KR20100042184A - 작물생장 촉진과 식물병해에 대한 유도물질을 생산하는 미생물 버커홀더리아 파이로시니아 ｋ87, 그 분리방법, 이를 이용한 제제 및 그 제제를 이용한 작물의 병해억제에 의한 생육촉진방법 - Google Patents

작물생장 촉진과 식물병해에 대한 유도물질을 생산하는 미생물 버커홀더리아 파이로시니아 ｋ87, 그 분리방법, 이를 이용한 제제 및 그 제제를 이용한 작물의 병해억제에 의한 생육촉진방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 작물의 생장 촉진과 식물병해에 대한 유도물질을 생산하는 미생물 버커홀더리아 파이로시니아(Burkholderia pyrrocinia) K87에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 작물에 저항성을 유도하여 식물병의 시들음병, 탄저병, 깨씨무늬병, 잿빛곰팡이병 및 무름병에 대한 억제효과를 나타내고 파이로니트린을 생산하는 버커홀더리아 파이로시니아(Burkholderia pyrrocinia) K87 균주와, 그 균주의 분리방법, 그 균주를 유효성분으로 하는 제제 및 이를 이용한 작물의 생장촉진과 식물병해 억제 방법에 관한 것이다.
버커홀더리아 파이로시니아 K87, K87 EPS, 식물병해, 작물생장, 미생물

Description

작물생장 촉진과 식물병해에 대한 유도물질을 생산하는 미생물 버커홀더리아 파이로시니아 Ｋ87, 그 분리방법, 이를 이용한 제제 및 그 제제를 이용한 작물의 병해억제에 의한 생육촉진방법{Burkholderia pyrrocinia K87 PROMOTING THE GROWTH OF CROPS AND PROUDING INDUCING SUBSTANCE ABOUT PLANT DISEASE DAMAGE AND METHOD FOR PROMOTING THE GROWTH OF CROPS USING IT}
본 발명은 작물생장 촉진과 식물병해에 대한 유도물질을 생산하는 미생물 버커홀더리아 파이로시니아(Burkholderia pyrrocinia) K87 균주, 그 분리방법, 그 균주를 이용한 제제 및 이를 이용한 작물의 병해억제에 의한 생육촉진방법에 관한 것이다.
작물에는 다양한 병원균이 발생하여 작물생산량에 막대한 피해를 주고 있으며, 이를 방제하기 위하여 2007년 세계적으로 330억달러의 화학농약이 판매되었으며, 국내에는 2007년 한국작물보호협회에 따르면 23,000톤이 사용되었다. 이러한 화학합성농약의 사용량은 12.4kg/ha로 OECD국가 중 일본 다음으로 높은 수준이며, 이러한 화학합성농약의 사용은 병원균의 화학합성농약에 대한 저항성 획득에 의해, 사용량의 증가 및 새로운 화학농약의 사용을 유발하고, 토양, 작물, 수중에 잔류하여 오염 및 생태계교란 등의 여러 가지 문제를 야기하며, 또한 화학합성농약 사용에 따른 사용자 중독사고의 위험이 계속해서 증대되고 있다.
이와 더불어 화학비료의 사용 역시 2007년 631,000톤이 사용되었으며 340kg/ha로 타 국가에 비해 사용량이 매우 높은 것이다. 이러한 화학합성농약 및 화학비료의 사용량을 감축하기 위해 정부에서는 친환경농업확산 및 환경친화형 농약개발 및 토양개량제등을 통해 2013년 까지 화학합성농약 및 화학비료의 사용량을 감축할 목표를 세웠다.
이러한 화학합성농약과 화학비료의 문제점을 해소하기 위하여, 미생물 및 그 추출물을 이용한 다양한 연구들이 있었으며 2002년 한국과학기술정보연구원의 "바이오 농약" 보고서에 의하며 국내의 생물농약시장은 다음의 표 1과 같다.
표 1: 생물농약시장(단위:백만원)
연도 계 BT제 미생물제제(추정) 천적 페로몬
살충제 살균제 제초제
1998 2,813 1,513 300 1,000 - - -
2000 7,682 2,358 800 3,000 - 100 -
2005 11,100 3,500 1,300 6,000 - 300 -
2010 19,300 5,000 3,000 10,000 700 500 100
또한 국내에 2008년 7월까지 등록되어 있는 생물농약은 표 2에서 제시하고 있는 바와 같이, 30개 제품으로, 이중 살균제 15개, 살충제 14개 제초제로 구성되 어 있다.
표 2: 생물농약
번호 용도 구분 농약 품목명
1 살균 수입 바실루스서브틸리스와이1336 수화제
2 바실루스서브틸리스큐에스티713 수화제
3 바실루스서브틸리스큐에스티713 액상수화제
4 바실루스푸밀루스큐에스티2808 액상수화제
5 제조 바실루스서브틸리스디비비1501 수화제
6 바실루스서브틸리스디비비1501 입제
7 바실루스서브틸리스제이케이케이238 액상제
8 바실루스서브틸리스지비365 수화제
9 바실루스서브틸리스지비365 액상수화제
10 바실루스서브틸리스케이비401 유상현탁제
11 바실루스서브틸리스케이비시1010 수화제
12 스트렙토마이세스고시키엔시스더블유와이이324 액제
13 스트렙토마이세스콜롬비엔시스더블유와이이20 액제
14 암펠로마이세스퀴스콸리스에이큐94013 수화제
15 패니바실루스폴리믹사에이시-1 액상수화제
16 살충 수입 뷰베리아바시아나지에이치에이 유상현탁제
17 뷰베리아바시아나티비아이-1 액상제
18 비티아이자와이 액상수화제
19 비티아이자와이 입상수화제
20 비티쿠르스타키 액상수화제
21 비티쿠르스타키 입상수화제
22 비티쿠르스타키 입상수화제
23 아자디락틴 입제
24 제조 모나크로스포륨타우마슘케이비시3017 고상제
25 비티아이자와이엔티423 수화제
26 비티아이자와이엔티423 액상수화제
27 비티아이자와이지비413 액상수화제
28 비티쿠르스타키 수화제
29 패실로마이세스퓨모소로세우스디비비-2032 수화제
30 제초 수입 펠라르곤산 유제
이러한 생물농약중 미생물농약들은 항균물질 또는 독소를 분비하거나, 양분의 경합, 대상병원균 또는 대상해충에 기생하여, 그 기능을 발휘하게 되는데, 최근에는 병에 대한 작물의 저항성을 유도하여 병해를 예방하는 기술이 이용되고 있는데, 이러한 기술은 전신획득저항성(Systemic acquired resistance)와 유도저항성(Induced systemic resistance)로 불리며, 그 유도체로서 단백질 또는 생육촉진 근권미생물(PGPR, Plant Growth Promoting Rhizobacteria)등이 이용되고 있다. 이러한 식물의 저항성을 유도하는 방법은 환경오염 및 작물의 약해 또는 잔류독성등의 문제를 일으키지 않으면서 병해를 방제한다는 면에서 기존의 방법에 비해 우수하게 여겨진다. 식물의 병해에 대한 저항성을 이용한 제품으로는 다음의 표 3과 같다.
표 3: 식물의 병해에 대한 저항성을 이용한 제품
제품명 원료명 작용기작 제조회사 발명회사
비온 Salicilyc acid SAR 신젠타
하핀 Harpin protein SAR Eden Bioscience
Taegrow Bacillus amyloliquefaciens FZB 24 PGPR(ISR) NOVOZYMES BIOLOGICALS
엑스텐 Bacillus vallismortis EXTN-1 PGPR(ISR) 동부한농
이중 근권미생물의 유도저항성을 이용한 식물병의 생물학적 방제 및 생육촉진효과는 농업환경에 부담을 주지 않는 신 방제기술로 식물의 자체 방어기작을 활성화 시켜 바이러스, 세균, 진균등, 주요 식물병의 발생을 억제하는 효과를 갖게 할 뿐만 아니라, 고온, 저온, 해충등에 의해 발생되는 환경스트레스에 대한 저항력을 높여주고, 토양내의 양분이용효율을 높여 식물 생육전반의 기능을 활성화 함으로서 고품질의 수량증대를 달성할 수 있게 한다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 안출된 것으로, 작물의 생육 촉진과 식 물병의 오이 탄저병, 토마토 시들음병, 옥수수깨씨무늬병, 담배 잿빛곰팡이병, 담배 무름병의 억제를 위한 저항성을 유도하며, PR-1a 프로모터에 GUS 유전자가 결합된 형질전환 담배에서 GUS 발현을 일으키는 수용성 세포벽 물질을 생산하는 신규 균주와, 그 분리방법의 제공을 발명의 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 균주를 포함하거나 상기 균주의 수용성 세포벽 물질을 이용하는 것으로, 토양에서 분리한 미생물인 버커홀더리아 파이로시니아(Burkholderia pyrrocinia) K87를 이용하여 환경에 영향이 적은 친환경적 생육촉진과 병해 억제 기능의 미생물 제제 및 이를 이용한 작물의 친환경적 생육촉진 및 병해 억제방법의 제공을 발명의 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 서열번호 1의 16s rDNA 염기서열을 가지는 버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주와,
상기 균주 또는 그 수용성 세포벽 물질을 유효성분으로 하는 미생물 제제와,
그 미생물 제제를 이용하여 토양 또는 작물에 처리하는 것을 특징으로 하는 작물의 병해억제에 의한 생육촉진방법을 주요 기술적 구성으로 한다.
상기 버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주는 근권 미생물로써 파이로니트린을 생산하는 것으로서, 본 발명자들은 K87균주를 2006년 4월 14일 부로 농촌진흥청 농업생명공학연구원 부설 한국농업미생물자원센터(KACC)에 기탁하여 수탁번호 KACC 91238P를 부여 받았다.
상기 버커홀더리아 파이로시니아 K87은 작물뿌리를 소디움하이포클로라이드 1% 용액에 1분간 침지후 살균된 스텐리스관에 넣어 마쇄한 다음 한천배지 위에 도말하여 28℃ 항온기에서 배양 후 분리된 균총을 순수분리한 것이다.
그리고, 상기 미생물 제제는 상기 버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주 또는 그 수용성 세포벽 물질을 유효성분으로 함유하는 조추출물을 이용하는 것으로서, 상기 미생물 제제를 토양 또는 작물에 처리함으로써 감자의 생육촉진, 토마토의 시들음병 억제, 옥수수의 깨씨무늬병의 억제, 오이 탄저병의 억제, 담배의 잿빛곰팡이병 및 무름병 억제효과와 생육촉진, 메론의 생육촉진, 그리고 고구마의 생육촉진 효과를 가져온다.
상기의 버커홀더리아 파이로시니아 K87균주 및 조추출물 K87 EPS는 파이로니트린을 생산하여 작물의 생육을 촉진하며 작물에 유도저항성을 일으켜 식물병의 오이 탄저병, 토마토 시들음병, 옥수수깨씨무늬병, 담배 잿빛곰팡이병, 담배 무름병의 발생 억제와 작물의 생육을 촉진하는데 유용하게 이용될 수 있다.
상기의 기술적 구성에 대해 실시 예를 통해 더욱 구체적으로 살펴보보고자 한다. 하기의 실시 예는 단지 예시를 위한 것으로 여러 가지 변형 및 변경할 수 있다는 것을 밝혀두는 바이며, 이는 여전히 본 발명의 청구범위의 사상 및 범위 내에 포함되는 것이다.
실시 예 1 : 버커홀더리아 파이로시니아 K87균주의 분리
충북 청원지역의 배추건전뿌리 1g을 소디움하이포클로라이드 1% 용액에 1분간 침지후 살균된 스텐리스관에 넣어 Pulverizer (Retsch MM200)로 마쇄한 다음 킹스비 한천배지(King's B Agar) 위에 도말하여 28℃ 항온기에서 배양 후 분리된 콜로니(균총)를 순수분리하였다. 분리된 균주는 10% 글리세롤에 넣어 - 80℃로 보존되었다.
시험 예 1 : 미생물의 동정
국내 토양에서 분리된 근권미생물은 16S rDNA를 염기서열 분석한 결과 서열번호 1로 기재되는 염기서열을 갖고 버커홀더리아속의 파이로시니아 U96930과 99%의 상동성을 보였다. 따라서 상기에서 분리한 근권미생물을 버커홀더리아 파이로시니아 K87로 명명하였다.
시험 예 2 : 근권미생물 버커홀더리아 파이로시니아 K87의 항균활성
선발된 근권미생물 버커홀더리아 파이로시니아 K87의 항균활성을 검정하기 위하여, 생물검정용 식물병원균으로 Rhizotonia solani, Fusarisum oxysporum f. sp. cucumerinum, Phytophthora capsici를 사용하였으며, Potato dextrose agar(Difco사)상에서 근권미생물 현탁액 20㎕가 접종된 직경 5mm의 페이퍼디스크와 각각의 식물병원균을 28℃에서 대치배양 하여, 정제된 시료에 의해 저지된 균사생장억제 거리를 측정하였으며, 그 결과를 아래의 표 4에 정리하였다.
표 4: 식물병원균의 균사생육억제 효과
식물병원균 저지원의 직경(mm)
Rhizotonia solani 30.3±2.9
Fusarisum oxysporum f.sp. cucumerinum 39.3±3.9
Phytophthora capsici 44.5±3.2
시험 예 3 : 근권미생물 버커홀더리아 파이로시니아 K87의 항균물질의 동정
근권미생물 버커홀더리아 파이로시니아 K87을 10ℓ의 King's B agar(Difco 사)에서 28℃, 7일간 배양한 후, 배양한 균체와 배지에 85% 메탄올을 동량으로 부어서 3번 추출한 다음 추출액을 Celite filter로 여과한 다음 감압 농축하였다. 농축된 시료는 Diethyl ether로 분배한 다음 물층과 용매층으로 분리하였다. 용매층을 농축하여 메탄올/물(0, 10, 20, 40, 60, 80, 100%)의 조건으로 C-18 컬럼 크로마토그래피를 수행하였다. 분획별로 합쳐진 시료는 농축되어졌으며, HPLC 컬럼을 통하여 정제된 다음, NMR(Bruker) 분석을 하여, 1H-NMR, 13C-NMR을 기초로 동정한 물질은 파이로니트린으로 결정되었으며, 그 구조식은 화학식 1과 같다.
Figure 112008071871792-PAT00001
시험 예 4 : 근권미생물 버커홀더리아 파이로시니아 K87의 수용성 물질에 대한 유도저항성 활성 검정
버커홀더리아 파이로시니아 K87을 King's B Agar (Difco사)에서 28℃, 7일간 배양 후 0,22㎛의 필터(Fisher Co.)를 이용하여 살아있는 미생물을 제거한 후, 병 저항성 유전자인 PR-1a 프로모터에 GUS 유전자가 결합된 형질전환 담배식물에 주사하였다. 3일 후 식물체에서 GUS 단백질을 추출하여 MUG에 추출된 시료를 반응시켜 자외선 상에서 발현된 GUS 발현량을 조사한 결과, 살아있는 미생물이 제거된 배양액에 병 저항성 유도물질이 존재하는 것을 확인 할 수 있었다.(도 2)
실시 예 2 : 근권미생물 버커홀더리아 파이로시니아 K87의 조추출물의 분리
버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주를 King's B Agar (Difco사)에서 28℃, 7일간 배양된 후 메탄올로 추출한 다음 남아있는 고형물에 살균증류수를 부어서 녹 인 후, agar를 제거하였다. 여액속에 살아있는 미생물의 세포를 제거하기 위하여, 8,000G로 15분간 원심분리 하였으며, 상등액을 메탄올을 이용하여 고형화하여 조출물을 분리하였다.
상기에서 분리한 버커홀더리아 파이로시니아 K87의 조추출물을 K87 EPS로 명명하였다.
시험 예 5 : 감자의 생육촉진
King's B 배지에서 28℃, 7일 간 배양된 버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주를 감자의 유묘에 1시간 침지시킨 후, 3주간 육묘된 감자의 지상부 생육을 조사하였다. 버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주 배양액 처리에 의해 감자의 지상부는 아래의 표 5에서 확인되는 바와 같이 평균 15.6% 증가하였다.
표 5 : 버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주에 의한 감자 생육촉진 효과
처리 초장(cm)
반복 1 반복 2 반복 3 평균
무처리 37.7 38.3 39.1 38.4
BTH(0.5mM) 33.6* 37.7* 39.9* 33.7*
균주 배양액 46.0* 46.1* 44.5* 45.5*
LSD(p=0.05) 3.9 5.0 4.5 4.5
(* BTH : 화학유도 저항성 물질)
시험 예 6 : 토마토의 병해억제
버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주와 조추출물 K87 EPS의 토마토의 시들음 병에 대한 억제효과를 규명하기 위하여, 2주간 육묘된 토마토 유묘에 버커홀더리이아 파이로시니아 K87 1×107 cfu/㎖와 100ppm의 K87 EPS를 처리한 후 정식하였다. 식물을 정식 후, 토마토 시들음병균(Fusarium oxyssporum)을 처리한 후, 1주 간격으로 6주간 병발생을 조사하였으며, 그 결과를 아래의 표 6에 나타내었다.
버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주와 조추출물 K87 EPS의 처리에 의해 토마토 시들음병의 발생은 2주간 억제되었으며, 무처리 대비 60%의 최종 발생억제 효과를 나타내었다.
표 6 : 버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주와 조추출물 K87 EPS의 토마토 시들음병 억제 효과
처리 토마토 시들음병 발생율(%)
처리일 (7월4일) 1주 (7월11일) 2주 (7월18일) 3주 (7월25일) 4주 (8월1일) 6주 (8월8일) 7주 (8월16일)
무처리 0.0 0.0 6.0 20.0 32.0 64.0 100.0
BTH 0.1mM 0.0 0.0 0.0 0.0 2.0 4.0 8.0
균주 + K87 EPS 0.0 0.0 0.0 4.0 4.0 14.0 40.0
시험 예 7 : 옥수수의 깨씨무늬병 억제
버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주와 조추출물 K87 EPS의 옥수수의 깨씨무늬병(Cochliobolus heterostrophus)에 대한 억제효과를 규명하기 위하여, 옥수수 종자에 버커홀더리아 파이로시니아 K87 1×107 cfu/㎖와 100ppm의 K87 EPS를 처리한 후 파종하였다. 파종 후, 생육 중기에 나타나는 깨씨무늬병의 발생을 옥수수 잎에 나타난 병반수로 비교하였으며, 그 결과를 아래의 표 7에 나타내었다.
버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주와 조추출물 K87 EPS의 처리구에 조사된 옥수수 깨씨무늬병은 옥수수 잎당 11.7개로 무처리의 31.7개 보다 63.09% 감소하였다.
표 7 : 버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주와 조출물 K87 EPS의 옥수수 깨씨무늬병 억제 효과
처리 평균 병반수/잎
무처리 31.7
BTH 0.1mM 8.3*
균주 + K87 EPS 11.7*
LSD(p=0.05) 17.1
시험 예 8 : 오이 탄저병의 억제
버커홀더리아 파이로시니아 K87 조추출물 K87 EPS의 유도저항성 효과를 규명하기 위해 오이에 발생하는 탄저병의 억제 효과를 K87 EPS의 처리농도와 처리방법별로 시험하였다. 버커홀더리아 파이로시니아 K87 EPS를 50ppm, 100ppm 그리고 200ppm으로 종자 침적 처리 및 관주 처리하였다. 이후 유묘의 제2본엽이 전개할 때, 오이 탄저병균(Colletotrichum orbiculare)를 처리하여 제3엽에 발생하는 병반수를 조사하였다. 병반수의 감소는 K87 EPS처리 농도에 따라 선형으로 감소하였으며, 종자침적 처리에서 관주처리 보다 적은 병반수를 아래의 표 8에 나타내었다.
표 8 : 버커홀더리아 파이로시니아 K87 조추출물(K87 EPS)의 오이 탄저병 억 제 효과
처리 평균 병반수 / 잎
종자 침적 관주
무처리 406.5 411.8
BTH 0.1mM 81.3* 6.1*
K87 EPS 50ppm 252.5* 318.5
K87 EPS 50ppm 134.8* 253.5*
K87 EPS 50ppm 174.5* 235.8*
LSD(p=0.05) 110.6 135.0
시험 예 9 : 담배 잿빛곰팡이병 및 무름병 억제효과 및 생육촉진 효과
버커홀더리아 파이로시니아 K87 조추출물 K87 EPS의 유도저항성 효과 및 생육촉진 효과를 규명하기 위해 K87 EPS를 0.1ppm, 1.0ppm, 10ppm, 50ppm, 100ppm, 200ppm, 400ppm, 그리고 1,000ppm으로 담배에 처리하여 잿빛곰팡이병(Botrytis cincerea)과 담배무름병(Erwinia carotovora SCC1)에 대한 병 발생 억제효과 및 생육촉진효과를 조사하여 아래의 표 9와 표 10에 각각 나타내었다.
표 9 : 버커홀더리아 파이로시니아 K87 조추출물(K87 EPS)의 담배 잿빛곰팡이병 및 담배무름병에 대한 억제 효과
처리 잿빛곰팡이병 병반 직경(mm) 담배무름병 병발병도(%)
무처리 27.2 50.0
BTH 1mM 20.7 75.0
BTH 50mM 19.8 50.0
K87 EPS 0.1ppm 12.0 50.0
K87 EPS 1.0ppm 24.3 50.0
K87 EPS 10.0ppm 24.3 50.0
K87 EPS 50.0ppm 19.8 25.0
K87 EPS 100ppm 16.9 0.0
K87 EPS 200ppm 13.2 25.0
K87 EPS 400ppm 16.9 25.0
K87 EPS 1,000ppm 17.8 0.0
표 10 : 버커홀더리아 파이로시니아 K87 조추출물(K87 EPS)의 담배 생육촉진 효과
처리 지상부 무게(mg) / 식물
무처리 23
BTH 1mM 28
BTH 50mM 32
K87 EPS 0.1ppm 33
K87 EPS 1.0ppm 43
K87 EPS 10.0ppm 38
K87 EPS 50.0ppm 44
K87 EPS 100ppm 33
K87 EPS 200ppm 34
K87 EPS 400ppm 40
K87 EPS 1,000ppm 41
시험 예 10 : 메론의 생육촉진
버커홀더리아 파이로시니아 K87 조추출물 K87 EPS의 생육촉진 효과를 규명하기 위해 K87 EPS를 10ppm, 100ppm, 200ppm, 그리고 400ppm으로 메론 종자에 침적 처리하여 17일간 생육촉진효과를 조사하였으며, 그 결과를 아래의 표 11에 나타내었다. 10ppm 처리에서 메론의 생육이 촉진되었으며, 400ppm에서 생육이 억제되었다.
표 11 : 버커홀더리아 파이로시니아 K87 조추출물(K87 EPS)의 메론유묘생육촉진효과
처리 초장(cm)
14일 후 17일 후
무처리 8.8 12.2
BTH 0.1mM 9.1 12.9
K87 EPS 10ppm 9.9* 13.4
K87 EPS 100ppm 8.1 10.9
K87 EPS 200ppm 8.5 12.1
K87 EPS 400ppm 5.9 9.8
LSD (p=0.05) 1.1 0.8
시험 예 11 : 고구마의 생육촉진
버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주와 조추출물 K87 EPS의 생육촉진 효과를 규명하기 위해 고구마에 버커홀더리아 파이로시니아 K87 1×107 cfu/㎖와 100ppm의 K87 EPS를 처리한 후 파종하였다. 버커홀더리아 파이로시니아 K87과 조추출물 K87 EPS처리에 의해 아래의 표 12에서 확인되는 바와 같이 고구마 덩이뿌리의 수와 총 생체중에서 무처리에 비해 각각 37.3%와 7.1% 그리고 24.2%와 22.5% 증가하였다.
표 12 : 버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주와 조추출물 K87 EPS의 고구마 생육촉진효과
처리 덩이뿌리 수 / 식물 덩이뿌리 생체중 / 식물
무처리 10.7 1,290.0
균주 배양액 1×107cfu/㎖ 14.7 1,382.0
K87 EPS 100ppm 13.3 1,580.7
도 1은 버커홀더리아 파이로시니아 K87 미생물의 식물병원균인 역병(Phytophthora capsici), 시들음병 (Fusarium oxysporum f. sp. cucumerium), 그리고 모잘록병(Rhizoctonia solani)에 대한 항균활성을 나타낸 사진.(사진의 좌: Phytophthora capsici, 사진의 중앙: Fusarium oxysporum f. sp. cucumerium, 사진의 우: Rhizoctonia solani)
도 2는 버커홀더리아 파이로시니아 K87 미생물의 배양액의 병저항성 유전자 PR-1프로모터 부착 GUS 활성도 시험결과를 나타낸 사진.(사진의 좌: 무처리, 사진의 중앙: BTH 0.1mM, 사진의 우: 버커홀더리아 파이로시니아 K87 배양원액)
도 3은 버커홀더리아 파이로시니아 K87 미생물과 조추출물 K87 EPS의 혼합처리에 의한 토마토 시들병병 억제효과의 시험결과를 나타낸 사진.(사진의 좌: 무처리, 사진의 중앙: BTH 0.1mM, 사진의 우: 버커홀더리아 파이로시니아 K87 1×107 cfu/㎖ + K87 EPS 100ppm)
도 4는 버커홀더리아 파이로시니아 K87 미생물과 조추출물 K87 EPS의 혼합처리에 의한 옥수수 깨씨무늬병 억제효과의 시험결과를 나타낸 사진.(사진의 좌: 무처리, 사진의 우: 버커홀더리아 파이로시니아 K87 1×107 cfu/㎖ + K87 EPS 100ppm)
도 5 는 버커홀더리아 파이로시니아 K87 미생물의 16S rDNA 유전자의 염기서열의 분석결과를 통한 균주의 계통발생학적인 계보.
<110> Republic of Korea(Rural Development Administration) Arysta LifeScience Korea <120> Burkholderia pyrrocinia K87 PROMOTING THE GROWTH OF CROPS AND PROUDING INDUCING SUBSTANCE ABOUT PLANT DISEASE DAMAGE AND METHOD FOR PROMOTING THE GROWTH OF CROPS AND INHIBITING OF PLANT DISEASE DAMAGE USING IT <160> 1 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 732 <212> DNA <213> Burkholderia pyrrocinia K87 <400> 1 gattgaacgc tggcggcatg ccttacacat gcaagtcgaa cggcagcacg ggtgcttgca 60 cctggtggcg agtggcgaac gggtgagtaa tacatcggaa catgtcctgt agtgggggat 120 agcccggcga aagccggatt aataccgcat acgatctacg gatgaaagcg ggggaccttc 180 gggcctcgcg ctatagggtt ggccgatggc tgattagcta gttggtgggg taaaggccta 240 ccaaggcgac gatcagtagc tggtctgaga ggacgaccag ccacactggg acgagacacg 300 gcccagactc ctacgggagg cagcagtggg gaattttgga caatgggcga aagcctgatc 360 cagcaatgcc gcgtgtgtga agaaggcctt cgggttgtaa agcacttttg tccggaaaga 420 aatccttggt tctaatatag ccgggggatg acggtaccgg aagaataagc accggctaac 480 tacgtgccag cagccgcggt aatacgtagg gtgcgagcgt taatcggaat tactgggcgt 540 aaagcgtgcg caggcggttt gctaagaccg atgtgaaatc cccgggctca acctgggaac 600 tgcattggtg actggcaggc tagagtatgg cagagggggg tagaattcca cgtgtagcag 660 tgaaatgcgt agagatgtgg aggaataccg atggcgaagg cagccccctg ggccaatact 720 gacgctcatg ca 732

Claims (5)

  1. 서열번호 1의 16s rDNA 염기서열을 가지는 버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주.
  2. 청구항 1에 있어서,
    버커홀더리아 파이로시니아 K87은 근권 미생물로써 파이로니트린을 생산하는 것임을 특징으로 하는 버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주.
  3. 청구항 1의 버커홀더리아 파이로시니아 K87은 작물뿌리를 소디움하이포클로라이드 1% 용액에 1분간 침지후 살균된 스텐리스관에 넣어 마쇄한 다음 한천배지 위에 도말하여 28℃ 항온기에서 배양 후 분리된 균총을 순수분리하는 것임을 특징으로 하는 버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주 분리방법.
  4. 청구항 1의 버커홀더리아 파이로시니아 K87 균주를 유효성분으로 하는 미생물 제제.
  5. 청구항 4의 미생물 제제를 토양 또는 작물에 처리하는 것을 특징으로 하는 작물의 병해억제에 의한 생육촉진방법.
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