KR20050101184A - 에이치씨이브이 조합 요법 - Google Patents

Abstract

이지린의 Hepreceptor 도메인 A 또는 B의 단편과 최소한 80%의 동일성을 갖는 펩티드는, 바이러스성 간염의 치료에, 인터페론과 동시적으로, 별도 혹은 순차적인 사용을 위해 조합된 제제로서 사용되어진다.

Description

에이치씨이브이 조합 요법{HCV COMBINATION THERAPY}

본 발명은 HCV 조합요법에 관한 것이다.

C형 간염 바이러스(HCV) 감염은 전세계적으로 주요한 보건상의 문제이다. 세계보건기구는 대략 1억 7천만명이 감염되어 있다고 추정하지만, 이 질병은 긴 잠복기를 가지고 있기 때문에 그 들 중 소수에게서만 증상이 나타난다. 이러한 사람들 중 10~20%가 간경변이나 간암과 같은 중증의 간질환을 앓고 있다. 미국 국립 보건원에 따르면, 매년 1만명의 미국인들이 HCV로 사망하고 매년 1만 7천명의 환자들이 간이식 수술을 위해 대기하고 있다. 여전히 매년 3백만명에서 4백만명의 새로운 HCV 감염이 발생한다. 감염 환자들의 대략 70%가 간질환으로 발전하고 1~5%는 간암으로 진전된다. HCV에 대한 백신은 없다.

현존하는 HCV 치료요법은 알파 2 인터페론이나, 페길화된(Pegylated) 인터페론 또는 페그인터페론으로서 알려진 폴리에틸렌 글리콜에 커플링된 알파 2 인터페론에 토대를 두고 있다. 심각한 부작용들과 낮은 치료효과가 현 치료 방법과 관련되어 있다. 통상의 치료 과정은 재조합 알파-인터페론 300만 단위를 12개월에 걸쳐 주당 3회 주사하는 것을 포함한다. 몇몇 연구들에 의하면 절반 이하의 환자들이 인터페론 치료 요법으로 어느 정도의 치료 효과를 얻었다.

효능을 향상시키기 위해서 항바이러스제인 리바비린이 인터페론 요법과 조합하여 사용되어 진다. HCV 유전자형-2 나 유전자형-3에 감염된 환자들이라면, 조합 요법은 치료로부터 효과를 얻는 환자들의 비율을 개선시킨다. 그러나 미국에서 가장 흔한 유전자형인 HCV-1B에 감염된 환자들의 40%만이 혼합 요법에 반응한다.

현존하는 인터페론 요법은 중증의 독감-유사 증상을 일으키고 리바비린과 인터페론의 혼합 요법의 부작용들은 일반적으로 인터페론 단독 요법의 부작용보다 더 심각하다는 것은 잘 알려져 있다. 알파-인터페론의 연장 치료는 치료 과정에 걸쳐 더 악화되는 추가적 부작용들의 발생을 동반한다. 환자들의 대다수는 치료 과정 중에 쇠약, 흥분, 불면증, 두통과 근육통, 관절통을 호소한다. 인터페론 요법에 빈번한 합병증은 빈혈, 호중구감소, 혈소판감소증과 탈모증을 포함한다. 더 드물게 환자들은 갑상선 기능 저하증, 모세혈관의 병리학적인 손상, 루푸스, 사르코이드증과 수포성 피부 손상, 우울증과 정신병들과 중증의 다기관 독성 효과들 중 하나 이상으로 발전한다.

US5773573A 는 HEP1 (Gepon)을 기술한다. GB2354241A는 이지린(Ezrin)의 조절/펼침 펩티드를 기술한다. 이 펩티드들은 면역 증강제이고 바이러스 감염 치료에 사용될 수 있다.

발명의 요약

본 발명은 HEP1(Gepon)이나 이지린 조절/펼침 펩티드들이 예를 들어 알파-인터페론이나 페그인터페론과 같은 인터페론들과 조합하여 사용될 때, 인터페론 치료법의 부작용들을 감소시키고 인터페론의 효능을 향상시킬 것이라는 것을 발견한 것에 근거를 두고 있다. 면역조절제 HEP1(Gepon)과 재조합 알파-인터페론의 성공적인 조합 요법의 한 예가 제공되어 진다. 그 혼합 요법은 인터페론의 부작용을 감소시키고 항바이러스 치료의 효과를 향상시켰다.

본 발명의 일면에 따르면, 펩티드와 인터페론으로 구성된 제품은 (여기서 펩티드는 이지린 Hepreceptor 도메인 A 또는 B의 단편과 최소한 80%의 동일성을 갖는 서열을 포함하고, 상기 펩티드는 적어도 HEP1만큼의 큰 친화성으로 Hepreceptor에 결합한다) 바이러스성 간염 치료에 동시적으로, 별도 혹은 순차적인 사용을 위해 조합된 제제이다.

본 발명의 또 다른 일면에 따르면, 상기 펩티드는 바이러스성 간염을 가진 환자 치료용 약의 제조에 사용되어지며 인터페론과 함께 쓰인다.

발명의 설명

본 발명에 사용되어진 펩티드는 바람직하게는 5~50개의 아미노산을 가지고 있다. 그것은 이지린 단편을 포함하거나 또는 그것에 밀접하게 관련되어져 있다. 그러므로 그것은 예를 들어 TEKKRRETVEREKE(SEQ ID NO:1)일 수 있다(예를 들어 US5773573A(그 내용들이 참고문헌으로서 여기에 병합되어 있다)을 참조). SEQ ID NO:1은 이지린의 아미노산 324-337에 상응한다. 이런 서열 또는 이지린의 단편에 적어도 80%, 더 바람직하게는 적어도 90%(또는 100% 일치) 동일한 서열을 가지고 있고 적어도 실질적으로 동일한 활성을 가지고 있는 펩티드는 모두 사용되어 질 수 있다. Hepreceptor의 A와 B 도메인으로부터 적절한 이지린의 단편들이 GB2354241A와 2001년 5월 17일 출원된 US 특허출원 일련번호 09/856070에 기술되어져 있고, 그 내용은 참조문헌으로서 여기에 병합되어 있다(특히 청구항 6, 9와 19를 참조).

본 발명에서 사용된 활성제들은 알려져 있거나 알려진 방법에 의해 제조 될 수 있다. 특히 알파-인터페론과 아미노산 서열 TEKKRRETVEREKE를 가진 펩티드인 HEP1과 같은 펩티드들의 합성 방법, 또는 이지린의 조절/펼침 펩티드들은 당해분야에서 당업자들에 알려져 있다.

개개 활성제들은 순서대로 또는 동시에, 예를 들면 동일한 조성물로 투여될 수 있다. 그것들은 경구용 또는 비경구적 투여에 적절한 형태로 함께 또는 독립적으로 제형될 수 있다.

본 발명에 사용된 활성 성분들의 제형화, 투여 경로 및 용량은 당해 분야에 당업자들에 알려져 있거나 통상의 인자들을 기초로 하여 정해질 수 있다. 예를 들어 HEP1이나 이지린의 조절/펼침 펩티드의 1mg~10mg의 경구 복용이나 0.1mg~1mg의 주사를 1일 1회에서 5회 또는 주당 35회까지의 투여하는 것은 인터페론 요법에 대한 표준 치료 규약과의 조합에 있어서 적절하다.

다음 실시예는 본 발명을 예시한다. "HEP1"은 SEQ ID NO:1을 가지고 있는 펩티드이다.

만성 HCV 감염(HCV 혈청 RNA PCR에 의해 측정) 및 간질환(Asp와 Ala 아미노기전이효소의 상승된 수치에 의해 측정)을 가진 11명의 환자들에게 재조합 알파2 인터페론과 2mg HEP1(Gepon)/5ml 수용액을 하루 두 번 경구투여로 처치했다(처치군). 만성 HCV 감염을 가진 열 명의 환자들에게 재조합 알파2 인터페론만을 처치했다(대조군).

그 결과는 처치군에서 대조군과 비교하여 HCV 바이러스 로드의 억제에서 적어도 20배의 향상과 아미노기전이효소 수준의 건강한 수준으로의 감소였다(대조군은 여전히 혈중 아미노기전이효소 수준이 상당히 높았다). 게다가 처치군에서는 인터페론 부작용에, 특히 일반적인 통증, 관절통, 식욕 부진, 쇠약의 영역에서의 예상치 못한 상당한 수준의 감소가 있었다.

데이타는 하기의 표에 도시되어 있다(각 데이타 점수의 군 평균).

연구 상세 설명

만성 C형 간염이 있는 18세에서 55세까지의 연령을 가진 21명의 환자들(여성 12명, 남성 9명)이 모스크바에 있는 임상 감염 병원 NO 1.의 위장병 센터에서의 연구에 참가했다. 만성 C형 간염은 적어도 6개월동안 환자의 혈중에 HCV에 대한 특정 항체들의 존재를 근거로 진단되었다. 말초 혈액 내 HCV RNA의 존재는 PCR(중합효소 사슬 반응)에 의해 측정되었고, 그 시험에 참가한 모든 환자들에서 HCV 감염의 복제상이 있었다. 임상자료와 혈액의 생화학적 연구 결과에 따르면, 환자들 대다수에서 만성 C형 간염 질환의 경증의 활성이 잘 수립되어 있었다.

이 조사에 참여한 모든 환자들은 재조합 알파 인터페론(레아페론)를 일주일에 3회, 3백만 단위 투약으로 처치받았다. 인터페론 요법에 추가하여 11명의 환자들은 석달동안 매일 하루 한 번 게폰(Gepon) 2mg 경구 투여로 처치받았다. ( 조제물은 물 5ml에 용해시켰고 입에서 2-3분 머금은 후 삼키게 했다). 환자들은 처치군(인터페론 항바이러스 요법과 게폰(Gepon)의 조합을 받은 11명의 환자들)과 대조군(인터페론 항바이러스 요법만을 받은 10명의 환자들), 두 그룹으로 나누었다.

연구조사 프레임 내에서 처치가 3개월 동안 계속되었다. 연이어서 인터페론 처치는 게폰(Gepon) 처치가 혈액에서 HCV RNA의 소실을 일어나게 한 경우에서조차 1년까지 계속되었다. 이 연구 기간 동안, 모든 환자들은 처치 시작 직전에, 그리고 처치 시작 1,2,3개월 후, 4번 이상 지정된 의사를 만났다. 같은 기간 내에 임상 검사에 추가하여 혈액의 임상적 그리고 생화학적 분석들이 행해졌다. 그리고 바이러스 로드는 PCR 준-양적(Semi-quantitative) 분석에서 HCV RNA에 의해 평가되었다. 최종 처치 효능 평가는 처치 시작 3개월 후에 행해졌다. 효능에 대한 기준은 우세한 증세; 간효소 AL-AT, As-AT, gamma GT의 활동성에서의 개선(또는 정상화) 빈도; 혈중 임상 지표들의 개선 빈도; 그리고 HCV RNA(바이러스 복제)의 PCR 분석 결과였다. 처치 결과의 통계 처리는 `Statgraphics' 라 불리워지는 컴퓨터 프로그램의 사용으로 행해졌다.

처치 전 환자들의 초기 임상 상태

치료 시작 전 처치군과 대조군 모두에서 환자들은 간담즙계의 간염 질환 특유의 증상들의 존재 및 표현에서 유사했다. 오른쪽 갈비밑근 부위에 통증을 호소하는 환자들이 21명 중 16명(76%)에서 있었다. 15명의 환자들(71%)은 입안이 쓰다고 느꼈다. 일반적인 영양쇠약증상의 징조인 급성 쇠약이 11명(52%)의 환자들에게서 뚜렷하게 나타났다.

연구에서 피실험자 한명에서만 피부와 흰자위막의 황달이 나타났다. 간비대(Hepatomegalia)와 비종대(Splenomegalia)가 각각 20명(95%)와 17명(81%)에서 일어났다. 간선세포조직의 확산적 변화가 21명의 환자들 중 20명(95%)에서 UZI로 기록되었다. 한명의 환자는 반응성 췌장염이 있었다. 어떤 경우들엔 9명의 환자에서 담낭벽의 비후, 6명의 환자에서 담낭관 염좌, 그리고 1명의 환자에서 담석을 포함한 담낭의 병상이 관찰되었다.

치료 과정에서 임상 발현의 역동학

치료 과정중, 소화 불량 증상(오른쪽 갈비밑근 부위의 통증, 입안이 씀), 영양쇠약 증상(쇠약, 흥분)과 관절통의 존재 및 발현이 평가되었다. 대조군에서는 발현된 일반적 쇠약증상에 대한 호소의 빈도가 50%에서 80%로, 흥분은 0%에서 100%로, 그리고 관절통은 0%에서 90%로 증가했다. 인터페론 치료 요법 중 환자의 건강상의 관련된 악화는 모든 인터페론 조제약에 의해 일어나는 폭넓게 알려진 부작용들에 의해 설명될 수 있다.

처치군에서는 일반적인 쇠약증상에 대한 호소 빈도가 54%에서 18%로(p<0.05), 그리고 관절통은 27%에서 18%로(p<0.1) 감소되었다. 치료 첫달에 흥분은 환자들 54%에서 나타났고 그 다음달 이후부터는 이러한 지표가 18%(p<0.05)로 감소되었다. 이러한 결과는 HCV 환자들에 인터페론 요법에 대한 부작용과 역작용에 대한 게폰의 긍정적 효과를 증명해 주었다.

치료 시작에 앞서 두 군 모두의 환자 대다수에서, 간질환과 관련된 증상들이 있었다. 환자들의 70~80%가 오른쪽 갈비밑근 부위에 통증과 입안의 씀을 느꼈다. 대조군에서는 인터페론 단독 요법 3개월 과정 중에 오른쪽 갈비밑근 부위의 통증과 입안의 쓴맛에 대한 호소 빈도가 변하지 않았다. 처치군에서는 오른쪽 갈비밑근 부위의 통증에 대한 불만 빈도가 80%에서 18%로 감소되었다(p<0.05). 치료 2~3개월 후, 입안에 쓴맛은 치료전 환자들 수와 비교하여 대조군의 64%에 비하여 처치군에서 9%만이 인지하였다.

만성 간염 특유의 특징들이 있었다: 치료전 간비대가 환자들 90%~100%에서 그리고 비종대가 치료전 70%~90%에서 의사들에 의해 기록되었다. 두 군의 환자들에서, 처치는 간비대와 비종대를 줄이는데 똑같이 효과적이었다. 처치 3개월 과정 후, 간비대와 비종대의 빈도는 30~40%로 감소되었다.

혈중 C형 간염 바이러스 수준의 역동학

조사되어진 21명 환자 모두에서, 혈중 HCV RNA 수준의 PCR 준-양적 분석이 행해졌고 HCV RNA의 적정량은 연구 시작시의 10³에서 10⁴로 변화했다. 대조군에서 치료 3개월 후, 10명 중 7명(70%)에서 HCV RNA의 적정량이 신뢰할 만하게 치료전 수준보다 낮아졌다. HCV RNA는 10명의 환자들 중 2명(20%)에서 검출되는 것이 끝났다. 평균적으로 HCV RNA의 적정량은 대조군에서 1.3 로그로 감소되었다. 대조군의 3명의 환자들(30%)에서 인터페론 치료에 반응하지 않았고 이런 환자들 중 한명은 바이러스 수준이 인터페론 치료중에 10배로 증가했다.

처치군에서, 바이러스 복제의 억제가 대조군에서보다 훨씬 효과적이었다. 조합 처치에 긍정적으로 반응한 모든 환자들과 11명 중 10명(91%)의 환자들은 혈중 HCV RNA 농도가 확실히 감소했다. 처치군에서 HCV RNA의 평균 적정량은 2.2 로그 또는 158배로 감소했는데, 이것은 대조군에서보다 거의 20배나 더 바이러스 로드가 감소한 것이다. 처치군 11명의 환자들 중 4명(36%)에서, HCV RNA 검출이 중지되었다. 처치군 환자 중 한 명도 바이러스 로드 증가가 기록되지 않았다.

혈액의 생화학적 지표

연구에 참여한 환자들은 만성 C형 간염으로 앓고 있었고 간세포 파괴 염증의 지표인 혈중 Al-AT와 As-AT 수준에 약간의 증가가 있었다. 두 군에서 단지 치료 1개월 후에, 혈중 Al-AT와 As-AT 수준의 상당한 감소가 일어났고, 그것은 그 다음달에도 계속되었다. 대조군에서 그 수준은 3개월째에 다시 증가하는 경향을 보였다. 처치군에서는 Al-AT와 As-AT에서 점진적이고 더 큰 감소로의 분명한 경향이 있었다. 두 군의 환자들에 일반 빌리루빈의 평균값은 정상 수준의 상층 경계의 위쪽에 있었다. 치료 과정에서 혈중 일반 빌리루빈 수준은 정상수치로 15%~20%쯤 감소되었다.

혈액학적 지표

재조합 인터페론의 연장 요법의 부작용들이 많은 혈중 지표에서의 변화에서 나타난다. 대조군에서, 헤모글로빈 수준 유지, 혈소판 수와 특히 성숙한 호중성 과립구의 양에서 상당한 감소가 관찰되었고, 동시에 림프구, 호산구와 대식세포/단핵구 함량의 증가가 있었다. 처치군에서는 인터페론과 게폰(Gepon)의 조합요법이, 일어나는 병리적 변화의 대다수를 예방했고, 호중구, 과립구, 호산구, 림프구와 대식세포/과립구의 수준은 치료 3개월동안 정상 수치를 유지시켰다.

<110> Regent Research L.L.P. <120> HCV COMBINATION THERAPY <130> REP07419WO <150> GB0301879.3 <151> 2003-01-27 <160> 1 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Fragment <400> 1 Thr Glu Lys Lys Arg Arg Glu Thr Val Glu Arg Glu Lys Glu 1 5 10

Claims (4)

1. 바이러스성 간염의 치료에서 동시에, 별도로 또는 순차적으로의 사용을 위해 조합된 조제물로서의, 펩티드와 인터페론을 포함하는 생성물로, 상기 펩티드는 이지린의 Hepreceptor의 단편 도메인 A 나 B에 80%이상의 동일성을 갖는 서열을 포함하고, 적어도 HEP1만큼 높은 친화성으로 Hepreceptor에 결합하는 것인 생성물.
2. 제1항에 있어서, 상기 펩티드는 TEKKRRETVEREKE 또는 그것의 활성 단편을 포함하는 생성물.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 바이러스성 간염은 C형 간염인 생성물.
4. 바이러스성 간염을 가지고 있고 인터페론으로 치료받고 있는 환자의 치료용 약제의 제조를 위한, 제1항 또는 제2항에 정의된 펩티드의 사용.