KR20030074780A

KR20030074780A - 유용 식물의 재배시 유해 생물의 방제 방법

Info

Publication number: KR20030074780A
Application number: KR20037010281A
Authority: KR
Inventors: 케른만프레트
Original assignee: 바이엘 크롭사이언스 게엠베하
Priority date: 2001-02-03
Filing date: 2002-01-17
Publication date: 2003-09-19
Also published as: EP1967068A2; DE10104871A1; US20040078843A1; MXPA03006934A; AU2002242678A1; BR0206926A; JP2004517945A; EP1922931A2; EP1367900A2; WO2002062144A3; US20080064735A1; WO2002062144A2; EP1967068A3

Abstract

본 발명은 살충 효과를 갖는 단백질을 암호화하고 이 단백질을 발현하는 바실러스 투링기엔시스(Bacillus thuringiensis)로부터 유래한 유전자를 포함하는 유전자 변형 식물에서 유해 생물을 방제하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 하기 (a) 내지 (f)로 구성된 군에서 선택된 살충 효과량의 1개 이상의 화합물이 식물, 그의 종자 산물 또는 그의 재생 산물 및/또는 그의 경작지에 적용됨을 특징으로 한다: (a) 살충 유기인 화합물; (b) 피레트로이드; (c) 살충 카바메이트; (d) 생물 구충제; (e) 살충 성장 조절 유전자; 및 (f) 기타 화합물. 본 발명의 방법은 형질전환 식물과 상승적으로 작용하여 농업 구충제의 양을 감소시키고, 형질전환 식물의 효율을 증가시키고 강화함으로써 경제적이고 생태학적인 이점을 제공할 수 있다.

Description

유용 식물의 재배시 유해 생물의 방제 방법{METHOD FOR CONTROLLING HARMFUL ORGANISMS IN THE CULTURE OF USEFUL PLANTS}

Bt 독소를 발현하여 특정 유해 곤충에 의한 공격에 내성인 가지와 같은 유전자 변형 식물(Bt 채소)은 공지되어 있으며, 상업 농작물 생산에서 점차적으로 적용된(예를 들어, 미국 특허 제 6,072,105 호 참조)다. 유전자 변형 식물이 매우 우수한 특성을 갖고 있지만, 일련의 문제가 여전히 존재하여 개선의 여지가 많이 남아 있다.

따라서, 채소 해충 방제의 문제에 가능한 한 효과적이고 환경 친화적인 해결책을 제공하는 것이 추가의 목적이었다.

놀랍게도, 특정 종류의 살충제가 Bt 채소와 혼합하여 사용될 경우 상승적으로 작용함이 밝혀졌다.

본 발명은 바실러스 투링기엔시스(Bacillus thuringiensis; Bt) 채소의 농작물에서 유해 생물을 방제하는 방법에 관한 것이다.

따라서, 본 발명은 살충 작용을 갖는 단백질을 암호화하고 발현하는 바실러스 투링기엔시스로부터 유래한 유전자를 포함하는 유전자 변형 채소 식물에서 유해 생물을 방제하는 방법으로서, 하기 (a) 내지 (f)로 구성된 군에서 선택된 살충 활성량의 1개 이상의 화합물을 상기 식물, 그의 종자 또는 생식 물질 및/또는 경작지에 적용하는 방법에 관한 것이다:

(a) 아세페이트(4), 아진포스-에틸(40), 아진포스-메틸(41), 카두사포스(101), 클로르펜빈포스(124), 클로르메포스(128), 클로르피리포스(137), 데메톤-S-메틸(205), 디아지논(209), 디크로토포스(223), 디메토에이트(243), 디설포톤(257), 에티온(283), 에토프로포스(286), 에트림포스(295), 포노포스(366), 이사조포스(429), 이소펜포스(430), 말라티온(448), 메타미도포스(479), 메티다티온(481), 메빈포스(499), 모노크로토포스(502), 오메토에이트(533), 파라티온(551), 펜토에이트(565), 포레이트(570), 포살론(571), 포스메트(572), 포스파미돈(573), 폭심(575), 피리미포스-메틸(585), 프로페노포스(594), 프로티오포스(614), 피리다펜티온(625), 퀴날포스(634), 테르부포스(690), 테트라클로르빈포스(694) 및 트리아조포스(726)로 구성된 군에서 선택된 살충 유기인 화합물;

(b) 아크리나트린(9), 알레트린(17), 비펜트린(70), 사이클로프로트린(172), 사이플루트린(176), (베타)-사이플루트린(177), (람다)-사이할로트린(180), 사이페르메트린(183), (알파)-사이페르메트린(184), (베타)-사이페르메트린(185), (제타)-사이페르메트린(187), 델타메트린(204), 에스펜발레레이트(277), 펜프로파트린(312), 펜발레레이트(319), 플루사이트리네이트(333), (타우)-플루발리네이트(362), 페르메트린(561), 테플루트린(687), 트랄로메트린(718) 및 ZXI 8901(759)로 구성된 군에서 선택된 피레트로이드;

(c) 알라니캅(15), 알디캅(16), 아미트라즈(22), 벤디오캅(56), 벤푸라캅(58), 부토카복심(95), 카바릴(106), 카보푸란(109), 카보설판(110), 에티오펜캅(282), 포르메타네이트(369), 푸라티오캅(376), 이소프로캅(431), 메티오캅(482), 메토밀(483), 옥사밀(541), 피리미캅(583), 프로폭수르(610), 티오파녹스(709), 티오디캅(708) 및 트리메타캅(743)으로 구성된 군에서 선택된 살충 카바메이트;

(d) 바실러스 투링기엔시스(46, 47), 바실러스 퍼무스(B. firmus), 그라눌로시스 및 핵 폴리헤드로시스 바이러스, 보우베리아 바시아나(Beauveria bassiana)(52), 보우베리아 브로그니아티(Beauveria brogniartii)(53), 및 오토그라파 캘리포니아(Autographa california)와 같은 바큘로바이러스로 구성된 군에서 선택된 생물 구충제;

(e) 클로르플루아즈우론(125), DBI-3204, 디플루벤즈우론(231), 플루사이클록스우론(332), 플루페녹스우론(335), 헥사플룸우론(399), 루펜우론(446), 노발우론(527), 메톡시페노자이드(643), 테플루벤즈우론(686), 테부페노자이드(679) 및 트리플룸우론(739)으로 구성된 군에서 선택된 살충 성장 조절인자; 및

(f) 아바멕틴(1), 벤설탑(64), 카르탑(113), 클로르단(121), 클로르페나피르(123),DNOC(261), 엔도설판(270), 피프로닐(323), 에티프롤, 이미다클로프리드(418), 티아클로프리드, 포스핀(574), 올레산/지방산(532), 피메트로진(615), 티오사이클람(707), IKI-220, 톨펜피라드(신규), 아세타미프리드(5), 스피노사드(754), 실라플루오펜(650) 및 티아메톡삼(신규)으로 구성된 군에서 선택된 화합물.

괄호 안의 숫자는 문헌[The Pesticide Manual, 11th Edition, British Crop Protection Council, Farnham, 1997]을 기초로 하여 'The e-Pesticide Manual', CD-ROM-버전 1.1, 1999-2000(ISBN: 1-901396-22-3)에서의 기입 번호이다.

바큘로바이러스는, 예를 들어 문헌[J. Ind. Microbiol. & Biotech, 19, 192, 1997]에 기술되어 있다. 바실러스 퍼무스, DBI-3204, 티아클로프리드 및 IKI-220은, 예를 들어 문헌[Proceedings of the BCPC-Conference, Pest & Diseases, 2000]에 기술되어 있다.

상기 참조 문헌 및 이에 인용된 문헌은 이와 함께 참조되며, 이들은 참조로 명세서에 인용된다.

본 발명의 방법은 형질전환 식물의 효율의 증가 및 광범위한 효율 이외에도, 형질전환 식물과 상승적으로 작용하는 농작물 보호 산물의 적용 비율을 감소시킴으로써, 경제적이고 생태학적인 이점을 제공할 수 있다.

본 발명의 방법의 이점은, 첫째로 형질전환 식물에서 생성된 바실러스 투링기엔시스(Bt 독소)와의 상승 작용이며, 둘째로, 예를 들어 일부 경우에서 거의 치사량에 가까운 투여량에 대한 적용 수의 감소 또는 적용 비율의 감소(각각의 살충제의 통상적인 용도와 비교하여) 및 수반되는 환경 오염의 현저한 감소이다.

특히, 내인성 Bt 독소, 즉 형질전환 식물 내에서 생성된 Bt 독소와 함께 전술된 활성 물질을 조합하면, 방제될 다양한 유해 생물에 대하여 뚜렷한 상승 효과를 나타낸다.

또한, 본 발명은 살충 활성 단백질을 암호화하고 발현하는 바실러스 투링기엔시스로부터 유래한 유전자를 포함하는 유전자 변형 채소 식물에서 유해 생물을 방제하기 위한, 전술된 (a) 내지 (f)로 구성된 군에서 선택된 화합물의 용도에 관한 것이다.

본 발명의 목적을 위해, "살충 활성"이란 용어는 살충, 진드기 살충, 살구, 선충 살충, 살란 효과 및 기피제, 습성 개질제 및 살균제 효과를 포함한다.

바람직한 살충 활성 물질은 전술된 유기인 화합물, 피레트로이드, 살충 카바메이트, 살충 성장 조절인자, 아바멕틴, 아세타미프리드, 클로르페나피르, 엔도설판, 피프로닐, 에티프롤, 이미다클로프리드, 피메트로진, 스피노사드, 실라플루오펜, 티아메톡삼, 티아클로프리드, 톨펜피라드, IKI-220 및 바실러스 투링기엔시스이다.

에토프로포스, 말라티온, 파라티온, 포살론, 피리미포스-메틸, 트리아조포스, 아크리나트린, 델타메트린, 테플루트린, 알디캅, 아미트라즈, 벤디오캅, 카바릴, 카보푸란, 옥사밀, 피리미캅, 티오디캅, 디플루벤즈우론, 루펜우론, 노발우론, 메톡시페노자이드, 테부페노자이드, 아바멕틴, 아세타미프리드, 클로르페나피르, 엔도설판, 피프로닐, 에티프롤, 이미다클로프리드, 피메트로진, 스피노사드, 실라플루오펜, 티아메톡삼, 티아클로프리드, 톨펜피라드, IKI-220 및 바실러스 투링기엔시스가 특히 바람직하다.

티오디캅, 아세타미프리드, 피프로닐 및 톨펜피라드가 매우 특히 바람직하다.

또한, 2개 이상, 바람직하게는 2 또는 3개, 특히 바람직하게는 2개의 살충 활성 화합물의 혼합물이 바람직하다.

전술된 유기인 화합물과 전술된 피레트로이드의 혼합물이 특히 바람직하다.

하기 제시된 혼합물이 매우 특히 바람직하다:

델타메트린과 엔도설판, 델타메트린과 스피노사드, 델타메트린과 클로르페나피르, 델타메트린과 바실러스 투링기엔시스, 델타메트린과 메톡시페노자이드, 델타메트린과 테부페노자이드, 엔도설판과 아미트라즈, 엔도설판과 바실러스 투링기엔시스, 및 사이플루트린과 클로르피리포스.

또한, 전술된 피레트로이드와 이미다클로프리드의 혼합물 및 피레트로이드와 테부페노자이드의 혼합물이 바람직하다.

본 발명에 따라 적용된 살충 활성 화합물은 공지되어 있으며, 대부분은 시판중이다.

본 발명에 따라 사용된 살충제는 일반적으로 상업적인 배합물로서 수득될 수 있지만, 경우에 따라 유력한 생물학적인 및/또는 화학-물리적인 매개변수에 따라 다양한 방식으로 배합될 수 있다. 가능한 배합물의 예는 하기와 같다:

습윤성 분말(WP), 유화성 농축물(EC), 수용액(SL), 유화액, 분무성 용액, 오일계또는 수계 분산액(SC), 액상수화제형(SE), 분진(DP), 씨-드레싱 물질, 극소과립 형태의 과립, 분무 과립, 피복 과립 및 흡착 과립, 수-분산성 과립(WG), ULV 배합물, 극소캡슐, 왁스 또는 베이트(bait).

상기 각각의 배합물 형태는 대체로 공지되어 있으며, 예를 들어 문헌[Winnacker-Kuchler, "Chemische Technologie"(Chemical Technology), Volume 7, C. Hanser Verlag Munchen, 4th Ed., 1986]; [von Falkenberg, "Pesticides Formulations", Marcel Dekker N. Y., 2nd Ed., 1972-73]; 및 [Martens, "Spray Drying Handbook", 3rd Ed., 1979, G. Goodwin Ltd. London]에 기술되어 있다.

필요한 배합물 보조제, 예를 들어 불활성 물질, 계면활성제, 용매 및 추가의 첨가제는 마찬가지로 공지되어 있으며, 예를 들어 문헌[Watkins, "Handbook of Insecticide Dust Diluents and Carriers", 2nd Ed., Darland Books, Caldwell N. J.]; [v. Olphen, "Introduction to Clay Colloid Chemistry", 2nd Ed., J. Wiley & Sons, N. Y.]; [Marsden, "Solvents Guide", 2nd Ed., Interscience, N. Y. 1950]; [McCutcheon's, "Detergents and Emulsifiers Annual", MC Publ. Corp., Ridgewood, N. J.]; [Sisley and Wood, "Encyclopedia of Surface Active Agents", Chem. Publ. Co. Inc., N. Y. 1964]; [Schonfeldt, "Grenzflachenaktive Athylenoxidaddukte"(Interface-active ethylene oxide adducts), Wiss. Verlagsgesell., Stuttgart 1967]; 및 [Winnacker-Kuchler, "Chemische Technologie", Volume 7, C. Hanser Verlag Munchen, 4th Ed., 1986]에 기술되어 있다.

또한, 기타 구충 활성 물질, 비료 및/또는 식물 성장 조절인자와의 조합물은, 예를 들어 사전혼합 또는 탱크혼합의 형태로 상기 배합물을 기준으로 제조될 수 있다. 습윤성 분말은 활성 성분, 희석제 또는 불활성 물질이외에도 습윤제(예를 들어, 폴리옥시에틸화 알킬페놀, 폴리옥시에틸화 지방 알콜, 알킬설포네이트 또는 알킬페놀설포네이트) 및 분산제(예를 들어, 나트륨 리그노설포네이트, 나트륨 2,2'-디나프틸메탄-6,6'-디설포네이트)를 포함하는 물중에서 균일하게 분산가능한 제제이다.

유화성 농축물은 1개 이상의 유화제를 첨가하여 유기 용매, 예를 들어 부탄올, 사이클로헥산온, 디메틸포름아미드, 크실렌 또는 그 밖의 고 비점의 방향족 화합물 또는 탄화수소 중에 활성 성분을 용해시킴으로써 제조된다. 사용될 수 있는 유화제는, 예를 들어 칼슘 알킬아릴설포네이트, 예를 들어 칼슘 도데실벤젠설포네이트 또는 비이온성 유화제, 예를 들어 지방산 폴리글리콜 에스테르, 알킬아릴 폴리글리콜 에테르, 지방 알콜 폴리글리콜 에테르, 프로필렌 옥사이드/에틸렌 옥사이드 농축물, 알킬 폴리에테르, 소르비탄 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르 또는 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르이다.

분진은 활성 물질을 미분 고체 물질, 예를 들어 활석, 천연 점토(예를 들어, 카올린, 벤토나이트 및 피로필라이트) 또는 규조토로 분쇄함으로써 수득될 수 있다. 과립은 흡착성 과립 불활성 물질을 활성 물질로 분무하거나, 또는 활성 물질 농축물을 모래, 카올리나이트 또는 과립 불활성 물질과 같은 담체의 표면에 결합제, 예를 들어 폴리비닐 알콜, 나트륨 폴리아크릴레이트 또는 그밖의 광유의 도움으로 적용함으로써 제조될 수 있다. 또한, 적합한 활성 물질은 비료 과립, 경우에 따라 비료와의 혼합물을 제조하는데 통상적인 형태로 과립화될 수 있다.

습윤성 분말 중에서 활성 물질 농축물은, 예를 들어 약 10 내지 90 중량%이고, 100 중량%에 이르는 나머지는 통상적인 배합물 성분으로 이루어진다. 유화성 농축물의 경우에, 활성 성분 농축물은 약 5 내지 80 중량%에 달할 수 있다. 분진 형태의 배합물은 통상적으로 활성 물질의 5 내지 20 중량%를 포함하는 반면, 분무성 용액은 활성 물질의 약 2 내지 20 중량%를 포함한다. 과립의 경우에, 활성 물질 함량은 활성 화합물이 액체 또는 고체 형태인지에 따라 및 사용되는 과립화 보조제, 충진제 등에 따라 부분적으로 좌우된다.

또한, 전술된 활성 물질 배합물은, 경우에 따라 각각의 경우에 통상적인 보조제, 예를 들어 스티커, 습윤제, 분산제, 유화제, 침투제, 용매, 충전제 또는 담체를 포함한다.

사용에 있어서, 상업적으로 이용가능한 형태로 존재하는 농축물은, 예를 들어 습윤성 분말, 유화성 농축물, 분산액의 경우, 또한 일부의 경우에 극소과립의 경우에 물을 사용하고, 경우에 따라 통상적인 형태로 희석된다. 분진, 화립 제제 및 분무성 용액 형태의 제제는 일반적으로 사용하기 전에 기타 불활성 성분으로 더 이상 추가적으로 희석되지 않는다.

필요한 적용 비율은 온도, 습도 등과 같은 외부 조건에 따라 변한다. 이는 넓은 범위, 예를 들어 활성 물질의 0.1 g/헥타르 내지 5.0 kg/헥타르 내에서 변한다. 그러나, 0.1 g/헥타르 내지 1.0 kg/헥타르가 바람직하다. Bt 채소와 살충제의 상승 효과에 따라, 0.1 내지 500 g/헥타르의 적용 비율이 특히 바람직하다.

살충 유기인 화합물 (a)의 경우에서, 적용 비율은 바람직하게는 50 내지 500 g/헥타르, 특히 바람직하게는 50 내지 200 g/헥타르이다.

피레트로이드 (b)의 경우에서, 적용 비율은 바람직하게는 0.1 내지 10 g/헥타르, 특히 바람직하게는 0.1 내지 6.0 g/헥타르이다.

살충 카바메이트 (c)의 경우에서, 적용 비율은 바람직하게는 50 내지 5000 g/헥타르, 특히 바람직하게는 50 내지 2000 g/헥타르이다.

생물 구충제 (d)의 경우에서, 상업적으로 통상적인 적용 비율이 바람직하다.

살충 성장 조절인자 (e)의 경우에서, 적용 비율은 바람직하게는 10 내지 1000 g/헥타르, 특히 바람직하게는 50 내지 500 g/헥타르이다.

(f) 군의 살충제의 경우에서, 적용 비율은 바람직하게는 0.1 내지 5000 g/헥타르, 특히 바람직하게는 0.1 내지 300 g/헥타르가 특히 바람직하다.

시판중인 배합물 및 이들 배합물로부터 제조된 사용 형태에서 본 발명에 따른 활성 물질은, 기타 활성 물질, 예를 들어 살충제, 유인제, 살균제, 진드기 살충제, 선충 살충제, 살진균제, 성장-조절 물질 또는 제초제와의 혼합물 형태로 존재할 수 있다.

혼합물에서 바람직한 기타 성분은,

1. 카복실산 에스테르, 알파메트린, 5-벤질-3-푸릴메틸-(E)-, (1R)-시스-2,2-디메틸-3-(2-옥소티올란-3-일리덴메틸)사이클로프로판카복실레이트, 비오알레트린, 비오알레트린((S)-사이클로펜틸 이성질체), 비오레스메트린, (RS)-1-시아노-1-(6-페녹시-2-피리딜)메틸 (1RS)-트랜스-3-(4-t-부틸페닐)-2,2-디메틸사이클로프로판카복실레이트(NCI 85193), 사이티트린, 사이페노트린, 엠펜트린, 펜플루트린, 플루메트린, 플루발리네이트(D 이성질체), 이미프로트린(S-41311), 페노트린((R) 이성질체), 프랄레트린, 피레트린(천연 산물), 레스메트린, 테트라메트린, 쎄타-사이퍼메트린(TD-2344) 및 트랜스플루트린으로 구성된 군에서 선택된 화합물;

2. 아미딘 및 클로로포름으로 구성된 군에서 선택된 화합물; 및

3. ABG-9008, 아나그라파 팔시테라, AKD-1022, AKD-3059, 비펜아제이트(D-2341), 비나파크릴, BJL-932, 브로모프로필레이트, BTG-504, BTG-505, 부프로페진, 캄페클로르, 클로로벤질레이트, 2-(4-클로로페닐)-4,5-디페닐티오펜(UBI-T 930), 클로르펜테진, 크로마페노자이드(ANS-118), CG-216, CG-217, CG-234, A-184699, 2-나프틸메틸 사이클로프로판카복실레이트(Ro12-0470), 사이로마진, 디아클로덴, 에틸 N-(3,5-디클로로-4-(1,1,2,3,3,3-헥사플루오로-1-프로필옥시)페닐)카바모일)-2- 클로로벤조카복스이미데이트, 디코폴, N-(2,3-디하이드로-3-메틸-1,3-티아졸-2- 일리덴)-2,4-크실리딘, 디노부톤, 디노캅, 디오페놀란, DPX-062, 에마멕틴-벤조에이트(MK-244), 설페티오프롤, 에토펜프록스, 에톡사졸(YI-5301), 페녹시캅, 플루아즈우론, 플루마이트(플루펜진, SZI-121), 2-플루오로-5-(4-(4-에톡시페닐)-4-메틸- 1-펜틸)디페닐 에테르(MTI 800), 펜피록시메이트, 펜티오캅, 플루벤즈이민, 플루펜프록스(ICI-A5683), 플루프록시펜, 감마-HCH, 할로페노자이드(RH-0345), 할로펜프록스(MTI-732), 헥시티아족스, HOI-9004, 하이드라메틸논(AC 217300), 인독사캅(DPX-MP062), 카네마이트(AKD-2023), M-020, MTI-446, 이베르멕틴, M-020, 밀베멕틴, NC-196, 니임가드, 니텐피람(TI-304), 2-니트로메틸-4,5-디하이드로-6H-티아진(DS 52618), 2-니트로메틸-3,4-디하이드로티아졸(SD 35651), 2-니트로메틸렌-1,2-티아지난-3-일카밤알데하이드(WL 108477), 피리프록시펜(S-71639), NC-196, NC-1111, NNI-9768, OK-9701, OK-9601, OK-9602, 프로파가이트, 피리다벤, 피리미디펜(SU-8801), RH-0345, RYI-210, S-1283, S-1833, SB7242, SI-8601, 실로마딘(CG-177), SU-9118, 테부펜피라드(MK-239), 테트라디폰, 테트라설, TI-435, 베르부틴, 베르탈렉(마이코탈) 및 YI-5301로 구성된 군에서 선택된 화합물이다.

시판중인 배합물로부터 제조된 사용 형태의 활성 물질 함량은 활성 물질의 0.00000001 내지 95 중량%, 바람직하게는 0.00001 내지 1 중량%의 범위일 수 있다.

예를 들어, 상응하는 피레트로이드와 유기인 화합물의 혼합물의 배합물은 0.05 내지 0.01 중량%의 피레트로이드와 0.25 내지 0.20 중량%의 유기인 화합물, 바람직하게는 0.01 내지 0.001 중량%의 피레트로이드와 0.2 내지 0.1 중량%의 유기인 화합물을 포함한다.

피레트로이드와 엔도설판의 혼합물의 경우에, 0.05 내지 0.01 중량%의 피레트로이드 대 0.7 내지 0.2 중량%의 엔도설판의 비율이 바람직하며, 0.01 내지 0.001 중량%의 피레트로이드 대 0.35 내지 0.2%의 엔도설판의 비율이 특히 바람직하다.

피레트로이드와 바실러스 투링기엔시스(Bt)의 혼합물의 경우에서, 피레트로이드는 상기 제시된 자료로 주어지는 반면, Bt 분획은 바람직하게는 0.01 내지0.001 중량%, 특히 바람직하게는 0.005 내지 0.001 중량%이다.

엔도설판과 아미트라즈의 혼합물은 바람직하게는 0.35 내지 0. 중량%의 엔도설판과 0.6 내지 0.2 중량%의 아미트라즈를 포함한다.

본 발명의 방법은 바람직하게는 유해 생물의 모든 성장 단계(알, 모든 영(instar), 예를 들어 L1, L2, L3, L4 및 L5 및 성충)에 대하여 사용하기에 적합하며, 특히 동시류, 쌍시류, 인시류 및 초시류의 방제에 적합하다.

본 발명의 목적을 위해, "Bt 채소"란 용어는 유전자 변형 채소 식물 또는 채소 농작물을 의미하며, 살충 활성 단백질을 번갈아 암호화하고 발현하는 1개 이상의 바실리러스 투링기엔시스 유전자를 포함한다. 이들 식물("Bt 채소")은 개방된 조건 및 유리 아래에서 농작물 성장시의 조건 둘다에서 성장할 수 있다. 이들 채소 식물 또는 농작물은, 예를 들어 감자, 바람직하게는 전분 감자, 고구마 및 테이블(table) 감자; 근채류, 바람직하게는 당근, 루타바가(근대속, 그루터기 순무, 순무, 브라시카 라파. 바. 라파 에프. 텔토위엔시스(Brassica rapa. var. rapa f. teltowiensis)), 쇠채, 예루살렘 아티초크, 뿌리 파슬리, 파스닙, 무 및 양고추냉이; 괴경 모양의 채소, 바람직하게는 구경 양배추, 적색 사탕무, 셀러리 및 무; 구근 채소, 바람직하게는 부추 및 양파(양파 세트 및 종자 생산용 양파); 양배추, 바람직하게는 카피타타 군(백색 양배추, 적색 양배추, 케일 및 사보이 양배추), 꽃양배추, 싹양배추, 브로콜리, 브라시카 올레라세아. 바. 사벨리카(Brassica oleracea. var. sabellica), 줄기 케일, 갯배추 및 브라시카 올레라세아 엘. 콘바르. 올레라세아 바. 겜미니페라 DC.(L. convar. oleracea var. gemmifera DC.);과실 채소, 바람직하게는 토마토(야생 토마토, 수풀 토마토, 비프스테이크 토마토, 온실 토마토, 칵테일 토마토, 가공 토마토 및 신선하게 팔리는 토마토), 멜론, 가지 나무, 가지 열매, 고추(피망, 파프리카 및 스페인 고추), 칠레 고추, 호박, 서양 호박 및 오이(야생 오이, 온실 오이, 뱀 오이 및 작은 오이); 채소 콩과식물, 바람직하게는 난쟁이 콩(예를 들어, 작두콩, 너도밤나무콩, 플래절렛(flageolet)콩, 제비콩, 및 녹색- 및 황색-꼬투리 변종의 끓이기 위한 건조 콩), 덩굴제비콩(예를 들어, 작도콩, 너도밤나무콩, 플래절렛콩, 녹색-, 청색- 및 황색-꼬투리 변종의 제비콩), 잠두(야생 콩, 잠두, 및 백색 및 흑색 얼룩무늬 꽃의 변종), 완두콩(야생 완두, 병아리콩, 큰 완두콩, 전체-꼬투리 콩, 깍지완두, 깍지형 완두, 및 담녹색 및 암녹색 미숙 종자) 및 렌즈콩; 잎 및 줄기 채소, 바람직하게는 배추, 상추, 샐러리 상추, 콘 샐러드, 아이스버그 레터스, 배추상추, 오크-잎 상추, 치코리, 라디치오, 롤로 로쏘, 아루굴라, 꽃상추, 시금치, 근대(잎 및 줄기) 및 파슬리; 기타 채소, 바람직하게는 아스파라거스, 대황, 골파, 아티초크, 박하, 해바라기, 플로렌스 펜넬, 딜위드, 큰다닥냉이, 겨자, 양귀비, 땅콩, 참께 및 샐러드용 치코리를 포함한다.

"Bt 채소" 속의 용어에 포함된 상기 식물 모두는, 본 발명의 목적을 위해 살충 활성 단백질을 암호화하는 바실리러스 투링기엔시스로부터 유래한 1개 이상의 유전자를 포함하고 발현하는 방식으로 유전자 변형된다.

인시류, 초시류 및 쌍시류에 대하여 활성인 Cry과에서 유래된 바실리러스 투링기엔시스 결정 단백질이 바람직하다(문헌[Crickmore et al., Microbiol. Mol.Biol. Rev. 62: 807-812, 1998] 참조).

단백질 cry1Aa1, cry1Aa2, cry1Aa3, cry1Aa4, cry1Aa5, cry1Aa6, cry1Aa7, cry1Aa8, cry1Aa9, cry1Aa10, cry1Aa11, cry1Ab1, cry1Ab2, cry1Ab3, cry1Ab4, cry1Ab5, cry1Ab6, cry1Ab7, cry1Ab8, cry1Ab9, cry1Ab10, cry1Ab11, cry1Ab12, cry1Ab13, cry1Ab14, cry1Ac1, cry1Ac2, cry1Ac3, cry1Ac4, cry1Ac5, cry1Ac6, cry1Ac7, cry1Ac8, cry1Ac9, cry1Ac10, cry1Ac11, cry1Ac12, cry1Ac13, cry1Ad1, cry1Ad2, cry1Ae1, cry1Af1, cry1Ag1, cry1Ba1, cry1Ba2, cry1Bb1, cry1Bc1, cry1Bd1, cry1Be1, cry1Ca1, cry1Ca2, cry1Ca3, cry1Ca4, cry1Ca5, cry1Ca6, cry1Ca7, cry1Cb1, cry1Cb2, cry1Da1, cry1Da2, cry1Db1, cry1Ea1, cry1Ea2, cry1Ea3, cry1Ea4, cry1Ea5, cry1Ea6, cry1Eb1, cry1Fa1, cry1Fa2, cry1Fb1, cry1Fb2, cry1Fb3, cry1Fb4, cry1Ga1, cry1Ga2, cry1Gb1, cry1Gb2, cry1Ha1, cry1Hb1, cry1Ia1, cry1Ia2, cry1Ia3, cry1Ia4, cry1Ia5, cry1Ia6, cry1Ib1, cry1Ic1, cry1Id1, cry1Ie1, cry1I-like, cry1Ja1, cry1Jb1, cry1Jc1, cry1Ka1, cry1-like, cry2Aa1, cry2Aa2, cry2Aa3, cry2Aa4, cry2Aa5, cry2Aa6, cry2Aa7, cry2Aa8, cry2Aa9, cry2Ab1, cry2Ab2, cry2Ab3, cry2Ac1, cry2Ac2, cry2Ad1, cry3Aa1, cry3Aa2, cry3Aa3, cry3Aa4, cry3Aa5, cry3Aa6, cry3Aa7, cry3Ba1, cry3Ba2, cry3Bb1, cry3Bb2, cry3Bb3, cry3Ca1, cry4Aa1, cry4Aa2, cry4Ba1, cry4Ba2, cry4Ba3, cry4Ba4, cry5Aa1, cry5Ab1, cry5Ac1, cry5Ba1, cry6Aa1, cry6Ba1, cry7Aa1, cry7Ab1, cry7Ab2, cry8Aa1, cry8Ba1, cry8Ca1, cry9 like, cry9Aa1, cry9Aa2, cry9Ba1, cry9Ca1, cry9Da1, cry9Da2, cry9Ea1, cry10Aa1,cry10Aa2, cry11Aa1, cry11Aa2, cry11Ba1, cry11Bb1, cry12Aa1, cry13Aa1, cry14Aa1, cry15Aa1, cry16Aa1, cry17Aa1, cry18Aa1, cry18Ba1, cry18Ca1, cry19Aa1, cry19Ba1, cry20Aa1, cry21Aa1, cry21Aa2, cry22Aa1, cry23Aa1, cry24Aa1, cry25Aa1, cry26Aa1, cry27Aa1, cry28Aa1, cry28Aa2, cry29Aa1, cry30Aa1, cry31Aa1, cyt1Aa1, cyt1Aa2, cyt1Aa3, cyt1Aa4, cyt1Ab1, cyt1Ba1, cyt2Aa1, cyt2Ba1, cyt2Ba2, cyt2Ba3, cyt2Ba4, cyt2Ba5, cyt2Ba6, cyt2Ba7, cyt2Ba8, cyt2Bb1을 암호화하는 유전자가 특히 바람직하다.

아과 cry1, cry3, cry5 및 cry9가 특히 바람직하다.

cry1Ab, cry1Ac, cry3A, cry3B 및 cry9C가 매우 특히 바람직하다.

또한, 1개 이상의 Bt 단백질에 대한 유전자를 포함하는 식물을 적용하는 것이 바람직하다.

또한, 곤충 내성에 대한 바실리러스 투링기엔시스(Bt) 독소의 발현 이외에도, 형질전환 농작물 식물은 추가적인 형질전환 특성, 예를 들어 추가적인 곤충 내성(예를 들어, 프로테아제 또는 펩티다제 억제제에 의해 기인함, 국제 특허 공개 제 95/35031 호 참조), 제초제 내성(예를 들어, pat 또는 bar 유전자의 발현에 기인한 글루포시네이트 또는 글리포세이트에 대하여) 또는 그 밖의 선충류, 진균류 또는 바이러스에 대한 내성(예를 들어, 글루카나제 또는 키티나제의 발현에 기인함), 또는 성분의 정성 및/또는 정량 변형이 생기도록 하는 대사적 특성에서 유전자 조작되는 기타 특징(예를 들어, 이들에 영향을 미치는 에너지, 탄수화물, 지방산 또는 질소 대사 작용 또는 대사 산물 흐름의 변형에 기인함)을 가질 수 있다.바람직한 Bt 채소 식물의 예는 부가적으로 글루포시네이트 또는 글리포세이트 내성을 갖는 식물이다.

Bt 채소 식물의 생산 방법을 포함하여 Bt 채소 식물은, 예를 들어 문헌[Barton et al., 1987, Plant Physiol. 85: 1103-1109]; [Vaeck et al., 1987, Nature 328: 33-37] 및 [Fischhoff et al., 1987, Bio/Technology 5: 807-813]에 광범위하게 기술되어 있다.

또한, Bt 채소 식물은 다양한 변종, 예를 들어 몬산토(Monsanto)에서 제조된 감자 변종 뉴리프(NewLeaf, 등록상표)로 시판중이다. 또한, 채소 변종, 예를 들어 몬산토에서 제조된 인시류에 대한 내성을 갖는 토마토 변종은 개발되었고/되었거나 시도되고 있다.

천연 식물과 비교하여 변형된 특징을 갖는 형질전환 식물의 생성 방식은, 예를 들어 문헌[Willmitzer, Transgenic plants, In: Biotechnology, A Multivolume Comprehensive Treatise, Rehm et al. (eds.), Vol. 2, 627-659, VCH Weinheim, Germany, 1993]; [McCormick et al., Plant Cell Reports 5: 81-84, 1986] 및 유럽 특허 공개 제 0131624 호에 기술된 방법의 용도에 있다.

변형된 특징을 갖는 새로운 형질전환 식물을 생산할 수 있는 수많은 분자 생물 기술은 당해 분야의 숙련자에게 공지되어 있다(문헌[Sambrook et al., 1989, "Molecular Cloning: A Laboratory Manual", 3rd Ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY]; [Winnacker, "Gene und Klone"(Genes and clones), VCH Weinheim, 2nd Ed., 1996] 및 [Christou, Trends in PlantScience 1: 423-431, 1996] 참조).

상기 재조합 조작을 수행하기 위해, 적당한 핵산 분자를, 예를 들어 돌연변이를 일으키거나 DNA 서열의 재조합에 의해 발생하는 서열에서의 변화를 일으키는 적당한 벡터에 의해 식물 또는 식물 세포에 도입한다. 전술된 표준 방법에 의해, 예를 들어 염기 치환을 수행하거나, 부분 서열을 제거하거나, 또는 천연 또는 합성 서열을 부가할 수 있다. 또한, 바람직하게는 식물 세포에서 활성인 프로모터를 방제하면서, 예를 들어 천연 유전자를 이종 구조 또는 합성 유전자로 완전히 대체할 수 있다(유전자 치환). DNA 단편을 서로 결합시키기 위해, 단편들에 어댑터 또는 링커(linker)를 제공할 수 있다.

유전자 산물의 활성이 감소된 식물 세포는 1개 이상의 상응하는 안티센스(antisense) RNA, 공동 억제 효과를 달성하기 위한 센스 RNA, 또는 전술된 유전자 산물의 전사를 특이적으로 분리하는 적당하게 구성된 1개 이상의 리보자임을 발현시킴으로써 수득될 수 있다.

이러한 이유로 인해, 한편, 존재할 수 있는 임의의 측면 서열을 포함하는 유전자 산물의 모든 암호화 서열을 포함하는 DNA 분자뿐만 아니라 세포에서 안티센스 효과를 일으키는 한 이들 일부가 필요한 암호화 서열의 일부만을 포함하는 DNA 분자를 사용할 수 있다. 다른 가능성은 유전자 산물의 암호화 서열을 갖지만 완전히 동일하지 않은 고도의 유사체를 갖는 DNA 서열의 사용이다.

식물에서 핵산 분자를 발현시키는 경우, 합성된 단백질은 식물 세포의 임의의 목적된 구획에 위치할 수 있다. 그러나, 특정 구획에 위치시키기 위해, 암호화영역은, 예를 들어 특정 구획 또는 특정 지점에서 적시에 위치시킬 수 있는 DNA 서열(특정 단계에서 유도되거나, 또는 화학적으로 또는 생물학적으로 유도됨; 예를 들어 운반 또는 신호 펩타이드, 타이밍- 또는 위치-특이적 프로모터)에 결합될 수 있다. 이러한 서열은 당해 분야의 숙련자에게 공지되어 있다(문헌[Braun et al., EMBO J. 11: 3219-3227, 1992]; [Wolter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 846-850, 1988] 및 [Sonnewald et al., Plant J. 1: 95-106, 1991] 참조).

형질전환 식물 세포는 완전한 식물을 제공하기 위해 공지의 기술에 의해 재생될 수 있다.

이와 같은 방법으로, 동종(즉, 내인성) 유전자 또는 유전자 서열의 과발현, 억제 또는 저해, 또는 이종(외인성) 유전자 또는 유전자 서열의 발현에 의해 변형된 특징을 나타내는 형질전환 식물이 수득될 수 있다.

본 발명의 방법은 특히 채소에서 발견되는 다양한 유해 생물, 특히 곤충 및 거미류, 매우 특히 바람직하게는 곤충을 방제하는데 적합하다. 전술된 해충은,

이소포다(Isopoda) 목, 예를 들어 아마딜리디움 종(Armadillidium spp.), 오니스커스 종(Oniscus spp.) 및 포셀리오 종(Porcellio spp.);

디플로포다(Diplopoda) 목, 예를 들어 블라니울루스 종(Blaniulus spp.);

칠로포다(Chilopoda) 목, 예를 들어 게오필러스 종(Geophilus spp.) 및 스커티게라 종(Scutigera spp.);

심필라(Symphyla) 목, 예를 들어 스커티게렐라 종(Scutigerella spp.);

피사누라(Thysanura) 목, 예를 들어 레피스마 종(Lepisma spp.);

콜렘볼라(Collembola) 목, 예를 들어오니키우루스 종(Onychiurus spp.);

오르토프테라(Orthoptera) 목, 예를 들어 블라텔라 종(Blattella spp.), 페리플라네타 종(Periplaneta spp.), 류코패아 종(Leucophaea spp.), 아케타 종(Acheta spp.), 그릴로탈파(Gryllotalpa spp.), 로커스타 미그라토리아 미그라토리오이즈(Locusta migratoria migratorioides), 멜라노플러스 종(Melanoplus spp.) 및 쉬스토세르카 종(Schistocerca spp.);

더마프테라(Dermaptera) 목, 예를 들어 포피큘라 종(Forficula spp.);

이소프테라(Isoptera) 목, 예를 들어 레티큘리테르메스 종(Reticulitermes spp.) 및 코프토테르메스 종(Coptotermes spp.);

티사노프테라(Thysanoptera) 목, 예를 들어 프랑클리니엘라 종(Frankliniella spp.), 카코트립스 종(Kakothrips spp.), 허시노트립스 종(Hercinothrips spp.), 스커토트립스 종(Scirtothrips spp.), 태니오트립스 종(Taeniothrips spp.) 및 트립스 종(Thrips spp.);

헤테로프테라(Heteroptera) 목, 예를 들어 유리가스터 종(Eurygaster spp.), 스테파니티스 종(Stephanitis spp.), 라이거스 종(Lygus spp.), 랠리아 종(Aelia spp.), 유리데마 종(Eurydema spp.), 다이스데르쿠스 종(Dysdercus spp.) 및 피에스마 종(Piesma spp.);

호모프네라(Homoptera) 목, 예를 들어 알레우로데스 종(Aleurodes spp.), 베미시아 종(Bemisia spp.), 트리알레우로데스 종(Trialeurodes spp.), 브레비코리네 종(Brevicoryne spp.), 크립토마이주스 종(Cryptomyzus spp.), 아피스 종(Aphisspp.), 에리오소마 종(Eriosoma spp.), 히알로프테루스 종(Hyalopterus spp.), 필록세라 종(Phylloxera spp.), 펨피구스 종(Pemphigus spp.), 마크로시펌 종(Macrosiphum spp.), 마이주스 종(Myzus spp.), 포로돈 종(Phorodon spp.), 포팔로시펌 종(Rhopalosiphum spp.), 엠포아스카 종(Empoasca spp.), 유셀리스 종(Euscelis spp.), 율레카니움 종(Eulecanium spp.), 사이세타아 종(Saissetia spp.), 아오니디엘라 종(Aonidiella spp.), 아스피디오투스 종(Aspidiotus spp.), 네포테틱스 종(Nephotettix spp.), 라오델팍스 종(Laodelphax spp.), 닐라파르바타 종(Nilaparvata spp.), 소가텔라 종(Sogatella spp.), 슈도코커스 종(Pseudococcus spp.), 사일라 종(Psylla spp.), 아프로포라 종(Aphrophora spp.) 및 애네올라미아 종(Aeneolamia spp.);

레피도프테라(Lepidoptera) 목, 예를 들어 펙티노포라 종(Pectinophora spp.), 부팔러스 종(Bupalus spp.), 케이마토비아 종(Cheimatobis spp.), 네파시아 종(Cnephasia spp.), 하이드라애시아 종(Hydraecia spp.), 리토콜레티스 종(Lithocolletis spp.), 하이포노메우타 종(Hyponomeuta spp.), 플루텔라 종(Plutella spp.), 풀루텔라 크실로스텔라(Plutella xylostella), 말라코소마 종(Malacosoma spp.), 유프록티스 종(Euproctis spp.), 라이만트리아 종(Lymantria spp.), 부큘라트릭스 종(Bucculatrix spp.), 파이토메트라 종(Phytometra spp.), 스크로비팔파 종(Scrobipalpa spp.), 프토리매아 종(Phthorimaea spp.), 노리모세마 종(Gnorimoschema spp.), 오토그라파 종(Autographa spp.), 에버게스티스 종(Evergestis spp.), 라카노비아 종(Lacanobia spp.), 사이디아 종(Cydia spp.),슈도시아필라 종(Pseudociaphila spp.), 파일록니스티스 종(Phyllocnistis spp.), 아그로티스 종(Agrotis spp.), 육소아 종(Euxoa spp.), 펠티아 종(Feltia spp.), 애리아스 종(Earias spp.), 헬리오티스 종(Heliothis spp.), 헬리코베르파 종(Helicoverpa spp.), 봄바익스 종(Bombyx spp.), 라피그마 종(Laphygma spp.), 마메스트라 종(Mamestra spp.), 파놀리스 종(Panolis spp.), 프로데니아 종(Prodenia spp.), 스포도프테라 종(Spodoptera spp.), 트리코플러시아(Trichoplusia spp.), 카포캅사 종(Carpocapsa spp.), 피에리스 종(Pieris spp.), 칠로 종(Chilo spp.), 오스트리니아 종(Ostrinia spp.), 파이라우스타 종(Pyrausta spp.), 에페스티아 종(Ephestia spp.), 갈레리아 종(Galleria spp.), 카코에시아 종(Cacoecia spp.), 카푸아 종(Capua spp.), 코리스토뉴라 종(Choristoneura spp.), 클라이시아 종(Clysia spp.), 호프마노필라 종(Hofmannophila spp.), 호모나 종(Homona spp.), 티네올라 종(Tineola spp.), 티네아 종(Tinea spp.) 및 토르트릭스 종(Tortrix spp.);

콜레오프테라(Coleoptera) 목, 예를 들어 아노비움 종(Anobium spp.), 라조페르타 종(Rhizopertha spp.), 브루키디우스 종(Bruchidius spp.), 아칸토셀리데스 종(Acanthoscelides spp.), 힐로트루페스 종(Hylotrupes spp.), 아클리페아 종(Aclypea spp.), 아젤라스티카 종(Agelastica spp.), 레프티노타르사 종(Leptinotarsa spp.), 사일리오데스 종(Psylliodes spp.), 캐토네마 종(Chaetocnema spp.), 카시다 종(Cassida spp.), 보티노데레스 종(Bothynoderes spp.), 클리비나 종(Clivina spp.), 슈토르힌쿠스 종(Ceutorhynchus spp.), 파일로트레타 종(Phyllotreta spp.), 아피온 종(Apion spp.), 시토나 종(Sitona spp.), 브루쿠스 종(Bruchus spp.), 패돈 종(Phaedon spp.), 디아브로티카 종(Diabrotica spp.), 사일로이데스 종(Psylloides spp.), 에필라크나 종(Epilachna spp.), 아토마리아 종(Atomaria spp.), 오리재필러스 종(Oryzaephilus spp.), 안토노무스 종(Anthonomus spp), 시토필러스 종(Sitophilus spp.), 오티오린쿠스 종(Otiorhynchus spp.), 코스모폴리테스 종(Cosmopolites spp.), 슈토린쿠스 종(Ceuthorrynchus spp.), 하이페라 종(Hypera spp.), 데르메스테스 종(Dermestes spp.), 트로고데르마 종(Trogoderma spp.), 안트레누스 종(Anthrenus spp.), 아타게누스 종(Attagenus spp.), 라익투스 종(Lyctus spp.), 멜리게테스 종(Meligethes spp.), 티누스 종(Ptinus spp.), 니프투스 종(Niptus spp.), 기비움 종(Gibbium spp.), 트리볼리움 종(Tribolium spp.), 테네브리오 종(Tenebrio spp.), 아그리오테스 종(Agriotes spp.), 코노데루스 종(Conoderus spp.), 멜로론타 종(Melolontha spp.), 암피말론 종(Amphimallon spp.) 및 코스텔리트라 종(Costelytra spp.);

하이메노프테라(Hymenoptera) 목, 예를 들어 디프리온 종(Diprion spp.), 호플로캄파 종(Hoplocampa spp.), 라시우스 종(Lasius spp.), 모노모리움 종(Monomorium spp.) 및 베스파 종(Vespa spp.);

디프테라(Diptera) 목, 예를 들어 드로소필라 종(Drosophila spp.), 크라이소마익사 종(Chrysomyxa spp.), 하이포데르마 종(Hypoderma spp.), 타니아 종(Tannia spp.), 비비오 종(Bibio spp.), 오시넬라 종(Oscinella spp.), 포르비아 종(Phorbia spp.), 페고마이아 종(Pegomyia spp.), 세라티티스 종(Ceratitisspp.), 다쿠스 종(Dacus spp.) 및 티풀라 종(Tipula spp.);

아라크니다(Arachnida) 강, 예를 들어 스코르피오 마우루스(Scorpio maurus) 및 라트로덱투스 막탄(Latrodectus mactans);

아카리나(Acarina) 목, 예를 들어 아카루스 종(Acarus spp.), 브리오비아 종(Bryobia spp.), 파노니쿠스 종(Panonychus spp.), 테트라니쿠스 종(Tetranychus spp.), 에오테트라니쿠스 종(Eotetranychus spp.), 올리고니쿠스 종(Oligonychus spp.), 유테트라니쿠스 종(Eutetranychus spp.), 에리오피에스 종(Eriophyes spp.), 파일로콥트루타 종(Phyllocoptruta spp.), 타르소네무스 종(Tarsonemus spp.), 라이피세팔루스 종(Rhipicephalus spp.), 익소데스 종(Ixodes spp.) 및 암블리오마 종(Amblyomma spp.);

헬민텐(Helminthen) 강, 예를 들어 멜로이도가인 종(Meloidogyne spp.), 헤테로데라 종(Heterodera spp.), 글로보데라 종(Globodera spp.), 라도폴루스 종(Radopholus spp.), 프라틸렌쿠스 종(Pratylenchus spp.), 타일렌쿨루스 종(Tylenchulus spp.), 파일렌코린쿠스 종(Tylenchorhynchus spp.), 로타일렌쿠스 종(Rotylenchus spp.), 헬리오코틸렌쿠스 종(Heliocotylenchus spp.), 벨로노아이무스 종(Belonoaimus spp.), 롱기도루스 종(Longidorus spp.), 트리코도루스 종(Trichodorus spp.), 자이피네마 종(Xiphinema spp.), 디틸렌쿠스 종(Ditylenchus spp.), 아펠렌코이데스 종(Aphelenchoides spp.) 및 앙귀나 종(Anguina spp.);

가스트로포다(Gastropoda) 강, 예를 들어 데로세라스 종(Deroceras spp.), 아리온종(Arion spp.), 라임내아 종(Lymnaea spp.), 갈바 종(Galba spp.) 및 숙시네아 종(Succinea spp.);

본 발명의 방법은 아그리오테스 종(Agriotes spp.), 멜로론타 종(Melolontha spp.), 아피스 종(Aphis spp.), 네파시아 종(Cnephasia spp.), 오스트리니아 종(Ostrinia spp.), 아그로티스 종(Agrotis spp.), 하이드래시아 종(Hydraecia spp.), 티풀라 종(Tipula spp.), 마이주스 종(Myzus spp.), 베미시아 종(Bemisia spp.), 트리알레우로데스 종(Trialeurodes spp.), 오시넬라 종(Oscinella spp.), 테트라니쿠스 종(Tetranychus spp.), 라이거스 종(Lygus spp.), 레프티노타르사 종(Leptinotarsa spp.), 사일리오데스 종(Psylliodes spp.), 파이토메트라 종(Phytometra spp.), 데로세라스 종(Deroceras spp.), 사일라 종(Psylla spp.), 블라니울루스 종(Blaniulus spp.), 오니키우루스 종(Onychiurus spp.), 피에스마 종(Piesma spp.), 아토마리아 종(Atomaria spp.), 아클리페아 종(Aclypea spp.), 캐토네마 종(Chaetocnema spp.), 카시다 종(Cassida spp.), 보티노데레스 종(Bothynoderes spp.), 글리비나 종(Clivina spp.), 스크로비팔파 종(Scrobipalpa spp.), 토리매아 종(Phthorimaea spp.), 노리모세마 종(Gnorimoschema spp.), 마메스트라 종(Mamestra spp.), 오토그라파 종(Autographa spp.), 아리온 종(Arion spp.), 그릴로탈파 종(Gryllotalpa spp.), 유리데마 종(Eurydema spp.), 멜리게테스 종(Meligethes spp.), 슈토린쿠스 종(Ceutorhynchus spp.), 파일로트레타 종(Phyllotreta spp.), 플루텔라 크실로스텔라(Plutella xylostella), 에버게스티스(Evergestis spp.), 라카노비아 종(Lacanobia spp.), 피에리스 종(Pieris spp.),포피큘라 종(Forficula spp.), 하이페라 종(Hypera spp.), 아피온 종(Apion spp.), 오티오린쿠스 종(Otiorhynchus spp.), 시토나 종(Sitona spp.), 아칸토셀리데스 종(Acanthoscelides spp.), 카코트리프스 종(Kakothrips spp.), 브루쿠스 종(Bruchus spp.), 사이디아 종(Cydia spp.), 트리프스 종(Thrips spp.), 슈도시아필라 종(Pseudociaphila spp.), 헬리오티스 종(Heliothis spp.), 헬리코베르파 종(Helicoverpa spp.), 프로데니아 종(Prodenia spp.), 스포도프테라 종(Spodoptera spp.), 칠로 종(Chilo spp.) 및 디아브로티카 종(Diabrotica spp.)

본 발명은 하기 실시예에 의해 더욱 상세히 예시되지만, 이에 제한되지는 않는다.

실시예 1

플루텔라 크실로스텔라( Plutella xylostella )(배추좀나방)

7주된 꽃양배추 식물(통상적으로 꽃양배추, 변종: 마르너 알프뤼(Marner Allfruh)) 및 Bt 꽃양배추(Bt-내성 균주, cry9C 포함)에 시험 살충제를 트랙(track) 분무기(200㎖/헥타르)의 도움으로 분무하였다. 건조시킨 후 각각의 식물을 플루텔라 크실로스텔라의 5 L2 유충 및 5 L3 유충으로 감염시켰다. 2, 4 및 7일(DAA) 후 사료 손상 및 사망률을 기록하였다. 시험을 온실에서 23℃ 및 60%의 대기 상대 습도의 온실에서 수행하였다.

중요한 상승 효과가 4개의 활성 물질 모두에 대하여 명백하게 관찰되었다.

Claims

살충 작용을 갖는 단백질을 암호화하고 발현하는 바실러스 투링기엔시스(Bacillus thuringiensis; Bt)로부터 유래한 유전자를 포함하는 유전자 변형 채소 식물에서 유해 생물을 방제하는 방법으로서, 하기 (a) 내지 (f)로 구성된 군에서 선택된 살충 활성량의 1개 이상의 화합물을 상기 식물, 그의 종자 또는 생식 물질 및/또는 경작지에 적용하는 방법:

(a) 아세페이트, 아진포스-에틸, 아진포스-메틸, 카두사포스, 클로르펜빈포스, 클로르메포스, 클로르피리포스, 데메톤-S-메틸, 디아지논, 디크로토포스, 디메토에이트, 디설포톤, 에티온, 에토프로포스, 에트림포스, 포노포스, 이사조포스, 이소펜포스, 말라티온, 메타미도포스, 메티다티온, 메빈포스, 모노크로토포스, 오메토에이트, 파라티온, 펜토에이트, 포레이트, 포살론, 포스메트, 포스파미돈, 폭심, 피리미포스-메틸, 프로페노포스, 프로티오포스, 피리다펜티온, 퀴날포스, 테르부포스, 테트라클로르빈포스 및 트리아조포스로 구성된 군에서 선택된 살충 유기인 화합물;

(b) 아크리나트린, 알레트린, 비펜트린, 사이클로프로트린, 사이플루트린, (베타)-사이플루트린, (람다)-사이할로트린, 사이페르메트린, (알파)-사이페르메트린, (베타)-사이페르메트린, (제타)-사이페르메트린, 델타메트린, 에스펜발레레이트, 펜프로파트린, 펜발레레이트, 플루사이트리네이트, (타우)-플루발리네이트, 페르메트린, 테플루트린, 트랄로메트린 및 ZXI 8901로 구성된 군에서 선택된 피레트로이드;

(c) 알라니캅, 알디캅, 아미트라즈, 벤디오캅, 벤푸라캅, 부토카복심, 카바릴, 카보푸란, 카보설판, 에티오펜캅, 포르메타네이트, 푸라티오캅, 이소프로캅, 메티오캅, 메토밀, 옥사밀, 피리미캅, 프로폭수르, 티오파녹스, 티오디캅 및 트리메타캅으로 구성된 군에서 선택된 살충 카바메이트;

(d) 바실러스 투링기엔시스, 바실러스 퍼무스(B. firmus), 그라눌로시스 및 핵 폴리헤드로시스 바이러스, 보우베리아 바시아나(Beauveria bassiana), 보우베리아 브로그니아티(Beauveria brogniartii) 및 오토그라파 캘리포니아(Autographa california)와 같은 바큘로바이러스로 구성된 군에서 선택된 생물 구충제;

(e) 클로르플루아즈우론, DBI-3204, 디플루벤즈우론, 플루사이클록스우론, 플루페녹스우론, 헥사플룸우론, 루펜우론, 노발우론, 메톡시페노자이드, 테플루벤즈우론, 테부페노자이드 및 트리플룸우론으로 구성된 군에서 선택된 살충 성장 조절인자; 및

(f) 아바멕틴, 벤설탑, 카르탑, 클로르단, 클로르페나피르, DNOC, 엔도설판, 피프로닐, 에티프롤, 이미다클로프리드, 티아클로프리드, 포스핀, 올레산/지방산, 피메트로진, 티오사이클람, IKI-220, 톨펜피라드, 아세타미프리드, 스피노사드, 실라플루오펜 및 티아메톡삼으로 구성된 군에서 선택된 화합물.
제 1 항에 있어서,

살충 유기인 화합물(a), 피레트로이드(b), 살충 카바메이트(c), 살충 성장 조절인자(e), 아바멕틴, 아세타미프리드, 클로르페나피르, 엔도설판, 피프로닐, 에티프롤, 이미다클로프리드, 피메트로진, 스피노사드, 실라플루오펜, 티아메톡삼, 티아클로프리드, 톨펜피라드, IKI-220 및 바실러스 투링기엔시스로 구성된 군에서 선택된 화합물을 적용하는 방법.
제 2 항에 있어서,

에토프로포스, 말라티온, 파라티온, 포살론, 피리미포스-메틸, 트리아조포스, 아크리나트린, 델타메트린, 테플루트린, 알디캅, 아미트라즈, 벤디오캅, 카바릴, 카보푸란, 옥사밀, 피리미캅, 티오디캅, 디플루벤즈우론, 루펜우론, 노발우론, 메톡시페노자이드, 테부페노자이드, 아바멕틴, 아세타미프리드, 클로르페나피르, 엔도설판, 피프로닐, 에티프롤, 이미다클로프리드, 피메트로진, 스피노사드, 실라플루오펜, 티아메톡삼, 티아클로프리드, 톨펜피라드, IKI-220 및 바실러스 투링기엔시스로 구성된 군에서 선택된 화합물을 적용하는 방법.
제 1 항 내지 제 3 항중 어느 한 항에 있어서,

2개 이상의 살충 활성 화합물의 혼합물을 적용하는 방법.
제 1 항 내지 제 4 항중 어느 한 항에 있어서,

살충 활성 화합물을 0.0001 내지 5.0 kg/헥타르의 적용 비율로 적용하는 방법.
제 1 항 내지 제 5 항중 어느 한 항에 있어서,

살충 활성 화합물을 0.00001 내지 95 중량%의 배합물로 적용하는 방법.
제 1 항 내지 제 6 항중 어느 한 항에 있어서,

채소 식물의 살충 활성 단백질이 아과 cry1, cry2, cry3, cry5 및 cry9로 구성된 군에서 선택된 결정 단백질인 방법.
제 7 항에 있어서,

채소 식물의 살충 활성 단백질이 cry1Ab, cry1Ac, cry3A, cry3B 및 cry9C로 구성된 군에서 선택되는 방법.
제 1 항 내지 제 8 항중 어느 한 항에 있어서,

사용된 채소 식물이 글루포시네이트 내성 또는 글리포세이트 내성을 갖는 방법.
제 1 항 내지 제 9 항중 어느 한 항에 있어서,

유해 생물이 호모프테라(Homoptera) 목, 레피도프테라(Lepidoptera) 목 또는 콜레오프테라(Coleoptera) 목에 속하는 곤충인 방법.
제 1 항 내지 제 10 항중 어느 한 항에 있어서,

살충 활성 화합물을 유해 생물의 알, L1 령(instar), L2 령, L3 령, L4 령, L5 령 및/또는 성충에 대하여 적용하는 방법.
제 1 항 내지 제 11 항중 어느 한 항에 있어서,

(a) 내지 (f)로 구성된 군에서 선택된 1개 이상의 살충 활성 화합물 이외에도, 1개 이상의 살충, 살균 또는 제초 활성 화합물을 추가로 적용하는 방법.
살충 활성 단백질을 암호화하고 발현하는 바실러스 투링기엔시스로부터 유래한 유전자를 포함하는 유전자 변형 채소 식물에서 유해 생물을 방제하기 위한, 하기 (a) 내지 (f)로 구성된 군에서 선택된 화합물의 용도:

(a) 아세페이트, 아진포스-에틸, 아진포스-메틸, 카두사포스, 클로르펜빈포스, 클로르메포스, 클로르피리포스, 데메톤-S-메틸, 디아지논, 디크로토포스, 디메토에이트, 디설포톤, 에티온, 에토프로포스, 에트림포스, 포노포스, 이사조포스, 이소펜포스, 말라티온, 메타미도포스, 메티다티온, 메빈포스, 모노크로토포스, 오메토에이트, 파라티온, 펜토에이트, 포레이트, 포살론, 포스메트, 포스파미돈, 폭심, 피리미포스-메틸, 프로페노포스, 프로티오포스, 피리다펜티온, 퀴날포스, 테르부포스, 테트라클로르빈포스 및 트리아조포스로 구성된 군에서 선택된 살충 유기인 화합물;

(b) 아크리나트린, 알레트린, 비펜트린, 사이클로프로트린, 사이플루트린, (베타)-사이플루트린, (람다)-사이할로트린, 사이페르메트린, (알파)-사이페르메트린, (베타)-사이페르메트린, (제타)-사이페르메트린, 델타메트린, 에스펜발레레이트, 펜프로파트린, 펜발레레이트, 플루사이트리네이트, (타우)-플루발리네이트, 페르메트린, 테플루트린, 트랄로메트린 및 ZXI 8901로 구성된 군에서 선택된 피레트로이드;

(c) 알라니캅, 알디캅, 아미트라즈, 벤디오캅, 벤푸라캅, 부토카복심, 카바릴, 카보푸란, 카보설판, 에티오펜캅, 포르메타네이트, 푸라티오캅, 이소프로캅, 메티오캅, 메토밀, 옥사밀, 피리미캅, 프로폭수르, 티오파녹스, 티오디캅 및 트리메타캅으로 구성된 군에서 선택된 살충 카바메이트;

(d) 바실러스 투링기엔시스, 바실러스 퍼무스, 그라눌로시스 및 핵 폴리헤드로시스 바이러스, 보우베리아 바시아나, 보우베리아 브로그니아티, 및 오토그라파 캘리포니아와 같은 바큘로바이러스로 구성된 군에서 선택된 생물 구충제;

(e) 클로르플루아즈우론, DBI-3204, 디플루벤즈우론, 플루사이클록스우론, 플루페녹스우론, 헥사플룸우론, 루펜우론, 노발우론, 메톡시페노자이드, 테플루벤즈우론, 테부페노자이드 및 트리플룸우론으로 구성된 군에서 선택된 살충 성장 조절인자; 및

(f) 아바멕틴, 벤설탑, 카르탑, 클로르단, 클로르페나피르, DNOC, 엔도설판, 피프로닐, 에티프롤, 이미다클로프리드, 티아클로프리드, 포스핀, 올레산/지방산, 피메트로진, 티오사이클람, IKI-220, 톨펜피라드, 아세타미프리드, 스피노사드, 실라플루오펜 및 티아메톡삼으로 구성된 군에서 선택된 화합물.