MXPA05004390A - Metodo para inhibicion del desarrollo del cancer por inhibidores de la sintasa de acidos grasos. - Google Patents

Abstract

Se describe un metodo para inhibir o prevenir el desarrollo del cancer por la administracion de inhibidores de la sintasa de acidos grasos (FAS). En particular, la presente invencion prohibe o retarda el desarrollo de cancer invasor de lesiones pre-malignas (no invasoras) que expresan FAS. Tambien se proporcionar composiciones que contienen inhibidores FAS, asi como metodos para administrar los inhibidores FAS y composiciones a pacientes que necesiten del mismo.

Description

METODO PARA INHIBICION DEL DESARROLLO DEL CANCER POR INHIBIDORES DE LA SINTASA DE ACIDOS GRASOS CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a un método para inhibir o prevenir el desarrollo del cáncer por la administración de inhibidores de la sintasa de ácidos grasos (FAS por sus siglas en inglés) . En particular, la presente invención prohibe o retarda el desarrollo de cáncer invasor a partir de lesiones pre-malignas (no invasoras) que expresan FAS. También se proporcionan composiciones que contienen inhibidores FAS, así como métodos para administrar los inhibidores FAS y composiciones a pacientes que necesitan de los mismos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION Los ácidos grasos tienen tres papeles primarios en la fisiología de las células. Primero, estos son los bloques de construcción de membranas biológicas. Segundo, los derivados de ácidos grasos sirven como hormonas y mensajeros intracelulares . Tercero, los ácidos grasos son moléculas combustibles que pueden almacenarse en el tejido adiposo como triacilgliceroles, que también se conocen como grasas neutrales . Existen cuatro enzimas primarias involucradas en la trayectoria sintética de ácidos grasos, sintasa de ácidos Ref: 163570 grasos (FAS) , carboxilasa de acetil CoA (ACC) , enzima málica, y liasa cítrica. La enzima principal es FAS, que cataliza la condensación dependiente de NADPH de los precursores malonil-CoA y acetil-CoA para producir ácidos grasos. El NADPH es un agente reductor que sirve como un donador esencial de electrones en las dos etapas de reductasa (enoil reductasa and ß-cetoacil reductasa) en la sintasa de ácidos grasos. Las otras tres enzimas (esto es, ACC, enzima málica, y liasa cítrica) producen los precursores necesarios. Otras enzimas, tales como, por ejemplo, las enzimas que producen NADPH, también están involucradas en la síntesis de ácidos grasos. La FAS tiene un No. 2.3.1.85 de la Comisión de Enzimas (E.C.) y es también conocida como sintetasa de ácidos grasos, ligasa de ácidos grasos, así como su nombre sistemático acil-CoA:malonil-CoA C-aciltransferasa (descarboxilante, reductora en oxoacil- y enoil e hidrolizante por tioéster) . Hay siete distintas enzimas involucradas en la síntesis catalizada por FAS de ácidos grasos: acetil transacilasa, malonil transacilasa, beta-cetoacil sintetasa (enzima de condensación) , beta-cetoacil reductasa, beta-hidroxiacil deshidrasa, enoil reductasa, y tioesterasa (Wakil, S., "Fatty acid synthase, a proficient multifunctional enzyme" . Biochemistry, 28:4523-4530, 1989). Siete de estas enzimas juntas comprenden FAS. De las cuatro enzimas en la trayectoria sintética de ácidos grasos, la" FAS es el objetivo preferido para la inhibición debido a que actúa sólo dentro de la trayectoria sintética de ácidos grasos, mientras que las otras tres enzimas están implicadas en otras funciones celulares. Por lo tanto, la inhibición de una de las otras tres enzimas es más probable que afecte células normales. Los inhibidores FAS pueden identificarse por la capacidad de un compuesto para inhibir la actividad enzimática de la FAS purificada. La actividad de FAS puede evaluarse por numerosos medios conocidos en el arte, tal como, por ejemplo, medir la oxidación de NADPH en presencia de malonil CoA (Dils, R. and Carey, E. M. , "Fatty acid synthase from rabbit mammary gland" Methods Enzymol, 35:74-83, 1975) . Otra información con relación a la determinación de si un compuesto es un inhibidor FAS, puede encontrarse en la Patente de E.U.A. No. 5,981,575, la descripción de la cual se incorpora por ello para referencia. De las siete etapas enzimáticas llevadas a cabo por FAS, la etapa catalizada por la enzima de condensación (esto es, beta-cetoacil sintetasa) es el candidato preferido para los inhibidores que reducen o detienen la síntesis de ácidos grasos. La enzima de condensación del complejo FAS está bien caracterizada en términos de estructura y función. El centro activo de la enzima de condensación contiene una cisteína tiol crítica, que es el objetivo de los reactivos antilipidémicos, tales como, por ejemplo, el inhibidor 2, 3-epoxi-4-oxo-7, 10- dodecadienoilamida (de aquí en adelante "cerulenina" ) . Los inhibidores preferidos de la enzima de condensación incluyen un amplio rango de compuestos químicos, que incluyen agentes alquilantes, oxidantes, y reactivos capaces de experimentar intercambio de disulfuro. La confirmación de la actividad inhibidora de tales compuestos puede demostrarse al observar el efecto del compuesto en los ensayos que miden su efecto en la actividad de la sintasa de ácidos grasos humana purificada, o en la incorporación de [14C] acetato en los lípidos totales. (Pizer, E.S., Thupari , J. , Han, W.F., Pinn, M.L., Chrest, F.J., Frehywot, G.L., Townsend, C.A., y Kuhajda, F.P., "Malonyl-coenzyme-A is a potential mediator of cytotoxicity induced by fatty acid synthase inhibition in human breast cáncer cells and xenografts, "Cáncer Research, 60: 213-218, 2000). La cerulenina es un ejemplo de tal inhibidor. La cerulenina se enlaza covalentemente al grupo de cisteina tiol crítico en el sitio activo de la enzima de condensación de FAS, que inactiva esta etapa enzimática clave (Funabashi, H., awaguchi, A., Tomoda, H. , Omura, S., Okuda, S., and Iwasaki , S. Binding site of cerulenin in fatty acid synthetase. J. Biochem. , 105: 751-755, 1989). Varios otros compuestos han demostrado que inhiben FAS. La Tabla 1, establecida abajo, enlista varios inhibidores FAS. Preferiblemente, los inhibidores de conformidad con esta invención mostrarán- un índice terapéutico apropiado, perfil de seguridad, asi como eficacia, al mostrar un IC50 para inhibición FAS que es menor al LD50; más preferiblemente LD50 está al menos en un orden de magnitud mayor a IC50.

Tabla 1 Inhibidores representativos de las enzimas de la trayectoria de síntesis del ácidos grasos Inhibidores de la sintasa del ácidos grasos 1, 3-dibromopropanona Ellman (ácido 5 , 5' -ditiobis (2-nitrobenzoico) , 4-(4' -clorobenciloxi)bencil nicotinato ( CD-232) ácido 4- (4' -clorobenciloxi) benzoico (Mil) 2 (5 (4-clorofenil) pentiloxirano-2-carboxilato (POCA) su derivado CoA Anhídrido etoxifórmico Cerulenina Feniocerulenina Melarsoprol Yodoacetato Fenilarsinóxido Pentostam Melitina Tiolactomicina Los inhibidores FAS se han descrito como agentes que inducen la pérdida de peso y para inhibir el crecimiento de células de cáncer pre-existentes . Por ejemplo, Patente E.U.A. No. 5,981,575 ("la patente 4575") describe un método para inducir la pérdida de peso por la administración de una clase de inhibidores FAS (compuestos de ?-substituido-a-metilen-P-carboxi-y-butirolactona) . La patente *575 también describe que estos compuestos son útiles para inhibir el crecimiento de células de cáncer pre-existentes. La patente E.U.A. no. 5,759, 837 ("la patente '837"), describe un método para tratar el cáncer pre-existente al administrar un inhibidor FAS en una cantidad que es selectivamente citotóxica para las células de cáncer, pero nó para otros tipos de células no transformadas (normales) . Sin embargo, ni la patente '575, ni la patente '837 describen la administración de estos compuestos antes del desarrollo del cáncer (esto es, antes de la aparición inicial de células cancerosas) , muchos menos ningún método que involucre lesiones precancerosas . Se han desarrollado recientemente diversas tecnologías que detectan los estados precancerosos en los pacientes, lo que permite que inicie un tratamiento aún antes de la aparición inicial de células cancerosas. Tal diagnóstico previo permite que inicie el tratamiento preventivo que reduce substancialmente el riesgo de desarrollo del cáncer. Las técnicas conocidas para separación por exclusión tempranas incluyen por ejemplo, el uso de una biopsia de aguja guiada ópticamente, sonográficamente , o radiológicamente, aspiración de aguja fina y citología exfoliante para detectar lesiones precancerosas en diversos tipos de tejido, tales como, por ejemplo, el pecho, el tracto aerodigestivo, páncreas, próstata y colon. Las mejoras en la morbilidad de cáncer y estadísticas de supervivencia al cáncer se basan primariamente en la detección temprana de la enfermedad cuando el tamaño de tumor es pequeño y el cáncer se confina al sitio de origen. La reducción ligera en la relación de mortalidad para cáncer de mama en los últimos 2 años se debe posiblemente en parte a la detección temprana (Ahmedin, J., Thomas, A., Murray, T., y Thun, M.," Cáncer Statistics 2002," CA Cáncer J Clin, 52: 23-47, 2002). Sin embargo, no obstante los recientes avances en los diagnósticos tempranos, la relación de mortalidad para muchos canceres no muestra una mejora conconcomitante. Una mejora potencialmente muy significante adicional en la morbilidad y mortalidad por cáncer seguiría de un tratamiento efectivo de lesiones premalignas que evitarían o retardarían el desarrollo de cánceres invasivos. La presente invención complementa los avances recientes en el diagnóstico temprano al porporcionar un método para tratar el estado precanceroso en un sujeto (esto es, inhibir el desarrollo del cáncer) por la administración de un inhibidor FAS .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona un método para inhibir el desarrollo del cáncer por la administración de inhibidores FAS. El método de la presente invención es particularmente útil para retardar o prevenir el desarrollo del cáncer de mama a partir de lesiones pre-malignas que expresan FAS. Las composiciones que contienen los inhibidores FAS también se proporcionan, así como métodos para administrar los inhibidores FAS y composiciones a pacientes que necesitan del mismo. De conformidad, en una modalidad, la presente invención proporciona un método para inhibir el desarrollo del cáncer que involucra la administración a un sujeto que necesita del mismo de una cantidad efectiva de un inhibidor FAS. En otra modalidad, la presente invención proporciona la inhibición del desarrollo del cáncer, composiciones farmacéuticas que contienen aditivos farmacéuticamente aceptables y cantidades efectivas para inhibir el desarrollo del cáncer de un inhibidor FAS .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 ilustra la inhibición de síntesis de ácidos grasos por cerulenina y ácido tetrahidro-3 -metileno-2 -oxo-5-n-octil-4-furancarboxílico (más adelante "C75") en células de cáncer NT5. La Figura 2 ilustra que los inhibidores FAS pueden inhibir el crecimiento de la célula de cáncer NT5 in vitro. La Figura 3 ilustra que los inhibidores FAS pueden reducir el crecimiento de aloinjertos de la célula de cáncer NT5 en ratones. La Figura 4 ilustra que los inhibidores FAS pueden inhibir el desarrollo del cáncer en un modelo de ratón transgénico de cáncer de mama HER-2/NEU.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona un método para inhibir el desarrollo del cáncer por la administración de inhibidores FAS. En particular, la presente invención proporciona un método para inhibir el desarrollo del cáncer que involucra la administración a un sujeto que necesita del mismo de una cantidad efectiva de un inhibidor FAS. La presente invención también proporciona una composición que contiene un inhibidor FAS útil para inhibir el desarrollo del cáncer. En particular, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que inhibe el desarrollo del cáncer que contiene un aditivo farmacéu icamente aceptable y una cantidad efectiva que inhibe el desarrollo del cáncer de un inhibidor FAS. Como se usa en la presente, el término "inhibir" se entenderá que significa prevenir, suprimir, retardar, bloquear o disminuir el desarrollo de cáncer tal como por ejemplo, al estimular, inducir o activar la apoptosis (esto es, muerte celular genéticamente determinada) en células pre-cancerosas . Como se usa en la presente, el término "desarrollo del cáncer" se entenderá que significa la aparición inicial de células cancerosas. Por "células cancerosas", significan células que tienen la propiedad de proliferación autónoma y han invadido tejidos adyacentes. Como se usa en la presente, el término "administración" se entenderá que significa cualesquiera de una multitud de medios posibles de administración usados comúnmente en el arte, tales como, por ejemplo, oralmente, rectalmente, nasalmente, o parenteralmente , y similares, en donde la administración parenteral incluye, por ejemplo, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal , intrapleural , intravesicular, intratecal, subcutánea, así como administración tópica. Además, "administración" incluye la administración por medio de cualesquiera de una multitud de formas de composición farmacéutica usadas •comúnmente en el arte.

Las composiciones f rmacéuticas preferidas incluyen composiciones orales, tales como, por ejemplo, formas sólidas (por ejemplo, tabletas, cápsulas, polvos, pildoras, o gránulos) o formas líquidas (por ejemplo, jarabes, emulsiones o suspensiones) ; composiciones rectales, tales como, por ejemplo, supositorios; y composiciones parenterales tales como por ejemplo, composiciones apropiadas para inyección o infusión. Como se usa en la presente, el término "sujeto que necesite del mismo" se entenderá que incluye sujetos que se les ha diagnosticado como precancerosos , o quienes tienen predisposición a desarrollar la enfermedad, genética o de otra manera. En un modo preferido, esta invención no se dirige al tratamiento de sujetos que toman inhibidores FAS para algún propósito diferente al tratamiento de la condición precancerosa , tal como por ejemplo, para pérdida de peso. Preferiblemente el sujeto no ha desarrollado cáncer del tipo para el cual se busca el tratamiento. Además, el sujeto puede tener una o más lesiones precancerosas . Las lesiones precancerosas pueden expresar preferiblemente FAS, o tanto FAS como la proteína neu. No obstante que las lesiones precancerosas pueden presentarse en cualquier tejido, esta invención proporciona particularmente una terapia para lesiones en el pecho, cavidad oral, pulmón, ducto biliar, estómago, próstata o cualquier combinación de las mismas que exprese FAS. Preferiblemente el sujeto es un mamífero, más preferiblemente un humano. Como se usa en la presente, el término "cantidad efectiva que inhibe el desarrollo del cáncer" se entenderá que significa una cantidad de inhibidor FAS necesaria para alcanzar el resultado deseado de inhibir el desarrollo de cáncer. También se entenderá que la cantidad efectiva normalmente se determinará por un médico que prescribe y que la cantidad variará de conformidad con la edad, peso y respuesta del sujeto individual, así como la severidad de los síntomas del sujeto (si el paciente tiene los síntomas de la lesión precancerosa) y la potencia del compuesto particular a administrarse. Preferiblemente, la cantidad efectiva está en el rango desde alrededor de 60 mg/kg hasta alrededor de 7.5 mg/kg por semana, más preferiblemente en el rango desde alrededor de 30 mg/kg hasta alrededor de 7.5 mg/kg por semana, aun más preferiblemente en el rango desde alrededor 15 mg/kg hasta alrededor de 7.5 mg/kg por semana. La cantidad efectiva puede administrarse en dosis sencilla o dividida. Como se usa en la presente, el término "inhibidor FAS" se entenderá qué significa un compuesto que inhibe directamente la enzima FAS. La inhibición directa significa que el inhibidor reduce la actividad FAS por una acción directa en la enzima en vez de como una consecuencia secundaria de alguna otra acción del compuesto, tal como, por ejemplo, una reducción en todas las actividades celulares. La inhibición FAS puede determinarse por los medios establecidos en la patente de E.U.A. No. 5,981,575. Preferiblemente, el inhibidor FAS es uno de los siguientes compuestos: C75 (esto es, ácido tetrahidro-3 -metileno-2-oxo-5-n-octil-4-furancarboxílico) ; cerulenina (esto es, 2 , 3-epoxi-4-oxo-7 , 10-dodecadienoilamida) ; 1,3-dibromopropanona ; reactivo Ellman (ácido 5 , 5 ' -ditiobis (2-nitrobenzoico) , DTNB) ; 4- ( ' -clorobenciloxi ) bencil nicotinato (KCD-232) ; ácido 4 - (4 ' -clorobenciloxi) benzoico (Mil) ; 2(5 (4-clorofenil) entil) oxirano-2-carboxilato (POCA) y su derivado CoA; anhídrido etoxi fórmico; tiolactomicina ; feniocerulenina; melarsoprol; yodoacetato; fenilarsinóxido ; pentostam; melitina; o metil malonilo coa. Un inhibidor FAS preferido es C75. Otros compuestos FAS preferidos son aquellos descritos en la solicitud de patente E.U.A. 60/394,585 (la descripción de la cual se incorpora por ello para referencia) : en donde : R1 = H, alquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilo, arilalquilo, o alquilarilo Ci-C20/ -CH2OR5, -C(0)R5, -C0(0)R5, -C(0)NR5R6, -CH2C(0)ft5, o -CH2C (O) NHR5, donde R5 y Rs son cada uno independientemente H, alquilo C1-C10, cicloalquilo, alquenilo, arilo, arilalquilo, o alquilarilo, opcionalmente que contiene uno o más átomos de halógeno. R2 = -OH, -OR7, -OCH2C(0)R7, -OCH2C(0) HR7, -OC(0)R7, -OC(0)OR7, -OC(0)NR7R8, donde R7 y R8 son cada uno independientemente H, alquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilo, arilalquilo, o alquilarilo de Ci-C20, respectivamente y donde R7 y R8 puede cada uno opcionalmente contener átomos de halógeno; R3 y R4, el mismo o diferente de cada uno otro, son alquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilo, arilalquilo, o alquilarilo de Ci-C20, respectivamente. Otro grupo de inhibidores preferidos FAS son aquellos descritos en la solicitud de patente de E.U.A. no de serie 60/392,809 (la descripción de la cual se incorpora en la presente para referencia) : R9 = H, o alquilo, cicloalquilo; alquenilo, arilo, arilalquilo o alquilarilo de Cx-C2o/ respectivamente, =CHR11, -C(0)OR, -C{0)R11, -CHaCÍOiOR11, -CH2C (O) NHR11 , donde R11 es H o alquilo, cicloalquilo, o alquenilo de Ci-Cio, respectivamente R10 = alquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilo, arilalquilo, o alquilarilo de Ci-C20, respectivamente; X = -OR12, o -NHR12, donde R12 es H, alquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilo, arilalquilo, o alquilarilo Ci-C20, el grupo R12 opcionalmente contiene un grupo carbonilo, un grupo carboxilo, un grupo carboxiamida, un grupo alcohol, o un grupo de éter, el grupo R12 además opcionalmente contiene uno o más átomos de halógeno; Con la condición de que cuando R9 es = CH2, luego X no es -OH. Como se usa en la presente, el término "aditivo" se entenderá que significa cualquier multitud de aditivos posibles usados comúnmente en el arte, tales como, por ejemplo, portadores, excipientes, agentes diluyentes, rellenos, o combinaciones de los mismos. Los ejemplos preferidos de aditivos son agua, alcoholes, gelatina, sacarosa, pectina, estearato de magnesio, ácido esteárico, talco, diversos aceites de origen animal o de planta, glicoles, almidón, y derivados de almidón, sílice, lactosa, monohidrato de lactosa, celulosa y derivados de celulosa, estearato de magnesio, estearato de calcio, fosfato ácido de calcio, PVP o povidona, manitol, sorbitol, gelatina, alcoholes de azúcar, ácido esteárico, derivados de acrilo, ácido algínico, ácido alfa.-octadecil- .OMEGA. -hidroxipoli - (oxietilen) -5-sórbico-H20, goma arábiga, substancias saborizantes , ácido ascórbico, carbonato de calciO, fosfato ácido de calcio, fosfato de calcio, estearato de calcio, carmelosa de sodio, celulosa, derivado de celulosa, dimeticon, agentes colorantes, gelatina, jarabe de glucosa, sílice altamente dispersado, benzoato de potasio, monohidrato de lactosa, Macrogol, carbonato de magnesio, óxido de magnesio (ligero) , estearato de magnesio, almidón de maíz, almidón de maíz expandido, manita, manitol, mono y diglicérido de ácidos grasos comestibles, cera de montan glicol, benzoato de sodio, carbonato de sodio (anhidro) , cloruro de sodio, carbonato ácido de sodio, pbli (butilmetacrilato) -co- (2-dimetil amino etil metacrilato) , polividona k.25, povidona, aceite de ricino refinado, sacarosa, monoestearato de sacarosa, sellador, sorbitol, talco, dióxido de titanio, ácido tartárico, propilen glicol, o polietilen glicol o macrogol, estabilizadores, antioxidantes, diversos emulsificantes naturales o sintéticos, agentes dispersantes o humectantes, agentes colorantes, agentes aromatizantes, soluciones amortiguadoras, agentes desintegrantes y otras substancias conocidas en el arte para promover la disponibilidad biológica del agente activo . Un número de estudios han demostrado sorprendentemente altos niveles de expresión FAS en lesiones de mama humanas precancerosas , así como lesiones precancerosas de otros órganos. La tabla" 2 de abajo ilustra la frecuencia de expresión FAS en lesiones precursoras del cáncer y su velocidad de avance para, o asociada con el cáncer invasor. Ya que la nomenclatura de lesiones precancerosas puede diferir para cada órgano una breve definición de los términos será útil para interpretar la tabla. En el pecho (mama) , hay dos variedades de lesiones preinvasoras (precancerosas) que se definen como carcinoma in situ: carcinoma intraductal y carcinoma lobular in situ (filas 1 y 2). El término carcinoma in situ se usa para describir una lesión en la cual las células precancerosas no han invadido aun el tejido circundante. Estas lesiones se asocian con los riesgos mayores para el desarrollo de carcinoma invasor y también tienen la frecuencia más alta de inmunoreactividad FAS. También hay lesiones de mama de riesgo intermedio para el desarrollo de cáncer (fila 3) . Estas también se llaman "hiperplasias ductales o lobulares atípicas" · y no exhiben todas las características histológicas de carcinoma in situ. Estas lesiones de mama indican un riesgo para el desarrollo de cáncer de mama alrededor de la mitad de lo que el carcinoma in situ y tienen una frecuencia más baja de positividad FAS. En la próstata, la neoplasia intraepitelial prostática (PIN por sus siglas en inglés) es una lesión asociada con la presencia de carcinoma invasor en cualquier lugar en la glándula. PIN se describe como que es de un grado bajo o alto. No obstante que las lesiones de grado bajo no tienen una asociación importante con el cáncer, PIN de alto grado se presenta con un cáncer de próstata invasor en alrededor de un tercio de los casos (fila 4). La historia natural real o sin tratar PIN todavía es desconocida. FAS se expresa comúnmente en PIN de alto grado. El adenoma es una lesión precursora comúnmente aceptada para carcinoma colorectal (fila 5), ya que el cáncer se ha demostrado que aparece comúnmente con o en asociación con adenomas. El tamaño aumentado, morfología vellosa, y la presencia de displasia de alto grado (como se define por características tanto histológicas como citológicas) se asocian con un riesgo aumentado para el desarrollo de cáncer. El término "displasia" se usa para indicar cambios histológicos y citologicos en los tejidos que indican el progreso para una lesión precancerosa . En un estudio, FAS se presentó localmente en adenomas colorectales ; otro grupo encontró que la expresión de FAS aumentó con grados crecientes de displasia en los adenomas. En el pulmón, el carcinoma escamoso se desarrolla de la mucosa escamosa displástica. La lesión crónica al pulmón, tal como humo de tabaco, lleva primero a un cambio de la glándula mucosa ciliada en las vías respiratorias a mucosa escamosa que es más resistente al daño. Este proceso se llama metaplasia. Con el tiempo, los cancerígenos en el humo causan cambio histológicos y citológicos llamados displasia que indican el desarrollo de una lesión precancerosa . Una vez que la displasia de alto grado se presenta, hay un riesgo importante, para el desarrollo de un cáncer invasor. La expresión FAS se ha encontrado que se incrementa en el epitelio bronquial displástico . Las lesiones precursoras de cáncer en el estómago son adenomas, similares pero no idénticos a los adenomas coloréeteles . Como en el colon, estos portan un riesgo aumentado de desarrollo de cáncer y FAS se expresa comúnmente . El precursor para cáncer invasor en la cavidad oral es la displasia del recubrimiento de la mucosa escamosa en la boca-similar a la displasia escamosa bronquial que lleva al cáncer de pulmón. La expresión FAS también se incrementa en estas lesiones displásticas. Los cánceres del ducto biliar salen comúnmente de la mucosa glándular displástica. En este tejido, el epitelio no cambia de glándula a escamoso como en los bronquios. No obstante, la expresión FAS se presenta localmente en la displasia de ducto biliar.

TABLA 2: Expresión FAS en Lesiones precursoras del Cáncer Organo Lesión % de inmuno- Progreso para, o patológica histoquimica asociación con el positiva de FAS Cáncer Mama Carcinoma -73% (6) -25% durante 16- intraductal 21.6 años (7-9) Mama Carcinoma In 100% (6) 21.3-36.4% Situ lobular durante 15>20 años (10-13) Mama Lesiones -50% (14) 5.1-12.9% durante lobular/ductal 8-21 años (13, atipica 15-17) Próstata Neoplasia 96% grado bajo -33% de hombres intraepitelial 100% grado alto con PIN de grado prostética (18) alto tienen (PIN) cáncer que sigue a la biopsia (19) Colon Adenoma 100% todos los ~3.7% del progreso adenomas (20) para el cáncer con 4.6%, 17.5% 56% de adenomas vellosos adenomas con o de >1 cm; 0.5% displacía de grado de progreso con bajo, moderado o adenomas tubulares alto (21) pequeños durante 14 años. (22) Organo Lesión % de inmuno- Progreso para, o patológica histoquímica asociación con el positiva de FAS Cáncer Pulmón Displasia Expresión FAS 33% de los escamosa incrementada en pacientes con todas las lesiones células preneo-plásticas y marcadamente de mucosa histodisplásticas en el lógicamente normal esputo desarrollan de pacientes con cáncer de pulmón carcinoma escamoso durante 1-10 años comparado con los (24, 25) controles normales (23) Estómago Adenoma 78% positivo (26) 2% durante 16 años (27 , 28) , 11% durante 6 meses- 12 años (28, 29) Boca Displasia Expresión FAS 2.9% de relación escamosa incrementada en de transformación . displasia maligna anual comparada con los media después de controles normales 29 meses (31, 32) (30) Organo Lesión % de inmuno- Progreso para, o patológica histoquímicá asociación con el positiva de FAS Cáncer Ducto Displasia de 100% de lesiones Carcinoma que biliar ducto biliar displásticas resulta en mues ran displasia se ha expresión FAS identificado en incrementada (33) 42% de pacientes (34) 6. Milgraum, L. Z., Witters, L.A., Pasternack, G.R., and Kuhajda, F . P . , "Enzimes of the fatty acid syntesis pathway are highly expressed in in situ breast carcinoma" . Clin Cáncer Res, 3: 2115-2120, 1997. 7. Bestill, W.L., Rosen, P.P., Lieberman, P.H., and Robbins, G.F., " Intraductal carcinoma. Long-term follow-up after treatment by biopsy alone," JAMA, 239: 1863-1867, 1978. 8. Page, D.L., Dupont, W.D., Rogers, L.W., and Landenberge , M. , "Intraductal carcinoma of the breast: follow-up after biopsy only," cáncer, 55: 2698-2708, 1982. 9. Page, D.L. and Japaze, H.J., The Breast: Comprehensive Management of Benign and Malignant Diseases, p. 169-192. Philadelphia: W.B. Saunders, 1991. 10. Ander'son, J. , "Lobular carcinoma in situ: a long-term follow-up in 52 cases," Acta Pathol Microbiol Scand Sect A, 82: 519-533, 1974. 11. Rosen, P.P., Lieberman, P.H., Braun, D.W. 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Laxen, F., "Gastric carcinoma and pernicious anemia in long-term endoscopic follow-up of subjects with gastric polyps," Scand J Gastroenterol , 19: 535-540, 1984. 28. Goldman, H. Pathology of the gastrointestinal tract, 2 edition, p. 594. Baltimore: Williams and Wilkins, 1998. 29. Kamiya, T. , Morishita, T., Asakura, H. , iura, S., Munakata, Y., and Tsuchiya, M . , "Long-term follow-up study on gastric adenoma and its relation to gastric protruded carcinoma," Cáncer, 50: 2496-2503, 1982. 31. Schepman, K.P., van der Meij , E.H., Smeele, L.E., and van der Waal , I. "Malignant transíormation of oral leukoplakia: A follow-up study of a hospital -based population of 166 patients with oral leukoplakia from The Netherlands," Oral Oncol, 34: 270-275, 1998. 32. Gnepp, D.R., Diagnostic surgical pathology of the head and neck, lst. edition, p. 1-17. Philadelphia : W.B. Saunders Co. , 2000. 34. Owen, D.A. and Kelly, J. , Pathology of the gallbladder, biliary tract, and páncreas., p. 337. Philadelphia: W.B. Saunders Company, 2001 La patente de E.U.A. No. 5,759,837 describe que la inhibición de FAS in vitro induce la apoptosis en líneas de células de cáncer de mama humanas. Este hallazgo se soporta por el Ejemplo 2 y la Figura 2 que ilustran la inhibición del crecimiento de células de cáncer NT5 por los inhibidores FAS de cerulenina y C75 in vitro. También se conoce que la inhibición de FAS in vivo reduce el crecimiento de xenoinjertos de cáncer de próstata y mama humanos (Owen, D.A. and Kelly, J., Pathology of the gallbladder, biliary tract, and páncreas., p. 337. Philadelphia: W.B. Saunders Company, 2001; Pizer, E., Pflug, B . , Bova, G. , Han, W., Udan, M. , and Nelson, J., "Increased fatty acid synthase as a therapeutic target in androgen- independent prostate cáncer progression. " Prostate, 47: 102-110, 2001). Este hallazgo se soporta por el Ejemplo 3 y la Figura 3 que ilustran la reducción en el crecimiento de aloinjerto de célula de tumor NT5 en ratones por el inhibidor FAS C75. De esta manera, se conoce que los inhibidores FAS pueden inhibir el crecimiento de célula de cáncer pre-existente . Sin embargo, hasta ahora, no se conoce el tratamiento con los inhibidores FAS que podría inhibir el desarrollo del cáncer. Para mostrar que los inhibidores FAS inhibirían el desarrollo del cáncer, se usa el modelo de ratón transgénico de cáncer de mama HER-2/neu. Derivado de la cepa FVB/N, los ratones transgénicos neu-N expresan el ADNc neu de rata no transformado bajo el control de un promotor específico mamario. Como consecuencia, los ratones desarrollan espontáneamente adenocarcinomas mamarios iniciando a aproximadamente 125 días, con casi todos los ratones presentando tumores por los 300 días (Guy, C, Webster, M . , Schaller, M . , Parsons, T. , Cardiff, R. , and uller, W., "Expression of the neu protooncogene in the mammary epithelium of transgenic mice induces metastatic disease, " Proc. Nati. Acad. Sci . USA, 89: 10578-10582, 1992). Este modelo no tiene un gen neu activado (mutado) . No obstante que el modelo neu activado tiene la ventaja de desarrollar tumores más rápidos (Guy, C, Cardiff, R., and Muller, W., "Activated neu induces rapid tumor progression, " Journal of Biological Chemistry, 271: 7673-7678, 1996), este punto de mutación no se ha identificado en el cáncer de mama humano (Lofts, F. and Gullick, W. , "C-erbB2 amplification and overexpression in human tumors," Cáncer Treat Res., 61: 161- 179, 1992). De esta" manera, el modelo de ratón transgénico de cáncer de mama HER-2/neu más cercanamente representa la enfermedad humana donde neu se sobre-expresa, no muta. Por otro lado, neu se expresa en el 25% del carcinoma intraductal humano (DCIS) (Glockner, S., Lehmann, U. , Wilke, N. , Kleeberger, W., Langer, F., and Kriepe, H. , "Amplification of growth regulator genes in intraductal breast cáncer is associated with higher nuclear grade but not with progression to invasiveness, " Laboratory Investigation, 81: 565-571, 2001) , lo que demuestra que la sobre-expresión de neu es un evento temprano en la carcinogénesis humana, de esta manera además haciendo substancial el modelo neuN. Ya que tanto FAS (Milgraum, L.Z., Witters, L.A., Pasternack, G.R. , and Kuhajda, F.P., "Enzymes of the fatty acid synthesis pathway are highly expressed in in situ breast carcinoma" , Clin Cáncer Res, 3: 2115-2120, 1997) como neu se han identificado en un carcinoma in situ en tejidos de mama humano, y la inhibición de FAS lleva a la apoptosis de células de cáncer de mama con la sobre-expresión de neu, el modelo neu-N se usa para mostrar que los inhibidores FAS pueden inhibir el desarrollo del cáncer. Como un inhibidor FAS representativo, se usa C75. La síntesis y eficacia de C75 como un inhibidor FAS se demuestra en la patente de E.U.A. No. 5,981,575. El Ejemplo 4 y la Figura 4 ilustran que el tratamiento de ratones transgérticos con cáncer de mama HER-2/neu con el inhibidor FAS C75 inhibe importantemente el desarrollo del cáncer, con tres animales que quedan libres de tumores por casi 1.5 años, la duración de sus vidas. Otros inhibidores FAS puede esperarse que funcionen de manera análoga a C75. Los siguientes ejemplos se suministran para ilustrar además los métodos y composiciones de la presente invención. Estos ejemplos son solamente ilustrativos y no se pretende que limiten el alcance de la invención de ninguna manera.

Ejemplo 1 La inhibición de síntesis de ácido graso por 2,3-epoxi-4-oxo-7 , 10-dodecadienoilamida (esto es, Cerulenina) y ácido tetrahidro-3-metileno-2-oxo-5-n-octil-4-furancarboxílico (esto es, C75) en células NT5. La capacidad de los inhibidores FAS, cerulenina y C75 para inhibir síntesis de ácidos grasos en el desarrollo de tumores se demostró en células de cáncer NT5 establecidas de tumores que se habían desarrollado en ratones transgénicos (Ver Figura 1) . Se siembran 5xl04 células NT5 en placas de 24 pozos. Después de un enlace durante la noche, las células se tratan con celurenina y se diluyen en C75 en DMSO a 5 mg/ml durante 4 horas, con células de control que reciben solamente vehículo. Durante las últimas 2 horas del tratamiento de fármaco, las células se tratan con ?µa [1C] acetato . Se extraen entonces los lípidos totales y se cuentan. Los resultados se muestran en la Figura 1. El análisis estadístico (esto es, 2 pruebas t en extremos) de los resultados es como sigue: Control -C75 5 µg ml, p=0.116; Control-C75 10 µ9 p?1, p=0.018; Control -Cerulenina 5 µg ml, p=0.002; Control -Cerulenina 10 µg/mlí p=0.002. La Figura 1 muestra la inhibición de la síntesis de ácidos grasos por cerulenina y C75 en células de cáncer NT5. Se establecen líneas de células NT de tumores que se desarrollan en ratones transgénicos (Reilly, R. , Gottlieb, M. , Ercolini, A., Machiels, J. , Kane, C. , Okone, F., Muller, W., Dixon, . , and Jaffee, E., "HER-2neu is a Tumor Rejection Target in Tolerized HER-2/neu Transgenic Mice, "Cáncer Research, 60:3569-3576, 2000; Reilly, R. , Machiels, J., Emens, L., Ercolini, A., Okoye, F. , Lei . , . , eintraub, D. , and Jaffe, E., "The Collaboration of Both Humoral and Cellular HER-2/neu-targeted immune Responses Is Required for the Complete Eradication of HER-2/neu . expressing Tumors," Cáncer Research, 61:880-883, 2001), y se proporciona un modelo in vitro para probar los inhibidores FAS C75 y cerulenina. Como puede apreciarse, tanto la cerulenina y C75 inhiben la síntesis de ácidos grasos en células NT5 en niveles similares a los estudios previos con líneas de célula humanas (Pizer, E. S., Thupari , J. , Han, W. F. , Pinn., M. L., Chrest, F. J . Frehywot, G. L. Townsend, C. A., and uhajda, F. P., "Malonil-coenzyme-A is a potential mediator of citotoxicity induced by fatty acid synthase inhibition in human breast cáncer cells and xenografts" , Cáncer Research, 60:213-218, 2000; Pizer, E . , Pflug, B. , Bova . , G. , Han, W., Udan., M., and Nelson, J., "Increased fatty acid synthase as a terapeutic target in androgen-independent prostate cáncer progression" , Prostate, 47:102-110,2001. Por otro lado, la figura 1 también demuestra que estas células tienen una síntesis de ácidos grasos activa, que expresa de esta manera FAS, la enzima objetivo para estos inhibidores.

Ejemplo 2 La inhibición del crecimiento celular de cáncer NT5 in vitro por inhibidores FAS La capacidad de los inhibidores FAS para inhibir el crecimiento de células de cáncer NT5 se demuestra in vitro (ver Figura 2) . Se siembran lxlO4 células en placas de 24 pozos. Después del enlace durante la noche, las células se tratan con C75 o cerulenina diluida con DMSO a 5 mg/ml, con células de control que solamente reciben vehículo. Después de 72 horas, las células se tiñen con violeta de cristal (0.2% en metanol al 10%) se solubilizan en SDS al 1%, y la medición O.D. a 490 mm. Dos pruebas t de extremos: Control-C75 5 µg ml, P=0.00003; Control-C75 10 µg/ml,. p<0.0001; Control- Cerulenina 5 ^g/ml, p<0.0001; Control -Cerulenina 10 µ9]/p?1, p<0.0001.

La figura 2 muestra la inhibición del crecimiento de células de cáncer NT5 por inhibidores de cáncer FAS in vitro. Como puede observarse el tratamiento con los inhibidores FAS, cerulenina y C75 reduce significativamente el crecimiento de cáncer (como se indican por el O.D. reducido 490 nm) .

Ejemplo 3 La reducción en el crecimiento de aloinjertos de células de cáncer NT5 en ratones por inhibidores FAS La capacidad de los inhibidores FAS para inhibir el crecimiento de aloinjerto de célula de cáncer NT5 en ratones se demuestra usando ratones FVB/N. (Ver figura 3). Catorce animales reciben 0.1 mi de células NT5 cultivadas empacadas en el costado. Cuando aparecen tumores medibles, siete animales se tratan con C75 (30 mg/kg en 0.1 mi de RPMI, inyección intraperitoneal ) cada seis días, y siete animales reciben control de vehículos. Las barras de error en la Figura 3 representan el error estándar de la media.

La Figura 3 muestra la reducción en el crecimiento de los aloinjertos de célula de cáncer de NT5 en ratones por el inhibidor FAS, C75. Como puede observarse, el tratamiento con C75 reduce significativamente el crecimiento de aloinjertos de célula de tumor NT5 en ratones FVB/N .

Ejemplo 4 La inhibición del desarrollo de cáncer por inhibidores FAS La capacidad de inhibidores FAS para inhibir el desarrollo de cáncer se demuestra usando el modelo de ratón transgénico de cáncer de mama HER-2/neu. (Ver Figura 4) . Se usan treinta ratones transgénicos con cáncer de mama HER-2/neu para el estudio. Quince ratones reciben dosis semanales de C75 (30 mg/kg en 0.1 mi RPMI) durante tres meses iniciando a las cinco semanas de edad, y quince ratones reciben solamente el vehículo. Se observan los ratones diariamente y la primera aparición de tumores de mama se registra. Dos (2) ratones en los controles y seis en el grupo tratado murieron durante el estudio. Los análisis de clasificación Log de los datos muestran que el desarrollo de tumor en animales tratados con C75 se retarda significativamente. Cincuenta por ciento (50%) de los ratones de control desarrollan tumores después de aproximadamente 200 días contra 300 días para los animales tratados con C75. Por otro lado, tres animales tratados se mantienen libre de tumor por casi 18 meses, la duración de su vida.

Ej emplo 5 Investigación en el mecanismo de acción Quince ratones" transgénicos neu-N, de 8-10 semanas edad, se tratan intraperitonealmente (ip) con C75 a 30 mg/kg semana1mente , junto con quince controles de vehículo (RPMI) . Tres ratones de los grupos de tratamiento y control se sacrifican por asfixia con dióxido de carbono a intervalos de dos semanas iniciando en la semana dos ¦ (dos semanas después del tratamiento con C75 a 8-10 semanas de edad) . Los animales se inyectan con 1 mg de BrdU dos horas antes de sacrificarse. Se remueven las glándulas mamarias inguinales completas junto con el ganglio linfático intramamario que es rápidamente identificable . Adicionalmente, se colectan muestras de ríñones, hígado y piel de cada animal. El hígado mamario de un lado y muestras de ríñones, hígado y piel se fijan en formalina amortiguada neutral, el otro se fija en fijador Carnoy para preparación de montaje completa. Además, las glándulas mamarias de los ratones de control FVB/N agrupados por edad no transgénicos se removieron para análisis similar a la semana 10 (edad 18-20 semanas) . Después de la fijación en formalina amortiguada neutral al 10% durante 24 horas, se colocan las glándulas mamarias en parafina. Se preparan seis portaobjetos de cuatro micrones para cada bloque de tejido, con el primer portaobjeto teñido con hematoxilina y eosina. Las secciones no teñidas restantes se utilizan para análisis inmunohistoquímico de las lesiones preneoplásticas y tejido mamario circundante con los siguientes anticuerpos: FAS, BrdU y P21/Waf-1 (Dako, Carpintería, CA) , Akt y Phospho-Akt (Cell Signaling Technology, Beverly, MA) , y neu (Santa Cruz Biotechnology, Inc., Santa Cruz, CA) apoptosis (ApopTag Peroxidase In Situ Oligo Ligation. Kit, Serologicals Corporation, Temecula, CA) . El teñido se evalúa al contar el número de células positivas por 500 células totales en las estructuras ductales y lobulares a 400x. Se realiza el análisis estadístico usando las pruebas t en un software Prism 3. El tejido fijado en Camoy se tiñe con rojo carmín como se describe y se monta completo en portaobjetos de vidrio. Después de 8-10 semanas de tratamiento con C75, hay una reducción importante tanto en el número de estructuras de ducto mamario, su espesor y el número de estructuras epiteliales unidas en los animales neu-N comparados con controles de vehículo y animales FVB/N. Las Figuras 5A-5F muestran el desarrollo de glándula mamaria anormal en ratones transgénicos N-neu tratados con C75 (figs. 5A, 5B, y 5F) contra controles (figs. 5C, 5D, y 5E) . La fig. 5A muestra un espécimen montado completo de animal tratado con C-75 que exhibe 'una reducción importante en el número y calibre de los ductos, así como un número reducido de estructuras epiteliales. Una visión aumentada de esto se muestra en la fig. 5B. Las figs. 5A y 5B pueden compararse con las figs. 5C y 5D, respectivamente, que muestran un espécimen de control que tiene un número normal, calibre y unión de las estructuras de ducto. Estos cambios se reflejan en las secciones histológicas en las figs. 5E y 5F. Las flechas negras en las figs. 5A, 5C, 5E, y 5F significan ganglios linfáticos, que indican áreas de captura de imagen similares en ambos tipos de especímenes. Como se muestra en las Figuras 6 y 7, los cambios apoptóticos se incrementan, se reduce la síntesis de ADN, y la expresión de FAS, toda se reduce cuando se compara a los ratones de control y FVB/N. Las figuras 8A-8F muestran un teñido inmunohistoquímico para FAS y neu (contrateñido con hematoxilina) en ratones transgénicos neu-N con C75 y controles de vehículo en ratones de control FVB/N. En animales de control de vehículo, los niveles altos de expresión FAS se presentan tanto en ductos como en tejido adiposo con un teñido de fuerte difusión (fig. 8A) (todas las figs. 5A-5F son de magnificación 200X) . Los animales tratados con C75 reducen significativamente la expresión FAS en ductos mamarios y tejido adiposo con un teñido débil y focal (fig. 8B) . La expresión FAS en los animales de control FVB/N fue rara y débil (fig. 8C) . El teñido inmunohistoquímico de neu se redujo en animales C75 (fig. 8E) en comparación con los animales de control de vehículo (fig. 8D) . En animales de control FVB/N, la expresión neu fue focal y débil (fig. 8F) .

De manera importante, estos efectos se restringen a las células epiteliales mamarias que sobre expresan neu, y no a otras estructuras de ducto normal en la piel, hígado o riñon.

En los animales FVB/N no hay una diferencia morfológica importante en las estructuras mamarias entre los animales tratados con C75 y los de control . Esto puede apreciarse en las Figuras 9A-9D, que muestran el desarrollo de glándula mamaria normal en ratones de control FVB/N tratados con C75 (figs. 9B y 9D) contra los de control (figs. 9A y 9C) . No hay diferencias morfológicas importantes en las estructuras mamarias que sean aparentes . Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (20)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones . 1. Un método para inhibir el desarrollo de cáncer, caracterizado porque comprende la administración a un sujeto que necesite del mismo de una cantidad efectiva de un inhibidor de la sintasa de ácidos grasos.
2. 2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el sujeto es un mamífero.
3. 3. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el sujeto es un humano.
4. 4. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el sujeto tiene lesiones pre-cancerosas.
5. 5. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque las lesiones pre-cancerosas expresan la sintasa de ácidos grasos.
6. 6. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque las lesiones pre-cancerosas expresan la proteína neu.
7. 7. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque las lesiones pre-cancerosas expresan la sintasa de ácidos grasos y la proteína neu.
8. 8. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque las lesiones pre-cancerosas están en un tipo de tejido seleccionado del grupo que consiste de mama, próstata, colon, pulmón, estómago, boca, y ducto biliar.
9. 9. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el tipo de tejido es mama.
10. 10. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el tipo de tejido es próstata.
11. 11. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el tipo de tejido es colon.
12. 12. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el tipo de tejido es pulmón.
13. 13. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el tipo de tejido es estómago.
14. 14. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el tipo de tejido es boca.
15. 15. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque el tipo de tejido es ducto biliar.
16. 16. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la cantidad efectiva está en el rango desde alrededor de 60 mg/kg hasta alrededor de 7.5 mg/kg por día.
17. 17. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor de la sintasa de ácidos grasos es un compuesto que inhibe directamente la enzima de la sintasa de ácidos grasos.
18. 18. El método" de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor de la sintasa de ácidos grasos es un compuesto que tiene la siguiente fórmula: en donde : R1= H, Cx-C2o alquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilo, arilalquilo, o alquilarilo, -CH2OR5, -C(0)R5, -CO(0)R5, C(0)NR5R6, -CH2C(0)R5, o -CH2C (O) NHR5, donde R5 y R6 son cada uno independientemente H, Ci-Ci0 alquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilo, arilalquilo, o alquilarilo, opcionalmente contienen uno o más átomos de halógeno. R2 = -0H,-0R7, -OCH2C(0)R, -0CH2C (O) NHR7 , -0C(0)R7, -OC(0)OR7, -OC(0)NR7R8, donde R7 y R8 son cada uno independientemente H, C!-C20 alquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilo, arilalquilo, o alquilarilo, y donde R7 y R8 puede cada uno contener opcionalmente átomos de halógeno ,- R3 y R4, el mismo o diferente de cada uno, son Ci-C2o alquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilo, arilalquilo, o alquilarilo .
19. 19. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor de la sintasa de ácidos grasos es un compuesto que tiene la siguiente fórmula: R9 = H , o C1 - C20 alquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilo, arilalquilo, o alquilarilo, =CHR", -C(0)ORu, -C(0)Rn, - CH2C(0)0R11, - CHSC Í O J HR11, donde R11 es H o Ci-Ci0 alquilo, cicloalquilo, o alquenilo; R10 = C1 - C20 alquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilo, arilalquilo, o alquilarilo; X = -OR , o -NHR , donde R1J es H , . X-C2Q alquilo, cicloalquilo, alquenilo, arilo, arilalquilo, o alquilarilo, el grupo R12 contiene opcionalmente un grupo carbonilo, un grupo carboxilo, un grupo carboxamida, un grupo alcohol, o un grupo éter el grupo R12 además contiene opcionalmente uno o más átomos de halógeno; con la condición que cuando R9 es =CH2, entonces X no es
20. 20. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor de la sintasa de ácidos grasos es ácido tetrahidro-3-metileno-2-oxo-5-n-octil-4- furancarboxílico .