KR20020053474A - 식방풍으로부터 추출정제한 팔카린디올을 이용한 항진균제 - Google Patents

식방풍으로부터 추출정제한 팔카린디올을 이용한 항진균제 Download PDF

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Abstract

본 발명은 각종 방부제와 진균에 의한 인체감염을 치료할 수 있는 약제성분, 즉 항진균제를 우리나라 약용식물인 식방풍(학명 :Peucedanum japonicum)으로부터 추출정제하여 사용케 하므로서 항진균제의 수입에 따른 외화유출방지와 국내약용식물 재배농가의 수익성을 기대할 수 있도록 한 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 약용식물인 식방풍(Peucedanum japonicum)으로부터 팔카린디올(falcarindiol)을 정제하고, 상기 팔카린디올 (falcarindiol)을 효모의 생육을 저해하는 항진균제로 사용케 한 것이다.

Description

식방풍으로부터 추출정제한 팔카린디올을 이용한 항진균제{Antifungal which the Falcarindiol isolated from Peucedanum japonicum is used}
본 발명은 각종 방부제와 진균에 의한 인체감염을 치료할 수 있는 약제성분, 즉 항진균제를 약용식물인 식방풍(Peucedanum japonicum)으로부터 추출정제하여 사용할 수 있도록 한 것이다.
일반적으로 미생물에 의한 식품부패 방지 및 진균에 의한 인체감염등을 치료하기 위한 항진균제들은 전량수입에 의존하고 있는 실정이므로 항진균제 수입에 따른 외화의 낭비가 많아지게 된다.
본 발명은 이러한 종래의 제반단점을 시정하고자 항진균제를 제공함에 있어서, 국내 농가에서 재배 가능한 약용식물로부터 추출정제하여 사용할 수 있도록 한것이다.
현재까지 팔카린디올의 항진균효능이 조사된 적이 없었다.
본 발명은 국내농가에서 재배가능한 식방풍(Peucedanum japonicum)으로부터 팔카린디올(falcarindiol)을 추출정제하고, 상기 팔카린디올(falcarindiol)을 항진균제로 사용케 한 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 약용식물인 식방풍(학명 :Peucedanum japonicum)을 분쇄하여 분말을 얻고, 상기 분말을 메탄올(methanol)과 혼합교반하여 추출액을 얻고, 상기 추출액을 감압, 농축, 건조한 다음 에칠아세테이트를 첨가하여 그 중 녹는 성분을 분리시킨후 농축건조하고, 상기 시료를 클로로포름메탄올용액에 녹여 실리카겔 칼럼(Silicagel column)에 흡착시킨 후 흡착된 물질을 클로로포름 메탄올의 부피비를 점차 달리하면서 매우 느린 유속으로 용출시켜 일정량씩 분획하고, 상기 분획시료 중 토포이소메라제Ⅰ(topoisomerase Ⅰ)저해활성을 강하게 나타내는 분획을 모아 실리카겔 칼럼에 다시 한번 더 흡착시킨 후 흡착된 물질을 헥산(hexane)과 에칠아세테이트의 혼합용매로 재용출, 분획하고, 상기 분획시료 중 토포이소메라제Ⅰ 저해활성을 강하게 나타내는 분획을 모아 정상 박층크로마토그라피(normal phase thin layer chromatography)판에 침적한 후 헥산(hexane), 에칠아세테이트 초산(acctic acid)의 용매로 전개하여 저해성분을 분리하고, 저해성분을 포함하는 실리카(Silica)를 박층 크로마토그라피판으로부터 긁어내어 에칠아세테이트로 용출하고, 상기 용출액을 각 바이알(vial)에 분취하여 감압회전건조기로 건조하여 본 발명에서 얻고자 하는 팔카린디올(falcarindiol)을얻고, 상기 팔카린디올(falcarindiol)을 항진균제로 사용케 하는 것이다.
도 1 : 본 발명의 항진균제로 사용하기 위한 팔카린디올의 제조공정도
도 2 : 본 발명에서 얻어진 팔카린디올이 미생물생육도에 미치는 영향을 나타낸 도표
이하 본 발명에서 제공하고자 하는 항진균제로 사용가능한 팔카린디올 (falcarindiol)을 약용식물인 식방풍(Peucedanum japonicum)으로부터 정제하는 실시예를 상세히 설명하면 다음과 같다.
약용식물인 식방풍(Peucedanum japonicum)가루 4Kg과 메탄올(methanol)20ℓ를 섞어 충분히 교반하여 유효성분을 추출한 후 침전물을 버리고, 추출액을 회전증발기로 감압농축하여 건조시킨다.
상기 건조된 시료에 에칠아세테이트(ethylacetate) 500 밀리리터를 첨가하면 녹는 성분과 녹지 않는 성분 두가지로 나누어지게 되며, 이때 에칠아세테이트에 녹는 성분을 취하여 다시 농축건조시킨다.
에칠아세테이트에 녹는 성분을 취하여 농축건조한 시료를 클로로포름 : 메탄올(CHCl3: MeOH)(50 : 1)의 용액 10㎖에 녹여 실리카겔(silicagel)칼럼 (5.8 ×67cm)에 흡착시킨 후 흡착된 물질을 클로로포름 : 메탄올의 부피비를 40 : 1, 35 : 1, 30 : 1, 25 : 1, 20 : 1로 점차 달리하면서 분당 0.5㎖의 느린 유속으로 용출시켜 20㎖씩 분획한다.
토포이소메라제Ⅰ(topoisomeraseⅠ) 저해활성을 강하게 나타내는 분획을 모아 실리카겔 칼럼(3 ×70cm)에 다시 한번 더 흡착시킨 후 흡착된 물질을 헥산(hexane) : 에칠아세테이트(ethylacetate)를 3 : 1의 혼합비로 혼합한 용매로상기와 같은 방법으로서 재용출시키면서 분획한다.
상기 분획중에서 토포이소메라제Ⅰ(topoisomerase Ⅰ)에 대하여 저해활성을 강하게 나타내는 분획을 모아 정상 박층크로마토그라피(normal phase thin layer chromatography)판에 집적한 후 헥산(hexane), 에칠아세테이트, 초산(aceticacid) (30 : 20 : 1)의 용매로 전개하여 저해성분을 분리하고, 저해성분을 포함하는 실리카(silica)를 박층 크로마토그라피판으로부터 긁어내어 에칠아세테이트로 용출한다.
상기 용출액을 각 바이알(vial)에 분취하여 감압회전건조기로 45℃에서 농축건조하므로서 본 발명에서 제공받고자 하는 팔카린디올(falcarindiol) 약200mg을 얻을수 있었으며 분석결과 구조식은 아래와 같이 분석되었다.
상기에서와 같이 약용식물인 식방풍(Peucedanum japonicum)으로부터 추출정제한 팔카린디올(falcarindiol)이 암세포 뿐만 아니라 효모에 대한 항균력이 우수하다는 사실을 본 발명에서 확인할 수 있었으며 본 발명의 팔카린디올을 이용하여식품보존등을 위한 항진균제로의 사용도 가능한 것으로 판단되었다.
식방풍(Peucedanum japonicum)으로부터 추출정제한 팔카린디올 (falcarindiol)이 미생물에 미치는 효과를 조사하였다.
미생물의 생육도는 대장균(E.Coli)과 효모인 사카로마이세스 세레비시아(S. cerevisiae)를 LB배지와 YPAD배지에서 각각 24시간 배양한 후 600nm(나노미터)에서 흡광도를 조사함으로써 그 생육도를 조사하였다.
이때 배지에 팔카린디올 농도별(0∼25㎍/㎖)로 첨가하고, 대장균과 사카로마이세스 세레비시아(S.cerevisiae)의 생육저해정도를 비교한 결과, 사카로마이세스 세레비시어(S. cerevisiae)의 생육도는 팔카린디올의 량이 증가함에 따라 현저히 감소하였다(도 2).
그래서 사카로마이세스 세레비시아에 대한 팔카린디올의 IC50값은 9㎍/㎖이었다.
이결과 팔카린디올(falcarindiol)이 식품보존등을 위한 항진균제로 사용될 수 있는 것으로 판단되었다.
이상과 같이 본 발명은 약용식물인 식방풍으로부터 효모에 대한 항균력이 우수한 팔카린디올(falcarindiol)을 추출한 다음 항진균제로 사용케 하므로서 항진균제에 대한 대체효과가 있을 뿐 아니라 식방풍과 같은 약용식물을 농촌에 보급, 재배케 하므로서 농가소득에 기여할 수 있게 되는 등의 효과가 있는 것이다.

Claims (1)

  1. 식방풍(Peucedanum japonicum)으로부터 팔카린디올(falcarindiol)을 추출하고, 상기 팔카린디올을 미생물의 항진균제로 사용함을 특징으로 하는 식방풍 (Peucedanum japonicum)으로부터 추출정제한 팔카린디올(falcarindiol)을 이용한 항진균제.
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