KR20100137641A

KR20100137641A - 사포나린을 유효성분으로 함유하는 염증질환, 면역질환 또는 암의 치료 및 예방을 위한 조성물

Info

Publication number: KR20100137641A
Application number: KR1020090055783A
Authority: KR
Inventors: 이영한; 임융호; 이선희; 용연중; 우윤경; 신순영
Original assignee: 건국대학교 산학협력단
Priority date: 2009-06-23
Filing date: 2009-06-23
Publication date: 2010-12-31
Also published as: KR101112677B1

Abstract

본 발명은 TNF-α(Tumor necrosis factor-α)에 의해 유도된 CXCL1(Melanomagrowth-stimulatory active/growth-regulated pro tein α; Chemokine(CXC motif) ligand 1)의 유전자 발현을 저해시키는 사포나린(Saponarin; (1S)-1,5-anhydro-1-[7-(beta-D-glucopyranosyloxy)-5-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4-oxo-4H-chromen-6-yl]-D-glucitol) 화합물 또는 약학적으로 허용되는 그의 염을 포함하는 약학조성물에 관한 것이다.

본 발명의 사포나린은 인체 내 면역기전 중 면역 통제와 염증과정의 조절자인 CXCL1의 유전자 발현을 억제시켜 생체 염증반응계의 초기 경로 및 과정을 저해할 수 있으므로 염증반응으로 발생하는 다양한 병리학적 질병을 예방하고 치료할 수 있는 약학조성물로 유용하게 이용될 수 있다.

사포나린(Saponarin), CXCL1, TNF-α

Description

사포나린을 유효성분으로 함유하는 염증질환, 면역질환 또는 암의 치료 및 예방을 위한 조성물{COMPOSITION COMPRISING SAPONARIN AS AN EFFECTIVE INGREDIENT FOR TREATMENT AND PREVENTION OF INFLAMMATORY DISEASES, IMMUNE DISEASES OR CANCERS}

본 발명은 사포나린을 염증질환, 면역질환 또는 암 치료제로 사용하는 신규한 용도에 관한 것이다.

유해한 자극은 인체 면역체계를 과도하게 항진시켜 대식세포와 같은 면역세포에서 TNF-a(tumor necrosis factor-a), IL(interleukin), 프로스타글란딘(prostaglandin)같은 염증유발물질을 과도하게 유도하여 관절염, 패혈증 등의 염증질환과 조직이식거부반응, 자가면역질환, 당뇨병 등의 면역질환 및 신경세포의 사멸을 유발하는 것으로 알려져 있다.

Chemokine (C-X-C motif) ligand 1 (CXCL1, GRO-a, GRO-1)은 대표적인 호중구 활성인자로써 인체 내에서 염증반응이 생길 때 가장 첫 번째 방어인자인 호중구 를 염증 부위에 끌어들이는 역할을 하는 사이토카인(Cytokine)의 일종이다. 케모카인은 대식세포, 호구성 백혈구, 상피세포 등 다양한 종류의 세포에서 발현되며, 반감기가 길고, 인체의 염증반응이 시작될 때 가장 초기 방어물질인 호중구를 불러올 뿐만 아니라 염증 물질의 생성을 유도할 수 있으므로 염증반응, 자가면역 질환, 신생혈관생성, 종양형성, 염증반응으로 유래되는 다양한 질병의 병태생리에 중요한 역할을 수행한다.

CXCL1을 포함하는 케모카인들은 단독으로 또는 공동으로 작용하여 궤양성 대장염의 병태생리에 중요한 역할을 수행한다. 또한 CXCL1을 포함하는 케모카인의 활성화가 다양한 염증성 질병의 병태생리에 중요한 역할을 하는 것으로 여겨진다. 이 뿐만 아니라 CXCL1은 흑생종양과 유방암에서 과발현되며, 혈관신생작용을 도와 종양의 전이에도 관여한다. 쥐(Mouse) 모델에서 CXCL1의 발현을 억제시킴으로써 종양의 전이가 억제됨을 확인한 바가 있다.

혈관의 신형성(neoformation)으로 특징되는 혈관신생(angiogenesis)은 다수의 생리학적, 병리생리학적 현상에 필수적이고, 케모카인들은 상이한 기전을 통하여 혈관신생의 이런 모든 측면에 영향을 준다.혈관신생은 암의 성장과 전이에 필수적인 단계로 알려져 있고, 관절염은 관절 내로의 신생 혈관의 형성이 중요한 병리기전으로 작용한다고 보고되고 있다. 건선은 신생혈관의 형성과 이로 인한 혈관 투과성의 증가로 호중구 등의 면역세포들의 침윤이 병의 악화에 중요하다고 알려져 있다. 또한, 당뇨성 안질환은 급속한 혈관신생의 진행에 의하여 초래되는 질환이라고 보고되고 있고, 동맥 경화증은 죽종 내로의 혈관신생이 혈관벽을 약화시키는 것에 중요한 역할을 한다고 보고되고 있으며, 염증은 혈류의 증가, 혈관벽의 투과성 증가, 백혈구의 침윤 등 모든 변화에 혈관 신생이 원인과 결과로 일어난다고 알려져 있으므로 이들 질병의 치료와 예방을 위해서는 혈관신생의 억제를 위한 케모카인의 활성화 억제가 필요하다.

그러므로 CXCL1의 유전자 발현을 조절 할 수 있는 화합물을 이용함으로써 여러 반응의 초기 경로 및 과정을 선택적으로 제어하여 위에 나열된 다양한 질병들의 치료뿐만 아니라 치료제의 새로운 선도 물질을 개발할 수 있는 지표로 개발할 수 있다.

본 발명자들은 인체 내 면역기전 중 면역 통제와 염증과정의 조절자인 CXCL1의 유전자 발현을 억제시켜 생체 염증반응계의 초기 경로 및 과정을 저해함으로써 염증반응으로 발생하는 다양한 병리학적 질병을 예방하고 치료할 수 있는 효과를 가진 화합물을 찾고자 예의 노력한 결과, 사포나린이 TNF-α에 의해 유도된 CXCL1의 유전자 발현을 억제시켜 생체 염증반응계의 초기 경로 및 과정을 저해함으로써 염증반응으로 발생하는 다양한 병리학적 질병을 예방하고 치료할 수 있는 효과를 가키는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 사포나린(saponarin; (1S)-1,5-anhydro-1-[7-(beta-D-glucopyranosyloxy)-5-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4-oxo-4H-chromen-6-yl]-D-glucitol)의 새로운 용도를 제공하는 것이다.

본 발명의 목적 및 장점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구의 범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 사포나린(saponarin) 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효 성분으로 함유하고, 약학적으로 허용 가능 한 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 염증질환 또는 면역질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 사포나린(saponarin) 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염 및 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함하는 염증질환 또는 면역질환의 예방 및 억제용 식품 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 사포나린(saponarin) 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효성분으로 함유하고, 약학적으로 허용 가능한 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 암 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 사포나린 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염 및 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함하는 암 예방 및 억제용 식품 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 사포나린 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효성분으로 포함하는 혈관신생 억제제를 제공한다.

이하 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 사포나린의 CXCL1의 유전자 발현을 억 제시키는 새로운 용도를 제공한다.

또한, 본 발명의 사포나린은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물이다.

본 발명에 따른 화학식 Ⅰ의 화합물은 식물로부터 추출, 분리하거나 당 업계에 잘 알려진 합성방법에 의해 제조가 가능하다. 본 발명자는 사포나린을 문헌 (S. Sengupta et al.,Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry, 24, 684, 2009)에 공지된 기술에 기초하여 합성하였다.

본 발명의 사포나린은 TNF-α에 의해 유도된 CXCL1의 유전자 발현을 억제시켜 생체 염증반응계의 초기 경로 및 과정을 저해함으로써 염증반응으로 발생하는 다양한 병리학적 질병을 예방하고 치료할 수 있는 효과를 가지므로 염증질환 또는 면역질환의 치료제로 유용하게 사용될 수 있다.

본 발명은 사포나린(saponarin) 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효 성분으로 포함하는 염증질환 또는 면역질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다.

상기 본 발명의 약학적으로 허용 가능한 염으로는 유리산(free acid)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 산부가염은 통상의 방법, 예를 들면 화합물을 과량의 산 수용액에 용해시키고, 이 염을 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴과 같은 수혼화성 유기용매를 사용하여 침전시켜서 제조한다. 동 몰량의 화합물 및 물중의 산 또는 알코올(예를 들면, 글리콜 모토메틸에테르)을 가열하고 이어서 상기 혼합물을 증발시켜서 건조시키거나 또는 석출된 염을 흡인 여과시킬 수 있다.

이때, 유리산으로는 유기산과 무기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산(hydrochloric acid), 인산(posphoric acid), 황산(sulfuric acid), 질산(nitric acid) 등을 사용할 수 있고, 유기산으로는 메탄술폰산(methane sulfonic acid), p-톨루엔술폰산(p-toluen sulfonic acid), 아세트산(acetic acid), 트리플루오로아세트산(trifluoroacetic acid), 시트르산(citric acid), 말레익산(maleic acid), 숙신산(succinic acid), 옥살산(oxalic acid), 벤조산(benzoic acid), 타르타르 산(tartaric acid), 푸마르산(fumaric acid), 프로피온산(propionic acid), 구연산(citric acid), 젖산(lactic acid), 글리콜산(glycollic acid), 글루콘산(gluconic acid), 갈락트우론산(galacturon acid), 글루탐산(glutamic acid), 글루타르산(glutaric acid), 글루쿠론산(glucuronic acid), 아스파르트산(aspartic acid), 아스코르빈산(ascorbic acid), 카본산(carbonic acid), 바닐릭산(vanillic acid), 히드로아이오딕산(hydroiodic acid) 등을 사용할 수 있다.

또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용 가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리토 금속염을, 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리토 금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물염을 여과한 후 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속염으로는 특히 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하며, 또한 이에 대응하는 은염은 알칼리 금속 또는 알칼리토 금속염을 적당한 은염(예를 들면, 질산은)과 반응시켜 얻는다.

본 발명의 약학적으로 허용 가능한 염은, 달리 언급되지 않는 한, 본 발명의 화합물에 존재할 수 있는 산성 또는 염기성기의 염을 포함한다. 예를 들면, 약학적으로 허용 가능한 염으로는 히드록시기의 나트륨, 칼슘 및 칼륨 염이 포함되며, 아미노기의 기타 약학적으로 허용 가능한 염으로는 히드로브로마이드(hydrobromide), 황산염(sulfate), 수소 황산염(hydrogen sulfate), 인산염(phosphate), 수소 인산염(hydrogen sulfate), 이수소 인산염(dihydrogen sulfate), 아세테이트(acetate), 숙시네이트(succinate), 시트레이트(citrate), 타르트레이트(tartrate), 락테이트(lactate), 메탄설포네이트(메실레이트, methane sulfonate) 및 p-톨루엔설포네이트(토실레이트, p-toluen sulfonate)염이 있으며, 당업계에서 알려진 염의 제조방법이나 제조과정을 통하여 제조될 수 있다.

상기 사포나린 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염은 사용 목적에 따라 적절하게 조절할 수 있으며, 특별한 제약은 없다.

또한, 본 발명의 약학 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 1종 이상의 액체 또는 고체 담체를 더 포함할 수 있다. 또한 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 활택제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 고체 형태의 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 펠렛제, 세립제 또는 분제일 수 있으며, 이러한 고형제제는 상기 화합물에 담체, 부형제 및/또는 희석제를 첨가하여 조제할 수 있다. 상기 담체, 부형제 및/또는 희석제로는 락토오스(lactose), 수크로오스(sucrose), 덱스트로오스(dextrose), 만니톨(mannitol), 말리톨(malitol), 소르비톨(sorbitol), 자일리톨(xylitol), 에리트리톨(erithritol), 전분(starch), 아카시아고무(acacia rubber), 알지네이트(alginate), 젤라틴(gelatin), 칼슘 포스페이트(calcium phosphate), 칼슘 실리 케이트(calcium silicate), 셀룰로오스(cellulose), 폴리비닐 피롤리돈(polyvinyl pyrrolidone), 마그네슘 스테아레이트(magnesium stearate) 및 광물유 등이 있다.

상기 액체 형태의 제제는 용액, 현탁액 또는 유탁액일 수 있으며, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 경구용으로 적당한 수성 현탁제로는 미분된 활성 성분을 천연 또는 합성검, 수지, 메틸셀룰로오스(methyl cellulose), 소디움카르복시메틸셀룰로오스(Sodium carboxymethyl cellulose) 및 공지의 현탁제와 같은 점성 물질에 분산시켜 제조될 수 있다.

본 명세서에서 개시된 약학 조성물 및 투여 형태에서의 사용될 수 있는 충진제의 예는 탈크, 칼슘 카보네이트(예를 들어, 과립 또는 파우더), 미결정 셀룰로오스,분말 셀룰로오스, 덱스트레이트, 카올린, 만니톨, 실리식산, 소르비톨, 전분, 프리-젤라틴환 전분, 및 그들의 혼합물을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물의 결합제 또는 충진제는 일반적으로 약학 조성물 또는 투여 형태의 약 50 내지 약 99 중량 퍼센트 존재한다.

본 명세서에서 개시된 약학 조성물 및 투여 형태에서의 사용될 수 있는 붕해제는 정제가 수성 환경에 노출되었을 때 붕해되도록 하기 위한 것이다. 너무 많은 붕해제를 함유한 정제는 보관 중에 붕해될 수 있는 반면, 너무 적게 함유한 정제는 바람직한 조건 하에서 바람직한 속도로 붕해되지 않는다. 따라서 활성 성분의 방출을 조절하는데 나쁘지 않도록 너무 많지도 너무 적지도 않은 충분한 붕해제의 양이 본 발명의 고형 경구 투여 형태를 형성하기 위해 사용되어야 한다. 사용된 붕해제의 양은 제제의 타입에 따라 다양하고, 본 발명이 속한 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 쉽게 판단할 수 있다. 전형적인 약학 조성물은 약 0.5 내지 약 15 중량 퍼센트의 붕해제, 바람직하게는 약 1 내지 약 5 중량 퍼센트의 붕해제를 함유한다.본 발명의 약학적 조성물 및 투여 형태에서 사용될 수 있는 붕해제는 아가-아가, 알지닉 산, 칼슘 카보네이트,미결정 셀룰로오스, 크로스카멜로스 소디움, 크로스포비돈, 포라크릴린 포타시움, 소디움 전분 글리콜렝미트,감자 또는 타피오카 전분, 다른 전분, 프리-젤라틴화 전분, 다른 전분, 점토, 다른 알진, 다른 셀룰로오스, 검류, 및 그들의 혼합물을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 약학 조성물 및 투여 형태에서 사용될 수 있는 활택제는 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 미네랄 오일, 경(light) 미네랄 오일, 글리세린, 소르비톨, 만니톨, 폴리에틸렌 글리콜, 다른 글리콜, 스테아릭 산, 소디움 라우릴 설페이트, 탈크, 수소화 식물유(예를 들어, 땅콩 유, 면실 유, 해바라기 유, 참깨 유,올리브 유, 옥수수 유, 및 콩 유), 진크 스테아레이트, 에틸 올레에이트, 에틸 라우레에이트, 아가, 및 그들의혼합물을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 부가적 활택제는 예를 들어, 실로이드 실리카 (AEROSIL200, W.R. Grace Co. 제조, Baltimore, MD), 합성 실리카의 응고 에어로솔(coagulated aerosol of synthetic silica,Degussa Co. 제조, Plano, TX), CAB-O-SIL (pyrogenic silicon dioxide product, Cabot Co., Boston, MA), 및 그들의 혼합물을 포함한다. 만약 사용된다면, 활택제는 일반적으로 그것이 포함된 약학 조성물 또는 투여 형태의 약 1 중량 퍼센트 이하의 양으로 사용된다.

본 발명의 약학 조성물을 랫트, 마우스, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있고, 투여의 모든 방식은 예상될 수 있다. 예를 들면, 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구로 투여되는 경우, 정맥내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사등으로 투여할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 적용되는 질환의 종류에 따라, 투여 경로가 결정되는 것이 바람직하다.

상기 비경구 투여제로는 주사제, 점적제, 수액, 연고, 스프레이제, 현탁제, 유제, 좌제 등을 들 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜(polyethylene glycol), 올리브 오일과 같은 식물성 오일, 에틸올레이트(ethyl oleate)와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골(macrogol), 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴(glycerogelatin) 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 약학 조성물을 임상적인 목적으로 투여시에 치료학적으로 유효한 양으로 투여한다. 용어 "치료학적으로 유효한 양(therapeutically effective amout)"는 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 특정 환자에 대한 유효량은 연령, 성별, 체중, 건강 상태, 투여시간, 투여 경로, 배출 비율, 약제혼합 및 질환의 중증도에 따라 변화될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서는 본 발명의 화합물은 0.0001 내지 100 ㎎/㎏, 바람직하게는 0.001 내지 100 ㎎/㎏의 양을 1일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 본 발명의 조성물에서 화학식 1의 화합물을 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.001 ~ 50 중량%, 바람직하게는 0.01 ~ 50 중량%의 양으로 존재하여야 한다.

본 발명에 따른 화합물이 적용될 수 있는 질환은 이에 제한되지는 않으나 패혈증, 관절염, 류머티즘성 관절염, 류마티스성 다발성 근육통, 동맥경화증, 염증성 내장 질병, 궤양성 대장염, 골다공증, 크론(Crohn) 병, 뇌척수염, 수막염, 췌장염, 복막염, 골수염,뇌염, 뇌막염, 비염, 급성 기관지염, 만성 기관지염, 골관절염, 통풍, 척추관절염, 강직성 척추염, 건선성 관절염, 맥관염, 임파구 맥락수막염, 사구체신염, 포도막염, 회장염, 간 염증, 신장 염증, 천식, 통증, 패혈성 쇼크, 국소 빈혈, 궤양, 다중경화증, 경화증, 출혈성 쇼크, 아나필락틱 쇼크, 화상, 감염, 박테리아성 감염, 비루스성 감염, 진균성 감염 및 기생성감염, 천식, 건선, 아토피 성피부염, 레이슈마니아증, 주혈흡충증, 혈액투석증, 발작, 심폐 혈관이식, 국소 빈혈, 재환류 질환, 혈색소증, 혈색소병증, 당뇨병, 알츠하이머(Alzheimer) 병, 파킨슨(Parkinson) 병, 타가이식거부증 또는 자가면역질환 등을 포함한다.

본 발명의 약학 조성물은 다른 하나 이상의 약제와 함께 제제화 또는 병용하여 사용할 수 있다.

본 발명의 조성물과 병용 투여될 수있는 약제의 예는 기관지 확장제, 항히스타민제, 소염진통제, 항암제, 신경세포 보호제 또는 항생제를 들 수 있다.

그러나, 본 발명에 따른 화합물 함유 제제는 상술된 것으로 제한되는 것은 아니며, 염증질환 또는 면역질환의 치료나 예방에 유용한 제제라면 어떠한 것도 포함될 수 있다.

또한, 본 발명은 사포나린 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효성분으로 포함하는 식품 조성물을 제공한다.

상기 식품 조성물은 염증질환 또는 면역질환의 예방 및/또는 억제, 치료용 식품 조성물로 유용하게 사용할 수 있다.

본 발명의 식품 조성물은 기능성 식품(functional food), 영양 보조제(nutritinal supplement), 건강식품(health food) 및 식품 첨가제(food additives) 등의 모든 형태를 포함한다. 상기 유형의 식품 조성물은 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 당 업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양하게 사용될 수 있다.

예를 들면, 기능성 식품으로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등에 스피라에오사이드 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 첨가하여 제조할 수 있다.

상기 음료 조성물로는 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드(monosaccharide), 말토오스(maltose), 수크로오스(sucrose)와 같은 디사카라이드(disaccharide) 및 덱스트린(dextrin), 사이클로덱스트린(cyclodextrin)과 같은 폴리사카라이드(polysaccharide), 자일리톨(xylitol), 소르비톨(sorbitol), 에리트리톨(erythritol) 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴(thaumatin), 스테비아 추출물(Stevia extracts)과 같은 천연 감미제나 사카린(saccharin), 아스파르탐(aspartame)과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다.

또한, 건강식품으로는 본 발명의 사포나린 자체를 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한, 본 발명의 사포나린과 염증 억제 효과가 있다고 알려진 공지의 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다.

상기 외에 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 또는 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.

식품에 대한 용이한 접근성을 고려한다면, 본 발명의 식품 조성물은 염증질환 또는 면역질환의 예방 및/또는 억제, 치료용으로 매우 유용하다.

또한, 본 발명은 사포나린(saponarin) 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효성분으로 포함하는 암 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다.

상기 약학 조성물은 암 전이 예방 및/또는 억제용 제제로 유용하게 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물에 의한 개선, 예방 또는 치료 대상 질병인 "암(cancer)" 은 세포가 정상적인 성장 한계를 무시하고 분열 및 성장하는 공격적(aggressive) 특성, 주위 조직에 침투하는 침투적(invasive) 특성 및 체내의 다른 부위로 퍼지는 전이적(metastatic) 특성을 갖는 세포에 의한 질병을 총칭하는 의미이다. 본 명세서에서 상기 암은 악성 종양(malignant tumor)과 동일한 의미로도 사용되며, 고체 종양 및 혈액 종양(blood born tumor)을 포함하되 이에 한정되지 않는다.

암이라는 용어는 방광, 뼈 또는 혈액, 뇌, 유방, 자궁목, 가슴, 결장, 엔드로메트리움(endrometrium), 식도, 구강, 눈, 머리(두부 또는 경부) 신장, 소장, 대장, 신장, 갑상선, 부갑상선, 내분비조직, 골수, 간, 림프절, 폐, 혀, 목, 난소, 췌장, 담낭, 전립선, 직장, 위, 고환, 인후, 후두, 항문, 중추 신경계 및 자궁의 암을 포함하되 이에 한정되지는 않는 피부 조직, 기관, 혈액 및 혈관의 질병을 의미한다. 특정 암은 진행성 암(advanced malignancy), 아밀로이드증, 신경모세포종, 수막종, 혈관주위세포종, 다발성 뇌 전이(multiple brain metastase), 다형성 아교모세포종(glioblastoma multiforms), 아교모세포종(glioblastoma), 뇌 줄기 신경아교종(brain stem glioma), 나쁜 예후 악성 뇌 종양(poor prognosis malignant brain tumor), 악성 신경아교종(malignant glioma), 재발성 악성 신경아교종(recurrent malignant glioma), 역형성별세포종(anaplastic astrocytoma), 역형성 희소돌기아교세포종(anaplastic oligodendroglioma), 신경내분비 종양, 직장 샘암종(adenocarcinoma), Dukes C & D 직장결장 암, 수술에 의해 제거될 수 없는(unresectable) 직장결장암, 전이성 간세포 암종, 카포시육종, 카로타 입(karotype) 급성 골수모구 백혈병, 호지킨 림프종(Hodgkin's lymphoma), 비-호지킨 림프종, 피부 T-세포 림프종, 피부 B-세포 림프종, 확산 거대 B-세포 림프종(diffuse large B-Cell lymphoma), 낮은 등급 감상샘소포암종(low grade follicular lymphoma), 악성 흑색종, 악성 중피 세포암종(mesothelioma), 악성 가슴막삼출 중피세포암종 신드롬(pleural effusion mesothelioma syndrome), 복강 암종, 유두샘 장액 암종(papillary serous carcinoma), 부인성 암종(gynecologic sarcoma), 연 조직 암종(soft tissue sarcoma), 스셀로더마(scelroderma), 피하 맥관염, 란게르한스 세포 조직구증, 평활근육종, 선천골화섬유형성이상(fibrodysplasia ossificans progressive), 호르몬 무반응 전립샘 암, 수술제거 고-위험 연조직 암(resected high-risk soft tissue sarcoma), 수술로 제거되기 어려운 간세포 암종(unrescectable hepatocellular carcinoma), 왈덴스트롬 마크로글로블린혈증, 노출성 골수종(smoldering myeloma), 무통성 골수종, 자궁관 암, 안드로겐 비의존성 전립샘 암, 안드로겐 의존성 스테이지 IV 비-전이성 전림샘 암, 호르몬-비감작성(hormone-insensitive) 전립샘 암, 화학요법제-비감작성 전립샘 암, 유두 감상샘 암종, 소포(follicular) 갑상생 암종, 속질(medullary) 갑상생 암종, 및 평활근종(leiomyoma), 두경부암을 포함하되 이에 한정되지는 않는다.

상기 암 중 바람직하게는 흑색종양과 유방암을 들 수 있다.

본 명세서에서 용어 "예방"은 질환 또는 질병을 보유하고 있다고 진단된 적은 없으나, 이러한 질환 또는 질병에 걸리기 쉬운 경향이 있는 동물에서 질환 또는 질병의 발생을 억제하는 것을 의미한다. 본 명세서에서 용어 "치료"는 (1) 질환 또는 질병의 발전의 억제; (2) 질환 또는 질병의 경감; 및 (3) 질환 또는 질병의 제거를 의미한다.

본 발명의 조성물들은 암의 예방 및/또는 치료를 위하여 항암제 전에, 동시에 또는 차후에 투여될 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 다른 제2의 항암제와 병용 사용함으로써, 암의 예방이나 치료에 효과적일 수 있다. 본 발명의 약학 조성물과 병용 투여될 수 있는 다른 항암제는 아래와 같다.

상기 제2의 항암제는 인터페론(interferon), 인터루킨-2(interleukin-2), 파클리탁셀(paclitaxel), 빈크리스틴(vincristine), 빈블라스틴(vinblastin), 독소루비신(doxorubicin), 에토포시드(etoposide), 이리노테칸 히드로클로라이드(irinotecan hydrochloride), 시스플라틴(cisplatin), 암사크린(amsacrine), 사이토신 아라비노시드(cytosine arabinoside), 플루오로우라실(fluoro uracil) 또는 탁솔 등을 들 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.

암의 전이란 암이 처음 발생한 부위에서 떨어져 나와 다른 장기로 이행하여 그 곳에서 2차 암을 유발하는 것으로, 암 사망의 주요 원인으로 알려져 있다.

CXCL1은 암에서 과발현되며, 혈관신생작용을 도와 종양의 전이에도 관여하므로, CXCL1의 발현을 억제하는 본 발명의 사포나린은 암의 전이 예방 및 억제에 유용하게 사용 될 수 있다.

또한, 본 발명의 사포나린 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효성분으로 포함하는 혈관신생 억제제를 제공한다.

상기 혈관신생 억제제는 혈관 신생으로 인해 유발되는 질병의 치료와 억제에 유용하게 사용될 수 있고, 바람직하게는 항암제, 암 전이 억제제, 관절염 치료제, 건선 치료제, 당뇨성 안질환 치료제, 동맥경화 치료제 및 염증 반응 치료제에 유용하게 사용될 수 있으나 이에 한정되지는 않는다.

본 발명에 따른 사포나린은 인체 내 면역기전 중 면역 통제와 염증과정의 조절자인 CXCL1 유전자 발현을 억제시키는 기능을 가진다.

따라서, 본 발명은 사포나린 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효성분으로 포함하는 염증질환 또는 면역질환 치료제, 염증질환 또는 면역질환 치료용 식품, 항암제, 암전이 억제제, 항암용 식품, 혈관신생 억제제의 개발에 효과적으로 이용될 수 있다.

이하, 실시예에 의하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다.

이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

실험예 1. 사포나린에 의한 CXCL1의 유전자 발현 억제 효과 확인

본 발명에서는 사포나린에 의한 CXCL1 유전자 발현 억제 효과를 관찰하기 위하여, CXCL1 유전자 프로모터 활성을 측정하는 루시퍼라아제 리포터 실험법(Luciferase reporter assay)을 이용하였다. 특정 효소의 발현 증가량을 측정하기 위해 프로모터의 활성을 이용한 검증법은 매우 중요한 역할을 한다. 프로모터 활성이 증가되면 유전자 발현량이 증가되는 것을 의미하기 때문이다.

유전자 서열 분석을 위하여 제노메틱스 소프트웨어(www.genomatix.de)를 이용하였다. 인간 CXCL1 유전자의 전사 조절 부위 (염기 서열 -970 ~ +76 base pair)를 PCR로 합성하여 루시퍼라제 (Luciferase) 유전자를 포함하는 pGL4-베이직 벡터(Promega, Madison, Wisconsin)의 멀티플 클로닝 사이트(multiplr cloning site)에 삽입하여 pGL4/CXCL1-Luc(-970/+76) 리포터 플라스미드를 제작하였다. 시퀀싱에 사용된 프라이머는 하기와 같다.

forward primer(-970F): 5'-ggtacccactccctggtgtc-3' (서열번호 1)

reverse primer(+76R): 5'-gctcagcaggcgggtctggc-3' (서열번호 2)

분석된 결과를 이용하여 인간의 유방암 세포주인 MDA-MB-231(ATCC, American Type Culture Collection, USA)에 CXCL1 의 결합 서열을 함유하는 0.5 ㎍의 ppGL4/CXCL1-Luc(-970/+76) 플라스미드(Plasmid)를 퓨진6 (fuGENE6, Transfection reagent)를 이용하여 세포내 주입(transfection)시킨 후, 48 시간 후에 세포배양액에 10 ng/mL 농도의 TNF-a를 단독 처리한 그룹을 대조군으로 하여, 10 ng/mL 농도의 TNF-a와 20 ㎍/㎖ 농도의 사포나린을 병행 처리한 그룹에서 사포나린에 의한 TNF-a 활성 억제 효과를 분석하였다.

TNF-a와 사포나린이 처리된 세포를 12시간 더 배양한 후 수확하여 세포를 용해시킨 후, 세포 용액 단백질에 기질인 루시페린(luciferin)을 50㎕ 첨가하여 발광되는 루시페린 형광량을 측정하였다. 세포 용해액과 기질 루시페린은 Promega(Madison, WI, USA)에서 구입한 듀얼-글로 루시퍼레이즈 시스템 키트 (Dual-Glo Luciferase Assay System Kit)를 사용하였으며 루시페린 형광량 측정은 Centro LB 960 루미노미터 (Berthold Technology, German)를 이용하였다.

도 1에 나타난 바와 같이 TNF-a를 단독 처리한 시료는 비처리한 세포와 비교하여 루시퍼라제 효소 활성을 2배 증가시켰다. 이와 같은 결과는 TNF-a에 의해 CXCL1 유전자 발현이 증가 된다는 것을 의미하는 것이다. 이때, 본 발명의 사포나린을 TNF-a와 병행 처리해주면 TNF-a에 의해 증가되는 루시페라제 활성이 완전히 억제되는 것이 관찰되었다.

본 실험 결과를 종합하면, 본 발명의 사포나린은 TNF-a에 의해 활성화되는 CXCL1 유전자 발현을 전사 수준에서 억제시킴을 확인할 수 있다.

하기에 본 발명의 조성물을 위한 제제예를 예시하나, 이에 제한되는 것은 아니다.

<제제예1> 약학적 제제의 제조

<1-1> 산제의 제조

사포나린 2g

유당 1g

상기의 성분을 혼합한 후 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.

<1-2>정제의 제조

사포나린 100mg

옥수수전분 100mg

유당 100mg

스테아린산 마그네슘 2mg

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.

<1-3>캡슐제의 제조

사포나린 100mg

옥수수전분 100mg

유 당 100mg

스테아린산 마그네슘 2mg

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.

<1-4> 환의 제조

사포나린 1g

유당 1.5g

글리세린 1g

자일리톨 0.5g

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 1환 당 4g이 되도록 제조하였다.

<1-5>과립의 제조

사포나린 150g

대두추출물 50mg

포도당 200mg

전분 600mg

상기의 성분을 혼합한 후, 30% 에탄올 100mg을 첨가하여 섭씨 60℃ 에서 건조하여 과립을 형성한 후 포에 충진하였다.

<1-6> 주사액제의 제조

사포나린 10mg

만니톨 180mg

주사용 멸균 증류수 2974mg

Na₂HPO₄.12H₂O 26mg

통상의 주사제의 제조방법에 따라 1앰플당(2ml)상기의 성분 함량으로 제조한다.

<1-7>액제의 제조

사포나린 20mg

이성화당 10g

만니톨 5g

정제수 적량

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 100ml로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.

<제제예 2> 식품의 제조

상기 제제예 1의 산제, 정제, 캡슐제, 환 및 과립을 식품에 응용하여도 무방하며, 상기의 사포나린을 포함하는 식품을 다음과 같이 제조하였다.

<2-1> 분말의 제조

현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다. 검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.

사포나린을 진공농축기에서 감압, 농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.

상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 사포나린 건조분말을 다음의 비율로 배합하여 통상의 방법으로 제조하였다.

곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부),

종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부),

사포나린 건조분말(1 중량부),

영지(0.5 중량부),

지황(0.5 중량부)

<제제예 3> 음료의 제조

사포나린을 포함하는 음료를 다음과 같이 제조하였다.

<3-1> 건강음료의 제조

액상과당(0.5 중량부), 올리고당(2 중량부), 설탕(2 중량부), 식염(0.5 중량부), 물(75 중량부)과 같은 부재료와 사포나린(0.5 중량부)을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후, 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 건강음료를 제조하였다.

<3-2> 야채쥬스의 제조

사포나린 0.5 g을 토마토 또는 당근 등의 야채의 쥬스 1,000 ㎖에 가하여 통상의 방법으로 건강 증진용 야채쥬스를 제조하였다.

<3-3> 과일쥬스의 제조

사포나린 0.1 g을 사과 또는 포도 등의 과일의 쥬스 1,000 ㎖에 가하여 통상의 방법으로 건강 증진용 과일쥬스를 제조하였다.

상기 조성비는 비교적 식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

도 1은 화학식 1에 의한 CXCL1 발현 정도를 확인한 리포터 유전자 분석표이다.

<110> Konkuk University Industrial Cooperation Corp <120> COMPOSITION COMPRISING 3-O-GLUCOSE-ISORHAMNETIN AS AN EFFECTIVE INGREDIENT FOR TREATMENT AND PREVENTION OF INFLAMMATORY DISEASES, IMMUNE DISEASES OR CANCERS <130> P09-E178 <160> 2 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer for identifying human CXCL1 promoter <400> 1 ggtacccact ccctggtgtc 20 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> primer for identifying human CXCL1 promoter <400> 2 gctcagcagg cgggtctggc 20

Claims

하기 화학식 1의 사포나린(saponarin) 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효 성분으로 함유하고, 약학적으로 허용 가능한 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 염증질환 또는 면역질환의 예방 및 치료용 약학 조성물.

〔화학식1〕
제 1항에 있어서,

상기 염증질환 또는 면역질환은 패혈증, 관절염, 류머티즘성 관절염, 류마티스성 다발성 근육통, 동맥경화증, 염증성 내장 질병, 궤양성 대장염, 골다공증, 크론(Crohn) 병, 뇌척수염, 수막염, 췌장염, 복막염, 골수염, 뇌염, 뇌막염, 비염, 급성 기관지염, 만성 기관지염, 골관절염, 통풍, 척추관절염, 강직성 척추염, 건선 성 관절염, 맥관염, 임파구 맥락수막염, 사구체신염, 포도막염, 회장염, 간 염증, 신장 염증, 천식, 통증, 패혈성 쇼크, 국소 빈혈, 궤양, 다중경화증, 경화증, 출혈성 쇼크, 아나필락틱 쇼크, 화상, 감염, 박테리아성 감염, 비루스성 감염, 진균성 감염 및 기생성감염, 건선, 아토피성피부염, 레이슈마니아증, 주혈흡충증, 혈액투석증, 발작, 심폐 혈관이식, 국소 빈혈, 재환류 질환, 혈색소증, 혈색소병증, 당뇨병, 알츠하이머(Alzheimer) 병, 파킨슨(Parkinson) 병, 타가이식거부증 및 자가면역질환으로 이루어진 군으로부터 선택되어지는 것을 특징으로 하는 염증질환 또는 면역질환의 예방 및 치료용 약학 조성물.
제 1항에 있어서,

상기 약학 조성물은 CXCL1(Chemokine ligand 1)의 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는 염증질환 또는 면역질환의 예방 및 치료용 약학 조성물.
제 1항에 있어서,

상기 약학 조성물은 기관지 확장제, 항히스타민제, 소염진통제, 항암제, 신경세포보호제 및 항생제 중의 어느 하나 이상의 약제와 함께 제제화 또는 병용하여 사용하는 것을 특징으로 하는 염증질환 또는 면역질환의 예방 및 치료용 약학 조성물.
제 1항의 화학식 1로 표시되는 사포나린(saponarin) 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염 및 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함하는 염증질환 또는 면역질환의 예방 및 억제용 식품 조성물.
제 5항에 있어서,

상기 식품 조성물은 분말, 과립, 정제, 캅셀 또는 음료 중에서 선택된 어느 하나의 형태인 것을 특징으로 하는 염증질환 또는 면역질환의 예방 및 억제용 식품 조성물.
제 1항의 화학식 1로 표시되는 사포나린(saponarin) 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효성분으로 함유하고, 약학적으로 허용 가능한 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 암 예방 및 치료용 약학 조성물.
제 7항에 있어서,

상기 약학 조성물은 암 전이 예방 및 억제용 제제인 것을 특징으로 하는 암 예방 및 치료용 약학 조성물.
제 7항 또는 제 8항에 있어서,

상기 암은 방광암, 뼈암, 혈액암, 유방암, 흑색종양, 갑상선암, 부갑상선암, 골수암, 직장암, 인후암, 후두암, 폐암, 식도암, 췌장암, 대장암, 위암, 설암, 피부암, 뇌종양, 자궁암, 두부 또는 경부암, 담낭암, 구강암, 결장암, 항문 부근암, 중추신경계 종양, 간암 및 대장암으로 이루어진 군으로부터 선택되어지는 것을 특징으로 하는 암 예방 및 치료용 약학 조성물.
제 7항 또는 제 8항에 있어서,

상기 암은 흑생종양 또는 유방암인 것을 특징으로 하는 암 예방 및 치료용 약학 조성물.
제 7항 또는 제 8항에 있어서,

상기 약학 조성물은 제2의 항암제 또는 항암보조제를 추가로 포함함을 특징으로 하는 암 예방 및 치료용 약학 조성물.
제 11항에 있어서,

상기 제2의 항암제는 인터페론(interferon), 인터루킨-2(interleukin-2), 파클리탁셀(paclitaxel), 빈크리스틴(vincristine), 빈블라스틴(vinblastin), 독소루비신(doxorubicin), 에토포시드(etoposide), 이리노테칸 히드로클로라이드(irinotecan hydrochloride), 시스플라틴(cisplatin), 암사크린(amsacrine), 사이토신 아라비노시드(cytosine arabinoside), 플루오로우라실(fluoro uracil) 또는 탁솔 중에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 암 예방 및 치료용 약학 조성물.
제 7항 또는 제 8항에 있어서,

상기 약학 조성물은 CXCL1(Chemokine ligand 1)의 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는 암 예방 및 치료용 약학 조성물.
제 1항의 화학식 1로 표시되는 사포나린(saponarin) 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염 및 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함하는 암 예방 및 억제용 식품 조성물.
제 14항에 있어서,

상기 식품조성물은 분말, 과립, 정제, 캅셀 또는 음료 중에서 선택된 어느 하나의 형태인 것을 특징으로 하는 암 예방 및 억제용 식품 조성물.
제 1항의 화학식 1로 표시되는 사포나린(saponarin) 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효성분으로 포함하는 혈관신생 억제제.
제 16항에 있어서,

상기 혈관신생 억제제는 항암제, 암 전이 억제제, 관절염 치료제, 건선 치료제, 당뇨성 안질환 치료제, 동맥경화 치료제 및 염증 반응 치료제 중의 어느 하나인 것을 특징으로 하는 혈관신생 억제제.