KR19990080373A - 사료 첨가제용 미생물 제제 및 그 제조방법 - Google Patents

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Abstract

기탁번호 제 KCTC 0408BP 호로 기탁되어 있고, 가축의 사료 첨가제로 사용되는 락토바실러스 애시도필러스, 락토바실러스 플란타럼, 사카로마이세스 세레비지에 및 아스퍼질러스 오리자에로 이루어진 미생물 제제 YFA-3는 가축의 비육과 소화를 촉진시키고 악취 발생 및 보건 위생상의 문제점을 극소화할 수 있고 일정 기간 후 효과적으로 소화기관내 정상 균총으로 정착할 수 있으며 축분의 발효(퇴비화)에 유익하고 자체 생산이 용이하며 경제성이 있다.

Description

사료 첨가제용 미생물 제제 및 그 제조방법
[산업상 이용 분야]
본 발명은 사료 첨가제용 미생물 제제 및 그 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 가축의 비육과 소화를 촉진시키고 축산 폐기물에 의한 환경에의 악영향을 저감시키는 사료 첨가제용 미생물 제제 및 상기 미생물 제제에 사용되는 분리 미생물들을 최소한의 설비 및 생산비로 배양할 수 있도록 배양 공정을 간편화하여 경제성을 제고한 상기 미생물 제제의 제조방법에 관한 것이다.
[종래기술]
최근 축산 폐기물에 대한 규제 강화와 유기 농법에 의한 고부가가치의 농산물 생산에 관심이 모아지면서 이와 관련된 미생물 제제의 수요 및 공급이 크게 증가하고 있다. 그러나 지금까지 미생물 제제의 제조 및 유통에 대해 아무런 법적, 제도적 규제 장치가 없기 때문에 용도에 맞지 아니한 수입 미생물 제제의 남용과 전문 지식이 부족한 소규모 업체가 무분별하게 제조한 미생물 제제의 유통이 빈번하게 이루어지고 있으며 이에 따라 미생물 제제의 효능과 관련하여 농민들이 받고 있는 피해와 미생물 제제에 대한 불신감이 크게 늘어나고 있는 실정이다.
사료 첨가제, 축분 처리제 및 유기질 발효(퇴비화) 촉진제 등의 목적으로 사용되는 미생물 제제의 개발은 수입 대체에 따른 외화의 낭비를 막을 수 있을 뿐만 아니라, 화학 비료 및 농약의 사용 경감에 따른 영농비의 절감, 유기 농법에 의한 고품질의 무공해 농산물 생산에 따른 농가의 소득 수준 향상에 기여할 수 있다는 점에서 그 중요성이 매우 크다.
특히 가축의 비육과 소화를 촉진시키고 축산 폐기물에 의한 환경에의 악영향을 저감시킬 뿐 아니라 현장의 축산 농가에서 발생되는 축산 폐기물을 처리·이용하여 이를 시설 채소 재배 농가에서 효율적으로 퇴비화할 수 있도록 연계할 수 있는 사료 첨가제용 미생물 제제의 개발 및 미생물 제제의 경제적 제조방법 및 생산체제 기반 구축은 미생물 제제에 의한 혼란과 수입을 방지하고 영농비의 절감 효과를 도모할 수 있으며 유기질 비료의 제조, 사용 및 관리 방법에 대한 농가 소득 증대에 기여할 수 있을 것이다.
본 발명의 목적은 가축의 비육과 소화를 촉진시키고 악취 발생 및 보건 위생상의 문제점을 극소화할 수 있고 일정 기간 후 효과적으로 소화기관내 정상 균총으로 정착할 수 있으며 축분의 발효에 유익하고 자체 생산이 용이하며 경제성이 있는 미생물 제제를 제공하기 위한 것이다.
도 1a은 본 발명에 따른 제제화 방법 a의 흐름도;
도 1b는 본 발명에 따른 제제화 방법 b의 흐름도.
상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 기탁번호 제 KCTC 0408BP 호로 기탁되어 있고, 가축의 사료 첨가제로 사용되는 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum), 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) 및 아스퍼질러스 오리자에(Aspergillus oryzae)로 이루어진 미생물 제제 YFA-3을 제공한다. 상기 가축은 소, 돼지 및 닭으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 바람직하다.
본 발명은 락토바실러스 애시도필러스 및 락토바실러스 플란타럼을 락토바실러스 배양용 배지에서 종균배양하고, 상기 종균배양된 락토바실러스 애시도필러스 및 락토바실러스 플란타럼을 발효조에 접종하여 본배양함으로써 상기 락토바실러스 애시도필러스 및 락토바실러스 플란타럼을 생산하는 단계; 사카로마이세스 세레비지에 및 아스퍼질러스 오리자에를 곰팡이 배양용 배지에서 종균배양하고, 상기 종균배양된 사카로마이세스 세레비지에 및 아스퍼질러스 오리자에를 발효조에 접종하여 본배양함으로써 상기 사카로마이세스 세레비지에 및 아스퍼질러스 오리자에를 생산하는 단계; 및 상기 생산된 락토바실러스 애시도필러스 및 락토바실러스 플란타럼과 상기 생산된 사카로마이세스 세레비지에 및 아스퍼질러스 오리자에를 혼합하는 단계:를 포함하는 상기 미생물 제제의 제조방법을 제공한다. 상기 제조방법은 상기 본배양된 미생물 배양액을 각각 흡착제인 질석 및 영양제인 쌀겨와 혼합하여 포뮬레이션(formulation)하여 2차배양하는 단계를 더욱 포함하는 것이 바람직하다. 상기 포뮬레이션시 상기 배양액, 질석 및 쌀겨를 질석의 함량이 전체의 50부피% 이하가 되고, 함수율(含水率)이 60부피% 정도를 유지하도록 혼합하고, 보조 영양제로 요소(urea), 인산소다(NaH2PO4) 및 마그네슘(MgSO4)을 더욱 첨가하는 것이 바람직하다. 또는 상기 제조방법은 상기 본배양된 미생물 배양액을 각각 원심분리하여 미생물 농축액을 수득하고, MSG(MonoSodium Glutamate) 및 탈지유(skim milk)를 첨가하여 동결건조하는 단계를 더욱 포함하는 것이 바람직하다.
이하 본 발명을 더욱 상세히 설명하면 하기와 같다.
현재 유통 중인 미생물 제제의 효용성 검증 및 축분의 퇴비화에 대한 기초 조사를 통하여 국내 토착 미생물을 이용한 사료 첨가제용 미생물 제제를 개발하였다. 사료 첨가제용 균주로서는 락토바실러스 애시도필러스, 락토바실러스 플란타럼, 아스퍼질러스 오리자에, 사카로마이세스 세레비지에가 분리·선정되었다. 미생물 제제에 이용될 분리 미생물들을 최소한의 설비와 생산비로 배양할 수 있도록 배양 공정을 간편화하여 경제성을 제고할 수 있는 생산 체제를 구축하였으며 배양 36∼48시간만에 108cfu/ml 이상 수준의 생균수를 얻을 수 있는 간이 발효 시설을 고안하였다. 또한 액체 배지에서 얻어진 균체수의 증강 및 퇴비 제조시 유기물 성분을 효과적으로 분해할 수 있도록 질석 및 쌀겨를 이용한 최적의 제제화 조건을 확립하였으며 이 제제화 공정을 통하여 원균 배양액 보다 균체수가 102∼103이상 증강되는 효과를 얻었다.
사료 첨가용 미생물 제제를 한우 두당 2g/day씩 조제 사료에 섞어 공급한 경우 한우의 체중 증가율이 1.14kg/day로서 33% 증가되는 효과를 보였으며 소화기관내 균총의 변화(유산균 이외의 미생물수 감소)를 유발하고 배설물의 냄새 제거 효과가 탁월한 것으로 나타났다. 또한 사료 첨가용 미생물 제제에 이용된 미생물은 축분의 퇴비화를 촉진시켜주는 효과를 보였다.
Ⅰ. 미생물 제제용 우수 균주의 분리
농축산 시설의 토양을 비롯한 토양 시료와 자연 발효 과정 중의 퇴비 및 건강한 어린 가축의 분 등을 대상으로 이들 환경내에 존재하는 다양한 미생물 군집의 구조적 특성을 조사하고 이로부터 각 환경내의 우점을 차지하는 균주를 중심으로 세균과 사상균을 분리하였다. 미생물의 탐색은 사료의 소화 및 이들 축분의 퇴비 제조에 유용하게 사용될 것으로 사료되는 몇가지 생리 생화학적 특성을 대상으로 하여 수행되었으며 우선적으로 분리된 균주를 특정의 효소 활성을 관찰할 수 있는 탐색용 평판배지에 배양하여 그 활성이 높은 균주를 선택하였다. 우수 균주의 탐색을 위하여 조사된 효소는 지방 분해 효소(lipase), 펙틴 분해 효소(pectinase), 단백질 분해 효소(protease), 전분 분해 효소(amylase), 셀룰로스 분해 효소(cellulase), 셀로비오스 분해 효소(β-glucosidase), 목질 분해 효소(xylanase), 요소 분해 효소(urease) 및 리그닌 분해 효소(ligninase)이다.
1. 사상균의 분리 및 생리적 특성 조사
톱밥 발효 우사 및 산림의 부숙토, 자연 완숙 퇴비 등으로부터 1차 분리된 80여종의 사상균에 대하여 상기의 9가지 효소 생성능을 조사하였다. 조사된 균주 중 각각의 효소 활성이 우수한 균주를 10종씩 선별하고 이들로부터 다양한 물질에 대하여 강한 효소 활성을 가지며 형태적 특성이 뚜렷하여 추후 미생물 천이 과정의 탐색에 용이하게 추적될 수 있는 6종의 균주를 선정하였다. 선정된 균주는 글리세롤 10% 용액에 포자를 현탁하여 -20℃ 및 -80℃에 보관하였다.
2. 세균의 탐색
축산 시설 토양, 자연 발효 퇴비로부터 시료를 채취하여 평판 배지에 도말하여 배양한 후 우점종을 일차로 선발하였고 단일 탄소원을 넣어준 고체배지에 접종하여 형성되는 투명환을 통해 전분 분해 효소, 셀룰로스 분해 효소, 목질 분해 효소 및 펙틴 분해 효소 등의 활성이 우수한 균주를 분리하였다. 또한 사료 첨가제의 기능성 향상을 위하여 가축의 장내에서 분리한 미생물이 적합할 것으로 사료되어 건강한 어린 송아지의 분을 채취하여 유용 장내 미생물을 분리하였다.
Ⅱ. 미생물 제제용 우수 균주의 동정
상기의 미생물들을 최적 생육 배지에서 배양하여 세균은 그람 염색과 포자 염색을 실시하여 그 형태를 관찰하고 곰팡이는 최적 생육 배지에서 포자 형성시까지 배양하여 슬라이드를 만들어 균사, 포자 사슬 및 포자 형성 기관 등을 관찰하였다. 또한 세균은 생리학적 특성 및 균체 화학적 특성을 조사한 결과를 종합하여 동정하였다. 그 결과 사상균의 경우 슈달레쉐리아 보이디(Pseudallescheria boydii), 헬리코덴드론 sp.(Helicodendronsp.), 클라도스포리움 클라도스포리오이데스(Cladosporium cladosporioides), 페니실리움 두클라욱시(Penicillium duclauxii), 아스퍼질러스 오리자에(Aspergillus oryzae), 페니실리움 시트리넘(Penicillium citrinum)으로 밝혀졌고, 세균의 경우에는 29종의 균주가 바실러스 속, 12종의 균주가 락토바실러스 속, 그밖에 슈도모나스(Pseudomonas), 잔토모나스(Xanthomonas), 마이크로코커스(Micrococcus) 속, 그리고 효모류에 속하는 미생물은 사카로마이세스 세레비지에, 토룰라스포라(Torulaspora) 속의 미생물로 밝혀졌다.
Ⅲ. 미생물 제제용 우수 균주의 선정
사료 첨가제는 독성이나 병원성이 없는 미생물을 사용하는 것이 우선적이다. 앞서 분리, 조사된 미생물 중 락토바실러스 균주는 MRS 배지와 SL 배지에서의 배양속도를 조사하여 최종적으로 자람성이 우수한 락토바실러스 애시도필러스를, 소의 위속에서와 같은 혐기적 조건에서 생리 활성을 보일 수 있고 배설된 후에 호기적 조건에서도 분변을 효과적으로 분해할 수 있는 미생물로서 혐기적 조건에서 분리된 락토바실러스 균주의 생리적 특성 및 유기물 분해능을 조사하여 우수한 활성을 보이는 락토바실러스 플란타럼을 최종 선정하였다. 또한 효모는 일반적으로 소화 촉진 효소제로 주로 사용되는 사카로마이세스 세레비지에, 사상균은 식품류의 발효에 관여하며 유해한 독소를 생성하지 않는 것으로 알려진 아스퍼질러스 오리자에를 사료 첨가제용 제제로 최종 선정하였다. 세균과 효모는 배양 후 동결건조하였으며 사상균은 포자를 많이 생성하는 조건에서 배양하여 사용하였다.
Ⅳ. 미생물 제제의 생산체제 구축
미생물 제제용으로 선정된 각 균주의 배양 조건, 생리적 특성을 바탕으로 미생물을 대량 배양하기 위한 배양 공정 기술을 확립하기 위한 실험을 수행하였다. 특히 본 발명에서는 최소한의 설비와 생산비로 미생물 제제를 생산할 수 있도록 배지 및 기타 첨가물의 원료비를 낮추고 배양 공정을 간편화하여 경제성을 제고시킬 수 있는 생산체제의 구축에 주력하였다. 분리된 균주의 분류적, 생리적 특성을 감안하여 선택한 배지의 조성과 배양조건은 하기 표 1과 같다.
미생물 대량 배양을 위해 사용된 배지의 조성 및 배양조건
균주 배지 조성(DW 1l당) 배양조건
락토바실러스 플란타럼락토바실러스 애시도필러스 펩톤 10.0g비프 추출물 10.0g효모 추출물 5.0g글루코스 20.0g트윈 80 1.0mlK2HPO42.0g소디움 아세테이트 5.0g트리암모니움 시트레이트 2.0gMgSO4·7H2O 0.2gMnSO4·7H2O 0.2g 혐기적 배양(정체배양)30℃pH 6.2∼6.6
사카로마이세스 세레비지에아스퍼질러스 오리자에 K2HPO41gMgSO40.5g효모 추출물 10g 진탕배양30℃pH 7.0
상기 배지를 이용하여 각 균주를 삼각 플라스크에서 종균배양한 후 자체 설비한 간이발효조(배양기)에서 접종(접종량은 3∼5% 수준)하여 본배양하였다. 본배양은 항온실에서 수행하였으며 본배양을 위하여 사용된 배양기는 생산비를 최소화하기 위해서 발효조를 모형으로 시중에 유통되는 25l 물통을 이용하여 제작하였다. 이 배양용기는 호기성 미생물의 경우 최고 15∼17l, 혐기성 미생물의 경우 20l까지 배양이 가능하며 배양전에 고온습윤멸균을 수행하여도 용기에 변화가 없는 재질로 만들어진 것을 이용하였다. 선정된 미생물 중 산소를 필요로 하는 호기성 세균의 경우에는 대량 배양시에 산소의 공급이 대단히 중요하므로 에어 컴프레서를 연결하여 배양액의 교반 및 산소를 공급하여 폭기를 원활히 해줄 수 있도록 하였다. 또한 배양 도중에 부족한 영양원과 미네랄의 첨가 및 미생물의 생장 상태를 모니터링하기 위하여 배양기 뚜껑에 몇 개의 포트를 연결하였으며 에어 컴프레서에서 나온 공기를 분지하여 여러개의 배양기에 공급이 가능하도록 설치·제작하였다. 반면에 락토바실러스 spp.의 경우에는 동일 배양기에서 산소 공급 없이 정치 배양하였다.
본 발명에 따른 제제화 방법 a 및 b를 도 1a 및 도 1b에 각각 나타내었다. 상기 제제화 방법 a에서는 본배양에서 얻어진 미생물 배양액을 흡착제로 공급된 질석과 영양제로 공급된 쌀겨와 혼합하여 포뮬레이션하고 2차 배양함으로써 균체수를 더욱 증강시켰다. 질석의 경우 비중이 0.3 이하로 배양된 미생물의 흡착을 위해 쌀겨는 흡착된 미생물의 균체수를 최대로 증강시키기 위해 사용하였다. 사용한 질석은 1800℃이상에서 풍화한 흑운모로 미생물의 오염이 거의 없는데 반해 쌀겨는 영양원으로 원하지 않는 미생물의 오염을 고려해 사용전에 스팀 멸균을 수행하였다. 상기 제제화 방법 a에서 미생물 생장을 최적화하기 위하여 원균 배양액, 질석 및 쌀겨를 혼합할 때 질석이 전체의 50부피% 이하가 되고, 함수율이 60부피% 정도가 되도록 혼합하였다. 이러한 혼합비로 혼합기(리본 믹서)로써 균질하게 섞은 혼합체를 넓은 틀에서 일정한 높이로 고르게 쌓은 뒤 균체 수 증강을 위해 30℃ 항온실에서 후배양하였다. 이때 보조 영양제로 요소, 인산소다, 마그네슘을 첨가하였다. 보조 영양제의 첨가는 균체수 증강에 도움이 되며 제제화 전과정을 통해 원균 배양액 보다 균체수가 102∼103이상 증강하는 결과를 얻었다.
상기 제제화 방법 b에서는 본배양된 미생물 배양액을 각각 원심분리하여 미생물 농축액을 수득하고, MSG 및 탈지유를 첨가하여 동결건조하였다. 미생물 균체수는 제제화 방법 b가 107∼108cfu/g이었으나 제제화 방법 a가 101∼102배 높았다. 제제화 방법 b의 경우 보존성은 뛰어나지만 대량배양 이후에 원심분리를 통하여 얻어진 미생물 수득액을 동결건조하기 위해 고가의 설비가 필요하므로 저렴한 생산비의 제제 생산 목적에는 바람직하지 않은 면이 있고 동결건조에 따른 생균수 감소율은 약 80%에 달하는 것으로 나타났다.
한편 미생물 제제의 안정적 공급을 위해 제제의 보관 온도를 조사하였는데 저온(4℃)과 상온(20℃)에서의 생균수를 조사한 결과 상온 보관의 경우 단기간일 경우에는 균체수의 효율이 더 좋으나 장기간 보관할 경우에는 저온에서 더 효과적이었다.
상기 미생물 제제는 1997년 11월 14일자로 생명공학연구소 유전자원센터 유전자은행에 기탁번호 제 KCTC 0408BP 호로 기탁되어 있다.
[실시예]
본 발명의 바람직한 실시예 및 비교예를 기재한다. 그러나 하기한 실시예는 본 발명의 구성 및 효과를 나타내는 본 발명의 일 실시예일 뿐 본 발명이 하기한 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예
본 발명에 따른 미생물 제제를 육우에 직접 투여하는 실험을 수행하였고 육우의 증체율 및 우분의 성분을 조사하였다. 사육 실험은 공주군 우성면에 위치한 소 사육장에서 한우를 대상으로 실시하였다. 거세한 숫소 4두를 매일 두당 볏짚 1.5kg과 조제 사료 3.8kg을 공급하였고, 자유 급수를 실시하였다. 본 실시예에서는 건조시켜 탈지 분유와 혼합한 미생물 제제를 두당 2g씩 조제 사료에 섞어 매일 공급하였다.
비교예
상기 실시예에서 상기 미생물 제제를 공급하지 않은 것을 제외하고는 실질적으로 동일하게 실시하였다.
결과분석
상기 실시예 및 비교예에서 시일 경과에 따른 한우의 체중 증가를 조사하여 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
미생물 제제를 투여한 한우의 체중 증가
구분 평균체중(kg) 증체율(kg/일)
1일 64일 160일
실시예 128 207 351 1.39
비교예 102 153 254 0.95
상기 표 2에서와 같이 64일 동안 비교예에서는 평균 50%의 체중 증가가 관찰된 반면 실시예에서는 62% 증가율을 보였으며 160일을 기준으로 한 체중 증가율은 실시예의 경우 174%, 비교예는 149%로 나타나 전체적으로 실시예에서 증체율이 크게 증가한 것으로 관찰되었다.
이는 투여한 미생물이 강장 작용을 하는 균이므로 장의 기능을 강화시켜 소화율 등을 증가시키기 때문으로 사료되는데 이를 확인하기 위하여 우분을 채취하여 냄새 성분과 장내의 미생물 군집 변화를 관찰해 보았다. 시료 투여 후 7일과 45일, 그리고 90일째 우분을 대상으로 하였으며 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
우분의 총 미생물 수 분석
구분 총미생물수(×107/ml)
7일 45일 90일
실시예 7.0 5.0 7.5
비교예 42.6 38.2 28.1
상기 표 3에서 보면 비교예에 비해 실시예에서 총 미생물 수가 크게 감소하였음을 알 수 있다. 이는 투여한 락토바실러스가 장내에서 우점종으로 자리하여 다른 유해 미생물의 성장을 억제하였거나 대사 산물에 의해 장내의 pH를 감소시켜 다른 세균들이 성장하는 것을 방해하였기 때문인 것으로 보인다. 투여한 미생물이 장내에서 우점종으로 자리하였다면 균의 일부가 분에 섞여 배설될 것이므로 이를 확인하기 위하여 락토바실러스를 선택적으로 배양할 수 있는 SL 배지를 이용하여 혐기적 조건에서 90일째 우분 시료 현탁액을 배양하였다. 37℃에서 1일 동안 배양하고 락토바실러스 수를 측정한 결과 비교예 시료에서는 1×107/ml의 균이 검출된 반면 실시예 시료에서는 10.5×107/ml의 균이 검출되었다. 이상의 두가지 결과를 보면 투여한 미생물이 장내에 우점종으로 자리하여 소의 소화를 촉진하였을 뿐만 아니라, 다른 유해 세균의 성장을 억제한 것을 알 수 있다. 현장에서 관찰되는 현저한 냄새의 감소나 변이 묽은 정도의 차이 등도 이를 뒷받침해준다.
현장에서 확인되는 냄새의 감소를 과학적으로 검정하기 위하여 시료 투여 후 45일째 우분을 채취하고 증류수에 현탁한 후 여과하여 냄새의 주성분인 휘발성 물질을 분석하였고 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.
우분의 휘발성 물질 분석
구분 실시예 비교예
프로피온산 0.0000μl/ml 0.0296μl/ml
부틸산 0.2109μl/ml 0.6521μl/ml
발레릭산 0.0000μl/ml 0.0005μl/ml
비교예의 경우 프로피온산이 전체에서 2%, 부틸산이 14%, 그리고 발레릭산이 1.6%를 차지하였지만 실시예에서는 부틸산만이 전체에서 5.9%의 농도로 검출되었을 뿐 나머지 두 종류는 검출되지 않았다. 따라서 제제 투여에 의해 우분의 냄새 감소가 실제적으로 휘발성 물질이 크게 감소한데서 기인하였음을 알 수 있다.
이상의 결과에서 보면 한우에 직접 투여한 미생물에 의해 증체량이 증가하였으며 우분의 냄새가 크게 감소하였음을 알 수 있다. 이는 투여한 미생물이 강장 작용을 하여 소의 소화율을 증가시키고 장내 유해균의 성장을 억제하였기 때문인 것으로 사료된다. 증체량의 증가는 소의 사육 기간을 단축시켜 볏짚이나 조제 사료 이용량을 감소시켜 사육 농가에 경제적인 효과를 가져다 줄 수 있다. 그리고 소와 같이 사육 기간이 긴 가축에 있어서는 사육 기간의 단축으로 인한 효과가 크지 않지만 사육 기간이 짧은 닭이나 돼지 사육에 미생물 제제의 투여를 확장한다면 보다 큰 효과를 볼 수 있을 것으로 사료된다. 또한 우분 냄새의 감소는 사육 농가의 애로 사항인 우분 악취에 의한 공해를 방지하게 해 줄 뿐만 아니라 축사에서 채취한 우분을 이용한 퇴비 제조 작업에도 유리하게 작용할 것으로 보인다.
본 발명의 미생물 제제는 가축의 비육과 소화를 촉진시키고 악취 발생 및 보건 위생상의 문제점을 극소화할 수 있고 일정 기간 후 효과적으로 소화기관내 정상 균총으로 정착할 수 있으며 축분의 발효(퇴비화)에 유익하고 자체 생산이 용이하며 경제성이 있다.

Claims (6)

  1. 기탁번호 제 KCTC 0408BP 호로 기탁되어 있고, 가축의 사료 첨가제로 사용되는 락토바실러스 애시도필러스, 락토바실러스 플란타럼, 사카로마이세스 세레비지에 및 아스퍼질러스 오리자에로 이루어진 미생물 제제 YFA-3.
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 가축은 소, 돼지 및 닭으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 미생물 제제 YFA-3.
  3. 락토바실러스 애시도필러스 및 락토바실러스 플란타럼을 락토바실러스 배양용 배지에서 종균배양하고,
    상기 종균배양된 락토바실러스 애시도필러스 및 락토바실러스 플란타럼을 발효조에 접종하여 본배양함으로써 상기 락토바실러스 애시도필러스 및 락토바실러스 플란타럼을 생산하는 단계;
    사카로마이세스 세레비지에 및 아스퍼질러스 오리자에를 곰팡이 배양용 배지에서 종균배양하고,
    상기 종균배양된 사카로마이세스 세레비지에 및 아스퍼질러스 오리자에를 발효조에 접종하여 본배양함으로써 상기 사카로마이세스 세레비지에 및 아스퍼질러스 오리자에를 생산하는 단계; 및
    상기 생산된 락토바실러스 애시도필러스 및 락토바실러스 플란타럼과 상기 생산된 사카로마이세스 세레비지에 및 아스퍼질러스 오리자에를 혼합하는 단계:
    를 포함하는 제 1 항의 미생물 제제의 제조방법.
  4. 제 3 항에 있어서, 상기 본배양된 미생물 배양액을 각각 흡착제인 질석 및 영양제인 쌀겨와 혼합하여 포뮬레이션하여 2차배양하는 단계를 더욱 포함하는 제 1 항의 미생물 제제의 제조방법.
  5. 제 4 항에 있어서, 상기 포뮬레이션시 상기 배양액, 질석 및 쌀겨를 질석의 함량이 전체의 50부피% 이하가 되고, 함수율이 60부피% 정도를 유지하도록 혼합하고, 보조 영양제로 요소, 인산소다 및 마그네슘을 더욱 첨가하는 것인 제 1 항의 미생물 제제의 제조방법.
  6. 제 3 항에 있어서, 상기 본배양된 미생물 배양액을 각각 원심분리하여 미생물 농축액을 수득하고, MSG 및 탈지유를 첨가하여 동결건조하는 단계를 더욱 포함하는 제 1 항의 미생물 제제의 제조방법.
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