KR20130049672A - 아젤라신 ｄ를 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 아젤라신 Ｄ를 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 의한 아젤라신 D는 골수세포가 파골세포로 분화하는 동안 세포 독성을 유발하지 않고, 파골세포 분화 억제활성 효과가 우수하며, 파골세포에서 많이 발현되는 TRAP 유전자, 카뎁신 K(cathepsin K) 유전자 및 MMP-9 유전자의 발현을 농도의존적을 억제하는 것으로 나타나 골수세포의 뼈조직을 파괴 또는 흡수하는 파골세포로의 분화를 억제하는 효과가 우수하므로, 골다공증, 골화석증, 골경화증, 관절염, 파제트병(Paget's disease), 대사성 골질환, 다발성 마이엘로마, 치주질환 또는 골형성 부전증 등과 같은 골질환의 예방 또는 치료를 위한 약학적 조성물 또는 개선을 위한 건강식품 조성물로서 유용하게 이용될 수 있다.

Description

아젤라신 Ｄ를 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물{Pharmaceutical composition for Prevention or Treatment of bone diseases comprising agelasin D}

본 발명은 아젤라신 Ｄ를 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

우리 몸을 이루고 있는 뼈는 정상적인 인체 조직처럼 일생 동안 오래된 뼈가 새로운 뼈로 바뀌는 과정을 거치는데, 이것을 뼈의 리모델링라고 한다. 뼈의 형성(bone formation)을 일으키는 조골세포(osteoblast)와 뼈의 파괴(bone destruction)를 일으키는 파골세포(osteoclast)가 균형을 이루면서 이러한 과정이 진행되게 되는데, 청소년기에는 뼈의 형성이 뼈의 파괴보다 활발하게 일어나고, 성인이 되면 형성과 파괴가 균형을 이루면서 정상적인 뼈의 리모델링이 일어나게 되지만 노년기가 되게 되면 뼈의 형성보다 뼈의 파괴가 더 활발하게 일어나게 되어 병이 생기는 원인이 된다. 이처럼 뼈의 리모델링 과정에서 균형을 이루지 못하게 되면 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis), 혹은 파골세포에 의해 뼈의 밀도가 낮아져 생기는 골다공증(osteoporosis), 조골세포의 활동이 너무 활발하여 뼈의 밀도가 높아지는 골석화증(osteopetrosis) 및 변형성 뼈염이라고 불리는 파제트병(Paget's disease)과 같은 골질환이 생기게 된다.

특히, 골다공증은 골절이 발생하기 전까지는 침묵의 질병으로 경미한 충격에도 골절이 발생한다. 골다공증성 골절은 흔하게 발생하여 노인에게는 개인적, 의학적으로 많은 비용을 지불해야할 뿐만 아니라 사회적으로도 경제적 부담이 증가하게 된다. 골다공증은 예방할 수 있고 골절이 발생하기 전에 진단하고 치료할 수 있는 질병이다. 이미 골절이 발생한 뒤라도 추가적인 골절 발생 위험도를 낮출 수 있는 효과적인 치료법이 있다는 점이 중요하다. 그러나 많은 환자들은 골다공증 예방에 대해 적절한 정보를 얻지 못하고 골다공증이 진단되었더라도 효과적인 치료를 받지 못하고 있다(유병연, 대한임상노인의학회 추계학술대회, 260-272(2009)).

골다공증 발생 원인으로는 골다공증을 일으키는 골밀도의 감소는 뼈의 대사 즉, 새로운 뼈를 생성하는 골생성과 오래된 뼈를 제거하는 골소실 속도에서의 불균형(unbalance)에 기인하고, 대표적인 원인은 연령증가에 따른 자연적인 노화 과정으로 골손실에 비하여 골생성이 낮아짐으로써 발생된다. 특히, 폐경기(menopause) 후 여성의 경우 뼈의 강도 유지에 중요한 역할을 하는 난소에서 분비되는 여성호르몬인 에스트로겐(estrogen) 분비가 중지됨에 따라 뼈로부터의 칼슘소실을 유발하게 되어 골다공증 발생 위험이 높아지는 것으로 알려져 있다(생명공학정책연구센터, BT기술동향 보고서, 제158권(2011)).

골다공증 치료약물로는 대부분 폐경 후 여성을 대상으로 연구한 것으로서, 알렌드로네이트, 리제드로네이트 및 이반드로네이트를 포함하는 비스포스포네이트 약물이 있고, 이는 세계적으로 가장 많이 처방되고 있는 약제이나, 연하곤란, 식도의 염증, 위궤양 등 위장관 문제 등의 부작용이 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 연어 칼시토닌은 최소한 폐경 후 5년 이상 여성의 골다공증 치료에 사용되고 있으나, 비염을 경험하고 매우 드물게 코피를 흘리는 등의 부작용이 있는 문제점이 있다.

골조직의 2/3는 주로 칼슘 포스페이트로 이루어진 무기물이고, 1/3은 주로 콜라겐으로 이루어진 유기물질로 구성되어 있다. 골조직에는 뼈 선조세포(osteoproenitor cells), 조골세포(osteoblast), 파골세포(Osteoclast), 골내세포(Osteocyte) 등이 있는데, 뼈조직에서 유일하게 뼈의 파괴를 담당하는 파골세포는 단핵구/대식세포 계통의 세포이며, 여러 조직에 존재하는 단핵구 대식 전구세포로부터 시험관내에서 파골세포의 생성이 가능하다. 파골세포는 특징적으로 TRAP와 풍부한 칼시토닌 수용체를 가지며 실제적으로 뼈의 흡수작용을 할 때는 산 생성이 활발하고, 액틴 고리(actin ring)를 형성하여 골기질을 흡수한다. 파골세포의 생성을 위해서는 NF-κB 리간드의 수용체 활성제(RANKL)와 대식세포증식자극인자(macrophage colony stimulating factor(M-CSF))와 같은 두 종류의 싸이토카인(cytokine)이 필수적인데, 이러한 싸이토카인이 파골세포의 분화를 유도한다(신정민 외, KOREAN J. FOOD SCI . TECHNOL. 40(6), 674-679(2008)). 또한, 파골세포 표지 인자로 사용되고 있는 TRAP, 파골세포에 선택적으로 분포하여 골흡수를 일으키는 단백질인 카뎁신 K 및 파골세포의 이동에 중요한 역할을 하는 MMP-9와 같은 활성화된 파골세포에만 특이하게 발현된다.

이에, 파골세포의 분화 및 생존에 결정적인 역할을 하는 RANKL을 억제하는 데노수맙(denosumab), 파골세포에 특이적으로 존재하여 골흡수에 매우 중요한 역할을 하는 카뎁신 K(cathepsin K)를 억제하는 약제, 골형성을 촉진하고 골흡수를 억제하는 스트론디움(strontium), 및 기존의 SERM 제제에 비해 더 조직 특이적이면서 더 좋은 골다공증 치료 효과를 갖는 일부 3세대 SERM 제제들이 곧 사용이 가능할 것으로 예상되고 있다. 그러나, 상기 약물의 경우, 아직 임상 단계에 있어, 부작용 면에서 확인된 바가 없다.

그 동안 많은 골다골증 치료제가 사용되어 왔으나 사용 방법이 불편하고 대부분이 골 흡수 억제 효과만 있는 현재 시점에서 골 생성 촉진제의 사용과 여러가지 골흡수 억제제의 다양한 선택은 골다공증 치료면에서 보다 많은 관심과 다양성을 갖게 되었다(유병연, 대한임상노인의학회 추계학술대회, 260-272(2009)).

아젤라신 D는 해양 해면동물인 Agelas 종에서 분리되었으며, Na, K-ATPase(Na/K-펌프)의 효소작용의 억제 효과(Hideshi Nakamura, Tetrahedron Letters 25(28), 2989-2992(1984)) 뿐만 아니라, 다약제내성 세포를 포함하는 암세포에 대한 세포독성 및 항균 효과가 있는 것으로 알려져 있으나(Anders Vik,et al., J. Nat . Prod . 69, 381-386(2006)), 골다공증과 관련된 문헌은 발견되지 않았다.

한편, 종래 골다공증 예방 또는 치료용 조성물로는 대한민국 등록특허 제10-971039호에서는 복분자 추출물 및 이로부터 분리된 에틸에스테르 프로토카테츄에이트 화합물을 유효성분으로 함유하는 골다공증의 예방, 치료, 또는 개선용 조성물로 사용될 수 있음을 개시하고 있고, US 7,829,572 B2에서는 피리도[4,3-d]피리미딘-4-(3H)-온 유도체 및 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것으로, 부갑성선 기능저하, 골다공증, 골감소증 등을 포함하는 비정상적인 뼈 또는 미네랄 항상성에 의한 질병 또는 장애 치료에 사용될 수 있음을 개시하고 있다. 또한, US 8,008,329 B2에서는 벤즈아미딘 유도체 및 이의 염을 유효성분으로 함유하는 골다공증 치료 방법을 개시하고 있으나, 아직까지 만족할만한 치료제가 없어 여전히 다양한 연구가 요구되고 있는 실정이다.

이에, 본 발명자들은 골다공증 치료제를 개발을 위한 물질을 연구하던 중, 아젤라신 D 화합물이 파골세포 골수세포의 뼈조직을 파괴 또는 흡수하는 파골세포로의 분화를 억제하는 효과가 있으므로 골다공증의 예방 또는 치료를 위한 약학적 조성물로서 유용하게 사용될 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

대한민국 등록특허 제10-971039호 US 7,829,572 B2 US 8,008,329 B2

유병연, 대한임상노인의학회 추계학술대회, 260-272(2009) 생명공학정책연구센터, BT기술동향 보고서, 제158권(2011) 신정민 외, KOREAN J. FOOD SCI. TECHNOL. 40(6), 674-679(2008) Hideshi Nakamura, Tetrahedron Letters 25(28), 2989-2992(1984) Anders Vik,et al., J. Nat. Prod. 69, 381-386(2006)

본 발명의 목적은 상기 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다:

[화학식 1]

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또한, 본 발명은 하기 상기 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공한다.

본 발명에 의한 아젤라신 D는 골수세포가 파골세포로 분화하는 동안 세포 독성을 유발하지 않고, 파골세포 분화 억제활성 효과가 우수하며, 파골세포에서 많이 발현되는 TRAP 유전자, 카뎁신 K(cathepsin K) 유전자 및 MMP-9 유전자의 발현을 농도의존적을 억제하는 것으로 나타나 골수세포의 뼈조직을 파괴 또는 흡수하는 파골세포로의 분화를 억제하는 효과가 우수하므로, 골다공증, 골화석증, 골경화증, 관절염, 파제트병(Paget's disease), 대사성 골질환, 다발성 마이엘로마, 치주질환 또는 골형성 부전증 등과 같은 골질환의 예방 또는 치료를 위한 약학적 조성물 또는 개선을 위한 건강식품 조성물로서 유용하게 이용될 수 있다.

도 1은 본 발명에 따른 아젤라신 D 화합물의 TRAP 억제활성 결과를 나타내는 도면이다.
도 2는 본 발명에 따른 아젤라신 D 화합물의 TRAP 억제활성 결과를 나타내는 도면이다.
도 3은 본 발명에 따른 아젤라신 D 화합물의 세포독성 결과를 나타내는 도면이다.
도 4는 본 발명에 따른 아젤라신 D 화합물의 TRAP 유전자발현 억제활성 결과를 나타내는 도면이다.
도 5는 본 발명에 따른 아젤라신 D 화합물의 카뎁신 K 유전자발현 억제활성 결과를 나타내는 도면이다.
도 6은 본 발명에 따른 아젤라신 D 화합물의 MMP-9 유전자발현 억제활성 결과를 나타내는 도면이다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

상기 아젤라신 D 화합물은 직접 제조하여 사용하거나 구입하여 사용할 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.

본 발명의 조성물에 있어서, 상기 골질환은 골다공증, 골화석증, 골경화증, 관절염, 파제트병(Paget's disease), 대사성 골질환, 다발성 마이엘로마, 치주질환 또는 골형성 부전증 등이 있고, 바람직하게는 골다공증 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물은 파골세포의 생성 억제 작용을 통해 골질환을 예방 또는 치료할 수 있다.

본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물은 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용 가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산 또는 아인산과 같은 무기산류와 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류와 같은 무독성 유기산으로부터 얻는다. 이러한 약학적으로 무독한 염류로는 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, 하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트 또는 만델레이트를 포함한다.

본 발명에 따른 산 부가염은 통상의 방법, 예를 들면, 화학식 1의 화합물을 과량의 산 수용액 중에 용해시키고, 이 염을 수혼화성 유기 용매, 예를 들면 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴을 사용하여 침전시켜서 제조할 수 있다.

또한, 동량의 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물 및 산 수용액 또는 알코올을 가열하고, 이어서 이 혼합물을 증발시켜서 건조하거나 또는 석출된 염을 흡입 여과시켜 제조할 수도 있다.

또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용 가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은, 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하고, 여액을 증발, 건조시켜 얻을 수 있다. 이때, 금속염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하다. 또한, 이에 대응하는 은 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 음염(예, 질산은)과 반응시켜 얻을 수 있다.

뼈조직에서 유일하게 뼈의 파괴를 담당하는 파골세포는 단핵구/대식세포 계통의 세포이며, 여러 조직에 존재하는 단핵구 대식 전구세포로부터 시험관내에서 파골세포의 생성이 가능하다. 파골세포는 특징적으로 TRAP와 풍부한 칼시토닌 수용체를 가지며 실제적으로 뼈의 흡수작용을 할 때는 산 생성이 활발하고, 액틴 고리(actin ring)를 형성하여 골기질을 흡수한다. 파골세포의 생성을 위해서는 NF-κB 리간드의 수용체 활성제(RANKL)와 대식세포증식자극인자(macrophage colony stimulating factor(M-CSF))와 같은 두 종류의 싸이토카인(cytokine)이 필수적인데, 이러한 싸이토카인이 파골세포의 분화를 유도한다(신정민 외, KOREAN J. FOOD SCI . TECHNOL. Vol. 40, No. 6, 674-679(2008)). 또한, 파골세포 표지 인자로 사용되고 있는 TRAP, 파골세포에 선택적으로 분포하여 골흡수를 일으키는 단백질인 카뎁신 K 및 파골세포의 이동에 중요한 역할을 하는 MMP-9와 같은 활성화된 파골세포에만 특이하게 발현된다.

이에, 본 발명에 따른 아젤라신 D의 파골세포 분화 억제 활성 및 세포 생존률을 측정한 결과, 본 발명에 의한 아젤라신 D는 골수세포가 파골세포로 분화하는 동안 세포 독성을 유발하지 않고, 파골세포 분화 억제활성 효과가 우수하며, 파골세포에서 많이 발현되는 TRAP 유전자, 카뎁신 K(cathepsin K) 유전자 및 MMP-9 유전자의 발현을 농도의존적을 억제하는 것으로 나타나 골수세포의 뼈조직을 파괴 또는 흡수하는 파골세포로의 분화를 억제하는 효과가 우수하므로(실시예 1 내지 3 및 도 1 내지 6 참조), 골다공증, 골화석증, 골경화증, 관절염, 파제트병(Paget's disease), 대사성 골질환, 다발성 마이엘로마, 치주질환 또는 골형성 부전증 등과 같은 골질환의 예방 또는 치료를 위한 약학적 조성물로서 유용하게 이용될 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물에 있어서, 상기 골질환은 골다공증, 골화석증, 골경화증, 관절염, 파제트병(Paget's disease), 대사성 골질환, 다발성 마이엘로마, 치주질환 또는 골형성 부전증 등이 있고, 바람직하게는 골다공증이다.

본 발명의 조성물에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물은 파골세포의 생성 억제 작용을 통해 골질환을 예방 또는 개선을 위한 건강식품 조성물에 유용하게 사용될 수 있다.

본 발명에 의한 아젤라신 D는 골수세포가 파골세포로 분화하는 동안 세포 독성을 유발하지 않고, 파골세포 분화 억제활성 효과가 우수하며, 파골세포에서 많이 발현되는 TRAP 유전자, 카뎁신 K(cathepsin K) 유전자 및 MMP-9 유전자의 발현을 농도의존적을 억제하는 것으로 나타나 골수세포의 뼈조직을 파괴 또는 흡수하는 파골세포로의 분화를 억제하는 효과가 우수하므로(실시예 1 내지 3 및 도 1 내지 6 참조), 골다공증, 골화석증, 골경화증, 관절염, 파제트병(Paget's disease), 대사성 골질환, 다발성 마이엘로마, 치주질환 또는 골형성 부전증 등과 같은 골질환의 예방 또는 개선을 위한 건강식품 조성물로서 유용하게 이용될 수 있다.

본 명세서에서 사용되는 용어 "예방"은 조성물의 투여로 발병을 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미한다. 본 발명에 있어서, "개선" 또는 "치료"란 조성물의 투여로 상기 질환의 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에 있어서 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 환자에게 소정의 물질을 제공하는 것을 의미하며, 본 발명의 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 일반적인 모든 경로를 통하여 경구 또는 비경구 투여될 수 있다. 또한, 조성물은 활성물질이 표적 세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수 있다.

상기 조성물을 제제화할 경우, 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조된다.

경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환자, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 본 발명로 표시되는 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.

비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다.

비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

구체적으로, 본 발명에 따른 화합물의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 1 ㎏당 0.1 내지 100 mg, 바람직하게는 0.5 내지 10 mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

또한, 본 발명의 아젤라신 D 화합물이 첨가되는 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 드링크제, 육류, 소시지, 빵, 비스킷, 떡, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 알코올 음료 및 비타민 복합제, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.

본 발명의 아젤라신 D 화합물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강기능식품 중의 상기 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 건강식품 조성물이 음료 조성물인 경우, 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 10 g이다.

또한, 본 발명에 따른 건강식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.

이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 제한되지 않으나, 본 발명의 아젤라신 D 화합물 100 중량부 당 0.1 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세하게 설명한다.

단, 하기 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 범위가 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

시료준비

(1) 본 연구에 사용한 시료 아젤라신-D(Cat. No. ALX-350-315)는 해양스폰지 Agelas sp.의 추출물로서 알렉시스(Alexis)사에서 구입하였다.

(2) 파골세포 분화 촉진을 위한 M-CSF와 RANKL은 페프로테크(Peprotech(London, UK))사에서 구입하였다.

(3) MTT 활성측정 키트(Cat. No. 11 465 0151 001)는 로쉐(Roche(Indianapolis, IN, USA))사에서 구입하였다.

(4) 포스포(Phospho(p))-p38, p38, p-JNK, JNK, p-ERK, ERK, IκBα, p-IκBα, p-p65, GAPDH 항체는 셀 시그널링 테크놀리지(Cell signaling Technology(beverly, MA, USA))사 제품을 사용하였다.

(5) TRAP 염색 키트(TRAP Staing kit(Cat. No. KT-008))는 카미야 바이오메디칼(Kamiya biomedical(Seattle, WA,USA))사 제품을 사용하였다.

(6) 피트-포메이션 키트(Pit-formation kit(Cat. No. BRA-24P))는 코스모바이오(Cosmobio(Tokyo, Japan))사 제품을 사용하였다.

(7) 배지는 집코(Gibco)사 α-MEM(Cat. No. 12000-022)배지에 10% FBS를 넣어 사용하였다.

< 실시예 1> 아젤라신 D의 파골세포 분화 억제활성 평가( TRAP activity )

뼈조직에서 유일하게 뼈의 파괴를 담당하는 파골세포는 단핵구/대식세포 계통의 세포이며, 여러 조직에 존재하는 단핵구 대식 전구세포로부터 시험관내에서 파골세포의 생성이 가능하다. 파골세포는 특징적으로 TRAP와 풍부한 칼시토닌 수용체를 가지며 실제적으로 뼈의 흡수작용을 할 때는 산 생성이 활발하고, 액틴 고리(actin ring)를 형성하여 골기질을 흡수한다. 파골세포의 생성을 위해서는 NF-κB 리간드의 수용체 활성제(RANKL)와 대식세포증식자극인자(macrophage colony stimulating factor(M-CSF))와 같은 두 종류의 싸이토카인(cytokine)이 필수적인데, 이러한 싸이토카인이 파골세포의 분화를 유도한다(신정민 외, KOREAN J. FOOD SCI . TECHNOL. Vol. 40, No. 6, 674-679(2008)).

이에, 본 발명에 따른 아젤라신 D의 미부화된 파골세포 전구세포로부터 파골세포의 생성 및 활성에 미치는 영향을 알아보기 위해 하기 실험을 수행하였다.

5~6주령 된 C57BL/6 마우스에서 경골과 대퇴골을 분리하여 얻은 골수세포는 10% 소태아혈청(Fetal bovine serum(FBS)), M-CSF(50 ng/ml)를 첨가한 α-최소필수배지(α-minimum essential medium(α-MEM))배지에서 3일간 배양 후 부유 세포는 제거하고 부착된 세포를 대식세포(bone marrow macrophages, BMMs)로 사용하였다. 대식세포는 M-CSF(50 ng/ml)와 RANKL(100 ng/ml)을 첨가한 배지에 4일간 배양 후 TRAP 용액을 이용하여 염색하여 TRAP 양성 다핵 형 세포를 파골세포로 간주하였다.

상기 4일간 배양한 세포 배양 배지를 제거 후 PBS로 세척하였다. 그 다음 10% 포르말린으로 5분간 고정 후, 증류수로 세 차례 세척하였다. 합성 기질( Chromogenic substrate)를 50 ㎕씩 넣고 37 ℃에서 30분간 염색한 후, 관찰하였다. TRAP 활성은 배양 상층액에 합성 기질/타르트산-contating 완충용액(Chromogenic substrate/Tartrate-contating buffer)을 170 ㎕씩 첨가하고, 37 ℃에서 3시간 동안 방치한 후, ELISA 리더기(Molecular Devices, CA, USA)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 확인하였다.

아젤라신 D는 DMSO에 녹여서 사용하였으며, 용매 대조군에는 DMSO를 처리하였다.

그 결과를 하기 표 1, 및 도 1 및 2에 나타내었다.

구분		TRAP 활성(O.D.)
아젤라신 D	0.3 μM	0.6595±0.0622
	1 μM	0.6300±0.0178
	3 μM	0.3737±0.0169
	10 μM	0.1691±0.0070
무처리군(UN)		0.1274±0.0050
용매 대조군(VH)		0.7080±0.0617
O.D.:optical density

표 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 아젤라신 D는 TRAP 활성이 농도의존적으로 골수세포의 파골세포로의 분화를 억제하였고, 특히, 10 μM에서는 0.1691±0.0070(O.D)로 TRAP의 발현을 억제하는 효과가 우수한 것으로 확인되었다(도 1 및 도 2 참조).

따라서, 본 발명에 따른 아젤라신 D는 골수세포의 뼈조직을 파괴 또는 흡수하는 파골세포로의 분화를 억제하는 효과가 우수하므로 골다공증, 골화석증, 골경화증, 관절염, 파제트병(Paget's disease), 대사성 골질환, 다발성 마이엘로마, 치주질환 또는 골형성 부전증 등과 같은 골질환의 예방 또는 치료를 위한 약학적 조성물 또는 개선을 위한 건강식품 조성물로서 유용하게 이용될 수 있다.

< 실시예 2> 아젤라신 D를 처리한 세포 생존률 측정

본 발명에 따른 아젤라신 D의 세포 독성을 측정하기 위해 하기 실험을 수행하였다.

대식세포는 1×10⁴/웰 농도로 96-웰 플레이트에 접종하고, 본 발명에 따른 아젤라신 D, M-CSF(50 ng/ml) 및 RANKL(100 ng/ml)을 첨가하여 4 일간 배양하였다. 4 일 후, XTT 용액 50 μL를 각각의 웰에 첨가하고 2 시간 배양 후 ELISA 리더기(Molecular Devices, CA, USA)를 이용하여 490 nm에서 흡광도를 확인하였다. 그 결과를 하기 표 2 및 도 3에 나타내었다.

구분		세포독성(O.D.)
아젤라신 D	0.3 μM	0.7725±0.0081
	1 μM	0.7602±0.0239
	3 μM	0.7540±0.0072
	10 μM	0.6988±0.0336
용매 대조군(VH)		0.7248±0.0092

표 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 아젤라신 D는 10 μM까지 세포독성을 유발하지 않는 것으로 확인되었다(도 3 참조).

따라서, 본 발명에 따른 아젤라신 D는 골수세포의 뼈조직을 파괴 또는 흡수하는 파골세포로의 분화를 억제하는 효과가 우수할 뿐만 아니라, 세포독성을 나타내지 않으므로 골다공증, 골화석증, 골경화증, 관절염, 파제트병(Paget's disease), 대사성 골질환, 다발성 마이엘로마, 치주질환 또는 골형성 부전증 등과 같은 골질환의 예방 또는 치료를 위한 약학적 조성물 또는 개선을 위한 건강식품 조성물로서 유용하게 이용될 수 있다.

< 실시예 3> 아젤라신 D의 파골세포 특이 단백질의 유전자 발현 억제활성 평가

본 발명에 따른 아젤라신 D 화합물의 파골세포 표지 인자로 사용되고 있는 TRAP, 파골세포에 선택적으로 분포하여 골흡수를 일으키는 단백질인 카뎁신 K 및 파골세포의 이동에 중요한 역할을 하는 MMP-9와 같은 활성화된 파골세포에만 특이하게 발현되는 단백질에 대한 유전자의 발현 억제활성을 알아보기 위하여 하기 실험을 수행하였다.

2×10⁶/웰 농도로 60 파이 접시에 3일 동안 배양한 세포를 RNeasy 미니 키트(QIAGEN, Cat. No. 74134)를 이용하여 세포 내 RNA를 분리하고, cDNA를 합성하기 위해 분리한 RNA 1 μg, 올리고 dT 프라이머 및 RT-프리믹스(Bioneer, K-2041)를 이용하였다. 합성된 cDNA는 TRAP, 카뎁신 K(Cathepsin K), MMP-9 빛 GAPDH 유전자 증폭을 위해 사용하였다. 사용된 프라이머는 서열목록에 나타내었다.

리얼-타임 PCR(Real-time PCR) 기기는 ABI 프리즘 7500 시퀀스 디텍션(prism 7500 sequence detection) 시스템을 사용하였다. PCR 조건은 95 ℃에서 30초, 54 ℃에서 30초, 72 ℃에서 30초씩 PCR 조건으로 40회 반복하였으며, 샘플은 SYBR Green PCR Master Mix(Applied Biosystems, Cheshire, UK)의 제조 프로토콜에 수행하였다.

그 결과를 하기 표 3 내지 6 및 도 4 내지 6에 나타내었다.

TRAP 유전자발현 억제활성 평가

구분		TRAP 유전자 발현(상대량)
아젤라신 D	1 μM	852.37±32.29
	3 μM	656.00±22.15
	10 μM	111.23±8.84
무처리군(UN)		1.00±0.24
용매 대조군(VH)		826.45±25.24

표 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 아젤라신 D는 TRAP의 유전자 발현을 농도의존적으로 억제하였고, 특히, 10 μM에서는 111.23±8.84(상대량)로 TRAP 유전자의 발현을 우수하게 억제하는 것으로 확인되었다(도 4 참조).

따라서, 본 발명에 따른 아젤라신 D는 골수세포의 뼈조직을 파괴 또는 흡수하는 파골세포로의 분화를 억제하는 효과가 우수하므로 골다공증, 골화석증, 골경화증, 관절염, 파제트병(Paget's disease), 대사성 골질환, 다발성 마이엘로마, 치주질환 또는 골형성 부전증 등과 같은 골질환의 예방 또는 치료를 위한 약학적 조성물 또는 개선을 위한 건강식품 조성물로서 유용하게 이용될 수 있다.

카뎁신 K 유전자발현 억제활성 평가

구분		카뎁신 K 유전자 발현(상대량)
아젤라신 D	1 μM	96.56±12.33
	3 μM	70.43±17.61
	10 μM	11.23±4.15
무처리군(UN)		1.00±0.05
용매 대조군(VH)		109.13±3.60

표 4에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 아젤라신 D는 카뎁신 K의 유전자 발현을 농도의존적으로 억제하였고 특히, 10 μM에서는 11.23±4.15(상대량)로 카뎁신 K의 유전자의 발현을 우수하게 억제하는 것으로 확인되었다(도 5 참조).

따라서, 본 발명에 따른 아젤라신 D는 골수세포의 뼈조직을 파괴 또는 흡수하는 파골세포로의 분화를 억제하는 효과가 우수하므로 골다공증, 골화석증, 골경화증, 관절염, 파제트병(Paget's disease), 대사성 골질환, 다발성 마이엘로마, 치주질환 또는 골형성 부전증 등과 같은 골질환의 예방 또는 치료를 위한 약학적 조성물 또는 개선을 위한 건강식품 조성물로서 유용하게 이용될 수 있다.

MMP -9 유전자발현 억제활성 평가

구분		카뎁신 K 유전자 발현(상대량)
아젤라신 D	1 μM	172.14±15.01
	3 μM	130.84±8.62
	10 μM	28.75±4.89
무처리군(UN)		1.00±0.35
용매 대조군(VH)		289.25±25..68

표 5에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 아젤라신 D는 MMP-9의 유전자 발현을 농도의존적으로 억제하였고, 특히, 10 μM에서는 28.75±4.89(상대량)로 MMP-9의 유전자의 발현을 우수하게 억제하는 것으로 확인되었다(도 6 참조).

따라서, 본 발명에 따른 아젤라신 D는 골수세포의 뼈조직을 파괴 또는 흡수하는 파골세포로의 분화를 억제하는 효과가 우수하므로 골다공증, 골화석증, 골경화증, 관절염, 파제트병(Paget's disease), 대사성 골질환, 다발성 마이엘로마, 치주질환 또는 골형성 부전증 등과 같은 골질환의 예방 또는 치료를 위한 약학적 조성물 또는 개선을 위한 건강식품 조성물로서 유용하게 이용될 수 있다.

한편, 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물은 목적에 따라 여러 형태로 제제화가 가능하다. 하기는 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 활성성분으로 함유시킨 몇몇 제제화 방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.

<제제예 1> 약학적 제제의 제조

1-1. 산제의 제조

아젤라신 D 화합물 500 ㎎

유당 100 ㎎

탈크 10 ㎎

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.

1-2. 정제의 제조

아젤라신 D 화합물 500 ㎎

옥수수전분 100 ㎎

유당 100 ㎎

스테아린산 마그네슘 2 ㎎

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.

1-3. 캅셀제의 제조

아젤라신 D 화합물 500 ㎎

옥수수전분 100 ㎎

유당 100 ㎎

스테아린산 마그네슘 2 ㎎

통상의 캡슐제제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.

1-4. 주사제의 제조

아젤라신 D 화합물 500 ㎎

주사용 멸균 증류수 적량

pH 조절제 적량

통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2 ㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.

1-5. 액제의 제조

아젤라신 D 화합물 100 ㎎

이성화당 10 g

만니톨 5 g

정제수 적량

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬 향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100 ㎖로 조절한 후 갈색 병에 충진하여 멸균시켜 액체를 제조한다.

<제제예 2> 건강식품의 제조

아젤라신 D 화합물 1000 ㎎

비타민 혼합물 적량

비타민 A 아세테이트 70 ㎍

비타민 E 1.0 ㎎

비타민 0.13 ㎎

비타민 B₂ 0.15 ㎎

비타민 B₆ 0.5 ㎎

비타민 B₁₂ 0.2 ㎍

비타민 C 10 ㎎

비오틴 10 ㎍

니코틴산아미드 1.7 ㎎

엽산 50 ㎍

판토텐산 칼슘 0.5 ㎎

무기질 혼합물 적량

황산제1철 1.75 ㎎

산화아연 0.82 ㎎

탄산마그네슘 25.3 ㎎

제1인산칼륨 15 ㎎

제2인산칼슘 55 ㎎

구연산칼륨 90 ㎎

탄산칼슘 100 ㎎

염화마그네슘 24.8 ㎎

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.

<제제예 3> 건강 음료의 제조

아젤라신 D 화합물 1000 ㎎

구연산 1000 ㎎

올리고당 100 g

매실농축액 2 g

타우린 1 g

정제수를 가하여 전체 900 ㎖

통상의 건강 음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 건강 음료 조성물 제조에 사용하였다.

상기 조성비는 비교적 기호 음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호 도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

<제제예 4> 기타 건강식품의 제조

4-1. 음료의 제조

꿀 522 ㎎

치옥토산아미드 5 ㎎

니코틴산아미드 10 ㎎

염산리보플라빈나트륨 3 ㎎

염산피리독신 2 ㎎

이노시톨 30 ㎎

오르트산 50 ㎎

아젤라신 D 화합물 0.48-1.28 ㎎

물 200 ㎖

상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 음료를 제조하였다.

4-2. 츄잉껌의 제조

껌베이스 20%

설탕 76.36-76.76%

아젤라신 D 화합물 0.24-0.64%

후르츠향 1%

물 2%

상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 츄잉껌을 제조하였다.

4-3. 캔디의 제조

설탕 50-60%

물엿 39.26-49.66%

아젤라신 D 화합물 0.24-0.64%

오렌지향 0.1%

상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 캔디를 제조하였다.

4-4. 밀가루 식품의 제조

아젤라신 D 화합물 0.5-5 중량부를 밀가루 100 중량부에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.

4-5. 유제품( dairy products )의 제조

아젤라신 D 화합물 5-10 중량부를 우유 100 중량부에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.

4-6. 선식의 제조

현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화 시켜서 건조한 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메시의 분말로 제조하였다. 검은콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조한 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메시의 분말로 제조하였다. 상기에서 제조한 곡물류 및 종실류와 본 발명의 아젤라신 D 화합물을 다음과 같은 비율로 배합하여 제조하였다.

현미 30%

율무 15%

보리 20%

들깨 7%

검정콩 7%

검은깨 7%

아젤라신 D 화합물 3%

영지 0.5%

지황 0.5%

<110> Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology <120> Pharmaceutical composition for Prevention or Treatment of bone diseases comprising agelasin D <130> 11p-09-18 <160> 6 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> TRAP primer <400> 1 ctgctgggcc tacaaatcat 20 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> TRAP primer <400> 2 ggtagtaagg gctggggaag 20 <210> 3 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Cathepsin K primer <400> 3 aggcggctat atgaccactg 20 <210> 4 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Cathepsin K primer <400> 4 ccgagccaag agagcatatc 20 <210> 5 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> MMP-9 primer <400> 5 cgtcgtgatc cccacttact 20 <210> 6 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> MMP-9 primer <400> 6 agagtactgc ttgcccagga 20

Claims (8)

1. 하기 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
   [화학식 1]
   

   

   .
   
2. 제1항에 있어서, 상기 골질환은 골다공증, 골화석증, 골경화증, 관절염, 파제트병(Paget's disease), 대사성 골질환, 다발성 마이엘로마, 치주질환 또는 골형성 부전증인 것을 특징으로 하는 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
   
3. 제1항에 있어서, 상기 골질환은 골다공증인 것을 특징으로 하는 골질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
   
4. 제1항에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물은 파골세포의 생성 억제 작용을 통해 골질환을 예방 또는 치료하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
   
5. 제1항의 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물을 유효성분으로 함유하는 골질환 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
   
6. 제5항에 있어서, 상기 골질환은 골다공증, 골화석증, 골경화증, 관절염, 파제트병(Paget's disease), 대사성 골질환, 다발성 마이엘로마, 치주질환 또는 골형성 부전증인 것을 특징으로 하는 골질환 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
   
7. 제5항에 있어서, 상기 골질환은 골다공증인 것을 특징으로 하는 골질환 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
   
8. 제5항에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 아젤라신 D 화합물은 파골세포의 생성 억제 작용을 통해 골질환을 예방 또는 개선하는 것을 특징으로 하는 건강식품 조성물.
   

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