KR20110089580A - Cosmetic compositions containing fermented extract of hippophae rhamnoides l - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: A cosmetic composition containing Hippophae rhamnoides fermentation extract is provided to improve skin healing and to ensure moisturizing, whitening, and antiaging. CONSTITUTION: A method for preparing Hippophae rhamnoides fermentation extract comprises: a step of directly fermenting branches, fruits, and leaves of Hippophae rhamnoides and isolating or isolating and fermenting. The Hippophae rhamnoides is fermented using yeast, nuruk, Bacillus subtilis, or Lactobacillus or fermented naturally. A cosmetic composition for moisturizing, whitening, and antiaging contains 0.1-80.0 weight% of the extract. The cosmetic composition is selected from lotion, nutrition cream, massage cream, and nutrition essence.

Description

비타민나무 발효 추출물을 함유하는 화장료 조성물{Cosmetic compositions containing fermented extract of Hippophae rhamnoides L}Cosmetic composition containing fermented extract of vitamin tree {Cosmetic compositions containing fermented extract of Hippophae rhamnoides L}

본 발명은 비타민나무의 가지, 잎, 열매를 효모균(Saccharomyces cerevisiae), 누룩균(Aspergillus oryzae), 고초균(Bacillus subtilis) 및 유산균(Lactobacillus bulgaricus) 을 접종하여 발효 숙성한 발효추출물을 함유하는 우수한 피부의 치유 개선 효과, 보습, 미백 및 항노화 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention heals the excellent skin containing the fermented extract fermented and fermented by inoculating the branches, leaves and berries of the vitamin tree with Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus oryzae, Bacillus subtilis and Lactobacillus bulgaricus. The present invention relates to a cosmetic composition having an improving effect, a moisturizing, whitening and anti-aging effect.

피부의 노화는 피부의 주름이 증가하고, 이완되며, 광택, 윤기, 매끄러움이 저하되며, 탄력이 저하된다. 그리고 살결이 거칠어지고, 주름이 흐트러지며 색소침착반이 증가하고, 부분적인 탈색소반이 생기며, 황색을 띠게 된다. 이러한 노화도 자연노화와 광노화로 나눌 수 있는데, 자외선이 원인이 되어 일어나는 피부변화를 광노화라 부르며, 태양 빛에 거의 노출되지 않는 부위에 나타나는 나이에 따른 변화를 자연노화라 부른다.Aging of the skin increases skin wrinkles, relaxes, reduces gloss, gloss, and smoothness, and reduces elasticity. The texture becomes rough, wrinkles are disturbed, pigmentation spots increase, partial depigmentation spots occur, and yellowish color occurs. Such aging can be divided into natural aging and photo aging. The skin change caused by ultraviolet rays is called photo aging, and the change according to age appearing in the area that is hardly exposed to sunlight is called natural aging.

이렇게 자외선의 유무로 피부의 노화속도는 달라질 수 있지만, 결과적으로 사람의 피부는 노화될 수밖에 없음을 시사한다. 이렇듯 인간의 피부는 주름 증가와 탄력감소, 피부건조, 색소 침착 등의 여러 형태로 노화가 진행되며 어느 하나 만의 조절로 피부노화를 막을 수는 없는 것이다.Although the rate of aging of the skin may be changed by the presence or absence of ultraviolet rays, the result suggests that human skin has no choice but to age. As such, aging of human skin progresses in various forms such as wrinkles, decreased elasticity, skin drying, and pigmentation, and it is impossible to prevent skin aging by controlling only one.

이에 본 발명에서는 피부노화의 전반적인 억제를 위해 다양한 효능을 지닌 화장료를 제공하고자하는 것이다.Therefore, the present invention is to provide a cosmetic having a variety of efficacy for the overall suppression of skin aging.

피부는 자외선에 노출되어 있어 활성 산소종을 만드는 광화학적 반응들이 계속해서 일어나고 있다. 이들 활성 산소종들은 피부에 염증이 생길 경우 피부 세포 및 조직 손상을 주도하기도 한다. 이들은 항산화 효소와 비효소적 항산화제들로 구성된 항산화 방어망을 파괴함으로써 산화제/항산화제 균형을 산화 상태로 기울게 한다. 피부에는 이러한 외인성 인자로부터 방어하기 위한 수단으로서 vitamin E, vitamin C, ubiquinol과 glutathione과 같은 항산화제와 수퍼옥시드 디스무타아제(superoxide dismutase: SOD), 글루타치온 퍼옥시다아제(glutathioneperoxidase : GPx), 카탈라아제(catalase: CAT)와 같은 항산화효소가 존재한다. 하지만 UV와 같은 외인성 인자의 지속적인 노출은 피부의 방어시스템인 항산화제의 감소와 항산화효소의 파괴를 초래하고 결과적으로 산화적 스트레스가 일어나 세포 성분들을 손상시키고 광노화를 촉진시키게 된다 (Sies, H. (1986) Biochemistry of oxidative stress . Angew. Chem. 25, 1058-1071., Sies, H. (1991) Oxidative stress : Oxidants and antioxidant s . Academic Press, N . Y.). The skin is exposed to ultraviolet light, which continues to produce photochemical reactions that produce free radicals. These reactive oxygen species also lead to skin cell and tissue damage when the skin becomes inflamed. They break the antioxidant defenses, which consist of antioxidant and non-enzymatic antioxidants, bringing the oxidant / antioxidant balance into the oxidized state. In skin, as a means to defend against these exogenous factors, antioxidants such as vitamin E, vitamin C, ubiquinol and glutathione, superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx), and catalase (catalase) Antioxidants such as CAT. However, continuous exposure of exogenous factors such as UV results in the reduction of antioxidants and the destruction of antioxidant enzymes, which are the skin's defense system, resulting in oxidative stress, damaging cellular components and promoting photoaging (Sies, H. ( 1986) Biochemistry of oxidative stress. Angew. Chem. 25, 1058-1071., Sies, H. (1991) Oxidative stress: Oxidants and antioxidant s. Academic Press, N. Y.).

또한 세포나 조직이 어떠한 원인에 의해 손상을 받으면, 그 반응을 최소화하고 손상된 부위를 원상으로 회복시키려하며 그 결과 염증이 발생하게 된다. 이러한 염증을 소실시키기 위해 염증원의 제거, 생체반응 및 증상을 감소시키는 작용을 하는 것을 항염제라고 한다. 현재까지 항염의 목적으로 이용되고 있는 물질로는 비스테로이드계로 프루폐나믹산(flufenamic acid), 이부프로펜(ibuprofen), 벤지다민(benzydamine), 인도메타신(indomethacin)등이 있고 스테로이드계통으로 프레드니솔론(prednisolone), 덱사메타손(dexamethasone)등이 있으며(김창종, 병태생리학, 한림상사, p61-69, 1988) 알란토인, 아즈렌,ε-아미노키프론산, 하이드로코티존(ⅴ), 감초산 및 그 유도체(β-글리칠레친산, 글리칠레친산유도체)등이 항염증에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.(광정무부, 신화장품학, 남산당, p162, 1993) If cells or tissues are damaged by any cause, they try to minimize the response and restore the damaged area to its original state, resulting in inflammation. Anti-inflammatory drugs are called anti-inflammatory agents that work to reduce inflammation, reduce biologic reactions and symptoms. Materials used for anti-inflammatory purposes so far include nonsteroidal flufenamic acid, ibuprofen, benzydamine, and indomethacin, and prednisolone as a steroid system. , Dexamethasone (dexamethasone) (Kim Chang-jong, Pathophysiology, Hallym Co., p61-69, 1988), allantoin, azulene, ε-aminokiproic acid, hydrocortisone, licoriceic acid and its derivatives (β-glychile) Hydrophilic acid, glycylinic acid derivatives, etc. are known to be effective in anti-inflammatory (Ministry of Gwang-jeong, Ministry of New Cosmetics, Namsan Dang, p162, 1993)

또한 외적 내적 요인에 의해 발생된 복합적 피부 노화 과정에서 생긴 물질은 멜라닌과 주름을 생성시키는 원인물질로 여겨진다. 피부내 탄력을 유지시켜주는 고분자 기질들 (콜라겐, 히아루론산, 엘라스틴)등에 활성산소를 노출함으로써 이들 기질들이 순차적으로 절단됨이 밝혀졌다 . 한편 피부에서의 색소 침착은 멜라닌 생성 혹은 멜라노사이트의 증식에 의해 야기되며 이러한 색소 침착은 다양한 방법으로 억제가 가능하다. 일반적으로 이용되는 방법으로는 멜라닌합성의 중요한 효소인 티로시나제(Tyrosinase) 활성억제, 멜라노사이트의 기능감소, 자동산화 반응의 억제를 통한 멜라닌 생성의 감소, 홍반과 같은 염증반응 억제등 다양한 경로를 이용할 수 있다.In addition, the substances produced during the complex skin aging process caused by external and internal factors are considered to be the cause of melanin and wrinkles. It has been found that these substrates are sequentially cleaved by exposing free radicals to polymeric substrates (collagen, hyaluronic acid, elastin) that maintain elasticity in the skin. On the other hand, pigmentation in the skin is caused by melanogenesis or proliferation of melanocytes, which can be suppressed in various ways. Commonly used methods include various pathways such as inhibition of tyrosinase activity, an important enzyme of melanin synthesis, decreased function of melanocytes, reduction of melanin through inhibition of automatic oxidation, and inhibition of inflammatory reactions such as erythema. have.

이러한 외적 요인에 의한 피부조직의 파괴는 건조한 피부에서 좀 더 가속화되며 이러한 이유로 피부에서 수분함량은 유연하고 건강한 피부의 표면을 유지하기 위해 매우 중요하다. 각질층의 수분함량은 각질층의 유연성과 보호기능과 밀접한 관련이 있는데, 진피에서 각질층으로 도달하는 물의 비율, 증발에 의해 배출되는 물의 비율 및 각질층의 물 보유능력에 의해 좌우된다. 또한 규칙적인 각질화로 생성된 각질층안의 수분의 양은 항상 10~20%를 유지한다. 이것은 땀과 피지의 혼합으로 되어 있는 피지막 때문으로, 외부로부터 피부를 보호하고, 각질층에서 수분이 증발되는 것을 막고 있다. 그러나 피부가 노화되면 피부의 탄력에 중요한 역할을 하고 있는 매트릭스(matrix)안의 콜라겐 (collagen), 뮤코폴리사카라이드(mucopolysaccharide), 히아루론산(hyaluronic acid)의 양이 줄어들고 불용성 콜라겐의 양이 증가한다. 이렇게 되면 진피는 피부의 수분을 유지하기 어렵게 되고 피부는 거칠게 된다. 더 나아가 노화sa더불어 피지샘과 땀샘의 기능도 감소하여 피지sa땀의 양이 점차로 줄어들게 된다. 이로 인해 피지막은 적당히 생성되지 못하고 피부 수화에 대한 보호능을 잃게 되어 결국에는 피부는 건조하게 된다.(Esko Alanen, Jouni Nuutinen, Kirsi Nickle´n, Tapani Lahtinen and Jukka Mo¨nkko¨nen , Measurement of hydration in the stratum corneum with the MoistureMeter and comparison with the Corneometer, Skin Research and Technology, 10: pp32-37, (2004)) The destruction of skin tissues caused by these external factors is more accelerated in dry skin, and for this reason, the moisture content in the skin is very important for maintaining the surface of the flexible and healthy skin. The moisture content of the stratum corneum is closely related to the flexibility and protection of the stratum corneum, depending on the proportion of water reaching the stratum corneum, the rate of water released by evaporation, and the capacity of the stratum corneum to retain water. In addition, the amount of moisture in the stratum corneum produced by regular keratinization is always maintained at 10-20%. This is due to the sebum film, which is a mixture of sweat and sebum, which protects the skin from the outside and prevents water from evaporating from the stratum corneum. However, as the skin ages, the amount of collagen, mucopolysaccharide and hyaluronic acid in the matrix, which play an important role in skin elasticity, decreases and the amount of insoluble collagen increases. This makes it difficult for the dermis to keep the skin hydrated and the skin rough. Furthermore, aging sa decreases the function of sebaceous glands and sweat glands, and the amount of sebaceous sa sweat is gradually reduced. This causes the sebaceous membrane to not form properly and loses protection against skin hydration, resulting in dry skin (Esko Alanen, Jouni Nuutinen, Kirsi Nickle´n, Tapani Lahtinen and Jukka Mo¨nkko¨nen, Measurement of hydration). in the stratum corneum with the MoistureMeter and comparison with the Corneometer, Skin Research and Technology, 10: pp 32-37, (2004))

이러한 일련의 반응들이 다양한 메카니즘으로 진행되며, 이들의 종합적인 결과가 결국은 피부노화를 가져오는 것이라고 보아도 무방할 것이다. This series of reactions proceeds through various mechanisms, and their overall results may eventually lead to skin aging.

본 발명에서는 이러한 종합적인 반응과정의 다양한 부분을 억제 및 증진시키고자 하였다. In the present invention, it is intended to suppress and enhance various parts of the overall reaction process.

본 발명에서 사용한 비타민 나무(Hippophae rhamnoides L)는 보리수과에 속하는 아교목성 식물로 동아시아와 유럽이 원산지로 강가나 바닷가 둔덕에서 잘 자라고 꽃이 없이 노란색에서 주홍색에 이르는 달걀 모양의 열매가 열리는 나무이다. 주요성분으로는 열매에는 많은 비타민을 함유하고 있는데, 그 중에서도 특히 비타민 A, C, E 및 P의 함량은 다른 과일이나 채소에 비하여 월등히 많다. (조선대백과사전,백과사전 출판사,1999,200~201)Vitamin tree (Hippophae rhamnoides L) used in the present invention is a tree belonging to the barley family, which is native to East Asia and Europe, grows well in river banks and beach mounds, and has an egg-shaped fruit that opens from yellow to scarlet without flowers. The main component of the fruit contains a lot of vitamins, especially vitamin A, C, E and P content is much higher than other fruits and vegetables. (Korean Encyclopedia, Encyclopedia Press, 1999, 200 ~ 201)

본 발명의 목적은 비타민 나무열매, 가지, 혹은 잎을 효모균(Saccharomyces cerevisiae), 누룩균(Aspergillus oryzae), 고초균(Bacillus subtilis) 또는 유산균(Lactobacillus bulgaricus) 을 접종시켜 발효시키거나, 자연발효시켜 단순하게 추출하여 얻어진 추출물보다, 보습효과, 항염효과, 항산화 효과, 미백 및 항노화 효능이 월등히 우수하고 안정성 및 안전성에 문제가 없는 물질을 천연물로부터 추출하여 제공하는 것이다. It is an object of the present invention to inoculate fermented with yeast (Saccharomyces cerevisiae), yeast (Aspergillus oryzae), Bacillus subtilis or Lactobacillus bulgaricus (vitamin) fruit, or simply fermented by natural fermentation. Compared with the extract obtained by, the moisturizing effect, anti-inflammatory effect, antioxidant effect, whitening and anti-aging effect is excellent and the stability and safety of the material is provided to extract from the natural product.

본 발명의 다른 목적은 이러한 효능을 갖는 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a cosmetic composition comprising an extract having such efficacy.

비타민나무(Hippophae rhamnoides L) 열매, 잎 또는 가지 일정량에 대하여 정제수 1~20배량을 넣고 80~120℃에서 0.5~6시간 가온한다. 가온 후 온도를 15~35℃ 로 냉각한 후 효모균(Saccharomyces cerevisiae), 누룩균(Aspergillus oryzae), 고초균(Bacillus subtilis) 또는 유산균(Lactobacillus bulgaricus) 을 접종시켜 단독 발효시키거나, 쌀, 좁쌀, 찹쌀, 현미, 보리 등의 발효액과 혼합하여 일정기간 (1~10일이상) 발효시키거나 또는 4~30℃에서 자연 발효시킨 후, 추출 용매로서 물, 에탄올, 글리세린, 부틸렌그리콜 및 프로필렌글리콜로 구성된 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 용매를 1-20배 부피량을 가한다. 추출 방법으로는 냉각 콘덴서가 장치되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 50-95℃, 4-20시간 가열하여 추출하거나, 5~37℃에서 1~15일간 침적시켜 유효성분을 추출한다.Vitamin Tree (Hippophae rhamnoides L) 1 ~ 20 times the amount of purified water to a certain amount of fruit, leaves or branches and warmed at 80 ~ 120 ℃ 0.5-6 hours. After warming, the temperature is cooled to 15 ~ 35 ℃, and then fermented alone by inoculation with Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus oryzae, Bacillus subtilis or Lactobacillus bulgaricus, or rice, millet, glutinous rice, brown rice. After fermentation for a certain period of time (1-10 days or more) by mixing with fermentation broth such as barley or natural fermentation at 4-30 ° C., the extraction solvent is selected from the group consisting of water, ethanol, glycerin, butylene glycol and propylene glycol. Add 1-20 fold volume of one or more selected solvents. As the extraction method, a cooling condenser is installed and extracted by heating at 50-95 ° C. for 4-20 hours while preventing the solvent from evaporating, or by extracting the active ingredient at 5 to 37 ° C. for 1 to 15 days.

본 발명의 발효추출물을 얻는 또 다른 추출방법은 비타민 나무열매, 잎, 또는 가지 일정량에 대하여 에탄올 혹은 정제수 또는 두 용매의 혼합액을 1~20배 부피량 넣고 냉각 콘덴서가 장치되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 50-95℃, 4-20시간 가열하여 추출하거나, 5~37℃에서 1~15일간 침적시켜 성분을 추출하여 감압 농축하여 얻은 1차 추출물 일정량에 대하여 다시 정제수 1~20배량을 넣고 80~120℃에서 0.5~6시간 가온한다. 가온 후 온도를 15~35℃ 로 냉각한 후 효모균(Saccharomyces cerevisiae), 누룩균(Aspergillus oryzae), 고초균(Bacillus subtilis) 또는 유산균(Lactobacillus bulgaricus) 을 접종시키켜 단독 발효하거나, 쌀, 좁쌀, 찹쌀, 현미, 보리등의 발효액과 혼합하여 일정기간(1~10일이상) 발효시킨 후, 추출 용매로서 물, 에탄올, 글리세린, 부틸렌글리콜 및 프로필렌글리콜로 구성된 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 용매를 1-20배 부피량을 가한다. 추출 방법으로는 냉각 콘덴서가 장치되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 50-95℃, 4-20시간 가열하여 추출하거나, 5~37℃에서 1~15일간 침적시켜 유효성분을 추출하는 방법을 사용할 수 있다.Another extraction method for obtaining a fermentation extract of the present invention is to add 1 to 20 times the volume of ethanol or purified water or a mixture of the two solvents to a certain amount of vitamin tree fruit, leaf, or eggplant to prevent the evaporation of the solvent is equipped with a cooling condenser In one state, extract by heating at 50-95 ° C. for 4-20 hours, or by dipping at 1∼15 days at 5 ~ 37 ° C., extracting the components, and adding 1 ~ 20 times the amount of purified water to a certain amount of the primary extract obtained by concentrating under reduced pressure. Warm 0.5 to 6 hours at 80 to 120 ° C. After warming, the temperature is cooled to 15 ~ 35 ℃, and then fermented alone by inoculation with Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus oryzae, Bacillus subtilis, or Lactobacillus bulgaricus, or fermented with rice, millet, glutinous rice, and brown rice. After fermentation for a certain period of time (1-10 days or more) by mixing with fermentation broth such as barley, 1-20 times the volume of one or more solvents selected from the group consisting of water, ethanol, glycerin, butylene glycol and propylene glycol as extraction solvents. Add quantity. Extraction method is a method of extracting by heating at 50-95 ℃ for 4-20 hours in the state of preventing the evaporation of the solvent is equipped with a cooling condenser, or by extracting the active ingredient by deposition for 1-15 days at 5 ~ 37 ℃. Can be used.

본 발명의 비타민나무 발효물을 제조하기 위한 효모로는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스 사케이(Saccharomyces sakei) 등을 사용할 수 있으며, 가장 바람직하게는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)가 적합하다. 유산균으로, 락토바실러스 브레비스 (Lactobacillus brevis), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus) 등을 사용할 수 있으며, 가장 바람직하게는 락토바실러스 브레비스 (Lactobacillus bulgaricus)가 적합하다.
Saccharomyces cerevisiae (Saccharomyces cerevisiae), Saccharomyces sakei (Saccharomyces sakei) and the like may be used as yeast for preparing the vitamin tree fermentation product of the present invention, most preferably Saccharomyces Saccharomyces cerevisiae is suitable. As lactic acid bacteria, Lactobacillus brevis, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophyllus, etc. And most preferably Lactobacillus bulgaricus.

이렇게 추출된 추출액을 조성물 전체중량의 0.01~80중량%, 바람직하게는 0.1 내지 80.0 중량% 범위로 혼합하여 화장료 조성물에 첨가하는 것이다. Thus extracted extract is added to the cosmetic composition by mixing in a range of 0.01 to 80% by weight, preferably 0.1 to 80.0% by weight of the total weight of the composition.

본 발명은 비타민나무를 효모균(Saccharomyces cerevisiae), 누룩균(Aspergillus oryzae), 고초균(Bacillus subtilis) 또는 유산균(Lactobacillus bulgaricus) 을 접종하여 발효시키거나, 자연발효시켜 숙성하여 얻은 추출물을 유효성분으로 사용함으로써 우수한 피부의 치유 개선 효과, 보습, 미백 및 항노화 효과를 갖는 안전한 화장료 조성물를 제공한다.The present invention is excellent by using the extract obtained by inoculating the fermented vitamin tree (Saccharomyces cerevisiae), Nuruk (Aspergillus oryzae), Bacillus subtilis or Lactobacillus bulgaricus or fermented by natural fermentation as an active ingredient. It provides a safe cosmetic composition having an effect of improving the healing of the skin, moisturizing, whitening and anti-aging.

아래의 실시예 및 실험예는 본 발명의 내용을 설명하나, 본 발명의 내용이 여기에 한정되지는 않는다.The following Examples and Experimental Examples illustrate the content of the present invention, but the content of the present invention is not limited thereto.

실시예 1. Example 1.

비타민 나무 열매 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 100 ℃ 에서 3시간동안 가온한 후 25℃ 냉각한 후 효모균(Saccharomyces cerevisiae)을 접종하여 25℃에서 10일 배양한다. 배양 후 에탄올을 6kg 을 가하여 2시간 교반한 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하여 추출액 7.2kg(고형분 0.25%)을 얻었다.200g of vitamin fruit is put in a container containing 2kg of purified water, warmed at 100 ° C for 3 hours, cooled to 25 ° C, inoculated with yeast (Saccharomyces cerevisiae) and incubated at 25 ° C for 10 days. After incubation, 6 kg of ethanol was added thereto, stirred for 2 hours, and then filtered through a filter paper (Watman No. 5) to obtain 7.2 kg of an extract (0.25% solids).

실시예 2. Example 2.

실시예 1과 같은 방법으로 비타민나무 가지를 처리하여 추출액 7.1kg(고형분 0.34%)을 얻었다.By treating the vitamin tree branches in the same manner as in Example 1 to obtain 7.1kg (0.34% solids) of the extract.

실시예 3. Example 3.

실시예 1과 같은 방법으로 비타민나무 잎을 처리하여 추출액 7.1kg(고형분 0.3%)을 얻었다.By treating the leaves of vitamin trees in the same manner as in Example 1 to obtain 7.1kg (0.3% solids) of the extract.

실시예 4. Example 4.

비타민 나무 열매 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 100 ℃ 에서 3시간동안 가온한 후 25℃ 냉각한 후 누룩균(Aspergillus oryzae)을 접종하여 25℃에서 10일 배양한다. 배양 후 에탄올을 6kg 을 가하여 2시간 교반한 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하여 추출액 7.2kg(고형분 0.24%)을 얻었다200g of vitamin fruit is put in a container containing 2kg of purified water, warmed at 100 ° C for 3 hours, cooled to 25 ° C, inoculated with Nuruk (Aspergillus oryzae) and incubated at 25 ° C for 10 days. After incubation, 6 kg of ethanol was added thereto, stirred for 2 hours, and filtered through a filter paper (Watman No. 5) to obtain 7.2 kg of an extract (0.24% solids).

실시예 5. Example 5.

실시예 4과 같은 방법으로 비타민나무 가지를 처리하여 추출액 7.1kg(고형분 0.29%)을 얻었다.In the same manner as in Example 4, the vitamin tree was treated to obtain 7.1 kg of extract (0.29% solids).

실시예 6. Example 6.

실시예 4과 같은 방법으로 비타민나무 잎을 처리하여 추출액 7.1kg(고형분 0.31%)을 얻었다.By treating the leaves of vitamin trees in the same manner as in Example 4 to obtain 7.1kg (0.31% solids) of the extract.

실시예 7. Example 7.

비타민 나무 열매 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 100 ℃ 에서 3시간동안 가온한 후 25℃ 냉각한 후 효모균(Saccharomyces cerevisiae)을 접종하여 25℃에서 10일 배양한다. 배양 후 프로필렌 글리콜을 2kg 을 가하여 2시간 교반한 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하여 추출액 3.5kg(고형분 0.51%)을 얻었다.200g of vitamin fruit is put in a container containing 2kg of purified water, warmed at 100 ° C for 3 hours, cooled to 25 ° C, inoculated with yeast (Saccharomyces cerevisiae) and incubated at 25 ° C for 10 days. After incubation, 2 kg of propylene glycol was added, the mixture was stirred for 2 hours, and then filtered through a filter paper (Watman No. 5) to obtain 3.5 kg (0.51% of solid content) of the extract.

실시예 8. Example 8.

비타민 나무 열매 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 100 ℃ 에서 3시간동안 가온한 후 25℃ 냉각한 후 효모균(Saccharomyces cerevisiae)을 접종하여 25℃에서 10일 배양한다. 배양 후 정제수을 2kg 을 가하여 2시간 교반한 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하고 60℃ 농축하여 추출물 17.4g 을 얻었다. 200g of vitamin fruit is put in a container containing 2kg of purified water, warmed at 100 ° C for 3 hours, cooled to 25 ° C, inoculated with yeast (Saccharomyces cerevisiae) and incubated at 25 ° C for 10 days. After incubation, 2 kg of purified water was added thereto, stirred for 2 hours, filtered through a filter paper (Watman No. 5), and concentrated to 60 ° C to obtain an extract 17.4 g.

실시예 9. Example 9.

비타민 나무 열매 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 100 ℃ 에서 3시간동안 가온한 후 25℃ 냉각한 후 효모균(Saccharomyces cerevisiae)을 접종하여 25℃에서 10일 배양한다. 배양 후 에탄올을 2kg 을 가하여 2시간 교반한 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하고 60℃ 농축하여 추출물 15.4g 을 얻었다. 200g of vitamin fruit is put in a container containing 2kg of purified water, warmed at 100 ° C for 3 hours, cooled to 25 ° C, inoculated with yeast (Saccharomyces cerevisiae) and incubated at 25 ° C for 10 days. After incubation, 2 kg of ethanol was added thereto, stirred for 2 hours, filtered through a filter paper (Watman No. 5), and concentrated to 60 ° C to obtain an extract 15.4 g.

실시예 10. Example 10.

비타민 나무 열매 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 100 ℃ 에서 3시간동안 가온한 후 30℃ 냉각한 후 효모균(Saccharomyces cerevisiae)을 접종하여 30℃에서 2일 배양한다. 배양 후 에탄올을 2kg 을 가하여 2시간 교반한 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하고 60℃ 농축하여 추출물 19.0g 을 얻었다. 200g of vitamin fruit is put in a container containing 2kg of purified water, warmed at 100 ° C for 3 hours, cooled to 30 ° C, inoculated with yeast (Saccharomyces cerevisiae) and incubated at 30 ° C for 2 days. After incubation, 2 kg of ethanol was added thereto, stirred for 2 hours, filtered through a filter paper (Watman No. 5), and concentrated at 60 ° C. to obtain 19.0 g of an extract.

실시예 11. Example 11.

비타민 나무 열매 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 100 ℃ 에서 3시간동안 가온한 후 25℃ 냉각한 후 누룩균(Aspergillus oryzae)을 접종하여 25℃에서 10일 배양한다. 배양 후 에탄올을 2kg 을 가하여 2시간 교반한 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하고 60℃ 농축하여 추출물 18.8g 을 얻었다. 200g of vitamin fruit is put in a container containing 2kg of purified water, warmed at 100 ° C for 3 hours, cooled to 25 ° C, inoculated with Nuruk (Aspergillus oryzae) and incubated at 25 ° C for 10 days. After incubation, 2 kg of ethanol was added thereto, stirred for 2 hours, filtered through a filter paper (Watman No. 5), and concentrated to 60 ° C to obtain an extract 18.8 g.

실시예 12. Example 12.

비타민 나무 열매 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 100 ℃ 에서 3시간동안 가온한 후 30℃ 냉각한 후 납두균(Bacillus subtilis)을 접종하여 30℃에서 2일 배양한다. 배양 후 에탄올을 2kg 을 가하여 2시간 교반한 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하고 60℃ 농축하여 추출물 18.5g 을 얻었다. 200g of vitamin fruit is put in a container containing 2kg of purified water, warmed at 100 ° C for 3 hours, cooled to 30 ° C, inoculated with Bacillus subtilis and incubated at 30 ° C for 2 days. After incubation, 2 kg of ethanol was added thereto, stirred for 2 hours, filtered through a filter paper (Watman No. 5), and concentrated at 60 ° C to obtain 18.5 g of an extract.

실시예 13. Example 13.

비타민 나무 열매 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 100 ℃ 에서 3시간동안 가온한 후 30℃ 냉각한 후 유산균(Lactobacillus bulgaricus)을 접종하여 2일 배양한다. 배양 후 에탄올을 2kg 을 가하여 2시간 교반한 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하고 60℃ 농축하여 추출물 16.6g 을 얻었다. 200g of vitamin fruit is put in a container containing 2kg of purified water, warmed at 100 ° C for 3 hours, cooled to 30 ° C, and inoculated with lactic acid bacteria (Lactobacillus bulgaricus) for 2 days. After incubation, 2 kg of ethanol was added thereto, stirred for 2 hours, filtered through a filter paper (Watman No. 5), and concentrated at 60 ° C to obtain an extract 16.6 g.

실시예 14. Example 14.

비타민나무열매 200g을 70% 에탄올 2kg 에 넣고 냉각 콘덴서가 장치되어 있는 60℃의 수욕조에서 5시간 가열 추출한 후 250메쉬 여과포로 여과하여 60℃ 농축하여 추출물 56.3g 을 얻었다. 이러한 방법으로 얻어진 추출물 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 121 ℃ 에서 20분 동안 가온한 후 25℃ 냉각한 후 효모균(Saccharomyces cerevisiae)을 접종하여 25℃에서 2일 배양한다. 배양 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하여 60℃에서 감압농축하여 추출물 212.8g 을 얻었다. 200 g of vitamin C fruit was put in 2 kg of 70% ethanol, and extracted by heating in a 60 ° C. water bath equipped with a cooling condenser for 5 hours, filtered through a 250 mesh filter cloth, and concentrated at 60 ° C. to obtain an extract 56.3 g. 200 g of the extract obtained in this way is placed in a container containing 2 kg of purified water, warmed at 121 ° C. for 20 minutes, cooled to 25 ° C., and then inoculated with yeast (Saccharomyces cerevisiae) and incubated at 25 ° C. for 2 days. After incubation, the resultant was filtered with filter paper (Watman No. 5), and concentrated under reduced pressure at 60 ° C to obtain 212.8 g of extract.

실시예 15. Example 15.

비타민나무열매 200g을 70% 에탄올 2kg 에 넣고 냉각 콘덴서가 장치되어 있는 60℃의 수욕조에서 5시간 가열 추출한 후 250메쉬 여과포로 여과하여 60℃ 농축하여 추출물 56.3g 을 얻었다. 이러한 방법으로 얻어진 추출물 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 121 ℃ 에서 20분 동안 가온한 후 30℃ 냉각한 후 효모균(Saccharomyces cerevisiae)을 접종하여 30℃에서 2일 배양한다. 배양 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하여 60℃에서 감압 농축하여 추출물 208.2g 을 얻었다. 200 g of vitamin C fruit was put in 2 kg of 70% ethanol, and extracted by heating in a 60 ° C. water bath equipped with a cooling condenser for 5 hours, filtered through a 250 mesh filter cloth, and concentrated at 60 ° C. to obtain an extract 56.3 g. 200 g of the extract obtained in this manner is placed in a container containing 2 kg of purified water, warmed at 121 ° C. for 20 minutes, cooled to 30 ° C., and then inoculated with yeast (Saccharomyces cerevisiae) and incubated at 30 ° C. for 2 days. After incubation, the mixture was filtered through a filter paper (Watman No. 5), and concentrated under reduced pressure at 60 ° C to obtain 208.2 g of an extract.

실시예 16. Example 16.

비타민나무열매 200g을 70% 에탄올 2kg 에 넣고 냉각 콘덴서가 장치되어 있는 60℃의 수욕조에서 5시간 가열 추출한 후 250메쉬 여과포로 여과하여 60℃ 농축하여 추출물 56.3g 을 얻었다. 이러한 방법으로 얻어진 추출물 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 121 ℃ 에서 20분 동안 가온한 후 25℃ 냉각한 후 누룩균(Aspergillus oryzae)을 접종하여 25℃에서 2일 배양한다. 배양 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하여 60℃에서 감압 농축하여 추출물 196.4g 을 얻었다. 200 g of vitamin C fruit was put in 2 kg of 70% ethanol, and extracted by heating in a 60 ° C. water bath equipped with a cooling condenser for 5 hours, filtered through a 250 mesh filter cloth, and concentrated at 60 ° C. to obtain an extract 56.3 g. 200 g of the extract obtained in this way is placed in a container containing 2 kg of purified water, warmed at 121 ° C. for 20 minutes, cooled to 25 ° C., and then inoculated with Nuruk (Aspergillus oryzae) and incubated at 25 ° C. for 2 days. After incubation, the mixture was filtered through a filter paper (Watman No. 5), and concentrated under reduced pressure at 60 ° C to obtain 196.4 g of an extract.

실시예 17. Example 17.

비타민나무열매 200g을 70% 에탄올 2kg 에 넣고 냉각 콘덴서가 장치되어 있는 60℃의 수욕조에서 5시간 가열 추출한 후 250메쉬 여과포로 여과하여 60℃ 농축하여 추출물 56.3g 을 얻었다. 이러한 방법으로 얻어진 추출물 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 121 ℃ 에서 20분 동안 가온한 후 30℃ 냉각한 후 납두균(Bacillus subtilis)을 접종하여 25℃에서 2일 배양한다. 배양 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하여 60℃에서 감압 농축하여 추출물 199.5g 을 얻었다. 200 g of vitamin C fruit was put in 2 kg of 70% ethanol, and extracted by heating in a 60 ° C. water bath equipped with a cooling condenser for 5 hours, filtered through a 250 mesh filter cloth, and concentrated at 60 ° C. to obtain an extract 56.3 g. 200 g of the extract obtained in this way is placed in a container containing 2 kg of purified water, warmed at 121 ° C. for 20 minutes, cooled to 30 ° C., inoculated with Bacillus subtilis, and incubated at 25 ° C. for 2 days. After incubation, the mixture was filtered through a filter paper (Watman No. 5), and concentrated under reduced pressure at 60 ° C to obtain 199.5 g of an extract.

실시예 18. Example 18.

비타민나무열매 200g을 70% 에탄올 2kg 에 넣고 냉각 콘덴서가 장치되어 있는 60℃의 수욕조에서 5시간 가열 추출한 후 250메쉬 여과포로 여과하여 60℃ 농축하여 추출물 56.3g 을 얻었다. 이러한 방법으로 얻어진 추출물 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 121 ℃ 에서 20분 동안 가온한 후 30℃ 냉각한 후 유산균(Lactobacillus bulgaricus)을 접종하여 25℃에서 2일 배양한다. 배양 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하여 60℃에서 감압 농축하여 추출물 214.6g 을 얻었다. 200 g of vitamin C fruit was put in 2 kg of 70% ethanol, and extracted by heating in a 60 ° C. water bath equipped with a cooling condenser for 5 hours, filtered through a 250 mesh filter cloth, and concentrated at 60 ° C. to obtain an extract 56.3 g. 200 g of the extract obtained in this way is placed in a container containing 2 kg of purified water, warmed at 121 ° C. for 20 minutes, cooled to 30 ° C., and then inoculated with lactic acid bacteria (Lactobacillus bulgaricus) and incubated at 25 ° C. for 2 days. After incubation, the mixture was filtered through a filter paper (Watman No. 5), and concentrated under reduced pressure at 60 ° C to obtain 214.6 g of an extract.

실시예 19. Example 19.

비타민 나무 열매 200g을 멸균된 병 500ml에 넣고 공기가 잘 통하는 천으로 막아 15℃ 에서 60일간 자연 발효 시키고, 발효 후 에탄올을 2kg 을 가하여 2시간 교반한 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하고 60℃ 농축하여 추출물 13.4g 을 얻었다. Put 200g of vitamin fruit into 500ml sterilized bottle and cover with air-ventilated cloth and fermented naturally at 15 ℃ for 60 days.After fermentation, add 2kg of ethanol for 2 hours, filter it with filter paper (Watman No. 5). 60 degreeC was concentrated and the extract 13.4g was obtained.

비교 실시예 1. Comparative Example 1.

비타민 나무 열매 200g을 정제수 2kg 이 들어있는 용기에서 넣고 100 ℃ 에서 3시간동안 가온한 후 25℃ 냉각하고 에탄올을 2kg 을 가하여 2시간 교반한 후 여과지(와트만 No. 5)로 여과하고 60℃ 농축하여 추출물 15.2g 을 얻었다. 200g of the vitamin fruit was put in a container containing 2kg of purified water, warmed at 100 ° C for 3 hours, cooled to 25 ° C, stirred for 2 hours with 2kg of ethanol, filtered with a filter paper (Watman No. 5), and concentrated at 60 ° C. Thus, the extract 15.2g was obtained.

비교 실시예 2. Comparative Example 2.

비타민나무열매 200g을 70% 에탄올 2kg 에 넣고 냉각 콘덴서가 장치되어 있는 60℃의 수욕조에서 5시간 가열 추출한 후 250메쉬 여과포로 여과하여 60℃ 농축하여 추출물 56.3g 을 얻었다. 200 g of vitamin C fruit was put in 2 kg of 70% ethanol, and extracted by heating in a 60 ° C. water bath equipped with a cooling condenser for 5 hours, filtered through a 250 mesh filter cloth, and concentrated at 60 ° C. to obtain an extract 56.3 g.

실험예 1. 비타민나무 발효추출물의 프리라디칼 소거 효능 실험Experimental Example 1. Experimental effect of free radical scavenging of vitamin tree fermented extract

상기 실시 1 - 19와 비교실시예 1-2를 시료로 사용하여 푸지타(Fujita) 등의 방법(Y.Fugita et al., Yakugak Zasshi, 108, p129, 1988)을 개선한 것으로, 안정한 1,1-디페닐-2-피크릴히드라질 라디칼(1,1-Diphenyl-2- picrylhydrazyl radical)을 사용하였다. 0.2 mM 의 디페닐-2-피크릴히드라질 (DPPH) 용액 1㎖에 시료를 각 농도별로 2㎖을 첨가하고, 상온에서 10분간 반응 시킨 후, 525nm에서 최대 흡광도를 측정하여 하기 수학식 2로 자유 라디칼 소거효과(%)를 계산하여 , 각각의 실시예가 갖는 Free radical 소거활성 SC50 은 Free radical 을 50% 소거하는데 요구되는 추출물 및 화합물의 농도(㎍/㎖)로써 표시하였으며 그 결과를 표 1에 나타내었다. 1 to 19 and Comparative Examples 1-2 were used as samples to improve the method of Fujita et al. (Y.Fugita et al., Yakugak Zasshi, 108, p129, 1988). 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical) was used. To 1 ml of 0.2 mM diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) solution, 2 ml of the sample was added at each concentration, reacted at room temperature for 10 minutes, and the maximum absorbance was measured at 525 nm. By calculating the free radical scavenging effect (%), the free radical scavenging activity SC50 of each example was expressed as the concentration of extract and compound (㎍ / ㎖) required to remove 50% of free radicals, and the results are shown in Table 1. Indicated.

<수학식 2><Equation 2>

자유 라디칼 소거효과(%) = [1-(A-A')/(B-B')] x 100
% Free radical scavenging effect = [1- (A-A ') / (B-B')] x 100

A : 시료와 DPPH를 첨가한 반응용액의 525nm에서 흡광도A: Absorbance at 525 nm of sample and reaction solution with DPPH

A' : DPPH를 첨가하지 않은 반응용액의 525nm에서 흡광도A ': absorbance at 525 nm of the reaction solution without DPPH

B : DPPH를 첨가한 반응용액의 525nm에서 흡광도B: absorbance at 525 nm of the reaction solution to which DPPH was added

B' : 시료와 DPPH를 첨가하지 않은 반응용액의 525nm에서 흡광도B ': absorbance at 525 nm of sample and reaction solution without DPPH

표 1 프리라디칼 소거작용 효과Table 1 Free radical scavenging effect

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표 1은 비타민나무 발효추출물의 프리라디칼소거 효능을 실험한 데이터로, 발효시키지 않은 비교실시에 1,2 는 프리라디칼 소거 효능이 상대적으로 떨이지며, 비타민나무의 열매, 가지, 잎 중에서도 비타민나무 열매를 발효추출한 것이 효능이 좋은 것을 확인할 수 있었다.Table 1 shows the experimental results of the free radical scavenging effect of the vitamin tree fermented extract. In the comparative example, the free radical scavenging effect of the non-fermented extracts was relatively decreased, and among the fruits, branches and leaves of the vitamin tree, Fermented extract was confirmed that the good efficacy.

실험예 2. 비타민나무 발효추출물의 항염 실험Experimental Example 2. Anti-inflammatory test of vitamin tree fermented extract

상기 비타민나무 발효추출물 1 - 19와 비교실시예 1-2에 대하여 항염 효과를 측정 하였다.The anti-inflammatory effect was measured for the vitamin tree fermented extract 1-19 and Comparative Example 1-2.

실험 방법Experiment method

마우스 좌측귀를 대조부위, 우측귀를 시험부위로 하여 시료을 적용하기 전에 에탄올로 귀를 깨끗하게 세척하고, 시료 20㎕를 1일 1회 4일간 지속적으로 도포하고 마지막 도포 1시간 후에 좌측귀에 에탄올을, 우측귀에는 아라키돈산(Arachidonic acid)을 2㎎/ear을 도포하여 1시간 후 귀의부종(ear edema) 정도를 마이크로미터로 양쪽귀를 3회씩 반복 측정하였다. Using the left ear of the mouse as the control site and the right ear as the test site, the ear was washed with ethanol before applying the sample, and 20 μl of the sample was continuously applied once a day for 4 days and ethanol was applied to the left ear 1 hour after the last application. Arachidonic acid (Arachidonic acid) was applied to the right ear, and after 1 hour, the degree of ear edema was measured three times by using a micrometer.

항염효과는 아라키돈산(Arachidonic acid) 처리군을 기준으로 부종억제 정도로 판정하였으며 그 결과를 표. 3 에 나타내었다.
Anti-inflammatory effect was judged as edema inhibition based on Arachidonic acid treatment group and the results are shown. 3 is shown.

※ 억제율(%) = (A ― B) / A × 100
※ Inhibition Rate (%) = (A-B) / A × 100

A : 대조군귀의 평균두께 (아라키돈산 처리귀의 두께 - 비처리 귀의두께)A: average thickness of control ear (thickness of arachidonic acid treated ear-thickness of untreated ear)

B : 증자 발효추출물 도포군 귀의두께 (아라키돈산 처리귀의 두께 - 비처리 귀의두께)
B: thickness of ear fermented extract applicator group (thickness of arachidonic acid treated ear-thickness of untreated ear)

표2 비타민나무 발효추출물의 항염효과Table 2 Anti-inflammatory Effects of Vitamin Tree Fermented Extracts

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표 2는 비타민나무 발효추출물의 항염효과를 실험한 결과로, 실시예 2,3,5,6에서 항염효과가 나타나지 않아서 비타민나무의 열매 부분에서만 항염효과가 나타나는 것을 알 수 있었다.Table 2 shows the anti-inflammatory effect of the fermented extract of vitamin tree, the anti-inflammatory effect did not appear in Examples 2, 3, 5, 6, it was found that the anti-inflammatory effect appeared only in the fruit portion of the vitamin tree.

실험예 3. 비타민나무 발효추출물의 보습실험Experimental Example 3. Moisturizing test of vitamin tree fermented extract

상기 비타민나무 발효추출물에 대한 Courage+Khazaka 사의 Corneometer CM 825 를 사용하여 보습 효과를 측정하여 나타내었고, 실시예 1 - 19와 비교실시예 1-2에 대하여서는 고형분을 1%로 고정하여 추출용매로 희석하여 보습실험을 실시하였고 시료 도포 40분 후의 값을 측정하여 표7에 나타내었다.Courage + Khazaka's Corneometer CM 825 on the fermented extract of the vitamin tree was used to measure the moisturizing effect. For Examples 1 to 19 and Comparative Examples 1-2, the solid content was fixed to 1% as an extraction solvent. Moisturizing experiment was carried out by dilution and the values after 40 minutes of sample application were measured and shown in Table 7.

실험 방법Experiment method

20 대 여성 20 명을 대상으로 상박부 2 × 2 ㎠ , 8 구획을 물로 여러 차례 세정한 후 자극없이 수분을 제거한다. 5 분경과 후, 각각 2 구획에 대하여 측정시료10 ㎕ 씩 점적하여 고르게 도포한다. 10 분 후, Corneometer를 이용하여 하나의 구획 당 5 회 측정한다. 1 구획에 대하여 5 분 간격으로 6 회 측정한다. 실내온도는 20℃, 상대습도 20% 였다.Twenty women in their 20s were washed several times with water in the upper arm 2 × 2 ㎠ and 8 sections, and then water was removed without irritation. After 5 minutes, apply 10 µl of the sample to each of the 2 sections. After 10 minutes, measure 5 times per compartment using the Corneometer. Measure 6 times at 5 minute intervals for one compartment. The room temperature was 20 ° C and relative humidity 20%.

Water contents (%) = 시료 도포후 Corneometer Value - 시료 도포전 Corneometer Value Water contents (%) = Corneometer Value after sample application-Corneometer Value before sample application

이며, data 값은 20 명에 대한 평균치로 나타냈다.The data values are expressed as the average value for 20 people.

표 3 . 비타민나무 발효추출물의 보습효과 Table 3. Moisturizing Effect of Vitamin Tree Fermented Extract

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표 3은 비타민나무 발효추출물의 보습효과를 실험한 결과로, 비타민나무 발효추출물 보다 발효시키지 않은 비교 실시에 1, 2의 수치가 낮게 나타나었다. 이것은 발효과정을 통하여 보습효과가 높아지는 것을 알수 있었다.Table 3 shows the results of experiments on the moisturizing effect of the vitamin tree fermentation extract, and the values of 1 and 2 were shown to be lower in the comparative runs not fermented than the vitamin tree fermentation extract. This was found to increase the moisturizing effect through the fermentation process.

실험예 4. 비타민나무 발효추출물의 티로시나아제 저해 실험.Experimental Example 4. Tyrosinase inhibition experiment of vitamin tree fermented extract.

상기 실시예 1 - 19와 비교실시예 1-2를 시료로 사용하여 1500ug/㎖의 농도에서 머쉬룸 티로시나제 활성 저해효과를 바니 등의 방법(A. Vanni, Annali di Chimica, 80, p35, 1990)을 이용하여 측정하였다. 구체적으로, 0.1 M 포타슘 포스페이트 완충액(pH 6.8) 1.0 ㎖, 0.3 ㎎/㎖ L-티로신 수용액 1.0 ㎖, 1,250 유닛/㎖ 머쉬룸 티로시나제(SIGMA사, T-7755) 0.1 ㎖를 혼합한 후 여기에 시료용액을 농도에 따라 각각 0.2 ㎖ 첨가하여 37℃에서 10분간 효소반응을 진행시켰다. 반응용액의 흡광도를 480nm에서 측정하여 하기 수학식 3로 티로시나제 활성 억제 효과를 계산하여 그 결과를 표 7에 나타내었다.Using Examples 1-19 and Comparative Example 1-2 as a sample to inhibit the activity of mushroom tyrosinase activity at a concentration of 1500ug / ㎖ (A. Vanni, Annali di Chimica, 80, p35, 1990) It measured using. Specifically, after mixing 1.0 ml of 0.1 M potassium phosphate buffer (pH 6.8), 0.3 ml of 0.3 mg / ml L-tyrosine aqueous solution, 1.0 ml of 1,250 units / ml mushroom tyrosinase (SIGMA, T-7755), sample solution was added thereto. 0.2 ml of each was added according to the concentration, and the enzyme reaction was performed at 37 ° C. for 10 minutes. The absorbance of the reaction solution was measured at 480 nm, and the tyrosinase activity inhibitory effect was calculated by Equation 3 below, and the results are shown in Table 7.

<수학식 3>&Quot; (3) &quot;

머쉬룸 티로시나제 활성 억제율(%) = [1-(A-A')/(B-B')] x 100% Inhibition of mushroom tyrosinase activity = [1- (A-A ') / (B-B')] x 100

A : 시료와 효소를 첨가한 반응용액의 480nm에서 흡광도A: Absorbance at 480 nm of reaction solution with sample and enzyme

A' : 시료만 첨가한 반응용액의 480nm에서 흡광도A ': absorbance at 480 nm of the reaction solution to which only the sample was added

B : 시료를 첨가하지 않지 않고 효소만 첨가한 반응용액의 480nm에서 흡광도B: Absorbance at 480 nm of reaction solution added with enzyme only without addition of sample

B': 시료와 효소를 첨가하지 않은 반응용액의 480nm에서 흡광도B ': absorbance at 480 nm of sample and reaction solution without enzyme

표 4. 머쉬룸 티로시나제 활성 억제율(%) Table 4. percent inhibition of mushroom tyrosinase activity

Figure pat00004
Figure pat00004

표4는 비타민나무 발효 추출물의 머쉬룸 티로시나아제 활성억제률을 나타낸 것으로, 비타민 나무의 가지 부분의 발효추출물은 티로시나아제 활성 억제능이 없는 것을 알수 있었다. Table 4 shows the mushroom tyrosinase activity inhibition rate of the vitamin tree fermentation extract, it can be seen that the fermentation extract of the branch portion of the vitamin tree has no inhibitory activity of tyrosinase activity.

실험예 5. 비타민나무 발효추출물의 멜라노마 B16의 멜라닌 생성 억제 활성Experimental Example 5. Melanin Production Inhibitory Activity of Melanoma B16 of Vitamin Tree Fermented Extract

상기 실시예 1 - 19와 비교실시예 1-2를 시료에 대하여 멜라노마 B16의 멜라닌 생성 억제작용효과를 측정 하였다. 구체적으로, 멜라노사이트 배양을 통하여 멜라닌 생성 억제 기능을 세포 수준에서 검정 하였다. B16 멜라노마 세포는 10 % 소의 멜라노마 세포를 5 % 이산화탄소가 존재하는 곳에서 2일간 배양하여 1.0 X 108 세포 / T25 프라스크가 될 때까지 배양한다. 그 다음 농도별로 혼합 식물 추출물을 넣고 5 % 이산화탄소가 존재하는 곳에서 2일간 배양한다. 그 후 트립신을 첨가하여 세포들을 수거하여 세포의 흑화 정도를 관찰한다. 멜라닌이 생성되어 배출된 T25 프라스크의 상층액을 취해 475 nm 에서 흡광도를 측정하여 멜라닌을 정량하고, 세포수는 수거된 세포: 트립판 블루(tryphan blue) = 1 : 9 의 비율로 혼합하여 현미경으로 관찰하여 살아있는 세포수를 세어 단위 세포당 생성된 멜라닌의 양을 정량하여 저해 효과를 나타낸다. 멜라닌 생성량 및 멜라닌 생성 저해효과는 하기 공식으로 구한 다음, 그 결과를 표 8에 나타내었다.In Examples 1 to 19 and Comparative Examples 1-2, the melanin production inhibitory effect of melanoma B16 was measured. Specifically, melanin production inhibition function was assayed at the cellular level through melanocyte culture. B16 melanoma cells are incubated for 10 days in 10% bovine melanoma cells in the presence of 5% carbon dioxide until 1.0 X 108 cells / T25 flask. Then mix the plant extracts by concentration and incubate for 2 days in the presence of 5% carbon dioxide. Then trypsin is added to collect the cells and observe the degree of blackening of the cells. Melanin was quantified by measuring the absorbance at 475 nm, taking the supernatant of melanin-produced and discharged T25 flask, and the number of cells was mixed at the ratio of collected cells: tryphan blue = 1: 9. Observed by the number of living cells to count the amount of melanin produced per unit cell shows the inhibitory effect. Melanin production amount and melanin production inhibitory effect was obtained by the following formula, and the results are shown in Table 8.

<수학식 4><Equation 4>

멜라닌 생성량 = 흡광계수(0.1498) × A475Melanin production = extinction coefficient (0.1498) × A475

<수학식 5><Equation 5>

멜라닌 생성 저해효과 = 1 - 멜라닌 생성량/시료의 세포수Melanin production inhibitory effect = 1-melanin production / sample cell number

<표 8>멜라닌 생성 저해효과(%)Table 8 Melanin production inhibitory effect (%)

표 5 . 멜라닌 생성 저해효과(%) Table 5. Melanin production inhibitory effect (%)

Figure pat00005
Figure pat00005

표 5는 비타민나무 발효추출물의 멜라닌 생성 저해 효과를 실험한 결과로, 실시예 2,3,5,6에서 멜라닌 생성 저해 효과가 나타나지 않아서 비타민나무의 열매 부분에서만 멜라닌 생성 저해 효과가 있는 것을 알 수 있었다.Table 5 shows the results of experiments on the melanin production inhibitory effect of the fermented extract of vitamin tree, in Example 2, 3, 5, 6 did not show the melanin production inhibitory effect, it can be seen that the melanin production inhibitory effect only in the fruit part of the vitamin tree there was.

처방예 조제 기준Prescription Formulation Criteria

하기 처방은 상기 실험예1~19에서 측정된 결과를 근거로 실시예 10의 추출물이 전반적으로 높은 효과를 나타내었고, 이에 따라 실시예 10의 추출물을 사용하여 제조하였다. The following formulation was based on the results measured in Experimental Examples 1 to 19, the extract of Example 10 showed an overall high effect, and thus was prepared using the extract of Example 10.

처방예 1.Prescription Example 1.

상기 비타민나무 발효추출물을 함유한 화장료 중 화장수(스킨로션)의 처방예는 다음과 같다. 여기서 실시한 시료는 실시예 10의 것을 말한다.Prescription example of a lotion (skin lotion) of the cosmetic containing the vitamin tree fermented extract is as follows. The sample implemented here refers to the thing of Example 10.

표6Table 6

Figure pat00006
Figure pat00006

<제조방법><Manufacturing Method>

1) 수상성분을 모두 넣고 균일하게 용해 및 혼합한다.1) Add all the aqueous phase components and dissolve and mix uniformly.

2) 에탄올파트 성분을 모두 넣고 균일하게 용해 및 혼합한다.2) Add all the ethanol parts and dissolve and mix uniformly.

3) 상기 1)의 수상성분에 상기 2)의 에탄올파트 성분을 천천히 투입하여 혼합한다.3) The ethanol part component of 2) is slowly added to the aqueous phase component of 1) and mixed.

4) 상기 3)에 수상성분 2를 투입한 후, 혼합한 후 여과하여 숙성시킨다.4) After the aqueous phase component 2 is added to 3), the mixture is mixed and filtered to mature.

처방예 2.Prescription Example 2.

상기 비타민나무 발효추출물을 함유한 화장료 중 영양로션의 처방예는 다음과 같다.Prescription example of nutrition lotion among the cosmetics containing the vitamin tree fermented extract is as follows.

여기서 실시한 시료는 실시예 10 의 것을 말한다. The sample implemented here refers to the thing of Example 10.

표7Table 7

Figure pat00007
Figure pat00007

<제조방법><Manufacturing Method>

1) 유상성분 1을 모두 넣고 70~75℃에서 가열하여 균일하게 용해 및 혼합한다.1) Add all the oily ingredients 1 and heat it at 70 ~ 75 ℃ to dissolve and mix uniformly.

2) 수상성분 1을 모두 넣고 70~75℃에서 가열하여 균일하게 용해 및 혼합한다.2) Add all the water component 1 and heat it at 70 ~ 75 ℃ to dissolve and mix uniformly.

3) 상기 2)의 수상성분에 상기 1)의 유상성분을 교반하면서 70~75℃를 유지한 상태에서 투압하여 에멀젼을 만들고 45℃까지 냉각하였다.3) The aqueous phase component of 2) was stirred at 70-75 ° C. while stirring the oil phase component of 1) to form an emulsion, and cooled to 45 ° C.

4) 상기 3)에 수상성분 2, 유상성분 2 를 투입한 후 30℃까지 냉각한 후 숙성시킨다. 4) After the aqueous phase component 2 and the oil phase component 2 are added to 3), it is cooled to 30 ° C and aged.

처방예 3Prescription Example 3

상기 비타민나무 발효추출물 을 함유한 화장료 중 영양크림의 처방예는 다음과 같다. Prescription example of nutrition cream in the cosmetic containing the vitamin tree fermented extract is as follows.

여기서 실시한 시료는 실시예 10 의 것을 말한다.The sample implemented here refers to the thing of Example 10.

표8Table 8

Figure pat00008
Figure pat00008

<제조방법><Manufacturing Method>

1) 유상성분 1을 모두 넣고 70~75℃에서 가열하여 균일하게 용해 및 혼합한다.1) Add all the oily ingredients 1 and heat it at 70 ~ 75 ℃ to dissolve and mix uniformly.

2) 수상성분 1을 모두 넣고 70~75℃에서 가열하여 균일하게 용해 및 혼합한다.2) Add all the water component 1 and heat it at 70 ~ 75 ℃ to dissolve and mix uniformly.

3) 상기 2)의 수상성분에 상기 1)의 유상성분을 교반하면서 70~75℃를 유지한 상태에서 투압하여 에멀젼을 만들고 45℃까지 냉각하였다.3) The aqueous phase component of 2) was stirred at 70-75 ° C. while stirring the oil phase component of 1) to form an emulsion, and cooled to 45 ° C.

4) 상기 3)에 수상성분 2, 유상성분 2 를 투입한 후 30℃까지 냉각한 후 숙성시킨다. 4) After the aqueous phase component 2 and the oil phase component 2 are added to 3), it is cooled to 30 ° C and aged.

처방예 4.Prescription Example 4.

상기 비타민나무 발효추출물을 함유한 화장료중 에센스의 처방예는 다음과 같다. Prescription example of the essence of the cosmetic containing the vitamin tree fermented extract is as follows.

여기서 실시한 시료는 실시예 10의 것을 말한다.The sample implemented here refers to the thing of Example 10.

표9Table 9

Figure pat00009
Figure pat00009

<제조방법><Manufacturing Method>

1) 수상성분을 모두 넣고 균일하게 용해 및 혼합한다.1) Add all the aqueous phase components and dissolve and mix uniformly.

2) 에탄올파트 성분을 모두 넣고 균일하게 용해 및 혼합한다.2) Add all the ethanol parts and dissolve and mix uniformly.

3) 상기 1)의 수상성분에 상기 2)의 에탄올파트 성분을 천천히 투입하여 혼합한 후, 여과하여 숙성시킨다.3) The ethanol part component of 2) is slowly added to the aqueous phase component of 1) and mixed, and then filtered and aged.

시험예 1. 피부 개선효과 확인실험Experimental Example 1. Experiment to confirm skin improvement effect

처방예 3과 비교처방예 3(비타민나무발효추출을 제외하고 처방예3과 동일) 의 영양크림에 대한 피부 도포시, 피부 손상 개선효과를 확인하기 위하여 다음과 같은 임상 확인 실험을 하였다. 동일인에게 왼쪽 손에는 처방예 3의 영양크림을, 복부 오른쪽 손에는 비교처방예 3의 영양크림을 매일 저녁 세정 후, 피부에 1일 1회 60일간 도포한 후 피부 개선을 확인하기 위하여 피부상태 개선 정도를 측정하였다. When applying the skin to the nutritional cream of Formulation Example 3 and Comparative Formulation Example 3 (same as Formulation Example 3 except for fermentation extract of vitamin N), the following clinical confirmation experiment was conducted to confirm the effect of improving skin damage. To the same person, the nutritional cream of Formulation 3 is applied to the left hand and the nutritional cream of Comparative Example 3 to the right hand of the abdomen every evening, and then applied to the skin once a day for 60 days to improve skin condition. The degree was measured.

표 10. 비타민나무 발효 추출물의 피부 개선효과Table 10. Skin Improvement Effect of Vitamin Tree Fermented Extracts

Figure pat00010
Figure pat00010

상기 조사결과와 같이 상기 비타민나무 발효추출물을 첨가하여 제조한 처방예 3의 화장료가 첨가하지 않고 제조한 비교 처방예 3보다 피부 치유 개선효과가 우수하다는 것을 알 수 있다. As a result of the investigation, it can be seen that the skin healing improvement effect is superior to that of Comparative Example 3 prepared without the addition of the cosmetic formulation of Formulation 3 prepared by adding the vitamin tree fermented extract.

본 발명은 비타민나무의 가지, 잎, 열매를 효모균(Saccharomyces cerevisiae), 누룩균(Aspergillus oryzae), 고초균(Bacillus subtilis) 또는 유산균(Lactobacillus bulgaricus) 을 접종하여 발효시키거나, 자연발효시켜 숙성하여 얻은 추출물을 사용하여 피부의 치유 개선 효과, 보습, 미백 및 항노화 등에서 우수한 효과를 갖는 안전한 화장료 조성물를 제공한다.The present invention is inoculated fermented with yeast (Saccharomyces cerevisiae), yeast (Aspergillus oryzae), Bacillus subtilis or Lactobacillus bulgaricus (Lactobacillus bulgaricus) of the vitamin tree fermentation, or natural fermentation extract obtained Use to provide a safe cosmetic composition having excellent effects in improving the healing of the skin, moisturizing, whitening and anti-aging.

Claims (9)

비타민나무 발효추출물을 함유하는 화장료 조성물.Cosmetic composition containing a vitamin tree fermented extract. 제1항에 있어서, 비타민나무 발효추출물은 비타민나무의 열매, 가지 및 잎을 직접 발효시켜 추출하여 얻은 추출물, 또는 먼저 1차 추출물을 얻은 후 이를 발효시켜 얻어진 추출물 임을 특징으로 하는 화장료 조성물The cosmetic composition according to claim 1, wherein the vitamin tree fermentation extract is an extract obtained by directly fermenting the fruits, branches and leaves of the vitamin tree, or an extract obtained by first fermenting the first extract. 제 1항 또는 제2항에 있어서, 비타민나무 발효추출물은 효모균(Saccharomyces cerevisiae), 누룩균(Aspergillus oryzae), 고초균(Bacillus subtilis) 또는 유산균(Lactobacillus bulgaricus을 이용하여 숙성 발효시키거나, 자연 발효시킨 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물The method according to claim 1 or 2, wherein the vitamin tree fermentation extract is aged or fermented using Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus oryzae, Bacillus subtilis or Lactobacillus bulgaricus, or naturally fermented. Cosmetic composition 제3항에 있어서, 비타민나무 발효추출물은 비타민나무의 열매를 발효하여 얻어진 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물The cosmetic composition according to claim 3, wherein the vitamin tree fermentation extract is obtained by fermenting the fruit of the vitamin tree. 제3항에 있어서, 비타민나무 발효추출물은 효모균(Saccharomyces cerevisiae)을 이용하여 숙성 발효한 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물The cosmetic composition according to claim 3, wherein the vitamin tree fermented extract is fermented using yeast (Saccharomyces cerevisiae). 제3항에 있어서, 비타민나무 발효추출물은 조성물 전체중량에 대해서 0.1 ~ 80.0 중량% 함유함을 특징으로 하는 화장료조성물. The cosmetic composition according to claim 3, wherein the vitamin tree fermented extract contains 0.1 to 80.0% by weight based on the total weight of the composition. 제3항에 있어서, 화장료조성물은 보습효과, 항염효과, 미백 및 항노화 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물The cosmetic composition according to claim 3, wherein the cosmetic composition has a moisturizing effect, an anti-inflammatory effect, a whitening and an anti-aging effect. 제 1 항 또는 제2항에 있어서, 추출 방법으로 냉각 콘덴서가 장치되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 50-95℃, 4-20시간 가열하여 추출하거나, 5~37℃에서 1~15일간 침적시켜 유효성분을 추출하는 것을 특징으로 하는 화장료조성물.The extraction method according to claim 1 or 2, wherein a cooling condenser is installed in the extraction method to prevent evaporation of the solvent, followed by heating for 50 to 95 ° C for 4-20 hours, or for 1 to 15 days at 5 to 37 ° C. Cosmetic composition, characterized in that the extraction by extracting the active ingredient. 제 1 항 또는 제2항에 있어서, 화장료조성물 제형이 화장수(스킨로션), 영양로션, 영양크림, 맛사지 크림, 영양에센스 중에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.The cosmetic composition according to claim 1 or 2, wherein the cosmetic composition formulation is selected from a lotion (skin lotion), a nourishing lotion, a nourishing cream, a massage cream, and a nutrient essence.
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