KR20080044100A - Animal feed composition containing by-products obtained from purification process of the conjugated linoleic acid - Google Patents

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Abstract

An animal feed composition containing the purification by-products of conjugated linoleic acid which are discarded as an active ingredient is provided to efficiently produce an animal and animal products containing highly unsaturated fatty acid at low costs. An animal feed composition contains 0.02 to 10 parts by weight of the purification by-products of conjugated linoleic acid and additionally dietary supplements, food additives and/or feed additives, based on the total weight of the composition. The purification by-products of conjugated linoleic acid are obtained by purifying conjugated linoleic acid, adding the filtrate and removing hexane. The animal is a cow, horse, mule, donkey, goat, sheep, deer, pig, rabbit, dog and poultry. The poultry is a chicken, turkey, duck, ostrich, goose or quail.

Description

공액리놀레인산 정제부산물 함유 동물 사료조성물 {Animal Feed Composition containing by-products obtained from purification process of the conjugated linoleic acid}Animal feed composition containing conjugated linoleic acid refined by-products {Animal Feed Composition containing by-products obtained from purification process of the conjugated linoleic acid}

도 1은 공액리놀레인산 (CLA)의 합성 및 정제과정을 통한, 본 발명의 공액리놀레인산 정제부산물의 제조방법에 대한 모식도이다.1 is a schematic diagram of a method for preparing a conjugated linoleic acid purified by-product of the present invention through the synthesis and purification of conjugated linoleic acid (CLA).

도 2는 공액리놀레인산 정제부산물의 열안정성을 확인한 그래프이다. CLA는 공액리놀레인산, CBP는 공액리놀레인산 정제부산물, LA는 리놀레인산, LBP는 리놀레인산 정제부산물을 나타내며, 이하 동일하다. Figure 2 is a graph confirming the thermal stability of the conjugated linoleic acid purified by-products. CLA represents a conjugated linoleic acid, CBP represents a conjugated linoleic acid purified byproduct, LA represents a linoleic acid, and LBP represents a linoleic acid purified byproduct, which is the same below.

도 3은 공액리놀레인산 정제부산물의 과산화물가 측정(peroxide value, POV test) 결과를 나타낸 그래프이다. Figure 3 is a graph showing the results of the peroxide value of the conjugated linoleic acid purified byproducts (peroxide value, POV test).

도 4는 공액리놀레인산 정제부산물에 함유된 각종 지방산의 에스테르화 정도를 TLC로 확인한 사진이다. 표준시료로 모노(mono-), 다이(di-), 트리(tri-) 리놀레인산을 사용하였다.Figure 4 is a photograph confirming the degree of esterification of various fatty acids contained in the conjugated linoleic acid purified by-product by TLC. Mono-, di- and tri-linoleic acid were used as standard samples.

도 5는 본 발명의 공액리놀레인산 정제부산물 함유 사료조성물을 산란계에 식이 급여한 후, 산란계가 산출 (産出)한 계란의 난황 내 공액리놀레인산의 시간대 별 축적도를 확인한 그래프이다. 내부표준물질 (internal standard)로써 말가릭산 (Margaric acid, Heptadecanoic acid)을 사용하였다. Figure 5 is a graph confirming the accumulation of the conjugated linoleic acid in egg yolk of the egg produced by the laying hen after feeding the feed composition containing the conjugated linoleic acid purified by-product of the present invention to the laying hen. As an internal standard, margaric acid (Heptadecanoic acid) was used.

도 6은 본 발명의 공액리놀레인산 정제부산물 함유 사료조성물을 산란계에 식이 급여한 후, 산란계가 산출한 계란의 난황 내 콜레스테롤의 시간대별 함량변화를 확인한 그래프이다. Figure 6 is a graph confirming the time-phase content change of cholesterol in egg yolk of the egg calculated by the laying hen after feeding the feed composition containing the conjugated linoleic acid purified byproducts of the present invention.

본 발명은 고도불포화 지방산인 공액리놀레인산 정제부산물을 유효성분으로 함유하는 동물 사료조성물에 관한 것이다. The present invention relates to an animal feed composition containing a conjugated linoleic acid purified by-product of polyunsaturated fatty acid as an active ingredient.

최근, 현대인의 소득향상과 식이 (食餌)의 변화에 따른 각종 성인성 질환이 급증하고 있으며, 그 중 혈관계 질환과 암 등이 현대인의 건강을 위협하는 요인으로 인식되고 있다. 이들 질환과 관련하여 여러 기능성 원료에 대한 동정 및 다양한 연구가 활발히 진행되어 왔으며, 그 결과 인체에 유용한 다양한 기능성 원료가 개발되었고, 이러한 성분들을 함유한 다양한 기능성 식품들이 상품화되고 있는 추세이다. In recent years, various adult diseases are increasing rapidly due to the improvement of the income of the modern man and the change of diet, and vascular disease and cancer are recognized as a threat to the health of the modern man. In connection with these diseases, various functional raw materials have been identified and various studies have been actively conducted. As a result, various functional raw materials useful for the human body have been developed, and various functional foods containing these ingredients have been commercialized.

그 중 탄소수 18개 이상으로 이루어진 고도불포화 지방산인 공액리놀레인산은 동물실험에서 동맥경화 억제, 면역강화, 항암 등에 대한 방어기작에 관여하는 것으로 밝혀져 있으며, 식품의 3차 기능, 즉 생리활성 강화소재로서도 활발한 연구가 진행되고 있으나 (Ha, Y. L. 등 1990, Cancer Res . 50:1097; Belury, M. A. 등 1996, Nutr . Cancer 26:149; Ip, C. 등 1991, Cancer Res. 50:6118; Liew, C. 등 1996, Carcinogenesis 16:3037), 상기와 같이 다양한 성인성 질환에 대한 보호효과가 보고되어 있음에도 안정성 증대 및 효과적인 체내 축적도의 증대방안에 대한 연구는 전무한 실정이었다. 반면, 이중결합이 3개 이상으로 구성된 오메가-3 계열 지방산의 효과는 다양한 연구를 통해 이미 체내 안정성 및 증대된 안정성이 입증된 바 있다. 오메가-3 계열의 고도불포화 지방산은 주로 어류의 육질에 함유되어 있는 것으로 밝혀져 있으며, 포화지방산 함량이 높은 육류를 주식으로 하는 서구사회에 큰 관심사로 등장하게 되어 활발한 연구가 진행되고 있는 실정이다. Among them, conjugated linoleic acid, a polyunsaturated fatty acid having 18 or more carbon atoms, has been found to be involved in defense mechanisms against arteriosclerosis, immune strengthening, and anticancer in animal experiments. Active research is ongoing (Ha, YL et al. 1990, Cancer Res . 50: 1097; Belury, MA et al . 1996, Nutr . Cancer 26: 149; Ip, C. et al. 1991, Cancer Res . 50: 6118; Liew, C. et al. 1996, Carcinogenesis 16: 3037), although the protective effects of various adult diseases have been reported as described above, there have been no studies on the improvement of stability and the increase of effective body accumulation. On the other hand, the effects of omega-3 fatty acids consisting of three or more double bonds have already been demonstrated in various studies through the body stability and increased stability. Omega-3 polyunsaturated fatty acids are found to be mainly contained in the meat of fish, and active research is being conducted since it has emerged as a major concern in Western societies based on meat with high saturated fatty acid content.

가금류 (poultry)는 체내 지방산대사에 의한 지방산의 변형이 비교적 적은 축종 (畜種)으로서 리놀레인산 (linoleic acid), 리놀레닌산 (linolenic acid)외에 생물체에서 타입 3의 PG (prostagladin) 및 타입 5의 류코트리엔의 전구물질 (前驅物質)이 되는 EPA (eicosapentaenoic acid)와 물고기 기름 속에 존재하는 오메가-3-지방산인 DHA (docosahexaenoic acid) 등 오메가-3 계열의 고도불포화 지방산의 축적효율이 높은 것으로 알려져 있다. Poultry is a livestock with relatively little alteration of fatty acids by fatty acid metabolism in the body, and in addition to linoleic acid, linolenic acid, type 3 PG (prostagladin) and type 5 Omega-3 polyunsaturated fatty acids such as eicosapentaenoic acid (EPA), a precursor of leukotriene, and DHA (docosahexaenoic acid), an omega-3-fatty acid in fish oil, are known to have high accumulation efficiency.

종래에는 지방산을 식이 첨가 형태로 이용하여 가축, 특히 가금류와 가금류 유래 축산물 (畜産物, stock farm products)내에 기능성 고도불포화지방산을 축적 및 강화시키기 위한 많은 연구들이 있었다. 이러한 종래기술들은 고순도로 정제한 지방산을 원료로 사용하기 때문에, 원료 정제시 막대한 비용이 필요하고, 오일 정제시 생산되는 부산물 역시 다량의 기능성 지방산을 포함하고 있음에도 이의 분리정제에 대한 연구나 활용방안의 모색 없이 전량 폐기처분함으로써 그 이용 가치를 활용하지 못했다. 또한, 정제 부산물의 폐기처분 비용 또한 소요되었다. In the past, there have been many studies for accumulating and fortifying functional polyunsaturated fatty acids in livestock, especially poultry and poultry-derived livestock products, using fatty acids as dietary additives. Since these prior arts use high-purity fatty acids as raw materials, enormous costs are required when refining raw materials, and the by-products produced during oil refining also contain large amounts of functional fatty acids. Disposal of the entire product without seeking it failed to utilize its value. In addition, the disposal costs of the purification by-products were also incurred.

또한, 고순도로 정제한 지방산의 형태가 유리지방산 (free fatty acid) 형태일 경우 동물 체내에서 지방이 흡수되기 위한 글리세린의 지방산 에스테르인 트리글리세리드 (triglyceride) 형태로의 전환 속도가 느리기 때문에 사료첨가 급여 시 단시간에 가금류 유래 축산물 내 기능 성분이 축적되는 효과를 얻지 못하였으며, 그 축적률 또한 높지 못하였다. 뿐만 아니라, 공액리놀레인산의 동물 사료첨가 급여는 동물의 사료 섭취량을 떨어뜨려 가금류 유래 축산물의 생산성 및 축산물의 품질을 저하시키는 등의 문제점들이 있었다. In addition, when the high-purity fatty acid is in the form of free fatty acid, the conversion of glycerin into triglyceride, a fatty acid ester of glycerin, for absorption of fat in the animal body is slow. The accumulation of functional components in poultry-derived livestock products was not obtained, and the accumulation rate was not high. In addition, the feed of the animal feed of conjugated linoleic acid has a problem such as lowering the feed intake of animals to reduce the productivity and quality of livestock of poultry-derived livestock.

이에, 본 발명자들은 저렴한 가격으로 축산물 내에 기능성 고도불포화지방산을 축적 및 강화시키기 위한 사료조성물을 개발하기 위해 예의 노력하였으며, 그 결과 전량 폐기되었던 공액리놀레인산 정제부산물에 에스테르화된 공액리놀레인산이 다량 함유되어 있음을 발견하고, 이를 가축의 사료조성물로 응용함으로써 가금육 또는 가금류 유래 축산물의 생산성과 품질의 저하 없이 빠르고 효율적으로 공액리놀레인산이 강화된 기능성 축산물을 얻을 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다. Accordingly, the present inventors have made diligent efforts to develop feed compositions for accumulating and strengthening functional polyunsaturated fatty acids in livestock products at low prices, and as a result, a large amount of conjugated linoleic acid esterified in the conjugated linoleic acid purified by-products that have been completely discarded is obtained. The present invention was completed by confirming that it was contained, and applying it as a feed composition of livestock to obtain a functional livestock enriched with conjugated linoleic acid quickly and efficiently without degrading the productivity and quality of poultry or poultry derived livestock. .

본 발명의 목적은 공액리놀레인산 정제부산물을 유효성분으로 함유하는 동물 사료조성물을 제공하는데 있다.An object of the present invention to provide an animal feed composition containing a conjugated linoleic acid purified by-product as an active ingredient.

본 발명의 다른 목적은, 본 발명의 사료조성물로 육종되어 항비만, 동맥경화예방, 항암에 효과가 있는 가축의 축산물을 제공하는데 있다. Another object of the present invention is to provide a livestock product of a livestock which is bred with the feed composition of the present invention and is effective in anti-obesity, arteriosclerosis prevention, and anti-cancer.

본 발명의 또 다른 목적은, 공액리놀레인산 정제부산물의 제조방법을 제공하는데 있다.Still another object of the present invention is to provide a method for producing a conjugated linoleic acid purified byproduct.

일 양태로, 본 발명은 공액리놀레인산 (Conjugate Linoleic Acid, CLA) 정제부산물을 유효성분으로 함유하는 동물 사료조성물을 제공한다. 구체적으로는, 본 발명의 동물 사료조성물은 총 조성물 100 중량부에 대해 0.01∼25 중량부, 바람직하게는 0.02∼10 중량부의 공액리놀레인산 정제부산물을 포함할 수 있다. In one aspect, the present invention provides an animal feed composition containing a conjugated linoleic acid (CLA) purified byproduct as an active ingredient. Specifically, the animal feed composition of the present invention may include 0.01 to 25 parts by weight, preferably 0.02 to 10 parts by weight of the conjugated linoleic acid purified byproducts based on 100 parts by weight of the total composition.

본 발명의 용어 "공액리놀레인산 정제부산물"은 공지의 공액리놀레인산 합성 방법에 의해 합성된 정제하지 않은 공액리놀레인산 (crude CLA)로부터 공액리놀레인산을 정제한 다음, 여액으로부터 회수한 것을 의미하며, 이에는 에스테르화된 공액리놀레인산이 다량 함유되어 있다. The term "conjugated linoleic acid purified by-product" of the present invention is purified from conjugated linoleic acid (crude CLA) synthesized by a known conjugated linoleic acid synthesis method, and then recovered from the filtrate. It contains a large amount of esterified conjugated linoleic acid.

본 발명의 실시예에서는, 공액리놀레인산 정제부산물의 효율적인 제조방법과 안정성을 규명하였으며, 또한 가금육 또는 가금류 유래 축산물의 생산성과 품질을 떨어뜨리지 않는 범위 내에서 효율적으로 생리활성을 가진 공액리놀레인산의 기능성을 부여함으로써 공액리놀레인산이 강화된 축산물을 제조할 수 있음을 확인하였다. 따라서, 일 양태로, 본 발명은 상기 본 발명의 사료조성물로 육종되어 항비만, 동맥경화예방, 항암에 효과가 있는 가축의 축산물을 제공한다. In the embodiment of the present invention, an efficient preparation method and stability of the conjugated linoleic acid purified by-products have been identified, and conjugated linoleic acid having a physiological activity efficiently without sacrificing productivity and quality of poultry meat or poultry-derived livestock products. It was confirmed that the livestock product with enhanced conjugated linoleic acid could be prepared by imparting the functionality of. Therefore, in one aspect, the present invention provides a livestock product of the livestock breeding with the feed composition of the present invention is effective in anti-obesity, arteriosclerosis prevention, anti-cancer.

본 발명에서의 동물은 축산법 제2조 제1호 및 동법 시행규칙 제2조 각호에서 정의하고 있는, 야생습성이 순화되어 사육하기에 적합하며 농가의 소득증대에 기여할 수 있는 가축일 수 있다. 상기 가축에는 소, 말, 노새, 당나귀, 염소, 산양, 면양, 사슴, 돼지, 토끼, 개, 가금류 등 일수 있으며, 가금류에는 닭, 칠면조, 오리, 타조, 거위, 메추리 등, 바람직하게는 닭 일수 있으나, 사육하여 축산물을 얻기에 적합한 것이라면 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 "축산물"은 축산법 제2조 3호의 정의인, 가축에서 생산된 고기, 젖, 알, 꿀과 이들의 가공품, 원피 (원모피를 포함한다), 원모, 기타 가축의 생산물로서 농림부령이 정하는 것을 의미한다. Animals in the present invention, as defined in Article 2 No. 1 of the Livestock Act and Article 2 of the Enforcement Rule of the Act, may be livestock that are suitable for breeding and are able to contribute to the income increase of farms. The livestock may be cattle, horses, mules, donkeys, goats, goats, sheep, deer, pigs, rabbits, dogs, poultry, etc., poultry chickens, turkeys, ducks, ostrich, goose, quail, etc., preferably chicken However, if the breeding is suitable for obtaining livestock products are not limited thereto. "Livestock" means the meat, milk, eggs, honey and processed products thereof, raw hides (including raw hides), raw wool and other livestock products, as defined in Article 2, paragraph 3 of the Livestock Act, as prescribed by the Ministry of Agriculture and Forestry; Means that.

후술하는 실시예에서 자세히 기술한 바와 같이, 본 발명의 사료조성물은 열안정성 및 산화적 안정성이 높고, 기능성 고도불포화지방산의 에스테르화 정도가 높아 사료조성물로서 적합하며, 이를 가축의 식이 급식하였을 경우 가축의 생체 내에 콜레스테롤 수치에는 변화가 없으면서도 고도불포화지방산이 높은 효율로 축적되게 된다. As described in detail in the following examples, the feed composition of the present invention has high thermal stability and oxidative stability, high esterification degree of functional polyunsaturated fatty acids, and thus is suitable as a feed composition. Polyunsaturated fatty acid is accumulated at high efficiency without any change in cholesterol level in the living body.

따라서, 일 양태로, 본 발명은 본 발명의 사료조성물을 식이 섭취하여 항비만, 동맥경화에방, 항암효과를 가지는 가축의 축산물을 제공한다. 구체적인 일 양태로, 본 발명의 축산물은 본 발명의 공액리놀레인산 정제부산물을 유효성분으로 함유하는 사료조성물로 육종된 가축으로부터 산출된 고기, 젖, 알일 수있으나, 가축으로부터 산출된 것으로서 축산법 제2조 3호의 축산물에 해당하는 것이라면 이에 제한되는 것은 아니다. Therefore, in one aspect, the present invention provides a livestock product of the animal having the anti-obesity, arteriosclerosis, anti-cancer effect by dietary intake of the feed composition of the present invention. In a specific embodiment, the livestock product of the present invention may be meat, milk, or eggs produced from livestock bred as a feed composition containing the conjugated linoleic acid purified by-product of the present invention as an active ingredient, but is derived from livestock as a second method of livestock production. It does not limit to livestock products of Article 3;

본 발명의 용어 "사료"는 동물이 먹고, 섭취하며, 소화시키기 위한 또는 이에 적당한 임의의 천연 또는 인공 규정식, 한끼식 등 또는 상기 한끼식의 성분을 의미한다. 일 양태로, 본 발명의 공액리놀레인산 정제부산물을 유효성분으로 함유하는 사료용 조성물에는 농후사료, 조사료 및/또는 특수사료가 포함될 수 있다. The term " feed " of the present invention means any natural or artificial diet, one meal, or the like or any ingredient of the one meal for the animal to eat, ingest and digest. In one embodiment, the feed composition containing the conjugated linoleic acid purified by-product of the present invention as an active ingredient may include a thick feed, a forage and / or special feed.

농후사료에는 밀, 귀리, 옥수수 등의 곡류를 포함하는 종자열매류, 곡물을 정제하고 얻는 부산물로서 쌀겨, 밀기울, 보릿겨 등을 포함하는 겨류, 콩, 유체, 깨, 아마인, 코코야자 등을 채유하고 얻는 부산물인 깻묵류와 고구마, 감자 등에서 녹말을 뺀 나머지인 녹말찌꺼기의 주성분인 잔존녹말질류 등의 찌꺼기류, 어분, 물고기찌꺼기, 어류에서 얻은 신선한 액상물(液狀物)을 농축시킨 것인 피시솔루블 (fish soluble), 육분(肉粉), 혈분, 우모분, 탈지분유, 우유에서 치즈, 탈지유에서 카ㅔㅅ인을 제조할 때의 잔액인 훼이(whey)를 건조한 건조훼이 등의 동물질사료, 효모, 클로렐라, 해조류 등이 있다. The rich feed includes seed fruits containing grains such as wheat, oats and corn, and by-products obtained by refining grains, bran, beans, fluids, sesame seeds, linseed, coco, etc., including rice bran, bran and barley bran. Concentrated fresh liquid from fish, fish meal, fish residues and other fish residues such as by-products such as dried starch, sweet potato, and potato. Animal feeds such as fish soluble, meat meal, blood meal, milk powder, skim milk powder, milk from cheese, and whey, which is the balance used to make cardine in skim milk , Yeast, chlorella, and seaweed.

조사료에는 야초, 목초, 풋베기 등의 생초(生草)사료, 사료용 순무, 사료용 비트, 순무의 일종인 루터베어거 등의 뿌리채소류, 생초, 풋베기작물, 곡실(穀實)등을 사일로에 채워 놓고 젖산발효시킨 저장사료인 사일리지(silage), 야초, 목초를 베어 건조시킨 건초, 종축용(種畜用) 작물의 짚, 콩과 식물의 나뭇잎 등이 있다. 특수사료에는 굴껍테기, 암염 등의 미네랄 사료, 요소나 그 유도체인 디우레이드이소부탄 등의 요소사료, 천연사료원료만을 배합했을 때 부족하기 쉬운 성분을 보충하거나, 사료의 저장성을 높이기 위해서 배합사료에 미량으로 첨가하는 물질인 사료첨가물 등이 있다. Forage, raw vegetables such as grasses, grasses, and green grass, fodder turnips, fodder beets, and root vegetables such as Lutherbearger, a type of turnip, raw grass, green crops, and grains Silage (silage), grasses, grasses, and dried hay, straws of breeder crops, and leaves of legumes. Special feeds are supplemented with mineral feeds such as oyster shells and rock salts, urea feeds such as urea and its derivatives, diureide isobutane, and natural feed ingredients. Feed additives, which are added in small amounts.

구체적인 일 양태로서, 본 발명은 곡물류인 옥수수, 대두박 (soybean meal), 옥수수 전분제조 과정에서 생산되는 부산물인 콘글루텐밀 (corn gluten meal), 비타민 복합체, 석회암(limestone) 등과 공액리놀레인산 정제부산물을 함유하는 동물사료조성물을 제공한다. 또한, 본 발명의 동물 사료조성물은 식이 보조제, 식품 첨가제 또는 사료 첨가제를 더 포함할 수 있다. As a specific aspect, the present invention is a by-product of corn, soybean meal (corn gluten meal), by-products produced during the production of corn starch (corn gluten meal), vitamin complexes, limestone (limestone), etc. It provides an animal feed composition containing. In addition, the animal feed composition of the present invention may further comprise a dietary supplement, food additives or feed additives.

"식이 보조제"는, 예를 들어 치료제 또는 소화제를 동물에 제공하는 제제 함유 조성물로, 통상 생체의 열량 섭취 공급원, 즉 에너지 공급원은 아니지만, 통상의 동물 사료에 추가하여 섭취되는 조성물을 의미한다. 또한, "식품첨가물"은 외관, 향미, 조직 또는 저장성을 향상시키기 위한 목적으로 보통 적은 양이 식품에 의도적으로 첨가되는 것을 가리키며, 식품의 품질을 개량하여, 보존성 또는 기호성을 향상시킬 뿐 아니라 영양가 및 식품의 실질적인 가치를 증진시킬 목적으로 사용하는 것을 의미한다. 이는, 식품위생법 제2조 제2호에서 정의하고 있는 바와 같이, 식품을 제조가공 또는 보존함에 있어 식품에 첨가, 혼합, 침윤, 기타의 방법으로 사용되는 물질일 수 있다. 또한, "사료첨가제"란 영양소 보충 및 체중감소 예방, 사료 내 섬유소의 소화 이용성 증진, 유질 개선, 번식장애 예방 및 수태율 향상, 하절기 고온 스트레스 예방 등 다양한 효과를 목적으로 사료에 첨가하는 물질을 말한다. 본 발명의 사료첨가제에는 사료관리법상의 보조사료에 해당하며, 탄산수소나트륨(중조), 벤토나이트 (bentonite), 산화마그네슘, 복합광물질 등의 광물질제제, 아연, 구리, 코발트, 셀레늄 등의 미량 광물질인 미네랄제제, 케로틴, 비타민 E, 비타민 A, D, E, 니코틴산, 비타민 B 복합체 등의 비타민제, 메티오닌, 리이산 등의 보호아미노산제, 지방산 칼슘염 등의 보호지방산제, 생균제(유산균제), 효모배양물, 곰팡이 발효물 등의 생균, 효모제 일 수 있다.A "dietary adjuvant" is a formulation containing a composition that provides a therapeutic or digestive agent to an animal, for example, and refers to a composition that is ingested in addition to a conventional animal feed, usually not a caloric intake source, ie, an energy source. In addition, "food additive" refers to the intentionally added in small amounts to the food for the purpose of improving the appearance, flavor, tissue or shelf life, improve the quality of the food, not only improve the preservation or palatability, but also the nutritional value and It is meant to be used for the purpose of enhancing the actual value of food. As defined in Article 2, Paragraph 2 of the Food Sanitation Act, this may be a substance used for adding, mixing, infiltrating, or otherwise using the food in manufacturing, processing or preserving the food. In addition, the "feed additive" refers to a substance added to the feed for various effects such as supplementation of nutrients and weight loss prevention, improving the digestive availability of the fiber in the feed, improving the oil quality, preventing reproductive disorders and improving the conception rate, prevention of high temperature stress in summer. The feed additive of the present invention corresponds to a feed supplement under the Feed Control Act, and minerals such as sodium bicarbonate, bentonite, magnesium oxide, composite minerals, minerals such as trace minerals such as zinc, copper, cobalt, and selenium. Preparations, vitamins such as keratin, vitamin E, vitamins A, D, E, nicotinic acid, and vitamin B complexes, protective amino acids such as methionine and lyric acid, protective fatty acids such as fatty acid calcium salts, probiotics (lactic acid bacteria), yeast culture It may be a live bacteria, yeast, such as water, mold fermentation products.

본 발명의 사료조성물에 포함되는 공액리놀레인산 정제부산물은 공액리놀레인산 (crude CLA)을 합성한 후 공액리놀레인산을 정제하고 남은 여액으로부터 회수할 수 있다. 구체적으로는, 후술하는 실시예 1에 자세히 기술한 바와 같이, 에틸렌 글리콜과 KOH를 반응시킨 다음, 이에 홍화유를 첨가하여 추가로 반응시켜 공액리놀레인산 (crude CLA)을 제조하고, 이에 헥산을 첨가 및 제거하는 방법으로 회수한 다음, 요소 포접화에 의한 정제 및 탈색 공정을 거쳐 공액리놀레인산을 정제하였으며, 정제 공랙리놀레인산을 분리하고 남은 여액을 물에 녹인 다음, 이에 헥산을 첨가 및 제거하여 공액리놀레인산 정제부산물을 생산하였다. 공액리놀레인산의 정제방법은 상기 방법 외에 당업계에 공지된 부가공정이나 변형공정을 포함하여 수정 가능하며, 본 발명은 그와 같은 정제 공액리놀레인산을 분리하고 남은 여액으로부터 공액리놀레인산의 정제부산물을 얻고, 이를 이용하는 것을 특징으로 한다. 상기 요접포접화는 합성한 공액리놀레인산 : 요소 : MeOH의 중량비가 1 : 3 : 9가 바람직하며, 잔류 여액을 물에 용해시키는 것은 여액 : 물의 중량비가 1 : 2인 것이 바람직하다.The conjugated linoleic acid purified by-products included in the feed composition of the present invention can be recovered from the remaining filtrate after purifying conjugated linoleic acid after synthesizing conjugated linoleic acid (crude CLA). Specifically, as described in detail in Example 1 to be described later, by reacting ethylene glycol and KOH, and then by adding safflower oil to the reaction further to prepare a conjugated linoleic acid (crude CLA), to which hexane is added And then recovered, and then purified by decontamination and decolorization process by urea clathrate to purify the conjugated linoleic acid, the purified conjugated linoleic acid is separated and the remaining filtrate is dissolved in water, and then hexane is added and removed To produce conjugated linoleic acid purified byproducts. The method for purifying conjugated linoleic acid may be modified to include addition steps or modification steps known in the art, in addition to the above method, and the present invention is to separate conjugated linoleic acid from the filtrate and to remove the conjugated linoleic acid. Purified by-products are obtained and used. Preferably, the weight ratio of the conjugated linoleic acid: urea: MeOH is 1: 3: 9, and the weight ratio of filtrate: water is 1: 2 for dissolving the residual filtrate in water.

이하, 하기 실시예에 의해 본 발명을 좀더 구체적으로 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 단지 본 발명의 예시에 불과하며 이로써 본 발명이 제한되지는 않는 다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, these examples are merely illustrative of the present invention and thus the present invention is not limited.

〈실시예 1〉공액리놀레인산 (CLA) 정제부산물의 제조Example 1 Preparation of Conjugated Linoleic Acid (CLA) Purified By-Product

실시예Example 1-1:  1-1: 공액리놀레인산Conjugated linoleic acid ( ( crudecrude CLACLA )의 합성 및 정제Synthesis and Purification

본 발명의 공액리놀레인산 (conjugated linoleic acid, 이하 "CLA"라 약칭함) 정제부산물은 다음과 같은 방법으로 제조하였다. 먼저, 에틸렌 글리콜 (ethylene glycol) 150 g과 KOH 22.5 g을 200 ℃에서 15 분 반응시킨 후, 상기 반응액에 홍화유 40 g 을 첨가하여 200℃에서 90 분간 교반반응을 수행함으로써 공액리놀레인산 (crude CLA)를 제조하였다. 이때, 홍화유를 첨가하는 단계로부터 반응시키는 동안 질소가스를 반응물에 천천히 흘려주어 지방산의 공기에 의한 산패 (rancidity)가 일어나지 않도록 하였다. 이 후, 상온에서 반응물을 80 ℃ 까지 냉각시킨 후, HCl 60 g을 첨가하여 30 분간 교반반응을 더 수행한 다음, 분리된 CLA 층을 회수하였다. CLA층 회수 시, 층 분리 현상이 확연하게 나타나게 하기 위해서 소량의 헥산 (hexane)을 첨가하였다. 회수한 crude CLA에 포함된 헥산은 질소농축 방법으로 모두 증발시켰다.Conjugated linoleic acid (hereinafter, abbreviated as "CLA") purified by-product of the present invention was prepared by the following method. First, 150 g of ethylene glycol and 22.5 g of KOH are reacted at 200 ° C. for 15 minutes, and 40 g of safflower oil is added to the reaction solution, followed by stirring at 200 ° C. for 90 minutes to give a conjugated linoleic acid (crude). CLA) was prepared. At this time, nitrogen gas was slowly flowed into the reactants during the reaction from the step of adding safflower oil to prevent rancidity caused by fatty acid air. Thereafter, the reaction was cooled to 80 ° C. at room temperature, 60 g of HCl was added thereto, followed by further stirring for 30 minutes, and then the separated CLA layer was recovered. In recovering the CLA layer, a small amount of hexane was added to make the separation of layers appear clearly. Hexane contained in the recovered crude CLA was all evaporated by nitrogen concentration method.

실시예Example 1-2:  1-2: CLACLA 정제부산물의 회수 Recovery of Purified By-Products

하기의 요소 포접화에 의한 정제, 탈색 공정을 거쳐 실시예 1-1의 방법에 의해 제조 및 회수한 crude CLA로부터 CLA 정제부산물을 회수하였다. 본 실시예에서 사용한 crude CLA : 요소 : MeOH의 중량비를 1 : 3 : 9로 사용하는 것이 가장 효과 적이었다. CLA purified byproducts were recovered from crude CLA prepared and recovered by the method of Example 1-1 through purification and decolorization by urea inclusion. It was most effective to use the weight ratio of crude CLA: urea: MeOH as 1: 3: 9 used in this example.

먼저, 온도를 70℃로 일정하게 유지시킨 이중 자켓 반응조 (Double Jacketed Reactor)에 MeOH과 요소 (urea, CO(NH2)2)를 첨가한 다음, 요소가 모두 녹아 반응물의 색이 맑아질 때까지 교반반응을 수행하였다. 이 후, 실시예 1-1의 방법에 의해 제조 및 회수한 crude CLA를 상기 반응액에 첨가하여 10 분간 추가로 교반반응을 수행한 다음, 이를 70℃에서 5℃까지 0.2 ℃/min으로 냉각시켰다. 반응액의 냉각을 완료한 다음, 요소에 포접되어(included) 결정화된 반응물을 헥산으로 세척하면서 감압여과시켰다. 정제된 CLA (purified CLA)를 얻기 위해 상기 감압여과된 결정화물을 사용하였다. 잔류 여액을 여액 : 물 = 1 : 2의 비율로 물에 용해시킨 다음, 이에, 소량의 염산 (HCl)을 첨가하여 10 분간 교반반응을 수행하였다. 상기 반응액에 헥산을 첨가하여 다시 5 분간 교반반응을 수행하였다. 이로부터 상등액을 회수한 다음, 헥산을 증류하여 제거하였으며, 가축의 사료조성물로 사용하기 위하여 잔류 CLA 정제부산물을 수득하였다 (도 1). First, add MeOH and Urea (urea, CO (NH 2 ) 2 ) to a Double Jacketed Reactor, keeping the temperature constant at 70 ° C. Then, until all the elements are dissolved and the color of the reactant is clear. The stirring reaction was carried out. Thereafter, crude CLA prepared and recovered by the method of Example 1-1 was added to the reaction solution, followed by further stirring for 10 minutes, and then cooled to 0.2 ° C / min from 70 ° C to 5 ° C. . After cooling of the reaction solution, the crystallized reactant contained in urea was filtered under reduced pressure while washing with hexane. The vacuum filtered crystallization was used to obtain purified CLA. The remaining filtrate was dissolved in water in the ratio of filtrate: water = 1: 2, and then a small amount of hydrochloric acid (HCl) was added thereto, followed by stirring for 10 minutes. Hexane was added to the reaction solution and stirred for 5 minutes. After recovering the supernatant therefrom, hexane was distilled off, and residual CLA purified byproducts were obtained for use as feed composition of livestock (FIG. 1).

상기 결과로부터, 식품 및 사료산업에서 활용되지 못했던 공액리놀레인산 정제부산물의 효율적 제조방법을 제시하였다. From the above results, a method for efficiently preparing conjugated linoleic acid purified by-products that has not been utilized in the food and feed industry has been proposed.

〈실시예 2〉4종류 지방산의 안정성 분석Example 2 Stability Analysis of Four Types of Fatty Acids

실시예Example 2-1:  2-1: 열안정성Thermal stability 분석 analysis

본 발명에 사용한 4종류의 지방산 (CLA, CLA 정제부산물, 리놀레인산 (Linoleic acid), 리놀레인산 정제부산물)의 열안정성은 하기의 방법으로 검증하였다. The thermal stability of four types of fatty acids (CLA, CLA purified byproducts, linoleic acid, linoleic acid purified byproducts) used in the present invention was verified by the following method.

상대적 열안정성 정도를 확인하기 위하여, 상기 4종류의 지방산을 95 ℃ 오븐 (oven)에서 96 시간 동안 열처리하면서 각 시간대 별로 시료 (sample)을 채취하였으며, 이를 기체크로마토그래피 (Gas Chromatography, 이하 "GC"로 약칭함)로 분석하여 각 지방산 함량의 변화를 비교하였다. In order to confirm the degree of relative thermal stability, samples of the four fatty acids were heat-treated in an oven at 95 ° C. for 96 hours, and samples were taken at each time interval, which was determined by gas chromatography (hereinafter referred to as “GC”). Abbreviated as) to compare the change of each fatty acid content.

96시간 동안 상기 4종류의 지방산의 농도변화를 관찰한 결과, 도 2에서 나타낸 바와 같이, CLA는 26.47 %, 리놀레인산은 30.08 % 소멸하였으나, CLA 정제부산물은 2.07 %, 리놀레인산 정제부산물은 15.62 % 소멸하였다. 상기 결과로부터 정제된 CLA와 리놀레인산에 비하여 각각의 정제부산물이 상대적으로 높은 열안정성을 갖는다는 것을 확인하였다 (도 2). As a result of observing the concentration change of the four types of fatty acids for 96 hours, as shown in FIG. 2, CLA was decreased by 26.47% and linoleic acid was 30.08%, but CLA purified byproducts were 2.07% and linoleic acid purified byproducts were 15.62. % Disappeared. From the above results, it was confirmed that each of the purified byproducts had a relatively high thermal stability compared to the purified CLA and linoleic acid (FIG. 2).

실시예Example 2-2: 과산화물가 측정 ( 2-2: Peroxide Value Measurement peroxideperoxide valuevalue , , POVPOV testtest ))

과산화물가 측정 결과는 지방산의 안정성 및 산화적 손상에 대한 하나의 지표로서 사용될 수 있는데, POV test는 지방산에 존재하는 과산화물의 함량은 분광광도기법 (Raghavan, S. and Hultin, H.O., J. Agric . Food Chem ., 53:4572-4577, 2005)에 따라 측정하였다. POV가 클수록 독성이 강하나, hydoperoxide의 함량이 자동산화 (autoxidation)의 진행에 따라 최고치(the maximum value)에 도달한 후 감소하기 때문에 도 3의 24시간 이후 결과와 같이, 산패가 발생한 지 오래된, 즉 과도하게 자동산화가 진행된 시료의 과산화물가는 의외로 낮게 나올 수 있다. Gwasanhwamulga measurement results may be used as an indicator of the stability and oxidative damage to the fatty acid, POV test is the content of peroxide present in the fatty acid spectrophotometric method (Raghavan, S. and Hultin, HO , J. Agric. Food Chem ., 53: 4572-4577, 2005). The larger the POV, the stronger the toxicity, but since the content of hydoperoxide decreases after reaching the maximum value with the progress of autoxidation, as shown in the result after 24 hours in FIG. The peroxide value of the sample that has undergone excessive automatic oxidation may be surprisingly low.

POV 측정결과, CLA의 과산화물가는 95℃에서 12시간과 24시간 사이에 최고점에 도달하였고, CLA 정제부산물 또한 시간대별 경향은 같았으나, CLA에 비해 상대적으로 그 변화 값이 적었다. 또한, 리놀레인산 정제부산물도 리놀레인산에 비해 POV 상승 값이 크지 않았다 (도 3). 상기 결과로부터 본 발명의 공액리놀레인산 정제부산물이 정제된 공액리놀레인산과 비교하여 산화적 손상에도 보다 안정함을 확인할 수 있었다. As a result of the POV measurement, the peroxide value of CLA reached the highest point between 12 hours and 24 hours at 95 ° C. The CLA purified by-products also showed the same trends over time, but the change was relatively smaller than that of CLA. In addition, the linoleic acid purified by-products also did not have a large POV rise compared to linoleic acid (FIG. 3). From the above results, it was confirmed that the conjugated linoleic acid purified by-product of the present invention was more stable against oxidative damage as compared with the purified conjugated linoleic acid.

〈실시예 3〉기능성 고도불포화지방산의 에스테르화 정도<Example 3> Degree of esterification of functional polyunsaturated fatty acid

본 발명에 사용한 4종류의 기능성 고도불포화지방산 (highly poly-unsaturated fatty acids) (CLA, CLA 정제부산물, 리놀레인산 (Linoleic acid), 리놀레인산 정제부산물)의 에스테르화 (esterification) 정도는 하기의 방법으로 확인하였다. The degree of esterification of the four types of highly functional polyunsaturated fatty acids (CLA, CLA purified byproducts, linoleic acid, linoleic acid purified byproducts) used in the present invention is as follows. It was confirmed by the method.

각 지방산 80 ul를 헥산 0.7 ml로 희석한 용액을 수분이 제거된 TLC 플레이트 (silica gel)에 일정 크기의 점으로 찍은 후 헥산 (hexane) : 디에틸에테르 (diethylether) : 메탄올 (methanol) : 아세트산 (acetic acid) (80 : 15 : 3 : 2, v/v) 전개용매를 사용하여 TLC 수조 내에서 플레이트에 전개용매를 흡수시켰다. 일정시간 후 플레이트를 꺼내 완전하게 말린 다음, 10% Molybdatophosphoric acid (MPA)를 플레이트 위에 골고루 분사하였다. 이 후 플레이트에 약간의 열을 가하여 각 지방산의 글리세린 (glyceride) 분포도를 띠로 확인하였다 (도 4). A solution of 80 ul of each fatty acid diluted with 0.7 ml of hexane was taken as a fixed size point on a water-free TLC plate (silica gel), and then hexane (diethylether): methanol (methanol): acetic acid ( Acetic acid) (80: 15: 3: 2, v / v) was used to absorb the developing solvent onto the plates in a TLC bath. After a certain time, the plate was taken out and completely dried, and then 10% Molybdatophosphoric acid (MPA) was evenly sprayed on the plate. Thereafter, a little heat was applied to the plate to confirm the distribution of glycerin (glyceride) of each fatty acid band (FIG. 4).

상기 결과로부터 오일 부산물 내에 주로 분포된 CLA의 형태는 에스테르화된 형태 (esterified form)이고, 정제된 오일 내에 주로 분포된 CLA의 형태는 유리지방산 형태 (free fatty acid form)임을 확인하였다. 지방산의 에스테르화된 형태는 유리지방산 형태에 비해 장내 흡수가 더 쉽게 되고, 빠르게 미셀 (micelle) 구조를 형성할 수 있으므로, 이를 동물의 사료로 식이 급여할 경우 더 효과적인 체내 축적율을 나타낼 수 있다. 상기 결과로부터 본 발명의 CLA 정제부산물을 가축의 사료조성물로 사용할 수 있음을 확인할 수 있었다. From the above results, it was confirmed that the form of CLA mainly distributed in the oil by-product is esterified form, and the form of CLA mainly distributed in the purified oil is free fatty acid form. The esterified form of fatty acids is more readily absorbed in the gut than the free fatty acid form, and can quickly form a micelle structure, which can result in more efficient body accumulation when fed with animal feed. From the above results, it was confirmed that the CLA purified by-product of the present invention can be used as a feed composition of livestock.

〈실시예 4〉CLA 정제부산물 함유 사료조성물의 제조 <Example 4> Preparation of feed composition containing CLA purified by-products

본 발명에 의한 공액리놀레인산 강화를 위한 정제부산물 함유 사료조성물의 조성은 하기의 표와 같다.The composition of the purified by-product-containing feed composition for strengthening conjugated linoleic acid according to the present invention is shown in the following table.

Control Control CLA정제부산물CLA Tablet Byproducts CLACLA 성분 (Ingredient (%)) Ingredient (% ) 옥수수 (Corn)  Corn 57.0 57.0 53.053.0 53.053.0 대두박 (Soybean meal)  Soybean meal 18.0 18.0 18.018.0 18.018.0 콘글루텐밀 (Corn gluten meal)   Corn gluten meal 5.0  5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 밀기울  bran 9.7  9.7 11.711.7 11.711.7 Salt  Salt 0.3  0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 석회암 (Limestone)  Limestone 7.5  7.5 7.5 7.5 7.5 7.5 Vitamin-Premix1 Vitamin-Premix 1 0.5  0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 L-Lysine  L-Lysine 0.5  0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 Methionine  Methionine 0.5  0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 Bicalcium phosphate  Bicalcium phosphate 1.0  1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 유지부산물 (Oil byproduct)  Oil byproduct -- 2.0 2.0 -- CLA oil  CLA oil -- -- 2.0 2.0 화학 조성물 (Chemical composition (%))Chemical composition (Chemical composition (%) ) Dry matter  Dry matter Ash  Ash 9.13 9.13 8.088.08 8.008.00 Crude protein  Crude protein 14.4614.46 14.7614.76 14.6214.62 Ether extract  Ether extract Crude fiber  Crude fiber 3.35  3.35 3.663.66 3.313.31 Calcium  Calcium Phosphate  Phosphate ME (Kcal/kg)  ME (Kcal / kg) 3,4563,456 3,6223,622 3,6093,609

상기 표에서 위첨자 1의 사료 Kg 당 제공되는 조성물은 다음과 같다: 비타민 A, 5,500 IU; 비타민 D3 , 1,100 IU; 비타민 E, 11 IU; 비타민 B12, 0.0066 mg; 리보플라빈 (riboflavin), 4.4 mg; 니아신 (niacin), 44 mg; 판토테닉산 (pantothenic acid), 11 mg; 칼슘-판토테닉산 (Ca-pantothenate), 11.96 mg; 콜린 (choline), 190.96 mg; 염화콜린 (choline chloride), 220 mg; 메나디온 (menadione), 1.1 mg 메나디온-산성아황산나트륨 염(menadione sodium bisulfite complex), 3.33 mg; ㅇ엽산 (folic acid), 0.55 mg; 피리독신 (pyridoxine), 2.2 mg; 피리독신 염화수소산염 (pyridoxine hydrochloride), 2.67 mg; 비오틴 (biotin), 0.11 mg; 티아민 (thiamin), 2.2 mg; 티아민 질산염 (thiamine mononitrate), 2.40 mg; 에톡시퀸 (ethoxyquin), 125 mg; Cu, 30; Zn, 60; Mn, 90; Co, 0.25; I, 1.2.Compositions provided per Kg of feed of superscript 1 in the table are as follows: Vitamin A, 5,500 IU; Vitamin D 3 , 1,100 IU; Vitamin E, 11 IU; Vitamin B 12 , 0.0066 mg; Riboflavin, 4.4 mg; Niacin, 44 mg; Pantothenic acid, 11 mg; Calcium-pantothenic acid (Ca-pantothenate), 11.96 mg; Choline, 190.96 mg; Choline chloride, 220 mg; Menadione, 1.1 mg menadione sodium bisulfite complex, 3.33 mg; Folic acid, 0.55 mg; Pyridoxine, 2.2 mg; Pyridoxine hydrochloride, 2.67 mg; Biotin, 0.11 mg; Thiamin, 2.2 mg; Thiamine mononitrate, 2.40 mg; Ethoxyquin, 125 mg; Cu, 30; Zn, 60; Mn, 90; Co, 0.25; I, 1.2.

〈실시예 5〉난황 내 기능성 고도불포화지방산의 축적도 비교<Example 5> Accumulation degree of functional polyunsaturated fatty acid in egg yolk

본 발명의 CLA 정제부산물을 동물의 사료로 식이 급여한 다음, 난황 내 기능성 고도불포화지방산의 축적 정도를 하기의 방법으로 확인하였다. CLA purified by-product of the present invention was fed dietary feed of animals, and then the degree of accumulation of functional polyunsaturated fatty acids in egg yolk was confirmed by the following method.

실시예Example 4-1.  4-1. 난황Egg yolk 내 지방의 추출 Extraction of my fat

일반 산란계 사료를 이용하는 control 그룹과 기능성 고도불포화지방산(CLA, CLA 정제부산물)이 첨가된 (각 2 %) 산란계 사료를 이용하는 2개의 그룹으로 48 마리의 산란계 (백색레그혼종, white leghon)를 나누어 같은 조건 하에서 5주 동안 육종 (feeding) 실험을 하였다. 실험기간 동안 각 그룹별 사료섭취량과 산란속도 (egg produntion rate), 계란 품질 (egg quality)을 측정하였으며, 매일 회수한 계란시료 (egg sample)에서 난황만을 분리해 -20℃에서 보관하였다. 시간대별 난황 내 기능성 고도불포화지방산의 축적도를 비교하기 위하여 Hexane : Isopropanol (3:2, v/v) 용매를 이용하여 주 단위로 수집한 난황 시료로부터 지방만을 추출하였다. The control group using a normal laying hen diet and the two groups using a laying hen diet with functional polyunsaturated fatty acids (CLA, CLA purified byproducts) (2% each) were divided into 48 groups and white leghon. Feeding experiments were conducted for 5 weeks under conditions. During the experiment, feed intake, egg produntion rate, and egg quality were measured for each group, and only egg yolks were collected from the egg samples collected daily and stored at -20 ° C. To compare the accumulation of functional polyunsaturated fatty acids in egg yolk at different time periods, only fat was extracted from yolk samples collected weekly using Hexane: Isopropanol (3: 2, v / v) solvent.

실시예Example 4-2. 추출한 지방의  4-2. Extracted fat 메틸methyl 에스테르화Esterification

추출한 지방은 하기와 같은 방법으로 메틸 에스테르화 (methyl esterification)을 수행하였다. The extracted fat was subjected to methyl esterification in the following manner.

먼저, 톨루엔 (toluene)과 5% KOH를 난황 시료로부터 지방만을 추출한 시료에 첨가하여 70℃에서 8분 반응시킨 후 이를 냉각하였으며, 이를 14 % BF3 (3불화붕소, boron trifluoride)를 첨가하여 같은 온도에서 8분 동안 반응시킨 후 냉각하였다. 이 후, 포화 NaCl과 헥산을 첨가하여 메틸 에스테르화된 지방산을 헥산으로 회수한 후 이를 GC로 분석하였다. 객관적 분석을 위하여, 모든 실험은 3회 반복 실행하였으며, 난황 g당 지방의 회수율 계산을 위하여 내부표준물질 (internal standard)로써 말가릭산 (Margaric acid, Heptadecanoic acid)를 사용하였다. First, toluene and toluene (5% KOH) were added to the sample extracted only from the egg yolk sample and reacted at 70 ° C. for 8 minutes and then cooled. The same temperature was added by adding 14% BF3 (boron trifluoride). After reacting for 8 minutes at, it was cooled. Thereafter, saturated NaCl and hexane were added to recover the methyl esterified fatty acid as hexane, which was then analyzed by GC. For objective analysis, all experiments were repeated three times, and margaric acid (Heptadecanoic acid) was used as an internal standard to calculate the recovery of fat per gram of egg yolk.

상기 방법으로 난황 내 기능성 고도불포화지방산의 축적 정도와 계란의 품질을 확인한 결과, CLA 정제부산물을 함유한 사료조성물을 식이 급여한 그룹이 정제된 CLA (CLA 80 %)를 함유한 사료조성물을 급여한 그룹에 비해 5주의 육종 실험기간 동안 난황 내 CLA 함량이 유의적으로 높게 축적됨이 확인되었다. 또한, 정제된 CLA 첨가 그룹에서는 난황 내 CLA 축적이 사료급여 3주 후부터 관찰된 데 반해, CLA 정제부산물 첨가 그룹에서는 사료급여 1주 후부터 5% 이상의 높은 축적율을 보였다 (도 5). As a result of confirming the accumulation of functional polyunsaturated fatty acids and egg quality in egg yolk by the above method, the group fed the dietary diet containing CLA refined by-product fed the dietary composition containing purified CLA (CLA 80%) Compared with the group, the CLA content in egg yolk was significantly accumulated during the 5-week breeding experiment. In addition, CLA accumulation in egg yolk was observed after 3 weeks of feeding in the purified CLA addition group, whereas CLA refined by-product addition group showed a high accumulation rate of 5% or more after 1 week of feeding (Fig. 5).

표 2는 공액리놀레인산 정제부산물 함유 사료조성물의 산란계 식이 급여가 계란의 품질변화에 미치는 영향을 확인한 결과이다. 상기 결과로부터 공액리놀레인산 정제부산물 함유 사료조성물을 급여 한 그룹의 경우, 일반 사료를 급여한 그룹에서의 계란의 품질과 유의적인 차이를 나타내지 않음을 확인할 수 있었다 (표 2). Table 2 shows the effects of laying hen diets on the quality change of eggs of feed compositions containing conjugated linoleic acid purified by-products. From the results, it was confirmed that the group fed the feed composition containing the conjugated linoleic acid purified by-product did not show a significant difference from the quality of eggs in the group fed the normal feed (Table 2).

품질 파라미터 (Quality parameters)  Quality parameters 식이군 (Dietary groups)Dietary groups SEMSEM p-value p -value 대조군(control)Control CLA정제부산물CLA Tablet Byproducts CLACLA 사료 섭취량 (Feed intake (g/d))  Feed Intake (g / d) 102.333102.333 100.628100.628 99.61199.611 11.54411.544 0.40530.4053 산란율 (Laying rate(%))  Laying rate (%) 82.1382.13 82.7482.74 79.1279.12 14.43914.439 0.42320.4232 계란 무게 (Egg Weight (g/egg))  Egg Weight (g / egg) 62.52ab 62.52 ab 61.99b 61.99 b 64.12a 64.12 a 3.2923.292 0.04870.0487 계란껍질강도 (Eggshell Strength (g/m2))Eggshell Strength (g / m 2 ) 2844.52844.5 2906.32906.3 2600.02600.0 750.9750.9 0.35310.3531 계란껍질두께 (Eggshell thickness (mm))  Eggshell thickness (mm) 0.4110.411 0.4160.416 0.3930.393 0.0610.061 0.30670.3067 난황 색 (Egg Yolk Color)  Egg Yolk Color 8.9298.929 8.9718.971 8.7578.757 0.8210.821 0.34170.3417 호우단위(Haugh unit)  Haugh unit 85.68a 85.68 a 81.16b 81.16 b 80.14b 80.14 b 7.9787.978 0.01090.0109 난황 높이 (Egg Yolk Height(mm))  Egg Yolk Height (mm) 18.63a 18.63 a 18.53a 18.53 a 18.22ab 18.22 ab 1.0601.060 0.03410.0341 난황 직경 (Egg Yolk Diameter(mm))  Egg Yolk Diameter (mm) 43.13a 43.13 a 42.10b 42.10 b 43.59a 43.59 a 1.5411.541 0.00100.0010 난황 지표 (Egg Yolk Index)  Egg Yolk Index 0.433ab 0.433 ab 0.441a 0.441 a 0.419b 0.419 b 0.0330.033 0.01230.0123

상기 표에서 동일 줄 내의 다른 윗첨자들인 a,b,c,d는 유의적인 차이를 나타내는 것을 의미한다. (p<0.05)In the above table, other superscripts a, b, c, and d in the same row mean a significant difference. ( p <0.05)

〈실시예 6〉난황 내 콜레스테롤 측정<Example 6> Measurement of cholesterol in egg yolk

본 발명의 CLA 정제부산물을 백색레그혼종 산란계에 식이 급여한 후, 난황 내 콜레스테롤 (cholesterol) 함량을 하기의 방법으로 확인하였다. After dietary supplementation of CLA purified by-products of the present invention to white leg horn breeding hens, cholesterol content in yolk was confirmed by the following method.

상기 실시예 4-1에서의 실험기간 동안 매주 수집한 난황 시료를 -20℃에서 보관하였으며, 이를 분석 직전 꺼내어 콜레스테롤 키트 (cholesterol kit, Wako)를 사용하여 효소적 분해법에 의해 분석하였다. 실시예 4에서 제조한 CLA 정제부산물 함유 사료조성물을 급여 한 그룹의 난황 내 콜레스테롤 수치는 식이 급여 후 첫 주에 대조군에서의 콜레스테롤 수치와 함께 상승하였으나, 곧 안정화되어 식이군 사이에서 유의적 차이를 나타내지 않았다 (도 6).The yolk samples collected weekly during the experiment in Example 4-1 were stored at -20 ° C, which were taken out immediately before analysis and analyzed by enzymatic digestion using a cholesterol kit (cholesterol kit, Wako). Cholesterol levels in yolk of the group fed CLA tablet byproducts prepared in Example 4 increased with cholesterol levels in the control group in the first week after dietary supplementation, but soon stabilized to show no significant differences between dietary groups. (Figure 6).

이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있음을 이해할 수 있다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예 및 실험예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 제한적인 것이 아닌 것으로 이해하여야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 상세한 설명보다는 후술되는 특허청구범위의 의미 및 범위, 그리고 그 등가개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포섭되는 것으로 해석되어야 한다. From the above description, those skilled in the art can understand that the present invention can be implemented in other specific forms without changing the technical spirit or essential features. In this regard, it should be understood that the examples and experimental examples described above are exemplary in all respects and not restrictive. The scope of the present invention should be construed to encompass the meaning and scope of the following claims rather than the foregoing detailed description, and all changes or modifications derived from the equivalent concept thereof are included in the scope of the present invention.

본 발명은 항비만, 동맥경화예방, 항암에 효과가 있는 가축의 축산물을 생산하기 위해, 식품 및 사료산업에서 활용되지 못하고 전량 폐기되었던 공액리놀레인산 정제부산물을 유효성분으로 함유하는 동물 사료조성물을 제공하는 효과가 있다. 또한, 본 발명의 공액리놀레인산 정제부산물 함유 사료조성물을 이용하여 저비용으로 고도불포화지방산을 유효성분으로 함유하는 가축 및 가축 유래 축산물을 효율적으로 생산할 수 있게 됨으로써, 저렴한 가격으로 각종 성인질환 예방 및 체내 기능 성분의 축적과 이로 인한 체내 생리활성증진을 통한 소비자의 건강증대 효과가 있을 것이다. The present invention provides an animal feed composition containing a conjugated linoleic acid purified by-product that has been completely discarded and not utilized in the food and feed industry to produce livestock products effective against anti-obesity, arteriosclerosis, and anti-cancer. It is effective to provide. In addition, by using the feed composition containing the conjugated linoleic acid purified by-product of the present invention, it is possible to efficiently produce livestock and livestock-derived livestock containing polyunsaturated fatty acids as an active ingredient at low cost, thereby preventing and preventing various adult diseases at low cost. Accumulation of functional ingredients and consequent enhancement of the body's physiological activity will increase the health of consumers.

Claims (10)

공액리놀레인산 정제부산물을 유효성분으로 함유하는 동물 사료조성물. Animal feed composition containing a conjugated linoleic acid purified by-product as an active ingredient. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 공액리놀레인산 정제부산물을 총 조성물 100 중량부에 대해 0.02∼10 중량부로 포함하는 동물 사료조성물.The animal feed composition according to claim 1, wherein the composition comprises 0.02 to 10 parts by weight of the conjugated linoleic acid purified byproducts based on 100 parts by weight of the total composition. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 식이 보조제, 식품 첨가물 및/또는 사료첨가제를 더 포함하는 동물 사료조성물.The animal feed composition of claim 1, wherein the composition further comprises a dietary supplement, a food additive, and / or a feed additive. 제1항에 있어서, 공액리놀레인산 정제부산물이 공액리놀레인산을 정제 분리하고 남은 여액에 헥산을 첨가 및 제거한 후 수득되는 것을 특징으로 하는 동물 사료조성물.The animal feed composition according to claim 1, wherein the conjugated linoleic acid purified byproduct is obtained after purifying and separating the conjugated linoleic acid and adding and removing hexane to the remaining filtrate. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 동물은 소, 말, 노새, 당나귀, 염소, 산양, 면양, 사슴, 돼지, 토끼, 개 및 가금류로 구성된 군에서 선택된 어느 하나인 동물 사료조성물.The animal feed according to any one of claims 1 to 4, wherein the animal is any one selected from the group consisting of cattle, horses, mules, donkeys, goats, goats, sheep, deer, pigs, rabbits, dogs and poultry. Composition. 제5항에 있어서, 가금류는 닭, 칠면조, 오리, 타조, 거위 또는 메추리인 동물 사료조성물.6. The animal feed composition of claim 5, wherein the poultry is chicken, turkey, duck, ostrich, goose or quail. 제1항의 사료조성물을 이용하여 고도불포화지방산 함량이 증가된 축산물을 얻는 방법.A method for obtaining livestock products with increased polyunsaturated fatty acid content using the feed composition of claim 1. 제7항에 있어서, 축산물은 고기, 젖 또는 알인 방법.8. The method of claim 7, wherein the livestock product is meat, milk or eggs. (a) 공액리놀레인산을 제조하여 정제·분리하고 남은 여액을 물에 용해시킨 후, 염산과 헥산을 첨가하여 반응시키는 단계; 및 (b) 상기 반응액에서 상등액을 회수하여 헥산을 제거하는 단계를 포함하는 공액리놀레인산 정제부산물의 제조방법. (a) preparing conjugated linoleic acid, purifying and separating the remaining filtrate, and dissolving the remaining filtrate in water, followed by reaction with hydrochloric acid and hexane; And (b) recovering the supernatant from the reaction solution to remove hexane. 제9항에 있어서, (e) 단계의 잔류 여액을 물에 용해시키는 것은 여액 : 물의 중량비가 1 : 2인 방법.The method of claim 9 wherein dissolving the residual filtrate of step (e) in water has a weight ratio of filtrate to water of 1: 2.
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