KR20090050789A - 바실러스 아밀로리퀴페시언스 케이제이-6 및 이를 이용하여감귤원 부산물을 퇴비화하는 방법 - Google Patents

바실러스 아밀로리퀴페시언스 케이제이-6 및 이를 이용하여감귤원 부산물을 퇴비화하는 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 섬유소 분해능 및 항균활성을 가지는 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6(KACC 91260P) 및 이를 이용하여 감귤원 부산물을 퇴비화하는 방법을 제공한다.
본 발명에 의하면 바실러스 아밀로리퀴페시언스 KJ-6를 이용하여 안정하게 감귤원 부산물의 퇴비화가 가능하게 되어 감귤원 부산물의 자원을 재활용할 수 있다.

Description

바실러스 아밀로리퀴페시언스 케이제이-6 및 이를 이용하여 감귤원 부산물을 퇴비화하는 방법{Bacillus amyloliquefaciens KJ-6 and the method for decomposing to citrus tree sawdust using it}
본 발명은 섬유소 분해능 및 항균 활성이 있는 신규한 미생물인 바실러스 아밀로리퀴페시언스 KJ-6(KACC 91260P) 및 이를 이용하여 감귤원 부산물을 퇴비화하는 방법에 관한 것이다.
화학합성 농자재의 남용으로 인하여 농경지가 오염되고 식품의 안전성에 대한 관심이 증가하면서 안전한 농식품 생산과 지속가능한 농업을 위하여 친환경농업의 필요성이 요구되고 있다. 이를 위하여 친환경농자재의 사용과 농업부산물의 자원화를 위하여 많은 노력이 이루어지고 있다.
농업부산물의 자원화를 위하여는 물질의 분해와 순환에 중요한 역할을 하는 미생물의 기능이 중시되고 있다. 최근에 미생물의 유기물분해, 작물생육촉진, 길항균을 이용한 미생물제제 등 다양한 제품이 생산 및 사용되고 있다.
환경보전을 의도한 병해방제기술개발 중에서, 생태계의 구성요인인 길항미생물이 갖고 있는 기능, 혹은 길항현상의 결과인 억제토양이 다시 살펴져서 현재의 방제수단을 교체하여 얻거나, 혹은 그러한 수단 중 하나로 사용할 수 있는 방제법의 개발이 기대되고 있다.
길항미생물은 여러 가지 경우에 관여하고 있다. 그 이용은 원래 그 토양에 사는 토착미생물의 활성화를 꾀하는 경우와 일단 분리된 균주를 배양해서 증식한 후 토양에 도입하는 경우에 의해 토양 병원균의 활동이 억제되거나, 균수가 감소하여 발병을 경감하는 것이다. 윤작이나 적절한 포장관리에 의해 건전한 작물을 육성하는 경우에는 토양 병원균수는 낮은 수준으로 억제되어, 토착미생물의 활동에 의해 토양 병원균의 활동도 억제된다고 추측된다. 유기물 사용에 의한 방제시험은 토착미생물의 활성화를 꾀하고, 그것에 의한 병원균의 활동억제를 기대하여 1960∼1970년대에 일본에서 왕성하게 실시되었다.
토양병해에 대한 억제토양은 자연발생적인 생물방제의 좋은 예로서 위치하고 있고, 그 메커니즘의 해명이 정력적으로 실시되고 있다. 이들 두 가지는 토착길항미생물을 자연스럽게 이용한 것이다. 그곳으로부터 유망한 길항미생물의 균주가 분리되어, 도입미생물에 의한 생물학적 방제법의 개발이 연구되었다. 모든 토양병해는 토양 하부로부터 발생하기 때문에 발병 초기에는 느끼지 않고, 병징이 나타났을 때에는 이미 손쓰기에 늦어진 경우가 많기 때문에, 이러한 생태계를 구성하는 길항미생물을 이용한 방제법 같은 예방적 수단이 필요하게 되었다.
따라서 지역발생 부산물의 자원화를 위하여는 지역의 환경조건에서 생존력이 우수하고 기능발현이 잘되는 토착 균주를 선발 이용하여야 한다. 많은 미생물제제 가 제품화되고 농가현장에서 이용되는 과정에서 균주의 기능이 많이 저하되어 효과를 얻고 있지 못하고 있는 게 현실이다.
더구나 감귤나무 부산물은 비료화 가치가 우수하지만 재료 중에 감귤병원균의 잔류로 퇴비화가 잘 이루어지지 않을 때는 농경지에 공급시 병원균을 전파시킬 염려가 있다.
상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 본 발명은 감귤원 부산물을 퇴비화 후 농경지에 공급하기 위하여 환경적응력이 우수하고 항균활성이 높으며 섬유소 분해능이 우수한 균주를 선발하는 것을 목적으로 한다.
또한, 상기 균주 또는 이를 포함하는 미생물제제를 이용하여 감귤원 부산물의 퇴비화하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 섬유소 분해능 및 항균활성을 가지는 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6(KACC 91260P)를 제공한다.
또한, 본 발명은 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6(KACC 91260P)를 이용하여 감귤원 부산물을 퇴비화하는 방법을 제공한다.
본 발명에 의하면 섬유소 분해능 및 항균 활성이 있는 바실러스 아밀로리퀴페시언스 KJ-6를 이용하여 안정하게 감귤원 부산물의 퇴비화가 가능하게 되어 감귤원 부산물의 자원을 재활용할 수 있다.
이하 본 발명을 하기 실시예를 통하여 더욱 상세하게 설명하기는 하나, 이는 본 발명의 이해를 돕기 위하여 제시된 것일 뿐, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 바실러스 아밀로리퀴페시언스 KJ-6(Bacillus amyloliquefaciens KJ-6)(KACC 91260P)의 분리 및 동정
(1) 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6의 분리
감귤나무톱밥과 가축분뇨를 이용한 고기능성 생물비료를 개발을 목적으로 감귤나무톱밥 분해 우수미생물을 선발하기 위하여 축사, 감귤나무 파쇄물 피복 과원, 토양, 부엽토 등에서 토양 30g을 채취하여 토양시료로서 사용하였다. 이 시료를 멸균수에 넣어 150rpm으로 30분간 진탕 후 105수준으로 희석하여 선택 배지(효모 추출물(yeast extract) 3.0g, 포도당(glucose) 1.0g, K2HPO4 0.3g, KH2PO4 0.2g, MgSO4 ·7H2O 0.2g, 한천(agar) 15.0g, 증류수 1000ml, pH 6.8)를 이용하여 고온에서 생육이 양호한 균을 1차 선발을 하였다. 즉, 섬유소 분해능이 우수한 균을 카르복시메틸셀룰로오스(carboxymethylcellulose; 이하 "CMC"이라 한다), 셀룰로오스(cellulose)를 탄소원으로 30℃에서 배양하여 분리 및 선발하였다.
(2) 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6의 16S rDNA 염기서열 분석에 의한 동정
선발된 균주를 동정하기 위해 세포벽에 존재하는 지방산을 추출하고 미생물 동정 시스템(Sherlock Microbial Identification System, MIDI Inc.)을 이용하여 동정하였으며 유사도지수(similarity index) 값이 0.5 이상인 종명을 균주명으로 하였다. 동정을 위한 분리 균주의 배양과 기체 크로마토그래피(Gas Chromatography; GC(HP 6990)) 조건은 엠아이디아이 오퍼레이션 메뉴얼 버전 6(MIDI Operation Manual Version 6)을 참조하였으며 비누화(saponification), 지방산(fatty acid)의 에스테르화(esterification), 지방산 메틸에스테르(fatty acid methylester; FAME)의 추출 및 염기 세척(base washing)의 전처리 과정을 거쳐 기체 크로마토그래피(gas chromatography)로 추출물을 분석하였다. 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens)의 16S rDNA의 염기서열 (약 1500bp)을 결정하고, 세균 기준주 데이터베이스 및 미국의 유전자은행(GenBank), 일본의 일본DNA데이터뱅크(DDBJ; DNA Data Bank of Japan) 및 유럽의 유럽분자생물실험실(EMBL; European Molecular Biology Laboratory)에서 상기 염기서열의 상동성을 검색했다. 그 결과 바실러스 서브틸리스 군(Bacillus subtilis group)으로 엠아이디아이(MIDI) 분석결과 바실러스 아밀로리퀴페시언스(Bacillus amyloliquefaciens; Bacillus subtilis group)과 일치하여 바실러스 아밀로리퀴페시언스 케이제이-6(Bacillus amyloliquefaciens KJ-6)로 명명하였다. 도 1은 본 균주의 형태를 전자현미경으로 관찰한 결과를 도시한 것이다.
(3) 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6 배양방법
본 발명의 균주 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens)의 동결 보존된 균체 현탁액 100㎕을 선택배지(효모 추출물(yeast extract) 3.0g, 포도 당(glucose) 1.0g, K2HPO4 0.3g, KH2PO4 0.2g, MgSO4 ·7H2O 0.2g, 한천(agar) 15.0g, 증류수 1000ml, pH 6.8)를 이용하여 평판 배양하였다.
<실시예 2> 감귤나무 부산물의 비료가치 평가
감귤의 품질향상과 생산량을 조절하기 위하여 매년 간벌과 일부폐원이 진행되고 있다. 이때 발생하는 부산물인 감귤 파쇄물 및 톱밥은 연간 38,500톤 가량이다. 이에 발생하는 감귤 파쇄물 및 톱밥을 이용하기 위해 감귤나무 톱밥의 이화학 성분을 분석하였다. 그 결과를 표 1에 나타내었다.
[표 1] 감귤나무 톱밥의 이화학성분(%)
구분 T-C T-N T-P K Ca Mg C/N 가밀도(g/㎤)
삼나무 톱밥 48.1 0.15 0.02 0.09 0.27 0.03 320.6 0.16
감귤나무 톱밥 48.7 0.49 0.06 0.22 0.66 0.04 99.4 0.27
상기 표 1에서 보는 바와 같이, 감귤나무는 기존에 많이 사용되고 있는 삼나무에 비해 총 질소, 칼륨, 칼슘함량이 많고 탄질비(C/N ratio)도 3배 이상 낮아 퇴비화가 쉽고 비료가치가 우수하다. 따라서 가축분뇨와 혼합할 경우 미생물에 의하여 부숙이 잘 이루어지면, 자원의 재활용과 가축분뇨를 적절히 처리할 수 있고, 가축분뇨 해양폐기에 드는 비용을 줄일 수 있어 불량자재에 의한 부산물 퇴비의 사용으로 인해 농가의 피해를 줄일 수 있다.
<실시예 3> 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6(KACC 91260P)의 섬유소 분해 활성 평가
(1) 섬유소 분해 활성 측정
1) 카르복시메틸셀룰레이즈(Carboxymethylcellulase; 이하 "CMCase"라 한다)의 활성 측정
CMC 평판배지(CMC 10g, NaNO3 2g, K2HPO4 1g, MgSO4·7H2O 0.5g, KCl 0.5g, FeSO4·7H2O 0.5g, 한천(Agar) 15g, 증류수 1L, pH 7.0)에 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6를 접종하여 28℃에서 5~7일간 배양하였다. 그리고 나서 0.1% 콩고레드(Congo-red)로 15분간 염색하고 1M NaCl로 2회 세척한 후 접종한 균의 생육 최말단 부위에서 나타난 CMC가 분해되면서 형성된 투명환(clear zone)의 크기에 의하여 분해활성을 조사하였다. 그 결과를 표 2 및 도 2a에 나타냈다.
2) 셀룰레이즈(Cellulase)의 활성 측정
셀룰로오스(cellulose) 평판배지(셀룰로오스 분말(cellulose powder) 1g, 효모 추출물(yeast extract) 1g, (NH4)2SO4 2.5g, K2HPO4 0.25g, NaCl 0.1g, MgSO4 ·7H2O 0.125g, FeSO4 ·7H2O 0.0025g, MnSO4 ·4H2O 0.0025g, 증류수 1L, 한천(Agar) 10g, pH 7.2)에 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6를 접종 하여 28℃에서 5~7일간 배양하였다. 그 후 0.1% 콩고레드(Congo-red)로 15분간 염색하고 1M NaCl로 2회 세척한 후 접종한 균의 생육 최말단 부위에서 나타난 셀룰로오스가 분해되면서 생긴 투명환(clear zone)의 크기에 의하여 분해활성을 조사하였다. 그 결과를 표 2 및 도 2b에 나타냈다.
[표 2] 섬유소 분해 활성
균주 CMCase Cellulase
5일 7일 5일 7일
KJ-6 ++ +++ ++++ ++++
*투명환 형성 : ++++ : 18~19㎜ , +++ : 16~17㎜, ++ :14~15㎜, + : 12~13㎜
3) 퍼옥시데이즈(peroxydase) 활성 측정
한천-맥아(agar-malt) 평판배지(맥아 추출물(malt extract) 20g, 한천(agar) 20g, 증류수 1000㎖)에 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6를 접종하여 28℃에서 3~5일간 배양하였다. O-디아니지딘 용액(O-dianisidine solution)(o-디아니지딘(O-dianisidine) 0.1g, pH 4.4)를 첨가하여 4시간 배양하여 레드-브라운 색소(red-brown colour)로 퍼옥시데이즈(peroxydase)의 활성을 측정하였다. 도 2c는 퍼옥시데이즈(peroxydase) 활성을 측정한 사진이다.
4) 아밀라아제(amylase)의 활성 측정
전분-암모니아(starch-ammonia) 평판배지(수용성 전분(starch water- soluble) 10g, (NH4)2SO4 2g, NaCl 1g, CaCO3 3g, K2HPO4 1g, MgSO4 1g, 한천 20g, 증류수 1000㎖)에 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6를 접종 후 28℃에서 3~5일간 배양하였다. 루골액(Lugol solution)(I2 1g, KI 3g, 증류수 300㎖)를 첨가하여 염색 후 투명환의 크기로 활성을 측정하였다. 도 2d는 아밀라아제의 활성을 측정한 사진이다.
(2) 결과
표 2 및 도 2a 내지 2d에서 보는 바와 같이, 선발 균주(바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6)는 감귤원에서 분리한 토착 미생물로서 환경적응력과 섬유소 분해활성이 우수하여 감귤나무 부산물의 분해를 촉진하여 퇴비화 기간을 단축할 수 있다.
(3) 균주에 따른 섬유소 분해 활성 비교
바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6의 섬유소 분해 활성을 평가하기 위해 다른 섬유소 분해 미생물인 마이크로모노 스포라로자리아 RK-2와 RC-8로 각각 퇴비화하였다.
[표 3] 퇴비화 균주접종에 따른 부식산 함량
처리 부식산
C(g/㎏) E4/E6
대조 14.5 11.0
KJ-6 13.5 11.6
RK-2 13.5 10.3
RC-8 11.7 11.3
표 3에서 보는 바와 같이, 균주접종에 따른 50일령 퇴비의 부숙정도를 나타내는 지표인 E4/E6의 값은 KJ-6이 11.6으로 대조구(11.0)와 RK-2(10.30 및 RC-8(11.3)에 비하여 높아 부숙이 원활하게 진행되고 있음을 알 수 있다.
[표 4] 균주접종에 따른 50일령 퇴비의 섬유소 함량변화
처리 cellulose hemicellulose
건물량 감소량 건물량 감소량
대조 13.49 23.2 5.68 9.0
KJ-6 9.79 44.2 5.68 25.0
RK-2 13.18 24.9 5.18 17.0
RC-8 10.16 42.1 5.80 7.0
또한, 표 4에서 보는 바와 같이, 50일령 퇴비의 셀룰로오스는 KJ-6 44.2%, RC-8 42.1%로 대조구 23.2%에 비하여 감소량이 많았다. 그리고 헤미셀룰로오스(hemicellulose)는 KJ-6 25%, RK-2 17%로 대조구 9%보다 약 2~3배 정도 감소량이 많았다.
이것은 퇴비화과정에서 이들 균주에 의하여 퇴비단 내의 섬유소가 분해가 되어 감소한 것으로 판단된다. 퇴비단의 섬유소 감소량만을 봤을 때는 KJ-6의 의한 섬유소분해 효과가 제일 컸다.
<실시예 4> 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6의 항균 활성 평가
(1)항균 활성 측정방법
1) 시험 병원균
피디에이(PDA, Potato dextrose agar)배지에 감귤 검은점무늬병균(Diaporthe citri), 시들음병균(Fusarium oxysporum), 역병균(phytophthora sp.)을 이식하여 25℃ 항온기에서 5일간 배양한 후 PDA 배지가 분주된 직경 87㎜ 일회용 페트리 디쉬의 중앙에 직경 5㎜ 병원균의 균총을 떼어내서 치상하였다.
2) 균사생육저지 검정
바실러스 아밀로리퀴페시언스 KJ-6를 영양 한천(nutrient agar; NA) 배지를 이용하여 28℃, 150rpm으로 24시간 진탕 배양하였다. 그 후 병원균을 치상한 페트리 디쉬에 일정한 간격으로 균주를 접종하여 30℃에서 7일간 정치 배양한 다음 병원균의 균사생육 저지 정도(inhibition zone)를 조사하였다.
[표 5] 식물 병원균에 대한 항균 활성
균주 역병 감귤 검은점무늬병 시들음병
KJ-6 +++ +++ +
표 5에서 보는 바와 같이, KJ-6는 식물병원균인 식물 역병균과 시들음병에 대하여 항균활성을 가지며 감귤 검은점무늬병균에 대하여 길항효과를 가져서(도 3) 퇴비화 시 감귤나무에 잔존하고 있는 병원균의 밀도를 감소시킬 수 있고 퇴비로 공급시 감귤원의 병원균 밀도를 저하할 수 있을 것으로 생각된다. 또한, 도 3에서 보는 바와 같이, 감귤나무 톱밥을 이용한 퇴비에 토마토를 재배시 시들음병에 대하여 길항효과가 있음을 알 수 있다.
(2) 균주접종퇴비의 식물 병원성균(토마토 시들음병, Fusarium oxysporum)에 대한 길항성 평가
KJ-6 접종퇴비가 토마토의 시들음병균에 대해 직접 항균활성을 나타내는지 조사하였다. 시험방법은 플라스틱 포트에 원예용 상토를 채우고 병원균(Fusarium oxysporum)을 접종 후 토마토를 파종한 후 온실에서 일정기간 키운 후 주당 식물체 무게와 뿌리 무게를 측정하였다(표 6).
[표 6] 균주접종퇴비의 식물 병원성균에 대한 길항성 평가
처리 생장량(g)
식물체 무게 뿌리 무게
대조 0.6±0.32 0.2±0.09
N-P-K 표준시비 3.4±0.63 0.5±0.30
KJ-6 1.4±0.77 0.5±0.30
RK-2 0.5±0.21 0.2±0.08
RC-8 0.6±0.19 0.2±0.06
시들음병원균(Fusarium oxysporum)을 이용한 토마토재배 시험결과 병원균 접종시 식물체 무게는 대조구 0.6±0.32g, 화학비료 사용시 3.4±0.63g, KJ-6 1.4±0.77g였다. 표 6에서 보는 바와 같이 KJ-6은 RK-2, RC-8보다 생육이 양호하였다.
또한, 도 4에서 보는 바와 같이, 균주접종퇴비의 토마토에 대한 시들음병원균(Fusarium oxysporum)에 대한 피해율은 KJ-6 15%, RK-2 49%, RC-8 30%로 KJ-6이 항균활성이 RK-2보다 3배나 높았다.
<실시예 5> 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6의 생장 범위
도 5 및 도 6에서 보는 바와 같이 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6는 생장가능 pH는 4~7, 생장가능 온도는 4~70℃로 폭 넓은 생장범위를 가진다. 또한, 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6는 토착 균주로써 정착능력이 우수하다.
<실시예 6> 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6를 이용한 퇴비의 평가
실시예 1에 의한 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6의 배양체 0.5~1.5㎏에 C/N비가 25가 되도록 감귤나무 파쇄물 150~250㎏, 감귤나무 톱밥 150~250㎏ 및 가축분뇨 300~500㎏을 혼합하고, 수분함량이 혼합물 전체 중량대비 50~60%로 함유하도록 수분을 공급하면서 교반하였다. 이때 상기 교반물을 150일간 발효시키면서 3~4회 더 교반하였다.
도 7 및 도 8에서 보는 바와 같이, 감귤나무 톱밥을 이용한 퇴비와 타제품의 부숙도를 측정한 결과, 무 종자 발아율이 96%로 높았으며 50일령 퇴비의 경우 대조퇴비보다 뿌리길이가 11.4%, 뿌리무게가 28%로 높아 식물에 대한 독성이 적고 항균활성이 높은 퇴비생산이 가능할 것으로 판단되었다.
이에 우수한 섬유소 분해능 및 항균 활성을 가지는 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6를 미생물 기탁번호 KACC 91260P로 농업생명공학연구원에 기탁하였다.
도 1은 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6의 전자현미경 사진이다.
도 2a, 2b, 2c 및 2d는 각각 바실러스 아밀로리퀴페시언스 KJ-6의 CMCase, 셀룰레이스, 퍼옥시데이즈 및 아밀라아제 효소 활성을 나타낸 사진이다.
도 3은 감귤 검은점무늬병(좌) 및 토마토시들음병(우)에 대한 항균 활성을 나타낸 사진이다.
도 4는 토마토 시들음병에 대한 균주별 피해율을 나타낸 도표이다.
도 5는 바실러스 아밀로리퀴페시언스 KJ-6의 생장가능 pH를 나타낸 도표이다.
도 6은 바실러스 아밀로리퀴페시언스 KJ-6의 생장가능 온도를 나타낸 도표이다.
도 7은 본 발명에 의한 퇴비 및 시제품을 사용하여 무 종자 발아율을 나타낸 도표이다.
도 8은 50일령 퇴비의 독성을 평가한 도표이다.

Claims (2)

  1. 섬유소 분해능 및 항균활성을 가지는 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6(KACC 91260P).
  2. 바실러스 아밀로리퀴페시언스(B. amyloliquefaciens) KJ-6(KACC 91260P)를 이용하여 감귤나무 부산물을 퇴비화하는 방법.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101137401B1 (ko) * 2009-12-29 2012-04-20 경남과학기술대학교 산학협력단 섬유소 분해 활성을 가지는 신균주 바실러스 아밀로리쿼파시엔스 ｃｓ47 및 그의 배양액
ITFI20130188A1 (it) * 2013-08-05 2015-02-06 Fabrizio Nardo Processo e impianto per la biostabilizzazione ossidativa del pastazzo di agrumi.
CN113793645A (zh) * 2021-09-16 2021-12-14 浙江大学 一种基于机器学习模型的堆肥腐熟度预测方法

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107099486B (zh) * 2017-06-26 2020-03-06 重庆师范大学 解淀粉芽孢杆菌gn03及其应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH08157285A (ja) * 1994-12-01 1996-06-18 Shikoku Keisoku Kogyo Kk 植物性廃棄物の液状堆肥化方法
KR100426930B1 (ko) * 2001-06-29 2004-04-13 한국생명공학연구원 음식물 찌꺼기의 습식발효를 위한 양돈 사료화 능력을 보유한 신규한 균주 바실러스 아밀로리키페이시엔스 비 4

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101137401B1 (ko) * 2009-12-29 2012-04-20 경남과학기술대학교 산학협력단 섬유소 분해 활성을 가지는 신균주 바실러스 아밀로리쿼파시엔스 ｃｓ47 및 그의 배양액
ITFI20130188A1 (it) * 2013-08-05 2015-02-06 Fabrizio Nardo Processo e impianto per la biostabilizzazione ossidativa del pastazzo di agrumi.
CN113793645A (zh) * 2021-09-16 2021-12-14 浙江大学 一种基于机器学习模型的堆肥腐熟度预测方法

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