다. 이들 세포는 약물의 존재에서 5시간 동안 성장되고, 이후 예로써, ATCC #VR-129B로부터 획득된 250 pfu 뮤린 뇌심근염 바이러스(EMCV)로 감염되었다. 감염된 세포는 추가로 18시간 동안 성장되고, 이후 MTS 분석평가를 이용하여 세포 생존능이 측정되었다. 음성 대조 세포는 0.5% DMSO를 내포하는 완충제 단독으로 처리되었다. 인터페론 처리는 바이러스 저해에 대한 양성 대조로서 이용되고, 그리고 예로써, Schering-Plough로부터 인터페론-α: Intron A가 10 IU/㎖의 최종 농도로, 약물 처리에서와 유사하게 첨가되었다. 세포 생존능은 MTS 분석평가, 예를 들면, Promega #G3580으로부터 CellTiter 96® AQueous One Solution 세포 증식 분석평가(MTS)를 이용하여 측정되었다.

결과는 도 3A와 3B에서 도시된다. 이들 도면 및 하기 표에서 확인할 수 있는 바와 같이, KIN101은 EMCV로 감염 이후에, 세포 생존능을 보호하였다.

첨가 (약물 또는 대조) 감염후 세포 생존능

음성 대조 ~ 0.7 - 0.75

5 IU/㎖ 인터페론 ~ 1.7

10 IU/㎖ 인터페론 ~ 2.0

20 IU/㎖ 인터페론 ~ 2.25

5 μM KIN 101 ~ 0.7

10 μM KIN 101 ~ 1.2

20 μM KIN 101 ~ 1.45

실시예 7. 정량적 구조-활성 관계( QSAR ) 연구를 이용한 항바이러스 활성 및 약리학적 성질

본 실시예에서는 항바이러스 작용을 위한 KIN100 화합물의 최적화를 기술한다. 최적화를 위해, 2단계 QSAR 접근법이 이용된다; 구조적 부류(structural class)를 정의하기 위한 작은 유사체 유도체(analog derivative) 세트로 시작, 그 이후에 유도체 확대(derivative expansion). 첫 번째 단계에서 확인된 활성 유사체는 단계 2에서 더욱 최적화를 위한 목적되는 구조적 부류의 부분집합을 정의하는데 이용된다.

단계 2는 구조적 다양성(structural diversity)을 산출하고 핵심 변수(core variant)를 평가하는데 집중할 것이다. 구조적 유도체(structural derivative)는 HCV와 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 활성, 그리고 하나 또는 그 이상의 세포주 또는 말초혈 단핵 세포에서 세포독성에 대해 조사되었다. 향상된 효능 및 낮은 세포독성을 보이는 최적화된 분자는 시험관내 독성학과 흡수, 분포, 물질대사, 그리고 제거(ADME)의 추가적인 적도(measure)에 의해 더욱 특성화된다. 이들의 작용 기전과 항바이러스 활성 폭 역시 조사된다.

QSAR 연구에서 화학적 설계. 유사체 구조를 설계하기 위해, KIN100 화합물의 약물-유사 성질, 대사 부담(metabolic liability), 그리고 독성 잠재력이 분석될 것이다. Lipinski 법칙(18)에 의해 측정된 약물-유사 성질, 그리고 관련된 이화학적 성질은 생체이용효율(bioavailability)의 일차적인 인디케이터이다. 대사와 독성 부담을 암시하는 구조적 특징은 한정된 안정성, 감소된 반감기, 반응성 중간물질, 또는 특유한 독성(idiosyncratic toxicity)을 지시할 수 있고, 따라서 제거될 것이다. 화학적으로 반응성 또는 대사적으로 민감성 구조적 특징을 제거하거나 변경하여 예비 QSAR을 개발하기 위해 5- 내지 10-화합물 유사체 세트가 구축된다.

유사체 설계의 실례는 이소플라본 분자 KIN100에 대해 도 1에서 도시된다. 이소플라본은 콩과(Leguminosae)(legume)로부터 분리된 자연 산물로서 잘 알려져 있고, 그리고 일반적으로, 다중히드록실화되고 식물에스트로겐 및 항산화제로서 약리학적 활성을 갖는다. 이러한 부류 중에서 가장 알려진 구성원은 제니스테인(genistein)인데, 이것은 항암 활성을 갖고 포유동물에서 흉선과 면역 변화를 유도하는 것으로 보고되었다(19). 적절하게는, NCI 자연 산물 라이브러리의 예비 스크린에 의해, ISG 유도를 위한 검증된 히트(hit)로서 제니스테인이 노출되었다. 이러한 상관관계는 생물학적 활성을 유지하면서 기능 기 변형 및 유사체 설계에서 폭넓은 유연성의 잠재력을 증명한다.

QSAR 프로그램에 적절한 구조적 요소는 KIN100의 위치 7에서 아세톡시 기를 포함한다. 위치 3에서 고도 친유성 브로모페닐 기는 KIN100 내에서 염기성 피리딘에 의해 효과적으로 대체될 수 있는데, 이것은 치환기 변화에 대한 높은 정도의 내성을 증명한다.

유사한 방식으로, KIN100의 위치 6에서 프로필 모이어티는 활성에서 상당한 불리 없이 제거될 수 있지만, 이의 존재는 유사한 입체 요구(steric demand)를 갖는 다른 치환기의 도입을 가능하게 한다. 효소적 가수분해(enzymatic hydrolysis)에 취약한, KIN100의 위치 7에서 불안정한 아세톡시 기는 실제 활성 화학종이 6-히드록시 유도체라는 것을 암시한다. 절대 안정성을 갖는 7-위치 유사체는 유사체 개발에 적합하다.

통상의 불포화된 케톤 코어(Michael 수용자)는 잠재적 알킬화 부위이고, 그리고 변형과 시험의 대상이 될 것이다. 시험을 위한 대체의 실례에는 피리돈, 피리미돈, 피리딘, 피리미딘, 그리고 나프틸렌 코어가 포함된다(도 1). 전체적으로, 쌍을 이룬 이소플라본 분자는 최적화된 생물학적, 독성학적, 그리고 약물동력학적 프로필을 갖는 유사체를 설계하는데 적합하다.

QSAR을 뒷받침하는 시험관내 모델. 화학적 유사체는 HCV 2A와 인플루엔자 A 바이러스(A/WSN/33)에 대한 시험관내 항바이러스 활성에 대해 조사된다. 바이러스 단백질과 RNA 수준은 약물 처리 이후에, 앞서 기술된 분석평가를 이용하여 평가된다.

여러 번의 반복적 QSAR 라운드 이후에, 다양한 구조적 부류로부터 가장 매력적인 유사체는 그들의 시험관내 독성과 ADMA 성질의 특성화, 그리고 진전된 기계학적 연구를 위해 선별된다. 이들 QSAR 연구는 피코몰(picomolar) 내지 나노몰(nanomolar) 효능을 갖는 선도 화합물을 제공하도록 설계되는데, 이것은 전임상 개발(preclinical development)을 뒷받침하는데 적합하다.

시험관내 약리학. 시험관내 약리학 연구는 장 투과성(intestinal permeability), 대사 안정성 및 독성 중에서 하나 또는 그 이상의 분석평가에서 가장 유망한 유사체의 성과를 측정하기 위해 실행된다. 핵심적인 시험관내 특성화 연구는 혈장 단백질 결합; 인간과 모델 생물체에서 혈청, 혈장, 그리고 전혈 안정성; 장 투과성; 고유 청소율(intrinsic clearance); 인간 Ether-a-go-go(hERG) 채널 저해; 그리고 유전독성(genotoxicity)을 포함할 수 있다.

각 유사체에 대해, HPLC- 및/또는 HPLC-질량 분석법-기초된 분석 방법이 다양한 검사 시스템에서 약물과 대사물질 농도를 평가하는데 이용될 것이다. 비록 각 분자에 대해 특정한 분석 방법이 최적화되긴 하지만, 여러 선도 분자의 실체와 순도를 특성화하기 위해, 역상 크로마토그래피(reverse-phase chromatography)가 단독으로 또는 4중극 질량 분석법과 공동으로 이용될 수 있다. 초기에, 포유동물 종(가령, 생쥐, 게먹이 원숭이(cynomolgus macaque), 그리고 인간)으로부터 증가하는 농도의 혈청, 혈장, 그리고 전혈에서 시간의 흐름에서 약물 안정성이 HPLC에 의해 평가되고, 그리고 반감기가 결정될 것이다.

일부 경우에, 현저한 대사물질은 질량 분석법으로 특성화된다. 인간 혈장 단백질 결합은 평형 투석(equilibrium dialysis)을 이용한 분할 분석(partition analysis)에 의해 평가될 것이다. 장 투과성 모델링을 위해, 선단-기저측면 유동(apical-to-basolateral flux)이 인간 상피 세포주 TC7에서 평가된다. 간 청소율(hepatic clearance)이 인간 간 마이크로솜에서 배양 동안 부모 화합물의 소멸률(rate of disappearance)을 측정함으로써 가장 유망한 유사체의 부분집합에 대해 평가된다. 상기한 바와 같이, 특정한 대사물질이 분리되고 특성화될 수 있다.

시험관내 독성학. 독성학적 분석평가에 관한 본 설명은 예시적이고 한정하는 것으로 의도되지 않는다. 시험관내 독성학 연구는 선도 유사체의 잠재적 심장 독성과 유전 독성을 평가하기 위해 실행된다. 자동화된 패치-클램프(patch-clamp)가 인간 Kv11.1 유전자를 유전자도입 방식으로 발현하는 재조합 중국 햄스터 난소(CHO) 세포주에서 hERG 채널 전류(channel current)에 대한 각 화합물의 영향을 평가하는데 이용될 수 있다. hERG 채널에서 분자에 대한 IC50을 결정하기 위해, 각 화합물의 최대 혈청 농도 또는 용해도 한계의 30배까지 적은 농도가 평가된다. 화합물의 부분집합이 일정한 농도 범위에서, 살모넬라 티피무리움(Salmonella typhimurium) 균주 TA98와 TA100에서 돌연변이 역전(mutation reversion)을 유도하거나, 또는 배양 중인 CHO 세포에서 소핵 형성(micronucleus formation)을 증진하는 능력에 대해 평가된다.

실시예 8. KIN100 화합물의 항바이러스 활성

세포 배양 감염 모델에서 항바이러스 작용. 본 명세서에서 개시된 KIN100 화합물은 HCV 유전형 2a 및 인플루엔자 바이러스 균주 WSN에 대해 유효한 활성을 갖는다. 최적화된 분자의 항바이러스 활성 폭을 더욱 특성화하기 위해, 세포 배양 감염 모델이 상이한 HCV 유전형 및 인플루엔자 바이러스 균주를 분석하는데 이용된다. 이에 더하여, 최적화된 화합물은 부상하고 있는 공중 보건 문제인 웨스트 나일 바이러스(WNV)에 대한 활성에 대해 조사된다. 이들 연구는 감염전 2-12시간 시점에 화합물로 세포를 처리하거나, 또는 감염후 8시간 시점에 화합물로 세포를 처리하는 것을 포함한다(표 3). 선도 구조적 부류로부터 대표적인 화합물의 항바이러스 효과를 분석하기 위해 시간 추이에서 바이러스 생산 및 세포 ISG 발현이 평가된다. IFNb 처리는 양성 대조로서 이용된다.

바이러스 생산은 병소-형성 또는 플라크 분석평가에 의해 측정된다. 병소-형성 분석평가의 실례는 도 2에 도시되는데, 이것은 HCV 병소-형성 분석평가의 그래프이다. Huh7 세포는 24시간 동안 KIN100으로 전-처리되고, 그리고 0.5의 MOI에서 48시간 동안 HCV2a로 감염되었다. HCV 단백질은 바이러스-특이적 혈청으로 면역형광 염색에 의해 검출되고, 그리고 병소는 약물 처리되지 않은 음성 대조 세포(1에 대응함)에 대해 정상화(normalization)되었다.

병렬 실험에서, 바이러스 RNA 및 세포 ISG 발현은 qPCR 및 면역블롯(immunoblot) 분석에 의해 측정된다. 이들 실험은 바이러스 감염 동안 화합물 신호전달 작용을 검증하고, 그리고 바이러스 대항의 환경에서 다양한 바이러스 균주에 대한 선천성 면역 항바이러스 프로그램을 주도하는 화합물 작용을 평가하기 위해 설계된다. 처리전 감염 모델 및 처리후 감염 모델 둘 모두에 대해 대조 세포와 비교하여 바이러스 생산을 50% (IC50)와 90% (IC90) 억제하는 효과량을 결정하기 위해, 각 화합물의 상세한 용량-반응 분석이 각 바이러스 감염 시스템에서 실행된다.

실시예 9. 전임상 동물 모델에서 최적화된 KIN100 화합물의 생체내 약물동력학적 성질, 독성학적 성질, 그리고 항바이러스 성질

전임상 약물동력학적 및 내약성 프로파일링. 인플루엔자 바이러스와 WNV 감염의 동물 모델에서 항바이러스 활성의 더욱 특성화를 수행하기 위해, KIN100 화합물의 생체내 약물동력학적(PK) 프로필 및 내약성/독성이 평가된다. 생쥐가 이들 연구를 위한 검사 종으로서 선택되는데, 그 이유는 생쥐가 WNV와 인플루엔자의 가장 일반적으로 이용되는 설치류 모델이기 때문이다.

생쥐 혈장에서 각 화합물의 농도를 측정하기 위해 역상 HPLC-MS/MS 검출 방법이 이용된다. PK 프로파일링에 앞서, 적은 숫자의 보관 조건에서 수성 용해도(aqueous solubility) 및 안정성(stability)을 극대화시키는데 거의 집중되는 한정된 제제 성분 스크린을 이용하여, 각 화합물에 대한 최초 경구와 정맥내 제제가 개발된다. 당분야에 공지된 기존의 분석 방법이 제제 성과를 측정하는데 이용된다. 제제는 3 계단식 전략에 따라서, 각 화합물에 대해 개발된다:

- 계단 1: pH (pH 3 내지 9), 완충제, 그리고 삼투질농도(osmolality) 조정

- 계단 2: 용해도를 증강시키기 위한 에탄올(<10%), 프로필렌 글리콜(<40%), 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 300 또는 400(<60%) 보조-용매의 첨가

- 계단 3: 용해도를 더욱 향상시키기 위해 필요에 따라, N-N-디메틸아세트아미드(DMA, <30%), N-메틸-2-피롤리돈(NMP, <20%), 및/또는 디메틸 술폭시화물 (DMSO, <20%) 보조-용매 또는 시클로덱스트린(<40%)의 첨가.

시험관내 항바이러스, 기계학, ADME, 그리고 독성학 연구에서 적절한 성과를 나타내는 선별된 KIN100 화합물의 경우에, 예비 생쥐 PK 연구가 실행된다(표 4). 각 화합물은 하룻밤 금식후 경구 위관영양(oral gavage)(<10 ㎖/㎏) 또는 i.v. 일시 주사(<5 ㎖/㎏)에 의해 동물에 단일 복용량(single dose)으로서 투여된다. 복수의 동물은 3마리 동물이 각 시점에서 샘플링(sampling)되도록 각 투약 군(dosing group)에 대해 투약된다. 혈액 샘플은 투약전, 그리고 투약후 5, 15와 30분 및 1, 2, 4, 8과 24시간 시점에 안와후 부비동(retro-orbital sinus)에 의해 수집된다. 약물 농도는 기존에 개발된 생물분석 방법에 따라 측정된다. 약물동력학적 파라미터는 WinNonlin 소프트웨어를 이용하여 평가된다.

연구	실험 설계	투여 루트	결과
생쥐 PK	단일 복용량 약물동력학적 연구	IV와 경구	경구 생체이용효율, C_max, t, Cl, V_d, AUC₀ _-24,0-
생쥐 내약성	1기: 상승적 복용량 내약성 및 MTD 결정; 2기: MTD에서 위약 대조 7-일 독성	경구	MTD, 급성 독성, 혈액학, 혈청 화학, 육안 병리학

예비적 PK 연구에서 성과에 기초하여, 화합물은 항바이러스 모델에서 특성화에 앞서, 생쥐에서 예비 내약성과 독성에 대해 더욱 평가된다. 내약성 연구는 2 단계로 실행된다: 최대 내약성 용량(maximum tolerable dose)을 결정하기 위한 최초 복용량 점증 단계(5회 복용량까지, 각각은 5-일 휴약 기간(washout period)에 의해 분리됨)(MTD, 단계 1), 그 이후에 급성 독성을 평가하기 위한 MTD의 하루 7회 투여(단계 2)(표 5). 모든 복용량은 경구 위관영양에 의해 투여된다. 예시적인 실험에서, 각 성별의 5마리 동물이 단계 1에서 연구에 배치되고, 그리고 단계 2에서 투약 군당 성별로 15마리 동물이 배치된다. 연구 종점은 MTD, 신체 검사, 임상적 관찰, 혈액학, 혈청 화학 및 동물 체중의 결정을 포함한다. 육안 병리학은 폐사, 극단에서 안락사, 또는 실험의 의도된 종결 시점에서 관찰되는 지에 상관없이, 모든 동물에서 실행된다. 독성학 연구는 성격상, 본래 예비적이고, 그리고 초기 독성학적 종점을 확인하고 항바이러스 동물 모델에 대한 선도 후보의 선별을 주동하기 위한 것으로 의도된다.

WNV와 인플루엔자 바이러스에 대한 화합물 작용의 생체내 연구

실험	분석	목적	생쥐의 예시적인 번호*
효과적인 화합물 용량 결정	혈청에서 바이러스 총균량 분석	생체내 EC₅₀과 EC₉₀ 정의	238
바이러스 병인 연구 1: EC₅₀과 EC₉₀ 처리	빈사 상태까지의 시간, 감염의 병리학적 징후에 대한 임상적 스코어링	바이러스 병인을 제한하는 방향으로 화합물 작용을 정의	739
바이러스 병인 연구 2: EC₅₀과 EC₉₀ 처리 및 시간 추이 분석	혈청 및 다양한 표적 장기에서 바이러스 총균량 분석	바이러스 복제와 확산을 제한하는 방향으로 화합물 작용을 정의	1056
바이러스 병인 연구 3: (신경침투 모델) EC₅₀과 EC₉₀ 처리	빈사 상태까지의 시간, 감염의 병리학적 징후에 대한 임상적 스코어링	CNS에서 바이러스 병인을 제한하는 방향으로 화합물 작용을 정의	370
*숫자는 각 실험의 적어도 2회 반복의 평균을 반영한다.

생쥐 감염 모델을 이용한 항바이러스 성질과 면역 보호의 평가. 최적화된 화합물은 감염의 전임상 생쥐 모델에서 진전된 평가를 위해 화합물 약물동력학, 항바이러스, 그리고 선천성 면역 작용에 기초하여 선별된다(표 5). 화합물의 선천성 면역 작용이 측정되고, 그리고 WNV와 인플루엔자 바이러스 공격으로부터 생쥐를 보호하는 능력이 평가된다. WNV 감염 모델의 경우에, WNV의 독력 계통 1 균주(WNV-TX)로 야생형 C57Bl/6 생쥐의 피하 발볼록살 감염이 수행된다(29). 인플루엔자 바이러스 균주 A/PR/8/34, A/WSN/33, 그리고 A/Udorn/72의 경우에 비-외과적 기관내 주입(tracheal instillation)이 수행된다.

일정한 실험에 이용되는 인플루엔자 바이러스 균주는 2가지 상이한 아류형(H1N1과 H3N2)을 갖고, 그리고 C57Bl/6 생쥐에서 다양한 병원성 성질 및 임상적 증상(clinical presentation)을 나타낸다(30). 생쥐는 단독으로, 또는 감염전 12시간 또는 감염후 24시간 시점에 시작되고 약물의 측정된 혈장 반감기를 조건으로 매일 지속되는 화합물 처리와 공동으로 일정한 범위의 공격 용량(challenge dose)(가령, 10 내지 1,000 pfu의 바이러스)에서 이환과 폐사에 대해 모니터링된다. 1) 혈청 바이러스 하중을 제한하고, 2) 표적 장기에서 바이러스 복제와 확산을 제한하고, 그리고 3) 바이러스 병인으로부터 보호하는 화합물 효능을 평가하기 위해, 화합물 용량-반응 곡선 및 감염 시간 추이 연구가 실행된다.

WNV의 경우에, 혈청 이외에, 림프절, 비장, 그리고 뇌에서 바이러스 총균량(viral burden)이 평가된다; 인플루엔자 바이러스의 경우에, 심장, 폐, 신장, 간, 그리고 뇌에서 바이러스 총균량이 평가된다. 이들 실험의 설계에는 100 pfu의 WNV-TX 또는 1,000 pfu의 인플루엔자 바이러스의 표준 공격후, 각 화합물에 의한 혈청 바이러스 하중의 50%와 90% 억제를 위한 효과량(ED50과 ED90)의 결정이 통합된다. 혈청 바이러스 하중은 화합물 처리 이후에, 24시간 간격에서 바이러스 RNA의 qPCR에 의해 측정된다. 화합물 작용은 감염의 WNV 신경침투(neuroinvasion) 모델을 이용하여 뇌신경계(cerebral nervous system)에서 WNV 병인을 제한하는 방향으로 ED50과 ED90에서 조사된다(31).

생쥐는 단독으로, 또는 감염후 24시간 시점에 시작되는 화합물 처리와 공동으로 1 pfu의 WNV-MAD의 표준 두개내 공격(intracranial challenge)후 이환과 폐사에 대해 모니터링된다.

달리 지시되지 않으면, 본 명세서 및 청구항에서 이용된 성분, 분자량과 같은 성질, 반응 조건 등의 양을 표시하는 모든 숫자는 모든 경우에, 용어 "약"에 의해 수식되는 것으로 이해된다. 따라서 반대로 지시되지 않으면, 본 명세서 및 첨부된 청구항에서 설명된 수치 파라미터는 본 발명에 의해 요망되는 원하는 성질에 따라 변할 수 있는 근사치이다. 적어도, 그리고 특허청구범위에 균등론(doctrine of equivalent)의 적용을 한정하려는 의도 없이, 각 수치 파라미터는 보고된 유효 숫자(significant digit)의 총수에 비추어, 그리고 통상의 반올림 기술을 적용함으로써 해석되어야 한다.

비록 본 발명의 넓은 범위를 설명하는 수치 범위와 파라미터가 근사치이긴 하지만, 특정 실시예에서 설명된 수치 값은 가능한 정확하게 보고된다. 하지만, 임의의 수치 값은 그들의 개별 검사 치수에서 발견되는 표준 오차(standard deviation)에 필연적으로 기인한 일정한 오류를 본래적으로 내포한다.

본 발명을 기술하는 문맥(특히, 하기 청구항의 문맥)에서 이용된 단수 표현 및 유사한 참고물은 본 명세서에서 달리 지시되거나, 또는 문맥에 의해 명백하게 반대되지 않으면, 단수와 복수 둘 모두를 포함하는 것으로 해석된다. 본 명세서에서 값의 범위의 언급은 단순히, 이러한 범위 내에 속하는 각 개별 값을 개별적으로 언급하기 위한 속기 방법으로서 의도된다. 본 명세서에서 달리 지시되지 않으면, 각 개별 값은 마치 상기 값이 본 명세서에서 개별적으로 언급되는 것처럼 명세서 내로 통합된다. 본 명세서에서 기술된 모든 방법은 본 명세서에서 달리 지시되거나, 또는 문맥에 의해 명백하게 반대되지 않으면, 임의의 적절한 순서로 수행될 수 있다. 본 명세서에서 제공된 임의의 모든 실시예, 또는 예시적인 용어(가령, 예를 들면)의 이용은 단순히, 본 발명을 더욱 충실하게 설명하는 것으로 의도되고, 그리고 만약 그렇지 않으면 청구되는 본 발명의 범위에 한정을 강제하지 않는다. 명세서 내에 어떤 용어도 본 발명의 실시에 필수적인 임의의 청구되지 않은 요소를 지시하는 것으로 해석되지 않아야 한다.

본 명세서에서 개시된 발명의 대안적 요소 또는 구체예의 그룹화(grouping)는 한정으로서 해석되지 않는다. 각 그룹 구성원은 개별적으로, 또는 본 명세서에서 발견되는 그룹의 다른 구성원 또는 다른 요소와의 임의의 조합으로 언급되고 청구될 수 있다. 한 그룹의 하나 또는 그 이상의 구성원이 편의(convenience) 및/또는 특허성(patentability)의 이유로, 그룹 내에 포함되거나, 또는 그룹으로부터 삭제될 수 있을 것으로 예상된다. 임의의 이와 같은 포함 또는 삭제가 발생할 때, 명세서는 변형된 그룹을 내포하고, 따라서 첨부된 청구항에서 이용된 모든 마쿠쉬(Markush) 그룹의 서면 설명서(written description)를 충족하는 것으로 간주된다.

본 발명을 실행하기 위한 본 발명자들에게 공지된 최적 양식을 비롯하여 본 발명의 일정한 구체예가 본 명세서에서 기술된다. 당연히, 이들 기술된 구체예의 변형은 상기한 설명을 읽어본 당업자에게 명백할 것이다. 본 발명자들은 당업자가 적절한 경우에 이런 변형을 이용할 것으로 예상하고, 그리고 본 발명자들은 본 발명이 본 명세서에서 특정적으로 기술된 것과 달리 실시될 수 있을 것이라고 생각한다. 따라서 본 발명은 적용가능 법규에 의해 허용되는, 첨부된 청구항에서 언급된 요부(subject matter)의 모든 변형과 등가물을 포함한다. 게다가, 모든 가능한 변형에서 앞서 기술된 요소의 임의의 조합은 본 명세서에서 달리 지시되거나, 또는 문맥에 의해 명백하게 반대되지 않으면, 본 발명에 포함된다.

본 명세서에서 개시된 특정 구체예는 "구성되는" 및/또는 "본질적으로 구성되는"의 어구를 이용하여 청구항에서 더욱 한정될 수 있다. 출원 시에 제출되거나, 또는 보정에 의해 추가되는 지에 상관없이, 청구항에서 이용될 때 연결 어구(transition term) "구성되는"은 청구항에서 명시되지 않은 임의의 요소, 단계, 또는 성분을 배제한다. 연결 어구 "본질적으로 구성되는"은 청구항의 범위를 명시된 물질 또는 단계, 그리고 기본적이고 새로운 특징(들)에 실질적으로 영향을 주지 않는 것들에 한정한다. 이렇게 청구된 본 발명의 구체예는 본 명세서에서 본래적으로 또는 명백히 기술되고 가능하다.

최종적으로, 본 명세서에서 개시된 발명의 구체예는 본 발명의 원리를 예증하는 것으로 이해된다. 이용될 수 있는 다른 변형은 본 발명의 범위 내에 있다. 따라서 실례로써, 하지만 한정 없이, 본 발명의 대안적 형태가 본 명세서에 기술된 교시에 따라서 이용될 수 있다. 따라서 본 발명은 도시되고 기술된 바와 정확하게 동일한 것에 한정되지 않는다.

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Claims

하기 구조를 갖는 화합물을 포함하는 제약학적 조성물:

여기서 R₁과 R²는 각각 독립적으로, H, 저급 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 알킬아릴, 아릴알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알콕시, 알콕시알킬아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 환상 헤테로알킬, 아실, NH₂, OH, CN, NO₂, OCF₃, CF₃, Br, Cl, F, 1-아미디노, 2-아미디노, 알킬카르보닐, 모르폴리노, 피페리디닐, 디옥사닐, 피라닐, 헤테로아릴, 푸라닐, 티오페닐, 테트라졸로, 티아졸, 이소티아졸로, 이미다졸로, 티아디아졸, 티아디아졸 S-산화물, 티아디아졸 S,S-이산화물, 피라졸로, 옥사졸, 이속사졸, 피리디닐, 피리미디닐, 퀴놀린, 이소퀴놀린, SR⁴, SOR⁴, SO₂R⁴, CO₂R⁴, COR⁴, CONR⁴R⁵, CSNR⁴R⁵ 또는 SO_mNR⁴R⁵에서 선택되고;
R³은 H, 저급 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 알킬아릴, 아릴알킬, 알콕시알킬아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 환상 헤테로알킬, 아실, 알킬설포닐, 아릴설포닐 또는 헤테로환상알킬알킬이고;
Z¹, Z²와 Z³은 각각 독립적으로, C, O, NH S, C=O, S=O 또는 SO₂에서 선택되고;
Y¹, Y²와 Y³은 각각 독립적으로, C 또는 N에서 선택되고;
W는 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로알킬, 치환된 헤테로알킬, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 아릴알킬 또는 헤테로아릴 알킬이고;
R⁴와 R⁵는 각각 독립적으로, H, 저급 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 알킬아릴, 아릴알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알콕시, 알콕시알킬아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 환상 헤테로알킬, 아실, NH₂, OH, CN, NO₂, OCF₃, CF₃, Br, Cl, F, 1-아미디노, 2-아미디노, 알킬카르보닐, 모르폴리노, 피페리디닐, 디옥사닐, 피라닐, 헤테로아릴, 푸라닐, 티오페닐, 테트라졸로, 티아졸, 이소티아졸로, 이미다졸로, 티아디아졸, 티아디아졸 S-산화물, 티아디아졸 S,S-이산화물, 피라졸로, 옥사졸, 이속사졸, 피리디닐, 피리미디닐, 퀴놀린 또는 이소퀴놀린에서 선택되고;
파선은 이중 결합의 존재 또는 부재를 나타내고;
m은 1 또는 2이고;
n은 0, 1, 2 또는 3이고; 그리고
o는 0, 1, 2, 또는 3이다.
청구항 1에 있어서, 청구항 1의 화합물, 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염, 호변체, 이성질체 및/또는 프로드러그를 포함하는 것을 특징으로 하는 제약학적 조성물.
청구항 2에 있어서, 1개의 R¹ 및 1개의 R³은 서로 합쳐 아릴, 시클로알킬, 메틸렌디옥소, 에틸렌디옥소, 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬 기를 형성하는 것을 특징으로 하는 제약학적 조성물.
청구항 2에 있어서, 화합물은 하기 구조를 갖는 것을 특징으로 하는 제약학적 조성물:

여기서 각 R⁶은 독립적으로, H, 저급 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 알킬아릴, 아릴알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알콕시, 알콕시알킬아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 환상 헤테로알킬, 아실, NH₂, OH, CN, NO₂, OCF₃, CF₃, Br, Cl, F, 1-아미디노, 2-아미디노, 알킬카르보닐, 모르폴리노, 피페리디닐, 디옥사닐, 피라닐, 헤테로아릴, 푸라닐, 티오페닐, 테트라졸로, 티아졸, 이소티아졸로, 이미다졸로, 티아디아졸, 티아디아졸 S-산화물, 티아디아졸 S,S-이산화물, 피라졸로, 옥사졸, 이속사졸, 피리디닐, 피리미디닐, 퀴놀린, 이소퀴놀린, SR⁴, SOR⁴, SO₂R⁴, CO₂R⁴, COR⁴, CONR⁴R⁵, CSNR⁴R⁵ 또는 SO_mNR⁴R⁵에서 선택되고;
X¹, X², X³, X⁴와 X⁵는 각각 독립적으로, C 또는 N에서 선택되고;
파선은 이중 결합의 존재 또는 부재를 나타내고;
p는 0, 1, 2, 3 또는 4이고; 그리고
여기서 2개의 R⁶ 기는 서로 합쳐 아릴, 시클로알킬, 메틸렌디옥소, 에틸렌디옥소, 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬 기를 형성한다.
청구항 2에 있어서, 화합물은 하기 구조를 갖는 것을 특징으로 하는 제약학적 조성물:

여기서 각 R¹, R²와 R⁶은 독립적으로, H, 저급 알킬, 아릴, 알케닐, 알키닐, 알킬아릴, 아릴알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알콕시, 알콕시알킬아릴, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 환상 헤테로알킬, NH₂, OH, CN, NO₂, OCF₃, CF₃, Br, Cl, F, 알킬카르보닐 또는 알킬설포닐에서 선택되고;
Z₁은 O, NH, NR 또는 S이고;
Z₃은 O, NH, NR, S, C=O, S=O 또는 SO₂이고;
파선은 이중 결합의 존재 또는 부재를 나타내고; 그리고
여기서 1개의 R¹ 및 1개의 R³ 또는 2개의 R⁶ 기는 서로 합쳐 아릴, 시클로알킬, 메틸렌디옥소, 에틸렌디옥소, 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬 기를 형성한다.
청구항 2에 있어서, 화합물은 하기 구조를 갖는 것을 특징으로 하는 제약학적 조성물:

.
청구항 2에 있어서, 화합물은 하기와 같이 구성된 군에서 선택되는 구조를 갖는 것을 특징으로 하는 제약학적 조성물:

,
,
, ,

및
.
청구항 2에 있어서, 화합물은 하기와 같이 구성된 군에서 선택되는 구조를 갖는 것을 특징으로 하는 제약학적 조성물:

및
청구항 2에 있어서, 화합물은 하기와 같이 구성된 군에서 선택되는 구조를 갖는 것을 특징으로 하는 제약학적 조성물:

및
.
척추동물에서 바이러스 감염을 치료하거나 예방하는 방법에 있어서, 청구항 2의 제약학적 조성물을 척추동물에게 투여하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
청구항 10에 있어서, 바이러스 감염은 하기 과(family) 중에서 하나 또는 그 이상으로부터 바이러스에 의해 유발되는 것을 특징으로 하는 방법:
아레나바이러스과(Arenaviridae), 아스트로바이러스과(Astroviridae), 버나바이러스과(Birnaviridae), 브로모바이러스과(Bromoviridae), 부니아바이러스과(Bunyaviridae), 칼리시바이러스과(Caliciviridae), 클로스테로바이러스과(Closteroviridae), 코모바이러스과(Comoviridae), 시스토바이러스과(Cystoviridae), 플라비바이러스과(Flaviviridae), 플렉시바이러스과(Flexiviridae), 헤페바이러스(Hepevirus), 레비바이러스과(Leviviridae), 루테오바이러스과(Luteoviridae), 모노네가바이러스(mononegavirales), 모자이크 바이러스(Mosaic Virus), 니도바이러스(Nidovirales), 노다바이러스과(Nodaviridae), 오르토믹소바이러스과(Orthomyxoviridae), 피코비르나바이러스(Picobirnavirus), 피코르나바이러스과(Picornaviridae), 포티바이러스과(Potyviridae), 레오바이러스과(Reoviridae), 레트로바이러스과(Retroviridae), 세쿠이바이러스과(Sequiviridae), 테뉴이바이러스(Tenuivirus), 토가바이러스과(Togaviridae), 톰부스바이러스과(Tombusviridae), 토티바이러스과(Totiviridae), 티모바이러스과(Tymoviridae), 헤파드나바이러스과(Hepadnaviridae), 허피스바이러스과(Herpesviridae), 파라믹소바이러스과(Paramyxoviridae) 또는 파필로마바이러스과(Papillomaviridae).
청구항 10에 있어서, 바이러스 감염은 인플루엔자 바이러스(influenza virus), C형 간염 바이러스(Hepatitis C virus), 웨스트 나일 바이러스(West Nile virus), SARS-코로나바이러스(SARS-coronavirus), 소아마비 바이러스(poliovirus), 홍역 바이러스(measles virus), 뎅기열 바이러스(Dengue virus), 황열병 바이러스(yellow fever virus), 진드기 매개 뇌염 바이러스(tick-borne encephalitis virus), 일본 뇌염 바이러스(Japanese encephalitis virus), 세인트루이스 뇌염 바이러스(St. Louis encephalitis virus), 머레이 계곡 바이러스(Murray Valley virus), 포와센 바이러스(Powassan virus), 로시오 바이러스(Rocio virus), 루우핑 일 바이러스(louping-ill virus), 방지 바이러스(Banzi virus), 일레우스 바이러스(Ilheus virus), 코코베라 바이러스(Kokobera virus), 쿤진 바이러스(Kunjin virus), 알푸이 바이러스(Alfuy virus), 소 설사 바이러스(bovine diarrhea virus), 키야사나 삼림병 바이러스(Kyasanur forest disease virus) 또는 인간 면역결핍 바이러스(human immunodeficiency virus, HIV)인 것을 특징으로 하는 방법.
청구항 10에 있어서, 화합물은 하기와 같이 구성된 군에서 선택되는 구조를 갖는 것을 특징으로 하는 방법:

및
청구항 10에 있어서, 상기 제약학적 조성물은 예방적 또는 치료적 백신에 대한 어쥬번트(adjuvant)로서 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
청구항 10에 있어서, 화합물은 하기와 같이 구성된 군에서 선택되는 구조를 갖는 것을 특징으로 하는 방법:

,
,

,
,
,
,
,
, 그리고
.
청구항 14에 있어서, 상기 방법은 인플루엔자 바이러스, C형 간염 바이러스, 웨스트 나일 바이러스, SARS-코로나바이러스, 소아마비 바이러스, 홍역 바이러스, 뎅기열 바이러스, 황열병 바이러스, 진드기 매개 뇌염 바이러스, 일본 뇌염 바이러스, 세인트루이스 뇌염 바이러스, 머레이 계곡 바이러스, 포와센 바이러스, 로시오 바이러스, 루우핑 일 바이러스, 방지 바이러스, 일레우스 바이러스, 코코베라 바이러스, 쿤진 바이러스, 알푸이 바이러스, 소 설사 바이러스, 키야사나 삼림병 바이러스 또는 인간 면역결핍 바이러스 (HIV)에 대한 백신을 추가로 투여함에 의해 척추동물에게 예방접종하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
진핵 세포에서 선천적 면역 반응(innate immune response)을 조정하는 방법에 있어서, 청구항 2의 화합물을 세포에 투여하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
청구항 17에 있어서, 화합물은 하기와 같이 구성된 군에서 선택되는 구조를 갖는 것을 특징으로 하는 방법:
,
,

,
,
,
,
,
, 그리고
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청구항 17에 있어서, 화합물은 하기와 같이 구성된 군에서 선택되는 구조를 갖는 것을 특징으로 하는 방법:

및