KR20070059503A - Burkholderia sp. ppk003 strain and methods of promoting turfgrass growth and preventing turfgrass disease by using it - Google Patents

Burkholderia sp. ppk003 strain and methods of promoting turfgrass growth and preventing turfgrass disease by using it Download PDF

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Abstract

A microorganism Burkholderia sp. PPK003 and methods for promoting turfgrass growth and preventing turfgrass disease by using the same microorganism are provided to promote growth of turfgrass and inhibit growth of plant pathogenic bacteria causing turfgrass disease simultaneously, so that quality and production efficiency of the turfgrass are improved. The microorganism Burkholderia sp. PPK003(KCCM 10712P) isolated from the soil having turfgrass is provided. The microbial agent for promoting turfgrass growth and preventing turfgrass disease contains Burkholderia sp. PPK003(KCCM 10712P). The turfgrass growth is promoted and turfgrass disease is prevented by spraying Burkholderia sp. PPK003(KCCM 10712P) or the microbial agent containing Burkholderia sp. PPK003(KCCM 10712P) into the turfgrass or the soil with turfgrass.

Description

버크홀데리아 종 PPK003 균주 및 이를 이용한 잔디생장 및 잔디병 발생 억제 방법{Burkholderia sp. PPK003 strain and Methods of Promoting Turfgrass Growth and Preventing Turfgrass Disease by using it} Burkholderia spp. 003 strain and method for inhibiting turf growth and turf disease development using the same {Burkholderia sp. PPK003 strain and Methods of Promoting Turfgrass Growth and Preventing Turfgrass Disease by using it}

도 1 는 PPK003 에 의한 잔디의 생장 촉진 사진. A: 대조구, B: 양성대조구, C: PPK003 처리 사진은 실험 종료 후 촬영되었다. 1 is a photograph showing growth growth of grass by PPK003. A: control, B: positive control, C: PPK003 treatment pictures were taken after the end of the experiment.

도 2는 PPK003에 의한 잔디의 생장 촉진 사진을 보인다. 대조구 및 양성대조구인 KLP, 미생물 제재 파인필드와 비교하였다. 대조구의 성장이 거의 없었던 거에 비해서 PPK003 실험구에서는 잔디 지상부의 성장이 두드러지게 촉진되었으며, 뿌리 길이 또한 많이 촉진된 것을 보인다. Figure 2 shows a growth promoting picture of the grass by PPK003. Control and positive control KLP, microbial preparation pinefield was compared. Compared to that of the control, the growth of the grassy ground was significantly promoted in the PPK003, and the root length was also greatly promoted.

도 3 는 PPK003 가 잔디 병원균에 길항력을 가지는 것을 보인다. A: 잔디 동전마름병(dollar-spot) 병원균에 대한 길항력, B: 라지패치(large-patch) 병원균에 대한 길항력, C: 브라운패치(brown-patch) 병원균에 대한 길항력을 보인다. 3 shows that PPK003 has antagonistic activity against grass pathogens. A: Antagonist against grass-spot pathogen, B: Antagonist against large-patch pathogen, C: Antagonist against brown-patch pathogen.

본 발명은 잔디가 식재된 토양에서 순수 분리되어진 신규한 Burkholderia 균주 및 이의 용도에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 잔디의 병원균에 항진균 활성을 보이는 Burkholderia sp. PPK003 (수탁번호: KCCM 10712P)에 관한 것으로서, 상기 미생물을 이용하여 잔디 병원균을 억제하는 방법, 및 상기 미생물을 이용하여 잔디의 생장을 촉진하는 방법에 관한 것이다. The present invention relates to a novel Burkholderia strain that is purely isolated from soil planted with grass and its use, and more particularly Burkholderia sp. PPK003 (Accession No .: KCCM 10712P), relates to a method for inhibiting grass pathogens using the microorganisms, and a method for promoting grass growth using the microorganisms.

기존의 화학농약은 극심한 환경오염을 초래하고 있을 뿐만 아니라, 생태계의 먹이사슬을 따라 농축되어서, 인간의 건강에 심각한 영향을 미친다. 또한 기존의 화학농약들에 대한 미생물의 저항성 증가로 인하여, 더 많은 양의 농약 사용이 되는 문제점이 있다. 따라서 환경오염을 축소하며, 무공해의 미생물농약의 개발이 절실히 요구되고 있다.Existing chemical pesticides not only cause severe environmental pollution, but also concentrate along the food chain of the ecosystem, which seriously affects human health. In addition, due to the increased resistance of microorganisms to conventional chemical pesticides, there is a problem that the use of a larger amount of pesticides. Therefore, reducing environmental pollution, the development of pollution-free microbial pesticides are urgently required.

농업에 유용한 몇 가지 미생물의 종류 및 특성은 다음과 같다. 우선, 유산균은 공기가 있건 없건 20~40℃에서 대단히 빠른 속도로 자라며, 배양 과정 중 유산을 생산하며 산도를 저하(pH 4)시키고 과산화수소(H2O2)를 생성함으로써 병원성 미생물의 증식을 억제하며 토양 병해를 방지한다고 알려져 있다. 또한 각종의 생리활성물질(비타민, 아미노산, 핵산 등), 항균물질, 항암물질을 생산함으로써 작물의 경우 식물체 자기방어능력을 증가시키며, 가축의 경우 장내 미생물상 안정화, 사료효율증가, 내병성증가 효과를 나타내는 것으로 밝혀지고 있다. 또한, 효모는 쌀겨, 밀기울 등 농사 부산물의 발효 시 열 발생의 주요 미생물로서 유기물 분해 능력이 뛰어나며 다양한 조건에서도 발효력 및 생존력을 나타낸다. 따라서 악취발생원(축사바닥등)에 살포시 악취제거 효과를 발휘하는 것으로 알려져 있다. 방선균의 경우, 병원성 곰팡이의 천적미생물로서 토양내에서 자라면서 병원균을 죽이거나 생육을 정지시키는 항생물질을 만들어내는 유익균이다. 양질의 활성화된 토양 유기질을 많이 넣은 토양은 방선균의 밀도가 높은 특징이 있다. 퇴비발효 시 유기질을 많이 넣은 토양은 방선균의 밀도가 높은 특징이 있다. 퇴비 발효 시 내부 온도가 70~80℃ 일 때 퇴비 내 많이 넣은 토양의 병해억제 능력이 바로 방선균에 의하여 생성된 다량의 항생물질 때문이다. 또 흙의 고유의 냄새가 바로 방선균의 냄새이기도 하다. 버섯 배지를 살균 후 발효 시키는 이유도 방선균을 배양하기 위한 것이며 방선균 배양이 잘 된 배지는 버섯종균 접종 후 활착과정에서 잡균의 오염이 거의 없게 되는 것도 널리 알려진 사실이다. 이외에 마이코리자(Mycorrhiza)라고 하는 곰팡이는 작물뿌리에 밀착 생장하면서 토양 내 난용성 성분(특히, 인산)을 흡수하여 작물에 제공하기도 하며, 또 뿌리 표면의 물리적 방어벽 역할을 하여 뿌리 병해를 방지한다고 알려져 있다. 또한, 마치 식물처럼 햇빛을 이용하여 광합성을 행하는 광합성세균이 있으며, 이 세균은 진홍색을 띠며 균체 내 단백질 함량이 매우 높고 각종 비타민, 미네랄, 생리활성물질 및 항균, 항바이러스 물질을 생산한다고 알려져 있으며, 암모니아, 유화수소, 유기산 등 각종 악취 발생 물질을 섭취하면서 자라므로 악취 제거 효과를 나타내기도 한다. 광합성 세균은 가스 제거 역할도 수행함으로써 하우스의 미숙유기물 사용에 따른 가스피해를 방지할 수 있으며, 또한 오염된 더러운 물의 정화 능력도 있어 양어장의 정수 처리용 미생물로도 사용되기도 한다. 미생물 살충제로 널리 사용되는 비티(B/T)균은 균체 내에 독소를 만들며, 해충(청벌레, 파밤나방)의 유충이 이 독소를 먹게 되면 장이 파괴되어 죽게 된다. 최근에는 토양 유해 선충을 죽이는 B/T 균도 개발되고 있다. Some types and characteristics of microorganisms useful for agriculture are as follows. First of all, lactic acid bacteria grow very rapidly at 20-40 ℃ with or without air and produce lactic acid during the culture process, lower acidity (pH 4) and produce hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) to inhibit the growth of pathogenic microorganisms. It is known to prevent soil pests. In addition, by producing various physiologically active substances (vitamins, amino acids, nucleic acids, etc.), antibacterial substances, and anticancer substances, crops increase the self-defense ability of plants. It turns out. In addition, yeast is a major microorganism of heat generation during fermentation of agricultural by-products such as rice bran and bran, and has excellent ability to decompose organic matter and shows fermentability and viability under various conditions. Therefore, it is known to exert an odor removal effect when spraying on odor generating sources (barn floor, etc.). Actinomycetes are beneficial microorganisms that grow in soil and produce antibiotics that kill pathogens or stop their growth as natural enemies of pathogenic fungi. Activated Soil of High Quality Soil containing lots of organic material has a high density of actinomycetes. Soil containing high organic matter during fermentation has a high density of actinomycetes. When the compost fermentation temperature is 70 ~ 80 ℃, the ability to control the pests of soil in the compost is due to the large amount of antibiotics produced by actinomycetes. In addition, the unique smell of soil is the smell of actinomycetes. The reason for sterilizing the mushroom medium after fermentation is also to cultivate actinomycetes, and it is also widely known that the well-preserved actinomycetes have almost no contamination of various germs during the sticking process after inoculation. In addition, a fungus called Mycorrhiza grows in close contact with crop roots, absorbs poorly soluble components in the soil (especially phosphoric acid) and provides them to the crop, and also acts as a physical barrier on the root surface to prevent root diseases. have. In addition, there is a photosynthetic bacterium that performs photosynthesis using sunlight as if it is a plant. The bacterium has a crimson color, has a high protein content in the cells, and is known to produce various vitamins, minerals, bioactive substances and antibacterial and antiviral substances. It grows while ingesting various odor generating substances such as ammonia, hydrogen sulfide, and organic acids, and may exhibit an odor removal effect. Photosynthetic bacteria also play a role in gas removal to prevent gas damage due to the use of immature oil in the house, and also has the ability to purify contaminated dirty water, which can be used as a microorganism for treatment of fish farms. Widely used as a microbial insecticide, B / T bacteria produce toxins in the cells, and when the larvae of pests (blue worms, beetroot moths) eat this toxin, the intestines are destroyed and die. Recently, B / T bacteria have been developed that kill soil harmful nematodes.

최근 들어서, 식물 생장 및 인간의 건강에 유리하게 이용하기 위하여 토양 내 미생물상을 변화시키는 노력을 하였다. 박터라이제이션(Bacterization)이란 미생물 배양물을 작물 성장 또는 생육부위에 접종하는 것을 뜻하며 이러한 접종은 가끔 대단한 작물 수량 증대를 가져오기도 하지만, 실제로 그 접종된 미생물이 근권에서 어떠한 역할을 하는지에 대해서는 아직 분명하지 않다. 미생물은 종류에 따라 작물 생장기간 내에 근권에서 안정적으로 생존 생육함으로써 그 밀도를 유지시키는 종류가 있는 하면, 원래의 기존 근권 미생물에 의해 배척당함으로써 근권에 정착하지 못하는 것도 있다. 이 때 뿌리 주면에서 안정적으로 정착 및 증식하는 미생물을 '근권 미생물'이라 부른다. In recent years, efforts have been made to change the microbial phase in soil in order to benefit plant growth and human health. Bacterization refers to the inoculation of microbial cultures into crop growth or growth, which sometimes leads to significant crop yields, but it is still unclear what role the inoculated microbes play in the root zone. Not. Some microorganisms cannot survive in the root zone by being rejected by the original existing root zone microorganisms, as long as there is a kind that maintains its density by stably surviving and growing in the root zone within the crop growth period. At this time, the microorganisms that stably settle and proliferate at the root surface are called 'root zone microorganisms'.

미생물의 근권 정착이란 대단히 적극적인 과정으로서, 미생물이 종자표면 또는 토양 내에서 생존하면서 탄수화물과 아미노산이 풍부한 종자 분비물을 이용하여 증식하고, 뿌리 표면에서 부착하여 생장하는 뿌리를 따라 계속 이동 증식하는 전체적인 과정이다. 또한 이 근권 미생물은 관수에 의해서 수동적으로 뿌리 아랫부분까지 이동하기도 한다. The rooting settlement of microorganisms is a very active process, in which the microorganisms survive on the seed surface or in the soil and grow using carbohydrate and amino acid-rich seed secretions and continue to grow along the roots attached and growing on the root surface. . In addition, the rhizosphere microbes are passively moved to the lower part of the root by watering.

대표적인 근권미생물로서는 슈도모나스, 아조토박터, 바실러스 등이 있으면 근권 미생물 들은 그 증식속도가 빠르고, 운동성이 있으며, 뿌리 분비물을 선호하는 경향이 있는데, 식물에 유익한 영향을 주는 종류를 '식물 생장촉진 근권 미생물'이라 한다. 예전에는 식물 생장 촉진 근권 미생물의 유익 효과가 무, 감자, 사탕수수 등 뿌리 작물에 대해서만 인식되었으나 최근에는 귀리, 콩, 목화, 땅콩, 봉숭아, 벼 및 채소류 등 다양한 작물에서 그 긍정적 효과가 인정되고 있다. Representative rhizosphere microorganisms include Pseudomonas, azotobacter, and Bacillus. 'Is called. In the past, the beneficial effects of plant-derived root-root microorganisms were only recognized for root crops such as radish, potatoes and sugar cane, but recently, the positive effects have been recognized in various crops such as oats, beans, cotton, peanuts, balsam, rice and vegetables. .

미생물 접종처리에 의한 생장 촉진 효과와 병해방제효과는 동전의 양면으로 인식되어야 한다. 즉, 생장촉진효과를 가진 미생물이 병해억제효과를 가지기도 하며, 역시 병해 억제 기능 미생물이 식물 생장을 촉진한다는 사실이 많은 연구자들에 의하여 밝혀지고 있다. 일례로서 식물생장촉진 효과가 인정된 어떤 미생물(슈도모나스 세균)은 근권의 유해세균 및 곰팡이의 밀도를 저하시켜 병해를 줄여줌으로써 상대적으로 작물 생육을 촉진시킨다고 하는 연구결과가 있다.Growth promotion and pest control effects by microbial inoculation should be recognized on both sides of the coin. That is, many researchers have revealed that the microorganisms having a growth promoting effect have a pest suppression effect, and that the microorganisms with a disease inhibiting function promote plant growth. For example, some microorganisms (Pseudomonas bacteria) that have been shown to promote plant growth have been shown to promote relative growth of crops by reducing the density of harmful bacteria and fungi in the rhizosphere.

즉 지금까지 그 작용 기작이 알려진 대부분의 식물생장촉진 근권 미생물은 유해 근권 미생물을 제어함으로써 간접적으로 작물 생육을 촉진하는 것으로 알려져 있다. That is, most of the plant growth promoting root zone microorganisms known so far have been known to promote crop growth indirectly by controlling harmful root zone microorganisms.

한편 근권 미생물이 식물 생장을 촉진시키는 물질(생리활성물질)을 생산함으로써, 식물 생장을 직접적으로 촉진시키는 경우도 있다. 즉, 이들 생리활성물질은 뿌리에 의한 양분 흡수를 촉진시킴으로써 뿌리털 발육증진, 뿌리 및 줄기 생장 촉진등의 효과를 발휘한다고 알려져 있다. 결국 식물생장촉진 근권 미생물은, 병해방제에 의한 생육촉진 효과 외, 특수 생리활성 물질을 생산하여 작물 생리를 변화시킴으로써 병균 침입에 대한 식물체 자기 방어능력을 배가시켜 병해방지 및 생장촉진효과를 거두게 되는 것이다.On the other hand, rhizosphere microorganisms sometimes produce a substance (physiologically active substance) that promotes plant growth, thereby directly promoting plant growth. That is, these bioactive substances are known to exert effects such as promoting root hair growth, promoting root and stem growth by promoting nutrient absorption by the root. Eventually, plant growth-promoting root-strain microorganisms, in addition to the growth promoting effect by pest control, produce special physiologically active substances to change crop physiology to double the plant's self-defense ability against invading germs, thereby preventing disease and promoting growth. .

근권 미생물에 의한 생물학적 방제기작은 항균성, 경쟁, 용균, 특정양분고갈, 시안 생산 등에 의한다고 알려져 있다. Biological control mechanisms by rhizosphere microorganisms are known to be due to antimicrobial activity, competition, lysis, specific nutrient depletion, cyan production, and the like.

항균성의 경우, 연구실내에서 병원균에 대한 항균능(길항능)이 안정되는 근권 미생물이 작물재배현장에서도 같은 항균력이 반드시 발휘되는 아니나 많은 경우 깊은 상관도를 나타낸다. In the case of antimicrobial activity, rhizosphere microorganisms in which antimicrobial activity (antagonism) against pathogens is stabilized in the laboratory do not necessarily exhibit the same antimicrobial activity in crop cultivation sites, but in many cases, there is a deep correlation.

항균력은 주로 근권 미생물이 분비하는 항생물질과 시데로포(Siderophore)에 의한 것으로 알려져 있으나, 병해 생물방제의 주 효과는 주로 항생물질에 의한다. 예로서, 어떤 식물 생장 촉진 근권 미생물은 밀재배 토양에 투여 시 밀의 뿌리주변에 페나진이라고 하는 강력한 항생물질을 분비하여 병원균을 억제함으로써 병해 방지는 물론 수량증대 효과를 나타내고 있다.Antibacterial activity is known to be mainly caused by antibiotics and siderophore secreted by rhizosphere microorganisms, but the main effect of pest biocontrol is mainly due to antibiotics. For example, some plant growth-promoting root zone microorganisms secrete a powerful antibiotic called phenazine around the roots of wheat when administered to wheat cultivated soil, thereby suppressing pathogens and increasing yields.

경쟁이라 함은 근권 영양분과 뿌리의 병해 민감 부위에 대하여 근권 미생물과 병원균 서로간의 경쟁에 의하여 병원균을 무력화시킴으로써 병해 억제효과를 얻는 것을 말한다. 식물 생장 촉진 근권 미생물(슈도모나스 세균)은 다양한 영양성분을 빠른 속도로 섭취하여 병원균이 이용할 필수 영양 성분을 고갈시킴으로써 병원균의 뿌리의 특정 부위를 통해 침입하여 발병시키게 되는데 이 식물 생장 촉진 근권 미생물이 그 특정부위를 선점하여 정착함으로써 병원균이 뿌리 내 침입을 못하게 되어 병 발생을 예방할 수 있다. Competition means the effect of inhibiting pathogens by incapacitating pathogens by competition between root-strain microorganisms and pathogens against the root-sensitive nutrients and root-sensitive areas of the roots. Pseudomonas microorganisms (Pseudomonas bacteria) promote plant growth by rapidly ingesting various nutrients and depleting essential nutrients for use by pathogens. By preoccupying the site, pathogens are prevented from invading the roots, thereby preventing the occurrence of disease.

용균이란 식물 생장촉진 근권 미생물이 생산하는 곰팡이 파괴 효소의 작용으로 병원성 곰팡이를 사명시키는 것을 말한다. 즉 식물성장촉진 근권 미생물이 키티나제라고 하는 곰팡이 세포벽 용해 효소를 생산하여 병원곰팡이(피시움 등)의 세포를 파괴함으로써 병해방지 및 증수효과를 거둘 수 있다. Lycobacterium refers to the mission of pathogenic fungi by the action of fungal destructive enzymes produced by plant-promoting rhizosphere microorganisms. In other words, plant growth-promoting root zone microorganisms produce a fungal cell wall lytic enzyme called chitinase to destroy the cells of hospital fungi (pisium, etc.), thereby preventing and increasing disease effects.

미량원소 중의 하나인 철 성분은 미생물 생장의 필수원소이나 토양 중에서 철은 주로 3가 철의 불용성 상태로 존재하므로 미생물에 직접 이용될 수 없다. 미생물은 이들 불용성 철을 흡수 이용하기 위하여 시데로포라고 하는 물질을 생산하여 시데로포-철이 결합된 킬레이트 화합물을 만듦으로써 철을 이용할 있는 것이다. 식물 생장촉진 근권 미생물을 다량의 또는 그 기능이 우수한 시데로포를 생산하여 빠른 속도로 철을 이용함으로써 근권의 유해미생물(병원균 포함) 생장에 필요한 철 성분을 고갈시켜 버리게 되며, 따라서 병원균은 생장 및 뿌리 내 침입을 할 수 없게 되는 것이다.Iron, one of the trace elements, is an essential element of microbial growth, but iron is insoluble in trivalent iron and cannot be directly used for microorganisms. Microorganisms can utilize iron by producing a substance called ciderofo in order to absorb and utilize these insoluble iron and making a chelate compound having a cederopo-iron. Promote plant growth By producing a large amount or excellent function of side-rope microorganisms, iron is rapidly used to deplete the iron components necessary for the growth of harmful microorganisms (including pathogens) in the root zone. You will not be able to break into roots.

많은 근권 미생물은 시안화합물을 만들며 이것은 병원균 방제에 일조를 하고 있다. 즉 시안화합물은 근권의 병원균 균체에 치명적인 손상을 입힘으로써 그 생육을 저지할 수 있게 되는 것이다. Many rhizospheres produce cyanide compounds, which contribute to pathogen control. In other words, the cyan compound can inhibit the growth by causing fatal damage to the pathogens of the root zone.

특정 미생물들은 식물 병원성 곰팡이들에 대하여 길항능력을 가지고 있다. 병원균이 접근할 수 없도록 미리 식물의 표면을 점유하고 있거나, 생장에 필수적인 영양물질을 먼저 섭취함으로서 병원균의 생장을 억제할 수도 있다. 지금까지 보고되어진 항진균 미생물은 Pseudomonas, Bacillus, Streptomyces, Agrobacterium, Burkholderia 등의 세균과, Trichoderma, Gilocladium, Fusarium 과 같은 곰팡이로부터 유래된 것이 알려져 있다. 그러나, 잔디의 성장을 촉진하며, 잔디병의 방제를 동시에 하는 미생물은 거의 없다.Certain microorganisms have the ability to antagonize plant pathogenic fungi. Occupying the surface of the plant in advance so that the pathogen is inaccessible, or by first ingesting the nutrients essential for growth may inhibit the growth of the pathogen. The antifungal microorganisms reported so far are known to be derived from bacteria such as Pseudomonas, Bacillus, Streptomyces, Agrobacterium, Burkholderia , and fungi such as Trichoderma, Gilocladium, and Fusarium . However, few microorganisms promote the growth of grass and simultaneously control the grass disease.

이에 본 발명자들은 Burkholderia sp. PPK003 (수탁번호: KCTC 10712P)가 잔디병의 원인균인 라지패치, 브라운패치, 잔디동전마름병에 길항적으로 작용하고, 잔디의 성장을 촉진하는 것을 발견하고 본 발명을 완성하였다.Therefore, the inventors of Burkholderia sp. It was found that PPK003 (Accession No .: KCTC 10712P) antagonistically acts as a causative agent of grass disease, large patches, brown patches, grass coin blight, and promotes the growth of grass.

따라서 본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 구성된 것으로, 토양 미생물로부터 추출된 잔디 성장 촉진과 잔디 병원균의 억제하는 균주 및 이를 포함하는 미생물제제를 제공하는 것을 목적으로 한다. Accordingly, the present invention has been made to solve the above problems, and an object of the present invention is to provide a microbial agent comprising the same, and a strain for inhibiting grass growth and grass pathogens extracted from soil microorganisms.

또한, 본 발명은 상기 균주 또는 이를 포함하는 미생물제제를 이용하여 잔디의 상품성 및 생산효율을 향상시킬 수 있는 재배방법을 제공하는 것을 또 다른 목적으로 한다.In addition, another object of the present invention is to provide a cultivation method that can improve the marketability and production efficiency of grass using the strain or microbial agent comprising the same.

본 발명은 잔디 생장 촉진 및 잔디병 발생을 억제하는 미생물 신균주 Burkholderia sp. PPK003 (수탁번호: KCCM 10712P)를 제공한다. Burkholderia sp. PPK003는 잔디가 식재되어 있는 토양에서 순수 분리되었고, 유전자 서열을 분석하여 동정한 결과 신균주 PPK003 (Burkholderia sp)로 동정되었으며, 우수한 항진균활성 및 식물생장촉진 활성이 있다. The invention microbial new strain Burkholderia sp. PPK003 (Accession Number: KCCM 10712P) is provided. Burkholderia sp. PPK003 was purely isolated from the soil where grass was planted, and identified as the new strain PPK003 ( Burkholderia sp) by analyzing the gene sequence, and has excellent antifungal activity and plant growth promoting activity.

본 발명은 상기 미생물 또는 이의 대사산물을 포함하는 미생물제제를 제공한다. 미생물제제의 형태는 액상, 분말, 알지네이트 프릴(alginate prill) 등의 형태로 사용되고 있으며, 그 후 제품에 증량제(filler)로서 피트(peat)를 섞거나 전착제(sticker)를 혼합하여 살포함으로써 제품의 효과를 증가시키는 시도가 있었다. The present invention provides a microbial agent comprising the microorganism or a metabolite thereof. Microbial formulations are used in the form of liquids, powders, alginate prills, etc.Then, the effect of the product by spraying by mixing the pete as a filler or the adhering agent as a filler. There was an attempt to increase it.

최근에는 알긴산, 폴리아크릴아마이드, 카라기난 같은 생체 고분자물질속에 포자를 고정화시킨 후, 각종 첨가제(영양원, 전착제 UV 차단제, 증강제, PGPR 등)와 혼합하여 포장에 살포할 수 있다.In recent years, spores are immobilized in biopolymers such as alginic acid, polyacrylamide, and carrageenan, and then mixed with various additives (nutrients, electrodeposited UV blocking agents, enhancers, PGPR, etc.) and sprayed onto packages.

본 발명은 상기 미생물을 이용하여 잔디병 발생을 억제하는 방법을 제공한다.The present invention provides a method for suppressing the development of turf disease using the microorganisms.

본 발명에 따른 Burkholderia sp. PPK003 (수탁번호: KCCM 10712P) 미생물을 단독 또는 이를 다른 미생물과 혼합하여 생균을 직접 살포하거나, 다른 첨가제를 포함한 미생물제제의 형태로 토양내 살포하여서 잔디의 병발생을 억제하는 방법을 제공한다. Burkholderia sp. PPK003 (Accession No .: KCCM 10712P) Provides a method of inhibiting the pathogenesis of grass by spraying microorganisms alone or in combination with other microorganisms, or spraying live bacteria directly in the form of a microbial agent containing other additives.

본 발명은 상기 미생물을 이용하여 잔디 생장을 촉진하는 방법을 제공한다.The present invention provides a method for promoting grass growth using the microorganism.

본 발명에 따른 Burkholderia sp. PPK003 (수탁번호: KCCM 10712P) 미생물을 단독 또는 이를 다른 미생물과 혼합하여 생균을 직접 살포하거나, 다른 첨가제를 포함한 미생물제제의 형태로 토양내 살포하여서 잔디의 생장을 촉진하는 방법을 제공한다. 상기 첨가제는 식물의 생장을 촉진하기 위한 영양원(퇴비 등), 전착제 등을 포함한다. Burkholderia sp. PPK003 (Accession No .: KCCM 10712P) Provides a method of promoting the growth of grass by spraying microorganisms directly or by mixing them with other microorganisms, or by spraying them in the soil in the form of microbial agents containing other additives. The additives include nutrients (compost, etc.), electrodeposition agents, and the like, for promoting plant growth.

이하, 실시예에 의하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. However, the following examples are merely to illustrate the present invention, but the content of the present invention is not limited to the following examples.

<실시예 1> 균주의 분리 동정 및 특징Example 1 Isolation Identification and Characteristics of Strains

신균주 PPK003 (Burkholderia sp)는 잔디가 식재되어 있는 토양에서 순수 분리되어졌다. 우수한 효능을 가지는 미생물을 분리하였고, 이를 분리 동정한 결과 신균주 PPK003 (Burkholderia sp)로 동정되었으며, 한국미생물보존센터에 기탁하였고, 기탁번호 KCCM 10712P를 부여받았다.The new strain PPK003 ( Burkholderia sp) was isolated purely from the soil where grass was planted. Microorganisms having excellent efficacy were isolated and identified as a new strain PPK003 ( Burkholderia sp) , deposited with the Korea Microorganism Conservation Center, and given accession number KCCM 10712P.

신균주 PPK003 (Burkholderia sp)의 균주의 특징Characteristics of the strain of the new strain PPK003 ( Burkholderia sp)

1. 배양적인 특징1. Cultural features

LB(트립톤 10g,이스트 추출 파우더 5g, 염화나트룸 10g, 아가 15g, 증류수 1l)에서 배양이 되고, 25 - 30 ℃에서 배양이 된다.Cultured in LB (10 g of tryptone, 5 g of yeast extract powder, 10 g of sodium chloride, 15 g of agar, 1 l of distilled water), and cultured at 25-30 ° C.

2. 형태적 특징2. Morphological features

PPK003 (Burkholderia sp)는 플레이트 배양 시 초반 15시간까지는 노란색을 띠다가 점점 형광빛을 띤 둥근 모양의 콜로니를 형성하고, 진탕 배양 시에도 배양액이 노란 형광색을 띠게 된다.PPK003 ( Burkholderia sp) becomes yellow until the first 15 hours of plate culture, but gradually forms fluorescent rounded colonies, and the culture solution becomes yellow fluorescent color even during shaking culture.

<실시예 2> 신균주 PPK003 (Burkholderia sp) 에 의한 잔디 생장 촉진 < Example 2> Grass growth promotion by the new strain PPK003 ( Burkholderia sp)

(1) 실시방법 (1) Method of implementation

멸균한 토양을(모래와 peat moss의 비율: 1:9)과 직경 11cm의 홀커터(hole-cutter)를 이용하여 뜬 벤트글라스를 이용하여 포트(pot)를 만든다. 그 후, 잔디를 짧게 잘라 준 다음, 미생물 처리 한다. 미생물의 OD값을 0.5로 조절하여 총 20 ml을 1주일 간격으로 3번 처리한 후, 일주일의 잔디 생장 차이를 본다.Pots are made using bent glass made from sterilized soil (a ratio of sand to peat moss: 1: 9) and a hole-cutter with a diameter of 11 cm. After that, cut the grass short, and then microbial treatment. After adjusting the OD value of the microorganism to 0.5 and treating a total of 20 ml three times a week, the difference in turfgrass growth of one week is observed.

뿌리 성장 촉진의 결과를 알기 위해서 너스리에 대조구, 양성대조구인 KLP, 미생물 제재 파인필드, 그리고 실험구인 PPK003를 처리하였다. In order to know the results of root growth promotion, the control group, the positive control KLP, the microbial preparation pinefield, and the experimental group PPK003 were treated.

(2) 결과 (2) results

PPK003 (Burkholderia sp) 를 처리한 처리구와 이미 잔디 활성 촉진의 효과가 있는 것으로 알려진 KLP 그리고 아무것도 처리 하지 않았던 대조구의 성장 차이를 알 수 있었다 (도 1 참조).The growth difference between the treatment group treated with PPK003 ( Burkholderia sp) , KLP which is known to have an effect of promoting turfgrass activity, and the control group treated with nothing was found (see FIG. 1).

특히 PPK003 (Burkholderia sp) 의 잔디 생장 촉진의 효과는 기존에 알려진 미생물 KLP보다 뛰어나다는 것을 알 수 있었다.Especially PPK003 ( Burkholderia sp ) It was found that the effect of promoting grass growth was superior to that of KLP.

대조구의 성장이 거의 없었던 거에 비해서 잔디 지상부의 성장이 두드러지게 촉진되었으며, 뿌리 길이 또한 많이 촉진되었다는 것 또한 알 수 있었다(도 2 참조).It was also found that the growth of the grassy ground was significantly promoted, and the root length was also significantly increased, compared to that of the control, which had little growth (see FIG. 2).

게다가 클로로필 함량 측정 결과, 대조구에 비해 클로필 함량도 높아진 것으로 보아, 색상도 더 좋아진 것을 알 수 있었다. In addition, as a result of measuring the chlorophyll content, it was found that the color of the clofil was better than that of the control.

이 실험 결과, 잔디의 생장을 촉진하여 조금은 까다로울 수 있는 잔디의 관리를 더 용이하게 할 수 있는 가능성을 제시하였고, 게다가 잔디의 사용이 대부분 심미적인 역할이 많다는 것을 감안하였을 때, 잔디를 더 높은 품질의 상태로 유지할 수 있는 것을 알 수 있었다.The results of this experiment suggest the possibility of facilitating the growth of the grass, making it easier to manage the turf, which can be a little tricky. Moreover, given that the use of the grass has many aesthetic roles, the grass is of higher quality. It was found that I can keep the state of.

<실시예 3> PPK003 (Burkholderia sp) 의 잔디 병원균에 대한 길항력 Example 3 Antagonist Against Grass Pathogens of PPK003 ( Burkholderia sp)

(1) 실시 방법(1) Conduct method

신균주 PPK003 (Burkholderia sp) 의 잔디 병원균 엘로우패치(yellow -patch), 브라운패치(brown-patch) 및 잔디 동전마름병(dollar-spot)에 대한 길항력을 시험하기 위해 3개의 병원균과 미생물을 PDA 배지(감자 추출액 300g, 포도당 20g, 아가 15g, 증류수 1l)에 대치 배양하였다. 이때, 이미 병원균들에 대한 길항력이 알려진 KLP 균주를 양성대조구로 이용하였다. New strain PPK003 ( Burkholderia sp ) Three pathogens and microorganisms were tested in PDA medium (potato extract 300 g, glucose 20 g) to test their antagonism against yellow-patch, brown-patch and grass-spot. 15 g of agar and 1 l of distilled water were incubated incubated. At this time, KLP strains already known as antagonism against pathogens were used as a positive control.

(2) 결과(2) results

배양 24시간 후 관찰하였을 때, 그 PPK003 (Burkholderia sp)이 자라나 있는 부분에는 병원균들의 균사가 자라나지 못하는 것을 알 수 있었다(도 3 참조). When observed after 24 hours of culture, it was found that the mycelia of pathogens did not grow in the area where the PPK003 ( Burkholderia sp) was grown (see FIG. 3).

이것은 미생물을 병원균보다 우점을 차지하는 것을 뜻하는 것으로, 미생물이 먼저 자라나 있는 곳은 잔디 병원균이 자라나지 못할 것이라는 것 또한 예측할 수 있었다. 이것은 잔디병의 예방에 효과적인 방법이 될 수 있을 것이다. 즉, 잔디병이 발생하기 전 이 미생물을 정기적으로 처리하여, 토양에 미생물이 항시 존재하게 한다면, 잔디병을 예방할 수 있을 것이다.This means that the microorganisms dominate the pathogens, and where the microorganisms grow first, the grass pathogens would not grow. This may be an effective way to prevent turf disease. In other words, if the microorganisms are regularly treated before the occurrence of turf disease, and the microorganisms are always present in the soil, the turf disease may be prevented.

본 발명에 따른 신균주 PPK003 ( Burkholderia sp)은 잔디의 생장을 촉진하였다. 이 뿐 아니라, 이 미생물을 잔디 병원균들과 같이 대치 배양하였을 때, 그 병원균들에 대하여 길항력을 가지는 것을 알게 되었다. 이것으로 이 미생물을 이용하면, 잔디의 품질을 높일 뿐 아니라, 잔디 관리가 용이해 지고, 잔디 질병을 예방 할 수 있다. The new strain PPK003 ( Burkholderia sp ) according to the present invention promoted the growth of grass. In addition, when these microorganisms were replaced with grass pathogens, they were found to have antagonism against the pathogens. By using this microorganism, not only the quality of the turf can be improved, but also the turf can be easily managed and the turf disease can be prevented.

Claims (4)

잔디 생장 촉진 및 잔디병 발생을 억제하는 미생물 신균주 버크홀데리아 종 PPK003 (수탁번호: KCCM 10712P).Microbial new strain Berkholdereria spp. PPK003 (Accession No .: KCCM 10712P) that promotes turf growth and inhibits turf disease. 제 1 항에 따른 미생물 또는 이의 대사산물을 포함하는 미생물제제.A microbial preparation comprising the microorganism according to claim 1 or a metabolite thereof. 제 1 항에 따른 미생물을 이용하여 잔디병 발생을 억제하는 방법.Method of inhibiting the development of turf disease using the microorganism according to claim 1. 제 1 항에 따른 미생물을 이용하여 잔디 생장을 촉진하는 방법. A method for promoting turf growth using the microorganism according to claim 1.
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