KR20040060958A

KR20040060958A - 인터페론-γ 생산 촉진제

Info

Publication number: KR20040060958A
Application number: KR10-2004-7006533A
Authority: KR
Inventors: 구니카타도시오; 이시하라다츠야; 구리모토마사시
Original assignee: 가부시끼가이샤 하야시바라 세이부쓰 가가꾸 겐꾸조
Priority date: 2001-11-02
Filing date: 2002-10-17
Publication date: 2004-07-06
Also published as: WO2003037339A1; US20080064722A1; KR100950136B1; US20050054675A1; EP1462108A4; EP1462108A1; JP2003137784A

Abstract

생체에 안전하게 적용할 수 있는 인터페론-γ 생산 촉진제와 그 용도를 제공하는 것을 과제로 하고, 3핵형(三核型) 폴리메틴계 시아닌 색소를 함유해서 되는 인터페론-γ 생산 촉진제와, 그 인터페론-γ 생산 촉진제를 면역담당 세포에 작용시키는 공정을 포함하는 인터페론-γ의 생산방법을 제공함으로써 상기 과제를 해결한다.

Description

인터페론-γ 생산 촉진제{INTERFERON $G(G) PRODUCTION PROMOTER}

인터페론-γ (이하, 「IFN-γ」라고 약기한다.)은, 항바이러스 작용, 항종양 작용, 면역조절 작용 등의 다양한 생리작용을 가진 단백질로서 알려져서, 항원이나 마이토젠에 의해 자극을 받은 면역담당 세포가 생산한다고 하고 있다. 이들의 생리작용과 더불어, IFN-γ은 발견 당초부터 항바이러스제, 항종양제로서의 실용화가 기대되어, 현재라도 뇌종양을 비롯한 악성 종양 일반의 치료제로서 정력적으로 임상시험이 진행되고 있다. 현재 입수할 수 있는 IFN-γ은, 면역담당 세포가 생산하는 천연형의 것과, IFN-γ유전자에 의해 형질전환한 대장균 등이 생산하는 재조합형의 것으로 분류되며, 상기한 임상시험에 있어서는 이들 중에서 어느 하나가 「외래 IFN-γ」로서 환자에게 적용되고 있다.

이 중에서, 천연형 IFN-γ은, 통상, 배양주화된 면역담당 세포를 IFN-γ 생산 촉진제를 함유하는 배지에서 배양한 후, 배양물을 정제해서 조제되고 있다. 이 조제 방법에서는, IFN-γ 생산 촉진제의 종류가 IFN-γ의 생산량이나 정제의 용이,더욱이는, 제품의 안전성 등에 큰 영향을 미친다고 하고 있고, 통상, 콘카나발린 A, 렌즈 콩 레시틴, 아메리카 야마고보렉틴, 엔도톡신, 리포다당 등의 마이토젠이 자주 이용된다. 그런데, 이들 물질은 모두 분자에 다양성이 있어, 공급원이나 정제 방법에 따라 품질이 변동하기 쉽고, IFN-γ 생산 촉진 능력이 일정한 조제품을 소망량 입수하기 어렵다고 하는 문제가 있었다. 더욱이, 이들 물질의 대부분은, 생체내에 있어서 심각한 부작용을 야기하거나, 물질에 따라서는 독성을 가지는 것조차 있으므로 생체에 직접 적용해서 IFN-γ의 생산을 촉진할 수 없었다. 이와 같은 상황을 감안하여, 본 발명의 과제는, 생체에 안전하게 적용할 수 있는 IFN-γ 생산 촉진제를 제공하는 것에 있다.

본 발명은 인터페론-γ 생산 촉진제에 관한 것으로서, 특히, 3핵형(三核型) 폴리메틴계(polymethine-type) 시아닌 색소를 유효성분으로 하는, 생체에 직접 적용할 수 있는 신규의 인터페론-γ 생산 촉진제에 관한 것이다.

본 발명자가 폴리메틴계 시아닌 색소에 착안하여 예의 연구하고, 검색한 결과, 폴리메틴계 시아닌 색소의 1종인 3핵형 폴리메틴계 시아닌 색소는, 면역담당 세포에 있어서 IFN-γ의 생산을 유의하게 촉진하는 외에 생체에 직접 적용해도 독성이나 심각한 부작용을 나타내지 않는 것을 발견하였다.

즉, 본 발명은, 3핵형 폴리메틴계 시아닌 색소를 함유해서 되는 IFN-γ 생산 촉진제를 제공함으로써 상기 과제를 해결하는 것이다.

또한, 본 발명은, 이와 같은 IFN-γ 생산 촉진제를 면역담당 세포에 작용시키는 공정을 포함하는 IFN-γ의 생산방법을 제공함으로써 상기 과제를 해결하는 것이다.

3핵형 폴리메틴계 시아닌 색소 자체는 공지의 물질이며, 예를 들면, 速水正明 감수, 『感光色素』, 1997년 10월 17일, 산업도서 주식회사 발행, 138 내지 154 페이지 등에 기재되어 있는 바와 같이, 오랜 세월, 빈혈, 식욕부진, 허약체질, 권태, 습진, 창상, 열상, 동상, 화농성 질환, 신경성 질환 등의 치료에 이용되어 왔다. 그러나, 3핵형 폴리메틴계 시아닌 색소가 면역담당 세포에서 IFN-γ의 생산을 촉진하는 것을 교시하거나 시사하는 문헌은 존재하지 않고, 3핵형 폴리메틴계 시아닌 색소를 함유해서 되는 IFN-γ 생산 촉진제는 본 발명으로서 효시(嚆矢)로 한다.

[발명을 실시하기 위한 최선의 형태]

이하, 본 발명의 실시의 형태에 대해서 설명하면, 앞서 설명한 바와 같이, 본 발명은 3핵형 폴리메틴계 시아닌 색소를 함유해서 되는 IFN-γ 생산 촉진제에 관한 것이다. 본 발명에서 말하는 3핵형 폴리메틴계 시아닌 색소라 함은, 트리메틴쇄(鎖), 펜타메틴쇄, 헵타메틴쇄 등의 폴리메틴쇄의 양단 및 메소 위치에, 예를 들면, 티아졸 골격, 퀴놀린 골격 등을 가진, 서로 동일하거나 상이한 복소환기(複素環基)가 각각 결합해서 되는 유기색소 화합물 전반을 의미한다.

본 발명은, 앞서 설명한 바와 같이, 3핵형 펜타메틴계 시아닌 색소가 면역담당 세포에 있어서 IFN-γ의 생산을 촉진한다고 하는 독자적인 발견에 근거한 것이므로, 어떠한 구조의 3핵형 폴리메틴계 시아닌 색소 (이하, 단지 「시아닌 색소」라고 약기할 경우가 있음.) 이더라도, 그것이 생체내 또는 생체외에서 면역담당 세포에 있어서의 IFN-γ의 생산을 유의하게 촉진할 수 있는 것인 한, 본 발명에서 유리하게 사용할 수 있다.

바람직한 시아닌 색소로서는, 예를 들면, 일반식 1 및 일반식 2로 나타내어지는 것을 들 수 있다.

일반식 1:

일반식 2:

일반식 1에 있어서, R₁내지 R₃은 서로 동일하거나 상이한 지방족 탄화 수소기를 나타낸다. R₁내지 R₃에 있어서의 지방족 탄화 수소기로서는, 예를 들면, 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, 부틸기, 이소부틸기, sec-부틸기, tert-부틸기, 펜틸기, 이소 펜틸기, 네오 펜틸기, tert-펜틸기 등의, 직쇄상 또는 분기(分岐)를 가진 탄소수 5까지의 쇄의 길이가 짧은 지방족 탄화 수소기를 들 수 있고, 이 중에서 R₁내지 R₃이 모두 메틸기, 에틸기 또는 프로필기 중의 어느 것인 것은 염가로 조제할 수 있는 외에, 생체에의 친화성이 크므로 특히 바람직하다.

일반식 2에 있어서, R₄내지 R₆은 서로 동일하거나 상이한 지방족 탄화 수소기를 나타낸다. R₄내지 R₆에 있어서의 지방족 탄화 수소기로서는, 예를 들면, 프로필기, 이소프로필기, 펜틸기, 이소 펜틸기, 네오 펜틸기, tert-펜틸기, 1-메틸펜틸기, 2-메틸펜틸기, 헥실기, 이소헥실기, 5-메틸헥실기, 헵틸기, 옥틸기, 노닐기, 데실기등의 탄소수 4 내지 10의, 직쇄상 또는 분기를 가진 중간 정도의 쇄(鎖) 길이를 가진 지방족 탄화 수소기를 들 수 있다. 이 중에서 R₄내지 R₆이 모두 직쇄상의 헥실기, 헵틸기 또는 옥틸기 중의 어느 하나인 것은 염가로 조제할 수 있는 외에 생체에의 친화성이 크므로 특히 바람직하다.

일반식 1 및 일반식 2에 있어서, X_l ^-및 X₂ ^-는 생리학적으로 허용할 수 있는 음이온을 나타내고, 통상, 예를 들면, 플루오르 이온, 염소 이온, 브롬 이온, 요오드 이온, 과염소산 이온 등의 할로겐 음이온, 황산 이온, 질산 이온, 인산 이온 등의 무기산 음이온, 아세트산 이온, 프로피온산 이온, 안식 청산 이온, p-톨루엔술폰산 이온, 벤젠술폰산 이온, 니코틴산 이온, 오로토산 이온 등의 유기산 음이온 등이 채용되며, 이 중에서 플루오르 이온, 염소 이온, 브롬 이온, 요오드 이온 등의 할로겐 음이온이 바람직하고, 특히 바람직한 것은 요오드 이온이다.

본 발명에서 사용하는 시아닌 색소의 구체적인 예를 들면, 화학식 1 및 화학식 2로서 나타내어지는 것을 들 수 있다. 이들은 모두, 면역담당 세포에 있어서 IFN-γ의 생산을 안정하게 촉진하는 외에 또한, 생체내에 있어서 독성이나 심각한 부작용을 나타내지 않으므로 본 발명에서 극히 유용하다.

화학식 1:

화학식 2:

이와 같은 시아닌 색소는, 공지의 방법에 따르거나, 공지의 방법에 준해서 소망량을 얻을 수 있다. 예를 들면, 화학식 1 및 화학식 2로 나타내어지는 시아닌 색소는, 예를 들면, 앞서 설명한 速水正明 감수, 『感光色素, 1997년 10월 17일, 산업도서 주식회사 발행, 24 내지 30 페이지에 기재된 방법, 혹은 그것들의 방법에 준해서 소망량을 얻을 수 있다. 시아닌 색소의 시판품이 있을 경우에는, 필요에 따라서, 그것을 적당히 정제한 후에 이용하면 좋은데, 예를 들면, 화학식 1 및 화학식 2로 나타내어지는 시아닌 색소의 시판품으로서는, 각각, 『NK-4』 및 『NK-19』 (모두, 주식회사 林原 생물화학 연구소 제조)로서 판매되고 있는 것을 들 수 있다.

이어서, 본 발명에 의한 IFN-γ 생산 촉진제의 용도에 대해서 설명하면, 앞서 설명한 바와 같이, 본 발명에서 이용하는 시아닌 색소는, 면역담당 세포에 있어서 IFN-γ의 생산을 촉진하는 성질을 구비하므로, 이와 같은 시아닌 색소를 함유해서 되는 본 발명의 IFN-γ 생산 촉진제는, 예를 들면, 세포 배양법에 의해 IFN-γ을 제조할 때에, 배양 배지에 공존시킴으로써 면역담당 세포에 있어서 IFN-γ의 생산을 촉진하기 위한 IFN-γ 생산 촉진제로서 유용하다. 더욱이, 본 발명의 IFN-γ 생산 촉진제는, 생체에 직접 적용해도 독성이나 심각한 부작용을 나타내지 않으므로, 여러 가지 종류의 IFN-γ 감수성 질환을 치료·예방하기 위한 IFN-γ 감수성 질환제로서도 유용하다.

본 발명에 의한 IFN-γ 생산 촉진제를 이용해서 IFN-γ을 생산하기 위해서는, 본 발명에 의한 IFN-γ 생산 촉진제의 유효량을 면역담당 세포에 작용시키면 좋다.

구체적으로는, 예를 들면, 포유류의 말초 피나 림프액을 구성하는 면역담당 세포인 백혈구, 림프구 등의 혈구나, KG-1세포(ATCC CCL-246), Mo 세포(ATCC CRL-8066), Jurkat 세포(ATCC TIB-52), HuT78 세포(ATCC TIB-161), EL4 세포(ATCC TIB-39) 등의 배양 주화된 면역담당 세포를, 본 발명에 의한 IFN-γ 생산 촉진제를 1 내지 10,000 ㎍/ml, 바람직하게는, 10 내지 1,000 ㎍/ml 함유하는 온도 30 내지 40℃로 미리 가온(加溫)해 둔 범용의 배양배지에 부유시킨다. 또한, 필요에 따라서, 배양배지에, 예를 들면, 마이토젠, 인터루킨 2, 인터루킨 12, 항CD3 항체 등의 T 세포 자극 물질을 가한 후, 배양 배지를 온도 30 내지 40℃, pH 5 내지 8로 유지하면서, 필요에 따라서, 배양 배지를 신선한 것으로 정기적으로 교체하면서, 통상 일반적인 방법에 의해 1 내지 100시간 배양한다.

이와 같이 하여 얻어진 배양물로부터 IFN-γ을 채취하기 위해서는, 배양물에, 예를 들면, 투석, 염석, 경사, 여과, 농축, 분별 침전, 겔 여과 크로마토그래피, 이온 교환 크로마토그래피, 소수 크로마토그래피, 어피니티 크로마토그래피, 크로마토포커싱, 겔 전기영동, 등전점 전기영동 등의 생리활성 단백질을 정제하기 위한 범용의 방법을 적용하면 좋고, 필요에 따라서, 이들 방법은 적당히 조합해서 적용된다.

한편, 본 발명의 IFN-γ 생산 촉진제를 IFN-γ 감수성 질환제로서 이용하는 후자의 용도에 있어서는, 본 발명에 의한 IFN-γ 생산 촉진제의 유효량을 생체에 직접 적용한다. 본 발명에서 말하는 IFN-γ 감수성 질환이라 함은, IFN-γ가 생체내에서 병인(病因)에 직접 또는 간접으로 작용해서 치료 및/또는 예방할 수 있는 질환 전반을 의미하는 것으로 하고, 각각의 질환으로서는, 예를 들면, 간염, 구내염, 헤르페스증, 첨규(尖圭) 콘디롬, 후천성 면역부전 증후군(AIDS) 등의 바이러스성 질환, 칸디다증, 말라리아증, 약제 내성 결핵, 비정형 항산균 감염증 등의 세균 감염증, 피부암, 신장 세포암, 폐 소세포암, 균상 식육종, 악성 흑색종, 만성 육아종, 신경 아세포종 등의 고형 악성 종양, 성인 T 세포 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 악성 림프종 등의 혈구계 악성 종양, 아토피성 피부염, 만성 관절 류머티즘 등의 면역질환, 더욱이는, 켈로이드, 뼈화석증, 스파오키시도시스무타아제 결손증 등을 들 수 있다.

이와 같이 하여, 본 발명에 의한 IFN-γ 생산 촉진제는, 상기한 바와 같은 IFN-γ 감수성 질환을 치료·예방하기 위한 항종양제, 항바이러스제, 항감염증제,면역질환제 등으로서 다종다양한 용도를 가진 것이 된다. 배합하는 시아닌 색소나 적용 대상이 되는 IFN-γ 감수성 질환의 종류에도 따르지만, 본 발명의 IFN-γ 생산 촉진제는 적용 경로에 따라, 통상, 시아닌 색소를 0.005％（w/w) 이상, 바람직하게는, 0.01 내지 1％（w/w) 함유시켜, 용도에 따라, 엑기스제, 엘릭시르제, 하기도용(下氣道用) 흡입제, 캡슐제, 과립제, 안과용 서방제, 환제, 눈연고제, 구강점막 첩부제, 현탁제, 에멀젼제, 경고제, 좌제, 가루약, 주정제, 정제, 시럽제, 침제제, 전제, 주사제, 용액제, 점안제, 점이제, 점비제, 트로치제, 연고제, 팝제, 방향수제, 코용 분무제, 리니멘트제, 리모나데제, 유동 엑기스제, 로션제 등으로 조제된다.

본 발명에 의한 IFN-γ 생산 촉진제를 IFN-γ 감수성 질환제로서 사용할 경우, 본 발명의 IFN-γ 생산 촉진제는, 유효성분으로서의 시아닌 색소 이외의, 예를 들면, 부형제, 연고 기제, 용해제, 교미제(矯味劑), 교취제(矯臭劑), 착색제, 유화제 등의 약제 일반에 범용되는 적당한 조제용 약을 배합해도 좋다. 또한, 본 발명의 목적을 일탈하지 않는 범위에서, 예를 들면, 외피용 살균 소독제, 창상 보호제, 소염제 등의 외피용 약, 비타민 A제, 비타민 B제, 비타민 C제, 비타민 D제, 비타민 E제, 비타민 K제 등의 비타민제, 칼슘제, 무기질 제제, 당류제, 유기산 제제, 단백 아미노산 제제, 장기 제제 등의 자양(慈養) 강장약, 클로로필 제제, 색소제제 등의 세포 부활용 약, 알킬화제, 대사 길항제, 항종양성 항생물질 제제, 항종양성 식물성분 제제 등의 종양용 약, 항히스타민제 등의 알레르기용 약, 항결핵제, 합성 항균제, 항바이러스제 등의 화학요법제, 그 외에, 호르몬제, 항생물질 제제, 생물학적 제제 등의 시아닌 색소 이외의 약제를 1 또는 복수 배합해도 좋다.

더욱이, IFN-γ 감수성 질환제로서 사용되는 본 발명의 IFN-γ 생산 촉진제는, 소위, 투약 단위형태의 약제도 포함하는 것으로 하고, 그 투약 단위형태의 약제라 함은, 시아닌 색소를, 예를 들면, 1회당의 용량 또는 그 정수배(4배까지) 혹은 약수(約數)(1/40까지)에 상당하는 양을 함유해서 되며, 투약에 적합한, 물리적으로 분리한 일체의 제형으로 있는 약제를 의미한다. 이러한 투약 단위형태의 약제로서는, 예를 들면, 캡슐제, 과립제, 환제, 좌제, 산제, 주사제, 퍼프제 등을 들 수 있다.

본 발명의 IFN-γ 생산 촉진제는, 경구경로로서 적용해도, 비경구 경로로서 적용해도 IFN-γ 감수성 질환의 치료·예방에 효과를 발휘한다. IFN-γ 감수성 질환의 종류나 증상에도 따르지만, 구체적으로는, 예를 들면, 환자의 증상이나 적용후의 경과를 관찰하면서, 체중 1 kg당 1 내지 10,000㎍/일, 바람직하게는, 10 내지 1,000㎍/일의 시아닌 색소를, 필요에 따라서 복수회로 나누어서 1주당 1회 내지 7회의 빈도로 1주간 내지 반년간에 걸쳐서 경구경로 적용하거나, 혹은, 피내, 피하, 근육내, 정맥내, 비강내, 직장내, 복강내 등의 비경구 경로에 의해 적용한다. 바람직한 적용 경로는 경구경로이며, 본 발명의 IFN-γ 생산 촉진제를 경구경로로서 적용할 때에는, 주사나 통원(通院) 등에 따르는 동통(疼痛)이나 불편을 현저히 저감 또는 해소할 수 있다.

주지하는 바와 같이, IFN-γ는 바이러스, 세균에게 대한 감염 방어, 종양세포의 증식 억제, 면역기능의 조절 작용 등을 통해서 인간을 비롯한 포유류의 생체방어에 엄청난 관여를 하고 있다. IFN-γ는, 앞서 설명한 바와 같이, 인간의 IFN-γ 감수성 질환제로서 이미 실용화되고 있어, 그 대상질환, 용량, 용법 및 안전성은 거의 확립되어 가고 있다. 한편, 대표적인 시아닌 색소인 화학식 1 및 화학식 2로 나타내어지는 것은, 독성이나 심각한 부작용이 지적됨이 없이, 오랜 세월, 빈혈, 식욕부진, 허약체질, 권태, 습진, 창상, 열상(熱傷), 동상, 화농성 질환, 신경성 질환 등의 치료·예방제로서 사용되어 왔다. 이들 사실은, 본 발명의 IFN-γ 생산 촉진제가 의약품으로서 생체에 안전하게 적용할 수 있는 것을 뒷받침하고 있다.

이어서, 면역담당 세포에 있어서의 IFN-γ 생산에 대한 시아닌 색소의 효과에 대하여, 마우스를 모델로 사용한 반(半)비보 실험에 근거하여 설명한다.

실험예: IFN-γ 생산에 대한 시아닌 색소의 효과

생후 10 주령(週齡)의 암컷 BALB/c 마우스 25 마리를 5군으로 나누었다. 별도로, 화학식 1로 나타내어지는 시아닌 색소(상품명 『NK-4』, 일본국의 주식회사 林原 생물화학 연구소 제조) 1 중량부와 중탄산 나트륨 200 중량부로 된 산제(散劑)를 조제하고, 이것을 적량의 생리 식염수에 시아닌 색소의 농도가 20mg/ml이 되도록 가하여 용해시켰다. 그 후, 이 용액을, 표 1에 나온 각 적용량이 되도록, 필요에 따라서 농도 20mg/ml의 중탄산 나트륨 수용액에 의해 적당히 희석한 후에, 상기한 마우스 중의 4군에 매일 1회, 3일간에 걸쳐서 경구경로로써 적용하였다.

시아닌 색소의 최종 적용으로부터 1일 후에, 통상적인 방법에 따라서 마우스로부터 비장(脾臟)을 적출하여 세절(細切)하고, 파쇄해서 세포를 분산시켰다. 비장 세포를 채취하고, 10 ％（v／v) 소 혈청 알부민, 10mM HEPES (N-2-히드록시에틸피페라진-N'-2-에탄술폰산) 및 5㎍/ml 리포 다당을 각각 함유하는 RPMI 배지(p=7.2)에 세포밀도 1×10⁶개/ml이 되도록 부유시켜, 37℃ 에서 72시간 배양한 후, 통상적인 고상 효소 면역측정법 (ELISA법)에 의해 배양물 중의 IFN-γ 농도를 측정하였다. 이와 병행하여, 나머지 1군의 마우스에, 시아닌 색소를 생략한 이외는 마찬가지로 해서 조제한 물약을 경구경로서 적용하고, 이것을 상기와 마찬가지로 처치해서 대조로 하였다. 그 결과를 표 1에 나타낸다. 또한 본 실험에 있어서는, IFN-γ의 표준품으로서, 미국 국립 공중위생 연구소에서 입수한 표준 마우스 IFN-γ(GgO2-901-533)를 이용하여 국제 표준단위(IU)로 환산해서 표시하였다.

[표 1]

시아닌 색소의 적용량 IFN-γ 생산량(㎍/kg 체중) (IU/ml)

0 0.41 1.210 2.2100 2.31,000 2.8

표 1의 결과에서 나온 바와 같이, 대조에 있어서는 고작해야 0.4 IU／ml의 IFN-γ 생산 밖에 나타나지 않은 것에 대해서, 시아닌 색소를 경구경로로서 적용한 계(系)에 있어서는, 시아닌 색소의 적용량에 의존해서 IFN-γ의 생산량이 현저하게 증가하고, 1,000㎍/kg 체중을 적용한 계에 있어서는, IFN-γ의 생산량이 2.8 IU/ml에도 달하여, 이것은 대조의 7배에 상당하는 고레벨이었다. 게다가, 시아닌 색소를 적용한 마우스는 모두, 윤기있는 털, 식욕, 운동성 등에 있어서 변조를 전혀 나타내지 않고, 사망예도 없었다.

이들 실험 결과는, 본 발명의 IFN-γ 생산 촉진제가 면역담당 세포에 있어서 IFN-γ의 생산을 유의하게 촉진하는 것과 함께, 생체에 직접 적용해도 독성이나 심각한 부작용을 나타내지 않는 것을 말하고 있다. 즉, 화학식 1로 나타내어지는 시아닌 색소는 경구경로로 4g/kg 체중 적용해도 중독증상 등의 부작용을 나타내지 않고, 또한, 화학식 2로 나타내어지는 시아닌 색소의 LD50은 경구경로에서 1.5g/kg 체중이며, 복강내 경로에서 54mg/kg 체중이다.

이하, 본 발명의 실시의 형태에 대하여 실시예에 근거해서 설명한다.

실시예 1: 물약

생리 식염수에 화학식 1 또는 화학식 2로 나타내어지는 시아닌 색소(상품명 『NK-4』 및 『NK-19』, 모두, 일본국의 주식회사 林原 생물화학 연구소 제조) 중의 어느 하나를 농도 0.01％（w/w)이 되도록 용해한 후, 이 용액을 통상적인 방법에 따라서 정밀여과에 의해 멸균해서 2종류의 액제를 얻었다.

안정한 이 제품은 모두, 악성 종양, 바이러스성 질환, 세균감염증, 면역질환 등의 IFN-γ 감수성 질환을 치료·예방하기 위한 주사제, 점안제, 점비제 등으로서 유용하다.

실시예 2: 건조 주사제

생리 식염수에 화학식 1 또는 화학식 2로 나타내어지는 시아닌 색소(상품명 『NK-4』 및 『NK-19』, 모두, 일본국의 주식회사 林原 생물화학 연구소 제조)의 어느 하나를 농도 0.1％（w/w)이 되도록 용해하였다. 이 용액을 통상적인 방법에 따라서 정밀여과에 의해 멸균하고, 별도로 멸균해 둔 바이알 병에 1ml씩 나누어 넣고 동결 건조한 후, 마개로 밀봉해서 2종류의 건조 주사제를 얻었다.

안정한 이 제품은 모두, 악성 종양, 바이러스성 질환, 세균감염증, 면역질환 등의 IFN-γ 감수성 질환을 치료·예방하기 위한 건조 주사제로서 유용하다.

실시예 3: 연고제

멸균 증류수에 카르복시비닐 폴리머 (상품명 『하이비스와코 104』, 주식회사 和光純藥공업 제조)와, 통상적인 방법에 따라서 미리 파이로젠을 제거해 둔 고순도 트레할로오스 (상품명 『트레하』, 일본국의 주식회사 林原 제조)를 각각 농도 1.4％（w/w) 및 2.0％（w/w)가 되도록 용해하고, 화학식 1 또는 화학식 2로 나타내어지는 시아닌 색소(상품명 『NK-4』 및 『NK-19』, 모두 일본국의 주식회사 林原 생물화학 연구소 제조)의 어느 하나를 가해서, 균일하게 혼합한 후, pH 7.2로 조정하고여 1g당 시아닌 색소를 약 1mg 함유하는 2종류의 페이스트상물 연고제를 얻었다.

안정성과 연전성(延展性)이 우수한 이 제품은 모두, 악성 종양, 바이러스성 질환, 세균감염증, 면역질환 등의 IFN-γ 감수성 질환을 치료·예방하기 위한 연고제로서 유용하다.

실시예 4: 정제

무수결정 α-말토오스 분말 (상품명 『파인토오스』, 일본국의 주식회사 林原 제조)과 화학식 1 또는 화학식 2로 나타내어지는 시아닌 색소 (상품명 『NK-4』 및 『NK-19』, 모두, 일본국의 주식회사 林原 생물화학 연구소 제조)의 어느 하나를 균일히 혼합한 후, 통상적인 방법에 따라서 타정(打錠)함으로써, 제품 1정(錠) (약 200mg) 당 시아닌 색소를 약 50㎍ 함유하는 2종류의 정제를 얻었다.

안정하고 섭취성이 우수한 이 제품은 모두, 악성 종양, 바이러스성 질환, 세균감염증, 면역질환 등의 IFN-γ 감수성 질환을 치료·예방하기 위한 정제로서 유용하다.

이상 설명한 바와 같이, 본 발명은 시아닌 색소의 신규의 생리작용의 발견에 근거한 것이다. 본 발명의 IFN-γ 생산 촉진제는 면역담당 세포에 있어서 IFN-γ의 생산을 안정하게 촉진하므로, 세포 배양법에 의해 IFN-γ을 제조할 때의 IFN-γ 생산 촉진제로서 유용하다.

또한, 본 발명의 IFN-γ 생산 촉진제는 생체에 직접 적용해도 독성이나 심각한 부작용을 나타내지 않으므로, IFN-γ가 생체내에서 병인(病因)에 직접 또는 간접으로 관여하는, 예를 들면, 바이러스성 질환, 세균감염증, 악성 종양, 면역질환 등의 IFN-γ 감수성 질환을 치료·예방하기 위한 IFN-γ 감수성 질환제로서도 유용하다.

이렇게도 현저한 효과를 나타내는 본 발명은 이 분야에 공헌하는 바 실로 큰, 의의가 있는 발명이라고 할 수 있다.

Claims

3핵형(三核型) 폴리메틴계 시아닌 색소를 함유해서 되는 인터페론-γ 생산 촉진제.
제1항에 있어서, 3핵형 폴리메틴계 시아닌 색소가 일반식 1 또는 일반식 2 중의 어느 하나로서 나타내어지는 인터페론-γ 생산 촉진제.

일반식 1:

(일반식 1에 있어서, R₁내지 R₃은 서로 동일하거나 상이한 지방족 탄화 수소기를 나타낸다. X₁ ^-은 생리학적으로 허용할 수 있는 음이온을 나타낸다.)

일반식 2:

(일반식 2에 있어서, R₄내지 R₆은 서로 동일하거나 상이한 지방족 탄화 수소기를 나타낸다. X₂ ^-는 생리학적으로 허용할 수 있는 음이온을 나타낸다.)
제1항 또는 제2항에 있어서, 인터페론-γ 감수성 질환제로서의 인터페론-γ 생산 촉진제.
제1항, 제2항 또는 제3항에 있어서, 경구경로로써 생체에 적용되는 인터페론-γ 생산 촉진제.
제1항 내지 제4항 중의 어느 한 항에 기재한 인터페론-γ 생산 촉진제를 면역담당 세포에 작용시키는 공정을 포함하는 인터페론-γ의 생산방법.