KR20090027412A - 항암성을 갖는 새로운 플라보노이드 유도체7-ｏ-(3-벤질옥시프로필)-5,4 -ｏ-디메틸-아피제닌, 그제법 및 그것을 포함하는 항암 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 7번 수산화기에 알킬 사슬이 도입된 항암성이 있는 아피제닌 (apigenin) 유도체에 관한 것이다.

플라보노이드 유도체, 7-O-알킬-아피제닌, 항암, Cyclin dependent kinase 2 (CDK2)

Description

항암성을 갖는 새로운 플라보노이드 유도체 7-Ｏ-(3-벤질옥시프로필)-5,4 -Ｏ-디메틸-아피제닌, 그 제법 및 그것을 포함하는 항암 조성물{Novel cytotoxic flavone derivative 7-O-(3-benzyloxypropyl)5,4 -di-O-methylapigenin, the preparation method and composition for treating cancers comprising the compound}

본 발명은 7번 수산화기에 알킬 사슬이 도입된 아피제닌 (apigenin) 유도체 및 그 제조방법 그리고 그것의 항암제로서의 용도에 관한 것이다.

일반적으로 플라보노이드는 식물유래 폴리페놀의 일종으로 항산화, 항암, 항염, 항바이러스 등의 효능을 갖는 것으로 공지되어 있다. 그 중, 플라보노이드계 항암물질로 널리 알려진 플라보피리돌(flavopiridol)의 등장 이후, cyclin-dependent kinase (CDK)를 저해함으로써 세포 성장에 필요한 신호전달과정을 차단하는 기작은 항암제 연구에서 많은 관심을 끌고 있다. 플라보피리돌은 모든 CDK (CDK 1, 2, 4, 7)에 대해서 강력한 in vitro 저해능을 보이며 세포주기의 G1/S 및 G2/M 단계를 차단한다. 그러나, 실제로 항암제로 개발되기 위해서는 플라보피리돌의 저해능과 특정 CDK에 대한 선택성을 향상시켜야 할 과제가 남아있다. 플라보피 리돌 유도체인 디클로로플라보피리돌 (deschloroflavopiridol)이 CDK2와 결합된 형태의 x-선 결정구조가 밝혀진 이후, CDK2에 선택성이 있는 플라보피리돌 유도체 개발이 활기를 띠었는데 플라보피리돌의 C8 치환체가 효소와 수소결합을 이룬다는 사실에 기반을 두고 플라보노이드의 C8 위치에 치환기를 도입하는 연구가 주로 이루어졌다.

본 발명은 식물유래 폴리페놀의 일종인 아피제닌의 7번 수산화기에 적절한 알킬 사슬을 도입하여 아피제닌의 항암성을 증대시킨 새로운 유도체를 개발하는 데 그 목적을 두고 있다.

상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1을 갖는 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 제공한다.

[화학식 1]

상기 식에서 Bn은 벤질이고, Me는 메틸인 것이 바람직하다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 약학적으로 허용 가능한 염은 염산, 황 산 및 인산을 포함하는 무기염과 수산, 푸마르산, 말레인산, 능금산, 구연산, 주석산 및 글루탐산을 포함하는 유기염으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하나 이에 한정되지 아니한다.

또한 본 발명은 상기 화학식 1을 갖는 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효성분으로 포함하는 항암용 의약조성물을 제공한다.

또 본 발명은 a) 1-요오드화-3-벤질옥시프로판과 나린제닌을 반응시켜 7-O-(3-벤질옥시프로필)나린제닌을 제조하는 단계; b) 상기 7-O-(3-벤질옥시프로필)나린제닌을 과량의 디메틸황산과 탄산칼륨 존재하에서 반응시켜 5,4 -O-디메틸나린제닌 유도체를 얻는 단계; 및 c) 상기 5,4 -O-디메틸나린제닌 유도체 화합물을 산화시켜서 7-O-(3-벤질옥시프로필)-5,4 -O-디메틸아피제닌을 제조하는 단계를 포함하는 7-O-(3-벤질옥시프로필)-5,4 -O-디메틸아피제닌 제조 방법을 제공한다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 a)단계의 반응은 탄산칼륨 존재 하에서 진행되는 것이 바람직하나 이에 한정되지 아니한다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 c)단계의 산화 반응은 2,4-dichloro-5,6-dicyano-1,4-benzoquinone(DDQ)을 이용하여 진행되는 것이 바람직하나 이에 한정되지 아니한다.

본 발명의 항암 조성물은 암을 치료, 예방 또는 처리하는데 통상적으로 사용되어온 치료법과 병용하여 투여된다. 그러한 통상적 치료법의 예는 외과수술, 화학요법, 방사선 요법, 호르몬 요법, 생물학적 요법 및 면역요법을 포함하되 이에 한정되지는 않는다.

본 발명의 조성물과 병용 투여될 수 있는 항암제의 예는 아시비신(acivicin); 아클라루비신(aclarubicin); 아코다졸 아이드로클로라이드(acodazole hydrochloride); 아크로닌(acronine); 아도젤레신(adozelesin); 알데스루킨(aldesleukin); 알트레트아민(altretamine); 암보마이신(ambomycin); 아메탄트론 아세테이트(ametantrone acetate); 암사크린(amsacrine); 아나스트로졸(anastrozole); 안트라마이신(anthramycin); 아스파라기나제(asparaginase); 아스페린(asperlin); 아자시티딘(azacitidine); 아제테파(azetepa); 아조토마이신(azotomycin); 바티마스타트(batimastat); 벤조데파(benzodepa); 비칼루트아미드(bicalutamide); 비산트렌 하이드로클로라이드(bisantrene hydrochloride); 비스나피드 디메실레이트(bisnafide dimesylate); 바젤레신(bizelesin); 블레오마이신 설페이트(bleomycin sulfate); 브레퀴나 소디움(brequinar sodium); 브로피리민(bropirimine); 부술판(busulfan); 칵티노마이신(cactinomycin); 칼루스테론(calusterone); 카라세마이드(caracemide); 카베티머(carbetimer); 카보플라틴(carboplatin); 카무스틴(carmustine); 카루비신 하이드로클로라이드(carubicin hydrochloride); 카젤레신(carzelesin); 세데핀골(cedefingol) ; 셀레콕시브(celecoxib) (COX-2 억제제); 클로암부실(chlorambucil); 시롤레마이신(cirolemycin); 시스플라틴(cisplatin); 글라드리빈(cladribine); 크리스나톨 메실레이트(crisnatol mesylate); 시클로포스파미드(cyclophosphamide); 시타라빈(cytarabine); 다카바진(dacarbazine); 닥티노마이신(dactinomycin); 다우노루비신 하이드로클로라이드(daunorubicin hydrochloride); 데시타빈(decitabine); 덱소 마플라틴(dexormaplatin); 데자구아닌(dezaguanine); 데자구아닌 메실레이트(dezaguanine mesylate); 디아지쿠온(diaziquone); 도세탁셀(docetaxel); 독소루비신(doxorubicin); 독소루비신 하이드로클로라이드(doxorubicin hydrochloride); 드롤록시펜(droloxifene); 드롤록시펜 시트레이트(droloxifene citrate); 드로모스타놀론 프로피오네이트(dromostanolone propionate); 두아조마이신(duazomycin); 에다트렉세이트(edatrexate); 데플로니틴 하이드로클로라이드(eflornithine hydrochloride); 엘사미드루신(elsamitrucin); 엔로플라틴(enloplatin); 엔프로메이트(enpromate); 에피프로피딘(epipropidine); 에피루비신 하이드로클로라이드(epirubicin hydrochloride); 에루불로졸(erbulozole); 에소루비신 하이드로클로라이드(esorubicin hydrochloride); 에스트라무스틴(estramustine); 에스트라무스틴 포스페이트 소디움(estramustine phosphate sodium); 에타니다졸(etanidazole); 에토포시드(etoposide); 에토포시드 포스페이트(etoposide phosphate); 에토프린(etoprine); 파드로졸 하이드로클로라이드(fadrozole hydrochloride); 파자라빈(fazarabine); 펜레티니드(fenretinide); 플록수리딘(floxuridine); 플루다라빈 포스페이트(fludarabine phosphate); 플루오로우라실(fluorouracil); 플로오로시타빈(flurocitabine); 포스퀴돈(fosquidone); 포스트리에신 소디움(fostriecin sodium); 젬시타빈(gemcitabine); 젬시타빈 하이드로클로라이드(gemcitabine hydrochloride); 히드록시우레아; 이다루비신 하이드로클로라이드(idarubicin hydrochloride); 이포스파미드(ifosfamide); 일모포신(ilmofosine); 이프로플라틴(iproplatin); 이리노테칸(irinotecan); 이리노테칸 하이드로클로라이 드(irinotecan hydrochloride); 란레오티드 아세테이트(lanreotide acetate); 레트로졸(letrozole); 류프롤리드 아세테이트(leuprolide acetate); 리아로졸 하이드로클로라이드(liarozole hydrochloride); 로메트렉솔 소디움(lometrexol sodium); 로무스틴(lomustine); 로속산트론 하이드로클로라이드(losoxantrone hydrochloride); 마소프로콜(masoprocol); 마이탄신(maytansine); 메크로레타민 하이드로클로라이드(mechlorethamine hydrochloride); 메게스트롤 아세테이트(megestrol acetate); 멜렌게스트롤 아세테이트(melengestrol acetate); 멜파란(melphalan); 메노가릴(menogaril); 메캡토퓨린(mercaptopurine); 메토트렉세이트(methotrexate); 메토트렉세이트 소디움(methotrexate sodium); 메토프린(metoprine); 메투레데파(meturedepa); 미틴도미드(mitindomide); 미토카신(mitocarcin); 미토크로민(mitocromin); 미토길린(mitogillin); 미토말신(mitomalcin); 미토마이신(mitomycin); 미토스퍼(mitosper); 미토테인(mitotane); 미토잔트론 하이드로클로라이드(mitoxantrone hydrochloride); 미코페놀릭 애시드(mycophenolic acid); 노코다졸(nocodazole); 노갈라마이신(nogalamycin); 오마플라틴(ormaplatin); 옥시수란(oxisuran); 파클리탁셀(paclitaxel); 페가스파가제(pegaspargase); 펠리오마이신(peliomycin); 펜타무스틴(pentamustine); 페플로마이신 설페이트(peplomycin sulfate); 퍼포스파미드(perfosfamide); 피포브로만(pipobroman); 피포술판(piposulfan); 피로잔트론 하이드로클로라이드(piroxantrone hydrochloride); 플리카마이신(plicamycin); 플로메스탄(plomestane); 포피머 소디움(porfimer sodium); 포피로마이신(porfiromycin); 프레드니무스틴(prednimustine); 프로카바 진 하이드로클로라이드(procarbazine hydrochloride); 푸로마이신(puromycin); 푸로마이신 하이드로믈로라이드(puromycin hydrochloride); 피라조푸린(pyrazofurin); 리보프린(riboprine); 사핀골(safingol); 사핀골 하이드로클로라이드(safingol hydrochloride); 세무스틴(semustine); 심트라젠(simtrazene); 스파포세이트 소디움(sparfosate sodium); 스파소마이신(sparsomycin); 스피로게르마늄 하이드로클로라이드(spirogermanium hydrochloride); 스피로무스틴(spiromustine); 스피로플라틴(spiroplatin); 스트렙토니그린(streptonigrin); 스트렙토조신(streptozocin); 술로페너(sulofenur); 탈리소마이신(talisomycin); 테코갈란 소디움(tecogalan sodium); 탁소테레(taxotere); 테갈퍼(tegafur); 텔로잔트론 하이드로클로라이드(teloxantrone hydrochloride); 테모포르핀(temoporfin); 테니포시드(teniposide); 테록시론(teroxirone); 테스토락톤(testolactone); 티아미프린(thiamiprine); 티오구아닌(thioguanine); 티오테파(thiotepa); 티아조푸린(tiazofurin) ; 티라파자민(tirapazamine); 토레미펜 시트레이트(toremifene citrate); 트레스톨론 아세테이트(trestolone acetate); 트리시리빈 포스페이트(triciribine phosphate); 트리메트렉세이트(trimetrexate); 트리메트렉세이트 글루쿠로네이트(trimetrexate glucuronate); 트리프토렐린(triptorelin); 투불로졸 하이드로클로라이드(tubulozole hydrochloride); 우라실 머스타드(uracil mustard); 우레데파(uredepa); 바프레티드(vapreotide); 베르테포르핀(verteporfin); 빈블라스틴 설페이트(vinblastine sulfate); 빈크리스틴 설페이트(vincristine sulfate); 빈데신(vindesine); 빈데신 설페이트(vindesine sulfate); 빈에피딘 설페이트(vinepidine sulfate); 빈글리시네이트 설페이트(vinglycinate sulfate); 빈루로신 설페이트(vinleurosine sulfate); 빈오렐빈 타르트레이트(vinorelbine tartrate); 빈로시딘 설페이트(vinrosidine sulfate); 진졸리딘 설페이트(vinzolidine sulfate); 보로졸(vorozole); 제니플라틴(zeniplatin); 지노스타틴(zinostatin); 및 조루비신 하이드로클로라이드(zorubicin hydrochloride)를 포함하되 이에 한정되지는 않는다.

다른 항암 약물은 20-에피-1, 25디히드록시비타민 D3; 5-에티닐우라실(ethynyluracil); 아비라테론(abiraterone); 아클라루비신(aclarubicin); 아실풀벤(acylfulvene); 아데시페놀(adecypenol); 아도젤레신(adozelesin); 알데스루킨(aldesleukin); ALL-TK 대항제; 알트레타민(altretamine); 암바무스틴(ambamustine); 아미독스(amidox); 아미포스틴(amifostine); 아미노레불리닉 애시드(aminolevulinic acid); 암루비신(amrubicin); 암사크린(amsacrine); 아나그레리드(anagrelide); 아나스트로졸(anastrozole); 안드로그라폴리드(andrographolide); 혈관신생 억제제; 대항제 D; 대항제 G; 안타렐릭스(antarelix); 안티-도살라이징 형태발생 단백질-1(anti-dorsalizing morphogenetic protein-1); 안티안드로겐(antiandrogen), 전립샘 암종(prostatic carcinoma); 안티에스트로겐(antiestrogen); 안티네오플라스톤(antineoplaston); 안티센스 올리고뉴클레오티드(antisense oligonucleotides); 아피디콜린 글리시네이트(aphidicolin glycinate); 아포프토시스 유전지 조정자(apoptosis gene modulators); 아포프도시스 조절자(apoptosis regulators); 아푸리닉 애시 드(apurinic acid); 아라(ara)-CDP-DL-PTBA; 아르기닌 디아미나제(arginine deaminase); 아술아크린(asulacrine); 아타메스탄(atamestane); 아트리무스탄(atrimustine); 악시나스타틴 1(axinastatin 1); 악시타스타틴 2(axinastatin 2); 악시나스타틴 3(axinastatin 3); 아자세트론(azasetron); 아자톡신(azatoxin); 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마스핀(maspin); 마트리리신 억제제(matrilysin inhibitors); 매트릭스 메탈로프로테인나제 억제제(matrix metalloproteinase inhibitors); 메노가릴(menogaril); 메르바론(merbarone); 메테렐린(meterelin); 메티오니나제(methioninase); 메토클로프라미드(metoclopramide); MIF 억제제; 미페프리스톤(mifepristone); 밀테포신(miltefosine); 미리모스팀(mirimostim); 미토구아존(mitoguazone); 미토락톨(mitolactol); 미토마이신 유사물(mitomycin analogues); 미토나피드(mitonafide); 미토톡신 피브로블라스트(mitotoxin fibroblast) 성장인자-사포린(saporin); 미토잔트론(mitoxantrone); 모파로텐(mofarotene); 몰그라모스팀(molgramostim); 에르비툭스(Erbitux), 인간 융모막 고나도트로핀(human chorionic gonadotrophin); 모노포스포릴 리피드(monophosphoryl lipid) A+미오박테리움 세포벽 sk(myobacterium cell wall sk); 모피다몰(mopidamol); 머스타드 항암제; 미카페록사이드 B(mycaperoxide B); 미코박테이라 세포벽 추출물(mycobacterial cell wall extract); 미리아포론(myriaporone); N-아세틸디날린; N-치환 벤즈아미드; 나파렐린(nafarelin); 나그레스팁(nagrestip); 날록손(naloxone)+펜타조신(pentazocine); 나파빈(napavin); 나프테르핀(naphterpin); 나토그라스팀(nartograstim); 네다플라틴(nedaplatin); 네모루비신(nemorubicin); 네리드로닉(neridronic) 애시드; 닐루트아미드(nilutamide); 니사마이신(nisamycin); 니트릭 옥사이드 조정자(nitric oxide modulators); 니트록사이드 항산화제(nitroxide antioxidant); 니트룰린(nitrullyn); 오블리머센(oblimersen) (Genasense　); 0⁶-벤질구아닌; 옥트레오티드(octreotide); 오키세논(okicenone); 올리고뉴클레오티드(oligonucleotides); 오나프리스톤(onapristone); 온단세트론(ondansetron); 온단세트론(ondansetron); 오라신(oracin); 경구 사이토카인 유발인자; 오마플라틴(ormaplatin); 오사테론(osaterone); 옥살리플라틴(oxaliplatin); 옥사우노마이신(oxaunomycin); 파클리탁셀(paclitaxel); 파클리탁셀 유사물(paclitaxel analogues); 파클리탁셀 유도 체(paclitaxel derivatives); 팔라우아민(palauamine); 팔미토일리족신(palmitoylrhizoxin); 팔미드로닉(pamidronic) 애시드; 파낙시트리올(panaxytriol); 파노미펜(panomifene); 파라박틴(parabactin); 파젤립틴(pazelliptine); 페가파가제(pegaspargase); 펠데신(peldesine); 펜토산 폴리설페이트 소디움(pentosan polysulfate sodium); 펜토스타틴(pentostatin); 펜트로졸(pentrozole); 퍼플루브론(perflubron); 퍼포스파미드(perfosfamide); 페릴릴 알코올(perillyl alcohol); 페나지노마이신(phenazinomycin); 페닐아세테이트; 포스파타제 억제제(phosphatase inhibitors); 피시바닐(picibanil); 필로카핀 하이드로클로라이드(pilocarpine hydrochloride); 피라루비신(pirarubicin); 피리트렉심(piritrexim); 플라세틴(placetin) A; 플라세틴 B; 플라스미노겐 활성자 저해제(plasminogen activator inhibitor); 플라티눔 복합체(platinum complex); 플라티눔 화합물(platinum compounds); 플라티눔-트리아민 복합체(platinum-triamine complex); 포르피머 소디움(porfimer sodium); 포르피로마이신(porfiromycin); 프레드니손(prednisone); 프로필 비스-아크리돈(propyl bis-acridone); 프로스탄글란딘 J2; 프로테아좀 억제제; 단백질 A-기초 면역 조절자; 단백질 키나제 C 억제제; 단백질 키나제 C 억제제, 마이크로알갈; 단백질 티로신 포스파타제 억제제; 퓨린 뉴클레오시드 포스포릴라제 억제제; purpurins; 피라졸로아크리딘; 피리독실레이티드 헤모글로빈 폴리옥시에틸렌 컨쥬게이트; 라프(raf) 대항제; raltitrexed; 라모세트론; 라스 파네실 단백질 트랜스퍼라제 억제제; 라스 억제제; 라스-GAP 억제제; 레텔리프틴 디메틸레이티드; 레늄 Re 186 에티드로네이트(rhenium Re 186 etidronate); 리족신(rhizoxin); 리보자임; RII 레티나미드; 로히투킨; 로무티드(romurtide); 로퀴니멕스(roquinimex); 루비기논(rubiginone) B1; 루복실; 사핀골; 사인토핀; SarCNU; 사르코피톨 A; 사르그라모스팀(sargramostim); Sdi 1 유사체(mimetics); 세무스틴; 노화 유래 억제제 1(senescence derived inhibitor 1); 감각 올리고뉴클리오티드(sense oligonucleotides); 신호전달 억제제(signal transduction inhibitors); 시조피란(sizofiran); 소부족산; 소디움 보로캅테이트; 소디움 페닐아세테이트; 솔베롤; 소마토메딘 결합 단백질; 소네르민(sonermin); 스파르포식(sparfosic) 애시드; 스피카마이신(spicamycin) D; 스피로무스틴(spiromustine); 스플레노펜틴(splenopentin); 스폰지스타틴(spongistatin) 1; 스쿠알아민(squalamine); 스티피아미드(stipiamide); 스트로멜리신(stromelysin) 억제제; 술피노신(sulfinosine); 수퍼액티브 바소액티브 인테스티날 펩타이드(superactive vasoactive intestinal peptide) 대항제; 수라디스타(suradista); 수라민(suramin); 스웨인소닌(swainsonine); 탈리무스틴(tallimustine); 타목시펜 메티오디드(tamoxifen methiodide); 타우로무스틴(tauromustine); 타자로텐(tazarotene); 테코갈란 소디움(tecogalan sodium); 테카푸르(tegafur); 텔루라피릴륨(tellurapyrylium); 텔로머라제 억제제(telomerase inhibitors); 테모포르핀(temoporfin); 테니포시드(teniposide); 테트라클로로데카옥사이드(tetrachlorodecaoxide); 테트라조민(tetrazomine); 탈리블라스틴(thaliblastine); 티오코랄린(thiocoraline); 트롬보포이에틴(thrombopoietin); 트롬보포이에틴 유사체(thrombopoietin mimetic); 티말파신(thymalfasin); 티모포 이에틴 수용체 작용제(thymopoietin receptor agonist); 티모트리난(thymotrinan); 티로이드 자극 호르몬(thyroid stimulating hormone); 틴 에틸 에티오푸푸린(tin ethyl etiopurpurin); 티라파자민(tirapazamine); 티타노센 비클로라이드(titanocene bichloride); 토프센틴(topsentin); 토레미펜(toremifene); 번역 저해제(translation inhibitors); 트레티노인(tretinoin); 트리아세틸우리딘(triacetyluridine); 트리시리빈(triciribine); 트리메트렉세이트(trimetrexate); 트리프토렐린(triptorelin); 트로피세트론(tropisetron); 투로스테리드(turosteride); 티로신 키나제 억제제(tyrosine kinase inhibitors); 티르포스틴(tyrphostins); UBC 억제제; 유베니멕스(ubenimex); 비뇨생식굴-유래 성장 억제 인자(urogenital sinus-derived growth inhibitory factor); 유로키나제 수용체 (urokinase receptor) 대항제; 바프레오티드(vapreotide); 바리올린(variolin) B; 베라레솔(velaresol); 베라민(veramine); 베르딘(verdins); 베르테포르핀(verteporfin); 비노렐빈(vinorelbine); 빈잘틴(vinxaltine); 비탁신(vitaxin); 보로졸(vorozole); 자노테론(zanoterone); 제니플라틴(zeniplatin); 질라스코릅(zilascorb); 및 지노스타틴 스티말라머(zinostatin stimalamer)를 포함하되 이에 한정되지는 않는다.

본 명세서에서 사용된 암(cancer)"라는 용어는 고체 종양 및 혈액 종양(blood born tumor)을 포함하되 이에 한정되지 않는다. 암이라는 용어는 방광, 뼈 또는 혈액, 뇌, 유방, 자궁목, 가슴, 결장, 엔드로메트리움(endrometrium), 식도, 눈, 머리, 신장, 간, 림프절, 폐, 입, 목, 난소, 췌장, 전립선, 직장, 위, 고 환, 인후 및 자궁의 암을 포함하되 이에 한정되지는 않는 피부 조직, 기관, 혈액 및 혈관의 질병을 의미한다. 특정 암은 진행 암(advanced malignancy), 아밀로이드증, 신경모세포종, 수막종, 혈관주위세포종, 다발성 뇌 전이(multiple brain metastase), 다형성 아교모세포종(glioblastoma multiforms), 아교모세포종(glioblastoma), 뇌 줄기 신경아교종(brain stem glioma), 나쁜 예후 악성 뇌 종양(poor prognosis malignant brain tumor), 악성 신경아교종(malignant glioma), 재발성 악성 신경아교종(recurrent malignant glioma), 역형성별세포종(anaplastic astrocytoma), 역형성 희소돌기아교세포종(anaplastic oligodendroglioma), 신경내분비 종양, 직장 샘암종(adenocarcinoma), Dukes C & D 직장결장 암, 수술에 의해 제거될 수 없는(unresectable) 직장결장 암, 전이성 간세포 암종, 카포시육종, 카로타입(karotype) 급성 골수모구 백혈병, 호지킨 림프종(Hodgkin's lymphoma), 비-호지킨 림프종, 피부 T-세포 림프종, 피부 B-세포 림프종, 확산 거대 B-세포 림프종(diffuse large B-Cell lymphoma), 낮은 등급 감상샘소포암종(low grade follicular lymphoma), 악성 흑색종, 악성 중피세포암종(mesothelioma), 악성 가슴막삼출 중피세포암종 신드롬(pleural effusion mesothelioma syndrome), 복강 암종, 유두샘 장액 암종(papillary serous carcinoma), 부인성 암종(gynecologic sarcoma), 연 조직 암종(soft tissue sarcoma), 스셀로더마(scelroderma), 피하 맥관염, 란게르한스 세포 조직구증, 평활근육종, 선천골화섬유형성이상(fibrodysplasia ossificans progressive), 호르몬 무반응 전립샘 암, 수술제거 고 위험 연조직 암(resected high-risk soft tissue sarcoma), 수술로 제거되기 어 려운 간세포 암종(unrescectable hepatocellular carcinoma), 왈덴스트롬 마크로글로블린혈증, 노출성 골수종(smoldering myeloma), 무통성 골수종, 자궁관 암, 안드로겐 비의존성 전립샘 암, 안드로겐 의존성 스테이지 IV 비-전이성 전림샘 암, 호르몬-비감작성(hormone-insensitive) 전립샘 암, 화학요법제-비감작성 전립샘 암, 유두 감상샘 암종, 소포(follicular) 갑상생 암종, 속질(medullary) 갑상생 암종, 및 평활근종(leiomyoma), 두경부암을 포함하되 이에 한정되지는 않는다.

특정 실시예에서, 암은 전이성이다. 다른 실시예에서, 암은 화학요법 또는 방사선 요법에 대해 난치성 또는 내성인 것을 특징으로 한다.

본 발명의 약학적 조성물 및 투여 형태는 또한 하나 이상의 부가적 활성 성분을 더 포함할 수 있다. 결과적으로, 본 발명의 약학적 조성물 및 투여 형태는 본 명세서에서 개시된 활성 성분을 포함한다.

본 발명의 단일 유닛 투여 형태는 환자에게 경구, 점막(예를 들어, 비강, 설하, 질, 버칼, 또는 직장), 비경구적(예를 들어, 피하, 정맥, 볼루스 주입, 근육내 또는 동맥내), 국소(예를 들어, 눈), 경피(transdermal) 또는 피부통과(transcutaneous) 투여하기에 적절하다. 투여 형태의 예는 정제; 캐프릿(caplets); 부드러운 탄성 젤라틴 캅셀과 같은 캅셀제; 캐세트(cachets); 트로키; 로젠즈(lozenges); 분산제; 좌제; 파우더; 에어로솔(예를 들어, 비강 스프레이 또는 인홀러); 겔; 현탁제제(예를 들어, 수상 또는 비-수상 액상 현탁제제, 수중유형 유제, 또는 유중수형 액상 유제) 용액제 및 엘릭실제를 포함하는 환자에게 경구 또는 점막 투여하기에 알맞은 액상 투여 제형; 환자에게 주사 투여하기에 알맞은 액상 투여 제형; 국소 투여하기에 적당한 아이 드랍(eye drop) 또는 다른 안과 제제; 및 환자에게 주사 투여하기에 적당한 액상 투여 형태를 제공하기 위하여 재구성될 수 있는 멸균 고상제제(예를 들어, 결정형 또는 무정형 고체)를 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 투여 형태의 조성물, 모양, 및 타입은 일반적으로 그들의 사용에 따라 매우 다양하다. 예를 들어, 질환의 급성 치료를 위해 사용된 투여 형태는 동일한 질환의 만성 치료를 위해 사용되는 투여 형태보다 그것이 포함하는 하나 이상의 활성 성분의 많은 양을 함유할 수 있다. 유사하게, 비경구적 투여 형태는 동일 질환을 치료하기 위해 사용된 경구 투여 형태보다 그것이 포함하는 하나 이상의 활성 성분의 더 적은 양을 함유할 수 있다. 본 발명에 의해 포함되는 특정 투여 형태의 이러한 및 다른 방식들은 각각 매우 다양하고 본 발명이 속한 분야에 있어 통상의 지식을 가진 자에게 자명하다. 예를 들어, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing, Easton PA (1990) 참조.

전형적인 약학적 조성물 및 투여 형태는 하나 이상의 부형제를 포함한다. 적절한 부형제는 약학 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 잘 알려져 있고, 적절한 부형제의 비-한정적 예는 본 명세서에 개시되어 있다. 특정 부형제가 약학적 조성물 또는 투여 형태에 포함되는 것이 바람직한지 여부는 투여 형태가 환자에게 투여되는 방식을 포함하는, 하지만 이에 한정되지 않는, 본 발명이 속한 분야에서 잘 알려진 여러 가지 인자에 달려 있다. 예를 들어, 정제와 같은 경구 투여 형태 비경구 투여 형태에서의 사용에 알맞지 않은 부형제를 포함할 수 있다.

본 발명은 또한 활성 성분이 분해하는 속도를 줄일 수 있는 하나 이상의 화합물을 함유하는 약학적 조성물 및 투여 형태를 포함한다. 그러한 화합물은 안정화제, 아스코르빅 산과 같은 항산화제, pH 완충제, 또는 염 완충제를 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

부형제의 양 및 타입과 같이, 투여 형태 내에서 활성 성분의 양 및 특정 형태는 환자에게 투여되는 경로와 같은, 하지만 이에 한정되지 않는, 인자들에 따라 다를 수 있다.

경구 투여를 위해 적당한 본 발명의 약학적 조성물은 정제(예를 들어, 츄어블정), 캐플릿(caplet), 캅셀, 및 액제(예를 들어, 가향된(flavored) 시럽)와 같은, 하지만 이에 한정되지 않는, 별개의 투여 형태로 존재할 수 있다. 그러한 투여 형태는 미리 정해진 양의 활성 성분을 포함하고, 본 발명이 속한 분야에서 잘 알려진 약학 방법에 의해 제조될 수 있다. 일반적으로, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing, Easton PA (1990) 참조.

본 발명의 일반적 경구 투여 형태는 활성 성분을 적어도 하나의 부형제와 통상적인 약학적 혼합 기술에 따라서 치밀한 혼합물로 혼합함으로써 제조된다. 부형제는 투여를 위해 바람직한 제제의 형태에 따라 매우 다양한 형태일 수 있다. 예를 들어, 경구 액상 또는 에어로솔 투여 형태의 사용에 적합한 부형제는 물, 글리콜, 오일, 알코올, 향료 성분, 보존제, 및 착색 성분을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 고형 경구 투여 형태(예를 들어, 파우더, 정제, 캅셀제 및 캐플릿)에서 사용하기에 알맞은 부형제의 예는 전분, 설탕, 미결정 셀룰로오스, 부형제, 과립화 제, 활택제, 결합제, 및 붕해제를 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

투여의 편리함 때문에, 정제 및 캅셀제는 가장 유용한 경구 투여 유닛 형태이고, 이 경우 고형 부형제가 적용된다. 바람직하다면, 정제는 표준 수상 또는 비수상(nonaqueous) 기술을 이용하여 코팅될 수 있다. 그러한 투여 형태는 약학 분야의 어떠한 방법에 의해서도 제조될 수 있다. 일반적으로, 약학적 조성물 및 투여 형태는 활성 성분과 액상 운반체, 미세하게 분리된 고체 운반체, 또는 둘 모두와 균일하고 친밀하게(intimately) 혼합하고, 그 후 필요하다면 바람직한 형태로 만들기 위해 프로덕트를 모양냄으로써 제조된다.

예를 들어, 정제는 압축 또는 몰딩(molding)에 의해 제조될 수 있다. 압축 정제는 적당한 기기를 사용하여 파우더 또는 과립과 같은 유동성이 있는 형태인 활성 성분을, 선택적으로 부형제와 혼합하여 압축함으로써 제조될 수 있다. 주조 정제(molded tablet)는 적당한 기기를 사용하여 비활성의 액상 부형제로 습윤된 분말화된 혼합물을 몰딩함으로써 제조될 수 있다. 본 발명의 경구 투여 형태에서 사용될 수 있는 부형제의 예는 결합제, 충진제, 붕해제, 및 활택제를 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 약학적 조성물 및 투여 형태에서의 사용에 적당한 결합제는 옥수수 전분, 감자 전분, 또는 다른 전분, 젤라틴, 아카시아와 같은 천연 및 합성 검류, 소디움 알지네이트, 알지닉 산, 다른 알지네이트, 분말 트라가칸트(powdered tragacanth), 구아 검(guar gum), 셀룰로오스 및 그의 유도체(예를 들어, 에틸 셀룰로오스, 셀룰로오스 아세테이트, 카복시메틸 셀룰로오스 칼슘, 소디움 카복시메틸 셀룰로오스), 폴리비닐 파이로리돈, 메틸 셀룰로오스, 프리-젤라틴화 전분, 하 이드록시프로필 메틸 셀룰로로스, (예를 들어, Nos. 2208, 2906, 2910), 미결정 셀룰로오스, 및 그들의 혼합물을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

미결정 셀룰로오스의 적절한 형태는 AVICEL-PH-101, AVICEL-PH-103, AVICEL RC-581, AVICEL-PH-105 (FMC Corporation, American Viscose Division, Avicel Sales, Marcus Hook, PA에서 상업적으로 구입 가능함)이란 명칭으로 팔리는 물질 및 그들의 혼합물을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 특정 결합제는 AVICEL RC-581이라는 명칭으로 시판되는 미결정 셀룰로오스와 소디움 카복시메틸 셀룰로오스의 혼합물이다. 적당한 무수 또는 낮은 수분 첨가제 또는 부가제는 AVICEL-PH-103^TM 및 Starch 1500 LM을 포함한다.

본 명세서에서 개시된 약학적 조성물 및 투여 형태에서의 사용에 적절한 충진제의 예는 탈크, 칼슘 카보네이트(예를 들어, 과립 또는 파우더), 미결정 셀룰로오스, 분말 셀룰로오스, 덱스트레이트, 카올린, 만니톨, 실리식 산, 소르비톨, 전분, 프리-젤라틴환 전분, 및 그들의 혼합물을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물의 결합제 또는 충진제는 일반적으로 약학적 조성물 또는 투여 형태의 약 50 내지 약 99 중량 퍼센트 존재한다.

붕해제는 정제가 수성 환경에 노출되었을 때 붕해되도록 하기 위하여 본 발명의 조성물에 사용된다. 너무 많은 붕해제를 함유한 정제는 보관 중에 붕해될 수 있는 반면, 너무 적게 함유한 정제는 바람직한 조건 하에서 바람직한 속도로 붕해되지 않는다. 따라서 활성 성분의 방출을 조절하는데 나쁘지 않도록 너무 많지도 너무 적지도 않은 충분한 붕해제의 양이 본 발명의 고형 경구 투여 형태를 형성하기 위해 사용되어야 한다. 사용된 붕해제의 양은 제제의 타입에 따라 다양하고, 본 발명이 속한 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 쉽게 판단할 수 있다. 전형적인 약학적 조성물은 약 0.5 내지 약 15 중량 퍼센트의 붕해제, 바람직하게는 약 1 내지 약 5 중량 퍼센트의 붕해제를 함유한다.

본 발명의 약학적 조성물 및 투여 형태에서 사용될 수 있는 붕해제는 아가-아가, 알지닉 산, 칼슘 카보네이트, 미결정 셀룰로오스, 크로스카멜로스 소디움, 크로스포비돈, 포라크릴린 포타시움, 소디움 전분 글리콜레이트, 감자 또는 타피오카 전분, 다른 전분, 프리-젤라틴화 전분, 다른 전분, 점토, 다른 알진, 다른 셀룰로오스, 검류, 및 그들의 혼합물을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 약학적 조성물 및 투여 형태에서 사용될 수 있는 활택제는 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 미네랄 오일, 경(light) 미네랄 오일, 글리세린, 소르비톨, 만니톨, 폴리에틸렌 글리콜, 다른 글리콜, 스테아릭 산, 소디움 라우릴 설페이트, 탈크, 수소화 식물유(예를 들어, 땅콩 유, 면실 유, 해바라기 유, 참깨 유, 올리브 유, 옥수수 유, 및 콩 유), 진크 스테아레이트, 에틸 올레에이트, 에틸 라우레에이트, 아가, 및 그들의 혼합물을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 부가적 활택제는 예를 들어, 실로이드 실리카 (AEROSIL200, W. R. Grace Co. 제조, Baltimore, MD), 합성 실리카의 응고 에어로솔(coagulated aerosol of synthetic silica, Degussa Co. 제조, Plano, TX), CAB-O-SIL (pyrogenic silicon dioxide product, Cabot Co., Boston, MA), 및 그들의 혼합물을 포함한다. 만약 사 용된다면, 활택제는 일반적으로 그것이 포함된 약학적 조성물 또는 투여 형태의 약 1 중량 퍼센트 이하의 양으로 사용된다.

본 발명의 바람직한 고체 경구 투여 형태는 본 발명의 선택적 사이토카인 억제 약물, 무수 락토스, 미결정 셀룰로오스, 폴리비닐파이로리돈, 스테아릭 산, 콜로이달 무수 실리카, 및 젤라틴을 함유한다.

본 발명의 활성 성분은 조절 방출 수단에 의해서 또는 본 발명이 속한 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 잘 알려진 전달 장치에 의해서 투여될 수 있다. 예는 미국특허 제3,845,770호; 제3,916,899호; 제3,536,809호; 제3,598,123호; 및 제4,008,719호, 제5,674,533호, 제5,059,595호, 제5,591,767호, 제5,120,548호, 제5,073,543호, 제5,639,476호, 제5,354,556호, 및 제5,733,566호에 개시된 것들을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 인용문헌은 그 인용에 의하여 본 명세서에 포함된다. 그러한 투여 형태는 예를 들어 다양한 비율로 바람직한 방출 프로파일을 제공하기 위한 하이드로프로필메틸 셀룰로오스, 다른 폴리머 매트릭스들, 겔, 투과성 막, 삼투 시스템, 다층 코팅, 마이크로파티클, 리포솜, 마이크로스피어, 또는 그들의 혼합물을 사용하여 하나 또는 그 이상의 활성 성분의 느린 또는 조절-방출을 제공하기 위하여 사용될 수 있다. 본 명세서에서 개시된 것을 포함하는 본 발명이 속한 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 알려진 적절한 조절-방출 제제는 본 발명의 활성 성분에 있어 사용을 위해 쉽게 선택될 수 있다. 본 발명은 따라서 조절-방출을 위해 적합한 정제, 캅셀제, 겔캡제(gelcaps), 및 캐플릿과 같은, 하지만 이에 한정되지 않는, 경구 투여를 위해 적당한 단일 유닛 투여 형태를 포함한다.

모든 조절-방출 약학적 조성물은 그들의 비-조절된 대응물에 의해 달성되는 약물 치료 효과를 개선하고자 하는 일반적인 목적을 가진다. 이상적으로, 의료 치료에 있어 최적으로 설계된 조절-방출 제제의 사용은 최소의 시간 내에 상태를 치료 또는 조절하도록 채택된 최소 약물 물질에 의해 특징져진다. 조절-방출 제제의 이점은 약물의 확장된 활성, 감소된 투여 주기, 및 증가된 환자의 복약순응도를 포함한다. 부가적으로, 조절-방출 제제는 작용의 개시 시기 또는 약물의 혈중 레벨과 같은 다른 특성을 조절하기 위해 사용될 수 있고, 따라서 부가 반응(예를 들어, 부작용)의 발생에 영향을 미칠 수 있다.

대부분의 조절-방출 제제는 초기에 바람직한 치료 효과를 즉시 나타낼 수 있는 약물(활성 성분)의 양을 방출하고, 점차적으로 연속하여 확장된 시기 동안 치료적 또는 예방적 효과의 레벨을 유지하기 위한 약물의 다른 양을 방출하도록 설계된다. 체내에서 이러한 일정한 약물 레벨을 유기하기 위해서, 약물은 투여 형태로부터 체내에서 배출 및 대사되는 약물의 양을 대체하는 속도로 방출되어야 한다. 활성 성분의 조절-방출은 pH, 온도, 효소, 수분, 또는 다른 생리적인 조건 또는 화합물을 포함하는, 하지만 이에 한정되지 않는, 다양한 조건에 의해 촉진될 수 있다.

비경구적 투여 형태는 환자에게 피하, 정맥(볼루스 주입을 포함), 근육내, 및 동맥내 경로를 포함하는, 하지만 이에 한정되지 않는, 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있다. 그러한 투여는 일반적으로 오염원에 대한 환자의 자연적 방어를 우회할 수 있기 때문에, 비경구적 투여 형태는 바람직하게는 멸균 또는 환자에게 투 여 전에 멸균될 수 있어야 한다. 비경구적 투여 형태의 예는 주사용 용액, 주사를 위한 약학적으로 허용 가능한 비히클로 용이하게 용해 또는 현탁될 수 있는 건조 프로덕트, 주사용 현탁액, 및 유제를 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 비경구적 투여 형태를 제공하기 위해 사용될 수 있는 적당한 비히클은 본 발명이 속한 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 잘 알려져 있다. 예는 USP 주사용 증류수; 소디움 클로라이드 주사액, 링거 주사액, 덱스트로스 주사액, 덱스트로스 및 소디움 클로라이드 주사액, 및 락테이티드 링거 주사액과 같은, 하지만 이에 한정되지 않는, 수성 비히클; 에틸 알코올, 폴리에틸렌 글리콜, 및 폴리프로필렌 글리콜과 같은, 하지만 이에 한정되지 않는, 물-혼화성 비히클; 옥수수 유, 면실 유, 땅콩 유, 참깨 유, 에틸 올레에이트, 이소프로필 미리스테이트, 및 벤질 벤조에이트와 같은, 하지만 이에 한정되지 않는, 비-수상 비히클을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다.

본 명세서에서 개시된 하나 이상의 활성 성분의 용해도를 증가시킬 수 있는 화합물 또한 본 발명의 비경구적 투여 형태에 포함될 수 있다. 예를 들어, 사이클로덱스트린 및 그 유도체는 본 발명의 선택적 사이토카인 억제 약물 및 그의 유도체의 용해도를 증가시키기 위해 사용될 수 있다. 예를 들어, 미국특허 제5,134,127호 참조. 상기 문헌은 인용에 의하여 본 명세서에 포함된다.

본 발명의 국소 및 점막 투여 형태는 스프레이, 에어로솔, 용액, 유제, 서스펜션, 아이 드랍 또는 다른 안과 제제, 또는 본 발명이 속한 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 알려진 다른 형태를 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. Remington's Pharmaceutical Sciences, 16^th and 18^th eds., Mack Publishing, Easton PA (1980 & 1990); 및 Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 4th ed., Lea & Febiger, Philadelphia (1985) 참조. 구강 내 점막 조직을 치료하기 위해 적당한 투여 형태는 양치질 약(mouthwash) 또는 경구 겔제로 제제화될 수 있다.

본 발명에 의해 포함되는 국소 및 점막 투여 형태를 제공하기 위해 사용될 수 있는 적당한 첨가제(예를 들어, 운반체 및 부형제) 및 다른 물질들은 약학 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 잘 알려져 있고, 주어진 약학적 조성물 또는 투여 형태가 적용될 특정 조직에 의존한다. 상기 사실을 염두에 두고, 용액, 유제 또는 겔제를 형성하기 위한 전형적인 첨가제는 물, 아세톤, 에탄올, 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 부탄-1,3-디올, 이소프로필 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트, 미네랄 오일 및 이들의 혼합물을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니며, 이들은 비-독성이고 약학적으로 허용 가능하다. 가습제(moisturizer) 또는 습윤제(humectant) 또한 바람직하다면 약학적 조성물 및 투여 형태에 첨가될 수 있다. 그러한 부가적 성분의 예는 본 발명이 속한 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 잘 알려져 있다. 예를 들어, Remington's Pharmaceutical Sciences, 16^th and 18^th eds., Mack Publishing, Easton PA (1980 & 1990) 참조.

약학적 조성물 또는 투여 형태의 pH 또한 하나 이상의 활성 성분의 전달을 개선하기 위하여 조정될 수 있다. 유사하게, 용매 운반체의 극성, 그의 이온 강도, 또는 삼투압도 전달을 개선하기 위하여 조절될 수 있다. 스테아레이트와 같은 화합 물이 전달을 개선하기 위하여 하나 이상의 활성 성분의 친수성 또는 친유성을 이롭게 조정하기 위하여 약학적 조성물 또는 투여 형태에 첨가될 수 있다. 이러한 관점에서, 스테아레이트는 제제화를 위한 지질 비히클로써, 유화제로써 또는 계면활성화제로써, 및 전달-촉진 또는 침투-촉진 성분으로써 사용될 수 있다. 활성 성분의 다른 염, 수화물 또는 용매화물이 생성되는 조성물의 물성을 더 조절하기 위하여 사용될 수 있다.

본 발명에 따라서, 본 발명의 조성물들은 암의 치료 또는 예방을 위하여 항암제 전에, 동시에, 또는 차후에 투여될 수 있다. 암의 타입, 환자의 병력 및 조건 및 항암제에 따라 본 발명의 조성물들의 사용은 그 용량 및 시기 등이 조절될 수 있다.

이하 본 발명을 구체적으로 설명한다.

플라보노이드에서 가장 반응성이 커서 치환기 도입이 용이한 7번 수산화기의 변형에 의한 유도체에 관한 연구는 그리 활발히 진행되고 있지 않고 있는데, 본 발명에서는 분자모델링 연구를 통해서 플라보노이드 7번 수산화기에 적절한 길이의 알킬기를 도입하였을 때 CDK(Cyclin dependent kinase)2의 ATP 결합자리에서 지금까지 알려지지 않은 새로운 리간드 결합자리와 상호작용할 수 있음을 확인하고(도 1 참조), 이 화합물을 직접 합성하여 그 활성을 검증하기로 하였다.

따라서, 본 발명은 플라보노이드가 가지는 다양한 수산화기중 7번 수산화기에 위치 선택적인 알킬화 반응에 의해 알킬기가 도입되었을 때 플라보노이드의 생리활성에 미치는 영향을 알아보는 것을 목적으로 한다.

[화학식 1]

상기 식에서 Bn은 벤질이고, Me는 메틸이다.

이에 본 발명자들은 상기 화학식 1로 표기되는 아피제닌 유도체를 효과적으로 합성하는 방법을 개발하고자 예의 노력한 결과, 플라보노이드계 화합물인 나린제닌을 출발물질로 하고, 위치 선택적인 7-O-알킬화 반응 후, DDQ를 이용한 산화반응으로 이어지는 새로운 반응 조건을 확인하였다(도 2 참조).

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

1,3-프로판디올로부터 세 단계에 걸쳐 통상적인 방법에 의해 합성한 1-요오드화-3-벤질옥시프로판과 나린제닌을 무수 아세톤에 녹인 후, 탄산칼륨 존재하에서 반응시켜 화합물 2를 55%의 수율로 얻는다. 화합물 2의 가리움기인 벤질기를 제거하면 화합물 3을 얻을 수 있고 반대로 과량의 디메틸황산과 탄산칼륨 존재하에서 반응시키면 5,4 -O-디메틸나린제닌 유도체 4를 얻을 수 있다. 화합물 4의 벤질 가리움기 제거 반응에 의해 화합물 5를 얻을 수 있으며 또한, 트리브로모보란과의 반응에 의해 5번 위치의 메틸기를 선택적으로 제거할 수 있어 화합물 6을 5로부터 얻을 수도 있다. 본 발명에서 의도한 화합물 8은 DDQ를 이용한 4의 산화반응에 의해 얻을 수 있는데 이 때, 벤질기가 이탈된 부산물 7이 함께 얻어진다. 화합물 8의 벤질기 제거 반응시 5번 메틸기가 함께 이탈하여 9가 얻어지며 마지막으로 4 위치에 있는 메틸기를 트리브로모보란으로 제거하면 화합물 10을 얻을 수 있다.

합성된 화합물들의 CDK2에 대한 저해능을 검증한 결과 기대한 바와 같이 화합물 8이 가장 우수한 저해능을 나타냈는데, 화합물 8은 20μM 농도에서 효소의 활성을 약 50% 가량 저해하여, 아피제닌과 비교했을 때 월등히 향상된 효소 저해능을 보인다(도 3 참조). 한편, 합성과정중 도출된 다른 화합물들 (1~7, 9~10)은 모두 아무런 효소 저해능을 보이지 않는 것으로 확인되어 본 발명에서 고안한 7-O-알킬 사슬의 구조가 화합물 8의 효소 저해능에 영향을 미치고 있는 것을 확인할 수 있었다.

한편, 합성된 플라보노이드 유도체들에 의한 세포 생존도 저해 실험 결과 역시, 세포의 성장은 화합물 8의 존재하에서만 영향을 받는 것으로 확인되었다(도 4 참조). 특히, 화합물 8은 50 μM 농도하에서 세포의 생존률을 20% 이하로 줄이는 강력한 세포독성을 가지는 것으로 확인되었다.

이상 상세히 기술한 바와 같이, 본 발명에서는 분자모델링 연구를 통해서 플 라보노이드 7번 수산화기에 적절한 길이의 알킬기를 도입하였을 때 CDK2의 ATP 결합자리에서 지금까지 알려지지 않은 새로운 리간드 결합자리와 상호작용할 수 있음을 확인하고 이 화합물을 합성하여 그 활성을 검증한 결과, 도입된 알킬기에 의해 CDK2 저해능은 물론 세포 생존도의 저해도도 월등히 향상됨을 확인하였다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 아니하는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

실시예 1. 7- O -(3- 벤질옥시프로필 ) 나린제닌 (2)의 제조:

나린제닌 (710 mg, 2.6 mmo)을 아세톤과 디메틸포름아미드의 1:1 혼합용액 (6 mL)에 녹인 용액에 탄산칼륨 (432 mg, 3.1 mmol)과 1-요오드화-3-벤질옥시프로판 (546 mg, 3.1 mmol)을 첨가하고 50℃에서 6 시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 상온으로 냉각한 후, 고체를 걸러내고 여과액을 감압 농축하여 얻은 농축액을 실리카겔 컬럼크로마토그래피 (헥산:아세트산에틸에스테르 = 2:1)로 정제하여 화합물 2 (600 ㎎, 1.43 mol, 55%)를 노란색 분말 형태로 얻었다:

¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 2.05 (quint, J = 6.1 Hz, 2H), 2.75 (dd, J = 17.2, 3.0 Hz, 1H), 3.08 (dd, J= 17.2, 13.0 Hz, 1H), 3.62 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 4.07 (t, J = 6.2 Hz, 2H) 4.51 (s, 2H), 5.30 (dd, J = 13.0 Hz, 2.9 Hz, 1H), 6.02 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.05 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.24-7.32 (m, 7H), 12.0 (s, 1H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ 195.9, 167.1, 163.6, 162.6, 156.2, 137.6, 129.6, 128.0, 127.5, 127.3, 115.3, 102.7, 95.2, 94.2, 78.5, 72.7, 66.0, 65.0, 42.6, 28.9.

실시예 2. 7- O -(3-히드록시프로필) 나린제닌 (3)의 제조:

화합물 2 (100 mg, 0.24 mmol)를 메탄올 (3 mL)에 녹인 용액에 10% Pd/C (10 mg)를 첨가하고 플라스크를 봉한 후, 수소 풍선을 장착하여 플라스크에 수소를 공급했다. 반응물을 상온에서 12 시간 동안 교반한 후, 짧은 셀라이트 컬럼을 통해 고체를 걸러내어 얻어진 여과액을 감압농축하여 농축액을 얻었다. 농축액을 실리카겔 컬럼크래마토그래피 (헥산:아세트산에틸에스테르 = 1:1)로 정제하여 화합물 3 (36.3 mg, 0.11 mmol, 46%)을 연한 노란 분말 형태로 얻었다:

¹H NMR (CD₃OD, 400 MHz) δ 1.98 (quint, J = 6.2 Hz, 2H), 2.73 (dd, J = 17.2, 3.0 Hz, 1H), 3.15 (dd, J= 17.2, 12.9 Hz, 1H), 3.71 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 4.10 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 5.37 (dd, J = 12.9, 2.8 Hz, 1H), 6.04 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.06 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.5, 2H), 7.32 (d, J = 8.5 Hz, 2H).

실시예 3. 7- O -(3- 벤질옥시프로필 )-5,4 - O - 디메틸나린제닌 (4)의 제조:

화합물 2 (1.5 g, 3.57 mmol)를 무수 아세톤 (40 mL)에 녹인 용액에 탄산칼륨 (2.5 g, 17.9 mmol)과 디메틸황산 (1.4 mg, 14.3 mmol)을 첨가하고 상온에서 5 시간 동안 교반하였다. 고체를 걸러내고 얻어진 여과액을 감압농축한 후, 농축액을 실리카겔 컬럼크로마토그래피 (헥산:아세트산에틸에스테르 = 4:1)로 정제하여 화합물 4 (1.53 mol, 70%)를 연한 노란 분말 형태로 얻었다:

¹H NMR ((CD₃)₂CO, 400 MHz) δ 2.06 (quint, J = 6.1 Hz, 2H), 2.75 (dd, J = 16.5, 2.8 Hz, 1H), 3.03 (dd, J = 16.5 , 13.1 Hz, 1H), 3.62 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.86 (s, 3H), 4.09 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 4.50 (s, 2H), 5.33 (dd, J= 13.0, 2.6 Hz, 1H), 6.06 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.13 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.24-7.31 (m, 5H), 7.36 (d, J = 8.6 Hz, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ 189.3, 165.3, 164.9, 162.2, 160.0, 138.2, 130.8, 128.3, 127.6, 127.5, 114.0, 105.8, 94.0, 93.3, 78.8, 73.0, 66.3, 65.2, 56.0, 55.2, 45.3, 29.4.

실시예 4. 7- O -(3-히드록시프로필)-5,4 - O - 디메틸나린제닌 (5)의 제조:

화합물 4 (60 mg, 0.13 mmol)를 메탄올 (3 mL)에 녹인 용액에 10% Pd/C (10 mg)를 첨가하고 플라스크를 봉한 후, 수소 풍선을 장착하여 플라스크에 수소를 공급했다. 반응물을 상온에서 12 시간 동안 교반한 후, 짧은 셀라이트 컬럼을 통해 고체를 걸러내어 얻어진 여과액을 감압농축하여 농축액을 얻었다. 농축액을 실리카 겔 컬럼크래마토그래피 (헥산:아세트산에틸에스테르 = 2:1)로 정제하여 화합물 5 (20 mg, 0.06 mmol, 45%)을 연한 노란 분말 형태로 얻었다:

¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 2.01 (quint, J = 5.9 Hz, 2H), 2.63 (m, 1H), 2.71 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.84 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 4.06 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 4.92 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 6.07 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.91(d, J= 8.2 Hz, 2H), 7.34 (d, J = 8.4 Hz, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ 159.7, 159.0, 158.8, 156.8, 134.2, 127.8, 114.3, 104.0, 94.5, 92.0, 66.3, 61.1, 55.9, 55.7, 53.9, 32.3, 29.8, 19.8.

실시예 5. 7- O -(3-히드록시프로필)-4 - O - 메틸나린제닌 (6)의 제조:

화합물 5 (100 mg, 0.23 mmol)을 무수 디클로로메탄 (7 mL)에 녹인 용액에 트리브로모보란 (1.0M in CH₂Cl₂, 0.46 mL, 0.46 mmol)을 0℃에서 천천히 첨가하였다. 반응용액을 0℃에서 1 시간 동안 교반한 후, 메탄올과 물의 1:1 혼합용액 (6 mL)을 첨가하였다. 휘발성 물질들을 감압증류하여 제거한 후 얻어진 농축액을 실리카겔 컬럼크로마토그래피 (헥산:아세트산에틸에스테르 = 3:1)로 정제하여 화합물 6 (40 mg, 0.12 mmol, 50%)을 연한 노란 분말 형태로 얻었다:

¹H NMR ((CD₃)₂CO, 400 MHz) δ 1.95 (quint, J = 6.1 Hz, 2H), 2.74 (dd, J = 17.1, 2.8 Hz, 1H), 3.18 (dd, J = 17.1. 12.8 Hz, 1H), 3.70 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 4.13 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 5.48 (dd, J= 12.9, 3.0 Hz, 1H), 6.01 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.04 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.40 (d, J = 8.44 Hz, 2H).

실시예 6. 7- O -(3-히드록시프로필)-5,4 - O - 디메틸아피제닌 (7)과 7- O -(3- 벤질옥시프로필 )-5,4 - O - 디메틸아피제닌 (8)의 제조:

화합물 4 (50 mg, 0.12 mmol)를 1,4-디옥산 (5 mL)에 녹인 용액에 DDQ (54.5 mg, 0.24 mmol)와 초산 (0.1 mL)을 상온에서 첨가한 후, 80℃에서 12 시간 동안 가열하였다. 반응 용액을 상온으로 냉각한 후 감압농축하여 얻어진 농축액을 디클로로메탄에 녹여 얻어진 고체를 걸러내고 여과액은 물로 두세번 씻어 주었다. 유기층을 분리하여 황산마그네슘으로 탈수한 후, 황산마그네슘을 걸러내고 얻어진 여과액을 감압농축하여 얻어진 농축액을 실리카겔 컬럼크래마토그래피 (디클로로메탄:메탄올 = 40:1)로 정제하여 7 (18 mg, 0.05 mmol, 42%)과 8 (22 mg, 0.049 mmol, 41%)을 각각 갈색 오일과 진한 노란 분말 형태로 얻었다.

화합물 7: ¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 2.10 (quint, J = 6.1 Hz, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.89-3.95 (m, 5H), 4.21 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 6.31 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.52 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 6.97 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.78 (d, J = 8.9 Hz, 2H) ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ 207.4, 178.2, 163.6, 162.5, 161.2, 161.1, 160.1, 128.0, 124.1, 114.7, 109.4, 107.8, 96.7, 93.8, 66.0, 59.8, 56.7, 55.8, 32.3:

화합물 8: ¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ2.13 (m, 2H), 3.69 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 4.20 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 4.55 (s, 2H), 6.35 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 7.00 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.48 (m, 5H), 7.81 (d, J = 8.9 Hz, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ 177.7, 163.3, 162.0, 160.8, 160.7, 159.8, 138.2, 129.7, 128.2, 127.6, 126.6, 123.8, 114.3, 109.1, 107.6, 96.4, 93.4, 73.1, 66.4, 65.4, 56.4, 55.5, 30.9; HRMS (MALDI-TOF): (M+H⁺) calcd. for C₂₇H₂₇O₆, 447.181; found, 447.037.

실시예 7. 7- O -(3-히드록시프로필)-4 - O - 메틸아피제닌 (9)의 제조:

화합물 8 (70 mg, 0.2 mmol)을 무수 디클로로메탄 (8 mL)에 녹인 용액에 트리브로모보란 (1.0M in CH₂Cl₂, 0.2 mL, 0.2 mmol)을 0℃에서 천천히 첨가하였다. 반응용액을 0℃에서 1 시간 동안 교반한 후, 메탄올과 물의 1:1 혼합용액 (6 mL)을 첨가하였다. 휘발성 물질들을 감압증류하여 제거한 후 얻어진 농축액을 실리카겔 컬럼크로마토그래피 (디클로로메탄:메탄올 = 20:1)로 정제하여 화합물 9 (42 mg, 0.12 mmol, 62%)를 연한 노란 분말 형태로 얻었다:

¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 2.05 (quint, J = 6.2 Hz, 2H), 3.79 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 4.18 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 6.33 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 7.03 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.87 (d, J = 9.0 Hz, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ 183.5, 166.1,165.5, 163.8, 162.3, 158.7, 128.9, 123.9, 115.3, 106.0, 104.3, 99.4, 93.8, 66.2, 59.1, 56.0, 32.6.

실시예 8. 7- O -(3-히드록시프로필) 아피제닌 (10)의 제조:

화합물 9 (130 mg, 0.38 mmol)을 무수 디클로로메탄 (12 mL)에 녹인 용액에 트리브로모보란 (1.0M in CH₂Cl₂, 0.76 mL, 0.76 mmol)을 0℃에서 천천히 첨가하였다. 반응용액을 0℃에서 1 시간 동안 교반한 후, 메탄올과 물의 1:1 혼합용액 (8 mL)을 첨가하였다. 휘발성 물질들을 감압증류하여 제거한 후 얻어진 농축액을 실리카겔 컬럼크로마토그래피 (디클로로메탄:메탄올 = 20:1)로 정제하여 화합물 10 (82 mg, 0.25 mmol, 65%)을 연한 노란 분말 형태로 얻었다: ¹H NMR ((CD₃)₂CO, 400 MHz) δ 1.63(quint, J = 6.2 Hz, 2H), 3.39 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.88 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 5.96 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.31 (s, 1H), 6.33 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.60 (d, J = 8.7 Hz, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ 184.0, 166.8, 166.0, 163.8, 162.8, 159.5, 130.1, 124.0, 117.7, 106.7, 105.0, 100.9, 95.4, 67.3, 59.5, 55.8, 33.8.

실험예 1. CDK2 의 저해능 검증:

CDK2-Cyclin A 효소 활성은 Biosource Omnia Ser/Thr recombinant kit 7 (Invitrogen Corporation, CA, USA)를 이용한 fluorescence kinetic assay법에 의 해 검증되었다. 상온에서 384-well black polystyrene plate에 30 μL의 부피로 검증을 시행하였다. 검증의 최종부피는 CDK2-Cyclin A가 1 μM, 펩티드 기질이 10 μM, 그리고 ATP가 1 mM이었다. 검증된 화합물들을 디메틸술폭시드 (DMSO)에 녹인 후 반응용액에 첨가하였는데 이 때, 화합물들의 농도는 20 μM으로 고정되었다. 검증에 사용된 디메틸술폭시드의 최종 농도는 1%였다. 효소의 활성을 연속적인 kinetic monitoring은 Spectramax Gemini reader (λ_ex 355 nm, λ_em 460 nm)에 의해 시행되었다. 실험은 세 번 반복하여 시행되었으며 이를 평균하여 효소 활성의 퍼센트 저해도를 계산하였다.

실험예 2. 세포 생존도 검증:

Huh-7 세포의 수가 100,000 cells/mL 정도 되는 세포 혼탁액을 마련하여 그 중 100 μL를 96-well plate의 각 well에 가하였다. Plate를 37 ℃에서 24 시간 동안 배양한 후, 배양액을 50 μM로 고정된 농도를 갖는 저해제를 포함하는 배양액으로 교체하였다. Plate를 48 시간 동안 더 배양한 후, 10 μL의 CCK-8 용액을 각 well 에 가하고 37 ℃에서 1 시간 동안 더 배양했다. Microplate reader (Spectramax Plus, Molecular Devices, UK)를 이용하여 각 well의 광밀도 (optical density, OD)를 450 nm에서 관찰하였다. 배양액에서만 배양된 세포를 세포 생존도의 대조군으로 삼았다.

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

도 1은 플라보노이드 유도체 7-O-(3-벤질옥시프로필)-5,4 -O-디메틸-아피제닌이 CDK2의 ATP 결합자리에 결합된 분자모델링 연구 결과를 설명한다.

도 2는 플라보노이드 유도체 7-O-(3-벤질옥시프로필)-5,4 -O-디메틸-아피제닌의 합성과정을 설명한다.

도 3은 화합물 7-O-(3-벤질옥시프로필)-5,4 -O-디메틸-아피제닌의 CDK2 저해능을 설명한다.

도 4는 화합물 7-O-(3-벤질옥시프로필)-5,4 -O-디메틸-아피제닌에 의한 암세포 생존도 저하 효과를 설명한다.

Claims (6)

1. 하기 화학식 1을 갖는 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염.

   [화학식 1]

   

   상기 식에서 Bn은 벤질이고, Me는 메틸이다.
2. 제1항에 있어서, 상기 약학적으로 허용 가능한 염은 염산, 황산 및 인산을 포함하는 무기염과 수산, 푸마르산, 말레인산, 능금산, 구연산, 주석산 및 글루탐산을 포함하는 유기염으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물.
3. 화학식 1을 갖는 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 그의 염을 유효성분으 로 포함하는 항암용 의약조성물.
4. a) 1-요오드화-3-벤질옥시프로판과 나린제닌을 반응시켜 7-O-(3-벤질옥시프로필)나린제닌을 제조하는 단계;

   b) 상기 7-O-(3-벤질옥시프로필)나린제닌을 디메틸황산과 탄산칼륨 존재하에서 반응시켜 5,4 -O-디메틸나린제닌 유도체를 얻는 단계; 및

   c) 상기 5,4 -O-디메틸나린제닌 유도체 화합물을 산화시켜서 7-O-(3-벤질옥시프로필)-5,4 -O-디메틸아피제닌을 제조하는 단계를 포함하는

   7-O-(3-벤질옥시프로필)-5,4 -O-디메틸아피제닌 제조 방법.
5. 제4항에 있어서, 상기 a)단계의 반응은 탄산칼륨 존재 하에서 진행되는 것을 특징으로 하는 방법.
6. 제4항에 있어서, 상기 c)단계의 산화 반응은 2,4-다이클로로-5,6-다이시아노-1,4 벤조퀴논(dichlorodicyanoquinone;DDQ)을 이용하여 진행되는 것을 특징으로 하는 방법.

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