KR20090057043A

KR20090057043A - 항혈관 신생 작용이 있는 추출물과 레시틴을 함유하는 항혈관 신생 조성물

Info

Publication number: KR20090057043A
Application number: KR1020097006067A
Authority: KR
Inventors: 마사오 다카하시; 란 유안
Original assignee: 가부시키가이샤 하이마트
Priority date: 2006-09-22
Filing date: 2007-09-21
Publication date: 2009-06-03
Also published as: WO2008035756A1; JPWO2008035756A1; JP5215858B2

Abstract

항혈관 신생 추출물과 레시틴을 함유하는 항혈관 신생 조성물을 제공한다. 또한, 항혈관 신생 작용의 상승 효과를 나타내는 항혈관 신생 추출물과 레시틴과의 유효한 조합을 제시한다.

항혈관 신생 추출물, 항혈관 신생 조성물

Description

항혈관 신생 작용이 있는 추출물과 레시틴을 함유하는 항혈관 신생 조성물 {ANTI-ANGIOGENIC COMPOSITION COMPRISING EXTRACT HAVING ANTI-ANGIOGENIC ACTIVITY AND LECITHIN}

본 발명은 항혈관 신생 작용이 있는 추출물 (항혈관 신생 추출물)과 레시틴을 함유하는 항혈관 신생 조성물에 관한 것이다. 특히, 상어육 추출물 및/또는 홍합육 추출물과 레시틴을 함유하는 항혈관 신생 조성물에 관한 것이다.

또한, 본 발명의 항혈관 신생 조성물을 사용하여, 혈관 신생를 억제하는 것이 유효한 질환이나 심신 기능 장해의 치료법 또는 예방법에 관한 것이다.

혈관 신생이라 함은, 새로운 혈관의 증식, 성장을 의미한다. 혈관 신생은 다양한 생리적, 병적인 상태에서 중요한 역할을 하고 있다.

건강한 몸에서는 창상 치유에 있어서의 세포의 증식기에 상처를 입은 후의 조직에 대한 혈류 회복을 위하여, 그리고 여성의 월경기나 임신기에 혈관 신생이 일어난다.

건강한 몸에서는 혈관 신생의 촉진이나 억제는「on」,「off」의 절환에 의하여 제어되는데,「on」 스위치는 혈관 신생 자극 인자,「off」스위치는 혈관 신생 억제 인자라 불린다.

통상의 건강한 몸에서는 혈관 신생의 촉진이나 억제를 제어하기 위하여, 혈관 신생 인자와 혈관 신생 억제 인자의 균형이 잡혀 있다.

혈관 신생의 제어가 결여되면 많은 심각한 질환을 일으킨다. 이른바「혈관 신생 과잉」이 일으키는 질환은 많이 알려져 있다. 이러한 질환으로서는 관절염 (비특허 문헌 1, 2), 망막증 (비특허 문헌 3, 4), 황반변성증 (비특허 문헌 5, 6, 7) 및 암 (비특허 문헌 8, 9) 등이 있다. 예를 들면, 암은 정상적인 성장이나 장기에 비하여 높은 대사 효율을 가지고 있다. 따라서, 암은 더 높은 영양 공급을 얻기 위하여 더 많은 혈액을 필요로 하므로, 혈관 형성의 억제는 종양의 성장을 억제 또는 제어하는 하나의 메커니즘이 될 수 있다. 이와 같이, 혈관 신생 억제 인자는 이들 질환의 진전을 지연시킬 수 있다.

지질 베이스의 제제를 비롯한, 다수의 항혈관 신생 조성물이나 제제 (비특허 문헌 10, 11)가 알려져 있다. 이들 중 하나로 여러 종류의 상어의 근육 조직 유래의 것이 있다 (특허 문헌 1).

본 발명자는 이 상어육 추출물과 레시틴의 조합이 상어육 추출물의 항혈관 신생 효과를 증강하는 것을 밝혀내었다. 이와 같은 항혈관 신생 작용을 증강하는 효과는 항혈관 신생 작용을 갖지 않는 레시틴의 이미 알려진 특성으로부터는 예측되지 않았던 것이다.

또한, 다른 천연물 추출물이 가지고 있는 항혈관 신생 작용을 레시틴이 증강시킬 수 있는지 검토하여, 레시틴이 홍합육 추출물의 항혈관 신생 작용도 증강시킬 수 있다는 것을 발견하였다.

레시틴이 광범위한 천연물 추출물의 항혈관 신생 작용을 증강한다고 하는 놀라운 사실은 이 발견의 기초가 되고 있다.

특허 문헌 1: 일본 특표2004-516272호 공보

비특허 문헌 1: Giatromanolaki et al., Arthritis Research & Therapy, 5:R193-201.

비특허 문헌 2: DeBusk et al., Athritis & Rheumatism, 48:2461-71.

비특허 문헌 3: Bainbridge et al., Clinical Science, 104:561-75.

비특허 문헌 4: Umeda et al., Ophthalmic Research, 35:217-23.

비특허 문헌 5: Bainbridge et al., Clinical Science, 104:561-75.

비특허 문헌 6: Yamaza et al., Journal of Electron Microscopy, 51:127-31.

비특허 문헌 7: Ohno-Matsui et al., Journal of Cellular Physiology, 189:323-33.

비특허 문헌 8: Sivridis et al., JournaI of Pathology, 201:173-80.

비특허 문헌 9: Longo et al., Angiogenesis, 5:237-56.

비특허 문헌 10: Scappaticci, Expert Opinion on Investigational Drugs, 12:923-32.

비특허 문헌 11: Caceres and Gonzalez, Puerto Rico Health Sciences JournaI, 22:149-51.

본 발명은 항혈관 신생 추출물과 레시틴을 함유하는 항혈관 신생 조성물을 제공하는 것, 그리고 항혈관 신생 작용의 상승 효과를 나타내는 항혈관 신생 추출물과 레시틴과의 유효한 조합을 제시하는 것을 목적으로 한다.

첫째, 본 발명에서는 항혈관 신생 추출물과 레시틴을 함유하는 항혈관 신생 조성물을 제공한다.

본 발명의 제 1 구체적인 예로서 항혈관 신생 추출물은 상어육 추출물 및/또는 홍합육 추출물이다. 홍합육 추출물은 뉴질랜드산의 녹색입 홍합 (Perna canaliculus )의 홍합육 추출물이 좋다.

항혈관 신생 추출물과 레시틴의 항혈관 신생 조성물은, 또한 올리브유와 같은 식용유를 함유하는 것이 좋다. 또한, 상기 항혈관 신생 조성물은 비타민 E를 함유하는 것이 좋다.

항혈관 신생 추출물과 레시틴의 항혈관 신생 조성물에 함유되는 항혈관 신생 추출물과 레시틴의 중량에 기초한 비율은 상승 효과를 제공한다면 어떠한 중량 비율이어도 좋지만, 항혈관 신생 추출물:레시틴이 1:1 내지 10:1의 범위에 있는 중량 비율인 것이 좋다. 최적인 것은 4:1 내지 5:1이다.

둘째, 본 발명에서는 상기 첫째에 기재된 항혈관 신생 조성물을 포유 동물에 투여하는 것을 포함하는, 혈관 신생을 억제하는 것이 유익한 질환 또는 장해의 치료 방법 또는 예방 방법을 제공한다. 따라서, 상기 첫째에 기재된 항혈관 신생 조성물은 의약의 형태이어도 좋다.

또한, 본 발명에서는 혈관 신생을 억제하는 것이 유익하다고 생각되는 질환이나 장해를 예방이나 치료하기 위한 항혈관 신생 조성물도 제공한다.

본 발명의 혈관 신생을 억제하는 것이 유익한 질환이나 장해는 관절염, 망막증, 황반부 변성 및 암이다. 치료나 예방의 대상은 포유 동물, 예를 들면 사람; 개, 고양이 등의 애완 동물; 소, 돼지, 닭 등의 가축 동물이며, 특히 사람인 것이 좋다.

또한, 본 발명에서는 혈관 신생을 억제하는 것이 유익하다고 생각되는 질환이나 장해를 예방 또는 치료하기 위한 의약을 제조하기 위한 항혈관 신생 조성물의 사용도 제공한다.

발명의 효과

놀랍게도, 본 발명자는 상어육 추출물이나 홍합육 추출물과 같은 항혈관 신생 추출물과 레시틴의 혼합물이 레시틴이 함유되지 않은 추출물에 비하여, 현저하게 항혈관 신생 작용을 증강한다는 것을 발견하였다.

따라서, 천연물로부터 얻는 항혈관 신생 작용이 있는 추출물을 레시틴과 조합함으로써, 단독으로 사용하였을 때보다 그 추출물의 항혈관 신생 작용을 증강할 수 있다. 특히, 항혈관 신생 작용이 있는 상어육 추출물 및/또는 홍합육 추출물과 레시틴과의 조합은 단독으로 사용하였을 때보다 이들 추출물의 항혈관 신생 작용을 증강할 수 있다.

본 발명에서는 항혈관 신생 추출물과 레시틴을 함유하는 항혈관 신생 조성물을 제공한다. 특히, 상어육 추출물 및/또는 홍합육 추출물과 레시틴을 함유하는 항 혈관 신생 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 있어서의「항혈관 신생 추출물」이라고 하는 용어는 천연물로부터 얻을 수 있는 항혈관 신생 작용이 있는 추출물을 의미하고, 예를 들면, 상어육으로부터 얻을 수 있는 추출물, 홍합육으로부터 얻을 수 있는 추출물, 버섯의 균체로부터 얻을 수 있는 추출물 (예를 들면, WO/2006/009477로 항혈관 신생 작용이 있는 것이 보고되어 있는 목질 진흑 버섯(Phellinus Linteus )이나 잎새 버섯 (Grifola frondosa)으로부터 얻는 추출물) 등을 들 수 있다. 이 때, 천연물이란 동물, 식물, 미생물 등의 생물을 의미하고, 천연물은 가공되어 있는 것이어도 좋고 가공되어 있지 않은 것이어도 좋다. 또한, 항혈관 신생 작용이라 함은, 혈관 형성 억제 작용, 즉 새로운 혈관의 증식이나 성장을 간섭 또는 억제하는 작용을 의미한다.

본 발명에 있어서의「추출물」이라고 하는 용어는 고체 및/또는 액체의 천연물을 특정의 용매와 혼합한 후의 용매 획분 또는 용매 획분으로부터 용매를 제거한 후의 물질을 의미한다. 추출물은 크로마토그래피나 여과 등의 통상의 방법으로 분획, 단리되어도 좋다.

추출 방법에는 용매 추출법이 포함되지만, 반드시 그것에 한정되는 것은 아니다. 적절한 용매라면 어떠한 것이라도 좋다. 용매는 유기 용매, 수성 용매, 또는 이들의 혼합 용매도 생각할 수 있다. 에탄올은 유기 용매 (또는, 수성 에탄올 혼합 용매)로서 대표적인 것이지만, 다른 유기 용매 (예를 들면, 메탄올, 초산에틸, 디클로로메탄, 또는 혼합 용매)를 사용하여도 좋다. 또한, 추출 용매로서 초임계 이산화탄소와 같은 초임계 유체도 사용할 수 있다.

본 발명에 있어서「상어육 추출물」이라고 하는 용어는 상기 용매를 사용하여 상어육으로부터 얻은 추출물을 의미한다. 특히, 특허 문헌 1에 개시되어 있는 상어육 추출물을 의미한다. 여기서 말하는「상어육」이란, 먹을 수 있는 부분을 비롯한 모든 어육 부분을 가리키지만, 오해를 피하기 위하여 내장 부분은 포함하지 않는 것으로 한다.

본 발명의 상어육 추출물은 일반적으로, 대략 15℃ 내지 25℃의 범위를 나타내는 환경 온도에서 일반적으로 오일 또는 페이스트와 같은 유상의 물질이다.

이 상어육 추출물의 주요 성분은 포스파티딜에탄올아민 (PE)이나 포스파티딜코린 (PC)과 같은 인지질이라는 것이 알려져 있다 (특허 문헌 1). 인지질 함유량은 통상 20 내지 40 중량%의 범위이다. 또한, 통상적으로 도코사헥사엔산 (DHA), 아라키돈산 (AA), 에이코사펜타엔산 (EPA) 등의 인지질 지방산을 함유하고 있다. 다른 어류 추출물 또는 제품과 비교하면, 상어육 추출물은 총지방산에 대하여 높은 농도 (20 내지 35 중량%)의 DHA를 함유하고 있다. DHA 샘플은 혈관 형성의 강력한 억제제라는 것이 알려져 있다 (특허 문헌 1). 상어육 추출물 중의 DHA 농도가 높은 것을 생각할 때, DHA는 이 추출물의 혈관 형성 억제 능력의 일단을 담당하고 있는 성분이라고 추측된다. 또한, 상어육 추출물은 트리글리세라이드 농도가 낮은 (10 중량% 미만) 점에서도 다른 어류의 추출물이나 제품과 분명히 다르다.

대표적인 추출법은 1종 또는 그 이상의 상어의 육편을 블렌더를 사용하여 잘게 자르고, 프리즈드라이 (또는 풍건이라도 좋다)한 후 에탄올과 같은 용매와 혼합한다. 통상적으로, 이 혼합물은 실온에서 1 내지 24 시간 교반된다. 또한, 여과에 의하여 용매가 육편으로부터 분리된다. 육편과 용매의 혼합은 임의이지만 반복된다. 그 후, 용매는 증발에 의하여 제거되고, 상어육 추출물을 오일 또는 유상 물질로서 얻을 수 있다. 이 오일 또는 유상 물질은 통상 각종 유리형 지방산 및 글리세롤 결합형 지방산을 함유한다.

본 발명에 있어서의「상어육」이라는 용어는 여기에 말하는 것에만 한정되는 것은 아니지만, 리그 (rig, lemonfish; 학명: Mustelus lenticulatus), 스쿨 샤크 (school shark; 학명: Galeorhinus galeus), 고스트 샤크 (Ghost Shark; 학명: Hydrolagus sp), 청상아리 (mako shark; 학명: Isurus oxyrinchus), 청새리 상어 (blue shark; 학명: Prionace glauca), 엘리펀트 피쉬 (elephant fish; 학명: Callorhynchus milii), 악상어 (salmon shark; 학명 Lamna ditropis), 검정 지느러미 상어 (blacktip reef shark; 학명: Carcharhinus melanopterus), 곱상어 (spiny dogfish; 학명: Squalus acanthias)를 비롯한, 여러가지 상어 또는 상어 모양 생물의 육편을 의미한다. 좋기로는 청새리 상어 (blue shark; 학명: Prionace glauca)이고, 더 좋기로는 곱상어 (spiny dogfish; 학명: Squalus acanthias)이다.

본 발명에 있어서의 「홍합육 추출물」이라는 용어는 상기 용매를 사용하여 홍합육으로부터 얻은 추출물을 의미한다. 여기서 말하는 「홍합육」이라 함은 먹을 수 있는 부분을 비롯한 모든 패육(貝肉) 부분을 가리키고, 내장 부분도 포함한다. 본 발명의 홍합육 추출물은 일반적으로 대략 15℃ 내지 25℃의 범위를 나타내는 환경 온도에서 일반적으로 오일 또는 페이스트와 같은 유상의 물질이다.

이 홍합육 추출물에는 장쇄 ω3 지방산 (특히 EPA 및 DHA), 인지질, 다양한 해양성 스테롤 등 지질이 포함된다.

대표적인 추출법은 1종 또는 그 이상의 홍합의 육편을 블라인더를 사용하여 잘게 자르고, 블리즈드라이 (또는 풍건이라도 좋다)한 후 에탄올과 같은 용매와 혼합한다. 통상, 그 혼합물은 실온에서 1 내지 24 시간 교반된다. 또한, 여과에 의하여 용매가 육편으로부터 분리된다. 육편과 용매의 혼합은 임의이지만 반복된다. 그 후, 용매는 증발에 의하여 제거되고, 홍합육 추출물이 오일 또는 유상 물질로서 얻어진다.

본 발명에 있어서의「홍합육 추출물」이라는 용어는, 여기서 말하는 것에만 한정되지는 않지만, 녹색입 홍합 (Perna canaliculus)나 진주 담치 (Mytilus edulis)를 비롯한 다양한 홍합의 홍합육으로부터 얻을 수 있는 추출물을 의미한다.

본 발명에 있어서의「레시틴」이라는 용어는 인지질을 비롯한, 지질 조성물을 의미하는데, 시판하는 지질 제품 또는 조성물이어도 좋다. 좋기로는 인지질로서 포스파티딜코린을, 지질 전체에 대하여는 10 내지 100 중량%, 좋기로는 20 내지 90중량%, 더 좋기로는 25 내지 90 중량% 포함한다. 레시틴을 구성하는 지질의 기원은 상어육 유래 및 홍합육 유래가 아니면 특히 한정되지 않고, 식물 (예를 들면, 대두, 해바라기씨 및 유채씨), 동물 (예를 들면, 계란의 노른자), 미생물 유래이어도 좋다. 좋기로는 대두 및 난황 유래이다. 예를 들면, 대두 레시틴이란, 대두로부터 만드는 포스파티딜코린을 함유하는 지질 조성물을 의미한다. 또한, 난황 레시틴이란, 계란 노른자로부터 만드는 포스파티딜코린을 함유하는 지질 조성물을 의미한다. 대두 레시틴 및 난황 레시틴은 시판품이어도 좋고, 직접 조제한 것이어도 좋 다.

본 발명에 있어서의 「항혈관 신생 조성물」이란, 천연물로부터 얻는 항혈관 신생 작용이 있는 추출물과 레시틴을 함유함으로써, 항혈관 신생 작용이 있는 추출물 단독으로 사용하는 경우보다 항혈관 신생 작용이 증강된 항혈관 신생 작용이 있는 조성물을 의미한다.

본 발명의 항혈관 신생 조성물은 그대로 사용하여도 좋고, 경구 투여를 위하여, 식용유와 혼합하여 캅셀화할 수도 있다. 또한, 항혈관 신생 조성물을 시클로덱스트린과 같은 고형 캐리어와 혼합하여, 정제, 과립, 분말 등의 형상으로 할 수도 있다. 이 과립이나 분말 및 그와 유사한 형상의 것은 경구 투여를 위하여, 식품과 같은 다른 물질에 함유시키거나 혼합시켜도 좋다. 항혈관 신생 조성물이 주사에 대응하는 용매에 용해될 수 있는 것도 생각할 수 있다. 또한, 비타민 E와 같은 성분의 추가도 처방에 포함될 수 있다.

식용유에는 올리브유, 참기름, 면실유, 낙화생유, 팜유, 유채유, 콘유, 아마인유, 소맥 배아유, 대두유, 피마자유, 미강유, 아몬드유, 카카오 지방, 코코넛유, 양귀비씨 기름, 해바라기유 및 차실유 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용하여도 좋고, 조합하여 사용하여도 좋다. 이들 식용유는 시판되는 것이어도 좋고, 직접 조제한 것이어도 좋다. 좋기로는 올리브유이다.

올리브유라 함은, 올리브의 열매를 으깨거나 압착하여 짜낸 기름을 의미한다. 마찬가지로 참기름, 면실유, 낙화생유, 팜유, 유채유, 콘유, 아마인유, 소맥 배아유, 대두유, 피마자 오일, 미강유, 아몬드 오일, 카카오 지방, 코코넛유, 양귀 비씨 기름, 해바라기유 및 차실유는 각각의 종자나 열매를 으깨거나 압착하여 짜낸 기름을 의미한다.

비타민 E란, α-, β-, γ-, δ-토코페롤 (tocopherol)과 α-, β-, γ-, δ-토코트리에놀 (tocotrienol)을 의미하는데, 산화 방지를 위하여 사용된다.

본 발명의 항혈관 신생 조성물에는 당업자에게 주지인 감미료, 착색료, 향료, 산화 방지제 및/또는 보존제 등을 추가로 함유하여도 좋다.

본 발명의 항혈관 신생 조성물 중에 있어서의 항혈관 신생 작용이 있는 추출물과 레시틴을 합한 합계량의 함유율은, 예를 들면 0.1 내지 99.9 중량%, 좋기로는 1 내지 99%이다. 나머지 부분은 식용유, 감미료, 착색료, 향료, 산화 방지제 및/또는 보존제 등이다.

혈관 형성은 병이나 장해와 광범위하게 관련되어 있다. 그러므로, 본 발명의 항혈관 신생 조성물은 그와 같은 병이나 장해의 치료나 예방을 위하여 유용하다. 혈관 형성에 관한 질환이나 장해는 이들에 한정되는 것은 아니지만, 암, 망막증, 황반변성증, 건선 및 관절염이 포함된다.

따라서, 본 발명에 있어서의「혈관 신생을 억제하는 것이 유익한 질환 또는 장해」라 함은, 혈관 신생을 억제함으로써, 질환 또는 장해의 진행이 억제되거나 또는 증상이 개선 또는 경감되는 질환 또는 장해를 의미하며, 예를 들면 암, 망막증, 황반변성증, 건선 및 관절염 등을 들 수 있다.

본 발명에 있어서의 「치료」라 함은, 이미 발병한 질환 또는 장해의 진행을 억제하거나 또는 증상을 개선 또는 경감하는 것을 의미한다. 또한,「예방」이라 함 은, 질환 또는 장해의 발증(發症)을 방지하거나 또는 지연시키는 것을 의미한다.

관절염이라 함은, 예를 들면 변형성 관절증, 악관절증이나 류머티즘성 관절증을 의미한다. 좋기로는 활막염을 수반하는 류머티즘성 관절증을 의미한다. 망막증이란, 예를 들면 당뇨병 망막증, 고혈압 망막증을 의미한다.

황반변성증이란, 예를 들면 가령 황반변성증을 의미한다. 좋기로는 참출형의 가령황반변성증을 의미한다.

암이란 악성 종양을 의미하며, 예를 들면 폐암, 유방암, 위암, 대장암, 자궁암, 난소암, 후두암, 인두암, 설암, 골육종, 연골 육종, 횡문근 육종, 평활근 육종, 섬유 육종, 지방 육종, 혈관 육종, 백혈병, 악성 임파종, 골수종 등을 들 수 있다. 좋기로는 멜라노마 등의 피부암, 유방암이다.

본 발명의 항혈관 신생 조성물은 이들 질환 또는 장해의 치료나 예방을 위한 의약의 제조를 위하여 사용할 수 있다. 항혈관 신생 조성물을 함유하는 의약은 본 발명의 항혈관 신생 조성물을 크림, 설하제, 맛사지 오일, 용액, 현탁액, 로션, 연고, 겔, 정제, 캅셀제, 과립제, 가루약, 시럽제, 좌제 등으로 하여, 경구 투여, 경피 투여, 설하 투여, 경장 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 정맥 투여, 경비 투여, 점안 투여하여도 좋다. 좋기로는 크림, 설하제, 맛사지 오일이다. 그 때문에, 항혈관 신생 조성물을 함유하는 의약은 의약적으로 허용되고 있는 당업자에게 주지인 캐리어나 아쥬반트 (adjuvant) 또는 첨가제 등을 더 함유하고 있어도 좋다.

의약적으로 허용되는 주지의 캐리어, 아쥬반트, 또는 첨가제 등으로서는 용매, 식물유, 광유, 지방유, 유동 파라핀, 완충제, 보존제, 습윤제, 킬레이트제, 항 산화제, 안정화제, 유화제, 현탁화제, 겔 형성제, 연고 기제, 좌제 기제, 침투 촉진제, 방향제, 감미료, 착색료, 향료 및 피부 보호제 등을 들 수 있다.

용매로서는 물, 알코올, BG(1,3-부틸렌글리콜), 폴리에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세롤, 액체 폴리알킬실록산 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있으나, 이들에 한정되는 것은 아니다.

식물유로서는 먼저 기재한 식용유 등을 들 수 있다.

완충제로서는 구연산, 초산, 주석산, 젖산, 인산수소, 디에틸아민 및 그들의 혼합물 등을 들 수 있으나, 이들에 한정되는 것은 아니다.

습윤제로서는 글리세린, 프로필렌 글리콜, 펜티렌 글리콜, 소르비톨, 젖산, 요소, BG(1,3-부틸렌 글리콜), 대두 스테롤 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있으나, 이들에 한정되는 것은 아니다.

킬레이트제로서는 EDTA 나트륨, 구연산 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.

항산화제로서는 앞서 기재한 비타민 E에 더하여 부틸화히드록시아니솔 (BHA), 아스코르브산 및 그 유도체와 시스테인 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있으나, 이들에 한정되는 것은 아니다.

유화제로서는 천연 고무 (예를 들면, 아카시아 고무), 트라가칸트 고무, 크산탄검; 천연 포스파티드 (예를 들면, 대두 레시틴); 모노올레인산 소르비탄 유도체; 양모지; 양모 알코올; 소르비탄 에스테르; 모노글리세라이드; 지방 알코올 (예를 들면, 베헤닐알코올); 지방산에스테르 (예를 들면, 트리(카프릴/카프린산)글리 세릴, 스테아린산글리세릴(SE)과 같은 지방산의 트리글리세리드) 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.

현탁화제로서는 셀룰로오스 및 그 유도체 (예를 들면, 카르복시메틸 셀룰로오스, 히드록시에틸 셀룰로오스, 히드록시프로필 셀룰로오스, 히드록시프로필메틸 셀룰로오스 등), 카라게난, 아카시아 고무, 아라비아 고무, 트라가칸트 및 그들의 혼합물 등을 들 수 있지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.

겔 기제 및 증점 성분으로서는 유동 파라핀, 폴리에틸렌, 지방유, 콜로이드 실리카 또는 알루미늄, 아연 비누, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 트라가칸트, 카르복시비닐폴리머, 규산마그네슘-알루미늄, 친수성 폴리머 (예를 들면, 전분, 카르복시메틸 셀룰로오스, 히드록시에틸 셀룰로오스 및 다른 셀룰로오스 유도체 등의 셀룰로오스 유도체), 물 팽윤성 친수 콜로이드, 카라게난, 히알론산염 (예를 들면, 염화나트륨을 선택적으로 포함하는 히알론산겔), 알긴산에스테르 (예를 들면, 알긴산프로필렌글리콜) 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있으나, 이들에 한정되는 것은 아니다.

연고 기제로서는 밀랍, 파라핀, 세탄올, 팔미트산세틸, 세테아릴알코올 스테아린산폴리글리세릴-10, 스테아린산, 스테아린산 PEG-150, 식물유, 지방산의 솔비탄 에스테르, 폴리에틸렌글리콜, 지방산의 솔비탄에스테르와 산화에틸렌과의 사이의 축합 생성물 (예를 들면, 모노올레인산 폴리옥시에틸렌솔비탄) 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있으나, 이들에 한정되는 것은 아니다.

소수성 연고 기제로서는 파라핀, 식물유, 동물 지방, 합성 글리세라이드, 밀 랍, 라놀린, 액체 폴리알킬실록산 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있으나, 이들에 한정되는 것은 아니다.

친수성 연고 기제로서는 고체 매크로골 (폴리에틸렌글리콜) 등을 들 수 있으나, 이것에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 조성물은 또한 혈관 신생 억제 작용이 있는 다른 약제를 함유하여도 좋다.

본 발명의 항혈관 신생 조성물 중에 있어서의 항혈관 신생 작용이 있는 추출물과 레시틴을 합한 합계량의 함유율은 예를 들면 0.1 내지 99.9 중량%, 좋기로는 1 내지 99%이다. 나머지 부분은 관용 캐리어, 아쥬반트, 첨가제 또는 다른 약제 등이다.

본 발명에서 사용되는 질환 또는 장해를 치료 또는 예방하는 데 유효한 투여량은 질환 또는 장해의 정도, 투여 방법에 따라서 달라지는데, 혈관 신생을 억제하기 위하여 유효한 양이면 한정되지 않지만, 항혈관 신생 추출물의 양이 0.O1 ㎎ 내지 100 ㎎/체중 ㎏·일, 좋기로는 0.1 ㎎ 내지 10 ㎎/체중 ㎏·일, 더 좋기로는 1.0 ㎎ 내지 100 ㎎/체중 ㎏·일이다.

본 발명에 관하여, 이하의 예에 의하여 더 설명한다. 다만, 본 발명은 이하에 제시하는 예에 한정되는 것은 아니라는 것을 이해하기 바란다.

실시예 1

상어육 추출물+레시틴의 항혈관 신생 작용

청새리 상어육 추출물의 조제

동결한 청새리 상어육을 2 cm의 두께로 슬라이스하여, 35℃, 2 mbar 미만으로 세트된 진공 오븐에 넣었다. 24 시간 후에 육편을 꺼내어, 가늘게 분쇄한 후 다시 진공 오븐에 3 내지 4일간 다시 넣어 두었다. 상어육의 중량은 통상적으로 동결 건조의 과정에서 원래의 20%까지 감소된다. 동결 건조된 육편은 또한 손으로 잘게 나눈 후 워링블렌더로 분쇄하여, 가루와 섬유질의 혼합물로 하였다.

상어육 파우더 (900 g)와 용매 (99.5 용량% 에탄올 4.5 L)는 하룻밤 교반하였다. 효과적으로 교반하기 위하여, 용매:파우더의 비가 5:1이 될 필요가 있다. 용기는 알루미늄 호일로 덮어 차광하였다. 그 혼합물은 쉬라이처 앤드 슈엘 595 (Schleicher & Schuell 595) 여과지를 사용하여 여과하였다. 여과 잔사는 새 용매 (3 L)와 함께 하룻밤 교반한 후 여과하였다. 2회의 여과로 얻은 여액을 혼합하고, 로터리 에바포레이션에 의하여 용매를 제거하여, 청새리 상어육 추출물을 오일 형태의 물질로서 얻었다 (수율 13.7%).

레시틴은 큐피(주) 제품인 난황 레시틴 PL-30S를 사용하였다. 난황 레시틴 PL-30S는 계란의 노른자로부터 추출된 레시틴으로, 그 지질 조성은 포스파티딜코린 29.6%, 포스파티딜에탄올아민 4.8%, 스핀고미에린 0.3%, 리조포스파티딜코린 0.4%, 트리글리세라이드 62.1%, 콜레스테롤 2.8%이다.

항혈관 신생 활성의 측정

항혈관 신생 작용은 대동맥 링 에세이법 (aortic ring assay)으로 측정되었다. 실험 방법은 니코시아와 오티네티(Nicosia and Ottinetti)의 기술 (Lab Invest. 63:115-122 (1990)) 및 브라운(Brown) 등의 기술 (Lab Invest. 75:539-555 (1996))에 기초하고 있다.

지방 및 혈관 주변 섬유 조직을 제거한 후, 래트 (Lewis rat, Charles River Laboratories, Wilmington, MA, USA)의 대동맥을 두께 2 mm의 환상으로 잘랐다. 피브리노겐 용액 0.4 mL (피브리노겐 용액은 150 ㎎의 피브리노겐 (Sigma Cat No. F-9754, Batch 041K7604)을 용해시킨 50 mL의 MCDB131 배양액 (Sigma Cat No. M-8537, Batch 064K8305) 3 mL에 1 ㎎/mL의 트롬빈 10 ㎕ (Serva Cat No. 36402. Batch 09309)를 가하여 작성되었다.)를 24 웰 배양 플레이트 (Costar (등록 상표) 24 Well TC-Treated Microplates, Individually Wrapped (Product #3524) Corning Incorporated, USA) 중의 각 웰에 부어, 피브린 겔을 작성하였다. 대동맥 링은 각 웰의 중심 부분에 배치되고, 그 위로부터 별도의 피브린 겔 (피브리노겐 용액 0.4 mL)을 덮었다. 또한, 겔은 MCDB131 배양액 (1.5 mL)으로 덮이고, 37℃, 3% CO₂/97% 공기의 조건하에서 배양되었다. 상어육 추출물 단독 또는 상어육 추출물+레시틴이 서플리먼트로서 배양액에 첨가되었다. 상어육 추출물 단독 또는 상어육 추출물+레시틴의 각각에 대하여 3개의 샘플을 준비하여 분석하였다. 또한, 배양액만을 대조군으로서 분석하였다.

약 5일 후에 미소 혈관이 링 주변 (링의 외측, 내측 모두)에서부터 생장하고 있는 것을 확인할 수 있을 것이다. 5일째부터 14일째까지 일정한 간격으로 각각의 웰의 화상이 기록된다. 촬영에는 도립현미경 (OLYMPUS CK-12 microscope)에 설치한 디지털 카메라 (Pixera PVC-100C digital camera)가 사용되었다. 링 주변의 미소 혈관의 성장 범위는 화상마다 NIH Image 1.59 소프트웨어 (http://rsb. info.nih.gov/nih-image/about.html)를 사용하여 결정되었다. 각각의 시점에서, 성장률 (검체 A/대조군 A×100=성장률, A=링의 외륜으로부터 뻗은 신생 혈관 면적+링의 내륜으로 뻗은 신생 혈관 면적)÷링 그 자체의 면적)의 평균을 정하고, 미소 혈관의 성장률이 상어육 추출물 단독 및 상어육 추출물+레시틴에 대하여 결정되며, 혈관 신생 억제율이 계산되었다.

표 1은 상어육 추출물과 레시틴을 포함하는 조성물 (상어육 추출물+레시틴으로서 표시하고 있다)의 항혈관 신생 작용을 나타내고 있다. 레시틴을 첨가한 경우, 그 추출물의 항혈관 신생 작용은 2배 이상이 된다. 상어육 추출물+레시틴이 제공하는 52.3%의 억제율은 상어육 추출물에 레시틴을 혼합하는 것에 의하여 제공된 상승적인 항혈관 신생 효과인 것을 나타내고 있다.

혈관 신생 억제율

상어육 추출물 (10 ㎛/㎖)	24.40%
상어육 추출물 (10 ㎛/㎖)+레시틴(2.45 ㎍/㎖)	52.27%

실시예 2

홍합육 추출물+레시틴

녹색입 홍합육 추출물의 조제

실시예 1의 상어육 추출물의 경우와 마찬가지로, 동결 건조하여 파우더화한 녹색입 홍합육을 에탄올 추출하고, 여과, 용매 제거하여 조제하였다.

녹색입 홍합육 추출물 및 녹색입 홍합육 추출물+레시틴에 대하여, 항혈관 신생 작용을 실시예 1과 동일하게 평가하였다.

표 2는 녹색입 홍합육 추출물 및 녹색입 홍합육+레시틴의 항혈관 신생 활성을 나타내고 있다. 녹색입 홍합육 추출물 단독으로는 상어육 추출물 단독보다 약간 낮은 항혈관 신생 효과가 나타난다. 레시틴을 녹색입 홍합육 추출물에 첨가한 경우, 그 항혈관 신생 작용은 유의하게 (약 2배) 증가하였다.

항혈관 신생 작용이 있는 추출물의 항혈관 신생 작용을 증강하는 레시틴의 효과는 녹색입 홍합육 추출물의 데이터에 의하여 더 뒷받침되었다. 녹색입 홍합육 추출물은 비교적 항혈관 신생 작용은 약하다 (사실, 녹색입 홍합육 추출물은 항염증 작용이 있는 것으로 알려져 있다 (WO/2006/052150)). 그러나, 레시틴을 4:1의 비율로 첨가하면, 의외로 그 항혈관 신생 작용은 약 2배 정도로 상승하였다.

혈관 신생 억제율

홍합육 추출물 (10 ㎛/㎖)	12.83%
홍합육 추출물 (10 ㎛/㎖)+레시틴(2.45 ㎍/㎖)	24.89%

레시틴이 상어육 추출물이나 홍합육 추출물의 항혈관 신생 작용을 모두 증강한다고 하는 사실은 레시틴이 항혈관 신생 작용이 있는 다른 여러 가지 천연물 추출물에 있어서도 상승 (증강) 효과를 발휘하는 것을 시사하고 있다.

본 발명에 대하여 예를 참고하여 설명하였지만, 발명의 범위를 벗어나지 않는 한, 여러 가지 응용 또는 개선이 가능하다. 또한, 동일한 특징을 가진 것이 알려져 있는 물질에 대하여는 이 명세서에서 상세히 설명한 바와 같이 다루어지는 것으로 한다.

본 발명의 항혈관 신생성 조성물은 폭 넓은 여러 가지 질환에 대한 치료, 예방에 유익하다. 이들 질환에는 관절염, 망막증, 황반변성증, 건선 및 암 등의 혈관 신생이 관여하는 질환이 포함된다.

Claims

항혈관 신생 추출물과 레시틴을 함유하는 항혈관 신생 조성물.
제1항에 있어서, 항혈관 신생 추출물은 상어육 추출물 및/또는 홍합육 추출물인 것인 항혈관 신생 조성물.
제2항에 있어서, 홍합육은 뉴질랜드산 녹색입 홍합육인 것인 항혈관 신생 조성물.
제1항 내지 제3항 중 어느 하나의 항에 있어서, 식용유가 더 첨가되어 있는 것인 항혈관 신생 조성물.
제4항에 있어서, 식용유는 올리브유인 것인 항혈관 신생 조성물.
제1항 내지 제5항 중 어느 하나의 항에 있어서, 비타민 E가 더 첨가되어 있는 것인 항혈관 신생 조성물.
제1항 내지 제6항 중 어느 하나의 항에 있어서, 항혈관 신생 추출물과 레시틴의 중량 비율은 1:1 내지 10:1의 범위인 것인 항혈관 신생 조성물.
제7항에 있어서, 중량 비율은 4:1 내지 5:1인 것인 항혈관 신생 조성물.
제1항 내지 제8항 중 어느 하나의 항에 있어서, 혈관 신생을 억제하는 것이 유익한 질환 또는 장해를 치료 또는 예방하기 위한 항혈관 신생 조성물.
제9항에 있어서, 질환 또는 장해는 관절염, 망막증, 황반변성증 및 암 등으로 이루어지는 군 중에서 선택되는 것인 항혈관 신생 조성물.
제1항 내지 제10항 중 어느 하나의 항에 있어서, 혈관 신생을 억제하는 것이 유익한 질환 또는 장해를 치료 또는 예방하기 위한 의약을 제조하기 위한 항혈관 신생 조성물의 사용.
제11항에 있어서, 질환 또는 장해는 관절염, 망막증, 황반변성증 및 암 등으로 이루어지는 군 중에서 선택되는 것인 사용.
제1항 내지 제10항 중 어느 하나의 항에 기재된 항혈관 신생 조성물을 포유 동물에 투여하는 것을 포함하는, 혈관 신생을 억제하는 것이 유익한 질환 또는 장해를 치료 또는 예방하는 방법.
제13항에 있어서, 질환 또는 장해는 관절염, 망막증, 황반변성증 및 암으로 이루어지는 군 중에서 선택되는 것인 방법.