KR20120115261A

KR20120115261A - 건선 또는 아토피성 피부염 치료제

Info

Publication number: KR20120115261A
Application number: KR1020127015012A
Authority: KR
Inventors: 마사요시 시치리
Original assignee: 가부시끼가이샤 사이와이 메딕스
Priority date: 2009-11-13
Filing date: 2010-11-12
Publication date: 2012-10-17
Also published as: EP2500034A1; AU2010319047A1; WO2011059110A1; JP2011105614A; JP5439127B2; CN102724999A; US20120322988A1; EP2500034A4; US20140234338A1

Abstract

항황색 포도상구균 항체를 유효성분으로서 포함하는, 건선 또는 아토피성 피부염 치료제의 제공.
(a) 황색 포도상구균을 단백질가교 고정 시약으로 처리하는 것에 의해, 전기 황색 포도상구균의 표면에 발현되고 있는 단백질을 분자내 가교에 의해 고정하고, (b) 상기 단백질가교 고정 시약으로 고정한 전기 황색 포도상구균을 면역원으로서 동물에게 투여하고, (c) 동물로부터 항체를 얻는 것에 의해, 제작한, 황색 포도상구균의 표면에 발현되는 단백질분자 전체에 대한 항체를 포함하는 포괄적인 항황색 포도상구균 표면 항체를 유효성분으로서 포함하는, 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.

Description

건선 또는 아토피성 피부염 치료제{THERAPEUTIC AGENT FOR PSORIASIS OR ATOPIC DERMATITIS}

본 발명은 항체를 유효성분으로 하는 건선 또는 아토피성 피부염의 치료제에 관한 것이다.

건선 및 아토피성 피부염의 발병 원인은 아직 해명되지 않고 있지만, 알레르기성 피부질환이라고 평가되어지고 있다. 아토피성 피부염에 대해서는 각양각색인 유전적?환경적 요인의 복합적이면서 복잡한 상호작용이 발병의 중심적인 역할을 다하는 것으로 알려져 있지만, 정확한 발병 재치에 대해서는 대부분 이해되지 않고 있다(비특허문헌1). 발병이나 진전에 관여할 가능성이 있는 여러 가지 요인?유인으로서, 지금까지 실로 많은 인자에 대해서 연구가 행해졌지만, 이들 안에는 인간 피부상주균이기도 하는 황색 포도상구균(Staphylococcus aureus)을 비롯하는 세균에 관한 검토도 포함된다. 그러나, 오늘까지 이것들 세균은 발병이나 악화의 요인이 아니라고 결론지어 지기에 이르고 있다. 건선의 발병 재치에 대해서는 더욱 해명되고 있지 않고, 치료에 대해서도 어려움이 있다(비특허문헌2). 그 결과, 현재까지, 세균의 번식을 촉진하지만 알레르기 기서에 작용하는 부신피질 스테로이드 호르몬이 이 유용한 치료 약으로서 빈용되고 있다.

황색 포도상구균(Staphylococcus aureus)은, 통성혐기성의 그램 양성구균이며, 인간의 피부, 모공, 비강내에 존재하는 상주세균이며, 창상부 등으로부터 인간 체내에 침입하고, 각종의 화농성 질환, 폐렴, 폐피증, 수막염등의 원인이 되는 것이 보고되고 있다. 또, 황색 포도상구균의 톡신(toxin)은 식중독이나 독소성 쇼크 증후군의 원인이 되는 것이 보고되고 있다.

　세균 균체, 바이러스 등의 미생물에는 수많은 단백질이 발현되고 있다. 종래는 이 안에서 유용이라고 생각되는 특정한 항원 단백질분자를 선택하고, 주로 모노클로날항체를 제작하고, 의료 등에 응용하는 시도가 행하여져 왔다. 그러나, 세균등의 표면에 발현되는 단일인 항원분자를 인식하는 항체에 의해, 세포 바로 그것을 특이적으로 인식하고, 표적으로 하는 것에는 한계가 있었다.

종래부터, 세균, 바이러스 등의 감염증등의 예방이나 치료에는, 주로 항생 물질이 이용되고 있었다. 또, 약독화 바이러스를 이용해서 제작한 백신을 투여해서 생체내에서 바이러스에 대한 항체를 생산하고, 바이러스 감염증의 예방 또는 치료에 쓸모있게 하는 것이 행하여지고 있었다. 그러나, 항생 물질은 세균에 의해 적절한 항생 물질을 선택할 필요가 있고, 또, 내성균이 생긴다고 하는 문제가 있었다. 또, 백신은 백신의 안전성을 고려할 필요성이 있어, 적용할 수 있는 감염증은 한정되어 있었다.

Bieber T, Novak N: Pathogenesis of atopic dermatitis: new developments. Current Allergy and Asthma Reports 2009, 9 291-294 Wippel-Slupetzky, K. Stingl, G: Future perspectives in the treatment of psoriasis Current Problems in Dermatology. 2009, 38:172-89

도 1은 아토피성 피부염 환자에게 대한 효과를 나타내는 사진이다 (그 1).
도 2는 아토피성 피부염 환자에게 대한 효과를 나타내는 사진이다 (그 2).
도 3은 아토피성 피부염 감염 개에게 대한 효과를 나타내는 사진이다 (그 1).
도 4는 아토피성 피부염 감염 개에게 대한 효과를 나타내는 사진이다 (그 2).
도 5는 아토피성 피부염 감염 개에게 대한 효과를 나타내는 사진이다 (그 3).
도 6은 건선 환자에게 대한 효과를 나타내는 사진이다.

발명의 개요

본 발명은, 항황색 포도상구균항체, 특히 황색 포도상구균의 표면에 발현되는 단백질 전체에 대한 포괄적인 항체를 유효성분으로서 포함하는, 건선 또는 아토피성 피부염 치료제의 제공을 목적으로 한다.

본 발명자들은, 건선 및 아토피성 피부염의 원인을 피부상주균인 황색 포도상구균의 피부감염 및 황색 포도상구균의 생산하는 톡신(toxin)에 의한 피부소파부위의 미난등의 피부증상인 가능성을 생각하고, 단백질가교 고정 시약으로 고정한 미생물을 항원으로서 채용하는 포괄적인 항표면 항원 항체 작성법(특원2008-324257)에 의해 항황색 포도상구균항체를 제작하고, 상기 항황색 포도상구균 항체를 이용해서 건선 및 아토피성 피부염의 치료가 가능한가 아닌가에 대해서 예의 검토를 갔다.

본 발명자들은, 황색 포도상구균이 생산하는 톡신(toxin)이 말초피중의 T세포를 활성화하는 슈퍼 항원이라는 인식 아래, 우선 황색 포도상구균의 생산하는 톡신(toxin)이 건선 및 아토피성 피부염의 증오 인자다라는 가설을 세웠다.

본 발명자는, 황색 포도상구균의 균체 표면을 포름알데히드를 이용해서 고정 처리한 것을 그대로 항원으로서 이용해서 동물을 면역하는 것에 의해, 고정된 항원 단백질분자전체에 대하여 포괄적인 폴리클로날 항체를 제작했다.

그리고, 병소부위에 항황색 포도상구균표면항체를 지속적으로 도포했다. 이 결과, 황색 포도상구균이 병소부위보다 완전히 배제되어, 건선이나 아토피성 피부염의 치료가 가능해지는 것을 찾아내고, 본 발명을 완성되게 하는 것에 이르렀다.

다시 말해, 본 발명은 이하 대로다.

[1] 항황색 포도상구균 항체를 유효성분으로서 포함하는, 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.

[2] 항체황색 포도상구균항체가, (a) 황색 포도상구균을 단백질 가교 고정 시약으로 처리하는 것에 의해, 전기 황색 포도상구균의 표면에 발현되고 있는 단백질을 분자내 가교에 의해 고정하고, (b) 상기 단백질 가교 고정 시약으로 고정한 전기 황색 포도상구균을 면역원으로서 동물에게 투여하고, (c) 동물로부터 항체를 얻는 것에 의해, 제작한, 황색 포도상구균의 표면에 발현되는 단백질분자 전체에 대한 항체를 포함하는 포괄적인 항황색 포도상구균 표면 항체인, [1]의 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.

[3] 단백질 가교 고정 시약이, 포름알데히드, 파라포름알데히드(paraformaldehyde) 및 글루타르알데히드로부터 되는 군이 선택되는, [2]의 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.

[4] 단백질 가교 고정 시약이 1?38% (V/V)포르말린인, [2]의 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.

[5] 단백질 가교 고정 시약에 의한 고정을 10분?48시간 하는, [2]? [4]의 어느쪽의 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.

[6] 면역원을 투여하는 동물이 닭이다 [2]? [5]의 어느 쪽인가의 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.

[7] 면역원을 투여한 닭이 생산 낳은 계란으로부터 항체를 얻는, [6]의 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.

본 명세서는 본원의 우선권의 기초인 일본국특허출원 2009-260031호의 명세서 및 / 또는 도면에 기재되는 내용을 포함한다.

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.

본 발명의 건선 또는 아토피성 피부염 치료제는, 항황색 포도상구균항체를 유효성분으로서 포함한다. 상기 항황색 포도상구균항체는, 황색 포도상구균의 전부 또는 부분을 이용해서 공공지식의 방법으로 제작할 수 있다. 본 발명의 항황색 포도상구균항체는 폴리클로날 항체이여도, 모노클로날 항체이여도 좋다. 항황색 포도상구균항체는, 완전항체뿐만 아니라, 그 기능적 단편도 포함한다. 항체의 기능적 단편과는, 항체의 일부분(부분 단편)이며, 항체의 항원에의 작용을 1개 이상 보유하는 것을 의미하고, 구체적으로는 F(ab" 2, Fab", Fab, Fv, 이황화결합 Fv, 1본쇄 사슬Fv(scFv),및 이 중합체등을 들 수 있다[D.J.King., Applications and Engineering of Monoclonal Antibodies., 1998 T.J.International Ltd].

또, 모노클로날 항체를 이용할 경우, 1종류만의 모노클로날 항체를 이용해도 좋지만, 인식하는 에피토프가 다른 2종류 이상, 예를 들면 2종류, 3종류, 4종류 또는 5종류의 모노클로날 항체를 이용해도 좋다. 게다가, 본 발명의 항황색 포도상구균항체는, 인간에게 대한 이종항원성을 저하되게 하는 것 등을 목적으로 해서 인위적으로 개변한 유전자조바꿈형 항체, 예를 들면, 키메라 항체, 인간형 화 (Humanized)항체도 포함한다. 이러한 항체로서는 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 항체를 들 수 있고, 모두 공공지식의 방법을 이용해서 제조할 수 있다.

포괄적인 표면 항체는, 황색 포도상구균(Staphylococcus aureus)의 균체 표면을 포름알데히드를 이용해서 고정 처리한 것을 그대로 항원으로서 이용해서 제작한다. 황색 포도상구균의 균체 표면을 포름알데히드를 이용해서 고정 처리한 것을 그대로 항원으로서 이용해서 항체를 제작하는 것에 의해, 황색 포도상구균에 대하여 포괄적으로 항체를 제작할 수 있다. 여기에서, 황색 포도상구균에 대하여 포괄적으로 항체를 제작하고, 황색 포도상구균의 표면에 발현되는 다수의 항원 단백질 분자 전체에 대하여 한번에 항체를 제작하는 것을 좋은, 얻을 수 있었던 항체를 포괄적인 항황색 포도상구균표면항체라고 부른다. 포괄적인 항황색 포도상구균표면항체는 황색 포도상구균의 표면에 발현되는 다수의 항원 단백질에 대한 각각의 항체를 포함하는 폴리클로날항체다. 본 발명의 방법에 의하면, 고정한 황색 포도상구균을 동물에게 투여하는 것만으로, 표면 단백질분자의 전체에 대한 항체를 포함하는 포괄적인 항황색 포도상구균 표면 항체를 얻을 수 있다. 여기에서, 표면 단백질분자의 전체에 대한 항체와는, 황색 포도상구균의 표면에 발현되고 있는 모든 단백질에 대한 항체를 포함하는 것까지는 요구되지 않지만, 표면 단백질 가운데, 존재량이 많지만 대부분에 대한 항체를 포함하는 것이 바람직하다.

포괄적인 항황색 포도상구균 항체는 이하의 방법으로 제작할 수 있다.

최초에, 황색 포도상구균을 단백질 분자내 가교 고정 시약을 이용해서 고정한다. 단백질 분자내 가교 고정 시약으로서는, 포름알데히드, 파라포름알데히드(paraformaldehyde), 글루타르알데히드등의 알데히드를 들 수 있다. 바람직하게는, 포름알데히드의 35?38%, 바람직하게는 37% 수용액인 포르말린을 이용해서 한다.

이 단백질 분자내 가교 고정 시약을 고정 시약으로서 이용했을 경우, 시약은 황색 포도상구균세포 중에 침투하고, 분자 중의 알데히드기가 황색 포도상구균표면의 단백질의 아미노 근본(α-아미노기나 리진(lysine) 잔기의 ε-아미노기)이나 SH 기초로 결합해서 분자간 가교를 형성하고, 단백질은 응고 변성한다. 가교에 의해, 단백질의 입체구조가 손상되어, 효소활성, 수송, 분비등이 각양각색인 생물활성이 저해된다. 단백질 분자내 가교 고정 시약의 작용은 단백질분자의 가교 반응이기 때문, 지방질등의 물질에 대하여는 고정 작용은 일하지 않고, 지방질등은 흘러 나가버린다.

시판하고 있는 35?38% 포름알데히드 수용액인 포르말린을 이용할 경우, 고정화는 1?38% (V/V)포르말린, 바람직하게는 2?20% (V/V)포르말린, 더욱 바람직하게는 5?10% (V/V)포르말린을 이용해서 하면 좋다. 이용하는 포르말린은, 증류수, 생리식염수, 완충액등을 이용해서 조제하면 좋다.

황색 포도상구균을 균질화(homogenize)하고, 상기 균질화(homogenize)의 펠렛(pellet) 1g에 대하여, 포르말린을 5?20 ml 첨가한다. 고정은, 황색 포도상구균 균질화(homogenize)에 포르말린을 첨가한 후, 휘젓고, 4?30도로 30분?48시간이상 정치하는 것에 의해 한다. 살아있는 황색 포도상구균은, 단시간의 포르말린 처리로 불활화되지만, 본 발명의 방법에 있어서는, 황색 포도상구균을 불활화할만으로는 충분하지 않고, 황색 포도상구균의 표면에 발현되고 있는 단백질분자가 분자내 가교를 생기게 하는 정도의 포르말린 처리가 필요하다.

고정화한 황색 포도상구균 균질화(homogenize)를 필요에 따라 생리식염수나 완충 액으로 희석, 현탁해 공공지식의 아쥬번트와 혼합하고, 면역원으로서 동물에게 투여하면 좋다. 이용하는 동물로서는, 마우스, 래트(rat), 누트리아(coypu), 토끼, 양, 염소, 말, 소 등의 포유 동물, 닭, 타조 등의 조류를 들 수 있다. 이 안에서도, IgY 항체를 함유한 계란을 얻을 수 있는 닭 등의 조류가 바람직하다.

면역원에 의한 동물의 면역은, 공공지식의 방법을 따라서 할 수 있다. 예를 들면, 일반적 방법으로서, 면역원을 동물의 복강허벅다리는 피하에 주사를 놓는 것에 의해 행하여진다. 면역은 1회라도 좋지만, 2?10 매일 수 회 투여하는 것이 바람직하다. 또, 첫 회합 투여후 5?10 매일 수 회, 추가 면역을 해도 좋다.

황색 포도상구균의 면역 원조제 방법을 이하에 든다. 이하의 방법은, 하나의 예이며, 이 방법에 한정되지 않는다.

황색 포도상구균을 원심분리에 의해 모으고, 펠렛(pellet) 장으로 하고, 상기 펠렛(pellet)을 포르말린에 넣고, 휘저음에 의해 분산되게 해, 30분간 정치한다. 그 다음에, 성김의 여지를 이용해서 여과하고, 찌꺼기를 제거한다. 노액을 회수하고, 원심분리를 하고, 펠렛(pellet)에 인산 버퍼(buffer)를 첨가하고, 이것을 면역원으로서 이용한다.

본 발명의 포괄적인 항표면 항체 조성물은 면역을 간 동물의 혈청으로부터 얻을 수 있다. 또, 면역하는 동물이 닭의 경우, 닭이 낳는 계란으로부터 얻을 수 있다. 최종 면역후, 약 3개월로 높은 항체값의 항체를 함유하는 계란을 얻을 수 있다. 계란의 난황에는 IgY가 포함되고, 흰자위에는 IgA 및 IgM이 포함된다. 항체를 전알로 회수했을 경우, 포괄적인 항체 조성물 중에는 IgY, IgA 및 IgM이 포함되고, 난황으로 회수했을 경우, IgY가 포함된다. 계란을 이용해서 본 발명의 항체조성물을 조제할 경우, 전알을 이용해도 좋고, 난황만을 이용해도 좋다.

얻을 수 있었던 계란은, 할란하여, 난황 및 흰자위를 함께, 혹은 난황만을 휘젓고, 분말화한다. 이 때, 항체는 단백질이기 때문에 열에 약하게 70도를 넘으면 그 활성을 잃으므로, 바람직하게는 60도 이하로 한다. 매우 적합하게는, 동결 건조, 스프레이드라이 또는 온풍건조에 의해 60도 이하로 건조해 분말화하면 좋다. 분말화한 계란은, 필요하면, 더욱 분쇄기에 걸어 미립분말로 한다. 이 방법으로 얻을 수 있었던 분말에는 난황의 기름성분이 포함되어 있으므로, 분말은 습기가 있다. 초저온임계법에 의해 완전탈지하는 것에 의해, 지방분을 제외해도 좋다.

계란으로 얻을 수 있었던 포괄적인 항표면 항체 조성물을 계란 항체라고 부를 것이 있다.

얻을 수 있었던 항체의 항체값은, ELISA(효소결합 면역흡착 검정법), EIA(효소면역측정법), RIA(방사 면역측정법), 형광항체법 등을 이용해서 측정할 수 있다. 항체 값은, 동물로부터 채취한 혈청을 이용해서 측정하면 좋다. 또, 계란을 이용할 경우, 계란보다 항체를 추출해서 추출물 중의 항체값을 측정하면 좋다.

본 발명의 황색 포도상구균에게 대한 포괄적인 항체는, 건선 및 아토피성 피부염의 예방 또는 치료에 이용할 수 있다. 본 발명의 포괄적인 항황색 포도상구균 항체는, 황색 포도상구균의 표면에 발현되는 단백질분자 전체에 대한 항체를 포함하기 위해서, 황색 포도상구균에게 대한 공격력이 강하게, 황색 포도상구균을 사멸시켜, 배제?방제할 수 있다.

포괄적인 항황색 포도상구균 항체를 유효성분으로서 포함하는 건선, 아토피성 피부염의 예방 또는 치료제는, 예를 들면, 동물에게 투여해서 이용한다. 상기 항체조성물은, 경구 루트, 비강 루트, 및 정맥내, 근육내, 피하 및 복강내의 주사 또는 비경장적 루트에서 투여할 수 있다. 특히, 연고등의 도포제의 형태로 피부의 환부에 도포 또는 물약의 분무에 의해 국소투여될 수 있다. 상기 연고는, 캐리어로서, 지방, 지방기름, 라놀린(lanoline), 바셀린, 파라핀, 프라스티베이스, 밀랍, 경고제, 수지, 플라스틱, 그루코르류, 고급 알코올, 글리세린, 물 혹은 유화제, 현탁화제를 포함한다. 본 발명의 의약조성물의 투여량은, 증상, 연령, 체중등에 의해 다르지만, 통상, 경구투여에서는, 성인에 대하여, 1일 약 0.01mg?10000mg이며, 이들을 1회, 또는 수 회로 나누어서 투여할 수 있다.

건선, 아토피성 피부염의 예방 또는 치료용 항체조성물은, 제제 분야로 있어서 통상 채용할 수 있는 담체, 희석제, 부형제를 포함하고 있어도 좋다. 예를 들면, 정제용의 담체, 부형제로서는, 유당, 스테아린산(stearic acid) 마그네슘등이 사용된다.

본 발명의 건선 또는 아토피성 피부염의 치료제는, 건선 또는 아토피성 피부염에 감염할 수 있는 동물에 대하여 적용할 수 있고, 인간이나 원숭이, 개, 고양이 등의 애완 동물등에 적용할 수 있다.

본 발명의 항황색 포도상구균항체를 포함하는 치료제를 이용하는 것에 의해, 건선 및 아토피성 피부염의 환부로부터 황색 포도상구균을 배제할 수 있고, 황색 포도상구균의 톡신(toxin)에 의한 피부소파부위의 미난등의 피부증상의 증오를 억제할 수 있다.

본 발명을 이하의 실시 여느 때처럼 구체적으로 설명하지만, 본 발명은 이 실시 여느 때처럼 한정되는 것이 아니다.

황색 포도상구균을 항원으로 하는 포괄적인 항체 제작

(1) 항원의 조제

황색 포도상구균의 구균의 종균을 배양하고, 황색 포도상구균의 냉동 펠렛(pellet)을 제작했다. 황색 포도상구균의 구균의 종균은, MicroBiologics사의 물건을 채용했다(간토화학 주식회사에서 입수).

용량 15ml의 마개부시험관에 해동한 황색 포도상구균의 펠렛(pellet) 약3mg를 넣고, 거기에 5% 포르말린 용액을 5ml 첨가하고, 마개를 밀봉했다.

시험관 믹서로 수 회 믹싱해(토탈 약10분간) 균등하게 확산 용해했다. 5% 포르말린 용액에 펠렛(pellet)을 완전히 용해시켜서, 황색 포도상구균의 표면항원을 고정화했다. 인큐베이션(incubation)을 상기 인큐베이션(incubation) 종료 후 30분간 청치했다.

펠렛(pellet)을 용해시킨 5% 포르말린 용액을 원심분리기에 걸러내고, 원심분리한 용액의 심사를 포함하는 하부용액 1.5ml을 피펫을 이용해서 흡인했다.

거친 메쉬의 여과지 또는 필터를 이용해서 자연 여과 또는 흡인 여과한 후, 원심분리를 하고, 위 상청을 버리고, 포르말린 농도를 저하되게 했다.

침전을 생리식염수에 용해시켜, 이것을 투여 항원으로서 이용했다.

에멀션(emulsion) 펌프에 상기항원 1ml과 화이트 오일을 서서히 혼화하고, 에멀션(emulsion)(유화액)을 제작하고, 이 에멀션(emulsion)을 동물에게 투여했다.

(2)면역

(1)로 제작한 에멀션(emulsion) 0.5ml을, 5주 나이의 수컷의 닭의 서경부가죽 피하에 투여했다. 이 때, 닭에 침습을 적게 하기 위해서, 투여 항원조성물을 닭의 체온인 37도에 가온해 두었다.

첫 회합 투여 후 7 매일 2회 동량의 에멀션(emulsion)을 이용해서 추가 면역을 갔다.

면역한 닭이 낳은 계란의 전란을 할란하여 휘저었다. 야마토과학제 스프레이 드라이어 GA22형, 온풍건조기 및 분쇄기를 이용해서 건조한 계란분말을 제조했다. 스프레이 드라이어의 온도설정은 60도 이하로 했다.

항체 값의 측정은 ELISA에서 진행되었다.

인간 아토피성 피부염의 치료

실시예 1에 기재의 방법으로 제작한 계란항체에 대해서, 한계값을 측정했다. 폴리클로날항체를 중량비 1?5%로 프루페트 연고에 혼화하고, 치료용 연고제를 제작하고, 아토피성 피부염 환자의 환부에 도포했다. 　

한계값 측정의 결과, 어느 것의 농도에 있어서도 황색 포도상구균 톡신(toxin)(SA톡신(toxin))에 의한 강한 소양감 및 발적을 억제할 수 있었다.

게다가, 중량비 5%로 폴리클로날항체를 프루페트연고에 혼화하고, 검토를 계속했다.

10명의 아토피성 피부염 환자에 대하여 연고를 도포했다. 매일, 1?2회 도포했다. 2주일 정도로 효과가 나타나 처음, 2?3개월로 저효를 내보였다.

표1에 효과 확인 시험의 결과를 내보인다. 표1에 나타내보이듯이, 개선이상의 증례가 90%이며, 대단히 높은 유효율을 내보였다.

효과확인시험결과

피험자	성별	연령	투여기간	효과판정
A	♂	35	6개월(종료)	(Ⅲ)저효:사진첨부
B	♂	28	6개월(계속)	(Ｉ)개선:소양감소실, 발적감약
C	♂	32	3개월(종료)	(Ⅲ)저효:피부의 건상화
D	♀	24	6개월(종료)	(Ⅲ)저효:피부의 건상화일
E	♂	8	1개월(종료)	(ㅡ)무효:증상에 개선없음
F	♀	21	2개월(계속)	(Ⅱ)유효:소양감, 발적의 소실
G	♂	40	8개월(계속)	(Ｉ)개선:컴플라이언스 나쁨
H	♀	34	3개월(종료)	(Ⅲ)저효:피부의 건상화
I	♀	24	6개월(종료)	(Ⅲ)저효:피부의 건상화
J	♀	31	4개월(종료)	(Ⅲ)저효:피부의 건상화

효과판정기준

(Ⅲ) 저효: 소양감, 발적의 소실 및 건상한 피부의 회복

(Ⅱ) 유효: 소양감, 발적의 소실

(Ｉ) 개선: 소양감 및 발적의 어느쪽의 소실

(ㅡ) 무효: 전혀 효과를 인정받지 못한다

개선이상의 효과가 인정을 받은 증례는 90%(유효율)이며, 저효라고 판단된 것이 60%, 유효라고 판단된 것이 10%, 개선 예가 20%, 효과가 없었던 것은 10%이었다.

또, 도1 및 2는 아토피성 피부염 환자에게 대한 효과를 나타내는 사진이다. 도1A 및 도2A는 본 발명의 치료제를 이용해서 치료하기 전의 아토피성 피부염 환자의 환부를 나타내고, 도1B 및 도2B는 본 발명의 치료제를 이용해서 치료한 뒤(후)의 환부를 나타낸다. 도에 나타내보이듯이, 본 발명의 치료제를 이용하는 것에 의해, 아토피성 피부염 환자의 환부의 증상이 소실 또는 완화되었다.

개 아토피성 피부염의 치료

약 10 몇 년의 수명을 소유하는 개는, 5세를 지나면 높은 확률로 아토피성 피부염을 발병한다. 본 실시예에서는, 본 발명의 치료제의 개의 아토피성 피부염에 대한 효과를 확인했다.

실시예 1에 기재의 방법으로 제작한 항황색 포도상구균 항체를 포함하는 연고를 실시예 2에 기재의 방법으로 제작하고, 7마리의 아토피성 피부염에 감염하고 있는 개의 환부에 도포했다. 도포는 1일 1회로 매일 실시하였다.

표2에 효과확인 시험의 결과를 내보인다. 표2에 나타내보이듯이 많은 증례에서 아토피성 피부염의 개선이 인정을 받았다.

SA항체가 들어있는 연고에 의한 개아토피성 피부염에의 효과 확인 시험

증례	견종?성별	개 나이	투여기간	효과판정
증례1	롱택스?♂	7	1개월(종료)	(Ⅲ)저효:피부의 건상화
증례2	미니츄마닥스?♀	9	1.5개월(종료)	(Ⅲ)저효:피부의 건상화
증례3	미니츄마닥스?♂	15	1.5개월(계속)	(Ⅱ)유효:소양감, 발적의 소실
증례4	시즈?♀	12	1.5개월(계속)	(ㅡ)증상에 개선이 없음
증례5	퍼그?♀	11	1개월(계속)	(ㅡ)증상에 개선이 없음
증례6	시바이누?♀	10	1개월(계속)	(ㅡ)증상에 개선이 없음
증례7	파필론?♂	2	1개월(계속)	(Ⅱ)유효:소양감, 발적의 소실

효과판정기준

(Ⅲ) 저효: 소양감, 발적의 소실 및 건상한 피부의 회복

(Ⅱ) 유효: 소양감, 발적의 소실

(Ｉ) 개선: 소양감 및 발적의 어느쪽의 소실

(ㅡ) 증상에 개선이 없음

개선이상의 효과가 인정을 받은 증례는 57%(유효율)이며, 저효라고 판단된 것이 29%, 유효라고 판단된 것이 29%, 개선 예가 0%, 효과가 없었던 것은 42%이었다.

또, 도3로부터 5은 아토피성 피부염 감염 개에게 대한 효과를 나타내는 사진이다. 도3A, 도4A 및 도5A는 본 발명의 치료제를 이용해서 치료하기 전의 아토피성 피부염 감염 개의 환부를 나타내고, 도3B, 도4B 및 도5B는 본 발명의 치료제를 이용해서 치료한 뒤(후)의 환부를 나타낸다. 도에 나타내보이듯이, 본 발명의 치료제를 이용하는 것에 의해, 아토피성 피부염 감염 개의 환부의 증상이 소실 또는 완화되었다. 실시예 2의 인간의 결과와 비교하면 효과는 다소 낮게, 10세 이상의 노개 정도 효과의 발현이 늦었다.

인간 건선의 치료

실시예 1에 기재의 방법으로 제작한 항황색 포도상구균항체를 포함하는 연고를 실시예 2에 기재의 방법으로 제작하고, 건선 환자의 환부에 도포했다. 도포는, 매일 1?2회 진행되었다. 2주일 정도로 효과가 나타나 처음, 2?3개월로 저효를 내보였다. 도포 시작 후, 일정 기간 환부를 관찰했다.

도6에 건선 환자에게 대한 효과를 나타내는 사진을 내보인다. 도6A, 도6B 및 도6C는, 각각 도포 시작 후, 15일째, 30일째 및 90일째의 환부의 모양을 나타낸다. 도에 나타내보이듯이, 도포를 계속하는 것에 의해, 증상의 완화가 인정을 받았다.

종래, 건선 및 아토피성 피부염과 황색 포도상구균과의 직접적인 인과관계는 없는 것과 생각되어 왔다. 본 발명의 건선 또는 아토피성 피부염 치료제는, 항황색 포도상구균항체를 유효성분으로서 포함하고, 피부의 환부의 황색 포도상구균을 배제하고, 건선 또는 아토피성 피부염의 치료에 이용할 수 있다. 특히 본 발명의 포괄적인 항황색 포도상구균 항체는, 황색 포도상구균의 표면에 발현되고 있는 단백질을 단백질 분자내 가교 시약을 이용해서 분자내 가교에 의해 고정해서 동물에게 투여해서 제작되어, 황색 포도상구균의 표면에 발현되고 있는 단백질 전체에 대한 항체를 포함한다. 이 포괄적인 항체를 함유하는 항체 조성물은, 종래의 항체 제작법에서는 얻을 수 없었던, 황색 포도상구균에게 대한 높은 특이성 및 감수성을 소유하고 있다. 상기 항체를 포함하는 의약조성물은, 건선 및 아토피성 피부염의 치료에 효과적으로 이용할 수 있다.

본 발명의 항황색 포도상구균항체를 유효성분으로서 포함하는 조성물은, 건선 또는 아토피성 피부염의 치료에 이용할 수 있다.

본 명세서로 인용한 모든 간행물, 특허 및 특허출원을 그대로 참고로서 본 명세서로 있어서 넣는 것으로 한다.

Claims

항황색 포도상구균 항체를 유효성분으로서 포함하는, 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.
제 1항에 있어서, 항황색 포도상구균 항체가, (a) 황색포도상구균을 단백질 가교 고정 시약으로 처리하는 것에 의해, 상기 황색 포도상구균의 표면에 발현하고 있는 단백질을 분자내 가교에 의해 고정하고, (b) 그 단백질가교 고정 시약으로 고정한 상기 황색 포도상구균을 면역원으로서 동물에게 투여하고, (c) 동물로부터 항체를 얻는 것에 의해 제작한 황색 포도상구균의 표면에 발현되는 단백질분자 전체에 대한 항체를 포함하는 포괄적인 항황색 포도상구균 표면 항체인 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.
제 2항에 있어서, 단백질가교 고정 시약이, 포름알데히드, 파라포름알데히드(paraformaldehyde) 및 글루타르알데히드로부터 구성되는 군으로부터 선택되는 것인 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.
제 2항에 있어서, 단백질가교 고정 시약이 1?38% (V/V)포르말린인 것인 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.
제 2항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서, 단백질가교 고정 시약에 의한 고정을 10분?48시간 하는 것인 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.
제 2항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서, 면역원을 투여하는 동물이 닭인 것인 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.
제 6항에 있어서, 면역원을 투여한 닭이 생산한 계란으로부터 항체를 얻는 것인 건선 또는 아토피성 피부염 치료제.