KR20050034833A

KR20050034833A - 차가버섯 추출물을 함유하는 있는 미백화장료

Info

Publication number: KR20050034833A
Application number: KR1020030070537A
Authority: KR
Inventors: 한영환; 김상은; 임창수
Original assignee: 한영환
Priority date: 2003-10-10
Filing date: 2003-10-10
Publication date: 2005-04-15

Abstract

본 차가버섯 추출물을 함유하고 있는 미백화장료는 차가버섯과 물, 친수유기용제 및 그 혼합물 중 어느 하나의 용제를 섞어 차가버섯 추출물을 추출하고, 상기 추출물은 화장료에 대하여 0.01 ~ 10 중량% 함유되어 있는 것을 포함한다.

Description

차가버섯 추출물을 함유하는 있는 미백화장료{The Skin Lightening Cosmetic Composition Containing Extract Of Inonotus obliquus}

본 발명은 미백화장료에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 차가버섯(학명 : Inonotus obliquus) 자실체, 균사체 및 균사 배양액으로 부터 추출된 차가버섯 추출물을 함유하는 미백화장료에 관한 것이다.

일일반적으로 사람은 햇빛을 받으면 피부색이 검게 변한다. 이것은 검은 색소를 나타내는 멜라닌이 형성되기 때문이다. 멜라닌은 동물, 식물 및 미생물에 널리 존재하는 페놀류의 고분자 물질로 검은 색소와 단백질로 이루어져 있다. 자외선, 건조, 극한 온도 등에 대한 생존능력을 높여주고, 커피, 차, 담배 등의 질을 향상시키나, 과도한 멜라닌 합성은 인체에 기미, 주근깨, 검버섯을 형성하고 피부노화를 촉진하며 피부암 유발에 관여하는 것으로 알려져 있다. 또한 식품에서는 채소, 과일, 생선 등의 갈변화 현상으로 품질을 저하시키는 문제점도 있다.

멜라닌은 생물에 따라 다양한 종류가 있으며, 주로 타이로시나제의 작용에 의하여 생합성되는 것으로 보고되고 있다. 타이로시나제는 구리와 결합한 금속단백질 효소로서, 동물, 식물, 미생물 및 사람 등에 넓게 분포되어 있고 타이로신(tyrosine)을 디하이드록시 페닐알라닌(도파, dihydroxyl-L-phenylalanine, L-DOPA), 디하이드록시 페닐알라닌를 도파퀴논(dopaquinone)으로 변환시키는 작용을 한다. 도파퀴논은 도파크롬(dopachrome)으로, 도파크롬은 디하이드로시인돌(dihydroxyindole)로 전환되고 디하이드로시인돌의 산화적 중합 및 단백질과 결합을 통해 최종적으로 멜라닌을 합성한다.

현재까지 알려진 타이로시나제 저해제로 하이드로퀴논(hydroquinone), 하이드록시아니솔(hydroxyanisole), 아스코빅산(ascorbic acid) 유도체, 코지산(kojic acid), 아제락산(azelaic acid), 코티코스테로이드(corticosteroids), 레티노이드(retinoids), 아부틴(arbutin) 등이 있으나,안전성과 경제성 등의 문제점으로 사용에 있어서 어려움이 있다. 특히, 하이드록시아니솔 및 하이드로퀴논 등은 강력한 멜라닌 생성 저해활성은 있으나 동시에 색소세포의 변성 또는 치사를 유발하고 세포 본래의 기능을 손상시키는 등의 부작용을 나타낸다. 그리고 코지산은 낮은 저해활성, 사용중의 변색, 물질자체의 불안정성 등의 문제점이 있다.

이와같이 타이로시나제 저해제가 많이 개발되어 현재 사용되고 있지만, 여러 가지 문제점이 있기 때문에, 강한 저해활성을 지니며 안정성 및 경제성이 모두 보장되는 저해제가 필요하다.

한편, 안정성이 높고 부작용이 적은 천연 추출물들을 이용하기도 하는데, 대한민국 특허 제23013호에 개시된 상지를 이용한 미백화장료, 대한민국 특허 제320743호에 개시된 목질진흙버섯을 이용한 미백화장료 외에 의이인, 천궁, 살구씨, 감초, 황금, 당귀, 녹두, 백지, 삼백초, 인삼잎, 부자, 천화분, 영능향, 두충, 방풍, 고본, 백렴, 표고버섯 등의 천연 추출물들이 미백 효과를 가지고 있는 것으로 알려져 있다. 그러나, 이들 천연 추출물의 경우 고농도에서만 비교적 높은 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타내며, 저농도에서는 저해 효과가 거의 나타나지 않는다.

본 발명은 상기와 같은 점들을 감안하여 창안된 것으로서, 종래 알려져 있는 미백물질들이 갖는 문제점을 극복하고 보다 우수한 미백 원료를 찾기 위하여 오래 전부터 한방 또는 민간 요법에 사용되어 안전성이 입증되어 있는 천연물을 대상으로 미백 효능이 있는 유효물질을 검색한 결과, 항암효과가 우수하여 민간에서 항암 치료제로 사용중인 차가버섯 자실체, 균사체 추출물이 매우 뛰어난 티로시나아제 활성 저해 효과를 나타냄을 발견하게 되었다.

차가(Chaga, Tchaga) 버섯의 학명은 Inonotus Obliquus로써 자작나무에서 자라며 Birch mushroom, Birch clinker, Polypore, Black birch touchwood, tschagapilz, Clinker polypore, Charcoal shelf 등의 이름을 가지고 있다. 국내에서는 검은자작나무버섯이라 불리기도 한다. 현재 차가버섯은 항산화, 항균, 항암등의 생리활성의 목적으로 민간에서 이용되고 있는 유용 버섯이다.

본 발명의 목적은 생리활성이 우수한 차가버섯의 자실체 추출물 및 자실체로부터 유도된 균사체를 액체 배양하여 균사체 추출물 및 배양액을 매 추출물을 함유하는 미백 화장료를 제공하는데 있다.

본 발명에 사용되는 차가버섯 추출물은 물, 친수유기용제 또는 그 혼합물 중 어느 하나의 용제를 사용하여 제조한다. 이를 좀 더 구체적으로 설명하면, 먼저 실시예 1에서는 일반적으로 사용되는 수용성, 메탄올, 에탄올 추출법을 사용하여 차가버섯 자실체 및 균사체 추출물을 추출한다.

[실시예 1]

차가버섯 자실체로부터 균사체를 유도하기 위해 차가버섯 자실체를 무균대 내에서 멸균된 칼을 이용하여 반으로 자른 후, 안쪽의 조직을 0.5 ㎝ 크기로 자른다. 자른 조직 단편을 미리 준비하여 둔 균사체 유도용 배지(포도당 3.0%, 효모추출물 0.5%, 항생제 100 ㎍/㎖, 한천 2.0%)에 치상하여 7일간 24℃에서 균사체를 유도한다. 유도된 균사체를 순수 분리하기 위하여 같은 배지에서 3회 계대 배양하여 차가버섯 균사체를 얻는다. 얻어진 균사체를 액체 배양하기 위해 균사체 생장용 배지(포도당 3.0%, 효모추출물 0.5%)에 접종하여 차가버섯 액체 배양 종균으로 사용한다.

차가버섯 균사체 대량 배양을 위해 20-ℓ 용량의 발효기를 사용한다. 발효조에 15ℓ의 균사체 생장용 배지를 넣은 후 121℃에서 40분간 멸균한 후, 미리 배양된 차가버섯 액체 배양 종균을 5% 되게 접종하여 15일간 배양한다. 액체 배양된 균사체를 여과지(20 mesh)를 이용하여 여과하여 균사체와 배양액을 분리하여 자실체와 같이 에탄올 및 열수 추출에 사용한다.

[실시예 2]

차가버섯 자실체 및 균사체 150g을 추출병에 넣고 증류수를 부어 80 ~ 121℃의 온도로 5시간 3회 추출하거나, 차가버섯 자실체 및 균사체 150g을 95~99% 농도의 에탄올 및 메탄올에 1∼15배의 부피량으로 넣고 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서 70∼80℃ 로 12시간 가열하여 추출한다. 추출액은 다시 워터만 종이 여과지로 감압 여과한 후, 건더기를 제거하고 나머지 액을 냉각콘덴서가 달린 농축장치에서 감압 농축하여 동결 건조한다.

차가버섯 균사 배양액은 원래 부피의 1/10의 부피로 감압농축하여 동결건조 한다.

[실험예1]

본 티로시나아제 활성 저해효과 시험은 티로신을 기질로 사용하며, 티로시나아제는 버섯에서 유래된 플루카(Fluka)사에서 구입하여 사용한다. 먼저 기질인 1.5 mM 티로신 용액 0.4㎖, 완충용액인 pH = 6.0, 0.1M 인산나트륨(Sodium phosphate) 0.4㎖을 큐빗에 넣고 상기 실시예 1, 2, 3의 추출물 0.2㎖과 효소액(0.1㎖, 890 units/㎖)를 첨가하여 30℃ 에서 1분간 반응시켜 475 nm에서 흡광도(UV-Vis 160A spectrophotometer, Shimadzu)를 측정 후 다음의 식에 의해 티로시나아제 효소 저해율(%)을 구한다. 이때, 각 반응은 3회 이상 측정한다.

티로시나아제 저해율(%) = [1-(S-B)/C] x 100

S : 효소액 및 시료용액 첨가시 흡광도 변화값

B : 효소액 대신 0.1M 인산 나트륨 버퍼(pH 6.0) 첨가시의 흡광도 변화값

C : 시료용액 대신 상기의 실시예 추출물들을 녹인 용매 첨가시의 흡광도 변화값

실험결과 값은 표 1내지 표 4에 나타내었다.

차가버섯 자실체	농도(%)	Tyrosinase 저해율(%)
차가버섯 자실체	농도(%)	Tyrosine 기질	L-DOPA 기질
수용성(D.W) 추출물	0.1	38.3	47.0
	0.25	67.4	80.0
	0.5	90.5	97.3
	1.0	100	100
	2.0	100	100
에탄올 용해성(EtOH) 추출물	0.1	48.8	91.4
	0.25	77.8	99.5
	0.5	95.0	100
	1.0	100	100
	2.0	100	100

상기 결과와 같이 실시예 2의 이용한 차가버섯 자실체 열수추출물, 에탄올 추출물은 농도 0.5% 이상의 농도에 tyrosine 및 L-DOPA 기질 모두에서 100%의 타이로시나아제 티로시나아제 활성 저해 효과를 보이는 것을 알 수 있다.

차가버섯 균사체	농도(%)	Tyrosinase 저해율(%)
차가버섯 균사체	농도(%)	Tyrosine 기질	L-DOPA 기질
수용성(D.W) 추출물	0.1	8.9	11.4
	0.5	18.4	21.4
	1.0	34.8	38.0
	2.0	64.4	70.5
	5.0	95.8	98.2
	10.0	100	100
에탄올 용해성(EtOH) 추출물	0.1	15.4	20.4
	0.5	34.7	31.2
	1.0	72.5	78.0
	2.0	95.5	98.6
	5.0	100	100
	10.0	100	100

상기 결과와 같이 실시예 2의 차가버섯 균사체 열수추출물, 에탄올 추출물은 농도 2.0% 이상의 농도에 tyrosine 및 L-DOPA 기질 모두에서 100%의 티로시나아제 활성 저해 효과를 보이는 것을 알 수 있다. 특히, 차가버섯 균사체 추출물은 상기 자실체 추출물의 결과와 비교하면 낮은 타이로시나아제 저해 활성을 나타내었다.

차가버섯 균사체	농도(%)	Tyrosinase 저해율(%)
차가버섯 균사체	농도(%)	Tyrosine 기질	L-DOPA 기질
배양액	0.1	0	0
	0.5	1.7	2.5
	1.0	5.6	7.2
	2.0	14.5	21.5
	5.0	44.5	56.4
	10.0	76.5	80.5

상기 결과와 같이 실시예 2의 차가버섯 균사 배양액의 경우 차가버섯 자실체 및 균사체 추출물에 비해 낮은 타이로시나아제 저해 활성을 나타내나, 배양액의 대량 생산이 가능하여 이를 이용한 미백원료 생산시 매우 유리한 장점을 가진다.

상기 표 1내지 표 4의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 차가버섯 자실체, 균사체 추출물 및 균사 배양액은 티로시나아제 활성 저해 효과가 뛰어난 것을 볼 수 있다. 아울러, 상기 효과는 하기의 표 5 및 표 6의 조성물과 같이 화장품 제조 분야에서 일반적으로 사용되는 보조제 및 부형제 등을 사용하여 화장품 제조에 통상적으로 이용되는 방법에 따라 제재되어도 동일한 미백효과를 가진다.

다음의 표 4 및 표 5은 실시예로서 자실체, 균사체 추출물 및 균사 배양액을 각각 첨가되어 제조된 크림 및 화장수를 나타낸 것이다.

크림(Cream) 원료	함량(중량%)
자실체 추출물	0.5	-	-
균사체 추출물	-	1.0	-
균사 배양액	-	-	5.0
부틸렌글리콜	3.0
카르복시비닐폴리머	-
밀납	10.0
폴리솔베이트 60	1.5
유동파라핀	10.0
스쿠알란	5.0
글리세린	5.0
프로필렌글리콜	3.0
트리에탄올아민	0.2
에탄올	-
방부제	미량
색소	미량
향료	미량
정제수	잔액
계	100

화장수(skin lotion)	함량(중량%)
자실체 추출물	0.5	-	-
균사체 추출물	-	1.0	-
균사 배양액	-	-	5.0
부틸렌글리콜	2.0
카르복시비닐폴리머	0.1
밀납	-
폴리솔베이트 60	-
유동파라핀	-
스쿠알란	-
글리세린	3.0
프로필렌글리콜	2.0
트리에탄올아민	0.1
에탄올	10.0
방부제	미량
색소	미량
향료	미량
정제수	잔액
계	100

팩	함량
자실체 추출물	0.5	-	-
균사체 추출물	-	1.0	-
균사 배양액	-	-	5.0
폴리비닐알콜	13.0
소듐카르복시메칠셀룰로스	0.2
알란토인	0.1
노니페닐에테르	0.3
방부제	미량
색소	미량
향료	미량
정제수	잔액 / 계 100

미용비누	함량
자실체 추출물	0.5	-	-
균사체 추출물	-	1.0	-
균사 배양액	-	-	5.0
야자유 지방산	1.0
이산화티탄	0.3
에틸렌아민 테트라초산나트륨	0.1
향료	0.5
색소	적량
글리세린	1.0
산화방지제	적량
비누칩(베이스)	to 100

[실험예 2]

본 실험에서는 멜라닌 생성 억제 효과를 이용한 미백효과(Whitening effect)를 실시한다. 이를 위해, 건강한 성인 남여 20명의 양팔 하박부에 실험 대상 부위에만 자외선이 조사되도록 알루미늄 호일을 씌우고 10cm거리에서 자외선을 조사한다. 관찰방법은 육안으로 색소 침착도를 판정하고, 상기 표 5 및 표 6과 같이 제조된 크림과 화장수 6가지를 2달간 매일 2차례 사용하여 사용 전후 피부가 희어진 정도를 육안으로 관찰하였다. 실험결과는 하기의 표 7에 나타낸 것과 같다.

화장료	첨가물질	관능평가(명)
화장료	첨가물질	현저한 효과	약간의 효과	효과 없음
크림	자실체 추출물	11	9	0
	균사체 추출물	7	11	2
	균사 배양액	4	11	5
화장수	자실체 추출물	10	10	0
	균사체 추출물	8	11	1
	균사 배양액	10	10	0
팩	자실체 추출물	13	7	0
	균사체 추출물	10	10	0
	균사 배양액	8	7	5
미용비누	자실체 추출물	10	10	0
	균사체 추출물	9	10	1
	균사 배양액	8	9	3

상기 결과와 같이 차가버섯 자실체 및 균사체 추출물을 0.01 ~ 5.0 중량% 함유한 화장료가 뛰어난 미백효과를 보이는 것을 알 수 있으며, 특히 자실체 추출물이 첨가된 팩을 사용 하였을 경우 현저한 미백효과를 나타내는 것으로 조사 되었다.

본 발명의 차가버섯 추출물을 함유하고 있는 미백화장료에 따르면, 종래의 미백물질로 개발된 천연 추출물들에 비해 적은 양으로도 뛰어난 티로시나아제 활성 저해효과를 가짐을 알 수 있으며, 상기 차가버섯을 친수성 유기용매를 이용하여 추출하였을 경우 매우 뛰어난 미백효과를 나타내었다.

본 명세서에 첨부되는 다음의 도면들은 본 발명의 바람직한 실시예를 예시하는 것이며, 후술하는 발명의 상세한 설명과 함께 본 발명의 기술사상을 더욱 이해시키는 역할을 하는 것이므로, 본 발명은 그러한 도면에 기재된 사항에만 한정되어 해석되어서는 아니 된다.

도 1은 차가버섯 자실체 추출물 농도에 따른 타이로시나아제 저해 활성도를 나타낸 도면이다.

< 도면의 주요 참조부호에 대한 설명>

-●- 차가버섯 자실체 열수 추출물(Tyrosine 기질 이용)

-■- 차가버섯 자실체 에탄올 추출물(Tyrosine 기질 이용)

-○- 차가버섯 자실체 열수 추출물(L-DOPA 기질 이용)

-□- 차가버섯 자실체 열수 추출물((L-DOPA 기질 이용)

Claims

차가버섯 자실체 및 균사체와 물, 친수유기용제 및 그 혼합물 중 어느 하나의 용제를 섞어 차가버섯 자실체 및 균사체를 추출물을 추출하고, 상기 추출물은 화장료에 대하여 0.01 ~ 10 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 차가버섯 추출물을 함유하는 미백 화장료.
제 1항에 있어서,

상기 차가버섯 자실체 추출물은 증류수를 용제로 하여 추출되고, 화장료에 대하여 0.01 ~10 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 미백화장료.
제 1항에 있어서,

상기 차가버섯 자실체 추출물은 에탄올을 용제로 하여 추출되고, 화장료에 대하여 0.01 ~10 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 미백화장료.
제 1항에 있어서,

상기 차가버섯 균사체 추출물은 증류수를 용제로 하여 추출되고, 화장료에 대하여 0.1 ~10 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 미백화장료.
제 1항에 있어서,

상기 차가버섯 균사체 추출물은 에탄올을 용제로 하여 추출되고, 화장료에 대하여 0.05 ~10 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 미백화장료.
차가버섯 균사 배양액을 화장료에 대하여 0.1 ~10 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 미백화장료.