KR20050111573A

KR20050111573A - 지방산 신타제 억제제에 의한 암 발생 억제 방법

Info

Publication number: KR20050111573A
Application number: KR1020057007617A
Authority: KR
Inventors: 프란시스 폴 쿠햐다; 엘리자베스 엠 자피; 크레이그 에이 타운센드
Original assignee: 파스젠, 엘엘씨.; 더 존스 홉킨스 유니버시티
Priority date: 2002-10-31
Filing date: 2003-10-31
Publication date: 2005-11-25
Also published as: CA2503717A1; WO2004041189A3; EP1565180A4; BR0315971A; EP1565180A2; JP2006507306A; CN1728994A; AU2003287380B8; MXPA05004390A; US20070142456A1; WO2004041189A2; ZA200503463B; EA200500745A1; AU2003287380B2; AU2003287380A1

Abstract

본 발명은 지방산 신타제(FAS) 억제제를 투여함으로써 암 발생을 억제 또는 예방하는 방법에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 FAS를 발현하는 전암성(pre-malignant)(비-침습성) 병변으로부터 침습성 암 발생을 방해 또는 지연시킨다. FAS 억제제를 함유하는 조성물 뿐만 아니라 FAS 억제제 및 조성물을, 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 방법이 또한 제공된다.

Description

지방산 신타제 억제제에 의한 암 발생 억제 방법{A method for inhibiting cancer development by fatty acid synthase inhibitors}

지방산은 세포 생리학에 있어 3가지 중요한 역할을 한다. 첫째, 이들은 생체막의 기본적 구성 단위(building block)이다. 둘째, 지방산 유도체는 호르몬 및 세포내 메신저로서 작용한다. 셋째, 지방산은 지방 조직 내에 트리아실글리세롤(이는 중성 지방으로서 공지되기도 함)로서 저장될 수 있는 연료 분자이다.

지방산 합성 경로에 관여하는 4가지 주요 효소, 즉 지방산 신타제(FAS), 아세틸 CoA 카복실라제(ACC), 말릭 효소 및 시트릭 리아제가 있다. 이들 중 가장 중요한 효소가 FAS인데, 이는 전구체 말로닐-CoA 및 아세틸-CoA의 NADPH-의존적 축합 반응을 촉매하여 지방산을 생성시킨다. NADPH는 지방산 신타제 중에서 2개의 리덕타제 단계(에노일 리덕타제 및 β-케토아실 리덕타제)에 있어 필수적인 전자 공여자로서 제공되는 환원제이다. 다른 3가지 효소(즉, ACC, 말릭 효소 및 시트릭 리아제)는 필수 전구체를 생성시킨다. 예를 들어, NADPH를 생성시키는 기타 효소들도 지방산 합성에 관여한다.

FAS는 효소 분과위원회(Enzyme Commission: E.C.) 번호 2.3.1.85를 갖고, 또한 지방산 신테타제(synthetase), 지방산 리가제 뿐만 아니라 이의 계통명 아실-CoA:말로닐-CoA C-아실트랜스퍼라제로서 공지되기도 한다(탈카복시화, 옥소아실- 및 에노일-환원성 및 티오에스테르-가수분해성). 다음의 7가지 별개의 효소가 FAS 촉매된 지방산 합성에 관여한다: 아세틸 트랜스아실라제, 말로닐 트랜스아실라제, 베타-케토아실 신테타제(축합 효소), 베타-케토아실 리덕타제, 베타-하이드록시아실 데하이드라제, 에노일 리덕타제 및 티오에스테라제[참조: Wakil, S., "Fatty acid synthase, a proficient multifunctional enzyme." Biochemistry, 28:4523-4530, 1989]. 이들 7가지 효소 모두 함께 FAS를 이룬다.

지방산 합성 경로에 관여하는 4가지 효소 중에서, 억제시키고자 하는 바람직한 표적은 FAS인데, 이는 FAS가 지방산 합성 경로 내에서만 작용하는 반면, 다른 3가지 효소는 기타 세포성 기능에도 밀접한 영향을 미치기 때문이다. 따라서, 기타 3가지 효소들 중의 하나를 억제시키면, 정상 세포에 영향을 미칠 가능성이 더 크다.

FAS 억제제는 정제된 FAS의 효소적 활성을 억제시킬 수 있는 특정 화합물의 능력에 의해 동정할 수 있다. FAS 활성은 당해 분야에 공지된 수 많은 방법, 예를 들면, 말로닐 CoA의 존재 하에 NADPH의 산화를 측정하는 방법에 의해 평가할 수 있다[참조: Dils, R. and Carey, E. M., "Fatty acid synthase from rabbit mammary gland," Methods Enzymol, 35:74-83, 1975]. 특정 화합물이 FAS 억제제인지를 결정하는 것과 관련된 기타 정보가 미국 특허 제5,981,575호(이의 전문이 본원에 참조문헌으로써 삽입되어 있다)에 보고되었다.

FAS에 의해 수행된 7가지 효소적 단계 중에서, 축합 효소(즉, 베타-케토아실 신테타제)에 의해 촉매된 단계가, 지방산 합성을 저하 또는 중지시키는 억제제에 대해 알아보는데 바람직한 후보 단계이다. FAS 복합체의 축합 효소는 구조와 기능 면에서 널리 특징이 확인되었다. 이러한 축합 효소의 활성 중심은 항고지질혈증 시약(antilipidemic reagent)의 표적인 결정적인 시스테인 티올, 예를 들면, 억제제 2,3-에폭시-4-옥소-7,10-도데카디에노일아미드("세룰레닌(cerulenin)"으로 후술됨)를 함유한다.

축합 효소의 바람직한 억제제에는 디설파이드 교환을 진행할 수 있는 시약, 알킬화제 및 산화제를 포함한 광범위한 화학적 화합물이 포함된다. 이러한 화합물의 억제 활성을 확인하는 것은 정제된 사람 지방산 신타제의 활성에 대한 상기 화합물의 효과, 또는 총 지질 내로의 [¹⁴C]아세테이트의 혼입량에 대한 상기 화합물의 효과를 측정하는 검정 상에서 상기 화합물의 효과를 관찰함으로써 입증할 수 있다[참조: Pizer, E.S., Thupari, J., Han, W. F., Pinn, M.L., Chrest, F. J., Frehywot, G.L., Townsend, C. A., and Kuhajda, F. P., "Malonyl-coenzyme-A is a potential mediator of cytotoxicity induced by fatty acid synthase inhibition in human breast cancer cells and xenografts," Cancer Research, 60:213-218,2000]. 세룰레닌은 이러한 억제제의 한 예이다. 세룰레닌은 FAS의 축합 효소의 활성 부위 중의 결정적 시스테인 티올 그룹과 공유적으로 결합하여, 이러한 주요 효소적 단계를 불활성화시킨다[참조: Funabashi, H., Kawaguchi, A., Tomoda, H., Omura, S., Okuda, S., and Iwasaki, S. Binding site of cerulenin in fatty acid synthetase. J. Biochem., 105: 751-755, 1989].

각종의 기타 화합물이 FAS를 억제시키는 것으로 밝혀졌다. 다음에 제시된 표 1에는 공지된 몇 가지 FAS 억제제가 열거되어 있다. 바람직하게는, 본 발명에 따르는 억제제는 FAS 억제에 대한 IC₅₀이 LD₅₀ 보다 낮다는 사실을 보여줌으로써, 보다 바람직하게는 LD₅₀이 적어도 IC₅₀ 보다는 한 자리 크기 정도 더 높다는 사실을 보여줌으로써, 적합한 치료 지수, 안전성 프로필 및 효능을 나타낼 것이다.

지방산 합성 경로에 관여하는 효소의 대표적인 억제제

지방산 신타제의 억제제1,3-디브로모프로파논엘만스 시약(5,5'-디티오비스(2-니트로벤조산), DTNB)4-(4'-클로로벤질옥시)벤질 니코티네이트(KCD-232)4-(4'-클로로벤질옥시)벤조산(MII)2(5(4-클로로페닐)펜틸)옥시란-2-카복실레이트(POCA) 및 이의 CoA 유도체에톡시포름산 무수물세룰레닌페뇨세룰레닌멜라르소프롤요오도아세테이트페닐아르신옥사이드펜토스탐멜리틴티오락토마이신

FAS 억제제는 체중 감량을 유도시키고 기존의 암 세포 성장을 억제시키기 위한 제제로서 보고된 바 있다. 예를 들어, 미국 특허 제5,981,575호('575 특허)에는 특정 부류의 FAS 억제제(γ-치환된-α-메틸렌-β-카복시-γ-부티롤락톤 화합물)을 투여함으로써 체중 감량을 유도하는 방법이 기재되어 있다. '575 특허에는 또한, 이들 화합물이 기존의 암 세포 성장을 억제하는데 유용하다고 기재되어 있다. 미국 특허 제5,759,837호('837 특허)에는 암 세포에 대해서는 선택적으로 세포독성이지만, 기타 유형의 비-형질전환된(정상) 세포에 대해서는 세포독성이 아닌 양으로 FAS 억제제를 투여함으로써 기존의 암을 치료하는 방법이 기재되어 있다. 그러나, 상기 '575 특허나 '873 특허 어떠한 것에도, 전암성 병변과 관련된 어떠한 방법 보다도 훨썬 덜한 수준으로 암 발생 이전에(즉, 암 세포가 초기 출현하기 이전에) 이들 화합물을 투여하는 것에 관해서는 전혀 언급되어 있지 않다.

환자의 전암 상태를 탐지하여, 암 세포가 초기 출현하기도 전에 치료를 시작할 수 있는 수 많은 기술들이 최근에 개발되었다. 이와 같이 조기 진단함으로써, 암 발생 위험을 실질적으로 저하시키는 예방적 치료를 시작할 수 있다. 조기 스크리닝하기 위해 공지된 기술로는, 예를 들어, 광학적, 초음파 또는 방사선학적으로 유도된 침 생검(needle biopsy), 미세 침 흡인, 및 각종 세포 유형, 예를 들면, 유방, 호흡 소화관(aerodigestive tract), 췌장, 전립선 및 결장에서 전암성 병변을 탐지하기 위한 탈락세포 진단법(exfoliative cytology)을 사용하는 것이 있다.

암 이환률과 암 생존률 통계치 상의 개선은, 종양 크기가 작고 암이 시작된 부위로만 국한된 경우의 질병을 조기에 발견하는 것에 주로 근거한다. 지난 2년간 유방암 이환률이 약간 저하된 것은 부분적으로 조기 발견에 기인한 것으로 추정된다[참조: Ahmedin, J., Thomas, A., Murray, T., and Thun, M., "Cancer Statistics 2002," CA Cancer J Clin, 52: 23-47, 2002]. 그러나, 최근에 조기 진단에 있어 눈부신 발전에도 불구하고, 많은 암에 대한 이환률 개선이 수반되지는 못하였다. 암 이환률과 사망률에 있어 잠재적으로 매우 실재적인 추가 개선은 침습성 암 발생을 예방 또는 지연시킬 수 있는, 전암성 병변의 효과적인 치료로부터 이루어질 것이다.

본 발명은 FAS 억제제를 투여하여 특정 대상체에게서 전암 상태를 치료하는 방법를 제공(즉, 암 발생을 억제)함으로써 최근 조기 진단에 있어서의 진보에 경의를 표한다.

발명의 요약

본 발명은 FAS 억제제를 투여함으로써 암 발생을 억제하는 방법을 제공한다. 본 발명의 방법은 FAS를 발현하는 전암성 병변으로부터 유방암 발생을 지연 또는 예방하는데 특히 유용하다. FAS 억제제를 함유하는 조성물 뿐만 아니라 FAS 억제제 및 조성물을, 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 방법이 또한 제공된다.

따라서, 한 양태에서, 본 발명은 유효량의 FAS 억제제를, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하여, 암 발생을 억제하는 방법을 제공한다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 암 발생 억제 유효량의 FAS 억제제와 약제학적으로 허용되는 부가제를 함유하는 암 발생 억제성 약제학적 조성물을 제공한다.

도 1은 NT5 암 세포에서 세룰레닌 및 테트라하이드로-3-메틸렌-2-옥소-5-n-옥틸-4-푸란카복실산("C75"로 후술됨)에 의한 지방산 합성 억제를 도시한 것이다.

도 2는 FAS 억제제가 시험관 내에서 NT5 암 세포 성장을 억제시킬 수 있다는 것을 도시한 것이다.

도 3은 FAS 억제제가 마우스에서 NT5 암 세포 동종이식편 성장을 저하시킬 수 있다는 것을 도시한 것이다.

도 4는 FAS 억제제가 HER-2/neu 유방암 형질전환성 마우스 모델에서 암 발생을 억제할 수 있다는 것을 도시한 것이다.

본 발명은 FAS 억제제를 투여함으로써 암 발생을 억제하는 방법을 제공한다. 특히, 본 발명은 유효량의 FAS 억제제를, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하여, 암 발생을 억제하는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한, 암 발생을 억제하는데 유용한 FAS 억제제를 함유하는 조성물을 제공한다. 특히, 본 발명은 암 발생 억제 유효량의 FAS 억제제와 약제학적으로 허용되는 부가제를 함유하는 암 발생 억제성 약제학적 조성물을 제공한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "억제하는"이란 전암성 세포에서 세포소멸(apoptosis)(즉, 유전적으로 결정된 세포 사멸)을 자극, 유도 또는 촉발시킴으로써 암 발생을 예방, 억제, 지체, 차단 또는 지연시키는 것을 의미한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "암 발생"은 암 세포의 초기 출현을 의미한다. "암 세포"란 자가 증식 특성을 지니고 있고 인접한 조직에 침습되는 세포를 의미한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "투여"는 당해 분야에 통상적으로 사용되는 다수의 가능한 모든 투여 방식, 예를 들면, 경구, 직장, 비내 또는 비경구 등을 의미하는데, 비경구 투여에는, 예를 들어, 정맥내, 근육내, 복강내, 흉막내, 소포내, 수막공간내, 피하 및 국부 투여가 포함된다. 또한, "투여"에는 당해 분야에 통상적으로 사용되는 다수의 모든 약제학적 조성물 형태를 통한 투여가 포함된다.

바람직한 약제학적 조성물에는 경구 조성물, 예를 들면, 고형물(예: 정제, 캅셀제, 산제, 환제 또는 과립제) 또는 액상 형태(예: 시럽제, 에멀션 또는 좌제); 직장 조성물, 예를 들면, 좌제; 및 비경구 조성물, 예를 들면, 주사 또는 주입용으로 적합한 조성물이 포함된다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "이를 필요로 하는 대상체"는 전암 상태인 것으로 진단되었거나, 또는 질병 발생 소인, 유전적 소인 등을 지닐 수도 있는 대상체가 포함된다. 바람직한 방식에서는, 본 발명이 전암성 상태를 치료하는 것 이외의 몇 가지 목적, 예를 들면, 체중 감량을 위해 FAS 억제제를 투여한 대상체의 치료에 관한 것이 아니다.

바람직하게는, 치료하고자 하는 유형의 암이 해당 대상체에게 발생하지 않아야 한다. 또한, 해당 대상체는 한 가지 이상의 전암성 병변을 가질 수도 있다. 이러한 전암성 병변은 바람직하게는, FAS를 발현할 수 있거나, 또는 FAS와 neu 단백질 둘 다를 발현할 수 있다. 전암성 병변이 어떠한 조직에서도 생겨날 수 있지만, 본 발명은 특히, 유방, 구강, 폐, 담관, 위, 전립선, 또는 FAS를 발현하는 모든 조합 조직에서의 병변에 대한 치료법을 제공한다. 바람직하게는, 상기 대상체가 포유류, 보다 바람직하게는 사람이다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "암 발생 억제 유효량"은 목적하는 암 발생 억제 결과를 달성하는데 필요한 FAS 억제제의 양을 의미한다. 이러한 유효량은 통상적으로 처방 의사에 의해 결정될 것이며, 개개 대상체의 연령, 체중 및 반응 뿐만 아니라 대상체의 증상 중증도(환자가 전암성 병변으로부터 증상을 나타내는 경우) 및 투여되는 특정 화합물의 효능에 따라서 다양할 것이라는 것을 인지해야 한다. 바람직하게는, 유효량이 1주 약 60mg/kg 내지 약 7.5mg/kg의 범위, 보다 바람직하게는 1주 약 30mg/kg 내지 약 7.5mg/kg의 범위, 가장 바람직하게는 1주 약 15mg/kg 내지 약 7.5mg/kg의 범위이다. 이러한 유효량은 단일 용량 또는 수 회분으로 나눈 용량으로 투여할 수 있다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "FAS 억제제"는 FAS 효소를 직접적으로 억제시키는 화합물을 의미한다. 직접적인 억제는 해당 억제제가 화합물의 몇몇 기타 작용의 부차적인 결과, 예를 들면, 모든 세포 활성의 저하로서 라기 보다는 효소에 직접적으로 작용함으로써 FAS 활성을 저하시키는 것을 의미한다. FAS 억제는 미국 특허 제5,981,575호에 제시된 수단에 의해 결정할 수 있다.

바람직하게는, FAS 억제제가 다음 화합물들 중의 하나이다: C75(즉, 테트라하이드로-3-메틸렌-2-옥소-5-n-옥틸-4-푸란카복실산); 세룰레닌(즉, 2,3-에폭시-4-옥소-7,10-도데카디에노일아미드); 1,3-디브로모프로판온; 엘만스(Ellman's) 시약(5,5'-디티오비스(2-니트로벤조산), DTNB); 4-(4'-클로로벤질옥시) 벤질 니코티네이트(KCD-232); 4-(4'-클로로벤질옥시) 벤조산(Mll); 2(5(4-클로로페닐)펜틸)옥시란-2-카복실레이트(POCA) 및 이의 CoA 유도체; 에톡시포름산 무수물; 티올락토마이신; 페뇨세룰레닌; 멜라르소프롤(melarsoprol); 요오도아세테이트; 페닐아르신옥사이드; 펜토스탐(pentostam); 멜리틴(melittin); 또는 메틸 말로닐 CoA. 한 가지 바람직한 FAS 억제제는 C75이다. 기타 바람직한 FAS 화합물은 미국 특허원 제60/394,585호(이의 전문이 본원에 참조문헌으로써 삽입되어 있다)에 기재된 것이다:

상기식에서,

R¹은 H, C_l-C₂₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴, -CH₂0R⁵, -C(O)R⁵, -CO(O)R⁵, -C(O)NR⁵R⁶, -CH₂C(O)R⁵, 또는 -CH₂C(O)NHR⁵[여기서, R⁵ 및 R⁶은 각각 독립적으로, H, C₁-C₁₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴(하나 이상의 할로겐 원자를 임의로 함유한다)이다]이고;

R²는 -OH, -OR⁷, -OCH₂C(O)R⁷, -OCH₂C(O)NHR⁷, -OC(O)R⁷, -OC(O)OR⁷,- OC(O)NR⁷R⁸[여기서, R⁷ 및 R⁸은 각각 독립적으로, H, C₁-C₂₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴이고, R⁷ 및 R⁸은 각각, 할로겐 원자를 임의로 함유할 수 있다]이며;

R³ 및 R⁴는 서로 동일하거나 상이하고, C₁-C₂₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴이다.

바람직한 FAS-억제제의 또 다른 그룹은 미국 특허원 제60/392,809호(이의 전문이 본원에 참조문헌으로써 삽입되어 있다)에 기재된 것이다:

상기식에서,

R⁹는 H, 또는 C_l-C₂₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴, =CHR¹¹, -C(O)OR¹¹, -C(O)R¹¹, -CH₂C(O)OR¹¹, -CH₂C(O)NHR¹¹[여기서, R¹¹은 H 또는 C_l-C₁₀ 알킬, 사이클로알킬 또는 알케닐이다]이고;

R¹⁰은 C_l-C₂₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴이며;

X는 -OR¹², 또는 -NHR¹²[여기서, R¹²는 H, C_l-C₂₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴이고, R¹² 그룹은 카보닐 그룹, 카복실 그룹, 카복시아미드 그룹, 알코올 그룹 또는 에테르 그룹을 임의로 함유하고, R¹² 그룹은 하나 이상의 할로겐 원자를 추가로 임의 함유한다]인데,

단 R⁹가 =CH₂이면, X는 -OH가 아니다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "부가제"는 당해 분야에 통상적으로 사용되는 다수의 가능한 모든 부가제를 의미하는데, 예를 들면, 담체, 부형제, 희석제, 충진제 또는 이의 조합물이다. 부가제의 바람직한 예는 물, 알코올, 젤라틴, 삭카로스, 펙틴, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산, 탈크, 동물 또는 식물 기원의 각종 오일, 글리콜, 전분 및 전분 유도체, 실리카, 락토스, 락토스 모노하이드레이트, 셀룰로스 및 셀룰로스 유도체, 마그네슘 스테아레이트, 칼슘 스테아레이트, 인산수소 칼슘, PVP 또는 포비돈, 만니톨, 솔비톨, 젤라틴, 당 알코올, 스테아르산, 아크릴 유도체, 알진산, 알파-옥타데실-오메가-하이드록시폴리-(옥시에틸렌)-5-소르브산-H₂O, 아라비아검, 향미 물질, 아스코르브산, 탄산칼슘, 인산수소 칼슘, 인산칼슘, 칼슘 스테아레이트, 카멜로스 나트륨, 셀룰로스, 셀룰로스 유도체, 디메티콘, 착색제, 젤라틴, 글루코스 시럽, 고분산 실리카, 칼륨 벤조에이트, 락토스 모노하이드레이트, 마크로졸, 탄산마그네슘, 산화마그네슘(경), 마그네슘 스테아레이트, 옥수수 전분, 옥수수 팽윤성 전분, 만나이트, 만니톨, 식용 지방산의 모노- 및 디글리세라이드, 몬탄 글리콜 왁스, 나트륨 벤조에이트, (무수) 탄산나트륨, 염화나트륨, 탄산수소 나트륨, 폴리(부틸메타크릴레이트)-코-(2-디메틸 아미노 에틸 메타크릴레이트), 폴리비돈 K25, 포비돈, 정제 피마자유, 슈크로스, 슈크로스 모노스테아레이트, 쉘락, 솔비톨, 탈쿰, 이산화티탄, 타르타르산, 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜 또는 마크로졸, 안정화제, 산화방지제, 각종 천연 또는 합성 유화제, 분산제 또는 습윤제, 착색제, 방향제, 완충제, 붕해제, 및 활성제의 생체 이용 효율성을 증진시키는 것으로 당해 분야에 공지된 기타 물질이다.

수 많은 연구가 놀랍게도, 전암성 사람 유방 병변에서 뿐만 아니라 기타 기관으로부터의 전암성 병변에서 고수준의 FAS 발현을 입증해주었다. 다음 표 2에는 암 전구 병변에서의 FAS 발현 우세와, 이들의 침습성 암으로의 진행율 또는 침습성 암과의 연합율이 제시되어 있다.

전암성 병변에 대한 명명법은 각 기관에 대해 상이할 수 있기 때문에, 이들 용어에 대한 간단한 정의가 다음 표를 해석하는데 도움이 될 것이다. 유방에서는, 원위치 암종으로서 정의되는 전침습성(전암성) 병변의 2가지 변형, 즉 관내 암종 및 원위치 소엽 암종(열 1 & 2)가 있다. 용어 원위치 암종(in situ carcinoma)은 전암성 세포가 아직까지는 주변 조직 내로 침습되지 않은 병변을 기술하는데 사용된다. 이들 병변은 침습성 암종을 발생시킬 위험이 가장 높은 것과 연관이 있고, 또한 FAS 면역반응성이 가장 우세하다. 중간 수준의 암 발생 위험이 있는 유방 병변이 또한 있다(열 3). 소위 "비정형 관상 또는 소엽 과형성(atypical ductal or lobular hyperplasia)"인 이들 병변은 원위치 암종의 모든 조직학적 특징을 나타내지 않는다. 이들 유방 병변은 원위치 암종 보다 대략 절반 수준의 유방암 발생 위험을 지시하고 FAS 양성 빈도가 더 낮다.

전립선에서는, 전립선 상피내 종양(PIN)이 샘(gland) 내의 어떤 다른 곳에서 침습성 암종이 존재하는 것과 연관된 병변이다. PIN은 저등급 또는 고등급으로서 서술된다. 저등급 병변은 암과 상당한 연관성을 지니고 있지 않지만, 고등급 PIN은 3가지 증례 중의 대략 1가지에서 침습성 전립선 암이 발생한다(열 4). 선천성 병력이나 치료받지 않은 PIN은 아직까지 공지되어 있지 않다. FAS는 고등급 PIN에서 통상 발현된다.

선종은 통상적으로 허용되는 결장직장 암종의 전구 병변인데(열 5), 이는 암이 선종 내에서 또는 선종과 연관되어 통상 유발되는 것으로 밝혀졌기 때문이다. 크기 증가, 융모 형태, 및 고등급 형성이상(dysplasia)의 존재(조직학적 특징과 세포학적 특징 둘 다에 의해 규정된 바와 같음)는 암 발생 위험 증가와 연관이 있다. 용어 "형성이상"은 전암성 병변으로의 진행을 나타내는, 조직 내의 조직학적 및 세포학적 변화를 나타내기 위해 사용된다. 한 연구에서는 FAS가 결장직장 선종 내의 어디에서든 존재하였으며; 또 다른 그룹은 선종 내의 형성이상 정도가 증가함에 따라 FAS 발현도 증가하였다는 사실을 발견하였다.

폐에서는, 형성이상 편평 점막으로부터 편평 암종이 발생한다. 담배 연기와 같은 만성적인 폐 손상은 기도 내의 섬모 선상 점막을, 상해에 보다 내성인 편평 점막으로 먼저 변화시켜 준다. 이러한 과정은 화생(metaplasia)으로 불리운다. 시간이 지남에 따라, 담배 연기 내의 발암물질이 형성이상으로 불리우는 조직학적 및 세포학적 변화를 유발시키는데, 이러한 변화가 전암성 병변의 발생을 나타내준다. 고등급 형성이상이 일단 존재하면, 침습성 암 발생 위험이 상당히 커진다. FAS 발현이 형성이상 기관지 상피에서 증가되는 것으로 밝혀졌다.

위암의 전구 병변은 선종인데, 이는 결장직장 선종과 유사하긴 하지만 동일하지는 않다. 결장에서와 같이, 이들은 암 발생 위험 증가를 수반하고 FAS가 통상 발현된다.

구강 내의 침습성 암에 대한 전구 병변은 구강 내층 편평 점막의 형성이상인데, 이는 폐암을 유발시키는 기관지 편평 형성이상과 유사하다. 이들 형성이상 병변에서도 FAS 발현이 증가되었다.

담관암은 형성이상 선상 점막으로부터 통상 유발된다. 이러한 조직에서는, 상피가 기관지에서와 같이 선상에서 편평으로 변하지 않는다. 그럼에도 불구하고, FAS 발현은 담관 형성이상 어디에서도 존재한다.

암 전구 병변에서의 FAS 발현

기관	병리학적 병변	% FAS 양성 면역조직화학	암으로의 진행, 또는 암과의 연관성
유방	관내 암종	~73%(6)	16 내지 21.6년에 걸쳐 ~25%(7-9)
유방	원위치 소엽 암종	100%(6)	15 내지 20년에 걸쳐 21.3 내지 36.4%(10-13)
유방	비정형 소엽/관 병변	~50%(14)	8 내지 21년에 걸쳐 5.1 내지 12.9%(13, 15-17)
전립선	전립선 상피내 종양(PIN)	96% 저등급100% 고등급(18)	고등급 PIN 남성의 대략 33%가 추적 생검시 암을 나타낸다(19)
결장	선종	100% 모두 선종(20)저등급, 중간등급 또는 고등급 형성이상을 나타내는 선종 4.6%, 17.5%, 56%(21)	14년에 걸쳐,대략 3.7%가 융모 암 또는 >1cm 선종으로 진행되고; 0.5%가 작은 관상 선종으로 진행됨(22)
폐	편평 형성이상	정상 대조군과 비교해서 편평 암종 환자로부터의 모든 전암성 병변과 모든 조직학적으로 정상적인 점막에서 FAS 발현 증가(23)	객담 중에 현저하게 형성이상 세포를 나타내는 환자의 33%에게서 1 내지 10년에 걸쳐 폐암이 발생하였다(24,25)
위	선종	78% 양성(26)	16년에 걸쳐 2%(27,28), 6개월 내지 12년에 걸쳐 11%(28,29)
구강	편평 형성이상	정상 대조군과 비교해서 형성이상에서 FAS 발현 증가(30)	평균 29개월 추적에서 악성 형질전환 비율이 매년 2.9%이다(31,32)
담관	담관 형성이상	형성이상 병변의 100%가 FAS 발현 증가를 나타낸다(33)	형성이상을 유발시키는 암종이 환자의 42%에서 동정되었다(34)

미국 특허 제5,759,837호에는 시험관 내에서의 FAS 억제가 사람 유방암 세포주의 세포소멸을 유도시킨다고 기재되어 있다. 이러한 발견은 시험관 내에서 FAS 억제제 세룰레닌 및 C75에 의한 NT5 암세포 성장의 억제를 예시해주는 도 2 및 실시예 2에 의해 지지된다. 생체 내에서의 FAS 억제가 사람 유방암 및 전립선 암 이종이식편의 성장을 저하시킨다고 또한 공지되어 있다[참조: Owen, D. A. and Kelly, J., Pathology of the gallbladder, biliary tract, and pancreas., p. 337. Philadelphia: W. B. Saunders Company, 2001; Pizer, E., Pflug, B., Bova, G., Han, W., Udan, M., and Nelson, J., "Increased fatty acid synthase as a therapeutic target in androgen-independent prostate cancer progression." Prostate, 47: 102-110, 2001]. 이러한 발견은 FAS 억제제 C75에 의한 마우스에서의 NT5 종양 세포 동종이식편의 성장 저하를 예시해주는 도 3 및 실시예 3에 의해 뒷받침된다. 따라서, FAS 억제제가 기존의 암 세포 성장을 억제할 수 있다는 사실이 공지되었다. 그러나, 지금까지는 FAS 억제제로 처리하는 것이 암 발생을 억제할 수 있다는 사실이 공지되지 않았다.

FAS 억제제가 암 발생을 억제할 수 있다는 것을 보여주기 위해, HER-2/neu 유방암 형질전환성 마우스 모델을 사용하였다. FVB/N 균주로부터 유도된 neu-N 형질전환성 마우스는 유방-특이적 프로모터의 제어 하에 비-형질전환성 랫트 neu cDNA를 발현한다. 그 결과, 상기 마우스는 대략 125일 째부터 자발적인 유방 선암종을 발생하기 시작하는데, 300일 째에는 거의 모든 마우스가 종양을 갖고 있다[참조: Guy, C., Webster, M., Schaller, M., Parsons, T., Cardiff, R., and Muller, W., "Expression of the neu protooncogene in the mammary epithelium of transgenic mice induces metastatic disease," Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 10578-10582, 1992]. 상기 모델은 활성화된(돌연변이된) neu 유전자를 갖지 않는다. 활성화된 neu 모델이 보다 신속한 종양 발생에 유리하긴 하지만[참조: Guy, C., Cardiff, R., and Muller, W., "Activated neu induces rapid tumor progression," Journal of Biological Chemistry, 271: 7673-7678, 1996], 이러한 점 돌연변이가 사람 유방암에서는 동정되지 않았다[참조: Lofts, F. and Gullick, W., "C-erbB2 amplification and overexpression in human tumors," Cancer Treat Res., 61: 161-179, 1992]. 따라서, HER-2/neu 유방암 형질전환성 마우스 모델은 neu가 돌연변이되는 것이 아니라 과발현되는 사람 질병과 보다 더 유사하다. 더우기 neu는 사람 관내 암종(DCIS)의 25%에서 발현되는데[참조: Glockner, S., Lehmann, U., Wilke, N., Kleeberger, W., Langer, F., and Kriepe, H., "Amplification of growth regulator genes in intraductal breast cancer is associated with higher nuclear grade but not with progression to invasiveness," Laboratory Investigation, 81: 565-571, 2001], 이는 neu 과발현이 사람 발암 현상에 있어 초기 사건이라는 것을 입증해 주므로, neuN 모델을 추가로 구현시킨다. FAS[참조: Milgraum, L. Z., Witters, L. A., Pasternack, G. R. , and Kuhajda, F. P., "Enzymes of the fatty acid synthesis pathway are highly expressed in in situ breast carcinoma", Clin Cancer Res, 3: 2115-2120, 1997]와 neu 둘 다가 사람 유방 조직 내의 원위치 암종에서 동정되었고 FAS 억제가 neu 과발현을 수반한 유방암 세포의 세포소멸을 유발시키기 때문에, neu-N 모델을 사용하여 FAS 억제제가 암 발생을 억제시킬 수 있다는 것을 보여주었다.

대표적인 FAS 억제제로서 C75를 사용하였다. FAS 억제제로서의 C75의 효능과 이의 합성은 미국 특허 제5,981,575호에서 입증되었다.

실시예 4 및 도 4는 HER-2/neu 유방암 형질전환성 마우스를 FAS 억제제 C75로 처리하면, 암 발생이 상당히 억제되었다는 것을 예시해주는데, 3마리 동물은 생존 기간인 1.5년 내내 종양이 없는 상태로 유지되었다. 기타 FAS 억제제도 C75와 유사한 방식으로 기능할 것으로 예상할 수 있다.

다음 실시예는 본 발명의 방법과 조성물을 추가로 예시하기 위해 제공된다. 이들 실시예는 단지 예시적이며, 이로써 본 발명의 범위가 어떤 방식으로든 제한되지 않는다.

실시예 1

NT5 세포에서 2,3-에폭시-4-옥소-7,10-도데카디에노일아미드(즉, 세룰레닌) 및 테트라하이드로-3-메틸렌-2-옥소-5-n-옥틸-4-푸란카복실산(즉, C75)에 의한 지방산 합성의 억제

종양 발생에 있어 지방산 합성을 억제할 수 있는 FAS 억제제 세룰레닌 및 C75의 능력을, 형질전환성 마우스에서 발생한 종양으로부터 정립된 NT5 암 세포에서 입증하였다(도 1 참조). 5 x 10⁴개 NT5 세포를 24-웰 판에 도말하였다. 밤새 부착시킨 후, 세포를 DMSO 중에 희석시킨 세룰레닌 및 C75로 4시간 동안 5mg/ml의 비율로 처리하고, 대조군 세포에는 비히클 만을 투여하였다. 약물 처리 기간의 마지막 2시간 동안, 세포를 1μCi[¹⁴C]아세테이트로 처리하였다. 이어서, 총 지질을 추출하고 계수하였다. 그 결과가 도 1에 제시되어 있다. 이들 결과의 통계적 분석(즉, 양측 t-시험)은 다음과 같다: 대조군-C75 5㎍/ml, p=0.116; 대조군-C75 10㎍/ml, p=0.018; 대조군-세룰레닌 5㎍/ml, p=0.002; 대조군-세룰레닌 10㎍/ml, p=0.002.

도 1은 NT5 암 세포에서 세룰레닌 및 C75에 의한 지방산 합성의 억제를 도시한 것이다. NT 세포주는 형질전환성 마우스에서 발생한 종양으로부터 정립되었고[참조: Reilly, R., Gottlieb, M., Ercolini, A., Machiels, J., Kane, C., Okoye, F., Muller, W., Dixon, K., and Jaffee, E., "HER-2neu Is a Tumor Rejection Target in Tolerized HER-2/neu Transgenic Mice," Cancer Research, 60: 3569-3576, 2000; Reilly, R., Machiels, J., Emens, L., Ercolini, A., Okoye, F., Lei, R., Weintraub, D., and Jaffee, E., "The Collaboration of Both Humoral and Cellular HER-2/neu-targeted Immune Responses Is Required for the Complete Eradication of HER-2/neu-expressing Tumors," Cancer Research, 61: 880-883, 2001], FAS 억제제 C75와 세룰레닌을 시험하기 위한 시험관내 모델을 제공해준다. 알 수 있는 바와 같이, 세룰레닌과 C75 둘 다는 사람 세포주를 이용한 선행 연구와 유사한 수준으로 NT5 세포에서 지방산 합성을 억제한다[참조: Pizer, E. S., Thupari, J., Han, W. F., Pinn, M. L., Chrest, F. J., Frehywot, G. L., Townsend, C. A., and Kuhajda, F. P., "Malonyl-coenzyme-A is a potential mediator of cytotoxicity induced by fatty acid synthase inhibition in human breast cancer cells and xenografts," Cancer Research, 60: 213-218, 2000; Pizer, E., Pflug, B., Bova, G., Han, W., Udan, M., and Nelson, J., "Increased fatty acid synthase as a therapeutic target in androgen-independent prostate cancer progression," Prostate, 47: 102-110, 2001]. 더우기, 도 1은 이들 세포가 지방산 합성에 있어 활성을 나타내므로, 이들 억제제에 대한 표적 효소인 FAS를 발현하다는 사실을 또한 입증해준다.

실시예 2

FAS 억제제에 의한 시험관 내에서의 NT5 암 세포 성장 억제

NT5 암 세포의 성장을 억제할 수 있는 FAS 억제제의 능력을 시험관 내에서 입증하였다(도 2 참조). 1 x 10⁴개 세포를 24-웰 판에 도말하였다. 밤새 부착시킨 후, 세포를 DMSO 중에 희석시킨 C75 또는 세룰레닌으로 5mg/ml의 비율로 처리하고, 대조군 세포에는 비히클 만을 투여하였다. 72시간 후, 세포를 크리스탈 바이올렛(10% 메탄올 중의 0.2%)로 염색시키고, 1% SDS에 가용화시킨 다음, 490nm에서 O.D.를 측정하였다. 양측 t-시험: 대조군-C75 5㎍/ml, p=0.0003; 대조군-C75 10㎍/ml, p<0.0001; 대조군-세룰레닌 5㎍/ml, p<0.0001; 대조군-세룰레닌 10㎍/ml, p<0.0001.

도 2는 시험관 내에서 FAS 억제제에 의한 NT5 암 세포 성장 억제를 도시한 것이다. 알 수 있는 바와 같이, FAS 억제제인 세룰레닌과 C75로 처리하면, 암 세포 성장이 상당히 저하되었다(감소된 O.D. 490nm에 의해 나타난 바와 같음).

실시예 3

FAS 억제제에 의한 마우스에서의 NT5 암 세포 동종이식편의 성장 저하

마우스에서 NT5 암 세포 동종이식편의 성장을 억제할 수 있는 FAS 억제제의 능력을 FVB/N 마우스를 이용하여 입증하였다(도 3 참조). 14마리 동물의 옆구리에 0.1ml 패킹 배양된 NT5 세포를 투여하였다. 측정 가능한 종양이 출현한 경우에는, 7마리 동물에게 6일마다 C75(0.1ml RPMI 중의 30mg/kg, 복강내 주사)로 처리하고, 나머지 7마리 동물에게는 비히클 대조군을 투여하였다. 도 3의 오차 막대는 평균의 표준 오차를 나타낸다.

도 3은 FAS 억제제 C75에 의한 마우스에서의 NT5 암 세포 동종이식편의 성장 저하를 도시한 것이다. 알 수 있는 바와 같이, C75로 처리하면, FVB/N 마우스에서 NT5 종양 세포 동종이식편의 성장이 상당히 저하되었다.

실시예 4

FAS 억제제에 의한 암 발생 억제

암 발생을 억제할 수 있는 FAS 억제제의 능력은 HER-2/neu 유방암 형질전환성 마우스 모델을 사용하여 입증하였다(도 4 참조). 본 연구를 위해 30마리의 HER-2/neu 유방암 형질전환성 마우스를 사용하였다. 15마리 마우스에게는 5주생 부터 시작하여 3개월 동안 매주 C75(0.1ml RPMI 중의 30mg/kg)을 투여하고, 나머지 15마리 마우스에게는 비히클 만을 투여하였다. 마우스를 매일 관찰하고 유방 종양의 처음 출현을 기록하였다. 대조군 중의 2마리와 처리된 그룹 중의 6마리가 본 연구 기간 동안 사망하였다. 데이터를 log-등급 분석한 결과, C75 처리된 동물에게서는 종양 발생이 상당히 지연된 것으로 나타났다. 대략 200일 후에 대조군 마우스의 50%에서 종양이 발생한 반면, C75 처리된 그룹의 경우에는 300일 후에 종양 발생하였다. 더우기, 처리된 3마리 동물은 생존 기간인 18개월 내내 종양이 없는 상태로 유지되었다.

실시예 5

작용 기전에 관한 연구

15마리의 8 내지 10주생 neu-N 형질전환성 마우스는 C75를 매주 30 mg/kg으로 복강내(ip) 처리하고, 15마리 동물에게는 비히클 대조군(RPMI)을 투여하였다. 처리 그룹과 대조군 그룹으로부터의 3마리 마우스를 2주 째에(8 내지 10주생을 C75로 처음 처리한지 2주 후) 시작하여 2주 간격으로 이산화탄소 질식시킴으로써 희생시켰다. 희생시키기 2시간 전에 모든 동물에게 1mg의 BrdU를 주사하였다. 총체적으로 동정 가능한 유방내 림프절을 따라 전체의 서혜 유선을 제거하였다. 부가적으로, 각 동물로부터 신장, 간 및 피부 샘플을 수집하였다. 한쪽 면으로부터의 유선 및 신장, 간 및 피부 샘플을 중성-완충된 포르말린에 고정시키고, 다른 것은 전조직표본(whole mount) 제조를 위해 카르노이(Carnoy) 고정액에서 고정시켰다. 또한, 10주 째에(18 내지 20주생) 유사한 분석을 위해, 비-형질전환성의 연령-적합 FVB/N 대조군 마우스로부터 유선을 제거하였다.

10% 중성-완충된 포르말린에서 24시간 동안 고정시킨 후, 유선을 파라핀에 매립시켰다. 각 조직 블록으로부터 6 x 4 마이크론 슬라이드를 준비하였는데, 제1 슬라이드는 헤마톡실린 및 에오신으로 염색시켰다. 나머지 염색되지 않은 절편들은 다음 항체를 사용하여 전암성 병변과 유방 주변 조직의 면역조직화학 분석을 위해 활용하였다: FAS, BrdU 및 p21/Waf-1(Dako, Carpinteria, CA), Akt 및 포스포-Akt(Cell Signaling Technology, Beverly, MA), 및 neu(Santa Cruz Biotechnology, Inc., Santa Cruz, CA) 세포소멸(ApopTag Peroxidase In Situ Oligo Ligation Kit, Serologicals Corporation, Temecula, CA). 관상 및 소엽 구조물에서 총 500개 세포당 양성 세포 수를 400x로 계수함으로써 염색을 평가하였다. 프리즘 3 소프트웨어상에서 t-시험을 사용하여 통계적 분석을 수행하였다. 카르노이 고정 조직을 기재된 바와 같이 카르민 레드로 염색시키고, 유리 슬라이드 상에 전조직표본화하였다. C75 처리한지 8 내지 10주 후에는, 비히클 대조군 및 FVB/N 동물과 비교해서 neu-N 동물에서는 유관 구조물의 수, 출아성 상피 구조물의 두께 및 수 모두가 상당히 감소되었다.

도 5는 대조군(사진 C, D 및 E)과 비교하여, C75로 처리된 N-neu 형질전환성 마우스(사진 A, B, 및 F)에서 비정상적인 유선 발생을 도시한 것이다. 사진 A는 관의 수와 구경에 있어 상당한 감소를 나타낼 뿐만 아니라 상피 구조물 수 감소를 나타내는 C75-처리된 동물의 전조직표본을 보여준다. 이를 확대시킨 것이 사진 B이다. 사진 A 및 B를, 정상적인 관 구조물 수, 구경 및 출아를 갖는 대조군 표본을 나타내는 사진 C 및 D와 각각 비교할 수 있다. 이들 변화는 사진 E 및 F의 조직학적 절편에 반영되었다. A, C, E, 및 F 중의 검은색 화살표는 림프절을 의미하는데, 이는 양 표본 유형에서 유사한 영상 포획 면적을 지시해준다.

도 6 및 7에 도시된 바와 같이, 대조군 및 FVB/N 마우스와 비교해서, 세포소멸성 변화는 증가하였고, DNA 합성은 저하되었으며, FAS, neu, Akt, 포스포-Akt 및 p21/Waf1 발현은 전부 저하되었다. 도 8은 FVB/N 대조군 마우스 중의 비히클 대조군과 C75 처리된 neu-N 형질전환성 마우스에서 FAS 및 neu(헤마톡실린 대조염색)에 대한 면역조직화학적 염색을 도시한 것이다. 비히클 대조군 동물에서는, 관과 지방 조직 둘 다에 고수준의 FAS 발현이 존재하는데, 이는 강력한 확산 염색을 수반한다(사진 A)(도 5의 모든 사진은 200배 배율이다). C75 처리된 동물은 유관과 지방 조직 둘 다에서 상당히 낮은 수준의 FAS 발현을 나타내는데, 이는 약한 국소 염색을 수반한다(사진 B). FVB/N 대조군 동물에서의 FAS 발현은 드물고 약하였다(사진 C). neu로부터의 면역조직화학적 염색은 비히클 대조군 동물(사진 D)과 비교해서 C75 동물(사진 E)에서 감소하였다. FVB/N 대조군 동물에서는, neu 발현이 국소적이고 약하였다(사진 F).

중요하게는, 이들 효과가 neu를 과발현하는 유방 상피 세포에만 한정되었고, 피부, 간 또는 신장 내의 기타 정상적인 관 구조물에는 영향을 미치지 않았다. FVB/N 동물에서는, C75 처리된 동물과 대조군 간의 유방 구조물 상의 실재적인 어떠한 형태적 차이도 없었다. 이는 도 9로부터 알 수 있는데, 이는 대조군(사진 A 및 C)와 비교해서, C75 처리된 FVB/N 대조군 마우스(사진 B 및 D)에서의 정상적인 유선 발생을 도시한 것이다. 유방 구조물 상의 실재적인 어떠한 형태적 차이도 외견상 나타나지 않았다.

Claims

유효량의 지방산 신타제(synthase) 억제제를, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하여, 암 발생을 억제하는 방법.
제1항에 있어서, 대상체가 포유류인 방법.
제1항에 있어서, 대상체가 사람인 방법.
제1항에 있어서, 대상체가 전암성 병변을 갖고 있는 방법.
제5항에 있어서, 전암성 병변이 지방산 신타제를 발현하는 방법.
제5항에 있어서, 전암성 병변이 neu 단백질을 발현하는 방법.
제5항에 있어서, 전암성 병변이 지방산 신타제와 neu 단백질을 발현하는 방법.
제5항에 있어서, 전암성 병변이 유방, 전립선, 결장, 폐, 위, 구강 및 담관으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 조직 유형 내에 존재하는 방법.
제8항에 있어서, 조직 유형이 유방인 방법.
제8항에 있어서, 조직 유형이 전립선인 방법.
제8항에 있어서, 조직 유형이 결장인 방법.
제8항에 있어서, 조직 유형이 폐인 방법.
제8항에 있어서, 조직 유형이 위인 방법.
제8항에 있어서, 조직 유형이 구강인 방법.
제8항에 있어서, 조직 유형이 담관인 방법.
제1항에 있어서, 유효량이 1일 약 60mg/kg 내지 약 7.5mg/kg의 범위 내인 방법.
제1항에 있어서, 지방산 신타제 억제제가 지방산 신타제 효소를 직접적으로 억제시키는 화합물인 방법.
제1항에 있어서, 지방산 신타제 억제제가 다음 구조식을 갖는 화합물인 방법:

상기식에서,

R¹은 H, C_l-C₂₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴, -CH₂0R⁵, -C(O)R⁵, -CO(O)R⁵, -C(O)NR⁵R⁶, -CH₂C(O)R⁵, 또는 -CH₂C(O)NHR⁵[여기서, R⁵ 및 R⁶은 각각 독립적으로, H, C₁-C₁₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴(하나 이상의 할로겐 원자를 임의로 함유한다)이다]이고;

R²는 -OH, -OR⁷, -OCH₂C(O)R⁷, -OCH₂C(O)NHR⁷, -OC(O)R⁷, -OC(O)OR⁷,- OC(O)NR⁷R⁸[여기서, R⁷ 및 R⁸은 각각 독립적으로, H, C₁-C₂₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴이고, R⁷ 및 R⁸은 각각, 할로겐 원자를 임의로 함유할 수 있다]이며;

R³ 및 R⁴는 서로 동일하거나 상이하고, C₁-C₂₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴이다.
제1항에 있어서, 지방산 신타제 억제제가 다음 구조식을 갖는 화합물인 방법:

상기식에서,

R⁹는 H, 또는 C_l-C₂₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴, =CHR¹¹, -C(O)OR¹¹, -C(O)R¹¹, -CH₂C(O)OR¹¹, -CH₂C(O)NHR¹¹[여기서, R¹¹은 H 또는 C_l-C₁₀ 알킬, 사이클로알킬 또는 알케닐이다]이고;

R¹⁰은 C_l-C₂₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴이며;

X는 -OR¹², 또는 -NHR¹²[여기서, R¹²는 H, C_l-C₂₀ 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬 또는 알킬아릴이고, R¹² 그룹은 카보닐 그룹, 카복실 그룹, 카복시아미드 그룹, 알코올 그룹 또는 에테르 그룹을 임의로 함유하고, R¹² 그룹은 하나 이상의 할로겐 원자를 추가로 임의 함유한다]인데,

단 R⁹가 =CH₂이면, X는 -OH가 아니다.
제1항에 있어서, 지방산 신타제 억제제가 테트라하이드로-3-메틸렌-2-옥소-5-n-옥틸-4-푸란카복실산인 방법.