KR20050111785A - 마이크로칩, 핵산 추출용 키트 및 핵산의 추출 방법 - Google Patents

마이크로칩, 핵산 추출용 키트 및 핵산의 추출 방법 Download PDF

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KR20050111785A
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미찌히로 오오니시
게이스께 모리시마
다께히꼬 기따모리
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소니 가부시끼 가이샤
카나가와 아카데미 오브 사이언스 앤드 테크놀로지
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Abstract

본 발명은, 저비용으로 제조, 생산할 수 있고, 액체 시료의 흐름의 정체 발생이 억제되며, 마이크로비드의 주입, 충전, 수송을 원활하고 간편하게 행할 수 있고, 또한 먼지의 발생도 억제할 수 있는 새로운 기술 수단과 이것을 이용하는 새로운 핵산 추출 방법을 제공한다. 상하 기판(1, 2)의 접합면에 설치된 홈부(11, 21)에 의해 미세 유로(3)이 형성되는 마이크로칩이며, 미세 유로(3)에는, 그 단면의 상하, 좌우 또는 상하좌우의 중앙부에 유로 단면이 축소된 간극부(31)이 설치되어 있어, 마이크로비드가 차단된다.

Description

마이크로칩, 핵산 추출용 키트 및 핵산의 추출 방법 {MICROCHIP, NUCLEIC ACID EXTRACTING KIT, AND NUCLEIC ACID EXTRACTING METHOD}
본 발명은 마이크로칩, 핵산 추출용 키트 및 핵산의 추출 방법에 관한 것이다.
본 출원은 일본에서 2003년 3월 24일에 출원된 일본 특허 출원 번호 제2003-081605호를 기초로 하여 우선권을 주장하는 것이고, 이 출원은 참조로 본 출원에 원용된다.
종래, 유리 등의 기판 표면에 리소그래피 등의 미세 가공 기술에 의해서 깊이 100 ㎛, 폭 500 ㎛ 정도까지의 크기의 홈을 형성하고, 이 홈을 액체나 기체의 미세 유로로 하여, 화학 반응, 생화학 반응, 용매 추출, 기액(氣液) 분리, 또한 이들에 기초하는 미량 성분의 화학 분석이나 비접촉 광학 분석 등을 가능하게 한 마이크로칩 기술이 알려져 있다.
이 마이크로칩 기술에 대해서는, 본 출원의 발명자들에 의해서 미세 유로 내에 반응 담체로서의 마이크로비드를 삽입하고, 또한 미세 유로 내에 댐 형상의 차단부를 설치하도록 한 방책도 제안되어 있다(문헌 1).
최근의 분자 유전자나 분자 생물학의 진전과 그의 의료 등에의 응용 확대에 따라서, 액체 시료 중에서의 핵산의 추출이 매우 중요한 과제로 되어 있기 때문에, 마이크로칩 기술을 핵산 추출에 이용하는 것이 검토되어 왔고, 지금까지도 실리카 비드를 이용하는 방법이나 실리카 마이크로필러를 이용하는 방법, 실리카 필터를 이용하는 방법 등이 제안되어 있다(문헌 2 내지 4).
그러나, 지금까지의 마이크로칩 기술에 있어서는, 예를 들면 실리카 마이크로필러나 실리카 필터를 이용한 핵산 추출의 방법에서는, 높은 비용이 들며, 오염된 경우에 교환할 수 없다는 기본적인 문제가 있고, 또한 지금까지의 실리카 등의 마이크로비드를 이용하는 방법에서는, 미세 유로 내로의 주입을 위해 큰 압력이 필요하여 비드의 충전이 용이하지 않았다.
또한, 마이크로비드를 댐 형상의 차단부에 의해 차단하는 종래의 방법에 있어서는, 액체 시료의 흐름에서 정체가 발생하기 쉬워, 실리카 등의 마이크로비드의 수송을 원활하게 행하는 것이 어려워지는 경우가 있다는 문제가 있었다.
또한, 종래에는, 유리, 석영 등을 마이크로칩 기판으로 하여 미세 유로를 형성한 경우에는, 유로 내에 먼지가 생기기 쉽고, 더구나 그의 제거가 어려운 경우가 있다는 문제도 있었다.
이하, 관련 문헌을 나타낸다. 이들 문헌은 참조로 본 출원에 원용된다.
1: K. Sato et al., Anal. Chem. 72, 1144-1147(2000)
2: L. Ceriotti et al., (2002) Proceedings of the micro TAS 2002 symposium, Nara, pp.175-177
3: J. Kim et al., (2002) Proceeding of the micro TAS 2002 symposium, Na ra, pp.224-226
4: Q. Wu et al., (2002) Proceeding of the micro TAS 2002 symposium, Nara, pp.198-200
도 1은 마이크로칩을 모식적으로 예시한 분해 사시도이다.
도 2A 및 도 2B는 도 1의 A 및 B 방향에서의 간극부(31)의 단면도이다.
도 3A 내지 3C는 간극부(31)의 다른 예를 나타낸 단면도이다.
도 4A 및 도 4B는 또한 다른 간극부(31)의 예를 나타낸 단면도이다.
도 5는 실시예로서의 DNA의 흡착에 대하여 예시한 광학 현미경 사진의 모식도이다.
<발명을 실시하기 위한 최선의 형태>
이하, 본 발명에 따른 마이크로칩, 핵산 추출용 키트 및 핵산의 추출 방법의 실시 형태에 대하여 도면을 참조하여 설명한다.
도 1 및 2는 본 발명에 따른 마이크로칩의 부분적인 구조를 모식적으로 나타내는 것이며, 도 1은 하측 기판(1)과 상측 기판(2)가 분리된 상태를 나타내고 있고, 도 2는 상하 기판(1, 2)가 접합된 상태에서의 미세 유로(3)에 설치된 간극부(31)에 대하여 도 1의 화살표 A 및 B 방향에서 본 부분 단면을 나타내고 있다.
예를 들면, 도 1 및 도 2에 나타내는 마이크로칩에서는, 상하 기판(1, 2)의 접합면에 설치된 홈부(11, 21)에 의해서 미세 유로(3)이 형성되어 있다. 또한, 미세 유로(3)에는, 그 단면의 상하 중앙부에 유로 단면이 축소된 간극부(31)이 설치되어 있다.
보다 구체적으로는, 상기 도 1 및 도 2의 예의 경우에는, 상하 기판(1, 2)의 각 홈부(11, 21)이 대향함으로써 미세 유로(3)이 형성됨과 동시에, 각 홈부(11, 21) 내에 설치된 돌기부(12, 22)가 대향함으로써 간극부(31)이 형성되도록 하고 있다.
간극부(31)에 대해서는, 미세 유로(3)의 단면의 중앙부일 수 있고, 도 2에 예시한 슬릿형의 개구와 같이, 상하의 중앙부 뿐 아니라, 예를 들면 도 3A에 모식적으로 나타낸 바와 같이 좌우의 중앙부일 수도, 또는 도 3B에 나타낸 바와 같이 상하좌우의 중앙부일 수도 있다. 물론, 이 간극부(31)의 단면 형상도 여러 종류일 수 있고, 예를 들면 도 3C에 나타낸 바와 같이 단면 원형 등의 여러 종류의 것일 수 있다. 이들 형상에 대해서는, 마이크로칩의 홈부(11, 21) 및 돌기부(12, 22)를 형성하기 위한 미세 가공의 수단이나 그의 조건, 또한 미세 유로 내에 주입하는 마이크로비드의 종류나 크기 등을 고려하여 정할 수 있다.
또한, 간극부(31)의 형성에 대해서는, 상하 기판(1, 2)의 각각의 홈부(11, 21) 내에 설치된 돌기부(12, 22)에 의한 것이 아닐 수도 있다. 예를 들면 도 4에 나타낸 바와 같이, 미세 유로(3) 자체는, 예를 들면 하측 기판(1)에 설치된 홈부(11)에 의해서 형성되고, 상측 기판(2)는 그의 커버판으로서 존재시켜, 이 미세 유로(3)의 구조에 있어서 상측 기판(2)에 설치된 돌기부(23)을 홈부(11)에 삽입하고, 이것을 홈부(11) 내의 돌기부(12)와 대향시킴으로써 간극부(31)을 형성하는 것도 가능하다.
물론, 간극부(31)에 대해서는, 상기 돌기부(12, 22, 23)에 의한 구성 이외에 다양하게 할 수 있다.
또한, 이들 돌기부(12, 22, 23)은 기판(1, 2)의 리소그래피 에칭 등에 의한 미세 가공에 의해서 형성될 뿐만 아니라, 예를 들면 중합체의 경화에 의한 형성 등의 수단에 의한 것일 수도 있다. 또한, 미세 유로(3)에 대한 외부로부터의 미소 부재의 작용, 또한 미세 유로(3) 자체의 변형 등의 수단에 의해서 간극부(31)을 형성할 수도 있다.
모든 경우에서, 본 발명에 따른 마이크로칩에 있어서는, 미세 유로(3)이나 간극부(31)의 제조, 생산을 간편하게 저비용으로 행할 수 있고, 또한 미세 유로(3)의 단면 중앙부에 간극부(31)을 설치함으로써, 미세 유로(3) 내에 마이크로비드를 주입하는 경우에, 액체나 기체 등의 유체 흐름의 정체 발생을 억제하여, 마이크로비드의 주입을 원활하면서 또한 간편하게 행하는 것을 가능하게 함과 동시에, 마이크로비드의 차단도 가능하게 한다.
미세 유로(3)에 설치되는 간극부(31)에 대해서는, 이와 같이 마이크로비드를 이용하는 것으로서는, 그 단면의 크기가 미세 유로(3) 내에 주입된 마이크로비드를 차단할 수 있는 것으로 한다. 또한, 이 간극부(31)에 대해서는, 예를 들면 상술한 돌기부, 또는 이와 동일한 기능을 갖는 부재 등을 가동으로 하고, 그 단면의 크기를 가변으로 하는 것도 고려된다. 단면의 크기를 가변으로 한 간극부(31)에 있어서는, 미세 유로(3) 내의 마이크로비드를 차단한 후에, 그 단면을 크게 확대하여, 마이크로비드를 하류 영역으로 이동시키는 것을 가능하게 한다. 통상, 마이크로비드의 배출을 위해서는, 주입과는 반대 방향으로 배출해야만 하지만, 이 단면 가변의 간극부(31)에 따르면, 주입과 동일한 순방향으로 배출하는 것이 가능해진다.
예를 들면, 상술한 바와 같은 본 발명에 따른 마이크로칩에 있어서는, 그의 이용 목적이나 대상물의 종류, 성질에 따라서, 미세 유로(3) 내에 시료 물질이나 불순물, 먼지 등이 부착하지 않도록 그의 내벽면을 표면 처리제로 수식할 수 있다. 예를 들면, 유리나 석영 등으로부터 제조된 마이크로칩의 경우에는, 통상 미세 유로(3)의 내벽 표면에는 표면 수산기가 존재하고, 이 표면 수산기가 핵산 등과 결합하여 핵산 등의 물질의 추출, 분리 등을 어렵게 하는 경우가 있다. 이러한 경우에는, 표면 처리제에 의해서 표면 수산기를 피복하여 불활성화시키는 것이 효과적이다. 본 발명에 따른 마이크로칩은, 마이크로비드와 조합함으로써 특징이 있는 화학 합성, 또는 분석용 키트로서 매우 유용한 것이 된다. 특히, 본 발명에서는, 이러한 키트로서, 상기와 같은 마이크로칩과, 표면 수산기를 갖는 마이크로비드를 구비하는 핵산 추출용 키트를 제공한다.
또한, 이 경우의 표면 수산기를 갖는 마이크로비드로서는, 직경 10 ㎛ 이하의 실리카 마이크로비드, 중공의 실리카 마이크로비드, 및 표면에 수산기가 부여된 폴리스티렌 등의 수지제 비드가 바람직한 것으로서 나타난다. 직경이 10 ㎛ 이상인 실리카 마이크로비드의 경우에는, 그 비중의 크기 때문에 미세 유로(3)에서의 수송이 곤란하다.
또한, 본 발명의 핵산 추출용 키트에서는, 미세 유로 내벽면에 표면 수산기를 갖는 것에 대해서는, 이 표면 수산기를 실란 커플링제로 피복 처리하는 것이 바람직하다.
그 중에서도, 할로겐 원자를 1개 갖는 트리알킬할로게노실란, 즉 화학식이
로 표시되는 화합물을 사용한 실란 커플링제가 바람직하다. 여기서, 식 중의 R1, R2 및 R3은 동일하거나 또는 상이한 알킬기를 나타내고, X는 염소 원자 등의 할로겐 원자를 나타낸다. 염소 원자 등의 할로겐 원자를 2개 이상 갖는 실란 화합물의 경우에는, 반응기인 할로겐 원자가 내벽 표면의 수산기와 반응할 뿐만 아니라, 분자 상호의 중합 반응 등에 의해 먼지를 생성시키는 경우가 있기 때문에, 그의 사용에는 제약이 있다.
핵산 추출의 방법으로서는, 예를 들면 도 1 및 도 2의 마이크로칩의 예에 있어서, 액 도입구부(4)로부터 마이크로비드 함유액을 주입하고, 미세 유로(3)에서 그 간극부(31)로 차단하며, 계속해서 액 도입구부(5)로부터 시료를 도입하여 마이크로비드에 핵산을 흡착시킨다. 나머지 액은 배출구부(6)으로부터 배출시킨다. 이 흡착에 의해서 핵산이 추출된다. 흡착된 핵산은 탈착액의 도입에 의해 마이크로비드로부터 탈착시킬 수 있다. 또한, 이 핵산 추출은 카오트로픽 이온의 존재하에 행하는 것이 바람직할 수 있다.
본 발명에 의해서 간편하면서 또한 고효율로 핵산의 추출이 가능해진다.
이하에 실시예를 나타내어 더욱 상세하게 설명한다. 물론, 이하의 실시예에 의해 발명이 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 마이크로비드의 수송
중앙부에 차단 구조를 갖는, 직경 50 ㎛, 길이 60 mm의 미세 유로를 갖는 유리제 마이크로칩을 준비하였다(도 1). 미세 유로의 상측과 하측의 양측에 돌기부에 의한 댐 형상의 차단 구조의 간극부를 형성하였다. 미세 유로의 중앙 간극부는 상하로 2 ㎛, 좌우로 50 ㎛의 슬릿형이었다. 미세 유로의 한쪽 입구를 주입구, 다른 쪽을 배출구로 하여, 주입구에 액 저장소를 설치하고, 배출구에 마이크로튜브를 접속하였다. 배출구의 마이크로튜브에는 실린지 펌프를 접속하여, 실린지 펌프의 동작에 의해서 액 저장소에 주입한 액체가 흡인되어, 미소 유로 중에 주입할 수 있는 실험 시스템을 조립하였다. 여기서, 순수한 물에 현탁한 마이크로비드를 액 저장소에 주입하고, 마이크로비드의 미소 유로 중에서의 수송을 광학 현미경을 이용하여 관찰하였다. 마이크로비드로서, 실리카 마이크로비드(직경 10 ㎛ 이하), 실리카 마이크로비드(직경 10 ㎛ 이상), 중공의 실리카 마이크로비드(직경 2 내지 20 ㎛), 표면에 수산기를 부가한 폴리스티렌 마이크로비드(직경 20 ㎛)를 준비하였다. 매분 10 ㎕의 유속으로 흡인하였다. 실리카 마이크로비드(직경 10 ㎛ 이상) 이외의 마이크로비드는 전부 미세 유로 내에 양호하게 수송되어, 차단 구조의 간극부의 직전 부분에 비드의 칼럼을 형성할 수 있었다. 한편, 직경 10 미크론 초과의 실리카 마이크로비드로 동일한 실험을 행한 결과, 미소 유로 도중에서 수송이 중단되어, 칼럼의 형성이 불충분하였다. 특히, 중공의 실리카 마이크로비드와 표면에 수산기를 부가한 폴리스티렌 마이크로비드는, 실리카 나노비드(직경이 1 ㎛ 이하인 비드)와 같이 수송이 양호하였다.
실린지 펌프에 순수한 물을 넣어, 미세 유로에 주입한 바, 실리카 마이크로비드(직경 10 ㎛ 이상) 이외의 마이크로비드는 미세 유로를 통해 수송되어, 액 저장소에 배출될 수 있었다.
실시예 2. 미소 유로 내벽의 표면 수식 처리
유리나 석영 등으로부터 제조한 마이크로칩의 경우에는, 미세 유로의 내벽 표면에의 핵산의 부착을 막기 위해서, 미세 유로 내벽의 표면 수산기를 피복할 필요가 있다. 표면 수산기의 피복에는, 알킬기와 반응기를 갖는 실란 커플링제 등에 의한 표면 수식 처리가 널리 이용되고 있다. 따라서, 미소 유로의 내벽 처리도 실란 커플링제를 사용하여 표면 수식 처리를 실시할 수 있다. 그러나, 통상 사용되고 있는 옥타데실트리클로로실란은 표면 수식을 위한 반응기인 염소기를 3개 가지고, 미세 유로 내벽의 표면 수산기와 반응할 뿐만 아니라, 분자끼리의 중합에 의해 고분자를 형성한다. 따라서, 옥타데실트리클로로실란의 분자끼리 반응하여 고분자화함으로써 먼지를 발생시킨다. 미세 유로가 아닌 슬라이드 유리같은 평판 기판의 표면 수식 처리에서는 발생한 먼지는 용매로 씻어낼 수 있어, 문제는 생기지 않는다. 그러나, 미세 유로의 내벽 처리에서는 생성된 먼지를 쉽게 씻어 낼 수 없다. 미세 유로 내에 차단 구조가 설치되어 있는 경우에는 특히 제거하는 것이 어렵다. 미세 유로 중에 남은 먼지는 미세 유로 중에서의 액체나 비드 수송의 장해가 될 뿐만 아니라, 핵산의 흡착 과정에도 지장이 된다. 또한, 반응기인 염소기가 2개인 디클로로디메틸실란도 널리 사용되고 있지만, 비점이 낮고(70 ℃), 휘발성이 높기 때문에 안전성이 낮을 뿐 아니라, 반응기가 2개이기 때문에 분자끼리의 중합에 의한 고분자화를 완전히 막을 수는 없다.
따라서, 반응기가 단수여서 원리적으로 고분자화하지 않고, 비점이 높아 휘발성이 낮으므로 안전성이 높고, 상온에서 액체여서 취급이 용이한 표면 수식 처리제를 검토하였다. 예를 들면, 트리에틸클로로실란은, 반응기 부위인 염소기가 1개이고, 원리적으로 고분자화하지 않는다. 또한, 비점이 145 ℃, 융점이 -50 ℃이기 때문에, 상온에서 휘발성이 낮고, 액체이기 때문에 톨루엔 등의 용매로 희석하기 용이하여, 취급하기 쉽다.
트리에틸클로로실란 또는 옥타데실트리클로로실란을 사용하여 미세 유로 내벽의 표면 수식 처리를 행하였다. 무수 톨루엔을 용매로서 사용하여, 각각 5 ％ 용액을 제조하였다. 실시예 1에서 서술한 실험 시스템을 이용하여, 양자를 비교하였다. 제조된 용액을 액 저장소에 주입하고, 실린지 펌프로 흡인함으로써 미세 유로 중에 용액을 주입하였다. 유량은 매분 10 ㎕로 하고, 50 ㎕의 용액을 주입하여 표면 수식을 행하였다. 또한, 탈수 톨루엔을 50 ㎕ 이상 주입하고, 표면 처리 후의 미세 유로를 세정하였다. 그 세정 동안 미세 유로를 광학 현미경으로 관찰하였다. 옥타데실트리클로로실란에서는 미세 유로 내에 먼지가 발생하였지만, 트리에틸클로로실란에서는 발생하지 않았다. 트리에틸클로로실란에서는 또한 농도를 10 ％로 올려, 동일한 처리를 실시하였다. 먼지는 발생하지 않았다.
실시예 3. 미세 유로 내에서의 핵산의 추출
실시예 1에서 서술한 실험 시스템을 이용하여 핵산의 흡착을 실시하였다. 미세 유로의 내벽 표면은 10 ％ 트리에틸클로로실란을 사용하여 실시예 2에서 서술한 대로 행하였다. 핵산으로서 ColE1DNA를 사용하였다. 카오트로픽 이온 용액으로서 포화 요오드화나트륨 수용액을 사용하였다. 실시예 1에서 서술한 마이크로비드 0.2 g을 1 l의 비율로 요오드화 나트륨 용액 중에 현탁시키고, 25 ㎕를 액 저장소로부터 미세 유로 중에 주입하여, 칼럼을 형성시켰다. 용매로서 요오드화 나트륨을 사용하여 1 ％ DNA 용액을 제조하고, 액 저장소로부터 미세 유로 내에 주입하였다. 다음에, DNA의 형광 염색 색소인 SYBRGreen I 용액을 액 저장소로부터 미세 유로 내에 주입하였다. 미세 유로를 광학 현미경으로 관찰한 결과, 도 5에 나타낸 바와 같이, 실리카 마이크로비드(41)의 칼럼부(42)만이 형광을 발하고 있는 것이 확인되었다. 실시예 1에서 사용한 실리카 마이크로비드(41)에 DNA가 흡착하는 것이 확인되었다. 칼럼부(42) 이외의 미세 유로에서는 형광은 보이지 않고, 미세 유로의 내벽 표면에의 DNA의 흡착이 생기지 않은 것도 확인되었다.
실시예 1에서 서술한 실험 시스템을 이용하여 핵산의 흡착과 탈착을 실시하였다. 실험 시스템은 상술한 바와 동일하게 하였다. 미세 유로 중에 실시예 1에서 서술한 마이크로비드를 주입하여 칼럼을 형성한 후, 핵산을 주입하였다. 핵산으로서는 람다 DNA를 사용하였다. 람다 DNA의 마이크로비드에의 흡착을 광학 현미경을 이용하여 확인하였다. 60 ℃ 이상의 순수한 온수를 준비하고, 액 저장소로부터 미세 유로에 주입하였다. 마이크로비드로부터 람다 DNA의 탈착을 확인하였다.
이상으로부터, 핵산의 마이크로비드에의 흡착과 탈착이 확인됨으로써, 핵산의 추출을 미세 유로 중에서 실현할 수 있음을 알 수 있었다.
또한, 본 발명은 도면을 참조하여 설명한 상술한 실시예로 한정되는 것이 아니고, 첨부하는 청구의 범위 및 그의 주지(主旨)를 일탈하지 않고, 다양한 변경, 치환 또는 그의 동등한 것을 행할 수 있음은 당업자에 있어서 분명하다.
<발명의 개시>
따라서, 상술한 바와 같은 종래 기술의 문제를 해소하기 위해서, 본 발명의 목적은, 핵산의 추출에 효과적일 뿐만 아니라, 각종 반응 담체로서도 유용한 마이크로비드를 이용하는 마이크로칩 기술로서, 저비용으로 제조, 생산할 수 있고, 유체 시료 흐름의 정체 발생이 억제되어, 마이크로비드의 주입, 충전, 수송을 원활하고 간편하게 행할 수 있고, 또한 먼지의 발생도 억제할 수 있는 새로운 기술의 마이크로칩과, 이것을 이용하는 새로운 핵산 추출 방법을 제공하는 것이다.
상술한 목적을 달성하기 위해서, 본 발명에 따른 마이크로칩에는 상하 기판의 접합면에 설치된 홈부에 의해서 미세 유로가 형성되어 있고, 미세 유로에는 그 단면의 상하, 좌우 또는 상하좌우의 중앙부에 유로 단면이 축소된 간극부가 설치되어 있다. 이 간극부는 홈부 내의 돌기부에 의해 형성될 수도 있다. 또한, 간극부는 상하 기판의 각각에 설치한 홈부 내의 돌기부의 대향에 의해 형성될 수도 있다. 또한, 간극부는 한쪽 기판의 홈부 내로 다른쪽 기판의 돌기부를 삽입함으로써 형성될 수도 있다. 또한, 간극부는, 상하 기판의 적어도 한쪽 가동(可動) 돌기부에 의해 그 단면의 크기가 가변(可變)일 수 있다.
또한, 간극부의 단면 크기는 미세 유로 내에 삽입한 마이크로비드를 차단시키는 크기이다. 미세 유로의 내벽면은 표면 처리제로 수식(修飾)될 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 핵산 추출용 키트는, 상술한 마이크로칩과, 표면 수산기를 갖는 마이크로비드를 구비한다. 이 표면 수산기를 갖는 마이크로비드는, 직경 10 ㎛ 이하의 실리카 마이크로비드, 중공의 실리카 마이크로비드 및 수지 마이크로비드 중 1종 이상일 수도 있다. 내벽면에 표면 수산기를 갖는 마이크로칩의 미세 유로는, 그 표면 수산기가 표면 처리제에 의해 피복 처리될 수도 있다. 이 표면 처리제는 트리알킬할로게노실란을 주성분으로 하는 실란 커플링제이다.
또한, 본 발명에 따른 핵산의 추출 방법은 상술한 핵산 추출용 키트를 이용하여, 마이크로칩의 미세 유로 내의 마이크로비드의 표면에 피처리액 중의 핵산을 흡착시킨다. 또한, 핵산의 흡착은 카오트로픽 이온의 존재하에 행할 수 있다.
이상, 상세하게 설명한 대로, 본 발명에 의해서 핵산의 추출에 효과적일 뿐만 아니라, 각종 반응 담체로서도 유용한 마이크로비드를 이용하는 마이크로칩 기술로서, 저비용으로 제조, 생산할 수 있고, 유체 시료의 흐름의 정체 발생이 억제되며, 마이크로비드의 주입, 충전, 수송을 원활하면서 간편하게 행할 수 있고, 또한 먼지의 발생도 억제할 수 있는 새로운 기술 수단과 이것을 이용하는 새로운 핵산 추출 방법을 제공할 수 있다.

Claims (13)

  1. 상하 기판의 접합면에 설치된 홈부에 의해서 미세 유로가 형성되는 마이크로칩이며,
    상기 미세 유로에는 그 단면의 상하, 좌우 또는 상하좌우의 중앙부에 유로 단면이 축소된 간극부가 설치되어 있는 것을 특징으로 하는 마이크로칩.
  2. 제1항에 있어서, 상기 간극부가 상기 홈부 내의 돌기부에 의해 형성되어 있는 것을 특징으로 하는 마이크로칩.
  3. 제2항에 있어서, 상기 상하 기판의 각각에 설치된 홈부 내의 돌기부의 대향에 의해 간극부가 형성되어 있는 것을 특징으로 하는 마이크로칩.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 간극부가 한쪽 기판의 홈부 내로의 다른쪽 기판의 돌기부의 삽입에 의해 형성되어 있는 것을 특징으로 하는 마이크로칩.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 간극부가 상기 상하 기판 중 적어도 한쪽 가동(可動) 돌기부에 의해 그 단면의 크기가 가변(可變)인 것을 특징으로 하는 마이크로칩.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 간극부의 단면 크기가 상기 미세 유로 내에 삽입된 마이크로비드를 차단시키는 크기인 것을 특징으로 하는 마이크로칩.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 미세 유로의 내벽면이 표면 처리제로 수식되어 있는 것을 특징으로 하는 마이크로칩.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 기재된 마이크로칩과,
    표면 수산기를 갖는 마이크로비드를 구비하고 있는 핵산 추출용 키트.
  9. 제8항에 있어서, 상기 표면 수산기를 갖는 마이크로비드가 직경 10 ㎛ 이하의 실리카 마이크로비드, 중공의 실리카 마이크로비드 및 수지 마이크로비드 중 1종 이상인 것을 특징으로 하는 핵산 추출용 키트.
  10. 제8항 또는 제9항에 있어서, 상기 내벽면에 표면 수산기를 갖는 마이크로칩미세 유로가, 그의 표면 수산기가 표면 처리제에 의해 피복 처리되어 있는 것을 특징으로 하는 핵산 추출용 키트.
  11. 제10항에 있어서, 상기 표면 처리제가 트리알킬할로게노실란을 주성분으로 하는 실란 커플링제인 것을 특징으로 하는 핵산 추출용 키트.
  12. 제8항 내지 제11항 중 어느 한 항에 기재된 핵산 추출용 키트를 이용하는 핵산의 추출 방법이며,
    마이크로칩의 미세 유로 내의 마이크로비드의 표면에 피처리액 중의 핵산을 흡착시키는 것을 특징으로 하는 핵산의 추출 방법.
  13. 제12항에 있어서, 카오트로픽 이온의 존재하에 행하는 것을 특징으로 하는 핵산의 추출 방법.
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