KR20090091119A

KR20090091119A - 뇌암을 치료하거나 예방하기 위한 ｍｔ 키나아제 저해제의 용도

Info

Publication number: KR20090091119A
Application number: KR1020097009076A
Authority: KR
Inventors: 티모시 피에트로 수렌 페레라; 마틴 존 페이지; 미셸 마리 프랑소와 자니꼬뜨; 에디 쟝 에드가 프레인
Original assignee: 얀센 파마슈티카 엔.브이.
Priority date: 2006-10-27
Filing date: 2007-10-25
Publication date: 2009-08-26
Also published as: IL198347A0; JP2010507625A; WO2008049901A1; CA2664145A1; EP2077843A1; AU2007310842A1; NO20092046L; EA200970418A1; MX2009004437A

Abstract

본 발명은 PCT 공보 제 WO2004/105765호에서 화합물 22로 기술된 일부 마크로사이클릭 퀴나졸린 유도체 4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로-펜타데신, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸이 원발성 뇌암의 치료 또는 뇌 전이의 치료 또는 예방용 의약의 제조에 유용한 것의 발견에 관한 것이다. 따라서, 뇌암의 치료, 예방, 지연 또는 완화 또는 뇌 기원 세포의 증식 방지 또는 지연 방법이 제공된다.

Description

뇌암을 치료하거나 예방하기 위한 ＭＴ 키나아제 저해제의 용도{USE OF A MT KINASE INHIBITOR FOR TREATING OR PREVENTING BRAIN CANCER}

본 발명은 PCT 공보 제 WO2004/105765호에서 화합물 22로 기술된 마크로사이클릭 퀴나졸린 유도체 4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로-펜타데신, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸이 원발성 뇌암의 치료 또는 뇌 전이의 치료 또는 예방용 의약의 제조에 유용한 것의 발견에 관한 것이다. 따라서, 뇌 전이의 치료, 예방, 지연 또는 완화 및 원발성 뇌암의 치료, 지연 또는 완화 방법이 제공된다.

"뇌암"은 (1) 하기에서 원발성 뇌암으로도 언급되는, 임의의 유형의 신경 세포의 비정상적으로 증가된 증식, 또는 (2) 하기에서 뇌 전이로도 언급되는, 중추신경계 (CNS)로 전이되는 임의의 다른 암을 의미한다.

예를 들어, 뉴런, 미세아교세포 및 별아교세포를 포함하는 CNS에서 발견되거나 이를 포함하는 세포인 대부분의 신경 세포는 "최종적으로 분화"되며, 이는 그들이 더이상 세포 주기를 완수할 능력을 지니지 않는 것을 의미한다. (Kornblith et al, (1986), Cancer: Principles and Practice of Oncology, 2nd Ed., DeVita, V., Hellman, S., Rosenberg, S, eds., J.B. Lippincott Company, Philadelphia, Chapter 41 : Neoplasms of the Central Nervous System). 신경 세포가 세포 주기로 유입되더라도, 그들은 통상 세포 자멸사(세포 사멸) 되기 때문에, 과정을 완료할 수 없다. (Multani, A.S., et al, Neoplasia 2(4), 339-45 (2000)). 신경 세포가 세포 자멸사를 겪는 보호 능력을 잃는 이러한 경우에만 원발성 뇌암이 발생할 수 있다. 원발성 뇌암의 예는 신경종, 별아교세포종, 신경모세포종, 신경아교종, 수막종, 희소돌기아교세포종, 속질모세포종, 척수 종양 및 신경집종을 포함하나 이에 한정되지 않는다.

신경아교종은 모든 원발성 CNS 종양의 약 60%를 포함하며 통상 뇌의 대뇌반구에서 발생하나, 시각 신경, 뇌 줄기 또는 소뇌와 같은 다른 영역에서 발견될 수 있다. 신경아교종은 그들이 기원한 아교 세포의 유형에 따라 그룹으로 분류될 수 있다. (Kornblith et al, (1986), Cancer: Principles and Practice of Oncology, 2nd Ed., DeVita, V., Hellman, S., Rosenberg, S, eds., J.B. Lippincott Company, Philadelphia, Chapter 41: Neoplasms of the Central Nervous System). 신경아교종의 가장 통상적인 유형은 별아교세포종이다. 이들 종양은 별아교세포로 불리는 별-모양의 아교 세포로부터 발달된다. 별아교세포종은 그들의 악성에 따라 등급으로 할당된다. I 및 II 등급 별아교세포종으로도 알려진 저-등급 별아교세포종은 최소의 악성이며, 상대적으로 느리게 성장하고, 종종 외과술을 사용하여 완전하게 제거될 수 있다. III 등급 별아교세포종으로도 알려진 중간-등급 별아교세포종은 더욱 빠르게 성장하고 더욱 악성이다. III 등급 별아교세포종은 외과술 이후 방사선 및 일부 화학 치료법으로 치료된다. IV 등급 별아교세포종으로도 알려진 고-등급 별아교세포종은 급속히 성장하며, 근처 조직에 침투하고 매우 악성이다. IV 등급 별아교세포종은 통상 외과술 이후 방사선 요법 및 화학 치료법의 조합으로 치료된다. 다형성 아교모세포종은 IV 등급 별아교세포종이며, 이는 그 중 가장 악성이고, 치명적인 원발성 뇌 종양 (Id)이다. 동일한 외과술 기술 및 원리가 다형성 아교모세포종 및 덜 악성인 뇌 종양을 치료하는 데 적용될 때, 다형성 아교모세포종 종양의 완전한 제거는 성취되기 더 어렵다.

악성의 차이는 또한 원발성 뇌 종양을 갖는 환자에 대한 예후에 반영된다. I 등급 별아교세포종에 대하여 치료된 환자가 통상 재발 없이 10년 이상을 생존할 수 있는 반면, IV 등급 별아교세포종 종양을 갖는 환자에 대한 평균 생존 기간은 외과술 치료 이후 15주이다. IV 등급 별아교세포종 종양의 높은-악성 성장 가능성 때문에, 오직 5%의 환자가 단독의 외과술 치료 이후에 1년 동안 생존하고, 2년 이후에는 거의 0% 생존율을 갖는다. 외과술 치료와 배합된 방사선 치료는 2년의 치료 이후에 약 10%로 생존율을 증가시키나, 사실상 5년 넘게 생존하는 환자는 없다 (Id).

외과술, 방사선 치료법 및 화학 치료법의 치료 요법이 IV 등급 별아교세포종 뇌 종양을 갖는 환자에 대하여 적당하게 증가된 수명에 대한 기회를 제공하는 한편, 각 치료 방법과 관련된 위험이 많다. 치료의 혜택이 최소이며, 치료는 환자의 잠시 남아있는 수명의 질을 상당히 감소시킬 수 있다. 따라서, 특히, CNS 종양이 어린 환자에서 고형 종양의 가장 통상적인 그룹을 나타내기 때문에, 상기-언급된 종래의 접근법의 단점을 극복하는 원발성 뇌암 예방 및 치료 방법이 본 분야에서 분명히 필요하다. 뇌 종양은 진단 첫 해 내에 이들 유아 대부분이 사망하는 현재 치료법과 함께 그리고 모든 그러한 사망의 대략 25%을 차지하는 유아의 암-관련 사망의 2차-유발 원인이다.

원발성 뇌 종양과 비교하여, 뇌 전이의 발생 수는 훨씬 더 많다. 대략 100,000명의 환자가 미국에서 해마다 증후성 두개내 전이를 가지며, 부검 연구에 따라 암 환자의 4분의 1은 종양 전이를 갖는다 (Newton, H.B., et al, J. Neurooncol. 61, 35-44 (2003)). 뇌 전이는 예를 들어, 폐암 (소세포 및 비-소세포 둘다), 유방암, 직장결장암, 전립선암, 흑색종 및 췌장암을 포함하나 이에 한정되지 않는 신체의 다른 곳의 원발성 종양으로부터 유발된다. 특히 전이성 유방암을 갖는 환자에서, 뇌 전이의 발생수는 10 내지 20%의 비율로 진단된다 (Tyson, R.M. et al, Therapy 3(1), 97-112 (2006)). 유방암은 여성에서 암-관련 사망을 두 번째로 유발하는 원인이며, 유방암으로부터의 거의 모든 사망은 부검에서 30%의 환자에서 발견되는 뇌 전이를 가지는 전이성 질환 때문이다.

치료의 표준 방식은 외과적 절제술, 화학 치료법 및 방사선 치료법, 특히 전-뇌 방사선 치료법 (WBRT) 및 정위방사선외과술 또는 이의 조합을 포함한다. 뇌 전이를 위한 외과술은 특히 단일 병변을 갖는 환자에서 생존을 개선시킬 수 있다. 그러나 외과술은 다발성 병변, 외과술적으로 가까이하기 어려운 병변 또는 외과술을 견딜 능력이 없는 환자의 면에서 가능하지 않을 수 있다. 유방암에서, 뇌암 전이를 지닌 50% 환자는 다발성 전이를 가져, 외과술 후보로서 덜 적합하게 한다. WBRT는 미치료에 대하여 중간 생존을 개선시킬 수 있으며, 외과술에 대한 어쥬번트로서, 이는 재발률 및 죽어가는 신경 죽음의 기회를 감소시키나, 이는 생존 또는 작용 수준을 변화시키지 않는다. SRS는 위치 또는 환자 증상에 의하여 외과술적으로 절제할 수 없는 뇌 전이를 치료하는 방법을 제공한다. SRS는 삶의 질의 개선을 제공하나, 단일 전이를 지닌 환자를 제외하고, 생존 혜택을 제공하지 않는다. 뇌 전이의 치료에서 화학 치료법의 사용은 고 분자량 화합물의 불가능에 의하여 방해되어, 혈액뇌장벽을 가로지르는 대부분의 화학 치료법 제제를 제한한다. 이는 화학 감수성 종양, 이를 테면 대부분 전이성 유방 암종이 종종 뇌에서 종양 진행과 동시에 화학 치료법에 대한 완전한 전신 반응을 나타내는 사실에 반영된다. 그러나 뇌 전이의 치료에서 화학 치료법의 사용에 대한 이러한 초기 저항은 동물 모델 및 인간 뇌 종양 부검에서의 관찰에 기초하여 최근에 변화하였으며, 전이성 병변은 혈액뇌장벽 부전을 유발하며, 이에 의하여, 화학 치료법 약물은 항시 종양으로 유입될 수 있다. 화학 치료법과 연결된 방사선 치료법이 뇌 전이의 치료에서 첫번째-선의 접근으로 진화되었다.

그러나 현재 치료 방법 모두와 관련된 심각한 위험 및 제한이 있다. 종종 신체의 정상 조직을 통하여 바람직하게 암 조직의 매우 특이적이며 종종 불완전하게 정의된 영역에 고도의 파괴성 용량의 전리 방사선을 전달하려는 시도의 방사선 치료법은 무엇보다 기억 손실 및 성격 변형을 유발하는 신체의 정상 신경계 또는 다른 조직의 파괴성 때문에 심각하며 상당한 부작용을 가질 수 있다 (이하 참조). 신체의 조직에 다른 종류의 화학적 제제 또는 약물의 투여를 통하여 바람직하게 정 상 세포 대신에 암 세포를 죽이려는 시도의 화학 치료법은 현재 이용가능한 화학적 제제에 의하여 효능이 제한되며, 정상 조직의 독성 및 의도하지 않은 부작용을 유발할 수 있다. 암의 진행을 기계적으로 파괴 또는 방해하는 시도의 외과술은 또한 정상 조직의 기계적 외상 또는 파괴의 결과로서 심각한 부작용 또는 결과를 유발할 수 있다. 상기한 접근법과 관련된 일부 문제점은 (i) 지능, 학습 능력, 기억, 운동 기능, 의식 및 감정의 변경을 포함하는 해로운 부작용; (ii) 이들 치료법에 대한 내성의 발달 때문에 치료 3 내지 5년 내에 종양의 재발; (iii) 이러한 치료가 효과가 없는 것에 따른 사망이다.

상기한 것으로부터, 아직 만족되지 않은, 중추신경계에서 암의 신생 확장 및/또는 성장을 감소시키기 위한 유효량으로 혈액뇌장벽을 가로지를 수 있는 화학치료제를 개발하는 것이 긴급하게 필요한 것이 명백할 것이다.

발명의 요약

본 발명은 부분적으로 본원에 그 전체가 참고로 인용되는 제 WO 2004/105765호에 기술된 특정 화합물을 사용하여 뇌암을 치료 또는 예방 및/또는 뇌 전이를 치료 또는 예방하는 방법에 관한 것이다.

일 구체예에서, 본 발명은 원발성 뇌암 또는 뇌 전이의 치료 또는 예방을 위한 의약의 제조에서 PCT 공보 제 WO2004/105765호에 화합물 2로 기술된 마크로사이클릭 퀴나졸린 유도체 4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로-펜타데신, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸의 용도를 제공한다.

관련 구체예에서, 본 발명은 본 발명의 화합물의 암의 중추신경계로의 전이성 확장을 억제하는 유효량을 전이성 암을 갖는 것으로 의심되는 포유동물 대상에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물 대상에서 암의 중추신경계로의 전이성 확장을 억제하는 방법; 및 본 발명의 화합물을 포함하는 조성물의 뇌암/전이의 성장 또는 신생물 확장을 감소시키는 유효량을 암으로 진단된 포유동물 대상에 투여하는 것을 포함하여 뇌암을 치료하는 방법을 제공한다. 암 성장 또는 확장 비의 임의의 감소 (이는 생명을 연장시키고 삶의 질을 개선시킬 수 있다)가 성공적인 치료를 나타내는 것이 명백할 것이다. 바람직한 구체예에서, 암 성장은 완전하게 멈춘다. 더욱 바람직한 구체예에서, 암이 축소되거나 전체적으로 근절된다. 치료를 위한 바람직한 대상은 인간 대상이나 다른 동물, 특히 뮤린, 랫트, 개, 소, 돼지, 영장류 및 암 치료를 위한 다른 동물 시스템이 고려된다.

상기한 치료 방법의 한 예에서, 화합물은 제2 암 치료제와 함께 투여된다. 제2 제제는 임의의 화학치료제, 방사성 제제, 방사선 조사, 암 치료제, 항체, 단백질 및/또는 다른 항-림프혈관형성제를 암호화하는 핵산 또는 항-혈관형성제일 수 있다. 제2 제제는 본 발명의 화합물 이전, 이후, 또는 동시에 투여될 수 있다.

일 예에서, 치료되는 대상은 외과술가능한 종양을 가진 것으로 진단되며, 투여 단계는 대상으로부터 종양의 절제 이전, 도중, 또는 이후에 수행된다. 종양 절제와 연계된 화합물 치료는 절제에 실패한 암 세포로부터 종양의 재성장을 줄이거나 제거하기 위하여 의도된다.

더욱 일반적으로 설명하면, 본 발명은 본 발명의 화합물을 이를 필요로 하는 포유동물 (인간, 랫트, 개, 소, 돼지 및 영장류를 포함하나 이에 한정되지 않음)에 투여하는 단계를 포함하는 뇌암의 치료 및 뇌 전이의 치료 또는 예방 방법을 제공한다.

도 1: 피하 A431 종양 성장에서 4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로펜타데신, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸 (화합물 1)의 효과. 회색 막대는 화합물 1, 예를 들어, 경구, QDx14의 처리 기간을 나타낸다. 검은색 화살표는 참조 화합물 BCNU (카르무스틴)의 처리, 예를 들어, 정맥내, Q14Dx2를 나타낸다. 회색 화살표 - 18일. 18일에, 중간 피하 (s.c.) 종양 부피를 통계적으로 분석하였다.

도 2: A431 세포의 중간 피하 (s.c.) 종양 부피의 통계적 분석. 회색 막대는 화합물 1, 예를 들어 경구, QDx14의 처리 기간을 나타낸다.

도 3: 두개내 및 피하 종양을 갖는 랫트의 생존을 나타내는 카팔란 마이어 (Kapalan Myer) 곡선. 91일에 일부 생존하는 동물이 과도한 피하내 종양 부하 때문에 희생되기 시작한다.

발명의 상세한 설명

제 WO-2004/105765호는 다중 표적화 키나아제 저해제(MTKI)로서 화학식 (I)의 마크로사이클릭 퀴나졸린 유도체의 제조, 제제 및 약제학적 특성을 기술하였다.

상기 언급된 분류에서 하나의 화합물, 예를 들어, 본원에서 MTKI 1 및/또는 화합물 1로도 언급되며 상기 언급된 PCT 공보에서 화합물 22로 기술된 4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로-펜타데신, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸이 뇌암 모델에서 임상적으로 활성을 가지는 것이 현재 발견되어, 본원에서 상기에 정의된 원발성 뇌암을 포함하는 뇌암 및 뇌 전이를 치료하는 약제학적 조성물의 제조를 위한 본 화합물의 용도가 제공된다.

따라서, 일면에서 본 발명은 뇌암의 치료 또는 예방을 위한 의약의 제조에서 4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로-펜타데신, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 산 또는 염기 부가 염의 용도를 제공한다.

본 발명의 추가의 면은 4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로-펜타데신, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시- 13-메틸 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 산 또는 염기 부가 염의 치료적 유효량을 이러한 치료를 필요로 하는 포유동물 대상에 투여하는 것을 포함하여, 포유동물 대상에서 뇌암을 치료 또는 예방하는 방법에 관한 것이다.

상기 언급된 약제학적으로 허용가능한 산 또는 염기 부가 염은 MTKI 1이 형성할 수 있는 치료적으로 활성이 있는 비-독성 산 및 비-독성 염기 부가 염 형태를 포함하는 것을 의미한다. 염기 특성은 적절한 산으로 상기 염기 형태를 처리하여 그들의 약제학적으로 허용가능한 산 부가 염으로 전환될 수 있다. 적절한 산은, 예를 들어 할로겐화수소산, 예를 들어, 염산 또는 브롬화 수소산; 황산; 질산; 인산 등과 같은 무기산; 또는 예를 들어 아세트산, 프로판산, 하이드록시아세트산, 락트산, 피루브산, 옥살산, 말론산, 숙신산(예를 들어, 부탄디오산), 말레산, 푸마르산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 벤젠설폰산, p-톨루엔설폰산, 시클람산, 살리실산, p-아미노살리실산, 팜산 등과 같은 유기산을 포함한다.

산 특성은 적합한 유기 또는 무기 염기로 상기 산 형태를 처리하여 그들의 약제학적으로 허용가능한 염기 부가 염으로 전환될 수 있다. 적절한 염기 염 형태는, 예를 들면, 암모늄 염, 알칼리 및 알칼리 토금속염, 예를 들어 리튬염, 나트륨염, 칼륨염, 마그네슘염, 칼슘염 등, 유기 염기와의 염, 예를 들어 벤자틴, N-메틸-D-글루카민, 하이드라바민 염 및 아르기닌, 라이신 등과 같은 아미노산과의 염을 포함한다.

용어 산 또는 염기 부가 염은 또한 MTKI 1이 형성할 수 있는 수화물 및 용매 부가 형태를 포함한다. 이러한 형태의 예는 예를 들어, 수화물, 알코올화물 등이다.

특히, 본 발명은 MTKI 1에 대한 상기 언급된 임의의 용도에서 4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로-펜타데신, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸의 디하이드로브로마이드 염, 예를 들어, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸-4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로펜타데신 디하이드로브로마이드의 용도에 관한 것이다.

추가의 구체예에서, 본 발명은 뇌암의 치료 및/또는 예방용 약제학적 조성물의 제조를 위한 상기 언급된 MTKI 1의 용도를 제공한다.

본 발명은 또한 상기 언급된 MTKI 1의 치료적 유효량을 상기 포유동물에 투여하는 단계를 포함하여, 포유 동물에서 뇌암을 치료 및/또는 예방하는 방법에 관한 것이다.

추가의 구체예에서, 본 발명은 뇌 전이의 치료 및/또는 예방용 약제학적 조성물의 제조를 위한 상기 언급된 MTKI 1의 용도를 제공한다.

본 발명은 또한 상기 언급된 MTKI 1의 치료적 유효량을 상기 포유동물에 투여하는 단계를 포함하여 포유동물에서 뇌 전이를 치료 및/또는 예방하는 방법에 관한 것이다.

따라서, 추가의 면에서, 본 발명에 따라 이용하기에 가장 바람직한 화합물은 다음 구조를 갖는 화합물로 구성된 군에서 선택된 것이다:

본 발명에 따른 화합물은 본 분야에 알려진 방법 및 특히 본원에 언급되고 참고로 인용된 공개 특허 제 WO-2004/105765호에 기술된 방법에 의하여 약제학적 조성물로 제조 및 제제화될 수 있다.

제 WO-2004/105765호로부터 취한 본 발명에 사용되는 바람직한 화합물의 적합한 제조는 다음과 같다:

실시예 1

a) 1-펜탄올, 5-[[(4-브로모-2-니트로페닐)메틸]아미노]-(중간체 1)의 제조

EtOH (15 ml) 중의 4-브로모-2-니트로-벤즈알데히드,(0.013 mol), 5-아미노-1-펜탄올 (0.013 mol) 및 티타늄, 테트라키스 (2-프로판올라토) (0.014 mol)를 실온에서 1 시간 동안 교반한 다음, 반응 혼합물을 50 ℃로 가열하고, 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, NaBH₄ (0.013 mol)를 조금씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반한 다음 얼음 물 (50 ml)에 부었다. 생성된 혼합물을 20 분 동안 교반하고, 형성된 침전물을 여과하고 (여액 (I) 제공), H₂O로 세척하고, DCM 중에서 교반하였다 (산물을 용해하고 Ti-염으로부터 그것을 제거하기 위하 여). 혼합물을 여과한 다음, 여액을 건조시키고 (MgSO₄) 여과하고, 최종적으로 용매를 증발시켰다. EtOH가 제거될 때까지 여액 (I)을 증발시키고, 수성 농축물을 DCM으로 2회 추출하였다. 유기층을 분리하고, 건조시키고 (MgSO₄), 여과하였으며, 용매를 증발시켜, 3.8 g (93 %)의 중간체 1을 수득하였다.

실시예 2

a) 1-펜탄올, 5-[[(4-브로모-2-니트로페닐)메틸]메틸아미노]-(중간체 2)의 제조

EtOH (150 ml) 중 중간체 50 (0.0047 mol), 포름알데히드 (0.025 mol) 및 티타늄, 테트라키스 (2-프로판올라토) (0.0051 mol)의 용액을 50 ℃로 가열하고, 1 시간 동안 교반한 다음, 실온에서 NaBH₄ (0.026 mol)를 조금씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반한 다음, 물 (100 ml)로 퀀칭(quenched)하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하고; 형성된 침전물을 여과하고 세척하였다. 유기 여액을 농축한 다음, 수성 농축물을 DCM으로 추출하고 건조시켰다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 실리카 겔에 대하여 여과하였다 (용리액: DCM/CH₃OH 98/2 내지 95/5). 산물 분획을 수집하고, 용매를 증발시켜, 0.5 g의 중간체 2를 얻었다.

b) 1-펜탄올, 5-[[(4-브로모-2-니트로페닐)메틸]메틸아미노]-, 아세테이트 (에스테르) (중간체 3)의 제조

아세트산 무수물 (8 ml) 중의 중간체 2 (0.0015 mol) 및 피리딘 (0.015 mol)의 용액을 실온에서 밤새 교반한 다음, 용매를 증발시키고, 톨루엔과 함께 공동-증발시켜, 중간체 3을 얻었다.

c) 1-펜탄올, 5-[[(2-아미노-4-브로모페닐)메틸]메틸아미노]-, 아세테이트 (에스테르) (중간체 4)의 제조

THF (50 ml) 중의 중간체 3 (0.0015 mol)의 혼합물을 촉매로서 Pt/C 5% (0.5 g)를 사용하여 티오펜 용액 (0.5 ml) [H179-034]의 존재 하에서 수소화시켰다. H₂ (3 당량)를 취한 후, 촉매를 여과하고 여액을 증발시켜 0.5 g의 중간체 4를 수득하였다.

d) 6-퀴나졸리놀, 4-[[2-[[[5-(아세틸옥시)펜틸]메틸아미노]메틸]-5-브로모페닐]아미노]-7-메톡시-, 아세테이트 (에스테르) (중간체 5)의 제조

2-프로판올 (30 ml) 중의 중간체 4 (0.0015 mol) 및 4-클로로-7-메톡시-6-퀴나졸리놀 아세테이트 (에스테르) (0.0015 mol)의 혼합물을 80 ℃로 가열하고, 반응 혼합물을 1일 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 잔류물을 다음 반응 단계에서 그대로 사용하여 0.83 g의 중간체 5를 얻었다.

e) 6-퀴나졸리놀, 4-[[5-브로모-2-[[(5-하이드록시펜틸)메틸아미노]메틸]페 닐]아미노]-7-메톡시-(중간체 6)의 제조

메탄올 (25 ml) 중의 중간체 5 (0.0015 mol)의 용액을 실온에서 교반하고, H₂O (2.5 ml) 중의 K₂CO₃ (0.003 mol)의 용액을 첨가한 다음, 반응 혼합물을 60 ℃로 가열하고, 18 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, H₂O (20 ml)를 첨가한 다음, 혼합물을 아세트산으로 중화시키고 형성된 침전물을 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축시키고, 농축물을 DCM으로 추출하고, 여과한 다음, 건조시켰으며 (MgSO₄), 혼합물을 감압 하에 농축시켜, 0.5 g (70 %)의 중간체 6을 얻었다.

실시예 3

a) 4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로-펜타데신, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸-(화합물 MTKI1)의 제조

THF (50 ml) 중의 중간체 6 (0.0011 mol)의 용액을 실온에서 교반하고, 트리부틸포스핀 (0.0016 mol)을 첨가한 다음, 1,1'-(아조디카보닐)비스-피페리딘 (0.0016 mol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 2 시간 동안 교반하였다. 초기 부피의 1/3까지 용매를 증발시켰다. 생성된 침전물을 여과하고 세척하였다. 여액을 증발시키고, 잔류물을 RP 고-성능 액체 크로마토그래피로 정제하였다. 산물 분획을 수집하고, 유기 용매를 증발시켰다. 수성 농축물을 DCM으로 2회 추출하고, 유기층을 건조시킨 다음 (MgSO₄), 여과하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 50 ℃에서 건조 시켜 (진공), 0.004 g (0.8 %)의 화합물 MTKI1을 얻었다.

상기 언급된 약제학적 조성물을 제조하기 위하여, 활성성분으로서의 치료적 유효량의 특정 화합물을 임의로 부가염 형태로, 투여를 위해 필요한 제제의 형태에 따라 각종 다양한 형태를 취할 수 있는 약제학적으로 허용가능한 담체와 친밀히 혼합한다. 이들 약제학적 조성물은 바람직하게는 경구 투여, 경피 투여 또는 비경구적 투여 등의 전신 투여; 또는 흡입제, 코 스프레이, 점안제 또는 크림, 겔, 샴푸 등을 통해서와 같은 국소 투여에 적절한 단위 제형인 것이 바람직하다. 예를 들면, 경구 제형의 조성물을 제조함에 있어서, 예를 들면, 현탁제(나노 현탁제 포함), 시럽, 엘릭시르 및 용액 등의 경구 액체 제제의 경우에는 물, 글리콜, 오일, 알콜 등; 또는 분제, 환약, 캡슐 및 정제의 경우에는 전분, 당, 카올린, 윤활제, 결합제, 붕괴제 등의 고체 담체와 같은 통상의 약제학적 매질 중 임의의 것을 사용할 수 있다. 이들의 투여 용이성으로 인해, 정제 및 캡슐이 가장 유리한 경구용 단위 제형을 나타내고, 이 경우에 고체 약제학적 담체가 명백히 사용된다. 비경구 조성물에 대해서는, 담체는 예를 들면 용해성을 돕기 위해 다른 성분이 포함될 수도 있으나, 통상적으로 적어도 대부분은 멸균수를 포함할 것이다. 예를 들면, 주사 용액은 담체가 식염수, 글루코오스 용액, 또는 식염수와 글루코오스 용액의 혼합물을 포함하도록 제조될 수 있다. 화학식 (I)의 화합물을 함유하는 주사 용액이 지속적인 작용을 위하여 오일로 제제화될 수 있다. 이러한 목적을 위한 적절한 오일은 예를 들어, 땅콩 기름, 참기름, 면실유, 옥수수유, 대두유, 긴 사슬 지방산의 합성 글리세롤 에스테르 및 이들과 다른 오일의 혼합물이다. 주사용 현탁제도 제조될 수 있고, 이 경우에 적당한 액체 담체, 현탁화제 등이 사용될 수 있다. 경피 투여에 적합한 조성물에 있어서, 담체는 임의로 어떤 성질을 갖는 적절한 첨가제와 소량의 비율로 배합된 침투촉진제 및/또는 적당한 습윤제를 포함하고, 상기 첨가제는 피부에 심각한 악영향을 끼치지 않는다. 상기 첨가제는 피부에의 투여를 용이하게 하고/하거나 원하는 조성물을 제조하는데 유용할 수 있다. 이들 조성물은 다양한 방법, 예를 들면 경피 패치, 스팟 온(spot-on) 또는 연고로서 투여될 수 있다. 국소 적용하기 위한 적절한 조성물로서, 국소 투여 약물, 예를 들어, 크림, 겔, 드레싱, 샴푸, 팅크쳐, 페이스트, 연고, 고약, 분제 등을 위하여 통상 사용되는 기술된 모든 조성물이 있을 수 있다. 상기 조성물의 적용은 질소, 이산화탄소, 프레온과 같은 분사제를 포함하는 에어로졸, 또는 펌프 스프레이, 드롭제, 로션과 같이 분사제를 포함하지 않는 에어로졸, 또는 면봉으로 적용될 수 있는 농축된 조성물과 같은 반고형에 의할 수 있다. 특히 반고형 조성물, 예로서, 고약, 크림제, 젤리, 연고제 등을 통상적으로 사용할 수 있다.

투여의 용이성 및 투여량의 균일성을 위해 상기 언급된 약제학적 조성물을 단위 복용 형태로 제형화하는 것이 특히 유리하다. 본 명세서 및 청구항에서 사용되는 단위 복용 형태는 단위 복용량으로 적절한 물리적으로 분리된 단위를 언급하고, 각 단위는 필요한 약제학적 담체와 관련하여 원하는 치료 효과를 내도록 계산된 소정량의 활성 성분을 함유한다. 그러한 투여 단위 형태의 예로는 정제(스코어(scored) 또는 피복된 정제 포함), 캡슐제, 환제, 분말 패킷, 웨이퍼, 주사용 용액제 또는 현탁액, 찻숟가락량 제제, 큰숟가락량 제제 등, 및 이들의 분할된 다중 회분(segregated multiples)이다.

바람직하게, 본 발명에 따른 화합물을 포함하는 약제학적 조성물의 치료적 유효량이 경구 또는 비경구적으로 투여된다. 상기 치료적 유효량은 환자에서 다양한 신생물 장애 또는 세포 증식성 장애 (앞에)의 전이 및/또는 성장을 효율적으로 예방하거나 이의 크기를 줄이는 양이다. 현재 데이터를 기초로, 본 발명의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물 및 특히, 활성 성분으로서 4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로-펜타데신, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸 (MTKI1)이 단일 용량 또는 예를 들어 매일 2, 3 또는 4회를 포함하는 다중 용량으로 하위 분할되어 매일 10 mg 내지 몇몇 (1 내지 5) 그램의 양으로 경구 투여될 수 있는 것으로 보인다. 바람직한 양은 매일 500 내지 4,000 mg이다. 특히, 이러한 화합물에 바람직한 용량은 매일 750 mg 내지 3,000 mg 범위이다. 본 명세서에서 활성 성분으로서도 언급되는 치료적 효능을 얻기 위해 요구되는 본 발명에 따른 화합물의 양은 물론 투여 경로, 수령자의 연령 및 상태, 및 치료하고자 하는 특정 질환 또는 장애에 따라 달라진다. 최적의 투여 용량 및 요법은 통상의 방법을 사용하여 본원에 기술된 정보의 관점에서 본 분야의 숙련자에 의하여 즉시 결정될 수 있다. 이러한 치료는 예를 들어, 사이클 당 1-21일 동안 제공되는 치료와 함께 3-4주의 사이클, 또는 효율적이고 안전한 것으로 보이는 다른 스케쥴을 포함하나 이에 한정 없이 지속적으로 또는 간헐적으로 주어질 수 있다.

하나의 예시적인 제제는 다음과 같다:

실시예 4: 제제:

산물 MTKI1은 10-mg/mL 경구 용액, pH 2로서 제조될 수 있다. 이는 정제수 중에 부형제, Captisol® (화학 명칭: 설포부틸 에테르-β-사이클로덱스트린, SBE-β-CD), 시트르산, Tween® 20, HCl 및 NaOH를 함유한다. 제제는 냉장 보관(2-8 ℃; 36-46 ℉)될 수 있으며, 용량 제조 전에 최대 1시간 동안 실온으로 가온시킬 수 있다. 산물 MTKI1은 또한 각각 사이즈 3, 4, 00의 젤라틴 경질 캡슐 중에 활성이 있는 화학적 물질 MTKI1, 락토오스 모노하이드레이트 (200 메쉬), 소듐 라우릴 설페이트 및 마그네슘 스테아레이트를 함유하는 50-mg, 100-mg 및 300-mg의 경구 즉방출형 캡슐로 제조될 수 있다. 캡슐은 젤라틴, 적색 산화철 (red iron oxide) 및 산화 티타늄 중 임의의 것 또는 모두를 함유할 수 있다.

상기 본 발명의 MTKI은 하나 이상의 다른 암 치료와 배합되어 사용될 수 있다. 이러한 배합물은 임의의 확립된 항종양 요법, 이를 테면 화학요법, 방사선 조사 및 표적 기초 치료법, 이를 테면 항체 및 소분자 (비제한적으로 테모졸로미드(Temozolomide) 또는 BCNU 포함)를 포함할 수 있다. 이들 치료법은 최적의 효능/안정성 요구에 따라 전신 치료법 또는 국소 점적 주입/투여 (예를 들어, 척수강내)와 배합될 수 있다.

MTKI1 (예를 들어, 화합물 1) 및 추가의 항암제는 동시에 (예를 들어, 분리 또는 단일 조성물로) 또는 순차적인 것 중 어느 한 순서로 투여될 수 있다. 후자의 경우에, 두 화합물은 유익한 첨가 또는 상승적 효과가 성취되도록 하는 데 충분 한 양 및 방식으로 그리고, 기간 내에 투여될 것이다. 배합물의 각 성분에 대한 바람직한 투여 방법 및 순서 및 각각의 투여 용량 및 요법이 투여되는 특정 MTKI 및 추가의 항암제, 그들의 투여 경로, 치료되는 특정 종양 및 치료되는 특정 숙주에 따라 달라질 것이라는 것이 고려될 것이다. 최적의 방법 및 투여 순서 및 투여 용량 및 요법이 본원에 기술된 정보의 관점 및 통상의 방법을 사용하여 본 분야의 숙련자에 의해 즉시 결정될 수 있다.

실험 데이터

MTKI1의 독특한 물리-화학적 특성은 여전히 훌륭한 세포 활성 및 경구 생체이용률을 보유하면서 무손상 뇌혈액장벽을 가로지르는 능력을 포함하는 매우 바람직한 조직 분포 프로필을 유발한다. 본원에서, 우리는 뇌 전이의 실험 모델을 사용하여 뇌에 대한 이러한 바람직한 조직 분포가 상당한 항종양 활성을 유발하는 것을 기술하였다.

A431 (ATCC, Rockville, MD. USA) 외음 암종 세포를 정위적으로(stereotactically) 무흉선 누드 마우스에 주사하였다. 마우스 연구의 경우에 MRI 이미징을 사용하여 또는 랫트 연구에서 판독으로서 동물 생존을 사용하여 종양 성장 지연을 수행하였다.

우리의 데이터는 MTKI 1이 가능성 있게 종양 성장을 지연시켜, 뇌 전이의 실험 모델에서 생존의 증가를 유발하는 것을 나타낸다.

방법

뇌 모델

랫트의 뇌에서 세포의 정위적 주사

0일에 파트 I에서 40 마리의 랫트 (Wistar, BDIX 또는 Sprague Dawley) 및 40 마리의 누드 랫트에 세포를 정위적으로 주사하였다. 종양 세포의 정위적 주사를 위하여, 케타민 (Ketamine500®, Ref 043KET204, Centravet, France) 및 자일라진 (Rompun®, Ref 002ROM001, Centravet, France) 혼합물 (2/1, v/v, 70 및 각각 15 mg/kg)을 근육내 주사하여 랫트를 마취시켰다. 4개의 독립적인 정위적 장치 (Kopf Instrument, Germany and Stoelting Company, USA)를 사용하여 1x10⁵ A431 세포를 5 ㎕의 RPMI 배지 중에 재-현탁된 1x10⁵ 종양 세포와 함께 우측 전두엽 세포에 정위적으로 주사하였다. SOP No TEC-083/001에 따라 0.5 ㎕/분으로 5 ㎕의 세포 현탁액을 주사하였다. 세포 주사 후에, 1 시간 동안 랫트를 관찰하였다.

랫트에서 세포의 피하 주사

정위적 주사와 동일한 날, 0일에 랫트에 A431 세포를 피하 주사하였다. 그들의 오른쪽 옆구리에 RPMI 배지 (200 ㎕) 중 1x1O⁷ A431 세포를 피하 주사하여 종양을 랫트에서 수득하였다. 종양 세포의 피하 주사를 위하여, 이소플루란 포렌(Isoflurane Forene) (Minerve, Bondoufle, France)의 흡입에 의해 랫트를 마취시켰다.

MTKI1 (하기의 도면에서 화합물 1)을 20% 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린 (20% β-HP-사이클로덱스트린, pH 4.0)의 용액에 용해시키고, 세포의 접종 4일 후에 시작하여, 매일 14일의 기간 동안, 예를 들어 4-17일에 경구 위삽관으로 제공하였다. 비히클 처리 동물에는 오직 β-HP-사이클로덱스트린 용액만을 제공하였다.

참조 화합물 BCNU (카르부스틴)을 4일 및 18일에 정맥 내로 투여하였다.

결과

뇌 모델

랫트에서 세포의 피하 주사

테스트된 3가지 용량, 예를 들어 50mpk, 75 mpk 및 100 mpk에서, 체중 손실 또는 행동 변화와 같은 독성의 임상적 징후가 MTKI 1으로의 처리와 관련되지 않았다. 상이한 동물에서 관찰된 중간 피하 종양 부피에서의 차이점을 관찰하였는데(도 1), A431 종양 성장에서 BCNU의 효과는 없는 반면, MTKI 1은 모든 테스트된 용량에서 피하 A431 종양 성장을 명백하게 억제하였다. 고용량의 BCNU (15 mpk)는 일부 가벼운 독성을 유도할 수 있으며(독성의 임상적 징후, 예를 들어 체중 손실이 더 빠르게 나타나는 것으로부터 증명), 심지어 비히클 대조군과 비교하여 증가된 종양 증식 속도를 나타내었다.

18일에, 예를 들어, 마지막 MTKI 1 처리 사이클 24 시간 후에, 피하 A431 종양의 통계적 분석(도 2)은 피하 종양 성장에서 테스트된 모든 용량의 MTKI1의 상당 한 효과를 나타낸다. 처리군 대 대조군 (대조군을 100%로 취함) 값은 50 mpk의 MTKI1에 대하여 15.37%, 75 mpk의 MTKI 1에 대하여 4.29% 및 100 mpk의 MTKI 1에 대하여 3.17%였다.

랫트의 뇌에서 세포의 정위적 주사

카팔란 마이어 생존 곡선 (도 3)은 MTKI 1 (화합물 1)로 처리된 동물에 대한 생존 혜택을 명백하게 나타내었다. 동물 생존 시간에서 MTKI 1 (화합물 1)의 용량-의존적인 효과(예를 들어, 폐에서 화합물의 잘못-투여 이후 일부 '우발적' 및/또는 뇌 종양의 존재와 관련되지 않은 동물 죽음이 관찰됨)가 관찰되었다. 생존 시간 (50%)은 비히클 처리된 동물에 대하여 49부터 각각 50 mpk, 75 mpk 및 100 mpk의 화합물 1로 처리된 동물에 대하여 61, 83 및 88 일로 변하였다.

이러한 실험에서, 91일에 생존한 일부 동물은 과도한 피하 종양 부담으로 인해 희생될 것이다.

상기 상세한 설명이 예시의 목적으로 제공된 실시예와 함께 본 발명의 원리를 교시하나, 본 발명의 실시가 다음 청구항 및 그의 균등물의 범위 내에 있는 모든 통상의 변경, 적용 및/또는 변형을 포함하는 것으로 이해될 것이다.

Claims

4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로-펜타데신, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 산 또는 염기 부가 염; 또는 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸-4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로 펜타데신 디하이드로브로마이드로 구성된 군에서 선택된 화합물의 치료적 유효량을 뇌암 또는 뇌암 전이의 치료를 필요로 하는 포유동물 대상에게 투여하는 것을 포함하여, 포유동물 대상에서 상기 뇌암 또는 뇌암 전이를 치료하거나 예방하는 방법.
제 1항에 있어서, 화합물이 다음 구조를 갖는 것을 특징으로 하는 방법:
제 1항에 있어서, 화합물의 치료적 유효량이 경구, 비경구, 국소 또는 경막내로 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1항에 있어서, 4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로-펜타데신, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 산 또는 염기 부가 염이 추가의 항암제와 배합되어 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 4항에 있어서, 추가의 항암제가 테모졸로미드 또는 BCNU로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
뇌암 또는 뇌암 전이의 치료 또는 예방을 위한 의약의 제조에서 4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로-펜타데신, 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 산 또는 염기 부가 염; 또는 17-브로모-8,9,10,11,12,13,14,19-옥타하이드로-20-메톡시-13-메틸-4,6-에탄디일리덴피리미도[4,5-b][6,1,12]벤족사디아자사이클로 펜타데신 디하이드로브로마이드로 구성된 군에서 선택되는 화합물의 용도.
제 6항에 있어서, 화합물이 다음 구조를 갖는 화합물로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 용도:
제 6항 또는 제 7항에 있어서, 의약의 치료적 유효량이 경구 또는 비경구적으로 투여되는 것을 특징으로 하는 용도.
제 6항 내지 제 8항 중 어느 한 항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물이 추가의 항암제와 배합되어 투여되는 것을 특징으로 하는 용도.
제 9항에 있어서, 추가의 항암제가 테모졸로미드 또는 BCNU로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 용도.