KR20120138746A - 신규한 ｓ-니트로소글루타치온 리덕타아제 억제제 - Google Patents

신규한 ｓ-니트로소글루타치온 리덕타아제 억제제 Download PDF

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Abstract

본 발명은 S-니트로소글루타치온 리덕타아제(S-nitrosoglutathione reductase; GSNOR)의 억제제, 이러한 GSNOR을 포함하는 약제학적 조성물 및 그것을 제조하고 사용하는 방법에 관한 것이다.

Description

신규한 Ｓ-니트로소글루타치온 리덕타아제 억제제{NOVEL Ｓ-NITROSOGLUTATHIONE REDUCTASE INHIBITORS}
본 발명은 신규한 화합물, 이러한 화합물을 포함하는 약제학적 조성물, 그것을 제조하고 사용하는 방법에 관한 것이다. 이 화합물은 S-니트로소글루타치온 리덕타아제(S-nitrosoglutathione reductase; GSNOR)의 억제제로서 유용하다.
화학 화합물 산화질소(nitric oxide)는 화학 일반식 NO를 가지는 가스이다. NO는 생물계(biological system)에 알려진 많지 않은 기체 신호전달 분자(signaling molecule) 중 하나이며, 다양한 생물학적 사건을 조절하는데 중요한 역할을 한다. 예를 들어, 내피세포(endothelium)는 소동맥(arteriole)의 벽에서 주위의 평활근(smooth muscle)을 이완시키기 위한 신호로서 NO를 사용하며, 그 결과 저산소 조직(hypoxic tissue)에 대하여 혈관이 확장되며 혈류가 증가한다. NO는 또한 평활근의 증식, 혈소판의 기능 및 신경전달(neurotransmission)을 조절하는데 관여하며, 숙주의 방어기전에서 중요한 역할을 한다. 비록 NO가 매우 반응성이 높고 불과 몇 초의 수명을 가지지만, 그것은 막을 자유롭게 가로질러 분산되며 많은 분자 표적에 결합할 수 있다. 이는 NO를 주위 세포와 세포 내 사이에서의 생물학적 사건을 조절할 수 있는 이상적인 신호전달 분자로 만들어주는 것으로 여겨진다.
NO는 그것을 반응성이며 불안정하게 만드는 자유 라디칼 가스(free radical gas)이므로, 생체 내(in vivo)에서 오래가지 못하는 NO는 생리학적 조건 하에서 3-5초의 반감기(half life)를 가진다. 산소의 존재하에서, NO는 S-니트로소티올(S-nitrosothiols; SNO's)이라 불리는 생물학적으로 중요한 종류의 안정한 NO 부가 생성물(adducts)를 생성하기 위하여 티올과 결합할 수 있다. 이 NO의 안정한 풀(stable pool)은 생물활성(bioactive) NO의 공급원으로서 작용하도록 상정되었으며, 이는 보통 말하는 건강과 질병, 세포 항상성(cellular homeostasis)에 있어서 NO의 주어진 중심적 역할에 중요한 역할을 하는 것으로 보인다(Stamler et al., Proc. Natl . Acad . Sci . USA, 89:7674-7677(1992)). 단백질 SNO's는 심혈관계(cardiovascular system), 호흡기관계(respiratory system), 대사계(metabolic system), 위장관계(gastrointestinal system), 면역계(immune system) 및 중추 신경계(central nervous system)의 기능에 있어서 폭넓은 역할을 한다(Foster et al., Trends in Molecular Medicine, 9(4):160-168, (2003)). 생물계에서 가장 잘 연구된 SNO's 중 하나는 효과적인 트랜스-니트로화제(trans-nitrosating agent)이며, 세포 내에서 다른 S-니트로화된 단백질(Liu et al., Nature, 410:490-494 (2001))과 함께 평형을 유지하는 것으로 보이므로 NO 신호전달에서 떠오르는 주요 조절자인 S-니트로소글루타치온(GSNO)이다(Gaston et al., Proc . Natl . Acad . Sci . USA 90:10957-10961 (1993)). NO-SNO 연속체(continuum)에서 이 중심이 되는 위치를 고려해 볼 때, GSNO는 NO 조절이 약제학적으로 보장될 때 고려할 치료학적으로 유망한 표적을 제공한다.
NO 항상성 및 세포 SNO 레벨의 주요 조절자로서의 GSNO의 이러한 이해를 감안하여, 산화질소 합성(nitric oxide synthetase; NOS) 효소에 의한 NO 라디칼의 생성으로부터 하향흐름(downstream)이 발생하는 GSNO 및 SNO 단백질의 내인적 생성(endogenous production)을 조사하는데 연구의 초점을 맞췄다. 더욱 최근에는, GSNO의 농도를 조절 가능하고 그 결과 NO 및 SNO's의 농도를 조절하는데 중요한 역할을 하는 GSNO의 효소적 이화작용(enzymatic catabolism)의 이해가 높아졌다.
GSNO 이화작용의 이러한 이해를 중심으로, 연구자들은 최근 고보존된 S-니트로소글루타치온 리덕타아제(GSNOR)를 확인하였다(Jensen et al., Biochem J., 331:659-668(1998); Liu et al., (2001)). GSNOR은 또한 글루타치온-의존성 포름알데히드 디하이드로게나아제(glutathione-dependent formaldehyde dehydrogenase; GSH-FDH), 알코올 디하이드로게나아제 3(alcohol dehydrogenase 3; ADH-3)(Uotila and Koivusalo, Coenzymes and Cofactors., D. Dolphin, ed. pp. 517-551 (New York, John Wiley & Sons, 1989)) 및 알코올 디하이드로게나아제 5(alcohol dehydrogenase 5; ADH-5)로도 알려져 있다. 중요하게는, GSNOR은 다른 기질보다 GSNO를 향한 더 큰 활성을 보이며(Jensen et al., 1998; Liu et al., 2001), 세균, 식물 및 동물에서 중요한 단백질 및 펩티드 탈니트로화 활성을 매개하는 것으로 보인다. GSNOR은 진핵생물에 있어서 주요한 GSNO-대사작용을 하는 효소인 것으로 보인다(Liu et al., 2001). 따라서, GSNO는 GSNOR 활성이 낮거나 없을 경우 생물학적 구획에 축적될 수 있다(예를 들어, 기도 내층액(airway lining fluid))(Gaston et al., 1993).
GSNOR이 결핍된 효모는 효소의 기질이 아닌 S-니트로화된 단백질을 축적하며, 이는 GSNO가 SNO-단백질과 평형을 이루어 존재한다는 것을 강하게 암시한다(Liu et al., 2001). 대기 수준(ambient level)의 GSNO에 대한 정확한 효소적 조절은 GSNO/GSNOR가 질산화적 스트레스(nitrosative stress)에 대한 보호를 포함하는 숙주의 생리학적 기능 및 병리학적 기능 전체에 걸쳐 중요한 역할을 할 수 있는 가능성을 높여주며, 여기에서 NO는 생리학적 요구 이상으로 생성된다. 실제로, GSNO는 특히 낭포성 섬유증 막투과 조절자(cystic fibrosis transmembrane regulator)의 조절(Zaman et al., Biochem Biophys Res Commun, 284:65-70 (2001)), 혈관 상태(vascular tone), 혈전증(thrombosis) 및 혈소판 기능(platelet function)의 조절(de Belder et al., Cardiovasc Res.; 28(5):691-4 (1994))을 위한 호흡 경향(Lipton et al., Nature, 413:171-174(2001)); (Z. Kaposzta, et al., Circulation; 106(24): 3057-3062, (2002)) 뿐만 아니라 숙주 방어(de Jesus-Berrios et al., Curr . Biol ., 13:1963-1968 (2003))에 이르는 생리학적 과정에 연루되어 있다.
총괄하면, 데이터는 GSNO를 이화시키며 그 결과 생물계에서 이용가능한 SNO's 및 NO를 감소시키는 효소 S-니트로소글루타치온 리덕타아제(GSNOR)에 대한 초기 생리학적 리간드로서 GSNO를 암시한다(Liu et al., (2001); Liu et al., Cell, 116(4), 617-628 (2004); Que et al., Science, 308 (5728):1618-1621 (2005)). 그와 같이, 이 효소는 국소 및 전신의 생물활성 NO를 조절하는데 중심적인 역할을 한다. NO 생물학적 이용가능성에 있어서 작은 변화는 고혈압(hypertension), 아테롬성 동맥경화증(atherosclerosis), 혈전증(thrombosis), 천식(asthma), 위장관 질환(gastrointestinal disorders), 염증(inflammation) 및 암(cancer)을 포함하는 다양한 질병 상태의 발병과 연결되어 있기 때문에, GSNOR 활성을 조절하는 약제는 NO 불균형에 연관된 질병을 치료하기 위한 후보 치료제이다.
산화질소(NO), S-니트로소글루타치온(GSNO) 및 S-니트로소글루타치온 리덕타아제(GSNOR)는 정상 폐의 생리를 조절하며, 폐의 병리생리학적 상태(pathophysiology)에 기여한다. 정상 조건 하에서, NO 및 GSNO는 그것들의 항-염증(anti-inflammatory) 및 기관지확장 작용(bronchodilatory action)을 통하여 정상적인 폐 생리 및 기능을 유지한다. 천식, 만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease; COPD)과 같은 폐질환에서 이 매개자의 낮아진 농도는 GSNOR 효소 활성의 상향조절을 통하여 발생할 수 있다. 이 낮아진 농도의 NO 및 GSNO와 이로 인하여 낮아진 항염증 능력은 폐질환을 일으키는데 기여하는 주요 사건이며, 이는 GSNOR 억제를 통하여 바뀔 가능성이 있다.
크론병(Crohn's)과 궤양성 대장염(ulcerative colitis)을 포함하는 염증성 장질환(Inflammatory bowel diseases; IBD's)은 위장(gastrointestinal; GI)관의 만성 염증성 질환이며, NO, GSNO 및 GSNOR이 영향을 줄 수 있다. 정상 조건 하에서, NO 및 GSNO는 항염증 작용 및 장 상피세포 장벽(intestinal epithelial cell barrier)을 통하여 정상적인 장 생리를 유지하도록 작용한다. 염증성 장질환에서, GSNO 및 NO의 농도가 감소하는 것은 분명하여, 이는 GSNOR 활성의 상향조절을 통하여 일어나는 것 같다. 이 매개자들의 낮아진 농도는 내피세포의 밀착결합(epithelial tight junctions)을 유지하는데 관여하는 단백질의 조절이상(dysregulation)을 통한 상피세포 장벽의 파괴를 통하여 염증성 장질환의 병리생리를 유발하는 요인이 된다. 관강(lumen)으로부터 미생물의 유입이 뒤따르는 이 상피세포 장벽의 기능장애와 낮아진 NO 및 GSNO의 존재하에서 전체적으로 낮아진 항염증 능력은 GSNOR 표적화에 잠재적으로 영향을 받을 수 있는 염증성 장질환의 진행에 있어서 주요 사건이다.
현재, 증가된 NO의 합성 및/또는 증가된 NO의 생물활성에 관련된 질병의 진단, 예방, 개선 및 치료에 대한 당업계에서의 많은 요구가 있다. 게다가, 다른 NO-관련 질병을 예방하고, 개선하거나 퇴치하기 위한 신규한 화합물, 조성물 및 방법에 대한 현저한 요구가 있다. 본 발명은 이러한 요구를 충족한다.
본 발명은 신규한 화합물(일반식 I)을 제공한다. 이 화합물은 S-니트로소글루타치온 리덕타아제(S-nitrosoglutathione reductase; "GSNOR") 억제제로서 유용하다. 본 발명은 원하는 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사산물 및 입체이성질체를 포함한다. 적어도 하나의 본 발명의 화합물 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물 또한 본 발명에 포함된다.
본 발명의 조성물은 임의의 적절한 약제학적으로 허용가능한 투약 형태로 제조될 수 있다.
본 발명은 GSNOR의 억제가 필요한 피험자에게서 GSNOR을 억제하기 위한 방법을 제공한다. 이와 같은 방법은 적어도 하나의 약제학적으로 허용가능함 담체와 함께 적어도 하나의 GSNOR 억제제 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염, 그것의 프로드러그, 대사 산물 또는 입체이성질체를 포함하는 치료학적 유효량의 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함한다. GSNOR 억제제는 본 발명에 따른 신규한 화합물일 수 있거나, 그것은 GSNOR의 억제제인 것으로 이전에 알려져 있지 않은 공지의 화합물일 수 있다.
본 발명은 또한 NO 공여체 치료에 의해 개선되는 질병의 치료가 필요한 피험자에게 NO 공여체(donor) 치료에 의해 개선되는 질병을 치료하는 방법을 제공한다. 이와 같은 방법은 적어도 하나의 약제학적으로 허용가능한 담체와 함께 적어도 하나의 GSNOR 억제제 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염, 그것의 프로드러그, 대사 산물 또는 입체이성질체를 포함하는 치료학적 유효량의 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함한다. GSNOR 억제제는 본 발명에 따른 신규한 화합물일 수 있거나, 그것은 GSNOR의 억제제인 것으로 이전에 알려져 있지 않은 공지의 화합물일 수 있다.
본 발명은 또한 세포증식성 질환(cell proliferative disorder)의 치료가 필요한 피험자에게서 세포증식성 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 이와 같은 방법은 적어도 하나의 약제학적으로 허용가능한 담체와 함께 적어도 하나의 GSNOR 억제제 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염, 그것의 프로드러그, 대사 산물 또는 입체이성질체를 포함하는 치료학적 유효량의 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함한다. GSNOR 억제제는 본 발명에 따른 신규한 화합물일 수 있거나, 그것은 GSNOR의 억제제인 것으로 이전에 알려져 있지 않은 공지의 화합물일 수 있다.
본 발명의 방법은 하나 또는 그 이상의 2차 활성제와 함께 투여하는 것을 포함한다. 이와 같은 투여는 순차적이거나 복합 조성물(combination composition)일 수 있다.
본원에 기재된 것들과 유사하거나 동등한 방법 및 물질들이 본 발명의 실행 또는 테스트에 사용될 수 있으나, 적절한 방법 및 물질들을 하기에 기재한다. 본원에 언급된 모든 공개적으로 입수가능한 간행물, 특허 출원, 특허들은 그 자체가 참조자료로 통합되어 있다. 분쟁 발생시, 정의를 포함하는 본 명세서는 조정될 것이다.
앞서 언급한 요약 및 하기의 상세한 설명 모두 예시 및 설명을 위한 것이며, 청구된 것과 같은 조성물 및 방법의 세부 사항을 제공한다. 다른 목적, 이점 및 신규한 특징들도 하기 상세한 설명으로부터 당업자들에게 분명할 것이다.
본 발명은 GSNOR의 강력한 억제제인 약제(pharmaceutical agent)를 제공하며, 세포증식성 질환(cell proliferative disorder)의 치료가 필요한 피험자에게서 세포증식성 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
A. 발명의 개요
최근, S-니트로소글루타치온 리덕타아제(S-nitrosoglutathione reductase; GSNOR)는 포름알데히드 글루타치온 부가 생성물(formaldehyde glutathione adduct)인 S-하이드록시메틸글루타치온(S-hydroxymethylglutathione)을 산화시키는 것으로 알려져 있다. GSNOR은 다양한 세균, 효모, 식물 및 동물들에서 확인되었으며, 잘 보존되어 있다. 대장균(E. coli), 사카로마이세스 세레비시아(S. cerevisiae) 및 생쥐의 대식세포(macrophages)로부터 유래된 단백질은 60%가 넘는 아미노산 서열 상동성을 공유한다. 대장균, 생쥐의 대식세포, 생쥐의 내피세포, 생쥐의 평활근 세포, 효모 및 인간의 HeLa 세포, 상피세포 및 단핵세포에서 GSNOR 활성(즉, NADH가 필수 보조인자로서 존재할 경우 GSNO의 분해)이 검출되었다. 인간 GSNOR 뉴클레오티드 및 아미노산 서열 정보는 미국 국립생물정보센터(National Center for Biotechnology Information; NCBI) 데이터베이스에서 등록번호(Accession Nos.) M29872, NM_000671로부터 얻을 수 있다. 생쥐의 GSNOR 뉴클레오티드 및 아미노산 서열 정보는 NCBI 데이터베이스에서 등록번호 NM_007410으로부터 얻을 수 있다. 뉴클레오티드 서열에서, 개시 부위(start site) 및 종료 부위(stop site)에 밑줄을 그었다. CDS는 코딩 서열(coding sequence)를 나타낸다. SNP는 단일 뉴클레오티드 단일염기 다형성(single nucleotide polymorphism)을 나타낸다. 다른 종의 것들을 포함하는 다른 관련된 GSNOR 뉴클레오티드 및 아미노산 서열은 미국 특허출원번호 제2005/0114697호에서 알 수 있다.
본 발명과 일치하게, GSNOR은 세포 내 레벨의 저질량 NO 공여체 화합물을 조절하고 단백질 니트로실화가 독성 레벨에 이르는 것을 방지함으로써, NO 생물활성을 조절하기 위하여 S-니트로소글루타치온(GSNO) 및 단백질 S-니트로소티올(SNOs)을 대사하도록 생체 내(in vivo) 및 시험관 내(in vitro)에서 작용한다고 알려져 왔다.
이에 기초하면, 이 효소의 억제는 NO 공여체 치료가 바람직한 질병에 있어서 생물활성을 증가시키고, 비정상적으로 증식하는 세포의 증식을 억제하며, 이것이 유익한 질병에서 NO의 생물활성을 증가시킨다.
본 발명은 GSNOR의 강력한 억제제인 약제(pharmaceutical agent)를 제공한다. 특히, 본 발명은 하기(일반식 I)에 나타낸 구조를 가지는 유사체(analogs) 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염, 입체이성질체, 프로드러그 또는 대사 산물을 제공한다:
Figure pct00001
여기에서,
X는 O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
Y는 O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
Z는 Z1, Z2, Z3 및 Z4로 이루어지는 군으로부터 선택되고; 여기에서
Z1은
Figure pct00002
, Z2는
Figure pct00003
, Z3는
Figure pct00004
및 Z4는
Figure pct00005
이며, 다만 적어도 하나의 X 또는 Y가 S일 경우 Z는 오직 Z4이고;
R1은 수소, (C1-C6)알킬, (C3-C7)시클로알킬, (C1-C6)할로알킬, 비치환된 아릴(C1-C4)알킬, 치환된 아릴(C1-C6)알킬, (C1-C6)헤테로알킬, 치환 또는 비치환된 아릴 및 치환 또는 비치환된 헤테로아릴로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
R2는 수소, 할로겐, 시아노 및 (C1-C6)알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
R3는 수소, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)알콕시, 시아노 및 N,N-디메틸아미노로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
R4는 테트라졸(tetrazole), 옥사디아졸론(oxadiazolone), 티아디아졸론(thiadiazolone), 메틸술포닐카르바모일(methylsulfonylcarbamoyl) 및 N-하이드록시카르바모일(N-hydroxycarbamoyl)로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
R5는 카르복시(carboxy), 테트라졸(tetrazole), 옥사디아졸론(oxadiazolone), 티아디아졸론(thiadiazolone), 메틸술포닐카르바모일(methylsulfonylcarbamoyl) 및 N-하이드록시카르바모일(N-hydroxycarbamoyl)로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
또한, 본원에 기재된 조성물 중 어느 하나에 있어서, 하나 또는 그 이상의 화합물 또는 화합물의 하위분류(subgenus)가 특별히 제외될 수 있다.
이 문맥에서 사용된 것으로서, 용어 "유사체(analog)"는 중심 고리 시스템(central ring system)을 유지하며 일반식 I의 화합물과 같은 유사한 화학 구조 및 기능을 가지는 화합물을 말한다.
본 발명의 몇몇의 유사체는 또한 배위 이성질체(configurational isomer), 기하 이성질체(geometric isomer) 및 형태 이성질체(conformational isomer)를 포함하는 다양한 입체이성질체의 형태로 존재할 뿐만 아니라, 다양한 호변이성 형태(tautomeric form), 특히 수소 원자의 부착 위치가 서로 다른 형태로 존재할 수 있다. 본원에 사용된 것으로서, 용어 "입체이성질체(stereoisomer)"는 화합물의 호변이성 형태를 포함하는 화합물의 이러한 이성질체 형태를 포함한다.
비대칭 중심을 가지는 실례가 되는 화합물은 서로 다른 거울상 이성질체 형태(enanthimeric form) 및 부분입체이성질체 형태(diastereomeric form)로 존재할 수 있다. 화합물은 광학이성질체(optic isomer) 또는 부분입체이성질체의 형태로 존재할 수 있다. 따라서, 본 발명은 화합물의 광학이성질체, 부분입체이성질체 및 라세미 혼합물(racemic mixtures)을 포함하는 그것들의 혼합물의 형태의 화합물을 포함한다.
만약 도시된 구조 및 그 구조에 주어진 명칭 간에 차이가 있다면, 도시된 구조를 조정해야 한다는 것에 특히 주의하여야 한다. 게다가, 만약 구조 또는 구조의 일부분의 입체화학이 예를 들어, 굵은선, 쐐기선 또는 점선으로 표시되지 않았다면, 그 구조 또는 구조의 일부분은 기재된 화합물의 모든 입체이성질체를 포함하는 것으로 해석된다.
B. S- 니트로소글루타치온 리덕타아제 억제제
1. 본 발명의 화합물
본 발명의 양상 중 하나에서, 본 발명은 일반식 I으로 나타낸 구조를 가지는 화합물 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염, 입체이성질체, 프로드러그 또는 대사 산물을 제공한다:
Figure pct00006
여기에서,
X는 O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
Y는 O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
Z는 Z1, Z2, Z3 및 Z4로 이루어지는 군으로부터 선택되고; 여기에서
Z1은
Figure pct00007
, Z2는
Figure pct00008
, Z3는
Figure pct00009
및 Z4는
Figure pct00010
이며, 다만 적어도 하나의 X 또는 Y가 S일 경우 Z는 오직 Z4이고;
R1은 수소, (C1-C6)알킬, (C3-C7)시클로알킬, (C1-C6)할로알킬, 비치환된 아릴(C1-C4)알킬, 치환된 아릴(C1-C6)알킬, (C1-C6)헤테로알킬, 치환 또는 비치환된 아릴 및 치환 또는 비치환된 헤테로아릴로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
R2는 수소, 할로겐, 시아노 및 (C1-C6)알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
R3는 수소, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)알콕시, 시아노 및 N,N-디메틸아미노로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
R4는 테트라졸(tetrazole), 옥사디아졸론(oxadiazolone), 티아디아졸론(thiadiazolone), 메틸술포닐카르바모일(methylsulfonylcarbamoyl) 및 N-하이드록시카르바모일(N-hydroxycarbamoyl)로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
R5는 카르복시(carboxy), 테트라졸(tetrazole), 옥사디아졸론(oxadiazolone), 티아디아졸론(thiadiazolone), 메틸술포닐카르바모일(methylsulfonylcarbamoyl) 및 N-하이드록시카르바모일(N-hydroxycarbamoyl)로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
본 발명의 또 다른 양상에서, R4는 테트라졸(tetrazole), 1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온-3-일(1,2,4-oxadiazol-5(4H)-one-3-yl), 1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온-3-일(1,2,4-thiadiazol-5(4H)-one-3-yl), 1,3,4-옥사디아졸-2(3H)-온-5-일(1,3,4-oxadiazol-2(3H)-one-5-yl), 1,3,4-티아디아졸-2(3H)-온-5-일(1,3,4-thiadiazol-2(3H)-one-5-yl), 1,2,4-티아디아졸-3(2H)-온-5-일(1,2,4-thiadiazol-3(2H)-one-5-yl), 1,2,4-옥사디아졸-3(2H)-온-5-일(1,2,4-oxadiazol-3(2H)-one-5-yl), 메틸술포닐카르바모일(methylsulfonylcarbamoyl) 및 N-하이드록시카르바모일(N-hydroxycarbamoyl)로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R5는 카르복시(carboxy), 테트라졸(tetrazole), 1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온-3-일(1,2,4-oxadiazol-5(4H)-one-3-yl), 1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온-3-일(1,2,4-thiadiazol-5(4H)-one-3-yl), 1,3,4-옥사디아졸-2(3H)-온-5-일(1,3,4-oxadiazol-2(3H)-one-5-yl), 1,3,4-티아디아졸-2(3H)-온-5-일(1,3,4-thiadiazol-2(3H)-one-5-yl), 1,2,4-티아디아졸-3(2H)-온-5-일(1,2,4-thiadiazol-3(2H)-one-5-yl), 1,2,4-옥사디아졸-3(2H)-온-5-일(1,2,4-oxadiazol-3(2H)-one-5-yl), 메틸술포닐카르바모일(methylsulfonylcarbamoyl) 및 N-하이드록시카르바모일(N-hydroxycarbamoyl)로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
본 발명의 다른 양상에서, R1은 수소, CF3, CF2H, CF2CH3, CF2CH2CH3, 메틸(methyl), 이소프로필(isopropyl), 이소부틸(isobutyl), 시클로펜틸(cyclopentyl), CH2OCH3, SCH3, 벤질(benzyl), 4-카르복시 벤질(4-carboxy benzyl), 티오펜-2-일(thiophen-2-yl) 및 티오펜-3-일(thiophen-3-yl)로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R2는 수소, 플루오로(fluoro), 클로로(chloro), 메톡시(methoxy) 및 시아노(cyano)로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R3는 수소, 플루오로, 클로로, 메틸, CF3, 메톡시, 시아노 및 N,N-디메틸아미노로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
본 발명의 다른 양상에서, R1은 수소, CF3, CF2H, 메틸 및 4-카르복시벤질(4-carboxybenzyl)로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R2는 수소 및 플루오로로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R3는 수소, 플루오로, 클로로 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R4는 테트라졸, 1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,3,4-옥사디아졸-2(3H)-온-5-일, 메틸술포닐카르바모일 및 N-하이드록시카르바모일로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R5는 카르복시, 테트라졸, 1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,3,4-옥사디아졸-2(3H)-온-5-일, 메틸술포닐카르바모일 및 N-하이드록시카르바모일로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
본 발명의 다른 양상에서, R4는 테트라졸, 1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온-3-일, 메틸술포닐카르바모일 및 N-하이드록시카르바모일로 이루어지는 군으로부터 선택되고; R5는 카르복시, 테트라졸, 1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온-3-일, 메틸술포닐카르바모일 및 N-하이드록시카르바모일로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
본 발명의 다른 양상에서, X는 O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택된다. 본 발명의 또 다른 양상에서, X는 O이다. 본 발명의 여전히 또 다른 양상에서, X는 S이다.
본 발명의 다른 양상에서, Y는 O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택된다. 본 발명의 또 다른 양상에서, Y는 O이다. 본 발명의 여전히 또 다른 양상에서, Y는 S이다.
본 발명의 다른 양상에서, 일반식 I의 적절한 화합물은 3-(4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-7-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-4-온(3-(4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-7-hydroxy-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-4-one); 5-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)티오펜-2-카르복시산(5-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)thiophene-2-carboxylic acid); (트랜스)-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)시클로헥산카르복시산((trans)-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)cyclohexanecarboxylic acid); (시스)-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)시클로헥산카르복시산((cis)-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)cyclohexanecarboxylic acid); 3-(4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-2-(디플루오로메틸)-7-하이드록시-4H-크로멘-4-온(3-(4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-2-(difluoromethyl)-7-hydroxy-4H-chromen-4-one); 3-(4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-7-하이드록시-2-메틸-4H-크로멘-4-온(3-(4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-7-hydroxy-2-methyl-4H-chromen-4-one); 4-(2-(4-카르복시벤질)-7-하이드록시-4-옥소-4H-티오크로멘-3-일)벤조산(4-(2-(4-carboxybenzyl)-7-hydroxy-4-oxo-4H-thiochromen-3-yl)benzoic acid); 4-(7-(하이드록시-2-메틸-4-옥소-4H-티오크로멘-3-일)벤조산(4-(7-hydroxy-2-methyl-4-oxo-4H-thiochromen-3-yl)benzoic acid); 3-(4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)페닐)-1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온(3-(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)phenyl)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-one); 4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)-N-(메틸술포닐)벤즈아미드(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)-N-(methylsulfonyl)benzamide); 3-(4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)페닐)-1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온(3-(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)phenyl)-1,2,4-thiadiazol-5(4H)-one); 3-(4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-7-하이드록시-2-메틸-4H-티오크로멘-4-온(3-(4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-7-hydroxy-2-methyl-4H-thiochromen-4-one); 5-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)티오펜-3-카르복시산(5-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)thiophene-3-carboxylic acid); 3-((트랜스)-4-(1H-테트라졸-5-일)시클로헥실)-7-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-4-온(3-((trans)-4-(1H-tetrazol-5-yl)cyclohexyl)-7-hydroxy-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-4-one); N-하이드록시-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤즈아미드(N-hydroxy-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzamide); 3-(2-클로로-4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-7-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-4-온(3-(2-chloro-4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-7-hydroxy-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-4-one); 3-(3-클로로-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)페닐)-1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온(3-(3-chloro-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)phenyl)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-one); 3-(3-플루오로-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)페닐)-1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온(3-(3-fluoro-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)phenyl)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-one); 3-(3-클로로-4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-7-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-4-온(3-(3-chloro-4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-7-hydroxy-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-4-one); 3-(4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-7-하이드록시-4H-크로멘-4-온(3-(4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-7-hydroxy-4H-chromen-4-one); 및 5-(4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2(3H)-온(5-(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)phenyl)-1,3,4-oxadiazol-2(3H)-one)을 포함하나 이로 제한되는 것은 아니다.
다른 구현에서, 화합물 3-플루오로-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조산(3-fluoro-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzoic acid)은 본 발명의 화합물이다.
다른 구현에서, 화합물 4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)-3-메틸벤조산(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)-3-methylbenzoic acid)은 본 발명의 화합물이다.
다른 구현에서, 화합물 4-(8-플루오로-7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조산(4-(8-fluoro-7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzoic acid)은 본 발명의 화합물이다.
R4가 테트라졸, 1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,3,4-옥사디아졸-2(3H)-온-5-일, 1,3,4-티아디아졸-2(3H)-온-5-일, 1,2,4-티아디아졸-3(2H)-온-5-일, 1,2,4-옥사디아졸-3(2H)-온-5-일, 메틸술포닐카르바모일 및 N-하이드록시카르바모일인, Z1의 예는 각각
Figure pct00011
를 포함한다.
R5가 카르복시, 테트라졸, 1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,3,4-옥사디아졸-2(3H)-온-5-일, 1,3,4-티아디아졸-2(3H)-온-5-일, 1,2,4-티아디아졸-3(2H)-온-5-일, 1,2,4-옥사디아졸-3(2H)-온-5-일, 메틸술포닐카르바모일 및 N-하이드록시카르바모일인, Z3의 예는 각각
Figure pct00012
를 포함한다.
치환기에 대한 결합이 고리에서의 두 개의 원자를 연결하는 결합을 가로지르는 것으로 나타날 때, 그때 그러한 치환기는 고리에서 임의의 원자에 결합될 수 있다. 치환기가 주어진 식의 나머지 화합물에 결합하는 원자를 나타내지 않고 언급되는 경우, 그때 그러한 치환기는 그러한 치환기에 임의의 원자를 통하여 결합될 수 있다. 치환기 및/또는 변수들의 조합은 허용되나, 이러한 조합이 화합물을 안정하게 할 경우에만 허용된다.
본원에 기재된 화합물은 비대칭 중심(asymmetric centers)을 가질 수 있다. 비대칭적으로 치환된 원자를 포함하는 본 발명의 화합물은 선택적으로 활성형 또는 라세미형으로 분리될 수 있다. 라세미형의 분할(resolution)에 의해 또는 선택적으로 활성 시작 물질로부터의 합성에 의한 것과 같이, 활성형을 어떻게 선택적으로 제조하는지에 대해서는 당업계에 잘 알려져 있다. 올레핀의 많은 기하 이성질체, C=N 이중 결합 등 또한 본원에 기재된 화합물에 존재할 수 있고, 모든 이러한 안정한 이성질체들은 본 발명으로 고려된다. 본 발명의 화합물의 시스 및 트랜스 기하 이성질체가 기재되어 있으며, 이성질체의 혼합물 또는 별개의 이성질체의 형태로서 분리될 수 있다. 특정 입체화학적 형태 또는 이성질체 형태를 특별히 나타내지 않는 한, 구조의 모든 키랄 이성질체 형태, 부분입체이성질체 형태, 라세미 이성질체 형태 및 기하 이성질체 형태를 대상으로 한다. 표시된 또는 기재된 화합물의 모든 호변성 이성질체 또한 본 발명의 일부분인 것으로 고려된다.
달리 표시하지 않는 한, 그러한 비대칭으로부터 생기는 이성질체(예를 들어, 모든 거울상 이성질체 및 부분입체이성질체)는 본 발명의 범위 내에 포함되는 것으로 받아들여야 한다. 그러한 이성질체는 고전적인 분리 기술 및 입체화학적으로 조절된 합성에 의하여 실질적으로 순수한 형태로 얻어질 수 있다. 게다가, 이 출원에 언급된 구조 및 다른 화합물 및 부분들 또한 그것들의 모든 호변 이성질체를 포함한다. 적절하다면, 알켄은 E- 또는 Z-기하학적 구조 중 하나를 포함할 수 있다.
2. 대표 화합물
본 발명의 대표적인 신규한 유사체의 예를 하기 표에 제공한다. 각 화합물을 제조하는데 사용될 수 있는 합성 방법을 실시예 25에 기재된 중간물질을 참고로 하여 실시예 1-24에 상세히 설명한다. 뒷받침하는 각 화합물에 대한 질량분석(mass spectrometry) 데이터 및/또는 프로톤 NMR 데이터 또한 실시예 1-22에 포함된다. 실시예 26에 기재된 검정법에 의해 GSNOR 억제제 활성을 측정하였고, IC50 값을 실시예 1-22에서 얻었다. 실시예 1-3, 5-6, 8-9, 11-12, 14, 16-22에서의 GSNOR 억제제 화합물은 약 0.1μM 보다 작은 IC50을 가진다.
C. 정의
본원에 사용된 것으로서, "약(about)"은 당업자에 의해 이해될 수 있을 것이며, 그것이 사용된 문맥상에 따라 다소 달라질 것이다. 만약 그것이 사용된 주어진 문맥에서 당업자에게 명확하지 않은 용어가 사용된다면, "약"은 특정 용어의 10% 안팎까지를 의미할 것이다.
용어 "아실(acyl)"은 아세틸 라디칼 (CH3CO-) 또는 직쇄 또는 분기쇄의 저급 알킬 잔기가 결합된 카보닐기를 포함하는 화합물 및 부분(moieties)을 포함한다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "알킬(alkyl)"은 표기된 숫자의 탄소 원자를 가지는 직쇄 또는 분기쇄의 포화된 탄화수소를 말한다. 예를 들면, (C1-C6)알킬은 메틸(methyl), 에틸(ethyl), 프로필(propyl), 이소프로필(isopropyl), 부틸(butyl), sec-부틸(sec-butyl), tert-부틸(tert-butyl), 펜틸(pentyl), 이소펜틸(isopentyl), 네오펜틸(neopentyl), 헥실(hexyl), 이소헥실(isohexyl) 및 네오헥실(neohexyl)을 포함하는 것을 의미하나, 이로 제한되는 것은 아니다. 알킬기는 비치환되거나 하나 또는 그 이상의 본원에 기재된 치환기로 선택적으로 치환될 수 있다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "알케닐(alkenyl)"은 표기된 숫자의 탄소 원자 및 적어도 하나의 이중 결합을 가지는 직쇄 또는 분기쇄의 불포화된 탄화수소를 말한다. (C2-C8)알케닐기의 예는 에틸렌(ethylene), 프로필렌(propylene), 1-부틸렌(1-butylene), 2-부틸렌(2-butylene), 이소부틸렌(isobutylene), sec-부틸렌(sec-butylene), 1-펜텐(1-pentene), 2-펜텐(2-pentene), 이소펜텐(isopentene), 1-헥센(1-hexene), 2-헥센(2-hexene), 3-헥센(3-hexene), 이소헥센(isohexene), 1-헵텐(1-heptene), 2-헵텐(2-heptene), 3-헵텐(3-heptene), 이소헵텐(isoheptene), 1-옥텐(1-octene), 2-옥텐(2-octene), 3-옥텐(3-octene), 4-옥텐(4-octene) 및 이소옥텐(isooctene)을 포함하나, 이로 제한되는 것은 아니다. 알케닐기는 비치환되거나 하나 또는 그 이상의 본원에 기재된 치환기로 선택적으로 치환될 수 있다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "알키닐(alkynyl)"은 표기된 숫자의 탄소 원자 및 적어도 하나의 삼중 결합을 가지는 직쇄 또는 분기쇄의 불포화된 탄화수소를 말한다. (C2-C8)알키닐기의 예는 아세틸렌(acetylene), 프로핀(propyne), 1-부틴(1-butyne), 2-부틴(2-butyne), 1-펜틴(1-pentyne), 2-펜틴(2-pentyne), 1-헥신(1-hexyne), 2-헥신(2-hexyne), 3-헥신(3-hexyne), 1-헵틴(1-heptyne), 2-헵틴(2-heptyne), 3-헵틴(3-heptyne), 1-옥틴(1-octyne), 2-옥틴(2-octyne), 3-옥틴(3-octyne) 및 4-옥틴(4-octyne)을 포함하나, 이로 제한되지는 않는다. 알키닐기는 비치환되거나 하나 또는 그 이상의 본원에 기재된 치환기로 선택적으로 치환될 수 있다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "알콕시(alkoxy)"는 표기된 숫자의 탄소 원자를 가지는 -O-알킬기를 말한다. 예를 들어, (C1-C6)알콕시기는 -O-메틸(-O-methyl), -O-에틸(-O-ethyl), -O-프로필(-O-propyl), -O-이소프로필(-O-isopropyl), -O-부틸(-O-butyl), -O-sec-부틸(-O-sec-butyl), -O-tert-부틸(-O-tert-butyl), -O-펜틸(-O-pentyl), -O-이소펜틸(-O-isopentyl), -O-네오펜틸(-O-neopentyl), -O-헥실(-O-hexyl), -O-이소헥실(-O-isohexyl) 및 -O-네오헥실(-O-neohexyl)을 포함한다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "아미노알킬(aminoalkyl)"은 하나 또는 그 이상의 C1-C6 알킬기의 수소 원자가 식 -N(Rc)2의 아민으로 치환된 알킬기(전형적으로 1 내지 6개의 탄소 원자)를 말하며, 여기에서 각 Rc의 존재는 독립적으로 -H 또는 (C1-C6)알킬이다. 아미노알킬의 예는 -CH2NH2, -CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2CH2CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2N(CH3)2, t-부틸아미노메틸(t-butylaminomethyl), 이소프로필아미노메틸(isopropylaminomethyl) 등을 포함하나, 이로 제한되는 것은 아니다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "아릴(aryl)"은 5 내지 14-원자 모노시클릭(monocyclic), 바이시클릭(bicyclic) 또는 트리시클릭(tricyclic) 방향족 고리 시스템(aromatic ring system)을 말한다. 아릴기의 예는 페닐(phenyl) 및 나프틸(naphthyl)을 포함한다. 아릴기는 비치환되거나 하나 또는 그 이상의 하기 본원에 기재된 것과 같은 치환기로 선택적으로 치환될 수 있다. 아릴기의 예는 페닐(phenyl) 또는 피롤(pyrrole), 퓨란(furan), 티오펜(thiophene), 티아졸(thiazole), 이소티아졸(isothiazole), 이미다졸(imidazole), 트리아졸(triaozle), 테트라졸(tetrazole), 피라졸(pyrazole), 옥사졸(oxazole), 이소옥사졸(isoxazole), 피리딘(pyridine), 피라진(pyrazine), 피리다진(pyridazine) 및 피리미딘(pyrimidine) 등과 같은 아릴 헤테로시클(aryl heterocycle)을 포함한다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "생물활성(bioactivity)"은 생리학적 또는 병리생리학적 과정에 영향을 줄 수 있는 하나 또는 그 이상의 세포 또는 세포 외 과정(예를 들어, 결합, 신호전달 등을 통하여)에 대한 효과를 나타낸다.
용어 "카보닐(carbonyl)"은 산소 원자에 이중 결합으로 연결된 탄소를 포함하는 화합물 및 부분을 포함한다. 카보닐을 포함하는 부분의 예는 알데히드(aldehydes), 케톤(ketones), 카르복시산(carboxylic acid), 아미드(amides), 에스테르(esters), 무수물(anhydrides) 등을 포함하나, 이로 제한되는 것은 아니다.
용어 "카르복시(carboxy)" 또는 "카르복실(carboxyl)"은 -COOH 기 또는 카르복시산(carboxylic acid)을 의미한다.
용어 "Cm-Cn"은 "m" 숫자의 탄소 원자 내지 "n" 숫자의 탄소 원자를 의미한다. 예를 들어, 용어 "C1-C6"는 1 내지 6 탄소 원자(C1, C2, C3, C4, C5 또는 C6)를 의미한다. 용어 "C2-C6"는 2 내지 6 탄소 원자(C2, C3, C4, C5 또는 C6)를 포함한다. 용어 "C3-C6"는 3 내지 6 탄소 원자(C3, C4, C5 또는 C6)를 포함한다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "시클로알킬(cycloalkyl)"은 3- 내지 14-원자의 포화 또는 불포화된 비방향족 모노시클릭, 바이시클릭 또는 트리시클릭 탄화수소 고리 시스템을 말한다. 이 분류에 포함되는 것은 벤젠 고리에 융합되는 시클로알킬기이다. 대표적인 시클로알킬기는 시클로프로필(cyclopropyl), 시클로부틸(cyclobutyl), 시클로부테닐(cyclobutenyl), 시클로펜틸(cyclopentyl), 시클로펜테닐(cyclopentenyl), 시클로펜타디에닐(cyclopentadienyl), 시클로헥실(cyclohexyl), 시클로헥세닐(cyclohexenyl), 1,3-시클로헥사디에닐(1,3-cyclohexadienyl), 시클로헵틸(cycloheptyl), 시클로헵테닐(cycloheptenyl), 1,3-시클로헵타디에닐(1,3-cycloheptadienyl), 1,4-시클로헵타디에닐(1,4-cycloheptadienyl), -1,3,5-시클로헵타트리에닐(-1,3,5-cycloheptatrienyl), 시클로옥틸(cyclooctyl), 시클로옥테닐(cyclooctenyl), 1,3-시클로옥타디에닐(1,3-cyclooctadienyl), 1,4-시클로옥타디에닐(1,4-cyclooctadienyl), -1,3,5-시클로옥타트리에닐(-1,3,5-cyclooctatrienyl), 데카하이드로나프탈렌(decahydronaphthalene), 옥타하이드로나프탈렌(octahydronaphthalene), 헥사하이드로나프탈렌(hexahydronaphthalene), 옥타하이드로인덴(octahydroindene), 헥사하이드로인덴(hexahydroindene), 테트라하이드로인덴(tetrahydroinden), 데카하이드로벤조시클로헵텐(decahydrobenzocycloheptene), 옥타하이드로벤조시클로헵텐(octahydrobenzocycloheptene), 헥사하이드로벤조시클로헵텐(hexahydrobenzocycloheptene), 테트라하이드로벤조시클로헵텐(tetrahydrobenzocycloheptene), 도데카하이드로헵탈렌(dodecahydroheptalene), 데카하이드로헵탈렌(decahydroheptalene), 옥타하이드로헵탈렌(octahydroheptalene), 헥사하이드로헵탈렌(hexahydroheptalene), 테트라하이드로헵탈렌(tetrahydroheptalene), (1s,3s)-바이시클로[1.1.0]부탄((1s,3s)-bicyclo[1.1.0]butane), 바이시클로[1.1.1]펜탄(bicyclo[1.1.1]pentane), 바이시클로[2.1.1]헥산(bicyclo[2.1.1]hexane), 바이시클로[2.2.1]헵탄(bicyclo[2.2.1]heptane), 바이시클로[2.2.2]옥탄(bicyclo[2.2.2]octane), 바이시클로[3.1.1]헵탄(bicyclo[3.1.1]heptane), 바이시클로[3.2.1]옥탄(bicyclo[3.2.1]octane), 바이시클로[3.3.1]노난(bicyclo[3.3.1]nonane), 바이시클로[3.3.2]데칸(bicyclo[3.3.2]decane), 바이시클로[3.3.]운데칸(bicyclo [3.3.]undecane), 바이시클로[4.2.2]데칸(bicyclo[4.2.2]decane) 및 바이시클로[4.3.1]데칸(bicyclo[4.3.1]decane)을 포함하나, 이로 제한되는 것은 아니다. 시클로알킬기는 비치환되거나 하나 또는 그 이상의 하기 본원에 기재된 것과 같은 치환기로 선택적으로 치환될 수 있다.
용어 "할로겐(halogen)"은 불소(fluorine), 브롬(bromine), 염소(chlorine), 요오드(iodine) 등을 포함한다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "할로알킬(haloalkyl)"은 하나 또는 그 이상의 C1-C6 알킬기의 수소 원자가 동일하거나 서로 다를 수 있는 할로겐 원자로 치환된 C1-C6 알킬기를 말한다. 할로알킬기의 예는 트리플루오로메틸(trifluoromethyl), 2,2,2-트리플루오로에틸(2,2,2-trifluoroethyl), 4-클로로부틸(4-chlorobutyl), 3-브로모프로필(3-bromopropyl), 펜타클로로에틸(pentachloroethyl) 및 1,1,1-트리플루오로-2-브로모-2-클로로에틸(1,1,1-trifluoro-2-bromo-2-chloroethyl)를 포함하나, 이로 제한되는 것은 아니다.
단독으로 또는 다른 용어와 함께, 용어 "헤테로알킬(heteroalkyl)"은 달리 언급하지 않는 한, 탄소 원자 및 O, N 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 내지 3개의 헤테로원자로 이루어지며, 여기에서 질소 및 황 원자는 선택적으로 산화될 수 있고, 질소 헤테로원자는 선택적으로 4기화될 수 있는, 안정한 직쇄 또는 분기쇄 알킬 또는 그것들의 조합을 의미한다. 헤테로원자 O, N 및 S는 헤테로알킬기의 임의의 위치에 위치할 수 있다. 예는 -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2-S(O)-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3 및 -CH2-CH=N-OCH3를 포함한다. 두 개 이하의 헤테로원자는 예를 들어, -CH2-NH-OCH3와 같이 연속될 수 있다. (C2-C8)과 같은 접두사가 헤테로알킬기를 칭하는 것으로 사용될 때, 탄소의 수(이 예에서, 2 내지 8)는 헤테로원자 또한 포함하는 것을 의미한다. 예를 들면, C2-헤테로알킬기는 예를 들어 -CH2OH(하나의 탄소 원자와 탄소 원자를 대신하는 하나의 헤테로원자) 및 -CH2SH를 포함하는 것을 의미한다.
헤테로알킬기의 정의를 더 설명하자면, 헤테로원자가 산소인 경우, 헤테로알킬기는 옥시알킬기(oxyalkyl group)일 수 있다. 예를 들어, (C2-C5)옥시알킬은 예를 들면 -CH2-O-CH3(두 개의 탄소 원자와 탄소 원자를 대신하는 하나의 산소를 가지는 C3-옥시알킬기), -CH2CH2CH2CH2OH, -OCH2CH2OCH2CH2OH, - OCH2CH(OH)CH2OH 등을 포함하는 것을 의미한다.
본원에 사용된 것으로서, "아릴알킬(arylalkyl)"은 -알킬-아릴기를 말하며, 겨이게서 아릴알킬기는 알킬기를 통하여 정의된 화학 구조에 공유결합으로 연결된다. 아릴알킬기의 예는 벤질기(-CH2-C6H5)이다. 아릴알킬기는 선택적으로 치환될 수 있다. 즉, 아릴기 및/또는 알킬기는 본원에 기재된 것과 같이 치환될 수 있다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "헤테로아릴(heteroaryl)"은 모노시클릭, 바이시클릭 및 트리시클릭 고리 시스템을 포함하며, 질소, 산소 및 황으로부터 선택되는 적어도 하나의 헤테로원자를 가지고, 적어도 하나의 탄소 원자를 포함하는 5 내지 14 원자의 방향족 헤테로시클 고리를 말한다. 대표적인 헤테로아릴은 트리아졸릴(triazolyl), 테트라졸릴(tetrazolyl), 옥사디아졸릴(oxadiazolyl), 피리딜(pyridyl), 퓨릴(furyl), 벤조퓨라닐(benzofuranyl), 티에닐(thienyl), 벤조티에닐(benzothienyl), 퀴놀리닐(quinolinyl), 피롤릴(pyrrolyl), 인돌릴(indolyl), 옥사졸릴(oxazolyl), 벤족사졸릴(benzoxazolyl), 이미다졸릴(imidazolyl), 벤즈이미다졸릴(benzimidazolyl), 티아졸릴(thiazolyl), 벤조티아졸릴(benzothiazolyl), 이속사졸릴(isoxazolyl), 피라졸릴(pyrazolyl), 이소티아졸릴(isothiazolyl), 피리다지닐(pyridazinyl), 피리미디닐(pyrimidinyl), 피라지닐(pyrazinyl), 트리아지닐(triazinyl), 시놀리닐(cinnolinyl), 프탈라지닐(phthalazinyl), 퀴나졸리닐(quinazolinyl), 피리미딜(pyrimidyl), 아제피닐(azepinyl), 옥세피닐(oxepinyl), 퀴녹살리닐(quinoxalinyl) 및 옥사졸릴(oxazolyl)이다. 헤테로아릴기는 비치환되거나 하기 본원에 기재된 것과 같은 하나 또는 그 이상의 치환기로 선택적으로 치환될 수 있다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "헤테로원자(heteroatom)"는 산소(O), 질소(N) 및 황(S)을 포함하는 것을 의미한다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "헤테로시클(heterocycle)"은 모노시클릭, 바이시클릭 및 트리시클릭 고리 시스템을 포함하는, 포화되고, 불포화되거나 방향족이고, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 포함하며, 여기에서 질소 및 황 헤테로원자는 선택적으로 산화될 수 있으며, 질소 헤테로원자는 선택적으로 4기화될 수 있는 3 내지 14 원자의 고리 시스템을 말한다. 바이시클릭 및 트리시클릭 고리 시스템은 벤젠 고리에 융합된 헤테로시클 또는 헤테로아릴을 포함할 수 있다. 헤테로시클은 화학적으로 허용가능한 경우 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자를 통하여 결합될 수 있다. 헤테로시클은 상기에 정의된 것과 같은 헤테로아릴을 포함한다. 대표적인 헤테로시클의 예는 아지리디닐(aziridinyl), 옥시라닐(oxiranyl), 티라닐(thiiranyl), 트리아졸릴(triazolyl), 테트라졸릴(tetrazolyl), 아지리닐(azirinyl), 디아지리디닐(diaziridinyl), 디아지리닐(diazirinyl), 옥사지리디닐(oxaziridinyl), 아제티디닐(azetidinyl), 아제티디노닐(azetidinonyl), 옥세타닐(oxetanyl), 티에타닐(thietanyl), 피페리디닐(piperidinyl), 피페라지닐(piperazinyl), 모폴리닐(morpholinyl), 피롤릴(pyrrolyl), 옥사지닐(oxazinyl), 티아지닐(thiazinyl), 디아지닐(diazinyl), 디옥사닐(dioxanyl), 트리아지닐(triazinyl), 테트라지닐(tetrazinyl), 이미다졸릴(imidazolyl), 테트라졸릴(tetrazolyl), 피롤리디닐(pyrrolidinyl), 이속사졸릴(isoxazolyl), 퓨라닐(furanyl), 퓨라자닐(furazanyl), 피리디닐(pyridinyl), 옥사졸릴(oxazolyl), 벤족사졸릴(benzoxazolyl), 벤즈이속사졸릴(benzisoxazolyl), 티아졸릴(thiazolyl), 벤즈티아졸릴(benzthiazolyl), 티에닐(thienyl), 피라졸릴(pyrazolyl), 트리아졸릴(triazolyl), 피리미디닐(pyrimidinyl), 벤즈이미다졸릴(benzimidazolyl), 이소인돌릴(isoindolyl), 인다졸릴(indazolyl), 벤조디아졸릴(benzodiazolyl), 벤조트리아졸릴(benzotriazolyl), 벤족사졸릴(benzoxazolyl), 벤즈이속사졸릴(benzisoxazolyl), 퓨리닐(purinyl), 인돌릴(indolyl), 이소퀴놀리닐(isoquinolinyl), 퀴놀리닐(quinolinyl) 및 퀴나졸리닐(quinazolinyl)을 포함하나, 이로 제한되는 것은 아니다. 헤테로시클기는 비치환되거나, 하기 본원에 기재된 것과 같은 하나 또는 그 이상의 치환기로 선택적으로 치환될 수 있다.
단독으로 또는 다른 용어와 함께, 용어 "헤테로시클로알킬(heterocycloalkyl)"은 달리 언급하지 않는 한 "헤테로알킬"의 시클릭 형태를 나타낸다. 게다가, 헤테로원자는 헤테로시클이 분자의 나머지에 결합되는 위치를 차지할 수 있다. 헤테로시클로알킬의 예는 1-(1,2,5,6-테트라하이드로피리딜)(1-(1,2,5,6-tetrahydropyridyl)), 1-피페리디닐(1-piperidinyl), 2-피페리디닐(2-piperidinyl), 3-피페리디닐(3-piperidinyl), 4-모폴리닐(4-morpholinyl), 3-모폴리닐(3-morpholinyl), 테트라하이드로퓨란-2-일(tetrahydrofuran-2-yl), 테트라하이드로퓨란-3-일(tetrahydrofuran-3-yl), 테트라하이드로티엔-2-일(tetrahydrothien-2-yl), 테트라하이드로티엔-3-일(tetrahydrothien-3-yl), 1-피페라지닐(1-piperazinyl), 2-피페라지닐(2-piperazinyl) 등을 포함한다.
본원에 사용된 것으로서 용어 "하이드록시알킬(hydroxyalkyl)"은 표기된 숫자의 탄소 원자를 가지는 알킬기를 말하며, 여기에서 알킬기에서 하나 또는 그 이상의 수소 원자는 -OH 기로 치환된다. 하이드록시알킬의 예는 -CH2OH, -CH2CH2OH, -CH2CH2CH2OH, -CH2CH2CH2CH2OH, -CH2CH2CH2CH2CH2OH, -CH2CH2CH2CH2CH2CH2OH 및 그것의 분기된 형태를 포함하나, 이로 제한되는 것은 아니다.
용어 "하이드록시(hydroxy)" 또는 "하이드록실(hydroxyl)"은 -OH 또는 -O-를 가지는 기를 포함한다.
본원에 사용된 것으로서, N-옥사이드(N-oxide) 또는 아민 옥사이드(amine oxide)는 질소 원자에 하나의 산소 원자가 결합하는 것에 의하여 3차 아민으로부터 유래된 화합물, R3N+-O-를 말한다. 더 나아가 상기 용어는 1차 및 2차 아민의 유사 유도체(analogous derivatives)를 포함한다.
본원에 사용된 것으로서 달리 언급하지 않는 한, 용어 "입체이성질체(stereoisomer)"는 실질적으로 그 화합물의 다른 입체이성질체를 포함하지 않는 화합물의 하나의 입체이성질체를 의미한다. 예를 들면, 하나의 키랄 중심을 가지는 입체이성질체적으로 순수한 화합물은 실질적으로 그 화합물의 반대 거울상 이성질체(opposite enantiomer)를 포함하지 않을 것이다. 두 개의 키랄 중심을 가지는 입체이성질체적으로 순수한 화합물은 실질적으로 그 화합물의 다른 부분입체 이성질체(diastereomer)를 포함하지 않을 것이다. 어떤 구현에서, 입체이성질체적으로 순수한 화합물은 약 80 중량%보다 많은 그 화합물의 하나의 입체이성질체와 약 20 중량%보다 적은 그 화합물의 다른 입체이성질체를 포함하며, 예를 들어 약 90 중량%보다 많은 그 화합물의 하나의 입체이성질체 및 약 10 중량%보다 적은 그 화합물의 다른 입체이성질체를 포함하거나, 약 95 중량%보다 많은 그 화합물의 하나의 입체이성질체 및 약 5 중량%보다 적은 그 화합물의 다른 입체이성질체를 포함하거나, 약 97 중량%보다 많은 그 화합물의 하나의 입체이성질체 및 약 3 중량%보다 적은 그 화합물의 다른 입체를 포함한다.
본원에 사용된 것으로서, "단백질(protein)"은 "펩티드(peptide)", "폴리펩티드(polypeptide)" 또는 "펩티드 단편(peptide fragment)"과 동일하게 사용된다. "정제된(purified)" 폴리펩티드, 단백질, 펩티드 또는 펩티드 단편은 실질적으로 세포, 조직, 또는 아미노산 서열이 얻어지는 무세포 공급원(cell-free source)으로부터의 세포 물질(cellular material) 또는 다른 오염 단백질(contaminating protein)을 포함하지 않고, 또는 화학적으로 합성될 때 화학 전구체 또는 다른 화학물질을 실질적으로 포함하지 않는다.
본원에 사용된 것으로서, "조절하다(modulate)"는 펩티드 또는 폴리펩티드의 농도를 증가 또는 감소시키거나, 펩티드 또는 폴리펩티드의 안정성 또는 활성을 증가 또는 감소시키는 것을 말한다. 용어 "억제하다(inhibit)"는 펩티드 또는 폴리펩티드의 농도를 감소시키거나, 펩티드 또는 폴리펩티드의 안정성 또는 활성을 감소시키는 것을 말한다. 바람직한 구현에서, 조절되거나 억제되는 펩티드는 S-니트로소글루타치온(GSNO) 또는 단백질 S-니트로소티올(SNOs)이다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "산화질소(nitric oxide)" 및 "NO"는 전하를 띠지 않은(uncharged) 산화질소 및 특히 니트로소늄 이온(nitrosonium ion; NO+) 및 니트록실 이온(nitroxyl ion; NO-)를 포함하는 전하를 띠는(charged) 산화질소 종(nitric oxide species)을 포함한다. 산화질소의 반응형(reactive form)은 가스성 산화질소에 의해 제공될 수 있다. 구조 X-NOy를 가지는 화합물은 산화질소를 의도된 목적을 위하여 활성형으로 그것의 의도된 작용 부위에 제공하는 임의의 모든 그런 화합물을 포함하며, 여기에서 X는 산화질소를 방출하는(releasing), 운반하는(delivering) 또는 이동시키는(transferring) 부분이고, Y는 1 또는 2이다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "약제학적으로 허용가능한(pharmaceutically acceptable)"은 연방 또는 주 정부의 관리기관에 의해 승인되거나, 동물, 더 상세하게는 인간에서 사용하기 위한 미국 약전 또는 다른 일반적으로 알려져 있는 약전에 기재된 것을 의미한다. 용어 "담체(carrier)"는 치료제와 함께 투여되는 물 및 오일과 같은 멸균된 액체를 포함하나 이로 제한되지는 않는 희석제, 보조제, 첨가제 또는 비히클을 말한다.
본 발명의 화합물의 "약제학적으로 허용가능한 염(pharmaceutical acceptable salt)" 또는 "염(salt)"은 이온 결합을 포함하는 개시된 화합물의 생성물이며, 전형적으로 피험자에게 투여하기에 적합한 산 또는 염과 함께 개시된 화합물을 반응시킴으로써 생성된다. 약제학적으로 허용가능한 염은 하이드로클로라이드(hydrochlorides), 하이드로브로마이드(hydrobromides), 포스페이트(phosphate), 설페이트(sulphates), 하이드로겐 설페이트(hydrogen sulphate), 알킬설포네이트(alkylsulphonates), 아릴설포네이트(arylsulphonates), 아릴알킬설포네이트(arylalkylsulfonates), 아세테이트(acetates), 벤조에이트(benzoates), 시트레이트(citrates), 말리에이트(maleates), 푸마레이트(fumarates), 숙시네이트(succinates), 락테이트(lactates) 및 타트레이트(tartrates)를 포함하는 산부가염(acid addition salts); Li, Na 및 K와 같은 알칼리 금속 양이온, Mg 또는 Ca와 같은 알칼리 토금속 염 또는 유기 아민 염을 포함할 수 있으나, 이로 제한되는 것은 아니다.
"약제학적 조성물(pharmaceutical composition)"은 피험자에게 투여하기 적절한 형태로 개시된 화합물을 포함하는 제형이다. 본 발명의 약제학적 조성물은 바람직하게는 투여의 의도된 방식에 적합하도록 제형화된다. 투여 방식의 예는 경구(oral) 및 비경구(parenteral), 예를 들어, 정맥내(intravenous), 피부내(intradermal), 피하내(subcutaneous), 흡입(inhalation), 국부(topical), 경피(transdermal), 점막내(transmucosal) 및 직장(rectal) 투여를 포함하나, 이로 제한되는 것은 아니다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "치환된(substituted)"은 지정된 원자의 정상 원자가(normal valency)를 초과하지 않는다면, 지정된 원자 상에서 임의의 하나 또는 그 이상의 수소가 지시된 기로부터 선택된 것으로 치환되며, 그 치환에 의해 안정한 화합물이 되는 것을 의미한다. 치환기가 케토(즉=O)인 경우, 원자 상의 2 개의 수소가 치환된다. 본원에 사용된 것으로서, 고리 이중결합(ring double bonds)은 두 개의 인접한 고리 원자 사이에 형성되는 이중 결합이다(예를 들어, C=C, C=N 또는 N=N).
알킬(alkyl), 헤테로알킬(heteroalkyl), 알킬렌(alkylene), 알케닐(alkenyl), 알키닐(alkynyl), 시클로알킬(cycloalkyl), 헤테로시클로알킬(heterocycloalkyl), 시클로알케닐(cycloalkenyl) 및 헤테로시클로알케닐(heterocycloalkenyl)로 불리는 기에 대한 치환기는 예로 0, 1 또는 2 개의 치환기를 가지는 기와 함께 0 내지 3까지의 수로, -ORd', =O, =NRd', =N-ORd', -NRd'Rd'', -SRd', -할로, -SiRd'Rd''Rd''', -OC(O)Rd', -C(O)Rd', -CO2Rd', -CONRd'Rd'', -OC(O)NRd'Rd'', -NRd''C(O)Rd', -NRd'''C(O)NRd'Rd'', -NRd'''SO2NRd'Rd'', -NRd''CO2Rd', -NHC(NH2)=NH, -NRa'C(NH2)=NH, -NHC(NH2)=NRd', -S(O)Rd', -SO2Rd', -SO2NRd'Rd'', -NRd''SO2Rd', -CN 및 -NO2를 포함하는 다양한 기로부터 선택될 수 있다.
Rd', Rd'' 및 Rd'''은 각각 독립적으로 수소, 비치환된 (C1-C8)알킬, 비치환된 헤테로(C1-C8)알킬, 비치환된 아릴 및 -할로로부터 선택되는 하나 또는 세 개 이상의 치환기로 치환된 아릴, 비치환된 알킬, 비치환된 알콕시, 비치환된 티오알콕시 및 비치환된 아릴(C1-C4)알킬을 말한다. Rd' 및 Rd''가 같은 질소 원자에 결합될 때, 그것들은 5-, 6- 또는 7-원자 고리를 형성하기 위하여 질소 원자가 결합될 수 있다. 예를 들면, -NRd'Rd''는 1-피롤리디닐(1-pyrrolidinyl) 또는 4-모폴리닐(4-morpholinyl)을 나타낼 수 있다.
전형적으로, 알킬 또는 헤테로알킬기는 본 발명의 예가 되는 두 개 또는 그보다 적은 치환기를 가지는 기와 함께 0 내지 3 개의 치환기를 가질 것이다. 알킬 또는 헤테로알킬 라디칼은 비치환되거나 1치환(monosubstituted)될 수 있다. 어떤 구현에서, 알킬 또는 헤테로알킬 라디칼은 비치환될 것이다.
알킬 및 헤테로알킬 라디칼에 대한 치환기의 예는 -ORd', =O, =NRd', =N-ORd', -NRd'Rd'', -SRd', -할로, -SiRd'Rd''Rd''', -OC(O)Rd', -C(O)Rd', -CO2Rd', -CONRd'Rd'', -OC(O)NRd'Rd'', -NRd''C(O)Rd', -NRd'''C(O)NRd'Rd'', -NRd'''SO2NRd'Rd'', -NRd''CO2Rd', -NHC(NH2)=NH, -NRa'C(NH2)=NH, -NHC(NH2)=NRd', -S(O)Rd', -SO2Rd', -SO2NRd'Rd'', -NRd''SO2Rd', -CN, 및 -NO2를 포함하나 이로 제한되지는 않으며, 여기에서 Rd', Rd'' 및 Rd ''' 는 상기에 정의된 것과 같다. 전형적으로, 치환기는 -ORd', =O, -NRd'Rd'', -할로, OC(O)Rd', -CO2Rd', -C(O)NRd'Rd'', -OC(O)NRd'Rd'', -NRd''C(O)Rd', -NRd''CO2Rd', -NRd'''SO2NRd'Rd'', -SO2Rd', -SO2NRd'Rd'', -NRd''SO2Rd', -CN 및 -NO2로부터 선택될 수 있다.
유사하게는, 아릴 및 헤테로아릴기에 대한 치환기는 다양하며, 0 내지 방향족 고리 시스템에서 이용가능한 원자가(open valencies)의 총 수까지의 수로, -할로, -ORe', -OC(O)Re', -NRe'Re'', -SRe', -Re', -CN, -NO2, -CO2Re', -C(O)NRe'Re'', -C(O)Re', -OC(O)NRe'Re'', -NRe''C(O)Re', -NRe''CO2Re', -NRe'''C(O)NRe'Re'', -NRe'''SO2NRe'Re'', -NHC(NH2)=NH, -NRe'C(NH2)=NH, -NH-C(NH2)=NRe', -S(O)Re', -SO2Re', -SO2NRe'Re'', -NRe''SO2Re', -N3, -CH(Ph)2, 퍼플루오로알콕시(perfluoroalkoxy) 및 퍼플루오로(C1-C4)알킬(perfluoro(C1-C4)alkyl)로부터 선택된다.
Re', Re'' 및 Re'''은 독립적으로 수소, 비치환된 (C1-C8)알킬, 비치환된 헤테로(C1-C8)알킬, 비치환된 아릴, 비치환된 헤테로아릴, 비치환된 아릴(C1-C4)알킬 및 비치환된 아릴옥시(C1-C4)알킬로부터 선택된다. 전형적으로, 아릴 또는 헤테로아릴기는 본 발명에 예시된 두 개 또는 그보다 적은 치환기를 가지는 기와 함께 0 내지 3개의 치환기를 가질 것이다. 본 발명의 일 구현에서, 아릴 또는 헤테로아릴기는 비치환되거나 1치환될 것이다. 다른 구현에서, 아릴 또는 헤테로아릴기는 비치환될 것이다.
본원에 기재된 것과 같은 아릴 또는 헤테로아릴기에서 아릴 또는 헤테로아릴 고리의 근접한 원자에 있는 치환기 중 2개는 선택적으로 일반식 -T-C(O)-(CH2)q-U-의 치환기로 치환될 수 있으며, 여기에서 T 및 U는 독립적으로 -NH-, -O-, -CH2- 또는 단일 결합이고, q는 0 내지 2의 정수이다. 대안적으로, 아릴 또는 헤테로아릴 고리의 근접한 원자에 있는 치환기 중 2개는 선택적으로 일반식 -J-(CH2)r-K-의 치환기로 치환될 수 있으며, 여기에서 J 및 K는 독립적으로 -CH2-, -O-, -NH-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2NRf'- 또는 이중결합이고, r은 1 내지 3의 정수이다. 이렇게 형성된 새로운 고리의 단일결합 중 하나는 선택적으로 이중 결합으로 치환될 수 있다. 대안적으로, 아릴 또는 헤테로아릴 고리의 근접한 원자에 있는 치환기 중 2개는 선택적으로 일반식 -(CH2)s-X-(CH2)t-로 치환될 수 있으며, 여기에서 s 및 t는 독립적으로 0 내지 3의 정수이고, X는 -O-, -NRf', -S-, -S(O)-, -S(O)2- 또는 -S(O)2NRa'-이다. -NRf'- 및 -S(O)2NRf'에서 치환기 Rf'는 수소 또는 비치환된 (C1-C6)알킬로부터 선택된다.
"안정한 화합물(stable compound)" 및 "안정한 구조(stable structure)"는 반응 혼합물로부터 유용한 정도의 순도로 분리하는 것과 효과적인 치료제로 제형화하는 것을 충분히 견디는 화합물을 나타낸다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "치료학적 유효량(therapeutically effective amount)"은 일반적으로 예방되고, 감소되고 또는 치료될 본원에 기재된 것과 같은 적어도 하나의 질병의 증상을 완화하는데 필요한 양을 의미한다. 상기 문구 "치료학적 유효량"은 본 발명의 GSNOR 억제제와 관련이 있기 때문에 그런 치료가 필요한 다수의 피험자들에게 GSNOR 억제제가 투여되었을 때 특정 약물학적 반응을 제공하는 GSNOR 억제제의 투약량을 의미할 것이다. 비록 그런 투약량이 당업자에게 치료학적으로 유효한 양으로 간주된다 할지라도, 특별한 사례에서 특정 피험자에게 투여된 치료학적 유효량의 GSNOR 억제제가 본원에 기재된 질환/질병을 치료하는데 언제나 효과적이라고 할 수는 없을 것이라는 점은 강조되어야 한다.
용어 "생물학적 샘플(biological sample)"은 혈액(blood)(예를 들어, 혈청, 혈장 또는 전혈), 소변(urine), 침(saliva), 땀(sweat), 모유(breast milk), 질 분비물(vaginal secretions), 정액(semen), 모공(hair follicles), 피부(skin), 치아(teeth), 뼈(bones), 손톱(nails) 또는 다른 분비물, 체액(body fluids), 조직(tissues) 또는 세포를 포함하나, 이로 제한되는 것은 아니다. 본 발명에 따르면, 생물학적 샘플에서 GSNOR의 농도는 미국 특허출원 공개번호 제2005/0014697호에 기재된 방법에 의해 측정될 수 있다.
D. 약제학적 조성물
본 발명은 적어도 하나의 본원에 기재된 본 발명의 화합물 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. 적절한 담체는 본원에 참조문헌으로서 통합되어 있는 리핀콧 윌리암스 & 윌킨스에 의해 공개된 "레밍턴: 과학 및 실습, 20판"에 기재되어 있다(Remington: The Science and Practice, Twentieth Edition," published by Lippincott Williams & Wilkins). 본 발명에 따른 약제학적 조성물은 또한 하나 또는 그 이상의 비-발명(non-inventive) 화합물 활성제를 포함할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 본원에 기재된 신규한 화합물을 포함할 수 있고, 상기 약제학적 조성물은 이전에 GSNOR 억제 활성을 가지는 것으로 알려지지 않은 공지의 화합물 또는 그것의 조합을 포함할 수 있다.
본 발명의 화합물은 주사가능한 투약 형태(injectable dosage forms), 액체 분산(liquid dispersions), 겔(gels), 에어로졸(aerosols), 연고(ointments), 크림(creams), 감압하에 동결건조된 제형(lyophilized formulations), 건조 파우더(dry powders), 정제(tablets), 캡슐(capsules), 제어 방출 제형(controlled release formulations), 박동성 방출 제형(pulsatile release formulations), 혼합 즉시 방출 및 제어 방출 제형(mixed immediate release and controlled release formulations) 등을 포함하나 이로 제한되지는 않는 임의의 약제학적으로 허용가능한 투약 형태로 이용될 수 있다.
특히, 본원에 기재된 본 발명의 화합물은 (a) 경구(oral), 폐(pulmonary), 동맥내(intra-arterial), 척추강내(intrathecal), 관절내(intra-articular), 직장내(rectal), 안내(ophthalmic), 결장내(colonic), 비경구(parenteral), 낭내(intracisternal), 질내(intravaginal), 복강내(intraperitoneal), 국부(local), 구강(buccal), 비강(nasal) 및 국소(topical) 투여로 이루어지는 군으로부터 선택되는 투여를 위하여; (b) 액체분산, 겔, 에어로졸, 연고, 크림, 정제, 샤셋(sachets) 및 캡슐로 이루어지는 군으로부터 선택되는 투약 형태로; (c) 감압하에 동결건조된 제형, 건조 분말, 고속 용해 제형(fast melt formulations), 제어 방출 제형, 지연방출 제형(delayed release formulations), 지속방출 제형(extended release formulations), 박동성 방출 제형 및 혼합 즉시 방출 및 제어 방출 제형으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 투약 형태로; 또는 (d) 그것들의 임의의 조합으로 제형화될 수 있다.
기도 감염에 대하여, 높은 국부 농도를 달성하기 위하여 흡입 제형이 사용될 수 있다. 흡입에 적절한 제형은 상하기도 세균 감염을 치료하기 위하여 감염된 환자의 기관지내 또는 비강 안으로 흡입기(inhaler) 또는 네블라이저(nebulizer)에 의해 분산될 수 있는 건조 파우더 또는 에어졸화되거나 증발된 액체, 분산 또는 현탁액을 포함한다.
비경구, 피부 또는 피하 적용을 위해 사용된 용액 또는 현탁액은 하나 또는 그 이상의 하기 성분들을 포함할 수 있다: (1) 주사용수(water for injection), 식염수(saline solution), 고정유(fixed oils), 폴리에틸렌 글리콜(polyethylene glycols), 글리세린(glycerine), 프로필렌 글리콜(propylene glycol) 또는 다른 합성 용매와 같은 멸균 희석제; (2) 벤질 알코올(benzyl alcohol) 또는 메틸 파라벤(methyl parabens)과 같은 항균제; (3) 아스코르브산(ascorbic acid) 또는 소디움 비설파이트(sodium bisulfite)와 같은 항산화제; (4) 에틸렌디아민테트라아세트산(ethylenediaminetetraacetic acid)와 같은 킬레이트제; (5) 아세테이트(acetates), 시트레이트(citrates) 또는 포스페이트(phosphates)와 같은 버퍼; 및 (6) 소디움 클로라이드(sodium chloride) 또는 덱스트로오스(dextrose)와 같은 장력(tonicity) 조절용 시약. pH는 염산(hydrochloric acid) 또는 수산화나트륨(sodium hydroxide)과 같은 산 또는 염기를 사용하여 조정될 수 있다. 비경구 제제는 앰플(ampoules), 1회용 주사기(disposable syringes), 또는 유리 또는 플라스틱으로 만들어진 주사액병(multiple dose vial)에 담길 수 있다.
주사용으로 사용하기에 적합한 약제학적 조성물은 (수용성인 경우) 멸균 수용액 또는 분산 및 멸균 주사용액 또는 분산의 즉석제조를 위한 멸균 파우더를 포함할 수 있다. 정맥 내 투여를 위한 적절한 담체는 생리학적 식염수(physiological saline), 정균수(bacteriostatic water), 크레모포 이엘(Cremophor EL; BASF, Parsippany, N.J.) 또는 인산완충식염수(phosphate buffered saline; PBS)를 포함한다. 모든 경우에 있어서, 조성물은 멸균되어야만 하며, 쉽게 주사가능할 정도의 유동체여야만 한다. 약제학적 조성물은 제조 및 저장의 조건하에 안정하여야만 하며, 세균 및 곰팡이와 같은 미생물의 오염 작용에 대하여 보호되어야만 한다.
담체는 예를 들어, 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액상 폴리에틸렌 글리콜 등) 및 그것들의 적절한 혼합물을 포함하는 용매 또는 분산매(dispersion medium)일 수 있다. 예를 들어, 레시틴(lecithin)과 같은 코팅제의 사용에 의하여, 분산의 경우에 있어서 요구되는 입자 크기의 유지에 의하여, 그리고 계면활성제의 사용에 의하여 적절한 유동성(fluidity)이 유지될 수 있다. 미생물 작용의 예방은 예를 들어, 파라벤(parabens), 클로로부탄올(chlorobutanol), 페놀(phenol), 아스코르브산(ascorbic acid), 티메로살(thimerosal) 등의 다양한 항균제 및 항진균제에 의하여 달성될 수 있다. 많은 경우에 있어서, 조성물 내에 예를 들어, 당(sugars)과 같은 등장화제(isotonic agents), 만니톨(manitol) 또는 소르비톨(sorbitol)과 같은 폴리알코올(polyalcohls) 및 소디움 클로라이드와 같은 무기염을 포함하는 것이 바람직할 것이다. 주사용 조성물의 지속적인 흡수는 예를 들어, 알루미늄 모노스테아레이트(aluminum monostearate) 및 젤라틴(gelatin)과 같은 흡수를 지연하는 시약을 조성물 내에 포함시킴으로써 이루어질 수 있다.
멸균 주사용액은 상기 열거된 성분 하나 또는 조합과 함께 적절한 용매에 필요한 양으로 활성제를 포함한 후 필요하다면, 그 후 멸균 여과하여 제조될 수 있다. 일반적으로, 분산은 기본적인 분산매 또는 임의의 다른 필요한 성분을 포함하는 멸균 비히클 내로 적어도 하나의 본 발명의 화합물을 포함시킴으로써 제조될 수 있다. 멸균 주사용액의 제조를 위한 멸균 파우더의 경우에 있어서, 제조의 예시적 방법은 그것의 미리 멸균 여과된 용액에 임의의 추가적으로 원하는 성분을 더하여 본 발명의 화합물의 파우더를 만들어내는, 진공 건조(vacuum drying) 및 동결 건조(freeze-drying)를 포함한다.
경구 조성물은 일반적으로 비활성 희석제 또는 식용 담체를 포함한다. 그것들은 예를 들어, 젤라틴 캡슐 내에 담기거나 정제로 압축될 수 있다. 경구 치료 투여를 목적으로, 본 발명의 화합물은 첨가제와 함께 포함될 수 있으며, 정제, 트로키(troches) 또는 캡슐의 형태로 사용될 수 있다. 경구 조성물은 또한 구강 청결제로서 사용하기 위한 유체 담체(fluid carrier)를 사용하여 제조될 수 있으며, 여기에서 유체 담체 내의 화합물은 경구적으로 적용되고, 우물거리고 뱉어내거나 삼켜진다. 약제학적으로 적합한 결합제 및/또는 보조 물질이 조성물의 일부분으로서 포함될 수 있다.
흡입에 의한 투여를 위하여, 화합물은 적절한 압축가스, 예를 들어 이산화탄소, 연무상 액체(nebulized liquid)를 포함하는 압축된 용기 또는 디스펜서로부터 에어로졸 스프레이의 형태로 또는 적절한 기구로부터 건조 파우더의 형태로 운반된다. 점막 또는 경피 투여를 위하여, 장벽을 투과하는데 적절한 침투제(penetrants)가 제형에 사용된다. 그러한 침투제는 일반적으로 당업계에 공지되어 있으며, 예를 들어, 점막 투여를 위한 세제(detergents), 담즙산염(bile salts) 및 푸시딘산 유도체(fusidic acid derivatives)를 포함한다. 점막 투여는 비강 스프레이 또는 좌약의 사용을 통하여 달성될 수 있다. 경피 투여를 위하여, 활성제는 일반적으로 당업계에 알려진 것으로서 연고(ointments, salves), 젤 또는 크림으로 제형화될 수 있다. 시약 또한 직장 운반을 위하여 좌약(예를 들어, 코코아 버터 및 다른 글리세리드와 같은 기존의 좌약 베이스와 함께) 또는 정체 관장(retention enema)의 형태로 제조될 수 있다.
일 구현에서, 본 발명의 화합물은 신체로부터의 빠른 제거에 대하여 보호될 수 있는 담체와 함께 제조된다. 예를 들어, 이식물(implants) 및 마이크로캡슐 운반 시스템(microencapsulated delivery systems)을 포함하는, 제어 방출 제형(controlled release formulation)이 사용될 수 있다. 에틸렌 비닐 아세테이트(ethylene vinyl acetate), 폴리안하이드리드(polyanhydrides), 폴리글리콜산(polyglycolic acid), 콜라겐(collagen), 폴리오르토에스테르(polyorthoesters) 및 폴리락산(polylactic acid)과 같은 생분해성(biodegradable), 생체적합성(biocompatible)의 폴리머가 사용될 수 있다. 그런 제형의 제조를 위한 방법들은 당업자들에게 명백할 것이다.
(바이러스 항원에 대한 단일클론 항체와 함께 감염된 세포를 표적으로 하는 리포좀을 포함하는) 리포좀성 현탁액(liposomal suspension) 또한 약제학적으로 허용가능한 담체로서 사용될 수 있다. 이것들은 예를 들어, U.S. Pat. No. 4,522,811에 개시되어 있는 것과 같은, 당업자들에게 잘 알려진 방법에 따라 제조될 수 있다.
또한, 본 발명의 화합물의 현탁액은 적절하게 유성의 주사용 현탁액으로서 제조될 수 있다. 적절한 친유성 용매 또는 비히클은 참기름(sesame oil)과 같은 지방산 오일(fatty oils) 또는 에틸 올리에이트(ethyl oleate), 트리글리세리드(triglycerides) 또는 리포좀과 같은 합성 지방산 에스테르(synthetic fatty acid ester)를 포함한다. 비지질 폴리양이온성 아미노 폴리머(non-lipid polycationic amino polymers) 또한 운반을 위해 사용될 수 있다. 선택적으로, 현탁액은 또한 적절한 안정화제 또는 화합물의 용해도를 증가시키고 고농도 용액의 제조를 가능하게 하는 물질을 포함할 수 있다.
투여 및 함량의 균일성에 용이한 투약 단위 형태로 경구 또는 비경구 조성물을 제형화하는 것이 특히 유익하다. 본원에 사용된 것과 같은 투약 단위 형태는 치료될 피험자를 위한 단일 투약(unitary dosage)에 적합한 물리적으로 별개의 단위를 말하며; 각 단위는 요구되는 약제학적 담체와 함께 원하는 치료학적 효과를 제공하도록 계산되어진 미리 결정된 양의 본 발명의 화합물을 포함한다. 본 발명의 투약 단위 형태에 대한 상세한 사항은 본 발명의 화합물의 고유한 특성 및 달성될 특정 치료 효과 및 개인의 치료를 위하여 그런 활성제를 조제하는 것의 당업계에서의 근본적인 한계에 영향을 받으며 직접적으로 의존한다.
적어도 하나의 본 발명의 화합물을 포함하는 본 발명에 따른 약제학적 조성물은 하나 또는 그 이상의 약제학적 첨가제를 포함할 수 있다. 그러한 첨가제의 예는 결합제(binding agents), 충전제(filling agents), 윤활제(lubricating agents), 현탁제(suspending agents), 감미료(sweeteners), 착향제(flavoring agents), 방부제(preservatives), 완충액(buffers), 습윤제(wetting agents), 붕괴제(disintegrants), 발포제(effervescent agents) 및 다른 첨가제를 포함하나, 이로 제한되는 것은 아니다. 이와 같은 첨가제들은 당업계에 공지되어 있다. 예시적인 첨가제는 (1) 다양한 셀룰로오스(cellulose) 및 가교결합된 폴리비닐피롤리돈(cross-linked polyvinylpyrrolidone), 아비셀?(Avicel?) PH101 및 아비셀? PH102와 같은 미세결정 셀룰로오스(microcrystalline cellulose), 규화 미세결정 셀룰로오스(silicified microcrystalline cellulose)(ProSolv SMCCTM), 검 트래거캔스(tragacanth) 및 젤라틴(gelatin)을 포함하는 결합제; (2) 다양한 전분(starches), 락토오스(lactose), 락토오스 모노하이드레이트(lactose monohydrate) 및 락토오스 무수물(lactose anhydrous)과 같은 충전제; (3) 알긴산(alginic acid), 프리모겔(Primogel), 옥수수 전분(corn starch), 약하게 가교결합된 폴리비닐피롤리돈(lightly crosslinked polyvinyl pyrrolidone), 감자 전분(potato starch), 옥수수 전분(maize starch) 및 변성 전분(modified starches), 크로스카멜로스 소디움(croscarmellose sodium), 크로스-포비돈(cross-povidone), 소디움 전분 글리콜레이트(sodium starch glycolate) 및 그것들의 혼합물과 같은 붕괴제; (4) 마그네슘 스테아레이트(magnesium stearate), 에어로실?(Aerosil?) 200과 같은 콜로이드성 실리콘 디옥사이드(colloidal silicon dioxide), 탈크(talc), 스테아르산(stearic acid), 칼슘 스테아레이트(calcium stearate) 및 실리카 겔(silica gel)을 포함하는, 압축될 파우더의 분산성에 작용하는 약제를 포함하는 윤활제; (5) 콜로이드성 실리콘 디옥사이드와 같은 활택제(glidant); (6) 포타슘 소르베이트(potassium sorbate), 메틸파라벤(methylparaben), 프로필파라벤(propylparaben), 벤조산(benzoic acid) 및 그것의 염, 부틸파라벤(butylparaben)과 같은 파라하이드록시벤조산(parahydroxybenzoic acid)의 다른 에스테르, 에틸 알코올(ethyl alcohol) 또는 벤질 알코올(benzyl alcohol)과 같은 알코올(alcohols), 페놀(phenol)과 같은 페놀성 화합물(phenolic compound) 또는 벤잘코늄 클로라이드(benzalkonium chloride)과 같은 4차 화합물과 같은 방부제; (7) 미세결정 셀룰로오스(microcrysalline cellulose), 락토오스(lactose), 2염기성 칼슘 포스페이트(dibasic calcium phosphate), 단당류(saccharides), 및/또는 앞서 언급한 것들의 임의의 혼합물과 같은 약제학적으로 허용가능한 비활성 충전제와 같은 희석제; 희석제의 예는 아비셀?(Avicel?) PH101 및 아비셀? PH102, 락토오스 모노하이드레이트(lactose monohydrate), 락토오스 무수물(lactose anhydrous) 및 파마토오스?(Pharmatose?) DCL21과 같은 미세결정 셀룰로오스; 엠컴프레스?(Emcompress?)와 같은 2염기성 칼슘 포스페이트; 만니톨(mannitol); 전분(starch); 소르비톨(sorbitol); 수크로오스(sucrose) 및 글루코오스(glucose)를 포함하고; (8) 수크로오스(sucrose), 사카린 수크로오스(saccharin sucrose), 자일리톨(xylitol), 소디움 사카린(sodium saccharin), 시클라메이트(cyclamate), 아스파탐(aspartame) 및 아세설팜(acesulfame)과 같은 임의의 천연 또는 인공 감미료를 포함하는 감미제; (9) 페퍼민트(peppermint), 메틸 살리실레이트(methyl salicylate), 오렌지향(orange flavoring), 마그나스위트?(Magnasweet?)(MAFCO의 상표), 버블검향(bubble gum flavor), 과일향(fruit flavors) 등과 같은 착향제; 및 (10) 유기산(organic acid) 및 카보네이트(carbonate) 또는 바이카보네이트(bicarbonate)와 같은 발포성 결합(effervescent couples)을 포함하는 발포제를 포함한다. 적절한 유기산은 예를 들어, 시트르산(citric acid), 타르타르산(tartaric acid), 말산(malic acid), 푸마르산(fumaric acid), 아디프산(adipic acid), 숙신산(succinic acid), 및 알긴산(alginic acid) 및 무수물(anhydrides) 및 산성염(acid salt)을 포함한다. 적절한 카보네이트 및 바이카보네이트는 예를 들어, 소디움 카보네이트(sodium carbonate), 소디움 바이카보네이트(sodium bicarbonate), 포타슘 카보네이트(potassium carbonate), 포타슘 바이카보네이트(potassium bicarbonate), 마그네슘 카보네이트(magnesium carbonate), 소디움 글리신 카보네이트(sodium glycine carbonate), L-리신 카보네이트(L-lysine carbonate) 및 아르기닌 카보네이트(arginine carbonate)를 포함한다. 대안적으로, 소디움 바이카보네이트 성분의 발포성 결합만이 존재할 수 있다.
E. 본 발명의 조성물을 포함하는 키트
본 발명은 또한 본 발명의 조성물을 포함하는 키트를 포함한다. 이와 같은 키트는 예를 들어, (1) 적어도 하나의 본 발명의 화합물; 및 (2) 용매 또는 용액과 같은 적어도 하나의 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함할 수 있다. 부가적인 키트 성분은 예를 들어, 선택적으로 (1) 안정화제, 완충액 등과 같은 본원에 나타낸 임의의 약제학적으로 허용가능한 첨가제; (2) 키트 성분을 유지하고/하거나 혼합하기 위한 적어도 하나의 용기, 바이알 또는 유사한 기구; 및 (3) 흡입기, 분무기, 주사기 등과 같은 운반 기구를 포함할 수 있다.
F. 본 발명의 화합물을 제조하는 방법
본 발명의 화합물은 공지의 합성 방법을 사용하거나 공지의 합성 방법의 변경을 통하여 쉽게 합성될 수 있다. 당업자들에 의해 쉽게 터득될 수 있으므로, 하기에 기재된 방법들은 다양한 치환기를 가지는 유사체의 합성을 가능하게 한다. 예시적 합성 방법을 하기 실시예 부분에 기재한다.
필요하다면, 당업계에 공지된 통상의 방법에 의해 거울상 이성질체 및 부분입체 이성질체의 추가 정제 및 분리가 달성될 수 있다. 따라서, 예를 들면, 화합물의 거울상 이성질체의 분리는 키랄 HPLC 및 관련 크로마토그래피 기술의 사용에 의해 달성될 수 있다. 부분입체 이성질체는 유사하게 분리될 수 있다. 그러나, 어떤 예에서, 부분입체 이성질체는 예를 들어 제어된 침전 또는 결정화에 의해 물리적으로 간단하게 분리될 수 있다.
본원에 규정된 것과 같이 수행될 때, 본 발명의 공정은 당업계에서 통상적으로 이용가능한 온도에서 전통적으로 수행될 수 있다. 일 구현에서, 상기 공정은 약 25℃ 내지 약 110℃ 범위의 온도에서 수행된다. 다른 구현에서, 상기 온도는 약 40℃ 내지 약 100℃의 범위이다. 여전히 다른 구현에서, 상기 온도는 약 50℃ 내지 약 95℃의 범위이다.
염기를 필요로 하는 합성 단계는 임의의 편리한 유기 염기(organic base) 또는 무기 염기(inorganic base)를 사용하여 수행된다. 전형적으로, 상기 염기는 친핵성(nucleophilic)이다. 따라서, 일 구현에서, 상기 염기는 카보네이트(carbonates), 포스페이트(phosphates), 하이드록시드(hydroxides), 알콕시드(alkoxides), 디실라잔(disilazane)의 염 및 3차 아민(tertiary amines)로부터 선택된다.
본원에 기재된 것과 같이 수행될 때, 본 발명의 공정은 반응물질의 특성 및 양과 반응 온도에 따라 실질적으로 몇 분 후 내지 몇 시간 후에 완료될 수 있다. 반응이 실질적으로 완료되었을 때의 측정은 전통적으로 예를 들어, HPLC, LCMS, TLC 및 1H NMR과 같은 당업계에 공지된 일반 기술에 의해 평가될 수 있다.
G. 치료 방법
본 발명은 하나 또는 그 이상의 개시된 화합물의 사용을 통하여 질병을 예방하거나 치료하는(예를 들어, 하나 또는 그 이상의 증상의 개선) 방법을 포함한다. 상기 방법은 치료학적 유효량의 본 발명의 화합물을 그것을 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 본 발명의 조성물은 또한 예방 치료를 위해 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 치료 방법에 사용된 본 발명의 화합물은 (1) 본원에 기재된 신규한 화합물, 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염, 그것의 프로드러그, 그것의 대사 산물 또는 그것의 입체이성질체; (2) 본 발명 이전에 공지된 화합물이지만, 그 화합물이 GSNOR 억제제라는 것이 알려져 있지 않은 화합물, 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염, 그것의 프로드러그, 그것의 대사 산물 또는 그것의 입체이성질체; 또는 (3) 본 발명 이전에 공지된 화합물이고 그 화합물이 GSNOR 억제제라는 것이 알려져 있으나, 그 화합물이 본원에 기재된 치료 방법에 유용하다는 것이 알려져 있지 않은 화합물, 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염, 그것의 프로드러그, 그것의 대사 산물 또는 그것의 입체이성질체일 수 있다.
환자는 고양이, 개, 말, 돼지 및 소를 포함하는 임의의 동물, 가축, 애완동물 또는 야생동물을 포함할 수 있으나 이로 제한되는 것은 아니며, 바람직하게는 인간 환자이다. 본원에 사용된 것으로서, 용어 환자(patient) 및 피험자는(subject) 상호교환적으로 사용될 수 있다.
본원에 기재된 것으로서, "치료하는(treating)"은 질병, 질환 또는 장애를 방지하는 목적을 위한 환자의 유지 및 관리를 말하며, 증상 또는 합병증의 발병을 예방하고, 증상 또는 합병증을 개선하거나, 질병, 질환 또는 장애를 없애기 위하여, 본 발명의 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 더욱 상세하게는, "치료하는"은 적어도 하나의 질병(질환) 상태의 유해한 증상 또는 효과, 질병의 진행, 질병의 병인(causative agent)(예를 들어, 세균 또는 바이러스), 또는 다른 비정상적 상태를 되돌리고, 약화시키고, 개선하고, 최소화하고, 억제하거나 중단시키는 것을 포함한다. 치료는 증상 및/또는 병리가 개선될 때까지 지속된다.
일반적으로, 투약량, 즉 치료학적 유효량은 하루에, 치료될 피험자의 체중의 1㎍/㎏ 내지 10g/㎏이고, 종종 10㎍/㎏ 내지 1g/㎏ 또는 10㎍/㎏ 내지 100㎎/㎏이다.
H. GSNOR 의 용도
유해하게 높은 레벨의 GSNOR 또는 GSNOR 활성을 가지는 피험자에서, 조절(modulation)은 예를 들어, GSNOR 기능을 파괴하거나 하향조절, 또는 GSNOR 레벨을 감소시키는 하나 또는 그 이상의 개시된 화합물을 투여함으로써 달성될 수 있다. 이 화합물들은 단독 또는 본원에 상세히 기재된 것과 같은 다른 약제와 함께, 항-GSNOR 항체 또는 항체 단편, GSNOR 안티센스(antisense), iRNA 또는 작은 분자(small molecules)와 같은 다른 GSNOR 억제 약제, 또는 다른 억제제와 함께 투여될 수 있다.
본 발명은 NO 공여체 치료에 의해 개선되는 질병을 앓는 피험자를 치료하는 방법을 제공한다. 이와 같은 방법은 치료학적 유효량의 GSNOR 억제제를 피험자에게 투여하는 것을 포함한다.
상기 질병은 폐 및 기도에서의 저산소혈증(hypoxemia) 및/또는 근육 수축(muscle constriction)과 연관된 폐기관 장애(pulmonary disorders) 및/또는 폐 감염 및/또는 폐 염증 및/또는 폐 손상(예를 들어, 폐고혈압(pulmonary hypertension), ARDS, 천식(asthma), 폐렴(pneumonia), 폐섬유증(pulmonary fibrosis)/간질성 폐질환(interstitial lung disease), 낭포성 섬유증(cystic fibrosis), COPD); 심혈관 질환(cardiovascular disease) 및 심장질환(heart disease)(예를 들어, 고혈압(hypertension), 허혈성 관동맥 증후군(ischemic coronary syndrome), 아테롬성 동맥경화증(atherosclerosis), 심부전(heart failure), 녹내장(glaucoma)); 혈관신생(angiogenesis)을 특징으로 하는 질병(예를 들어, 관상동맥 질환(coronary artery disease)); 혈전증(thrombosis) 발생 위험이 있는 질환; 재협착(restenosis) 발생 위험이 있는 질환; 감염 질병(예를 들어, AIDS 관련 치매(AIDS related dementia), 염증성 장 질환(inflammatory bowel disease; IBD), 크론병(Crohn's disease), 대장염(colitis) 및 건선(psoriasis)); 기능성 대장 장애(functional bowel disorders)(예를 들어, 과민성 대장 증후군(irritable bowel syndrome; IBS)); 아폽토시스 발생 위험이 있는 질병(예를 들어, 심부전(heart failure), 아테롬성 동맥경화증(atherosclerosis), 퇴행성 신경질환(degenerative neurologic disorders), 관절염(arthritis) 및 간 손상(허혈성 또는 알코올성)); 발기부전(impotence); 수면 무호흡증(sleep apnea); 당뇨성 상처치료(diabetic wound healing); 피부 감염(cutaneous infections); 건선의 치료; 음식에 대한 욕구에 반응하여 먹음으로써 야기되는 비만(obesity); 뇌졸중(stroke); 재관류 손상(reperfusion injury)(예를 들어, 심장 또는 폐에서의 외상성 근육 손상(traumatic muscle injury) 또는 좌상(crush injury)); 및 차후의 허혈성 사건에 대한 NO 보호를 위한 심장 또는 뇌의 전조건 형성(preconditioning)가 유익한 질병, 중추신경계(central nervous system; CNS) 질병(예를 들어, 불안(anxiety), 우울증(depression), 정신병(psychosis) 및 정신분열증(schizophrenia)); 및 세균에 의해 야기되는 감염(예를 들어, 그 중에서도 결핵(tuberculosis), 클로스트리디움 디피실레 감염(C. difficile infection))을 포함할 수 있다.
일 구현에서, 본 발명의 화합물 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그것의 프로드러그, 입체이성질체 또는 대사 산물은 NO 공여체와 함께 투여될 수 있다. NO 공여체는 산화질소 또는 관련 산화환원 종(redox species)를 제공하며, 더욱 일반적으로는 예를 들어, 혈관이완(vasorelaxation) 또는 수용체 단백질, 예를 들어 라스 단백질(ras protein), 아드레날린성 수용체(adrenergic receptor), NFκB의 자극(stimulation) 또는 억제와 같은 산화질소와 밀접한 관계가 있는 산화질소의 생물활성을 제공한다. 본원에 유용한, S-니트로소(S-nitroso), O-니트로소(O-nitroso), C-니트로소(C-nitroso) 및 N-니트로소(N-nitroso) 화합물을 및 그것들의 니트로 유도체 및 금속 NO 복합체를 포함하지만 다른 NO 생물활성을 만들어내는 화합물은 제외한 NO 공여체는 본원에 참조로서 통합되어 있는 필리쉬 등에 기재되어 있다("Methods in Nitric Oxide Research", Feelisch et al. eds., pages 71-115(J.S., John Wiley & Sons, New York, 1996)). 니트로소가 본원에 유용한 3차 탄소에 결합된 C-니트로소 화합물인 NO 공여체는 U.S. Pat. No. 6,359,182 및 WO 02/34705에 기재된 것들을 포함한다. 본원에 유용한 S-니트로소티올을 포함하는 S-니트로소 화합물의 예는 예를 들어, S-니트로소글루타치온(S-nitrosoglutathione), S-니트로소-N-아세틸페니실라민(S-nitroso-N-acetylpenicillamine), S-니트로소-시스테인(S-nitroso-cysteine) 및 그것의 에틸 에스테르, S-니트로소 시스테이닐 글리신(S-nitroso cysteinyl glycine), S-니트로소-감마-메틸-L-호모시스테인(S-nitroso-gamma-methyl-L-homocysteine), S-니트로소-L-호모시스테인(S-nitroso-L-homocysteine), S-니트로소-감마-티오-L-루이신(S-nitroso-gamma-thio-L-leucine), S-니트로소-델타-티오-L-루이신(S-nitroso-delta-thio-L-leucine) 및 S-니트로소알부민(S-nitrosoalbumin)을 포함한다. 본원에 유용한 다른 NO 공여체의 예는 소디움 니트로프루시드(sodium nitroprusside)(nipride), 에틸 나이트라이트(ethyl nitrite), 이소소르비드(isosorbide), 니트로글리세린(nitroglycerin), 몰시도민(molsidomine)인 SIN 1, 프록사민(furoxamines), N-하이드록시(N-니트록사민)(N-hydroxy(N-nitrosamine)) 및 NO로 포화된 퍼플루오로카본(perfluorocarbon) 또는 소수성 NO 공여체를 포함한다.
공지의 NO 방출제(NO releaser)인 암로디핀(amlodipine)의 R(+) 거울상 이성질체와 GSNOR 억제제의 조합 또한 본 발명의 구현이다.
본 발명은 또한 비정상적으로 증식하는 세포로 고통받는 피험자를 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 치료학적 유효량의 GSNOR 억제제를 상기 피험자에게 투여하는 것을 포함한다. GSNOR의 억제제는 약제학적으로 허용가능한 담체와 함께, 상기에 정의된 것과 같은 화합물 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그것의 프로드러그 또는 대사 산물 또는 부분입체 이성질체이다. 치료는 증상 및/또는 병리를 개선할 때까지 지속된다.
다른 구현에서, 비정상적으로 증식하는 세포는 비정상적으로 증식하는 미생물일 수 있다. 관련 미생물은 질산화적 스트레스로부터 미생물을 보호하기 위하여 GSNOR을 발현하거나, 미생물에 감염된 숙주 세포가 효소를 발현하여 질산화적 스트레스로부터 미생물을 보호하는 그런 종류의 미생물일 수 있다. 용어 "비정상적으로 증식하는 미생물(pathologically proliferating microbes)"은 본원에서 병원성 세균(pathologic bacteria), 병원성 바이러스(pathologic viruses), 병원성 클라미디아(pathologic Chlamydia), 병원성 원생동물(pathologic protozoa), 병원성 리케치아(pathologic Richettsia), 병원성 진균(pathologic fungi) 및 병원성 마이코플라스마(pathologic mycoplasmata)를 포함하나 이로 제한되지는 않는 병원성 미생물을 의미하는 것으로 사용된다. 더욱 상세하게는, 해당되는 미생물은 U.S. Pat. No. 6,057,367의 컬럼 11 및 12에 기재되어 있다. 용어 "병원성 미생물에 감염된 숙주 세포(host cells infected with pathologic microbes)"는 병원성 바이러스에 감염된 포유동물의 세포뿐만 아니라, 세포 내 세균 또는 원생동물, 예를 들어 마이코박테리움 투버큘로시스(Mycobacterium tuberculosis), 마이코박테리움 레프래(Mycobacterium leprae)(나병(leprosy)) 또는 살모넬라 티프(Salmonella typhi)(장티푸스(typhoid fever))를 포함하는 대식세포(macrophage)를 포함하는 포유동물의 세포를 포함한다.
다른 구현에서, 비정상적으로 증식하는 세포는 병원성 기생충일 수 있다. 용어 "병원성 기생충(pathologic helminths)"은 본원에서 병원성 선충류(pathologic nematodes), 병원성 디스토마류(pathologic trematodes) 및 병원성 촌충류(pathologic cestodes)를 말하는 것으로 사용된다. 더욱 상세하게는, 해당되는 기생충은 U.S. Pat. No. 6,057,367의 컬럼 12에 기재되어 있다.
다른 구현에서, 비정상적으로 증식하는 세포는 비정상적으로 증식하는 포유동물 세포일 수 있다. 본원에 사용된 것으로서 용어 "비정상적으로 증식하는 포유동물 세포(pathologically proliferating mammalian cells)"는 상기 포유동물에서 그 크기 또는 수가 증가하여 포유동물 또는 그 기관에 해로운 영향을 끼치는 포유동물의 세포를 의미한다. 상기 용어는 예를 들어, 재협착(restenosis)을 야기하는 비정상적으로 증식하거나 커지는 세포, 전립선 비대증(benign prostatic hypertrophy)을 야기하는 비정상적으로 증식하거나 커지는 세포, 심근비대(myocardial hypertrophy)를 야기하는 비정상적으로 증식하거나 커지는 세포 및 관절염(arthritis)에서 활막세포(synovial cell)와 같은 염증성 부위에서 증식하는 세포 또는 세포 증식성 질환(cell proliferation disorder)과 관련된 세포를 포함한다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "세포 증식성 질환(cell proliferative disorder)"은 예를 들어, 암성(cancerous) 또는 비암성(non-cancerous)일 수 있는 원치않는 질환 또는 질병, 예를 들어 건선성 질환(psoriatic condition)의 발병을 야기할 수 있는, 세포의 성장이 조절되지 않는/않거나 비정상적인 상태를 말한다. 본원에 사용된 것으로서, 용어 "건선성 질환(psoriatic condition)"은 케라틴세포 과증식(keratinocyte hyperproliferation), 염증성 세포 침윤(inflammatory cell infiltration) 및 사이토카인 변형(cytokine alteration)을 포함하는 질환을 말한다. 세포 증식성 질환은 전암성 상태(precancerous condition) 또는 암(cancer)일 수 있다. 암은 일차암(primary cancer) 또는 전이성 암(metastatic cancer), 또는 두가지 모두일 수 있다.
본원에 사용된 것으로서, 용어 "암(cancer)"은 폐암(lung cancer), 유방암(breast cancer), 대장암(colon cancer), 난소암(ovarian cancer), 췌장암(pancreas cancer), 전립선암(prostate cancer), 선암종(adenocarcinoma), 편평상피암종(squamous carcinoma), 육종(sarcoma), 악성 뇌교종(malignant glioma), 평활근육종(leiomyosarcoma), 간암(hepatoma), 두경부암(head and neck cancer), 악성 흑색종(malignant melanoma), 비흑색종 피부암(non-melanoma skin cancers)과 같은 고형종양(solid tumors)뿐만 아니라, 백혈병(leukemia), 유아성 백혈병(childhood leukemia) 및 림프종(lymphomas), 다발성 골수종(multiple myeloma), 호지킨병(Hodgkin's disease), 림프구(lymphocytic) 및 피부(cutaneous) 유래의 림프종(lymphomas), 급성 림프구성(acute lymphoblastic), 급성 골수성(acute myelocytic) 또는 만성 골수성(chronic myelocytic) 백혈병과 같은 급성 및 만성 백혈병, 형질세포 종양(plasma cell neoplasm), 림프구성 종양(lymphoid neoplasm)과 같은 혈액암(hematologic tumors) 및/또는 악성종양(malignancies), 및 AIDS와 관련된 암을 포함한다.
건선성 질환뿐만 아니라, 본 발명의 조성물을 사용하여 치료될 수 있는 증식성 질병의 형태는 표피(epidermic) 및 유피낭포(dermoidcyst), 지방종(lipoma), 선암(adenomas), 모세혈관종(capillary hemangioma) 및 피부혈관종(cutaneous hemangioma), 림프관종(lymphangioma), 모반 병변(nevi lesions), 기형종(teratoma), 신장종(nephroma), 근섬유종(myofibromatosis), 조골성 종양(osteoblastic tumor) 및 다른 이형성 종괴(dysplastic masses) 등이다. 일 구현에서, 증식성 질병은 형성이상(dysplasias) 및 그것과 같은 종류의 장애를 포함한다.
일 구현에서, 암을 치료하는 것은 암 크기의 축소, 종양 수의 감소, 종양 성장의 지연, 원발성 종양 부의로부터 멀리 떨어져 있는 다른 조직 또는 기관으로의 전이성 병변의 감소, 환자 생존의 향상 또는 환자 삶의 질의 개선 또는 상기 언급한 것들 중 적어도 두 가지를 포함한다.
다른 구현에서, 세포 증식성 질병을 치료하는 것은 세포 증식 속도의 감소, 증식 세포 비율의 감소, 세포 증식 부위 또는 부분의 크기 축소 또는 비정상적인 외관 또는 형태를 가지는 세포의 수 또는 비율의 감소 또는 상기 언급한 것들 중 적어도 두 가지를 포함한다.
또 다른 구현에서, 본 발명의 화합물 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염, 그것의 프로드러그, 그것의 입체이성질체 또는 그것의 대사 산물은 2차 화학치료제(chemotherapeutic agent)과 함께 투여될 수 있다. 다른 구현에서, 2차 화학치료제는 타목시펜(tamoxifen), 랄록시펜(raloxifene), 아나스트로졸(anastrozole), 엑스메스탄(exemestane), 레트로졸(letrozole), 시스플라틴(cisplatin), 카르보플라틴(carboplatin), 파클리탁셀(paclitaxel), 시클로포스파미드(cyclophosphamide), 로바스타틴(lovastatin), 미노신(minosine), 젬시타빈(gemcitabine), 아라C(araC), 5-플루오로우라실(5-fluorouracil), 메토트렉세이트(methotrexate), 도세탁셀(docetaxel), 고세렐린(goserelin), 빈크리스틴(vincristin), 빈블라스틴(vinblastin), 노코다졸(nocodazole), 테니포시드(teniposide), 에토포시드(etoposide), 에포틸론(epothilone), 나벨빈(navelbine), 캄토테신(camptothecin), 다우노니비신(daunonibicin), 닥티노마이신(dactinomycin), 미토센트론(mitoxantrone), 암사크린(amsacrine), 독소루비신(doxorubicin), 에피루비신(epirubicin), 이다루비신(idarubicin), 이마타닙(imatanib), 제피티닙(gefitinib), 엘로티닙(erlotinib), 소라페닙(sorafenib), 수니티닙 말레이트(sunitinib malate), 트라스트주맙(trastuzumab), 리툭시맙(rituximab), 세툭시맙(cetuximab), 및 베바시주맙(bevacizumab)으로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
일 구현에서, 본 발명의 화합물 또는 그것의 약제학적으로 혀용가능한 염, 그것의 프로드러그, 그것의 입체이성질체 또는 그것의 대사 산물은 질산화적 또는 산화적 스트레스를 주는 약제와 함께 투여될 수 있다. 본원에서 GSNOR 억제제와의 병행치료에서 비정상적으로 증식하는 세포의 증식을 억제하기 위하여 선택적으로 질산화적 스트레스를 주는 약제 및 그것의 투여 용량 및 방법은 본원에 통합되어 있는 U.S. Pat. No. 6,057,367에 기재된 것들을 포함한다. 본원에서 GSNOR 억제제와의 병행치료에서 산화적 스트레스를 주는 추가적인 약제(즉, GSH(글루타치온)에 대한 GSSG(산화된 글루타치온) 비율 또는 NAD(P)H에 대한 NAD(P)의 비율을 증가시키거나, 티오바르비투르산 유도체(thiobarbituric acid derivatives)를 증가시키는 약제)는 표준 투여 방법과 함께 표준 투약량으로, 예를 들어, L-부티오닌-S-설폭시민(L-buthionine-S-sulfoximine; BSO), 글루타치온 리덕타아제 억제제(glutathione reductase inhibitors)(예를 들어, BCNU), 미토콘드리아성 호흡(mitochondrial respiration) 억제제 또는 탈공역제(uncoupler) 및 반응성 산소종(reactive oxygen species; ROS)을 증가시키는 약물, 예를 들어 아드리아마이신(adriamycin)을 포함한다.
GSNOR 억제제는 또한 포스포디에스테라아제 억제제(phosphodiesterase inhibitor)(예를 들어, 롤리프람(rolipram), 실로밀라스트(cilomilast), 로플루밀라스트(roflumilast), 비아그라?(Viagra?)(실데나필 시트레이트(sildenifil citrate)), 시알리스?(Cialis?)(타달라필(tadalafil)), 레비트라?(Levitra?)(바르데니필(vardenifil)), 등), β-작용제(β-agonist), 스테로이드(steroid) 또는 류코트리엔 길항제(leukotriene antagonist; LTD-4)와 함께 병용투여될 수 있다. 당업자들은 개선될 질병에 따라 적절한 치료학적 유효량을 쉽게 결정할 수 있다.
GSNOR 억제제는 β-아드레날린 작용성 신호전달(β-adrenergic signaling)을 향상시키는 것으로 사용될 수 있다. 특히, 심부전 또는 고혈압 및 천식과 같은 다른 혈관질환을 치료하거나 예방하는데 GSNOR 억제제 단독으로 또는 β-작용제와 함께 사용될 수 있다. GSNOR 억제제는 또한 평활근 이완(smooth muscle relaxation)(예를 들어, 기도 및 혈관)을 야기하는 Gs G-단백질을 강화시킴으로써 G 단백질 결합 수용체(G protein coupled receptor)를 조절하고, Gq G-단백질을 약화시킴으로써 평활근 수축(예를 들어, 기도 및 혈관에서)을 예방하는데 사용될 수 있다.
NO 공여체 치료에 의해 개선되는 질병에 고통받는 환자의 치료를 위한 치료학적 유효량은 질병에 관련된 위험에 대하여 치료되거나 보호될 질병을 개선시키는 생체 내에서 GSNOR을 억제하는 양이다. 예를 들어, 천식(asthma)에 대한 치료학적 유효량은 기관지확장에 효과적인 양(bronchodilating effective amount)이고; 낭포성 섬유증(cystic fibrosis)에 대한 치료학적 유효량은 기도 폐쇄를 개선하는데 효과적인 양(airway obstruction ameliorating effective amount)이고; ARDS에 대한 치료학적 유효량은 저산소증을 개선하는데 효과적인 양(hypoxemia ameliorating effective amount)이고; 심장 질환(heart disease)에 대한 치료학적 유효량은 협심증을 제거하는데 효과적(angina relieving effective)이거나 혈관신생을 유도하는데 효과적인(angiogenesis inducing effective) 양이고; 고혈압(hypertension)에 대한 치료학적 유효량은 혈압을 감소시키는데 효과적인 양(blood pressure reducing effective amount)이고; 허혈성 관상동맥 질환(ischemic coronary disorders)에 대한 치료학적 유효량은 혈류를 증가시키는데 효과적인 양(blood flow increasing effective amount)이고; 아테롬성 동맥경화증(atherosclerosis)에 대한 치료학적 유효량은 혈관내피세포의 기능이상을 되돌리는데 효과적인 양(endothelial dysfunction reversing effective amount)이고; 녹내장(glaucoma)에 대한 치료학적 유효량은 안내 압력을 감소시키는데 효과적인 양(intraocular pressure reducing effective amount)이고; 혈관신생을 특징으로 하는 질병에 대한 치료학적 유효량은 혈관신생을 억제하는데 효과적인 양(angiogenesis inhibiting effective amount)이괴; 혈전(thrombosis) 발생의 위험이 있는 질병에 대한 치료학적 유효량은 혈전을 예방하는데 효과적인 양(thrombosis preventing effective amount)이고; 재협착(restenosis) 발생의 위험이 있는 질병에 대한 치료학적 유효량은 재협착을 억제하는데 효과적인 양(restenosis inhibiting effective amount)이고; 만성 염증성 질환에 대한 치료학적 유효량은 염증을 감소시키는데 효과적인 양(inflammation reducing effective amount)이고; 아폽토시스(apoptosis) 발생의 위험이 있는 질병에 대한 치료학적 유효량은 아폽토시스를 방지하는데 효과적인 양(apoptosis preventing effective amount)이고; 발기부전(impotence)에 대한 치료학적 유효량은 발기하거나 유지하는데 효과적인 양(erection attaining or sustaining effective amount)이고; 비만(obesity)에 대한 치료학적 유효량은 포만감을 야기하는데 효과적인 양(satiety causing effective amount)이고; 뇌졸중(stroke)에 대한 치료학적 유효량은 혈류를 증가시키거나 TIA 보호에 효과적인 양(blood flow increasing or TIA protecting effective amount)이고; 재관류 손상(reperfusion injury)에 대한 치료학적 유효량은 기능을 증가시키는데 효과적인 양(function increasing effective amount)이고; 심장 및 뇌의 전조건 형성(preconditioning)에 대한 치료학적 유효량은 예를 들어, 트로포닌(troponin) 또는 CPK에 의해 측정되는 것과 같은 세포 보호에 효과적인 양(cell protective effective amount)이다.
비정상적으로 증식하는 세포로 고통받는 피험자의 치료를 위한 치료학적 유효량은 항증식(antiproliferative)에 효과적인, 생체 내에서 GSNOR을 억제하는 양을 의미한다. 본원에 사용된 것으로서 이와 같은 항증식에 효과적인 양은 증식 속도를 적어도 약 20%, 적어도 약 10%, 적어도 약 5% 또는 적어도 약 1%로 감소시키는 양을 의미한다.
I. 기구에서의 사용
본 발명의 화합물 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그것의 프로드러그 또는 대사 산물 또는 입체이성질체는 이러한 화합물의 존재가 유익한 상황에서 다양한 기구에 적용될 수 있다. 이와 같은 기구는 임의의 장치 또는 용기, 예를 들어, 본 발명의 화합물이 환자에게 이식하기 전의 외과용 메쉬(surgical mesh) 또는 심혈관 스텐트(cardiovascular stent)를 코팅하는데 사용될 수 있는 이식가능 기구(implantable devices)일 수 있다. 본 발명의 화합물은 또한 시험관 내 검정을 목적으로 하거나 세포를 배양하기 위한 다양한 기구에 적용될 수 있다.
본 발명의 화합물 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그것의 프로드러그, 입체이성질체 또는 대사 산물은 또한 예를 들어 항체, 천연 리간드 등과 같은 본 발명의 화합물에 결합하는 파트너의 개발, 분리 또는 정제를 위한 약제로서 사용될 수 있다. 당업자들은 본 발명의 화합물에 대한 관련 용도를 쉽게 알아낼 수 있다.
실시예
하기의 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것이다. 그러나, 본 발명은 특정 조건 또는 이 실시예에 상세히 기재된 것들로 제한되는 것이 아님을 명심하여야 한다. 명세서에 걸쳐, 미국 특허를 포함하는 공중에게 이용가능한 문서와 관련된 모든 것들은 참조로서 특별히 통합되어 있다.
실시예 1-24는 GSNOR 억제제로서 유용한 본 발명의 대표적인 신규한 유사체를 열거한다. 각 화합물을 제조하는데 사용될 수 있는 합성 방법을 실시예 1-24에 기재하였다. 뒷받침하는 질량분석 데이터 및/또는 양성자 NMR 데이터 또한 실시예 1-22에 포함된다. 해당하는 중간물질에 대한 합성 세부사항들은 실시예 25에 기재하였다.
실시예 1 : 3-(4-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 )-7- 하이드록시 -2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -4-온(3-(4-(1H- tetrazol -5- yl ) phenyl )-7- hydroxy -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -4- one )
Figure pct00013
합성:
단계 1: 4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일) 벤조니트릴 (4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3- yl ) benzonitrile )의 합성
DCM(6ml)에 용해시킨 4-(2-(2,4-디하이드록시페닐)-2-옥소에틸)벤즈아미드(4-(2-(2,4-dihydroxyphenyl)-2-oxoethyl)benzamide)(중간물질 A)(300 mg, 1.08 mmol)와 트리에틸아민(triethylamine)(TEA)(0.6 ml, 4.32 mmol)의 용액에 TFAA(1.2ml, 8.64mmol)을 0℃에서 한 방울 씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 2시간 동안 교반하였다. 그 후, 상기 혼합물을 1N HCl 용액(5ml), 포화 NaHCO3 (5 ml) 및 염수(5ml)로 세척하였다. 유기상(organic phase)을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시키고 프렙-TLC (PE(petroleum ether) : EtOAc = 3 : 1)로 정제하여, 노란색 오일로서 생성물(66 mg, 19.5%)을 얻었다. MS (ESI): m/z 332.1 [M+1]+.
단계 2: 3-(4-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 )-7- 하이드록시 -2-( 트리플루오로메틸 )-4H-크로멘-4-온(3-(4-(1H- tetrazol -5- yl ) phenyl )-7- hydroxy -2-( trifluoromethyl )-4H-chromen-4-one)의 합성
상온에서 톨루엔(2ml)에 용해시킨 4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조니트릴(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzonitrile)(50 mg, 0.15 mmol) 용액에 TMSN3 (296 mg, 2.72 mmol) 및 Bu2SnO (10 mg, 0.045 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 환류하였다. 갑압 하에서 휘발성 물질(volatiles)을 제거하였다. 잔류물을 프렙-HPLC로 정제하여, 노란색 파우더로서 실시예 1에서 원하는 생성물(19.4 mg, 34.6 %)을 얻었다.
데이터: 1H NMR (MeOH-d 4 500 MHz TMS): 8.12 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 8.02 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.52 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.02 (dd, J = 1.5 Hz, J = 8.5 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 1.5 Hz, 1H); MS (ESI): m/z 375.0 [M+1]+.
실시예 2: 5-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일)티오펜-2-카르복시산(5-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3-yl)thiophene-2-carboxylic acid )
Figure pct00014
합성:
단계 1: 메틸 5-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일)티오펜-2-카르복시산염( methyl 5-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H-chromen-3-yl)thiophene-2-carboxylate)의 합성
중간물질 B를 시작물질로 사용하여, 실시예 1의 단계 1에 기재된 방법에 따랐다. MS (ESI): m/z 371.0 [M+1]+.
단계 2: 5-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일)티오펜-2-카르복시산(5-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3-yl)thiophene-2-carboxylic acid )의 합성
디옥산에 용해시킨 메틸 5-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)티오펜-2-카르복시산염(methyl 5-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)thiophene-2-carboxylate)(295 mg, 0.80 mmol)의 용액에 진한 HCl(1.5ml)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 24시간 동안 70℃에서 교반하고, 상온에서 냉각시킨 후 원심분리하였다. 침전물을 물(2 ml×2), DCM(2 ml×2)로 헹구고 진공하에서 건조시켜, 회색 파우더로서 실시예 2에서 원하는 생성물(216.1mg, 76.3%)을 얻었다.
데이터: 1H NMR (MeOD-d 4 500 MHz TMS): 8.04 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.04 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.5 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 2.0 Hz, 1H); MS (ESI): m/z 357.0 [M+1]+.
실시예 3 : (트랜스)-4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일) 시클로헥산카르복시산 (( trans )-4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H-chromen-3-yl)cyclohexanecarboxylic acid )
Figure pct00015
합성:
단계 1: 에틸 4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일) 시클로헥산카르복시산염 ( ethyl 4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H-chromen-3-yl)cyclohexanecarboxylate)의 합성
중간물질 C를 시작물질로 사용하고, 여기에서 조생성물은 일련의 정밀검사(workup) 또는 정제 없이 직접 사용하여, 실시예 1의 단계 1에 기재된 방법에 따랐다. MS (ESI): m/z 385.1[M+1]+.
단계 2: 디옥산(3ml)에 용해시킨 에틸 4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)시클로헥산카르복시산염(ethyl 4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)cyclohexanecarboxylate)(450 mg, 1.1 mmol)의 용액에 진한 HCl(3ml)을 첨가하였다. 상기 용액을 75℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 진공하에서 농축하여 노란색 고체를 얻었으며, 이를 프렙-HPLC로 정제하여 실시예 3에서 원하는 생성물인 순수한 트랜스 이성질체(100 mg, 24%)를 얻었다.
데이터: 1H NMR (MeOH-d4 500 MHz TMS): δ7.97 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.97 (dd, J = 2.0, 8.5 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 2.71 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 2.38-2.48 (m, 3H), 2.05-2.14 (m, 2H), 1.65-1.68 (m, 2H), 1.44-1.53 (m, 2H); MS (ESI): m/z 357.0[M+1]+.
실시예 4: ( 시스 )-4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일) 시클로헥산카르복시산 (( cis )-4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H-chromen-3-yl)cyclohexanecarboxylic acid )
Figure pct00016
합성: 상세한 사항은 실시예 3을 참고하라. 프렙-HPLC에 의해 64mg, 15.3%의 실시예 4에서 원하는 생성물인 순수한 시스 이성질체를 얻었다.
데이터: 1H NMR (MeOH-d4 500 MHz TMS): δ7.93 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 2.5, 9.0 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 2.77-2.71 (m, 2H), 2.50-2.58 (m, 2H), 2.33 (s, 2H), 1.55-1.62 (m, 2H), 1.45-1.47 (m, 2H); MS (ESI): m/z 357.0 [M+1]+.
실시예 5: 3-(4-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 )-2-( 디플루오로메틸 )-7- 하이드록시 -4H-크로멘-4-온(3-(4-(1H- tetrazol -5- yl ) phenyl )-2-( difluoromethyl )-7- hydroxy -4H- chromen -4- one )
Figure pct00017
합성: 중간물질 D와 디플루오로아세트산 무수물(difluoroacetic anhydride)를 시작물질로서 사용하여, 실시예 1의 단계 1에 기재된 방법에 따랐다.
데이터: 1H NMR (MeOH-d 4 500 MHz TMS): δ8.18 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 8.07 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.03 (dd, J = 2.5 Hz, J = 9.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.56 (t, J = 2.0 Hz, 1H); MS (ESI): m/z 357.0 [M+1]+.
실시예 6: 3-(4-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 )-7- 하이드록시 -2- 메틸 -4H- 크로멘 -4-온(3-(4-(1H- tetrazol -5- yl ) phenyl )-7- hydroxy -2- methyl -4H- chromen -4- one )
Figure pct00018
합성: 중간물질 D 및 아세트산 무수물을 시작물질로 사용하여, 실시예 1의 단계 1에 기재된 방법에 따랐다. 실시예 6을 얻기 위하여, 조생성물은 프렙-HPLC로 정제하였다.
데이터: 1H NMR (DMSO-d 6 500 MHz TMS): δ10.84 (s, 1 H), 8.09 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.90 (d, J = 9.0 Hz ,1H), 7.53 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.93 (dd, J = 2.5 Hz, J = 8.5 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H); MS (ESI): m/z 321.0 [M+1]+.
실시예 7: 4-(2-(4- 카르복시벤질 )-7- 하이드록시 -4-옥소-4H- 티오크로멘 -3-일)벤조산(4-(2-(4- carboxybenzyl )-7- hydroxy -4- oxo -4H- thiochromen -3- yl ) benzoic acid )
Figure pct00019
합성:
단계 1: 메틸 4-(7- 메톡시 -2-(4-( 메톡시카르보닐 )벤질)-4-옥소-4H- 티오크로멘 -3-일) 벤조에이트 ( methyl 4-(7- methoxy -2-(4-( methoxycarbonyl ) benzyl )-4- oxo -4H-thiochromen-3-yl)benzoate)의 합성
알루미늄 트리클로라이드(Aluminum trichloride)(253 mg, 1.9 mmol)를 중간물질 E(메틸 4-(2-(3-메톡시페닐티오)-2-옥소에틸)벤조에이트)(methyl 4-(2-(3-methoxyphenylthio)-2-oxoethyl)benzoate)) (500 mg, 1.58 mmol)에 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 130℃에서 가열하엿다. 상온에서 냉각한 후, 반응 혼합물을 EtOAc (50 ml)에 용해시키고, 1 N의 차가운 HCl (25 ml ×2), 물(25 ml) 및 염수(25 ml)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 여과하여 진공하에 농축하였다. 잔류물을 콤비-플래쉬(Combi-Flash)(40 g silica gel, fluent: PE : EtOAc = 10 : 0 to 1 : 1 by gradient, 40 ml/min, 30 min, 1.2 L total solvent volume)로 정제하여, 노란색 고체로서 생성물(160 mg, 21%)을 얻었다. MS (ESI): m/z 475.1 [M+1]+.
단계 2: 4-(2-(4- 카르복시벤질 )-7- 하이드록시 -4-옥소-4H- 티오크로멘 -3-일)벤조산(4-(2-(4- carboxybenzyl )-7- hydroxy -4- oxo -4H- thiochromen -3- yl ) benzoic acid )의 합성( 실시예 7)
건조 DCM(3ml)에 용해시킨 메틸 4-(7-메톡시-2-(4-(메톡시카르보닐)벤질)-4-옥소-4H-티오크로멘-3-일)벤조에이트(methyl 4-(7-methoxy-2-(4-(methoxycarbonyl)benzyl)-4-oxo-4H-thiochromen-3-yl)benzoate)(105 mg, 0.23 mmol)의 용액에 BBr3 (0.2 ml, 2.23 mmol)을 0℃에서 교반하면서 첨가하였다. 혼합물을 상온에서 40분간 교반하고, 교반하면서 1N의 차가운 HCl 용액(1ml) 안으로 부었다. 휘발성 물질을 증발시키고, 잔류물을 프렙-HPLC(PE : EtOAc = 1 : 1)로 정제하여, 핑크색 고체로서 실시예 7에서 원하는 생성물(15 mg, 16%)을 얻었다.
데이터: 1H NMR (MeOH-d 4 500 MHz TMS): δ8.30 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.91 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.28 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.053 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.049 (s, 1H), 4.01 (s, 2H); MS (ESI): m/z 433.0 [M+1]+.
실시예 8: 4-(7- 하이드록시 -2- 메틸 -4-옥소-4H- 티오크로멘 -3-일)벤조산(4-(7-hydroxy-2-methyl-4-oxo-4H-thiochromen-3-yl)benzoic acid )
Figure pct00020
합성:
단계 1: 메틸 4-(7- 메톡시 -2- 메틸 -4-옥소-4H- 티오크로멘 -3-일) 벤조에이트 ( methyl 4-(7- methoxy -2- methyl -4- oxo -4H- thiochromen -3- yl ) benzoate )의 합성
아세톤(12ml)에 용해시킨 중간물질 F(메틸 4-(2-(2-(아세틸티오)-4-메톡시페닐)-2-옥소에틸)벤조에이트(methyl 4-(2-(2-(acetylthio)-4-methoxyphenyl)-2-oxoethyl)benzoate))(600 mg, 1.674 mmol) 용액에 K2CO3 (386 mg, 3.348 mmol)를 상온에서 첨가하였다. 상기 혼합물을 3시간 동안 교반하고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 콤비-플래쉬(40 g silica gel, start PE / EtOAc =10/0 to 3/1 gradient, 40 ml/min, 40 min, 1.6 L total solvent volume)로 정제하여, 노란색 고체로서 생성물(400 mg, 70%)을 얻었다. MS (ESI): m/z 341.0 [M+1]+.
단계 2: 4-(7- 하이드록시 -2- 메틸 -4-옥소-4H- 티오크로멘 -3-일)벤조산(4-(7-hydroxy-2-methyl-4-oxo-4H-thiochromen-3-yl)benzoic acid )의 합성( 실시예 8)
DCM(10ml)에 용해시킨 메틸 4-(7-메톡시-2-메틸-4-옥소-4H-티오크로멘-3-일)벤조에이트(methyl 4-(7-methoxy-2-methyl-4-oxo-4H-thiochromen-3-yl)benzoate)(200 mg, 0.588 mmol) 용액에 BBr3 (0.83 ml, 8.813 mmol)을 상온에서 첨가하고, 20시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 교반하면서 1N의 차가운 HCl(50ml)에 붓고, 조 생성물을 얻기 위하여 침전물을 여과에 의해 수집하고, 프렙-HPLC로 정제하여 노란색 고체로서 실시예 8에서 원하는 생성물(57.3 mg, 31%)을 얻었다.
데이터: 1H NMR (DMSO-d 6 500 MHz TMS): δ13.00 (brs, 1H), 10.76 (brs, 1H), 8.16 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.03-7.08 (m, 2H), 2.17 (s, 3H); MS (ESI): m/z 313.0 [M+1]+.
실시예 9: 3-(4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 티오플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일) 페닐 )-1,2,4- 옥사디아졸 -5(4H)-온(3-(4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3- yl ) phenyl )-1,2,4- oxadiazol -5(4H)- one )
Figure pct00021
합성:
무수 에탄올(2ml)에 용해시킨 4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조니트릴(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzonitrile)(합성을 위하여 실시예 1, 단계 1을 참조)(200 mg, 0.60 mmol) 및 하이드록실아민 하이드로클로라이드(hydroxylamine hydrochloride)(218 mg, 3.13 mmol) 용액에 트리에틸아민(triethylamine)(0.7 ml)을 한 방울씩 첨가하였다. 그 결과 만들어진 혼합물을 5시간 동안 환류를 위해 가열하였다. 휘발성 물질을 증발시키고, 잔류물을 무수 THF(2ml)에 용해하였다. CDI (296 mg, 1.83 mmol)을 첨가하고, 현탁액을 밤새 환류를 위해 가열하였다. 휘발성 물질을 증발시키고, 잔류물을 프렙-TLC(순수한 EtOAc) 및 프렙-HPLC로 정제하여, 흰색 고체로서 실시예 9에서 원하는 생성물(35 mg, 15%)을 얻었다.
데이터: 1H NMR (MeOH-d 4 500 MHz TMS): δ8.04 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.50 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.04 (dd, J = 2.5 Hz, J = 8.5 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 2.5 Hz, 1H); MS (ESI): m/z 391.0 [M+1]+.
실시예 10: 4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플르오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일)-N-(메 틸설포 닐) 벤즈아미드 (4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3- yl )-N-( methylsulfonyl ) benzamide )
Figure pct00022
합성:
THF(10ml)에 용해시킨 4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조산(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzoic acid)(합성은 PCT/US2010/024035에 기재되어 있다)(100 mg, 0.28 mmol) 용액에 CDI (139 mg, 0.86 mmol)를 상온에서 첨가하였다. 상기 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. MeSO2NH2 (280 mg, 2.86 mmol)를 1회분 첨가한 후, DBU (394 mg, 2.86 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 4시간 동안 교반하고, 1N HCl(30ml)과 에틸 아세테이트(ethyl acetate)(100ml) 사이에 분할하였다. 유기상을 분리하고, 염수(50ml)로 세척하고, Na2SO4로 건조하고 농축하여, 산 시료 물질로 오염된 원하는 생성물을 얻었다. 상기 혼합물은 정제하기 어려웠으며, 산 오염물은 MeOH(4ml)에 용해시킨 SOCl2 (91 mg, 0.77 mmol)로 0℃에서 처리함으로써 메틸 에스테르로 전환시켰다. 첨가가 완료되었을 때, 상기 혼합물을 3일간 교반하였다. 휘발성 물질을 감압하에서 제거하고, 잔류물을 프렙-HPLC로 정제하여, 흰색 파우더로서 실시예 10에서 원하는 생성물(25 mg, 20.5%)을 얻었다.
데이터: 1H NMR (MeOH-d 4 500 MHz TMS): δ8.04 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.46 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.04 (dd, J = 2.0 Hz, J = 9.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.41 (s, 1H); MS (ESI): m/z 428.0 [M+1]+.
실시예 11: 3-(4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일) 페닐 )-1,2,4- 티아디아졸 -5(4H)-온(3-(4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3- yl ) phenyl )-1,2,4- thiadiazol -5(4H)- one )
Figure pct00023
합성:
무수 에탄올(2ml)에 용해시킨 4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조니트릴(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzonitrile)(합성을 위하여 실시예 1, 단계 1을 참조)(250 mg, 0.76 mmol) 및 하이드록실아민 하이드로클로라이드(hydroxylamine hydrochloride)(105 mg, 1.51 mmol) 용액에 트리에틸아민(0.5ml)을 한 방울씩 첨가하였다. 그 결과 만들어진 혼합물을 2시간 동안 환류를 위하여 가열하였다. 휘발성 물질을 증발시키고, 잔류물을 무수 THF(5ml)에 용해시켰다. TCDI (202 mg, 1.13 mmol)를 첨가하고, 현탁액을 2시간 동안 상온에서 교반하고, EtOAc (50 ml)과 물(20 ml) 사이에 분할하였다. 유기상을 분리하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 THF(5ml)에 용해시키고, BF3-Et2O를 첨가하고, 상온에서 2시간 동안 교반하였다. 1N HCl로 분리정제한 후, 휘발성 물질을 증발시키고, 잔류물을 프렙-HPLC로 정제하여, 흰색 고체로서 실시예 11에서 원하는 생성물(17.5 mg, 5%)을 얻었다.
데이터: 1HNMR (MeOD 500 MHz TMS): δ8.04 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.45 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.04 (dd, J = 1.5, 8.5 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 1.5 Hz, 1H); MS (ESI): m/z 406.9 [M+1]+.
실시예 12: 3-(4-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 )-7- 하이드록시 -2- 메틸 -4H- 티오크로멘 -4-온(3-(4-(1H- tetrazol -5- yl ) phenyl )-7- hydroxy -2- methyl -4H- thiochromen -4- one )
Figure pct00024
합성:
단계 1: 4-(7- 메톡시 -2- 메틸 -4-옥소-4H- 티오크로멘 -3-일) 벤조니트릴 (4-(7-methoxy-2-methyl-4-oxo-4H-thiochromen-3-yl)benzonitrile)의 합성
DMF(4ml)에 용해시킨 중간물질 G(664 mg, 2 mmol), 4-시아노페닐보론산(4-cyanophenylboronic acid)(294 mg, 2 mmol) 및 TEA (1.4 ml, 10 mmol)의 용액에 Pd(dppf)Cl2 (146 mg, 0.2 mmol)을 첨가하고, 그 결과 생성된 혼합물을 18시간 동안 질소하에서 85℃로 가열하였다. 상기 혼합물을 상온에서 냉각시킨 후, 1N HCl(20ml)과 에틸 아세테이트(50ml) 사이에 분할하였다. 유기상을 분리하고, 염수(10ml)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시킨 후, 컬럼 크로마토그래피(PE/ EtOAc = 5/1)로 정제하여, 노란색 고체로서 생성물(310 mg, 54%)을 얻었다.
단계 2:4-(7- 하이드록시 -2- 메틸 -4-옥소-4H- 티오크로멘 -3-일) 벤조니트릴 (4-(7-hydroxy-2-methyl-4-oxo-4H-thiochromen-3-yl)benzonitrile)의 합성
DCM(3ml)에 용해시킨 상기 생성물(310 mg, 1.0 mmol)에 BBr3 (1 ml, 10 mmol)을 조심스럽게 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 밤새 교반하였다. 그 결과 생성된 혼합물을 차가운 물(5ml)에 붓고, 에틸 아세테이트(3ml×3)로 추출하였다. 화합된 유기상을 염수(3ml)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 농축하였다. 컬럼 크로마토그래피(PE/ EtOAc = 3/1)로 정제하여, 노란색 파우더로서 생성물(120 mg, 40%)을 얻었다.
단계 3: 실시예 12의 합성
그 후, 실시예 1의 단계 2에 기재된 방법에 따라 상기 생성물로부터 테트라졸을 65%의 수율로 제조하였다.
데이터: 1HNMR (DMSO-d6 500 MHz TMS): δ10.78 (s, 1H), 8.17 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.08 (s, 1H), 7.04 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 2.07 (s, 3H); MS (ESI): m/z 337.0 [M+1]+.
실시예 13:5-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일)티오펜-3-카르복시산(5-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3-yl)thiophene-3-carboxylic acid )
Figure pct00025
합성:
단계 1: 메틸 5-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플르오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일)티오펜-3-카르복실레이트( methyl 5-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H-chromen-3-yl)thiophene-3-carboxylate)의 합성
실시예 1, 단계 1에 기재된 방법에 따랐으며, 여기에서 중간물질 H는 시료 물질이었고, 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 43%의 수율로 생성물을 얻었다.
단계 2: 5-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일)티오펜-3-카르복시산(5-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3-yl)thiophene-3-carboxylic acid )의 합성
실시예 3, 단계 2에 기재된 가수분해 방법에 따라, 65%의 수율로 생성물을 얻었다.
데이터: 1H NMR (MeOD-d 4 500 MHz TMS): 8.42 (s, 1H), 8.05 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.05 (dd, J = 2.5, 9.0 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 2.0 Hz, 1H); MS (ESI): m/z 357.0 [M+1]+.
실시예 14: 3-((트랜스)-4-(1H- 테트라졸 -5-일) 시클로헥실 )-7- 하이드록시 -2-(트 리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -4-온(3-(( trans )-4-(1H- tetrazol -5- yl ) cyclohexyl )-7- hydroxy -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -4- one )
Figure pct00026
합성:
단계 1: (트랜스)-4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일) 시클로헥산카르복사미드 (( trans )-4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H-chromen-3-yl)cyclohexanecarboxamide)의 합성
옥살릴 클로라이드(Oxalyl chloride)(6.5 ml, 84.27 mmol)를 상온에서 DCM(25ml)에 용해시킨 (트랜스)-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)시클로헥산카르복시산((trans)-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)cyclohexanecarboxylic acid (실시예 3)) (1.0 g)의 용액에 한 방울씩 첨가하였다(3방울의 DMF를 첨가하였다). 격렬한 가스 발생이 관찰되었다. 30분간 교반한 후, 상기 용액에 NH3H2O (25%, 9 ml)를 첨가하였다. 60분간 교반한 후, 에틸 아세테이트(50ml)을 첨가하였다. 유기층을 농축하고, 컬럼 크로마토그래피(PE/ EtOAc = 1/1)로 정제하여, 흰색 고체로서 원하는 생성물(0.81 g, yield: 81%)을 얻었다.
단계 2:(트랜스)-4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일) 시클로헥산카르보니트릴 (( trans )-4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H-chromen-3-yl)cyclohexanecarbonitrile)의 합성
DCM(8.0ml)에 용해시킨 상기 생성물(0.81g)과 TEA(3.5ml)의 용액에 TFAA(2.7g)를 상온에서 한 방울씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 제거하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(PE/ EtOAc = 5/ 1)로 정제하여, 노란색 고체로서 생성물(0.72 g, 74%)을 얻었다.
단계 3: 3-((트랜스)-4-(1H- 테트라졸 -5-일) 시클로헥실 )-7- 하이드록시 -2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -4-온(3-(( trans )-4-(1H- tetrazol -5- yl ) cyclohexyl )-7-hydroxy-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-4-one)의 합성
실시예 1, 단계 2에 기재된 방법에 따라 상기 생성물로부터 59%의 수율로 테트라졸을 제조하였다.
데이터: 1H NMR (MeOD-d 4 500 MHz TMS): 7.87 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.86 (dd, J = 2.0 Hz, J = 9.0 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 2.5 Hz, 2H), 3.08~3.03 (m, 1H) , 2.72 (t, J = 12.5 Hz, 1H), 2.53~2.45 (m, 2H), 2.12 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 1.67~1.54 (m, 4H); MS (ESI): m/z 381.1 [M+1]+.
실시예 15: N- 하이드록시 -4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H-크로멘-3-일) 벤즈아미드 (N- hydroxy -4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3- yl ) benzamide )
Figure pct00027
합성: 옥살릴 클로라이드(140mg, 1.1mmol)를 DCM(25ml)에 용해시킨 4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조산(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzoic acid)(합성은 PCT/US2010/024035에 기재되어 있음) (130 mg, 0.4 mmol) 과 DMF(0.5ml)의 용액에 상온에서 한 방울씩 첨가하였다. 격렬한 가스 발생이 관찰되었다. 30분간 교반한 후, 상기 용액을 THF(2ml)과 물(0.5ml)에 용해시킨 하이드록실아민 하이드로클로라이드(0.29g, 0.5mmol)과 TEA(0.12ml, 0.9mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 1시간 동안 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 증발시켰다. 잔류물을 아세톤으로 재결정화시켜 흰색 파우더(120mg)를 얻고, 이를 프렙-HPLC로 정제하여 밝은 노란색 파우더로서 실시예 15에서 원하는 생성물(48 mg, 수율: 33%)을 얻었다.
데이터: 1H NMR (DMSO-d 6 500 MHz TMS): 11.31 (s, 1H), 9.14 (s, 1H), 7.92 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 7.80 (s, 2H) , 7.36 (d, J = 3.5 Hz, 2H), 7.01 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H); MS (ESI): m/z 366.0 [M+1]+.
실시예 16: 3-플루오로-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조산(3- fluoro -4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3-yl)benzoic acid )
Figure pct00028
합성:
단계 1: 메틸 3- 플루오로 -4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H-크로멘-3-일) 벤조에이트 ( methyl 3- fluoro -4-(7- hydroxy -4- oxo -2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzoate)의 합성
DCM(60ml)에 용해시킨 메틸 4-(2-(2,4-디하이드록시페닐)-2-옥소에틸)-3-플루오로벤조에이트(methyl 4-(2-(2,4-dihydroxyphenyl)-2-oxoethyl)-3-fluorobenzoate)(중간물질 I)(6 g, 19.7 mmol)와 TEA(24ml, 190mmol) 용액에 TFAA(13ml, 95mmol)를 한 방울씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 15시간 동안 상온에서 교반하였다. 그 후, 상기 용액을 1N HCl 용액(50ml)과 물(50ml)로 세척하고; 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 증발시켜 조 생성물(6 g, 79.7%)을 얻었다.
단계 2: 디옥산(60ml)에 용해시킨 상기 조 생성물 용액(6 g, 15.7 mmol)에 진한 HCl(30ml)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 15시간 동안 90℃에서 교반하였다. 그 후, 상기 용액을 EtOAc(100ml×5)로 추출하였다. 유기층을 화합시키고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 증발시켜 조 생성물을 얻었다. 상기 조 생성물을 EtOAc /PE = 3/1 (50 ml)로 재결정화시켜, 고체로서 실시예 16에서 원하는 생성물(4.5 g, 77.9 %)을 얻었다.
데이터: 1H NMR (DMSO-d 6 500 MHz TMS): δ13.44 (brs, 1H), 11.31 (brs, 1H), 7.98 (d, J = 9.0 Hz,1H), 7.89 (dd, J = 1.5 Hz, 7.5 Hz,1H), 7.81 (dd, J = 1.0 Hz, 9.5 Hz, 1H), 7.56 (t, J = 8.0 Hz,1H), 7.09 (dd, J = 2.0 Hz, 8.5 Hz, 1H); 7.03 (d, J = 2.0 Hz, 1H); MS (ESI): m/z 369.0 [M+1]+.
실시예 17: 3-(2-클로로-4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-7-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-4-온(3-(2- chloro -4-(1H- tetrazol -5- yl ) phenyl )-7- hydroxy -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -4- one )
Figure pct00029
단계 1: 3-클로로-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조산(3-chloro-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzoic acid)(합성은 PCT/US2010/024035에 기재되어 있음)으로부터 시작하여, 실시예 14에 기재된 것과 동일한 3 단계 방법에 따라 원하는 생성물 합성하였다.
데이터: 1H NMR (MeOD-d4 500 MHz TMS): 8.22 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.07 (dd, J = 1.5 Hz, J = 8.0 Hz, 1H) , 8.04 (d, J = 9.0 Hz, 1H) 7.43 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.04 (dd, J = 2.5 Hz, J = 9.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 2.5 Hz, 1H); MS (ESI): m/z 409.0 [M+1]+.
실시예 18: 3-(3- 클로로 -4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H-크로멘-3-일) 페닐 )-1,2,4- 옥사디아졸 -5(4H)-온(3-(3- chloro -4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3- yl ) phenyl )-1,2,4- oxadiazol -5(4H)- one )
Figure pct00030
단계 1 및 2: 3- 클로로 -4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일) 벤조니트릴 (3- chloro -4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H-chromen-3-yl)benzonitrile)의 합성
3-클로로-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조산(3-chloro-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzoic acid)(합성은 PCT/US2010/024035에 기재되어 있음)으로부터 시작하여, 실시예 14의 첫 번째 두 번째 단계에 기재된 방법을 따랐다.
단계 3: 3-클로로-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조니트릴(3-Chloro-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzonitrile)(0.3 g, 0.8 mmol)을 EtOH(0.11ml, 1 eq.)에 용해시키고, 얼음 수조에서 냉각하였다. 하이드록시아민 HCl 염(46mg, 0.85 eq.)과 TEA(0.11ml, 1 eq.)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔류물(0.4g)을 무수 THF(5ml)에 현탁하였다. CDI(0.24g, 1.5 eq.)와 TEA(0.13ml)의 첨가 후, 현탁된 용액을 50℃에서 밤새 가열하였다. THF의 제거 후, 상기 혼합물을 물(15ml)에 현탁시키고, pH를 8로 조정하였다. 수층(aqueous layer)을 EtOAc (10 ml×2)로 추출하였다. 그 후, 상기 수층을 pH ~2로 산성화시키고, EtOAc (15 ml×4)로 추출하였다. 화합된 유기층을 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시켰다. 용매를 제거한 후, 조 생성물을 프렙-HPLC로 정제하여, 황갈색 고체로서 실시예 18에서 원하는 생성물(44 mg, 10 %)을 얻었다.
데이터: 1H NMR (MeOH-d 4 500 MHz TMS): 8.04 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 1.5 Hz, 8.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.06 (dd, J = 2.0 Hz, 8.5 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 2.0 Hz,1H); MS (ESI): m/z 425 [M+1]+.
실시예 19: 3-(3- 플루오로 -4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H-크로멘-3-일) 페닐 )-1,2,4- 옥사디아졸 -5(4H)-온(3-(3- fluoro -4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3- yl ) phenyl )-1,2,4- oxadiazol -5(4H)- one )
Figure pct00031
합성: 3-플루오로-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조산(3-fluoro-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzoic acid)(실시예 16)으로부터 시작하여, 실시예 14의 첫 번째 두 번째 단계에 따라, 3-플루오로-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조니트릴(3-fluoro-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzonitrile)을 제조한 후, 실시예 18의 단계 3에 따라 실시예 19에서 원하는 생성물로 전환하였다.
데이터: 1H NMR (MeOH-d 4 500 MHz TMS): 8.06 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 2.0 Hz, 8.0 Hz, 2H), 7.70 (dd, J = 2 Hz, 10.0 Hz, 1H), 7.54 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.07 (dd, J = 2.5 Hz, 9.0 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 2.0 Hz,1H); MS (ESI): m/z 409 [M+1]+.
실시예 20: 3-(3- 클로로 -4-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 )-7- 하이드록시 -2-( 트리플루오로메틸 )-4H-- 크로멘 -4-온(3-(3- chloro -4-(1H- tetrazol -5- yl ) phenyl )-7- hydroxy -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -4- one )
Figure pct00032
합성: 2-클로로-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조산(2-chloro-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzoic acid)(합성은 PCT/US2010/024035에 기재되어 있음)으로부터 시작하여, 실시예 14의 첫 번째 두 번째 단계에 따라, 2-클로로-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조니트릴(2-chloro-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzonitrile)을 제조한 후, 실시예 1, 단계 2에 기재된 방법에 따라 실시예 20에서 원하는 생성물로 전환하였다.
데이터: 1H NMR (MeOD-d 4 500 MHz TMS): 8.07 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 8.0 Hz 1H) , 7.65 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.07 (dd, J = 2.0 Hz, J = 9.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 2.0 Hz, 1H) ; MS (ESI): m/z 409.0 [M+1]+.
실시예 21: 4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일)-3-메틸벤조산(4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3- yl )-3-methylbenzoic acid )
Figure pct00033
합성: 메틸 4-(2-(2,4-디하이드록시페닐)-2-옥소에틸)-3-메틸벤조에이트(methyl 4-(2-(2,4-dihydroxyphenyl)-2-oxoethyl)-3-methylbenzoate)(중간물질 J)로부터 시작하여, 실시예 16에 기재된 방법과 유사한 두 단계에 따라 원하는 생성물을 합성하였다.
데이터: 1H NMR (DMSO-d 6 , 300 MHz): δ13.02(brs, 1H), 11.21 (brs, 1H), 7.95 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 3 Hz, 1H), 7.80 (dd, J = 3, 9 hz, 1H), 7.30 (d, J = 9 Hz, 1H), 7.04 (dd, J = 3, 9 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 3 Hz, 1H), 2.13 (s, 3H); MS (ESI): m/z 365.1 [M+H+]+.
실시예 22: 3-(4-(1H- 테트라졸 -4-일) 페닐 )-7- 하이드록시 -4H- 크로멘 -4-온(3-(4-(1H- tetrazol -5- yl ) phenyl )-7- hydroxy -4H- chromen -4- one )
Figure pct00034
단계 1: 4-(7- 하이드록시 -4-옥소-4H- 크로멘 -3-일) 벤조니트릴 (4-(7- hydroxy -4-oxo-4H-chromen-3-yl)benzonitrile)의 합성
무수 DMF(6.0ml)에 용해시킨 중간물질 K(200mg, 0.79mmol) 용액에 BF3-Et2O (0.8 ml)을 0~10℃에서 한 방울씩 첨가하였다. 첨가가 완료되었을 때, 상기 혼합물을 0.5시간 동안 상온으로 승온시키고, 90℃로 가열하였다. MsCl(1.6ml)을 일정량 첨가하고, 5시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 EtOAc(50ml)과 1N HCl(50ml) 사이에 분할하였다. 유기상을 분리하고, 무수 소디움 설페이트로 건조시키고, 여과하고 농축하여 밝은 노랑색 고체를 얻고, 이를 DCM(5ml)로 재결정화하여 노란색 고체로서 생성물(120 mg, 58%)을 얻었다. MS (ESI): m/z 263.9 [M+1]+.
단계 2: 3-(4-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 )-7- 하이드록시 -4H- 크로멘 -4-온(3-(4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-7-hydroxy-4H-chromen-4-one)의 합성
실시예 1의 단계 2에 기재된 방법에 따라, 생성물을 DCM(10ml)로 두 번 재결정화하여 흰색 고체로서 실시예 22에서 원하는 생성물(60 mg, 43%)을 얻었다.
데이터: 1HNMR (DMSO-d 4 500 MHz TMS): δ10.89 (s, 1H), 8.54 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 8.01 (m, 1H), 7.79 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.98 (dd, J = 2.5, 8.0 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 2.0 Hz, 1H); MS (ESI): m/z 307.1 [M+1]+.
실시예 23: 5-(4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일) 페닐 )-1,3,4- 옥사디아졸 -2(3H)-온(5-(4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3- yl ) phenyl )-1,3,4- oxadiazol -2(3H)- one )
Figure pct00035
합성: 실시예 23은 하기의 세 단계에 따라 제조될 수 있다.
단계 1: tert -부틸 2-(4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일) 벤조일 ) 하이드라진카르복실레이트 ( tert - butyl 2-(4-(7- hydroxy -4- oxo -2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzoyl)hydrazinecarboxylate)의 합성
DCM과 DMF(1:1)에 용해시킨 4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조산(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzoic acid)(합성은 PCT/US2010/024035에 기재되어 있음)(1 equiv.), EDCI (1 equiv.) 및 BocNHNH2 (1 equiv.)의 혼합물을 밤새 25℃에서 교반한 후, 물/EtOAc로 분리정제하였다. 만약 필요하다면, 실리카 겔 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 생성물을 얻는다.
단계 2: 4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일) 벤조 하이드라지드(4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3-yl)benzohydrazide)의 합성
tert-부틸 2-(4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조일)하이드라진카르복실레이트(tert-Butyl 2-(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzoyl)hydrazinecarboxylate)를 밤새 HCl / MeOH로 처리하였다. 용매를 감압하에서 제거하여 생성물을 얻었다.
단계 3: 5-(4-(7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일)페닐)-1,3,4- 옥사디아졸 -2(3H)-온(5-(4-(7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H-chromen-3-yl)phenyl)-1,3,4-oxadiazol-2(3H)-one)의 합성
DCM에 용해시킨 4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조하이드라지드(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzohydrazide)(1 equiv.)와 CDI (10 equiv.)를 밤새 환류하였다. 물/EtOAc로 분리정제한 후 프렙-HPLC로 정제하여, 실시예 23에서 원하는 생성물을 얻을 수 있다.
실시예 24: 4-(8- 플루오로 -7- 하이드록시 -4-옥소-2-( 트리플루오로메틸 )-4H- 크로멘 -3-일)벤조산(4-(8- fluoro -7- hydroxy -4- oxo -2-( trifluoromethyl )-4H- chromen -3-yl)benzoic acid )
Figure pct00036
합성: 실시예 24에서 원하는 생성물은 메틸 4-(2-(3-플루오로-2,4-디하이드록시페닐)-2-옥소에틸)벤조에이트(methyl 4-(2-(3-fluoro-2,4-dihydroxyphenyl)-2-oxoethyl)benzoate)(중간물질 L)로부터 시작하여, 실시예 16에 기재된 두 단계 방법에 따라 제조될 수 있다.
실시예 25: 중간물질의 합성
상기 실시예에 언급된 중간물질들은 하기에 기재된 것과 같이 합성될 수 있다.
중간물질 A: 4-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 ) 벤즈아미드 (4-(2-(2,4- dihydroxyphenyl )-2- oxoethyl ) benzamide )
단계 1: 2-(4-( 메톡시카르보닐 ) 페닐 )아세트산(2-(4-(methoxycarbonyl)phenyl)acetic acid )의 합성
MeOH(1.5L)에 용해시킨 2-(4-브로모페닐)아세트산(2-(4-bromophenyl)acetic acid)(91.3 g, 0.42 mol, 1.0 eq.) 용액에 건조 TEA(85.8 g, 0.85 mol, 2.0 eq.) 및 Pd(dppf)Cl2 (3.43 g, 4.2 mmol, 1%)를 첨가하였다. 상기 용액을 16시간 동안 120℃에서 CO 가스(4 Mpa) 하에 가열하였다. 그 후, 그것을 여과하고 진공하에서 농축하였다. 잔류물을 500ml의 EtOAc와 1L의 물에 용해하였다. pH=7.5로 맞추기 위하여 상기 혼합물을 포화 NaHCO3으로 중성화하고 분리하였다. 무기상을 EtOAc (500 ml×3)로 추출하고, pH=5로 맞추기 위하여 1N HCl로 산성화시켰다. 진공하에서 여과하고 건조시켜, 62.8g의 생성물을 얻었다(흰색 고체, 수율 76%). MS (ESI): m/z 195.1 [M+1]+.
단계 2: 메틸 4-(2-(2,4- 디메톡시페닐 )-2- 옥소에틸 ) 벤조에이트 ( methyl 4-(2-(2,4-dimethoxyphenyl)-2-oxoethyl)benzoate)의 합성
무수 DCM(150ml)에 용해시킨 2-(4-(메톡시카보닐)페닐)아세트산(2-(4-(methoxycarbonyl)phenyl)acetic acid)(15 g, 77.3 mmol)과 DMF(한방울) 용액에 옥살릴 클로라이드(33 ml, 386.0 mmol)를 0~5℃에서 교반하면서 한 방울씩 첨가하였다. 첨가가 완료되었을 때, 상기 혼합물을 2시간 동안 상온에서 교반하였다. TLC(PE/ EtOAc = 3/1, MeOH로 퀀칭)는 반응이 완료되었음을 나타내었으며, 휘발성 물질을 증발시키고 잔류물을 DCM(20ml)로 희석하였다.
무수 DCM(80ml)에 용해시킨 알루미늄 트리클로라이드(aluminum trichloride)(16.5 g, 123.7 mmol) 현탁액에 1,3-디메톡시벤젠(1, 3-dimethoxybenzene)(21.3 g, 154.6 mmol)을 5℃에서 첨가한 후, 아실 클로라이드 용액(acyl chloride solution)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 밤새 교반하고, 차가운 1N HCl(200ml)에 조심스럽게 붓고, EtOAc (150 ml×3)로 추출하였다. 화합된 유기층을 염수(200ml)로 세척하고, 무수 소디움 설페이트로 건조시키고, 여과하고 농축하여 갈색 오일을 얻고, 이를 실리카 겔 컬럼(silica gel column)(PE/ EtOAc = 5/1)으로 정제하여 노란색 고체로서 생성물(12 g, 49.6%)을 얻었다. MS (ESI): m/z 315.1 [M+1]+.
단계 3: 에틸 4-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 ) 벤조에이트 ( ethyl 4-(2-(2,4-dihydroxyphenyl)-2-oxoethyl)benzoate)의 합성
DCM(600ml)에 용해시킨 메틸 4-(2-(2,4-디메톡시페닐)-2-옥소에틸)벤조에이트(methyl 4-(2-(2,4-dimethoxyphenyl)-2-oxoethyl)benzoate)(55 g, 141.6 mmol) 용액에 BBr3 (164 ml, 1.7 mol)를 -10℃에서 한 방울씩 첨가하였다. 첨가가 완료되면, 상기 혼합물을 상온에서 밤새 교반하고, 교반하면서 갈은 얼음(700g)에 따랐다. 휘발성 물질을 증발시켜 노란색 고체를 얻고, 고진공하에서 건조시키고 무수에틸알코올(500ml)에 용해시켰다. 그 용액에 티오닐 클로라이드(thionyl chloride)(80ml)를 0~10℃에서 한 방울씩 첨가하였다. 첨가가 완료되면, 상기 생성된 혼합물을 3시간 동안 환류를 위해 가열하였다. 휘발성 물질을 증발시키고, 잔류물을 EtOAc (600 ml)와 포화된 소디움 카르보네이트(sodium carbonate)(200 ml) 사이에 분할하였다. 유기상을 분리하고, 염수(200ml)로 세척하고, 무수 소디움 설페이트로 건조시키고, 여과하고 농축하여 갈색 슬러리를 얻었고, 이를 컬럼 크로마토그래피(PE/ EtOAc = 3/1)로 정제하여 노란색 고체로서 생성물(24.5 g, 58%)을 얻었다. 1H NMR (CDCl3 500 MHz TMS): δ12.58 (s, 1H), 8.01 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.69 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.05 (brs, 1H), 6.41 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.37 (s, 1H), 4.38 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 4.26 (s, 2H), 1.38 (t, J = 7 Hz, 3H). MS (ESI): m/z 301.1 [M+1]+.
단계 4: 4-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )2- 옥소에틸 )벤조산(4-(2-(2,4-dihydroxyphenyl)-2-oxoethyl)benzoic acid )의 합성
1,4-디옥산(10ml)에 용해시킨 에틸 4-(2-(2,4-디하이드록시페닐)-2-옥소에틸)벤조에이트(ethyl 4-(2-(2,4-dihydroxyphenyl)-2-oxoethyl)benzoate)(2 g, 6.7 mmol) 용액에 진한 HCl(10ml)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 밤새 70℃에서 교반하였다. 휘발성 물질을 감압하에서 제거하였다. 잔류물을 물(20ml)로 용해시키고, EtOAc (20 ml > 2)로 추출하였다. 화합된 유기상을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축하여 갈색 고체로서 생성물(1.5 g, 83.3%)을 얻었다. MS (ESI): m/z 273.1 [M+1]+.
단계 5: 4-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 ) 벤즈아미드 (4-(2-(2,4-dihydroxyphenyl)-2-oxoethyl)benzamide)의 합성
DCM(20ml)에 용해시킨 4-(2-(2,4-디하이드록시페닐)-2-옥소에틸)벤조산(4-(2-(2,4-dihydroxyphenyl)-2-oxoethyl)benzoic acid)(1.5 g, 5.5 mmol) 용액에 옥살릴 클로라이드(oxalyl chloride)(4.7 ml, 55 mmol)와 DMF 한 방울을 첨가하였다. 상기 혼합물을 3시간 동안 상온에서 교반한 후, 상기 혼합물을 밤새 환류하였다. 상기 혼합물을 건조를 위해 농축하였다. 잔류물을 THF(20ml)에 용해하였다. 그 후, 그것을 상온에서 NH3·H2O (25%, 60 ml) 수용액에 한 방울씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 2시간 동안 상온에서 교반하였다. 휘발성 물질을 감압하에서 제거하였다. 잔류물을 EtOAc (30 ml×3)로 추출하였다. 화합된 유기상을 Na2SO4로 건조시키고 농축하여, 갈색 고체로서 생성물(300 mg, 20.1 %)을 얻었다. MS (ESI): m/z 272.1[M+1] +.
중간물질 B: 메틸 5-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 )티오펜-2-카르복실레이트( methyl 5-(2-(2,4- dihydroxyphenyl )-2- oxoethyl ) thiophene -2- carboxylate )
단계 1: 2-(5- 브로모티오펜 -2-일)아세트산(2-(5- bromothiophen -2- yl ) acetic acid)의 합성
HOAc(10ml)에 용해시킨 2-(티오펜-2-일)아세트산(2-(thiophen-2-yl)acetic acid)(2 g, 14 m mol) 용액에 브로민(2.25 g, 14 mmol)을 10~20℃에서 30분간 한 방울씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 3시간 동안 상온으로 승온시켰다. 그 후, 그것을 물(100ml)로 희석하고, 무수 소디움 카르보네이트를 사용하여 pH=5로 중성화하고, EtOAc (100 m×3)로 추출하였다. Na2SO4로 건조시키고 농축하여, 갈색 오일로서 조 생성물을 얻었다. MS (ESI): m/z 220.9 [M+1]+.
단계 2: 2-(5-( 메톡시카르보닐 )티오펜-2-일)아세트산(2-(5-(methoxycarbonyl)thiophen-2-yl)acetic acid )의 합성
MeOH(110ml)에 용해시킨 2-(5-브로모티오펜-2-일)아세트산(2-(5-bromothiophen-2-yl)acetic acid)(2.5 g, 11.4 mmol) 용액에 TEA (5 ml, 34.1 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2 (769 mg, 1.1 mmol)를 첨가하고, 그 결과 생성된 혼합물을 20시간 동안 CO(4 MPa) 하에 120℃에서 가열하였다. 진공하에서 농축하고, 잔류물을 콤비-플래쉬(80 g silica gel, start PE / EtOAc = 10 : 0 to 1 : 3 gradient, 60 ml/min, 60 min, 3.6 L total solvent volume)로 정제하여, 색이 옅은 고체로서 생성물(1.3 g, 58%)을 얻었다. MS (ESI): m/z 198.0 [M+1]+.
단계 3: 메틸 5-(2-(2,4- 디메톡시페닐 )-2- 옥소에틸 )티오펜-2-카르복실레이트( methyl 5-(2-(2,4- dimethoxyphenyl )-2- oxoethyl ) thiophene -2- carboxylate )의 합성
2-(5-(메톡시카르보닐)티오펜-2-일)아세트산(2-(5-(methoxycarbonyl)thiophen-2-yl)acetic acid)으로부터 시작하여, 중간물질 A의 단계 2에 기재된 방법에 따라 제조하였다.
단계 4: 메틸 5-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 )티오펜-2-카르복실레이트( methyl 5-(2-(2,4- dihydroxyphenyl )-2- oxoethyl ) thiophene -2- carboxylate )의 합성
DCM(5ml)에 용해시킨 메틸 5-(2-(2,4-디메톡시페닐)-2-옥소에틸)티오펜-2-카르복실레이트(methyl 5-(2-(2,4-dimethoxyphenyl)-2-oxoethyl)thiophene-2-carboxylate)(460 mg, 1.44 mmol) 용액에 AlCl3 (5.7 g, 43 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 2일간 교반하였다. 0℃에서 물(15ml)을 조심스럽게 첨가하고, 상기 혼합물을 EtOAc (20 ml×3)로 추출하였다. 화합된 유기상을 염수(50ml)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 농축하고 프렙-TLC(PE/ EtOAc = 3/1)로 정제하여, 오렌지색 파우더로 중간물질 B(260 mg, 61.9%)를 얻었다. MS (ESI): m/z 293.0 [M+1]+.
중간물질 C: 에틸 4-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 ) 시클로헥산카르복실레이트 ( ethyl 4-(2-(2,4- dihydroxyphenyl )-2- oxoethyl ) cyclohexanecarboxylate )
단계 1: 에틸 4(2- tert - 부톡시 -2- 옥소에틸리덴 ) 시클로헥산카르복실레이트 ( ethyl 4-(2- tert - butoxy -2- oxoethylidene ) cyclohexanecarboxylate )의 합성
MeCN(100ml)에 용해시킨 무수 리튬 클로라이드(anhydrous lithium chloride)(1.9 g, 45 mmol) 현탁액에 tert-부틸 2-(디에톡시포스포릴)아세테이트(tert-butyl 2-(diethoxyphosphoryl)acetate)(7.6 g, 30 mmol)를 상온에서 첨가하였다. 상기 혼합물을 30분간 교반하였다. TEA(6.4ml, 45mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 30분간 더 교반하였다. 에틸 4-옥소시클로헥산카르복실레이트(ethyl 4-oxocyclohexanecarboxylate)(5.1 g, 30 mmol)를 첨가하고, 상기 혼합물을 밤새 교반하였다. 침전물을 여과하고, 여과액을 농축하여 갈색 오일을 얻고, 이를 실리카 겔 컬럼(PE : EtOAc = 10 : 1)으로 정제하여 생성물(5 g, 62%)을 얻었다.
단계 2: 2-(4-( 에톡시카르보닐 ) 시클로헥실리덴 )아세트산(2-(4-(ethoxycarbonyl)cyclohexylidene)acetic acid )의 합성
CH2Cl2 (30 ml)에 용해시킨 에틸 4-(2-tert-부톡시-2-옥소에틸리덴)시클로헥산카르복실레이트(ethyl 4-(2-tert-butoxy-2-oxoethylidene)cyclohexanecarboxylate)(5.3 g, 21 mmol) 용액에 TEA(30ml)를 첨가하였다. 상기 용액을 상온에서 밤새 교반하였다. 상기 용액을 진공하에서 농축하여 무색의 오일로서 6g의 생성물을 얻고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계를 위해 직접 사용하였다.
단계 3: 2-(4-( 에톡시카르보닐 ) 시클로헥실 )아세트산(2-(4-(ethoxycarbonyl)cyclohexyl)acetic acid )의 합성
EtOH (50 ml)에 용해시킨 2-(4-(에톡시카르보닐)시클로헥실리덴)아세트산(2-(4-(ethoxycarbonyl)cyclohexylidene)acetic acid)(6.0 g, 28.3 mmol) 용액에 10% Pd/C (306 mg)를 천천히 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 수소화시켰다. 촉매를 여과하였다. 여과액을 진공하에서 농축하여, 무색 오일로서 2.5g의 생성물(42%)을 얻었다.
단계 4: 에틸 4-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 ) 시클로헥산카르복실레이트 ( ethyl 4-(2-(2,4- dihydroxyphenyl )-2- oxoethyl ) cyclohexanecarboxylate )(중간물질 C)의 합성
BF3-Et2O (10 ml)에 용해시킨 2-(4-(에톡시카르보닐)시클로헥실)아세트산(2-(4-(ethoxycarbonyl)cyclohexyl)acetic acid)(700 mg, 11.6 mmol) 용액에 레소르시놀(resorcinol)(1.5 g, 14.0 mmol)을 첨가하였다. 상기 용액을 밤새 85℃에서 교반하고, Na2CO3 용액 (2N, 20 ml)에 붓고, EtOAc (30 ml x 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축하여 3g의 노란색 오일을 얻고, 이를 실리카 겔 컬럼(PE/ EtOAc = 3/1)으로 정제하여 400mg의 중간물질 C를 얻었다. MS (ESI): m/z 307.1[M+1]+.
중간물질 D: 2-(4-(2H- 테트라졸 -5-일) 페닐 )-1-(2,4- 디하이드록시페닐 ) 에탄온 (2-(4-(2H- tetrazol -5- yl ) phenyl )-1-(2,4- dihydroxyphenyl ) ethanone )
단계 1: 2-(4- 브로모페닐 )-1-(2,4- 디하이드록시페닐 ) 에탄온 (2-(4-bromophenyl)-1-(2,4-dihydroxyphenyl)ethanone)의 합성
2-(4-브로모페닐)아세트산(2-(4-bromophenyl)acetic acid)을 시작으로 하여 중간물질 C의 단계 4에 따라 오렌지색 파우더로서 생성물(20 g, 27.9 %)을 얻었다. MS (ESI): m/z 307.0, 309.0 [M+1]+, [M+3]+ .
단계 2: 4-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 ) 벤조니트릴 (4-(2-(2,4-dihydroxyphenyl)-2-oxoethyl)benzonitrile)의 합성
DMF(50ml)에 용해시킨 2-(4- 브로모페닐 )-1-(2,4- 디하이드록시페닐 ) 에탄온(2-(4-bromophenyl)-1-(2,4-dihydroxyphenyl)ethanone)(5 g, 16.3 mmol)과 CuCN (5.8 g, 65.4 mmol)의 혼합물을 질소하에서 6시간 동안 150℃에서 교반하였다. 물(100ml)과 EtOAc (100 ml)를 혼합물에 첨가하였다. 침전물을 여과하고, 여과액을 염수(100ml)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 농축하여 검은색 오일을 얻고, 이를 콤비-플래쉬(PE/ EtOAc = 3/1)로 정제하여 노란색 파우더로서 생성물(1.5 g, 36.6%)을 얻었다. MS (ESI): m/z 254.1 [M+1]+.
단계 3: 2-(4-(2H- 테트라졸 -5-일) 페닐 )-1-(2,4- 디하이드록시페닐 ) 에탄온 (2-(4-(2H-tetrazol-5-yl)phenyl)-1-(2,4-dihydroxyphenyl)ethanone)의 합성
톨루엔(15ml)에 용해시킨 4-(2-(2,4-디하이드록시페닐)-2-옥소에틸)벤조니트릴(4-(2-(2,4-dihydroxyphenyl)-2-oxoethyl)benzonitrile)(1.2 g, 4.7 mmol) 용액에 TMSN3 (9.3 g, 85.4 mmol)과 Bu2SnO (309 mg, 1.41 mmol)를 상온에서 첨가하였다. 상기 혼합물을 밤새 환류를 위해 가열하였다. 휘발성 물질을 감압하에서 제거하고, 잔류물을 콤비-플래쉬(EtOAc /HOAc = 50/1)로 정제하여 노란색 파우더로서 중간물질 D(550 mg, 39.6 %)를 얻었다. 1H NMR (DMSO-d 6 500 MHz TMS): δ12.41 (s, 1H), 10.72 (s, 1H), 7.99~7.96 (m, 3H), 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.42 (dd, J = 2.0 Hz, J = 9.0 Hz, 1H), 6.27 (d, J = 2.5 Hz ,1H), 4.44 (s, 2H); MS (ESI): m/z 297.0 [M+1]+.
중간물질 E: 메틸 4-(2-(3- 메톡시페닐티오 )-2- 옥소에틸 ) 벤조에이트 ( methyl 4-(2-(3- methoxyphenylthio )-2- oxoethyl ) benzoate )
건조 DCM(50ml)에 용해시킨 2-(4-(메톡시카르보닐)페닐)아세트산(2-(4-(methoxycarbonyl)phenyl)acetic acid)(합성을 위하여 중간물질 A, 단계 1을 참조) (3.88 g, 20 mmol) 용액에 옥살릴 클로라이드(8.4 ml, 100 mmol)를 상온에서 교반하면서 한 방울씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 2시간 동안 교반하였다. TLC(PE : EtOAc = 3 : 1, quenched with MeOH)에 의해 반응이 완료되었음이 나타났다. 상기 혼합물을 농축하여 노란색 오일로서 메틸 4-(2-클로로-2-옥소에틸)벤조에이트(methyl 4-(2-chloro-2-oxoethyl)benzoate)(4.5 g)를 얻었으며, 이를 다음 단계를 위해 직접 사용하였다.
건조 CS2 (50 ml)에 용해시킨 알루미늄 트리클로라이드(aluminum trichloride)(2.93 g, 21.96 mmol) 현탁액에 3-메톡시벤젠티올(3-methoxybenzenethiol)(3.1 g, 21.96 mmol)을 0~5℃에서 첨가한 후, 건조 CS2 (5 ml)에 용해시킨 메틸 4-(2-클로로-2-옥소에틸)벤조에이트(methyl 4-(2-chloro-2-oxoethyl)benzoate)(4.5 g, crude, 21.16 mmol) 용액을 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 밤새 교반하고, 1N 차가운 HCl(200ml)에 조심스럽게 붓고, EtOAc (100 ml×3)로 추출하였따. 화합된 유기층을 물(100ml×2)와 염수(100ml)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 콤비-플래쉬(80 g silica gel, start PE/ EtOAc = 10/0 to 1/1 gradient, 50 ml/min, 40 min, 2.0 L total solvent volume)로 정제하여 노란색 고체로서 중간물질 E(2.7 g, 43%)를 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6 500 MHz TMS): δ7.95 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.49 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.37 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.02~7.04 (m, 1H), 6.97~6.98 (m, 2H), 4.18 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.76 (s, 3H); MS (ESI): m/z 317.1 [M+1]+.
중간물질 F: 메틸 4-(2-(2-( 아세틸티오 )-4- 메톡시페닐 )-2- 옥소에틸 ) 벤조에이트 ( methyl 4-(2-(2-( acetylthio )-4- methoxyphenyl )-2- oxoethyl ) benzoate )
단계 1: S-3- 메톡시페닐 에탄티오네이트(S-3- methoxyphenyl ethanethioate )의 합성
DCM(60ml)에 용해시킨 3-메톡시벤젠티올(3-methoxybenzenethiol)(5 g, 35.66 mmol)과 TEA (7.45 ml, 53.49 mmol) 용액에 Ac2O (4 g, 39.23 mmol)를 상온에서 첨가하고 3시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 1N HCl(50ml×2), 물(50ml×2) 및 염수(50ml)로 세척하고, 무수 소디움 설페이트로 건조시키고, 여과하고 농축하여 노란색 고체로서 생성물(6.5 g, 100%)을 얻었다. MS (ESI): m/z 183.1 [M+1]+.
단계 2: 메틸 4-(2- 클로로 -2- 옥소에틸 ) 벤조에이트 ( methyl 4-(2- chloro -2-oxoethyl)benzoate)의 합성
DCM(60ml)에 용해시킨 2-(4-(메톡시카르보닐)페닐)아세트산(2-(4-(methoxycarbonyl)phenyl)acetic acid)(합성을 위해 중간물질 A, 단계 1을 참조)(5 g, 25.75 mmol) 용액에 옥살릴 클로라이드(6.6ml, 77.25mmol)을 상온에서 한 방울씩 첨가하고, 상기 혼합물을 4시간 동안 교반하였다. 농축하여 금색 오일로서 생성물(6 g, 109%)을 얻고, 이를 다음 단계를 위해 직접 사용하였다.
단계 3: 메틸 4-(2-(2-( 아세틸티오 )-4- 메톡시페닐 )-2- 옥소에틸 ) 벤조에이트 ( methyl 4-(2-(2-( acetylthio )-4- methoxyphenyl )-2- oxoethyl ) benzoate ) (중간물질 F)의 합성
DCM(100ml)에 용해시킨 알루미늄 트리클로라이드(aluminum trichloride)(9.9 g, 74.08 mmol) 현탁액에 S-3-메톡시페닐 에탄티오에이트(S-3-methoxyphenyl ethanethioate)(단계 1) (4.5 g, 30.57 mmol)를 0~5℃에서 첨가한 후, DCM(20ml)에 용해시킨 메틸 4-(2-클로로-2-옥소에틸)벤조에이트(methyl 4-(2-chloro-2-oxoethyl)benzoate)(단계 2) (4.5 g, 조(crude), 24.69 mmol) 용액을 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 3일간 교반하였다. 상기 혼합물을 차가운 1N HCl(200ml)에 조심스럽게 붓고, EtOAc (50 ml×2)로 추출하였다. 화합된 유기층을 물(100ml×2) 및 염수(100ml)로 세척하고, 무수 소디움 설페이트로 건조시키고, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(PE/ EtOAc = 15/1 to 10/1)로 정제하여, 노란색 고체로서 중간물질 F(1.8g, 14%)을 얻었다. MS (ESI): m/z 359.0 [M+1]+.
중간물질 G: 3- 이오도 -7- 메톡시 -2- 메틸 -4H- 티오크로멘 -4-온(3- iodo -7- methoxy -2- methyl -4H- thiochromen -4- one )
단계 1: 7- 메톡시 -2- 메틸 -4H- 티오크로멘 -4-온(7- methoxy -2- methyl -4H-thiochromen-4-one)의 합성
PPA(200g)에 용해시킨 3-메톡시벤젠티올(3-methoxybenzenethiol)(24 g, 28.5 mmol) 혼합물에 에틸 아세토아세테이트(ethyl acetoacetate)(22.8g, 28.5mmol)을 상온에서 질소하에 첨가하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 강하게 교반하면서 5시간 동안 110℃로 가열하고, 얼음물(100ml)에 부었다. 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(ethyl acetate)(500ml×3)으로 추출하였다. 화합된 유기상을 무수 소디움 설페이트로 건조시키고, 여과하고 농축한 후, 실리카 겔 컬럼(PE/ EtOAc = 10/1)으로 정제하여, 노란색 고체로서 원하는 생성물(2 g, 4%)을 얻었다.
단계 2: 3- 이오도 -7- 메톡시 -2- 메틸 -4H- 티오크로멘 -4-온(3- iodo -7- methoxy -2-methyl-4H-thiochromen-4-one)의 합성
무수 아세토니트릴(anhydrous acetonitrile)(10 ml)에 용해시킨 7-메톡시-2-메틸-4H-티오크로멘-4-온(7-methoxy-2-methyl-4H-thiochromen-4-one)(500 mg, 2.42 mmol)과 요오드(and iodine)(620 mg, 2.42 mmol) 용액에 CAN (1.5 g, 2.70 mmol)을 상온에서 첨가하였다. 그 후, 상기 혼합물을 질소하에서 5시간 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공하에서 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트(ethyl acetate)(20 ml)와 포화된 Na2S2O3 (20 ml) 사이에 분할하였다. 유기상을 분리하고, 무수 소디움 설페이트로 건조시키고, 여과하고 농축하여 노란색 고체를 얻고, 이를 메탄올(5ml)로 재결정하여 밝은 노란색 고체로서 중간물질 G(620 mg, 77%)를 얻었다. 1HNMR (CDCl3 500 MHz ): δ8.46 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.09 (dd, J = 2.5, 9.5 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 2.61 (s, 3H).
중간물질 H: 메틸 5-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 )티오펜-3-카르복실레이트( methyl 5-(2-(2,4- dihydroxyphenyl )-2- oxoethyl ) thiophene -3- carboxylate )
단계 1: 메틸 2-(4- 브로모티오펜 -2-일)아세테이트( methyl 2-(4-bromothiophen-2-yl)acetate)의 합성
CHCl3 (50 ml)에 용해시킨 메틸 2-(티오펜-2-일)아세테이트(methyl 2-(thiophen-2-yl)acetate)(5 g, 32 m mol)와 무수 AlCl3 (10.7g, 80 mmol) 용액에 브로민(1.8ml, 34mmol)을 0~5℃에서 30분에 걸쳐 한 방울씩 첨가하였다. 첨가가 완료되면, 상기 혼합물을 밤새 상온으로 승온시켰다. 그 후, 그것을 얼음물(50ml)에 붓고, EtOAc (30 ml×3)로 추출하였다. 화합된 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축하였다. 컬럼 크로마토그래피(PE/ EtOAc = 10/1)로 정제하여 밝은 노란색 오일로서 생성물(3.1 g, 41%)을 얻었다.
단계 2: 메틸 5-(2- 메톡시 -2- 옥소에틸 )티오펜-3-카르복실레이트( methyl 5-(2-methoxy-2-oxoethyl)thiophene-3-carboxylate)의 합성
MeOH(110ml)에 용해시킨 상기 생성물(3.1g, 13.4mmol) 용액에 TEA (10 ml, 67.0 mmol)와 Pd(dppf)Cl2 (976 mg, 1.4 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 20시간 동안 CO(4 MPa) 하에 120℃에서 가열하였다. 농축한 후, 잔류물을 에틸 아세테이트(50ml)와 1N HCl(20ml) 사이에 분할하였다. 유기상을 분리하고, 무수 소디움 설페이트로 건조시키고, 여과하고 농축하여 생성물을 얻었다.
단계 3: 2-(4-( 메톡시카르보닐 )티오펜-2-일)아세트산(2-(4-(methoxycarbonyl)thiophen-2-yl)acetic acid )의 합성
THF/H2O (15/15 ml)에 용해시킨 상기 생성물(2.8g, 13.1mmol) 용액에 리튬 하이드록사이드 모노하이드레이트(lithium hydroxide monohydrate)(490 mg, 11.7 mmol)를 상온에서 3 부분으로 나누어 첨가하였다. 상기 혼합물을 2일간 교반하고, PE(10ml)로 추출하였다. 수상(aqueous phase)을 분리하고, 1N HCl을 사용하여 pH=5로 산성화시키고, EtOAc (30 ml×3)으로 추출하였다. 화합된 유기상을 무수 소디움 설페이트로 건조시키고, 여과하고 농축하여 조 생성물을 얻었다.
단계 4: 중간물질 H의 합성
레소르시놀(resorcinol)(248g, 2.3mol)과 상기 생성물(450mg, 2.3mol)의 혼합물에 BF3-Et2O (2 ml)을 첨가하고, 상기 혼합물을 밤새 95℃에서 교반하였다. 상기 혼합물을 포화된 소디움 카르보네이트(sodium carbonate)(10ml)에 pH=10이 될 때까지 붓고, 에틸 아세테이트(20ml×3)으로 추출하였다. 화합된 유기상을 분리하고, 무수 소디움 설페이트로 건조시키고, 여과하고 농축하여 노란색 오일을 얻고, 이를 컬럼 크로마토그래피(PE/ EtOAc = 3/1)로 정제하여 노란색 고체로서 중간물질 H(95 mg, 15 %)를 얻었다. MS (ESI): m/z 292.9 [M+1]+.
중간물질 I: 메틸 4-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 )-3-플루오로벤조에이트( methyl 4-(2-(2,4- dihydroxyphenyl )-2- oxoethyl )-3- fluorobenzoate )
단계 1: 메틸 3- 플루오로 -4-메틸벤조에이트( methyl 3- fluoro -4-methylbenzoate)의 합성
티오닐 클로라이드(thionyl chloride)(80ml)에 용해시킨 3-플루오로-4-메틸벤조산(3-fluoro-4-methylbenzoic acid)(20 g, 130 mmol) 용액을 2시간 동안 환류를 위해 가열하고(TLC는 시료 물질이 없음을 나타내었다), 휘발성 물질을 증발시켰다. 잔류물에 MeOH(100ml)을 0℃에서 교반하면서 한 방울씩 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축하고, EtOAc로 희석하고, 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 증발시켜 흰색 고체로서 생성물을 얻고, 이를 다음 단계를 위하여 추가 정제 없이 사용하였다(21 g, 96%).
단계 2: 메틸 4-( 브로모메틸 )-3-플루오로벤조에이트( methyl 4-(bromomethyl)-3-fluorobenzoate)의 합성
CCl4 (200 ml)에 용해시킨 상기 생성물(21g, 125mmol) 용액에 NBS (20 g, 113 mmol)와 벤조일 퍼록사이드(benzoyl peroxide)(1.5 g, 6 mmol)의 혼합물을 첨가하였다. 생성된 용액을 5시간 동안 환류하였다. 그 후, 용매를 증발시키고, 잔류물을 DCM(300ml)에 용해시키고, H2O (200 ml×3)로 세척하였다. 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 증발시켜 무색 오일로서 조 생성물(18 g, 64.7%)을 얻었다.
단계 3: 메틸 4-( 시아노메틸 )-3-플루오로벤조에이트( methyl 4-(cyanomethyl)-3-fluorobenzoate)의 합성
MeOH(150ml)에 용해시킨 메틸 4-(브로모메틸)-3-플루오로벤조에이트(methyl 4-(bromomethyl)-3-fluorobenzoate)(18 g, 73 mmol) 용액에 H2O (40 ml)에 용해시킨 NaCN (7.2 g, 146 mmol) 용액을 첨가하였다. 상기 혼합물을 5시간 동안 65℃에서 교반하였다. 대부분의 MeOH를 증발시키고, 추가로 물을 첨가하고, EtOAc (200 ml×3)으로 추출하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 증발시켜 조 생성물을 얻었다. 컬럼 크로마토그래피(PE/ EtOAc = 50/1 to 10/1)로 정제하여 생성물(8 g, 63.8%)을 얻었다.
단계 4: 메틸 4-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 )-3-플루오로벤조에이트( methyl 4-(2-(2,4- dihydroxyphenyl )-2- oxoethyl )-3- fluorobenzoate )의 합성
BF3-Et2O (100 ml)에 용해시킨 메틸 4-(시아노메틸)-3-플루오로벤조에이트(methyl 4-(cyanomethyl)-3-fluorobenzoate)(8 g, 41 mmol)와 레소르시놀(resorcinol)(6.8 g, 62 mmol) 용액에 15분간 0℃에서 HCl를 사용하여 거품을 일으켰다. 상기 혼합물을 16시간 동안 75℃에서 교반하였다. 그 후, H2O (100 ml)를 첨가하고, 상기 용액을 16시간 동안 95℃에서 가열하였다. 상기 혼합물을 상온으로 냉각시키고, Na2CO3로 중성화시키고, EtOAc (100 ml×3)로 추출하였다. 유기층을 화합시키고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 증발시켜 조 생성물을 얻었다. 컬럼 크로마토그래피(PE/ EtOAc = 10/1 to 3/1)로 정제하여 흰색 고체(6g, 48%)로서 중간물질 I를 얻었다.
중간물질 J: 메틸 4-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 )-3-메틸벤조에이트( methyl 4-(2-(2,4- dihydroxyphenyl )-2- oxoethyl )-3- methylbenzoate )
단계 1: 메틸 4-(2- 에톡시 -2- 옥소에틸 )-3-메틸벤조에이트( methyl 4-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-3-methylbenzoate)의 합성
메틸 4-브로모-3-메틸벤조에이트(methyl 4-bromo-3-methylbenzoate)(1.5 g, 6.55 mmol), 메틸 3-옥소부타노에이트(methyl 3-oxobutanoate)(0.99 g, 8.51 mmol) 및 K3PO4 (4.17 g, 19.6 mmol) 를 Pd(OAc)2(15 mg) 및 디-tert-부틸(2'-메틸-[1,1'-바이페닐]-2-일)포스핀(di-tert-butyl(2'-methyl-[1,1'-biphenyl]-2-yl)phosphine)(39 mg)과 혼합하고, 톨루엔(toluene)(25 ml)으로 희석하였다. 생성된 혼합물을 진공을 통하여 간단하게 탈가스화하고, 아르곤으로 충전하였다. 그 후, 24시간 동안 90℃에서, 5시간 동안 110℃에서 가열하였다. EtOAc과 함께 물을 이용하여 분리정제한 후, 컬럼 크로마토그래피로 분리하고, EtOAc/Hexane (1/3)으로 용출하여 오일로서 원하는 생성물인 메틸 4-(2-에톡시-2-옥소에틸)-3-메틸벤조에이트(methyl 4-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-3-methylbenzoate)(366 mg, 25%)를 얻었다.
단계 2: 2-(4-( 메톡시카르보닐 )-2- 메틸페닐 )아세트산(2-(4-(methoxycarbonyl)-2-methylphenyl)acetic acid )의 합성
메틸 4-(2-에톡시-2-옥소에틸)-3-메틸벤조에이트(methyl 4-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-3-methylbenzoate)(366 mg)를 MeOH(10ml)과 H2O (2 ml)에 현탁시키고, 3일간에 걸쳐 LiOH (48 mg)로 처리하였다. 반응 혼합물을 1N HCl로 산성화시킨 후, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 증발시키고 진공하에서 건조시켜, 원하는 생성물(295mg)을 얻었다.
단계 3: 중간물질 J의 합성
2-(4-(메톡시카르보닐)-2-메틸페닐)아세트산(2-(4-(methoxycarbonyl)-2-methylphenyl)acetic acid) (295 mg) 을 밤새 90℃에서 BF3Et2O에 용해시킨 레소르시놀(190mg)로 처리하였다. 에틸 아세테이트와 함께 물을 이용하여 분리정제하고 컬럼 정제한 후, 원하는 생성물(296mg)을 오일로서 분리하였다.
중간물질 K: 4-(2-(2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 ) 벤조니트릴 (4-(2-(2,4- dihydroxyphenyl )-2- oxoethyl ) benzonitrile )
합성: DMF(50ml)에 용해시킨 2-(4-브로모페닐)-1-(2,4-디하이드록시페닐)에탄온(2-(4-bromophenyl)-1-(2,4-dihydroxyphenyl)ethanone)(단계 1, 중간물질 D) (5 g, 16.3 mmol)와 CuCN (5.8 g, 65.4 mmol)의 혼합물을 질소 보호하에서 6시간 동안 150℃에서 교반하였다. 상기 혼합물에 물(100ml)과 EtOAc (100 ml)를 첨가하였다. 침전물을 여과하고, 침전액을 염수(100ml)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 농축하여 검은색 오일을 얻고, 이를 콤비-플래쉬(PE/ EtOAc = 3/1)로 정제하여 노란색 파우더로서 중간물질 K(1.5g, 36.6%)를 얻었다.
중간물질 L: 메틸 4-(2-(3- 플루오로 -2,4- 디하이드록시페닐 )-2- 옥소에틸 ) 벤조에이트 ( methyl 4-(2-(3- fluoro -2,4- dihydroxyphenyl )-2- oxoethyl ) benzoate )
중간물질 L은 2-(4-(메톡시카르보닐)페닐)아세트산(2-(4-(methoxycarbonyl)phenyl)acetic acid)(합성은 PCT/US2010/024035에 기재되어 있음)과 2-플루오로벤젠-1,3-디올(2-fluorobenzene-1,3-diol)(상업적으로 입수가능)으로부터 시작하여, 중간물질 K, 단계 3에 기재된 방법에 따라 제조하였다.
실시예 26: GSNOR 검정( GSNOR Assays )
GSNOR 활성을 억제하기 위한 다양한 화합물들의 활성에 대하여 시험관 내 테스트를 하였다. 실시예 1-22에서의 GSNOR 억제제 화합물들은 약 <1μM의 IC50을 가진다. 실시예 1-3, 5-6, 8-9, 11-12, 14, 16-22에서의 GSNOR 억제제 화합물들은 약 0.1보다 작은 IC50을 가진다.
GSNOR 발현 및 정제는 바이오케미스트리 2000에 기재되어 있다(Biochemistry 2000, 39, 10720-10729).
GSNOR 발효( GSNOR fermentation )
100μg/ml 암피실린을 포함하는 2XYT 배지에 GSNOR 글리세롤 스톡을 천자한 후 37℃ 배양기에서 밤새 전배양(pre-cultures) 하였다. 그 후, 암피실린을 포함하는 신선한 2XYT(4L) 배지에 세포를 넣어, 유도하기 전 37℃에서 0.6-0.9의 OD(A600) 로 배양하였다. GSNOR 발현을 20℃에서의 밤새 배양에서 0.1% 아라비노스로 유도하였다.
GSNOR 정제( GSNOR Purification )
E.coli 세포 페이스트를 질소 캐비테이션(nitrogen cavitation)으로 용해하고, 분리된 용해물을 AKTA FPLC (Amersham Pharmacia) 상에서 Ni 친화 크로마토그래피(Ni affinity chromatography)로 정제하였다. 상기 컬럼을 0-500mM 이미다졸 기울기를 사용하여 20 mM Tris pH 8.0/250 mM NaCl에서 용출하였다. Smt-GSNOR 융합을 포함하는 용출된 GSNOR 분획을 친화 태그(affinity tag)를 제거하기 위하여 4℃에서 Ulp-1을 사용하여 밤새 분해한 후, 동일한 조건하에서 Ni 컬럼을 다시 실행하였다. GSNOR을 통과된 분획(flowthrough fraction)에서 회수하고, 결정학(crystallography)을 위하여 20 mM Tris pH 8.0, 1mM DTT, 10uM ZnSO4에서 Q-세파로오스(Q-Sepharose)와 헤파린 통과 크로마토그래피(heparin flowthrough chromatography)로 정제하였다.
GSNOR 검정( GSNOR assay )
GSNO와 효소/NADH 용액을 매일 새로 만들었다. 상기 용액을 여과하고 상온으로 승온시켰다. GSNO 용액: 100 mM NaPO4 (pH 7.4), 0.480 mM GSNO. 396L의 GSNO 용액을 큐벳(cuvette)에 넣은 후, DMSO에 용해시킨 8μL의 테스트 화합물(또는 전체 반응 조절을 위하여 DMSO 만을)을 첨가하고, 피펫 팁으로 혼합하였다. 테스트될 화합물을 100% DMSO에 10mM의 스톡 농도로 만들었다. 100% DMSO로 2배 계단희석(serial dilution)을 완료하였다. 검정을 위해 검정에서의 DMSO 최종 농도를 1%로 하기 위하여 각 8μL의 희석액을 첨가하였다. 테스트된 화합물의 농도는 100 내지 0.003μM이다. 효소/NADH 용액: 100 mM NaPO4 (pH 7.4), 0.600 mM NADH, 1.0 μg/ml GSNO 리덕타아제. 반응을 개시하기 위하여 396μL의 효소/NADH 용액을 큐벳에 넣었다. 큐벳을 캐리 3E 자외선/가시광선 분광광도계(Cary 3E UV/Visible Spectrophotometer)에 놓고, 25℃ 340nm 흡광도/분에서의 변화를 3분간 기록하였다. 각 화합물 농도에 대하여 검정을 3회 완료하였다. 각 화합물에 대한 IC50의 값을 시그마플롯(SigmaPlot)의 효소반응속도 모듈(Enzyme Kinetics Module)에서의 표준 곡선 분석을 사용하여 계산하였다.
최종 검정 조건: 100 mM NaPO4, pH 7.4, 0.240 mM GSNO, 0.300 mM NADH, 0.5 μg/ml GSNO 리덕타아제, 및 1% DMSO. 최종 부피: 800 μL/큐벳.
실시예 27: 천식 동물모델에서의 GSNORi 의 효과
천식 동물모델:
메타콜린(methacholine; MCh)-유도성 기관지수축/기도 과민반응에 대한 GSNOR 억제제의 효능을 선별하기 위하여, 난백알부민(ovalbumin; OVA)-유도성 천식 마우스 모델을 사용하였다. 이는 인간의 천식과 유사한 급성, 알러지성 천식 표현형을 동반하는 널리 사용되며 잘 특성화되어진 모델이다. GSNOR 억제제의 효능은OVA 감작(OVA sensitization)과 기도 유발(airway challenge) 이후 MCh를 사용한 유발 이전에 GSNOR 억제제를 투여하는 프로토콜을 사용하여 평가하였다. 전신체적변동 기록기(whole body plethysmography)를 사용하여 MCh의 투약을 증가시킨 유발에 의한 기관지수축을 평가하였다(Penh; Buxco). 기관지 폐포 세정액(bronchoalveolar lavage fluid; BALF) 내로의 호산구 침윤(eosinophil infiltrate)의 양 또한 폐 염증의 척도로서 측정하였다. GSNOR 억제제의 효과를 양성 대조군으로서 비히클 및 컴비벤트(Combivent)(흡입용; IH)와 비교하였다.
물질 및 방법
항원감작 ( allergen sensitization ) 및 유발 프로토콜
PBS에 용해시킨 OVA(500 μg/ml)를 동량의 증류수에 용해시킨 10%(w/v) 알루미늄 포타슘 설페이트와 혼합하고, 10N NaOH를 사용하여 pH 6.5로 조정한 후, 상온에서 60분간 배양하였다. 5분간 750 xg에서 원심분리한 후, PVA/명반(alum) 펠릿을 증류수에 원래 양이 되도록 재현탁하였다. 0일에 명반과 착물을 형성한 100μg OVA(0.2ml의 식염수에 용해시킨 500μg/ml)를 마우스에 복강 내(IP)로 주사하였다. 식염수에 용해시킨 0.2ml의 케타민(ketamine)과 자일라진(xylazine) 혼합물(각각, 0.44 및 6.3mg/ml)을 IP 주사하여 마우스를 마취시키고, 보드 위에 앙와위(supine position)로 눕혔다. 250μg(2.5mg/ml의 100μl)의 OVA(8일째) 및 125μg(2.5mg/ml의 50μl)의 OVA(15, 18 및 21일에)를 각 동물의 혀 뒷면에 놓았다.
폐기능 검사( Penh )
북소 챔버(Buxco chamber)(Wilmington, NC)를 사용하는 전신체적변동 기록기(whole body plethysmography)를 이용하여, 의식이 있고(conscious), 자유롭게 움직이며(freely moving), 자발적으로 호흡하는 마우스에서의 최종 OVA 유발 24시간 후의 메타콜린에 대한 생체 내 기도 반응성을 측정하였다. 마우스에 2분간 에어졸화된 생리식염수 또는 초음파 네블라이저(ultrasonic nebulizer)에 의해 발생시킨 메타콜린의 투약량을 증가(5, 20 및 50mg/ml)시켜 유발하였다. 기관지 수축의 정도는 동일한 마우스에서 기도 저항성(airway resistance), 임피던스(impedence) 및 흉곽내압(intrapleural pressure)의 측정과 관련이 있는 강화된 포즈(enhanced pause; Penh), 계산된 무차원 값(dimensionless value)으로 나타내었다. Penh를 판독하여, 각각의 분무(nebulization) 유발 후 4분 동안을 평균내었다. Penh를 하기와 같이 계산하였다: Penh = [(Te/Tr - 1) x (PEF/PIF)], 여기에서 Te는 호기시간(expiration time)이고, Tr은 이완시간(relaxaiton time), PEP는 최대 호기 유속(peak expiratory flow)이고 PIF는 최대 흡기 유속(peak inspiratory flow) ×0.67 계수이다. 최대에서 최대의 사용자 정의 백분율(user-defined percentage)로 변하는 상자 내압(box pressure)에 대한 시간을 이완 시간으로 나타낸다. Tr 측정은 최대 박스 내압에서 시작하여 40%에서 끝낸다.
BALF 에서의 호산구 침윤
기도 과민성을 측정한 후, 마우스에서 심장 천자를 통해 방혈한 후, 양쪽 폐엽 또는 주 기관지에서 좌측 폐엽을 결찰한 후 우측 폐엽으로부터 BALF를 수집하였다. 총 BALF 세포를 0.05ml 엘리컷으로 계측하고, 남아있는 액을 4℃에서 10분간 200xg로 원심분리하였다. 세포 펠렛을 10% BSA를 포함하는 식염수에 재현탁하여 유리 슬라이드에 도말하였다. 증류수에 용해시킨 0.05% 에오신 용액과 5% 아세톤을 이용하여 호산구를 5분간 염색하고, 증류수로 헹구고, 0.07% 메틸렌 블루로 대비염색하였다. 대안적으로, 호산구 및 다른 백혈구들은 DiffQuik으로 염색하였다.
GSNOR 억제제 및 대조군
GSNOR 억제제를 0.00005 내지 3mg/ml 범위의 농도로 pH 7.4, 인산완충식염수(PBS) 또는 0.5% w/v 카르복시 메틸셀룰로오스(carboxy methylcellulose)에 재구성하였다. GSNOR 억제제를 정맥 내(IV) 또는 위관영양(gavage)으로 1회 용량 또는 다회 용량으로 마우스(10ml/kg)에 투여하였다. 투약은 MCh 유발 이전 30분 내지 72시간에 수행하였다. GSNOR 억제제의 효과를 동일한 방법으로 투약한 비히클과 비교하였다.
콤비벤트(Combivent)를 모든 연구에서 양성 대조군으로 사용하였다. 콤비벤트(Boehringer Ingelheim)를 제품을 채운 흡입 기구를 사용하여 폐로 투여하였으나, 마우스에는 투여를 위하여 피펫 팁을 사용하였다. 콤비벤트는 MCh 유발 48시간 전, 24시간 전 및 1시간 전에 투여하였다. 각 콤비벤트의 흡입(또는 투약)은 18㎍ 이프라토퓸 브로마이드(ipratropium bromide; IpBr)와 103㎍ 알부테롤 설페이트(albuterol sulfate) 또는 대략 9.0mg/kg IpBr 및 5mg/kg 알부테놀을 제공한다.
통계적 분석
그래프패드 프리즘 5.0(GraphPad Prism 5.0)(San Die해, CA)을 사용하여, 기준치(baseline), 식염수(saline) 및 MCh 유발을 위한 투약을 증가시키는 것에서 Penh에 대한 곡선하 면적을 계산하고, 각각 (IV 또는 경구적으로 투여된) 비히클 대조군의 백분율로서 나타내었다. 각 연구 내에서 치료군과 각 비히클 대조군 사이의 통계적 차이는 일원분산분석(one-way ANOVA), 던넷(Dunnetts) 또는 본페로니(Bonferroni) 사후분석(post-hoc test) 또는 t-테스트(t-test)를 사용하여 계산하였다(JMP 8.0, SAS Institute, Cary, NC or Microsoft Excel). 치료군과 각 비히클 대조군 사이에서 0.05 미만의 p 값은 현저한 차이가 있는 것으로 간주된다.
결과
천식 OVA 모델에서, 실시예 3의 화합물은 평가 24시간 전 10mg/kg의 1회 경구투여를 통하여 주어졌을 때, Penh에 대한 AUC(p<0.05) 및 BALF 내로의 호산구 침윤을 각각 비히클 대조군의 43% 및 42%로 감소시켰다. 다른 연구에서, 실시예 3의 화합물은 평가 48시간 전, 24시간 전 그리고 1시간 전에 10mg/kg의 3회 경구투여를 통하여 주어졌을 때, BALF 내로의 호산구 침윤을 비히클 대조군의 12%로 감소시켰다.
천식 OVA 모델에서, 실시예 1의 화합물은 평가 24시간 전 10mg/kg의 1회 경구투약을 통하여 주어졌을 때, Penh에 대한 AUC(p<0.05) 및 BALF 내로의 호산구 침윤을 각각 비히클 대조군의 20% 내지 39% 및 0% 내지 31%로 감소시켰다. 실시예 1의 화합물은 평가 24시간 전에 10mg/kg의 1회 정맥 내 투여를 통하여 주어졌을 때, Penh에 대한 AUC를 비히클 대조군의 39%로 현저하게 감소시켰다.
천식 OVA 모델에서, 실시예 9의 화합물은 평가 24시간 전 10mg/kg의 1회 경구 투여를 통하여 주어졌을 때, Penh에 대한 AUC 및 BALF 내로의 호산구 침윤을 각각 비히클 대조군의 18% 및 82%로 현저하게 감소시켰다.
천식 OVA 모델에서, 실시예 16의 화합물은 평가 48시간 전, 24시간 전 그리고 1시간 전에 10mg/kg의 3회 경구 투여를 통하여 주어졌을 때, BALF 내로의 호산구 침윤을 현저하게 감소시켰다(p<0.05).
실시예 28: 마우스의 약물동력학 ( Pharmacokinetic ; PK ) 연구
실험 모델
본 발명의 화합물의 약물동력학을 측정하기 위하여 마우스를 사용하였다. 이 종은 경구(PO) 및 정맥 내(IV) 테스트 물품 모두를 투여하는 것에 의하여 화합물의 생물학적 이용가능성(bioavailability)을 평가하는데 널리 사용된다. 본 발명의 화합물의 효능은 최고 활성을 나타내는 시간에서 IV 또는 PO 투여를 통하여 수컷 BALB/c 마우스에서의 혈장 노출을 평가함으로써 비교하였다.
물질 및 방법
본 발명의 화합물의 IV 투여
본 발명의 화합물을 인산완충식염수(PBS)/10% 솔루톨(HS 15)의 맑은 용액에 재구성하여 0.2mg/ml의 농도로 만들어 1회 IV 투여로 마우스에(2mg/kg) 투여하였다. 외측 꼬리 정맥(lateral tail vein)을 통하여 투여하였다. 아이소플루레인(isoflurane) 마취 하에서 심장 천자에 의해 지정된 시각 지점(0.083, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8, 16, 24시간)에서 혈액 샘플을 수집하였다(동물 당 1ml 혈액까지). 상기 혈액을 Li-헤파린을 포함하는 튜브 안에 수집하였다. 상기 혈액 샘플을 대략 회수 30분 내로 원심분리 때까지 얼음에 놓아두었다. 혈장을 라벨을 붙인 폴리프로필렌 튜브 안으로 옮기고, LC/MS/MS에 의해 분석할 때까지 -70℃에 냉동시켰다.
본 발명의 화합물의 PO 투여
본 발명의 화합물을 40% 프로필렌 글리콜/40% 프로필렌 카르보네이트/20%의 5% 수크로오스의 맑은 용액에 재구성하여 2mg/ml의 농도로 만들어 위관 영양을 통하여 1회 경구 투여로 마우스에(10mg/kg) 투여하였다. 아이소플루레인 마취 하에 심장 천자에 의해 투약 후 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20 및 24시간에서 혈액 샘플을 수집하였다. 상기 혈액을 Li-헤파린을 포함하는 튜브 안에 수집하였다. 상기 혈액 샘플을 대략 회수 30분 내로 원심분리 때까지 얼음에 놓아두었다. 혈장을 라벨을 붙인 폴리프로필렌 튜브 안으로 옮기고, LC/MS/MS에 의해 분석할 때까지 -70℃에 냉동시켰다.
LC / MS / MS 분석
각 시간 지점에서의 혈장 샘플을 1ng/ml의 최저 정량 한계(lower limit of quantification)와 함께 LC-MS/MS를 사용하여 분석하였다. 각 샘플 및 적절한 매트릭스에서 본 발명의 각 화합물에 대하여 생성된 회귀 곡선(regression curve)에서 본 발명의 화합물의 양을 측정하기 위하여 혈장을 분석하였다.
IV 및 PO 투여 모두에 대한 PK 파라미터를 계산하기 위하여 WinNonlin 분석을 사용하였다:
IV 부분에 대한 PK 파라미터 - AUClast; AUCINF; T1/2; Cl; Vss; Cmax; MRT
PO 부분에 대한 PK 파라미터 - AUClast; AUCINF; T1/2; Cmax; Cl, MRT.
상기 PK 파라미터에 더하여 생물학적 이용가능성(%F)을 계산하였다.
결과
실시예 1, 3, 9 및 12의 화합물은 약 4-41%의 경구 생물학적 이용가능성을 가진다. 실시예 16의 화합물은 약 44%의 경구 생물학적 이용가능성을 가진다. 대조군 화합물 4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤조산(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzoic acid)(PCT/US2010/024035을 참조)은 약 17%의 경구 생물학적 이용가능성을 가진다. 대조군 화합물은 실시예 15보다 약 3배 더 빠르게 제거된다.
실시예 29: 염증성 장 질환 동물모델에서 GSNOR 억제제의 효능
모델의 개요
마우스에서 덱스트란 소디움 설페이트(dextran sodium sulfate; DSS)-유도성 IBD의 급성 및 만성 모델은 이 질병에 대한 GSNORi의 효능을 분석하는데 사용되어 왔다. 급성 및 만성 DSS-유도성 IBD는 인간 질병에서 발견되는 것들과 유사하게 결장에 병리학적 변화가 유도된 널리 사용되며 잘 확립된 모델이다. 이 모델과 인간 질병에서는, 결장의 소낭(crypt) 내 상피세포가 파괴되며, 이는 상피 장벽(epithelial barrier)의 기능이상을 초래하고, 조직 염증(inflammation), 부종(edema) 및 궤양(ulceration)이 뒤따른다. GSNORi 치료는 s-니트로소글루타치온(GSNO) 레벨을 회복시켜 상피 장벽 기능이상을 예방하거나 회복시킴으로써 IBD에 유익할 것이다.
급성 예방적 모델( acute prophylactic model )
연이은 6일 동안 수컷 C57Bl/6 마우스(각 그룹당 N=8 내지 10의 마우스)의 음용수에 DSS를 투여함으로써 실험적 IBD를 유도하였다. GSNORi를 DSS 노출 이틀 전에 시작하여 DSS 노출 후 이틀 연속적으로 10일간 0.1 내지 10mg/kg/day의 용량으로 경구적으로 투여하였다. DSS 노출 이틀 후, GSNORi의 효능을 스코어=0(정상 조직)에서 스코어=4(울혈성 조직 손상 및 뚜렷한 병리학적 변화)까지의 범위의 5점 스케일을 사용하여 내시경(endoscopy) 및 조직병리학(histopathology)을 통해 맹목형 형태(blinded fashion)로 평가하였다. 염증 경로에 관여하는 순환하는 사이토카인의 레벨 또한 평가하였다. GSNORi의 효능을 대조군으로 처리된 비히클과 비교하였다. 코르티코스테로이드(corticosteroid), 프레드니솔론(prednisolone)을 이 연구에서 양성 대조군으로서 사용하였고, 경구 투여를 통하여 일일 3mg/kg/day로 투여하였다. 비감작 마우스(naive mice)(N=5) 또한 정상 조직 대조군으로서 평가하였다.
만성 치료 모델( Chronic treatment model ):
연이은 6일 동안 수컷 C57Bl/6 마우스(각 그룹당 N=10 내지 12의 마우스)의 음용수에 DSS를 투여함으로써 실험적 IBD를 유도하였다. GSNORi를 DSS 노출 중단 하루 후에 시작하여 14일간 10mg/kg/day의 용량으로 경구적으로 투여하였다. DSS 노출 이틀 후, GSNORi의 효능을 스코어=0(정상 조직)에서 스코어=4(울혈성 조직 손상 및 뚜렷한 병리학적 변화)까지의 범위의 5점 스케일을 사용하여 내시경(endoscopy) 및 조직병리학(histopathology)을 통해 맹목형 형태(blinded fashion)로 평가하였다. 염증 경로에 관여하는 순환하는 사이토카인의 레벨 또한 평가하였다. GSNORi의 효능을 대조군으로 처리된 비히클과 비교하였다. 코르티코스테로이드(corticosteroid), 프레드니솔론(prednisolone)을 이 연구에서 양성 대조군으로서 사용하였고, 경구 투여를 통하여 일일 3mg/kg/day로 투여하였다. 비감작 마우스(naive mice)(N=5) 또한 정상 조직 대조군으로서 평가하였다.
결과
실시예 3의 화합물은 급성 DSS-유도성 IBD 마우스 모델에서 결장의 손상을 감소시켰다. 예방적 투약 규칙을 사용하여 연속 10일간 각각 0.1 또는 1mg/kg/day의 실시예 3의 화합물로 경구 치료한 후, 내시경 평가를 통하여 심각한 결장 손상 스코어를 나타내는 마우스의 백분율은 비히클 대조군의 38% 또는 25%로 감소하였다. 10일간 각각 0.1 또는 1mg/kg/day의 실시예 3의 화합물로 경구 치료한 후, 내시경 평가를 통하여 심각한 결장 손상을 나타내는 마우스의 백분율은 비히클 대조군의 12% 또는 33%로 감소하였다.
실시예 1의 화합물은 급성 DSS-유도성 IBD 마우스 모델에서 결장의 손상을 감소시켰다. 예방적 투약 규칙을 사용하여 연속 10일간 10mg/kg/day의 실시예 1의 화합물로 경구 치료한 후, 내시경 또는 조직병리학적 평가를 통하여 심각한 결장 손상 스코어를 나타내는 마우스의 백분율은 각각 비히클 대조군의 75% 또는 17%로 감소하였다.
실시예 16의 화합물은 급성 DSS-유도성 IBD 마우스 모델에서 결장의 손상을 감소시켰다. 예방적 투약 규칙을 사용하여 연속 10일간 10mg/kg/day의 실시예 16의 화합물로 경구 치료한 후, 내시경 또는 조직병리학적 평가를 통하여 심각한 결장 손상 스코어를 나타내는 마우스의 백분율은 각각 비히클 대조군의 58% 또는 15%로 감소하였다.
실시예 30: 만성 폐쇄성 폐질환( COPD ) 모델에서 GSNOR 억제제의 효능
단기간 담배연기 COPD 모델( Short Duration Cigarette Smoke COPD models )
단기간 동안(4일 또는 11일)의 담배 연기에 노출시킴으로써 유도된 만성 폐쇄성 폐질환 마우스 모델에서 GSNOR 억제제의 효능을 평가하였다. COPD의 발병 및 진행과 관련된 몇몇의 초기 사건들에 있어서의 GSNOR 억제제의 영향을 알아보기 위하여, 기관지폐포 세척액(BALF) 내로의 염증세포의 침윤 및 염증 및 조직의 교체(turnover)/회복(repair)에 관련된 케모카인(chemokines)의 BALF 레벨을 측정하였다.
모델의 개요:
마우스에서 담배 연기에 의해 유도된 COPD의 급성(4일) 및 아급성(11일) 모델을 사용하여 COPD에 대한 GSNOR 억제제의 효능을 분석하였다. 담배 연기에 대한 동물의 노출은 COPD 모델에 인간 질병에서와 같이 동일한 병인(causative agent)에 의해 유도되는 손상을 주며, 상기 손상은 기도 협착(airway obstruction), 기강 확장(airspace enlargement) 및 이 병적 이상에서의 염증 반응의 개입을 포함하는 인간 질병에 대하여 유사성을 나타낸다. 동물 모델에서, 폐 병리에서의 변화는 담배 연기에 장기간 노출(몇 달)된 후 유일한 증거이므로, 효과적인 식별 수단으로서 만성 모델을 만드는 것은 엄두를 못 낼 정도로 비싸다. 최근에, 마우스에서 단기간(2주 또는 그보다 적게)의 담배 노출 후 염증성 반응을 분석하는 모델이 COPD에 대한 신규한 치료제의 효능 및 작용 메커니즘을 식별하기 위한 도구로서 사용되고 있다. COPD의 발병 및 진행에서 염증의 주요 역할은 이 단기 모델을 신규한 치료제의 효능의 초기 테스트와 관련되게 만든다.
급성 담배 노출 모델(4일):
암컷 C57Bl/6 마우스(그룹 당 N=8)를 전신 노출 챔버(whole body exposure chamber)를 사용하여 담배 연기에 노출시켰다. 주기 사이에 30분의 금연시간을 가지고, 순차적으로 6개의 담배(Kentucky 3R4F without filter)로부터 담배 연기를 연속 4일간 4번의 주기로 매일 마우스에 노출시켰다. 담배연기 노출 이틀 전부터 시작하여 노출 후 1일까지 지속적으로 7일간 10mg/kg/day로 경구 투여를 통해 GSNOR 억제제를 투여하였다.
BALF에서 총 세포, 백혈구 및 광학 현미경을 통한 백혈구 감별의 수를 정량하고, 대략 마지막 담배연기 노출 24시간 후에 ELISA를 통한 BALF 케모카인의 레벨을 정량함으로써 GSNOR 억제제의 효과를 평가하였다. GSNOR 억제제의 효과를 대조군으로 처리된 비히클과 비교하였다. PDE4 억제제, 로플루밀라스트(roflumilast)를 연구를 위한 양성 대조군으로서 사용하였다. 비감작 마우스 그룹(N=8)을 공기에 노출시켜, 연구를 위한 양성 대조군으로서 사용하였다.
아급성 담배연기 노출 모델(11일):
암컷 C57Bl/6 마우스(그룹 당 N=10)를 필터가 없는 100개의 말보로 담배로부터 생긴 담배 연기에 노출시켰다. 노출 시간은 연구 1일에 25분, 연구 2일에 35분 및 연구 3 내지 11일에 45분이었다. 각 날에 담배연기에 노출되기 한 시간 전에 GSNOR 억제제를 투여하였다. 11일일 동안 1 내지 10mg/kg/day로 GSNOR 억제제를 경구로 투여하였다. 마지막 노출 24시간 후에 광학 현미경을 통하여 BALF에서의 총 세포의 수 및 백혈구 감별을 정량함으로써 GSNOR 억제제의 효과를 평가하였다. GSNOR 억제제의 효과를 대조군으로 처리된 비히클과 비교하고, BALF 세포 수 증가를 유도하는 담배연기의 백분율 억제로서 나타내었다. 로플루밀라스트를 연구를 위한 양성 대조군으로서 사용하고, 5mg/kg/day로 투여하였다. 비감작 마우스 그룹(N=10)을 공기에 노출시켜, 연구를 위한 음성 대조군으로서 비히클을 투여하였다.
결과
실시예 3의 화합물은 BALF 세포 침윤 및 BALF 염증성 케모카인에서 담배연기-유도성 변화를 감소시킨다. 실시예 3은 급성 4일 담배연기 모델에서 7일간 10mg/kg/day로 경구적으로 투여되었을 때, 비히클 처리된 대조군과 비교하여 BALF에서의 총 세포, 백혈구, 대식세포, 호중성 백혈구 및 호산구의 담배연기-유도성 증가를 완벽하게(100%) 그리고 현저하게(p < 0.05) 억제하였다. 이러한 실시예 3의 효과들은 로플루밀라스트에서 관찰된 것들보다 더 비슷하거나 컸다. 실시예 3은 또한 비감작 마우스에서 관찰된 레벨로 BALF 케모카인을 회복시켰다. 아급성 11일 모델에서, 실시예 3의 화합물은 11일간 10mg/kg/day로 경구적으로 투여되었을 때, BALF에서의 총 세포(p < 0.05), 대식세포(p < 0.05), 호중성 백혈구, 호산구 및 림프구의 담배연기-유도성 증가를 각각 26%, 28%, 25%, 57% 및 24%로 억제하였다.
실시예 16의 화합물은 아급성 11일 모델에서 11일간 1mg/kg/day로 경구적으로 투여되었을 때, BAL에서의 총 세포, 대식세포, 호중성 백혈구 및 림프구의 담배연기-유도성 증가를 각각 53%, 44%, 68% 및 62%로 현저하게(p < 0.05) 억제하였다. 실시예 16의 효과는 로플루밀라스트의 것들과 비슷하였다.
본 발명의 목적 또는 범위로부터 벗어나는 일 없이 본 발명의 방법 및 조성물에서 다양한 변경 및 변화들이 일어날 수 있다는 것은 당업자들에게 명백할 것이다.

Claims (8)

  1. 일반식 (I)의 화합물.

    Figure pct00037

    여기에서,
    X는 O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
    Y는 O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
    Z는 Z1, Z2, Z3 및 Z4로 이루어지는 군으로부터 선택되고; 여기에서
    Z1은 , Z2는
    Figure pct00039
    , Z3는
    Figure pct00040
    및 Z4는
    Figure pct00041
    이며, 다만 적어도 하나의 X 또는 Y가 S일 경우 Z는 오직 Z4이고;
    R1은 수소, (C1-C6)알킬, (C3-C7)시클로알킬, (C1-C6)할로알킬, 비치환된 아릴(C1-C4)알킬, 치환된 아릴(C1-C6)알킬, (C1-C6)헤테로알킬, 치환 또는 비치환된 아릴 및 치환 또는 비치환된 헤테로아릴로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
    R2는 수소, 할로겐, 시아노 및 (C1-C6)알콕시로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
    R3는 수소, 할로겐, (C1-C6)알킬, (C1-C6)할로알킬, (C1-C6)알콕시, 시아노 및 N,N-디메틸아미노로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
    R4는 테트라졸(tetrazole), 옥사디아졸론(oxadiazolone), 티아디아졸론(thiadiazolone), 메틸술포닐카르바모일(methylsulfonylcarbamoyl) 및 N-하이드록시카르바모일(N-hydroxycarbamoyl)로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
    R5는 카르복시(carboxy), 테트라졸(tetrazole), 옥사디아졸론(oxadiazolone), 티아디아졸론(thiadiazolone), 메틸술포닐카르바모일(methylsulfonylcarbamoyl) 및 N-하이드록시카르바모일(N-hydroxycarbamoyl)로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
  2. 제1항에 있어서,
    R4는 테트라졸(tetrazole), 1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온-3-일(1,2,4-oxadiazol-5(4H)-one-3-yl), 1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온-3-일(1,2,4-thiadiazol-5(4H)-one-3-yl), 1,3,4-옥사디아졸-2(3H)-온-5-일(1,3,4-oxadiazol-2(3H)-one-5-yl), 1,3,4-티아디아졸-2(3H)-온-5-일(1,3,4-thiadiazol-2(3H)-one-5-yl), 1,2,4-티아디아졸-3(2H)-온-5-일(1,2,4-thiadiazol-3(2H)-one-5-yl), 1,2,4-옥사디아졸-3(2H)-온-5-일(1,2,4-oxadiazol-3(2H)-one-5-yl), 메틸술포닐카르바모일(methylsulfonylcarbamoyl) 및 N-하이드록시카르바모일(N-hydroxycarbamoyl)로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
    R5는 카르복시(carboxy), 테트라졸(tetrazole), 1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온-3-일(1,2,4-oxadiazol-5(4H)-one-3-yl), 1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온-3-일(1,2,4-thiadiazol-5(4H)-one-3-yl), 1,3,4-옥사디아졸-2(3H)-온-5-일(1,3,4-oxadiazol-2(3H)-one-5-yl), 1,3,4-티아디아졸-2(3H)-온-5-일(1,3,4-thiadiazol-2(3H)-one-5-yl), 1,2,4-티아디아졸-3(2H)-온-5-일(1,2,4-thiadiazol-3(2H)-one-5-yl), 1,2,4-옥사디아졸-3(2H)-온-5-일(1,2,4-oxadiazol-3(2H)-one-5-yl), 메틸술포닐카르바모일(methylsulfonylcarbamoyl) 및 N-하이드록시카르바모일(N-hydroxycarbamoyl)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 일반식 (I)의 화합물.
  3. 제1항에 있어서,
    R1은 수소, CF3, CF2H, CF2CH3, CF2CH2CH3, 메틸(methyl), 이소프로필(isopropyl), 이소부틸(isobutyl), 시클로펜틸(cyclopentyl), CH2OCH3, SCH3, 벤질(benzyl), 4-카르복시 벤질(4-carboxy benzyl), 티오펜-2-일(thiophen-2-yl) 및 티오펜-3-일(thiophen-3-yl)로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
    R2는 수소, 플루오로(fluoro), 클로로(chloro), 메톡시(methoxy) 및 시아노(cyano)로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
    R3는 수소, 플루오로, 클로로, 메틸, CF3, 메톡시, 시아노 및 N,N-디메틸아미노로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 일반식 (I)의 화합물.
  4. 제1항에 있어서,
    R1은 수소, CF3, CF2H, 메틸 및 4-카르복시벤질(4-carboxybenzyl)로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
    R2는 수소 및 플루오로로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
    R3는 수소, 플루오로, 클로로 및 메틸로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
    R4는 테트라졸, 1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,3,4-옥사디아졸-2(3H)-온-5-일, 메틸술포닐카르바모일 및 N-하이드록시카르바모일로 이루어지는 군으로부터 선택되고;
    R5는 카르복시, 테트라졸, 1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온-3-일, 1,3,4-옥사디아졸-2(3H)-온-5-일, 메틸술포닐카르바모일 및 N-하이드록시카르바모일로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 일반식 (I)의 화합물.
  5. 제1항에 있어서,
    3-(4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-7-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-4-온(3-(4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-7-hydroxy-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-4-one);
    5-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)티오펜-2-카르복시산(5-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)thiophene-2-carboxylic acid);
    (트랜스)-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)시클로헥산카르복시산((trans)-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)cyclohexanecarboxylic acid);
    (시스)-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)시클로헥산카르복시산((cis)-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)cyclohexanecarboxylic acid);
    3-(4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-2-(디플루오로메틸)-7-하이드록시-4H-크로멘-4-온(3-(4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-2-(difluoromethyl)-7-hydroxy-4H-chromen-4-one);
    3-(4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-7-하이드록시-2-메틸-4H-크로멘-4-온(3-(4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-7-hydroxy-2-methyl-4H-chromen-4-one);
    4-(2-(4-카르복시벤질)-7-하이드록시-4-옥소-4H-티오크로멘-3-일)벤조산(4-(2-(4-carboxybenzyl)-7-hydroxy-4-oxo-4H-thiochromen-3-yl)benzoic acid);
    4-(7-(하이드록시-2-메틸-4-옥소-4H-티오크로멘-3-일)벤조산(4-(7-hydroxy-2-methyl-4-oxo-4H-thiochromen-3-yl)benzoic acid);
    3-(4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)페닐)-1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온(3-(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)phenyl)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-one);
    4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)-N-(메틸술포닐)벤즈아미드(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)-N-(methylsulfonyl)benzamide);
    3-(4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)페닐)-1,2,4-티아디아졸-5(4H)-온(3-(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)phenyl)-1,2,4-thiadiazol-5(4H)-one);
    3-(4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-7-하이드록시-2-메틸-4H-티오크로멘-4-온(3-(4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-7-hydroxy-2-methyl-4H-thiochromen-4-one);
    5-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)티오펜-3-카르복시산(5-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)thiophene-3-carboxylic acid);
    3-((트랜스)-4-(1H-테트라졸-5-일)시클로헥실)-7-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-4-온(3-((trans)-4-(1H-tetrazol-5-yl)cyclohexyl)-7-hydroxy-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-4-one);
    N-하이드록시-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)벤즈아미드(N-hydroxy-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)benzamide);
    3-(2-클로로-4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-7-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-4-온(3-(2-chloro-4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-7-hydroxy-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-4-one);
    3-(3-클로로-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)페닐)-1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온(3-(3-chloro-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)phenyl)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-one);
    3-(3-플루오로-4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)페닐)-1,2,4-옥사디아졸-5(4H)-온(3-(3-fluoro-4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)phenyl)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-one);
    3-(3-클로로-4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-7-하이드록시-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-4-온(3-(3-chloro-4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-7-hydroxy-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-4-one);
    3-(4-(1H-테트라졸-5-일)페닐)-7-하이드록시-4H-크로멘-4-온(3-(4-(1H-tetrazol-5-yl)phenyl)-7-hydroxy-4H-chromen-4-one); 및
    5-(4-(7-하이드록시-4-옥소-2-(트리플루오로메틸)-4H-크로멘-3-일)페닐)-1,3,4-옥사디아졸-2(3H)-온(5-(4-(7-hydroxy-4-oxo-2-(trifluoromethyl)-4H-chromen-3-yl)phenyl)-1,3,4-oxadiazol-2(3H)-one);
    으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 일반식 (I)의 화합물.
  6. 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 첨가제와 함께, 치료학적 유효량의 선행하는 항들 중 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
  7. 치료학적 유효량의 선행하는 항들 중 어느 한 항에 정의된 것과 같은 일반식 I의 화합물을 그것을 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 질병 또는 질환의 치료방법.
  8. 선행하는 항들 중 어느 한 항에 정의된 것과 같은 일반식 I의 화합물을 만드는 방법.





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Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8481590B2 (en) 2010-02-12 2013-07-09 N30 Pharmaceuticals, Inc. Chromone inhibitors of S-nitrosoglutathione reductase
ES2565345T3 (es) * 2010-02-12 2016-04-04 Nivalis Therapeutics, Inc. Nuevos inhibidores de la reductasa de s-nitrosoglutatión
BR112013007907A2 (pt) 2010-10-08 2016-06-14 N30 Pharmaceuticals Inc novos compostos de quinolina substituída como inibidores de s-nitrosoglutationa reductase
AU2011343518B2 (en) 2010-12-16 2016-11-10 Nivalis Therapeutics, Inc. Novel substituted bicyclic aromatic compounds as S-nitrosoglutathione reductase inhibitors
US20140094465A1 (en) * 2011-06-10 2014-04-03 N30 Pharmaceuticals, Inc. Compounds as S-Nitrosoglutathione Reductase Inhibitors
RU2014121984A (ru) 2011-10-31 2015-12-10 Ксенон Фармасьютикалз Инк. Бензолсульфонамидные соединения и их применение в качестве терапевтических средств
BR112014010368A2 (pt) 2011-10-31 2017-04-25 Xenon Pharmaceuticals Inc biaril éter sulfonamidas e seu uso como agentes terapêuticos
MX2014014234A (es) 2012-05-22 2015-05-07 Genentech Inc Benzamidas n-sustituidas y su uso en el tratamiento del dolor.
KR101663436B1 (ko) 2012-07-06 2016-10-06 제넨테크, 인크. N-치환된 벤즈아미드 및 이의 사용 방법
RU2015143906A (ru) 2013-03-14 2017-04-18 Дженентек, Инк. Замещенные триазолопиридины и способы их применения
MX2015010775A (es) 2013-03-15 2016-04-25 Genentech Inc Benzoxazoles sustituidos y metodos para usarlos.
CA2931732A1 (en) 2013-11-27 2015-06-04 Genentech, Inc. Substituted benzamides and methods of use thereof
CN106715418A (zh) 2014-07-07 2017-05-24 基因泰克公司 治疗化合物及其使用方法
BR112017024853A2 (pt) 2015-05-22 2018-08-07 Genentech Inc composto, composição farmacêutica, método para tratar uma doença ou condição em um mamífero, para tratamento de prurido em um mamífero, para tratamento ou profilaxia e uso de um composto
EP3341353A1 (en) 2015-08-27 2018-07-04 Genentech, Inc. Therapeutic compounds and methods of use thereof
WO2017044766A1 (en) 2015-09-10 2017-03-16 Nivalis Therapeutics, Inc. Solid forms of an s-nitrosoglutathione reductase inhibitor
JP6987746B2 (ja) 2015-09-28 2022-01-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド 治療用化合物及びその使用方法
EP3380466A1 (en) 2015-11-25 2018-10-03 Genentech, Inc. Substituted benzamides useful as sodium channel blockers
EP3854782A1 (en) 2016-03-30 2021-07-28 Genentech, Inc. Substituted benzamides and methods of use thereof
CA3039853A1 (en) 2016-10-17 2018-04-26 Genentech, Inc. Therapeutic compounds and methods of use thereof
EP3601273B1 (en) 2017-03-24 2021-12-01 Genentech, Inc. 4-piperidin-n-(pyrimidin-4-yl)chroman-7-sulfonamide derivatives as sodium channel inhibitors
WO2018177993A1 (de) 2017-03-31 2018-10-04 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Pyrazole zur bekämpfung von arthropoden
AR114263A1 (es) 2018-02-26 2020-08-12 Genentech Inc Compuestos terapéuticos y métodos para utilizarlos
US10947251B2 (en) 2018-03-30 2021-03-16 Genentech, Inc. Therapeutic compounds and methods of use thereof
WO2021040814A1 (en) * 2019-08-23 2021-03-04 NOTA Laboratories, LLC Nitric oxide generating systems for nasal inhalation

Family Cites Families (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8626344D0 (en) 1986-11-04 1986-12-03 Zyma Sa Bicyclic compounds
WO1997032872A1 (en) * 1996-03-05 1997-09-12 Imperial College Of Science Technology And Medicine Compounds with a sulfamate group
EP0888369A1 (en) 1996-02-21 1999-01-07 Glycomed Incorporated Sialyl lewis x mimetics containing flavanoid backbones
US6057367A (en) 1996-08-30 2000-05-02 Duke University Manipulating nitrosative stress to kill pathologic microbes, pathologic helminths and pathologically proliferating cells or to upregulate nitrosative stress defenses
US5919813C1 (en) 1998-03-13 2002-01-29 Univ Johns Hopkins Med Use of a protein tyrosine kinase pathway inhibitor in the treatment of diabetic retinopathy
KR20000001793A (ko) * 1998-06-13 2000-01-15 이경하 신규한 벤조피란 또는 티오벤조피란 유도체
KR100295206B1 (ko) 1998-08-22 2001-07-12 서경배 디아릴벤조피란유도체및이를함유하는시클로옥시게네이즈-2저해제조성물
US7572788B2 (en) 1999-04-30 2009-08-11 The Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods relating to novel compounds and targets thereof
AU2001255696A1 (en) 2000-04-27 2001-11-07 Geron Corporation Telomerase inhibitors and methods of their use
US6359182B1 (en) 2000-10-26 2002-03-19 Duke University C-nitroso compounds and use thereof
US7049308B2 (en) 2000-10-26 2006-05-23 Duke University C-nitroso compounds and use thereof
US7179791B2 (en) 2001-01-11 2007-02-20 Duke University Inhibiting GS-FDH to modulate NO bioactivity
AUPR255401A0 (en) 2001-01-16 2001-02-08 Novogen Research Pty Ltd Regulation of lipids and/or bone density and compositions therefor
US20030181510A1 (en) 2002-03-19 2003-09-25 Robert Baker Inhibition of muscle regeneration following myectomy
CA2491089A1 (en) 2002-06-27 2004-01-08 The Endowment For Research In Human Biology, Inc. Compounds useful for the inhibition of aldh
US20050080024A1 (en) 2002-08-15 2005-04-14 Joseph Tucker Nitric oxide donating derivatives for the treatment of cardiovascular disorders
US8138165B2 (en) 2002-10-22 2012-03-20 Jenken Biosciences, Inc. Chromones and chromone derivatives and uses thereof
AU2004251690A1 (en) 2003-06-04 2005-01-06 Duke University Compositions and methods for modulating S-nitrosoglutathione reductase
CN1241921C (zh) 2003-07-09 2006-02-15 东华大学 含氟异黄酮衍生物、制造方法及其用途
CN1950353B (zh) 2004-04-08 2011-06-01 ARYx医疗有限公司 治疗凝血紊乱的药物和方法
KR101203124B1 (ko) 2004-04-08 2012-11-20 아메데온, 인코포레이티드 응고 장애 치료용 물질 및 치료 방법
ATE396183T1 (de) * 2004-12-21 2008-06-15 Hoffmann La Roche Chromanderivate und ihre verwendung als liganden des 5-ht-rezeptors
JP2008533039A (ja) * 2005-03-11 2008-08-21 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミシガン 抗アポトーシスＢｃｌ−２ファミリーメンバーのクロメン−４−オン阻害剤およびその使用
AU2006275514B2 (en) 2005-07-29 2012-04-05 Resverlogix Corp. Pharmaceutical compositions for the prevention and treatment of complex diseases and their delivery by insertable medical devices
EP2046769A2 (en) * 2006-07-27 2009-04-15 Cv Therapeutics, Inc. Aldh-2 inhibitors in the treatment of addiction
GB0618168D0 (en) 2006-09-15 2006-10-25 Babraham Inst Compounds
EP2084141A4 (en) 2006-10-30 2010-07-21 Novogen Res Pty Ltd PREVENTION AND REVERSION OF CHEMOTHERAPY-INDUCED PERIPHERAL NEUROPATHY
WO2009026657A1 (en) * 2007-08-29 2009-03-05 The University Of Sydney Flavonoid ppar agonists
JP2011507811A (ja) * 2007-12-13 2011-03-10 インディアナ・ユニバーシティ・リサーチ・アンド・テクノロジー・コーポレーション 哺乳動物のｓ−ニトロソグルタチオンレダクターゼを阻害するための材料および方法
WO2010107476A1 (en) 2009-03-19 2010-09-23 Duke University Inhibiting gsnor
ES2565345T3 (es) 2010-02-12 2016-04-04 Nivalis Therapeutics, Inc. Nuevos inhibidores de la reductasa de s-nitrosoglutatión
US8481590B2 (en) 2010-02-12 2013-07-09 N30 Pharmaceuticals, Inc. Chromone inhibitors of S-nitrosoglutathione reductase
US20140094465A1 (en) * 2011-06-10 2014-04-03 N30 Pharmaceuticals, Inc. Compounds as S-Nitrosoglutathione Reductase Inhibitors

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