KR20070083898A - 췌장 기능 개선을 위한 의약 또는 음식품 - Google Patents

췌장 기능 개선을 위한 의약 또는 음식품 Download PDF

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미유키 다나카
에리코 미사와
노리코 하바라
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모리나가 뉴교 가부시키가이샤
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Abstract

3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올, 또는 동 화합물을 포함하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물로서, 상기 화합물을 건조 질량으로, 0.001 내지 10질량% 포함하는 조성물을 췌장 기능 개선을 위한 의약의 유효 성분으로 한다.
3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올, 췌장 기능 개선, 백합과 식물, 알로에베라, 췌장 내분비선.

Description

췌장 기능 개선을 위한 의약 또는 음식품{Drugs, food or drink for improving pancreatic functions}
본 발명은 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 포함하는, 췌장 기능 개선을 위한 의약 또는 음식품에 관한 것이다.
4-메틸에르고스트-7-엔-3-올은, 식물중에 존재하는 물질인 것이 알려져 있다[참조: 비특허문헌 1]. 그러나, 당해 화합물에 있어서의 선행기술에 관해서는, 동 화합물과 유사한 구조를 갖는 로페놀(4-메틸콜레스트-7-엔-3-올의 입체이성체의 하나)의 생합성계에 관한 것 뿐이며[참조: 비특허문헌 2], 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 포함하며, 로페놀 골격을 갖는 화합물군의 용도에 관해서는 전혀 알려져 있지 않았다.
백합과 알로에속은 알로에베라(Aloe barbadensis Miller)나 키다치알로에(Aloe arborescen Miller var . natalensis Berger) 등을 포함하는 식물군으로, 여러 가지 효능이 있는 것이 경험적으로 알려져 있고, 알로에속 식물의 용도에 관한 선행기술에는, 면역 개질성 다당류[참조: 특허문헌 1], 알로에 추출물의 부탄올 분 획 또는 알로인을 함유함을 특징으로 하는 면역 억제 개선제[참조: 특허문헌 2], HSP60 패밀리에 속하는 단백질의 알로인 유도체 함유 합성 억제제[참조: 특허문헌 3 내지 5], 알로에 엽피 유래의 렉틴 활성 단백질[참조: 특허문헌 6] 및 혈당치 개선에 관한 것[참조: 비특허문헌 3 내지 7, 특허문헌 7 내지 10] 등이 있다.
췌장은 췌도(랑게르한스섬)라고 불리는 내분비선 조직과, 소화 효소의 분비를 수행하는 외분비선 조직에 의해서 구성되는 기관이다. 랑게르한스섬에는 β세포, α세포, δ세포, 췌장 폴리펩타이드 세포 등이 존재하며, 혈당이나 대사의 제어에 큰 영향을 미치고 있다. 이 중에서도 β세포는 인슐린을 생산하는 세포로서 특히 중요한 역할을 담당하고 있다.
당뇨병은 일본 성인의 10%에서 확인되는 고빈도의 대사 이상이지만, 원인의 하나가 되는 췌장의 β세포 장애의 역학에 있어서, 경계형 고혈당의 개체에서는 물론 β세포 장애가 있지만, 내당능이 정상인 개체 중에도 분명히 β세포 기능이 저하된 개체가 30% 혼재하고 있다. 또한 현대의 일본에서 평균적인 사회 생활을 하는 성인은 정도의 차는 있지만, 고빈도로 인슐린 저항성을 일으킨다고 말해지고 있는데, 인슐린 저항성을 일으키고 있는 경우, β세포 기능 장애를 일으키지 않는 사람은 혈당치가 상승하지 않고, β세포 기능 장애를 일으키는 사람은 혈당치가 정상 내당능으로부터 경계형 고혈당으로 상승되는 것으로 생각되고 있다[참조: 비특허문헌 8].
현재 시점에서, 췌장 기능 장애에 대해서는 원인이 되는 병태 또는 인자를 제거함으로써, 췌장 기능의 자연 회복을 촉진시키는 치료법이 사용되고 있지만, 일 단 저하된 췌장의 기능을 적극적으로 회복시키는 치료 방법이나 약제는 아직 사용되고 있지 않으며, 췌장 세포 보호제 또는 장해를 받은 췌장 세포의 개선제가 의료 현장에서 요구되고 있다.
췌장 기능 장애는 췌장의 내분비선 또는 외분비선 기능이 저하 또는 이상으로 항진된 병태를 의미한다.
췌장 기능 장애의 치료제의 선행기술에는, BDNF 등의 신경 영양 인자를 유효 성분으로 하는 것[참조: 특허문헌 11], 글리세린 유도체를 유효 성분으로 하는 것[참조: 특허문헌 12], 베타셀린산 단백질 또는 이의 뮤테인을 함유하여 이루어진 췌장 기능 개선제[참조: 특허문헌 13] 등이 있지만, 지금까지 BDNF는 염증이나 신경 장애시에 다른 전달 물질과 함께 소형 DRG 뉴런의 중추단으로부터 방출되고, 후각(後角) 세포상에서 NMDA 수용체를 티로신인산화함으로써 동통 정보 전달의 촉진에 관여하고 있다고 생각되고 있으며[참조: 비특허문헌 9], 실제의 사용에는 제한이 있다고 생각된다.
또한, 특허문헌 12에 개시되어 있는 글리세린 유도체는, 특허문헌 14에 기재되어 있는 화합물로서, 항혈소판 활성화 인자(PAF) 작용을 갖는 DIC, 쇼크, 알레르기, 급성 췌장염, 운막하 출혈시의 뇌연축 등의 예방·치료제이고, 허혈 상태에서의 장기 보존, 이식후 혈액 재관류 또는 수술에 의한 혈류 장애 등의 과정에서 생기는 장기 장애를 예방·치료·개선하는, 장기 장애 예방·치료·개선 효과도 갖고 있는 것이 밝혀진 것이지만, 당해 약제는 이러한 증상을 동반하지 않는 만성적인 췌장 질환에 적합하다고는 말하기 어렵다.
또한, 특허문헌 13에서 개시되어 있는 베타셀룰린산 단백질 또는 이의 뮤테인을 함유하여 이루어진 췌장 기능 개선제는, 미분화 췌장 줄기세포에 작용하여, 인슐린을 생산하는 췌장 β세포로의 분화를 촉진시키는 작용 및, 미분화 줄기세포를 췌장의 다른 세포, 예를 들면, 췌장 폴리펩타이드를 생산하는 F 세포로 분화 유도시키는 작용도 갖는 것이며, 미숙한 세포가 고갈된 상태에서는 효과를 기대할 수 없다. 또한 당해 단백질의 mRNA는, 뇌 이외의 각종 장기, 예를 들면 간장, 신장, 췌장 등에서 검출되고 있지만, 이러한 기능의 상세한 것은 거의 밝혀져 있지 않은 점에서, 임상에서 즉시 사용할 수 있는 것이라고는 말하기 어렵다.
또한 특허문헌 15에 있어서는, 라노스탄 골격 또는 3,4-세코라노스탄 골격을 갖는 화합물에, 인슐린 작용 증강 활성이 있는 것이 개시되어 있지만, 이의 효과는 지방 세포의 분화 조절에 있어서의 인슐린의 작용을 증강시키는 것이며, 췌장에서의 질환에 대한 효과에 관해서는 불명하였다.
식물 유래의 로페놀 골격을 갖는 배당체로서는, 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸스티그마스트-7-엔-3-올이, 참외과의 식물인 브리오니아 알바(Bryonia alba)에 포함되어 있는 것이 보고되어 있지만[참조: 비특허문헌 10], 일반적으로 식경험이 있는 식물이라고는 말할 수 없으며, 전합성의 예도 없다.
특허문헌 1: 일본 국제공개특허공보 제2001-520019호
특허문헌 2: 일본 공개특허공보 제(평)08-208495호
특허문헌 3: 일본 공개특허공보 제(평)10-120576호
특허문헌 4: 일본 공개특허공보 제(평)10-045604호
특허문헌 5: 일본 공개특허공보 제(평)10-036271호
특허문헌 6: 일본 공개특허공보 제(평)09-059298호
특허문헌 7: 일본 공개특허공보 제(소)60-214741호
특허문헌 8: 일본 공개특허공보 제2003-286185호
특허문헌 9: 미국특허 제4598069호 명세서
특허문헌 10: 미국특허출원공개 제2003/0207818호 명세서
특허문헌 11: 국제공개번호 WO00/62796
특허문헌 12: 일본 공개특허공보 제(평)07-285866호
특허문헌 13: 일본 공개특허공보 제(평)09-188630호
특허문헌 14: 일본 공개특허공보 제(평)02-131467호
특허문헌 15: 일본 공개특허공보 제(평)10-330266호
비특허문헌 1: Chem. Pharm. Bull, p.624~626, 1993.
비특허문헌 2: Biochimica Biophysica Acta, p.63~88, 2000.
비특허문헌 3: Phytomedicine, vol.3, p.245~248, 1996.
비특허문헌 4: Phytotherapy Research, vol.15, p.157~161, 2001.
비특허문헌 5: Phytotherapy Research, vol.7, p.37~42, 1993.
비특허문헌 6: 일본임상, 통권 제748호, 제1권, 제615 내지 617페이지, 1999년
비특허문헌 7: 일본임상, 통권 제808호, 제2권, 제405 내지 409페이지, 2002년
비특허문헌 8:「인슐린 저항성」, 당뇨병 커런트 라이브러리, 발행 분코도, 2004년 4월 17일 발행
비특허문헌 9: Brain Res Rev vol.40, p.240~249, 2002.
비특허문헌 10: Khimiya Phrodnyk Soedinenii, vol.3, USSR, 1977.
본 발명의 과제는, 식경험상 안전하게 섭취할 수 있고, 입수 용이한 원료로부터, 의약 또는 음식품으로서 바람직하지 못한 성분을 포함하지 않고, 췌장 기능 개선에 적합한 의약 또는 음식품을 제공하는 것이다.
본 발명자들은 상기의 과제를 해결하기 위해 예의 연구를 한 결과, 알로에베라(Aloe barbadensis Miller)의 엽육(투명 겔 부분)으로부터 추출, 정제한 신규 배당체인, 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올이 안전하게 섭취될 수 있고, 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선 작용을 갖는 것을 밝혀냈다. 본 발명은 상기의 지견에 근거하여 완성된 것이다.
즉, 본 발명은 하기 화학식 1의 화합물을 유효 성분으로서 포함하는, 췌장 기능 개선을 위한 의약에 관한 것이다. 본 발명의 의약은 췌장 기능 개선이 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선인 것을 바람직한 형태로 하고 있다.
Figure 112007032799034-PCT00001
본 발명의 의약은 상기 화합물을 건조 질량으로 0.001 내지 10질량% 포함하는 것을 바람직한 형태로 하고 있다.
또한 본 발명은 상기 화학식 1의 화합물을 건조 질량으로 0.001 내지 10질량% 포함하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로서 함유하는, 췌장 기능 개선을 위한 의약을 제공한다. 본 발명의 의약은 췌장 기능 개선이 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선인 것을 바람직한 형태로 하고 있다.
본 발명은 또한 상기 화학식 1의 화합물을 포함하는, 췌장 기능 개선을 위한 음식품을 제공한다. 본 발명의 음식품은 췌장 기능 개선이 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선인 것을 바람직한 형태로 하고 있다.
또한, 본 발명의 음식품은 상기 화합물을 건조 질량으로 0.0001 내지 1질량% 포함하는 것을 바람직한 형태로 하고 있다.
또한 본 발명은 상기 화학식 1의 화합물을 건조 질량으로 0.0001 내지 1질량% 포함하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는, 췌장 기능 개선을 위한 음식품을 제공한다. 본 발명의 음식품은 췌장 기능 개선이 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선인 것을 바람직한 형태로 하고 있다. 본 발명의 음식품은 췌장 기능 개선을 위해 사용되는 것이라는 취지의 표시를 부착한 것을 바람직한 형태로 하고 있다.
본 발명은 또한 췌장 기능 개선용 의약의 제조에 있어서의, 상기 화학식 1의 화합물 또는 이를 포함하는 조성물의 사용을 제공한다. 본 발명의 사용은 췌장 기능 개선이 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선인 것을 바람직한 형태로 하고 있다. 또한, 본 발명의 사용은 상기 조성물이 상기 화합물을 건조 질량으로 0.001질량% 이상 포함하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물인 것을 바람직한 형태로 하고 있다.
본 발명은 또한 췌장 내분비선 세포를 보호하고, 또는 췌장 내분비선 세포의 기능을 개선하는 방법으로서, 상기 화학식 1의 화합물 또는 이를 포함하는 조성물을, 췌장 내분비선 세포를 보호하고, 또는 췌장 내분비선 세포의 기능을 개선하고자 하는 대상에 투여함을 특징으로 하는 방법을 제공한다. 본 발명의 방법은 췌장 기능 개선이 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선인 것을 바람직한 형태로 하고 있다. 또한, 본 발명의 방법은 상기 조성물이 상기 화합물을 건조 질량으로 0.001질량% 이상 포함하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물인 것을 바람직한 형태로 하고 있다.
도 1은 본 발명의 배당체의 아글리콘부의 아세틸화체의 GC-MS 스펙트럼(도면 을 대신하는 사진: 디스플레이상에 표시한 중간조 화상)이다.
도 2는 본 발명의 배당체의 아글리콘부의 아세틸화체의 13C-NMR 차트(도면을 대신하는 사진: 디스플레이상에 표시한 중간조 화상)이다.
도 3은 본 발명의 화합물을 투여한 마우스의 통상 혈당치의 경시적 변화를 도시한 도면이다.
도 4는 본 발명의 화합물을 투여한 마우스의 공복시 혈당치의 경시적 변화를 도시한 도면이다.
발명을 실시하기 위한 최상의 양태
다음에, 본 발명의 바람직한 실시형태에 관해서 상세하게 설명한다. 단, 본 발명은 이하의 바람직한 실시형태에 한정되지 않고, 본 발명의 범위내에서 자유롭게 변경할 수 있는 것이다.
본 발명의 의약 또는 음식품의 유효 성분으로서 사용하는 화합물(이하, 「본 발명의 화합물」이라고도 한다)은, 상기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물, 즉 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올이다. 즉, 본 발명의 화합물은 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 3위치의 하이드록실 그룹과, D-글루코스의 1위치의 하이드록실 그룹이 탈수축합한 구조를 갖고 있다.
또한, 본 발명의 의약 또는 음식품의 유효 성분으로서 사용하는 조성물(이하, 「본 발명의 조성물」이라고도 한다)은, 상기 본 발명의 화합물을 의약의 유효 성분으로서 사용하는 경우는 건조 질량으로 0.001질량% 이상, 바람직하게는 0.01질 량% 이상, 보다 바람직하게는 0.1질량% 이상 포함하는, 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물이고, 음식품의 유효 성분으로서 사용하는 경우는 건조 질량으로 0.0001질량% 이상, 바람직하게는 0.001질량% 이상, 보다 바람직하게는 0.1질량% 이상 포함하는, 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물이다. 본 발명의 조성물에 포함되는 본 발명의 화합물의 함유량의 상한은 특별히 제한되지 않지만, 50질량%, 또는 70질량%, 또는 90질량%을 예시할 수 있다.
본 발명의 화합물 또는 이를 포함하는 조성물은, 예를 들면, 백합과 식물에 속하며, 본 발명의 화합물을 포함하는 식물 또는 이의 일부 또는 이들의 파쇄물로부터 동 화합물을 포함하는 분획을 유기 용매 또는 열수를 사용하여 추출, 농축시킴으로써 제조할 수 있다.
상기 백합과에 속하는 식물로서는, 알로에속 또는 알리움속에 속하는 식물을 들 수 있다. 알로에속 식물로서는, 알로에베라(Aloe barbadensis Miller), 알로에 페록스 밀러(Aloe ferox Miller), 알로에 아프리카나 밀러(Aloe africana Miller),키다치 알로에(Aloe arborescen Miller var . natalensis Berger), 알로에 스피카타 베이커(Aloe spicata Baker) 등을 들 수 있다. 본 발명의 화합물 또는 이를 포함하는 조성물의 제조에 있어서는, 상기 식물의 전체를 사용해도 양호하지만, 엽육(투명 겔 부분)을 사용하는 것이 바람직하다. 이러한 식물 또는 이의 일부를, 바람직하게는 균질기 등을 사용하여 파쇄하여 액상화하고, 유기 용매 또는 열수로 추출한다. 유기 용매로서는 메탄올, 에탄올, 부탄올 등의 알코올; 아세트산메틸, 아세트산에틸, 아세트산프로필, 아세트산부틸 등의 에스테르; 아세톤, 메틸이소부틸 케톤 등의 케톤; 디에틸에테르, 석유에테르 등의 에테르; 헥산, 사이클로헥산, 톨루엔, 벤젠 등의 탄화수소; 사염화탄소, 디클로로메탄, 클로로포름 등의 할로겐화 탄화수소; 피리딘 등의 복소환 화합물, 에틸렌글리콜 등의 글리콜; 폴리에틸렌글리콜 등의 폴리알코올; 아세토니트릴 등의 니트릴 용매 및 이들 용매의 혼합액 등을 들 수 있다. 또한, 이러한 용매는 무수 상태라도 양호하며, 함수 상태라도 양호하다. 이러한 용매 중에서는, 특히, 아세트산에틸/부탄올 혼합액(3:1), 또는 클로로포름/메탄올 혼합액(2:1)이 바람직하다.
추출 방법으로서는 통상의 식물 성분의 추출에 사용되는 방법을 사용할 수 있다. 통상적으로 신선한 식물 또는 건조 식물 1질량부에 대하여, 유기 용매 1 내지 300질량부를 사용하며, 교반 또는 진탕하면서, 용매의 비점 이하의 온도로 가열환류하거나, 상온에서 초음파 추출하는 방법을 들 수 있다. 추출액은 여과 또는 원심분리 등의 적당한 방법에 의해, 불용물을 분리하여 조 추출물을 수득할 수 있다.
조 추출물은 각종 크로마토그래피, 예를 들면 순상 또는 역상의 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제할 수 있다. 순상 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에서는, 용출 용매로서 클로로포름/메탄올 혼합액의 구배를 사용하면, 클로로포름:메탄올=5:1 정도로 본 발명의 화합물이 용출된다. 또한, 역상 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 있어서는, 용출 용매로서 메탄올/물 혼합액의 구배를 사용하면, 95% 정도 농도의 메탄올로 본 발명의 화합물이 용출된다.
수득된 분획은 또한 HPLC 등에 의해 정제할 수 있다.
상기한 바와 같이 하여 수득되는 화합물 또는 이를 포함하는 조성물이, 본 발명의 화합물을 포함하는 것은, 예를 들면, 후술의 실시예에 나타내는 방법에 의해서 확인할 수 있다. 예를 들면, 아글리콘부에 글루코스가 결합된 배당체인 것은, 또한 아글리콘부가 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올인 것은, 13C-NMR 등에 의해서 확인할 수 있다.
또한, 본 발명자들은 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올이 혈당치 개선 작용을 갖는 것을 밝혀내었으며, 후술의 제조예 1에서는, 참고예 1에 나타내는 혈당치 개선 작용의 평가를 지표로 하여, 알로에베라로부터의 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 정제하였지만, 췌장 기능 개선 작용, 특히 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선 작용을 지표로 하여 정제할 수도 있다.
본 발명의 화합물은 D-글루코스와 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 축합시킴으로서도 제조할 수 있다. 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올은 식물로부터 추출 및 정제를 실시함으로써 입수할 수 있다. D-글루코스와 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 축합은, 예를 들면, 제4판 실험화학강좌 26, 1992년(제272페이지, 제297페이지 및 제342페이지에 기재)에 나타내고 있는 방법을 조합하여 실시할 수 있다. 즉, D-글루코스를 완전 아세틸화후, 아노머 위치를 α-브로마이드로 변환한다. 디에틸에테르중, 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 α-브로마이드와 반응시켜 β-글리코실화한 후, 나트륨메톡사이드·메탄올 중에서 아세틸 그룹을 가수분해하여, 목적 화합물을 수득하였다.
본 발명의 화합물은, 췌장 기능 개선 작용, 특히 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선의 작용을 갖는다. 췌장 기능 개선 작용, 특히 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선을 위한 의약 또는 음식품의 유효 성분으로서 사용할 수 있다. 한편, 본 발명에 있어서, 췌장 내분비선 세포의 보호란, 췌장 내분비선 세포를 여러 가지 원인에 의한 변성으로부터 보호하는 것 또는 췌장 내분비선 세포의 인슐린 생산능이 저하되는 것을 방지하는 것을 의미한다. 또한, 췌장 내분비선 세포의 기능 개선이란, 인슐린 생산능이 저하된 췌장 내분비선 세포의 인슐린 생산능을 높이는 것을 의미한다. 췌장 내분비선 세포의 변성, 또는 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선은, 동물의 췌장 조직 절편의 현미경 관찰 또는 혈청중의 인슐린량 측정에 의해 평가가 가능하다.
본 발명의 화합물은 상기 작용을 갖는 결과, 췌장 내분비선 세포의 인슐린 생산능의 저하를 방지하며, 또는 인슐린 생산능이 저하된 췌장 내분비선 세포의 인슐린 생산능을 높일 수 있다.
후기 실시예에서 사용한 db/db 마우스는, 주령이 진행됨과 함께 췌장의 장애가 나타나는 것이 알려져 있다[참조: Science, 153, 1127-1128, 1966]. 당해 마우스에게, 항산화 작용 화합물인 N-아세틸-L-시스테인, 비타민 C 및 비타민 E를 병용 투여한 경우, 췌장중의 β세포수의 감소를 일부 예방할 수 있다는 보고가 있지만[참조: Diabetes, 48, 2398-2406, 1999], 투여량은 N-아세틸-L-시스테인만으로도 100g/60kg이고, 매우 대량의 투여가 필요해질 것으로 예상된다. 이에 대해, 본원 발명에서는, 저용량으로 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선의 작용을 발휘하는 것을 기대할 수 있다.
본 발명의 의약은 췌장 내분비선 세포의 기능 저하에 의해 야기되는 질환, 예를 들면, 급성 췌장염, 만성 췌장염, I형 당뇨병, II형 당뇨병에서의 췌장 기능 장애, 노인성의 인슐린 분비 저하에 따르는 췌장 기능 저하증 등의 질환의 치료제 또는 예방제의 유효 성분으로서 사용할 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물은 저독성인 점에서, 췌장암 치료에서 항종양제와 병용할 수도 있다. 본 발명의 의약은, 바람직하게는 인슐린 생산능의 저하에 따르는 질환 중 고혈당 개선용으로서 사용하는 것은 제외된다.
또한, 종래, 알로에베라의 엽피에는 완하 작용을 갖는 발바로인이나 알로에에모딘이 포함되어 있고, 완하 작용을 기대할 수 없는 의약 또는 음식품으로서는, 바람직하지 못하다고 생각되고 있다. 한편, 본 발명의 조성물은, 바람직한 형태에 있어서는, 식경험상 안전하게 섭취할 수 있는 알로에베라의 엽육(투명 겔 부분)으로부터 추출, 분획함으로써 수득할 수 있기 때문에, 발바로인 또는 알로에에모딘이 포함되지 않으면서 본 발명의 화합물을 유효량 포함한다. 따라서, 본 발명의 조성물도, 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선용 의약의 유효 성분으로서 적합하다.
본 발명의 화합물 또는 조성물은 그대로 본 발명의 약제 또는 음식품의 유효 성분으로서 이용하는 것이 가능하다. 또한, 본 발명의 조성물은 용액이라도 양호하며, 통상의 방법에 의해 동결 건조 또는 분무 건조시켜 분말로서 보존, 사용할 수도 있다.
본 발명의 의약은 본 발명의 화합물 또는 조성물, 또는 이들을 제제학적으로 허용되는 제제 담체와 조합하여, 경구적 또는 비경구적으로 인간을 포함하는 포유 동물에게 투여할 수 있다. 한편, 본 발명의 약제에 있어서, 본 발명의 화합물은 의약에 허용되는 염으로 할 수 있다. 의약에 허용 가능한 염으로서, 금속염(무기염)과 유기염 둘다 포함되고, 이들의 리스트는「Remington's Pharmaceutical Sciences, 제17판, 제1418페이지, 1985년」에 게재되어 있는 것이 예시된다. 구체적으로는 염산염, 황산염, 인산염, 2인산염 및 브롬화수소산염 등의 무기산염이나, 말산염, 말레산염, 푸마르산염, 주석산염, 석신산염, 시트르산염, 아세트산염, 락트산염, 메탄설폰산염, p-톨루엔설폰산염, 파모산염, 살리실산염 및 스테아르산염 등의 유기산염이 비한정적으로 포함된다. 또한, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 알루미늄 등의 금속의 염, 리신 등의 아미노산과의 염으로 할 수도 있다. 또한, 상기 화합물 또는 이의 의약상 허용되는 염의 수화물 등의 용매화물도 본 발명에 포함된다.
본 발명의 의약의 제제형태는 특별히 한정되지 않으며, 치료 목적에 따라서 적절하게 선택할 수 있고, 구체적으로는, 정제, 환제, 산제, 액제, 현탁제, 유제, 과립제, 캡슐제, 시럽제, 좌제, 주사제, 연고제, 첩부제, 점안제, 점비제 등을 예시할 수 있다. 제제화에 있어서는 제제 담체로서 통상의 췌장 등의 내장 질환의 치료 또는 예방용 의약에 범용되는 부형제, 결합제, 붕괴제, 윤택제, 안정제, 교미교취제, 희석제, 계면활성제, 주사제용 용제 등의 첨가제를 사용할 수 있다. 또 한, 본 발명의 효과를 손상시키지 않는 한, 본 발명의 화합물 또는 조성물과, 다른 췌장 질환의 치료 또는 예방 작용을 갖는 약제를 병용해도 양호하다.
본 발명의 의약중에 포함되는 본 발명의 화합물 또는 조성물의 양은, 특별히 한정되지 않으며 적절하게 선택하면 양호하지만, 예를 들면, 본 발명의 화합물의 양으로서, 제제중에 0.001 내지 10질량%, 바람직하게는 0.01 내지 1질량%, 특히 바람직하게는 0.05 내지 1질량%으로 하는 것이 양호하다.
또한, 본 발명의 의약은 췌장 내분비선 세포의 기능 저하에 기인하는 여러가지 질병·합병증 등의 예방 및 이들 질병·합병증 등의 리스크를 감소시키는 것이 가능하다.
이러한 췌장 내분비선 세포의 기능 저하에 기인하는 여러 가지 질병·합병증으로서는, 신경장애, 신증, 망막증, 백내장, 대혈관 장애, 당뇨병 등을 예시할 수 있다.
본 발명의 약제 또는 의약의 투여 시기는 특별히 한정되지 않으며, 대상이 되는 질환의 치료 방법에 따라서, 적절하게 투여 시기를 선택하는 것이 가능하다. 또한, 투여 형태는 제제 형태, 환자의 연령, 성별, 그 밖의 조건, 환자의 증상의 정도 등에 따라서 결정되는 것이 바람직하다.
본 발명의 약제의 유효 성분의 투여량은, 용법, 환자의 연령, 성별, 질환의 정도, 그 밖의 조건 등에 의해 적절하게 선택된다. 통상적으로 유효 성분으로서의 본 발명의 화합물의 양은, 바람직하게는 O.01 내지 10mg/kg/일, 보다 바람직하게는 0.1 내지 1mg/kg/일의 범위가 되는 양을 기준으로 하는 것이 양호하며, 또한 본 발 명의 조성물을 사용하는 경우는, 조성물의 건조 중량으로서 바람직하게는 0.1 내지 10OOmg/kg/일, 보다 바람직하게는 1 내지 10Omg/kg/일이 되는 양을 목표로 하는 것이 양호하다. 어느 쪽의 경우도, 1일 1회 또는 복수회로 나누어 투여할 수 있다.
본 발명의 화합물 또는 조성물은, 음식품(음료 또는 식품)에 함유시킬 수도 있다. 음식품으로서는, 상기 유효 성분의 효과를 손상시키지 않고, 경구 섭취할 수 있는 것이면 형태나 성상은 특별히 제한되지 않으며, 상기 유효 성분을 함유시키는 것 이외에는, 통상 음식품에 사용되는 원료를 사용하여 통상의 방법에 의해서 제조할 수 있다.
본 발명의 음식품중에 포함되는 본 발명의 화합물 또는 조성물의 양은, 특별히 한정되지 않고 적절하게 선택하면 양호하지만, 예를 들면, 본 발명의 화합물의 양으로서, 음식품중에 0.0001 내지 1질량%, 바람직하게는 0.001 내지 1질량%, 특히 바람직하게는 0.005 내지 1질량%으로 하는 것이 양호하다.
본 발명의 음식품에 있어서의 용도로서는, 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선 효과를 이용하는 여러 가지 용도를 취하는 것이 가능하다. 예를 들면, 「인슐린 생산이 낮은 쪽」,「인슐린의 기능이 낮은 쪽」, 또는「췌장의 기능이 걱정되는 쪽」에 적합한 음식품, 췌장 기능 저하에 의해 야기되는 당뇨병 및 과도한 알코올 섭취나 스트레스로부터 야기되는 췌장염 등의 생활 습관병의 위험 요인의 감소·제거에 도움이 되는 음식품 등의 용도를 예시할 수 있다.
한편, 본 발명의 음식품에 있어서, 「췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선」이란, 췌장 내분비선 세포의 기능 저하에 기인하여 유도되는 여러 가지 건강에 대한 해를 개선 또는 예방하는 것을 의미하고 있으며, 「랑게르한스섬 기능 보호」,「랑게르한스섬 기능 개선」,「β세포 기능 보호」,「β세포 기능 개선」,「인슐린 생산 증강」,「인슐린 생산 저하 예방」,「인슐린 작용 증강」,「인슐린 작용 저하 예방」등도, 상기「췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선」과 동일한 의미로서, 본 발명에서 예시할 수 있다.
또한, 본 발명의 음식품은 췌장 내분비선 세포의 기능 저하에 의해 야기되는 질환, 예를 들면 급성 췌장염, 만성 췌장염, I형 당뇨병, II형 당뇨병에서의 췌장 기능 장애, 노인성의 인슐린 분비 저하에 따르는 췌장 기능 저하증 등의 질환의 예방에 유용하다. 또한, 본 발명의 음식품은 췌장 내분비선 세포의 기능 저하에 기인하는 여러 가지 질병·합병증 등의 예방 및 이러한 질병·합병증 등의 리스크를 감소시키는 것이 가능하다. 또한, 본 발명의 화합물은 저독성인 점에서, 본 발명의 음식품은 췌장암 치료에 있어서 항종양제를 투여하고 있는 환자에게도 유용하다.
이러한 췌장 내분비선 세포의 기능 저하에 기인하는 여러 가지 질병·합병증으로서는, 신경장애, 신증, 망막증, 백내장, 대혈관 장애, 당뇨병 등을 예시할 수 있다.
본 발명의 음식품은 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선을 위해 사용된다는 취지의 표시를 붙인 음식품, 예를 들면「췌장 내분비 선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선용으로 표시된, 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선 효과를 갖는 화합물을 함유하는 음식품」, 또는「췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선용으로 표시된, 식물 추출물을 함유하는 음식품」,「췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선용으로 기재된, 알로에베라 추출물을 함유하는 음식품」 등으로서 판매하는 것이 바람직하다.
한편, 이상과 같은 표시를 하기 위해서 사용하는 문언은, 「췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선용」이라는 문언에만 한정되는 것은 아니며, 이 이외의 문언이더라도, 췌장 내분비선 세포를 보호하고, 또는 기능 저하를 개선하는 효과를 나타내는 문언이면, 본 발명의 범위에 포함되는 것은 말할 필요도 없다. 이와 같은 문언으로서는, 예를 들면, 수요자에 대하여, 췌장 내분비선 세포를 보호하고, 또는 기능 저하를 개선하는 효과를 인식시키는 여러 가지 용도에 근거하는 표시도 가능하다. 예를 들면, 「인슐린 생산이 낮은 쪽에 적합하다」, 또는「인슐린의 기능이 낮은 쪽에 적합하다」,「인슐린 기능 또는 인슐린 생산 저하에 의해 야기되는 당뇨병 및 과도한 알코올 섭취나 스트레스에 의해 야기되는 췌장염 등의 생활 습관병의 위험 요인(리스크)의 감소·제거에 도움이 된다」 등의 표시를 예시할 수 있다.
상기「표시」란, 수요자에 대하여 상기 용도를 알리기 위한 모든 행위를 의미하며, 상기 용도를 상기(想起)·유추시킬 수 있는 표시이면, 표시의 목적, 표시의 내용, 표시하는 대상물·매체 등의 어느 것에 상관없이, 전부 본 발명의「표시 」에 해당한다. 그러나, 수요자가 상기 용도를 직접적으로 인식할 수 있는 표현에 의해 표시하는 것이 바람직하다. 구체적으로는, 본 발명의 음식품에 관련된 상품 또는 상품의 포장에 상기 용도를 기재하는 행위, 상품 또는 상품의 포장에 상기 용도를 기재한 것을 양도, 인도, 양도 또는 인도를 위해 전시하고, 수입하는 행위, 상품에 관한 광고, 가격표 또는 거래 서류에 상기 용도를 기재하여 전시하고, 또는 반포하며, 또는 이들을 내용으로 하는 정보에 상기 용도를 기재하여 전자기적(인터넷 등) 방법에 의해 제공하는 행위 등을 예시할 수 있다.
한편, 표시로서는, 행정 등에 의해서 인가된 표시(예를 들면, 행정이 정하는 각종 제도에 기초하여 인가를 받아, 이와 같은 인가에 기초를 둔 형태로 하는 표시)인 것이 바람직하고, 특히 포장, 용기, 카탈로그, 팜플렛, POP 등의 판매 현장에서의 선전재, 그 밖의 서류 등에 대한 표시가 바람직하다.
또한, 예를 들면, 건강 식품, 기능성 식품, 경장 영양 식품(enteric nutritive food), 특별 용도 식품, 영양 기능 식품, 의약용 부외품 등으로서의 표시를 예시할 수 있으며, 기타 일본 후생노동부에 의해서 인가되는 표시, 예를 들면, 특정 보건용 식품, 이와 유사한 제도에서 인가되는 표시를 예시할 수 있다. 후자의 예로서는, 특정 보건용 식품으로서의 표시, 조건부 특정 보건용 식품으로서의 표시, 신체의 구조나 기능에 영향을 준다는 취지의 표시, 질병 리스크 감소 표시 등을 예시할 수 있으며, 상세하게 말하면, 건강 증진법 시행 규칙(평성 15년 4월 30일 일본 후생노동성령 제86호)에 규정된 특정 보건용 식품으로서의 표시(특히 보건 용도의 표시) 및 이와 유사한 표시를 전형적인 예로서 열거할 수 있다.
다음에 실시예를 나타내어 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하지만, 본 발명은 이하의 실시예에 한정되는 것이 아니다.
[제조예 1]
이하, 알로에베라로부터의 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 제조예를 나타낸다.
알로에베라로부터, 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을, 이하에 나타낸 바와 같이 하여 추출, 정제하였다.
알로에베라의 엽육(투명 겔 부분) 100kg을 균질기를 사용하여 액상화하고, 여기에 100L의 아세트산에틸/부탄올 혼합액(3:1)을 첨가하여 교반하였다.
밤새 방치한 후, 아세트산에틸/부탄올 혼합액과 수층을 분액하여 아세트산에틸/부탄올 혼합액을 회수하였다. 이러한 아세트산에틸/부탄올 혼합액을 감압하 농축하여 수득된, 아세트산에틸/부탄올 혼합액 추출물의 중량은 13.5g이었다.
상기 수층 및 아세트산에틸/부탄올 혼합액 추출물을 사용하여, 후술의 참고예 1에 나타내는 당뇨병 모델 마우스를 사용한 고혈당 개선 작용의 평가를 실시한 결과, 아세트산에틸/부탄올 혼합액 추출물에 동 작용이 확인되었기 때문에, 이러한 추출물 중의 성분의 분리, 정제를 시도하였다. 우선, 상기 추출물을 박층 크로마토그래피(머크사 제조, 실리카 겔 60F254 및 RP-18F2543)에 의해 검토한 결과, 클 로로포름/메탄올 혼합액을 사용한 순상 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의한 분리방법이 적절하다고 생각되었다. 그래서, 실리카 겔 60(머크사 제조)를 400g 충전한 칼럼에, 상기 추출물 13g을 1㎖의 클로로포름/메탄올 혼합액(1:1)에 용해시킨 용액을 흘려 칼럼에 흡착시킨 후, 클로로포름/메탄올 혼합액을 사용하여, 메탄올 농도를 단계적으로 상승시키는 단계적 구배법(클로로포름:메탄올=100:1, 25:1, 10:1, 5:1 및 1:1의 각 혼합비)에 의해 용출하여, 상기 혼합액의 혼합비마다 용출액을 분획하였다. 각 분획의 용매 제거후의 조 정제물 수득량은, 각각 1.44g, 3.0g, 1.17g, 1.28g, 2.27g이었다. 이러한 분획 중, 클로로포름:메탄올=5:1로 용출된 분획(조 정제물 A)에 활성 성분이 존재하는 것을, 상기 모델 동물을 사용한 방법으로 확인하였다. 또한, 박층 크로마토그래피로 분석한 결과, 발바로인 및 알로에에모딘의 존재는 확인되지 않았다.
또한, 상기 조 정제물 A로부터 활성 성분의 분리 정제를 실시하기 위해서, 이러한 조 정제물 A를 박층 크로마토그래피(머크사 제조, 실리카 겔 60F254 및 RP-18F2543)를 사용하여 검토한 결과, 메탄올을 사용한 역상 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의한 분리 방법이면 적절하다고 생각되었다. 그래서 상기 조 정제물 A를 1㎖의 클로로포름/메탄올 혼합액(1:1)에 용해시켜 코스모실 140[참조: 나카라이테스크사 제조]를 180g 충전한 칼럼에 흘려 칼럼에 흡착시킨 후, 메탄올 85% 용액, 600㎖, 메탄올 95% 용액, 600㎖, 메탄올 100%, 100㎖로 순차 용출하였다. 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올은, 95% 메탄올의 용출 분획에 농축 분리되어 있고, 이의 용매 제거후의 중량은 370mg이었다. 이하, 이를 화합물 1이 라고 한다.
화합물 1을 박층 크로마토그래피의 검토를 실시한 결과, β-시토스테롤글루코사이드에 매우 가까운 Rf 값을 나타내는 점에서, 아글리콘부에 당이 1분자 결합하고 있는 배당체인 것이 예측되었다. 또한, 화합물 1의 당 조성에 관해서 조사하기 위해서, 화합물 1을 메탄 분해(Methanolysis)후, TMS 유도체로 하여 GC-MS를 사용한 측정을 실시하였다. 그 결과, 화합물 1의 당 부분의 TMS 유도체를 측정한 경우의 메인 피크는, 보유 시간 14.28min, 14.61min, 16.34min에 나타나고, 표준품 글루코스[참조: 나카라이테스크사 제조]의 메인 피크인 14.27min, 14.60min, 16.33min과 거의 일치하였다. 또한, 표준품 갈락토스[참조: 키시다사 제조] 및 표준품 크실로스[참조: 키시다사 제조]의 메인 피크에 해당하는 피크는 보이지 않았다. 따라서, 화합물 1에 포함되어 있는 당의 종류는 글루코스인 것이 확인되었다.
이상의 결과로부터, 화합물 1은 아글리콘부에 글루코스가 1분자 결합하고 있는 배당체인 것이 추정되었다. 그러나, 화합물 1을 13C-NMR(125MHz, CDCl3)로 측정한 결과, 협잡물의 존재가 확인되었기 때문에, 구조 결정에는 한층 더 정제가 필요하다고 생각되었다. 그래서, 화합물 1을 메탄 분해한 후, 아세틸화하여 아글리콘부의 구조 및 아글리콘부와 당의 결합 부위를 확인하였다. 이하에 이러한 방법을 나타낸다.
50mg의 화합물 1을 5% 염산을 포함하는 메탄올(50㎖)에 용해시킨 후, 6시간 동안 가열 환류하여 메탄 분해한 후, 건조시켜 잔사를 수득하였다(약 30mg). 당해 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(헥산:클로로포름=9:1)로 정제하여 화합물 2(10mg)을 수득하였다. 당해 화합물 2(5mg)에 무수아세트산·피리딘(각 2방울)을 가하여 70℃에서 30분 동안 가열하여 아세틸화한 후, 반응액의 용매를 증류 제거하여 화합물 3을 수득하였다. 당해 화합물 3을 GC-MS 및 13C-NMR(125MHz, CDCl3)로 분석을 실시한 결과를, 각각 도 1 및 도 2에 도시한다. 측정 조건 및 결과는 이하와 같다. 또한, 표준 물질로서 사용한 3-아세톡시-4-메틸에르고스트-7-엔은, 알로에로부터 추출 정제한 후, 13C-NMR로 구조를 확인한 후, 아세틸화하여 제조하였다.
〔13C-NMR 스펙트럼(d 값, in CDCl3 중)〕; C-1:36.8, C-2:27.3, C-3:78.7, C-4:37.0, C-5:46.9, C-6:26.8, C-7:117.4, C-8:139.4, C-9:49.7, C-10:34.9, C-11:21.6, C-12:39.7, C-13:43.6, C-14:55.1, C-15:23.1, C-16:28.2, C-17:56.3, C-18:12.0, C-19:14.2, C-20:36.5, C-21:19.0, C-22:33.9, C-23:30.6, C-24:39.1, C-25:32.6, C-26:20.4, C-27:18.4, C-28:15.6, C-29:15.3
〔GC-MS〕
장치: GC-17A/GCMS5050A(SHIMADZU)
GC 칼럼: NEUTRA BOND-5(GL Scienses)
칼럼 온도: 100℃(2분)→(10℃/분)→300℃(28분)
주입 온도: 250℃,
캐리어 가스: He(1.3㎖/분)
인터페이스 온도: 300℃
MS 모드: EI
이온화 에너지: 70eV
〔결과〕
표준 물질: 3-아세톡시-4-메틸에르고스트-7-엔: tR[min]=39.4; m/z 456[M]+, 441[M-CH3]+, 396[M-AcOH]+, 381[M-CH3-AcOH]+
화합물 3: tR[min]=39.2; m/z 456[M]+, 441[M-CH3]+, 396[M-AcOH]+, 381[M-CH3-AcOH]+
NMR의 측정 결과로부터 화합물 3은 3-아세톡시-4-메틸에르고스트-7-엔의 문헌값과 일치하였다[참조: 유화학, 제36권, 제5호, 제301 내지 319페이지, 1987년]. 이러한 결과로부터 화합물 2는 4-메틸에르고스트-7-엔-3-올인 것이 판명되었다. 또한, FAB-MS를 사용한 측정의 결과, 화합물 1의 분자량은 576이었다. 화합물 2(아글리콘부)와 글루코스를 탈수축합한 경우, 수득되는 화합물의 분자량은, 414(화합물 2)+180(글루코스)-18(물)=576이 되고, 화합물 1의 분자량과 일치하였다.
이상의 결과로부터, 화합물 1의 구조는, 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올인 것이 밝혀졌다.
이하 각각의 분자식, 분자량, 화학식을 나타낸다.
(화합물 1)
분자식: C35H60O6
분자량: 576
화학식: 하기 화학식 1
화학식 1
Figure 112007032799034-PCT00002
(화합물 2)
분자식: C29H50O
분자량: 414
화학식: 하기 화학식 2
Figure 112007032799034-PCT00003
(화합물 3)
분자식: C31H52O2
분자량: 456
화학식: 하기 화학식 3
Figure 112007032799034-PCT00004
[제조예 2]
알로에베라의 엽육(투명 겔 부분)을 가열 건조시켜 분쇄한 건조 알로에베라 분말 O.3g에, 60%, 80%, 또는 100% 에탄올 60㎖을 가한 후, 60℃에서 1시간 동안 가열 환류하였다. 추출액을 1500rpm으로 20분간 원심분리하여, 상등액을 감압하에 서 농축시켜 완전히 에탄올을 제거하여 조 추출물을 수득하였다. 60%, 80% 및 100% 에탄올을 사용한 추출에 의해 수득된 조 추출물의 건조 중량은, 각각 65mg, 42mg, 18mg이었다. 이러한 조 추출물이 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 포함하는 것을, 박층 크로마토그래피로 확인하였다.
[제조예 3]
알로에베라의 엽육(투명 겔 부분)을 가열 건조시켜 분쇄한 건조 알로에베라 분말 O.3g에, 물 60㎖를 가한 후, 95℃에서 5시간 동안 가열 환류하였다. 추출액을 1500rpm으로 20분 동안 원심분리하고 상등액을 동결 건조시켜 75mg의 조 추출물을 수득하였다. 당해 조 추출물이 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 포함하는 것을 박층 크로마토그래피로 확인하였다.
[제조예 4]
알로에베라의 엽육(투명 겔 부분)을 가열 건조시키고, 이를 분쇄하고 추가로 건조시켜 제조한 알로에베라 분말 21kg에, 클로로포름/메탄올 혼합액(2:1) 9lℓ를 가한 후, 실온에서 밤새 침지한 후, 여과하여 여과 잔사에 다시 클로로포름/메탄올 혼합액(2:1) 9lℓ를 첨가하고, 동일한 조작을 총 4회 실시하였다. 수득된 여과액(35lℓ)을 28℃에서 농축시키고 최종적으로 조 추출물 784g을 수득하였다. 이 중에서 780g의 조 추출물에 클로로포름/메탄올 혼합액(2:1) lℓ를 첨가하고, 1시간 동안 교반한 후, 여과하여 클로로포름/메탄올 혼합액층을 회수하였다(A). 여과 잔 사는 물 2.lℓ 및 아세트산에틸 lℓ를 순차 첨가하고 1시간 동안 교반한 후, 아세트산에틸층(B)을 회수하여, 남은 수층에 클로로포름 5ℓ를 다시 첨가하고, 1시간 동안 교반한 후, 클로로포름층(C)을 회수하였다.
회수한 A, B 및 C의 유기 용매 추출액을 혼합하여 23℃에서 농축한 후, 실리카 겔 칼럼〔유리 칼럼: 52mm×350mm, 충전제: IR-63/210-W(다이소 가부시키가이샤 제조)〕에 첨가하였다. 이어서, 박층 크로마토그래피로 용출물을 모니터링하면서, 헥산/클로로포름 혼합액(1:1)을 10ℓ, 클로로포름을 10ℓ, 클로로포름/메탄올 혼합액(10:1)을 20ℓ, 클로로포름/메탄올 혼합액(5:1)를 20ℓ의 순서로 칼럼에 통액하고, 각 용출 용매의 순서로 분획 1(약 lℓ), 분획 2(약 1.5ℓ), 분획 3(약 1.5ℓ), 분획 4(약 1.5ℓ)를 회수하였다.
이 중, 분획 3에 목적의 배당체를 포함하는 것을 박층 크로마토그래피로 확인한 후, 용매를 제거하여 조 추출물 131.6g을 수득하였다. 당해 조 추출물 130g에 관해서, 다시 실리카 겔 칼럼〔유리 칼럼: 70mm×500mm, 충전제: SP-60-40/60(다이소 가부시키가이샤 제조)〕에 첨가하여, 클로로포름/메탄올 혼합액(30:1)을 10ℓ, 클로로포름/메탄올 혼합액(20:1)을 50ℓ, 클로로포름/메탄올 혼합액(10:1)을 10ℓ, 클로로포름/메탄올 혼합액(1:1)을 10ℓ를 각각 용출 용매로 하고, 압: 10kgfcm-2, 유속: 40㎖/min의 조건으로 순차 용출시켰다. 용출액은 분획 콜렉터에 의해서 100㎖씩 분획하여, 분획 1 내지 8를 회수하였다.
회수한 분획을 박층 크로마토그래피로 확인한 결과, 분획 7에 목적으로 하는 배당체와 협잡물이 존재하고 있는 것이 밝혀졌기 때문에, 당해 분획을 농축시키고, 다시 실리카 겔 칼럼〔유리 칼럼: 70mm×500mm, 충전제: SP-60-40/60(다이소 가부시키가이샤 제조)〕에 첨가하고, 클로로포름/메탄올 혼합액(20:1)을 10ℓ, 클로로포름/메탄올 혼합액(10:1) 10ℓ를 각각 용출 용매로 하고, 압: 10kgfcm-2, 유속: 40㎖/min의 조건으로 순차 용출시켰다. 그 결과, 클로로포름/메탄올 혼합액(10:1)의 용출 분획에 포함되는 목적의 배당체인 3-O-β-D-글루코피라노실-4--메틸에르고스트-7-엔-3-올을 25.3g 제조하였다.
참고예 1
본 시험은 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 고혈당 상태의 개선 효과를 평가하기 위해서 실시하였다.
(1) 시료의 제조
상기 제조예 1에서 제조한 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 시험 시료로 하였다.
(2) 시험 방법
II형 당뇨병 모델 마우스로서, 6주령, 웅성 db/db 마우스(니혼쿠레아사로부터 구입)를 사용하였다. 당해 마우스를 1군 7마리로 군 분류하였다. 시험 시료를 DMSO에 용해시킨 후, 생리식염수로 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 농도를 15㎍/㎖로 조정하였다. 최종 DMSO 농도는 0.2%로 조정하였다. 당해 II형 당뇨병 모델 마우스에게 1일 1회 존데를 사용하여 시험 시료 용액을 1ℓ씩 연일 경구 투여하였다. 한편, 시험 시료를 포함하지 않는 용액을 음성 시료로 하였다. 공복시 혈당치 및 통상 혈당치는 안트센스 II[참조: 바이엘산쿄사 제조]로 경시적으로 측정하였다. 공복시 혈당치는 15시간의 절식후에 측정하였다.
(3) 고혈당 개선 효과
도 3 및 도 4에 통상 혈당치 및 공복시 혈당치의 시험 시료 투여 기간중의 경시적 변화를 도시한다. 음성 시료를 투여한 마우스에서는 통상 혈당치 및 공복시 혈당치 중 어느 것에 있어서도 급격한 혈당치의 상승이 관찰되었지만, 시험 시료를 연속 투여한 마우스에 있어서는, 분명히 혈당치의 상승을 억제하는 효과가 관찰되었다.
〔시험예 1〕
본 시험은 췌장 기능 저하 또한 췌장 조직 장애의 모델 동물로서 알려져 있는 db/db 마우스를 사용하여, 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 췌장 내분비 세포의 기능(인슐린 생산능)의 보호 작용을 평가하기 위해서 실시하였다.
(1) 시료의 제조
상기 제조예 1에서 제조한 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔- 3-올을 시험 시료로 하였다.
(2) 시험 방법
본 시험에 있어서, 마우스는 6주령, 웅성 db/db 마우스(니혼쿠레아사로부터 구입)를 사용하였다. 상기 마우스를 1군 7마리로 군 분류하였다. 각 시험 시료를 DMSO에 용해시킨 후, 생리식염수로 0.1 또는 1㎍/㎖로 조정하였다. 최종 DMSO 농도는 0.2%로 조정하였다. 당해 모델 마우스에게 각각 1㎖씩, 1일 1회, 존데를 사용하여 경구 투여를 42일간 연속으로 실시하였다. 연속 투여 43일째에 혈청중의 인슐린량을 레비스 인슐린 마우스 ELISA 키트[참조: 시바야기사 제조]를 사용하여 측정하였다.
(3) 시험결과
시료 연속 투여 43일째의 혈청중 인슐린량을 표 1에 기재한다. 시험 시료 1을 1㎍/마리의 농도로 투여한 경우, 혈청중 인슐린량은 음성 시험의 216%로 높고, 확실히 췌장 기능(인슐린 생산능)의 보호 효과가 나타났다. 한편, 0.1㎍/마리의 농도로 투여한 경우, 유의적인 효과는 보이지 않았다. 또한, 투여 기간중, 체중 및 병리적인 소견으로부터도 부작용은 전혀 나타나지 않았다.
Figure 112007032799034-PCT00005
〔시험예 2〕
본 시험은 췌장 기능 저하 또한 췌장 조직 장애의 모델 동물로서 알려져 있는 db/db 마우스를 사용하여, 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올의 췌장 조직의 보호 작용에 관해서 검토하였다.
(1) 시료의 제조
상기 제조예 1에서 제조한 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올을 시험 시료로 하였다.
(2) 시험 방법
본 시험에 있어서 마우스는 6주령, 웅성 db/db 마우스(니혼쿠레아사로부터 구입)를 사용하였다. 상기 마우스를 1군 7마리로 군 분류하였다. 각 시험 시료를 DMSO에 용해시킨 후, 생리식염수로 1㎍/㎖로 조정하였다. 최종 DMSO 농도는 0.2%로 조정하였다. 모델 마우스에게 각각 1㎖씩, 1일 1회, 존데를 사용하여 경구 투여를 42일간 연속으로 실시하였다. 연속 투여 43일째에 췌장을 적출하여 십이지장측으로부터 상류, 중류, 하류의 3부분으로 나누고, 포르말린액으로 고정시킨 후, 통상의 방법에 따라서 파라핀 블록을 제작하였다. 파라핀 블록에 의해 절편 슬라이드를 제작하고, 헤마톡실린-에오진 염색을 실시하였다. 췌장 3개 위치의 절편상에 존재하는 랑게르한스섬의 수 및 절편중의 최대 면적을 갖는 랑게르한스섬의 면적을, 현미경(니콘사제「ECLIPSE E600」)의 접안 마이크로미터를 사용하여 측정하였다.
(3) 시험 결과
시료 연속 투여 43일째에서의 췌장 절편중의 랑게르한스섬 수를 표 2에, 랑게르한스섬의 최대 면적을 표 3에 기재한다. 시험 시료를 투여한 마우스의 랑게르한스섬의 수는, 음성 시험 투여 마우스에서의 랑게르한스섬 수의 188%가 되어 명백히 많은 것을 알 수 있었다. 동일하게, 시험 시료를 투여한 마우스에서의 랑게르한스섬의 최대 면적은 음성 시험의 3.6배의 크기를 유지하고 있고, 췌장 장애에 의한 랑게르한스섬의 축소를 예방하고 있는 것을 알 수 있었다. 이러한 결과로부터, 3-O-β-D-글루코피라노실-4-메틸에르고스트-7-엔-3-올은 췌장 조직, 특히 내분비세포의 보호 작용을 갖는 것이 명백해졌다.
Figure 112007032799034-PCT00006
Figure 112007032799034-PCT00007
본 발명의 의약 및 음식품은 안전하게 투여 또는 섭취할 수 있고, 췌장 내분비선 세포를 보호하며, 기능을 개선하는 작용을 갖는다. 또한, 본 발명의 의약 및 음식품은 바람직하게는, 의약 또는 음식품으로서 바람직하지 못한 성분인 발바로인 또는 알로에에모딘을 포함하지 않는다.

Claims (17)

  1. 화학식 1의 화합물을 유효 성분으로서 함유하는 췌장 기능 개선을 위한 의약.
    화학식 1
    Figure 112007032799034-PCT00008
  2. 제1항에 있어서, 췌장 기능 개선이 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선인 의약.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 화학식 1의 화합물을 건조 질량으로 0.001 내지 10질량% 포함하는 의약.
  4. 화학식 1의 화합물을 건조 질량으로 0.001 내지 10질량% 포함하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로서 함유하는 췌장 기능 개선을 위한 의약.
    화학식 1
    Figure 112007032799034-PCT00009
  5. 제4항에 있어서, 췌장 기능 개선이 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선인 의약.
  6. 화학식 1의 화합물을 함유하는 췌장 기능 개선을 위한 음식품.
    화학식 1
    Figure 112007032799034-PCT00010
  7. 제6항에 있어서, 췌장 기능 개선이 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선인 음식품.
  8. 제6항 또는 제7항에 있어서, 화학식 1의 화합물을 건조 질량으로 0.0001 내 지 1질량% 포함하는 음식품.
  9. 화학식 1의 화합물을 건조 질량으로 0.0001 내지 1질량% 포함하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 췌장 기능 개선을 위한 음식품.
    화학식 1
    Figure 112007032799034-PCT00011
  10. 제9항에 있어서, 췌장 기능 개선이 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선인 음식품.
  11. 제6항 내지 제10항 중 어느 하나의 항에 있어서, 췌장 기능 개선을 위해 사용된다는 취지의 표시를 부착한 음식품.
  12. 췌장 기능 개선을 위한 의약의 제조에 있어서의, 화학식 1의 화합물 또는 이를 포함하는 조성물의 사용.
    화학식 1
    Figure 112007032799034-PCT00012
  13. 제12항에 있어서, 췌장 기능 개선이 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선인 사용.
  14. 제12항 또는 제13항에 있어서, 조성물이 화학식 1의 화합물을 건조 질량으로 0.001질량% 이상 포함하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물인 사용.
  15. 췌장의 기능 개선을 하는 방법으로서, 화학식 1의 화합물 또는 이를 포함하는 조성물을, 췌장의 기능 개선을 하고자 하는 대상에 투여함을 특징으로 하는 방법.
    화학식 1
    Figure 112007032799034-PCT00013
  16. 제15항에 있어서, 췌장의 기능 개선이 췌장 내분비선 세포의 보호 또는 췌장 내분비선 세포의 기능 개선인 방법.
  17. 제15항 또는 제16항에 있어서, 조성물이 화학식 1의 화합물을 건조 질량으로 0.001질량% 이상 포함하는 백합과 식물의 추출물 또는 이의 분획물인 방법.
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2611086C (en) 2005-09-22 2011-06-21 Morinaga Milk Industry Co., Ltd. Agent for inhibiting visceral fat accumulation
KR100999317B1 (ko) * 2005-09-30 2010-12-09 모리나가 뉴교 가부시키가이샤 인슐린 저항성 개선제
KR101434129B1 (ko) * 2008-11-19 2014-08-26 모리나가 뉴교 가부시키가이샤 항산화제
CN105029618A (zh) * 2015-08-21 2015-11-11 王璐 一种治疗内分泌失调的饮料
CN109364019B (zh) * 2015-09-02 2021-12-28 盛世泰科生物医药技术(苏州)有限公司 一种用于预防和治疗白内障的眼用制剂及其制备方法

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS60214741A (ja) 1984-04-05 1985-10-28 Toyo Yakushiyoku Kogyo Kk 血糖降下剤
JP2880434B2 (ja) * 1995-09-05 1999-04-12 恒和化学工業株式会社 ギムネマ・イノドラム焙煎茶
JP3945846B2 (ja) * 1995-11-09 2007-07-18 武田薬品工業株式会社 膵臓機能改善剤
CN1202112A (zh) * 1995-11-09 1998-12-16 武田药品工业株式会社 增强胰腺功能的组合物
JPH10330266A (ja) 1997-06-02 1998-12-15 Kotarou Kanpo Seiyaku Kk インスリン作用増強活性組成物
US6013259A (en) * 1997-09-22 2000-01-11 De De La Pena; Nuria E. A. C. Patent on use of aloe vera ophthalmic solution for treatment of the dry eye syndrome, inflammations, ulcerations, alkaline or acid burns, infections, and cataracts
US6133440A (en) 1997-10-10 2000-10-17 Univera Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of immunomodulatory polysaccharides from aloe
CA2348292A1 (en) * 1998-10-30 2000-05-11 Takeda Chemical Industries, Ltd. Betacellulin protein-containing preparation
JP4918201B2 (ja) * 2001-09-13 2012-04-18 株式会社 日本薬用食品研究所 糖尿病の予防及び治療剤
JP4086492B2 (ja) * 2001-10-02 2008-05-14 協和醗酵工業株式会社 糖尿病治療用医薬
WO2003059360A1 (en) 2002-01-11 2003-07-24 Medical Isotopes, Inc. Novel cholesterol absorption lowering agents
JP2003286185A (ja) * 2002-03-29 2003-10-07 Daily Foods Kk アロエベラ圧搾液及び該圧搾液を有効成分とする血糖値降下剤
CN1468607A (zh) * 2002-06-10 2004-01-21 宋玉麟 治糖尿病配方
CN100484555C (zh) * 2003-01-07 2009-05-06 无锡杰西医药科技有限公司 一种库拉索芦荟提取物在制备预防和治疗糖尿病方面的药物和保健品中的应用
EP1731527B1 (en) * 2004-03-31 2012-10-10 Morinaga Milk Industry Co., Ltd. Glycoside having 4-methylergost-7-en-3-ol skeleton and drug for ameliorating hyperglycemia

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Free format text: TRIAL DECISION FOR APPEAL AGAINST DECISION TO DECLINE REFUSAL REQUESTED 20090416

Effective date: 20101214