JP2000517171A

JP2000517171A - 液体の微生物汚染の定量方法とその装置

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Publication number: JP2000517171A
Application number: JP10509157A
Authority: JP
Inventors: ケイン，ジェフリー・エフ; ボートン，ノエル・トッド
Original assignee: Pall Corp
Current assignee: Pall Corp
Priority date: 1996-07-29
Filing date: 1997-07-25
Publication date: 2000-12-26
Also published as: WO1998004675A3; DE69729303T2; CA2264958A1; GB2329394B; EP0915964B1; GB2329394A; US5979668A; AU723744B2; WO1998004675A2; EP0915964A2; GB9828769D0; CA2264958C; US5820767A; AU3968297A; KR20000029540A; DE69729303D1

Abstract

(57)【要約】標準的ならせん巻きカートリッジフィルターに代えて、遮蔽されていないメンブランフィルター要素を備えた使い捨て濾過カプセルを使用すると、液体、特に表層水、井戸水、水道水等における微生物のより迅速かつ定量的な濾過、回収および定量が可能になる。このカプセルは、試験する水サンプル量の著しい減少を可能にし、交差汚染の危険性を実質的に最小限にし、そして輸送に対して漏れ防止性の容器を提供する。実験室員の感染の危険性と分析時間の両者が低減する。ジアルジア(Giardia)およびクリプトスポリジウム(Cryptosporidium)のような微生物汚染の測定コストが著しく低減し、同時に測定の精度および信頼性が増大する。

Description

【発明の詳細な説明】液体の微生物汚染の定量方法とその装置技術分野本発明は、液体の微生物汚染を捕捉、回収および定量する方法と、それに使用するのに適した装置とに関する。より詳しくは、本発明は、水源に存在する微生物を、ユニークな使い捨て濾過カプセルを用いた濾過および溶離を用いて定量する方法に関する。この方法は特に、湖沼、河川、飲料水系等からのクリプトスポリジウム(Cryptosporidium)およびジアルジア(Giardia)病原体の定量に適用できる。発明の背景飲料水の衛生面の防御は全世界的な関心事となっている。非常に多くの微生物汚染源が存在するが、主要な関心はクリプトスポリジウムおよびジアルジアといった病原性腸管原生動物(pathogenic intestinal protozoa)の水源への混入である。この種の微生物は、シスト（嚢子、被嚢体）およびオーシスト（胞嚢体）の形態で存在することが多いので特に厄介である。この種の微生物は、被嚢過程のために環境に対して耐性をもつようになる。かかる腸管病原体は、ヒトまたは動物の糞便（家畜および野生の両方）が直接落とされるか、または湖沼、河川、もしくは飲用可能にするために処理する原水を供給する貯水池(aquifer)に下水もしくは廃水が故意または事故で混入することによって、環境に導入されることがよくある。微生物の存在に対する飲料水の検査に加えて、上流の検査で汚染源を特定できることが多い。飲料水の検査以外に、水泳または水浴が予想される場所の水質検査も、病気の蔓延を防止するためによく必要となる。そのような例は、下水があふれたことによる糞便汚染と同時に、風上地域の汚染を改善するのではなく維持してしまった気象条件のために、1993年の夏中、米国ミシガン州セントクレア湖の西岸の大部分が閉鎖されたことである。クリプトスポリジウムおよびジアルジアに対して現在提案されている試験は、 ASTM D-19提案P229「蛍光抗体法による低濁度水中のジアルジア・シストおよびクリプトスポリジウム・オーシストに対する提案試験法(Proposed Test Method for Gardia Cysts and Cryptosporidium Oocysts in Low-Turbidity Water bya Fluorescent Antibody Procedure)」に規定されている。米国環境保護局(EPA)の提案試験法は、米国59官報第28号、6415-6427(1994年２月10日)に公告されており、ASTM P229法と実質的に類似している。 ASTM P229法では、試験する水を、らせん巻き型の25.4cm(10インチ)長さのデプスフィルター(depth filter)を入れたカートリッジ型フィルターに通す。推奨される水量は380L（100ガロン）であり、これをフィルターカートリッジに通し、公称細孔寸法１μｍのらせん巻き型フィルター要素に懸濁物（但し、下記参照）が保持され、沈降物が懸濁している水だけが通過する。必要な量の水がフィルターを通過したら、カートリッジを分解し、カートリッジハウジング内に残留する水とカートリッジ自体を、実験室に移送するためにプラスチック製のサンプル袋、例えば、密封型（ジップロック^TM）袋、好ましくは二重袋型、に移す。実験室では、フィルターカートリッジをナイフまたはメスで切り離し、巻き糸 (yarn wrapping)と沈降物を、比較的沈降物を含まない部分である内部と、中間部と、ひどく沈降している部分である外部、の３つの部分に分ける。これらの各部分の糸を同じ３つの1.0Lの量の溶離液で順に洗浄し、最も内側の糸を最初に洗浄する。洗浄工程は、糸を溶離液中で手で揉み洗いするか、または糸をスタマキング(stomaching)袋に加え（別のEPA法）、スタマカー(stomacher)でホモジナイズした後、手で揉み洗いして二回目のホモジナイズを行う。沈降物とフィルターが捕捉した微生物とを含んでいる溶出液を、揺動バケット遠心分離機の250mL遠心ボトル内で1050x gにて10分間遠心分離する。上清を廃棄し、固形物を合わせて再懸濁させ、再遠心分離してペレットを得る。このペレットの量（体積）を測定し、その一部を再懸濁させ、クリプトスポリジウムおよびジアルジアの存在について、標準的な分子法（molecular method）、この場合は蛍光抗体法により試験する。これらの分子法、並びに一般に有用かもしれない他の方法に関するそれ以上の情報は、Abdallah M．Isa「Elisa法(Elisa Technolog y)」Encyclopedia of Microbiology，Vol．2，pp．59-62(1992);J．Leder berg編「間接蛍光抗体試験および他の免疫微視的方法(Indirect Fluorescent An tibody Tests and Other Immunomicroscopic Methods）」Encyclopedia of Micr obiology，Vol．2，pp．163-164(1992);E．Baron，L．Peterson and S．Finegol d，Diagnostic Microbiolgy，Bailey & Scott's，pp．1015-1018;D．Jones，「ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)」Encyclopedia of Microbiology，Vol．3，pp．443 -449(1992);およびJ．Conroy，R．Stevens and K．Hechemy「酵素免疫検定(Enzy me Immunoassay)」Encyclopedia of Microbiology，Vol．3，pp．87-92(1992)に開示されている。従来の検査法には、多くの不満が残っている。欠点としてはとりわけ次の点が挙げられる：違う製造業者から入手したフィルターカートリッジおよびハウジングが完全には互換性がない；フィルターカートリッジの取り付けが不正確になる場合がある；使用ごとにフィルターハウジングを十分きれいにしなければならず、これは時間がかかる上、交差汚染(cross-contamination)の可能性を与える；フィルターの「細孔寸法」は公称１μｍであるが、広い範囲に及ぶので、かなりの沈降物および微生物（存在するなら）が通過してしまう可能性がある；ハウジング内の水とフィルターカートリッジはプラスチック袋に保管されるが、この袋は破損または閉じるのが不適切なために漏れることがあり、交差汚染、輸送、およびサンプル損失の各危険性がある；取り付けと取り外しを防具（ゴム手袋）をつけて行わなければならない。前記の欠点は、フィルターカートリッジおよびハウジングとその野外での使用の根本的な性質に付随するものである。しかし、実験室に到着するとさらに深刻な欠点が生ずる。例えば：フィルター要素をナイフかメスを用いて手で切り離さなければならず、これはゴム手袋を着けていても、その技師に感染の危険性をもたらす；洗浄操作は面倒な作業であり、多量の溶出液を使用する；洗浄操作は非効率的であって、微生物の回収率が比較的低い上、非常に変動し易い；溶出液の遠心分離は大きな遠心ボトルを必要とするが、このボトルは交差感染を避けるには使用後に捨てることが好ましい；そしてさらに濃縮するために遠心分離したサンプルを混合するのは、サンプルの損失および／もしくは汚染の危険を冒す。前記したのは従来の処理方法に伴う欠点の一部に過ぎない。これらの欠点が微生物定量に及ぼしうる影響がいかに大きいかを示す指標として、既知量の攻撃用微生物を含有する水を、提案されたASTM法を用いて「定量」したラウンドロビン（round robin、方法評価）試験において、回収されたクリプトスポリジウム微生物は平均で３％未満であった(EPA契約No．68-C3-0365，WA No．2-2．p．21)。汚染および交差汚染の可能性を最小限にし；輸送中の漏れを実質的に防止し；沈降物および微生物の保持を最大にし；時間および費用面でより経済的であり；実験室員の感染の危険性を実質的に低減し；より小さいサンプル・サイズでの定量を可能にし；処理に用いる溶出液量がより少なくてすみ；そして定量の精度と信頼性をより大きくする機会を与える、液体からの微生物の分離方法の提供が望まれていよう。発明の簡単な要約沈降物とこれに含まれる微生物を、従来技術の広範囲のカートリッジの切断、洗浄、および大量の遠心分離の各工程に頼らずに定量することができるように、沈降物保持手段としての露出した微孔質メンブランフィルターと、溶出液用の内部貯液部とを有する、使い捨て沈降物捕集濾過カプセルを用いることにより、前記およびその他の改善が得られることが予想外にも判明した。図面の簡単な説明図１は、本発明の使い捨てカプセルの１態様ならびにこの装置を通る流体の流れを示す。図２ａは、図１の２−２線を横断する末端キャップの断面を示す。図２ｂは、サンプル入口および出口を備えた別の末端キャップの断面を示す。図２ｃは、図２ｂの末端キャップの上部（外部）から見た平面図を示す。図２ｄは、取り外し可能な末端キャップの断面を示す。図３ａは、メンブランフィルター要素の端面から見た従来の大容積メンブランフィルターに伴う密なプリーツ畳みを示す。図３ｂは、ゆるくプリーツ畳みした(loosely pleated)メンブランフィルターの１態様を示す。図３ｃは、ゆるくプリーツ畳みしたメンブランフィルターの別の態様を示す。図３ｄは、プリーツ接合部付近の典型的なプリーツ形態を示す。図４は、本発明の定量方法の１態様の図式図である。図５ａは、本発明のカートリッジの別の態様を示し、図５ｂは図５ａの5b−5b 線に沿った本発明のカートリッジの断面を示す。好適態様の説明本発明は、沈降物および微生物の捕捉と、存在する標的微生物（いるなら）を定量するべくさらに試験するため、これらを含有する溶出液の供給、の両方を行うユニークな使い捨て濾過カプセルを採用する。かくして、本発明の方法の新規な点は、完全定量プロトコルの溶離および／または遠心分離／濃縮工程による捕集を包含する点である。本発明の使い捨てフィルターカプセルは、微生物の高い回収率を可能にするように、上流側が完全に露出している表面捕捉フィルター媒体を採用する。「表面捕捉」とは、微生物の大半が、除去を妨げるように膜（メンブラン）を浸透するのではなく、膜の表面上で捕捉されることを意味する。「完全に露出」とは、膜がより多孔性の大きい膜、プレフィルター等により被覆または遮蔽されていない（これらはやはり微生物の除去を妨げる可能性がある）ことを意味する。但し、フィルター媒体の支持または閉じ込めを与えるが、微生物の回収を実質的に妨げない、目の粗いスクリーン、格子板（グリッド）、またはメッシュは、遮蔽性カバーとはならず、本発明のカプセルの望ましい要素となる場合もある。膜は、プリーツ（折り畳み）型、平面型でもよく、或いは中空繊維束または他の形態の膜を構成していてもよい。濾過膜の形状および配置は多岐にわたり、上流側の膜表面が極めて接近しているプリーツ型、中空繊維束などの膜を使用する場合に、その表面が高い微生物／微粒子回収率を可能にするのに十分なだけ離間していなければならないということだけが重要である。例えば、プリーツの大半が隣りのプリーツにぶつかっている、密に折り畳んだプリーツ型フィルターは望ましくない。例えば、平たい平面膜、または円筒形態にした平面膜は非常に適しているが、限られた流量しか処理できない。市販のプリーツ型フィルターは、折り畳み（プリーツ）が近づきすぎている上、フィルターカプセルの壁がフィルター要素に近づきすぎていて、必要な溶離容積をとることができないので、適当ではない。図１を参照すると、本発明の使い捨てカプセルの１態様が開示されている。図１において、カプセル１は気密シールされている。好ましくは透明のポリマー本体３は、サンプル（水／沈降物）入口５を備えており、これは、標準的な航空機クランプまたは同等もしくは他のシール具によりカプセルにシール接続できるサンプル供給ホースまたはチューブ９とのシール形成を助けるように、段つき管接続部(ridged tubulatures)７を持つように成形されている。或いは、サンプル入口５は、標準的なホース取付け部材、例えば、雄型もしくは雌型のネジ式接続部材の形態としてもよい。カプセルハウジング３は、接着剤による接合、溶剤接合、熱融着、超音波溶接または他の標準的な接合／シール技法により、ポリマー製末端キャップ11に気密シールされている。一体(integral)プリーツ型濾過要素12は、隙間があくようにゆるくプリーツ畳みされた微孔質膜13から構成され、任意に設けたプラスチックまたは他の材料製のメッシュ15の内部に閉じ込められている。この微孔質膜13は上流側が完全に露出している、即ち、遮蔽性のプレフィルターまたは他の遮蔽性表面で覆われていないので、フィルターの上流側の表面に捕捉された沈降物を容易に溶出（流出）させることができる。微孔質膜13は、しっかりした支持コア17 （図示例では有孔プラスチックスリーブとして示す）により支持され、下流側に配置した別の織布、不織布または膜支持体をさらに備えていてもよい。一体プリーツ型フィルター要素12の上流側の露出端部は、末端キャップ19に気密シールされている。一体プリーツ型フィルター要素の流体出口21に通じている方の端部では、フィルター要素が末端キャップ11に、半径方向に同心のフランジ23の内面へのシールまたは接合によって気密シールされている。25で示すのは、ハウジング延長部27にネジで接続されている任意の空気パージ用ガス抜きである。この空気パージ用ガス抜きの内部には、穴29に注射針を通すことによる内容物の取り出しやサンプリングを容易にするためにエラストマー材料を詰めてもよい。気密シール末端キャップ19とハウジング３の末端31の間に位置するのは、溶出液を収容するための空隙容積である。さらに図１を参照すると、図１のカプセルを通る流体流れが幅広矢印で示されている。サンプル入口５に流入した流体は、一体プリーツ型フィルター要素12の周囲からこれを通過して流れ、出口21から出ていく。装置に流入したサンプル液に含まれている沈降物は、一体プリーツ型フィルター要素12とポリマー製ハウジング３との間に捕捉されるので、その間に装置から出ていく流体は実質的に沈降物を含まない。カプセルの他の配置ももちろん可能である。必要なものは、上流側には流れを阻害する遮蔽層を持たない、遮蔽されていないフィルター要素、例えば、ゆるくプリーツ畳みされたメンブランフィルター要素；流体流れが膜を完全に通過するようにフィルター要素の両端をシールする手段；フィルター要素のサンプル側と連通しているサンプル入口通路およびフィルター要素の濾液側と連通している出口通路；ならびに十分な量の溶出液を収容すると共に、沈降物の全部またはほとんどの実質部分を再懸濁させるのに十分な攪拌(agitation)を可能にするサイズの空隙容積(void volume)である。図２ａには図１の２−２線に沿って切断した末端キャップの断面図が示されている。流体出口21はシール用フランジ23の内部に配置され、その内周23ａにフィルター要素がシールされる。ハウジング（図１の３）は表面23bと24の間にシールされる。図２ｂに示すのは、図１に３で示したのと同様であるが、サンプル入口５を末端キャップ11の方に移動させたポリマー製ハウジングに使用する別の末端キャップの断面である。図２ｂでは、フィルター要素（図１の12）はシール用表面23ａ間にシールされ、ポリマー製ハウジング（図１の３）はシール用表面23bと24の間にシールされている。この末端キャップの片側部分でシール用表面23ａと23b の間に配置されているのは、サンプル出口21である。任意のガス抜きも、25で示すように、末端キャップ11の方に移動させてもよく、その閉鎖部材25ａはその内部に任意のエラストマー製の穿剌可能なシール25bを収容していてもよい。この閉鎖部材は、フィルター要素12の上流側と開口27ａを経て連通している延長部27 にネジまたは他の手段でシール取り付けされている。図２ｃは、上面から見た図２ｂの末端キャップを示す。フィルター要素（図１の12）は、フランジ23の表面23ａの内部にシールされている。この場合、フランジ23は、末端キャップの外径と半径方向に対称（同心）ではなく、入口５と任意の空気パージ用ガス抜き延長部27（閉鎖部材25を外して示す）が連通している、三日月形の断面を持つ長手方向の空隙容積33を形成するように偏心させてある。入口５とガス抜き27が前もって配置されている閉鎖端面を備えることになるポリマー製ハウジング（図１の３）は、シャドウで示した、シール用表面23bと24の間にシールされる。もちろん、サンプル入口５、出口21、および任意のガス抜き延長部27の適当な配置により、各シール用フランジを全て半径方向同心にして、空隙容積を前と同様にフィルター要素12の気密シール端部19の先に配置することもできる。フィルター要素の断面は、末端キャップの各シール用フランジと良好なシールを得るのに見合った任意の形状のものでよい。さらに、入口、出口、およびパージ用ガス抜きが全て、長手方向の空隙容積を持った同じ末端キャップ上に位置する場合には、図１に19で気密シールするように示されているフィルター要素の上流側の端部は、代わりにポリマー製ハウジング３の端部31に気密シールしてもよい。空隙容積は、十分な量の溶離液を収容するのみならず、徹底した攪拌を実施できるように十分な物理的空間を提供する、という二重の目的を達成することは強く認識すべきである。従って、「有効」空隙容積とは、この空の空間の容積を意味するだけでなく、有意な量の沈降物、好ましくは少なくとも30％、より好ましくは少なくとも50％、さらにより好ましくは少なくとも70％、そして特に好ましくは90％またはそれ以上の沈降物を、いずれも極めて激しい攪拌または膜の切開に頼らずに、再懸濁させる能力をも意味する。本発明のフィルターの別の態様は、図５ａおよび５ｂに示されている。図５ａでは、円筒形カプセルは、円筒形のフィルターハウジング501と両側の末端キャップ503とから構成される。末端キャップ503は入口／出口の管接続部を備え、入口の管接続部505は入口／溶離液貯液部511に連通し、出口の管接続部507は出口貯液部509に連通している。フィルター要素513は支持格子板517、メンブランフィルター519、および閉じ込め／逆フラッシュ洗浄用格子板515からなる。このフィルター要素は図５ｂに断面で示されている。図５ｂにおいて、フィルター格子板517はメンブランフィルター519を支えるために多数のウネ部および谷部521および523を有する。穴525により濾液が出口貯液部509に流入することができる。上流側の膜519の上には硬質プラスチックメッシュ515が設けられ、これは実質的に膜の全表面を非遮蔽状態とすることができ、それでもなお一時的な背圧に耐え、特により完全な微生物回収を得るために逆フラッシュ洗浄を可能にするのに十分な膜の支持を与える。図５ａおよび５ｂに示した装置は、円筒形である必要はなく、製造の容易さと予想される水濾過圧力に耐える能力に見合った平面型または他の形状のものであってもよい。本発明のカプセルは、他の濾過装置と著しく異なっている。まず、この装置は、その好適態様において、気密シールされた一体ユニットである。一般に、この種の用途では、多量の濾過を考慮した装置は、交換可能なフィルター要素を固定式カートリッジのハウジング内に装着するように設計される。第２に、プリーツ型微孔質膜の態様のプリーツ折り畳みが、後で規定するように、「ゆるい（隙間があいている）ことである。慣用の濾過要素では、濾過表面積を最大にし、それによって処理量を増大させると同時に、フィルター要素の交換間隔を長くするため、プリーツを密に詰め込む。慣用の形態を図３ａに示す。ここには慣用の円筒形フィルター要素の断面が示されている。フィルターのプリーツ301は、図１ａに17で示すようにプラスチック格子でよいマクロポーラス円筒形支持体303の周囲に、放射状に配列されている。図からわかるように、プリーツは互いに実質的にぶつかっている。このぶつかりは、慣用の微孔質メンブランフィルターの性能を最大にするのに必要である。このような慣用のフィルターは、可能な最小のサイズ、従って最低のコストで、多量の液体を通すように設計されている。このようなフィルターにより捕捉された固形物は廃棄することになるので、プリーツの密な詰め込みが望ましいのである。しかし、本発明の使い捨てカプセルでは、流量は、流量が少ないと沈降物の捕集に要する時間が長くなるという意味でしか重要ではない；カプセルは、大流量を長時間作りだすのではなく、沈降物を可逆的に捕捉する目的で設計される。しかし、本発明に規定した微生物の定量方法に最も重要かつ主要であるのは、沈降物と微生物がカプセルからの再懸濁と溶離が可能でなければならないということである。水または飲料濾過用のメンブランカートリッジフィルターのような装置では、狙いは沈降物を捨てることであり；沈降物を密なプリーツの間に捕捉するかどうかは全く関心外である。しかし、本発明では、密なプリーツは沈降物を捕捉するが、その再懸濁と溶離を妨げる。従って、プリーツを使用する場合には、図３ｂおよび３ｃに示すように、離して（ルースに）プリーツ畳みすることが必要である。図３ｂにおいて、プリーツ301は、図３ａと同様にマクロポーラス支持体303の周囲に放射状に配列されているが、但し、各プリーツ内の夾角(開先角度)(φ)が図３ａに示すものよりかなり大きく、そのため隣接ピークの壁面305と307が実質的にぶつかり合わない。このプリーツ角度φは有利には３〜10°、好ましくは４〜８°、最も好ましくは５〜６°である。図３ｃでは、プリーツの夾角φは小さいままで、これを増大させるのではなく、代わりにプリーツ間に離間部309を入れてプリーツの離間を増大させることにより、離したプリーツ畳みを達成している。この離間部309は、プリーツの三角形断面の底面が、やはり隣接するプリーツ壁面305と307の実質的な接触が起こらないように離間している限り、平面、曲面または他の任意の形状とすることができる。隣接プリーツ間の最も狭い地点での間隔は、捕集された「沈降物」が隣接するプリーツ表面間で回収を妨げるクサビを形成するのを防止することにより標的微生物／微粒子の捕集を最大にするような寸法とすべきである。上記説明によるゆるいプリーツは、平均して、隣接するぶつかったピーク(例、図３ａ〜３ｃの305と307)の壁面間の接触が、図３ｂおよび３ｃに311として示したように測定した高さを持つプリーツの全表面積の25％以下である一連のプリーツ、と規定することができる。好ましくは、プリーツのぶつかり接触は、この表面の20％未満であり、より好ましくは10％未満であり、特に製造過程で生じたプリーツ間隔の不揃いに起因する隣接プリーツ間の不可避的な接触だけである（即ち、本質的に接触はない）。プリーツ／プリーツ接触の量は、円筒形のフィルター要素の封入した端面の目視検査により、または注封材料（例、エポキシ）中にフィルター要素全体を注型封入し、フィルター要素の長さに対して横方向にスライスすることにより確かめることができる。上記の制限は、プリーツに並行なシーム（継ぎ目）でプリーツ材料を貼り合わせるためにプリーツ／プリーツ接触が必要である折り畳み部分には適用しない。これは図３ｄに示されている。図中、「通常の」ピーク301間には実質的に接触がないが、315で接着剤により、または例えば融着、溶剤接合等の他の手段により接合されている結合プリーツ313間は実質的に接触している。結合プリーツのすぐ隣りのプリーツもゆがむことがあり、プリーツ／プリーツ接触の程度を計算する場合に無視すべきである。好ましくは、結合プリーツと恐らくはすぐ両隣りのピークを例外として、隣接ピーク間の谷の底を目視観察することができる筈である。プリーツの離間、または中空繊維の十分な離間を規定する別の手段は、攻撃クリプトスポリジウムおよびジアルジアの回収率に基づくことができる。カプセルを攻撃するため、１×10⁵ないし５×10⁵個のホルマリン保存ジアルジアおよび／または５×10⁴ないし１×10⁵個のホルマリン保存クリプトスポリジウムを16Ｌの生理食塩水に加え、この液を1000〜1500mL/minの流量でポンプ押し込みまたは吸引によりカプセルを通過させた後、さらに２Ｌの食塩水でパージする。全量を約 20分のうちにカプセルを通過させるべきである。その後、カプセルを取り外し、激しく、即ち、渦流（ボルテックス）により攪拌して沈降物（微生物）を再懸濁させ、この液体を遠心ボトルにあける。次いで、100mLずつ２回の溶離を、各回５分の攪拌時間で行う。各溶出液を最初の再懸濁溶出液に加え、一定量を微生物定量のために採取する。或いは、合わせた溶出液を遠心分離してペレットにし、このペレットを微生物について分析してもよい。カプセルが、本発明に従って、ゆるくプリーツ畳み（ここでは「微生物再懸濁可能なプリーツ畳み」などといった用語で呼ぶ）されたフィルターを含んでいる場合、この攻撃により与えられたクリプトスポリジウムの平均回収率は平均で９％より高くなり、好ましくは30％以上、最も好ましくは60％以上となる筈である。一方、ジアルジアの回収率は９％より高くなり、好ましくは70％以上、より好ましくは85％以上、最も好ましくは約95％以上となる筈である。ここで回収率は、最初の溶出液と溶離液による２回の洗浄の洗液をデカンテーションし、最初の溶出液と沈降物溶出液とを合わせた後の濾過サンプル中の微生物の回収率である。測定は、ASTM P229に開示されているような標準的な方法によって、このASTM試験に従って合わせた溶出液を遠心分離することにより得られた遠心ケーキの一定量からの微生物を計数することにより行われる。統計的に有意な回数の試験を用いて回収率を評価すべきである。折り畳んだ膜（メンブラン）のプリーツ畳みまたは中空繊維フィルターもしくは他の濾過装置の間隔は、ここに説明したように処理した場合に微生物および／または微粒子の実質的な回収がなされるようにしなければならない。「実質的な回収を可能にするのに有効」という用語を微生物または微粒子に適用した場合、フィルター要素の構成は、平均して、標的微生物／微粒子の最低約９％の回収を可能にすべきである。好ましくは回収率は30％以上、特に好ましくはさらに高くすべきである。本発明のカプセルが示す平均ジアルジア回収率は、ASTM P229に規定されているようならせん巻きフィルターのそれに比べて、最低でも２倍、好ましくは少なくとも４倍以上、最も好ましくは10〜40倍またはそれ以上である。これらの値は、20〜70のNTU濁度を持つ水に対し、らせん巻きフィルターについては約1.25gal /min（4.73L/min）、カプセルについては約0.28gal/min（1.06L/min）の初期流量で測定された。カプセルに対するサンプル量（リットル）は、らせん巻きフィルターのサンプル量の５〜20％でよい。これ以上の詳細についてはここに示した表１を参照することができる。前述したカプセルは、気密シールされていて、かつジアルジアおよびクリプトスポリジウムのような微生物の迅速、経済的かつより正確な検出に役立つものであり、これは膜の細孔寸法が上流側表面上で対象微生物を実質的に保持するようなものである限り、他の微生物／微粒子の検出にも同様に使用することができる。このカプセルは、例えば、大腸菌型の細菌、特に大腸菌(E．coli)の検出、さらには帯電膜または他のウイルス保持膜を利用すればウイルスにも使用することができる。カプセルの一体型気密シール性は好ましい態様である。ただし、好ましくはフィルター要素を完全に露出させることができるように取り外し可能な末端キャップを設けることにより、カプセルの特徴を実質的に保持しながら、装置の有用性と融通性を増大させることができる。適当な末端キャップの１例が図２ｄに断面で示されている。これは、ポリマー製ハウジング３を末端キャップ表面23ａと24の間の部分で気密シールするのではなく、これらの表面の一方、この場合は表面24、がポリマー製ハウジング３の対応するネジ込み端部を受けるようにネジ切りされている点を除いて、図１および２ａに示した末端キャップと類似している。26はエラストマー製Ｏリングシールである。他のシール具ももちろん可能である。取り外し可能な閉鎖部材の利点は、膜全体にアクセス可能となることである。例えば、大腸菌類の検査では、膜を外して平らに伸ばし、培地をかぶせるか接触させてインキュベーションし、通常のＸ線透視、顕微鏡等の手法で観察するには小さすぎる微生物のコロニーを増殖させることがある。１例は大腸菌型の細菌であり、米国特許第5,510,243号に開示されているように適当な色素原物質および酵素誘導剤を含有する培地中でのコロニー増殖を用いて、全大腸菌型細菌数と大腸菌数の両方を計数することができる。他の方法、例えば、PCR、IFA(免疫蛍光または免疫抗体検定)等による核酸の増殖およびハイブリダイゼーション、もまた適している。濾過膜の気孔率およびその組成は、実際の用途を考慮して選択することができる。好ましくは、膜は、Gelman Sciences，Inc．から商標スポール(Supor)^TM微孔質膜として入手できる、米国特許第4,900,449号に開示されているように製造されたポリエーテルスルホン微孔質膜のような、自発的水濡れ性（spontaneous water-wettable）の膜である。しかし、ナイロン、酢酸セルロースなどから製造されるような他の親水性の膜、ならびに濡れ性を付与するように処理された疎水性の膜も使用できる。膜は、標的微生物／微粒子の寸法に応じて、超孔質(ultra porous）または微孔質でよい。細孔寸法は、平均をはるかに超える寸法の大細孔が存在しないように比較的よく制御すべきである。最も普通の濾過膜材料はこの基準を満たす。膜の細孔寸法に関しては、細孔寸法は、標的サイズの微生物の実質量を保持するようにすべきである。この細孔寸法は、標的微生物／微粒子の最低９％、好ましくは30％以上、最も好ましくは90％以上が保持されるようなものである。膜による保持（即ち、通過拒絶）の程度は、標的微生物に対する陽性／陰性（存在／不存在）検査について統計的に信頼できるようなものとするのが好ましい。フィルター要素およびカプセルは従来の製造技術により製造される。円筒形のプリーツ畳みフィルターは、この膜を損傷せずに確実に接合を行う任意の手段によってそのプリーツに並行な継ぎ目でシールすることができる。使用する方法の一部として、融着、溶剤接合、超音波溶接、または適当な接着剤（例、エポキシ系接着剤）がある。円筒形プリーツ畳みフィルターの両端は、気密シール、即ち、やはり同じまたは類似のシール方法を用いて「注封」される。平面膜は、同様の方法によりシール用表面にシールしてもよく、または２枚の刃先型閉鎖部材間、隆起表面間等の間に挟んで捕捉してもよい。中空繊維膜も類似の方法を用いてシール用表面にシールすることができる。慣用のフィルターでは、製造コストを低減し、装置をできるだけ物理的に小型化するため、そのハウジングの壁面、端面および末端キャップ（設置する場合）をプリーツ畳み膜の外径にできるだけ物理的に近接させるが、本発明のカプセルは、この点でもまた慣用のフィルターとは異なり、かなりの空隙容積（本明細書では「溶離有効空隙容積」という）を含んでいる。溶離有効空隙容積は、後で規定するフィルター容積の最低2.2倍、好ましくは少なくとも2.5倍の容積とすることができる。これより大きい空隙容積を用いてもよい。フィルター容積は、プリーツ畳みフィルターを、直径方向で反対に位置するプリーツ間でマクロポーラス支持体の直径を横断する距離に対応する内径と、この直径の延長部を横断するピーク先端間の距離に対応する外径、例えば、図３ｂの距離Ａ（内径）およびＢ（外径）を持ち、長さが気密シールされた両端のシール間の有効長さで規定される長さの中空円筒の形状であると仮定して、この仮定形状のフィルターが占める体積の１／２であると規定される。例えば、内径 2.54cm、外径4.45cm、長さ12.2cmのフィルター要素を持つカプセルの場合、フィルター容積は約66cm³であり、従ってハウジング内にさらに囲まれる空隙容積は約100〜600mLの範囲内とすることができ、200〜300mLの範囲の空隙容積がこのサイズのフィルターにとって好ましい。平たい平面膜の場合、cm³で表した空隙容積はcm²で表した表面積の最低約0.5倍とすべきであり、好ましくはこの表面積の約0.8〜３倍である。空隙容積は多様な形状をとりうる。例えば、有利には、この容積の実質的部分、即ち、少なくとも30％、好ましくは約50％またはそれ以上を、フィルター要素と単なる同心部分ではない区画された空間に位置させることができる。換言すると、図２ｃのフィルター要素配置用末端キャップで例示されるように、フィルター要素をハウジング内で実質的に偏心配置して、断面が三日月形状の空隙容積を形成してもよく、或いは有利には図１に示すように、フィルター要素をポリマー製ハウジングの延長部に配置してもよい。この図では、ハウジングの端部31は、フィルター要素の末端キャップ19のすぐ後ろで終わるのではなく、これからいくらか、例えば、0.75〜２インチ(1.91〜5.08cm)離れていて、既述したフィルター寸法の場合で100〜200mLという大きさの区画された貯液部を形成する。空隙容積に関して「区画された」とは、空隙容積の少なくとも30％、好ましくは約50％以上がフィルター要素と半径方向に同心ではない空間に位置していることを意味する。以上に本発明の方法に使用するのに好ましいカプセルについて説明してきた。本発明の方法は、既知の確認可能な量の被検流体の流れを、適当な流量、例えば、これに制限されないが、適当な圧力(例、１バール＝100kPa)で0.1L/minまたはそれ以上、を有する使い捨て微孔質メンブランフィルターカプセルのサンプル入口に流入させ、ここで上流側の微孔質膜は、微生物の溶離を妨げるような別の表面で遮蔽されていない、ゆるくプリーツ畳みされた膜であり、カプセルは溶離有効空隙容積を有しており；サンプル入口に接続された流体流れから使い捨てカプセルを取り外し；フィルターの上流側に捕捉された全ての沈降物および／または微生物を再懸濁するように攪拌し；最初の溶出液（初期溶出液）の流体および沈降物（以下、特記しない限り「沈降物」は「微生物」を包含する）を溶離有効空隙容積および他の上流側の内部空間からデカンテーションし；カプセルにその全上流側内部容積より少ない量の溶離液を加え；カプセルを激しく攪拌して膜に結合した沈降物をゆるめ；溶離液を沈降物溶出液としてデカンテーションし；必要なら溶離液の添加、攪拌、およびデカンテーションを反復して実質的に完全な沈降物の除去を達成し；して好ましくは、初期溶出液と沈降物溶出液とを一緒にして混合溶出液を形成し；任意に沈降物溶出液および／または初期または混合溶出液を濃縮して濃縮沈降物溶出液を回収し；そして任意に沈降物溶出液または濃縮沈降物溶出液に存在する少なくとも１種の微生物を定量する、ことによる流体に含まれる微生物の定量方法に関する。上記方法に使用できる適当なカプセルは、既に定義したフィルター容積が約66 mL、空隙容積が約130〜160mLのものである。より大きいか、より小さい装置のどちらもまた使用できる。ジアルジアおよび／またはクリプトスポリジウムの定量に適した１態様は、図１に示したようなフィルターカプセルに関して、内径約2. 2cm、外径約4.45cm、長さ12.2cm、表面積約1400cm²、区画された空隙容積約140m L、全上流側容積約264mL（上流側のプリーツ間の流体が占める容積も含む）の、ゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルター要素を含むフィルター要素を有すると説明することができる。この膜は、Gelman Sciences，Inc．からスポール^TM1200微孔質膜として入手できる、細孔寸法1.0μｍのポリエーテルスルホン系の本質的に濡れ性の膜である。この膜は沈降物の実質的部分をはねのける（通過させない）べきである。以上に本発明を一般的に説明したが、例示だけの目的でここに提示し、特に明記しない限り制限を意図していないいくつかの具体例を参照することによりさらなる理解を得ることができる。本発明の方法は、この方法を一般的に理解するために示した図４において番号を付した工程により説明することができる。これらの工程のいくつかは、本明細書で明記したように任意工程であり、また必要に応じて別の工程を追加することもできる。本発明の使い捨て濾過カプセルを使用すると、カートリッジフィルターを使用する場合より方法の融通性がより大きくなる。例えば、溶出液貯液部から一部を、いつでも（例えば、保持された沈降物の最初の攪拌の後または１もしくは２以上の追加の沈降物溶離の後）除去することができる。らせん巻きフィルターカートリッジを用いる方法ではこの利点を与えることができない。図４において、401で、使い捨てフィルターカプセルのサンプル入口をサンプル供給源と接続する。次に、402で、所望のサンプル液量をカプセルに通して濾過する。403で、カプセルをサンプル供給源から取り外し、全体を封入して、実験室（通常はサンプル供給源から離れている）に運び込む。実験室に到着したら、404でカプセルを攪拌してサンプリング中に捕集された沈降物を再懸濁させ、これから保持された沈降物の大半を含有する初期溶出液を得る。この初期溶出液を次いで405で、適当な容器、例えば、遠心ボトルにデカンテーションする。場合によっては、初期溶出液のデカンテーションだけで十分に所望微生物の検査をすることができる。しかし、通常は溶離液によるカプセルの溶離をさらに行う必要がある。工程406では、溶離液をカプセルに導入するが、その量は攪拌中に攪乱を生ずることができるように全内部容積より一般に少ない量とする。407でカプセルを攪拌し、408では、フィルター膜表面に強く付着していた含有沈降物を含む一般に比較的少量の沈降物を含有する沈降物溶出液をデカンテーションする。この時点で、やはり、使用する具体的な試験プロトコルにとって溶離が分析目的に十分であること示す場合があり、その場合には定量を行ってもよい。しかし、一般には、溶離液による１回もしくは２回以上のさらなる溶離、または任意に（場合によって）、決定ブロック409で示すように、410で溶離液による逆フラッシュ洗浄を用いて、フィルター膜表面に強固に付着していたか、またはその細孔内に捕捉されていたかもしれない全ての微粒子および／もしくは微生物をより完全に除去することができる。沈降物の溶離が完全と考えられたら、捕集した溶出液のどれかの定量を実施してもよい。しかし、一般には、411で初期溶出液とその後の溶出液とを合わせて1 つの混合溶出液を形成する。その後、これらの溶出液を工程412で濃縮してもよい。濃縮は、例えば、１または２以上の溶出液を遠心分離した後、遠心分離で得られたペレットを少量の溶液に再懸濁させて再び遠心分離するという形態をとることができる。この方法は例えばASTM P229試験に利用されている。最後に、標的微生物の定量を行う。定量工程413は本発明の方法の一部であるが、その詳細は特に制限されず、そのプロトコルで構想した具体的な試験に応じて選択すればよい。404aおよび408aには、皮下注射器を用いて液の一部を取り出すことにより溶離室空隙容積から得た部分（試料）を試験する任意工程が示されている。例えば、408aでは、試料を用いて、その前の攪拌後の溶離が全ての沈降物を実質的に除去するのに十分であったかどうかを定性的に決定することができる。本発明の方法は、例えば、総重量または他の方法により沈降物を定量するのにも採用することができる。実施例１および２ならびに比較例Ｃ１およびＣ２本発明の使い捨てフィルターカプセルを採用した２系統のサンプリングを、高濁度条件下で使用して、水サンプル中のクリプトスポリジウムおよびジアルジアを定量した。この２系統は、第１系統の試験を濁度22NTUの水で行ったのに対し、第２系統の試験では濁度が62.6NTUとより高かった点で異なっていた。このフィルターを、ASTM P229に規定されている種類のカートリッジフィルターである標準的ならせん巻きポリプロピレンフィルター（フィルタライト<Filterite>U1A 10U型）と比べて試験した。水サンプルはチャタフーチー(Chattahoochee)川から得た。 ASTM P229提案試験法を下の表１に示したように修正し、微生物の計数には酢酸セルロースディスクフィルターでの捕集ではなく、顕微鏡スライドなすりつけ標本（スミアー）を用いた。ASTM P229情報採集規則(Information Collection R ule)では、最大沈降物を１mLのパーコル(Percoll)／スクロース傾斜浮上で処理することができる。高濁度の水を各フィルターに流した。らせん巻きポリプロピレンフィルターは、ジアルジアおよびクリプトスポリジウムのEPA提案試験に規定されているようにして取り出し、切り離し、洗浄し、そしてスタマキングした。本発明のカプセルは、５分間攪拌（渦式攪拌）し、沈降物を溶離して初期溶出液を形成し、カプセルの上流側部分（沈降物側）を、100mLのリン酸緩衝溶離液で２回、各回５分間の攪拌時間で洗浄して、２つの連続した溶出液を形成した。初期溶出液とその後の溶出液を混合し、ASTM P229プロトコルによるのと同様に遠心分離し、上清を捨てて廃棄し、沈降物のペレットを再懸濁させ、第２の遠心分離により濃縮した。サンプリングのパラメータと結果を下の表１に示す。表１からわかるように、実施例１および２で使用した使い捨てカプセルフィルターは、並行比較試験Ｃ１およびＣ２で用いたらせん巻きフィルターによる採集量のそれぞれ約20％および５％の量の採集にしか使用しなかったが、リットル当たり捕集した沈降物はそれぞれ1.86倍および1.3倍多く、ジアルジア回収率はそれぞれ17.6倍および5.9倍高かった。従って、本発明の方法にとって、ジアルジアの検出感度はおよそ６〜18倍という予想外の増大を示し、一方で、サンプル処理量はかなり少なくてすみ；未濃縮の再懸濁した沈降物（初期溶出液、沈降物溶出液）はずっと少なく（約３Lに対して約300mL）；そして定量に利用した沈降物ペレットのパーセンテージはより大きかった（従って、より高い信頼性を生ずる筈である）。クリプトスポリジウムはどのサンプルでも検出されなかった。実施例３〜６本発明の４つの使い捨てカプセルフィルターを、ジアルジアおよびクリプトスポリジウムの注射により攻撃し、既に説明したようにして処理した。検出限度は生物（虫体）５個であり；表中のBDL＝検出限界未満である。全ての値を端数を切り捨てて報告した。結果を下の表２に示す。表２からわかるように、ジアルジアとクリプトスポリジウムの両方とも、平均して緩衝剤含有脱イオン水中で90〜95％、そして未処理（生）の表層水中では65 〜79％と、回収率が非常に高い。実施例７および比較例Ｃ３本発明の使い捨てカプセルフィルターと、ASTM P229の要件を満たすフィルター(Filterite，U1A10U)を用いて、チャプレン湖の水におけるジアルジアとクリプトスポリジウムのオーシストについて検査した。結果を次の表３に示す。本発明の方法およびカプセルは23％の水しかサンプリングしないにもかかわらず、標準試験のペレット容積の67％を生じた。らせん巻きフィルターの100ガロン(378.5L)あたりの沈降物回収量がが0.9mLであったのに対し、本発明のカプセルは100ガロン(378.5L)あたり2.7mLの沈降物を回収した。実施例７および比較例Ｃ３のカプセルフィルターの濾過パラメータを次の表４に示す。実施例８〜15 これらの実施例の目的は、カプセルフィルターからのジアルジアおよびクリプトスポリジウムの抽出を最適化および自動化することであった。この試験操作は、本発明の６個の使い捨てカプセルフィルターに、マルチポート(multiport)再循環チャレンジ用マニホルドを用いて新鮮なランブル鞭毛虫(Giardia lamblia) のシストおよびクリプトスポリジウム・パルバム(Cryptosporidium parvum)のオーシストで同時に攻撃することを含む。カプセルフィルターが捕捉した沈降物を Lab-Line手首運動式振盪機(wrist action shaker)を用いて２つの方法で３回溶離した。抽出液を、ASTM P229の修正プロトコルを用いて遠心分離し、染色し、顕微鏡検査した。対照フィルターも同時に処理した。いくつかの手首運動式振盪機を、活発な手作業での手首運動攪拌を模擬するその能力について評価した。Lab-Line 3587-4型が許容できることが判明した。攻撃の装備は、試験生物を含んだ55ガロン(208.2L)のポリプロピレン製貯液槽を備えていた。試験生物をポンプによりディジタル流量計、スタティックミキサー、マルチポート・マニホルドを通過させ、貯液槽に戻した。この再循環用マニホルドを通過する流量を11gpm（41.6lpm）の一定に保持した。６個のカプセルフィルターと２個の対照フィルターをポンプでマルチポート・マニホルドに接続した。マニホルドの各ポートはそれぞれ１gpm（3.8lpm）の流れ制御バルブを備えていた。各フィルターの流出液を20Lの容器に集めた。 55ガロン(208.2L)の貯液槽に脱イオン水と５×10⁶個ずつのランブル鞭毛虫のシストおよびクリプトスポリジウム・パルバムのオーシストを満たした。生物は、攻撃の３日前にWaterborne，Inc．（米国ルイジアナ州ニューオルリーンズ）から高純度ホルマリン保存調製物として入手した。試験生物の溶液をよく混合した後、スタティックミキサーにより15gpm（56.８lpm）で15分間再循環させた。その後、マルチポート・マニホルドに６個のカプセルフィルターと２個の対照フィルターを取り付けた。対照フィルターは、１μｍのポリカーボネート製中性子トラックエッチング処理膜(neutron track etched membrane)を取り付けた47m mポリテトラフルオロエチレン(PTFE;テフロン^TM)インライン(in-line)フィルターホルダーであった。この再循環系を通る試験生物の流れを開始し、流れをフィルターへの入口圧力が36psi(248pKa)となるように調整した。全ての調整を実施した後、各フィルターへのバルブを開き、攻撃を開始した。各フィルターをアクリル20Lの混合物で攻撃した。流出液から集めた水の全量を計量し、容器自体の重量を差し引いて、抽出液量を算出した。高速再循環「排出(bleed off)」型マニホルドを用いると、流れ動力学に何ら偏りを伴わずに非常に均質な攻撃を確保し、各フィルターへの一様な攻撃を確実にすることができる。２つの別の対照フィルターは、マルチポート・マニホルドから１リットルのPTFE製容器への１リットルの攻撃用溶液の２分間での排出による攻撃の最初と最後に集めた。各カプセルには、下記溶離緩衝液120mLを満たした：単一強度PBS（ASTM P229、pH7.4）、0.01％ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)（ w/v）、0.0003％Tween 80^TM(v/v)、および0.015％Antifoam B^TM(v/v)。 SDSの濃度を、PBSにより供給されるナトリウムイオンを考慮して算出し、タンパク質変性に対する臨界ミセル濃度の20％になるように調整した(Bollag and Ed elstein，Protein Methods，1994)。これより高い濃度は望ましくないタンパク質および／またはエピトープ変性を生じて、免疫蛍光抗体染色の効力を減ずる恐れがある。３つのカプセルフィルターをlab line手首運動式振盪機にクランプ止めした。振盪機のアームをフィルターが水平位置になるように調整した。振盪機を最高振盪速度の90％で５分間運転した。５分後、フィルターを振盪機から取り出し、入口のカバーを取り外した。抽出液を滅菌250mLコニカル遠心管に無菌投入した。再び120mLの溶離緩衝液を各フィルターに加え、先の位置から180°の向きで振盪機にクランプ止めした。振盪機を再び５分間運転し、抽出液を同じ250mLコニカル遠心ボトルに移した。この操作を、ただ１つの例外（振盪時間を両方の攪拌とも10分間に増大した）を除いて残り３つのフィルターに対しても繰り返した。 250mLのコニカルボトルを1100x gで20分間遠心分離した。40mLを残して全部を吸引して捨てた。残りの40mLを滅菌50mLコニカル遠心管に無菌移入した。250mL のボトルを５mLずつの溶離液で２回すすぎ、対応する50mLの遠心管に移した。 PCTEメンブランフィルターの方は、PTFEフィルターホルダーから無菌的に取り出し、50mLの溶離緩衝液に移した。フィルターを、10分間の振盪と、３分間の渦式攪拌とで、間に短い超音波処理を入れて抽出した。 PTFEボトルに入っている１リットルのグラブ(grab)サンプルは、PBSで緩衝化し、100％ホルマリン50mLで保存した以外は何の処理も受けなかった。全サンプルの定量用一定量をASTM P229の染色手順を用いて３回染色した。生物数を蛍光顕微鏡法を用いて300での完全スライド走査により数えた。下記は、５分の振盪時間を用いたジアルジアおよびクリプトスポリジウム攻撃と抽出操作の結果である。対照平均回収数はグラブサンプルとPCTE膜計数値を用いて求めた。下記は、10分の振盪時間を用いたジアルジアおよびクリプトスポリジウム攻撃と抽出操作の結果である。対照平均回収数はグラブサンプルとPCTE膜サンプルの両方から得られたデータを用いて求めた。既に概説したのと同じ攻撃操作を用いて、攻撃用の水にハドソン川の水の沈降物を、１リットルの攻撃濃度が40リットルのハドソン川沈降物に等しくなるように接種した。この攻撃用混合物約18リットルでカプセルフィルターを攻撃し、Lab Line手首運動式振盪機3587-4型を用いて、一方のフィルターについては５分間の手順で、他方のフィルターについては10分間の手順で抽出処理を行った。下記は自動化抽出操作を用いた生水攻撃の結果である。実施例および表からわかるように、らせん巻きフィルターの代わりに、本発明の使い捨てフィルターカプセルを使用すると、より小さい生サンプル量、より小さい洗浄（溶離）液量、そしてより高い割合のペレットを試験に実際に使用する、という利点を与えると同時に、微生物試験の精度の著しいかつ予想外の高さへの増大を生ずる。さらに、カプセルから流出する流体の濁度は低く、これは流出液が極めて濁ったままであるカートリッジフィルターとは異なり、著しい量の沈降物が捕集されることを示している。容易に密封でき、輸送中の損傷を受けにくい小型の容器にサンプルを捕集することができるため、野外使用の容易さと信頼性が著しく向上する。既知濃度の攻撃用微生物で本発明のカプセルを試験すると、28％以上、平均で40％以上の一定した回収率を生じたのに対し、ASTM提案法ではわずか約３％の回収率しか得られなかった。切断、セグメント化、洗浄、攪拌および大量(3L)の多数回遠心操作がなくなることによる検査時間の短縮も、特に実験室員への感染の危険性と有害廃棄物の廃棄がずっと少なくなることを考慮すると、顕著な利点である。「さらなる濃縮」とは、混合した洗液または溶出液をさらに濃縮する操作を意味する。実施例に示したように、このさらなる濃縮は、遠心分離による沈降物ペレット化と、場合によりこのペレットを再懸濁させ、必要に応じてより小容量の遠心管内で再遠心分離して沈降物ペレット量をより正確に測定する操作を含みうる。「定量」とは、存在する微生物の量を測定する方法を意味する。ジアルジアおよびクリプトスポリジウムについては、ASTM P229または公開されたEPA試験法を用いることができる。上に引用した刊行物に記載されている分子法も採用できる。定量の実際の方法および詳細は、浮上沈降物のなすりつけ標本を用いた定量を除いて、本発明の一部を構成しない。「浮上沈降物」とは、所望の比重（ジアルジアおよびクリプトスポリジウムについては、ASTM試験法P229に記載されているように1.09〜1.10）を持つパーコル／スクロース溶液またはその均等物を用いた浮上を意味する。本明細書で用いた定量とは、他の場合には定性試験と考えられるかもしれない存在／不存在試験も意味している。ここに引用した全ての刊行物を、各刊行物を個別かつ具体的に援用すると表示し、ここにその全体を述べたと仮定した場合と同程度にここに援用する。以上に本発明を詳述したが、ここに説明した本発明の思想または範囲から逸脱せずにこれに多くの変更および改変を加えることができることは当業者には明らかであろう。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】平成１０年７月２２日（１９９８．７．２２）【補正内容】請求の範囲１．下記工程を含む、微生物の含有が疑われる流体サンプル中の微生物を定量する方法： (a) 微生物の含有が疑われるサンプル供給源を使い捨て濾過カプセルのサンプル入口に接続し； (b) 既知量の前記微生物含有が疑われる流体サンプルを、前記使い捨て濾過カプセルに通して流し；該使い捨て濾過カプセルは、サンプル入口および出口を備えたポリマー製ハウジングからなり、このサンプル入口と出口の間に、膜を備えた遮蔽されていないフィルター要素が、該サンプル入口から該出口に向かって流れる全流体が必ず該フィルター要素を通過するように配置されており、ここで微生物を含有する沈降物が該フィルター膜の上流側に捕捉され、該カプセルは溶離有効空隙容積を有しており； (c) 該使い捨て濾過カプセルの上流側からの液体および沈降物を、初期溶出液として該サンプル入口からデカンテーションし； (d) 該使い捨て濾過カプセルの該上流側に少なくとも１回の溶離液を加え、該使い捨て濾過カプセルを攪拌して残留する沈降物の少なくとも一部を再懸濁させ、沈降物溶出液をデカンテーションし； (e) 場合により、工程(d)を反復してさらに溶出液をデカンテーションし； (f) 場合により、前記初期溶出液と前記その後の溶出液の１または２以上とを合わせて混合溶出液を形成し； (g) 場合により、該初期溶出液、該その後の溶出液、および／または該混合溶出液の１または２以上を濃縮して濃縮溶出液を形成し；そして (h) 該初期溶出液、該その後の溶出液、該混合溶出液および／または該濃縮溶出液から１種または２種以上の標的微生物を定量する。２．工程(f)が該初期溶出液と該その後の溶出液の１または２以上とを合わせて混合溶出液を形成することからなる、請求の範囲第１項記載の方法。３．工程(g)が該混合溶出液を遠心分離して微生物含有沈降物の１または２以上のペレットを形成することからなる、請求の範囲第２項記載の方法。４．前記１または２以上のペレットを液体に再懸濁させ、再遠心分離して再遠心ペレットを形成する、請求の範囲第３項記載の方法。５．微生物が、ジアルジア、クリプトスポリジウム、およびジアルジアとクリプトスポリジウムの両者よりなる群から選ばれる請求の範囲第４項記載の方法。６．前記再遠心ペレットの少なくとも一部を用いて浮上沈降物を形成し、この浮上沈降物を分子法によりジアルジアおよび／またはクリプトスポリジウムについて定量する、請求の範囲第５項記載の方法。７．前記フィルター要素がゆるくプリーツ畳みされた濾過膜からなり、この膜の各プリーツが、この膜を通過しなかった微生物の実質的な回収を可能にするのに有効な間隔で離間している、請求の範囲第１項記載の方法。８．前記フィルター要素がゆるくプリーツ畳みされた微孔質濾過膜からなり、ぶつかり合う隣接プリーツ表面積が平均して該表面積の25％以下である、請求の範囲第１項記載の方法。９．隣接プリーツ表面積が実質的に全くぶつかり合っていない請求の範囲第７項記載の方法。 10．前記プリーツ畳み微孔質メンブランフィルターが、微生物の再懸濁が可能なプリーツ畳み膜からなる、請求の範囲第７項または第８項記載の方法。 11．前記フィルター要素が平面フィルターからなる、請求の範囲第１項記載の方法。 12．前記フィルター要素が中空繊維フィルターの束からなり、この繊維フィルターが該膜を通過しなかった微生物の実質的な回収を可能にするのに有効な間隔で離間している、請求の範囲第１項記載の方法。 13．前記使い捨て濾過カプセルが、取り外し可能なシールをさらに備え、このシールを取り外すと該濾過膜が露出するようになる、請求の範囲第１項記載の方法。 14．微生物含有流体サンプル中の微生物の定量に用いるのに適した使い捨て濾過カプセルであって、 (a) 密封（シール）可能なサンプル入口と密封可能な出口とを備えたポリマー製ハウジング； (b) ゆるくプリーツ畳みされた膜を備えたフィルター要素；但し、該膜は、最小の標的微生物がこの膜に実質的に保持されるような細孔寸法を有し、かつ該サンプル入口から流入して該出口から流出する流体が必ず該膜を通って流れるように該サンプル入口と該出口との間に配置されており、該膜と該サンプル入口との間の空間が上流側での沈降物保持空隙を形成しており、この膜はその下流側でマクロポーラスポリマー支持体により支持されており、該ゆるくプリーツ畳みされた膜は、濾過中に該膜上に堆積した沈降物の再懸濁を妨げるような遮蔽性の表面をその上流側に全く持っておらず； (c) 前記のゆるくプリーツ畳みされた膜のフィルター容積の少なくとも2.2倍の幾何学的容積を持つ、別個の溶離有効空隙容積； (d) 任意に、前記ポリマー製ハウジングを介して前記上流側の沈降物保持空隙と連通している空気パージ用バルブ； (e) 任意に、湿潤時に膜がハウジング内面と実質的に接触して閉塞を生ずることができないように膜の上流側にかぶせた適当な材料からなる非遮蔽性のメッシュ；を備えた使い捨て濾過カプセル。 15．微生物含有流体サンプル中の微生物の定量に用いるのに適した濾過カプセルであって、 (a) 少なくとも入口と出口とを有するハウジング； (b) 標的微生物が膜に実質的に保持されるような細孔寸法を持った膜を備えたフィルター要素、この膜は上流側と下流側を有し、該入口から流入して該出口から流出する流体が必ずこの膜を通って流れるように該入口と該出口との間に配置されており、該膜の上流側は、濾過中にこの膜上に堆積した微生物の再懸濁を妨げるような遮蔽性の構造物を実質的に有していない；を備えた濾過カプセル。 16．フィルター要素の少なくとも一部にシールされている少なくとも１つの末端キャップを備えた、請求の範囲第15項記載のカプセル。 17．該空気流出（パージ）用バルブがさらに、皮下注射針が穿剌可能なエラストマー製シールを備えている請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過カプセル。 18．該カプセルがさらに前記ポリマー製ハウジングにシールされた末端キャップを備えている、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過カプセル。 19．該末端キャップが前記ポリマー製ハウジングに可逆的にシールされている、請求の範囲第18項記載の使い捨て濾過装置。 20．該末端キャップが該ポリマー製ハウジングに気密シールされている請求の範囲第18項記載の使い捨て濾過カプセル。 21．該ゆるくプリーツ畳みされた微孔質膜の隣接プリーツ間の空間が、最も狭い地点で、隣接プリーツ表面間で標的微生物／微粒子が回収を阻害するくさびを生ずるのを防止することにより該微生物／微粒子の捕集が最大になるような寸法のものであることを特徴とする、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置。 22．該ゆるくプリーツ畳みされた膜が、ぶつかり合う隣接プリーツの表面積が 25％以下であることを特徴とする、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置。 23．該ゆるくプリーツ畳みされた膜が、ぶつかり合う隣接プリーツの表面積が 10％以下であることを特徴とする、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置。 24．該メンブランフィルター要素が微生物の再懸濁が可能なプリーツ畳み膜からなる、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置。 25．該別個の溶離有効空隙容積が、該装置の軸線方向から見えるように、該ポリマー製ハウジングの内壁と該フィルター要素の上流側の表面との間の空間により形成されている、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置。 26．該別個の空隙容積が該フィルター要素の端面と該ポリマー製ハウジングの端面との間に位置する、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置。 27．該別個の溶離有効空隙容積が、該カプセルの軸線方向から見えるように該ポリマー製ハウジングの内壁と該フィルター要素の上流側の表面との間の空間、および該フィルター要素の端面と該ポリマー製ハウジングの端面との間の空間、により形成されている、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置。 28．下記から構成される請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置： (a) 開放端部と閉鎖端部を有する中空円筒形のポリマー製ハウジング、該閉鎖端部には、この中空円筒形ポリマー製ハウジングの中空内部と連通するサンプル入口通路が成形されており； (b) 該中空円筒形ポリマー製ハウジングの該開放端部にシール係合するようにした末端キャップ、この末端キャップには該中空内部と連通する出口通路が成形されており、この末端キャップはさらに円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされたメンブランフィルターの一端の第１気密シールとシール係合するようにしてあり、このフィルターは支持するマクロポーラスポリマー製支持体の外部に配置されており、該第１気密シールは、この第１気密シールを通って該末端キャップの該出口通路から該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされたメンブランフィルターの下流側の内部への流体連通を可能にする通路を有しており、該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされたフィルターはさらに第２の気密シール端部を有しており、この第２の気密シール端部と該サンプル入口通路との間に流体連通路が全く存在せず、該サンプル入口通路から流入した流体は該出口を経て該ハウジングから出る前に必ず該膜を通って流れるようになっており；および (c) 該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターのフィルター容積の大きさの少なくとも約2.2倍の幾何学的容積を持ち、該中空円筒形ポリマー製ハウジングの一端と該第２の気密シールとの間に位置する、空隙容積。 29．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、ピークが該支持体から最も離れている位置でのプリーツの二辺間の夾角が、平均して約３°以上である、請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 30．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、ピークが該支持体から最も離れている位置でのプリーツの二辺間の夾角が、平均して約４°以上である、請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 31．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、プリーツの二辺間の夾角が、ぶつかり合う隣接プリーツ表面積が平均して25％以下となるようなものである、請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 32．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、プリーツの二辺間の夾角が、ぶつかり合う隣接プリーツ表面積が平均して10％以下となるようなものである、請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 33．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、プリーツの二辺間の夾角が、ぶつかり合う隣接プリーツの表面積が実質的にないようなものである、請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 34．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、プリーツの二辺間の夾角が、１×10⁵〜５×10⁵の量の攻撃ジアルジアの回収率が 70％より大となるようなものである、請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 35．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、プリーツの二辺間の夾角が、１×10⁵〜５×10⁵の量の攻撃ジアルジアの回収率が 95％より大となるようなものである、請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 36．該遮蔽されていないフィルター要素が、平面型微孔質膜と、この微孔質膜の下流側でこれに隣接した、この微孔質膜を流体サンプルの圧力に抗して支持するのに有効な支持グリッド（格子板）からなる、請求の範囲第１項記載の方法。 37．フィルター要素が該微孔質膜の上流側でこの微孔質膜に隣接した閉じ込めグリッドをさらに備えた、請求の範囲第36項記載の方法。 38．該閉じ込めグリッドが逆フラッシュ洗浄の圧力に耐えるように該膜を支持する請求の範囲第37項記載の方法。 39．cm³単位での空隙容積がcm²単位での該膜の表面積の少なくとも0.5である、請求の範囲第36項記載の方法。 40．下記工程を含む、沈降物含有流体サンプル中の沈降物を定量する方法： (a) 沈降物を含有するサンプル供給源を使い捨て濾過カプセルのサンプル入口に接続し； (b) 既知量の前記沈降物含有流体サンプルを、前記使い捨て濾過カプセルに通して流し；該使い捨て濾過カプセルは、サンプル入口および出口を備えたポリマー製ハウジングからなり、このサンプル入口と出口の間に、微孔質膜を備えた遮蔽されていないフィルター要素が、該サンプル入口から該出口に向かって流れる全流体が必ず該フィルター要素を通過するように配置され、沈降物は該微孔質膜の上流側に捕捉され、該カプセルは溶離有効空隙容積を有しており； (c) 該使い捨て濾過カプセルの上流側からの液体および沈降物を、初期溶出液として該サンプル入口からデカンテーションし； (d) 該使い捨て濾過カプセルの該上流側に少なくとも１回の溶離液を加え、該使い捨て濾過カプセルを攪拌して残留する沈降物の少なくとも一部を再懸濁させ、沈降物溶出液をデカンテーションし； (e) 場合により、工程(d)を反復してさらに沈降物溶出液をデカンテーションし； (f) 場合により、該初期溶出液と該沈降物溶出液の１または２以上を合わせて混合溶出液を形成し； (g) 場合により、該初期溶出液、該沈降物溶出液、および／または該混合溶出液の１または２以上を濃縮して、濃縮溶出液を形成し；そして (h) 該初期溶出液、該沈降物溶出液、該混合溶出液および／または該濃縮溶出液からの沈降物を定量する。 41．定量工程が沈降物の総重量を測定することを含む請求の範囲第40項記載の方法。 42．定量工程の前に該膜を逆フラッシュ洗浄することをさらに含む、請求の範囲第１項記載の方法。 43．下記工程を含む、微生物の含有が疑われる流体サンプル中の微生物を定量する方法： (a) 既知量の微生物含有が疑われる流体サンプルを、上流側と下流側とを持ち、膜を備えた遮蔽されていないフィルター要素を収容したハウジングからなる濾過カプセルを通過させて、微生物を含有する沈降物を該フィルター膜の上流側に捕捉し、ここで該フィルター要素は、濾過カプセルを通って流れる全流体がフィルター要素を通過するように配置されており； (b) 該フィルター要素の上流側からの液体および沈降物を含む初期溶出液をハウジングから流出させ； (c) 該フィルター要素の該上流側に少なくとも１回の溶離液を加え、この濾過カプセルを攪拌して残留する沈降物の少なくとも一部を再懸濁させ； (d) 該フィルター要素の上流側からの溶離液と再懸濁した沈降物を含む少なくとも１つの沈降物溶出液をハウジングから流出させ；そして (e) 該初期溶出液および／または該少なくとも１つの沈降物溶出液から１種または２種以上の標的微生物を定量する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．微生物の含有が疑われる流体サンプル中の微生物を定量するための改良方法であって、 (a) 微生物の含有が疑われるサンプル供給源を使い捨て濾過カプセルのサンプル入口に接続し； (b) 既知量の前記微生物含有が疑われる流体サンプルを、前記使い捨て濾過カプセルに通して流し；該使い捨て濾過カプセルは、サンプル入口および出口を備えたポリマー製ハウジングからなり、このサンプル入口と出口の間に、遮蔽されていないメンブランフィルター要素が、該サンプル入口から該出口に向かって流れる全流体が必ず該メンブランフィルターを通過するように配置され、ここで微生物を含有する沈降物は該フィルター膜の上流側に捕捉され、該カプセルは溶離有効空隙容積を有しており； (c) 該使い捨て濾過カプセルの上流側から液体および沈降物を、初期溶出液として該サンプル入口からデカンテーションし； (d) 場合により、該使い捨て濾過カプセルの該上流側に少なくとも1容積の溶離液を加え、該使い捨て濾過カプセルを攪拌して残留する沈降物の少なくとも一部を再懸濁させ、沈降物溶出液をデカンテーションし； (e) 場合により、工程(d)を反復してさらに溶出液をデカンテーションし； (f) 場合により、前記初期溶出液と前記その後の溶出液の１または２以上を合わせて、混合溶出液を形成し； (g) 場合により、該初期溶出液、該その後の溶出液、および／または該混合溶出液の１または２以上を濃縮して、濃縮溶出液を形成し；そして (h) 該初期溶出液、該その後の溶出液、該混合溶出液および／または該濃縮溶出液からの１種または２種以上の標的微生物を定量する；ことを含む改良方法。２．工程(f)が該初期溶出液と該その後の溶出液の１または２以上を合わせて混合溶出液を形成することからなる、請求の範囲第１項記載の方法。３．工程(g)が該混合溶出液を遠心分離して微生物含有沈降物の１または２以上のペレットを形成することからなる、請求の範囲第２項記載の方法。４．前記１または２以上のペレットを液体に再懸濁させ、再遠心分離して再遠心ペレを形成する、請求の範囲第３項記載の方法。５．微生物が、ジアルジア、クリプトスポリジウム、およびジアルジアとクリプトスポリジウムの両者よりなる群から選ばれる請求の範囲第４項記載の方法。６．前記再遠心ペレットの少なくとも一部を用いて浮上沈降物を形成し、この浮上沈降物を分子法によりジアルジアおよび／またはクリプトスポリジウムについて定量する、請求の範囲第５項記載の方法。７．前記フィルター要素がゆるくプリーツ畳みされた濾過膜からなり、この膜の各プリーツが、この膜を通過しなかった微生物の実質的な回収を可能にするのに有効な間隔で離間している、請求の範囲第１項記載の方法。８．前記フィルター要素がゆるくプリーツ畳みされた微孔質濾過膜からなり、ぶつかり合っている隣接プリーツ表面積が平均して該表面積の25％以下である、請求の範囲第１項記載の方法。９．隣接プリーツ表面積が実質的に全くぶつかり合っていない請求の範囲第７項記載の方法。 10．前記プリーツ畳み微孔質メンブランフィルターが、微生物再懸濁可能なプリーツ畳み膜からなる、請求の範囲第１項記載の方法。 11．前記フィルター要素が平面フィルターからなる、請求の範囲第１項記載の方法。 12．前記フィルター要素が中空繊維フィルターの束からなり、この繊維フィルターが該膜を通過しなかった微生物の実質的な回収を可能にするのに有効な間隔で離間している、請求の範囲第１項記載の方法。 13．前記使い捨て濾過カプセルが、取り外し可能なシールをさらに備え、このシールを取り外すと該濾過膜が露出するようになる、請求の範囲第１項記載の方法。 14．微生物含有流体サンプル中の微生物の定量に用いるのに適した使い捨て濾過カプセルであって、 (a) 密封（シール）可能なサンプル入口と密封可能な出口とを備えたポリマー製ハウジング； (b) ゆるくプリーツ畳みされた膜からなるフィルター要素；但し、該膜は、最小の標的微生物がこの膜に実質的に保持されるような細孔寸法を有し、かつ該サンプル入口から流入して該出口から流出する流体が必ず該膜を通って流れるように該サンプル入口と該出口との間に配置されており、該膜と該サンプル入口との間の空間が上流側での沈降物保持空隙を形成しており、この膜はその下流側でマクロポーラスポリマー支持体により支持されており、該ゆるくプリーツ畳みされた膜は、濾過中に該膜上に付着した沈降物の再懸濁を妨げるような遮蔽性の表面をその上流側に全く持っておらず； (c) 前記のゆるくプリーツ畳みされた膜のフィルター容積の少なくとも2.2倍の幾何学的容積を持つ、別個の溶離有効空隙容積； (d) 任意に、前記ポリマー製ハウジングを介して前記上流側の沈降物保持空隙と連通している空気パージ用バルブ； (e) 任意に、湿潤時に膜がハウジング内面と実質的に接触して閉塞を生ずることができないように膜の上流側にかぶせた適当な材料からなる非遮蔽性のメッシュ；を備えた使い捨て濾過カプセル。 15．フィルター要素が平面型フィルターである、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過カプセル。 16．フィルター要素が中空繊維フィルターの束からなり、この繊維フィルターが該膜を通過しなかった微生物の実質的な回収を可能にするのに有効な間隔で離間している、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過カプセル。 17．該空気流出（パージ）バルブがさらに、皮下注射針の穿剌可能なエラストマー製シール部材を備えている請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過カプセル。 18．該カプセルがさらに前記ポリマー製ハウジングにシールされた末端キャップを備えている、請求の範囲第１項記載の使い捨て濾過カプセル。 19．該末端キャップが前記ポリマー製ハウジングに可逆的にシールされている、請求の範囲第18項記載の使い捨て濾過装置。 20．該末端キャップが該ポリマー製ハウジングに気密シールされている請求の範囲第18項記載の使い捨て濾過カプセル。 21．該ゆるくプリーツ畳みされた微孔質膜の隣接プリーツ間の空間が、最も狭い地点で、隣接プリーツ表面間で標的微生物／微粒子の回収を阻害するくさびができるのを防止することにより該微生物／微粒子の捕集が最大になるような寸法のものであることを特徴とする、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置。 22．該ゆるくプリーツ畳みされた膜が、ぶつかり合っている隣接プリーツの表面積が25％以下であることを特徴とする、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置。 23．該ゆるくプリーツ畳みされた膜が、ぶつかり合っている隣接プリーツの表面積が10％以下であることを特徴とする、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置。 24．該メンブランフィルター要素が微生物再懸濁可能なプリーツ畳み膜からなる、請求の範囲第１項記載の使い捨て濾過装置。 25．該別個の溶離有効空隙容積が、該装置の軸線方向から見えるような、該ポリマー製ハウジングの内壁と該フィルター要素の上流側表面との間の空間により形成されている、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置。 26．該別個の空隙容積が該フィルター要素の端面と該ポリマー製ハウジングの端面との間に位置する、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置。 27．該別個の溶離有効空隙容積が、該カプセルの軸線方向から見えるような該ポリマー製ハウジングの内壁と該フィルター要素の上流側表面との間の空間、および該フィルター要素の端面と該ポリマー製ハウジングの端面との間の空間により形成されている、請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置。 28．下記から構成される請求の範囲第14項記載の使い捨て濾過装置： (a) 開放端部と閉鎖端部を有する中空円筒形のポリマー製ハウジング、該閉鎖端部には、この中空円筒形ポリマー製ハウジングの中空内部と連通するサンプル入口通路が成形されており； (b) 該中空円筒形ポリマー製ハウジングの該開放端部にシール係合するようにした末端キャップ、この末端キャップには該中空内部と連通する出口通路が成形されており、この末端キャップはさらに円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされたメンブランフィルターの一端の第１気密シールとシール係合するようにしてあり、このフィルターは支持するマクロポーラスポリマー製支持体の外部に配置されており、該第１気密シールは、この第１気密シールを通って該末端キャップの該出口通路から該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされたメンブランフィルターの内部の下流側への流体連通を可能にする通路を有しており、該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされたフィルターはさらに第２の気密シール端部を、この第２の気密シール端部と該サンプル入口通路との間に流体連通路が全く存在せず、該サンプル入口通路から流入した流体は該出口を経て該ハウジングから出る前に必ず該膜を通って流れるように有しており；および (c) 該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされたメンブランフィルターのフィルター容積の大きさの少なくとも約2.2倍の幾何学的容積を持ち、該中空円筒形ポリマー製ハウジングの一端と該第２の気密シールとの間に位置する、空隙容積。 29．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、ピークが該支持体から最も離れている位置でのプリーツの二辺間の夾角が、平均して約３°以上である、請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 30．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、ピークが該支持体から最も離れている位置でのプリーツの二辺間の夾角が、平均して約４°以上である、請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 31．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、プリーツの二辺間の夾角が、ぶつかり合う隣接プリーツ表面積が平均して25％以下となるようなものである、請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 32．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、プリーツの二辺間の夾角が、ぶつかり合う隣接プリーツ表面積が平均して10％以下となるようなものである、請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 33．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、プリーツの二辺間の夾角が、ぶつかり合っている隣接プリーツの表面積が実質的にないようなものである、請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 34．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、プリーツの二辺間の夾角が１×10⁵〜５×10⁵の量の攻撃ジアルジアの回収率が70 ％より大となるようなものである請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 35．該円筒形配置のゆるくプリーツ畳みされた微孔質メンブランフィルターの内径が約２〜３cmであり、該プリーツの半径方向の深さが約0.75〜２cmであり、プリーツの二辺間の夾角が１×10⁵〜５×10⁵の量の攻撃ジアルジアの回収率が95 ％より大となるようなものである請求の範囲第28項記載の使い捨て濾過装置。 36．該遮蔽されていないフィルター要素が、平面型微孔質膜と、この微孔質膜の下流側でこれに隣接した、この微孔質膜を流体サンプルの圧力に抗して支持するのに有効な支持グリッド（格子板）からなる、請求の範囲第１項記載の方法。 37．フィルター要素が該微孔質膜の上流側でこの微孔質膜に隣接した閉じ込めグリッドをさらに備えた、請求の範囲第36項記載の方法。 38．該閉じ込めグリッドが逆フラッシュ洗浄の圧力に耐えるように該膜を支持する請求の範囲第37項記載の方法。 39．cm³単位での空隙容積がcm²単位での該膜の表面積の少なくとも0.5である、請求の範囲第36項記載の方法。 40．沈降物含有流体サンプル中の沈降物を定量するための改良方法であって、 (a) 沈降物を含有するサンプル供給源を使い捨て濾過カプセルのサンプル入口に接続し； (b) 既知量の前記沈降物含有流体サンプルを、前記使い捨て濾過カプセルに通して流し；該使い捨て濾過カプセルは、サンプル入口および出口を備えたポリマー製ハウジングからなり、このサンプル入口と出口の間に、遮蔽されていない微孔質メンブランフィルター要素が、該サンプル入口から該出口に向かって流れる全流体が必ず該微孔質メンブランフィルターを通過するように配置され、沈降物は該フィルター膜の上流側に捕捉され、該カプセルは溶離有効空隙容積を有しており； (c) 該使い捨て濾過カプセルの上流側から液体および沈降物を、初期溶出液として該サンプル入口からデカンテーションし； (d) 場合により、該使い捨て濾過カプセルの該上流側に少なくとも１容積の溶離液を加え、該使い捨て濾過カプセルを攪拌して残留する沈降物の少なくとも一部を再懸濁させ、沈降物溶出液をデカンテーションし； (e) 場合により、工程(d)を反復してさらに沈降物溶出液をデカンテーションし； (f) 場合により、該初期溶出液と該沈降物溶出液の１または２以上を合わせて混合溶出液を形成し； (g) 場合により、該初期溶出液、該沈降物溶出液、および／または該混合溶出液の１または２以上を濃縮して、濃縮溶出液を形成し；そして (h) 該初期溶出液、該沈降物溶出液、該混合溶出液および／または該濃縮溶出液からの沈降物を定量する；ことを含む改良方法。 41．定量工程が沈降物の総重量を測定することを含む請求の範囲第40項記載の方法。 42．定量工程の前に該膜を逆フラッシュ洗浄することをさらに含む、請求の範囲第１項記載の方法。