KR20090117364A - 아담자 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 아담자 추출물(Brucea javanica)을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물에 관한 것이다. 또한 본 발명은 상기 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 아담자 추출물은 멜라닌 생성 억제효과와 타이로시나제 활성억제효과를 갖고 있으며 이를 함유한 제형의 미백임상실험에서도 우수한 효과를 갖고 있음을 확인하였다. 따라서, 이러한 다양한 기능을 가진 아담자(鴉膽子) 추출물을 유효성분으로 포함하는 본 발명의 화장료 조성물은 피부미백효과를 갖는다.

아담자(鴉膽子), 압담자(鴨膽子),고삼자(苦參子), 피부미백, 화장료 조성물

Description

아담자 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물{Cosmetic Composition for Whitening of the Skin Comprising the Extract of Brucea javanica as Active Ingredient}

본 발명은 아담자 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물에 관한 것이다. 또한 본 발명은 상기 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장방법에 관한 것이다.

피부는 인체의 최외각 방어막으로 외부의 자극 및 오염 등으로부터 보호해주며, 체온조절, 면역조절 등 생체의 항상성 유지에 중요한 역할을 하고 있다. 그러나 외부로부터 가해진 물리적 화학적 자극 및 스트레스, 환경오염 등의 변화는 피부의 색소 침착을 야기하고 결국 피부에 기미, 주근깨, 잡티 등을 일으킨다. 피부색을 결정짓는데 가장 중요한 역할을 하는 멜라닌을 생성하는 멜라닌세포는 표피의 기저층에서 흑갈색의 멜라닌을 생성하는 나뭇가지 모양의 수지상세포이며, 그 수지상 돌기는 가늘고 길쭉한 형태로 주위의 각질형성세포 사이로 뻗어 있다.

멜라닌의 주요한 역할은 피부에서 발생하는 활성산소나 프리라디칼(free radical)을 제거하고, 또 자외선의 투과를 막아 피부의 내부를 보호하는 것이다. 멜라닌을 만드는 출발물질은 인체에 정상적으로 존재하는 아미노산의 일종인 타이로신이다. 타이로신은 멜라닌세포 내에서 타이로시나제(tyrosinase)라는 효소에 의해 산화되어 도파(dihydroxy phenylalanine, DOPA)로 변하고, 도파는 더욱 산화하여 도파퀴논(DOPA quinone)으로 바뀐다. 도파퀴논은 이후 자동산화반응을 거쳐 최종적으로 흑갈색의 유멜라닌(eumelanin)을 만들어낸다. 한편 도파퀴논이 시스테인(cysteine)을 만나게 되면 시스테이닐도파(cysteinyl DOPA)가 만들어지고 그 결과 적갈색의 페오멜라닌(pheomelanin)이 만들어진다. 이후 생성된 멜라닌은 멜라노좀(melanosome)에 실려 각질형성세포로 전달된다.

미백제로 함유되는 물질은 크게 2가지로 나눌 수 있는데, 첫 번째는 멜라닌 세포내에서 멜라닌색소를 만드는 과정에 작용하여 멜라닌 색소의 생성을 억제하는 물질로 대표적인 물질로는 알부틴(일본특개평 4-93150), 비타민 C(일본특개평 4-9320), 하이드로퀴논(일본특개평-192062) 등 여러 가지 미백효과가 있는 식물추출물이 있다. 이 중 하이드로퀴논은 탈색효과가 가장 강력하여 화장품보다는 피부과 연고에 포함되며 알부틴은 하이드로퀴논 제제보다는 탈색효과가 약하다. 그리고 최근에 유전 독성 등으로 사용이 제한되고 있어서 그 소재의 다양성이 다른 화장품소재에 비해 매우 부족한 실정이다. 비타민 C의 작용은 타이로시나제(Tyrosinase)와 반응하여 멜라닌(melanin) 중간체인 도파퀴논을 환원하여 멜라닌 생성을 억제하는 작용과 진한색의 산화형 멜라닌을 환원하여 엷은 색의 환원형 멜라닌으로 하는 작용의 2가지가 있다. 비타민 C가 색소세포의 기능을 억제하여 색소생성을 억제한다는 것은 널리 알려진 사실로 여러 미백제품에 쓰이고 있으나 비타민 C는 안전성이 높으나 안정성은 나쁘기 때문에 불안정한 물질로서 단순히 피부에 바르는 것으로 피부에 흡수가 어려운 문제가 있다. 그러므로 비타민 C는 제제의 안정화를 위해 다양한 유도체가 개발되고 있다. 미백효과가 있다고 알려진 식물추출물로는 닥나무, 상백피(뽕나무 뿌리 껍질 추출물), 감초 추출물 등이 있다.

본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 특허 문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 특허 문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.

본 발명자들은 기존의 피부 미백제가 가진 문제점을 극복하고 보다 우수한 멜라닌 생성 억제 효과와 피부 색소 침착을 개선하는 미백 화장료를 제공하기 위해 천연 식물성분들에 대한 다양한 피부 생리활성을 검색한 결과 천연 식물 추출물 중에서 소태나무과(Quassia Family)에 속한 상록관목식물인 아담자나무의 아담자 열매 추출물은 멜라닌 생성 억제 효과와 타이로시나제 활성 억제 효과가 뛰어나고, 피부 자극이 없으면서도 피부 미백 개선 효과가 매우 뛰어남을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 아담자 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 다른 목적은 상기 아담자 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장 방법을 제공하는데 있다.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 실시예 및 청구범위에 의해 보다 명확하게 된다.

상기와 같은 목적은 본 발명의 아담자(Brucea javanica) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물에 의해 달성된다.

바람직하게는, 상기 아담자 추출물은 상기 화장료 조성물 총 중량에 대해서 0.001-30.0중량%로 함유되는 것을 특징으로 한다.

또한 바람직하게는, 상기 아담자 추출물은 (a) 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸아세테이트 및 1,3-부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매를 이용한 용매 추출법, (b) 초임계 추출법 또는 (c) 초음파 추출법을 이용하여 추출한다.

또한 바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 다른 목적은, 상기 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장 방법에 의해 달성된다.

본 발명은 아담자 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 아담자 추출물은 세포 생존율의 안정화 효과(실험예 1), 멜라닌 생성 억제효과(실험예 2), 타이로시나제 활성 억제 효과(실험예 3)가 뛰어나다. 따라서, 이러한 다양한 기능을 가진 아담자 추출물을 유효성분으로 포함하는 본 발명의 화장료 조성물은 피부미백효과(실험예 4)가 우수하다.

소태나무과에 속한 상록관목(大灌木) 혹은 소교목(小喬木)인 아담자는 주로 중국의 광서성, 광동성 등지에서 산출된다. 이 아담자는 이명으로, 고삼자(苦參子) 노아담(老鴉膽), 압담자(鴨膽子)라고도 불리워지며, 학명은 Brucea javanica이다. 그 성상은 계란형으로 길이는 6~10mm, 지름 4~7mm 이며, 표면은 흑색계통의 주름이 져 있으며 과실의 껍질은 질이 단단하여 부서지기가 쉽고 종자 역시도 계란형에 황백색을 띤다. 열매가 여물어 가는 가을에 채취하여 햇볕에 말린 후 외각을 제거하고 종자를 취한다. 마른 용안육(龍眼肉) 및 교낭(膠囊) 면피(面皮)로 포리(包裏)하여 탄복한다. 또는 기름을 뺀 후에 환(丸) 편(片)으로 만들어 사용한다. 주로 간과 대장에 작용하여 열을 내리고 해독하는 효능이 있으며, 몸 안에 있는 기생충을 없애는 약으로서 습을 날리는 효능 역시 가지고 있다. 학질과 세균성 이질을 치료하며 말라리아 원충을 죽이는 살충효과도 입증된 약재이다.

본 명세서에서, 용어 “아담자 추출물”은 아담자나무의 다양한 기관 또는 부분(예: 잎, 꽃, 뿌리, 줄기, 가지, 껍질 및 종자 등)으로부터 추출하여 얻은 것을 의미하고, 바람직하게는 잎, 줄기, 가지, 껍질 또는 종자이며, 보다 바람직하게는 잎, 가지 또는 종자이며, 가장 바람직하게는 종자로부터 얻은 추출물을 의미한다.

본 발명의 아담자 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건 하에서, 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있으며, 바람직하게는 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸에테르, 부틸렌글라이콜 및 헥산으로 구성된 군으로부터 선택된 1종 이상의 추출용매를 사용하여 추출되며, 보다 바람직하게는 에탄올, 70% 에탄올 또는 물을 사용하여 추출되며, 가장 바람직하게는 70% 에탄올을 사용하여 추출된다.

한편, 본 발명의 아담자 추출물은 상기한 추출 용매뿐 만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.

또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 이산화탄소에 의한 감압, 고온에 의한 초임계추출법에 의한 추출, 초음파를 이용한 추출법에 의한 추출, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 활성 분획도 본 발명의 추출물에 포함되는 것이다.

또한, 본 발명은 상기 추출물이 상온에서 냉침, 가열 여과하여 얻어진 액상물, 추가로 용매를 감압농축 또는 동결 건조하여 얻은 것임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명의 아담자 추출물은 화장료 조성물 전체에 대해서 0.001-30.0중량% 함유되며, 바람직하게는 0.1-10.0 중량% 함유되는 것을 특징으로 한다. 상기 추출물의 함량이 0.001중량% 미만인 경우에는 미백 효과가 극히 미약하며, 30.0중량% 초과인 경우에는 함유량 증가에 대한 효과 증대 정도가 미미하며, 제형상의 안전 및 안정성에 문제가 있으며 경제적이지도 못하다.

본 발명의 아담자 추출물은 피부에 국소적으로 바르는 거나 뿌리는 것에 의 해 그 효과를 달성할 수 있다. 따라서, 본 발명의 바람직한 일 양태에 따르면, 본 발명의 조성물은 크림, 로션 및 유연수 등의 화장료 조성물 또는 스프레이 및 연고 등의 약제학적 조성물 형태로 제조될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 유효성분 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카 본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

또한, 본 발명은 본 발명의 아담자 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장방법을 제공한다.

본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 피부에 도포하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다.

본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 피부 보호 효과가 우수한 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 아담자 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 화장방법을 수행하면, 피부의 미백 효과를 얻을 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.

제조예 1. 아담자 추출물의 제조

세절하여 음건한 아담자 종자를 70%(V/V) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환 류추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #5 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하였다. 감압농축물 및 동결건조물이 1%가 되게 50% 부틸렌글리콜용액에 분산/용해하여 아담자 추출물을 제조하였다.

실험예 1: MTT 법을 이용한 세포생존율 실험

본 실험예는 제조예 1에서 수득한 아담자 추출물의 세포생존율을 알아보기 위해 MTT법을 실험하였다. MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)- 2,5-diphenyl-tetrazolium bromide) assay는 세포의 성장을 알아보는 방법 중 하나로 수용성의 노란색 테트라졸리움 염(tetrazolium salt) MTT는 살아있는 세포에서 청자색의 비수용성인 포르마잔 크리스탈(formazan crystal)로 환원시키는 미토콘드리아의 능력을 이용하는 검사법이다. 그리고, 세포 생존율이 95% 이상일 경우 세포에 안정하기 때문에 적정 사용농도를 확인하기에 적당한 것이다. 각각 다른 농도의 아담자 추출물이 첨가된 배양액으로 24시간 배양된 세포에, MTT 시약(Sigma, USA)을 PBS(phosphate- buffered saline)에 녹여 여과한 후 최종 0.5 ㎎/㎖의 농도로 각 웰에 첨가하고, 37 ℃에서 4시간 배양하였다. MTT 포르마잔의 흡광도는 570nm의 파장에서 최대가 되며, 이를 녹여내기 위하여 200 ㎕ DMSO를 첨가하고, 570 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이에 따른 세포생존율의 결과는 표 1로 나타내었다.

시료명	처리 농도(ppm)	세포생존율(%)
아담자 추출물(제조예1)	10	103.1
아담자 추출물(제조예1)	20	99.6
아담자 추출물(제조예1)	50	99.1
아담자 추출물(제조예1)	100	98.9
아담자 추출물(제조예1)	200	97.2

상기 표 1의 결과에서 보는 바와 같이, 본 발명의 아담자 추출물은 실험한 전 농도에서 95%이상의 모두 우수한 세포생존율(%)을 나타내고 있어 안정함을 알수 있었다.

실험예 2. B16F1 멜라닌형성세포를 이용한 멜라닌 생성 억제효과 측정

제조예 1에서 수득한 아담자 추출물의 미백효과를 확인하기 위해 B16F1 멜라닌형성세포에 대한 멜라닌 생성 억제 정도를 보고 미백효과를 판단하였다. 본 실험예에 사용된 B16F1 멜라닌형성세포는 마우스에서 유래한 세포균주이며, 멜라닌이라는 흑색색소를 분비하는 세포이다. 이 세포의 인공배양 중에 시료를 처리하여 멜라닌 흑색색소가 감소하는 정도를 비교 평가하였다. 본 실험예에 사용된 B16F1 멜라닌형성세포는 ATCC(American Type Culture Collection)로부터 분양받아 사용하였다.

B16F1 멜라닌형성세포의 멜라닌 생합성 억제효과 측정은 다음과 같이 행하였다. B16F1 멜라닌형성 세포를 6웰 플레이트에 각 웰당 1 X 10⁵ 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도의 아담자 추출물과 멜라노사이트 자극 호르몬을 DMEM배지에 희석시켜 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양 후 세포를 트립신-EDTA로 떼어 낸 후 세포수를 측정한 다음 원심 분리하여 세포를 회수하였다. 세포내 멜라닌의 정량은 로탄(Lotan: Cancer Res., 40: 3345-3350, 1980)의 방법을 약간 변형하여 실시하였다. 회수된 셀 펠릿은 60°C에서 건조 후 1N NaOH(10% DMSO)를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해한 후 마이크로 플레이트 판독기로 490nm에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌 생성 저해율(%)을 측정하였다. B16F1 멜라닌형성세포의 멜라닌 생성 저해율(%)은 수학식 1에 의하여 계산하였으며, 그 값을 하기 표 2에 나타내었다. 아담자 추출물의 멜라닌 생성저해율 정도를 확인하기 위해 양성 대조군으로서 하이드로퀴논 및 알부틴을 사용하여 동일하게 실험하였다.

A : 시료를 첨가하지 않은 웰의 멜라닌 양

B : 시료를 첨가한 웰의 멜라닌 양

시료명	처리 농도(ppm)	멜라닌 생성 저해율(%)
아담자 추출물(제조예1)	10	68.8
아담자 추출물(제조예1)	20	84
아담자 추출물(제조예1)	50	91.8
아담자추출물(제조예1)	100	96.3
아담자 추출물(제조예1)	200	95.8
하이드로퀴논	0.1%	60.4
알부틴	0.1%	60.4

상기 표 2의 결과에서 보는 바와 같이, 아담자 추출물을 10ppm에서 200ppm 처리하였을 때 양성대조군인 하이드로퀴논과 알부틴의 0.1% 실험한 농도보다 더 우수한 멜라닌 생성 저해효과를 확인할 수 있었다.

실험예 3. 타이로시나제 활성 저해도 측정

타이로시나제는 버섯에서 분리 및 정제된 것으로 sigma (USA)에서 구입하여 사용하였다. 아담자 추출물은 제조예1의 방법에 따라 제조하여 0.1M 인산나트륨 완충용액 (pH 6.5)에 적당한 농도로 조절하여 용해한 후 사용하였다. 시험관에 0.1 M 인산염완충액(pH 6.5) 220 ㎕와 시료액 20 ㎕ 그리고 머쉬룸 타이로시나제(1500U/mL)액 20 ㎕를 순서대로 넣는다. 이 용액에 1.5 mM 타이로신 액 40 ㎕를 넣고 37℃에서 10～15분 동안 반응시킨다. 그리고 이것을 ELISA 판독기를 이용하여 490 nm에서 흡광도를 측정한다. 공시료액으로 시료액 대신 0.1 M인산염완충액(pH 6.5)을 넣는다. 기질로서 L-타이로신(1500U/mL) 은 0.1 M 인산나트륨 완충용액 (pH 6.5)에 용해하여 사용하였다.

각 시료액의 타이로시나제 활성 저해율은 하기 수학식 2에 따라 계산하고 실험 결과는 하기 표 3에 나타내었다.

효소 활성 저해율(%) = 100-(비교군 흡광도/대조군 흡광도) x 100

아담자 추출물 (㎍/㎖)	효소 활성 저해율 (%)
5	29.3
10	32.5
20	48.1
50	56
100	70.2
200	72.6

상기 표 3의 결과에서도 알 수 있듯이, 아담자 추출물은 농도 의존적으로 타이로시나제 활성 억제효과가 증가함을 확인하였다.

이하, 제형예에는 본 발명의 제조예 1로부터 제조된 아담자 추출물을 사용하였으나 이에 한정하지 않는다.

제형예 1. 유연 화장수( 스킨 )

본 발명의 아담자 추출물을 포함하는 화장료 중 유연 화장수(스킨)의 제형예는 다음과 같다:

성분	함량(중량%)
제조예1의 아담자 추출물	1.0
1,3-부틸렌글리콜	5.2
올레일알코올	1.5
에탄올	3.2
폴리솔베이트 20	3.2
벤조페논-9	2.0
카르복실비닐폴리머	1.0
글리세린	3.5
향	미량
방부제	미량
정제수	잔량
계	100

제형예 2. 영양화장수( 밀크로션 )

본 발명의 아담자 추출물을 포함하는 화장료 중 영양화장수(밀크로션)의 제형예는 다음과 같다:

성분	함량(중량%)
제조예1의 아담자 추출물	2.0
글리세린	5.1
프로필렌글리콜	4.2
토코페릴아세테이트	3.0
유동파라핀	4.6
트리에탄올아민	1.0
스쿠알란	3.1
마카다미아너트오일	2.5
폴리솔베이트60	1.6
솔비탄세스퀴롤레이트	1.6
프로필파라벤	0.6
카르복실비닐폴리머	1.5
향	미량
방부제	미량
정제수	잔량
계	100

제형예 3. 영양크림

본 발명의 아담자 추출물을 포함하는 화장료 중 영양크림의 제형예는 다음과 같다:

성 분	함량(중량%)
아담자 추출물	3.0
친유형 모노스테아린산글리세린	2.0
세테아릴알콜	2.2
스테아린산	1.5
밀납	1.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄스테아레이트	0.6
경화식물유	1.0
스쿠알란	3.0
광물유	5.0
트리옥타노인	5.0
디메치콘	1.0
소듐마그네슘실리케이트	0.1
글리세린	5.0
베타인	3.0
트리에타올아민	1.0
소듐히아루로네이트	4.0
방부제, 향, 색소	미량
증류수	잔량
합계	100

제형예 4. 맛사지 크림

본 발명의 아담자 추출물을 함유한 화장료 중 맛사지 크림의 제형예는 다음과 같다:

성분	함량(중량%)
제조예1의 아담자 추출물	0.5
글리세린	4.0
바셀린	3.5
트리에탄올아민	0.5
유동파라핀	24.0
스쿠알란	3.0
밀납	2.1
토코페릴아세테이트	0.1
폴리솔베이트 60	2.4
카르복실비닐폴리머	1.0
솔비탄세스퀴올레이트	2.3
향	미량
방부제	미량
정제수	잔량
계	100

제형예 5. 팩

본 발명의 아담자 추출물을 포함하는 화장료 중 팩의 제형예는 다음과 같다:

성 분	함량(중량%)
제조예1의 아담자 추출물	1.0
에틸알코올	3.0
EDTA-2Na	0.02
프로필렌 글리콜	5.1
글리셀린	4.5
카보폴	1.0
폴리옥사이드	0.1
방부제	미량
향	미량
정제수	잔량
계	100

실험예 4 : 미백효과 측정

피부색이 어두운 26-45세의 여성 30명을 대상으로, 아담자 추출물을 포함하는 제형예 3의 영양크림과 아담자 추출물대신 1,3-BG를 사용한 비교예의 영양크림을 이용해 화장료의 미백 효과를 측정하였다. 피검자의 팔의 12군데를 가로 세로 1 cm씩 표시하고, 제형예 3의 각 화장료를 각각 도포한 다음, 나머지 1 곳은 대조군으로 사용하였다. 화장료는 2달 동안 하루에 2회 적용하였다. 측정 장비인 Minolta CR 300을 사용하여 2개월경과 후 피부색(L value)을 측정하였으며, 하기 수학식 3을 이용하여 피부색의 변화도를 계산하여 그 결과를 표 9에 나타내었다.

피부색의 변화도(ΔL 값)=(화장료 적용 전의 L 값)-(2개월경과 후 L 값)

피부색 변화도

구분	비교예	제형예3
ΔL값	0.86	5.23

상기 표 9의 결과에서도 알 수 있듯이, 아담자 추출물을 넣지 않은 비교예에 비해 아담자 추출물을 함유한 제형예 3의 ΔL 값이 약 6배 정도 증가하였다. 이로써, 아담자 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 미백 효과가 매우 뛰어남을 알 수 있다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (5)

1. 아담자(Brucea javanica ) 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부미백용 화장료 조성물.
2. 제 1 항에 있어서, 상기 아담자 추출물은 상기 화장료 조성물 총 중량에 대해서 0.001-30.0중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는 피부미백용 화장료 조성물.
3. 제 1 항에 있어서, 상기 아담자 추출물은 (a) 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸아세테이트 및 1,3-부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매를 이용한 용매 추출법, (b) 초임계 추출법 또는 (c) 초음파 추출법을 이용하여 추출한 것을 특징으로 하는 피부미백용 화장료 조성물.
4. 제 1 항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부미백용 화장료 조성물.
5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항의 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포 하는 것을 특징으로 하는 화장 방법.