KR20070103173A

KR20070103173A - 코엔자임 ｑ10을 포함하는 피부보호 조성물

Info

Publication number: KR20070103173A
Application number: KR1020060034938A
Authority: KR
Inventors: 송광수; 문병관; 백승옥
Original assignee: 영진약품공업주식회사
Priority date: 2006-04-18
Filing date: 2006-04-18
Publication date: 2007-10-23

Abstract

본 발명은 코엔자임 (Coenzyme) Q10을 포함하는 피부보호 조성물, 특히 항염 및 피부보습을 위한 피부보호 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 조성물은, 항산화 효과뿐만 아니라 항염 효과에 따른 상처치유 효과 및 보습 효과를 동시에 가지고 있으며, 인체 세포주 및 인체 피부에 대하여 독성을 나타내지 않는 안전한 조성물이다. 따라서, 산화물이 발생되고, 균에 감염되기 쉽고, 상처가 있고, 건조하고 손상된 피부의 보호를 위한 의약품, 식품, 화장품 등에 안전하게 사용할 수 있다.

코엔자임 (Coenzyme) Q10, 항염, 피부보습

Description

코엔자임 Ｑ10을 포함하는 피부보호 조성물{A Composition for Skin-care Comprising Coenzyme Q10}

도 1은 코엔자임 Q10에 의해서 NF-kB 프로모터 활성이 농도 의존적으로 감소되는 결과를 나타낸 것이다 (CoQ10: 코엔자임 Q10, LPS: 리포폴리사카라이드).

도 2는 코엔자임 Q10에 의해 인터루킨-8 생산이 농도 의존적으로 감소되는 결과를 나타낸 것이다 (CoQ10: 코엔자임 Q10, LPS: 리포폴리사카라이드).

도 3은 코엔자임 Q10에 의해 TNF alpha 생산이 농도 의존적으로 감소되는 결과를 나타낸 것이다 (CoQ10: 코엔자임 Q10, LPS: 리포폴리사카라이드).

도 4는 코엔자임 Q10에 대한 세포독성 효과를 나타낸 것이다 (CoQ10: 코엔자임 Q10, LPS: 리포폴리사카라이드).

본 발명은 피부보호 조성물에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 코엔자임 Q10 (Coenzyme Q10)을 포함하는 항염 및 피부보습 조성물에 관한 것이다. 또 한, 이러한 조성물을 포함하는 제품에 관한 것이다.

피부는 피부 구조의 골격을 형성하는 케라틴 및 콜라겐 섬유 단백질을 피복하고 보호하는 여러층의 세포로 구성되어 있다. 각질층으로 언급되는 이들 층의 최외각은 8 nm 두께의 층으로 둘러싸인 25 nm의 단백질 다발로 구성된 것으로 알려져 있다. 음이온 계면활성제 및 유기 용매는 전형적으로 각질층 막을 투과하여 탈지화 (즉, 각질층으로부터 지방의 제거)함으로써 각질층의 일체성을 파괴한다. 피부 표면 형태의 이러한 파괴는 피부를 거칠어지게 하고 동시에 피부의 수분 손실과 유연성을 상실하게 하고, 궁극적으로 세균이나 바이러스에 의한 감염을 용이하게 해준다. 또한, 이러한 과정에서 활성 산소 (reactive oxygen)의 발생을 촉진시켜 염증반응을 유발시키고, 이러한 현상이 진척되면 피부암까지 발생하기도 한다.

피부손상은 각질층의 손상으로 이어지고, 각질부가 손상되면 방어막이 손상된 것과 같은 효과를 가지기 때문에 미생물에 의한 2차 감염이 진행될 수 있으며, 손상된 부위는 점점 악화되어 상처로 발전된다. 또한, 손상된 피부를 통하여 경피 수분 손실량이 증가하여 피부건조증이 발생하고, 이를 방지하기 위한 급격한 피지분비에 의해 피비분비 이상이 동반되어, 피부가 너무 건조하거나 또는 역으로 너무 지성화할 수 있다 이러한 복합적인 피부 문제가 최종적으로는 피부 가려움증, 홍반, 조직손상 등으로 악화될 수 있다.

상기한 바와 같이, 인체 피부는 다양한 외적 또는 내적 스트레스에 노출되어 있기 때문에, 스트레스에 의해 발생하는 활성산소나 자유 라디칼 (free radicals) 을 효과적으로 제거하지 못하면 염증을 동반하는 피부질환이 발생할 가능성이 높아진다. 따라서, 인체피부를 부드럽고 유연하며 탄력있는 정상적인 피부로 유지하기 위해서는 항산화 효과와 더불어 항염 효과에 따른 상처 치유 효과와 보습 효과를 갖는 물질을 적절한 시기에 처리해 주어야 한다.

따라서, 스트레스로부터 인체 피부를 보다 효과적으로 보호할 수 있는, 즉 항산화 효과와 더불어 항염 효과에 따른 상처치유 효과와 보습 효과를 동시에 가지고 있는 피부보호 조성물의 필요성이 높아지고 있다.

코엔자임 Q10은 2,3-디메톡시-5-메틸-6-폴리프레닐-1,4-벤조퀴논에서 측쇄의 이소프렌 단위가 10인, 고등 동물에 존재하는 유비퀴논류 (구조식 C₅₉H₉₀O₄, 분자량 863.4)이고, 유비데카레논 또는 조효소 Q10 으로서 공지된 조효소 Q 의 한 종류이다. 그 물성으로는 오렌지색 결정, 융점 약 49 ℃의 지용성 물질로서 알려져 있다. 코엔자임 Q10 은 조효소로서 생물활성을 가질 뿐만 아니라, 산소 이용 효율을 개선시키는 작용을 갖는 비타민-유사 작용 물질로도 알려져 있다. 코엔자임 Q10은 미토콘드리아 중의 아데노신 3 인산 생산에 필수적이고, 면역 기능을 향상시키는 것에 의하여 심장병, 고혈압, 류머티즘성 변 (valve) 질환, 치조의 염증에 대한 유효성 등이 보고되어 있다. 또, 울혈성 심부전, 뇌혈관 장해, 항암제의 부작용 방지 (아드리아마이신에 의한 심장 장해의 방지), 피로 회복, 에너지 부활, 생체 내 활성 산소에 대한 항산화 등에 사용되고 있다. 또한, 피부 외용제로서의 노화 방 지에 대한 유효성도 기대되고 있다.

상기한 바와 같이, 본 발명 이전, 코엔자임 Q10은 다양한 생리적 활성을 나타내고 우수한 항산화력에 근거하여 피부외용제에 사용되었으나, 코엔자임 Q10 자체가 항염 효과 및 피부보습 효과를 지닌다는 것에 대해서는 알려진 바 없었다. 이러한 배경 하에서, 본 발명자들은 코엔자임 Q10이 우수한 항산화력 뿐만 아니라 동시에 항염/상처치유력 및 피부보습력을 가지고 있고 인체적용 시 안전한 물질임을 확인하여, 코엔자임 Q10을 포함하는 항염/상처치유 및 피부보습 효과를 갖는 피부보호 조성물을 완성하게 되었다.

본 발명은 코엔자임 Q10을 포함하는 항염 및 피부 보습을 위한 피부보호 조성물을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.

본 발명은 또한 상기 항염 및 피부보습을 위한 피부보호 조성물을 이용한 피부보호용 화장품, 식품 및 의약품을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 코엔자임 Q10을 포함하는 피부보호 조성물을 제공하는 것이다.

구체적 양태로서, 본 발명은 코엔자임 Q10을 포함하는 항염 및 피부 보습을 위한 피부보호 조성물에 관한 것이다.

본 발명에서 용어 "피부보호"란, 해당 물질이 항산화력을 보유하여 반응성 산소종이나 자유 라디칼을 소거하는 등에 의해 단순히 피부의 손상을 억제하는 효과를 말하는 것이 아니라, 항산화력에 의해 손상 자체를 막아줄 뿐만 아니라 손상된 피부의 염증을 치유하고 또한 손상되거나 염증이 치유되는 피부에서 보습력을 유지시켜 전체적인 피부 개선을 달성함을 의미하는 것이다.

전술한 바와 같이, 본 발명 이전, 코엔자임 Q10의 항산화 효과는 당 분야에서 이미 알려져 있었으며 이러한 목적으로 화장품 등의 다양한 분야에서 사용되어 왔다. 그러나, 코엔자임이 소염 조성물에 단순 첨가물로서 혼입된 조성물에 대한 기술은 있으나, 코엔자임 Q10 그 자체가 항산화력 만이 아니라 우수한 항염 (또는 소염) 효과 및 피부 보습 효과를 나타낸다는 것에 대해서는 알려진 바 없었으며, 본 발명자에 의해 비로소 밝혀지게 되었다.

구체적으로, 본 발명자는 NF-κB 루시페라제 활성 측정을 통해 코엔자임 Q10이 NF-κB 프로모터 활성을 농도 의존적으로 억제하며, 또한 LPS 처리로 활성화된 세포에서 IL-8 및 TNF-α의 생성을 억제함을 밝혀내었다. IL-8과 TNF-α는 염증을 유도하는 호염증성 사이토카인 (pro-inflammatory cytokine)으로 잘 알려져 있다. NF-κB는 IL-8과 TNF-α 유전자의 발현에 매우 중요한 역할을 하는 프로모터로서, NF-κB 프로모터 활성을 억제하는 물질의 경우, 염증억제 효과를 나타낸다고 보고되어 있다 (참고: Nature reviews immunology, 2005, 5: 749-759).

또한, 본 발명자는 코엔자임 Q10인 경피 수분 손실을 억제하여 피부 보습 효과를 나타내며, 특히 시간이 경과될수록 그 효과가 더욱 두드러진다는 것을 밝혀내었다. 코엔자임 Q10 그 자체에 대해 이러한 효과가 기술된 바 없었다. 본 발명은 코엔자임 Q10이 항염 효과뿐만 아니라 피부 보습 효과를 동시에 나타냄으로써, 이를 피부에 적용하여 단순히 피부의 손상을 억제하는 것이 아니라 치유 효과를 갖는다는 것을 처음으로 확인한 것이다.

구체적으로, 본 발명의 실시예에서는 코엔자임 Q10가 우수한 항산화 효과 (표 1) 및 항염 효능 (도 1, 2, 3)을 갖고, 세포 독성(도 4)이 없을 뿐만 아니라 인체 피부에 안전하고(표 2) 급성경구독성을 나타내지 않음을 입증하였다. 또한, 인체를 대상으로 한 실험에서, 코엔자임 Q10을 함유한 시료는 우수한 피부보습력 (표 4)을 나타내어, 본 발명의 피부보호 조성물은 뛰어난 피부보호 효과 (표 5)를 가지고 있음을 확인하였다.

코엔자임 Q (coenzyme Q)는 세균으로부터 포유동물까지 생체에 널리 분포하는 필수 성분으로서, 생체내의 세포중에서의 미토콘드리아의 전자전달계 구성 성분으로 알려져 있다. 사람에서는 코엔자임 Q의 측쇄의 반복구조가 10개인 코엔자임 Q10이 주성분이다. 본 발명에서는 코엔자임 Q 중 코엔자임 Q10을 이용하는 것이다. 특히, 본 발명에 사용되는 코엔자임 Q10은 산화형 또는 환원형의 형태일 수 있다.

본 발명의 조성물에 포함되는 코엔자임 Q10은 당 분야에 공지된 다양한 방법으로 수득될 수 있으며, 예를 들어 합성, 발효, 천연물로부터의 추출 등에 의해 수득할 수 있다. 또한, 코엔자임 Q10은 천연 형태 그대로도 사용할 수 있으나, 당 분야에 공지된 다양한 처리를 수행하여 취급이 용이하거나 생체 이용성을 증가시키는 등의 처리를 한 형태로 사용될 수 있다. 예를 들어, 코엔자임 Q10을 알콜 및/ 또는 케톤류의 용액 중에서 결정화하거나 (대한민국 공개 10-2004-0017294), 수중유형의 에멀젼을 형성하거나 (대한민국 공개 10-2005-0084126), 인지질 리포좀에 캡슐화하는 (대한민국 특허 등록 10-0553160) 등 다양한 처리를 수행할 수 있다.

본 발명의 피부보호용 조성물은 상기한 코엔자임 Q10 이외에 이의 피부보습, 항산화, 항염, 상처치유 활성을 저해하지 않는 추가의 성분들을 포함할 수 있다.

추가의 성분으로서 피부보습 효과가 있다고 보고된 옥죽, 백합, 작약, 연자육 및 자황 추출물 등을 본 발명 조성물의 유효 함유량 범위 내에서 5 내지 50 중량% 함량으로 혼합하여 제조할 수 있다.

추가의 성분으로서 항산화 효능이 있다고 보고된 연교(Forsythia Fructus) 추출물, 아스코르빈산 (ascorbic acid), 베타 카로틴 (beta-carotene), 디부틸히드록실톨루엔 (BHT), 디엘 알파 토코페롤 (Dl-alpha-tocopherol) 등을 본 발명 조성물의 유효 함유량 범위 내에서 5 내지 50 중량% 함량으로 혼합하여 제조할 수 있다.

추가의 성분으로서 상처치유 활성이 있다고 보고된 삼백초, 미나리, 자작나무, 가래나무 추출물 등을 본 발명 조성물의 유효 함유량 범위 내에서 5 내지 50 중량% 함량으로 혼합하여 제조할 수 있다.

상기한 바와 같이 광범위한 피부보호 효과를 갖는 본 발명에 따른 피부보호 조성물은 의약, 화장품, 식품 등에서 항염 및 피부 보습을 위한 피부보호의 목적을 달성하기 위해 광범위하게 사용될 수 있다. 식품에 있어서는 상기한 피부보호 목적의 건강식품으로, 화장품이나 생활용품에 있어서는 상기한 피부보호 목적의 아토 피나 건선등에 사용이 가능하다. 그러나, 본 발명의 피부보호 조성물이 이러한 목적으로만 한정하여 사용되는 것은 아니다.

따라서, 또 다른 양태로서, 본 발명은 상기한 조성물을 포함하는 제품, 예를 들어 화장품, 식품 (예: 건강식품), 의약품 등에 관한 것이다.

코엔자임 Q10은 화장료 조성물의 경우 이의 총 중량에 대해 0.001 내지 20.0 중량%, 바람직하게는 0.001 내지 5 중량%의 양으로 포함된다.

특히, 상기한 제품의 특정 양태로서, 본 발명의 조성물은 각종 크림, 로션, 스킨 등과 같은 화장품류와 샴푸, 린스, 클렌징, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등에 포함되어 항염 및 피부 보습 효과를 제공하는 화장품을 제공한다. 이러한 화장품은 수성 비타민, 유성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 등의 통상의 성분들을 포함할 있으며, 당업자에게 널리 공지된 기술에 따라 용이하게 제조될 수 있다. 또한, 상기 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분들, 예를 들어 유지 성분, 에몰리엔트제, 계면활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료 등을 들 수 있다.

본 발명의 화장품의 구체예로서는 세안크림, 세안폼, 클렌징크림, 클렌징밀크, 클렌징로션, 마사지크림, 콜드크림, 모이스처크림, 유액, 화장수, 팩, 에프터세이빙크림, 썬텐방지크림, 썬텐용 오일, 비누, 보디샴푸, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 양모료, 육모료, 헤어크림, 헤어리퀴드, 세트로션, 헤어스프레이, 헤어브리지, 컬러린스, 컬러스프레이, 퍼머넌트웨이브액, 프레스파우더, 루스파우 더, 아이섀도, 핸드크림, 립스틱 등을 들 수 있다.

또한, 상기한 제품의 특정 양태로서, 본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구로, 국소 또는 전신 투여 가능한 정제, 환제, 산제, 캡슐제, 용액제, 현탁제, 유화액제, 주사제, 좌약제, 페이스트, 연고, 페이스트 등에 포함되어 항염 및 피부 보습 효과를 제공하는 의약품을 제공한다. 이러한 의약품은 당분야에 공지된 기술을 이용하여 당업자에 의해 용이하게 제조될 수 있으며, 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 용해제, 감미제, 착색제, 삼투조절제 등 다양한 첨가제를 추가로 포함할 있을 것이다. 이의 투여량 또한, 환자의 상태, 성별, 연령, 체중, 병력 등 다양한 인자를 고려하여 주치의에 의해 용이하게 결정될 수 있을 것이다.

이하, 실시예를 들어 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 하기 실시예는 단지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서 본 발명을 이에 제한하고자 함이 아니다.

실시예 1: 코엔자임 Q10의 항산화 효과

코엔자임 Q10의 항산화 효과를 알아보기 위한 방법으로 DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 방법을 이용하였다. DPPH은 색을 띄는 라디칼로 이를 이용해 시료의 라디칼 제거능력을 직접 확인할 수 있다. 코엔자임 Q10 (영진약품)을 증류수 또는 용매 4 ml에 녹인 후, 100 uM DPPH 1ml을 혼합하였다. 고루 혼합한 후, 상온에서 30분간 인큐베이션하였다. 남아있는 DPPH의 양을, 517nm에서의 흡광도 측정을 통해 파악하였다 (블랭크: 증류수 또는 용매, 대조군: 시료를 넣지 않고 DPPH와 증류수 또는 용매로만 구성된 시험구). 항산화력 (Radical Scavenging Activity: RSA)을 하기 수학식 1에 의해 대조구의 흡광도와 비교하여 낮아진 비율로 나타내었다.

RSA(%)= [히드록실레이트의 흡광도 / 대조군의 흡광도] X 100

표 1에 제시된 것과 같이 코엔자임 Q10은 농도 의존적으로 생성된 라디칼을 제거하는 능력을 보여 주었다. 양성 대조군으로서 비타민 C를 이용하였다.

코엔자임 Q10의 항산화 효과

코엔자임 Q10 (uM)	0	10	20	30	40	50	60	70	100	비타민 C (100 uM)
RSA (%)	100	81	67	64	55	49	41	35	26	30

실시예 2: 코엔자임 Q10의 항염 효능 평가

NF-kB 프로모터에 대한 활성을 이용한 루시퍼라아제 검정 (luciferase assay)을 통해 항염 효과를 측정하였다.

THP-1 세포 (한국세포주은행)를 6-웰 디쉬 (Nunc)에 각각 1 X 10⁶개의 세포를 분주한 후, 슈퍼펙트 형질전환 시약 (superfect transfection reagent; Qiagen)를 이용하여 NF-kB 루시페라제 리포터 플라스미드 DNA (stratagene)로 형질전환시켰다. 형질감염 후 24시간이 경과한 후, LPS (100 ng/ml)를 처리하여 THP-1세포를 활성화시킴과 동시에 코엔자임 Q10 (영진약품)을 농도별로 처리하였다. 24시간 후 세포를 수집하여 Luminometer (Berthold Technologies)를 이용하여 루시페라제 활성을 측정하였다 (Young, B.C., Chan, K.K., and Yungdae, Y. (1999). J. Immunol . 163: 5242-5249). 코엔자임 Q10은 농도 의존적으로 NF-kB 프로모터 활성을 억제하였다 (도 1). 이를 통해 코엔자임 Q10이 항염 효능을 보유하고 있음을 알 수 있었다.

실시예 3: 코엔자임 Q10의 호염증성 사이토카인의 생산에 미치는 효과

THP-1 세포를 6-웰 디쉬에 1 X 10⁶개의 세포를 분주한 후, LPS (100 ng/ml)를 처리하여 THP-1 세포를 활성화시킴과 동시에 코엔자임 Q10을 농도별로 처리하였다. 48시간 후에 세포배지로 분비된 IL-8과 TNF-α를 ELISA 키트 (Genzyme)를 이용하여 측정하였다 (Benjamin, R. V., Shijun, Y., and James, J. L. (1995). Infection and Immunity 63: 3158-3165). 도 2와 3에 나타난 바와 같이, LPS에 의해 유도된 IL-8과 TNF alpha 생산이 코엔자임 Q10에 의해 모두 농도 의존적으로 감소되었다 (도 2 및 도 3).

실시예 4: 코엔자임 Q10과 삼백초 또는 자작나무 추출물과의 상승적인 항염 효과

THP-1 세포를 6-웰 디쉬에 1 X 10⁶개의 세포로 분주한 후, LPS (100 ng/ml)를 처리하여 THP-1 세포를 활성화시킴과 동시에 코엔자임 Q10 단독, 코엔자임 Q10 + 삼백초 추출물, 또는 코엔자임 Q10 + 자작나무 추출물을 농도별로 처리하였다. 48시간 후에 세포배지로 분비된 IL-8을 ELISA 키트 (Genzyme)를 이용하여 측정하였다. 표 2에 제시된 것처럼, 코엔자임 Q10는 단독으로 처리했을 때보다 삼백추추출물이나 자귀나무추출물과 함께 처리했을 때 항염 효능이 더 높음을 알 수 있다. 즉 이러한 결과는 코엔자임 Q10이 자귀나무 추출물 또는 삼백초 추출물과 상승적인 항염 효능이 있음을 나타낸다.

종류	IL-8의 양(pg/ml)
(-): 무처리구	0.09
LPS(100 ng/ml)	1.52
LPS(100ng/ml)+코엔자임 Q10(10ppm)	0.78
LPS(100ng/ml)+코엔자임 Q10(5ppm)+삼백초 추출물(5ppm)	0.45
LPS(100ng/ml) + 삼백초추출물(10 ppm)	0.94
LPS(100ng/ml)+코엔자임Q10(5ppm)+자귀나무추출물(5ppm)	0.55
LPS(100ng/ml) +자귀나무 추출물(10 ppm)	0.92

실시예 5: 코엔자임 Q10의 세포독성 평가

항산화 및 항염 효능이 우수하더라도 인체에 사용될 경우 독성이 없어야만 그 용도를 넓혀 나갈 수 있다. 이러한 독성 시험에서 가장 간편하면서도 확실한 독성시험이 인간 세포를 이용한 세포독성 시험이다. 통상 세포독성에서 독성이 없으면 개체수준에서 독성이 나타날 가능성이 매우 낮은 것으로 간주한다.

코엔자임 Q10의 세포독성 효과에 대해 인간 정상 섬유아세포 (태평양(주))를 이용해 MTT 실험을 수행하였다. 코엔자임 Q10은 시험한 농도에서 세포독성을 나타내지 않았다 (도 4).

실시예 6: 인체 피부에 대한 안전성 확인 실험

5-1) 코엔자임 Q10을 포함한 피부외용제의 제조

상기와 같이 항염 효과가 우수하다고 판명된 코엔자임 Q10이 인체피부에도 안전한지 확인하기 위하여, 코엔자임 Q10을 함유한 피부외용제를 제조하고 이에 의한 피부 안전성 검증 실험을 수행하였다.

코엔자임 Q10을 함유한 피부외용제는 하기 표 2의 성분함량으로 제조하였다. 하기 표 3에서 대조군은 코엔자임 Q10을 포함하지 않은 피부외용제이다.

피부외용제 제조를 위하여, 정제수, 글리세린, 부틸렌글리콜을 혼합하고 70 ℃에서 용해하였으며 (물 파트), 상기 3 성분과 트리메탄올아민을 제외한 나머지 성분을 70 ℃에서 용해하였다 (오일 파트). 상기 오일파트를 물 파트에 첨가하고 호모믹서 (일본 Tokushu Kika사)로 교반하여 1차 유화하였고, 여기에 트리메탄올아민을 최종 첨가하였다. 혼합액에 생성된 기포를 제거한 후, 실온으로 냉각시켜 피부외용제를 제조하였다.

성분	함량 (%)
성분	대조군	시험군
정제수	72	72
글리세린	8.0	8.0
부틸렌글리콜	4.0	4.0
코엔자임 Q10	0	1% 또는 5%
카프릴릭 카프리 트리글리세라이드	8.0	8.0
스쿠알란	5.0	5.0
세테아릴 글루쿠사이드	1.5	1.5
소르비탄 스테아레이트	0.4	0.4
세테아릴 알코올	1.0	1.0
트리메탄올아민	0.1	0.1
총중량	100	100

5-2) 피부누적 자극 시험

상기 실시예 5-1)에서 제조한 각 피부외용제를 사용하여 건강한 30명의 성인을 대상으로 윗팔뚝 부위에 격일로 총 9회의 24시간 누적 첩포를 시행하는 것에 의하여 코엔자임 Q10이 피부에 자극을 주는지의 여부를 측정하였다.

첩포 방법은 핀 챔버 (Finn chamber, Epitest Ltd, 핀란드)를 이용하였다. 챔버에 상기 각 피부외용제를 15 ul씩 적하한 후 첩포를 실시하였다. 매회 피부에 나타난 반응의 정도를 아래의 수학식 2를 이용하여 점수화하였으며, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.

평균반응도=[[반응지수 x 반응도/총피검자수 x 최고점수 (4점)] x 100 ] ÷ 검사회수 (9회)

이 때, 반응도에서 ±는 1점, +는 2점, ++는 4점의 점수를 부여하며, 평균반응도가 3 미만일 때 안전한 조성물로 판정된다.

시험물질	반응이 나타난 피검자 수									평균 반응도
	1주			2주			3주
	1차	2차	3차	4차	5차	6차	7차	8차	9차
	ㅁ ＋＋＋	ㅁ ＋＋＋	ㅁ ＋＋＋	ㅁ ＋＋＋	ㅁ ＋＋＋	ㅁ ＋＋＋	ㅁ ＋＋＋	ㅁ ＋＋＋	ㅁ ＋＋＋
대조군	2 - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	0.18
코엔자임 Q10(1%)	2 - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	0.18
코엔자임 Q10(5%)	2 - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	0.18
피검인원	30	30	30	30	30	30	30	30	30

상기 표 4에 나타난 바와 같이, 시험군의 경우 특별한 부작용을 보이지 않았다. 상기 기재된 수학식에 따라 계산한, 코엔자임 Q10을 1 % 및 5 %를 각각 포함한 피부외용제의 평균반응도가 0.18로 모두 3이하가 되므로 안전한 조성물로 판단되었다.

실시예 7: 경피 수분 손실 억제 측정

TEWA (Tewameter TM210, Germany) 증발계를 사용하여 경피수분손실(transepidermal water loss, TEWL) 정도를 측정하였다. 측정은 상기에서 제조된 코엔자임 Q10 함유 피부외용제와 코엔자임 Q10을 포함하지 않는 피부외용제를 각각 처리하고 0주 후, 2주 후, 4주 후 3회 실시하여 통계학적으로 비교하였다. 모든 측정은 공기의 이동이 없고 직사광선이 없는 실내온도는 22 ℃, 상대 습도는 40%로 유지되는 항온 항습실에서 측정하였다. 30명의 대상자들에서 동일하게 측정부위는 복부로 하였다. 표 4에서 제시된 것처럼, 코엔자임 Q10이 1% 함유된 외용제의 경우, 2주 때부터 수분손실을 감소시키고, 4주 후엔 수분 손실량을 크게 감소시키는 것을 확인할 수 있었다 (표 5). 이러한 결과는 코엔자임 Q10이 피부 보습효과를 가지고 있음을 나타낸다.

복부에서의 TEWL 변화 (단위 : g/m²/h)

주수	시료의 종류	수	평균	표준편차
0주	코엔자임 Q10 1%함유 피부외용제	30	22.81	3.09
0주	코엔자임 Q10 미함유 피부외용제	30	22.98	4.02
2주	코엔자임 Q10 1%함유 피부외용제	30	17.31	5..76
2주	코엔자임 Q10 미함유 피부외용제	30	21.23	3.26
4주	코엔자임 Q10 1%함유 피부외용제	30	13.46	2.46
4주	코엔자임 Q10 미함유 피부외용제	30	20.12	4.32

실시예 8: 코엔자임 Q10 과 백합 추출물과의 상승작용적 경피 수분 손실 억제 평가

TEWA 증발계를 사용하여 경피수분손실 정도를 측정하였다. 측정은 상기에서 제조된 코엔자임 Q10 1% 함유 피부외용제, 코엔자임 Q10을 포함하지 않는 피부외용제, 코엔자임 Q10 0.5% + 백합추출물 0.5% 함유 피부외용제, 백합 추출물 1.0% 함유 피부외용제를 각각 처리하고 0주 후, 4주 후 2회 실시하여 통계학적으로 비교하였다. 모든 측정은 공기의 이동이 없고 직사광선이 없는 실내온도는 22 ℃, 상대 습도는 40%로 유지되는 항온 항습실에서 측정하였다. 30명의 대상자들에서 동일하게 측정부위는 복부로 하였다. 표 6에서 제시된 것처럼, 코엔자임 Q10은 단독으로 처리되었을 때보다 백합추출물과 같이 도포하였을 경우, 훨씬 높은 보습효과를 나타냄을 알 수 있다. 이러한 사실은 코엔자임 Q10이 백합추출물과 상승적인 경피 수분 억제효과를 나타내고 있음을 제시한다 (표 6).

복부에서의 TEWL 변화 (단위:g/m²/h)

주수	시료의 종류	수	평균	표준편차
0주	백합추출물 1%함유 피부외용제	30	21.84	1.54
	코엔자임 Q10 0.5%+백합추출물 0.5%함유 피부외용제	30	22.54	3.22
	코엔자임 Q10 1%함유 피부외용제	30	22.81	3.09
	코엔자임 Q10 미함유 피부외용제	30	22.98	4.02
4주	백합추출물 1%함유 피부외용제	30	17.35	2.67
	코엔자임 Q10 0.5%+백합추출물 0.5%함유 피부외용제	30	9.41	3/12
	코엔자임 Q10 1%함유 피부외용제	30	15.44	2.46
	코엔자임 Q10 미함유 피부외용제	30	21.12	4.32

실시예 9: 급성경구독성시험

코엔자임 Q10이 식품에도 안전하게 적용될 수 있는가를 확인하기 위해 급성 경구독성시험을 실시하였다. 실험동물로서 5 내지 6주령 된 SPF SD계 랫트 20마리를 사용하여 하기와 같은 조건에서 급성독성시험을 실시한다.

온, 습도조건: 온도 22 ℃ +/- 2도. 상대습도 50 +/- 10 %

명암 사이클: 형광등조명 (08시 점등 ~ 20시 소등)

조도: 200 내지 300 Lux

자외선 처리된 음용수는 자유섭취 시킴

시험물질을 멸균증류수에 희석하여 투여시료를 제조하여 대조구로서 멸균 증류수를 사용하여 동량 투입하였다.

투여 당일은 4시간까지 매 시간마다 일반상태를 관찰하고, 투여 다음날부터 14일까지는 매일 1회씩 일반상태의 변화, 중독증상, 운동성, 외관, 자율신경 및 사망동물의 유무를 주의깊게 관찰하고 여러 가지 병리 해부학적인 검증을 거쳐 독성 유무를 판단하였다. LD₅₀이 2650 mg/kg B.W.이었으며, 독성은 없는 것으로 판단되었다.

실시예 10: 피부개선 평가

SDS (0.01%)로 피부에 자극을 주어 피부조직을 손상시킨 후, 코엔자임 Q10을 함유한 피부외용제를 윗팔뚝 부위에 첩포하여 피부조직이 개선되는지의 여부를 관찰하였다. 이 실험에서는 건강한 성인 30명을 대상으로 하였다.

첩포 방법은 핀 챔버 (Finn chamber, Epitest Ltd, 핀란드)를 이용하였다. 챔버에 상기 각 피부외용제를 15 ul씩 적하한 후 첩포를 실시하였다. 매회 피부에 나타난 반응의 정도를 하기 수학식 2를 이용하여 점수화하였으며, 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다.

수학식 2

이 때, 반응도에서 ±는 1점, +는 2점, ++는 4점의 점수를 부여하였다.

시험물질	반응도			평균 반응도
시험물질	1주	2주	3주	평균 반응도
SDS(0.01 %)	4.0	4.2	4.4	4.2
코엔자임 Q10함유 피부외용제(0.1 %)	3.7	3.5	3.0	3.4
코엔자임 Q10함유 피부외용제(1 %)	2.4	1.9	1.7	2.0
코엔자임 Q10함유 피부외용제(3 %)	0.84	0.72	0.65	0.74
코엔자임 Q10함유 피부외용제(5 %)	0.74	0.66	0.58	0.66
코엔자임 Q10함유 피부외용제(0 %)	4.2	4.0	3.6	3.93

상기 표 7과 같이, SDS (0.01%)을 피부에 도포하였을 경우, 평균 반응도가 4.2이 되어 피부가 심하게 손상된 것을 알 수 있다. 반면에 코엔자임 Q10 각각 0.1%, 1%, 3%, 5% 을 함유한 피부외용제를 도포하였을 경우, 농도 의존적으로 피부가 보호됨을 알 수가 있다. 이를 통해 코엔자임 Q10 함유 피부외용제는 피부상태를 보호하는 효능이 있음이 판정되었다.

본 발명에 따른 코엔자임 Q10을 포함하는 조성물은 항산화 효과뿐만 아니라, 우수한 항염 및 보습 효과를 나타내며, 동물과 인체 안전성 시험에서 어떠한 독성이나 자극도 발생하지 않아 인체사용에 있어 안전한 물질이므로, 화장품, 의약, 생활용품, 등의 다양한 분야에서 피부보호 목적으로 유용하게 사용할 수 있다.

Claims

코엔자임 Q10을 포함하는 항염 및 피부 보습을 위한 피부보호 조성물.
제 1항에 있어서, 코엔자임 Q10이 조성물의 총 중량에 대해 0.001 내지 20.0 (w/w) 양으로 포함되는 조성물.
제 1항에 있어서, 피부 보습, 항산화, 항염 및 상처치유 물질 중에서 선택된 하나 이상의 물질을 추가로 포함하는 조성물.
제 3항에 있어서, 삼백초, 미나리, 자작나무 및 가래나무 추출물 중 하나 이상을 추가로 포함하는 조성물.
제 4항에 있어서, 삼백초 및 자작나무 추출물 중 하나 이상을 추가로 포함하는 조성물.
제 3항에 있어서, 옥죽, 백합, 작약, 연자육 및 자황 추출물 중 하나 이상을 추가로 포함하는 조성물.
제 6항에 있어서, 백합 추출물을 추가로 포함하는 조성물.
제 1항 내지 5항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하는 항염 및 피부 보습을 위한 제품.
제 4항에 있어서, 화장품인 제품.