KR101638833B1 - Lysobacter gummosus strain having antifungal activity against plant pathogen and thatch - decomposing activity, and microbial agent containing the same - Google Patents
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Abstract
본 발명은 식물 병원균에 대한 항진균 활성 및 셀룰로스(cellulose)와 펙틴(pectin) 분해능을 갖는 리소박터 굼모서스(Lysobacter gummosus) 균주와 이를 함유한 미생물 제제에 관한 것으로, 식물 재배지에서 발생하는 식물 병원균을 방제하고 토양 내 대취(thatch)를 조절하는 효과가 있다.The present invention relates to a strain of Lysobacter gummosus having an antifungal activity against plant pathogenic bacteria and a cellulose and pectin resolving ability and a microorganism preparation containing the strain, And it has the effect of controlling thatch in the soil.
Description
본 발명은 식물 병원균에 대한 항진균 활성 및 대취(thatch) 분해능을 갖는 리소박터 굼모서스(Lysobacter gummosus) 균주와 이를 함유한 미생물 제제에 관한 것이다.
The present invention relates to a strain of Lysobacter gummosus having an antifungal activity and an ability to degrade thatch against a plant pathogen and a microorganism preparation containing the strain.
골프장과 천연잔디운동장에 식재되어 있는 토양은 깊이에 따라 잔디와 모래로 구성되어 있다. 이는 골프장을 포함한 운동경기장이 이용객과 관리 기계에 의해 지속적인 답압이 이루어지는 환경이고, 모래가 통기성과 배수에 유리하기 때문이다. 골프장과 천연잔디운동장에서 잔디는 이용객들의 건강과 적당한 운동 환경 조성을 위해 보통 25㎜ 내외의 높이로 유지, 관리되고 있다. 관리 상태 및 계절에 따라 다르지만 켄터키 블루그래스는 주 1 ∼ 2회, 한국잔디는 더 낮은 빈도로 예초가 이루어지고 있다. 예초로부터 잘려진 잎과 줄기는 예지물(clippings)이라고 하며, 지면 아래에 축적되어 미분해 짙은 갈색의 유기물인 대취층(thatch layer)으로 존재한다. [도 1]은 경기장에서 채취된 잔디의 단면도로서, 잔디 바로 밑의 검은 부분인 대취층(thatch layer)을 나타낸 것이다. [도 1]에 나타낸 바와 같이, 대취층은 엽 조직, 뿌리 및 줄기 등의 살아있는 조직과 노화엽, 예지물, 노화근 등의 죽은 조직으로 이루어져 있다. 잔디 종에 따라 차이가 있지만 줄기와 뿌리가 6개월 ∼ 2년 간격으로 생산과 노화(죽음)를 반복하기 때문이다. Golf course and natural grass The soil cultivated in the playground is composed of grass and sand depending on the depth. This is because the athletic field including the golf course is an environment in which the continuous pressurization is performed by the user and the management machine, and the sand is advantageous for ventilation and drainage. At the golf course and the natural grass playground, the grass is maintained and maintained at a height of about 25 mm for the health of the users and proper exercise environment. Depending on the condition and season, Kentucky bluegrass is planted once or twice a week and Korean grass is planted at a lower frequency. Leaves and stems, cut from mowing, are called clippings, and accumulate under the ground and are present as thatch layer which is a dark brown organic matter. FIG. 1 is a cross-sectional view of grass taken from an arena, showing a black layer under the grass, thatch layer. As shown in Fig. 1, the odor layer consists of living tissue such as leaf tissue, root and stem, and dead tissues such as aged leaf, clue, and aging root. It differs depending on the grass species, but stem and root repeat production and aging (death) every 6 months ~ 2 years.
천연잔디운동장이나 골프장에서 적당한 두께의 대취는 큰 장점으로 작용하고 있다. 대취의 두께가 약 12 ∼ 13㎜에 이르면 공 튀김에 좋고, 토양 온도의 안정화에 도움을 주며, 이용자에게 발의 충격을 완화시키는 탄력을 제공하기도 한다. 하지만 많은 단점이 잔디 관리에 문제가 되고 있다. 토양에 축적된 대취는 토양 과습을 유발하기 때문에, 잔디 뿌리의 호흡작용을 어렵게 하여 식물체가 죽는 생리장해를 유발하고 주요 병원균과 해충의 서식지 역할을 하여 발병의 원인이 된다. 또한 고사된 잔디의 줄기 및 뿌리 잔재물로 이루어진 대취층은 물에 잘 녹지 않는 소수성을 띄기 때문에 하부의 뿌리까지 투수성과 통기성 불량을 유발하여 한발에 약해지거나 시비효율을 감소시키는 등 관리상의 매우 중요한 문제를 낳고 있다. 특히, 우리나라 천연잔디운동장에서 많이 이용되고 있는 두 종인 켄터키 블루그래스와 한국잔디 모두 대취 축적도가 높은 것으로 보고되고 있다. [도 2]는 잔디의 세포벽 구조를 나타낸 것이다. 잔디의 세포벽 구조는 [도 2]에 도시된 바와 같이 1, 2차 세포벽으로 구성되어 있으며, 주요 성분으로 셀룰로스, 헤미셀룰로스, 펙틴, 리그닌 등이 있다. 1차 세포벽은 어린 식물에서 형성되며, 2차 세포벽은 성숙하면 형성된다. 가장 분해가 어려운 것으로 알려져 있는 리그닌은 생육 후기에 형성된다. 일반적으로 식물의 세포벽은 셀룰로스 25%, 헤미셀룰로스 25%, 펙틴 35% 등으로 구성되어 있지만, 잔디는 셀룰로스와 헤미셀룰로스(75%), 리그닌(25%)의 함유량이 높은 것으로 알려져 있다.It is a great advantage to play a proper thickness in a natural grass playground or a golf course. A thickness of about 12 to 13 mm is good for deep frying, helps to stabilize soil temperature, and gives the user elasticity to mitigate the impact of the foot. However, many disadvantages have become a problem in lawn management. Soil accumulation in the soil causes soil respiration, which makes the respiration of the grass roots difficult, which causes the physiological disorder of the plant to die, and acts as a habitat for major pathogens and insects. In addition, since the odorant layer composed of dead grass stem and root remnant is highly hydrophobic and water insoluble, it causes permeability and poor breathability to the lower roots and weakens to one foot or reduces fertilization efficiency. It is giving birth. Especially, it is reported that both of Kentucky bluegrass and Korean grass which are widely used in Korean natural grass playground have a high accumulation rate. [Figure 2] shows the cell wall structure of grass. The cell wall structure of grass is composed of primary and secondary cell walls as shown in Fig. 2, and main components are cellulose, hemicellulose, pectin, lignin and the like. Primary cell walls are formed in young plants, and secondary cell walls are formed when mature. Lignin, which is known to be the most difficult to decompose, is formed at the late stage of growth. In general, the cell walls of plants consist of 25% of cellulose, 25% of hemicellulose, 35% of pectin, and grass is known to have high content of cellulose, hemicellulose (75%) and lignin (25%).
잔디운동장이나 골프장에서 기존의 대취 관리는 모래를 지면에 뿌리는 배토(top-dressing), 일정 깊이로 구멍을 만들고 모래로 그 구멍을 채우는 코어링(coring) 및 잔디 지면을 깨끗이 하는 그루밍(grooming) 등의 기계적 방법을 통하여 실시되고 있다. 하지만 위의 작업들은 고가의 장비를 사용해야 하고 시간이 많이 소요된다는 점에서 작은 면적의 운동을 관리하기 위해 구입하기 어렵고 임차할 경우 관리비 상승요인으로 작용한다. 또한 기계를 이용한 물리적 방법은 잔디표면을 손상시키는 결과를 가져오기 때문에 잔디가 재피복될 때까지 미관상 좋지 않으며 경기장 이용자의 사용상 불편함을 초래하는 것이 불가피하다. In grass playgrounds or golf courses, the traditional control of the game involves top-dressing the sand, making coring holes to a certain depth, coring to fill the holes with sand, and grooming to clean the grass floor. And the like. However, the above tasks are expensive to use because they require expensive equipment and they take time, so it is difficult to purchase a small area to manage the exercise, and the rent increases the management cost. In addition, since the physical method using the machine results in damaging the grass surface, it is not good for the grass until it is re-coated, and it is inevitably inconvenient to use in the stadium users.
이러한 이유 때문에 잔디 운동장의 구조를 파괴시키지 않고 저비용이 투입될 수 있는 방법이 꾸준히 요구되어 왔으며, 대취를 분해하는 미생물의 사용은 고가의 장비가 필요하지 않고 운동장의 잔디를 손상시키지 않기 때문에 그 대안으로 주목받아 왔다. 특히, 미생물 제제는 대취를 분해하는 합성 효소 제품 등 화학 제제에 비하여 인체와 환경에 부담되지 않는 장점 때문에 최근 그 선호도가 높아지고 있다. 아울러 대취 분해뿐만 아니라 대취에 서식하는 잔디 감염 병원균에 대한 활성을 보일 경우 병 방제 효과도 얻을 수 있는 장점도 있다. 식물병원균에 대한 길항성 제제의 경우 화학 살균제가 갖는 토양 잔류, 살균제 저항성 병원균의 출현, 인체와 환경에 대한 위해 등의 부담으로부터 자유롭기도 하다. For this reason, there has been a steady demand for low-cost inputs without destroying the structure of the turf ground, and the use of microorganisms to break down the stools does not require expensive equipment and does not damage grass on the playground. It has attracted attention. In particular, microbial preparations have recently become more popular due to their advantages in that they are not burdensome to humans and the environment as compared with chemical preparations, such as synthetic enzyme products that degrade odors. In addition, there is an advantage that the disease control effect can be obtained when the activity against the grass infecting pathogenic bacteria living in the stool is shown as well as the stool decomposition. In the case of antagonistic agents against plant pathogens, it is also free from burdens such as soil remnants, the emergence of fungicide resistant pathogens, and human and environmental risks.
리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) 균은 잔디에 브라운 패치, 라지 패치, 옐로 패치 등 기주와 계절을 가리지 않고 주요 병을 일으키는 대표적인 균류 병원균이다. 리족토니아 솔라니에 의해 발병하는 갈색마름병(brown patch)은 한국에 식재되어 있는 잔디에 심각한 위협을 나타내는 진균 병이다. 높은 온도와 습도에서 발병하며 일반적으로 작은 점에서 시작하여 크게는 약 1 미터에 이르는 원형 크기로 바깥쪽으로 확산 된다. 동전마름병(dollar spot)은 봄, 가을 기간 동안 스크레로티니아 호모에오카르파(Sclerotinia homoeocarpa)에 의해 발생하는 전 세계적으로 가장 흔한 잔디 진균 병해이다. 골프장 등 잔디밭에서 병반의 크기는 직경 2.5 ∼ 5㎝ 이하이지만, 병이 진전되면서 불규칙하게 큰 병반을 형성하기도 한다. 피시움 속(Pythium spp.) 잔디 병원균은 우리나라에서 10종 이상이 잎마름병, 관부 및 뿌리썩음병, 설부병 등을 일으키는 것으로 알려져 있다. 우리나라에서는 여름에 따뜻하고 습한 기후 조건이 되면 지름 2 ∼ 3㎝의 원형 병반으로 시작하여 밝은 황갈색으로 시들고 급속히 식물체가 시들며 주저앉게 된다. 특히, 피시움 아파니데르마툼(Pythium aphanidermatum) 등은 가장 중요한 피시움 속(Pythium spp.) 병원균 중 하나이다. 드레크스레라 비세프타타(Drechslera biseptata)도 주요 병원균 중 하나로 보고되고 있는데, 잔디에서 반점과 마름 증상을 유발하여 결국 잔디는 시들어 죽게 된다. Rhizoctonia solani is a typical fungal pathogen that causes major diseases such as brown patches, large patches, and yellow patches on the grass, regardless of the host and season. The brown patches caused by Liaronia solani are fungal diseases that present a serious threat to the grass cultivated in Korea. It occurs at high temperature and humidity and generally spreads outward at a small point, and at a circular size of about 1 meter. The dollar spot is the most common turf fungal disease worldwide, caused by Sclerotinia homoeocarpa during spring and autumn. The size of lesions on the lawns such as golf courses is less than 2.5 ~ 5㎝ in diameter, but they may form irregular large lesions as the disease progresses. Pythium spp. It is known that more than 10 kinds of grass pathogens cause leaf blight, root and root rot, and leprosy in Korea. In Korea, when the climate is warm and humid in summer, it begins with a circular lesion with a diameter of 2 ~ 3 cm and it wilts with a light yellow brown color, and the plants are rapidly wilted and hesitate. In particular, Pythium aphanidermatum is one of the most important Pythium spp. Pathogens. Drechslera biseptata is also reported to be one of the major pathogens, causing spots and blotches in the grass, which eventually cause the grass to die.
현재 천연잔디운동장이나 골프장에서 위의 병들은 살균제의 사용이 가장 효과적인 방제와 예방법이다. 하지만 살균제의 지속적인 사용은 환경오염 유발, 병원균의 농약에 대한 내성 증가, 토양 미생물 생태계 파괴 등 문제점을 야기할 수 있다. 특히 스크레로티니아 호모에오카르파 균주는, 그 특성상 약제 저항성 발현이 빈번하기 때문에 전적으로 살균제의 이용에 한계가 있다. Currently, the use of disinfectants is the most effective control and prevention method for the above diseases in natural grass playgrounds and golf courses. However, the continuous use of fungicides can cause problems such as environmental pollution, increased tolerance of pesticides to pathogens, and destruction of soil microbial ecosystem. In particular, the strain of the scarlettinia homo okrea virus has a limitation in the use of the sterilizing agent entirely because of its frequent occurrence of drug resistance.
따라서 미생물을 이용한 생물학적 방제는 그러한 부작용을 줄일 수 있는 대안으로 제시받고 있다. 자연으로부터 분리한 미생물을 이용하여 천연잔디운동장에 식재되어 있는 켄터키 블루그래스와 한국잔디에서 문제가 되고 있는 대취를 친환경적으로 줄여 주고, 동시에 병을 방제하거나 병원균의 밀도를 낮출 수 있다면 좋은 선택이 될 수 있다.
[선행기술문헌]
[특허문헌]
한국등록특허 제10-0757298호Therefore, biological control using microorganisms is proposed as an alternative to reduce such side effects. Using microorganisms isolated from nature, it is a good choice if you can reduce the pollution of Kentucky bluegrass and turfgrass that are planted in natural turf grasses and reduce the density of pathogens at the same time. have.
[Prior Art Literature]
[Patent Literature]
Korean Patent No. 10-0757298
본 발명은 상기한 바와 같은 문제점을 해결하기 위하여 제안된 것으로, 식물 병원균에 대한 항진균 활성 및 대취(thatch) 분해능을 갖는 리소박터 굼모서스(Lysobacter gummosus) 균주와 이를 함유한 미생물 제제를 제공하는 데 그 목적이 있다.
The present invention has been proposed in order to solve the above-mentioned problems. It is an object of the present invention to provide a strain of Lysobacter gummosus having an antifungal activity and an ability to degrade thatch against plant pathogens and a microorganism preparation containing the same. There is a purpose.
상기와 같은 기술적 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 식물 병원균에 대한 항진균 활성과 셀룰로스(cellulose) 및 펙틴(pectin) 분해능을 갖는 BAS-1 (KCTC 18322P)인 리소박터 굼모서스(Lysobacter gummosus) 균주를 제공한다.In order to solve the above-mentioned technical problems, the present invention relates to a method for producing an antifungal activity against plant pathogens and a strain of Lysobacter gummosus , BAS-1 (KCTC 18322P) having cellulose and pectin resolving ability , to provide.
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주는 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani), 스크레로티니아 호모에오카르파(Sclerotinia homoeocarpa), 드레크스레라 비세프타타(Drechslera biseptata) 및 피시움 아파니데르마툼(Pythium aphanidermatum)으로 이루어진 군에서 선택되는 식물 병원균에 대한 항진균 활성을 갖는 것이 바람직하다.In one embodiment of the invention, the Roche germosis strain is selected from the group consisting of Rhizoctonia solani , Sclerotinia homoeocarpa , Drechslera biseptata , And antifungal activity against a plant pathogenic bacterium selected from the group consisting of Pythium aphanidermatum .
또한, 본 발명은 식물 병원균에 대한 항진균 활성과 셀룰로스(cellulose) 및 펙틴(pectin) 분해능을 갖는 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 제제를 제공한다.
The present invention also provides a microorganism preparation containing as an active ingredient, a microorganism strain of the genus Lysobacteria or a culture thereof having an antifungal activity against a plant pathogen and a cellulose and pectin resolving ability.
상기와 같은 본 발명은, 리소박터 굼모서스(Lysobacter gummosus) 균주의 식물 병원균에 대한 항진균 활성과 대취(thatch) 분해능에 의해, 식물 재배지에서 발생하는 식물 병원균을 방제하고 토양 내 대취(thatch)를 조절하는 효과가 있다.
The present invention relates to a method for controlling phytopathogenic fungi occurring in a plantation field and controlling the occurrence of thatch in the soil by the antifungal activity and the cleavage ability of the phytopathogenic fungi of the strain Lysobacter gummosus against plant pathogens .
도 1은 경기장에서 채취된 잔디의 단면도로서, 잔디 바로 밑의 검은 부분인 대취층(thatch layer)을 나타낸 것이다.
도 2는 잔디의 세포벽 구조를 나타낸 것이다.
도 3은 잔디 주요 병원균에 대한 BAS-1 균주의 억제 효과(좌측 그림- 상: R. solani, 중: BAS-1 균주, 하: S. homoeocarpa)(우측 그림-상: D. biseptata, 중: BAS-1 균주, 하: P. aphanidermatum)를 나타낸 것이다.
도 4는 BAS-1 균주의 셀룰로스(cellulose) 분해능을 나타낸 것이다.
도 5은 BAS-1 균주의 펙틴(pectin) 분해능을 나타낸 것이다.
도 6은 BAS-1 균주와 리소박터 굼모서스(Lysobacter gummosus) 균주의 16S rRNA 서열 상동성을 나타낸 것이다.
도 7은 BAS-1 균주의 계통학적 분석 결과(phylogenetic tree)를 나타낸 것이다.Figure 1 is a cross-sectional view of a grass taken from an arena, showing a black layer under the grass, thatch layer.
Figure 2 shows the cell wall structure of grass.
Figure 3 is a grass major pathogen inhibition of BAS-1 strain of the effectiveness (the left picture-phase: R. solani, of: BAS-1 strain, and: S. homoeocarpa) (right picture-phase: D. biseptata, of: BAS-1 strain, and P. aphanidermatum ).
Figure 4 shows the cellulose resolution of the BAS-1 strain.
Figure 5 shows the pectin resolving ability of the BAS-1 strain.
Figure 6 shows the 16S rRNA sequence homology of BAS-1 and Lysobacter gummosus strains.
Figure 7 shows the phylogenetic tree of the BAS-1 strain.
본 발명은 다양한 변경을 가할 수 있고 여러가지 실시예를 가질 수 있는바, 특정 실시예들을 상세한 설명에 상세하게 설명하고자 한다. While the invention is susceptible to various modifications and alternative forms, specific embodiments thereof are shown by way of example in the drawings and will herein be described in detail.
그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.It should be understood, however, that the invention is not intended to be limited to the particular embodiments, but includes all modifications, equivalents, and alternatives falling within the spirit and scope of the invention.
나아가, 본 출원에서 사용한 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로 본 발명을 한정하려는 의도가 아니며, 다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의하여 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미가 있다.
Furthermore, all terms used herein, including technical or scientific terms, unless otherwise defined, are intended to be solely for the purpose of describing particular embodiments and are not intended to limit the invention. Have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 식물 병원균에 대한 항진균 활성 및 셀룰로스 분해능을 갖는 리소박터 굼모서스(Lysobacter gummosus) 균주를 제공한다. 본 발명의 리소박터 굼모서스 균주는 잔디 재배지 근권 토양 또는 잔디 예지물을 포함하는 토양에서 분리한 것으로, "BAS-1"로 명명한다.In order to accomplish the object of the present invention, the present invention provides a strain of Lysobacter gummosus having an antifungal activity against cellulose phytase and a cellulose decomposing ability . The Rosemary germosis strain of the present invention is called "BAS-1", which is isolated from grass cultivation rhizosphere soil or soil containing grass clippings.
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주는 BAS-1 (KCTC 18322P)인 것이 바람직하다. 본 발명의 리소박터 굼모서스 BAS-1 균주는 2014년 8월 28일 한국생명공학원 미생물자원센터에 기탁하였으며, 기탁번호는 KCTC 18322P이다.In one embodiment of the present invention, the Rosemary germosis strain is preferably BAS-1 (KCTC 18322P). The isolate BAS-1 strain of the present invention was deposited on August 28, 2014 at the Microbiological Resource Center of the Korean Institute of Bioscience and the deposit number is KCTC 18322P.
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주는 리족토니아 속(Rhizoctonia spp.), 스크레로티니아 속(Sclerotinia spp.), 드레크스레라 속(Drechslera spp.) 및 피시움 속(Pythium spp.)으로 이루어진 군에서 하나 이상 선택되는의 식물 병원균에 대한 항진균 활성을 나타낼 수 있다.In one embodiment of the invention, the R. germosis strain is selected from the group consisting of Rhizoctonia spp., Sclerotinia spp., Drechslera spp. And Pythium spp. spp.), which may be selected from the group consisting of plant pathogenic fungi.
더욱 바람직하게는, 본 발명의 리소박터 굼모서스 균주는 리족토니아 속, 스크레로티니아 속, 드레크스레라 속 및 피시움 속의 식물 병원균 모두에 대한 항진균 활성을 갖는 것이나, 이에 제한되지 않는다.More preferably, the P. gommos strains of the present invention have antifungal activity against all plant pathogenic fungi of the genus Leganina, Sclerotinia, Drexlera and Pichia, but are not limited thereto.
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주는 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani)에 대한 항진균 활성을 나타낼 수 있다.In one embodiment of the invention, the R. germosis strain may exhibit antifungal activity against Rhizoctonia solani .
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주는 스크레로티니아 호모에오카르파(Sclerotinia homoeocarpa)에 대한 항진균 활성을 나타낼 수 있다.In one embodiment of the present invention, the R. germosis strain may exhibit antifungal activity against Sclerotinia homoeocarpa .
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주는 드레크스레라 비세프타타(Drechslera biseptata)에 대한 항진균 활성을 나타낼 수 있다.In one embodiment of the present invention, the Roche germosis strain may exhibit antifungal activity against Drechslera biseptata .
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주는 피시움 아파니데르마툼(Pythium aphanidermatum)에 대한 항진균 활성을 나타낼 수 있다.In one embodiment of the invention, the R. germosis strain may exhibit antifungal activity against Pythium aphanidermatum .
더욱 바람직하게는, 본 발명의 리소박터 굼모서스 균주는 리족토니아 솔라니, 스크레로티니아 호모에오카르파, 드레크스레라 비세프타타 및 피시움 아파니데르마툼 모두에 대한 항진균 활성을 갖는 것이나, 이에 제한되지 않는다.More preferably, the P. gommos strains of the present invention are those having antifungal activity against both Lyotonia solani, Scarlettinia homoe okapa, Drexlera biceptata, and Pichia apani dermatum , But is not limited thereto.
또한, 본 발명은 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 제제를 제공한다.The present invention also provides a microorganism preparation containing as an active ingredient a microorganism of the genus Lysobacteria germosis or a culture thereof.
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 제제는, 잔디의 갈색마름병 또는 동전마름병 등을 일으키는 식물 병원균을 방제하기 위하여 사용될 수 있다.In one embodiment of the present invention, a microorganism preparation containing the R. germosis strain or a culture thereof as an active ingredient can be used for controlling a plant pathogenic bacterium causing brown blotching or coin blight of grass.
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 제제는, 잔디의 대취(thatch)를 관리하기 위하여 사용될 수 있다.In one embodiment of the present invention, a microorganism preparation containing the Roche gambassus strain or a culture thereof as an active ingredient can be used to manage grass thatch.
본 발명에 따른 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 제제는, 유효성분 이외의 성분으로서, 예를 들어 소정의 담체, 점결제, 증점제, 고착제, 방부, 방미제, 용제, 안정화제, 산화 방지제, 자외선 방지제, 결정 석출 방지제, 소포제, 물성 향상제, 착색제 등을 함유할 수 있다. The microorganism preparation containing the microorganism strain containing the microorganism strain of the present invention or the culture thereof as an active ingredient can be used as a component other than the effective component, for example, a predetermined carrier, a binder, a thickener, a fixing agent, , A stabilizer, an antioxidant, an ultraviolet ray inhibitor, a crystal precipitation inhibitor, a defoaming agent, a physical property improving agent, a colorant and the like.
담체로는, 고체 담체 또는 액체 담체 중 어느 하나 또는 둘 다 사용할 수 있다. 고체 담체로서 예를 들면, 전분, 활성탄, 대두 분말, 밀 분말, 나무 분말, 어류 분말, 분유 등의 동식물성 분말, 탈크, 카올린, 벤토나이트, 제올라이트, 규조토, 화이트카본, 클레이, 알루미나, 탄산칼슘, 염화칼륨, 황산암모늄 등의 광물성 분말을 사용할 수 있다. 액체 담체로서 예를 들면, 물, 이소프로필알코올, 에틸렌글리콜 등의 알코올류, 시클로헥사논, 메틸에틸케톤 등의 케톤류, 프로필렌글리콜모노메틸에테르, 디에틸렌글리콜모노-n-부틸에테르 등의 에테르류, 케로신, 경유 등의 지방족 탄화수소류, 크실렌, 트리메틸벤젠, 테트라메틸벤젠, 메틸나프탈렌, 용매 나프타 등의 방향족 탄화수소류, N-메틸-2-피롤리돈 등의 아미드류, 지방산의 글리세린에스테르 등의 에스테르류, 대두유, 유채씨유 등의 식물유를 사용할 수 있다.As the carrier, either a solid carrier or a liquid carrier or both may be used. Kaolin, bentonite, zeolite, diatomaceous earth, white carbon, clay, alumina, calcium carbonate, calcium carbonate, calcium carbonate and the like as the solid carrier. Examples of the solid carrier include starch, activated carbon, soybean powder, wheat powder, wood powder, fish powder, Mineral powders such as sodium chloride, potassium chloride and ammonium sulfate can be used. Examples of the liquid carrier include alcohols such as water, isopropyl alcohol and ethylene glycol, ketones such as cyclohexanone and methyl ethyl ketone, ethers such as propylene glycol monomethyl ether and diethylene glycol mono-n-butyl ether , Aliphatic hydrocarbons such as kerosene and light oil, aromatic hydrocarbons such as xylene, trimethylbenzene, tetramethylbenzene, methylnaphthalene and solvent naphtha, amides such as N-methyl-2-pyrrolidone and glycerin esters of fatty acids , Vegetable oils such as soybean oil and rapeseed oil can be used.
점결제, 증점제, 고착제로서 예를 들면, 전분, 덱스트린, 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 카르복시메틸전분, 풀루란, 알긴산나트륨, 알긴산암모늄, 알긴산프로필렌글리콜에스테르, 구아검, 로커스트빈 검, 아라비아 고무, 크산탄 검, 젤라틴, 카제인, 폴리비닐알코올, 폴리에틸렌옥사이드, 폴리에틸렌글리콜, 에틸렌·프로필렌 블록 중합체, 폴리아크릴산나트륨, 폴리비닐피롤리돈 등을 사용 할 수 있다.Examples of the binder, thickening agent and fixing agent include starch, dextrin, cellulose, methylcellulose, ethylcellulose, carboxymethylcellulose, hydroxyethylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, carboxymethylstarch, Sodium alginate, ammonium alginate, propylene glycol ester alginate, guar gum, locust bean gum, gum arabic, xanthan gum, gelatin, casein, polyvinyl alcohol, polyethylene oxide, polyethylene glycol, ethylene / propylene block polymer, sodium polyacrylate, poly Vinyl pyrrolidone and the like can be used.
또한, 본 발명은 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 농약을 제공한다.The present invention also provides a microbial pesticide containing as an active ingredient a microbial germsus strain or a culture thereof.
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 농약은, 잔디의 갈색마름병 또는 동전마름병 등을일으키는 식물 병원균을 방제하기 위하여 사용될 수 있다.In one embodiment of the present invention, a microbial pesticide containing as an active ingredient a Rosemary germosis strain or a culture thereof can be used for controlling a plant pathogenic bacterium causing brown blotching or coin blight of grass and the like.
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 농약은, 잔디의 대취(thatch)를 관리하기 위하여 사용될 수 있다.In one embodiment of the present invention, a microbial pesticide containing as an active ingredient a Rosemary germsus strain or a culture thereof can be used to manage grass thatch.
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 농약은 살균제일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the microbial pesticide containing the Rosemary germsus strain or a culture thereof as an active ingredient may be a sterilizing agent.
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 농약은 생장조절제일 수 있고, 더욱 바람직하게는 잔디의 생장조절제이나, 이에 제한되지 않는다.In one embodiment of the present invention, the microbial pesticide containing the Rosemary germsus strain or a culture thereof as an active ingredient may be a growth regulator, more preferably, but not limited to, a grass growth regulator.
본 발명의 일실시예에서, 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 농약은 천연식물보호제일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the microbial pesticide containing the Roche gambassus strain or a culture thereof as an active ingredient may be a natural plant protection agent.
"농약"이란, 농작물(수목, 농산물과 임산물을 포함한다)을 해치는 균, 곤충, 응애, 선충, 바이러스, 잡초, 그 밖에 농림축산식품부령으로 정하는 동식물을 방제하는 데에 사용하는 살균제·살충제·제초제, 농작물의 생리기능을 증진하거나 억제하는 데에 사용하는 약제 및 그 밖에 농림축산식품부령으로 정하는 약제를 말한다(농약관리법 제12426호, 2014.3.18., 개정 참조). 이와 같이 농약은, 용도에 따라, 살균제, 살충제, 제초제 또는 생장조절제 등으로 분류되며, '미생물 농약'은 세균, 바이러스 따위를 써서 식물의 해충이나 병균 따위를 죽이는 생물 농약을 말한다."Pesticide" means a disinfectant, an insecticide, an insecticide, a fungicide, a fungicide, a fungicide, a fungicide, a fungicide, a fungicide, a fungicide, a fungicide, etc. used for controlling plants, Herbicides, medicines used to promote or inhibit the physiological functions of crops, and other medicines prescribed by the Ordinance of the Ministry of Agriculture, Forestry and Livestock Food (Pesticide Control Act No. 12426, revised on March 18, 2014). Thus, pesticides are classified as fungicides, insecticides, herbicides, growth regulators, and the like, and "microbial pesticides" refers to biological pesticides that kill plant pests or germs using bacteria or viruses.
"천연식물보호제"란, 진균, 세균, 바이러스 또는 원생동물 등 살아있는 미생물을 유효성분으로 하여 제조한 농약 및 자연계에서 생성된 유기화합물 또는 무기화합물을 유효성분으로 하여 제조한 농약 중 어느 하나에 해당하는 농약으로서 농촌진흥청장이 정하여 고시하는 기준에 적합한 것을 말한다(농약관리법 제12426호, 2014.3.18., 개정 참조).The term "natural plant protection agent" means any one of pesticides produced from living microorganisms such as fungi, bacteria, viruses or protozoa as an effective ingredient, and pesticides produced from an organic compound or an inorganic compound produced in nature It refers to a pesticide which meets the standard prescribed by the Director of Rural Development Administration (Pesticide Control Act No. 12426, revised on March 18, 2014).
또한, 본 발명은 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 부산물 비료를 제공한다.In addition, the present invention provides a byproduct fertilizer containing as an active ingredient a bacterium of the genus Lysobacteria or a culture thereof.
"비료"란, 식물에 영양을 주거나 식물의 재배를 돕기 위하여 흙에서 화학적 변화를 가져오게 하는 물질, 식물에 영양을 주는 물질, 그 밖에 농림축산식품부령으로 정하는 토양개량용 자재 등을 말하며, "부산물비료"란 농업·임업·축산업·수산업·제조업 또는 판매업을 영위하는 과정에서 나온 부산물, 사람의 분뇨, 음식물류 폐기물, 토양미생물 제제(제제, 토양효소 제제를 포함한다), 토양활성제 등을 이용하여 제조한 비료로서 농림축산식품부장관이 지정하는 것을 말한다(비료관리법 제11998호, 2013.8.6., 개정 참조)."Fertilizer" refers to materials that cause nutrients to the plant or cause chemical changes in the soil to help the plant grow, materials that nourish the plants, and soil improvement materials prescribed by the Agriculture, Forestry and Livestock Food Ordinance. By-product fertilizer "means by-product, manure, food waste, soil microorganism preparation (including formulation, soil enzyme preparation), soil activator, etc. from the process of conducting agricultural, forestry, animal husbandry, fisheries, (Fertilizer Control Act No. 11998, revised Aug. 6, 2013), which is designated by the Minister of Agriculture, Forestry and Livestock Foods.
본 발명에 따른 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 부산물 비료는, 식물 성장을 촉진하거나 본 발명의 리소박터 굼모서스 균주의 성장을 촉진할 수 있도록 각종 영양분을 보충하는 함량으로 토양 또는 식물에 사용될 수 있다.The by-product fertilizer containing the R. germosis strain or the culture thereof as an active ingredient according to the present invention can be used as a supplement to various nutrients in order to promote plant growth or to promote the growth of the R. gomatis strain of the present invention Soil or plant.
본 발명에 따른 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 부산물 비료는, 고체 입상 또는 응집된 배합물을 포함할 수 있다.The byproduct fertilizer containing the Roger-germagmus strain according to the present invention or a culture thereof as an active ingredient may contain solid granular or agglomerated formulations.
본 발명에 따른 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 부산물 비료는, 용액에 비료가 분산되도록 하기 위한 계면활성제, 유화제, 소포제 또는 분산제와 혼합될 수 있으며, 균질 수용액 또는 수성 불균질 현탁액 배합물을 포함할 수 있다.The byproduct fertilizer containing the strain of the present invention or the culture thereof as an active ingredient may be mixed with a surfactant, an emulsifying agent, a defoaming agent or a dispersing agent for dispersing the fertilizer in the solution, Homogeneous suspension formulations.
또한, 본 발명은 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 제제를 식물 또는 이의 재배지에 처리하는 단계를 포함하는 식물 재배지에서 발생하는 진균 방제 방법을 제공한다.The present invention also provides a method of controlling fungi occurring in a plantation field, which comprises treating a plant or a cultivar thereof with a microorganism preparation containing the strain of the genus Lysobacteria germosis or a culture thereof as an active ingredient.
본 발명의 일실시예에서, 진균 방제 방법은 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 제제를 잔디 또는 이의 재배지에 처리하는 단계를 포함하는 것이 바람직하다.In one embodiment of the present invention, it is preferred that the fungal control method comprises the step of treating the microorganism preparation containing the Rosemary germosis strain or a culture thereof as an active ingredient to grass or a cultivation field thereof.
또한, 본 발명은 리소박터 굼모서스 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 미생물 제제를 잔디 또는 이의 재배지에 처리하는 단계를 포함하는 잔디의 대취(thatch) 조절 방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for controlling thatch of grass, comprising the step of treating a microorganism preparation containing as an active ingredient a Rosemary germosis strain or a culture thereof with a grass or a cultivation field thereof.
본 발명에 따른 미생물 제제를 식물 또는 이의 재배지에 처리하는 수단은, 예를 들어 미생물 제제를 잎의 표면 또는 이면에 도포하는 방법, 소정의 담체 등을 이용하여 미생물 제제를 잎의 표면 또는 이면에 부착시키는 방법, 미생물 제제를 잎에 산포 또는 공급하는 방법 등을 들 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.The means for treating the microorganism preparation according to the present invention to a plant or a cultivation field thereof may be, for example, a method of applying a microorganism preparation to the surface or the back surface of a leaf, a method of attaching the microorganism preparation to the surface or back surface of a leaf , A method of dispersing or supplying a microorganism preparation to leaves, and the like, but the present invention is not limited thereto.
본 발명에 따른 미생물 제제의 도포량 또는 산포량은, 유효 성분의 농도, 제제의 형태, 대상 병해나 작물의 종류, 병해에 의한 피해의 정도, 시용 장소, 시용 방법, 시용 시기, 혼용·병용하는 약제나 비료 등의 사용량, 종류 등의 여러가지 조건에 따라서 적절하게 선택할 수 있다.
The amount of application or the amount of application of the microorganism preparation according to the present invention depends on the concentration of the active ingredient, the form of the preparation, the type of the target disease or crop, the degree of damage caused by the disease, the place of application, the application method, The amount of the fertilizer and the like, the kind of the fertilizer, and the like.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of examples.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
However, the following examples are illustrative of the present invention, and the present invention is not limited to the following examples.
신규 미생물 BAS-1 균주의 분리Isolation of new microbial BAS-1 strain
잔디 재배지 근권 토양 또는 잔디 예지물을 포함하는 토양의 각 현탁액을 희석하여 영양한천(nutrient agar) 평판 배지(plate media)에 도말하고, 26℃에서 48시간 동안 배양하여 자란 콜로니(colony)를 수집하였다. 각 균주별로 멸균한 백금 이(platinum loop)를 이용하여 획선배양법(streak culture)으로 200개의 단일 콜로니를 다시 분리하여 실험에 사용하였다.
Each suspension of soil containing grass cultivation rhizosphere soil or grass clippings was diluted, plated on nutrient agar plate media, and colony grown by culturing at 26 DEG C for 48 hours. 200 single colonies were separated by streak culture using a platinum loop sterilized by each strain and used in the experiment.
신규 미생물 BAS-1 균주의 선발Selection of new microbial BAS-1 strains
실험례 1. 항진균 활성Experimental Example 1. Antifungal activity
분리된 각 단일 콜로니를 24시간 배양한 후, 멸균한 백금 이를 이용하여 PDA(potato dextrose agar) 배지의 가운데 획선을 긋었다. 식물 병원균인 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani), 스크레로티니아 호모에오카르파(Sclerotinia homoeocarpa), 드레크스레라 비세프타타(Drechslera biseptata) 및 피시움 아파니데르마툼(Pythium aphanidermatum) 균주를 각 다른 PDA 배지에서 배양한 후, 각 지름 5㎜의 식물 병원균주의 신선한 한천 디스크(agar disk)를 상기 획선을 그은 배지 플레이트의 반대편에 위치시켰다. 위와 같이 처리한 모든 플레이트들을 26℃에서 5일간 배양한 후, 후보 미생물 균주 콜로니의 가장자리와 각 식물 병원균주 콜로니의 가장자리 사이의 거리를 측정하였다. 그 결과, BAS-1 균주의 항진균 활성을 확인하였다. 위 실험을 2회 추가 반복 수행하였을 때에도 매우 유사한 경향을 나타내었으며, 이를 하기 [표 1] 및 [도 3]에 나타내었다.
Each isolated single colony was cultured for 24 hours, and the center line of PDA (potato dextrose agar) medium was drawn using sterilized platinum. Rhizoctonia solani , plant pathogenic bacterium, Sclerotinia homoeocarpa , Drechslera biseptata and Pythium aphanidermatum strains were cultured in the presence of each strain After culturing in another PDA medium, a fresh agar disk of 5 mm diameter phytopathogenic fungi was placed on the opposite side of the plate with the above line. All the treated plates were incubated at 26 ° C for 5 days, and then the distance between the edge of the candidate microbial strain colonies and the edge of each plant pathogenic colony was measured. As a result, the antifungal activity of the strain BAS-1 was confirmed. When the above experiment was repeated two more times, a very similar tendency was shown, which is shown in [Table 1] and [Figure 3] below.
(값(㎜)±표준편차, 대조구는 멸균수 접종)
(Value (㎜) ± standard deviation, control is inoculated with sterilized water)
실험례 2. 셀룰로스 분해능Experimental Example 2. Cellulose Resolution
각 단일 콜로니를, 0.5g/L의 K2HPO4, 0.25g/L의 MgSO4, 1.88g/L의 셀룰로스 분말(cellulose powder), 0.2g/L의 콩고 레드(Congo red), 2g/L의 젤라틴(gelatine) 및 15g/L의 한천 분말(agar powder)을 포함하는 셀룰로스 콩고 레드 한천(cellulose congo red agar) 고체 배지에 26℃에서 48시간 배양한 후, 각 단일 콜로니 주변에 투명환(clear zone, halo zone)이 형성되는지 여부에 따라 셀룰로스를 탄소원으로 이용하는 미생물을 후보 미생물 군으로부터 선별하였고, 다시 투명환의 크기를 측정함으로써 셀룰로스 분해 정도를 관찰하였다. 그 결과, 투명환이 형성되지 않았던 대조군과 비교하여, BAS-1 균주의 셀룰로스 분해능은 2.3㎜로 확인되었다. 위 실험을 2회 추가 반복 수행하였을 때에도 매우 유사한 경향을 나타내었으며, 이를 하기 [표 2] 및 [도 4]에 나타내었다.
Each single colony was treated with 0.5 g / L K 2 HPO 4 , Of 0.25g / L MgSO 4, 1.88g / L of cellulose powder (cellulose powder), 0.2g / L of Congo Red (Congo red), 2g / L of gelatine (gelatine) and 15g / L of agar powder (agar powder ) Cellulose Congo Red agar After culturing for 48 hours at 26 ° C in a solid medium, cellulose was added as a carbon source, depending on whether a clear zone (halo zone) was formed around each single colony The microorganisms to be used were selected from the candidate microorganism group, and the degree of cellulose decomposition was observed again by measuring the size of the transparent ring. As a result, the cellulose resolution of the BAS-1 strain was 2.3 mm as compared with the control group in which no transparent ring was formed. When the above experiment was repeated two more times, a very similar tendency was shown, which is shown in [Table 2] and [Figure 4].
실험례 3. 펙틴 분해능Experimental Example 3. Pectin Resolution
각 단일 콜로니를, 0.7g의 펙틴(pectin), 1.0g의 효모 추출물(yeast extract), 1.5g의 한천을 포함하는 중성 pH의 고체 배지에 26℃에서 48시간 배양한 후, 각 콜로니에 요오드 용액을 처리하였으며, 각 단일 콜로니 주변에 투명환(clear zone, halo zone)이 형성되는지 여부에 따라 펙틴을 탄소원으로 이용하는 미생물을 후보 미생물 군으로부터 선별하였고, 다시 투명환의 크기를 측정함으로써 펙틴 분해 정도를 관찰하였다. 그 결과, 투명환이 형성되지 않았던 대조군과 비교하여, BAS-1 균주의 펙틴 분해능은 3.3㎜로 확인되었다. 위 실험을 2회 추가 반복 수행하였을 때에도 매우 유사한 경향을 나타내었으며, 이를 하기 [표 2] 및 [도 5]에 나타내었다.
Each single colony was cultured at 26 DEG C for 48 hours in a solid medium of neutral pH containing 0.7 g of pectin, 1.0 g of yeast extract and 1.5 g of agar, and then added to each colony with iodine solution , Microorganisms using pectin as a carbon source were selected from candidate microorganisms depending on whether a clear zone (halo zone) was formed around each single colony, and the degree of pectin degradation was measured by measuring the size of the transparent ring Respectively. As a result, the pectin-resolving ability of the BAS-1 strain was confirmed to be 3.3 mm as compared with the control group in which no transparent ring was formed. When the above experiment was further repeated twice, similar tendencies were exhibited, which are shown in [Table 2] and [Figure 5].
(값(㎜)±표준편차, 대조구는 멸균수 접종)
(Value (㎜) ± standard deviation, control is inoculated with sterilized water)
신규 미생물 BAS-1 균주의 동정Identification of a new microbial strain BAS-1
선별된 BAS-1 균주를 분자생물학적으로 동정(identification)하기 위하여, BAS-1 균주의 콜로니를 NB(Nutrient Broth) 배지에 접종하여 26℃에서 3일간 배양한 후, 솔젠트사의 정제 비드(SolGent purification bead)를 사용하여 DNA를 추출하였다. PCR(Polymerase chain reaction)에 사용한 프라이머(primer)는 하기 [표 3]에 나타낸 서열과 같았고, 솔젠트사의 EF-태그(SolGent EF-Taq)를 사용하였으며, PCR은, 95℃에서 15분간 DNA를 변성(Denaturation)시킨 후, 95℃에서 20초, 50℃에서 40초 및 72℃에서 1분 30초의 사이클(cycle)을 각 30회 반복한 다음, 72℃에서 5분간 반응시키는 조건으로 수행하였다. PCR 생성물을 솔젠트사의 정제 키트(SolGent PCR purification kit)로 정제한 후, 1% 아가로스 젤(agarose gel)에서 전기영동(electrophoresis)하여 확인하였고, 시퀀싱(sequencing)을 통해 16S rRNA의 서열을 확인하였다. 시퀀싱 결과를 NCBI(National Center for Biotechnology Information) 데이터베이스(http://www.ncbi.nlm)에서 BLAST로 검색하여 99%의 상동성으로 리소박터 굼모서스(Lysobacter gummosus) 균주임을 [도 3]과 같이 확인하였고, CLUSTRAL X 프로그램 및 treev32 프로그램으로 균주의 계통학적 위치를 [도 4]와 같이 확인하였다.
In order to identify the selected BAS-1 strains by molecular biology, colonies of BAS-1 strains were inoculated into NB (Nutrient Broth) medium and cultured at 26 ° C for 3 days. SolGent purification bead) was used to extract DNA. The primers used for the PCR were the same as those shown in Table 3, and EG-tag (SolGent EF-Taq) from Solzent Co. was used. The PCR was carried out at 95 ° C for 15 minutes, Denaturation was carried out and the cycle was repeated 30 times each at 95 ° C for 20 seconds, 50 ° C for 40 seconds and 72 ° C for 1 minute and 30 seconds, followed by reaction at 72 ° C for 5 minutes. The PCR product was purified by SolGent PCR purification kit and confirmed by electrophoresis on 1% agarose gel. Sequencing of 16S rRNA was confirmed by sequencing. Respectively. The sequencing results were searched by BLAST in the National Center for Biotechnology Information (NCBI) database (http: //www.ncbi.nlm), and it was confirmed that the strain was Lysobacter gummosus strain with a homology of 99% , And the systematic location of the strain was confirmed by the CLUSTRAL X program and treev32 program as shown in FIG.
ggcagcgccc tcccgaaggt taagctacct gcttctggtg caacaaactc ccatggtgtg 60
acgggcggtg tgtacaaggc ccgggaacgt attcaccgca gcaatgctga tctgcgatta 120
ctagcgattc cgacttcacg gagtcgagtt gcagactccg atccggactg agatagggtt 180
tctgggattg gcttgccctc gcgggtttgc agccctctgt ccctaccatt gttagtaacg 240
tgtgtagccc tggccgtaag ggccatgatg acctgaccgt catccccacc ttcctccggg 300
ttgttcaccg gcggtctcct tagagttccc accattacgt gctggcaact aaggacaagg 360
gttgcgctcg ttgcgggact taacccaaca tctcacgaca cgagctgacg acagccatgc 420
agcacctgtc tcacggttcc cgaaggcacc aatccatctc tggaaagttc ccgtggatgt 480
caaggcccag gtaaggttct gcgcgttgca tcgaattaaa ccacatactc caccgcttgt 540
gcgggccccc gtcaattcct ttgagtttca gtcttgcgac cgtacttccc aggcggcgaa 600
cttaacgcgt tagcttcgat actgagagcc aagttgctcc caacatccag ttcgcatcgt 660
ttagggcgtg gactaccagg gtatctaatc ctgtttgctc cccacgcttt cgtgcctcag 720
tgtcagtgct ggtccagggt gtcgccttcg ccacagatgt tcctcccgat atctacgcat 780
ttcactgcta caccgggaat tccacacccc tctaccgcac tctagtaagc cagtttccaa 840
tgccattccc aggttgagcc cagggctttc acatcagact taacaaacca cctacgcacg 900
ctttacgccc agtaattccg agtaacgctt gcacccttcg tattaccgcg gctgctggca 960
cgaagttagc cgggtgctta ttcttccggg taccgtcatg actcaaggtt attaacccct 1020
aagctttttc tttccgggac aaaagtgctt tacaacccga aggccttctt cacacaccgc 1080
ggcatggctg gatcaggctt gcgcccattg tccaatattc cccactgctg cctcccgtag 1140
gagtctggac cgtgtctcag ttccaggtgt gcctgatcat cgctctcaga ccagctacgg 1200
atcgtcgcct tggtgggcct ttaccccgcc aactagctaa tccgacgtcg gctcatctat 1260
ctgcgtgagg ccttgcggtc ccccactttc acccgtaggt cgtatgcggt attagcgtaa 1320
gtttccctac gttatccccc acaaataggc agattccgac gtattcctca cccgtccgcc 1380
actcgccacc caaggagcaa gctcctctgt gctgccgttc gacttgcatgggcagcgccc tcccgaaggt taagctacct gcttctggtg caacaaactc ccatggtgtg 60
acgggcggtg tgtacaaggc ccgggaacgt attcaccgca gcaatgctga tctgcgatta 120
ctagcgattc cgacttcacg gagtcgagtt gcagactccg atccggactg agatagggtt 180
tctgggattg gcttgccctc gcgggtttgc agccctctgt ccctaccatt gttagtaacg 240
tgtgtagccc tggccgtaag ggccatgatg acctgaccgt catccccacc ttcctccggg 300
ttgttcaccg gcggtctcct tagagttccc accattacgt gctggcaact aaggacaagg 360
gttgcgctcg ttgcgggact taacccaaca tctcacgaca cgagctgacg acagccatgc 420
agcacctgtc tcacggttcc cgaaggcacc aatccatctc tggaaagttc ccgtggatgt 480
caaggcccag gtaaggttct gcgcgttgca tcgaattaaa ccacatactc caccgcttgt 540
gcgggccccc gtcaattcct ttgagtttca gtcttgcgac cgtacttccc aggcggcgaa 600
cttaacgcgt tagcttcgat actgagagcc aagttgctcc caacatccag ttcgcatcgt 660
ttagggcgtg gactaccagg gtatctaatc ctgtttgctc cccacgcttt cgtgcctcag 720
tgtcagtgct ggtccagggt gtcgccttcg ccacagatgt tcctcccgat atctacgcat 780
ttcactgcta caccgggaat tccacacccc tctaccgcac tctagtaagc cagtttccaa 840
tgccattccc aggttgagcc cagggctttc acatcagact taacaaacca cctacgcacg 900
ctttacgccc agtaattccg agtaacgctt gcacccttcg tattaccgcg gctgctggca 960
cgaagttagc cgggtgctta ttcttccggg taccgtcatg actcaaggtt attaacccct 1020
aagctttttc tttccgggac aaaagtgctt tacaacccga aggccttctt cacacaccgc 1080
ggcatggctg gatcaggctt gcgcccattg tccaatattc cccactgctg cctcccgtag 1140
gagtctggac cgtgtctcag ttccaggtgt gcctgatcat cgctctcaga ccagctacgg 1200
atcgtcgcct tggtgggcct ttaccccgcc aactagctaa tccgacgtcg gctcatctat 1260
ctgcgtgagg ccttgcggtc ccccactttc acccgtaggt cgtatgcggt attagcgtaa 1320
gtttccctac gttatccccc acaaataggc agattccgac gtattcctca cccgtccgcc 1380
actcgccacc caaggagcaa gctcctctgt gctgccgttc gacttgcatg
<110> Hanul Inc. <120> Lysobacter gummosus strain having antifungal activity against plant pathogen and thatch - decomposing activity, and microbial agent containing the same <130> P140245PP <160> 1 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 1430 <212> DNA <213> Lysobacter gummosus <400> 1 ggcagcgccc tcccgaaggt taagctacct gcttctggtg caacaaactc ccatggtgtg 60 acgggcggtg tgtacaaggc ccgggaacgt attcaccgca gcaatgctga tctgcgatta 120 ctagcgattc cgacttcacg gagtcgagtt gcagactccg atccggactg agatagggtt 180 tctgggattg gcttgccctc gcgggtttgc agccctctgt ccctaccatt gttagtaacg 240 tgtgtagccc tggccgtaag ggccatgatg acctgaccgt catccccacc ttcctccggg 300 ttgttcaccg gcggtctcct tagagttccc accattacgt gctggcaact aaggacaagg 360 gttgcgctcg ttgcgggact taacccaaca tctcacgaca cgagctgacg acagccatgc 420 agcacctgtc tcacggttcc cgaaggcacc aatccatctc tggaaagttc ccgtggatgt 480 caaggcccag gtaaggttct gcgcgttgca tcgaattaaa ccacatactc caccgcttgt 540 gcgggccccc gtcaattcct ttgagtttca gtcttgcgac cgtacttccc aggcggcgaa 600 cttaacgcgt tagcttcgat actgagagcc aagttgctcc caacatccag ttcgcatcgt 660 ttagggcgtg gactaccagg gtatctaatc ctgtttgctc cccacgcttt cgtgcctcag 720 tgtcagtgct ggtccagggt gtcgccttcg ccacagatgt tcctcccgat atctacgcat 780 ttcactgcta caccgggaat tccacacccc tctaccgcac tctagtaagc cagtttccaa 840 tgccattccc aggttgagcc cagggctttc acatcagact taacaaacca cctacgcacg 900 ctttacgccc agtaattccg agtaacgctt gcacccttcg tattaccgcg gctgctggca 960 cgaagttagc cgggtgctta ttcttccggg taccgtcatg actcaaggtt attaacccct 1020 aagctttttc tttccgggac aaaagtgctt tacaacccga aggccttctt cacacaccgc 1080 ggcatggctg gatcaggctt gcgcccattg tccaatattc cccactgctg cctcccgtag 1140 gagtctggac cgtgtctcag ttccaggtgt gcctgatcat cgctctcaga ccagctacgg 1200 atcgtcgcct tggtgggcct ttaccccgcc aactagctaa tccgacgtcg gctcatctat 1260 ctgcgtgagg ccttgcggtc ccccactttc acccgtaggt cgtatgcggt attagcgtaa 1320 gtttccctac gttatccccc acaaataggc agattccgac gtattcctca cccgtccgcc 1380 actcgccacc caaggagcaa gctcctctgt gctgccgttc gacttgcatg 1430 <110> Hanul Inc. <120> Lysobacter gummosus strain having antifungal activity against plant pathogen and thatch-decomposing activity, and microbial agent containing the same <130> P140245PP <160> 1 <170> Kopatentin 2.0 <210> 1 <211> 1430 <212> DNA <213> Lysobacter gummosus <400> 1 ggcagcgccc tcccgaaggt taagctacct gcttctggtg caacaaactc ccatggtgtg 60 acgggcggtg tgtacaaggc ccgggaacgt attcaccgca gcaatgctga tctgcgatta 120 ctagcgattc cgacttcacg gagtcgagtt gcagactccg atccggactg agatagggtt 180 tctgggattg gcttgccctc gcgggtttgc agccctctgt ccctaccatt gttagtaacg 240 tgtgtagccc tggccgtaag ggccatgatg acctgaccgt catccccacc ttcctccggg 300 ttgttcaccg gcggtctcct tagagttccc accattacgt gctggcaact aaggacaagg 360 gttgcgctcg ttgcgggact taacccaaca tctcacgaca cgagctgacg acagccatgc 420 agcacctgtc tcacggttcc cgaaggcacc aatccatctc tggaaagttc ccgtggatgt 480 caaggcccag gtaaggttct gcgcgttgca tcgaattaaa ccacatactc caccgcttgt 540 gcgggccccc gtcaattcct ttgagtttca gtcttgcgac cgtacttccc aggcggcgaa 600 cttaacgcgt tagcttcgat actgagagcc aagttgctcc caacatccag ttcgcatcgt 660 ttagggcgtg gactaccagg gtatctaatc ctgtttgctc cccacgcttt cgtgcctcag 720 tgtcagtgct ggtccagggt gtcgccttcg ccacagatgt tcctcccgat atctacgcat 780 ttcactgcta caccgggaat tccacacccc tctaccgcac tctagtaagc cagtttccaa 840 tgccattccc aggttgagcc cagggctttc acatcagact taacaaacca cctacgcacg 900 ctttacgccc agtaattccg agtaacgctt gcacccttcg tattaccgcg gctgctggca 960 cgaagttagc cgggtgctta ttcttccggg taccgtcatg actcaaggtt attaacccct 1020 aagctttttc tttccgggac aaaagtgctt tacaacccga aggccttctt cacacaccgc 1080 ggcatggctg gatcaggctt gcgcccattg tccaatattc cccactgctg cctcccgtag 1140 gagtctggac cgtgtctcag ttccaggtgt gcctgatcat cgctctcaga ccagctacgg 1200 atcgtcgcct tggtgggcct ttaccccgcc aactagctaa tccgacgtcg gctcatctat 1260 ctgcgtgagg ccttgcggtc ccccactttc acccgtaggt cgtatgcggt attagcgtaa 1320 gtttccctac gttatccccc acaaataggc agattccgac gtattcctca cccgtccgcc 1380 actcgccacc caaggagcaa gctcctctgt gctgccgttc gacttgcatg 1430
Claims (3)
A grass pathogen of any one of Rhizoctonia solani, Sclerotinia homoeocarpa, Drechslera biseptata, and Pythium aphanidermatum, (Lysobacter gummosus) BAS-1 strain (KCTC 18322P) having antifungal activity and cellulose and pectin resolving ability against E. coli.
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Citations (1)
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