KR20100094575A - 물에 난용성인 제약학적 활성 물질의 투여를 위한 약물 전달 시스템 - Google Patents

물에 난용성인 제약학적 활성 물질의 투여를 위한 약물 전달 시스템 Download PDF

Info

Publication number
KR20100094575A
KR20100094575A KR1020107015610A KR20107015610A KR20100094575A KR 20100094575 A KR20100094575 A KR 20100094575A KR 1020107015610 A KR1020107015610 A KR 1020107015610A KR 20107015610 A KR20107015610 A KR 20107015610A KR 20100094575 A KR20100094575 A KR 20100094575A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
retinoyl
methyl ester
sodium salt
drug delivery
delivery system
Prior art date
Application number
KR1020107015610A
Other languages
English (en)
Other versions
KR101572703B1 (ko
Inventor
줄리안 알렉소브
아이고르 로코트
Original Assignee
아데니아 인베스트먼츠, 엘티디.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=40795732&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=KR20100094575(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by 아데니아 인베스트먼츠, 엘티디. filed Critical 아데니아 인베스트먼츠, 엘티디.
Publication of KR20100094575A publication Critical patent/KR20100094575A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101572703B1 publication Critical patent/KR101572703B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/5123—Organic compounds, e.g. fats, sugars
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
    • A61K38/13—Cyclosporins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/141—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers
    • A61K9/145—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers with organic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

본 발명은 난용성 제약학적 활성 물질의 투여를 위한 약물 전달 시스템, 상기 약물 전달 시스템을 포함하는 제약학적 조성물, 및 상기 약물 전달 시스템의 제조 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 약물 전달 시스템 내에 입자 크기 및/또는 입자 형태 및/또는 입도 분포를 조절하는 방법, 및 입자의 약물 부하 용량을 증가시키는 방법에 관한 것이다. 나아가, 본 발명은 상기 약물 전달 시스템의 암 치료용 약제 제조를 위한 용도에 관한 것이다.

Description

물에 난용성인 제약학적 활성 물질의 투여를 위한 약물 전달 시스템{DRUG DELIVERY SYSTEM FOR ADMINISTRATION OF POORLY WATER SOLUBLE PHARMACEUTICALLY ACTIVE SUBSTANCES}
본 발명은 물에 난용성인 제약학적 활성 물질의 투여를 위한 약물 전달 시스템, 그러한 약물 전달 시스템을 포함하는 제약학적 조성물, 및 그러한 약물 전달 시스템의 제조 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 약물 전달 시스템 내에서 입자 크기 및/또는 입자 형태 및/또는 입도 분포를 조절하는 방법, 및 입자의 약물 부하 용량을 증가시키는 방법에 관한 것이다. 나아가, 본 발명은 상기 약물 전달 시스템의 암 치료용 약제 제조를 위한 용도에 관한 것이다.
제약 및 기타 관련 산업에서 산업적으로 유용한 수 불용성(water-insoluble) 또는 난용성 물질을 경구, 주사, 흡입, 눈(ophthalmic) 및 기타 전달 경로를 위한 제제로 제제화하는 것이 절실히 요구되고 있다. 산업적으로 유용한 수 불용성 또는 난용성 물질은 수 불용성 또는 난용성의 생물학적으로 유용한 화합물, 조영제, 제약학적으로 유용한 화합물, 특히 인간 및 수의학용 수 불용성 및 난용성 약물을 포함한다.
본 발명에 사용하기 위한 수 불용성 또는 난용성 물질에 대한 제한은 없다. 그 예는 해열제, 소염제, 진통제, 정신 안정제, 진정제, 항암제, 항균제, 항생제, 고지혈증 치료제, 진해제/거담제, 근육 이완제, 항간질약, 항궤양제, 항우울제, 항알러지제, 강심제, 항부정맥제, 혈관확장제, 강압제/이뇨제, 당뇨병 치료제, 항결핵제, 항류마티스제, 스테로이드, 마약길항제, 호르몬, 지용성 비타민, 항응고제, 빈혈 치료제, 면역 질환 치료제, 골다공증 치료제, 혈관형성 치료제, 망막증 치료제, 망막정맥폐쇄 치료제, 노년기 원반 황반 변성, 뇌혈관 연축 치료제, 뇌혈전증 치료제, 뇌경색 치료제, 뇌폐색 치료제, 뇌내출혈 치료제, 지주막하출혈 치료제, 고혈압성 뇌증 치료제, 뇌허혈발작 치료제, 다발경색 치매 치료제, 동맥경화증 치료제, 헌팅톤병 치료제, 뇌조직 장애 치료제, 시신경장애 치료제, 녹내장 치료제, 고안압증 치료제, 망막 박리 치료제, 관절염 치료제, 항균약, 항균 쇼크 약물, 천식 치료제, 빈뇨/색소실소증 치료제, 아토피성 비염 치료제, 알레르기성 비염 치료제, 화장품 조성물, 농화학 조성물, 살충제, 살균제, 제초제, 음료 또는 식품 조성물, 면역억제제 및 동물 약물 조성물을 포함한다.
수용성 물질만이 정맥 내 투여될 수 있다는 사실로 인하여, 항종양약으로 사용될 수 있는 유기 분자가 난용성이 아닌 것으로 제한된다.
약물 구조의 변화는 약물의 적절한 약리학적 특성의 손실을 초래하므로, 난용성 물질 내로의 극성 작용기의 혼입은 상기 문제를 해결하지 못한다.
난용성 화합물의 수용액 내 용해를 가능케 하는 약물 전달 시스템의 개발은 방대한 수의 물질의 항암 잠재성을 실현하고자 하는 노력에 있어 매우 중요할 것이며, 신세대 약물을 제공할 것이다.
파클리탁셀(paclitaxel) 및 도세탁셀(docetaxel)은 그들 또는 그 전구체가 택서스 ( Taxus ; yews) 속 식물에 의해 생산되므로 탁산류의 항암제에 속한다. 파클리탁셀은 천연 급원으로부터 분리하여 생산되는 반면, 파클리탁셀의 반합성 유사체인 도세탁셀은 10-데아세틸바카틴으로부터 합성된다. 파클리탁셀은 포지션 10에서 아세틸화 히드록시 작용기 및 페닐프로피오네이트 측쇄 상의 3급-부틸 대신에 벤조일기를 갖는 점에서 도세탁셀과 다르다. 탁산의 작용 기전은 미소관의 해중합을 방해하여 분열하는 세포를 손상시키는 튜뷸린의 β 서브유닛에 결합하는 능력에 근거한다. 이와 같은 작용의 특이성은 종양학에서 상이한 고형 종양, 특히 난소, 폐, 유방, 방광, 머리 및 목 암을 치료하는데 광범위하게 사용된다.
파클리탁셀 및 도세탁셀은 경구 생체이용률이 낮으며, 따라서 정맥 내 (i.v.) 주입이 유일한 투여 경로이다. 또한, 매우 낮은 수용성으로 인하여 탁산 수용액 사용이 불가능하다. 이러한 문제를 해결하기 위하여 몇몇 전달 매체(vehicles)가 적용되어 왔다.
탁솔(TAXOL®) 은 폴리에톡실화 피마자유인 크레모포어(CREMOPHOR®) EL이 파클리탁셀을 87:1의 중량 대 중량비 (w/w)로 용해하는 능력에 근거한 것이다. 이는 종양학에 있어서 탁산 사용 시대를 연 최초의 상업적 탁산 제제이다. 그러나, 크레모포어(CREMOPHOR®)는 탁솔(TAXOL®) 주입 동안 과민증 반응의 원인이 되는 것으로 후에 밝혀졌으며, 이러한 반응의 발생 및 심각성을 최소하하기 위하여 연속적인 주입 스케쥴뿐 아니라 히스타민 차단제 및 글루코코티코이드의 예비 투약 또한 표준 관행으로 되었다.
탁소테르(TAXOTERE®)라 불리우는 두번째 전달 시스템에서는, 폴리에톡실화 소르비톨 및 올레산의 유도체인 폴리소르베이트 80(Polysorbate 80:상표명 TWEEN® 80으로 알려짐)이 전달 매체(vehicle)의 역할을 한다. 이 경우, w/w 비는 24:1이다. CREMOPHOR® EL과 마찬가지로, 폴리소르베이트 80은 폴리에톡시 체인으로 이루어진 비이온성 세제이며 민감증 반응을 또한 유도할 수 있다.
세번째 전달 시스템인 아브락산(ABRAXANE®)은 9:1의 w/w 비로 인간 혈청 알부민에 의해 안정화된 130 nm의 평균 입경을 갖는 파클리탁셀 나노입자로 이루어진다. 비이온성 계면활성제의 부재로 인하여 예비투약이 불필요하므로, 치료가 단순화되고, 주입 시간이 단축된다. 한편, 다른 입자들과 마찬가지로 크기가 100 nm 이상인 ABRAXANE® 나노입자가 세망내피계(reticuloendothelial system)에 대한 기질이기 때문에, 상기 ABRAXANE® 제제는 TAXOL® 보다 효능이 약하다. 이 약물 전달 매체의 다른 단점은 기증 혈액으로부터 분리된 인간 혈청 알부민이 사용되는데 이는 항상 바이러스 질환 전염의 위험성이 적지만 분명히 따른다는 것이다.
마지막으로, 파클리탁셀 및 도세탁셀은 음이온 계면활성제로 작용하는 레티노산의 수용성 유도체의 수용액 내에 용해될 수 있음이 밝혀졌다. 상기 유도체 구조의 특이성으로 인하여, 파클리탁셀 및 도세탁셀이 놀랍게 낮은 0.5:1의 w/w 비로 용해될 수 있다.
익사베필론(Ixabepilone)(에포틸론(epothilone) B 유사체)은 작용 방식 및 수용액 내 용해도에 있어서 탁산과 매우 유사하다. 이는 전이성 또는 국소진행성 유방암 치료 가능성이 있다. BMS에서 개발된 IV 투여용 익사베필론 제제인 익셈프라(Ixempra)는 탁솔(Taxol)과 마찬가지로 크레모어포(Cremophor) EL에 근거하며 따라서 민감증 반응 감소를 위한 예비투약 및 연장된 주입이 요구된다.
포도필로톡신(podophyllotoxin)의 유사체인 에토포사이드(Etoposide)는 토포아이소머라아제(topoisomerase) II 저해제이며, 유잉 육종(Ewing's sarcoma), 폐암, 고환암, 림프종 및 비림프구성 백혈병의 치료에 이용된다. IV 투여용 에토포사이드 제제는 매우 낮은 수용성을 갖는 제약학적 활성 성분을 가용화하기 위하여 Polysorbate 80 (TWEEN 80) 또는 Macrogol 300과 같은 PEG-유도체를 기본으로 한다.
레티노이드는 비타민 A(레티놀) 및 그 천연 유사체(레티노산)와 합성 유사체(펜레티나이드, 에트레티네이트, 타자로텐, 벡사로텐, 아다팔렌)를 포함하는 폴리이소프레노이드류를 포함한다. 상기 화합물은 세포 증식, 세포 분화 및 배자 발생 조절에의 관여를 포함하는 광범위한 생물학적 활성을 보이며, 이는 백혈병, 림프종, 카포시육종(Kaposi's sarcoma), 폐암 및 유방암과 같은 다양한 형태의 암의 치료를 위한 항종양제로서 레티노이드의 사용을 가능케 한다. 상기 화합물은 또한 건선, 여드름, 햇빛으로 손상된 피부와 같은 다양한 피부 질환 치료에 사용된다. 레티노이드는 대개 고-친지성 화합물이며, 수용액 형태로의 그 사용은 전달 시스템의 적용을 필요로 한다. 그러나, 지금까지, 레티노이드의 수용성 제제는 상업적으로 개발되지 않았으며, 이는 경구 투여용으로만 유용하다.
사이클로스포린(ciclosporin), 시로리무스(sirolimus), 타크로리무스(tacrolimus) 및 에베리무스(everolimus)는 난용성(scarcely water soluble) 면역 억제제이다. 상기 약물의 경구 투여시 생물학적 이용 가능성은 약 20%에 불과하다. 이들 면역억제제의 상업적으로 유용한 제제는 폴리에톡실화 피마자유의 사용에만 근거하며, 이는 정맥 내 투여시 민감증 반응을 야기한다.
사이클로스포린(ciclosporin, cyclosporine, 또는 cyclosporin)은 동종이형 기관 이식 후 환자의 면역시스템의 활성을 감소시켜 거부 반응 위험성을 감소시키기 위하여 널리 사용되는 면역억제제이다. 이는 피부, 심장, 신장, 간, 폐, 췌장, 골수 및 소장 이식에서 연구되어 왔다. 사이클로스포린 A는 약물의 주요 형태로서, Tolypocladium inflatum Gams 균에 의해 생산되는 11 아미노산의 시클릭 비-리보솜 펩타이드(운데카펩타이드)이며, 자연에서 접하기 힘든 D-아미노산을 함유한다.
지나치게 높은 농도의 약물은 독성이 있고 최상의 경우 불활성이나, 지나치게 낮은 농도에서는 세포가 지나치게 낮은 농도의 약물에 노출되어 종종 약물 내성 메커니즘이 활성화된다는 사실을 인식하면서, 새로운 약물 전달 시스템의 개발 및 탐색이 증가되어 왔다. 약물이 적은 부작용으로 바람직한 반응을 유발하는 농도 범위는 "치료창(therapeutic window)"으로 알려져 있다.
연장된 주입은 항암제의 독성을 감소시키는 것으로 입증되었으나, 이러한 방식의 투여는 실행의 관점에서 볼 때 상당히 더 복잡하다.
상이한 종류의 나노입자에 결합 또는 그 안에 캡슐화된 약물을 사용함으로써 약물이 천천히 방출되도록 할 수 있음이 밝혀졌다. 이러한 입자들은 "창고"의 역학을 하면서 며칠 동안 혈액 내를 순환할 수 있다. 이러한 약물 방출은 캡슐화된 약물 확산 또는 입자 부식 및 분해에 의하여 일어난다. 당 분야에서 가장 많이 사용되는 유형의 나노입자는 미셀 및 리포좀으로, 이와 같은 나노입자의 형성은 단순히 엔트로피 중심 공정이다, 즉, 이들은 자발적으로 출현되고 그 특성은 형성 조건에 의하여 조정된다. 이러한 전달 시스템에서 사용되는 입자의 크기는 8 내지 200 nm 범위 내 및 심지어 그 이상이다.
그러나, 크기 증가에 따라, 입자는 림프절, 간 및 비장의 망상 결체 조직에 위치하는 식균 세포로 이루어지는 면역시스템의 일부인 세망내피계에 가시적으로 된다. 세망내피계 청소율(clearance) 정도는 입자 크기에 따라 증가하여, 혈액 내에 약물의 양을 현저히 감소시킨다.
약물 전달 분야에서 또 다른 흥미로운 도전은 약물을 유효 구획에 표적화하여 치료학적 유효성을 궁극적인 수준으로 증가시키는 것이다. 이와 관련하여 나노입자가 매우 유용한 것으로 밝혀졌다. 고형 종양은 연장된 혈관생성, 및 과투과성 결함성 맥관구조에 있어서 건강한 조직과 병리해부학적으로 다르다. 즉, 종양 모세혈관 크기가 클수록, 세포독성 카르고(cargo)가 적재된 나노입자의 건강한 조직과 비교하여 종양으로의 수동적 수송을 현저히 증가시킬 가능성이 커진다.
US 2004048923는 무수한 것들 중 N-(올-트랜스-레티노일)-L-시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 및 N-(13-시스-레티노일)-L-시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염을 포함하는 레티노이드 군을 기재하고 있다. 상기 물질은 파클리탁셀 및 도세탁셀과 같은 난용성 제약학적 화합물의 신규한 미셀 제제의 제조를 가능케 한다고 기재되어 있다.
WO 02092600는 파클리탁셀의 수용성 제제의 제조 방법에 관한 것으로, 이 방법은 파클리탁셀을 제1 용매 내에 용해시키는 단계, N-(올-트랜스-레티노일)-L-시스테인산, N-(13-시스-레티노일)-L-시스테인산, N-(올-트랜스-레티노일)-L-호모시스테인산, N-(13-시스-레티노일)-L-호모-시스테인산, N-(올-트랜스-레티노일)-L-시스테인술폰산 및 N-(13-레티노일)-L-시스테인술폰산 중에서 선택되는 화합물을 제2 용매 내에 용해시키는 단계, 결과 생성되는 파클리탁셀 용액의 분취액과 상기 화합물 바람직한 몰비로 혼합하는 단계, 및 생성되는 혼합물을 증발 건조시키는 단계를 포함한다.
상기 제약학적 화합물의 난용성은 이들이 특별한 형태임을 시사할 수 있으나, US 2004048923 및 WO 02092600은 모두 입자의 크기 및 형태에 대하여 전혀 언급하고 있지 않다. 특히 이들이 무결정 상태이어야 함, 또는 심지어 이와 같은 상태로 존재할 수 있음에 대해서도 언급 또는 암시하고 있지 않다. 이와 같은 상태로 입자를 제공하는 방법에 대해서도 개시되어 있지 않다. 당업계에 주지되어 있는 바와 같이, 비결정을 포함하는 동질이상은 유기 물질의 경우 근본적으로 예측불가하다.
연장된 투여를 본뜬, 약물 방출이 제어되거나 미리 프로그램된 신규한 약물 전달 시스템의 창출은 매우 바람직할 것이다.
본 발명의 목적은 이와 같은 약물 전달 시스템을 제공하는 것이다.
따라서, 본 발명의 일 측면은 약 100 ㎍/ml 미만의 물 내 자체 용해도를 가지며 약 100 nm 미만의 유효 평균 입경을 갖는 미립자 형태인 적어도 하나의 제약학적 활성 성분의 투여를 위한 약물 전달 시스템으로서, 상기 물질 입자는 본질적으로 비결정성이고, 상기 물질 입자는 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합으로 이루어지는 나노입자 내에 포획되고, 상기 물질에 대한, 상기 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합의 중량 대 중량비는 약 0.5:1 내지 약 20:1의 범위인 약물 전달 시스템에 관한 것이다.
본 발명에 대하여 기술하기 전에, 본 발명은 본원에 개시된 특정 구조, 공정 단계, 및 재료로 제한되지 않으며, 그러한 구조, 공정 단계 및 재료는 어느 정도 변화될 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 또한, 본원에 사용되는 용어는 특정 실시예만을 기술할 목적으로 사용되는 것으로 제한을 의도하는 것이 아니며, 본 발명의 범위는 첨부하는 특허청구범위 및 그의 균등물에 의해서만 제한되는 것으로 이해되어야 할 것이다.
본 명세서 및 청구범위에 사용되는 바와 같은 단수 형태는 문맥상 그렇지 않음을 분명히 나타내지 않는 한 복수를 포함하는 것임을 주목하여야 한다.
본 명세서에서, 달리 기재하지 않는 한, 본 발명의 약물 전달 시스템 또는 조성물 또는 방법에 사용되는 성분들의 양을 한정하는 용어 "약"은 가능한 수치의 변화를 의미하며, 예컨대, 실제 농축물 또는 사용 용액 제조를 위한 통상적인 측정 및 액체 취급 절차를 통한; 이러한 절차에서 부주의한 실수에 의한; 제조, 급원 또는 상기 방법을 실행하기 위한 약물 전달 시스템 또는 조성물의 제조에 사용되는 성분 순도의 차이에 의한 변화를 의미한다. 용어 "약"은 또한 특정 출발 혼합물로부터 생성되는 조성물에 대한 상이한 평형 조건으로 인하여 달라지는 양을 포함한다. 용어 "약"으로 수식되든 아니든, 청구범위는 양에 대한 균등물을 포함한다.
본 명세서에서, 달리 기재하지 않는 한, 용어 "약물 전달 시스템"은 치료제(들)을 원하는 신체 부위(들)로 전달하고/하거나 치료제(들)의 시기적절한 방출을 제공하는 제제 또는 기구를 의미한다.
본 명세서에서, 달리 기재하지 않는 한, 용어 "입자 크기"는 633 nm 파장을 가진 레드 레이저를 사용하여 동적 광산란에 의하여 측정되는 Z-평균 직경을 의미한다. "약 100 nm 미만의 유효 평균 입경"은, 상기한 기법으로 측정시 입자의 적어도 90%가 약 100 nm 미만의 크기를 가짐을 의미한다.
본 명세서에서, 달리 기재하지 않는 한, 용어 "나노입자"는 그 크기가 나노미터로 측정되는 미세 입자를 의미한다. 본 발명의 나노입자는 통상적으로 약 1 내지 약 999 nm 범위의 직경을 가지며, 포획되거나, 캡슐화된 또는 둘러싸여진 생물학적으로 유용한 분자를 포함할 수 있다.
본 명세서에서, 달리 기재하지 않는 한, 용어 물질의 "용해도"는 약 15℃ 내지 약 38℃인 약 실온에서 물질이 특정 용매에 용해되는 능력을 의미한다.
본 명세서에서, 달리 기재하지 않는 한, 용어 "비결정성(amorphous)"은 비-결정성(non-crystalline)이거나 또는 약 10 nm 이하의 입경을 갖는 매우 작은 결정으로 이루어지는 고체 구조를 가리키는 것으로 의도된다.
본 명세서에서, 달리 기재하지 않는 한, 용어 "세포독성 화합물"은 세포 성장을 저지하거나 세포를 사멸시킬 수 있는 화합물을 의미한다.
본 명세서에서, 달리 기재하지 않는 한, 용어 "세포 증식 억제성 화합물"은 반드시 세포를 용균 또는 사멸시키지는 않지만 세포를 영구적 비-증식성 상태가 되게 하는 능력을 갖는 화합물을 의미한다.
본 명세서에서, 달리 기재하지 않는 한, 용어 "면역억제제"는 면역 시스템의 활성을 저해하는, 특히 신체 면역 시스템이 그 자신의 조직을 공격하는 장애에서 및 이식 기관 거부를 방지하는 능력을 갖는 화합물을 의미한다.
본 명세서에서, 달리 기재하지 않는 한, 용어 "유도체"는 본래 구조로부터 직접적으로, 본래 구조의 화학적 반응에 의해, 또는 본래 구조의 부분 치환인 변경에 의해, 또는 고안 및 신생 합성에 의하여 형성되는 화합물을 의미한다. 유도체는 합성에 의한 것일 수 있거나, 또는 세포의 대사 생산물 또는 실험실 효소 반응 생산물일 수 있다.
일 실시예에서, 본 발명의 약물 전달 시스템 내 물질 입자는 약 50 nm 미만의 유효 평균 입경을 가진다.
다른 실시예에서, 본 발명의 약물 전달 시스템 내 물질 입자는 약 5 ~ 50 nm 범위의 유효 평균 입경을 가진다.
또 다른 실시예에서, 본 발명의 약물 전달 시스템 내 물질 입자는 약 8 ~ 30 nm 범위의 유효 평균 입경을 가진다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 제약학적 활성 물질에 대한, 상기 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합의 중량 대 중량비는 약 1:1 내지 약 10:1의 범위이다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 제약학적 활성 물질은 세포독성 또는 세포 증식 억제성 화합물이고; 이러한 실시예의 일 측면에서, 상기 세포독성 또는 세포 증식 억제성 화합물은 비스클로로니트로소우레아(Carmustine)이고; 다른 측면에서, 상기 세포독성 또는 세포 증식 억제성 화합물은 에토포사이드이고; 또 다른 측면에서, 상기 세포독성 또는 세포 증식 억제성 화합물은 탁산이고, 보다 상세하게, 상기 탁산은 파클리탁셀, 도세탁셀 및 이들의 유도체 중에서 선택된다. 상기 실시예의 다른 측면에서, 본 발명은 암 치료에 사용하기 위한 상기 약물 전달 시스템에 관한 것이다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 제약학적 활성 물질은 면역억제제이고; 이 실시예의 일 측면에서, 상기 면역억제제는 사이클로스포린, 시로리무스, 타크로리무스 및 이들의 유도체 중에서 선택된다. 상기 실시예의 다른 측면에서, 본 발명은 동종이형 기관 이식 후 사용하기 위한 상기 약물 전달 시스템에 관한 것이다.
본 발명의 다른 실시예는 이러한 유형의 약물 전달 시스템과 제약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 제약학적 조성물에 관한 것이다. 상기 실시예의 일 측면에서, 상기 제약학적 활성 물질은 세포독성 또는 세포 증식 억제성 화합물이고; 일 측면에서, 상기 세포독성 또는 세포 증식 억제성 화합물은 비스클로로니트로소우레아(Carmustine)이고; 다른 측면에서, 상기 세포독성 또는 세포 증식 억제성 화합물은 에토포사이드이고; 또 다른 측면에서, 상기 세포독성 또는 세포 증식 억제성 화합물은 탁산이고, 보다 상세하게, 상기 탁산은 파클리탁셀, 도세탁셀 및 이들의 유도체 중에서 선택되고; 상기 실시예의 또 다른 측면에서, 상기 제약학적 활성 물질은 면역억제제이고; 상기 실시예의 일 측면에서, 상기 면역억제제는 사이클로스포린, 시로리무스, 타크로리무스 및 이들의 유도체로부터 선택된다. 상기 실시예의 일 측면에서, 상기 제약학적 조성물은 수용액, 겔, 크림, 연고, 정제, 캡슐 또는 소프트겔의 형태로 제공될 수 있다.
본 발명의 다른 실시예는 상기한 바와 같은 약물 전달 시스템의 제조를 위한, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합의 용도에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 실시예는 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합, 및 약 100 ㎍/ml 미만의 물 내 자체 용해도를 갖는 적어도 하나의 제약학적 활성 물질로 이루어지는 나노입자를 포함하는 약물 전달 시스템의 제조 방법으로서, 상기 물질을 약 100 nm 미만의 유효 평균 입경을 갖는 본질적으로 비결정성 입자 형태로 제공하고; 상기 물질에 대한, 상기 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합의 중량 대 중량비를 약 0.5:1 내지 약 20:1의 범위로 조절함으로써, 상기 나노입자의 크기를 약 100 nm 미만의 유효 평균 입경을 갖도록 조절하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 상기 방법에 의하여 얻어지는 약물 전달 시스템, 및 제약학적으로 허용가능한 담체와 상기 약물 전달 시스템을 포함하는 제약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 실시예는 약물 전달 시스템의 제조 과정에서, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합, 및 약 100 ㎍/ml 미만의 물 내 자체 용해도를 갖는 적어도 하나의 제약학적 활성 물질로 이루어지는 나노입자의 입자 크기 및/또는 입자 형태 및/또는 입도분포를 조절하는 방법으로서, 상기 물질을 약 100 nm 미만의 유효 평균 입경을 갖는 본질적으로 비결정성 입자 형태로 제공하고; 상기 물질에 대한, 상기 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합의 중량 대 중량비를 약 0.5:1 내지 약 20:1의 범위로 조절함으로써, 상기 나노입자의 입자 크기 및/또는 입자 형태 및/또는 입도 분포를 조절하는 방법에 관한 것이다. 상기 실시예의 일 측면에서, 나노입자의 크기는 약 10 - 100 nm 범위로 조절된다.
본 발명의 또 다른 실시예는 약물 전달 시스템의 제조 과정에서, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합, 및 약 100 ㎍/ml 미만의 물 내 자체 용해도를 갖는 적어도 하나의 제약학적 활성 물질로 이루어지는 나노입자의 입자 크기를 조절하는 방법으로서, 상기 물질을 약 100 nm 미만의 유효 평균 입경을 갖는 본질적으로 비결정성 입자 형태로 제공하고; 상기 본질적으로 비결정성 입자를 적어도 하나의 이온화 염을 함유하는 이온 강도 I를 갖는 수용액 내에 제공하고; I를 증가시킴으로써 상기 나노입자의 입자 크기를 증가시키거나, I를 감소시킴으로써 상기 나노입자의 입자 크기를 감소시키는 방법에 관한 것이다.
상기 실시예의 일 측면에서, 상기 제약학적 활성 물질은 탁산이고, 상기 적어도 하나의 이온화 염은 염화나트륨이다. 나트륨 및 염소 이온은 인체 내에 및 많은 동물의 신체 내에 가장 풍부한 이온이므로, 이는 i.v. 주사 용액의 제조에 유용하다.
상기 실시예의 다른 측면에서, 상기 이온화 염은 예컨대 이중 원자가 양이온과 같은 다가 양이온을 포함한다. 이러한 양이온은 일반적으로 용매의 이온 강도를 증가시킴으로써 입자 크기를 증가시킬 뿐 아니라, 형성되는 입자를 안정화한다.
약 10 - 100 nm 범위의 크기를 갖는 탁산-함유 입자의 사용은 약물의 혈액 순환의 연장, 이들에 대한 세망내피계 청소율 저하, 및 결함 맥관구조의 선택적 침투에 의하여 항암 화합물의 치료 효율을 현저히 증진시킨다. 생체 내 이와 같은 나노입자 형태의 탁산 사용의 이점, 즉, 약물 서방출 및 증가된 종양 맥관구조 투과성 이외에도, 이와 같은 나노입자 함유 탁산 제제의 활성은 상이한 고형 종양 세포주에서 실험실 내에서 더욱 발현된다. 또한, 이들 제제의 세포독성은 입자 크기에 극적으로 의존한다.
본 발명의 다른 실시예는 약물 전달 시스템의 제조 과정에서, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합, 및 약 100 ㎍/ml 미만의 물 내 자체 용해도를 갖는 적어도 하나의 제약학적 활성 물질로 이루어지는 나노입자의 약물 부하 용량을 증가시키는 방법으로서, 상기 물질을 약 100 nm 미만의 유효 평균 입경을 갖는 본질적으로 비결정성 입자 형태로 제공하고; 상기 물질에 대한, 상기 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합의 중량 대 중량비를 약 0.5:1 내지 약 20:1의 범위로 조절함으로써 약물 부하 용량을 증가시키는 방법에 관한 것이다.
상기 각각의 본 발명의 방법에서, 상기 제약학적 활성 물질은 상기 물질을 적절한 유기 용매 내에 용해시켜 상기 물질의 유기 용액을 제공하는 단계; 약 0.01~3 몰 당량의 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합을 상기 유기 용액에 첨가하는 단계; 및 상기 유기 용액으로부터 상기 유기 용매를 증발시켜 본질적으로 비결정성 입자 형태인 제약학적 활성 물질을 포함하는 잔사를 제공하는 단계를 포함하는 방법에 의하여, 약 100 nm 미만의 유효 평균 입경을 갖는 본질적으로 비결정성 입자 형태로 제공될 수 있다. 상기 방법의 일 실시예에서, 약 0.1 ~ 1 몰 당량의 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합이 상기 유기 용액에 첨가된다.
상기 제안된 방법은 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 및 N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염이 예컨대 탁산과 같은 제약학적 활성 물질의 결정화를 방지하는 능력에 근거한다.
상기 유기 용매의 증발 중에, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합은 상기 제약학적 활성 물질과 함께 공-결정화하여 필름을 형성한다. 상기 필름에 물을 첨가하여 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합을 용해하고, 매우 증가된 표면적을 갖는 매우 비결정성 형태로 제약학적 활성 물질을 제공한다.
이와 같이 얻어지는 제약학적 활성 물질의 본질적으로 비결정성 입자의 용액은 주입을 위하여 또는 추후 재구성을 위한 동결 건조 생성물의 제조를 위하여 분리 또는 정제없이 직접 사용될 수 있다.
대안적으로, 상기 제약학적 활성 물질의 본질적으로 비결정성 입자는 예컨대 증발에 의하여 건조 형태로 제공된 후, 후에 약 0.01 ~ 50 몰 당량의 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합을 포함하는 수용액 내에 용해될 수 있다. 일 실시예에서, 상기 활성 물질 입자는 약 0.1 ~ 5 몰 당량의 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합을 포함하는 용액 내에 용해될 수 있다. 상기 본질적으로 비결정성 입자는 몇 분 이내에 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합의 용액 내에 용해될 수 있다.
다른 대안에서, 유기 용매 내 상기 제약학적 활성 물질 용액을 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합의 수용액에 첨가한 후, 상기 유기 용매를 증발시켜 비결정성 형태의 상기 제약학적 활성 물질을 포함하는 수용액을 남긴다.
상기 방법은 상기 제약학적 활성 물질 유기 용액의 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합의 수용액을 함유하는 증발 플라스크 내로의 유입을 조절하면서 증발시킴으로써 최적화 및 단순화될 수 있다.
유기 용매의 유량, 증발 시스템 내부 압력 및 증발 온도는 유기 용액의 농도가 15%를 초과하지 않도록 선택될 수 있다.
상기 제약학적 활성 물질을 본질적으로 비결정성 입자 형태로 제공하는 과정에 사용되는 유기 용매는 알코올, 예컨대, 메탄올 또는 에탄올일 수 있다. 에탄올 대신 낮은 비등점을 갖는 메탄올의 사용은 알코올-물 혼합물의 증발을 단순화한다.
그러나, 유기 용매의 잔사는 생체 내 직접 적용에 덜 적합하므로, 본질적으로 비결정성인 제약학적 활성 물질 입자의 유기 용액을 예컨대 동결건조하여 유기 용매를 제거하여, 제약학적 활성 물질의 본질적으로 비결정성 입자를 저장 및 새로운 제제 제조를 위한 편리한 분말 형태로 남길 수 있다.
또한, 본 발명의 다른 실시예에 의하면,
- 암 치료용 약제 제조를 위한 본 발명의 약물 전달 시스템의 용도, 및 본 발명의 약물 전달 시스템을 그러한 치료를 필요로 하는 환자에게 치료학적 유효량으로 투여하는 암 치료 방법; 및
- 암 치료용 약제 제조를 위한 본 발명의 제약학적 조성물의 용도, 및 본 발명의 제약학적 조성물을 그러한 치료를 필요로 하는 환자에게 치료학적 유효량으로 투여하는 암 치료 방법;
- 동종이형 기관 이식 후 사용하기 위한 약제의 제조를 위한 본 발명의 약물 전달 시스템의 용도, 및 본 발명의 약물 전달 시스템을 그러한 치료를 필요로 하는 환자에게 치료학적 유효량으로 투여하는 동종이형 기관 이식 후 치료 방법; 및
- 동종이형 기관 이식 후 사용하기 위한 약제의 제조를 위한 본 발명의 제약학적 조성물의 용도, 및 본 발명의 제약학적 조성물을 그러한 치료를 필요로 하는 환자에게 치료학적 유효량으로 투여하는 동종이형 기관 이식 후 치료 방법이 제공된다.
상기 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합을 사용하여 얻어지는 수용성 탁산 제제는 이들 제제의 광범위한 형성 조건에서 몇 시간 동안 안정하다.
따라서, 본 발명은 그렇지 않으면 난용성일 파클리탁셀 및 도세탁셀과 같은 탁산의 주입용 수용액을 비이온성 계면활성제를 사용하지 않고 제공하는 것을 가능케 한다. 이는 주입 용액에 대한 민감증 반응을 현저히 감소시키고, 주입 시간을 단축시키고, 민감증에 대한 환자의 예비투약을 불필요하게 한다.
본 발명은 하기 비-제한적 실시예에서 보다 상세히 예시될 것이다.
본 발명에 의하면, 연장된 투여를 본뜬, 약물 방출이 제어되거나 미리 프로그램된 신규한 약물 전달 시스템이 제공된다.
본 발명을 이하 실시예 및 첨부 도면을 참조로 하여 보다 상세히 설명한다.
도 1은 9 mg/ml 농도의 염화나트륨 수용액 내에 상이한 파클리탁셀 농도에서 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 대 파클리탁셀의 w/w비에 대한 입자 크기의 의존성을 도시한다.
도 2는 상이한 도세탁셀 농도에서 N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 및 도세탁셀 (w/w 비 1:1)로 이루어지는 입자의 크기의 염화나트륨 농도에 대한 의존성을 도시한다.
도 3은 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 및 파클리탁셀(파클리탁셀:methyl ester of N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 w/w비는 1:2)로 이루어지는 입자의 크기의 9 mg/ml 농도의 염화나트륨 수용액 내에 염화칼슘 농도에 대한 의존성을 도시한다.
도 4 및 5는 시간 경과에 따른, 염화나트륨(9 mg/ml), 염화칼슘(2 mmol/l) 및 염화마그네슘(1 mmol/l)의 수용액 내에 파클리탁셀, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 및 N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염의 w/w/w/비 1:0.75:0.75의 동결 건조 혼합물의 재구성에 의하여 얻어지는 제제의 입자 크기 및 Z-포텐셜을 도시한다.
도 6 및 7은 시간 경과에 따른, 염화나트륨(9 mg/ml) 및 염화칼슘(3 mmol/l) 의 수용액 내에 도세탁셀과 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염의 w/w/비 1:2의 동결 건조 혼합물의 재구성에 의하여 얻어지는 제제의 입자 크기 및 Z-포텐셜을 도시한다.
도 8은 인간 난소 선암 SKOV3 세포주 배양액 내에 도세탁셀, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 및 N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(w/w/w = 1:1:1)으로 이루어지는 제제의 세포독성에 대한 상대적 평가를 도시한다.
도 9는 인간 난소 선암 SKOV3 세포주 배양액 내에 파클리탁셀, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 및 N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(w/w/w = 1:0.75:0.75)으로 이루어지는 제제의 세포독성에 대한 상대적 평가를 도시한다.
도 10은 9 mg/ml 농도의 염화나트륨 수용액 내에 상이한 사이클로스포린 A 농도에서 사이클로스포린 A에 대한 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염의 w/w 비에 대한 입자 크기의 의존성을 도시한다.
재료 및 방법
N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합과 함께 제약학적 활성 성분을 포함하는 제제를, 재구성을 위한 특정 용액을 사용하여 상기 레티노일 시스테인산 유도체와 활성 성분의 갓 증발되거나 동결건조된 잔사를 재구성하여 제조할 수 있다.
파클리탁셀, 사이클로스포린 A 및 올-트랜스-레티노산을 Sigma Aldrich Sweden AB로부터 구입하였다. 도세탁셀을 ScinoPharm Taiwan, Ltd.로부터 구입하였다. 익사베필론을 Chemtronica KB, Sweden으로부터 구입하였다. 펜레티나이드를 표준 절차에 따라 합성하였다 (Cancer Research, 39, 1339-1346, April 1979). 탁솔, 탁소테르 및 아브락산을 약국에서 구입하여 제조업자 정보에 따라 재구성하였다.
제제의 입자 크기를 레드 레이저(633 nm)를 사용하여 동적 광산란법에 의하여 측정하였다. 제타(Z)-포텐셜을 전기영동 관산란법에 의하여 측정하였다. Nano-ZS(Malvern Instruments Ltd.)를 사용하여 입자 크기 및 제타-포텐셜을 결정하였다. 세 개의 독립적인 측정의 평균값을 입자 크기 및 제타-포텐셜 습성의 도시화를 위하여 계산하였다. Y-오차 막대를 측정값의 +/- 표준 오차에 의하여 구성한다.
실험실 내 세포독성 평가를 위하여, 상이한 인간 종양 세포주 세포를 American Type Culture Collection(Rockville, Md., USA)으로부터 구입하였다: 인간 유방 선암 세포주 MDA-MB-231(ATCC-HTB-26, Lot 3576799), 인간 난소 선암 세포주 SKOV-3(ATCC-HTB-77, Lot 3038337) 및 인간 비소세포 폐암 세포주 A549(ATCC-CCL-185, Lot 3244171). MDA-MB-231 세포를 2 mM L-글루타민, 10% 소태아혈청(FBS) 및 항생제를 함유하는 MEM 배지에서 증식시켰다. SKOV-3 세포를 1.5 mM L-글루타민, 10% FBS 및 항생제로 보충된 McCoy's 5A 배지 내에서 배양하였다. 모든 배지 및 보충물을 Sigma-Aldrich Co.(St. Louis, Mi., USA)로부터 구입하였다. 모든 세포주의 세포 증식을 BD FalconTM 25 또는 75 cm2 배양 플라스크(Becton Dickinson Labware) 내에서 수행하였다. A549 세포를 1 mM L-글루타민, 10% FBS 및 항생제를 함유하는 Ham's F-12 배지 내에서 배양하였다. 모든 세포주의 세포 증식을 BD FalconTM 25 또는 75 cm2 배양 플라스크 내에서 수행하였다.
부착 세포에 대하여 BD FalconTM 96-웰 배양 플레이트(Becton Dickinson Labware)를 이용하여 세포독성 시험을 수행하였다. 상기 플레이트에 MDA-MB-231에 대해서 8x103 세포/웰, SKOV-3에 대해서 10x103 세포/웰, 또는 A549에 대해서 6x103 세포/웰의 농도로, 200 ㎕/웰의 부피로 세포를 시딩하였다. 플라스크와 배양 플레이트 모두 95% 공기 및 5% CO2의 가습된 분위기에서 37℃에서 세포 성장을 위하여 배양하였다.
상기 배양 플레이트 내 세포 배양액을 24 시간의 배양 시간 동안 부착하도록 하였다. 세포 시딩후 1일에, 적절한 용매 내에 상이한 농도로 시험될 제제 용액 4 ㎕를 배양액과 함께 웰에 첨가하였다 (투여량 - 반응 실험). 대조 배양액에서, 4 ㎕의 용매를 용매 대조군으로서 첨가하였다. 세포를 2~4 연속일 동안 배양하였다. 배양 시기 끝에, 부착 세포를 트립신화하여 분리하고, 생존 세포 수를 트리판 블루 배제 검사 및 혈구계를 이용하여 카운트하였다. 모든 실험을 적어도 3회 수행하였고, 각각 4회 반복으로 3회 측정의 평균으로부터 데이터를 얻었다. 결과를 평균 세포수 ± SE 및 Student's t-test에 의해 측정되는 대조군과 테스트 시리즈 간의 차이로서 나타내었다. 약물 세포독성을 세포 성장 저해 정도에 근거하여 평가하였다. 시험 약물에 의한 세포 성장 저해를 다음과 같이 계산하였다:
세포 성장 저해% = (대조군 - 테스트 시리즈)/대조군 × 100
대조 시리즈에서, 약물 시험에 사용되는 4 ㎕의 상이한 용매를 배양액에 음성 용매 대조군으로서 첨가하였다. 이들 대조 시리즈 간의 차이는 유의하지 않았다; 따라서, 음성 대조군의 평균을 계산에 적용하였다.
파클리탁셀 및 도세탁셀 용액과 이들의 상업적 제제를 양성 대조군으로서 사용하였다. 상이한 용매 내에서 이들 약물에 의한 성장 저해 차이는 유의하지 않았다; 따라서, 양성 대조군의 평균 저해를 계산에 적용하였다.
평균 IC50 ± SE를 적어도 3회 별개 실험을 근거로 계산하였다.
상승팩터(Enhancement factors (EF))를 대조 비교 약물의 IC50를 본 발명의 제제의 IC50로 나누어 계산하였다.
용액의 이온 강도는 용액 내에 존재하는 모든 이온 농도의 함수이다.
Figure pct00001
여기서, CB는 이온 B의 농도이고, ZB는 그 이온의 전하 수이고, 용액 내 전체 이온에 대하여 합계가 구하여진다.
실시예 1
비결정성 파클리탁셀의 제조
메탄올 내 파클리탁셀 저장 용액 12 ml(c=2.5 mg/ml) 및 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 수용액(c=15 mg/ml) 2 ml를 50 ml 둥근 바닥 플라스크 내에서 진공에서 증발 건조시켰다. 메탄올 15 ml를 플라스크에 첨가하여 잔사를 용해시켰다. 얻어진 용액을 증발 건조시켰다. 증발 후 얻어진 필름은 비결정성 파클리탁셀과 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테스르의 나트륨염의 혼합물로 이루어졌다.
실시예 2
비결정성 도세탁셀의 제조
메탄올 내 도세탁셀 저장 용액 27 ml(c=0.5 mg/ml) 및 N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 수용액(c=15 mg/ml) 1 ml를 100 ml 둥근 바닥 플라스크 내에서 혼합하였다. 수득된 용액을 진공에서 증발 건조시켰다; 잔사를 20 ml 메탄올 내에 용해한 후, 진공에서 메탄올을 증발시켰다. 증발 후 얻어진 필름은 비결정성 도세탁셀 및 N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테스르의 나트륨염의 혼합물로 이루어졌다.
실시예 3
N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염의 미셀용액 내 비결정성 파클리탁셀의 용해
물 13 ml 및 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 수용액(c=15 mg/ml) 2 ml를 실시예 1에서 제조된 비결정성 파클리탁셀을 갖는 필름을 함유하는 플라스크에 첨가하였다. 바이얼을 10 분 동안 가볍게 흔들어 상기 파클리탁셀 필름을 완전히 용해시켰다. 수득된 용액은 맑고 투명하였으며, 용해된 파클리탁셀을 2 mg/ml의 농도로 함유하였다. 0.2 ㎛ 필터를 통한 용액을 여과는 파클리탁셀 농도의 감소를 초래하지 않았다.
실시예 4
N-13- 시스 - 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 수용액 내 비결정성 도세탁셀의 용해
물 24.4 ml를실시예 2에서 제조한 비결정성 도세탁셀에 첨가하고, 혼합물을 자석 교반기로 5분 동안 교반하였다. 그 후, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르 나트륨염 수용액(c=15 mg/ml) 2.6 ml를 상기 현탁액에 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 수득된 용액은 맑고 투명하였으며, 0.5 mg/ml의 농도의 용해된 도세탁셀을 함유하였다. 0.2 ㎛ 필터를 통한 용액을 여과는 도세탁셀 농도의 감소를 초래하지 않았다.
실시예 5
N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염과 N-13- 시스 - 레 티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염의 혼합물의 수용액과 파클리탁셀 메탄올 용액의 단계별 혼합에 의한 파클리탁셀 수성 제제의 제조
파클리탁셀 메탄올 용액 10 ml(10 mg/ml)를 자석 교반기로 교반하면서 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(2.5 mg/ml)과 N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(2.5 mg/ml)의 수용액 120 ml를 함유하는 500 ml 둥근 바닥 플라스크 내로 적가하였다. 그 다음, 상기 플라스크, 증발기 및 진공 펌프로 이루어진 폐쇄 진공 시스템의 내부 압력이 70 mbar로 떨어질 때까지 상기 플라스크 내용물을 회전 증발기 상에서 90 rpm 및 욕 온도 45℃로 증발시켰다. 상기한 바와 같은 파클리탁셀 메탄올 용액의 첨가 후 증발을 2회 반복하였다. 첨가된 메탄올 용액의 총 부피는 30 ml였다. 증발 후 남은 수용액을 플라스크로부터 250 ml 측정 실린더 내로 이동시켰다. 상기 플라스크를 5 ml 물로 3회 헹구고, 헹굼 용액을 상기 실린더 내로 부었다. 혼합된 용액에 물을 첨가하여 150 ml의 총부피가 되도록 하였다. 수득된 용액을 0.2 ㎛ 필터를 통하여 여과하고, 동결건조하였다. 수득된 제제 내에 파클리탁셀 농도는 2 mg/ml였다.
실시예 6
N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 수용액과 도세 탁셀 에탄올 용액의 단계별 혼합에 의한 도세탁셀 수성 제제의 제조
95% 에탄올 내 도세탁셀 용액 6 ml(5 mg/ml)를 자석 교반기에 의하여 교반하면서 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 수용액(3 mg/ml) 100 ml를 함유하는 500 ml 둥근 바닥 플라스트 내로 적가하였다. 상기 플라스크, 증발기 및 진공 펌프로 이루어지는 폐쇄 진공 시스템의 내부 압력이 60 mbar로 떨어질 때까지 에탄올의 주요 부분을 회전 증발기 상에서 90 rpm 및 욕 온도 55℃에서 증발시켰다. 상기한 바와 같은 도세탁셀 에탄올 용액 첨가 후 증발을 2회 반복하였다. 첨가된 에탄올 용액의 총 부피는 30 ml였다. 에탄올 증발 후 남은 수용액을 플라스크로부터 250 ml 측정 실린더 내로 옮겼다. 상기 플라스크를 5 ml 물로 3회 헹구고, 상기 헹굼 용액을 상기 실린더 내로 부었다. 물을 상기 혼합된 용액에 첨가하여 총 부피가 150 ml가 되도록 하였다. 0.2 ㎛ 필터를 통한 여과 후, 상기 제제를 동결건조하였다. 수득된 제제 내 도세탁셀 농도는 1 mg/ml였다.
실시예 7
N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염과 N-13- 시스 -레 티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염의 수용액과 도세탁셀 에탄올 용액의 증발 중 혼합에 의한 도세탁셀 수성 제제의 제조
N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테스의 나트륨염(3 mg/ml)과 N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(3 mg/ml)의 수용액 150 ml를 함유하는 1000 ml 둥근 바닥 플라스크를 탁산 알코올 용액 공급을 위한 유입관을 구비하는 회전 증발기에 상기 유입관이 상기 수용액과 접촉하지 않도록 부착시켰다. 증발을 욕 온도 45 ℃ 및 회전 속도 100 rpm으로 개시하였다. 1 분 후, 도세탁셀 메탄올 용액(5 mg/ml) 80 ml를 적가하기 시작하였다 (60 방울/분 또는 3 ml/분). 이와 같은 첨가가 완료된 후, 상기 증발을 5분간 지속하였다. 메탄올 증발후 남은 수용액을 증발 플라스크에서 250 ml 측정 실린더로 옮겼다. 상기 플라스크를 10 ml 물로 3회 헹구고, 상기 헹굼 용액을 실린더 내로 부었다. 상기 혼합 용액에 물을 첨가하여 총 부피 200 ml가 되도록 하였다. 0.2 ㎛ 필터를 통한 여과 후, 상기 제제를 동결건조시켰다. 수득된 제제 내 도세탁셀 농도는 2 mg/ml였다.
실시예 8
9 mg / ml 농도의 염화나트륨 수용액으로 N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염과 파클리탁셀의 갓 증발된 잔사의 재구성에 의하여 형성되 는 제제 내에 N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염/ 파클리 탁셀의 w/w 비에 대한 입자 크기의 의존성 평가
N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸에스테르의 나트륨염/파클리탁셀의 w/w 비 파클리탁셀 농도 0.5 mg/ml 파클리탁셀 농도 1 mg/ml 파클리탁셀 농도 2 mg/ml 파클리탁셀 농도 4 mg/ml
평균 입자 크기
nm		 표준 편차 평균 입자 크기
nm		 표준 편차 평균 입자 크기
nm		 표준 편차 평균 입자 크기
nm		 표준 편차
1.1 27.9 2.0 32.2 1.2 35.7 1.3 40.3 1.1
1.2 21.4 0.6 22.0 1.1 23.5 1.2 25.6 0.8
1.5 13.1 0.6 14.8 0.5 14.9 1.0 15.3 0.7
3.0 12.6 0.3 13.3 0.7 13.8 0.4 14.8 0.5
8.0 11.0 0.5 11.5 0.6 12.8 0.4 13.3 0.3
표 1 및 도 1에 나타나는 바와 같이, 미셀 내에 적재되는 파클리탁셀 양이 감소함에 따라 입자 크기가 감소한다.
실시예 9
도세탁셀 제제의 입자 크기의 염화나트륨 농도에 대한 의존성 평가
도세탁셀과 N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염을 1:1의 w/w 비로 함유하는 동결건조된 분말을 재구성하여 용액을 제조하였다.
NaCl 농도
mg/ml		 도세탁셀 농도
0.5 mg/ml		 도세탁셀 농도
1 mg/ml		 도세탁셀 농도
2 mg/ml		 도세탁셀 농도
4 mg/ml
평균 크기, nm 표준 편차 평균크기 nm 표준편차 평균크기
nm		 표준편차 평균크기
nm		 표준편차
4 7.2 0.7 6.7 0.6 6.4 0.4 5.9 2.5
8 7.8 0.7 8.2 0.7 9.3 1.4 12.7 1.4
12 12.1 1.0 13.4 0.9 14.6 1.0 40.0 4.9
16 17.0 2.3 29.0 4.2 51.3 3.7 82.7 3.7
20 22.4 1.8 39.3 2.8 72.3 3.7 107.7 6.2
24 28.3 4.6 86.0 4.2 108.3 7.5 144.3 9.9
도 2 및 표 2에 나타난 바와 같이, 염화나트륨 농도, 즉 이온 강도가 증가할수록 입자 크기가 커진다.
실시예 10
N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸에스테르의 나트륨염의 그 칼슘염으로의 변경
N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메팅틸 에스테르의 나트륨염 수용액(5 ml, 15 mg/ml)과 염화칼슘 수용액(3 ml, 30 mg/ml)을 10 ml 시험관 내에서 혼합하였다. 혼합 동안, 미세 침전이 발생하였다. 상기 침전물을 3000 rpm에서 10 분동안 시험관을 원심분리하여 분리하였다. 상등액을 제거하고 침전물을 8 ml 물과 함께 흔든 다음, 새로 원심분리하였다. 상기한 바와 같은 3회의 추가적인 세척 절차 후, 상등액을 0.2 ㎛ 필터로 여과하여 생성물의 큰 응집물을 제거하였다. N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 칼슘염의 여과된 용액 내 그 농도에 상응하는 용해도는 상기한 바와 같은 UV 법에 의하여 측정시 0.2 mg/ml였다. 상기 반응을 칼슘 이온뿐 아니라 임의의 다가 금속 이온의 염화물을 수반하는 하기 일반 개략식으로 나타낸다.
Figure pct00002
실시예 11
파클리탁셀 제제의 입자 크기의 염화칼슘 농도에 대한 의존성 평가
파클리탁셀, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 및 N-13-시스 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염을 w/w/w 비 1:1:1로 함유하는 동결 건조된 분말의 재구성에 의하여 용액을 제조하였다. 적절한 양의 염화칼슘 2수화물을 9 mg/ml 농도로 염화나트륨 수용액 내에 용해시킴으로써 재구성을 위한 용매를 제조하였다.
CaCl2의 농도
mmol/l		 파클리탁셀 농도
0.5 mg/ml		 파클리탁셀 농도
1 mg/ml		 파클리탁셀 농도
2 mg/ml
평균입자크기
nm		 표준편차 평균입자크기
nm		 표준편차 평균입자크기
nm		 표준편차
0 12.7 0.4 16.3 1.1 22.1 0.2
2 23.8 1.7 24.6 0.5 27.3 0.2
4 27.4 0.2 30.1 0.4 32.0 0.1
6 51.0 0.6 55.2 5.1 58.6 1.6
표 3 및 도 3에 나타나는 바와 같이, 제제 내 입자의 크기는 CaCl2 농도의 증가와 함께 거의 선형으로 증가한다.
실시예 12
염화나트륨(9 mg / ml ), 염화칼슘(2 mmol /l) 및 염화마그네슘(1 mmol /l)의 수용액 내에 파클리탁셀 , N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 및 N-13- 시스 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염을 w/w/w 비 1:0.75:0.75로 함유하는 동결 건조된 혼합물의 재구성에 의하여 수득되는 제제의 시간 경과에 따른 입자 크기 및 제타- 포텐셜
재구성 후 시간 파클리탁셀 농도
0.5 mg/ml		 파클리탁셀 농도
1 mg/ml		 파클리탁셀 농도
2 mg/ml
평균입자크기 nm 표준 편차 평균입자크기
nm		 표준편차 평균입자크기
nm		 표준편차
0 22.1 0.5 23.5 0.5 25.6 0.8
1 22.7 0.7 24.1 0.8 26.3 0.7
2 23.1 0.5 24.3 0.4 26.2 0.5
4 23 0.4 24.4 0.3 26.6 0.2
8 23.4 0.7 24.0 0.6 27.0 0.4
파클리탁셀 농도
0.5 mg/ml		 파클리탁셀 농도
1 mg/ml		 파클리탁셀 농도
2 mg/ml
재구성 후 시간 제타-포텐셜
mV		 표준 편차 제타-포텐셜
mV		 표준편차 제타-포텐셜
mV		 표준 편차
0 -24.5 1.3 -28.7 1.2 -29.9 1.1
1 -26.3 1.8 -30.1 1.0 -32.7 0.8
2 -25.2 0.4 -30.4 1.0 -30.6 0.5
4 -27.0 0.5 -29.6 0.6 -31.2 0.3
8 -27.1 0.4 -30.4 0.3 -32.4 0.6
표 4~5 및 도 4~5에 나타나는 바와 같이, 8 시간의 제제 저장 동안 입자 크기 및 제타-포텐셜 값의 유의한 변화는 없다.
실시예 13
염화나트륨(9 mg / ml ) 및 염화칼슘(3 mmol /l)의 수용액 내에 도세탁셀 및 N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염을 w/w 비 1:2로 함유하는 동결 건조된 혼합물의 재구성에 의하여 수득되는 제제의 시간 경과에 따른 입자 크기 및 제타- 포텐셜
재구성 후
시간		 도세탁셀 농도
0.5 mg/ml		 도세탁셀 농도
1 mg/ml		 도세탁셀 농도
2 mg/ml
평균입경
nm		 표준 편차 평균입경
nm		 표준편차 평균입경
nm		 표준편차
0 11.9 0.3 12.6 0.2 13.1 0.4
1 12.3 0.3 13.2 0.4 13.4 0.2
2 12.4 0.2 13.0 0.2 13.7 0.4
4 12.2 0.4 12.9 0.1 13.4 0.2
8 12.5 0.3 13.2 0.2 13.8 0.2
재구성 후
시간		 도세탁셀 농도
0.5 mg/ml		 도세탁셀 농도
1 mg/ml		 도세탁셀 농도
2 mg/ml
제타-포텐셜
mV		 표준 편차 제타-포텐셜
mV		 표준편차 제타-포텐셜
mV		 표준 편차
0 -22.2 2.1 -22.6 1.3 -22.8 0.6
1 -23.4 0.9 -22.4 1.2 -24.1 0.8
2 -22.7 0.4 -23.7 0.9 -23.3 0.4
4 -21.9 0.3 -23.1 0.8 -23.1 0.2
8 -21.7 0.6 -23.4 0.6 -23.5 0.5
표 6 ~ 7 및 도 6 ~ 7에 나타난 바와 같이, 8 시간의 제제 저장 동안 입자 크기 및 제타-포텐셜 값에 있어서 유의한 변화는 없다.
실시예 14
비결정성 사이클로스포린 A의 제조
메탄올 내 사이클로스포린 A 저장 용액 50 ml(c=1.0 mg/ml) 및 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염의 수용액 4.2 ml(c=12 mg/ml)를 100 ml 둥근 바닥 플라스크 내에서 진공 증발 건조시켰다. 메탄올 15ml를 상기 플라스크에 첨가하여 잔사를 용해하였다. 수득된 용액을 증발 건조시켰다. 증발 후 수득된 필름은 비결정성 사이클로스포린 A 및 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염으로 이루어졌다.
실시예 15
N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염의 미셀 용액 내에 비결정성 사이클로스포린 A의 용해
물 45.8 ml 및 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염의 수용액 4.2 ml(c=12 mg/ml)를 실시예 14에서 제조된 비결정성 사이클로스포린 A를 갖는 필름을 함유하는 플라스크에 첨가하였다. 바이얼을 10 분 동안 가볍게 흔들어 상기 사이클로스포린 A 필름을 완전히 용해시켰다. 수득된 용액은 맑고 투명하였으며, 사이클로스포린 A를 1 mg/ml의 농도로 함유하였다. 0.2 ㎛ 필터를 통한 용액의 여과는 사이클로스포린 A 농도 감소를 초래하지 않았다.
실시예 16
9 mg / ml 농도의 염화나트륨 수용액을 이용한 N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염과 사이클로스포린 A의 갓 증발된 잔사의 재구성에 의 하여 형성된 제제 내에 N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염/ 사이클로스포린 A의 w/w 비에 대한 입자 크기의 의존성 평가
N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸에스테르의 나트륨염/사이클로스포린 A의 w/w 비 사이클로스포린 A 농도
0.5 mg/ml		 사이클로스포린 A 농도
1 mg/ml		 사이클로스포린 A 농도
2 mg/ml		 사이클로스포린 A 농도
4 mg/ml
평균입자크기
nm		 표준 편차 평균 입자 크기 nm 표준 편차 평균 입자 크기
nm		 표준 편차 평균 입자 크기 nm 표준 편차
1.3 57.3 1.6 63.2 2.2 69.7 2.0 78.0 3.6
1.4 42.2 1.8 46.9 1.8 50.8 1.8 58.8 2.7
1.6 28.6 1.4 30.9 1.7 32.3 1.1 37.8 2.5
2.0 20.2 1.2 22.1 1.1 25.5 0.6 25.9 0.9
8.0 10.4 0.8 11.5 0.4 11.9 0.5 12.9 0.5
표 8 및 도 10에 나타나는 바와 같이, 미셀 내에 적재되는 사이클로스포린 A의 양이 감소함에 따라 입자 크기가 감소한다.
생물학적 평가 - 실시예 17 - 21
실험실 실험은 상이한 고형 종양 세포주 내에 탁산 제제의 활성이 본 발명에 의하여 제공되는 바와 같은 나노입자의 사용에 의하여 더욱 발현됨을 보인다. 또한, 이러한 제제의 세포독성은 상기 나노입자 크기에 매우 의존한다. 본 발명의 약물 전달 시스템 내에 나노입자의 크기가 클수록 세포 내에 탁산 수송이 감소되며, 따라서 세포독성이 감소된다.
파클리탁셀 및 도세탁셀 용액에 대하여 각각의 크기가 25 및 13 nm일 때 최고 활성이 관측되었다: 실험실 실험에 의하면, 노출 3일 째에 상기 제제에 대한 각각 41.7 및 31.7의 상승팩터가 나타났다. 본 실험에서 대조 샘플은 에탄올 용액 내에 탁산을 함유하였다 (나노입자를 함유하지 않음).
본 발명의 탁산 제제와 상업적으로 구입가능한 탁산 제제의 다른 실험실 비교는 본 발명의 제제가 유방 선암, 난소 선암 및 비소세포폐암과 같은 악성 세포주배양액에 대하여 세포독성을 보다 많이 발현함을 보였다.
실시예 17
인간 난소 선암 SKOV3 세포주의 배양액 내에 도세탁셀 - N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13- 시스레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 혼합물(w/w/w = 1:1:1)에 의하여 형성되는 제제의 세포독성에 대한 비교 평가
도세탁셀, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 및 N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염으로 이루어진 동결건조된 분말을 적절한 양의 염화칼슘을 함유하는 염화나트륨 용액(9 mg/ml) 또는 70% 에탄올 내에 용해시켰다. 수득된 용액 표본을 채취하여 평균 입자 크기 측정을 위하여 사용하였다.
용매
 CaCl2 농도
mmol/l		 입자크기
nm		 3일
IC50
EF*
3일		 4일
IC50
EF*
4일		 5일
IC50
EF*
5일
70% EtOH - - 2.0·10-7 - 7.2·10-9 - 7.6·10-10 -
NaCl 용액 0 11.3 1.2·10-7 1.7 7.2·10-9 1 6.5·10-10 1.2
NaCl 용액 1 12.2 3.4·10-8 5.9 5.6·10-9 1.3 4.2·10-10 1.8
NaCl 용액 2 13.1 6.3·10-9 31.7 2.1·10-9 3.4 9.4·10-11 8.1
NaCl 용액 3 14.6 2.0·10-8 10 3.4·10-9 2.1 1.4·10-10 5.4
* 에탄올을 함유한 제제를 EF 계산을 위한 양성 대조군으로 사용하였다.
표 9 및 도 8에 나타나는 바와 같이, 2 mmol/l의 칼슘을 함유하는 제제가 가장 활성이 높다. 다음, 칼슘 농도의 증가 및 감소에 따라 제제의 세포독성이 감소한다.
실시예 18
인간 난소 선암 SKOV3 세포주의 배양액 내에 파클리탁셀 - N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13- 시스레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 혼합물(w/w/w = 1:0.75:.75)에 의하여 형성되는 제제의 세포독성에 대한 비교 평가
파클리탁셀, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 및 N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염으로 이루어진 동결건조된 분말을 적절한 양의 염화칼슘을 함유하는 염화나트륨 용액(9 mg/ml) 또는 70% 에탄올 내에 용해시켰다. 수득된 용액 표본을 채취하여 평균 입자 크기 측정을 위하여 사용하였다.
용매 CaCl2 농도
mmol/l		 입자 크기
nm		 3일
IC50
EF*
3일
 4일
IC50
EF*
4일
 5일
IC50
EF*
5일
70% EtOH - - 5.0·10-6 - 2.1·10-7 - 6.8·10-8 -
NaCl 용액 0 17 3.0·10-6 1.7 1.3·10-7 1.6 5.5·10-8 1.2
NaCl 용액 1 19 1.7·10-6 2.9 8.4·10-8 2.5 9.8·10-9 6.9
NaCl 용액 2 25 1.2·10-7 41.7 2.3 ·10-8 9.1 7.2·10-10 94.0
NaCl 용액 3 29 2.4·10-7 20.8 4.3·10-8 4.9 1.2·10-8 5.7
* 에탄올을 함유하는 제제를 EF 계산을 위한 양성 대조군으로 사용하였다.
표 10 및 도 9에 나타나는 바와 같이, 2 mmol/l의 칼슘을 함유하는 제제가 가장 활성이 높다. 다음, 칼슘 농도의 증가 및 감소에 따라 제제의 세포독성이 감소한다.
실시예 19
인간 유방 선암 MDA - MB -231 세포주 배양액 내 TAXOL ® , ABRAXANE ® 및 파클리탁셀 단독과 " 파클리탁셀 - N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13- 시스 - 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(w/w/w 1:0.75:0.75)" 제제의 세포독성 평가
염화나트륨(6 mg/ml), 염화칼륨(0.3 mg/ml), 염화칼슘 6수화물(0.4 mg/ml), 소디움 락테이트(3.1 mg/ml)를 함유하는 수용액 내에 동결건조된 분말을 용해함으로써 표제의 제제를 제조하였다. 파클리탁셀을 메탄올 용액 내 사용하였다. TAXOL® 및 ABRAXANE® 샘플을 제조업자의 지시에 따라 상업적으로 구입가능한 TAXOL® 농축액(6 mg/ml)을 염화나트륨(9 mg/ml) 용액 내에 희석하고 염화나트륨(9 mg/ml) 용액을 사용하여 동결건조된 알부민-결합 파클리탁셀을 5 mg/ml 파클리탁셀 농도로 재구성하여 제조하였다. 모든 샘플을 제조 후 1 시간 이내에 사용하였다. 파클리탁셀 메탄올 용액에 대한 상승 효과를 계산하였다. 결과를 하기 표 11에 기재한다.
제제 입자크기 nm IC50 3일 EF
3일		 IC50 4일EF
4일
파클리탁셀 - (3.80±0.15)×10-8 - (3.4±0.12)×10-8 -
TAXOL® - (2.04±0.05)×10-8 1.9 (2.0±0.10)×10-8 1.7
ABRAXANE® 130 (4.2±0.09)×10-8 0.9 (3.4±0.16)×10-8 1
파클리탁셀 - N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 24 (4.2±0.14) ×10-9 4.9 (3.2±0.09)×10-9 10.6
실시예 20
인간 유방 선암 MDA - MB -231 세포주 배양액 내 TAXOTERE ® 및 도세탁셀 단독과 " 도세탁셀 - N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13-시스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(w/w/w 1:0.5:0.5)" 제제의 세포독성 평가
염화나트륨(6 mg/ml), 염화칼륨(0.3 mg/ml), 염화칼슘 6수화물(0.4 mg/ml), 소디움 락테이트(3.1 mg/ml)를 함유하는 수용액 내에 동결건조된 분말을 용해함으로써 표제의 제제를 제조하였다. 도세탁셀을 메탄올 용액 내 사용하였다. TAXOTERE® 샘플을 제조업자의 지시에 따라 상업적으로 구입가능한 농축액(40 mg/ml)을 먼저 에탄올 용액으로 10 mg/ml 농도로 희석한 다음 염화나트륨(9 mg/ml) 용액 내에 희석하여 제조하였다. 모든 샘플을 제조 후 1 시간 이내에 사용하였다. 도세탁셀 메탄올 용액에 대한 상승 효과를 계산하였다. 결과를 하기 표 12에 기재한다.
제제 입자크기
nm		 IC50 3일 EF
3일		 IC50 4일 EF4일
4일
도세탁셀 - (1.25±0.11)×10-8 - (1.0±0.1)×10-8 -
TAXOTERE® - (1.08±0.09)×10-8 1.2 (9.60±0.18)×10-9 1.0
도세탁셀 - N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 12 (3.1±0.1)×10-9 4.0 (1.2±0.1)×10-9 8.3
실시예 21
인간 난소 선암 SKOV -3 세포주 배양액 내 TAXOL ® , ABRAXANE ® 및 파클리탁셀 단독과 " 파클리탁셀 - N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13- 시스 - 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(w/w/w 1:0.75:0.75)" 제제의 세포독성 평가
염화나트륨(6 mg/ml), 염화칼륨(0.3 mg/ml), 염화칼슘 6수화물(0.4 mg/ml), 소디움 락테이트(3.1 mg/ml)를 함유하는 수용액 내에 동결건조된 분말을 용해함으로써 표제의 제제를 제조하였다. 파클리탁셀을 메탄올 용액 내 사용하였다. TAXOL® 및 ABRAXANE® 샘플을 제조업자의 지시에 따라 상업적으로 구입가능한 TAXOL® 농축액(6 mg/ml)을 염화나트륨(9 mg/ml) 용액 내에 희석하고 염화나트륨(9 mg/ml) 용액을 사용하여 동결건조된 알부민-결합 파클리탁셀을 5 mg/ml 파클리탁셀 농도로 재구성하여 제조하였다. 모든 샘플을 제조 후 1 시간 이내에 사용하였다. 파클리탁셀 메탄올 용액에 대한 상승 효과를 계산하였다. 결과를 하기 표 13에 기재한다.
제제 입자크기
nm		 IC50 3일 EF
3일		 IC50 4일 EF
4일
4일
파클리탁셀 - (5.94±0.21)×10-7 - (6.22±0.18)×10-8 -
TAXOL® - (3.24±0.16)×10-7 1.8 (4.20±0.25)×10-8 1.5
ABRAXANE® 130 (6.3±0.32)×10-7 0.94 (6.5±0.30)×10-8 0.96
파클리탁셀 - N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 24 (2.05±0.08)×10-7 2.3 (2.17±0.15)×10-9 2.9
실시예 22
인간 난소 선암 SKOV -3 세포주 배양액 내 TAXOTERE ® 및 도세탁셀 단독과 "도세탁셀 - N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13- 시스 - 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(w/w/w 1:0.5:0.5)" 제제의 세포독성 평가
염화나트륨(6 mg/ml), 염화칼륨(0.3 mg/ml), 염화칼슘 6수화물(0.4 mg/ml), 소디움 락테이트(3.1 mg/ml)를 함유하는 수용액 내에 동결건조된 분말을 용해함으로써 표제의 제제를 제조하였다. 도세탁셀을 메탄올 용액 내 사용하였다. TAXOTERE® 샘플을 제조업자의 지시에 따라 상업적으로 구입가능한 농축액(40 mg/ml)을 먼저 에탄올 용액으로 10 mg/ml 농도로 희석한 다음 염화나트륨(9 mg/ml) 용액 내에 희석하여 제조하였다. 모든 샘플을 제조 후 1 시간 이내에 사용하였다. 도세탁셀 메탄올 용액에 대한 상승 효과를 계산하였다. 결과를 하기 표 14에 기재한다.
제제 입자크기
nm		 IC50 3일 EF
3일		 IC50 4일 EF4일
4일
도세탁셀 - (9.07±0.38)×10-8 - (2.85±0.26)×10-8 -
TAXOTERE® - (1.18±0.09)×10-7 0.8 (2.03±0.15)×10-8 1.4
도세탁셀 - N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 12 (3.24±0.18)×10-8 2.8 (2.86±0.13)×10-9 10.0
실시예 23
인간 비소세포폐암 세포주 A549 배양액 내 TAXOL ® , ABRAXANE ® 및 파클리탁셀 단독과 " 파클리탁셀 - N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트 륨염 - N-13- 시스 - 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(w/w/w 1:0.75:0.75)" 제제의 세포독성 평가
염화나트륨(6 mg/ml), 염화칼륨(0.3 mg/ml), 염화칼슘 6수화물(0.4 mg/ml), 소디움 락테이트(3.1 mg/ml)를 함유하는 수용액 내에 동결건조된 분말을 용해함으로써 표제의 제제를 제조하였다. 파클리탁셀을 메탄올 용액 내 사용하였다. TAXOL® 및 ABRAXANE® 샘플을 제조업자의 지시에 따라 상업적으로 구입가능한 TAXOL® 농축액(6 mg/ml)을 염화나트륨(9 mg/ml) 용액 내에 희석하고 염화나트륨(9 mg/ml) 용액을 사용하여 동결건조된 알부민-결합 파클리탁셀을 5 mg/ml 파클리탁셀 농도로 재구성하여 제조하였다. 모든 샘플을 제조 후 1 시간 이내에 사용하였다. 파클리탁셀 메탄올 용액에 대한 상승 효과를 계산하였다. 결과를 하기 표 15에 기재한다.
제제 입자크기
nm		 IC50 3일 EF
3일		 IC50 4일 EF
4일
4일
파클리탁셀 - (8.02±0.11)×10-9 - (5.28±0.13)×10-9 -
TAXOL® - (6.49±0.08)×10-9 1.2 (3.77±0.09)×10-9 1.4
ABRAXANE® 130 (1.2±0.06)×10-8 0.67 (5.2±0.15)×10-9 1
파클리탁셀 - N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 24 (1.61±0.11)×10-9 5.0 (7.02±0.12)×10-10 7.5
실시예 24
인간 비소세포폐암 세포주 A549 배양액 내 TAXOTERE ® 및 도세탁셀 단독과 "도세탁셀 - N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13-시 스 - 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(w/w/w 1:0.5:0.5)" 제제의 세포독성 평가
염화나트륨(6 mg/ml), 염화칼륨(0.3 mg/ml), 염화칼슘 6수화물(0.4 mg/ml), 소디움 락테이트(3.1 mg/ml)를 함유하는 수용액 내에 동결건조된 분말을 용해함으로써 표제의 제제를 제조하였다. 도세탁셀을 메탄올 용액 내 사용하였다. TAXOTERE® 샘플을 제조업자의 지시에 따라 상업적으로 구입가능한 농축액(40 mg/ml)을 먼저 에탄올 용액으로 10 mg/ml 농도로 희석한 다음 염화나트륨(9 mg/ml) 용액 내에 희석하여 제조하였다. 모든 샘플을 제조 후 1 시간 이내에 사용하였다. 도세탁셀 메탄올 용액에 대한 상승 효과를 계산하였다. 결과를 하기 표 16에 기재한다.
제제 입자크기
nm		 IC50 3일 EF
3일		 IC50 4일 EF4일
4일
도세탁셀 - (5.76±0.26)×10-9 - (4.97±0.27)×10-9 -
TAXOTERE® (4.81±0.34)×10-9 1.2 (4.63±0.17)×10-9 1.1
도세탁셀 - N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 12 (9.14±0.47)×10-10 6.3 (5.35±0.15)×10-10 7.9
실시예 25: 래트 내에 " 파클리탁셀 - N-올-트랜스- 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13- 시스 - 레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(w/w/w/ 1:0.75:0.75)" 제제의 1개월 독성 연구
파클리탁셀 - N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(w/w/w/ 1:0.75:0.75)의 동결 건조된 혼합물을 식염수 내 재구성하여 시험 제제를 제조하였다. 80 마리의 Wistar 래트(BRLHan:Wist@Mol (GALAS))(40 마리 수컷과 40 마리 암컷)를 각각 10 마리의 수컷과 10 마리의 암컷의 4 군으로 나누었다. 시험 제제를 일주일에 한번 5주에 걸쳐서 정맥 주사에 의하여 투여하였다. 1 군은 식염수를 투여받은 대조군이며, 2 군에 폴리옥시에틸화 피마자유를 함유하는 파클리탁셀 제제를(Taxol) 5 mg/kg을 투여하였으며, 3 군에 5 mg/kg의 표제 제제를 투여하였으며, 4 군에 10 mg/kg의 표제 제제를 투여하였다. 본래, 본 연구는 군 2을 군 4에 대한 직접 비교로서 10 mg/kg Taxol을 투여하도록 고안되었으나, 치사로 인하여 군 3과의 직접 비교가 더욱 적절하도록 투여량을 5 mg/kg으로 줄였다. 본 연구 동안 8 마리가 사망하였다. 10 mg/kg Taxol을 투여받은 7 마리 래트는 최초 투여 직후 사망하였다. 이들 중 다섯 마리 래트는 여분으로 대체되었으며, 투여량을 5 mg/kg으로 줄였다. 군 2, 3 및 4에서 암컷의 경우, 적혈구 파라미터(Hb, RBC and HT)의 평균값이 대조군보다 낮았다. 수컷에서는 유사한 변화가 나타나지 않았으나, 군 2의 수컷에서 적혈구 지수 MCV 값이 상승되었다. 처리 동물에서 백혈구, 특히 호중구, 림프구, 호산구, 및 수컷에서 단핵구에 대한 평균값이 대조군보다 낮았다. 군 4의 수컷과 군 2및 4의 암컷에서 평균 혈청 빌리루빈 값은 대조군보다 높았다. 군 2(Taxol)의 암컷에 대한 빌리루빈은 군 3의 수컷보다 현저히 높았다. 군 2 및 4의 수컷에서 간 무게는 대조군보다 낮았다. 군 4의 수컷과 암컷 및 군 2의 수컷에서 흉선 무게는 대조군보다 현저히 낮았다. 군 4의 비장, 장간막- 및 하악 림프절에서 최소 내지 경미한 림프구위축 발생이 상대적으로 높게 기록되었다. 군 2 및 3의 비장에서 최소 내지 경미한 림프구위축 발생이 낮게 기록되었다. 군 2 수컷에서 비장의 림프구위축 발생이 약간 더 높았다. 군 2의 장간막- 및 하악 림프절에서 최소 내지 경미한 림프구위축 발생이 낮게 기록되었다. 군 2의 모든 수컷에서 최소 내지 경미한 피질 림프구용해(cortical lymphocytolysis) 증가가 기록되었다. 군 2 및 4의 수컷의 유선에서, 최소의 다병소성 분비액포 감소/폐포의 저형성증의 발생이 대조군과 군 3에 비하여 높게 기록되었다. 모든 처리군의 수컷의 대략 절반에서 유선 점막 내 분열상/세포자살체 발생 증가가 기록되었다.
본 실시예는 "파클리탁셀 - N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염(w/w/w 1:0.75:0.75)" 나노입자 제제가 동일한 농도의 폴리옥시에틸화 피마자유를 함유하는 통상적인 파클리탁셀 제제에 비하여 낮은 독성을 가짐을 입증한다.
실시예 26
폴리옥시에틸화 피마자유를 함유하는 통상적인 파클리탁셀 제제(Taxol)에 대한 "파클리탁셀 - N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염" 나노입자 제제의 이점. 주요 결과 및 결론을 표 17에 요약한다.
파클리탁셀 제제의 비교 (조직학적으로 증명된 고형 악성 종양 질환을 가지며 어떠한 표준 치료법도 유효하지 않았거나 실패한 34명의 환자의 치료 연구에 따른 표제 제제에 대한 셋업 및 결과; Taxol에 대한 정보는 BMS PI Rev July 2007에 따름)
파클리탁셀 - N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 - N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염 파클리탁셀 - 폴리옥시에틸화 피마자유
투여량 수준/m2 250 175
스테로이드, 구토방지제, 항히스타민제 예비투약 없음 있음
과민증 및
심각한 과민반응		 없음 (예비투약 없음) 5% (모든 환자에 예비투약함)
주입 시간 1 시간 3 시간
본 발명은 현재까지 본 발명자들에게 알려진 최상의 방식을 포함하는 특정 실시예에 대하여 기재되었으나, 첨부하는 특허청구범위에 기재된 본 발명의 범위로부터 이탈됨이 없이 당업자에게 자명한 다양한 변화 및 변경이 가능한 것으로 이해되어야 할 것이다.

Claims (31)

  1. 약 100 ㎍/ml 미만의 물 내 자체 용해도를 가지며 약 100 nm 미만의 유효 평균 입자 크기를 갖는 미립자 형태인 적어도 하나의 제약학적 활성 물질의 투여를 위한 약물 전달 시스템으로서,
    - 상기 물질 입자는 본질적으로 비결정성이고;
    - 상기 물질 입자는 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합으로 이루어지는 나노입자 내에 포획되고;
    - 상기 물질에 대한, 상기 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산의 메틸 에스테르 또는 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산의 메틸 에스테르 또는 나트륨염, 또는 이들의 조합의 중량 대 중량비는 약 0.5:1 내지 약 20:1의 범위인 것을 특징으로 하는 약물 전달 시스템.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 물질 입자는 약 50 nm 미만의 유효 평균 입자 크기를 갖는 것을 특징으로 하는 약물 전달 시스템.
  3. 청구항 1 또는 2에 있어서, 상기 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합 대 상기 물질의 중량 대 중량비는 약 1:1 내지 약 10:1의 범위인 것을 특징으로 하는 약물 전달 시스템.
  4. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 물질은 세포독성 또는 세포 증식 억제성 화합물인 것을 특징으로 하는 약물 전달 시스템.
  5. 청구항 4에 있어서, 상기 세포독성 또는 세포 증식 억제성 화합물은 탁산인 것을 특징으로 하는 약물 전달 시스템.
  6. 청구항 5에 있어서, 상기 탁산은 파클리탁셀, 도세탁셀 및 이들의 유도체 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 약물 전달 시스템.
  7. 청구항 4 내지 6 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약물 전달 시스템은 암 치료용인 약물 전달 시스템.
  8. 청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 있어서, 상기 물질은 면역 억제제인 것을 특징으로 하는 약물 전달 시스템.
  9. 청구항 8에 있어서, 상기 면역 억제제는 사이클로스포린, 시로리무스, 타크로리무스 및 이들의 유도체 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 약물 전달 시스템.
  10. 청구항 8 내지 10 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약물 전달 시스템은 동종이형 기관 이식 후 사용하기 위한 약물 전달 시스템.
  11. 청구항 1 내지 10 중 어느 한 항에 따른 약물 전달 시스템 및 제약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 제약학적 조성물.
  12. 청구항 4 내지 7 중 어느 한 항에 따른 약물 전달 시스템 및 제약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 제약학적 조성물.
  13. 청구항 8 내지 10 중 어느 한 항에 따른 약물 전달 시스템 및 제약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 제약학적 조성물.
  14. 청구항 11 내지 13 중 어느 한 항에 있어서, 수용액, 겔, 크림, 연고, 정제, 캡슐 또는 소프트겔 형태인 제약학적 조성물.
  15. 청구항 1 내지 10 중 어느 한 항에 따른 약물 전달 시스템의 제조를 위한, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합의 이용.
  16. N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합, 및 약 100 ㎍/ml 미만의 물 내 자체 용해도를 갖는 적어도 하나의 제약학적 활성 물질로 이루어지는 나노입자를 포함하는 약물 전달 시스템의 제조 방법으로서,
    - 상기 물질을 약 100 nm 미만의 유효 평균 입자 크기를 갖는 본질적으로 비결정성 입자 형태로 제공하고;
    - 상기 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합 대 상기 물질의 중량 대 중량비를 약 0.5:1 내지 약 20:1의 범위로 조절함으로써, 상기 나노입자의 크기를 약 100 nm 미만의 유효 평균 입자 크기를 갖도록 조절하는, 약물 전달 시스템의 제조 방법.
  17. N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합, 및 약 100 ㎍/ml 미만의 물 내 자체 용해도를 갖는 적어도 하나의 제약학적 활성 물질로 이루어지는 나노입자의 입자 크기 및/또는 입자 형태 및/또는 입도 분포를 조절하는 방법으로서,
    - 상기 물질을 약 100 nm 미만의 유효 평균 입자 크기를 갖는 본질적으로 비결정성 입자 형태로 제공하고;
    - 상기 물질에 대한, 상기 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합의 중량 대 중량비를 약 0.5:1 내지 약 20:1의 범위로 조절함으로써, 상기 나노입자의 입자 크기 및/또는 입자 형태 및/또는 입도 분포를 조절하는 방법.
  18. 약물 전달 시스템의 제조 과정에서, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합, 및 약 100 ㎍/ml 미만의 물 내 자체 용해도를 갖는 적어도 하나의 제약학적 활성 물질로 이루어지는 나노입자의 입자 크기를 조절하는 방법으로서,
    - 상기 물질을 약 100 nm 미만의 유효 평균 입자 크기를 갖는 본질적으로 비결정성 입자 형태로 제공하고;
    - 상기 본질적으로 비결정성 입자를 적어도 하나의 이온화 염을 함유하는 이온 강도 I를 갖는 수용액 내에 제공하고;
    - I를 증가시킴으로써 상기 나노입자의 입자 크기를 증가시키거나, I를 감소시킴으로써 상기 나노입자의 입자 크기를 감소시키는, 나노입자의 입자 크기를 조절하는 방법.
  19. 약물 전달 시스템의 제조 과정에서, N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합으로 이루어지는 나노입자, 및 약 100 ㎍/ml 미만의 물 내 자체 용해도를 갖는 적어도 하나의 제약학적 활성 물질의 약물 부하 용량을 증가시키는 방법으로서,
    - 상기 물질을 약 100 nm 미만의 유효 평균 입자 크기를 갖는 본질적으로 비결정성 입자 형태로 제공하고;
    - 상기 물질에 대한, 상기 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합의 중량 대 중량비를 약 0.5:1 내지 약 20:1의 범위로 조절함으로써 약물 부하 용량을 증가시키는 방법.
  20. 청구항 16 내지 19 중 어느 한 항에 있어서, 상기 물질은 약 100 nm 미만의 유효 평균 입자 크기를 갖는 본질적으로 비결정성 입자 형태로 제공되고,
    상기 방법은
    - 상기 물질을 적절한 유기 용매 내에 용해시켜 상기 물질의 유기 용액을 제공하는 단계;
    - 약 0.01~3 몰 당량의 N-올-트랜스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, N-13-시스-레티노일 시스테인산 메틸 에스테르의 나트륨염, 또는 이들의 조합을 상기 유기 용액에 첨가하는 단계; 및
    - 상기 유기 용액으로부터 상기 유기 용매를 증발시켜 본질적으로 비결정성 입자 형태인 제약학적 활성 물질을 포함하는 잔사를 제공하는 단계를 포함하는 방법.
  21. 청구항 16 또는 21에 따른 방법에 의하여 얻어지는 약물 전달 시스템.
  22. 청구항 21에 따른 약물 전달 시스템 및 제약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 제약학적 조성물.
  23. 청구항 22에 있어서, 수용액, 겔, 크림, 연고, 정제, 캡슐 또는 소프트겔 형태의 제약학적 조성물.
  24. 암 치료용 약제 제조를 위한 청구항 4 내지 7 또는 21 중 어느 한 항에 따른 약물 전달 시스템의 이용.
  25. 청구항 12에 따른 제약학적 조성물이 암 치료를 요하는 환자에게 치료학적 유효량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 암 치료 방법.
  26. 암 치료용 약제 제조를 위한 청구항 12에 따른 제약학적 조성물의 이용.
  27. 청구항 4 내지 7 중 어느 한 항에 따른 약물 전달 시스템이 암 치료를 요하는 환자에게 치료학적 유효량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 암 치료 방법.
  28. 동종이형 기관 이식 후 사용을 위한 약제를 제조하기 위한 청구항 8 내지 10 또는 21 중 어느 한 항에 따른 약물 전달 시스템의 이용.
  29. 청구항 13에 따른 제약학적 조성물이 치료를 요하는 환자에게 치료학적 유효량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 동종이형 기관 이식 후 치료 방법.
  30. 동종이형 기관 이식 후 사용을 위한 약제를 제조하기 위한 청구항 13에 따른 제약학적 조성물의 이용.
  31. 청구항 8 내지 10 중 어느 한 항에 따른 약물 전달 시스템이 치료를 필요로 하는 환자에게 치료학적 유효량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 동종이형 기관 이식 후 치료 방법.
KR1020107015610A 2007-12-19 2008-12-18 물에 난용성인 제약학적 활성 물질의 투여를 위한 약물 전달 시스템 KR101572703B1 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/SE2007/001127 WO2009078754A1 (en) 2007-12-19 2007-12-19 Drug delivery system for administration of poorly water soluble pharmaceutically active substances
SEPCT/SE2007/001127 2007-12-19

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20100094575A true KR20100094575A (ko) 2010-08-26
KR101572703B1 KR101572703B1 (ko) 2015-11-27

Family

ID=40795732

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020107015610A KR101572703B1 (ko) 2007-12-19 2008-12-18 물에 난용성인 제약학적 활성 물질의 투여를 위한 약물 전달 시스템

Country Status (27)

Country Link
US (4) US8999382B2 (ko)
EP (1) EP2231189B1 (ko)
JP (1) JP5466172B2 (ko)
KR (1) KR101572703B1 (ko)
CN (1) CN101951956B (ko)
AU (1) AU2008339099B2 (ko)
BR (1) BRPI0821740B1 (ko)
CA (1) CA2709266C (ko)
CY (2) CY1119805T1 (ko)
DK (1) DK2231189T3 (ko)
EA (1) EA015247B1 (ko)
ES (1) ES2650242T3 (ko)
FR (1) FR19C1030I1 (ko)
HR (1) HRP20171796T1 (ko)
HU (1) HUE034684T2 (ko)
LT (2) LT2231189T (ko)
LU (1) LUC00117I2 (ko)
MX (1) MX2010006914A (ko)
MY (2) MY157187A (ko)
NL (1) NL300987I9 (ko)
NO (2) NO2231189T3 (ko)
NZ (1) NZ586859A (ko)
PL (1) PL2231189T3 (ko)
PT (1) PT2231189T (ko)
SI (1) SI2231189T1 (ko)
WO (2) WO2009078754A1 (ko)
ZA (1) ZA201004685B (ko)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009078756A1 (en) 2007-12-19 2009-06-25 Ardenia Investments, Ltd. Drug delivery system for administration of a water soluble, cationic and amphiphilic pharmaceutically active substance
WO2009078754A1 (en) * 2007-12-19 2009-06-25 Ardenia Investments, Ltd. Drug delivery system for administration of poorly water soluble pharmaceutically active substances
WO2009078755A1 (en) 2007-12-19 2009-06-25 Ardenia Investments, Ltd. Drug delivery system for administration of a water soluble, cationic and amphiphilic pharmaceutically active substance
MX2011011134A (es) * 2009-04-21 2012-01-31 Selecta Biosciences Inc Agentes inmunonanoterapeuticos que proporcionan una respuesta sesgada hacia th1.
MX2012013713A (es) 2010-05-26 2013-01-28 Selecta Biosciences Inc Composiciones de nanovehiculos con adyuvante no acoplado.
US9994443B2 (en) 2010-11-05 2018-06-12 Selecta Biosciences, Inc. Modified nicotinic compounds and related methods
CN103908432B (zh) * 2013-01-02 2018-09-21 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 一种伊沙匹隆白蛋白的冻干组合物及其制备方法
CN112239418B (zh) * 2019-07-18 2023-07-07 上海现代药物制剂工程研究中心有限公司 视黄醇类化合物及其钠盐的制备方法
CN112321465B (zh) * 2019-07-18 2023-06-06 上海现代药物制剂工程研究中心有限公司 一种含苯基化合物、其中间体、制备方法及应用
WO2021259472A1 (en) * 2020-06-24 2021-12-30 Oasmia Pharmaceutical Ab Micellar docetaxel for use in the treatment of cancer

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6096331A (en) * 1993-02-22 2000-08-01 Vivorx Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions useful for administration of chemotherapeutic agents
DE19839566C2 (de) * 1998-08-31 2002-01-17 Fumapharm Ag Muri Verwendung von Fumarsäurederivaten in der Transplantationsmedizin
US6197809B1 (en) * 1998-12-23 2001-03-06 Ardenia Investments Ltd. Compounds for the treatment of cancer
US6656504B1 (en) * 1999-09-09 2003-12-02 Elan Pharma International Ltd. Nanoparticulate compositions comprising amorphous cyclosporine and methods of making and using such compositions
SE0101702D0 (sv) * 2001-05-15 2001-05-15 Ardenia Investments Ltd Novel potentiating compounds
US20050191359A1 (en) * 2001-09-28 2005-09-01 Solubest Ltd. Water soluble nanoparticles and method for their production
US20050249786A1 (en) * 2001-09-28 2005-11-10 Solubest Ltd. Hydrophilic dispersions of nanoparticles of inclusion complexes of amorphous compounds
SE0202311D0 (sv) * 2002-07-23 2002-07-23 Ardenia Investments Ltd Novel compounds, cytotoxic preparations comprising said compounds, methods of manufacture of said preparations, as well as methods of treatment
CN100360502C (zh) * 2002-07-23 2008-01-09 阿登尼亚投资有限公司 视黄醇衍生物、它们在治疗癌症和增强其它细胞毒性剂功效中的应用
US7259984B2 (en) * 2002-11-26 2007-08-21 Cornell Research Foundation, Inc. Multibit metal nanocrystal memories and fabrication
JP2006199590A (ja) 2003-09-04 2006-08-03 Nano Career Kk 水溶性の塩基性薬物内包ナノ粒子含有組成物
US20050196343A1 (en) 2004-02-27 2005-09-08 Molecular Therapeutics, Inc. Degradable nanoparticles
US7871632B2 (en) 2004-07-12 2011-01-18 Adventrx Pharmaceuticals, Inc. Compositions for delivering highly water soluble drugs
US8945629B2 (en) * 2004-09-10 2015-02-03 University Of Wyoming Nanoparticles for cytoplasmic drug delivery to cancer cells
ES2719093T3 (es) * 2005-08-31 2019-07-08 Abraxis Bioscience Llc Composiciones de fármacos poco solubles en agua con mayor estabilidad y métodos para su preparación
WO2009078754A1 (en) 2007-12-19 2009-06-25 Ardenia Investments, Ltd. Drug delivery system for administration of poorly water soluble pharmaceutically active substances
WO2009078756A1 (en) 2007-12-19 2009-06-25 Ardenia Investments, Ltd. Drug delivery system for administration of a water soluble, cationic and amphiphilic pharmaceutically active substance
WO2009078755A1 (en) 2007-12-19 2009-06-25 Ardenia Investments, Ltd. Drug delivery system for administration of a water soluble, cationic and amphiphilic pharmaceutically active substance

Also Published As

Publication number Publication date
FR19C1030I1 (fr) 2019-06-21
WO2009078802A1 (en) 2009-06-25
EA200802350A3 (ru) 2009-10-30
ZA201004685B (en) 2011-03-30
SI2231189T1 (en) 2018-03-30
LUC00117I2 (ko) 2024-05-22
NZ586859A (en) 2012-06-29
CA2709266C (en) 2017-09-26
LT2231189T (lt) 2017-12-27
US8999382B2 (en) 2015-04-07
EP2231189A4 (en) 2013-10-09
US20110014281A1 (en) 2011-01-20
PT2231189T (pt) 2017-12-12
CN101951956B (zh) 2012-10-17
US20150164819A1 (en) 2015-06-18
LTPA2019508I1 (lt) 2019-05-10
HRP20171796T1 (hr) 2018-01-26
BRPI0821740B1 (pt) 2021-05-18
DK2231189T3 (en) 2017-12-11
EP2231189B1 (en) 2017-09-06
MY157186A (en) 2016-05-13
JP2011507838A (ja) 2011-03-10
KR101572703B1 (ko) 2015-11-27
BRPI0821740A2 (pt) 2020-02-27
NO2231189T3 (ko) 2018-02-03
CN101951956A (zh) 2011-01-19
ES2650242T3 (es) 2018-01-17
PL2231189T3 (pl) 2018-03-30
AU2008339099A1 (en) 2009-06-25
USRE49742E1 (en) 2023-12-05
WO2009078754A1 (en) 2009-06-25
EA200802350A2 (ru) 2009-06-30
USRE49741E1 (en) 2023-12-05
CA2709266A1 (en) 2009-06-25
CY2019021I1 (el) 2019-11-27
HUE034684T2 (en) 2018-02-28
NO2019023I1 (no) 2019-05-08
NL300987I2 (ko) 2019-05-09
CY1119805T1 (el) 2018-06-27
NL300987I9 (nl) 2019-05-16
EA015247B1 (ru) 2011-06-30
EP2231189A1 (en) 2010-09-29
JP5466172B2 (ja) 2014-04-09
CY2019021I2 (el) 2019-11-27
AU2008339099B2 (en) 2015-08-13
US9993438B2 (en) 2018-06-12
MX2010006914A (es) 2010-11-10
MY157187A (en) 2016-05-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
USRE49741E1 (en) Drug delivery system for administration of poorly water soluble pharmaceutically active substances
RU2451510C2 (ru) Композиции и способы получения слаборастворимых в воде лекарственных средств с увеличенной стабильностью
EP1928435B1 (en) Compositions of poorly water soluble drugs with increased stability and methods for preparation thereof
ES2435944T3 (es) Nuevas formulaciones de agentes farmacológicos, métodos para su preparación y métodos para su uso
KR20140027554A (ko) 약리학적 물질의 조성물 및 그 전달방법
KR20110056042A (ko) 종양세포 표적지향을 위한 나노 입자 및 이의 제조방법
JP5466174B2 (ja) 水溶性、カチオン性および両親媒性の薬学的に活性な物質を投与するためのドラッグ・デリバリー・システム
RU2522977C2 (ru) Композиции и способы доставки фармакологических агентов
UA96273C2 (uk) Композиція доцетакселу і цитрату для лікування раку

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant