KR20070056067A - 생리학적 활성 조성물 - Google Patents

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랄프 얘거
한스-헤닝 벵크
하이케 톰 디크
한스 울리히 호페
롤란트 라벨러
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카아길, 인코포레이팃드
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Abstract

4-O-메틸다비디게닌, 4'-O-메틸다비디게닌, 다비디게닌, 엘레미신, 이소엘레미신, 헤르니아린, 데메톡시카필라리신, 특히, 6-디메톡시카필라리신 및/또는 6-디메톡시-3'-메톡시카필라리신, 히스필루딘 및 9-히드록시-10E, 12Z, 15Z-옥타데카트리에논산, 및 그의 글리코시드, 특히, 4-O-메틸다비디게닌 및/또는 4'-O-메틸다비디게닌, 그의 염 및 유도체의 글루코시드 및/또는 람노글루코시드로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 화합물의 유효량을 포함하는 생리학적 활성 조성물이 청구된다.
당뇨병, 다비디게닌, 아르테미시아(Artemisia), 혈당량.

Description

생리학적 활성 조성물{Physiologically active composition}
본 발명은 유효량의 정의된 화합물을 포함하는 생리학적 활성 조성물 및 그의 용도에 관한 것이다.
천연 추출물 또는 그 추출물에 존재하는 주요한 활성 화합물을 포함하는 조성물이 대사 질환의 자가-치료(self-medication)를 위해 소비자들에 의해 그 사용이 점차 증가되고 있다. 이 경우에, 특히, 예를 들면, 자연요법(naturopathy)으로부터 알려지거나 또는 외국의 문화적 환경에서 입증된 효과 때문에 식물-유래 추출물이 특히 신뢰받고 있다.
대표적인 질병은 심혈관 질환 및 대사 질환, 예를 들면, 특히 당뇨병 및 그의 전구 증상들(precursors) 및 또한, 부적합한 영양 또는 운동 부족에 기인한 병적으로 변화된 혈액 값들, 특히 콜레스테롤 증가나 혈중 지질 수치가 있다.
특히, 대사 질환과 관련하여, 시장에서 의사의 처방 없이 잠정적인 다수의 제제들이 구매가능하고 당뇨병 및 특히, 당뇨병 타입 2의 예방 및 치료에 대한 관심이 증가되고 있다.
종래기술에서 천연 추출물 또는 식물 성분들을 이용하는 당뇨병 치료법에 관한 다수의 문헌들이 알려져 있다.
예를 들면, 국제특허출원 WO 00/15174 A2는 포유동물의 혈중 포도당 수준을 감소시키기 위한 식물 추출물의 형태인 정의된 조성의 바이오플라보노이드(bioflavonoid)의 용도를 개시한다. 언급된 대표적인 바이오플라보노이드는 헤스페리딘(hesperidin), 헤스페레틴(hesperetin), 나린긴(naringin), 나린게닌(naringenin), 디오스민(diosmin), 루틴(rutin) 및 퀘르세틴(quercetin)이다.
유럽특허출원 EP 0 902 870 A1은 마찬가지로, 특히, 나린게닌 및 나린긴을 혈중 포도당 또는 지방 수준을 저하시키거나 또는 당뇨병 및 고지혈증의 예방을 위을 적합한 플라바논(flavanone)으로 개시한다. 이 출원은 또한 플라바논이 예를 들면, 귤속 과일(citrus fruit)과 같은 식물 추출물로부터 유래할 수 있는 것으로 개시한다.
Herba Hungarica 1987, Tom. 26, No. 1의 발표에 따르면, 선별된 콩과 바우히니아(Bauhinia)속 종의 여러 기관들에 존재하는 것과 같은 플라보노이드는 혈중 포도당 수준에 효과를 보일 수 있다. 이 문헌에서, 특히, 퀘르시트로시드(quercitroside) 및 캠프페롤-3-갈락토시드(kaempferol-3-galactoside) 및 -람노글루코시드(rhamnoglucoside)가 언급되나; 5,7-디메톡시플라보논 및 4-O-L-람노피라노실-β-D-글리코시라노시드도 언급된다.
마지막으로, 국제특허출원 WO 03/020026 A1은 혈중 포도당 수준, 글루카곤-유사 펩티드 1(Glucagon-like peptide 1:GLP1)의 활성, 인슐린-의존성 포도당 흡수에 영향을 미치는 상이한 방법들 또는 타입 2 당뇨병의 치료 방법, 아르테미시아(Artemisia) 종, 특히, 아르테미시아 드라쿤쿨루스(Artemisia dracunculus)의 적 당히 극성인 추출물의 일반적으로 유효한 투여량을 청구한다.
당뇨병은 일반적으로 복잡한 대사 프로파일 또는 대부분의 경우에 증가된 혈당량 및 탄수화물, 지방 및 단백질의 대사에 대한 심각한 영향이 동반되는 것을 특징으로 하는 질병을 의미한다. 이 질병 프로파일은 예를 들면, 충분하지 못한 인슐린 수준(절대적 인슐린 결핍) 또는 부적합한 인슐린 활성(상대적 인슐린 결핍) 때문에 혈당량을 조절하지 못하는 상태로부터 기인한다. 증가된 포도당 수준은 이어서 추가적인 치료 단계를 요구하는 이차적인 건강 문제를 초래한다. 당뇨병과 연관된 것으로 간주되는 주요한 위험 인자들은 죽상경화증, 당뇨병성 망막증, 백내장, 신장병, 증가된 감염 위험, 고혈압, 신경 질환 및 치매이다.
전체적으로, 다양한 변이를 갖는 두 개의 주요한 당뇨병 타입들로 분류된다. 타입 1 당뇨병은 일반적으로 영아 또는 청년층에 영향을 미치고 신체가 인슐린을 생성하지 못하는 상태로부터 초래된다(절대적 인슐린 결핍). 그 빈도가 일반적으로 타입 1 당뇨병을 초과하는 타입 2 당뇨병은 감소된 인슐린 분비, 또는 보다 잦게는 인슐린 저항성(insulin resistance)에 의해 유발된다(상대적 인슐린 결핍). 일반적으로 적용되는 치료방법은 세포로 비-선택적(non-selective) 포도당 흡수를 촉진하여 혈당 수준을 저하시키는 것이다. 그러나, 이와 같이 거의 조절되지 않는(little-controlled) 포도당 흡수는 또한, 지방 세포에 영향을 미치고, 그 결과 체중 문제가 초래될 수 있다. 따라서, 이와 같은 경우들에서, 치료 방법의 엄격한 제어 및 그에 의해 달성되는 변화들이 중요하다. 가장 널리 이용되는 통상적인 치료방법은 인슐린의 투여로 이는 매우 비싸고 환자들에게 불편하며 과용에 따른 저 혈당증, 과민 반응(allergic reaction) 및 주사 부위에서 국소 지방성이영양증(lipodystrophy)의 발생과 같은 부작용을 일으킬 수 있다.
통상적인 치료 방법에 대립되는 것으로 전술된 천연 생성물, 특히, 식물 유래의 생성물과 같은, 일반의약품(over-the-counter medication)이 있다. 전통적인 자연 요법에서 이용되는 다양한 식물 과(family) 중 하나는 400 여종 이상을 포함하는 아르테미시아 과이다. Yazdanparast 등은 Biochemical Letters 59(1999), pp 137-141에서 아르테미시아 드라쿤쿨루스의 알코올-기반 추출물이 랫트에서 항 고지혈증 효과를 갖는 것으로 보고했다. 전술된 PCT 출원 WO 03/020026에 널리 기재된 바와 같이, 그러나, 교란된 지방 또는 당 균형과 연관된 유용한 효과는 또한 예를 들면, A. herba-alba 또는 A. judaica와 같은 다른 아르테미시아 종들에 대해서도 보고되었다.
천연 추출물과 관련된 일반적인 문제는 표준화이고, 표준화는 특히, 재배 및 수확 조건 및 보관 조건 및 워크업(workup)의 종류가 개시 물질의 성분 및 그들의 개별적인 분획 및 그로부터 수득되는 추출물에 상당한 영향을 미치기 때문에 수행하기가 어려울 수 있다. 기원(origin) 및 특히 관련된 기후적 인자 및 토양의 질이 식물 성분의 질 및 양에 유의성 있게 영향을 미친다. 그러나, 보관 온도, 공기 및 수분의 이미 수확된 물질에 대한 작용도 또한 예를 들면, 산화 효과의 형태로 역할을 수행한다. 또한, 분명하게 워크업의 종류 및 특히, 사용된 용매의 종류 및 품질이 중요하므로, 동일한 식물 종의 경우에도 식물 추출물의 조성물에서 상당한 차이가 관찰될 수 있다.
이는 특히, 타라곤(tarragon)의 대표적인 전술된 아르테미시아 변종의 경우에서 일어난다. "저먼(German)" 또는 "프렌치(French)" 타라곤이라 불리는 것들이 가장 많은 방향성을 갖는(aromoatic) 재배된 형태이고 최대 3%의 에센셜 오일을 포함하며 그 향은 메틸카비콜 (에스트라골) 및 -유게놀(eugenol)에 의해 결정된다. 또한, p-메톡시신남산(p-methoxycinnamic acid), 펠란드렌, α- 및 β-피넨, 캄펜, 옥시멘 및 리모넨이 또한 존재한다. "러시안(Russian)" 타라곤인 또 다른 변종은 훨씬 더 작은 수의 에센셜 오일을 포함하고, 에스트라골은 전혀 포함하지 않으며 그 결과 이 변종은 프렌치 타라곤의 매우 기분좋은 달콤한 향기를 생성하지 않는다. 대신에 존재하는 플라보노이드인 퀘르세틴 및 파툴레틴은 쓰고 떫은(astringent) 맛을 갖는다. 러시안 타라곤은 따라서 통상적인 요리용 향료 식물(herb)로 기술되지 않고, 타라곤의 본래의 야생종으로 분류된다. 그러나, 러시안 타라곤은 비교적 찬 기후에서 보다 용이하게 재배될 수 있다. 아르테미시아 변종들, 특히, 아르테미시아 드라쿤쿨루스의 잠재적인 성분들의 조사는 농업연구소(Agricultural Research Services)의 조사("Phytochemical and Ethnobotanical Databases")에서 찾을 수 있다(http://sun/arsgrin.gov:8080/npgspub/xsql/duke/plantdisp.xsql?taxon=123).
이미 반복적으로 언급된 국제특허출원 WO 03/020026에 아르테미시아 추출물에 존재할 수 있는 대표적인 성분들이 열거되어 있다. 예를 들면, 예로서, 카필라리신, 테트라히드록시메톡시플라본, 움벨리페론, 사쿠라닌, 트리히드록시메톡시플라본 및 트리히드록시플라본이 열거된다. 이 문헌은 또한 신선한 아르테미시아 추 출물 및 동결된 아르테미시아 추출물의 다양한 크로마토그램을 개시하나, 각 경우에 주어진 피크들은 존재 가능한 명확한 성분들에 대한 결론을 도출할 수 있는 정도는 아니며, 다만, 실시예들에서 에스트라골 및 메틸유게놀이 아르테미시아 드라쿤쿨루스 추출물의 대표적인 성분들로 언급된다. 마찬가지로, 완전히 자란 식물체에서 바이오매스 비율이 잎으로부터 줄기로 이전된다는 설명 때문에, 이 문헌에 따라 연구된 추출물은 주로 분리된 줄기 및 잎에 대해 진행된다. 바람직한 추출물 프로파일을 워크-업된(worked-up) 아르테미시아 잎에 기초하여 준비하고 보다 상세하게 조사된 추출물의 상대적 평가만 수행하였다. 예를 들면, 동결된 식물 재료로부터 수득된 아르테미시아 드라쿤쿨루스의 추출물은 신선한 식물 재료의 경우보다 높은 활성을 보이는 것으로 언급된다. 질량 스펙트럼의 Wiley 등록 기재와의 1회 비교에만 근거하면, 전술된 화합물들을 잠재적인 성분으로 명확하게 표시하는 주요 피크들이 확인될 수 있었다. 특히, 교란된 혈당 수준에 대한 동시-주장된 유용한 작용을 담당할 수 있는 추가적인 성분들은 기술된 약한 극성의 에탄올 추출물에서 확인되지 않았다.
따라서, 본 발명의 목적은 종래 기술에서 발생하는 이와 같은 어려움들을 극복하고, 특히 명확한 화합물 또는 종류의 화합물로 구성되며 전술된 증후군 및 증상들을 위해 유효량으로 이용될 수 있는 생리학적 활성 조성물(physiologically active composition)을 제공하는 것이다. 이 조성물은 가능한 한 용이하게 접근가능한 식물 재료를 포함하고 표준화된 형태로 용이하게 제조될 수 있어야 한다. 또한, 이 조성물은 종래 기술로부터 공지된 화합물이 아닌 성분들로 구성되고, 이들과의 상호작용 및 상호 간의 작용이 선택된 응용 분야에서 상승적인 효과를 가져야 한다.
본 발명의 목적은 4-O-메틸다비디게닌, 4'-O-메틸다비디게닌, 다비디게닌, 엘레미신, 이소엘레미신, 헤르니아린, 데메톡시카필라리신, 특히, 6-디메톡시카필라리신 및/또는 6-디메톡시-3'-메톡시카필라리신, 히스필루딘 및 9-히드록시-10E, 12Z, 15Z-옥타데카트리에논산, 및 그의 글리코시드, 특히, 4-O-메틸다비디게닌 및/또는 4'-O-메틸다비디게닌의 글루코시드 및/또는 -람노글루코시드로부터 선택된 하나 이상의 화합물의 유효량을 포함하는 상응하는 조성물에 의해 달성되었다. 또한, 그들의 개별적인 적합한 염 및 유도체가 포함될 수 있고 모든 화합물들은 HPLC를 이용한 분석을 통해 아르테미시아 추출물에서 검출가능하다.
놀랍게도, 청구된 화합물들은 또한 대사장애를 치료하기 위한 작용제의 제조를 위한 기반으로 이용되는 식물 추출물에서 실제로 검출될 수 있다. 이전에 공지된 문헌들과 대조적으로, 이 화합물들은 바람직하게는 아르테미시아 추출물에서 관찰될 수 있고, 예상과 달리, 개별적인 농도는 종래의 공지된 분석으로부터 유도가능하지 않은 양이다. 추가적인 장점으로서, 청구된 조성물은 특히 접근가능하여 순수한 물질들의 조합을 통해서뿐 아니라, 적합한 식물 추출물의 선택에 의한 간단한 방식으로 이용가능하므로, 이 식물 추출물 자체의 생산은 종래의 공지된 식물 재료의 워크-업 방법을 통해 처리되지 않아도 된다는 것이다.
청구된 조성물은 또한 바람직한 구체예에서, 클로로겐산, 나린게닌, 플라보노이드, 테르펜, 테르페노이드 및/또는 그의 유도체로 구성된 군으로부터 선택되고, 특히, 글리코시드 및/또는 아글리콘을 의미하는 것인 하나 이상의 화합물을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 한다. 이 화합물들은 개별적인 물질로서는 신규하지 않으나, 본 발명에 따라 포함된 성분들과 함께 조합되어 상승 효과, 바람직하게는 부가적 효과를 보인다.
본 발명에 따르면, 순수한 형태 및/또는 혼합물로 상기 화합물들을 포함하는 조성물이 바람직하고, 상기 혼합물은 바람직하게는 천연 추출물로서 존재한다. 그들의 생리화학적 특성들 때문에, 본 발명에 따른 조성물에 포함된 화합물들은 특히, 그들의 제형이 알코올 추출물인 것이 적합하고 바람직하게는 알코올/수용성 추출물이 적합하며, 이때, 특히 그들의 에테르 분획이 적합하다.
극성 액체로 알려진 알코올 및 특히, 메탄올, 에탄올 및 이소프로판올이 특별한 특징으로서 돌연변이유발(mutagenic) 활성을 빼지 않거나 또는 유해한 독소를 포함하는 그와 같은 추출물의 제조에 매우 적합하다.
그와 같은 추출물의 제조는 전혀 한정되지 않으나, 먼저 식물성 개시 물질을 유도물질(inductor) 성분과 접촉시키는 것이 바람직하고, 상기 성분은 특히 예를 들면 키토산과 같은 다당류 및 아세트산, 메틸 살리실레이트, 메틸 자스모네이트, 또는 심지어 미생물이 특히 적합하다. 뒤이어, 그에 의해 증해된(digested) 개시 물질을 추출 액제, 예를 들면, 알코올/수용액으로 처리한다. 알코올 함량은 40 내지 75%이고, 바람직하게는 알코올 함량, 특히, 에탄올 함량은 50 내지 60%인 것이 매우 적합한 것으로 입증되었다.
또한, 및 선택된 개시 물질에 따라, 이는 기계적 수단에 의해 예비처리되거나 또는 추가적으로 추출 과정 동안 , 특히 세포벽 및 막 구조를 파괴시켜 그에 의해 성분들이 방출되어 용매에 접근가능하게 하여 제조된다. 특히, 통상적인 분쇄(grinding) 방법이 이를 위해 선택되어야 한다. 그러나, 상승된 온도에서 신선한 또는 동결 및 해동된 개시물질의 건조를 수행하는 것이 가능하고, 이에 의해 확인된 발암물질이며, 타라곤 식물과 같은 일부 아스테라시애(Asteraceae)에 존재하는 성분인 메틸유게놀의 농도를 낮출 수 있다.
본 발명은 아르테미시아 추출물인 조성물을 특히 바람직한 것으로 포함한다. 이 경우, 특히 적합한 추출물은 아르테미시아 드라쿤쿨루스, A. 헤르바-알바, A. 주다이카, A. 불가리스, A. 아비시니카, A. 아비신티쿰, A. 아프라, A. 칸나리엔시스, A. 팔렌스, A. 안누아, A. 아브로타눔, A. 루도비시아나, A. 카필라리스 및 A. 스코파리아의 추출물이다.
이 추출물에 존재하는 성분들의 분석에서, 특별히 입증된 장점들을 갖는 A. 드라쿤쿨루스의 특별히 적합한 아종(subspecies)은 러시안 타라곤 또는 프렌치 타라곤의 추출물이고, 이들은 본 발명에 필수적인 화합물들을 충분하고 안정적인 농도로 포함하기 때문이다.
본 명세서에서, 본 발명에 따른 조성물은 유리하게는 1 내지 1,000,000 ppm인 유효량으로 개별적인 화합물 또는 혼합물 또는 추출물을 포함하고, 그 농도의 최대값은 순수한 화합물에 근거하는 것을 특징으로 하는 것으로 기재될 수 있다. 바람직하게는, 그러나, 유효량은 10 내지 20,000 ppm이고 특히 바람직하게는 100 내지 5000 ppm이다. 이 양들은 특히, 상이한 화합물들은 상호 간에 부분적으로 상이함을 보이고, 이미 전술된 바와 같이 동종요법 범위(homeopathic range) 내지 순수한 화합물에 이르는 상이한 양으로 보충적인 활성을 보인다는 사실을 반영한다.
전술된 조성물 외에, 본 발명은 또한 당뇨병 (전증:pre-diabetes) 및 그와 연관된 형태, 동반된 질환 및/또는 이차 질병의 예방 및/또는 치료용 작용제의 제조에서의 용도를 포함하고, 총 11개의 응용 분야가 바람직한 것으로 간주된다. 주로, 본 발명의 조성물의 작용제의 제조에서의 청구된 용도는 바람직하게는 a) 포유동물에서 혈당 수준, b) 인슐린 저항성, c) 간의 포도당 방출(hepatic glucose release), d) GLP-1("글루칸-유사-펩티드 1")의 활성, e) GLP-1과 관련된 수용체 간의 결합 능력, f) 포도당의 글리코겐으로의 전환, g) IRS-2("인슐린 수용체 기질 2") 폴리펩티드의 발현, h) 인슐린-제어 포도당 흡수 및/또는 i) 식후 포도당 수준에 영향을 주는 작용제를 포함한다. 그러나, j) 당뇨병 타입 2 및/또는 타입 1의 치료 또는 예방, k) 당뇨병 전증(pre-diabetes)의 치료 또는 예방 및/또는 l) 체중에 대한 표적화된 영향 및/또는 m) 신체의 신체적 활동력(physical performance ability)을 증가시키기 위해 이용될 수 있는 작용제가 또한 유용하다.
대사 과정에 영향을 미치는 상기 가능성들은 바람직하게는 a) 혈중 포도당 수준, b)인슐린 저항성, c) 간의 포도당 방출, 및/또는 i) 식후 포도당 수준에 영향을 주는 경우에 감소를 위해 작용하고 d) GLP-1("글루칸-유사-펩티드 1")의 활성, e) GLP-1 및 관련된 수용체 간의 결합 능력, f) 포도당의 글리코겐으로의 전환, g) IRS-2("인슐린 수용체 기질 2") 폴리펩티드의 활성, 및 h) 인슐린-제어 포도당 흡수에 영향을 주는 경우들에서 그들의 증가를 위해 작용할 수 있다.
또 다른 구체예에서, 본 발명은 작용제의 식품 보충제, 음료, (당뇨병 환자용) 식품 및/또는 기능성 식품으로서의 비-치료적 용도를 포함한다. 그러나, 임상영양(clinical nutrition) 및/또는 스포츠 식품으로서의 용도도 가능하며 각 경우에 비-치료적 응용 분야에 속한다. 청구된 조성물에 의해 제조될 수 있는 작용제는 따라서 특히, OTC 제품 및 따라서 자가-치료에 특히 적합하다.
용도 및 그와 연관된 응용의 개별적인 목적과 독립적으로, 본 발명은 조성물의 일일 유효량이 단위 체중당 0.1 내지 500 mg이고 단위 체중당 1.5 내지 150 mg/kg이 바람직하며, 단위 체중당 15 mg이 특히 바람직한 것인 양에 의한 작용제의 용도를 제공한다.
본 발명에 따른 화합물 및 추가적으로 열거된 화합물들 외에, 작용제는 또한 당살초(Gymnema sylvestre), 호로파(fenugreek), 고과(bitter melon), α-리포산(염), 코로솔산, 우르솔린산, D-피니톨, 알로에 베라, 크로모피콜리네이트, 바나바, 야코우, 여주(Momordica charantia), 올리브, 페로카르푸스 마르수피움(Pherocarpus marsupium), 살라시아 레티큘라타(Salacia reticulata), 마늘, 산사나무(hawthorn), 포스포리피드 및 특히, 포스파티딜세린, 오메가-3 지방산 및 전분으로부터 선택된 하나 이상의 활성 화합물 및/또는 활성 추출물을 더 포함할 수 있다. 따라서 구성되는 작용제는 본 발명에서 특히, (당뇨병) 전증의 예방 및 치료를 위해 이용될 수 있다.
본 발명은 그러나, 또한 생리적 활성 조성물 외에 피루브산, L-카르니틴, 히드록시시트르산, 에페드린, 카페인, 컨쥬게이트된 리놀산, 아세틸살리실산, α-리포산, 및/또는 그의 염 및 유도체로부터 선택된 하나 이상의 활성 화합물을 포함하는 작용제의 용도에 동시에 포함한다. 이 작용제는 체중 조절 및 특히 체중 감소에 특히 적합한 것으로 입증되었다.
본 발명에서, 그러나, 생리적 활성 조성물 외에, 구아니딘 화합물, 특히, 크레아틴, 크레아틴 모노히드레이트, 구아니디노아세트산, 크레아티놀, 크레아틴-시트르산 화합물, 크레아틴 피루베이트, 포스포크레아틴, 및 또한 카페인, α-리포산, 글루코사민, 콘드로이틴, 가수분해된 콜라겐, 메틸술포닐메탄, 유청 단백질, L-글루타민, 포스포리피드, 특히, 포스파티딜세린, 포스파티딜콜린, 및 또한 콜린, β-히드록시-β-메틸 부티레이트, 피루브산, L-카르니틴, D-리보오스, 아미노산, S- 아데노실메티오닌, 타우린, 컨쥬게이트된 리놀산, 글리세롤, 시나몬 및/또는 염 및 유도체로부터 선택된 하나 이상의 활성 화합물을 포함하는 작용제를 이용할 수 있다. 작용제의 이 변형은 무엇보다도 비-지방(non-adipose) 세포에서 세포 에너지를 증가시킨다.
또한, 본 발명에 따르면, 본 발명에 따른 조성물을 단독으로 또는 전술된 활성 화합물 및/또는 추출물 중 하나 이상과 조합하여 이용하는 약제가 청구된다.
전체적으로, 청구된 조성물 및 관련된 응용들을 이용하면 본 발명의 목적이 완전히 달성될 뿐 아니라 특히, 대사 과정에 대해 유용한 효과를 갖는 정의된 화합물이 조합되어 이용될 수 있고 이 화합물들은 순수한 물질로서 뿐 아니라 추출물 및 특히 식물 추출물의 형태로 그들의 원하는 효과를 보일 수 있다. 이 화합물들의 효능은 부분적으로 상호 간의 조합 및 다른 종류의 화합물, 특히, 비-의료 분야에서 자가-치료와 연관되어 최종 소비자에게 상당한 장점들을 가져다 주는 화합물과의 조합에 의해 상승적으로(superadditively) 부분 제고될 수 있다.
하기의 실시예들은 본 발명의 상기 장점들을 예시한다.
실시예 1: 타라곤 추출물의 제조
러시안 타라곤(아르테미시아 드라쿤쿨루스)의 건조된 지상 식물체 부분(overground plant parts) 500g을 분쇄(입자 크기 < 10 mm)하고 부피기준 80% 에탄올 8l로 45℃에서 16시간 동안 추출하였다. 뒤이어 추출액을 여과시키고 그 여과액을 회전 증류기(rotary evaporator)에서 200 ml까지 농축하고 50g의 미정질 셀룰로오스와 혼합하여 동결건조 시켰다. 175g의 녹색 분말을 수득하였다.
추출물의 HPLC 분석으로 다음과 같은 함량을 확인했다:
헤르니아린 360 ppm
다비디게닌 990 ppm
6-데메톡시카필라리신 1450 ppm
6-데메톡시-3'-메톡시카필라리신 15 ppm
엘레미신 195 ppm
이소엘레미신 420 ppm
히스필루딘 65 ppm
9-히드록시-10E, 12Z, 15Z-옥타데카트리에논산 25 ppm
4'-O-메틸다비디게닌 465 ppm
4-O-메틸다비디게닌 35 ppm
4-O-메틸다비디게닌 4'-글루코시드 585 ppm
4-O-메틸다비디게닌 4'-람노글루코시드 675 ppm
실시예 2: 당뇨병 타입 2-동물 모델에서 식후 혈중 포도당 수준에 대한 알코올계 타라곤 추출물의 급성 효과
하기에, 비만증 및 동시에 증가된 공복 혈당을 갖는(당뇨병 타입 2) 동물에서 타라곤 추출물의 식후 혈당량에 대한 급성 효과를 연구한 연구의 결과들이 열거된다. 실시예 1에 따라 수득된 분말을 함유하는 포도당 용액을 이용하였다.
실험 시간은 각 경우에 최대 5시간이었고 각 동물을 대상으로 다양한 투여량의 추출물 또는 위약(placebo)으로 경구 포도당 내성 테스트(oral glucose tolerance test)를 수행하였다.
상승된 혈당량을 가진 총 30마리의 랫트를 연구하거나 또는 ob/ob 마우스( ob(비만증) 유전자에 대해 동질접합체인 지방이 많은 마우스)를 연구하고, 각 처리군 당 10마리를 배정하였다. 14시간의 공복 기간 후에, 대상 동물에서 공복 혈당량을 측정하였다. 이는 평균 138.8 mg/dl(마우스) 또는 136.0 mg/dl(랫트)의 포도당이었고 군들 간에 유의성 있는 차이를 보이지는 않았다. 용액 내의 정의된 포도당의 양(랫트의 단위 체중당 3.33 ml, 또는 마우스의 단위 체중당 10 ml의 용액)을 뒤이어 위관(gastric tube)에 의해 동물에게 투여하였고, 그 용액은 단위 체중당 500mg 또는 1000mg의 추출 용액, 또는 대조구로 포도당 용액(60% 강도(랫트) 또는 20% 강도(마우스) + 가용화제인 2% 트윈 80)만을 포함했다. 포도당 용액의 투여 후에, 180분 동안 15분 간격으로 혈액을 채취하여 혈액의 포도당 농도 및 인슐린 농도를 측정하였다. 식후 포도당 수준의 값들이 표 1 및 표 2에 기재된다.
모든 동물들은 부적합의 기미 없이 치료들을 수용했다.
표 1: 포도당 용액에 담긴 단위 체중 kg당 500 mg 또는 1000 mg의 추출물 또는 대조구 포도당 용액으로 처리된 당뇨병 마우스에서 식후 혈중 포도당 농도(mg/dl).
시간 (분) 0 15 30 60 90 120 180
대조구
평균 142.2 433.2 686.0 357.1 340.4 335.0 313.5
표준편차 54.2 88.2 118.9 110.5 124.2 131.9 97.5
500mg/kg 체중
평균 143.7 353.9 534.2 319.7 274.0 260.5 259.9
표준편차 60.4 85.7 100.2 71.8 77.9 61.5 50.7
1000mg/kg 체중
평균 130.5 313.4 476.9 300.9 265.6 251.3 236.1
표준편차 44.6 88.1 100.9 76.8 63.8 75.4 76.6
표 2: 포도당 용액에 담긴 단위 체중 kg당 500 mg 또는 1000 mg의 추출물 또는 대조구 포도당 용액으로 처리된 당뇨병 랫트에서 식후 혈중 포도당 농도(mg/dl).
시간 (분) 0 15 30 60 90 120 180
대조구
평균 133.2 323.7 430.2 452.6 367.5 286.3 235
표준편차 28.3 43.8 62.3 75.9 79.3 81.7 65.5
500mg/kg 체중
평균 135.2 306.9 382.4 364.2 294.8 230.5 195.8
표준편차 16.1 65.8 77.2 59.3 58.2 55.2 46.8
1000mg/kg 체중
평균 139.6 281.4 314.3 297.7 245.6 210.4 194.2
표준편차 42.2 99.8 82.4 91.8 102.2 93.2 55.4
실시예 3: 당 내인성(Glucose intolerance) 또는 타입 2 당뇨병을 가진 인간에서 식후 혈중 포도당 수준에 대한 타라곤 추출물의 급성 효과
당 내인성 또는 타입 2 당뇨병을 가진 사람을 대상으로 타라곤 추출물의 식후 혈당량에 대한 급성 활성을 조사하기 위해 단심적, 이중맹검 랜덤화 위약-제어 교차 연구(monocentric, double-blind randomized placebo-controlled cross-over study)를 수행하였다. 제제의 작용은 식사 내성 테스트(Meal Tolerance Test: MTT)에 의해 결정하였다.
식이요법으로만 치료되고 상승된 공복 혈당량을 갖는 8명의 남성 또는 여성 환자들이 연구에 참여하였다. 예비 참여자들을 본 연구의 참여 대상으로서의 적합성 여부에 대해 테스트하는 스크리닝 테스트(VO) 외에, 본 연구는 2 내지 3주의 제거(wash-out) 기간을 간격으로 2일의 순회 연구일(ambulant study day), 방문 1(V1) + 방문 2(V2) 및 V2에 뒤이은 최종 조사를 포함했다.
참여자의 적합성이 확인되면, 참여자들을 무작위로 치료 계획에 할당하고 이중맹검 교차 방법으로 연구 과정 동안 양 치료법, 즉, 추출액 및 위약(미정질 셀룰로오스)을 적용하였다. 각 연구 일에, 각 경우에서 환자들은 표준 조식 전에 1000 mg의 추출물 또는 위약의 단일 경구 투여를 받았고, 그 후 뒤이어 그 처리의 식후 혈당량에 대한 작용을 정규적인 혈당량 결정 및 뒤이은 5시간 동안의 혈청 인슐린 수준의 분석에 의해 결정하였다. 최종 조사가 수행되는 방문 2의 완료 후, 참여자들에 대한 연구를 종료하였다.
임상 연구에 대한 관심 있는 참여자의 전제조건은 당사자가 해당 임상 연구 의 속성, 중요성 및 결과에 관해 구두 및 서면으로 고지받았다는 서면 동의이다. 조사자들은 헬싱키 선언(2000년 10월 에딘버러 개정), 국제조화회의(ICH)의 임상시험 품질관리규범(principles of Good Clinical Practice(GCP)) 및 국내 규정 및 가이드라인을 준수하여 연구를 수행하여야 한다.
참여자들은 연구의 모든 측면들 및 데이터 보호에 대해 안내 책자를 통해 고지받았다. 대상자의 동의 서약서 외에, 대상자의 고지를 담당 의사의 서명에 의해 문서화하였다.
참여자 포함 기준(inclusion criteria)에 따라, 35세 내지 70세 사이의 연령자로, BMI가 29 kg/m2를 초과하고 40 kg/m2미만이고, 공복 혈당치가 125 mg/dl 이상이고 220mg/dl 이하이며, 정제 또는 인슐린에 의한 항당뇨병 치료 없이 HbA1c 값이 6.1%를 초과하며 서면 동의서를 제출한 5명의 남성 및 3명의 여성 대상자들을 연구에 참여시켰다. 이 대상자들은 연구 의사의 추정에 따르면, 예비 테스트에서 연구 값(laboratory value)(특히: 급성 또는 만성 질병/장애를 반영할, 혈청 크레아틴 및 혈청 헤모글로빈 값, 및 글루타메이트-옥살아세테이트 트랜스아미나아제(GOT) 및 글루타메이트-피루베이트 트랜스아미나제(GPT)의 활성)의 임상적으로 유의성 있는 편차를 보이지 않았다.
표 3: 표준 조식 동안 1000 mg의 추출물 또는 위약으로 처리된 당뇨병 대상자의 식후 혈장 포도당 농도(mg/dl).
시간 [분] 0 30 60 90 120 180 300
위약
평균 142.4 202.7 234.4 243.7 223.5 185.7 152.6
표준편차 2.59 5.95 7.08 9.53 7.32 4.89 3.30
1000mg
평균 141.3 185.7 218.4 207.6 184.8 159.3 133.7
표준편차 3.34 14.59 10.55 6.18 3.3 4.78 3.45
표 4: 표준 조식 동안 1000 mg의 추출물 또는 위약으로 처리된 당뇨병 대상자의 식후 혈장 인슐린 농도(μU/ml).
시간 [분] 0 30 60 90 120 180 300
위약
평균 14.1 79.9 149.8 173.8 178.7 148.3 56.9
표준편차 4.2 18.4 26.7 20.2 23.7 14.5 6.3
1000mg
평균 13.2 72.1 134.4 156.7 145.5 118.6 42.9
표준편차 2.9 20.3 18.9 26.8 19.6 11.4 7.3

Claims (23)

  1. 4-O-메틸다비디게닌, 4'-O-메틸다비디게닌, 다비디게닌, 엘레미신, 이소엘레미신, 헤르니아린, 데메톡시카필라리신, 특히, 6-데메톡시카필라리신 및/또는 6-데메톡시-3'-메톡시카필라리신, 히스필루딘 및 9-히드록시-10E, 12Z, 15Z-옥타데카트리에논산, 및 그의 글리코시드로부터 선택된 하나 이상의 화합물의 유효량을 포함하는 생리학적 활성 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 글리코시드는 4-O-메틸다비디게닌 및/또는 4'-O-메틸다비디게닌의 글루코시드 및/또는 람노글루코시드 및 그의 염 및 유도체 및 HPLC 분석에 의해 아르테미시아 추출물에서 검출가능한 화합물로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 클로로겐산, 나린게닌, 플라보노이드, 플라바노이드, 테르펜, 테르페노이드 및/또는 그의 유도체로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  4. 제3항에 있어서, 글리코시드 및/또는 아글리콘의 형태인 하나 이상의 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 순수한 형태 및/또는 혼합물로서 상기 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  6. 제5항에 있어서, 천연 추출물의 형태로 상기 혼합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 알코올 추출물 및/또는 알코올/수성 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  8. 제7항에 있어서, 상기 알코올/수성 추출물의 에테르 분획을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  9. 제6항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 아르테미시아 추출물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  10. 제9항에 있어서, 상기 아르테미시아 추출물은 A. 드라쿤쿨루스, A. 헤르바-알바, A. 주다이카, A. 불가리스, A. 아비시니카, A. 아비신티쿰, A. 아프라, A. 칸나리엔시스, A. 팔렌스, A. 안누아, A. 아브로타눔, A. 루도비시아나, A. 카필라리스 및/또는 A. 스코파리아의 추출물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  11. 제6항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 추출물은 A. 드라쿤쿨루스의 아종으로부터 유래되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 상기 아종은 러시안 타라곤 또는 프렌치 타라곤인 것을 특징으로 하는 조성물.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 유효량은 1 내지 1000000 ppm인 것을 특징으로 하는 조성물.
  14. 당뇨병 (전증) 및 그와 관련된 형태, 동반된 질병 및/또는 이차 질병의 예방 및/또는 치료를 위한 작용제를 제조하기 위한 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 용도.
  15. 제14항에 있어서, 상기 당뇨병 (전증) 및 관련된 형태, 동반된 질병 및 이차 질병의 예방 및/또는 치료에서, 상기 조성물은
    a) 포유동물의 혈당량,
    b) 인슐린 저항성,
    c) 간의 포도당 방출,
    d) GLP-1("글루카곤-유사-펩티드 1")의 활성,
    e) GLP-1 및 연관된 수용체 간의 결합능,
    f) 포도당의 글리코겐으로의 전환,
    g) IRS-2("인슐린 수용체 기질 2") 폴리펩티드의 발현,
    h) 인슐린-제어 포도당의 흡수 및/또는
    i) 식후 포도당 수준 및
    j) 당뇨병 타입 2 및/또는 당뇨병 타입 1의 치료 및/또는 예방,
    k) 당뇨병 전증의 치료 및/또는 예방,
    l) 체중에 대한 표적화된 영향 및/또는
    m) 신체의 신체적 활동력을 증진시키는 데 영향을 미치는 것을 특징으로 하는 것인 용도.
  16. 제15항에 있어서, 상기 a), b), c) 및 i)에서 상기 영향은 감소로서 일어나고, 상기 d), e), f), g), h)에서 상기 영향은 증가로서 일어나는 것을 특징으로 하는 용도.
  17. 제14항 내지 제16항에 따른 비-치료적 용도로서, 상기 작용제는 임상 영양에서 식품 보충제, 음료, 식품, 당뇨병환자용(diatectic) 식품, 기능성 식품 및/또는 스포츠 식품으로 이용되는 것을 특징으로 하는 용도.
  18. 제14항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 작용제는 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 일일 유효량에 해당하고 단위 체중당 0.1 mg 내지 500 mg인 양으로 이용되는 것을 특징으로 하는 용도.
  19. 제14항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 작용제는 상기 생리적 활성 조성물 외에,
    a) 당살초(Gymnema sylvestre), 호로파(fenugreek), 고과(bitter melon), α-리포산(염), 코로솔산, 우르솔린산, D-피니톨, 알로에 베라, 크로모피콜리네이트, 바나바, 야코우, 여주(Momordica charantia), 올리브, 페로카르푸스 마르수피움(Pherocarpus marsupium), 살라시아 레티큘라타(Salacia reticulata), 마늘, 산사나무(hawthorn), 포스포리피드, 오메가-3 지방산 및/또는 전분으로부터 선택된 하나 이상의 활성 화합물 및/또는 활성 추출물
    b) 피루브산, L-카르니틴, 히드록시시트르산, 에페드린, 카페인, 컨쥬게이트된 리놀산, 아세틸살리실산, α-리포산, 및/또는 그의 염 및 유도체로부터 선택된 하나 이상의 활성 화합물 및/또는
    c) 구아니딘 화합물, 카페인, α-리포산, 글루코사민, 콘드로이틴, 가수분해된 콜라겐, 메틸술포닐메탄, 유청 단백질, L-글루타민, 포스포리피드, 및 또한 콜린, β-히드록시-β-메틸 부티레이트, 피루브산, L-카르니틴, D-리보오스, 아미노산, S- 아데노실메티오닌, 타우린, 컨쥬게이트된 리놀산, 글리세롤, 시나몬 및/또는 그의 염 및 유도체로부터 선택된 하나 이상의 활성 화합물;을 포함하는 것을 특징으로 하는 용도.
  20. 제19항에 있어서, 상기 a)의 경우에, 상기 포스포리피드는 포스파티딜세린이고,
    상기 c)의 경우에, 상기 구아니딘 화합물은 크레아틴, 크레아틴 모노히드레이트, 구아니디노아세트산, 크레아티놀, 크레아틴-시트르산 화합물, 크레아틴 피루베이트 및/또는 포스포크레아틴이고, 상기 포스포리피드는 포스파티딜세린 및/또는 포스파티딜콜린인 것을 특징으로 하는 용도.
  21. 제19항 또는 제20항에 있어서, 상기 a)의 경우에, 상기 작용제는 당뇨병 (전증)의 예방 및/또는 치료를 위해 이용되고,
    상기 b)의 경우에, 상기 작용제는 체중의 조절, 및 특히, 체중의 감소를 위해 이용되며,
    상기 c)의 경우에, 상기 작용제는 비-지방 세포(non-adipose cell)의 세포 에너지를 증가시키기 위해 이용되는 것을 특징으로 하는 용도.
  22. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 포함하는 약제.
  23. 제22항에 있어서, 제19항에 언급된 하나 이상의 활성 화합물 및/또는 활성 추출물을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 약제.
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