KR20020096070A - 투명한 플라스틱 지지체를 가진 면역크로마토그래피 분석스트립, 분석 장치 및 그의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 투명한 플라스틱 지지체에 검체 패드 및 다공성 멤브레인 패드를 포함하는 면역크로마토그래피 분석용 스트립의 구성 성분을 연속적으로 배열, 부착시킨 분석 스트립 및 이를 이용한 분석 디바이스에 관한 것으로서, 상기 분석 스트립은 액상 검체가 투입되는 검체 패드, 상기 검체 패드에 연결되어 상기 액상 검체를 이송하며, 상기 액상 검체 내의 분석 물질과 반응할 수 있는 검출 물질로 형성된 적어도 하나의 반응 영역을 포함하는 다공성 멤브레인 패드, 및 상기 검체 패드 및 다공성 멤브레인 패드를 지지하며, 투명한 플라스틱으로 이루어진 지지체를 포함한다.

Description

투명한 플라스틱 지지체를 가진 면역크로마토그래피 분석 스트립, 분석 장치 및 그의 제조 방법{Immunochromatographic assay strip and assay device having transparent plastic backing and method for producing he same}

본 발명은 면역크로마토그래피 분석 스트립 및 디바이스에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 투명한 플라스틱 지지체(transparent plastic backing)에 검체 패드, 다공성 멤브레인 패드를 포함하는 면역크로마토그래피 분석용 스트립의 구성 성분을 연속적으로 배열, 부착시킨 분석 스트립, 이를 이용한 분석 디바이스 및 그 제조방법에 관한 것이다.

본 발명에 따른 분석 스트립의 투명한 플라스틱 지지체는 각각의 패드를 연결시켜 액상의 분석용 샘플이 검체 패드로부터 다공성 멤브레인으로 막힘 없이 이동하도록 하는 역할을 함과 동시에, 투명한 재질로 만들어져 다공성 멤브레인 위에 나타난 분석 결과를 플라스틱 지지체를 통하여 확인할 수 있도록 하여준다. 본 발명은 상기 스트립이 검체 투입구 및 결과 확인창을 가지는 상부 케이스와 상기 상부 케이스에 대응하여 결합되는 하부 케이스에 내재되는 것을 특징으로 하는 면역크로마토그래피 분석 디바이스를 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 분석용 스트립의 투명한 플라스틱 지지체를 상부 케이스의 결과 확인창을 향하도록 끼우고 하부 케이스를 덮는 것을 특징으로 하는 면역크로마토그래피 분석 디바이스 제조방법을 제공한다. 또한, 본 발명은 분석용 스트립을 케이스에 삽입시 스트립을 고정시키는 역할을 하는 스트립 지지체가 상부케이스에 존재하는 것을 특징으로 하는 면역크로마토그래피 분석 디바이스를 제공한다.

래피드 테스트법으로 알려진 면역 크로마토그래피법은 각종 질병을 검사하는 의약 분야 뿐 아니라, 농업, 축산업, 식품, 군사, 환경 등 다양한 분야에서 미량의 분석하고자 하는 물질을 정성 및 정량적으로 검사하는 간편한 방법으로 개발되어 왔다. 이 방법은 일반적으로 스트립에 검체를 적하하는 일회 조작으로 5분 이내에 검사를 완료하는 신속성을 특징으로 한다.

이러한 면역크로마토그래피 분석법은 일반적으로 스트립 형태의 분석장치 단독으로 구성되거나, 상기 스트립을 플라스틱 디바이스 내부에 조립한 디바이스 형태로 구성된다. 상기 스트립은 검체를 수용하는 검체 패드, 육안으로 또는 센서를 이용하여 측정할 수 있는 시그널을 발생시키는 라벨을 항원 또는 항체 등의 리간드와 접합하여 만든 추적자를 함유하는 추적자 패드, 분석하고자 하는 물질과 특이적으로 결합하는 1차 결합제(항체 또는 항원)와 추적자를 부차적으로 검출하기 위한 2차 결합제(항체 또는 항원)를 고정시킨 다공성 멤브레인 박층 고상, 액상 검체를 최종적으로 수용하는 흡수 패드로 구성되어지며, 이러한 구성 성분들이 불투명한 플라스틱 지지체의 상부에 겹쳐져 연속적으로 배열된다. 이러한 스트립은 단독으로 사용되어질 수도 있고, 상부와 하부로 이루어진 케이스에 내재되어 사용되기도 하는데, 상부 케이스에는 검체를 적하하는 검체 투입구와 검사결과를 확인하기 위한 결과 확인창이 배열되어 있고, 하부 케이스에는 스트립을 고정시키는 스트립 지지대가 형성되어 있는 것이 일반적이며, 상부와 하부 케이스를 결합하여 분석용 디바이스로 사용한다.

이와 같은 통상적인 분석용 스트립은 대개의 경우 액상 검체가 담겨있는 시험관에 담그고 일정시간 후 검사 결과를 확인하는데, 이때, 불투명한 플라스틱 지지체로 인하여 한쪽 면으로만 검사 결과를 확인할 수 있기 때문에 시험관을 이리저리 돌리는 불편함이 있고, 다공성 멤브레인의 균질한 면인 벨트 사이드(belt-side)를 통하여 결과를 확인할 수 없으므로 결과 선이 선명하지 않다는 문제점이 있다. 한편, 상기와 같이 디자인된 통상적인 분석용 디바이스는 검체 투입구를 통하여 투입된 액상 검체가 모세관 현상에 의해서 실질적인 분석이 수행되는 다공성 멤브레인을 따라 이동하여, 분석 결과를 다공성 멤브레인 위에 나타내며, 대부분의 수분은 흡수패드에 흡수되는데, 분석용 검체가 혈장 등 점도가 높은 물질인 경우에는 다공성 멤브레인 상부에 형성된 결과 확인창을 통하여 수분이 증발되어 테스트 도중에 검체의 흐름이 멈추거나, 검사 후에는 흡수패드의 수분이 역류하여 다공성 멤브레인 위에 나타난 결과 선이 역류되는 수분에 따라 이동하므로 더 이상 검사 결과를 보존할 수 없게 된다. 또한, 분석용 스트립의 경우와 마찬가지로 다공성 멤브레인의 균질한 면인 벨트 사이드를 통하여 선명한 결과를 확인할 수 없다는 문제점이 있다.

상기와 같이 결과 확인창을 통한 수분의 증발을 방지하기 위하여, Yoshihito 등(WO 00/77521 참조)은 다공성 멤브레인 위로 뚫린 결과 확인창을 투명한 덮개로 덮어 사용하거나, Lee-Won 등(WO 94/24563 참조)은 투명한 재질의 테이프를 결과 확인창이 있는 면의 다공성 멤브레인 박층 고상 상부에 직접 덧붙여, 공기와의 접촉 및 수분의 증발을 방지하고 검사 결과를 반영구적으로 보존할 수 있도록 하였다. 또한, 종이 또는 플라스틱을 철로의 받침목과 같은 형태로 다공성 멤브레인 박층 상부에 부착한 후, 상기 받침 상부에 결과 확인창 크기 정도의 투명한 필름을 부착하여 상기 문제점을 해결하는 방법도 알려져 있으나(미국 특허 제5,415,994호), 이러한 분석 디바이스들은 별도의 제작비용이 요구되거나 및 제작과정에서 추가적인 조작이 요구되는 문제점이 있다.

한편, 통상의 분석용 스트립이나 분석용 디바이스가 다공성 멤브레인의 균질한 면인 벨트 사이드(belt-side)를 통하여 보다 선명한 검사결과를 확인할 수 없다는 문제점을 해결하기 위하여, 불투명한 플라스틱 지지판을 사용하지 않고, 분석용 스트립의 구성 성분인 검체 패드, 추적자패드, 다공성 멤브레인 및 흡수패드를 각각 분석용 디바이스의 하부 케이스에 개별적으로 조립하고 특히 다공성 멤브레인의 벨트 사이드(belt-side)을 결과 확인창을 향하도록 하여 제작하는 방법도 알려져 있다(유한양행, 제품명: 마이체크). 그러나, 이러한 분석용 디바이스는 분석용 스트립의 구성 성분 각각을 기계 장치를 이용하여 조립하여야 하므로 자동화 설비를 갖추어야 하고, 접착성 플라스틱 지지체에 의하여 고정되어 있지 않으므로, 취급에 유의하여야 하는 문제점이 있다.

본 발명의 발명자들은, 상기의 문제점들이 검사 결과를 불투명한 플라스틱 지지판 위에 배열된 스트립 구성물의 정면(앞면)에서만 관찰하려는 의도에 따라 면역크로마토그래피 분석용 스트립을 설계함으로써 발생하였고, 따라서, 면역크로마토그래피 분석용 스트립의 불투명한 플라스틱 지지판 대신에 투명한 플라스틱 지지판을 사용하고, 스트립의 후면(뒷면)인 플라스틱 지지판을 통하여 반응결과를 관찰함으로써 이러한 문제점을 해결할 수 있다는 것을 인식하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 투명한 재질의 플라스틱 지지체를 사용하여 스트립의 정면(앞면) 뿐만 아니라 후면(뒷면)을 통해서도 검사 결과를 관찰할 수 있는 면역크로마토그래피 분석용 스트립을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 스트립의 투명한 플라스틱 지지체가 디바이스 상부 케이스의 결과 확인창을 향하도록 조립함으로써, 결과 확인창을 통한 건조 현상을 방지하여 검사 결과의 훼손을 방지하고 검사 결과를 장기간 보존할 수 있는 면역크로마토그래피 분석용 디바이스를 제공하는 데 그 목적이 있다.

또한, 본 발명의 목적은 분석용 디바이스의 상부 케이스에 스트립을 고정할 수 있도록 가이드를 형성하여, 디바이스의 조립 및 제작이 용이하도록 고안한 면역크로마토그래피 분석용 디바이스 및 그 제조방법을 제공함을 목적으로 한다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 면역크로마토그래피 분석 스트립의 초기 제조 상태를 나타낸 사시도.

도 2는 도 1의 A-A'선을 따라 절단한 단일 분석 스트립의 사시도.

도 3은 도 2의 B-B'선을 따라 절단한 분석 스트립의 단면도.

도 4a 및 4b는 각각 본 발명의 일 실시예에 따른 면역 크로마토그래피 분석 디바이스의 상부 케이스 및 하부 케이스의 평면도.

도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 면역 크로마토그래피 분석 디바이스의 분해 사시도.

도 6a 및 6b는 본 발명의 일 실시예에 따른 면역 크로마토그래피 분석 디바이스를 이용한 비형간염 표면항원 음성 검체의 시험 결과 사진.

도 7a 및 7b는 본 발명의 일 실시예에 따른 면역 크로마토그래피 분석 디바이스를 이용한 비형간염 표면항원 양성 검체의 시험 결과 사진.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 액상 검체가 투입되는 검체 패드, 상기 검체 패드에 연결되어 상기 액상 검체를 이송하며, 상기 액상 검체 내의 분석 물질과 반응할 수 있는 검출 물질로 형성된 적어도 하나의 반응 영역을 포함하는 다공성 멤브레인 패드, 및 상기 검체 패드 및 다공성 멤브레인 패드를 지지하며,투명한 플라스틱으로 이루어진 지지체를 포함하는 것을 특징으로 하는 면역크로마토그래피 분석 스트립을 제공한다. 본 발명은 또한 상기 분석 스트립의 반응 영역과 대응되는 위치에 결과 확인창이 형성되고, 상기 검체 패드와 대응되는 위치에 검체 투입구가 형성되어 있는 상부 케이스, 및 상기 상부 케이스와 대응하여 결합하는 하부 케이스로 이루어지며, 상기 분석 스트립의 투명 지지체가 상기 상부 케이스의 결과 확인창을 향하도록 상기 상부케이스 및 하부케이스 사이에 위치한 면역 크로마토그래피 분석 디바이스를 제공한다. 여기서, 상기 지지체는 투명 폴리에스테르 (polyester) 필름, 폴리카보네이트필름 (polycarbonate film), 아크릴 필름 (acrylic film) 등으로 이루어지며, 투명한 접착제에 의하여 상기 검체 패드 및 다공성 멤브레인 패드와 접착되어 있는 것이 바람직하다.

본 발명은 또한 상기 분석 스트립의 투명한 플라스틱 지지체가 상기 결과 확인창을 향하도록 상기 분석스트립을 상기 상부케이스에 부착하는 단계; 및 상기 상부 케이스와 대응하는 하부 케이스를 결합하는 단계를 포함하는 면역 크로마토그래피 분석 디바이스의 제조방법을 제공한다.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 면역크로마토그래피 분석 스트립의 초기 제조 상태를 나타낸 사시도이고, 도 2는 도 1의 A-A'선을 따라 절단한 단일(의) 스트립의 사시도이며, 도 3은 도 2의 B-B'선을 따라 절단한 분석 스트립의 단면도이다. 상기 도면들에 도시된 바와 같이, 본 발명의 스트립(1)은 투명한 재질의 지지체(10)를 포함한다. 투명한 스트립 지지체(10)의 일면에 바람직하게는 무색의 접착제를 도포하고, 그 위에 검사선(2)이 형성된 다공성 멤브레인 패드(12)와 검체 패드(18)를 부착한다. 상기 지지체(10)는 투명 폴리에스테르 필름, 폴리카보네이트 필름 (polycarbonate film), 아크릴 필름 (acrylic film) 등으로 이루어진 것이 바람직하다.

상기 검체 패드(18)에는 분석하고자 하는 분석 물질을 함유하는 액상 검체가 투입되며, 액상 검체가 이송될 수 있도록 상기 다공성 멤브레인 패드(12)와 연결되어 있다. 상기 다공성 멤브레인 패드(12)의 검사선(2)은 상기 액상 검체 내의 분석 물질(analyte)과 반응할 수 있는 검출 물질로 형성된 반응 영역으로서, 상기 다공성 멤브레인 패드(12)에 적어도 하나 이상 형성되며, 필요에 따라 대조선(4)이 상기 검사선(2)과 소정 거리를 두고 형성되어 있을 수 있다. 상기 검체 패드(18)는 상기 분석 물질 또는 검출 물질과 반응하는 추적자를 더욱 포함할 수 있으며, 상기 추적자는 상기 다공성 멤브레인 패드(12)와 상기 검체 패드(18) 사이에 형성된 별도의 추적자 패드(14)에 위치할 수도 있다. 상기 추적자 패드(14)는 예를 들어 금 콜로이드-항체 접합체와 같은 추적자-리간드 접합체를 함유하고, 바람직하게는 상기 다공성 멤브레인 패드(12)와 상기 검체 패드(18)에 각각 2mm 정도 중첩되도록 부착한다. 또한 상기 다공성 멤브레인 패드(12)의 다른 쪽 끝과 2mm 정도 중첩되도록 흡수 패드(16)를 더욱 부착할 수 있다. 이때 흡수 패드(16)는 지지판(10)의 끝부분과 일치시킬 수 있다.

일반적으로, 면역크로마토그래피 분석에 있어서 검사방법이 샌드위치 분석형태(sandwich assay)인 경우, 검체 패드(18)에 액상 검체를 적하하면 모세관 현상에 의해 검체는 추적자 패드(14)로 이동하고, 검체 내의 분석 물질(analyte)과 추적자의 리간드 부위는 면역학적 반응으로 면역복합체를 형성한다. 상기 면역복합체는 검체의 흐름을 따라 다공성 멤브레인 패드(12)로 이동하고 1차 결합제가 고정화된 부위인 검사선(2)에서 면역학적 특이 결합반응으로 포획된다. 분석형태가 경쟁형(competitive or inhibition assay) 분석일 때에 다공성 멤브레인 패드(12)부분에는 최소한 추적자의 리간드 부위와 반응하는 결합제로 이루어진 검사선(2)이 형성되며, 이 결합제는 분석물질(analyte)과 동일한 물질이거나 이것의 유도체 또는 추적자의 리간드 부위와 동일하거나 이와 동일한 결합력을 가진 유사체일 수 있다.

추적자는 검체 패드가 액상 검체에 의해 적셔졌을 때 재용해되어 모세관 현상에 의하여 검체와 함께 이동하기 쉽도록, 동결 건조하여 추적자 패드(14)에 함유시키는 것이 바람직하며, 이 추적자는 리간드 부분과 상기 리간드 부분에 접합된 검출 가능한 신호를 발생시키는 라벨부분으로 이루어지는 것이 바람직하다. 상기 리간드는 분석물질과 반응하는 항원이거나 분석물질과 결합하는 특이 항체일 수 있고, 또한 추적자 라벨은 육안 또는 센서를 이용하여 검출 가능한 시그널을 발생시키는 금콜로이드, 라텍스로 알려진 유색 폴리스티렌 마이크로 입자, 효소, 형광성 염료, 전도성 고분자(conducting polymer), 전류가 흐르는 필드에서만 자기장을 형성하는 특수 자성입자(paramagnetic particle) 등으로 구성될 수 있다. 이때, 상기의 리간드와 추적자 라벨을 따로 사용하는 것 보다 리간드와 추적자 라벨을 결합시켜 사용하는 것이 바람직하다. 본 발명의 일 실시예에서는 금콜로이드와 항체를 결합하여 표식한 추적자 현탁액을 제조하여 사용할 수 있다.

샌드위치형 분석의 경우 라벨이 발생시키는 시그널의 세기는 분석물질(analyte)의 양에 비례하므로 분석물질(analyte)의 존재 여부를 “양성” 또는 “음성”과 같이 정성적으로 검출할 수 있으며, 더 나아가 표준물질을 발색시킨 스트립의 시그널 또는 표준 비색표와 비교하여 정량적으로 측정할 수 있으며, 보다 정확하게는 라벨이 발생시키는 시그널의 특성에 따라 적절한 광학센서, 전기화학식 센서, 전도도의 변화, 자기장 변화를 감지하는 센서를 사용하여 정량적인 값으로 측정할 수 있다. 분석물질(analyte)에 의해 결합제에 간접적으로 포획된 추적자의 양은 샘플 내에 있는 분석물질(analyte)의 양에 비례하므로 포획되지 않은 추적자를 검출하기 위한 2차 결합제에 결합하는 추적자의 양은 분석물질(analyte)의 양에 반비례한다. 따라서, 1차 결합제와 2차 결합제에 포획된 추적자에 의해 나타나는 발색의 세기를 상대적으로 비교함으로 검체 내의 분석물질의 분석물질(analyte) 농도를 측정할 수도 있다. 면역 검사법에서 일반적으로 알려진 것과 같이 분석물질(analyte)이 항원 또는 합텐(hapten)인 경우 결합제는 분석물질(analyte)에 특이적으로 반응하는 항체 단일클론 항체 또는 다클론 항체일 수 있다. 분석하고자 하는 물질이 항체일 경우 결합제는 항체에 특이적으로 반응하는 항원일 수 있다.

도 1 내지 3에 도시한 바와 같이, 추적자 패드(14)를 형성한 경우에는 추적자 패드(14) 부분은 그 화학적 조성과 물성이 인접한 다공성 멤브레인 패드(12) 및 검체 패드(18)와 다른 것을 사용하는 것이 일반적이다. 또한, 추적자 패드(14)가 별도로 사용되지 않고 검체 패드(18)에 추적자를 부가하여 제조하여, 검체 패드(18)가 추적자 패드(14)의 기능을 포함하도록 제조할 수도 있다. 상기 추적자는 다공성 멤브레인 패드(12)부분에 있는 결합제에 의해 직접 포획되거나 또는 분석물질(analyte)을 통해 결합제에 간접적으로 포획되므로 결합제가 고정화된 부위에 집적되는 추적자의 양은 액상 검체 내의 분석물질(analyte)의 유무 또는 검체의 양과 일정한 정비례 또는 반비례의 상관관계를 가진다.

상기 다공성 멤브레인 패드(12)는 니트로셀룰로스, 유리 섬유, 폴리에테르설폰(PES), 셀룰로오즈, 나일론 등 으로 구성될 수 있으며, 5 내지 15㎛ 크기의 기공을 가지는 니트로셀룰로스가 가장 적절하다. 다공성 멤브레인 패드(12)에 형성된 검사선(2)의 결합제들은 모세관 현상으로 검체가 흘러 이동하여도 고정화한 위치에서 움직이지 않도록 처리하여야 한다. 따라서 결합제를 하이드로포빅(hydrophobic)한 흡수 또는 흡착, 공유커플링, 수소결합 등의 힘이 복합적으로 작용하도록 함으로서, 다공성 박막인 니트로 셀룰로오스에 고정화 될 수 있다. 결합제를 다공성 멤브레인 패드(12)에 결합시키는 방법은 업계에 공지되어 있다. 흡수 패드(16) 부분은 모세관 현상에 의해 다공성 패드(12)로부터 이동한 검체와 추적자를 최종적으로 수용하는 부분으로 일정한 양의 액체가 흡수되면 더 이상 검체가 흐르지 않도록 일정한 면적으로 그 크기를 조절하여야 한다.

상기 분석 스트립은 수분의 증발을 방지하고, 분석의 편의를 위하여 상부 케이스 및 하부 케이스에 내재시킨 면역 크로마토그래피 분석 디바이스의 형태로 이용될 수 있다. 도 4a는 본 발명의 일 실시예에 따른 면역 크로마토그래피 분석 디바이스의 상부 케이스의 평면도이다. 도 4a에 도시한 바와 같이, 본 발명의 디바이스의 상부 케이스는 분석 스트립의 검체 패드(18)와 대응되는 위치에 형성된 검체 투입구(24)와, 분석 스트립의 검사선(2)과 대응되는 위치에 형성된 결과 확인창(22)을 가진다. 또한, 스트립을 적절하게 배치하고 고정시키기 위하여 여러 개의 가이드(26) 및 다공성 멤브레인 패드(12), 검체 패드(18) 또는 흡수 패드(16)가 겹쳐지는 부분을 압착하기 위한 돌기(26’)들을 가질 수 있다. 또한, 하부 케이스와 결합하기 위한 결합 홈(27)들을 가진다.

도 4b는 본 발명의 일 실시예에 따른 면역 크로마토그래피 분석 디바이스의 하부 케이스의 평면도이다. 도 4b에서 보는 바와 같이, 하부 케이스에는 스트립(1)에 순차적으로 배열된 검체 패드(18)와 추적자 패드(14)의 중첩부위, 추적자 패드(14)와 다공성 멤브레인(12)의 중첩부위, 다공성 멤브레인(12)과 흡수패드(16)의 중첩부위를 지지하기 위한 받침대(28)가 배치되어 있다. 또한, 스트립을 적절하게 배치하고 고정시키기 위한 가이드(30)가 배치될 수 있으며, 상부 케이스와 결합하기 위한 결합 돌기(32)들이 배치되어 있다. [도면4a]의 26번은 다공성 멤브레인과 검체 패드 또는 흡수 패드가 겹쳐지는 부분을 압착하기 위한 돌기 이므로 별도로 번호를 부여하고 설명하여야 합니다.

도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 면역 크로마토그래피 분석 디바이스의 분해 사시도를 나타낸 것이다. 도 5에 도시된 바와 같이, 스트립(1)은 상부 케이스 (21a) 및 하부 케이스(21b)에 의하여 형성되는 공간에 투명 플라스틱 지지체(10)가 위로 향하도록 내재된다. 즉, 투명 플라스틱 지지체(10)는 다공성 멤브레인 패드(12)로 이동되고 있는 검체를 외기로부터 보호하는 역할을 함과 동시에 다공성 멤브레 패드(12)인 상에 나타나는 반응선을 결과 확인창(22)을 통하여 육안으로 볼 수 있도록 한다. 상기 분석 스트립(1)은 상기 상부 케이스(21a)에 고정 결합되는 것이 바람직하며, 또한 상기 지지체(10)는 상기 결과 확인창(22)에 공기 및 수분이 통과하지 않도록 밀착 결합되어 있는 것이 더욱 바람직하다.

본 발명을 보다 손쉽게 실시하기 위하여 바람직하게는 도 4a에서 도시한 상부케이스(21a)의 압착 돌기(26’)는 도 4b에 도시한 하부케이스의 정대응하는 위치로 맞바꾸어 옮길 수 있으며 도 4b에서 도시한 하부케이스(21b)의 가이드(30)는 도 4a에 도시한 상부케이스(21a)의 정대응하는 위치로 맞바꾸어 옮길 수 있다.

따라서, 본 발명의 디바이스는 간단한 구조로 검체의 테스트 중에 검체가 건조되는 현상을 방지할 수 있다. 이때 상기 검체 패드(18) 말단의 일부분은 투명 플라스틱 지지체(10)에 의해 덮여지지 않도록 하는 것이 바람직하다. 이 부분은, 본 발명의 스트립(1)이 디바이스로 조립될 때 투명한 스트립 지지체(10)가 검체 투입구(24)를 향하도록 배치되기 때문에, 검체가 투입구(24)를 통하여 검체 패드(18)에 투입되도록 하기 위한 것이다. 본 발명에 따른 분석 스트립(1)은 통상의 스트립과는 달리, 각 패드(12, 14, 16, 18)들을 투명한 플라스틱 지지체(10) 상에 서로중첩되도록 연결하여 부착한다. 또한, 통상의 디바이스와 달리, 스트립(1)이 케이스(21a, 21b)에 조립될 때, 투명한 플라스틱 지지체(10)가 상부로 향하도록 조립하여, 투명 플라스틱 지지체(10)가 검사 결과 확인창(22)을 통하여 외부에 노출되도록 배치한다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하나, 하기 실시예에 의하여 본 발명이 한정되는 것은 아니다.

[실시예]

(1). 다공성 멤브레인을 함유하는 투명카드의 제조

기공의 크기가 10 내지 12㎛이며 모세관현상에 의한 증류수의 이동속도가 135 30sec/4cm인 특성을 가지는 다공성 니트로셀룰로스 멤브레인을 25.4mm X 270mm크기로 절단하였다. 상기 니트로셀룰로스 멤브레인은 마일러 지지체(mylar backing)가 없는 것으로 표면의 매끄러운 정도에 의해 벨트 사이드(belt side)와 에어 사이드(air side)로 구분된다. 상기 멤브레인의 에어벨트 사이드가 바닥으로 향하게 하여 56mm X 270mm크기의 투명 접착제가 발라진 투명카드의 윗부분으로부터 14mm, 밑부분에서 16mm 이격하여 중앙 부분에 부착하였다. 상기의 니트로셀룰로스 멤브레인이 마일러 지지체에 분사되어 만들어진 것일 경우는 마일러 지지체가 바닥으로 향하게 하여 상기 투명카드에 부착하였다.

(2). 항체 고정화 다공성 박층 분석막의 제조

비형간염 표면항원을 산양에 면역하여 얻은 항-비형간염표면 항체를 10mM 붕산염 완충액으로 희석하고, 분극기계장치의 시약 침착펜으로 제조된 니트로셀룰로스 멤브레인의 검사선 위치에 1㎕/cm로 분주하고, 37℃ 항온기에서 건조하여 고정화시켰다. 또한 마우스 면역 글로블린지를 산양에 면역하여 얻은 항-마우스 면역글로블린지 항체를 붕산염 완충액으로 희석하여 상기 니트로셀룰로오스 멤브레인의 대조선 부위에 1㎕/cm로 분주하고 37℃ 항온기에서 건조하여 고정화시켰다. 항체가 고정된 부분을 제외한 나머지 니트로셀룰로스 멤브레인의 여백은 소혈청 알부민 0.05%, 수크로오스 4% 및 이온성 계면활성제 0.0625%를 함유한 인산염 완충액을 분무하여 봉쇄한 후 30℃ 항온기에서 60분에서 120분간 건조하였다.

(3). 금 콜로이드와 항체를 결합하여 표식한 추적자 현탁액의 제조

금 콜로이드 수용액 1㎖에 단일클론 항-비형간염표면항원 항체를 농도별로 첨가한 다음, 150mM 염화나트륨 수용액을 금 콜로이드 수용액 부피의 1/10에 해당하는 양을 첨가하여 골드 콜로이드 안정화 최소량을 구하고 여기서 결정된 비율대로 혼합하여 접합하고 1% 소혈청 알부민으로 봉쇄하였다. 상기의 접합액을 원심분리기에서 800rpm으로 4회 원심분리하여 상청을 제거하고, 1% 소혈청 알부민 인산염 완충액으로 흡광도가 10이 되도록 재부유하였다.

(4). 추적자 패드의 제조

제조한 금 콜로이드 항체 접합체액을 0.5% 수크로오스를 함유한 증류수를 사용하여 흡광도 2가 되도록 희석한 후 유리섬유 패드에 10㎕/25㎟비율로 분주하였다. 상기의 금 콜로이드 항체 접합체액을 함유한 패드를 액체 질소로 급속 동결한 후 동결건조기 내에서 20시간간 동결건조 하였다. 상기 건조한 패드를 4mm X 270mm크기로 절단하였다.

(5). 분석용 디바이스의 제조

상기 항목 1 및 2에 따라 제조한 검사선(2)과 대조선(4)을 포함하는 다공성 멤브레인(12)이 부착된 투명한 재질로 된 플라스틱 지지체(10)의 하단에서 15mm 떨어진 위치에 금 콜로이드-항체 접합체를 함유한 추적자 패드(14)를 다공성 멤브레인패드(12)의 한쪽 끝부분과 2mm 중첩되도록 부착하고, 그 위 즉, 플라스틱 지지판(10)의 하단에서 18mm가 되는 지점을 덮는 검체 패드(18)를 부착하고 플라스틱 지지체(10) 상단에서 14mm가 되는 지점까지 흡수패드(16)를 부착하였다. 상기와 같이 제조한 라미네이트 원단을 4mm X 58mm크기로 절단하여 스트립을 제조하였으며, 또한 제조된 스트립을 케이스에 내재하여 분석용 디바이스를 제조하였다.

완성된 분석용 디바이스를 이용하여 비형간염 표면항원 음성 및 양성 검체 1개를 시험한 결과를 도 6a, 6b 및 도 7a, 7b에 각각 예시하였다. 도 6a 및 6b는는 각각 검사개시 후 10분 및 30분이 경과한 시점의 사진이며, 도 6a 및 6b에서 사진 내의 A(좌측)는 본 발명에 따른 디바이스를 사용한 결과이며, B(우측)는 다공성멤브레인이 결과 확인창을 통하여 공기에 노출된 통상의 디바이스를 이용한 검사 결과이다. 도 6으로부터 알 수 있듯이, 본 발명의 디바이스를 사용한 경우에는 테스트 후 10분 및 30분이 경과하여도 반응선의 색상이 선명히 나타나는데 반하여, 통상의 디바이스를 사용한 경우에는 테스트 후 시간이 경과할수록 반응선의 색상이 매우 흐려지는 단점이 있음을 알 수 있다. 또한 비형간염 표면항원 양성 검체를 시험한 경우에도 유사한 결과를 얻었다(도 7a 및 7b 참조).

이상 상술한 바와 같이, 본 발명은 투명한 재질의 플라스틱 지지체를 사용하여 스트립의 구성물이 배열된 정면뿐 만 아니라 반대면에서도 분석 결과를 관찰할 수 있다. 또한, 다공성 멤브레인의 매끄러운 면인 마일러 지지체가 붙어있는 면(belt-side)을 통하여 분석 결과를 관찰함으로써 보다 선명한 분석 결과를 얻을 수 있다. 또한, 상기 스트립을 디바이스 내부에 조립할 경우 별도의 투명 필름이나 투명 플라스틱 덮게 등을 이용하여 다공성 멤브레인이 결과 확인창을 통하여 외부 공기에 노출을 방지하는 별도의 조작없이, 분석 결과의 훼손을 방지하므로 분석 결과를 반영구적으로 보존할 수 있으며, 제조 공정이 간편한 장점이 있다.

Claims (10)

1. 액상 검체가 투입되는 검체 패드;

   상기 검체 패드에 연결되어 상기 액상 검체를 이송하며, 상기 액상 검체 내의 분석 물질과 반응할 수 있는 검출 물질로 형성된 적어도 하나의 반응 영역을 포함하는 다공성 멤브레인 패드; 및

   상기 검체 패드 및 다공성 멤브레인 패드를 지지하며, 투명한 플라스틱으로 이루어진 지지체를 포함하는 것을 특징으로 하는 면역크로마토그래피 분석 스트립.
2. 제1항에 있어서, 상기 지지체는 투명한 폴리에스테르 필름, 폴리카보네이트 필름, 및 아크릴 필름으로 이루어진 군중에서 선택되는 하나의 필름인 것을 특징으로 하는 면역크로마토그래피 분석 스트립.
3. 제1항에 있어서, 상기 검체 패드에는 상기 분석 물질 또는 검출 물질과 반응하는 추적자가 더욱 포함되어 있는 것을 특징으로 하는 면역크로마토그래피 분석 스트립.
4. 제1항에 있어서, 상기 액상 검체가 이송되는 다공성 멤브레인 패드의 말단에는 상기 액상 검체를 흡수하기 위한 흡수 패드가 더욱 형성되어 있는 것을 특징으로 하는 면역크로마토그래피 분석 스트립.
5. 제1항에 있어서, 상기 검체 패드와 다공성 멤브레인 패드의 사이에 상기 분석 물질 또는 검출 물질과 반응하는 추적자를 포함하는 추적자 패드가 형성되어 있는 것을 특징으로 하는 면역크로마토그래피 분석 스트립.
6. 액상 검체가 투입되는 검체 패드, 상기 검체 패드에 연결되어 상기 액상 검체를 이송하며, 상기 액상 검체 내의 분석 물질과 반응할 수 있는 검출 물질로 형성된 적어도 하나의 반응 영역을 포함하는 다공성 멤브레인 패드, 및 상기 검체 패드 및 다공성 멤브레인 패드를 지지하며, 투명한 플라스틱으로 이루어진 지지체를 포함하는 분석 스트립;

   상기 반응 영역과 대응되는 위치에 결과 확인창이 형성되고, 상기 검체 패드와 대응되는 위치에 검체 투입구가 형성되어 있는 상부 케이스; 및

   상기 상부 케이스와 대응하여 결합하는 하부 케이스를 포함하며,

   상기 분석 스트립의 투명 지지체가 상기 상부 케이스의 결과 확인창을 향하도록 상기 상부케이스 및 하부케이스 사이에 위치한 것을 특징으로 하는 면역 크로마토그래피 분석 디바이스.
7. 제6항에 있어서, 상기 분석 스트립은 상기 상부 케이스에 고정 결합되는 것을 특징으로 하는 면역 크로마토그래피 분석 디바이스.
8. 제6항에 있어서, 상기 분석스트립은 상기 상부케이스에 형성된 다수의 가이드에 의하여 고정되는 것을 특징으로 하는 면역 크로마토그래피 분석 디바이스.
9. 제6항에 있어서, 상기 지지체는 상기 검체 패드의 적어도 일부에만 형성되어 있는 것을 특징으로 하는 면역 크로마토그래피 분석 디바이스.
10. 액상 검체가 투입되는 검체 패드, 상기 검체 패드에 연결되어 상기 액상 검체를 이송하며, 상기 액상 검체 내의 분석 물질과 반응할 수 있는 검출 물질로 형성된 적어도 하나의 반응 영역을 포함하는 다공성 멤브레인 패드, 및 상기 검체 패드 및 다공성 멤브레인 패드를 지지하며, 투명한 플라스틱으로 이루어진 지지체를 포함하는 분석 스트립을 상기 반응 영역과 대응되는 위치에 결과 확인창이 형성되고, 상기 검체 패드와 대응되는 위치에 검체 투입구가 형성되어 있는 상부 케이스에 상기 투명한 플라스틱 지지체가 상기 결과 확인창을 향하도록 부착하는 단계; 및

    상기 상부 케이스와 대응하는 하부 케이스를 결합하는 단계를 포함하는 면역 크로마토그래피 분석 디바이스의 제조방법.