KR20090048150A - Composition against propionibacterium acnes containing caesapinia sappan l. extract and cosmetic composition containing the said composition - Google Patents

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Abstract

본 발명은 소목의 열수 추출물을 함유하는 항 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 조성물 및 이를 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물로서 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대해 항균성을 나타내어 여드름의 발생을 억제하는 효과를 발휘한다.The present invention is an anti-propionibacterium acnes containing a hydrothermal extract of joiner ( Propionibacterium) acnes ) composition and cosmetic composition for improving acne containing the same acetic acid propionibacterium acne ( Propionibacterium) acnes ) shows antimicrobial activity and suppresses the occurrence of acne.

소목, 스타필로코커스, 여드름, 프로피오니박테리움, 항균 Joiner, Staphylococcus, Acne, Propionibacterium, Antibacterial

Description

소목의 열수 추출물을 함유하는 항 프로피오니박테리움 아크네스 조성물 및 이를 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물{composition against Propionibacterium acnes containing Caesapinia sappan L. extract and cosmetic composition containing the said composition}Anti-propionibacterium acnes composition containing hot water extract of joiner and composition for improving acne containing same {composition against Propionibacterium acnes containing Caesapinia sappan L. extract and cosmetic composition containing the said composition}

본 발명은 소목 추출물을 함유하는 항 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 조성물 및 이를 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention is an anti-propionibacterium acnes containing propeller extract ( Propionibacterium) acnes ) The composition and a cosmetic composition for improving acne containing the same.

여드름(acne vulgaris)은 거의 모든 연령층에서 공통적으로 발병되는 피부질환의 하나로써 청년층의 약 80~95%가 여드름으로 고민하고 있으며(L. Cordain, S. Lindeberg, M. Hurtado, K. Hill, S. B. Eaton, and J. Brand-Miller, Acne vulgaris: A disease of western civilization, Arch . Dermatol . 138(12), 1584 (2002)), 특히 청소년기에는 그 증상이 심각하여 임상적 후유증에 시달리고 있다. Acne (acne vulgaris) is a skin disease common to almost all age groups, and about 80 to 95% of young people suffer from acne (L. Cordain, S. Lindeberg, M. Hurtado, K. Hill, SB). Eaton, and J. Brand-Miller, Acne vulgaris: A disease of western civilization, Arch . Dermatol . 138 (12), 1584 (2002)), especially in adolescence, are severe and suffer from clinical sequelae.

여드름 발병 원인으로는 유전적, 환경적 요인 외에 체내 호르몬 분비의 변화 로 인한 활발한 피지 생성, 모낭 피지선의 비정상적인 각질화 (hyperkeratinization)로 인한 모공의 폐쇄, 여드름균의 활성화 및 여드름균에 의해 유발되는 피부 염증반응과 이들 간의 상호작용이 있다. 상기의 원인 중 특히 여드름균에 의한 피부 염증반응이 여드름 발병의 주요 원인으로, 주요 여드름균으로는 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)가 알려져 있다. (W. J. Cunliffe, H. Gollnick, Acne; diagnosis and management, London, Dunitz Ltd. (2001))The causes of acne include, in addition to genetic and environmental factors, active sebum production due to changes in hormone secretion in the body, pore closure due to abnormal hyperkeratinization of hair follicle sebaceous glands, activation of acne bacteria and skin inflammation caused by acne bacteria. There are reactions and interactions between them. In particular, the skin inflammatory response caused by acne bacteria is a major cause of acne, and the main acne bacteria is Propionibacterium. acnes ) is known. (WJ Cunliffe, H. Gollnick, Acne; diagnosis and management, London, Dunitz Ltd. (2001))

프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)는 리파아제와 루코사이트 케모테틱(leukocyte chemotatic) 인자를 분비하여 왕성한 남성 호르몬 분비로 좁아진 모공에 싸인 피지를 지방산으로 분해하고 모낭벽을 자극하여 여드름을 유발할 뿐만 아니라 이들의 상호작용으로 최종적으로 염증반응을 유도하여 피부에 구진, 농포, 낭종, 결절 및 반흔(scar)을 형성한다. (A. M. Layton, A review on the treatment of acne vulgaris, Int. J. Clin . Pract., 60(1), 64 (2006)) Propionibacterium acnes ) secrete lipase and leukocyte chemotatic factors to break down the sebum enveloped in the pores narrowed by vigorous testosterone secretion into fatty acids and stimulate the hair follicle wall to induce acne and finally interact with them. Induces inflammatory reactions, forming papules, pustules, cysts, nodules and scars on the skin. (AM Layton, A review on the treatment of acne vulgaris, Int. J. Clin . Pract ., 60 (1), 64 (2006))

한편, 화장품에서 통상적으로 함유되는 원료인 화장오일, 계면활성제, 무기분말, 유기수용성 고분자, 향료 등도 피부의 자극원으로 작용할 수 있고, 미생물이 생장하기에 좋은 영양배지로 작용할 수 있으며, 사용 중에 손가락에 의한 오염 및 보관상의 부주의로 인한 오염 등의 다양한 2차 오염을 일으켜 여드름 생성 부위를 자극할 수 있다. On the other hand, cosmetic oils, surfactants, inorganic powders, organic water-soluble polymers, and fragrances, which are commonly contained in cosmetics, can also act as a source of irritation of the skin, and can act as a nutrient medium for microorganisms to grow. It can cause acne-producing sites by causing various secondary contaminations such as contamination caused by and contamination due to careless storage.

피지 생성을 억제하는 항안드로겐제를 비롯한 스테로이드 제제와 다양한 항생제 및 레티노익산 등의 비타민 A 유도체 등이 여드름 치료제로 많이 사용되고 있 으며, 특히 항생제가 가장 많이 사용되고 있다. 그러나 매년 수백만 건 이상 처방되고 있는 경구용 항생제는 부작용이 나타나 큰 문제점으로 대두 되고 있는 실정이다. (P. Coates, S. Vyakrnam, E. A. Eady, C. E. Jones, J. H. Cove, and W. J. Cunliffe, Prevalence of antibiotic-resistant propionibacteria on the skin of acne patients; 10-year surveillance data and snapshot distribution study, British J. Dermatol ., 146, 840 (2002))Steroid preparations, including anti-androgens that inhibit sebum production, vitamin A derivatives such as various antibiotics and retinoic acid are widely used as an acne treatment, and antibiotics are most commonly used. However, oral antibiotics, which are prescribed over millions of cases every year, have been causing serious side effects. (P. Coates, S. Vyakrnam, EA Eady, CE Jones, JH Cove, and WJ Cunliffe, Prevalence of antibiotic-resistant propionibacteria on the skin of acne patients; 10-year surveillance data and snapshot distribution study, British J. Dermatol . , 146 , 840 (2002))

이에 최근에는 식물을 비롯한 천연자원으로부터 지속적으로 사용할 수 있고 인체에 무해한 항여드름 효과를 갖는 유효성분의 연구가 활발하게 진행되고 있다. 현재 천연 추출물을 이용한 항여드름에 대한 연구는 감초, 목련, 호두나무, 황련, 버드나무, 삼백초, 계피 추출물 등의 다양한 목초본류를 이용하여 국내외 여러 연구자들에 의해 진행되고 있거나 제품화되고 있는 실정이다. (C. Nam, S. Kim, Y. Sim, and I. Chang, Anti-acne effects of oriental herb extracts: a novel screening method to select anti-acne agents, Skin Pharmacol . Appl . Skin Physiol., 16(2), 84 (2003), M. T. Chomnawang, S. Surassmo, V. S. Nukoolkarn, and W. Gritsanapan, Antimicrobial effects of Thai medicinal plants against acne-inducing bacteria, J. Ethnopharmacol ., 101, 330 (2005), S. Higaki, S. Morimatsu, M. Morohashi, T. Yamagishi, Y. Hasegawa, Susceptibility of Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidrermidis to 10 Kampo formulations, J. Int . Med . Res ., 25(6), 318 (1997), F. Qadan, A. J. Thewaini, D. A. Ali, R. Afifi, A. Elkhawad, and K. Z. Matalka, The antimicrobial activities of Psidium guajava and Juglans regia leaf extracts to cane-developing organism, Am. J. Clin . Med., 33(2), 197 (2005)) Recently, research on active ingredients that can be continuously used from natural resources including plants and has an anti-acne effect that is harmless to the human body has been actively conducted. Currently, research on anti-acne using natural extracts is being progressed or commercialized by various researchers at home and abroad using various herbaceous herbs such as licorice, magnolia, walnut tree, yellow lotus, willow, triticale, and cinnamon extract. (C. Nam, S. Kim, Y. Sim, and I. Chang, Anti-acne effects of oriental herb extracts: a novel screening method to select anti-acne agents, Skin Pharmacol . Appl . Skin Physiol ., 16 (2), 84 (2003), MT Chomnawang, S. Surassmo, VS Nukoolkarn, and W. Gritsanapan, Antimicrobial effects of Thai medicinal plants against acne-inducing bacteria, J. Ethnopharmacol . , 101 , 330 (2005), S. Higaki, S. Morimatsu, M. Morohashi, T. Yamagishi, Y. Hasegawa, Susceptibility of Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidrermidis to 10 Kampo formulations, J. Int . Med . Res . , 25 (6), 318 (1997), F. Qadan, AJ Thewaini, DA Ali, R. Afifi, A. Elkhawad, and KZ Matalka, The antimicrobial activities of Psidium guajava and Juglans regia leaf extracts to cane-developing organism, Am. J. Clin . Med. , 33 (2), 197 (2005))

한편, 소목은 (Caesapinia sappan L.)은 콩과(豆科, Leguminosae)에 속한 낙엽 소교목 혹은 관목인 소목의 심재(心材)를 건조한 것으로 연중 수시로 채취하여 수피와 변재를 제거하고 중심부분만 취하여 쇄건한다. 소방목(蘇方木), 소방(蘇方), 적목(赤木), 홍자(紅紫) 등으로 불리기도 하며, 중국 남부와 인도 동부 등에 분포하고, 열대지방에서 생육된다. Meanwhile, joiner ( Caesapinia sappan L.) is a dried deciduous arborescent or shrub belonging to Leguminosae, which is collected throughout the year to remove bark and sapwood, and to be reconstructed by taking only the central part. It is also called firewood, fire, red-eye, red porcelain, etc., and is distributed in southern China and eastern India.

소목의 목부에는 주요 효능 성분으로 무색의 원색소인 브라질린(brazilin)이 약 2% 함유되어 있고, 이 외에 사파닌(sappanin)과 L-펠란드리넨(L-phellandrene), 오시메네(ocimene)을 주성분으로 하는 정유 및 탄닌(tannin)을 포함한다. The neck of the joiner contains about 2% of brazilin, a colorless primary pigment, as well as sappanin, L-phellandrene, and ocimene. Essential oils and tannins, the main constituents of which are;

소목은 이미 많은 연구가 진행되어 있는 상태이며, 항균효능으로 수침액이 디프테리아균, 폐렴쌍구균, C형 파라티푸스균, 황색포도상구균, 용혈성연쇄균 등의 성장을 현저하게 억제한다는 연구가 보고된 바 있으며, 메탄올 추출물은 메티실린(methicillin)에 내성을 보이는 스타필로코커스 아우레우스Joiner has already been studied a lot, and the antimicrobial effect has been reported that the immersion solution significantly inhibits the growth of diphtheria bacteria, pneumococcus pneumoniae, type C paratyphoid bacteria, Staphylococcus aureus, hemolytic streptococci, etc. , Methanol extract is Staphylococcus aureus resistant to methicillin

(Staphylococcus aureus (MRSA))에 대해서 항균작용을 나타내고, MRSA에 대한 엠피실린(ampicillin)과 오사실린(oxacillin)의 항균작용을 증강 시킨다는 연구가 보고된바 있다. (Kim KJ, Yu HH, Jeong SI, Cha JD, Kim SM, You YO. Inhibitory effects of Caesalpinia sappan on growth and invasion of methicillin-resistant Staphylococcus aureus. J Ethnopharmacol . 2004 Mar;91(1):81-7) ( Staphylococcus aureus (MRSA)) has been reported to enhance the antimicrobial activity of ampicillin (ampicillin) and oxacillin (MRSA) against MRSA. (Kim KJ, Yu HH, Jeong SI, Cha JD, Kim SM, You YO.Inhibitory effects of Caesalpinia sappan on growth and invasion of methicillin-resistant Staphylococcus aureus. J Ethnopharmacol . 2004 Mar; 91 (1): 81-7)

상기와 같은 소목의 항균 효능는 브라질린(brazilin)이라는 성분에 의한 것으로, MRSA의 세포 내 DNA와 단백질 합성에서 [3H] 티미딘(thymidine)과 [3H]세린(serine)의 상호작용을 억제한다고 보고된 바 있다. (Hong-Xi Xu, Song F. Lee. The antibacterial principle of Caesalpina sappan. Phytother . Res . 18, 647-651 (2004)) The antimicrobial effect of the joiner is due to a component called brazilin, and it is reported that it inhibits the interaction of [3H] thymidine and [3H] serine in the DNA and protein synthesis of MRSA. It has been. (Hong-Xi Xu, Song F. Lee.The antibacterial principle of Caesalpina sappan. Phytother . Res . 18 , 647-651 (2004))

한편, 소목을 주정 추출하여 김치, 육수와 같은 제품의 천연 방부제(대한민국 특허공개 10-2001-0028618)로 사용한 사례는 개시되었지만, 소목 열수 추출물을 함유한 항 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 조성물 및 이를 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물은 개시된 바 없다.On the other hand, although the case of using alcohol extract as a natural preservative (Korean Patent Publication No. 10-2001-0028618) of products such as kimchi and broth, but has been disclosed, anti-propionibacterium acne ( propionibacterium) acnes ) compositions and cosmetic compositions for improving acne containing the same have not been disclosed.

이에 본 발명은 일부 미생물에 대해 항균 효능이 있는 것으로 알려진 소목을 소재로 한 항 여드름균 조성물 및 이를 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 개발하여 제공하는데 목적이 있다. Accordingly, an object of the present invention is to develop and provide an anti-acne bacterium composition based on joiner material known to have antimicrobial efficacy against some microorganisms, and a cosmetic composition for improving acne.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 소목의 열수 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 항 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention is characterized in that the anti-propionibacterium acnes ( Propionibacterium ) characterized in that it contains a hydrothermal extract of joiner acnes ) to provide a composition.

본 발명은 소목(Caesapinia sappan L.)의 열수 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 항 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 조성물 및 이를 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물로 항 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 조성물은 소목 열수 추출물이 건조된 분말 형태로 전체 조성물 중 125 ㎍/㎖ 이상 함유되는 것이 바람직하다.The present invention is Caesapinia Propionibacterium, characterized in that it contains a hydrothermal extract of sappan L. acnes ) composition and cosmetic composition for improving acne containing the same propionibacterium acnes ) The composition is preferably a dry powder of the joiner hot water in the form of a dry powder of 125 ㎍ / ㎖ or more in the total composition.

또한, 소목 열수의 추출에 있어서 통상적으로 사용되는 추출방법을 사용하여도 무방하나 바람직하게는 소목에 소목 중량의 10~20배 중량만큼의 증류수를 첨가하여 추출하는 것이 좋다.In addition, the extraction method commonly used in the extraction of the heat of the joiner may be used, but preferably, 10 to 20 times the weight of the joiner by distilled water is added to the joiner.

또한, 본 발명인 소목의 열수 추출물을 함유하는 항 프로피오니박테니움 아크네스(Propionibacterium acnes) 조성물을 여드름 개선용 화장료 조성물에 첨가할 수 있으며, 화장료 조성물은 소목의 열수 추출물 외에도 필요에 따라 본 발명의 효과를 저하시키지 않는 범위 내에서 화장료에 일반적으로 사용하는 각종 성분, 예를 들면 수용성 성분, 분말 성분, 유분, 계면활성제, 보습제, 점도조절제, 방부제, 산화방지제, 향료, 색소 등을 배합하는 것이 가능하다.In addition, anti-propynyl'll sludge foil containing a hot water extract of the present inventors joiner Titanium arc Ness (Propionibacterium acnes ) composition can be added to the cosmetic composition for improving acne, the cosmetic composition, in addition to the hydrothermal extract of the joiner, various components generally used in cosmetics, for example, water-soluble in the range that does not reduce the effect of the present invention, if necessary It is possible to mix | blend a component, a powder component, oil, surfactant, a moisturizer, a viscosity modifier, a preservative, antioxidant, a fragrance | flavor, a pigment | dye, etc.

또한, 본 발명에서 제공하는 소목의 열수 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 화장품 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 예를 들어, 용액, 현탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있고, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수도 있다.In addition, the cosmetic composition containing the hot-water extract of the joiner provided in the present invention may be prepared in any formulation that is commonly prepared in the cosmetic industry. For example, it can be formulated into solutions, suspensions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, oils, powder foundations, emulsion foundations, wax foundations and sprays, etc., flexible lotions, nourishing lotions, nourishing creams, It may also be prepared in the form of a massage cream, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray or powder.

이상, 상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명인 소목의 열수 추출물은 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)와 2차 감염균인 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aures)의 생장을 억제하므로 본 발명인 소목의 열수 추출물을 함유하는 항 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 조성물은 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 대해 항균성을 나타내고, 이를 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물는 여드름의 발생을 억제하는 효과를 발휘한다.As described above, the hot water extract of the present inventors joiner is propionibacterium acnes ( propionibacterium acne) acnes ) and the secondary infection bacteria Staphylococcus aures ( Staphylococcus aures ) to inhibit the growth of the propionibacterium acnes ( propionibacterium acnes ) composition containing the hot water extract of the present inventors is propionibacte acne Leeum Acnes ( Propionibacterium acnes ) exhibits antimicrobial activity, containing the cosmetic composition for improving acne exhibits an effect of suppressing the occurrence of acne.

이하, 본 발명의 내용에 대해 하기 실시예에서 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.Hereinafter, the content of the present invention will be described in more detail in the following examples, but the scope of the present invention is not limited only to the following examples, and includes modifications of equivalent technical ideas.

<< 실시예Example 1> 소목  1> Joiner 열수Hydrothermal 추출물의 제조 Preparation of Extract

소목을 실온에서 음건하여 분쇄기를 이용하여 쇄절하고 분말로 만들어 열수추출하였다. 소목 분말 100g을 건조 중량에 대하여 증류수 (1:20 w/v) 2ℓ를 가하고 약탕기를 이용하여 100℃에서 2시간 동안 중탕시켜 추출한 후, 감압여과기를 통하여 여과하고 감압회전 농축기를 이용하여 농축하여 1%(건조중량 기준)의 소목 추출액을 얻었다.The seedlings were dried at room temperature, crushed using a grinder, powdered, and hot water extracted. 2 g of distilled water (1:20 w / v) was added to the dry weight by distilled water (1:20 w / v), followed by extraction with a water bath at 100 ° C. for 2 hours, filtered through a vacuum filter, and concentrated using a vacuum rotary concentrator. The joiner extract of% (dry weight basis) was obtained.

<실험예 1> 소목 열수 추출물의 여드름 유발 균주에 대한 생장억제 효능 평가 Experimental Example 1 Evaluation of Growth Inhibition Efficacy of Acne-Induced Strains of Joiner Hot Water Extract

여드름 원인균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) KCTC 3314에 대한 소목 열수 추출물의 생장억제 효능을 평가하였다. Propionibacterium , the acne causing bacterium acnes ) The inhibitory effect of growth of H. pylori extract on KCTC 3314 was evaluated.

프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) KCTC 3314는 한국 유전자 은행에서 분양받아 사용하였으며 배양 배지는 레인포스 크로스트리다이얼(Reinforced clostridial;RC) 배지를 사용하였다. Propionibacterium acnes ) KCTC 3314 was distributed by the Korea Gene Bank and used as a culture medium, Reinforced clostridial (RC) medium.

상기의 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)를 활성시켜 마스터 플레이트를 만들어 4℃에서 보관하면서 실험 3일 전에 활성화시켜 사용하였고, 마스터 프레이트는 2주에 한 번씩 다시 만들었다. 균을 배양 배지에 접종한 후 혐기성 단지(anaerobic jar)에서 가스팩시스템(Gaspack system; MERK. Germany)을 이용하여 밀봉한 후, 37℃ 배양기에서 3일 동안 혐기성 배양하였다. Propionibacterium of the Propionibacterium acnes ) was activated and used to make a master plate and stored at 4 ° C. three days before the experiment, and the master plate was rebuilt every two weeks. The bacteria were inoculated in the culture medium and sealed in an anaerobic jar using a gaspack system (MERK. Germany), followed by anaerobic culture for 3 days in a 37 ° C. incubator.

상기 실시예 1에서 얻은 소목 열수 추출물의 항여드름균 효능 평가는 디스크 확산법(paper disk diffusion method)을 이용하였다. 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 균주를 레인포스 크로스트리다이얼 액체 배지에서 3일간 배양한 후, 균 현탁액을 일정한 농도(1.5 X 108 CFU/ml)로 희석하였다. 미리 멸균하여 45℃ 항온 수조에 준비해 둔 반 액체 상의 레인포스 크로스트리다이얼 고체 배지에 이를 접종하고 이를 잘 섞어주어 레인포스 크로스트리다이얼 고체 배지에 부었다. 5~10분간 정치한 후 배지가 굳으면 그 표면에 디스크(Φ8mm, Adventec. USA)를 핀셋을 이용하여 일정간격으로 올려놓았다. 각각의 디스크에 소목 열수 추출물을 농도별로 희석하여 50㎕씩 흡수시키고 충분히 건조시킨 후, 시료가 처리된 프레이트(plate)를 혐기성단지에서 가스팩 시스템(Gaspack system;MERK. Germany)을 이용하여 3일간 배양하였다. 배양을 마친 프레이트의 디스크 주위 생육 억제환의 크기로 항균 활성을 측정하였으며 비교예 1은 항균 효능이 알려져 있는 트리크로산(triclosan)을 사용하였다. Anti-acne bacterium efficacy evaluation of the seedling hydrothermal extract obtained in Example 1 was used a paper disk diffusion method. Propionibacterium acnes ) strains were incubated in Reinforce crosstridial liquid medium for 3 days, and then the bacterial suspension was diluted to a constant concentration (1.5 × 10 8 CFU / ml). It was inoculated into a semi-liquid Rainforce crosstridial solid medium prepared in a 45 ° C. constant temperature water bath, mixed well, and poured into a Rainforce crosstridial solid medium. After standing for 5 to 10 minutes, when the medium was hardened, a disk (Φ 8 mm, Adventec. USA) was placed on the surface at regular intervals using tweezers. After diluting the seedling hydrothermal extract on each disc by the concentration and absorbing 50 μl and drying it sufficiently, the plate treated with the sample was dried for 3 days using a gaspack system (MERK. Germany) in an anaerobic complex. Incubated. Antimicrobial activity was measured by the size of the disk growth inhibition ring around the plate after the culture and Comparative Example 1 used triclosan (trilosan) known antimicrobial efficacy.

구분division 프로피오니박테리움 아크네스 (Propionibacterium acnes) KCTC 3314 Propionibacterium acnes ) KCTC 3314 농도 (㎍/disk)Concentration (㎍ / disk) 생육 억제환 크기 (mm)Growth inhibition ring size (mm) 비교예 1Comparative Example 1 2525 3232 5050 3636 100100 3838 실시예 1Example 1 125125 2121 250250 2828 500500 3434

상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 비교예 1은 100 ㎍/disk의 농도에서 38mm의 생육 억제환을 형성하였으며, 실시예 1의 경우 500 ㎍/disk의 농도에서 34mm의 억제환을 나타내었다. 비교예 1에 비해서 다소 농도와 효능의 차이가 있지만 소목 열수 추출물이 조추출액임을 감안한다면 우수한 효능을 나타내는 것으로 판단할 수 있었다.As shown in Table 1, Comparative Example 1 formed a growth inhibiting ring of 38 mm at a concentration of 100 μg / disk, and Example 1 showed an inhibitory ring of 34 mm at a concentration of 500 μg / disk. Compared with Comparative Example 1, there was a difference in concentration and potency, but considering that the joiner hydrothermal extract was a crude extract, it could be determined to exhibit excellent efficacy.

<< 실험예Experimental Example 2> 소목  2> Joiner 열수Hydrothermal 추출물의 2차 감염 원인균에 대한 생장억제 효능 평가 Evaluation of Growth Inhibitory Efficacy of Extracts Against Secondary Infection Bacteria

본 발명인 소목의 열수 추출물의 피부에 상재하면서 붉게 부어오르고 심한 염증 반응을 일으키는 2차 감염균인 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aures) KCTC 1927에 대한 생장 억제 효능을 평가하였다. Staphylococcus aures , a secondary infectious bacterium that swells red and causes a severe inflammatory response, is present on the skin of the hot water extract of the presenter's joiner Growth inhibition efficacy for KCTC 1927 was evaluated.

스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aures) KCTC 1927는 한국 유전자 은행에서 분양받아 사용하였으며 배양 배지는 뮬레르-힌톤(Mueller - Hinton; MH)배지를 사용하였다. 분양받은 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aures) KCTC 1927는 활성화시켜 마스터 프레이트(master plate)를 만든 후, 4℃에서 보관하면서 실험 하루 전에 활성화시켜 사용하였고, 마스터 프레이트는 2주에 한 번씩 다시 만들어 보관하였다. 균을 배양 배지에 접종한 후, 37℃ 배양기에서 18 내지 24시간 동안 배양하였다. Staphylococcus aures ) KCTC 1927 was obtained from the Korea Gene Bank and used as a culture medium, Mueller-Hinton (MH) medium. Received pre-sale Staphylococcus aureus (Staphylococcus aures ) KCTC 1927 was activated to make a master plate, and then activated at a day before the experiment while storing at 4 ° C., and the master plate was made and stored once every two weeks. The bacteria were inoculated in the culture medium, and then cultured in a 37 ° C. incubator for 18 to 24 hours.

상기 실시예 1에서 제조한 소목 열수 추출물의 항균 효능 평가는 상기 실험예 1과 동일한 디스크 확산법(paper disk diffusion method)을 이용하였다. 배양을 마친 프레이트 디스크 주위의 생육 억제환 크기로 항균 활성을 측정하였으며 비교예 2는 항균 효능이 알려져 있는 항생제인 에리스로마이신(erythromycin)을 사용하였다. Evaluation of the antimicrobial efficacy of the joiner hydrothermal extract prepared in Example 1 was used the same paper disk diffusion method (Experimental Example 1). Antimicrobial activity was measured by growth inhibitory ring size around the plate after completion of the culture. In Comparative Example 2, erythromycin, an antibiotic known to have antimicrobial efficacy, was used.

구분  division 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aures) KCTC 1927 Staphylococcus aures ) KCTC 1927 농도 (㎍/disk)Concentration (㎍ / disk) 생육 억제환 크기 (mm)Growth inhibition ring size (mm) 비교예 2Comparative Example 2 62.562.5 1212 125125 1414 실시예 1Example 1 250250 1616 500500 1717

상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 비교예 2는 250 ㎍/disk의 농도에서 16mm의 생육 억제환을 형성하였으며, 실시예 1의 경우 500 ㎍/disk의 농도에서 17mm의 억제환을 나타내었다. 비교예 2에 대비하여 약 2배 높은 농도에서 비슷한 효능을 보이는 것으로 나타났으며, 여드름에 관여하여 2차적인 감염을 일으켜 염증을 심화시킬 수 있는 원인 균주에 대한 항균 효능을 확인할 수 있었다. As shown in Table 2 above, Comparative Example 2 formed a growth inhibiting ring of 16 mm at a concentration of 250 μg / disk, and Example 1 showed a suppressing ring of 17 mm at a concentration of 500 μg / disk. It was shown to show similar efficacy at a concentration about 2 times higher than in Comparative Example 2, it was confirmed that the antimicrobial efficacy against the causative strain that can intensify the inflammation by causing secondary infections in acne.

<< 실험예Experimental Example 3> 소목  3> Joiner 열수Hydrothermal 추출물의 미생물 생장 최소 억제 농도 평가  Evaluation of Minimal Inhibitory Concentration of Microbial Growth of Extracts

상기 실시예 1에서 제조한 소목 열수 추출물을 화장료 조성물로 사용할 시에 여드름 유발균에 대한 항균력의 유효한 농도를 결정하기 위해 미생물 생장 최소 억제 농도를 액체배지희석(broth dilution) 법을 사용하여 평가하였다. In order to determine the effective concentration of the antimicrobial activity against acne-inducing bacteria when the joiner hydrothermal extract prepared in Example 1 was used as a cosmetic composition, the minimum growth concentration of microbial growth was evaluated using a broth dilution method.

전배양 한 여드름 유발 균주인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) KCTC 3314를 일정 농도로 희석하여(1.5 X 108 CFU/ml) 160㎕의 배지가 들어있는 각 웰에 20㎕씩을 접종하였다. 상기 실시예 1에서 제조한 소목 열수 추출물(20mg/ml of DMSO)을 레인포스 크로스트리다이얼(RC) 액체배지를 이용하여 2배수 희석(two-fold serial dilution) 하였고, 농도별로 균 희석액이 접종된 각 웰에 20㎕씩 넣어 주고 잘 섞어 주었으며, 비교예 1은 상기 실험예 1에서 사용한 트리크로산을 사용하였다. Propionibacterium , a pre-cultured acne-inducing strain acnes ) KCTC 3314 was diluted to a constant concentration (1.5 × 10 8 CFU / ml) and inoculated with 20 μl in each well containing 160 μl of medium. Joiner's hot water extract (20mg / ml of DMSO) prepared in Example 1 was subjected to two-fold serial dilution using a Reinforced CrossTrial (RC) liquid medium and inoculated with a bacterial dilution by concentration. 20 μl of each well was added and mixed well, and Comparative Example 1 used the trichromic acid used in Experimental Example 1.

균 희석액 및 시료를 접종한 96 웰 플레이트를 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) KCTC 3314의 경우에는 anaerocult Gaspack system (MERK. Germany)을 이용하여 3일간 혐기성 배양한 후, 균의 생육이 나타나지 않는 최소 농도를 MIC로 결정하였다. 96 well plates inoculated with bacterial dilutions and samples were prepared using Propionibacterium. acnes ) KCTC 3314 was anaerobicly cultured for 3 days using anaerocult Gaspack system (MERK. Germany), and the minimum concentration was determined by MIC .

구분division 프로피오니박테리움아크네스 (Propionibacterium acnes) KCTC 3314 Propionibacterium acnes ) KCTC 3314 비교예 1Comparative Example 1 12.5 ㎍/ml12.5 μg / ml 실시예 1Example 1 125 ㎍/ml125 μg / ml

상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 비교예 1의 경우에는 12.5㎍/㎖의 농도에서 균의 생장이 거의 일어나지 않았으나, 실시예 1의 경우에는 다소 높은 농도로 10배의 농도인 125㎍/㎖의 농도에서 최소생장억제농도(MIC)를 나타내었다. (도 1)As shown in Table 3, in Comparative Example 1, the growth of the bacteria hardly occurred at a concentration of 12.5 µg / ml, but in Example 1, the concentration of 125 µg / ml, which was 10 times higher, was somewhat higher. The minimum growth inhibitory concentration (MIC) was shown at. (Figure 1)

<< 실험예Experimental Example 4> 소목  4> Joiner 열수Hydrothermal 추출물의 여드름 유발균에 대한 생육곡선 측정 Growth Curve Measurement of Acne-causing Bacteria from Extracts

상기 실시예 1에서 제조한 소목 열수 추출물을 처리한 여드름 유발균주인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) KCTC 3314의 배양시간과 소목 열수 추출물의 처리농도에 따른 생육곡선의 변화를 확인하였다. Propionibacterium acne-producing strain treated with Joiner hydrothermal extract prepared in Example 1 Propionibacterium acnes ) The growth curve of KCTC 3314 was determined by the incubation time and the treatment concentration of hot water extract.

3일간 전배양한 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) KCTC 3314 균현탁액을 일정 농도(1.5 X 108 CFU/ml)로 희석한 후, 5㎖의 레인포스 크로스트리다이얼(RC) 액체 배지에 100㎕씩 접종한 튜브에 대조군으로 멸균증류수 200㎕을 넣고, 시험군으로 멸균증류수에 소목 열수 추출물을 농도별로 희석하여 멸균증류수와 동일한 방법으로 처리하였다. 튜브 내의 반응액을 잘 섞어준 후, 96 웰 플레이트에 각 튜브별로 200㎕씩 취하여 동일한 플레이트 7개를 만들었다. 96 웰 플레이트에 반응액을 옮긴 직후를 반응시간 0시간으로 하였고 ELISA reader를 이용하여 620nm 파장에서 흡광을 측정하였다. 각 프레이트를 anaerocult Gaspack system을 이용하여 37℃에서 혐기성 배양하면서 12시간 간격으로 흡광을 측정 후, 시간 결과에 따른 농도별 균 생장 억제 정도를 측정하였다. Propionibacterium precultured for 3 days acnes ) After diluting the KCTC 3314 fungus suspension to a certain concentration (1.5 X 10 8 CFU / ml), add 200 µl of sterile distilled water as a control to a tube inoculated with 100 µl of 5 ml of Reinforced Cross Tridial (RC) liquid medium. As a test group, the joiner hot water extract was diluted in sterile distilled water by concentration and treated in the same manner as sterile distilled water. After the reaction solution was mixed well in the tube, 200 μl of each tube was taken in a 96 well plate to make seven identical plates. Immediately after the reaction solution was transferred to a 96 well plate, the reaction time was 0 hours, and the absorbance was measured at 620 nm using an ELISA reader. Anaerobic culture of each plate was anaerobicly cultured at 37 ° C using an anaerocult gaspack system, and the absorbance was measured at 12 hours intervals.

실시예 1에서 제조한 소목 열수 추출물을 멸균증류수에 희석한 농도별에 따라 배양시간에 따른 균의 생장 정도를 측정하였는데(도 2), 시료를 처리하지 않은 것에서부터 15.625 ㎍/㎖까지의 농도에서는 대조군과 거의 유사한 생장곡선을 나타냈으며 62.5㎍/㎖의 농도에서는 배양 24시간 이후부터 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) KCTC 3314의 생장이 시작되는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 소목 열수 추출물의 유효농도인 125㎍/㎖의 농도에서는 최종 배양시간인 72시간까지 거의 생장이 일어나지 않음을 확인할 수 있어 상기 실험예 2의 결과와 유의한 결과를 확인할 수 있었다.According to the concentration of the distilled hot water extract prepared in Example 1 diluted in sterile distilled water, the growth of bacteria was measured according to the incubation time (FIG. 2), but at the concentration of 15.625 μg / ml from the untreated sample. in showed the almost similar growth curve to the control concentration of 62.5㎍ / ㎖ after cultivation for 24 hours was repeated sludge tumefaciens arc Ness (Propionibacterium acnes ) KCTC 3314 can be seen to start growing. In addition, at the concentration of 125㎍ / ㎖ effective concentration of the joiner hot water extract it can be confirmed that almost no growth occurs up to 72 hours of the final incubation time, it was confirmed that the results of Experimental Example 2 and significant results.

따라서 본 발명의 소목 열수 추출물은 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) KCTC 3314의 생장을 억제하는 항 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 효과가 있음을 확인할 수 있었다.Therefore, the joiner hydrothermal extract of the present invention is acne bacteria Propionibacterium acnes ( Propionibacterium acnes ) Propionibacterium Inhibits the Growth of KCTC 3314 acnes ) effect was confirmed.

<< 실시예Example 2> 소목  2> Joiner 열수Hydrothermal 추출물을 함유한 유연 화장수( Flexible lotion with extract skinskin tonertoner ) 제조) Produce

본 발명의 소목 열수 추출물을 함유한 화장수는 통상의 방법에 따라 제조하였고 화장수의 조성은 하기 표 5와 같았다. The lotion containing the seedling hot water extract of the present invention was prepared according to a conventional method, and the composition of the lotion was shown in Table 5 below.

성분ingredient 함량 (중량%)Content (% by weight) 비교예3Comparative Example 3 실시예2Example 2 부틸렌글라이콜Butylene Glycol 5.05.0 5.05.0 살리실산Salicylic acid 0.50.5 0.50.5 모노라우린산 폴리옥시에틸렌소르비탄Monolauric acid polyoxyethylene sorbitan 1.51.5 1.51.5 폴리옥시에틸렌 라우릴에테르Polyoxyethylene lauryl ether 0.50.5 0.50.5 에탄올ethanol 15.015.0 15.015.0 향료Spices 0.30.3 0.360.36 방부제antiseptic 적량Quantity 적량Quantity 소목 추출물Joiner extract 0.00.0 1One 정제수Purified water 100 중량% 까지Up to 100% by weight

<< 실시예Example 3> 소목  3> Joiner 열수Hydrothermal 추출물을 함유한 로션제조 Manufacture lotion containing extract

본 발명의 소목 열수 추출물을 함유한 로션은 통상의 방법에 따라 제조하였고 로션의 조성은 하기 표 5와 같았다.The lotion containing the seedling hot water extract of the present invention was prepared according to a conventional method, and the composition of the lotion was shown in Table 5 below.

성분ingredient 함량 (중량%)Content (% by weight) 에틸렌디아민테트라아세트산나트륨Sodium Ethylenediaminetetraacetic Acid 0.050.05 부틸렌글라이콜Butylene Glycol 8.08.0 모노올레인산폴리혹시에틸렌소르비탄Monooleic acid poly ethylene sorbitan 1.51.5 유동파라핀Liquid paraffin 6.06.0 스쿠알란Squalane 2.52.5 바셀린vaseline 1.01.0 스테아린산Stearic acid 0.50.5 에탄올ethanol 10.010.0 트리에탄올아민Triethanolamine 0.80.8 향료Spices 0.30.3 방부제antiseptic 적량Quantity 산화방지제Antioxidant 적량Quantity 소목 추출물Joiner extract 0.250.25 정제수Purified water 100 중량% 까지Up to 100% by weight

<< 실험예Experimental Example 4> 소목  4> Joiner 열수Hydrothermal 추출물을 함유한 화장수의 항균 활성 평가 Evaluation of Antimicrobial Activity of Lotion Containing Extracts

상기 실시예 2에서 제조한 화장수의 항균활성을 평가하기 위하여, 농도별로 4㎖씩 튜브에 넣고 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) KCTC 3314가 함유된 1㎖ 균현탁액을 첨가한 후, 튜브를 흔들어 주면서 배양하였다. 24시간 후, 생균수 측정을 통해 항균활성을 측정하였다. In order to evaluate the antimicrobial activity of the lotion prepared in Example 2, 4 ml each of the concentration in a tube propionibacterium Acnes ( Propionibacterium acnes ) After adding 1 ml of the bacterial suspension containing KCTC 3314, the tube was incubated by shaking. After 24 hours, antimicrobial activity was measured by viable cell count.

한편, 상기 실시예 2에서 제조한 비교예 3에 대해서도 동일한 방법으로 항균활성을 확인하였고, 그 결과는 하기 표 6과 같았다.On the other hand, the antimicrobial activity was confirmed by the same method for Comparative Example 3 prepared in Example 2, the results were as shown in Table 6.

화장수 함량 (중량%)Lotion content (% by weight) 비교예 3 (CFU/ml)Comparative Example 3 (CFU / ml) 실시예 2(CFU/ml)Example 2 (CFU / ml) 0.50.5 1 X 105 1 X 10 5 8.4 X 102 8.4 X 10 2 1One 1 X 105 1 X 10 5 -- 2.52.5 7.5 X 104 7.5 X 10 4 -- 55 1 X 103 1 X 10 3 --

화장수 함량 0.5 중량%에서 비교예 3의 생균수는 1×105인데 반해 실시예 2의 화장수는 생균수가 8.4 X 102로 나타났다. 또한, 화장수의 함량이 1중량% 이상일 경우, 실시예 2의 화장수에서는 생균수가 발견되지 않았지만 비교예 3은 농도가 올라가도 생균수가 0.5 중량% 함량 일 때와 거의 변화 없었다.The viable cell number of Comparative Example 3 was 1 × 10 5 at 0.5% by weight of the lotion, whereas the viable cell number of Example 2 was 8.4 × 10 2 . In addition, when the content of the lotion is more than 1% by weight, no viable cell number was found in the lotion of Example 2, but Comparative Example 3 was almost unchanged even when the concentration of the viable cell number was 0.5% by weight.

이로부터 본 발명의 소목 열수 추출물을 함유한 화장수는 여드름발생 원인균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) KCTC 3314에 대해 항균활성이 있다는 것을 확인할 수 있었다.From this, the lotion containing the extract of hot water of the present invention is propionibacterium acnes ( propionibacterium) which is the cause of acne acnes ) It was confirmed that the antimicrobial activity against KCTC 3314.

도 1은 본 발명의 소목 열수 추출물과 트리크로산에 대한 미생물 생장 최소 억제 농도 평가(MIC)에 관한 그래프이다.1 is a graph of microbial growth minimum inhibitory concentration (MIC) evaluation for the joiner hydrothermal extract and triclosan of the present invention.

도 2는 본 발명의 소목 열수 추출물의 농도별 배양시간에 따른 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)의 생장 정도 평가에 관한 그래프이다.2 is propionibacterium acnes according to the incubation time according to the concentration of the joiner hydrothermal extract of the present invention ( Propionibacterium) acnes ) is a graph of the evaluation of growth.

Claims (4)

소목(Caesapinia sappan L.)의 열수 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 항 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 조성물 Joiner ( Caesapinia) Propionibacterium, characterized in that it contains a hydrothermal extract of sappan L. acnes ) composition 제1항에 있어서, The method of claim 1, 소목(Caesapinia sappan L.)의 열수 추출물은, Joiner ( Caesapinia) sappan L. ) hydrothermal extract, 건조되어 분말 형태로 전체 조성물 중 125 ㎍/㎖ 이상 함유되는 것을 특징으로 하는 항 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 조성물 Anti-propionibacterium acnes ( Proionibacterium ) characterized in that the dried and contained in powder form more than 125 ㎍ / ㎖ acnes ) composition 제1항에 있어서,The method of claim 1, 상기 소목의 열수 추출물은, The hydrothermal extract of the joiner, 소목에 소목 중량의 10~20배 중량만큼의 증류수를 첨가하여 추출한 것을 특징으로 하는 항 프로피오니박테리움 아크테스(Propionibacterium acnes) 조성물Anti-propionibacterium arctes ( Propionibacterium ), characterized in that extracted by adding distilled water as much as 10 to 20 times the weight of the joiner acnes ) composition 제1항의 항 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 조성물을 함유하는 것을 특징으로 하는 여드름 개선용 화장료 조성물 Propionibacterium of claim 1 acnes ) cosmetic composition for acne improvement comprising the composition
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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