KR20000029540A - 액체의오염미생물을정량하는방법및장치 - Google Patents

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와이너 길버트 피.
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Abstract

표준 나선형으로 감긴 카트리지를 대체하여 비폐색형 멤브레인 필터 요소를 가진 일회용 여과 캡슐을 사용함으로써, 더욱 빠르고 정량적인 여과, 회수 및 액체내, 특히 표면수, 우물물, 수도물 등에서 미생물의 정량이 가능하다. 상기 캡슐은 시험될 물의 샘플 크기를 크게 감소시킬 수 있고, 교차오염의 위험을 실질적으로 최소화하고, 운반을 위한 누출 방지 용기를 제공한다. 또한 시험자의 감염의 위험과 분석 시간이 줄어든다. 기아르디아와 크립스포리디움 같은 미생물의 오염을 측정하는데 드는 비용은 상당히 낮아지면서 신뢰성과 정확성은 증가한다.

Description

액체의 오염 미생물을 정량하는 방법 및 장치 {Method for quantitation of microorganism contamination of liquids and apparatus therefor}
음용수의 위생상의 특성에 대한 보호는 세계적인 관심사이다. 미생물의 오염원이 다양하게 존재하기는 하지만, 주요한 관심사는 상수도로의 크립토스포리디움(Cryptosporidium)과 기아르디아(Giardia) 같은 병원성 장내 원생동물의 유입이다. 특히, 이러한 미생물들은 종종 포낭과 접합자낭의 형태로 존재하기 때문에 문제를 일으킨다. 포낭형성 과정에 의해 상기 미생물들은 환경적으로 저항력을 가진다. 그러한 장내 병원균은 의도적이든 우연히든 오폐수의 방출 또는 인간, 가축과 야생동물의 배설물의 직접적 배출에 의해 호수, 개울 또는 먹을 수 있도록 처리되는 원수를 공급하는 대수층(帶水層)에 종종 유입된다. 미생물의 존재여부에 대한 음용수에 대한 시험뿐아니라 상류부분에 대한 실험으로 종종 오염원을 확인할 수 있다. 음용수의 시험뿐아니라, 오수의 범람에 의한 배설물의 오염과 동시에 바람불어오는 지역의 오염을 개선하기 보다는 유지하는 일기상태로 인한 1993년 여름동안의 미시간 세인트 클레어 호수의 서부연안의 광범위한 폐쇄에서 보여주듯이, 수영 또는 목욕 예상 지역의 물을 시험하는 것도 역시 질병의 전파에 대한 예방에 종종 필요하다.
크립토스포리디움(Cryptosporidium)과 기아르디아(Giardia)에 대한 현재 제안된 시험은 " 형광성 항체 이용방법(Fluorescent Antibody Procedure)에 의한 저탁도의 물에서의 크립토스포리디움(Cryptosporidium) 접합자낭과 기아르디아 (Giardia) 포낭에 대한 제안된 시험법 " ASTM D-19 제안서 P229에 설명되어 있다. 미합중국 환경보호국 (EPA)에서 제안한 시험법은 59 연방 등록관보 28호, 6416-6427 (1994년 2월 10일) 에 공표되어 있으며, 이는 ASTM P229 방법과 실질적으로 유사하다.
ASTM P229 방법에서는 시험되어지는 물이 나선형으로 감긴 25.4 cm (10 inch) 길이의 심층 필터(Depth Filter)가 들어있는 카트리지 필터를 통과하게 된다. 물의 권장량은 180ℓ(100 갤런) 이며, 이 물은 필터 카트리지를 통과하게 되는데, 이 필터 카트리지에 나선상으로 감겨있는 필터 요소는 공칭 구멍이 1㎛로 부유물은 보유하고(하기 참조), 물은 통과시킨다. 필요한 양의 물이 필터를 통과했을 때, 카트리지를 분해하여 카트리지 하우징과 카트리지 자체에 존재하는 물은 실험실로 운반하기위하여 예컨데 밀봉가능한 백 (Zip-LockTM), 바람직하게는 더블 백 같은 플라스틱 샘플 백에 옮긴다.
실험실에서는 필터 카트리지를 칼 또는 해부용 메스로 잘라서 섬유사가 감긴 부분과 침전물은 내부, 상대적으로 침전물이 없는 중간부, 침전물이 많은 외부의 세부분으로 분리한다. 세부분의 각각의 섬유사는 용출액 1ℓ 짜리 3개를 가지고 연속적으로 세척하며, 가장 내부의 실을 가장 먼저 세척한다. 세척은 용출액 내에서 실을 손으로 주무르거나 또는 스토마칭 백에 실을 넣고 (EPA의 대체 방법 절차), 손으로 주무른 다음 스토마춰 내에서 균질화하고 다시 한번 균질화 하는 단계로 이루어진다.
필터에 포획된 미생물과 침전물을 함유하는 용출액에 대해, 스윙 버킷형 원심분리기에 250ml 원심분리 병을 장착하여 1050g로 10분 동안 원심분리하여, 상등액은 버리고 고형물은 합쳐서 다시 현탁시키고 재원심분리하여 펠릿을 만들어 펠릿의 부피를 측정하고, 펠릿의 일부는 재현탁시켜서 표준 분자 방법, 이경우에는 형광성 항체 이용방법에 의해서 크립토스포리디움(Cryptosporidium)과 기아르디 아(Giardia)의 존재여부에 대하여 시험한다. 일반적으로 유용한 다른 방법뿐만 아니라 이 분자 방법에 관련된 추가적 정보는 하기 문헌들에 개시되어있다: Abdallah M. Isa, " Elisa Technology", Encyclopedia of Microbiology, Vol. 2, pp. 59-62 (1992); J. Lederber, Ed. , "Indirect Fluorescent Antibody Tests and Immunomicroscopic Methods", Encyclopedia of Microbiology, Vol. 2, pp. 163-164 (1992); E. Baron, L. Peterson and S. Finegold, Diagnostic Microbiology, Bailey ＆ Scott's; pp. 1015-1018; D. Jones, "Poymerase Chain Reaction (PCR)", Encyclopedia of Microbiology, Vol. 3, pp. 443-449 (1992); 및 J. Conroy, R. Stevens and K. Hechemy, "Enzyme Immnoassay", Encyclopedia of Microbiology, Vol. 3, pp. 87 -92 (1992).
선행 기술의 시험방법은 개선되어야 할 점이 많다. 결점들은 아래와 같다:
제조회사가 다르면 필터 카트리지와 하우징은 완전하게 교환될 수 없다;
필터 카트리지가 부정확하게 설치될 수 있다;
필터 하우징은 사용한 다음 그 다음번 사용하는 사이에 철저히 세척되어야하는데, 이것은 잠재적인 교차오염을 제공할 뿐만아니라 시간을 소모하는 일이다;
필터의 구멍 크기는 공식적으로는 1㎛라 할지라도 변화의 폭이 커서 상당한 정도의 침전물과 미생물을 통과시킬 수 있다;
하우징의 물과 필터 카트리지는 부적절한 밀봉과 손상으로 누출될 수 있는 플라스틱 백에 보관되므로, 운반 시에 교차오염과 샘플 손실의 위험이 있다;
설치와 제거가 보호장치 (라텍스 장갑)를 가지고 수행되어야 한다.
전술한 결함은 필터 카트리지와 하우징의 기본적 특성과 그것을 현장에서 사용하는 것과 관련되어 있다. 그러나, 실험실에 도착한 후에 더욱 심각한 결함이 발생한다. 예를 들면:
필터 요소는 칼 또는 수술용 메스를 가지고 손으로 잘라야 하며, 이것은 라텍스 장갑을 끼었을 때일지라도 시험자를 감염의 위험에 처하게 한다;
세척 과정은 수고스럽고 많은 양의 용출액을 사용하며; 세척 과정은 또한 비효율적이어서 상대적으로 낮은 미생물 회수율을 보이며, 게다가 매우 변화하기 쉽다;
추출액의 원심분리는 교차오염을 피하기위해 사용 후 바람직하게는 버려야하는 커다란 원심분리 병을 필요로 한다; 및
고농도로 하기 위하여 원심분리한 샘플을 조합하는 것은 샘플 손실 및/ 또는 오염의 위험이 있다.
전술한 결함은 선행 기술의 방법과 관련된 결함의 일부일 뿐이다. 이러한 결함이 미생물 정량에 얼마나 많은 영향을 미치는지를 알려주는 것으로서, 기지의 양의 시험 미생물을 함유하는 물을 상기 제안된 ASTM 절차에 의하여 "정량"하는 라운드 로빈 시험(Round Robin Test)에 의할 경우에 평균하여 3%이하의 크립토스포리디움(Cryptosporidium) 미생물이 회수되었다 (EPA Contract No. 68-C3-0365, WA No. 2-2, p. 21).
따라서, 잠재적인 오염과 교차오염을 최소화하고; 운반 도중의 누출을 실질적으로 방지하고; 침전물과 미생물의 잔류를 최대화하고; 시간과 자본면에서 보다 경제적이고; 시험자의 감염 위험을 실질적으로 감소시키고; 소량의 샘플로도 정량이 가능하며; 시험에 필요한 용출액의 양이 더 적고; 정량의 신뢰성과 정확성이 더 뛰어난, 액체로부터 미생물을 분리하는 방법을 제시하는 것이 바람직하다.
발명의 간단한 요약
침전물의 잔류 수단으로서 노출된 미세다공성의 멤브레인 필터와 용출액의 내부 저장소를 가진 일회용 침전물 수집 여과 캡슐을 사용함으로써 다음과 같은 개선점과 그밖의 개선점을 달성하게 된 것은 예상치 못했던 것인데, 상기 여과 캡슐에서는 선행 기술의 카트리지 절단, 세척과 대 용량 원심분리 단계없이 여과 캡슐 내부에 함유된 침전물과 미생물을 정량할 수 있다.
본 발명은 액체의 오염 미생물을 포획, 회수 및 정량하는 방법과 그것에 사용하기 적합한 장치에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명은 독특한 일회용 여과 캡슐을 가지고 용출과 여과를 통해 수자원 내에 존재하는 미생물을 정량하는 방법에 관한 것이다. 특히, 상기 방법은 호수, 개울, 식수체계 등으로부터 크립토스포리디움(Cryptosporidium)과 기아르디아(Giardia) 병원균을 정량하는데 이용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 일회용 캡슐의 일 태양과 그 장치를 통한 액체의 흐름을 도시한 것이다.
도 2a는 도 1의 2-2를 따라 절단된 단부 캡의 단면도이다.
도 2b는 샘플 입구와 출구를 가지는 또하나의 단부 캡의 단면도이다.
도 2c는 도 2b의 단부 캡을 위에서 본 평면도이다.
도 2d는 제거가능한 단부 캡의 단면도이다.
도 3a는 멤브레인 필터 요소의 단부로부터 본 전통적인 대 용량 멤브레인 필터에 사용되는 촘촘한 주름을 도시한 것이다.
도 3b는 성글게 주름잡힌 멤브레인 필터의 일 태양을 도시한 것이다.
도 3c는 성글게 주름잡힌 멤브레인 필터의 또다른 태양을 도시한 것이다.
도 3d는 결합된 주름 부근의 전형적인 주름의 형태를 도시한 것이다.
도 4는 본 발명의 정량 방법의 일 태양에 대한 개략도이다.
도 5a는 주 카트리지의 또다른 태양을 도시한 것이다.
도 5b는 도 5a의 5b-5b선을 따라 절단된 단면도이다.
바람직한 실시예의 설명
본 발명은 침전물과 미생물을 포획하고, 존재한다면 그 표적 미생물을 정량하는 차후의 시험을 위하여 상기 침전물과 미생물을 함유하는 용출액을 제공하는 독특한 일회용 여과 캡슐을 사용한다. 따라서, 본 발명의 방법의 신규한 면은 완전한 정량 프로토콜에 따라 용출 및/또는 원심분리/농축 단계를 통한 수집과정을 포함한다.
본 발명의 일회용 여과 캡슐은 미생물의 고율 회수를 위하여 상류부분이 충분히 노출된 표면 함정 필터 매체(Surface Entrapment Filter Medium)를 사용한다. "표면 함정"은 제거될 수 없게 멤브레인을 통과하는 것이 아니라 미생물의 대다수가 멤브레인의 표면 상에 또는 표면 위에 걸리는 것을 의미한다. "충분히 노출된" 이란 다공성 멤브레인, 프리필터 등에 의해 덮히거나 폐색되지 않아서 미생물의 제거를 방해하는 멤브레인을 의미한다. 실질적으로 미생물의 회수를 방해하지 않으면서 필터 매체에 지지체 또는 봉쇄부를 제공하는 성근 체, 격자 또는 메쉬는 폐색 덮개가 아니고 본 발명의 캡슐의 바람직한 특징부가 될 수 있다. 상기 멤브레인은 주름지거나 평면 모양이거나 중공형 섬유 다발 또는 다른 형태를 이루고 있을 수 있다.
필터 멤브레인의 모양과 배치는 가지각색일 수 있으며, 주름진 멤브레인, 중공형 섬유의 다발 또는 상류부분의 멤브레인 표면들이 근접하여 있는 그 밖의 다른 멤브레인이 사용될 때 미생물과 침전물의 회수를 높이기 위해서 표면과 표면 사이가 충분히 떨어져 있어야 하는 경우에는 필터 멤브레인의 모양과 배치가 중요하다. 예를들어, 대부분의 주름과 주름 사이가 인접하여 있는 촘촘하게 주름진 필터는 바람직하지 않고, 원통형 구조체 내에 평평한 평면 모양의 필터 또는 평평한 필터가 있는 경우는 매우 적절하기는 하지만, 유속을 제한한다. 상업적으로 이용가능한 필터는 주름이 너무 조밀하고, 필터 캡슐의 벽이 필터 요소와 너무 밀접하여 필요한 용출액 양을 허용할 수 없으므로 부적절하다.
도 1은 본 발명의 일회용 캡슐의 일 태양을 개시한 것이다. 도 1에서 캡슐 (1)은 밀봉되어져 있다. 고분자 하우징 (3)은 투명한 것이 바람직하며, 표준 항공기 클램프 또는 그와 동등한 것 또는 다른 밀봉 장치에 의해 캡슐에 밀봉될 수 있는 샘플 공급호스 또는 튜브 (9)에 밀봉되기 좋게 둘출된 관 (7)을 가지도록 성형된 샘플(물/침전물) 입구 (5)를 포함한다. 상기와 달리, 샘플 입구 (5)는 표준 호스 피팅(fitting), 즉, 수 또는 암 커넥터 형태일 수 있다.
캡슐 하우징 (3)은 접착제 결합, 용매 결합, 열 융합, 초음파 용접 또는 다른 표준 결합/밀봉 기술에 의하여 고분자의 단부 캡 (11)에 밀봉되어 있다. 주름진 여과 요소 (12)는 성글게 주름진 미세다공성 멤브레인 (13)을 포함하며, 멤브레인 (13)은 상류부분이 충분히 노출되어 있는데, 즉, 필터의 상류부분에 포획된 침전물이 쉽게 추출될 수 있도록 폐색 프리필터와 다른 폐색 표면에 의해 덮여 있지 않고, 경우에 따라플라스틱 또는 다른 재료로 된 메쉬 (15)의 내부에 선택적으로 들어가 있다. 미세다공성 멤브레인 (13)은 여기서는 천공 플리스틱 슬리브로 도시된 단단한 지지 코어 (17)에 의해 지지되어 있고, 하류부분에 위치하는 또하나의 직물, 부직포 또는 멤브레인형 지지체를 가질 수 있다. 상류부분의, 주름잡힌 여과 요소 (12)의 노출된 단부는 단부 캡 (19)에 밀봉되어져 있다. 유체 출구 (21)과 소통하는 주름진 필터 요소의 단부쪽으로, 상기 요소가 방사상의 동심형 플랜지 (23)의 내부 표면에 밀봉 또는 결합됨으로써 단부 캡 (11)에 밀봉되어 있다. 도 1의 "25"는 하우징 확장부 (27)에 나사결합되는 임의의 공기 퍼지 벤트 이다. 공기 퍼지 벤트 내부는, 구멍 (29)를 통해 주사기를 이용하여 내용물을 쉽게 제거 또는 샘플링하기 위하여, 탄성 고분자의 물질로 채워질 수 있다. 하우징 (3)의 단부 (31)과 밀봉되어 있는 단부 (19)의 사이는 용출액을 담기 위한 공간이다. 도 1의 캡슐을 통한 유체의 흐름은 화살표로 도 1에 나타나 있다. 샘플 입구 (5)로 들어온 물은 주름진 필터 요소 (12)로 흘러서 출구 (21)로 나간다. 장치 내로 들어온 샘플 액체에 포함된 침전물은 주름진 필터 요소 (12)와 고분자 하우징 (3)의 사이에 포획되지만, 장치로부터 배출되는 유체에는 실질적으로 침전물이 없다.
다른 형태의 캡슐도 물론 가능하다. 필요한 것은 폐색되지 않은 필터 요소, 예를 들면, 상류부분에 방해가 되는 폐색층이 없는 성글게 주름진 멤브레인 필터 요소; 유체 흐름이 완전히 멤브레인을 통하도록 요소의 단부를 밀봉하는 수단; 필터 요소의 샘플 측과 통하는 샘플 입구 통로와 필터 요소의 여과물 측과 통하는 샘플 출구 통로; 및 침전물의 전부 또는 거의 대부분을 재현탁할 수 있도록 충분한 교반을 가능하게 하고 충분한 양의 용출액을 함유할 수 있는 크기의 공간이다.
도 2a는 도 1의 2-2선을 따라 절단된 단부 캡의 단면도이다. 샘플 출구 (21)은 밀봉 플랜지 (23)의 내부에 있고, 플랜지 (23)의 내부면 (23a)에 필터 요소가 밀봉되어져 있다. 도 1의 하우징 (3)은 표면 (23b)와 (24) 사이에 밀봉되어져 있다.
도 2b는 도 1의 "3"으로 도시된 고분자 하우징에 사용하기위한 또다른 단부 캡의 단면도인데, 샘플 입구 (5)를 단부 캡 (11)에 위치시켰다. 도 2b에서는 도 1의 필터 요소 (12)가 밀봉 표면 (23a) 사이에 밀봉되어 있고 도 1의 고분자 하우징 (3)은 밀봉 표면 (23b)와 (24) 사이에 밀봉되어 있다. 샘플 출구 (21)은 단부 캡의 일부분의 밀봉 표면 (23a)와 (23b)사이에 위치한다. 임의의 벤트 역시 "25"로 도시되어 있듯이 탄성고분자로 된 관통가능한 씰 (25b)를 내부에 포함하는 마개 (25a)를 가진 단부 형태로 캡 (11)에 재위치시킬 수 있다. 그 마개는 구멍 (27a)를 통하여 필터 요소 (12)의 상류부분과 통하는 확장부 (27)과 나사결합으로 또는 밀봉방식으로 연결되어 있다.
도 2c는 도 2b의 단부 캡의 평면도이다. 도 1의 필터 요소 (12)는 플랜지 (23)의 표면 (23a) 내에 밀봉되어 있다. 이 경우에, 플랜지 (23)은 단부 캡의 외부 직경과 방사상으로 대칭이 아니라, 출구 (5)및 임의의 공기 퍼지 벤트 확장부 (27) 마개 (25)가 없는 상태로 도시되어 있음)이 소통하는 초승달 모양의 횡단면을 가진 길이 방향 공간 (33)을 제공하도록 오프셋되어 있다. 이전에는 입구 (5)와 퍼지 벤트 (27)이 위치했지만 현재는 밀폐된 단부를 가진 도 1 의 고분자 하우징 (3)은 점선부분으로 도시되어 있는 바와 같이 밀봉 표면 (23b)와 (24) 사이에 밀봉되어져 있다. 물론, 입구 (5), 출구 (21)과 임의의 퍼지 벤트 확장부 (27)을 적절하게 배치함으로써 다양한 밀봉 플랜지들이 모두 방사상으로 동심원이 되도록 만들어 질 수 있으며, 필터 요소 (12)의 밀봉 단부(19)의 뒤에 공간이 다시 자리잡을 수 있다.
필터 요소의 횡단면은 단부 캡에 각각의 밀봉 플랜지가 잘 밀봉될 수 있도록 하는 것이라면 어떠한 모양이어도 무방하다. 더욱이, 길이 방향의 공간을 가진 단부 캡위에 입구, 출구, 퍼지 벤트가 모두 위치한다면, 도 1의 "19"에 밀봉된 것으로 도시된 필터 요소의 상류부분 단부가 고분자 하우징 (3)의 단부 (31)에 밀봉될 수 있다. 상기 공간이 충분한 양의 용출액을 저장할뿐만 아니라, 철저한 교반이 이루어질 수 있도록 충분한 물리적 공간을 제공한다는 점에서 두가지 목적을 수행하는 것이 강조되어야 한다. 그러므로, "유효한" 공간이란 용어는 이 공간의 부피뿐만 아니라, 매우 심한 교반 또는 멤브레인의 절개 없이 바람직하게는 최소 30%, 더욱 바람직하게는 최소 50%, 보다 더 바람직하게는 70%이상, 그리고 가장 바람직하게는 90% 또는 그 이상으로 상당한 양의 침전물을 재현탁시킬 수 있는 능력을 의미한다.
본 발명의 필터의 또다른 태양은 도 5a와 5b에 나타나 있다. 도 5a의 원통형의 캡슐은 원통형의 필터 하우징 (501)과 단부 캡 (503)으로 이루어 졌다. 단부 캡 (503)은 입구/출구 관을 가지는데, 입구 관 (505)는 입구/추출액 저장소 (511)과 통하고, 출구 관 (507)은 출구 저장소 (509)와 통한다. 필터 요소 (513)은 지지 격자 (517), 멤브레인 필터 (519)와 저장/역류 격자 (515)를 포함한다. 필터 요소는 도 5b에 단면도로 나타나 있다.
도 5b에서 필터 격자 (517)은 멤브레인 필터 (519)를 지지하기 위한 복수개의 마루와 계곡 (521)과 (523)을 가진다. 구멍 (525)를 통해 여과액이 출구 저장소 (509)로 들어갈 수 있다. 멤브레인 (519)의 상류부분 정상에, 실질적으로 멤브레인의 전체 표면이 폐색되지 않도록 하면서도, 일시적인 역압력에 견딜 수 있을 정도로 충분한 멤브레인 지지력을 제공하고, 특히 역세척에 의해 더욱 완전한 미생물의 회수를 가능케하는 견고한 플라스틱 메쉬 (515)가 있다. 도 5a와 5b에 도시된 장치는 원통형일 필요는 없으며, 평평하거나 또는 예상되는 물 여과 압력을 견딜 수 있는 능력이 있고 제조하기가 용이하다면 어떠한 모양이어도 무방하다.
본 발명의 캡슐은 다른 여과 장치와는 현저하게 다르다. 첫째, 바람직한 실시예에 있어서 상기 장치는 밀봉된 일체형이다. 일반적으로, 이러한 유형의 용도에 있어서 대용량 여과를 위하여 설계되는 장치는 고정된 카트리지 하우징에 장착시키기 위한 교환가능한 필터 요소로서 설계된다. 둘째, 주름진 미세다공성의 멤브레인 태양들의 주름은 이하에서 정의한 것처럼 "성글다". 종래의 필터 요소에 있어서, 필터 표면 영역을 최대화함으로써 필터 요소 교환 주기뿐만 아니라 처리량을 증가시키기 위하여 주름은 매우 촘촘하게 잡혀있다. 종래의 형태는 도 3a에 나타나 있는데, 이는 종래의 원통형 필터요소의 단면도이다. 필터 주름 (301)은 거대다공성 원통형 지지체 (303)에 대하여 방사상으로 배열되어 있는데, 이 지지체 (303)은 도 1a에 "17"로 도시된 플라스틱 격자일 수 있다. 도면으로부터 알 수 있듯이 주름은 실질적으로 서로 근접해 있다. 이러한 근접은 종래의 미세다공성의 멤브레인 필터의 성능을 최대화하기 위하여 필요하다. 이러한 종래의 필터들은 가능한한 가장 작은 크기를 가짐으로써 가능한 최소의 비용으로 대용량의 액체를 통과시키도록 설계되어 있다. 그러한 필터에 의해서 포획되는 고형물질은 버려져야 될 것이고, 그 때문에 주름을 촘촘하게 잡는 것이 바람직하다.
그러나, 본 발명의 일회용 캡슐에 있어서, 유속은 단지 유속이 느리면 느릴수록 침전물 수집 시간이 길어 질 것이라는 점에서만 중요하므로, 본 발명의 캡슐은 침전물을 가역적으로 포획할 목적으로 설계된 것이며, 장 시간 동안 빠른 흐름을 만들기 위해 설계된 것이 아니다. 그러나, 여기에서 한정한 미생물을 정량하는 방법에 있어서 가장 중요한 것은 침전물과 미생물이 캡슐로부터 용출과 재현탁이 가능하여야 한다는 것이다. 물 또는 음료 여과를 위한 멤브레인 카트리지 필터와 같은 장치에 있어서, 침전물을 처리하는 것이 목적이지, 촘촘한 주름 사이에 침전물이 포힉되는 지의 여부는 절대적인 관심사가 아니다. 그러나 여기서 촘촘한 주름은 침전물을 포획하나, 그것의 재현탁과 추출은 방해한다. 그러므로, 주름을 사용할 때 도 3b와 도 3c에서 도시된 바와 같이 주름을 성글게 잡을 필요가 있다.
도 3b에 있어서, 주름 (301)은 도 3a에서처럼 거대다공성 지지체 (303)주변에 방사상으로 배열되어 있으나, 주름 사이의 협각(ψ)은 도 3a에 도시된 각보다 상당히 넓고, 따라서 근접된 피크의 벽 (305)와 (307)은 실질적으로 각각 근접하여 있지는 않다. 주름 각은 이롭게는 3 내지 10°, 바람직하게는 3 내지 8°, 더욱 바람직하게는 약 5 내지 6°이다. 도 3c에 있어서, 성근 주름은 작은 각도로 유지되어 있는주름의 협각(ψ)을 증가시키는 것에 의해 이루어지는 것이 아니라 그 대신 스페이싱 섹션 (309)의 통합에 의하여 이루어지는데, 상기 스페이싱 섹션은 주름의 삼각의 단면의 저부가 떨어져 있는 한, 다시 말해서 인접한 주름 벽 (305)와 (307)이 실질적으로 접촉되지 않는 한, 평평하거나 곡선형 이거나 또는 다른 모양일 수 있다. 인접한 주름사이의 공간은 그 가장 좁은 지점이, 수집된 침전물이 회수를 방해하는 인접한 주름 표면사이에 달라붙는 것을 방지함으로써 표적 미생물/입자의 수집을 최대화하는 정도의 치수를 가져야한다.
상기의 설명에 따르면, 성근 주름은, 인접한 피크의 벽 (예를 들면, 도 3a-3c의 (305)와 (307)) 사이의 접촉은 평균하여 주름의 전체 표면 영역의 겨우 25%이며, 주름의 높이는 도 3b와 3c의 "311"로 되시된 바와 같이 측정되는, 일련의 주름으로서 정의될 수 있다. 바람직하게는, 인접하는 접촉이 표면 영역의 20% 미만이며, 더욱 바람직하게는 10% 미만이고, 특히, 인접한 주름사이의 유일한 의도적 접촉은 제조 공정에서 일어나는 주름간격의 불규칙성 때문이다 (즉, 접촉이 없는 경우다). 주름과 주름의 접촉량은 원통형의 필터 요소의 캡슐화된 단부의 육안 검사에 의하거나, 에폭시 같은 포팅 화합물(potting compound)내에 전체 요소를 포팅하고 필터 요소 길이에 대해 횡으로 잘라냄에 의해 조사되어질 수 있다.
상기의 제한사항은 주름 평행 이음부에 주름진 물질을 붙일 목적으로 주름과 주름의 접촉이 필요한 주름 부분에는 적용되지 않는다. 이것은 도 3d에 나타나 있는데, "보통의" 피크 (301)사이의 실질적 접촉은 없으나, 결합 주름 (313)사이에 실질적 접촉이 있는데, 결합 (315)에 접착제에 의하거나, 또는 융합 결합, 용매 결합 등과 같은 다른 수단에 의하여 결합되어져 있다. 결합 주름에 바로 인접한 주름은 왜곡되어질 수 있으나, 주름과 주름의 접촉 정도를 계산 할 때에는 무시되어야 한다. 바람직하게는, 결합 주름과 다음 인접한 주름을 제외하고는 인접한 피크 사이의 계곡의 바닥이 육안으로 관찰되어질 수 있어야 한다.
주름의 성근 정도 또는 중공형 섬유의 적절한 분리를 한정하는 다른 수단은 시험 크립토스포리디움(Cryptosporidium)과 기아르디아(Giardia)의 회수에 기초할 수 있다. 캡슐을 시험하기 위하여, 포르말린에 저장된 기아르디아(Giardia) 1 X 105내지 5 X 105및/또는 포르말린에 저장된 크립토스포리디움(Cryptosporidium) 4 X 104내지 1 X 105에 생리 식염수 16ℓ를 가하고, 1000 ml/min 에서 1500ml/min 사이의 유속으로 상기 용액을 캡슐에 통과시키고, 그리고 나서 추가적으로 염류 용액 2ℓ를 흘려준다. 대략 20분내에 모든 용액이 캡슐을 통과해야 한다. 그리고나서, 캡슐을 분리하고, 침전물(미생물)이 재현탁되도록 보텍싱에 의하여 심하게 교반하고 상기 액체를 원심분리 병에 옮겨 붓는다. 100ml 용출액 2개를 각각 5분동안 교반한다. 이 용출물들을 처음의 재현탁 용출물을 가하고 미생물 정량을 위해 일정량을 취한다. 대안으로는, 상기 조합된 용출물을 원심분리하여 펠릿을 만들 수 있고, 상기 펠릿으로 미생물을 정량할 수 있다. 상기 캡슐이 본 발명에서," 미생물 재현탁가능한 주름" 또는 이와 유사한 용어로 불리우는 성글게 주름진 필터를 함유한다면, 상기 시험에서 제시하는 크립토스포리디움(Cryptosporidium)의 평균 회수율이 평균적으로 9% 이상, 바람직하게는 30% 이상, 가장 바람직하게는 60% 초과 이어야 하며; 반면에 기아르디아(Giardia)의 회수율은 9% 이상, 바람직하게는 70% 이상, 보다 바람직하게는 95% 이상 이어야 한다.
여기에서, 회수율은 처음의 용출물을 따라 내고, 용출 용액으로 두번 세척하고, 처음의 용출물과 침전물 용출물을 조합한 후에 여과된 샘플에서의 미생물 회수 율(%)이다. ASTM 시험법에 따라 조합된 용출물을 원심분리하여 추출한 원심분리 케이크의 일정랴에 대해 ASTM P299에 개시되어 있는 표준 방법 (Standard Technique)에 의하여 미생물을 카운트하여 회수율을 측정한다. 회수율을 평가하기 위해서는 통계학적으로 유의성을 지닌 횟수의 시험을 해야한다. 주름진 멤브레인의 주름 또는 중공형 섬유 필터의 공간 또는 다른 여과 장치는 여기에서 기재된 대로 처리될 때 미생물 및/또는 입자의 실질적 회수가 이루어 질 수 있도록 하는 것이어야 한다. 미생물 또는 입자에 대하여 적용되는 경우 "실질적 회수를 가능한 정도로 유효한"이란 용어는 필터 요소의 구조가 표적 미생물/입자의 회수율을 평균하여 최소한 약 9%는 허용할 수 있어야 함을 의미한다. 바람직하게는 30% 이상 이어야 하고, 높으면 높을수록 더욱 바람직하다.
본 발명의 캡슐은 ASTM P229에 상세히 설명된 것과 같은 나선형으로 감긴 필터를 사용하는 경우에 비해 기아르디아(Giardia)에 대한 회수율이 최소 2배의, 바람직하게는 적어도 4배, 가장 바람직하게는 10 내지 40배 이상을 보여야 하며, 상기 후자의 값은 20 에서 70 NTU 사이의 탁도를 가진 물을 사용하여 얻은 것인데, 본 발명의 캡슐에 대해서는 초기 유속을 약 0.28 gal/min(1.06ℓ/min)로 하고, 나선형으로 감긴 필터에 대해서는 초기 유속을 약 1.25 gal/min(4.73ℓ/ min)로 하여 측정되었다. 본 발명의 캡슐에 대한 샘플 크기(ℓ단위)는 나선형으로 감긴 필터에 대한 샘플 크기의 5 내지 20%일 것이다. 표 1에 상세하게 설명되어 있으니 참조가 될 것이다.
지금까지 개시된 본 발명의 캡슐은 밀봉되어 있고, 크립토스포리디과 기아르디아와 같은 미생물이 빠르고 경제적이며 정확하게 검출될 수 있도록 하는 캡슐이고, 또한 멤브레인의 구멍 크기가 상류부분 표면상에 관심 미생물을 실질적으로 보유할 수 있는 정도인 한 다른 미생물/입자의 검출에도 본 발명의 캡슐을 사용할 수 있다. 본 발명의 캡슐은, 예를 들면 특히 대장균같은 대장균형 박테리아와 대전된 멤브레인 또는 다른 바이러스 보유 멤브레인을 이용하면 바이러스의 검출에도 사용되어질 수 있다. 일체형의 밀봉된 특성을 가진 본 발명의 캡슐이 바람직한 실시예이다.
그러나, 본 발명의 캡슐의 특징은 바람직하게는 필터 요소가 완전히 노출될 수 있도록 제거가능한 단부 캡을 포함으로써 장치의 유연성과 유용성을 증가시키는데 있다. 적합한 단부 캡의 일예는 도 2d에 단면도로 도시되어 있는데, 이 단부 캡은 고분자 하우징 (3)이 단부 캡 표면 (23a)와 (24)사이의 부분에 밀봉되어 있기 보다는, 상기 표면 중의 하나, 이경우에는 표면 (24)에 고분자 하우징 (3)의 단부가 나사결합되어 있다는 점을 제외하고는 도 1과 2d의 단부 캡과 유사하다. 도 2d의 "26"은 탄성고분자의 오-링 씰이다. 다른 밀봉 장치도 물론 가능하다.
제거가능한 마개의 잇점은 멤브레인 전체에 접근할 수 있다는 것이다. 예를 를면, 대장균형 미생물을 시험하기 위해서는 멤브레인은 분리되어 있거나, 평평하게 또는 성장 배지와 접촉 또는 성장 배지로 덮혀 있어서, 너무 작아서 종래의 형광 투시, 현미경 등에 의해서는 관찰할 수 없는 미생물의 콜로니를 성장시키기 위하여 배양돨 수 있어야 한다. 대장균형 박테리아의 예를 보면, 미국 특허 5,510,243호에 개시된 것과 같이 적합한 색소 생산 기질과 효소 유도 물질을 함유한 배지에서 성장된 콜로니를 총 대장균군과 대장균의 수를 세는데 이용할 수 있다. PCR, IFA(Immunofluorescence Assay) 등에 의한 핵산의 증폭과 잡종화와 같은 다른 기술 또한 적합하다.
여과 멤브레인의 다공성과 그것의 조성은 특정 이용분야에 따라 선택될 수 있다. 바람직하게는, 멤브레인은 미국 특허 번호 4,900,449호에 개시된 바에 따라 제조된 폴리에테르설폰 미세다공성 멤브레인과 같이 자발적으로 물에 젖을 수 있는 멤브레인인데, 젤만 사이언스사(Gelman Sciences Inc.), SuperTM미세다공성 멤브레인으로서 구입가능하다. 그러나. 나일론, 세룰로스아세테이트 등으로부터 제조된 친수성의 멤브레인을 사용할 수도 있으며, 젖음성을 갖도록 처리된 소수성의 멤브레인 또한 사용할 수 있다. 멤브레인은 표적 미생물/입자의 크기에 따라 초미세다공성 또는 미세다공성일 수 있다. 평균 크기를 휠씬 초과하는 큰 구멍이 없도록 구멍 크기는 비교적 잘 조절되어야 한다. 종래의 여과 멤브레인 물질은 대부분 이 기준을 만족시킨다.
멤브레인의 구멍크기에 관해서, 상기 구멍 크기는 표적 크기의 미생물의 실질적인 양을 보유할 수 있어야 한다. 최소한 표적 미생물/입자의 9%, 바람직하게는 30% 이상, 가장 바람직하게는 90% 이상을 보유하는 크기로 되어 있다. 멤브레인에 의한 보유 또는 배척의 정도는 표적 미생물에 대한 양성/음성( 존재/부존재) 시험이 통계학적으로 신뢰가능한 정도가 되어야 바람직하다.
본 발명의 필터 요소와 캡슐은 종래의 제조 기술에 의해 제조된다. 원통형 주름진 필터는 멤브레인의 손상없이 밀봉을 보장하는 어떠한 수단에 의해서든 주름 평행 이음부를 따라 밀봉되어 진다. 사용되는 방법중에는 융합 결합, 용매 결합, 음파 용접 또는 예컨데, 에폭시 접착제와 같은 적합한 접착제에 의한 결합이 있다. 원통형 주름진 필터의 단부들은 밀봉되어 있거나, 상기와 같은 또는 유사한 밀봉 방법에 의해 다시 "포팅"되어 있다. 평판형의 멤브레인은 상기와 같은 방법에 의해 밀봉 표면에 대해 밀봉될 수 있거나 또는 나이프 엣지 마개 또는 이랑진 표면 등의 사이에 포획되어 있다. 중공형 섬유 멤브레인은 유사한 방법을 사용하여 밀봉 표면에 밀봉될 수 있다.
제조 단가의 감소와 장치의 물리적인 크기를의 소형화를 위해 하우징 벽, 단부와 단부 캡이 주름진 필터의 외경과 가능한 한 물리적으로 근접하는 종래의 필터외 달리 본 발명의 캡슐은 "용출 유효 공간"으로 명명된 인지가능한 공간을 포함하고 있다.
상기 용출 유효 공간이란, 이후에 정의될 필터 공간의 최소 2.2배, 바람직하게는 최소 2.5배이다. 더 큰 공간이 사용될 수 있다. 상기의 필터 공간은, 예를 들어 도 3b의 B(외경)과 A(내경)와 같이 거대다공성 지지체의 직경을 가로지르는 반대방향의 주름들 사이의 직경방향의 거리에 상응하는 내경, 이런한 직경의 확장부를 가로지르는 피크 단부사이의 거리에 상응하는 외경, 밀봉된 단부들의 씰사이의 유효 길이에 의해 정의되는 길이를 가진 중공형 실린더의 형태로 필터를 가정하는 경우 주름진 필터가 차지하는 공간의 절반을 의미한다. 그러므로, 내경 2.54cm, 외경 4.45cm, 길이 12.2cm의 필터 요소를 가진 캡슐은 필터 공간이 약 66cm3일 것이고, 추가적으로 하우징의 폐쇄된 공간은 약 100ml 내지 약 600ml의 범위일 수 있고, 이 크기의 필터에서는 200ml 내지 300ml의 범위가 바람직하다. 평평한 평판형 멤브레인에서는 공간의 체적은 평방미터로 표현된 표면 영역에 대해 최소 약 0.5배, 바람직하게는 0.8 내지 3배 이어야 한다.
상기 공간은 다양한 모양을 가질 수 있다. 예를 들면, 이러한 공간의 상당한 부분, 즉, 바람직하게는 30%, 보다 바람직하게는 약 50%이상이 필터 요소와 단순히 동심원을 이루는 공간 이외의 달리 한정된 공간에 위치할 수 있다. 달리말하면, 즉, 도 2C의 필터 요소가 위치한 단부 캡에 의해 나타나 있는 바와 같이 필터 요소가 하우징에서 실질적으로 오프셋될 수 있어서 단면이 초승달 모양인 공간을 제공하거나, 또는 이롭게는 도 1a에 도시된 바와 같이 고분자 하우징의 확장부에 위치할 수 있다. 도 1a에서 하우징 단부 (31)은 인접한 필터 요소 단부 캡 (19)에서 끝나는 것이 아니라, 전술한 크기의 필터의 경우에 예를 들면, 0.75 내지 2인치(1.91 내지 5.08cm) 정도 떨어져 있어서 100ml 내지 200ml의 크기의 한정된 저장소를 제공한다. 공간과 관련하여 "한정된"이란 용어는, 상기 공간의 최소 30%, 바람직하게는 약 50%이상이 필터 요소와 동심원상으로 놓여 있지 않는 공간에 위치하는 것을 의미한다.
지금까지 본 발명의 방법에 사용하기에 바람직한 캡슐에 대해 설명하였다. 본 발명의 방법은 유체중의 미생물의 정량의 방법에 관한 것인데, 그 방법은 다음과 같다. 제1단계는 적합한 압력 예컨데, 1bar(100KPa)에서 적합한 유속, 반듯이 특정 유속으로 제한되는 것은 아니지만,예컨데, 0.1ℓ/min 이상의 유속을 가진 일회용 미세다공성 멤브레인 필터 캡슐의 샘플 입구로 시험해야 할 기지의 확인가능한 양의 유체를 흘려보내는 단계인데, 상류부분 미세다공성 멤브레인은 미생물의 용출을 방해하는 어떠한 다른 표면에 의해서도 폐색되지 않은 성글게 주름진 멤브레인이고, 캡슐은 용출 유효 공간을 가지고 있다. 제2단계는 샘플 입구에 연결된 유체 흐름으로부터 일회용 캡슐을 제거하는 단계이다. 제3단계는 필터의 상류부분에 포획된 침전물 및/또는 미생물을 재현탁하기 위해 교반하는 단계이다. 제4단계는 용출 유효 공간과 다른 상류부분의 내부 공간으로부터 유체와 침전물(이하, 달리 기재되어 있지 않는 한 "미생물"을 포함한다)의 초기 용출물을 따라내는 단계이다. 제5단계는 상류부분 내부 용적 보다 작은 양으로 용출 용액을 캡슐에 부가하는 단계이다. 제6단계는 멤브레인에 결합된 침전물이 떨어져 나오도록 캡슐을 심하게 교반하는 단계이다. 제7단계는 침전물 용출물으로써 용출 용액을 옮겨 붓는 단계이다. 제8단계는 침전물의 완전한 제거를 실질적으로 달성하기 위해 필요하다면 용출 용액을 가하고, 교반하고, 따라내기를 반복하는 단계이고, 바람직하게는 초기 용출물과 침전물 용출물을 조합하여 조합된 용출물을 만들어 낸다. 이외에, 농축된 침전물 용출물를 회수하기 위해 침전물 용출물 및/또는 초기 또는 조합된 용출물을 농축화시키는 단계와 침전물 용출물 또는 농축된 침전물 용출물내에 존재하는 적어도 하나의 미생물을 정량하는 단계를 추가적으로 실시할 수 있다.
상기 방법에 사용될 수 있는 적합한 캡슐은 앞에서 한정한 것과 같은 약 66ml의 필터 용량과 약 130-140ml의 공간을 가진다. 이보다 더 크거나 더 작은 장치 역시 사용될 수 있다. 기아르디아 및/또는 크립토스포리디움의 정량을 위해 적합한 방법은 도 1에서 도시된 바와 같은 필터 캡슐을 참조하여 설명될 수 있는, 이 필터 캡슐은 내경 약 2.2cm , 외경 약 4.45cm, 길이 12.2cm, 표면 영역 약 1400cm2, 한정된 공간 약 140ml, 상류부분 총용적 약 264ml (상류부분의 주름사이에 유체가 차지하는 공간을 포함)의 성글게 주름진 미세다공성 필터 요소를 포함한다. 멤브레인은 구멍 크기 1㎛인 본래부터 젖음성 폴리에테르설폰 멤브레인인데, 젤만 사이언스사의 상표명 Super 1200 미세다공성 멤브레인으로서 구입가능하다. 멤브레인은 침전물의 상당한 부분을 배척한다.
지금까지 본 발명에 대해 전체적으로 설명하였으며, 별다른 언급이 없는한 제한하고자 하는 것이 아니라 단지 예시를 위한 목적으로 여기서 제시한 특정의 구체적인 실시예를 참고하여 본 발명을 좀 더 이해할 수 있을 것이다.
상기 방법은 도 4에 번호를 매긴 단계들에 의해 설명될 수 있는데, 이는 방법을 전체적으로 이해하기 위한 목적이다. 여기에서 지적한 바와 같이 일부 단계들은 필요한 경우에 부가할 수 있는 임의적인 것이며, 필요에 따라 부가적인 단계가 추가될 수 있다. 일회용 여과 캡슐을 사용하게 되연 카트리지 필터의 사용하는 경우에 비해 공정이 보다 유연성을 갖게된다. 예를 들면, 보유된 침전물의 1차 교반에 이어서 또는 한번 이상의 추가적인 침전물 용출단게 후와 같이 어느 때라도 용출물 저장소로부터 소정량을 뽑아낼 수 있다. 나선형으로 감긴 필터 카트리지로는 이러한 장점을 얻을 수 없다.
도 4를 참조하면 401 단계에서 일회용 여과 캡슐의 샘플 입구에 샘플 공급원을 연결한다. 그 다음으로 402 단계에서는 원하는 크기의 액체 샘플을 캡슐을 통하여 여과한다. 403 단계에서는 캡슐을 일반적으로 밀봉된 샘플 공급원으로부터 분리하고, 통상 샘플 공급원으로부터 멀리 떨어진 실험실로 운반한다. 실험실에 도착한 후에는 샘플링 과정에서 수집된 침전물을 재현탁하고, 또한 캡슐에 보유된 침전물의 대부분을 함유하는 초기 용출물을 얻기 위하여 404 단계에서는 캡슐을 교반한다. 이 초기 용출물을 405 단계에서는 원심분리 병과 같은 적합한 용기에 옮겨 붓는다. 어떤 경우에는 이렇게 따라낸 초기 용출물을 가지고 원하는 미생물에 대한 시험을 충분히 할 수 있다. 그러나, 보통은 캡슐에 용출 용액을 가하여 추가로 용출 시키는 단계가 필요하다. 406 단계에서는 용출 용액을 캡슐에 유입시키는데, 그 양은 일반적으로 총 내부 용량 이하이며, 그래야 교반하는 동안 난류를 일으킬 수 있다. 407 단계에서는 캡슐을 교반하고, 408 단계에서는 상대적으로 적은 양의 침전물을 일반적으로 함유하며, 또한 필터 멤브레인 표면에 강하게 부착된 어떤 침전물도 포함하는 침전물 용출물을 따라 낸다. 이 시점에서, 다시, 특정 시험 프로토콜은 용출물이 분석 목적을 수행하기에 충분한지를 가리킬 수 있으며 정량이 이루어 질 수 있다. 그러나, 일반적으로 결정 단계 409로 도시된 바와 같이 하나 또는 그 이상의 용출 용액을 가지고 행하는 추가적인 용출 단계, 또는 410 단계에서의 용출 용액을 이요하여 임의의 역세척 단계를 실시하여 필터 멤브레인 표면에 강하게 부착되어 있거나, 표면의 구멍에 포획된 입자 물질 및/또는 미생물을 더욱 완전히 제거할 수 있다.
침전물의 용출이 완료 된 것으로 생각되면 수집된 용출물 어느 것으로든 정량할 수 있다. 그러나, 일반적으로 411 단계에 초기 용출물과 그 후의 용출물을 조합하여 하나의 조합된 용출물을 형성하고, 뒤이어 412 단계에서는 이러한 용출물을 농축할 수 있다. 예를 들면, 농축은 하나 또는 그 이상의 용출물을 원심분리한 다음으로 원심분리로 얻어진 펠릿을 적은 양의 용액에서 재현탁시켜, 재원심분리하는 방식으로 이루어 질 수 있다. 이 방법은 예를 들어 ASTM P229 시험에서 이용된다.
최종적으로 표적 미생물의 정량이 행해진다. 정량 단계 413이 본 발명의 방법의 일부일지라도, 그 상세한 설명은 중요하지 않으며 프로토콜에 의해 계획된 특정한 시험에 따라 선택할 수 있다. 404a와 408a 단계에서는 피하 주사기를 사용하여 소정량을 제거하는 방법으로 용출 챔버 공간으로부터 추출된 소정량을 시험하는 단계이다. 408a 단계에서는, 예를 들어, 교반 후 이전의 용출이 모든 침전물을 실질적으로 제거하기에 충분한 것이었는 지의 여부를 질적으로 결정하기 위하여 소정량이 사용된다. 예를 들어, 본 발명의 방법은 총 중량의 측정 또는 다른 방법에 의해 침전물을 정량하는 데 역시 이용될 수 있다.
실시예 1-2 및 비교예 C1ㅡ C2
물 시료 내의 크립토스포리디움과 기아르디아의 정량을 위해 본 발명의 일회용 여과 캡슐을 사용하여 고 탁도의 상태하에 두개의 시리즈로 샘플링을 실시하였다. 상기 두개의 시리즈는, 첫번째 시리즈가 탁도 22NTU의 물에 대한 시험이고, 반면에 두번째 시리즈는 더 높은 탁도 62.6NTU에서 수행했던 점에서 다르다. 상기 필터는 ASTM P229에 기재된 카트리지 필터 형태인 표준 나선형으로 감긴 폴리프로필렌 필터 (필터리트 모델 U1A1OU)에 대응하여 시험되었다. 물 샘플은 캐타후크 강에서 얻었다.
제안된 ASTM P229 시험 절차는 하기 표 1에 나타나 있는 바와 같이 수정 되었고, 또한 미생물의 수를 세기 위하여 셀룰로오스 디스크 필터상에서 수집하는 것 대신 현미경 슬라이드 스미어 (Microscope slide smear)가 사용되었다. ASTM P229 정보 수집 규칙에 따르면 1ml의 퍼콜/자당(Percoll/sucrose) 경사(Gradient)에 대해 최대 침전물이 처리될 수 있다.
고 탁도의 물을 각각의 필터를 통해 흘려주었다. 상기 나선형으로 감긴 폴리프로필렌 필터는 기아르디아와 크립토스포리디움에 대한 EPA 제안된 시험에서 처럼 제거, 절단, 세척 및 스토마취하였다. 본 발명의 캡슐을 5분동안 교반하여, 용출된 침전물을 초기 추출물로 하고 캡슐의 상류부분(침전물 측)은 100ml 인산염 완충 용출 용액으로 두번 세척하였고, 세척시 매번 5분 동안 교반하여 ,연속적인 추출물 두개를 얻었다. 초기 용출물과 그 후의 용출물들을 조합하였고, ASTM P229 프로토콜에 따라 원심분리하여 상등액은 버리고, 침전물 펠릿은 재현탁하여 2차 원심분리하여 농축했다. 샘플링 과정의 변수와 결과는 표 1에 기재되어 있다.
표 1에서 보는 바와 같이 실시예 1과 2에 사용된 일회용 캡슐 필터가 동등한 비교시험 C1과 C2에서 나선형으로 감긴 필터에 의해 수집된 양에 대해 각각 대략 20%와 5%만 수집하기 위해서 사용되었음에도 불구하고, 리터당 수집된 침전물은 각각 1.86과 1.3배 높았고, 기아르디아의 회수는 각각 17.6과 5.9배 높았다. 그러므로, 본 발명의 방법에 따르면 처리된 샘플량이 상당히 적음에도 불구하고, 기아르디아 검출 감도가 대략 6내지 18배까지 예상밖으로 증가되었고; 농축되지 않은 재현탁 침전물 (초기 용출물, 침전물 용출물)의 경우에는 훨씬 적었고(약 300ml 대 약 3ℓ); 정량에 이용한 펠릿의 퍼센트는 훨씬 높았다(이는 신뢰도가 높음을 말한다). 크립토스포리디움은 어떤 샘플에서도 검출되지 않았다.
실시예 3-6
본 발명의 일회용 캡슐 필터 4개에 대해 기아르디아와 크립토스포리디움을 투여하여 전술한 바와 같이 처리하였다. 검출 한계는 미생물 5마리이고, BDL은 검출 한계 미만를 말한다. 모든 값은 우수리를 잘라버리고 기록했다. 그 결과는 아래 표 2에 기재되어 있다.
표 2에서 보는 바와 같이, 기아르디아와 크립토스포리디움의 회수율은 매우 높은데, 완충 탈이온수에서는 평균 90 내지 95% 이고 원 표면수에서는 65 내지 79%이다.
실시예 7 및 비교예 C3
본 발명의 일회용 캡슐과 ASTM P229(필터리트, U1A1OU)의 요건을 충족시키는 필터를 이용하여 챔플레인 호수의 기아르디아와 크립토스포리디움 포자낭에 대해 시험하였다. 그 결과는 아래 표 3에 기재되어 있다.
샘플링한 물의 양은 단지 23%에 불과하지만, 본 발명의 방법과 캡슐은 표준 시험의 펠릿 양의 67%의 결과를 나타내었음이 주목된다. 나선형으로 감긴 필터의 경우에 100갤런(378.5ℓ)당 침전물 0.9 ml를 회수한데 비하여 본 발명의 캡슐은 100갤런( 378.5ℓ)당 침전물 2.7 ml를 회수했다.
실시예 7과 비교예 3의 캡슐 필터의 여과 과정의 변수는 아래 표 4에 나타나 있다.
매개 변수 필터 형태
젤만 표본 (버전 4) 섬유사가 감긴(ASTM 형태) 상품1㎛
초기 매개 변수유속시간유입물 탁도유출물 탁도 2300 ml/min12:10 pm0.56 NTU0.12 NTU 3500 ml/min12:10 pm0.56 NTU0.29 NTU
종말 매개 변수유속시간유입물 탁도유출물 탁도 150 ml/min6:10 pm0.48 NTU0.09 NTU 3500 ml/min6:10 pm0.48 NTU0.28 NTU
샘플링된 총용량 74 gal [280ℓ] 325 gal [1230ℓ]
실시예 8-15
이 실험의 목적은 캡슐 필터로부터 기아르디아와 크립토스포리디움의 추출을 자동화 및 최적화하기 위한 것이었다. 이 시험은 멀티포트형 재순환하는 매니폴드를 사용하여 신선한 기아르디아 람블리아 (Giardia lamblia) 포낭과 크립토스포리디움 파르붐 (Cryptosporidiym parvum) 접합자낭을 가지고 본 발명의 일회용 캡슐 필터 6개를 동시에 시험하는 과정을 포함하는 것이었다. 캡슐 필터에 의해 포획된 침전물은 랩-라인 리스트 액션 쉐이커(Lab-Line wrist action shaker)를 이용하여 두가지 방법을 3회씩 사용하여 용출시켰다. 추출물을 ASTM P229의 수정된 프로토콜을 사용하여 원심분리하여 염색한 다음, 현미경으로 검사하였다. 대조표준에 대한 시험도 동시에 진행되었다.
수동의 리스트 액션 교반을 흉내내는 능력으로 몇개의 리스트 액션 쉐이커를 평가하였다. 랩-라인 모델 3587-4가 적합한 것으로 판단되었다.
시험장치에는 미생물을 포함하고 있는 55갤런(208.2L)용량의 폴리프로필렌 저장소가 포함되었다. 미생물은 디지털 유량계, 스태틱 믹서, 멀티포트 매니폴드를 통해 미생물을 펌프되어, 저장소로 되돌아오도록 하였다. 재순환 매니폴드를 통한 유속은 항상 11gpm(41.6lpm)로 유지하였다. 6개의 캡슐 필터와 두개의 대조 표준을 멀티포트 매니폴드에 넣고, 각각의 캡슐 필터와 대조 표준에는 1gpm(3.8lpm)으로 유속 통제 밸브를 장착시켰다. 각각의 필터의 유출물은 20ℓ 용량의 용기에 수집되었다.
상기 55갤런 (208.2L)용량의 저장소는 탈이온화 수와 5 X 106의 기아르디아람블리아(Giardia lamblia) 포낭과 크립토스포리디움 파르붐(Cryptosporidium parvum) 접합자낭으로 채워졌다. 미생물은 고 순도의 포르말린에 저장된 조제품 상태로 시험하기 3일전에 워터본사 (뉴 오리언, 엘에이)로부터 구했다. 미생물을 잘 혼합한 다음 15gpm (56.8lpm)의 속도로 15분 동안 스택틱 믹서를 통해 재순환 시켰다.
상기 멀티포트 매니폴드에 6개의 필터와 2개의 대조 표준이 설치하였다. 대조 표준은 1㎛ 폴리카보네이트 중성자 트랙 에취드 멤브레인이 설치된 47mm 폴리테트라플루오로에틸렌 (PTFE; TeflonTM) 인라인 필터 홀더 이었다.
재순환 시스템를 통해 미생물의 흐름이 시작되었고, 필터에 36psi(248KPa)의 유입 압력이 제공되도록 조절되었다. 모든 조정 작업을 마친 후 각각의 필터로의 밸브를 열고 시험을 시작하였다. 각 필터는 상기 혼합물 약 20ℓ를 가지고 시험되었다. 추출물의 용량은 컨테이너 자체의 무게를 제외하고 유출물로부터 수집된 물의 총량을 측정하여 계산하였다.
빠르게 재순환하는 "블리드 오프(bleed off)"형 매니폴드의 사용을 통해 유체역학적 편차없이 매우 균일한 시험이 보장되었고, 각각의 필터에 대한 시험에서도 마찬가지였다. 2분에 걸쳐 멀티포트 매니폴드로부터 1리터 PTFE 용기에 시험 용액 1리터를 누출시킴으로서 시험의 초기와 말기에 두개의 부가적 대조 표준을 수집하였다. 각 캡슐은 아래의 용출 완충액 120ml로 채워졌다. 단일 강도 PBS(ASTM P229, pH 7.4), 0.01% 소디움 도데실 설페이트 (SDS)(W/V), 0.0003% 트윈 80TM(V/V),과 0.015% 안티폼B(AntifoamBTM) (V/V)
SDS 농도는 PBS에 의해 공급된 소디움 이온을 고려하여 계산했고, 단백질의 변성을 위한 임계 미셀 농도의 20%로 하였다 (Bollag and Edelstein, Protein Methods. 1994). 이보다 높은 농도에서는 원하지 않는 단백질 및/또는 에피토프의 변성을 일으킬 수 있으며, 면역형광성 항체 염색의 효능을 저하시킬 수 있다.
캡슐 필터 중 3개는 랩 라인 리스트 액션 쉐이커에 고정되었다. 쉐이커의 아암을 조절하여 필터를 수평으로 위치하도록 하였다. 쉐이커는 최대 쉐이킹 속도의 90%에서 5분동안 작동되었다. 5분 후에 쉐이커에서 필터를 제거하였고, 입구 덮개를 제거했다. 추출물은 멸균된 250ml 원뿔형 원심분리 튜브에 무균상태에서 부었다.
다시, 용출 완충액 120ml를 각각의 필터에 가했고, 필터는 앞서의 위치의 180도 방향으로 쉐이커내에 고정했다. 쉐이커를 다시 5분동안 작동시켰고, 추출물은 상기와 같은 250ml 원뿔형 원심분리 병에 옮겼다.
이 과정은 오직 하나의 예외 사항을 제외하고는 나머지 3개의 필터에도 반복되었다. 그 예외 사항은 두번의 교반에서 쉐이킹 시간을 10분으로 늘린 것이다.
상기 250ml 원뿔형 병을 20분 동안 1100 x g에서 원심분리 하였다. 40ml를 제외한 나머지는 흡인하여 버렸다. 나머지 40ml는 멸균된 50ml 원뿔형 원심분리 튜브에 무균상태에서 옮겼다. 250ml병을 용출 용액 5ml을 가지고 두번 헹구었고, 그 헹군 액을 상기에 상응하는 50ml튜브에 옮겼다.
상기 PCTE 멤브레인 필터는 PTFE 필터 홀더에서 무균상태에서 제거하여 용출 완충액 50ml에 옮겼다. 상기 필터를 10분동안의 쉐이킹과 그 사이사이에 간단한 초음파 분해기를 가지고 3분동안의 보텍싱을 하여 추출하였다.
상기 PTFE 병에 포함되어 있던 1리터의 그래브(grab) 샘플에 대해서는 PBS로 버퍼링하는 과정과 100% 포르말린 50ml로 보존하는 과정을 제외하고는 어떤 처리도 실시하지 않았다.
모든 샘플에 대해 정량하기 위한 소정량을 취하여 ASTM P229의 염색 방법을 사용하여 염색했으며, 샘플마다 3개씩 준비했다. 형광 현미경 검사법을 이용하여 "300"에서 컴플리트 슬라이드 스캐닝에 의해 미생물의 수를 세었다.
아래의 표는 쉐이킹 시간을 5분으로한 추출 과정과 기아르디아와 크립토스포리디움에 대한 시험결과이다
필터# 미생물 형태 시험 용량(L) 리스트 액션쉐이킹시간 리터당 회수된 평균수 리터당 대조표준 평균 평균 회수율 필터 평균 회수율
8 기아르디아램블리아 17.8 5분(X2) 338 489 61.9% 78.8%
9 기아르디아램블리아 17.4 5분(X2) 513 489 105%
10 기아르디아램블리아 18.1 5분(X2) 304 489 62.2%
8 크립토스포리디움파르붐 17.8 5분(X2) 867 2489 34.8% 40.8%
9 크립토스포리디움파르붐 17.4 5분(X2) 1482 2489 59.5%
10 크립토스포리디움파르붐 18.1 5분(X2) 699 2489 28.1%
그래브 샘플과 PCTE 멤브레인 카운트를 사용하여 대조 평균을 결정하였다.
아래의 표는 쉐이킹 시간을 10분으로한 추출 과정과 기아르디아와 크립토스포리디움에 대한시험결과이다.
필터# 미생물 형태 시험 용량(L) 리스트 액션쉐이킹시간 리터당 회수된 평균수 리터당 대조표준 평균 평균 회수율 필터 평균 회수율
11 기아르디아램블리아 19.0 10분(X2) 405 489 82.8% 88.1%
12 기아르디아램블리아 16.3 10분(X2) 467 489 95.5%
13 기아르디아램블리아 15.5 10분(X2) 420 489 85.9%
11 크립토스포리디움파르붐 19.0 10분(X2) 1426 2489 57.3% 51.3%
12 크립토스포리디움파르붐 16.3 10분(X2) 1313 2489 52.8%
13 크립토스포리디움파르붐 15.5 10분(X2) 1087 2489 43.7%
그래브 샘플과 PCTE 멤브레인 카운트로부터의 테이타를 사용하여 대조 평균을 결정하였다.
앞에서 설명한 것과 같은 시험 방법을 사용하여, 시험용 물에 허드슨 강물의 침전물을 주입하여 40 리터의 허드슨 강물의 침전물과 동등한 시험용 물 1 리터의 농도로 하였다.
캡슐 필터는 상기 시험용 혼합물 약 18리터를 가지고 시험했으며, 랩라인 리스트 액션 쉐이커 모델 3587-4를 하나의 필터에는 5분동안, 나머지 필터에는 10분 동안 사용하여 추출했다.
아래의 표는 자동화된 추출 과정을 이용하여 얻은 원수(raw water)의 시험 결과이다.
필터# 미생물 형태 시험용량 (L) 리스트액션 쉐이킹시간 리터당 회수된평균수 리터당 대조표준평균 평균 회수율
14 기아르디아램블리아 18.2 5분(X2) 339 489 69.3%
15 기아르디아램블리아 17.3 10분(X2) 505 489 103%
14 크립포스포디움파르붐 18.2 5분(X2) 755 2489 30.3%
15 크립토스포디움파르붐 79.3 10분(X2) 1853 2489 74.4%
상기 실시예와 표에서 보는 바와 같이 나선형으로 감긴 필터를 대신하여 일회용 여과 캡슐을 사용 함으로써 원 샘플 크기와 세척(용출) 용량은 더 작아지고, 시험을 위해 실질적으로 사용되는 펠릿의 비율은 더 커지는 장점을 얻을 수 있고, 미생물 시험의 정확도가 현저하게 증가된다. 게다가, 캡슐에 존재하는 유체의 탁도가 낮은데, 이는 침전물의 상당량이 수집되었음을 의미하며, 반면에 카트리지 필터의 경우에는 유출물은 상당히 탁하다. 쉬게 밀봉가능하고, 운송 중에 쉽게 손상되지 않는 작은용기의 샘플을 수집할 수 있다는 것은 현장에서의 사용을 더욱 편리하고, 신뢰가능하게 한다. 제안된 ASTM 방법에서는 단지 약 3%의 회수율을 보인 반면에, 기지의 농도의 시험용 미생물을 이용한 본 발명의 캡슐에 대한 시험에서는 28% 이상, 평균하여 40% 이상의 일정한 회수율을 보였다.
본 발명의 캡슐을 사용하여 절단, 분할, 세척, 교반, 및 대 용량(3ℓ)의 반 복적인 원심분리 단계를 제거함으로써, 실험 시간을 절약할 수 있다는 것 역시 중요하며, 시험자에 대한 감염의 위험과 위험한 폐기물을 버릴 경우에 발생할 감염의 위험을 감소시키는 것을 고려하면 특히 중요하다.
"추가 농축"이란 용어는 공정 중에 조합된 세척물 또는 용출물을 추가로 농축하는 것을 의미한다. 상기 실시예에서 지적한 바와 같이, 이 추가 농축은 침전물 펠릿에 대한 원심분리를 포함할 수 있는데, 침전물 펠릿은 필요하다면 침전물 펠릿의 용량을 더욱 정확히 측정하기 위해 더 작은 용량의 원심분리 튜브에서 재현탁과 재원심분리될 수 있다.
"정량 방법"이란 용어는 존재하는 미생물을 정량하는 방법을 의미한다. 기아르디아와 크리스포리디움의 정량에 ASTM P229의 방법 또는 공표된 EPA 시험 방법이 사용될 수 있다. 이전에 인용한 간행물에서 개시된 분자 방법 역시 사용될 수 있다. 정량방법의 상세한 설명과 그 실질적 방법은, 부유된 침전물의 도포표본을 사용하여 정량하는 것을 제외하고는 본 발명의 주제가 아니다. "부유 침전물"이란 ASTM 시험 방법 P229에서 개시된 바와 같이, 기아르디아 및 크립토스포리디움의 경우 퍼콜/자당 (Percoll/Sucrose)용액 또는 원하는 비중 1.09-1.10을 가진 그의 균등물을 사용하여 부유시킴을 의미한다. 여기에서 사용한 정량 방법은 정성 시험으로 간주될 수 있는 존재/부존재 시험도 의미한다.
본 명세서에서 인용된 간행물들은 모두, 상기 간행물 각각이 본 명세서에서 개별적이고 구체적으로 포함되는 것과 그리고 그 내용 그대로 본 명세서에서 개시되어 있는 것과 같은 정도로, 본 명세서에 참고문헌으로서 포함된다.
지금까지 본 발명을 충분히 설명했기 때문에, 여기에 기재된 본 발명의 범위와 정신으로부터 벗어남없이 많은 변화와 수정이 이루어 질 수 있다는 것은 당해 기술 분야의 통상의 지식인들에게 명백할 것이다.

Claims (42)

  1. 의심스러운 미생물을 함유하는 유체 샘플에서 정량하는 개선된 방법에 있어서,
    (a) 일회용 여과 캡슐의 샘플 입구에 의심스러운 미생물을 포함하는 샘플 원을 연결하는 단계;
    (b) 샘플 입구와 샘플 출구를 가진 고분자 하우징을 포함하고, 상기 샘플 입구와 상기 샘플 출구 사이에는, 상기 샘플 입구로부터 상기 출구로의 모든 유체의 흐름이 멤브레인 필터를 통과하여야만 하고 미생물을 함유하는 침전물은 상기 멤브레인의 상류부분에 포획되도록 비폐색형 멤브레인 필터 요소가 위치하며, 캡슐은 용출 유효 공간을 가지고 있는 것을 특징으로 하는, 일회용 여과 캡슐을 통하여 상기 의심스러운 미생물을 포함하는 유체 샘플을 기지의 양만큼 흘려보내는 단계;
    (c) 상기 샘플 입구를 통하여 상기 일회용 여과 갭슐의 상류부분으로부터 액체와 침전물을 초기 용출물 형태로 따라내는 단계;
    (d) 상기 일회용 여과 캡슐의 상기 상류부분에 1배 이상의 용출 용액을 부가하고, 잔류하는 침전물의 적어도 일부를 재현탁하기 위하여 상기 일회용 여과 캡슐을 교반하고 침전물 용출물을 따라내는 임의의 단계;
    (e) 상기 단계(d)를 반복하고 또다른 용출물을 따라내는 임의의 단계;
    (f) 상기 초기 용출물과 상기 차후의 용출물(들)을 조합하여 조합된 용출물을 형성하는 임의의 단계;
    (g) 상기 초기 용출물, 상기 차후의 용출물 및/또는 상기 조합된 용출물의 하나 또는 그이상을 농축하여 농축된 용출물을 형성하는 임의의 단계; 및
    (h) 상기 초기 용출물, 상기 차후의 용출물, 상기 조합된 용출물 및/또는 상기 농축된 용출물로부터 하나 또는 그 이상의 표적 미생물을 정량하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
  2. 제1항에 있어서, 상기 단계(f)가 초기 용출물과 하나 또는 그 이상의 상기 차후의 용출물들을 조합하여 조합된 용출물을 형성하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  3. 제2항에 있어서, 상기 단계(g)가 상기 조합된 용출물을 원심분리하여 미생물을 포함하는 하나 또는 그 이상의 펠릿(들)을 형성하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  4. 제3항에 있어서, 상기 펠릿 또는 펠릿들을 액체에 재현탁시키고, 재원심분리하여 재원심분리된 펠릿을 형성하는 것을 특징으로 하는 방법.
  5. 제4항에 있어서, 상기 미생물이 기아르디아 (Giardia), 크립토스포리디움 (Cryptosporidium) 및 기아르디아(Giardia)와 크립토스포리디움(Cryptosporidium) 모두로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
  6. 제5항에 있어서, 상기 재원심분리된 펠릿의 적어도 일부가 이용되어 부유 침전물을 형성하고, 상기 부유된 침전물에 대해 분자 방법에 의하여 기아르디아 (Giardia) 및/또는 크립토스포리디움(Cryptosporidium)을 정량하는 것을 특징으로 하는 방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 필터 요소는 성글게 주름진 여과 멤브레인을 포함하며, 상기 멤브레인의 주름은 상기 멤브레인에 의해 배척된 미생물에 대한 실질적인 회수를 허용하는 유효한 간격으로 분리되어 있는 것을 특징으로 하는 방법.
  8. 제1항에 있어서, 상기 필터 요소는 성글게 주름진 미세다공성 여과 멤브레인을 포함하며, 인접한 주름의 표면 영역의 평균 25% 이하가 중첩하고 있는 것을 특징으로 하는 방법
  9. 제7항에 있어서, 인접한 주름의 표면 영역이 실질적으로 접하고 있지 않는 것을 특징으로 하는 방법.
  10. 제1항에 있어서, 상기 주름진 미세다공성 멤브레인 필터가 미생물을 재현탁시킬 수 있는 주름진 멤브레인을 포함하는 것을 특징으로 하는 공정.
  11. 제1항에 있어서, 상기 필터 요소가 평판상의 필터를 포함하는 것을 특징으로 하는 공정.
  12. 제1항에 있어서, 상기 필터 요소는 중공형 섬유 필터들의 다발을 포함하며, 상기 섬유 필터들은 상기 멤브레인에 의해 배척된 미생물들의 실질적인 회수를 허용하는 유효한 공간으로 분리되어 있는 것을 특징으로 하는 공정.
  13. 제1항에 있어서, 상기 일회용 여과 캡슐은 분리가능한 씰을 포함하고, 상기 씰을 분리함에 따라 상기 여과 멤브레인이 노출되는 것을 특징으로 하는 방법.
  14. 미생물을 함유하는 유체 샘플에서 미생물의 정량에 사용하기 적합한 일회용 여과 캡슐에 있어서,
    (a) 밀봉가능한 샘플 입구와 밀봉가능한 샘플 출구를 가진 고분자 하우징;
    (b) 성글게 주름진 멤브레인을 포함하는 필터 요소로서, 상기 멤브레인은 가장 작은 크기의 표적 미생물이 실질적으로 보유되는 정도의 구멍 크기를 가지며 상기 샘플 입구로 들어와서 출구로 나가게 되는 유체가 멤브레인을 통해 흘러야 되도록 상기 샘플 입구와 출구 사이에 위치하고 있고, 상기 멤브레인과 샘플 입구 사이의 공간은 침전물을 보유하는 공간인 상류부분을 한정하며, 상기 멤브레인은 거대다공성 고분자 지지체에 의해 하류부분 측상에 지지되어 있고, 상류부분측에는 여과시 상기 멤브레인에 쌓이게 되는 침전물의 재현탁을 방해하게 되는 어떠한 폐색 표면도 가지고 있지 않는 것을 특징으로 하는, 필터 요소;
    (c) 상기 주름진 멤브레인의 필터 용량의 2.2배 이상의 기하학적 부피를 가진 특징적인 용출 유효 공간;
    (d) 상기 고분자 하우징을 통해 상기 상류부분의 침전물을 보유하는 공간과 소통하는 임의의 공기 퍼지 밸브; 및
    (e) 상기 멤브레인이 적셔질 때 멤브레인이 하우징의 내부 표면과 실질적으로 접촉하여 폐색을 야기할 수 없도록 멤브레인의 상류부분에 결합되기에 적합한 물질로 된 비폐색성의 임의의 메쉬를 포함하는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 캡슐.
  15. 제14항에 있어서, 상기 필터 요소가 평판상의 필터를 포함하는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 캡슐.
  16. 제14항에 있어서, 상기 필터 요소는 중공형 섬유 필터들의 다발을 포함하며, 상기 섬유 필터들은 상기 멤브레인에 의해 배척된 미생물들의 실질적인 회수를 허용하는 유효한 공간으로 분리되어 있는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 캡슐.
  17. 제14항에 있어서, 상기 공기 퍼지 밸브가 피하 주사 바늘로 천공가능한 탄성체 씰을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 캡슐.
  18. 제1항에 있어서, 상기 캡슐이 상기 고분자 하우징에 밀봉되는 단부 캡을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 캡슐.
  19. 제18항에 있어서, 상기 단부 캡이 고분자 하우징에 가역적으로 밀봉되는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  20. 제18항에 있어서, 상기 단부 캡이 상기 고분자 하우징에 밀봉되는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 캡슐.
  21. 제14항에 있어서, 상기 성글게 주름진 미세다공성 멤브레인이 인접하는 주름과 주름 사이에 공간을 가지며, 가장 좁은 지점에서의 공간 크기가 표적 미생물/입자물질이 인접한 주름 표면사이에 밀착되어 회수되지 못하게 되는 것을 방지함으로써 상기 표적 미생물/입자의 수집을 최대화 하도록 하는 크기로 되어 있는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  22. 제14항에 있어서, 상기 성글게 주름진 멤브레인이 인접한 주름의 표면 영역의 25% 이하가 중첩되어 있는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  23. 제14항에 있어서, 상기 성글게 주름진 멤브레인이 인접한 주름의 표면 영역의 10% 이하가 중첩되어 있는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  24. 제1항에 있어서, 상기 멤브레인 필터 요소가 미생물을 재현탁시킬 수 있는 주름진 멤브레인을 포함하는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  25. 제14항에 있어서, 특징적인 용출 유효 공간이, 상기 장치의 길이방향 축에 따른 방향에서 볼 때, 상기 고분자 하우징의 내부 벽과 상기 필터 요소의 상류부분 표면 사이의 공간에 의해 형성되는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  26. 제14항에 있어서, 상기 특징적인 공간이 상기 필터 요소의 단부(들)와 상기 고분자 하우징의 단부들 사이에 위치하는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  27. 제14항에 있어서, 상기 특징적인 용출 유효 공간이, 상기 장치의 길이방향 축에 따른 방향에서 볼 때, 상기 고분자 하우징의 상기 내부 벽과 상기 필터 요소의 상기 상류부분 표면 사이의 공간 및 상기 필터 요소의 상기 단부(들)과 상기 하우징의 상기 단부(들) 사이의 공간에 의해 형성되는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  28. 제14항에 있어서,
    (a) 개방 단부와 폐쇄 단부를 가지며, 상기 폐쇄 단부에는 중공 원통형 고분자 하우징의 중공형 내부와 소통하는 입구 통로가 구비되어 있는 중공 원통형의 고분자 하우징;
    (b) 상기 중공형 내부와 소통하는 출구 통로가 구비되어 상기 중공형 원통형 고분자 하우징의 상기 개방 단부와 밀봉 결합되기에 적합하며, 또한 지지하는 거대다공성 고분자 지지체 외부에 위치하는 원통형으로 배치된 성글게 주름진 멤브레인 필터의 일단부의 제1 밀봉 씰과 밀봉 결합되기에 적합하며, 상기 제1 밀봉 씰은 상기 단부 캡의 상기 출구 통로로부터 상기 원통형으로 배치된 성글게 주름진 멤브레인 필터의 하류부분 내부로 상기 제1 밀봉 씰을 통한 유체 소통을 가능하게 하는 통로를 가지며, 상기 원통형으로 배치된 성글게 주름진 멤브레인 필터는, 상기 샘플 입구 통로를 통해 들어온 유체는 상기 출구를 통해 상기 하우징을 벗어나기 이전에 상기 멤브레인을 통해 흘러야만 되도록 상기 샘플 입구 통로와 제2 밀봉 단부 사이에 유체 통로가 존재하지 않게끔 제2 밀봉단부를 더 포함하는, 단부 캡; 및
    (c) 상기 원통형으로 배치된 성글게 주름진 멤브레인 필터의 여과 용량의 약 2.2배 이상의 기하학적 용량을 가지며, 상기 제2 밀봉 씰과 상기 중공 원통형의 고분자 하우징의 단부 사이에 위치하는 공간을 포함하는 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  29. 제28항에 있어서, 상기 원통형으로 배치된 성글게 주름진 미세다공성 멤브레인 필터의 내경이 약 2 내지 3cm이고, 상기 주름들이 방사상 방향으로 약 0.75 내지 2cm의 깊이를 가지고, 상기 지지체로 부터 주름의 피크가 가장 멀리 떨어진 주름의 양면 사이의 협각이 평균하여 3°이상인 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  30. 제28항에 있어서, 상기 원통형으로 배치된 성글게 주름진 미세다공성 멤브레인 필터의 내경이 약 2 내지 3cm이고, 상기 주름들이 방사상 방향으로 약 0.75 내지 2cm의 깊이를 가지고, 상기 지지체로 부터 주름의 피크가 가장 멀리 떨어진 주름의 양면 사이의 협각이 평균하여 4°이상인 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  31. 제28항에 있어서, 상기 원통형으로 배치된 성글게 주름진 미세다공성 멤브레인 필터의 내경이 약 2 내지 3cm이고, 상기 주름들이 방사상의 방향으로 약 0.75 내지 2cm의 깊이를 가지고, 주름의 양면 사이의 협각이 인접한 주름의 표면 영역의 평균 25% 이하가 중첩되도록 하는 크기인 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  32. 제28항에 있어서, 상기 원통형으로 배치된 성글게 주름진 미세다공성 멤브레인 필터의 내경이 약 2 내지 3cm이고, 상기 주름들이 방사상의 방향으로 약 0.75 내지 2cm의 깊이를 가지고, 주름의 양면 사이의 협각이 인접한 주름의 표면 영역의 평균 10% 이하가 중첩되도록 하는 크기인 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  33. 제28항에 있어서, 상기 원통형으로 배치된 성글게 주름진 미세다공성 멤브레인 필터의 내경이 약 2 내지 3cm이고, 상기 주름들이 방사상의 방향으로 약 0.75 내지 2cm의 깊이를 가지고, 주름의 양면 사이의 협각은 인접한 주름의 표면 영역이 실질적으로 중첩되지 않도록 하는 크기인 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  34. 제28항에 있어서, 상기 원통형으로 배치된 성글게 주름진 미세다공성 멤브레인 필터의 내경이 약 2 내지 3cm이고, 상기 주름들이 방사상의 방향으로 약 0.75 내지 2cm의 깊이를 가지고, 주름의 면 사이의 협각은 시험 기아르디아(Giardia)의 양이 1x105에서 5x105범위일 때 회수율이 70%가 넘도록 하는 크기인 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  35. 제28항에 있어서, 상기 원통형으로 배치된 성글게 주름진 미세다공성 멤브레인 필터의 내경이 약 2 내지 3cm이고, 상기 주름들이 방사상의 방향으로 약 0.75 내지 2cm의 깊이를 가지고, 주름의 면 사이의 협각은 시험 기아르디아(Giardia)의 양이 1x105에서 5x105범위일 때 회수율이 95%가 넘도록 하는 크기인 것을 특징으로 하는 일회용 여과 장치.
  36. 제1항에 있어서, 상기 비폐색형 필터 요소가 유체 샘플의 압력으로부터 상기 미세다공성 멤브레인을 효과적으로 지지하도록 상기 미세다공성 멤브레인의 하류부분에 상기 미세다공성 멤브레인과 인접한 지지 격자를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  37. 제36항에 있어서, 상기 미세다공성 멤브레인의 상류부분에 상기 미세다공성 멤브레과 인접한 봉쇄 격자를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  38. 제37항에 있어서, 상기 봉쇄 격자가 역세척 압력을 견디도록 상기 멤브레인을 지지하는 것을 특징으로 하는 방법.
  39. 제36항에 있어서, 공간(cm3)이 상기 멤브레인의 표면 영역(cm2)의 0.5배 이상인 것을 특징으로 하는 방법.
  40. 침전물을 함유하는 유체 샘플에서 침전물을 정량하는 개선된 방법에 있어서,
    (a) 일회용 여과 캡슐의 샘플 입구에 침전물을 포함하는 샘플원을 연결하는 단계;
    (b) 샘플 입구와 샘플 출구를 가진 고분자 하우징을 포함하고, 상기 샘플 입구와 상기 샘플 출구 사이에는, 상기 샘플 입구로부터 상기 출구로의 모든 유체의 흐름이 미세다공성 멤브레인 필터을 통과하여야만 하고 침전물은 상기 멤브레인의 상류부분에 포획되도록 비폐색형 미세다공성 멤브레인 필터 요소가 위치하며, 용출 유효 공간을 가지고 있는 것을 특징으로 하는, 일회용 여과 캡슐을 통하여 침전물을 포함하는 유체 샘플을 기지의 양만큼 흘려보내는 단계;
    (c) 상기 샘플 입구를 통하여 상기 일회용 여과 갭슐의 상류부분으로부터 액체와 침전물을 따라내는 초기 용출물 형태로 따라내는 단계;
    (d) 상기 일회용 여과 캡슐의 상기 상류부분에 1배 용량 이상의 용출 용액을 부가하고, 잔류하는 침전물의 적어도 일부를 재현탁하기 위하여 상기 일회용 여과 캡슐을 교반하고 침전물 용출물을 따라내는 임의의 단계;
    (e) 상기 단계(d)를 반복하고 또다른 침전물 용출물을 따라내는 임의의 단계;
    (f) 상기 초기 용출물과 상기 침전물 용출물(들)을 조합하여 조합된 용출액을 형성하는 임의의 단계;
    (g) 상기 초기 용출물, 상기 침전물 용출물 및/또는 상기 조합된 용출물의 하나 또는 그이상을 농축하여 농축된 용출물을 형성하는 임의의 단계; 및
    (h) 상기 초기 용출물, 상기 침전물 용출물, 상기 조합된 용출물 및/또는 상기 농축된 용출물로부터 침전물을 정량하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  41. 제40항에 있어서, 상기 정량 단계가 침전물의 총 중량을 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로하는 방법.
  42. 제1항에 있어서, 상기 정량 단계 이전에 상기 멤브레인을 역세척하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
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Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5820767A (en) * 1996-07-29 1998-10-13 Pall Corporation Method for quantitation of microorganism contamination of liquids
DE19742439C1 (de) * 1997-09-26 1998-10-22 Boehringer Ingelheim Int Mikrostrukturiertes Filter
US6187530B1 (en) * 1997-10-03 2001-02-13 Monterey Bay Aquarium Research Institute Aquatic autosampler device
US6207053B1 (en) * 1998-03-12 2001-03-27 Celgard Inc. Thermoplastic, unibody transfer device
US6217540B1 (en) * 1998-07-10 2001-04-17 Fuji Photo Film Co., Ltd. Blood filter cartridge
EP1123501A4 (en) * 1998-10-19 2005-04-13 Cbd Technologies Ltd METHOD FOR CONCENTRATING MICROORGANISMS USING AFFINITY SEPARATION
US6260709B1 (en) * 1998-11-09 2001-07-17 Parker-Hannifin Corporation Membrane filter element for chemical-mechanical polishing slurries
US20030024872A1 (en) * 1999-06-30 2003-02-06 Pti Advanced Filtration, Inc. Filter having staged pleating
GB2352652A (en) * 1999-08-06 2001-02-07 Fsm Technologies Ltd Pre-treating hollow fibre membranes for micro-organism detection
US6799085B1 (en) 2000-06-08 2004-09-28 Beverage Works, Inc. Appliance supply distribution, dispensing and use system method
US7083071B1 (en) 2000-06-08 2006-08-01 Beverage Works, Inc. Drink supply canister for beverage dispensing apparatus
US7754025B1 (en) 2000-06-08 2010-07-13 Beverage Works, Inc. Dishwasher having a door supply housing which holds dish washing supply for multiple wash cycles
US6751525B1 (en) * 2000-06-08 2004-06-15 Beverage Works, Inc. Beverage distribution and dispensing system and method
US20020055116A1 (en) * 2000-09-12 2002-05-09 Cunningham Melissa M. Compositions, methods and kits for determining the presence of cryptosporidium organisms in a test sample
JP2002153297A (ja) * 2000-11-24 2002-05-28 Matsushita Electric Ind Co Ltd 微生物数測定方法及び前処理装置付き微生物数測定装置
WO2002062941A1 (en) * 2001-02-05 2002-08-15 Micap Plc Detection of micro-organisms
US20030010718A1 (en) * 2001-07-12 2003-01-16 Nxstage Medical, Inc. Hemodilution cap and methods of use in blood-processing procedures
US6706180B2 (en) * 2001-08-13 2004-03-16 Phase Inc. System for vibration in a centrifuge
GB2387130A (en) 2002-04-04 2003-10-08 Fluid Technologies Plc Hollow fibre filter membrane unit with microorganism detector, and associated usage
JP3934514B2 (ja) * 2002-09-09 2007-06-20 松永 是 クリプトスポリジウムの検出方法及び検出装置
US7258781B2 (en) 2002-09-09 2007-08-21 Clarity Filters Llc Single-use long-life faucet-mounted water filtration devices
US7252757B2 (en) 2002-09-09 2007-08-07 Clarity Filters Llc Faucet-mounted water filtration device including gate position sensor
WO2004073831A1 (en) * 2003-02-19 2004-09-02 Robert Joseph Scilinato Axial depth filter
US7329538B2 (en) * 2003-03-17 2008-02-12 Charles River Laboratories, Inc. Methods and compositions for the detection of microbial contaminants
US6971525B2 (en) * 2003-06-25 2005-12-06 Phase Inc. Centrifuge with combinations of multiple features
EP1663459A4 (en) 2003-07-30 2007-11-07 Phase Inc FILTRATION SYSTEM AND DYNAMIC FLUID SEPARATION METHOD
WO2005011833A2 (en) 2003-07-30 2005-02-10 Phase Inc. Filtration system with enhanced cleaning and dynamic fluid separation
WO2006066225A2 (en) * 2004-12-16 2006-06-22 Idexx Laboratories, Inc. Apparatus and method to elute microorganisms from a filter
CN100379686C (zh) * 2005-05-24 2008-04-09 郭其昌 可提高滤膜清洁作用的水处理装置
JP5476558B2 (ja) * 2006-08-02 2014-04-23 公益財団法人ヒューマンサイエンス振興財団 水試料中の原虫のろ過回収方法および水道水又は水道原水の水質の管理方法
US8066790B2 (en) * 2007-03-16 2011-11-29 3M Innovative Properties Company Fluid filter cartridge and housing
US20090255880A1 (en) * 2008-04-14 2009-10-15 Pritchard Scott J Single use sanitary filter assembly
US20100018071A1 (en) * 2008-07-28 2010-01-28 Mckinley Donald E Clothes dryer lint filter device
WO2010080236A1 (en) 2008-12-19 2010-07-15 3M Innovative Properties Company System and method for processing samples
CN102301220B (zh) 2008-12-19 2014-06-25 3M创新有限公司 用于浓缩样品的系统和方法
US8584535B2 (en) 2009-09-17 2013-11-19 Innova Prep LLC Liquid to liquid biological particle concentrator with disposable fluid path
USD734363S1 (en) * 2011-06-03 2015-07-14 Mahle Metal Leve S/A Fuel filter
WO2013003308A1 (en) 2011-06-30 2013-01-03 3M Innovative Properties Company Systems and methods for detecting an analyte of interest in a sample using microstructured surfaces
JP2014526041A (ja) 2011-06-30 2014-10-02 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー フィルター及び微細構造化表面を使用して、サンプル中の目的の検体を検出するためのシステム及び方法
US20140008285A1 (en) * 2012-07-09 2014-01-09 In-Tec Water Products, Llc Pleated filter
US20140116966A1 (en) * 2012-10-31 2014-05-01 Robert Dennis Podsadowski High pressure fluid filter system
EP2962082B1 (en) * 2013-02-26 2023-06-07 Innovaprep LLC Liquid to liquid biological particle concentrator with disposable fluid path
KR101564759B1 (ko) * 2014-02-04 2015-11-02 한국과학기술연구원 막 증류 수처리 용 분리막
DE102014119441A1 (de) * 2014-12-22 2016-06-23 Endress + Hauser Conducta Gesellschaft für Mess- und Regeltechnik mbH + Co. KG Vorrichtung zur Entnahme einer Probe aus kommunalen und/oder industriellen Abwässern
JP2018516579A (ja) * 2015-06-08 2018-06-28 コーニング インコーポレイテッド 細胞および培地からのマイクロキャリアの濾過および分離のための装置
US10077422B2 (en) * 2015-09-28 2018-09-18 The University Of Toledo Microalgae harvesting using stimuli-sensitive hydrogels
CN108473936A (zh) 2015-12-22 2018-08-31 康宁股份有限公司 细胞分离装置及其使用方法
WO2017116695A1 (en) * 2015-12-29 2017-07-06 3M Innovative Properties Company Assembly and method for field filtration of water samples
JP7082728B2 (ja) * 2017-02-20 2022-06-09 株式会社サタケ 微生物サンプリング装置
KR20220041916A (ko) * 2019-08-05 2022-04-01 아이커 시스템즈, 인크. 유량 제한기용 밀봉부
IT202000018307A1 (it) * 2020-07-28 2022-01-28 Giordano Locci Dispositivo filtrante per liquidi di scarico accoppiabile a dispositivi che necessitano di scaricare liquidi attraverso un condotto di scarico
WO2022055859A1 (en) 2020-09-08 2022-03-17 Sunflower Therapeutics, Llc Cell retention device
CN113324801B (zh) * 2021-05-29 2022-08-19 林孔亮 一种用于检测水质中两虫含量的采样器及其采样方法

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4126559A (en) * 1976-03-30 1978-11-21 Pall Corporation Pharmaceutical filter
US4361483A (en) * 1981-11-02 1982-11-30 Pall Corporation Disposable pharmaceutical filter assembly
EP0148290A1 (en) * 1983-12-14 1985-07-17 Försvarets Forskningsanstalt Method and device at the analysis of liquid samples
US4693985A (en) * 1984-08-21 1987-09-15 Pall Corporation Methods of concentrating ligands and active membranes used therefor
JP2559760B2 (ja) * 1987-08-31 1996-12-04 株式会社日立製作所 細胞搬送方法
JPH01312991A (ja) * 1988-06-09 1989-12-18 Techno Sci Kk 液体中の微生物検査用装置
US5174896A (en) * 1990-06-25 1992-12-29 Harmsco, Inc. Filtering system utilizing rotational flow and angled pleated filter media and method for making slanted pleated filter media
JPH05306978A (ja) * 1992-05-01 1993-11-19 Meidensha Corp 微生物測定装置
GB2267231B (en) * 1992-05-26 1996-04-03 Pall Corp Filter assembly
GB9311242D0 (en) * 1993-06-01 1993-07-21 Celsis Ltd Detection apparatus
US5527705A (en) * 1994-09-12 1996-06-18 Becton, Dickinson And Company Roller bottle for trans-membrane co-culture of cells and method for its use
US5500134A (en) * 1995-03-16 1996-03-19 Dyna Flow, Inc. Microfiltration system with swirling flow around filter medium
US5820767A (en) * 1996-07-29 1998-10-13 Pall Corporation Method for quantitation of microorganism contamination of liquids

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