KR20120033699A - Cosmetic components comprised of the rubiadin having anti-allergy activity - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: A cosmetic composition containing rubiadin is provided to suppress beta-hexosaminidase secreation and caspase-1 expression and to treat atopic dermatitis. CONSTITUTION: A cosmetic composition for preventing and relieving allergy contains 0.00001-30 wt% of rubiadin as an active ingredient, isolated from adventitious roots of Morinda citrifolia L. The cosmetic composition contains 0.01-1.0 wt% of dipotassium glycyrrhizinate, 0.3-10.0 wt% of 1,3-butylene glycol, and 0.01-1.0 wt% of sodium hyaluronate.

Description

항알레르기 효과를 갖는 루비아딘과 이를 포함하는 화장료 조성물{Cosmetic components comprised of the rubiadin having anti-allergy activity}Rubiadin having anti-allergic effect and cosmetic composition comprising the same {Cosmetic components comprised of the rubiadin having anti-allergy activity}

본 발명은 알레르기에 대한 활성을 갖는 루비아딘과 이를 포함하는 알레르기 예방 및 완화에 효과가 있는 화장료 조성물에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 쥐 비만세포의 탈과립화시 β-hexosaminidase 및 히스타민 발현을 억제시키고 알레르기 반응시 발생되는 caspase-1 발현을 억제하여 알레르기 증상 완화에 유용한 루비아딘추출방법과 루비아딘을 이용한 항알레르기 화장료 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a rubiviadin having an activity against allergies and a cosmetic composition effective in preventing and alleviating allergies including the same. More specifically, by inhibiting the expression of β-hexosaminidase and histamine during degranulation of rat mast cells, and by inhibiting caspase-1 expression during allergic reaction, rubidine extraction method and anti-allergic cosmetic composition using rubidine are useful. It is about.

알레르기(allergy)란, 이물질에 대한 특이하고 변형된 반응을 나타내는 생화학적 현상이다. 이는 면역 불균형에 의한 민반응의 일종으로 알러젠(allergen)이라는 특정한 항원에 대하여 나타나는 반응으로, 그 항원에 대해 특이적인 IgE급 항체가 비만세포(mast cell)나 호염구(basophile)에 결합되어 유도되는 반응이다. 알러젠에 특이적인 IgE 항체가 많이 만들어지면 이들 항체는 비만세포나 호염구 표면에 있는 Fc수용체와 결합하게 되며, 여기에 알러젠이 결합하게 되면 이들 세포가 활성화되어 여러 가지의 생리활성 물질(사이토카인, 프로스타글란딘, 루코트리엔, 히스타민, 브래디키닌, 트립테이즈 등)이 분비되어, 혈관확장, 혈관의 침투성의 증가, 평활근 수축, 염증반응 등과 같은 변화가 유도된다. 이러한 반응은 이들 세포가 만들어내는 매개물질의 종류와 양에 따라 국소적으로 또는 전신적으로 나타날 수 있다. 질환으로는 알레르기성 아토피, 전신 알레르기, 알레르기성 비염, 천식, 음식 알레르기, 피부 알레르기 등이 있다. Allergy is a biochemical phenomenon that shows a specific and modified response to a foreign body. It is a type of sensitization caused by immune imbalance. It is a response to a specific antigen called allergen. The reaction in which an IgE-class antibody specific to the antigen is bound to mast cells or basophils is induced. to be. When allergen-specific IgE antibodies are made, these antibodies bind to Fc receptors on the surface of mast cells or basophils, and when allergens bind, these cells are activated to activate various bioactive substances (cytokines, prostaglandins). , Leukotrienes, histamine, bradykinin, tryptase, etc.) are secreted to induce changes such as vasodilation, increased permeability of blood vessels, smooth muscle contraction, and inflammatory responses. These responses can occur locally or systemically, depending on the type and amount of mediator these cells produce. Diseases include allergic atopic dermatitis, systemic allergies, allergic rhinitis, asthma, food allergies, and skin allergies.

알레르기 반응에 대해 자세히 알아보면, 히스타민은 히스티딘이 L-히스티딘 디카복시레이즈에 의해 디카복실레이션되어 형성되며, 비만세포나 호염구에 과립형태로 저장되어진다. 알러젠이 비만세포나 호염구에 결합하여 알레르기 반응이 시작되면 세포가 탈과립되어 히스타민이 분비되어지며, 이때 β-hexosaminidase도 함께 분비되어진다. 이런 효소적 활성은 비만세포 탈과립의 척도로 사용될 수 있어 실험에 사용할 수 있었다.In detail about allergic reactions, histamine is formed by decarboxylation of histidine by L-histidine dicarboxylase and stored in granules in mast cells or basophils. When allergens bind to mast cells or basophils and allergic reactions begin, the cells are degranulated to release histamine, and β-hexosaminidase is also secreted. This enzymatic activity could be used as a measure of mast cell degranulation and used in experiments.

또한, 자극물질에 대한 알레르기 반응시 활성화되는 caspase-1에 대한 발현 억제 정도를 측정하였다.In addition, the degree of inhibition of expression of caspase-1, which is activated during an allergic reaction to stimulants, was measured.

한편, 아토피는 유아기에 주로 발생하여 태열이라고도 하며 주로 각질층내의 세라마이드(ceramides)의 함량이 감소됨에 따라 발생한다. 아토피는 각질층의 수분유지기능이 떨어짐에 따라 피부가 건조되어 각질이 다량 일어나며, 피부장벽(skin barrier) 기능이 저하됨에 따라 정상피부에서는 침입하기 어려운 항원 단백질등 자극유발물질이 각질층 내로 침입하여 피부 알러지 등이 용이하게 발생하여 심한 소양증을 나타낸다. 그러므로 아토피 환자의 90% 이상이 포도상구균에 감염되어 있는데 이 균은 환자가 가려움을 참지 못해 긁어서 생기기도 하지만 최근의 보고에 의하면 이 세균의 외독소가 우리 몸의 면역체계를 자극하여 알레르기를 일으키는 화학물질을 나오게 하여 아토피를 악화시킨다고 한다.On the other hand, atopy occurs mainly in infancy and is also called febrile fever, and mainly occurs as the content of ceramides in the stratum corneum decreases. As atopic dermatitis is deteriorated in the stratum corneum, the skin dries up, resulting in a large amount of dead skin, and as the skin barrier is deteriorated, irritant substances such as antigenic proteins, which are difficult to invade in normal skin, enter the stratum corneum. The back develops easily and shows severe pruritus. Therefore, more than 90% of atopic patients are infected with Staphylococcus aureus, which may be caused by scratching because the patient cannot tolerate itching, but recent reports suggest that the toxins of this bacterium stimulate the body's immune system and cause allergies. It is said to make atopic dermatitis worse.

알레르기 질환은 1979년 10만명 당 0.9명 였으나 1998년 1.4명으로 약 55.6% 정도 크게 증가하였으며, 그에 따라 질환 완화 및 예방에 대한 중요성이 부각되게 되었다. 기존에 사용되는 치료제로는 크게 스테로이드성 소염제 또는 비스테로이드성 소염제와 항히스타민제 또는 항류코트리엔제로 나눌 수 있으며, 전자는 대부분 강력한 면역럭제 작용을 가지므로 단기간 내에 일시적인 진정 효과를 나타낼 수 있지만 메스꺼움 등의 가벼운 부작용부터 성장 억제나 골다공증 등과 같은 심각한 부작용까지 있어 장기 복용에는 많은 문제가 따른다. 후자는 일시적인 완화 효과를 보일 수는 있으나, 졸림이나 어지러움 등의 부작용이 있어 사용에 제한이 따른다. 따라서, 체내 부작용이 적으며 항알레르기 활성이 높은 천연 추출물에서 유래한 물질의 필요성이 대두되고 있다.Allergic diseases were 0.9 per 100,000 people in 1979, but the number of allergic diseases increased to 1.4 in 1998, about 55.6%. Therefore, the importance of disease alleviation and prevention became more important. Existing therapeutic agents can be divided into steroidal anti-inflammatory drugs or nonsteroidal anti-inflammatory drugs and antihistamines or anti-leukotrienes. The former have a strong immune lubricating agent, so they can have a temporary calming effect in a short period of time, but they can be mild, such as nausea. From side effects to serious side effects such as growth inhibition and osteoporosis, there are many problems with long-term use. The latter may show a temporary relief, but there are side effects such as drowsiness and dizziness, which limits its use. Therefore, there is a need for a substance derived from a natural extract with little side effects and high antiallergic activity.

노니(Morinda citrifolia)는 화산 토양에 뿌리를 깊이 내리고 자라는 나무로, 작은 덤불 모양에서 부터 9m 정도 높이의 나무까지 다양한 모습을 하고 있다. 화산성 토질의 폴리네시아, 남태평양군도, 타이티(Tahiti), 하와이, 말레이시아, 중국 등지에서 알로베라, 켈프, 파파야 파크노제놀과 함께 민간요법의 전통 약제로널리 사용되며, 동의보감에는 해파극(海巴戟) 또는 파극천(巴戟天)으로 알려져 있다.Noni (Morinda citrifolia) is a tree that grows deeply rooted in volcanic soil, ranging from small bushes to trees up to 9 meters high. It is widely used as a traditional medicine for folk remedies, along with aloe vera, kelp and papaya parknogenol in Polynesia, South Pacific Islands, Taiti, Hawaii, Malaysia and China of volcanic soils. Or Pagokcheon (巴戟 天) is known.

노니를 이를 이용한 선행발명의 예를 보면, 노니 초임계 추출물을 함유하는 화장료 조성물(대한민국 특허 10-09555720000), 노니 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부노화 방지용화장료 조성물 (대한민국 특허 10-08442750000), 조직 배양한 노니 배양세포 추출물을 포함하는 화장료 조성물 및 상기 조직 배양한 노니 배양세포 추출물의 제조방법(국내공개공보 10-2010-0102437), 피부 기능 재생 화장료(JO 2005-145945), 피부 또는 모발용 화장료(JP 2004-035454) 등의 선행연구가 이루어졌다. 그러나 항알레르기 목적으로 사용된 것이 아니며, 단순히 노니 추출물을 함유시킨 조성물이라는 한계가 있었다.Examples of the preceding invention using noni, a cosmetic composition containing a noni supercritical extract (Korean Patent 10-09555720000), a skin anti-aging cosmetic composition (No. 10-08442750000), tissue containing Noni extract as an active ingredient Cosmetic composition comprising the cultured noni cultured cell extract and a method for producing the tissue cultured noni cultured cell extract (Korean Patent Publication No. 10-2010-0102437), skin function regenerating cosmetics (JO 2005-145945), skin or hair cosmetics ( JP 2004-035454). However, it was not used for anti-allergic purposes, and there was a limit to simply a composition containing noni extract.

이에, 본 발명자들은 노니에 함유된 루비아딘(Rubiadin)이 항알레르기 효과가 있음을 확인하고, 루비아딘을 함유하는 것을 특징으로 하는 본 발명을 완성하게 되었다.
Accordingly, the present inventors have confirmed that rubidine (Rubiadin) contained in noni has an antiallergic effect, and completed the present invention characterized by containing rubidine.

따라서, 본 발명의 목적은 알레르기 반응시 생성되는 히스타민, β-hexosaminidase 발현억제와 알레르기 반응 시 발생되는 caspase-1 발현을 억제하여 알레르기 증상 완화에 유용한 루비아딘과 이를 이용한 항알레르기 화장료 조성물을 제조하는데 있다. 나아가 항알레르기 화장료 조성물로서 아토피의 악화를 방지하게 하고, 이에 더하여 세라마이드를 구성요소로 더하여 아토피를 개선 효과를 부여함을 목적으로 한다.
Therefore, an object of the present invention is to inhibit the expression of histamine, β-hexosaminidase produced during the allergic reaction, and to suppress caspase-1 expression generated during the allergic reaction, thereby preparing rubidine and anti-allergic cosmetic compositions using the same. . Furthermore, the anti-allergic cosmetic composition is intended to prevent the deterioration of atopy, and in addition to the ceramide as a component to give an atopic improvement effect.

본 발명은 루비아딘(Rubiadin)을 유효성분으로 함유하는 알레르기 예방 및 완화에 효과가 있는 화장료 조성물을 제공한다. The present invention provides a cosmetic composition that is effective in the prevention and alleviation of allergies containing rubidin (Rubiadin) as an active ingredient.

노니는 루비아딘 이외에 제로닌, 프로제로닌, 세로토닌, 담나칸탈, 노르담나칸탈, 안트로키노즈, 카레노이드, 모르딘, 테르펜, 식물성 스테롤,시토스테롤, 알자린, 어솔릭산, 카프로의 산, 클루코피라노즈, 세로토닌 선구, 이소류신, 발린 등 60여 가지의 천연성분을 포함하는데, 본 발명은 그 중 루비아딘(Rubiadin)을 분리하여 이를 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 대한 것이다. In addition to rubidine, noni is composed of geronine, progeronine, serotonin, damnacantal, nordamnacantal, anthrokinose, carrenoid, mordine, terpene, vegetable sterol, cytosterol, azaline, asolic acid, caproic acid, glucopyranose, Serotonin precursor, isoleucine, valine, and includes more than 60 kinds of natural ingredients, the present invention relates to a cosmetic composition comprising a rubidine (Rubiadin) of which is isolated as an active ingredient.

본 발명의 조성물의 유효성분인 루비아딘은 합성되거나 노니(Morinda citrifolia) 부정근에서 분리하여 이용하는데, 노니 추출물에서 분리하는 방법으로 Prep-LC(LC 8A, 시마즈)를 이용하여 노니 부정근의 용매 추출물 중 methylene chloride 층과 hexane층을 분리하고, 이 각층을 고성능액체크로마토그래피(HPLC)를 이용하여 분리하였다. 그리고, 분취된 성분을 UPLC로 분석하여 루비아딘임을 확인하였다. 구체적인 분취 및 분석조건의 내용은 실시예 1에서 나타내는 바와 같다.Rubidine, an active ingredient of the composition of the present invention, is synthesized or separated from noni (Morinda citrifolia) involuntary root. The methylene chloride layer and hexane layer were separated, and each layer was separated by high performance liquid chromatography (HPLC). In addition, the aliquot was analyzed by UPLC to confirm that it was rubidine. The content of specific preparative and analytical conditions is as showing in Example 1.

본 발명에 있어서, 노니추출물은 당업계 공지의 다양한 추출용매 및 추출방법을 이용하여 얻을 수 있다. 이러한 추출용매의 바람직한 예로는 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 1,3-부틸렌글리콜, 부틸 아세테이트 등으로 이루어진 군에서 선택되는 단일 용매 또는 이들중 2종 이상의 혼합용매가 있다.In the present invention, noni extract can be obtained by using a variety of extraction solvents and extraction methods known in the art. Preferred examples of such extraction solvents include water, anhydrous or hydrous lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms (methanol, ethanol, propanol, butanol, etc.), acetone, ethyl acetate, chloroform, 1,3-butylene glycol, butyl acetate, and the like. There is a single solvent selected from the group or a mixed solvent of two or more thereof.

본 발명은 상기 루비아딘을 함유하는 화장료로서 알레르기 예방 및 완화용 화장료 조성물에서, 루비아딘이 0.00001 내지 30 중량%, 특히 바람직하게는 0.0025 내지 0.01 중량% 함유된 것임을 특징으로 하는 것으로 처방예 1 내지 7에서는 유연화장수, 영양화장수, 에센스, 영양크림, 바디크림, 베이비 로션, 베이비 크림을 제조하였다.The present invention is a cosmetic composition for the prevention and alleviation of allergic cosmetics containing the rubidine, characterized in that the rubidine is contained in 0.00001 to 30% by weight, particularly preferably 0.0025 to 0.01% by weight. Essence cosmetics, nourishing cosmetics, essence, nutrition cream, body cream, baby lotion, baby cream was prepared.

본 발명의 알레르기 예방 및 완화는 히스타민방출 억제, β-hexosaminidase 발현억제와 알레르기 반응 시 발생되는 caspase-1 발현을 억제하는 것을 특징으로 한다. 따라서 루비아딘의 항알레르기 효능을 증명하기 위하여 실시예 4에서 루비아딘의 β-hexosaminidase 발현억제 효과와 실시예 5에서는 루비아딘의 caspase-1 발현을 억제 효과를 확인하기 위한 실험을 진행하였다. 상기 분리한 루비아딘을 RBL-2H3 (rat basophilic leukemia)와 HMC-1(hunman mast cell) 세포에 대한 항알레르기 효능평가를 측정하여, 이를 포함한 화장료 조성물을 제공한다.Allergy prevention and alleviation of the present invention is characterized by inhibiting histamine release, inhibiting β-hexosaminidase expression and suppressing caspase-1 expression generated during an allergic reaction. Therefore, in order to prove the anti-allergic effect of rubidine, an experiment was conducted to confirm the inhibitory effect of rubiviadin β-hexosaminidase expression in Example 4 and the inhibitory effect of rubiviadin caspase-1 expression. The isolated rubidine is measured for anti-allergic efficacy evaluation on rat basophilic leukemia (RBL-2H3) and hunman mast cell (HMC-1) cells to provide a cosmetic composition comprising the same.

실시예 2에서 루비아딘의 세포에 대한 독성 실험을 통하여 화장료에 대한 원료로서의 기본적인 적합성을 실험하였는바, 사람 섬유아세포를 배양하여 루비아딘이 2.5㎍/㎖ 이하의 농도에서는 세포에 대한 독성을 나타내지 않음을 확인하여 기본적인 안전성을 확보하였다.In Example 2, the basic suitability of rubiviadin as a raw material for cosmetics was tested through toxicological experiments on cells. When fibroblasts were cultured, rubiviadin did not show toxicity to cells at concentrations of 2.5 µg / ml or less. To ensure basic safety.

루비아딘은 항산화 작용을 가지는 데, 슈퍼옥사이드 디스뮤타제(SOD; Superoxide dismutase)는 초과산화이온이 가지고 있는 자유 라디칼 음이온은 세포에 해로운 영향을 미치기 때문에 SOD는 초과산화이온을 산소와 과산화수소로 바꿔 줌으로써 독성으로부터 세포를 방어하는 역할을 한다. 산소에 노출되는 거의 모든 세포에서 이러한 SOD에 의한 항산화방어기작이 중요하며, 일부 유산균들의 경우 다른 방어기작을 사용하는 것으로 알려져 있다. 실시예 3에서는 마이크로플레이트 계수기를 이용하여 450nm에서 흡광도를 측정을 통하여 루비아딘이 50㎍/㎖에서 SOD와 유사활성을 나타내는 것으로 항산화 효과를 확인하였으며, 나아가 과산화물로서 하이드록젠퍼옥사이드 제거 활성에 대하여 확인하였다.Rubidine has an antioxidant action. SOD converts superoxide ions into oxygen and hydrogen peroxide because superoxide dismutases (SODs) free radical anions that are harmful to cells. It serves to protect cells from toxicity. In almost all cells exposed to oxygen, this SOD antioxidant defense mechanism is important, and some lactic acid bacteria are known to use a different defense mechanism. In Example 3, the anti-oxidant effect was confirmed that rubiviadin exhibited SOD-like activity at 50 µg / ml by measuring the absorbance at 450 nm using a microplate counter, and further confirmed the removal of hydroxyl peroxide as a peroxide. It was.

구체적인 루비아딘의 항알레르기에 대한 효과로서 실시예 4에서 RBL-2H3(Rat basophilic leukemia) 세포에 1mg/㎖ IgE 항체를 첨가하여 배양한 뒤 원심분리 한 상층액을 50㎕ 취하여 배양판에 옮겨 기질을 50㎕씩 넣고 반응시켜 마이크로플에이트 계수기 405nm에서 결과 값을 측정하였는바, 히스타민의 방출지표로 사용되는 β-hexosaminidase의 방출을 측정하였고, 루비아딘은 β-hexosaminidase을 억제 효과를 나타내어 그 항알레르기 효과가 매우 뛰어남을 확인하였다. 구체적인 실험조건 및 결과는 실시예 4와 같다. As an effect on specific anti-allergic effects of rubidine, 1 mg / ml IgE antibody was added to RBL-2H3 (Rat basophilic leukemia) cells in Example 4, followed by culturing, and 50 μl of the supernatant was centrifuged. 50 μl each was reacted to measure the results at 405 nm. The release of β-hexosaminidase, which is used as a release indicator of histamine, was measured. Confirmed very good. Specific experimental conditions and results are the same as in Example 4.

또한, 루비아딘이 caspase-1의 발현을 억제함을 증명하기 위하여 Caspase-1 colormetric assay kit(R&D system)을 이용하여 caspase-1의 발현정도를 측정한 결과 루비아딘은 10㎍/㎖에서 caspase-1 발현을 억제함을 확인하였고, Western blotting 결과 pro-caspase-1의 발현 억제에 매우 높은 효과를 가짐을 확인하였고, 또한 active caspase-1의 발현 억제를 나타냄을 확인하였다. 구체적인 실험조건 및 결과는 실시예 5와 같다. In addition, the expression level of caspase-1 was measured using a Caspase-1 colormetric assay kit (R & D system) to prove that rubiviain inhibited the expression of caspase-1. 1 expression was inhibited, Western blotting was confirmed to have a very high effect on the inhibition of the expression of pro-caspase-1, it was also confirmed that the expression of active caspase-1. Specific experimental conditions and results are the same as in Example 5.

따라서, 본 발명의 항알레르기 효과를 가지는 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 또는 바디클린저의 등의 다양한 제형으로 제조될 수 있다. 본 조성물을 첨가할 수 있는 제품의 예로서 처방예 1 내지 7에서, 유연화장수, 영양화장수, 에센스, 영양크림, 바디크림, 베이비로션, 베이비 크림에 대한 구체적인 조성을 나타내었다.Therefore, the cosmetic composition having the anti-allergic effect of the present invention is a skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisturizing lotion, nutrition lotion, massage cream, nutrition cream, moisturizing cream, hand cream, foundation, essence It can be prepared in various formulations, such as nutritional essences, packs, soaps, cleansing foams, cleansing lotions, cleansing creams, body lotions or body cleansers. In Formulation Examples 1 to 7 as examples of products to which the composition can be added, specific compositions for softening cream, nourishing cream, essence, nourishing cream, body cream, baby lotion, and baby cream are shown.

본 발명의 화장료에는 상기 루비아딘을 유효성분으로 하는 외에 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합할 수 있다.To the cosmetic of the present invention, in addition to using the rubidine as an active ingredient, other ingredients usually formulated in the cosmetic may be blended as necessary.

한편, 본 발명에서 처방예 6 및 7은 루비아딘에 더하여 세라마이드를 구성요소로 포함하는데, 상기 확인한 루비아딘의 항알레르기 효과에 따른 알레르기에 의한 아토피 악화 방지 뿐만 아니라 세라마이드는 피부장벽 유사체로서 피부장벽 복원에 사용되며, 조성물 총중량에 대하여 1.0 내지 3.0 중량 %에서 피부의 각질형성 촉진 효과에 의한 우수한 피부보습효과제공으로 아토피 증상의 개선에 보다 효과적이다.Meanwhile, in the present invention, Formulations 6 and 7 include ceramide as a component in addition to rubidine, and not only prevent atopic deterioration due to allergy due to the anti-allergic effect of the rubidine, ceramide is a skin barrier analog and restores the skin barrier. It is used in, it is more effective in improving atopic symptoms by providing excellent skin moisturizing effect by promoting the exfoliation effect of the skin at 1.0 to 3.0% by weight relative to the total weight of the composition.

본 발명에서 1,3 부틸렌글리콜을 더 포함하는 유연화제수, 에센스, 영야크림, 바디크림에 있어서, 1,3 부틸렌글리콜은 다가알코올의 고분자 보습제의 일종으로서 비교적 자극이 덜하며, 끈적임이 적은데, 이는 항미생물 효과를 가지고 있다. 글리세롤, 솔리톨, 프포릴렌 글리콜과 비교했을때 1,3 부틸렌글리콜이 가장 효과적인 항미생물 물질이다.
In the present invention, in the softening agent water, essence, night cream, and body cream further comprising 1,3 butylene glycol, 1,3 butylene glycol is a kind of polymer moisturizer of polyhydric alcohol, which is relatively less irritating and less sticky. , It has an antimicrobial effect. 1,3 butylene glycol is the most effective antimicrobial when compared to glycerol, solitol, and propylene glycol.

루비아딘은 히스타민 생성 관련 효소인 β-hexosaminidase와 히스타민 유리 억제 및 caspase-1의 발현을 억제하여 항알레르기 효과를 가지며, 나아가 항산화 및 과산화물로서 하이드록젠퍼옥사이드 제거에 효과가 있다. 따라서 이를 포함한 화장료 조성물은 알레르기의 예방 및 완화 등에 효과를 가질 수 있다. 나아가 이에 세라마이드를 더한 경우 보습효과를 통한 아토피 증상 개선에 효과가 있다.
Rubidine has an antiallergic effect by inhibiting the expression of β-hexosaminidase, histamine production enzymes and histamine release and caspase-1, and furthermore, it is effective in removing hydroxide peroxide as an antioxidant and peroxide. Therefore, the cosmetic composition including the same may have an effect on prevention and alleviation of allergies. Furthermore, the addition of ceramide is effective in improving atopic symptoms through the moisturizing effect.

도 1은 루비아딘의 구조식을 나타낸 것이다.
도 2는 실시예 5에서 caspase-1 발현측정의 실험결과를 나타낸 것이다.
도 3은 실시예 5에서 Western blotting에 있어서 X-ray film으로 현상한 결과를 나타낸 것이다.
1 shows the structural formula of rubidine.
Figure 2 shows the experimental results of caspase-1 expression measurement in Example 5.
Figure 3 shows the result of developing with an X-ray film in Western blotting in Example 5.

실시예Example 1.  One. 노니로부터From Noni 루비아딘의Rubidine 분리 detach

노니 부정근의 용매 추출물 중 항알레르기 효과를 보이는 methylene chloride 층과 hexane 층을 Prep-LC(LC 8A, Shimadzu)로 분리하였다. 용매 분획물 10mg을 10ml의 methanol에 용해 후 0.2um syringe filter로 여과하여 5ml를 주입하였다. Prep-LC 분취 조건은 column은 ODS C18(300 x 250mm, Shimadzu), 이동상은 농축을 고려하여 100% methanol로 하였다. 유속은 15ml/min으로 하였다. 그리고, hexane 층과 methylene chlorine 층의 HPLC로 분리하였으며, 분리 조건은 아래의 표 1과 같다.
The methylene chloride layer and hexane layer, which showed antiallergic effect, were separated by Prep-LC (LC 8A, Shimadzu). 10 mg of the solvent fraction was dissolved in 10 ml of methanol and filtered through a 0.2um syringe filter to inject 5 ml. Prep-LC preparative conditions were ODS C18 (300 x 250mm, Shimadzu) column and 100% methanol considering mobile phase concentration. The flow rate was 15 ml / min. The hexane and methylene chlorine layers were separated by HPLC, and the separation conditions are shown in Table 1 below.

ParameterParameter ConditionCondition HPLCHPLC ProminanceProminance 20A( 20 A ( ShimadzuShimadzu ,, JapanJapan )) MobileMobile phasephase MeOHMeOH :  : waterwater = 70 : 30 = 70: 30 ColumnColumn ODSODS C18(4.6 x 250 C18 (4.6 x 250 mmmm )) WavelengthWavelength 280280 nmnm InjectionInjection volvol .. 2020 ulul OvenOven temptemp .. 30℃30 ℃ FlowFlow raterate 1One mlml /Of minmin

HPLCHPLC conditioncondition forfor analysisanalysis ofof fractionfraction ..

HPLC로 분취된 성분은 UPLC(20A, Shimadzu)로 분석하였다. 분석조건은 70% methanol, column은 VP-ODS(3 x 75mm, Shimadzu), 유속은 0.1ml/min, 분석파장은 280nm로 하였다. 분취된 FRH2, FRM3를 GC/MS/MS(320MS, Varian)로 분자량 및 fragment를 확인하였다. GC/MS/MS 분석조건은 DB5(30m x 0.25mm id x 0.25um) 컬럼을 사용했다. 주입구 온도는 230℃, 유속은 1ml/min, column oven 온도는 80℃에서 2min간 유지 후, 10℃/min 씩 250℃까지 승온 후, 10 분간 유지하였다. EI-MS는 transfer line 온도는 210℃, source 온도는 180℃, 70eV에서 분석하였다. Components preparated by HPLC were analyzed by UPLC (20A, Shimadzu). Analytical conditions were 70% methanol, column VP-ODS (3 x 75mm, Shimadzu), flow rate 0.1ml / min, analysis wavelength was 280nm. The molecular weight and fragments of the fractionated FRH2, FRM3 were identified by GC / MS / MS (320MS, Varian). GC / MS / MS analysis conditions were performed using a DB5 (30m x 0.25mm id x 0.25um) column. The temperature of the inlet was 230 ° C., the flow rate was 1 ml / min, and the column oven temperature was maintained at 80 ° C. for 2 min. The EI-MS was analyzed at transfer line temperature of 210 ℃, source temperature of 180 ℃ and 70eV.

피크가 가장 큰 FRH2, FRM3를 HPLC, GC/MS/MS, IT-TOF, UV/VIS의 분석결과 rubiadin임을 확인하였다. Rubiadin의 구조는 도 1과 같다. FRH2 and FRM3 having the largest peaks were identified as rubiadin by HPLC, GC / MS / MS, IT-TOF, and UV / VIS analysis. The structure of Rubiadin is shown in FIG.

실험에 필요한 루비아딘은 Chromadex (미국) 제품을 사용하였다.
The rubiadine required for the experiment used Chromadex (USA).

실시예Example 2. 세포독성실험 2. Cytotoxicity Test

2-1. 실험 방법2-1. Experiment method

본 발명에 따른 루비아딘에 대한 세포독성을 알아보기 위하여, 사람 섬유아세포 (Human fibroblast cell)을 5x104 cells/ml 농도로 하여 96well plate에 200㎕ 씩 분주하여 37℃, CO2 인큐베이터에서 1일 동안 배양하였다. 이때 배지는 소혈청 10%와 항생제 1%가 포함된 IMDM(lscove's Modified Eagle Medium, Gibco)를 이용하였다. 배양 한 후 소혈청과 항생제가 배제된 IMDM 배지로 교체한 후, 시료를 농도 별로 첨가한 후, 같은 배양조건에서 45시간 배양하였다. 배양이 끝난 후 5㎎/㎖ MTT(Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide) 시약을 첨가하여 동일 조건에서 3시간 배양한다. 그 후 배양액을 제거하고 DMSO(Dimetyl sulfoxide)을 150㎕씩 넣은 후 10분 동안 쉐이킹 한 다음 마이크로플레이트계수기(Micro plate reader) 570nm 에서 결과값을 측정하였으며, 그 값은 아래의 표 2와 같다.
In order to examine the cytotoxicity against rubidine according to the present invention, human fibroblast cells were injected at a concentration of 5x10 4 cells / ml in a 200 well aliquot in a 96well plate at 37 ° C. in a CO 2 incubator for 1 day. Incubated. At this time, the medium was used as IMDM (lscove's Modified Eagle Medium, Gibco) containing 10% bovine serum and 1% antibiotics. After incubation was replaced with IMDM medium without bovine serum and antibiotics, samples were added by concentration, and then incubated for 45 hours under the same culture conditions. After incubation, 5 mg / mL MTT (Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide) reagent is added and incubated for 3 hours under the same conditions. Thereafter, the culture medium was removed, and 150 μl of DMSO (Dimetyl sulfoxide) was added thereto, followed by shaking for 10 minutes. The results were measured at 570 nm of a micro plate reader, and the values are shown in Table 2 below.

2-2. 실험 결과
2-2. Experiment result

RubiadinRubiadin 시료 (㎍/㎖)Sample (µg / mL) 대조군Control group 0.10.1 0.50.5 1One 2.52.5 55 세포 증식율 (%)Cell proliferation (%) 100100 118118 99.699.6 108.4108.4 89.589.5 78.778.7

상기 표 1에서와 같이 루비아딘 0.1㎍/㎖과 1㎍/㎖에서는 오히려 세포 증실율이 증가하였으며, 루비아딘은 2.5㎍/㎖ 이하의 농도에서 독성을 나타내지 않음을 확인하였다.
As shown in Table 1, the cell deposition rate was increased at 0.1 μg / ml and 1 μg / ml of rubidine, and it was confirmed that rubivia did not show toxicity at a concentration of 2.5 μg / ml or less.

실시예Example 3.  3. 루비아딘의Rubidine 항산화 효과 Antioxidative effect

3-1. 슈퍼옥사이드 디스뮤타제(SOD; Superoxide dismutase) 유사활성 측정
3-1. Superoxide dismutase (SOD) -like activity measurement

3-1-1. 실험 방법 3-1-1. Experiment method

SOD 유사활성은 측정은 각 추출물 당 100ppm의 농도별 시료용액 20㎕에 슈퍼옥사이드 디스뮤타제 분석 키트(SOD assay kit-WST) 내 더블류에스티 작업용액(WST working solution) 200㎕을 넣어 교반 한 후, 다시 효소작업용액(Enzyme working solution) 20㎕를 넣어 혼합한 후, 37℃ 인큐베이터에서 20분간 반응시키고, 마이크로플레이트 계수기를 이용하여 450nm에서 흡광도를 측정하였다.실험 대조구로는 슈퍼옥사이드 디스뮤타제(Superoxide dismutase, 1,000units)을 사용하였으며, 슈퍼옥사이드 디스뮤타제 유사활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다.
SOD-like activity was measured by adding 20 μl of 100 ppm of sample solution to each extract and adding 200 μl of WST working solution in a superoxide dismutase kit (SST assay kit-WST). Then, 20 µl of the enzyme working solution was added and mixed, and then reacted in an incubator at 37 ° C. for 20 minutes, and the absorbance was measured at 450 nm using a microplate counter. Superoxide dismutase (1,000 units) was used, and the superoxide dismutase-like activity was expressed as the absorbance decrease rate of the sample solution added and non-added.

3-1-2. 실험 결과3-1-2. Experiment result

시료(㎍/㎖)Sample (µg / mL) 5050 2525 1010 RubiadinRubiadin 29.1%29.1% 5.4%5.4% 0.8%0.8%

상기 표 3에서와 같이 루비아딘은 50 ㎍/㎖ 이상의 농도에서 슈퍼옥사이드 디스큐타제 유사 활성을 나타냄을 확인하였다.
As shown in Table 3 above, it was confirmed that rubiviadin exhibited superoxide decutase-like activity at a concentration of 50 μg / ml or more.

3-2. 하이드로젠 퍼록사이드 제거 효과3-2. Hydrogen Peroxide Removal Effect

3-2-1. 실험 방법3-2-1. Experiment method

하이드로젠 퍼록사이드 제거 효과 실험은 96well 플레이트에 각 농도별 루비아딘 20㎕, 10mM 하이드로젠 퍼록사이드 20㎕, 0.1M 포스페이트 버퍼(pH 5) 100㎕ 넣고 37℃에서 5분 반응시킨 후 1.25mM ABTS와 1U/㎖ 퍼록시데이즈 30㎕를 넣고 37℃에서 10분 반응시킨 후 405nm 에서 흡광도를 측정하였다.
Hydrogen peroxide removal effect experiment was performed by adding 20 μl of rubidine, 10 mM hydrogen peroxide 20 μl, 0.1 M phosphate buffer (pH 5) in 96well plate and reacting for 5 minutes at 37 ° C., followed by 1.25 mM ABTS. 30 μl of 1 U / ml peroxidase was added and reacted at 37 ° C. for 10 minutes, and the absorbance was measured at 405 nm.

3-2-2. 실험 결과3-2-2. Experiment result

시료(㎍/㎖)Sample (µg / mL) 5050 2525 1010 RubiadinRubiadin 50.3%50.3% 31.4%31.4% 14.5%14.5%

상기 표 4에서와 같이 루비아딘은 50 ㎍/㎖ 이상의 농도에서 하이드로젠 퍼록사이드 제거 활성을 나타냄을 확인하였다.
As shown in Table 4, rubivia was confirmed to exhibit hydrogen peroxide removal activity at a concentration of 50 ㎍ / ㎖ or more.

3-3. 하이드록실 라디칼 제거 효과3-3. Hydroxyl radical removal effect

3-3-1. 실험 방법3-3-1. Experiment method

하이드록실 라디칼 제거 효과 실험은 96well 플레이트에 각 농도별 루비아딘 200㎕, 10mM 황산제일철 200㎕, 10mM 이디티에이 200㎕, 10mM 데옥시리보즈 200㎕, 0.1M 포스페이트 버퍼(pH 7.4) 1200㎕, 10mM 과산화수소 200㎕를 넣고 37℃에서 4시간 반응시킨 후 2.8% TCA, 1% TBA을 각각 1ml 넣고 10분간 끓여준다. 원심분리하여 532nm에서 흡광도를 측정하였다.
Hydroxyl radical scavenging effect experiment was carried out in 200well of rubidine, 10mM ferrous sulfate 200l, 10mM identiate 200l, 10mM deoxyribose 200l, 0.1M phosphate buffer (pH 7.4) 1200l, 10mM in 96well plate Add 200 μl hydrogen peroxide and react for 4 hours at 37 ° C., add 1 ml of 2.8% TCA and 1% TBA, and boil for 10 minutes. The absorbance was measured at 532 nm by centrifugation.

3-3-2. 실험 결과3-3-2. Experiment result

시료(㎍/㎖)Sample (µg / mL) 5050 2525 1010 RubiadinRubiadin 41.5%41.5% 20.0%20.0% 6.8%6.8%

상기 표 5에서와 같이 루비아딘은 50 ㎍/㎖ 이상의 농도에서 하이드록실 라디칼 제거 활성을 나타냄을 확인하였다.
As shown in Table 5, it was confirmed that rubidine shows hydroxyl radical scavenging activity at a concentration of 50 µg / ml or more.

실시예Example 4.  4. 루비아딘의Rubidine β- β- hexosaminidasehexosaminidase 억제 효과 Inhibitory effect

4-1. 실험방법4-1. Experiment method

RBL-2H3 (Rat basophilic leukemia) 세포를 10% 소혈청과 1% 항생제가 포함된 MEM(Modified eagle medium, Sigma) 배지를 사용하여 세포수가 5x105 cells/ml 이 되게 계수한 후, 1㎎/㎖ IgE 항체를 첨가하여 24웰 배양판에 분주한 후 37℃, CO2 인큐베이터에서 24시간 배양한다. 배양 후 배양액을 제거하고 피비에스 용액 1ml으로 2회 세척한 후, 릴리징 버퍼 260㎕와 시료를 농도 별로 넣은 후 동일 조건에서 10분 배양한다. 여기에 비에스에이를 넣고 동일조건에서 1시간 배양한다. 배양이 끝나면 200㎕씩 취하여 300알피엠, 5분간 원심 한 후, 상층액을 50㎕씩 취하여 96웰 배양판으로 옮긴 다음 기질을 50㎕씩 넣고 동일 조건에서 30분 반응시킨 다음 100mM 카보네이트 버퍼 150㎕ 넣고 5분간 쉐이킹하여 마이크로 플레이트 계수기 405㎚에서 결과 값을 측정하였다.
RBL-2H3 (Rat basophilic leukemia) cells were counted to 5x10 5 cells / ml using Modified eagle medium (MEM) medium containing 10% bovine serum and 1% antibiotics. IgE antibody is added and aliquoted into a 24-well culture plate, followed by incubation for 24 hours in a 37C, CO 2 incubator. After incubation, the culture medium was removed and washed twice with 1 ml of PBS solution. After 260 µl of the releasing buffer and the sample were added to each concentration, the culture solution was incubated for 10 minutes under the same conditions. Add BC to this and incubate for 1 hour under the same conditions. After incubation, take 200µl each, centrifuge at 300LP, for 5 minutes, take 50µl of the supernatant, transfer to 96-well culture plate, add 50µl of substrate and react for 30 minutes under the same conditions, then add 150µl of 100mM carbonate buffer. Shake for 5 minutes and measure the result on a microplate counter 405 nm.

4-2. 실험결과4-2. Experiment result

농도 (㎍/㎖)Concentration (μg / ml) 루비아딘 (%)Rubidine (%) 대조군Control group 66.966.9 12.512.5 64.164.1 2525 84.084.0 5050 76.876.8

표 6과 같이 루비아딘의 β-hexosaminidase 방출 억제효과가 매우 뛰어남을 알 수 있었다. 이는 본 발명의 유효성분인 루비아딘이 비만세포의 탈과립 현상을 억제하여 알러지 유발을 저해할 수 있음을 나타내는 것으로 항알레르기 효과가 매우 뛰어난 것으로 확인된다. As shown in Table 6, it was found that the rubidine has an excellent inhibitory effect on β-hexosaminidase release. This indicates that rubiviadin, which is an active ingredient of the present invention, may inhibit degranulation of mast cells and inhibit allergy induction.

(대조군은 케토티펜 푸마레이트(ketotifen fumarate)를 사용하였다. 케토티펜 푸마레이트는 항히스타민제로 사용된다.)
(The control group used ketotifen fumarate. Ketotifen fumarate is used as an antihistamine.)

실시예Example 5.  5. 루비아딘의Rubidine caspasecaspase -1 억제 효과-1 inhibitory effect

5-1-1. Caspase-1 colormetric assay5-1-1. Caspase-1 colormetric assay

HMC-1(Human mast cell) 세포를 10% 소혈청과 1% 항생제가 포함된 IMDM(lscove's Modified Eagle Medium, Gibco) 배지를 사용하여 세포수가 6x106 cells/ml 이 되게 계수한 후, 배양판에 분주한 후 37℃, CO2 인큐베이터에서 10분 안정화하였다. 배양 후 루비아딘을 처리하고 동일 조건에서 1시간 배양한다. 자극제를 처리하고 2시간 동일 조건에서 배양한 후 라이시스 버퍼를 사용하여 세포에서 단백질을 분리한다. Caspase-1 colormetric assay kit (R&D system)을 사용하여 caspase-1 발현 정도를 측정한다.Human mast cell (HMC-1) cells were counted to 6x10 6 cells / ml using lscove's Modified Eagle Medium (IMDM) medium containing 10% bovine serum and 1% antibiotics. 37 ℃, CO 2 after dispensing It was stabilized for 10 minutes in the incubator. After the incubation treatment with rubidine and incubated for 1 hour under the same conditions. After treatment with the stimulant and incubated at the same conditions for 2 hours, the protein is separated from the cells using Lysis buffer. Caspase-1 expression was measured using a Caspase-1 colormetric assay kit (R & D system).

5-1-2. 실험 결과5-1-2. Experiment result

도 2에서 보는 봐야 같이 루비아딘은 10 ㎍/㎖ 농도에서 caspase-1 발현을 억제함을 확인하였다.
As shown in FIG. 2, rubivia inhibited caspase-1 expression at a concentration of 10 μg / ml.

5-2-1. Western blotting5-2-1. Western blotting

5-1-1에서 분리한 단백질을 가지고 실험하였다. 12% SDS-PAGE 를 이용해 전기영동하고, PVDF membrane으로 이전시켰다. 5% skim milk가 함유된 tris 완충용액에서 1시간 bloking 과정을 거친 후, caspase-1과 β-actin 항체를 각각 반응시켰다. Horseraldehyde peroxidase (HRP)가 결합된 항체를 가하고, enhanced chemiliminescent (ECL, amersham, UK) kit를 사용하여 1~3분 동안 반응시킨 후 X-ray film으로 현상하였다.
Experiments were performed with the protein isolated from 5-1-1. Electrophoresis using 12% SDS-PAGE and transfer to PVDF membrane. After 1 hour bloking in tris buffer containing 5% skim milk, caspase-1 and β-actin antibodies were reacted. Horseraldehyde peroxidase (HRP) conjugated antibody was added and reacted for 1 to 3 minutes using an enhanced chemiliminescent (ECL, amersham, UK) kit and developed with X-ray film.

5-2-2. 결과5-2-2. result

도 3에서 보는 봐야 같이 루비아딘은 10 ㎍/㎖ 농도에서 pro-caspase-1과 active caspase-1의 발현을 억제함을 확인하였고, 특히 pro-caspase-1의 발현 억제에 높은 효과를 나타내었다.
As shown in Figure 3, rubidine was confirmed to inhibit the expression of pro-caspase-1 and active caspase-1 at a concentration of 10 ㎍ / ㎖, in particular showed a high effect on the inhibition of pro-caspase-1 expression.

6. 6. 처방예Prescription Example

본 발명의 루비아딘을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 제제의 예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.An example of a cosmetic composition formulation containing rubidine of the present invention as an active ingredient will be described, but the present invention is not intended to be limited thereto but only to be described in detail.

처방예Prescription Example 6-1 6-1

루비아딘을 함유한 화장료 중 유연화장수의 처방 예 표 7과 다음과 같다.Prescription Examples of Soft Cosmetics in Cosmetics Containing Rubidine Table 7 is as follows.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 루비아딘Rubidine 0.0010.001 폴리옥시에칠렌경화피마자유Polyoxyethylene Cured Castor Oil 0.50.5 글리신Glycine 3.03.0 디포타슘글리시리제이트Dipotassium glycylizate 0.10.1 1,3-부틸렌 글리콜1,3-butylene glycol 3.03.0 소듐히아루로네이트Sodium hyaluronate 0.10.1 에탄올ethanol 5.05.0 항산화제Antioxidant 0.10.1 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 EDTAEDTA 0.10.1 방부제antiseptic 적량Quantity 정제수Purified water 잔량Balance

처방예Prescription Example 6-2 6-2

루비아딘을 함유한 화장료 중 영양화장수의 처방예는 표 8과 같다.Table 8 shows a prescription example of nutritional longevity in cosmetics containing rubidine.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 루비아딘Rubidine 0.0010.001 글리세린glycerin 7.07.0 소르비탄스테아레이트 슈크로오즈코코에이트Sorbitan stearate sucrose cocoate 2.02.0 미네랄 오일Mineral oil 4.04.0 트리옥타노인Trioctanoine 1.01.0 스테아릭에씨드Stearic acid 1.01.0 글리세릴 스테아레이트Glyceryl stearate 0.50.5 소르비탄모노스테아레이트Sorbitan monostearate 1.01.0 디메치콘Dimethicone 0.50.5 항산화제Antioxidant 0.30.3 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 카보머Carbomer 0.20.2 EDTAEDTA 0.10.1 방부제antiseptic 적량Quantity 정제수Purified water 잔량Balance

처방예Prescription Example 6-3 6-3

루비아딘을 함유한 화장료 중 에센스의 처방 예는 표 9와 같다.Formulation examples of the essence in the cosmetic containing rubidine is shown in Table 9.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 루비아딘Rubidine 0.0010.001 글리세린glycerin 5.05.0 1,3-부틸렌 글리콜1,3-butylene glycol 2.02.0 폴리에칠렌 글리콜Polyethylene glycol 2.02.0 카보머Carbomer 1.01.0 소듐히아루로네이트Sodium hyaluronate 0.10.1 글리신Glycine 3.03.0 폴리아크릴아마이드Polyacrylamide 2.02.0 히드록시에칠셀룰로이즈Hydroxyethyl Cellulose 0.20.2 에탄올ethanol 3.03.0 항산화제Antioxidant 0.30.3 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 폴리옥시에칠렌경화피마자유Polyoxyethylene Cured Castor Oil 1.01.0 EDTAEDTA 0.10.1 방부제antiseptic 적량Quantity 정제수Purified water 잔량Balance

처방예Prescription Example 6-4 6-4

루비아딘을 함유한 화장료 중 영양크림의 처방 예는 표 10과 같다.Table 10 shows an example of the prescription of nutrition cream in the cosmetic containing rubidine.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 루비아딘Rubidine 0.0010.001 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 3.03.0 글리세린glycerin 3.03.0 하이드로제네이티드 레시친Hydrogenated Lecithin 1.01.0 옥틸도데카놀Octyldodecanol 3.03.0 트리옥타노인Trioctanoine 2.02.0 스테아릭에씨드Stearic acid 1.51.5 세토스테아릴알콜Cetostearyl alcohol 2.02.0 폴리솔베이트60Polysorbate 60 1.51.5 소르비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 2.02.0 디메치콘Dimethicone 3.03.0 항산화제Antioxidant 0.30.3 산탄검Xanthan Gum 0.20.2 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 EDTAEDTA 0.10.1 방부제antiseptic 적량Quantity 정제수Purified water 잔량Balance

처방예Prescription Example 6-5 6-5

루비아딘을 함유한 화장료 중 바디크림의 처방 예는 표 11과 같다.Table 11 shows an example of the prescription of body cream among the cosmetics containing rubidine.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 루비아딘Rubidine 0.0010.001 글리세린glycerin 7.07.0 1,3-부틸렌 글리콜1,3-butylene glycol 3.03.0 스쿠알렌Squalene 3.03.0 디메치콘Dimethicone 3.03.0 소듐히아루로네이트Sodium hyaluronate 0.10.1 글리신Glycine 2.02.0 폴리아크릴아마이드Polyacrylamide 5.05.0 항산화제Antioxidant 0.30.3 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 EDTAEDTA 0.10.1 방부제antiseptic 적량Quantity 정제수Purified water 잔량Balance

처방예Prescription Example 6-6 6-6

루비아딘을 함유한 화장료 중 베이비 로션의 처방 예는 표 12와 같다.Formulation examples of the baby lotion among the cosmetics containing rubidine are shown in Table 12.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 루비아딘Rubidine 0.0010.001 글리세린glycerin 5.05.0 판테놀Panthenol 4.04.0 세라마이드Ceramide 0.10.1 피토스팅고신Phytosing 0.10.1 세테아릴알코올Cetearyl Alcohol 0.50.5 인지질Phospholipids 1.01.0 스테아릭산Stearic acid 0.50.5 동백유Camellia oil 7.07.0 쉐어버터Shea Butter 1.01.0 소듐콜리아크릴레이트(5% 분산액)Sodium Copolyacrylate (5% dispersion) 10.010.0 복합 방부제Compound preservative 0.50.5 정제수Purified water 잔량Balance

처방예Prescription Example 6-7 6-7

루비아딘을 함유한 화장료 중 베이비 크림의 처방 예는 표 13과 같다.Formulation examples of the baby cream in the cosmetic containing rubidine are shown in Table 13.

성분ingredient 함량(중량%)Content (% by weight) 루비아딘Rubidine 0.0010.001 글리세린glycerin 5.05.0 판테놀Panthenol 4.04.0 세라마이드Ceramide 0.50.5 피토스팅고신Phytosing 0.50.5 세테아릴알코올Cetearyl Alcohol 1.01.0 인지질Phospholipids 3.03.0 스테아릭산Stearic acid 1.51.5 동백유Camellia oil 16.016.0 쉐어버터Shea Butter 2.02.0 소듐콜리아크릴레이트(5% 분산액)Sodium Copolyacrylate (5% dispersion) 15.015.0 복합 방부제Compound preservative 0.50.5 정제수Purified water 잔량Balance

Claims (10)

루비아딘(Rubiadin)이 유효성분으로 조성물 총중량에 대하여 0.00001 내지 30 중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는 알레르기 예방 및 완화를 위한 화장료 조성물.
Rubiadin (Rubiadin) as an active ingredient cosmetic composition for allergy prevention and alleviation, characterized in that it comprises 0.00001 to 30% by weight relative to the total weight of the composition.
제 1항에 있어서,
상기 루비아딘은 노니 부정근으로부터 분리된 것을 특징으로 하는 알레르기 예방 및 완화용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The rubidine is a cosmetic composition for allergy prevention and alleviation, characterized in that it is isolated from noni root muscle.
제 1항에 있어서,
상기 루비아딘(Rubiadin)은 화장료 조성물 총 중량에 대해 0.0025 내지 0.01 중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는 알레르기 예방 및 완화를 위한 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The rubiadine (Rubiadin) is a cosmetic composition for allergy prevention and alleviation, characterized in that it comprises 0.0025 to 0.01% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition.
제 1항 또는 제 3항에 있어서,
상기 화장료는 루비아딘 이외에 주요성분으로서,
디포타슘글리시리제이트 0.01 내지 1.0 중량%;
1,3-부틸렌 글리콜 0.3 내지 10.0 중량%;
소듐히아루로네이트 0.01 내지 1.0 중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 알레르기 예방 및 완화를 위한 유연화장수 조성물.
The method according to claim 1 or 3,
The cosmetic is a main ingredient in addition to rubidine,
0.01-1.0 wt% dipotassium glycylizate;
0.3-10.0 wt% of 1,3-butylene glycol;
Softening longevity composition for allergy prevention and alleviation, characterized in that it comprises 0.01 to 1.0% by weight sodium hyaluronate.
제 1항 또는 제 3항에 있어서,
상기 화장료는 루비아딘 이외에 주요성분으로서,
소르비탄스테아레이트 슈크로오즈코코에이트 0.2 내지 8.0 중량%;
트리옥타노인 0.01 내지 5.0 중량%;
스테아릭에씨드 0.01 내지 5.0 중량%;
소르비탄모노스테아레이트 0.1 내지 5.0 중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 알레르기 예방 및 완화를 위한 영양화장수 조성물.
The method according to claim 1 or 3,
The cosmetic is a main ingredient in addition to rubidine,
Sorbitan stearate sucrose cocoate 0.2-8.0 wt%;
0.01 to 5.0 weight percent of trioctanoine;
0.01 to 5.0 wt% stearic acid;
Nutritional longevity composition for allergy prevention and alleviation, comprising sorbitan monostearate 0.1 to 5.0% by weight.
제 1항 또는 제 3항에 있어서,
상기 화장료는 루비아딘 이외에 주요성분으로서,
1,3-부틸렌 글리콜 0.2 내지 10.0 중량%;
폴리에틸렌글리콜 0.2 내지 10.0 중량%;
카보머 0.1 내지 5.0 중량%;를 포함하는 것을 특징으로 하는 알레르기 예방 및 완화를 위한 에센스 조성물.
The method according to claim 1 or 3,
The cosmetic is a main ingredient in addition to rubidine,
0.2-10.0 wt% of 1,3-butylene glycol;
0.2-10.0 weight percent polyethylene glycol;
Carbomer 0.1 to 5.0% by weight; Essence composition for allergy prevention and alleviation, comprising a.
제 1항 또는 제 3항에 있어서,
상기 화장료는 루비아딘 이외에 주요성분으로서,
1,3-부틸렌 글리콜 0.3 내지 15.0 중량%;
하이드로제네이티드 레시친 0.1 내지 4.0 중량%;
트리옥타노인 0.2 내지 8.0 중량%;
스테아릭에씨드 0.1 내지 7.0 중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 알레르기 예방 및 완화를 위한 영양크림 조성물.
The method according to claim 1 or 3,
The cosmetic is a main ingredient in addition to rubidine,
0.3-15.0 wt.% 1,3-butylene glycol;
0.1 to 4.0 wt% hydrogenated lecithin;
0.2-8.0 wt% trioctanoin;
Nutritional cream composition for allergy prevention and alleviation, comprising 0.1 to 7.0% by weight of stearic acid.
제 1항 또는 제 3항에 있어서,
상기 화장료는 루비아딘 이외에 주요성분으로서,
1,3-부틸렌 글리콜 0.3 내지 15.0 중량%;
소듐히아루로네이트 0.01 내지 1.0 중량%;
폴리아크릴아마이드 0.05 내지 20.0 중량%;를 포함하는 것을 특징으로 하는 알레르기 예방 및 완화를 위한 바디크림 조성물.
The method according to claim 1 or 3,
The cosmetic is a main ingredient in addition to rubidine,
0.3-15.0 wt.% 1,3-butylene glycol;
0.01-1.0 wt% sodium hyaluronate;
Polyacrylamide 0.05 to 20.0% by weight; Body cream composition for allergy prevention and alleviation comprising a.
제 1항 또는 제 3항에 있어서,
상기 화장료는 루비아딘 이외에 주요성분으로서,
세라마이드 0.01 내지 5.0 중량%;
피토스팅고신 0.01 내지 5.0 중량%;
인지질 0.1 내지 4.0 중량%;
스테아릭산 0.05 내지 2.5 중량%;를 포함하는 것을 특징으로 하는 알레르기 예방 및 완화를 위한 베이비 로션 또는 베이비 크림 조성물.
The method according to claim 1 or 3,
The cosmetic is a main ingredient in addition to rubidine,
0.01 to 5.0 weight percent of ceramide;
0.01 to 5.0 weight percent of phytostingosine;
Phospholipids from 0.1 to 4.0 weight percent;
Stearic acid 0.05 to 2.5% by weight; Baby lotion or baby cream composition for allergy prevention and alleviation comprising a.
(a) 건조된 노니 부정근에 대하여 물 또는 알코올, 아세톤, 클로로포름 및 1,3-부틸렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 사용하여 하여 노니 추출물을 제조하는 단계;
(b) 노니 부정근 용매 추출물 중 methylene chloride 층과 hexane 층을 Prep-LC로 분리하는 단계;
(c) 상기 (b)단계에 의해 분리된 hexane 층과 methylene chlorine 층을 HPLC로 각각 분리하는 단계;
(d) 상기 (c)단계에서 HPLC로 분취된 성분을 UPLC로 분석하여 루비아딘을 확인하는 단계;를
포함하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 노니 부정근 용매 추출물로부터 루비아딘을 분리하는 방법.
(a) preparing a Noni extract with respect to the dried Noni root root using water or a solvent selected from the group consisting of alcohol, acetone, chloroform and 1,3-butylene glycol;
(b) separating the methylene chloride layer and the hexane layer from the Noni root extract with Prep-LC;
(c) separating the hexane layer and the methylene chlorine layer separated by step (b) by HPLC respectively;
(d) analyzing the components separated by HPLC in step (c) by UPLC to identify rubidine;
A method for separating rubidine from noni abscess solvent extract, characterized in that it comprises a.
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