KR20120044580A - Foot cleansing composition containing immobilized protease - Google Patents

Foot cleansing composition containing immobilized protease

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KR20120044580A
KR20120044580A KR1020100105928A KR20100105928A KR20120044580A KR 20120044580 A KR20120044580 A KR 20120044580A KR 1020100105928 A KR1020100105928 A KR 1020100105928A KR 20100105928 A KR20100105928 A KR 20100105928A KR 20120044580 A KR20120044580 A KR 20120044580A
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Abstract

PURPOSE: A foot cleansing composition is provided to cause physical scrub function by microbeads and chemical decomposing function by protease, thereby improving exfoliating ability and metabolism. CONSTITUTION: A foot cleansing composition contains microbeads in which proteinase is fixed. The proteinase is one or more mixture selected from papain, bromelain and pancreatin. The amount of the microbeads is 0.1-10 weight% on the basis of the total weight of the composition. The microbeads are circular porous microbeads manufactured by chitosan. The composition additionally comprises one or more components selected from surfactant, moisturizer, antiseptic, antioxidant, antimycotic, perfume, pigment, thickener, moisture carrier, and mixture thereof.

Description

안정성이 향상된 단백질 분해효소를 함유한 발 세정용 조성물{Foot cleansing Composition containing immobilized protease} Foot cleansing composition containing immobilized protease

본 발명은 발 세정용 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 고정화된 단백질 분해효소를 포함하는 발 세정용 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a foot washing composition, and more particularly, to a foot washing composition comprising an immobilized protease.

피부의 표면은 각질층으로 둘러 싸여 있으며, 이들은 체내 물질이 외부로 빠져 나가는 것을 막아주고 외부의 물리화학적 자극으로부터 인체의 내부를 보호하는 기능을 한다. 피부의 표피는 기저층, 유극층, 과립층, 각질층으로 턴오버(turn-over)하며 결국에는 노폐물로 제거되는데, 이중 기저층에서 과립층까지 14일이 걸리며, 다시 과랍층에서 가장 외측의 각질층까지 14일이 소요된다. 그러나 피부의 노화가 진행되면 전체적으로 턴오버 기간이 길러지고 결과적으로 최외각을 차지하는 각질층의 비율이 많아져 피부는 건조해지고 칙칙해 보이게 된다. 이외에 각질층 사이에 세균의 증식이 늘어나게 되고 부패로 인해 악취가 발생하기도 한다. 따라서 피부의 상태를 건강하게 유지하기 위해서는 과도한 각질이 쌓이지 않도록 해야 한다. 특히 발은 각질층이 10~20개인 다른 피부 부위에 비해 두꺼워 45~50개 정도의 층을 이루고 있어 자칫 악취의 온상이 될 수 있으며 피지선의 분포가 부족하여 지방산 보호막이 적어 무좀균이 발바닥의 각질층에 달라붙으면 발바닥 전체로 퍼지기 쉽워 관리에 특별이 신경을 써야 한다.
The surface of the skin is surrounded by a stratum corneum, which prevents the escape of substances in the body and protects the body's interior from external physical and chemical stimuli. The epidermis of the skin is turned over to the basal layer, the pole layer, the granule layer and the stratum corneum and eventually removed as waste products, which takes 14 days from the base layer to the granule layer and 14 days from the excess to the outermost stratum corneum. It takes However, as the skin ages, the turnover period generally increases, and as a result, the proportion of the stratum corneum that occupies the outermost part increases, resulting in a dry and dull skin. In addition, the growth of bacteria between the stratum corneum increases and odor may occur due to decay. Therefore, in order to maintain the health of the skin to prevent excessive accumulation of keratin. In particular, the foot is thicker than other skin areas with 10 ~ 20 stratum corneum, forming 45 ~ 50 layers, which can be a hotbed of bad smell. If attached, it is easy to spread throughout the sole, so special care should be taken.

각질제거제는 화학적인 것과 물리적인 제거제 등 다양한 것이 개발되었다. 화학적 제거제로는 알파-하이드록시애씨드(alpha-hydroxy acid)와 베타-하이드록시애씨드(beta-hydroxy acid)가 대표적이며 이들은 단독으로 보다는 다른 요소와 함께 배합되어 발관리용 각질제거제품에 사용되었다. 또한 효소를 함유한 것으로는 파파인, 판크레아틴 등이 파우더 형태의 제형으로 사용되었다. 물리적 제거제로는 스크럽이 대표적이다. Exfoliants have been developed in a variety of ways, including chemical and physical removers. Typical chemical removers include alpha-hydroxy acid and beta-hydroxy acid, which are combined with other components rather than alone to be used in exfoliating products for foot care. In addition, papain, pancreatin, and the like were used in the form of powder as the enzyme. Scrub is a typical physical remover.

스크럽이 함유된 제품은 세정 효과가 매우 뛰어나 피부에 쌓인 각종 노폐물, 먼지, 화장품 찌꺼기 등을 말끔하게 제거해 준다. 그러나, 무기계 스크럽의 경우는 경도가 높아 표면이 둥글지 못하고 모가 난 것은 피부를 미세하게 상하게 할 수 있는 문제점이 있다. 따라서 이에 대한 대안으로 효소를 세정용 조성물로 사용하는 경우가 늘어나고 있다. Products containing scrubs are very effective in cleaning and removes various wastes, dust and cosmetic residues accumulated on the skin. However, in the case of the inorganic scrub, the hardness is high and the surface is not rounded, so that there is a problem that can damage the skin finely. Therefore, as an alternative to this, the use of enzymes for cleaning compositions is increasing.

효소는 생체 촉매로서 기존의 세정제에 비해 환경 친화적이고 기질 특이성이 뛰어난 장점을 가지고 있다. 그럼에도 불구하고 수용액에 배합했을 때 안정성이 떨어져 화장품 원료로 사용하는데 한계를 가지고 있다.
Enzymes are biocatalysts that have the advantages of being environmentally friendly and superior in substrate specificity over conventional cleaning agents. Nevertheless, when formulated in an aqueous solution, the stability is limited to use as a raw material for cosmetics.

본 발명의 목적은 안정성이 향상된 단백질 분해효소를 포함하는 친환경적 발 세정용 조성물을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide an environment-friendly composition for washing feet containing protease with improved stability.

본 발명의 또 다른 목적은 부작용을 최소화하여 인체에 해가 없는 발 세정용 조성물을 제공하는 것이다.
Still another object of the present invention is to provide a composition for washing feet that is harmless to humans by minimizing side effects.

청구항 제1항에 기재된 발명은, 발 세정용 조성물이고, 단백질 분해 효소가 고정된 마이크로비드를 함유한다.The invention according to claim 1 is a composition for washing feet, and contains microbeads to which proteolytic enzymes are immobilized.

청구항 제1항에 기재된 발 세정용 조성물에 의하면, 마이크로비드에 의한 물리적 스크럽작용과 단백질 분해효소에 의한 화학적 분해 작용이 함께 일어날 수 있게 하여, 각질 분해시 상승 효과를 유발하고, 신진대사를 증진하여 청결유지 및 발 건강에 도움을 줄 수 있다.
According to the composition for foot cleaning according to claim 1, the physical scrub action by the microbead and the chemical degradation action by the protease can occur together, causing a synergistic effect upon keratin degradation, and promoting metabolism. It can help keep you clean and your feet healthy.

청구항 제2항에 기재된 발명은, 청구항 제1항에 기재된 발 세정용 조성물이고, 단백질 분해 효소가 파파인, 브로멜라인 및 판크레아틴으로 이루어진 군으로부터 선택된 1 또는 2개 이상의 혼합물이다.The invention according to claim 2 is the foot washing composition according to claim 1, wherein the proteolytic enzyme is one or a mixture of two or more selected from the group consisting of papain, bromelain and pancreatin.

청구항 제2항에 기재된 발 세정용 조성물에 의하면, 파파인, 브로멜라인 및 판크레아틴은 고정화되어 더욱 우수한 각질효과를 나타낸다.
According to the foot-washing composition according to claim 2, papain, bromelain and pancreatin are immobilized to exhibit more excellent keratin effect.

청구항 제3항에 기재된 발명은, 청구항 제1항에 기재된 발 세정용 조성물이고, 단백질 분해 효소가 고정된 마이크로비드가 전체 조성물의 중량에 대하여 0.1~10중량%으로 포함된다.The invention according to claim 3 is the composition for foot washing according to claim 1, wherein the microbeads to which proteolytic enzymes are immobilized are contained at 0.1 to 10% by weight based on the weight of the whole composition.

청구항 제3항에 기재된 발 세정용 조성물에 의하면, 과다하게 포함되어 피부 트러블 일으키는 일 없이 높은 세정효과 및 각질 제거효과를 나타낸다.
According to the composition for feet cleaning of Claim 3, it shows high washing | cleaning effect and exfoliation effect, without excessively containing and causing a skin trouble.

청구항 제4항에 기재된 발명은, 청구항 제1항에 기재된 발 세정용 조성물이고, 마이크로비드가 키토산으로 제조된 둥근 형상의 다공성 마이크로비드이다.The invention according to claim 4 is the foot washing composition according to claim 1, wherein the microbeads are round porous microbeads made of chitosan.

청구항 제4항에 기재된 발 세정용 조성물에 의하면, 천연 유래의 기능성 소재를 사용하여 다공성 마이크로비드로 만들어 사용하므로, 부작용이 없고 물리적 스크럽의 효과를 더욱 높일 수 있다. 또한 키토산제 마이크로비드는 인체에 무해하며, 둥근 형상으로 이루어져 있어 사용성을 높였다.
According to the composition for feet cleaning according to claim 4, since it is made of porous microbeads using a natural-derived functional material, there is no side effect and the effect of the physical scrub can be further enhanced. In addition, chitosan-made microbeads are harmless to the human body and have a round shape to enhance usability.

청구항 제5항에 기재된 발명은, 청구항 제1항에 기재된 발 세정용 조성물이고, 상기 발 세정용 조성물이 계면활성제, 보습제, 방부제, 항산화제, 항곰팡이제, 향료, 색소, 점도증가제, 수분운반체 및 이들의 혼합물로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 또는 2개 이상의 성분들을 추가로 포함한다.The invention according to claim 5 is the composition for foot cleaning according to claim 1, wherein the composition for foot cleaning is a surfactant, a humectant, a preservative, an antioxidant, an antifungal agent, a perfume, a pigment, a viscosity increasing agent, and water. And one or more components selected from the group consisting of carriers and mixtures thereof.

청구항 제5항에 기재된 발 세정용 조성물에 의하면, 발 각질 제거 효과외에 사용감이나 피부 안정도 등을 증가시키는 효과가 있다.
According to the composition for feet cleaning of Claim 5, there exists an effect which increases a usability, skin stability, etc. in addition to a foot exfoliation effect.

청구항 제6항에 기재된 발명은, 청구항 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 기재된 발 세정용 조성물이고, 상기 발 세정용 조성물이 샴푸, 크림, 맛사지 크림, 로션, 겔, 연고 또는 분무제 형태이다.The invention according to claim 6 is the foot cleaning composition according to any one of claims 1 to 5, wherein the foot cleaning composition is in the form of a shampoo, cream, massage cream, lotion, gel, ointment or spray. to be.

청구항 제6항에 기재된 발 세정용 조성물에 의하면, 사용자의 취향이나, 사용부위, 사용자의 상태등에 따라 목적에 맞도록 사용될 수 있다.
According to the foot-washing composition of Claim 6, it can be used according to the objective according to a user's taste, a use part, a user's condition, etc.

상기에서 살펴본 바와 같이 본 발명에 의한 발 세정용 조성물은 마이크로비드에 의한 물리적 스크럽작용과 단백질 분해효소에 의한 화학적 분해작용으로 각질 분해시 상승효과를 유발하고 신진대사를 증진하여 청결유지 및 발 건강에 도움을 줄 수 있다. 또한, 파파인, 브로멜라닌, 판크레아틴이 고정화된 경우 우수한 각질제거효과를 나타냄으로써 발 세정제로 유용하게 사용될 수 있다.
As described above, the foot cleaning composition according to the present invention causes a synergistic effect upon keratin degradation by physical scrub action by microbeads and a chemical decomposition action by proteolytic enzymes and promotes metabolism to maintain cleanliness and foot health. It can help. In addition, papain, bromelain, and pancreatin can be usefully used as a foot cleanser by showing excellent exfoliation effect when immobilized.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따라 마이크로비드를 제조하는 개략도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따라 단백질 분해효소가 결합되기 전 후의 마이크로비드의 표면을 찍은 현미경 사진이다.
도 3a 내지 도 3c는 키토산마이크로비드, 글루타르알데히드 반응후 키토산마이크로비드, 단백질분해효소가 결합된 키토산마이크로비드의 FT-IR Spectrum을 각각 나타낸 것이다.
도 4 및 도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 발 세정용 조성물의 사용 전 후에 따른 발 상태를 찍은 사진이다.
도 6은 유리 단백질 효소와 고정화된 단백질 효소의 활성 안정화도를 비교한 그래프이다.
1 is a schematic diagram of preparing microbeads according to an embodiment of the present invention.
Figure 2 is a micrograph of the surface of the microbeads before and after proteolytic enzyme binding according to an embodiment of the present invention.
3A to 3C show FT-IR Spectrum of chitosan microbeads, chitosan microbeads after glutaraldehyde reaction, and chitosan microbeads to which proteases are bound, respectively.
4 and 5 are photographs taken of the state of the foot before and after use of the foot cleaning composition according to an embodiment of the present invention.
6 is a graph comparing the activity stabilization of free protein enzyme and immobilized protein enzyme.

이하 본 발명을 보다 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 발명의 일 실시예에 따른 발 세정용 조성물은 단백질 분해 효소가 고정된 마이크로비드를 함유한다.Foot cleaning composition according to an embodiment of the present invention contains a microbead fixed with a proteolytic enzyme.

상기 단백질 분해효소는 각질 제거기능을 갖는 촉매제로 어느 것이나 다 가능하나 피부자극에 문제가 없는 식물이나 동물에서 유래한 것들 예를들면, 파파야로부터 얻어지는 파파인(papain), 파인애플로부터 얻어지는 브로멜라인(bromelain), 돼지의 쓸개즙에서 얻어지는 판크레아틴(pancreatin)이 사용될 수 있다. The protease is a catalyst having an exfoliating function, which can be any of them, but those derived from plants or animals that have no problem of skin irritation, for example, papain obtained from papaya and bromelain obtained from pineapple. Pancreatin from pig bile can be used.

상기 마이크로 비드는 효소를 고정화하는데 적합한 것이면, 어느 것이나 다 가능하며, 예를 들어, 게껍질, 달걀껍질과 같은 동물성 스크럽, 살구씨, 아몬드씨, 호두껍질, 봉숭아씨, 율무씨과 같은 식물성 스크럽, 나일론, 폴리염화비닐, 폴리스타일렌, 폴리프로필렌, 폴리에칠렌, 셀룰로오스와 같은 유기계 스크럽, 실리카, 알루미나, 탄산칼슘과 같은 무기계 스크럽을 쓸 수 있으나, 바람직하게는 게껍질로부터 추출한 키토산을 둥근 형상으로 한 다공성 마이크로비드로 만든 것이 바람직하다. 키토산을 스크럽제로 사용할 경우 크기와 모양이 중요한데 너무 입자가 크거나 모가 나 있는 것은 사용성이 떨어져 바람직하지 못하며, 따라서, 둥근 형상의 마이크로비드를 이용하는 것이 바람직하다. 이러한 마이크로비드 표면에 단백질분해효소를 결합시킴으로써 물리적 스크럽작용과 화학적 분해작용이 함께 일어날 수 있도록 하였다.
The microbeads can be any that is suitable for immobilizing the enzyme, for example, animal scrubs such as crab shells, egg shells, apricot seeds, almond seeds, walnut shells, balsam seeds, july seeds, nylon scrubs, nylon , Organic scrubs such as polyvinyl chloride, polystyrene, polypropylene, polyethylene, cellulose, and inorganic scrubs such as silica, alumina, and calcium carbonate can be used. It is preferable to make it. When chitosan is used as a scrub agent, the size and shape are important. Too large or brittle particles are not preferable, and therefore, it is preferable to use round microbeads. By combining proteolytic enzymes on the surface of the microbeads, physical scrub and chemical degradation can occur together.

상기 단백질 분해효소가 고정된 마이크로비드는 전체 조성물의 중량에 대하여 0.1~10중량%이고, 바람직하게는 1.0~5중량% 이다. 10중량%를 초과하게 되면 각질의 과다한 제거로 피부를 예민하게 만드는 문제를 야기할 수 있고, 0.1중량% 미만으로 포함되면, 유효한 각질제거 효과를 얻을 수 없다.
The microbead fixed with the protease is 0.1 to 10% by weight, preferably 1.0 to 5% by weight based on the total weight of the composition. Exceeding 10% by weight can cause a problem of skin sensitization due to excessive removal of keratin, and when contained below 0.1% by weight, no effective exfoliation effect can be obtained.

본 발명의 일 실시예에 따른 발 세정용 조성물에는 통상 화장품용 제형에 사용되는 첨가제를 추가로 포함할 수 있다. 예를들면 세정, 침투, 거품형성을 위한 계면활성제, 수분의 적절한 유지를 위한 보습제, 산화를 막기나 지연시키기 위한 항산화제, 원료의 냄새를 마스킹하거나 적절한 향취를 부여하기 위한 향료물질, 펄 효과를 부여하기 위한 펄화제, 매끄러운 감촉과 적절한 유분감을 고급알코올, 물때 형성을 막기 위한 금속이온봉쇄제, 미생물의 과도한 증식을 억제하기 위한 방부제, 항곰팡이제, 점도증가제 등이 있다[참고: 1) R. J Akers, Foams, Academic Press, New York (1976). 2) J. J. Bikerman, Foam, Springer, Berlin (1973)].
Foot cleaning composition according to an embodiment of the present invention may further include an additive usually used in cosmetic formulations. Examples include surfactants for cleaning, penetration, foaming, moisturizers for proper retention of moisture, antioxidants to prevent or delay oxidation, fragrances to mask the odor of the raw materials or impart an appropriate odor, and the pearl effect. A pulping agent to impart, a smooth feel and proper oiliness, high-grade alcohol, a metal ion sequestrant to prevent the formation of scales, a preservative to prevent excessive growth of microorganisms, an antifungal agent, and a viscosity increasing agent [1] R. J Akers, Foams, Academic Press, New York (1976). 2) JJ Bikerman, Foam, Springer, Berlin (1973)].

상기 계면활성제로는 비이온성계와 아미노산계 또는 양쪽성계의 계면활성제가 있다. 비이온성계의 경우에는 세정력이 낮아 사용성이 낮아, 고 본 발명의 목적을 최종적으로 수행하기에는 한계가 있다. 따라서 아미노산계와 양쪽성계를 단독으로 배합한 것 혹은 이들과 비이온성계를 혼용 사용한 것이 바람직하다. The surfactants include nonionic and amino or amphoteric surfactants. In the case of nonionic systems, there is a limit to finally perform the object of the present invention because of its low cleaning power and low usability. Therefore, it is preferable to mix | blend an amino acid system and an amphoteric system independently, or to mix and use these and nonionic systems.

상기 비이온성 계면활성제는 엄격하게 제한되지 않으나 일반적으로는 HLB 6~12사이로 오일과의 혼합성이 좋으며 물이 닿았을 때 백탁이 되면서 쉽게 씻겨나가는 피이지-30 소르비탄 테트라올리에이트, 피이지-30 소르비탄테트라이소스테아레이트, 피이지-20 글리세릴 트리이소스테아레이트가 적당하나 이에 한정되지는 않으며 1종 또는 2종 이상 사용될 수 있다.The nonionic surfactant is not strictly limited, but in general, HLB 6-12 is mixed well with oil, and when washed with water, it becomes white turbid and easily washed away with PJ-30 sorbitan tetraoleate, PIG- 30 sorbitan tetraisostearate, Fiji-20 glyceryl triisostearate are suitable but not limited to one or two or more kinds thereof.

음이온성 계면활성제로는 소듐 코코일 이세티오네이트(sodium Cocoyl Isethionate), 알킬 폴리사카라이드, 락토비온아미드, 에틸렌글리콜 에스테르, 글리세롤 모노에테르, 폴리히드록시아미드 (글루카미드), 1급 및 2급 알콜 에톡실레이트 등이 있다.Anionic surfactants include sodium Cocoyl Isethionate, alkyl polysaccharides, lactobionamides, ethylene glycol esters, glycerol monoethers, polyhydroxyamides (glucamides), primary and secondary Alcohol ethoxylates and the like.

아미노산 계면활성제로는 아실 알라니네이트, 아실 글리시네이트 및 아실 글루타메이트가 있고, 바람직하게는 디소듐 아실글루타메이트, 포타슘 코코일 글리시네이트 등이 있다.Amino acid surfactants include acyl alanate, acyl glycinate and acyl glutamate, preferably disodium acyl glutamate, potassium cocoyl glycinate and the like.

상기 보습제로는 1,3-부틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 및 글리세린이 있으며, 방부제로는 메틸 파라벤(Methyl paraben), 에틸파라벤, 프로필파라벤, 및 부틸 파라벤이 있고, 점증제로는 세테아릴알콜(Cetearyl alcohol), 카르복시 비닐 폴리머, 및 잔탄 검(Xanthan Gum)이 있으며, 향료로는 에센셜 오일(essential oil)이 있고, 유화제로서 소르비탄올리베이트(Sorbitan Olivate) 등이 있다. 상기 예는 설명을 위한 나열한 것이며, 당해 기술분야에서 사용되는 것은 어느 것이나 적절하게 선택할 수 있다.
The moisturizing agents include 1,3-butylene glycol, propylene glycol, and glycerin, and preservatives include methyl paraben, ethyl paraben, propyl paraben, and butyl paraben, and the thickener is cetearyl alcohol ( Cetearyl alcohol, carboxy vinyl polymer, and Xanthan Gum, and the fragrance includes essential oil, and Sorbitan Olivate as an emulsifier. The above examples are listed for illustrative purposes, and any one used in the art may be appropriately selected.

상기 펄제는 세정제 또는 화장품에 있어 외관을 화려하게 하기 위한 펄감을 부여하기 위하여 사용되는 것으로, 종래 알려진 펄제로는 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 올리고머 및 알킬렌 글리콜의 모노 스테아레이트 혹은 디 스테아레이트등이 있으며, 이 중 에틸렌 글리콜, 모노 스테아레이트 및 디스테아레이트가 주로 많이 사용된다.
The pulsing agent is used to impart a feeling of pearl to make the appearance gorgeous in a cleaning agent or cosmetics, and conventionally known pulsing agents include ethylene glycol, propylene glycol, oligomers and monostearate or distearate of alkylene glycol. Of these, ethylene glycol, mono stearate and distearate are mainly used.

본 발명에 따른 발 세정용 조성물은 무좀 예방 기능을 보강하기 위하여, 소금 또는 천일염을 추가할 수도 있다. Foot cleaning composition according to the present invention may add salt or sun salt to reinforce the athlete's foot prevention function.

본 발명에 따른 발 세정용 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 제한되지 아니하며, 예를 들어 샴푸, 크림, 맛사지 크림, 로션, 겔, 연고 또는 분무제의 형태로 제조되어 사용될 수 있다.
The foot cleaning composition according to the present invention is not particularly limited in the formulation, and may be prepared and used, for example, in the form of a shampoo, cream, massage cream, lotion, gel, ointment or spray.

이하, 도면을 참고로 하여 보다 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the drawings.

도 1을 참조로 하면, 본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 마이크로비드는 W/0 에멀젼을 이용하여 제조될 수 있다. 키토산외에 달걀껍질등 동물성 스크럽, 살구씨등 식물성 스크럽, 나일론 등의 유기계 스크럽, 실리카등의 무기계 스크럽은 그대로 물리적으로 분쇄하여 비드로 사용될 수 있으나 모양이 둥글지 못해 피부에 미세한 상처를 남길 수 있다. 키토산은 1차 아민기를 가지고 있기 때문에 효소 고정화에는 적합하다. 즉, 키토산의 경우 유기산을 가했을때 쉽게 용해하고 둥근 입자 모양으로 가공을 할 수 있어 바람직하다. Referring to FIG. 1, according to one embodiment of the present invention, the microbeads may be prepared using a W / 0 emulsion. In addition to chitosan, animal scrubs such as egg shells, vegetable scrubs such as apricot seeds, organic scrubs such as nylon, and inorganic scrubs such as silica can be physically pulverized and used as beads. Chitosan is suitable for enzyme immobilization because it has a primary amine group. In other words, chitosan is preferable because it can be easily dissolved and processed into round particles when an organic acid is added.

게껍질로부터 추출한 키토산의 경우, 수상으로서 키토산을 용해시킨 유기산과 유기상으로서 비극성 유기용매를 혼합하여 W/O 에멀젼을 제조한다. 이때 안정한 유중수형 유화(W/O)를 형성하기 위하여 200~450rpm에서 1~2시간 교반하면서 키토산 용액을 서서히 가해준다. 이후, 염기성 용액을 가하여 경화시켜 코아세르베이트를 형성한다. 이후 층분리, 경화, 여과, 세척 및 건조시켜 마이크로비드를 제조한다.
In the case of chitosan extracted from crab shell, a W / O emulsion is prepared by mixing an organic acid in which chitosan is dissolved as an aqueous phase and a nonpolar organic solvent as an organic phase. At this time, to form a stable water-in-oil emulsion (W / O), the chitosan solution is slowly added while stirring at 200-450 rpm for 1 to 2 hours. Thereafter, the basic solution is added to cure to form coacervate. Microbeads are then prepared by layer separation, curing, filtration, washing and drying.

상기 유기산로는 아스코르빈산, 글리콜산, 젖산, 아세트산, 트리플루오르아세트산이 사용될 수 있으며 바람직하게는 아세트산이 사용될 수 있다. 상기 유기산은 0.5~2% 농도로 사용되는 것이 바람직하다.Ascorbic acid, glycolic acid, lactic acid, acetic acid, trifluoroacetic acid may be used as the organic acid, preferably acetic acid may be used. The organic acid is preferably used at a concentration of 0.5 ~ 2%.

상기 비극성 유기용매로는 n-헥산, 사이클로헥산, 디클로로메탄, 디클로로에탄이 사용될 수 있으며, 바람직하게는 톨루엔이 사용될 수 있다.As the nonpolar organic solvent, n-hexane, cyclohexane, dichloromethane, dichloroethane may be used, and preferably toluene may be used.

상기 염기성 용액으로는 소듐하이드록사이드, 포타슘하이드록사이드, 리튬하이드록사이드, 칼슘하이드록사이드, 모노에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민이 사용될 수 있으며, 바람직하게는 소듐하이드록사이드가 사용될 수 있다. 상기 염기성 용액은 5~15%의 농도로 사용되는 것이 바람직하다.As the basic solution, sodium hydroxide, potassium hydroxide, lithium hydroxide, calcium hydroxide, monoethanolamine, diethanolamine, triethanolamine may be used, and sodium hydroxide may be preferably used. have. The basic solution is preferably used at a concentration of 5-15%.

상기 세척, 여과 및 건조의 방법은 당해 기술분야에 알려진 기술을 이용하여 당해 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진자가 적절하게 선택하여 사용할 수 있다.
The washing, filtration and drying methods may be appropriately selected and used by those skilled in the art using techniques known in the art.

다음으로 본 발명의 일 실시예에 따라 상기 마이크로비드에 효소를 고정화한다. Next, the enzyme is immobilized on the microbead according to an embodiment of the present invention.

상기 제조된 마이크로비드를 생물학적 접착제에 넣고 반응시킨다. 예를들어 글루타르알데히드 용액 1ml에 대하여 마이크로비드 40~60mg 첨가하여 1~3시간 동안 반응시킨다. 반응후, 뜨거운 증류수로 세척하여, 마이크로비드에서 글루타르알데히드의 냄새를 제거한다. 이때, 뜨거운 증류수로 세척하는 단계가 매우 중요하다. 이 단계에 의하여 미반응물을 완전히 제거한 다음 효소를 완충용액 존재하에서 결합시키므로, 미반응 글루타르알데이드에 의한 부반응을 최소화 할 수 있다. 다시 완충용액, 예를 들어 인산명 완충용액(pH7.0)으로 세척하여 마이크로 비드를 안정화시킨다. 다시 완충용액 1ml에 대하여 단백질 분해효소 1~2mg을 넣고 진탕기(shaking incubator)에서 18~28℃, 200~300rpm에서 4~8시간 고정화시킨다. The prepared microbeads are placed in a biological adhesive and reacted. For example, 40 to 60 mg of microbeads are added to 1 ml of glutaraldehyde solution and reacted for 1 to 3 hours. After the reaction, washing with hot distilled water removes the smell of glutaraldehyde from the microbeads. At this time, the step of washing with hot distilled water is very important. This step completely removes the unreacted material and then binds the enzyme in the presence of a buffer solution, thereby minimizing side reactions caused by unreacted glutaraldehyde. Again, the microbeads are stabilized by washing with a buffer solution such as phosphate buffer (pH 7.0). Again, 1 ~ 2mg of protease is added to 1ml of buffer solution and immobilized at 18 ~ 28 ℃ and 200 ~ 300rpm in shaking incubator for 4 ~ 8 hours.

이후, 용액을 여과하고, 증류수로 세척하여 단백질 분해효소가 결합된 마이크로비드를 완성한다. 단백질 분해효소가 고정된 비드의 표면을 전자현미경을 통해 관찰할 수 있다(도 3a 내지 도 3c 참조).
Thereafter, the solution is filtered and washed with distilled water to complete the proteolytic enzyme-bound microbeads. The surface of the bead to which the protease is immobilized can be observed through an electron microscope (see FIGS. 3A to 3C).

다음으로, 단백질 분해효소가 고정된 마이크로비드를 함유한 발 세정용 조성물은 다음 방법으로 제조된다.Next, the foot washing composition containing the microbead fixed with the protease is prepared by the following method.

단백질 분해효소가 고정된 마이크로비드를 전체 조성물 중량에 대하여 1~10중량% 포함되도록 구성한다. 이때, 계면활성제, 보습제, 항산화제, 방부제등이 함께 포함되도록 구성될 수 있다. The protease-immobilized microbeads are configured to contain 1 to 10% by weight based on the total weight of the composition. At this time, it may be configured to include a surfactant, a moisturizing agent, antioxidants, preservatives and the like.

이렇게 제조된 발 세정용 조성물을 사용하기 위한 최적 온도는 30~45℃이며, pH 범위는 5~9이다. 바람직하기로는 35~40℃의 온도, 최적 pH 는 5~7이다. 이는 따뜻한 온수에서 단백질 분해 효소가 죽은 각질세포 사이로 침투하여 자연분해하므로 각질이 생기는 문제를 근본적으로 해결할 수 있으며, 스크럽효과 및 보습효과를 증대시킬 수 있기 때문이다. 다만 온도가 너무 높을 경우, 효소가 죽거나 피부 손상을 일으킬 수 있다.
The optimal temperature for using the foot cleaning composition thus prepared is 30 ~ 45 ℃, pH range is 5 ~ 9. Preferably the temperature of 35-40 degreeC, and optimal pH are 5-7. This is because proteolytic enzymes penetrate into dead keratinocytes in warm hot water and naturally decompose, thereby fundamentally solving the problem of keratin, and increasing scrubbing and moisturizing effects. If the temperature is too high, the enzyme may die or damage the skin.

이하 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 본 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것이며, 본 발명의 범위가 이에 한정된 것은 아니다.
Through the following examples will be described the present invention in more detail. This embodiment is intended to illustrate the present invention in more detail, but the scope of the present invention is not limited thereto.

실시예Example 1:  One: 마이크로비드의Microbead 제조 Produce

1% 아세트산 수용액 250ml에 키토산을 용해시킨 뒤 냉장고에 하루정도 방치하여 기포를 제거하였다. 톨루엔을 유화제로 솔비탄 모노올레이트(상품명 Span80, HLB = 4.3) 2g과 보조 유화제로 n-헥산 1.2ml를 혼합하여 총 300ml가 되게 폴리에틸렌 비이커에 옮기고 기계식 교반기를 이용하여 250rpm으로 교반해주면서 키토산 용액을 서서히 가해 주었다. 2시간 정도 교반하여 안정한 구형의 유중수형 유화(W/O)를 형성시킨 후 10%(도1과 일치시킴)수산화나트륨 수용액 1.5ℓ로 경화시키고 여액의 액성이 중성이 될 때까지 끓는 증류수로 세척하고 난 뒤 에탄올, 에테르, 아세톤으로 차례로 세척한 후 건조기에서 건조하였다.
Chitosan was dissolved in 250 ml of 1% acetic acid aqueous solution and left in the refrigerator for about one day to remove bubbles. 2 g of sorbitan monooleate (trade name Span80, HLB = 4.3) was added as an emulsifier and 1.2 ml of n-hexane as an auxiliary emulsifier. Slowly added. Stir for about 2 hours to form a stable spherical water-in-oil emulsion (W / O), then harden with 1.5 liter of 10% sodium hydroxide aqueous solution and wash with boiling distilled water until the filtrate becomes neutral. After washing with ethanol, ether, acetone in order and dried in a dryer.

실시예Example 2. 단백질 분해효소가 고정된  2. Protease-immobilized 마이크로비드의Microbead 제조 Produce

실시예 1에서 제조된 마이크로비드 200mg에 4ml의 10% 글루타르알데히드 용액을 넣고 2시간 동안 반응시켰다. 반응 후 비드에서 글루타르알데히드의 냄새가 나지 않을 때까지 뜨거운 증류수로 세척하였다. 최종적으로 0.05몰 인산염 완충용액(pH7.0)으로 2회 세척해 주었다. 그 후 다시 인산염 완충욕액 4ml와 단백질 분해효소(papain) 1.5mg을 상기 마이크로비드와 함께 shaking incubator에 넣은 후 25℃, 250rpm으로 6시간 고정화시켰다. 고정화가 끝난 후 용액을 여과한 수 증류수로 세척한 후 세정용 화장품의 베이스에 혼합하여 사용하였다. 고정화된 비드의 표면은 전자현미경(Hitachi, Japan)을 통하여 관찰하였고 화학결합의 확인은 FT-IR을 통해 실시하였다(도 2 참조).
4 ml of 10% glutaraldehyde solution was added to 200 mg of the microbead prepared in Example 1 and reacted for 2 hours. After the reaction, the beads were washed with hot distilled water until no smell of glutaraldehyde was obtained. Finally washed twice with 0.05 mole phosphate buffer (pH 7.0). Then, 4ml of phosphate buffer bath and 1.5mg of protease (papain) were added to the shaking incubator together with the microbeads and fixed at 25 ° C. and 250rpm for 6 hours. After the immobilization was completed, the solution was washed with filtered distilled water and mixed with the base of the cleaning cosmetics. The surface of the immobilized beads was observed through an electron microscope (Hitachi, Japan) and the chemical bond was confirmed by FT-IR (see FIG. 2).

실시예Example 3: 발 세정용 조성물의 제조 3: Preparation of Foot Washing Composition

정제수 1리터에 고정화 효소 1g, 디소듐 아실글루타메이트(Disodium Acylglutamate) 20g, 소듐 코코일 이세티오네이트(Sodium Cocoyl isethionate) 20g, 포타슘 코코일 글리시네이트(Potassium cocoylglycinate) 10g을 water bath를 이용해 가열하여 혼합하였다. 에틸렌 글리콜 디스테아레이트(ethylene glycol distearate) 1g, 1,3-부틸렌글리콜(1,3-Butylene glycol) 5g을 55~65℃로 맞추어 섞어주었다. 여기에 세테아릴 알콜(Cetearyl alcohol) 0.3g, 소르비탄 올리베이트(Sorbitan Olivate) 3g, 에틸렌 디아민 테트라아세트산(ethylene diamine tetraacetic acid)(disodium salt) 0.05g을 50~55℃에서 섞어주었다. 이에 방부제로서 메칠파라벤(methyl paraben) 0.01g을 45℃를 유지하여 혼합하여 발 세정용 조성물을 제조하였다.
1 g of purified water, 1 g of immobilized enzyme, 20 g of disodium acylglutamate, 20 g of sodium cocoyl isethionate, and 10 g of potassium cocoylglycinate were mixed by heating with a water bath. It was. 1 g of ethylene glycol distearate and 5 g of 1,3-butylene glycol were mixed at 55 to 65 ° C. 0.3 g of cetearyl alcohol, 3 g of sorbitan olivate (Sorbitan Olivate), and 0.05 g of ethylene diamine tetraacetic acid (disodium salt) were mixed at 50 to 55 ° C. As a preservative, 0.01 g of methyl paraben was mixed at 45 ° C. to prepare a foot washing composition.

실험예Experimental Example 1: 효소고정화 확인 1: Enzyme Immobilization Confirmation

고정화 여부를 관찰하기 위하여 고정화 전후의 비드 표면의 형상을 주사전자 현미경(SEM, scanning electron microscope)을 사용하여 50배, 20,000의 배율로 확대하여 관찰하였다. 그 결과를 도 2에 나타내었다. 도 2의 현미경 사진에서 관찰한 바와 같이, 효소고정화 전에는 상당히 편평한 비드 표면의 형상을 관찰 할 수 있었으나, 효소를 고정한 후에는 거친 형상을 나타내고 있는 것을 알 수 있었다. 이는 고정화 과정에서 발생한 표면의 물리적 변화에도 기인하겠지만, 표면에 다른 물질이 결합되어 있는 것으로 미루어 보아 효소가 고정화되었다는 것을 알 수 있었다. In order to observe the immobilization, the shape of the bead surface before and after the immobilization was observed at a magnification of 50 times and 20,000 using a scanning electron microscope (SEM). The results are shown in FIG. As observed in the micrograph of FIG. 2, it was possible to observe the shape of a fairly flat bead surface before enzyme immobilization, but it was found that the enzyme had a rough shape after fixing the enzyme. This may be due to the physical change of the surface during the immobilization process, but it can be seen that the enzyme is immobilized due to the binding of other substances on the surface.

또한, 도 3(도 3a 내지 도 3c)의 FT-IR spectrum에서 보는 바와 같이 키토산마이크로비드에 글루타르알데히드를 반응시킨 후 1716cm에서 알데히드에 기인하는 피크가 나타났고 1100cm에서 이민(imine)에 기인하는 피크의 강도가 증가하였다. 효소를 고정화한 후에는 알데히드와 효소와의 반응에 의해 다시 알데히드에 기인하는 피크가 사리지는 것으로 보아 화학결합에 의해 효소가 고정화되었음을 확인할 수 있었다.
In addition, after reacting glutaraldehyde to chitosan microbeads as shown in the FT-IR spectrum of FIG. 3 (FIGS. 3A to 3C), a peak due to aldehyde appeared at 1716 cm and an imine at 1100 cm. The intensity of the peaks increased. After the immobilization of the enzyme, it was confirmed that the enzyme was immobilized by chemical bonding because the peak caused by the aldehyde disappeared again by the reaction between the aldehyde and the enzyme.

실험예Experimental Example 2: 본 발명의 발 세정용 조성물의 효능 확인 2: confirm the efficacy of the foot cleaning composition of the present invention

본 발명 조성물에 대한 효능효과의 확인을 위해 Home Usage Test (HUT) 시험에 의해 7일간 실시예 3의 조성물에 대한 사용성 품평을 실시하였다. 각 품평자는 매일 저녁 8~10시경 시료를 각각 정해진 방법에 따라 사용하도록 하고, 설문은 7일간 사용 후 1시간이 지났을 때 발꿈치를 포함한 발바닥의 상태를 관찰하였다. 실시예 1에 따른 조성물을 사용하기 전 단실클로라이드(형광물질)과 바셀린을 혼합하여 발바닥 부위를 염색하고, 이후 온수에서 실시예 1에 따른 발 세정용 조성물로 세정하였다. 실시예 1에 따른 발 세정용 조성물로 세정하기 전 및 후의 상태를 UV 램프 365nm에서 사진으로 찍어 도 4에 나타내었다. 또한, 실시예 1에 따른 발 세정용 조성물을 사용하기 전 후의 발 바닥의 상태를 사진으로 찍어 도 5에 나타내었다. In order to confirm the efficacy effect on the composition of the present invention, usability review of the composition of Example 3 was carried out for 7 days by the Home Usage Test (HUT) test. Each reviewer was asked to use the sample at 8 to 10 o'clock every evening according to the prescribed method, and the questionnaire observed the condition of the sole including the heel after 1 hour after 7 days of use. Before using the composition according to Example 1, the monochlorochloride (phosphorescent material) and petrolatum were mixed to dye the sole of the foot, and then washed with the composition for washing feet according to Example 1 in warm water. The state before and after washing with the foot washing composition according to Example 1 was photographed at a UV lamp 365nm and shown in FIG. 4. In addition, the state of the bottom of the foot before and after using the foot cleaning composition according to Example 1 was shown in Fig. 5 by taking a picture.

도 4 및 도 5에 도시된 바와 같이, 단백질 분해효소가 고정된 마이크로비드가 함유된 발 세정용 조성물을 사용하면, 발꿈치를 비롯한 발바닥의 상태가 전반적으로 개선되었음을 알 수 있었다. 이는 안정화된 단백질 분해 효소가 피부 표면의 각질과 반응하여 이를 분해시키는 것과 동시에 마이크로미드의 스크럽효과가 더해져서, 각질 탈락을 유발시키며 이로 인해 발꿈치 부분의 투명도가 증가하여 피부가 밝아짐을 알 수 있다.
As shown in Figures 4 and 5, it was found that the use of the foot cleaning composition containing the proteolytic enzyme-immobilized microbeads, the overall condition of the soles, including the heel. This can be seen that the stabilized proteolytic enzyme reacts with the keratin on the surface of the skin to decompose it, and at the same time, the scrubbing effect of the micromead is added, leading to the exfoliation of the keratin.

실험예Experimental Example 3: 유리 단백질 분해 효소와 고정화된 단백질 분해효소의 활성비교 3: Activity Comparison between Free Protease and Immobilized Protease

실시예 2에 제조된 키토산 마이크로비드에 고정화된 파파인과, 유리 파파인의 활성을 1일 내지 30일 동안 활성을 관찰하였다. 파파인의 활성은 UV spectrophotometer로 측정하였다. 기질 용액은 0.5몰 인산염 완충용액 (pH7.0)에 N-벤조일-DL-아르기닌-4-니트로아닐리드를 녹인 기질 용액을 고정화 담체가 들어 있는 반응기에 넣고 실온에서 10분간 반응시킨 후 바로 ice bath에 넣은 후 여액을 분취하여 405nm에서의 흡광도로 측정하였다. 그 결과를 도 6에 나타내었다.
The papain immobilized on the chitosan microbead prepared in Example 2 and the activity of free papain were observed for 1 to 30 days. Papain activity was measured by UV spectrophotometer. Substrate solution was dissolved in N-benzoyl-DL-arginine-4-nitroanilide in 0.5 mole phosphate buffer (pH7.0) to the reactor containing the immobilization carrier and reacted for 10 minutes at room temperature immediately in the ice bath After addition, the filtrate was aliquoted and measured by absorbance at 405 nm. The results are shown in FIG.

도 6에 도시된 바와 같이 고정화된 단백질 분해효소는 지속적으로 안정되게 활성을 나타내는 것을 알 수 있다. As shown in Figure 6 it can be seen that the immobilized protease is continuously stable activity.

Claims (6)

단백질 분해 효소가 고정된 마이크로비드를 함유한 발 세정용 조성물.A foot washing composition containing microbeads fixed with proteolytic enzymes. 제1항에 있어서,
상기 단백질 분해 효소가 파파인, 브로멜라인 및 판크레아틴으로 이루어진 군으로부터 선택된 1 또는 2개 이상의 혼합물인 발 세정용 조성물.
The method of claim 1,
The proteolytic enzyme is one or two or more mixtures selected from the group consisting of papain, bromelain and pancreatin.
제1항에 있어서,
상기 마이크로비드가 전체 조성물의 중량에 대하여 0.1~10중량%인 발 세정용 조성물.
The method of claim 1,
Foot composition for the microbeads is 0.1 to 10% by weight based on the total weight of the composition.
제1항에 있어서,
상기 마이크로비드가 키토산으로 제조된 둥근 형상의 다공성 마이크로비드인 발 세정용 조성물.
The method of claim 1,
The microbeads are round porous microbeads made of chitosan.
제1항에 있어서,
상기 발 세정용 조성물이 계면활성제, 보습제, 방부제, 항산화제, 항곰팡이제, 향료, 색소, 점도증가제, 수분운반체 및 이들의 혼합물로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 또는 2개 이상의 성분들을 추가로 포함하는 발 세정용 조성물.
The method of claim 1,
The foot cleaning composition further comprises one or two or more components selected from the group consisting of surfactants, moisturizers, preservatives, antioxidants, antifungals, fragrances, pigments, viscosity increasing agents, water carriers and mixtures thereof. Foot cleaning composition.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 발 세정용 조성물이 샴푸, 크림, 맛사지 크림, 로션, 겔, 연고 또는 분무제 형태인 발 세정용 조성물.
The method according to any one of claims 1 to 5,
The foot cleaning composition is a foot cleaning composition in the form of a shampoo, cream, massage cream, lotion, gel, ointment or spray.
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