KR102624448B1 - 버섯균사체 곡립 종균을 이용한 기능성 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법 - Google Patents

버섯균사체 곡립 종균을 이용한 기능성 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 전처리한 인삼열매 씨앗을 멸균하고 냉각하는 단계; 상기 냉각한 인삼열매 씨앗에 곡물 곡립 고체 종균을 도포하고, 배양하여 인삼 씨앗 발효물을 제조하는 단계; 상기 제조한 인삼 씨앗 발효물로부터 곡물 곡립 고체 종균을 분리한 후, 건조하는 단계; 및 상기 건조한 인삼 씨앗 발효물을 분쇄한 후 물을 첨가하고, 추출하고 여과하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효 인삼씨앗 추출물에 관한 것이다.

Description

버섯균사체 곡립 종균을 이용한 기능성 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법{Method for producing functional fermented ginseng seed extract using grain mushroom mycelium seed culture}
본 발명은 전처리한 인삼열매 씨앗에 곡물 곡립 고체 종균을 도포하여 배양한 인삼 씨앗 발효물을 건조하는 단계; 및 상기 건조한 인삼 씨앗 발효물에 물을 첨가하고, 추출하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법에 관한 것이다.
인삼의 열매는 가장 젊은 시기의 4년생 인삼에게서 7월 중순경 일주일간만 열리는 희귀한 붉은 열매이다. 공 모양으로 빨갛게 익은 열매 속에는 두꺼운 씨껍질로 씨가 하나씩 들어있다.
기존에는 단순히 인삼 씨앗으로만 인식되어 왔으나 미국, 일본, 한국 등 의학계의 임상실험 및 연구 결과를 통해 인삼 뿌리보다 뛰어난 효능을 지닌 것이 밝혀졌다. 미국 아인슈타인대학의 연구에 따르면 인삼 열매는 유해한 활성산소를 제거하는 항산화 작용을 비롯해, 노화 유전자의 활동을 억제하고 항노화 유전자를 활성화시킨다. 또한, 시카고 의과대학에서는 인삼 열매의 항당뇨ㆍ항비만 효과를 입증한 바 있다.
특히 인삼의 핵심 영양소가 집약된 인삼 열매에는 인삼의 사포닌인 진세노사이드(ginsenoside)가 30% 가량이나 함유되어 있으며, 특이 사포닌인 진세노사이드-Re 성분은 인삼 뿌리에 비해 2~3배 많은 함량을 나타낸다. 인삼 사포닌은 혈액 흐름의 개선을 통해 노화 예방에 탁월한 효과를 보이며 주름 개선, 피부 탄력, 성기능 향상 등 다양한 효능을 발휘한다고 알려져 있다. 이밖에도 비타민, 무기질, 칼슘, 마그네슘, 아연 등 미네랄이 풍부해 신진대사를 원활하게 하는 등 인삼 열매는 현대판 불로초로 각광받고 있다. 그러나 열매를 수확한 지 하루만에 시들어버리는 인삼 열매의 특성상 단시간에 집중적인 수확을 필요로 하기 때문에 재배 및 관리에 어려움이 따른다.
표고버섯의 주성분은 탄수화물이지만 조섬유가 다량 함유되어 있어 칼로리가 적은 다이어트 식품으로 우수한 평가를 받고 있기 때문에 기능성 식품소재로서 그 활용가치가 높으며, 이러한 이유 등으로 인해 우리나라에서 생산량이 가장 많은 버섯 중의 하나이다.
표고버섯은 항종양성과 면역을 증강시키는 베타글루칸과 레티난(letinan)을 비롯한 다당류와 혈압을 강하시키는 에리타데닌, 비타민 D의 모체인 에르고스테롤(ergosterol) 등을 함유하고 있어 체내에서 칼슘의 흡수와 이용을 촉진시켜 주며, 구루병을 예방해준다. 또한 표고버섯에는 맛을 좌우하는 구아닐산 및 아데닐산이 들어있어 채소와 함께 조리하면 그 맛이 좋아진다.
표고버섯 균사체 추출물 또한 면역세포인 백혈구와 림프구를 활성화시키고 면역력을 높여 항암작용을 하는 건강식품으로 주목을 받고 있으며, 표고버섯 균사체 추출물의 주성분인 다당류는 베타-글루칸 및 아세틸화된 알파-글루칸이며, 이 중에서 아세틸화된 알파-글루칸이 표고버섯 균사체 추출물만의 특성성분으로 면역 활성 작용에 큰 효과가 있는 것으로 보고되어 있다.
한국공개특허 제2017-0053793호에는 항산화 활성이 증가된 발효 인삼열매 추출물의 제조방법이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1502018호에는 인삼열매 발효액의 제조방법이 개시되어 있으나, 본 발명의 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법과는 상이하다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 인삼열매로부터 분리한 씨앗을 이용하여 인삼열매 유래 사포닌 성분과 버섯 유래 베타글루칸 성분을 모두 포함하면서, 기호도가 우수한 발효 인삼씨앗 추출물을 제조하기 위해, 인삼씨앗 전처리, 배양 및 추출 등의 제조조건을 최적화하여, 유효성분 함량과 기호도가 우수한 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법을 제공하는 데 있다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 (1) 홍차잎, 여뀌잎 및 고욤나무 열매를 혼합한 혼합물에 물을 첨가한 후 추출하고 여과하여 식물 추출액을 제조하는 단계; (2) 인삼열매를 건조한 후, 상기 (1)단계의 제조한 식물 추출액에 침지한 후 꺼내는 단계; (3) 상기 (1)단계의 제조한 식물 추출액을 찜기에 넣고 상기 (2)단계의 꺼낸 인삼열매를 찜기의 채반에 올려놓고 증숙한 후 건조하여 증숙 인삼열매를 제조하고, 상기 제조한 증숙 인삼열매로부터 인삼열매 과육과 인삼열매 씨앗을 분리하는 단계; (4) 상기 (3)단계의 분리한 인삼열매 씨앗을 멸균하고 냉각하는 단계; (5) 상기 (4)단계의 냉각한 인삼열매 씨앗에 곡물 곡립 고체 종균을 도포하고, 배양하여 인삼 씨앗 발효물을 제조하는 단계; (6) 상기 (5)단계의 제조한 인삼 씨앗 발효물로부터 곡물 곡립 고체 종균을 분리한 후, 건조하는 단계; 및 (7) 상기 (6)단계의 건조한 인삼 씨앗 발효물을 분쇄한 후 물을 첨가하고, 추출하고 여과하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 발효 인삼씨앗 추출물을 제공한다.
종래의 인삼 가공 시 주로 인삼뿌리를 사용하였으나, 본 발명은 인삼열매의 씨앗을 사용하기 때문에 인삼열매의 부가가치를 창출할 수 있고, 본 발명의 방법에 의해 제조된 발효 인삼씨앗 추출물은 버섯균사체 곡립 종균을 이용한 발효과정을 통해 유효성분을 효과적으로 증진시킬 수 있어 이용 가치가 높은 이점이 있다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은
(1) 홍차잎, 여뀌잎 및 고욤나무 열매를 혼합한 혼합물에 물을 첨가한 후 추출하고 여과하여 식물 추출액을 제조하는 단계;
(2) 인삼열매를 건조한 후, 상기 (1)단계의 제조한 식물 추출액에 침지한 후 꺼내는 단계;
(3) 상기 (1)단계의 제조한 식물 추출액을 찜기에 넣고 상기 (2)단계의 꺼낸 인삼열매를 찜기의 채반에 올려놓고 증숙한 후 건조하여 증숙 인삼열매를 제조하고, 상기 제조한 증숙 인삼열매로부터 인삼열매 과육과 인삼열매 씨앗을 분리하는 단계;
(4) 상기 (3)단계의 분리한 인삼열매 씨앗을 멸균하고 냉각하는 단계;
(5) 상기 (4)단계의 냉각한 인삼열매 씨앗에 곡물 곡립 고체 종균을 도포하고, 배양하여 인삼 씨앗 발효물을 제조하는 단계;
(6) 상기 (5)단계의 제조한 인삼 씨앗 발효물로부터 곡물 곡립 고체 종균을 분리한 후, 건조하는 단계; 및
(7) 상기 (6)단계의 건조한 인삼 씨앗 발효물을 분쇄한 후 물을 첨가하고, 추출하고 여과하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법에서, 상기 (1)단계의 식물 추출액은 바람직하게는 홍차잎, 여뀌잎 및 고욤나무 열매를 0.8~1.2:0.4~0.6:0.4~0.6 중량비율로 혼합한 혼합물에 물 13~17배(v/w)를 첨가한 후 70~90℃에서 20~40분 동안 추출하고 여과하여 제조할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 홍차잎, 여뀌잎 및 고욤나무 열매를 1:0.5:0.5 중량비율로 혼합한 혼합물에 물 15배(v/w)를 첨가한 후 80℃에서 30분 동안 추출하고 여과하여 제조할 수 있다.
또한, 본 발명의 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법에서, 상기 (2)단계는 바람직하게는 인삼열매를 20~30℃에서 2~4시간 동안 건조한 후, 식물 추출액에 18~22℃에서 5~10시간 동안 침지한 후 꺼낼 수 있으며, 더욱 바람직하게는 인삼열매를 25℃에서 3시간 동안 건조한 후, 식물 추출액에 20℃에서 5~10시간 동안 침지한 후 꺼낼 수 있다.
또한, 본 발명의 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법에서, 상기 (3)단계는 바람직하게는 식물 추출액을 찜기에 넣고 인삼열매를 찜기의 채반에 올려놓고 90~110℃에서 50~70분 동안 증숙한 후, 꺼내어 40~50℃에서 6~10시간 동안 건조하는, 상기 증숙 및 건조하는 과정을 3~5회 반복하여 증숙 인삼열매를 제조하고, 상기 제조한 증숙 인삼열매로부터 인삼열매 과육과 인삼열매 씨앗을 분리할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 식물 추출액을 찜기에 넣고 인삼열매를 찜기의 채반에 올려놓고 100℃에서 60분 동안 증숙한 후, 꺼내어 45℃에서 8시간 동안 건조하는, 상기 증숙 및 건조하는 과정을 4회 반복하여 증숙 인삼열매를 제조하고, 상기 제조한 증숙 인삼열매로부터 인삼열매 과육과 인삼열매 씨앗을 분리할 수 있다.
또한, 본 발명의 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법에서, 상기 (4)단계는 바람직하게는 인삼열매 씨앗을 110~130℃에서 50~70분 동안 멸균하고 냉각할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 인삼열매 씨앗을 121℃에서 60분 동안 멸균하고 냉각할 수 있다.
또한, 본 발명의 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법에서, 상기 (4)단계의 배양은 바람직하게는 18~22℃에서 30~40일 동안 배양할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 18~22℃에서 35일 동안 배양할 수 있다.
또한, 상기 (5)단계의 곡물 곡립 고체 종균은 바람직하게는 물에 침지한 후 멸균한 곡물에 버섯 균사체를 접종한 후 배양한 것을 의미한다.
상기 버섯 균사체는 표고버섯, 상황버섯, 영지버섯, 복령버섯, 아가리쿠스 버섯, 노루궁뎅이 버섯, 동충하초, 운지, 저령, 느타리버섯, 팽이버섯, 새송이버섯, 꽃송이버섯, 잎새버섯, 차가버섯, 장수버섯, 목이버섯, 버들송이, 녹각영지버섯, 송이버섯, 참송이버섯 및 송로버섯으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 버섯 균사체일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 상기 곡물은 현미, 백미, 흑미, 적미, 녹미, 홍미, 보리, 흑보리, 귀리, 밀, 수수, 옥수수, 콩, 호밀, 녹두, 율무, 조, 기장, 팥 및 메밀로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 곡물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법에서, 상기 (7)단계는 바람직하게는 인삼 씨앗 발효물을 분쇄한 후 물을 18~22배(v/w) 첨가하고, 8~10 bar의 압력 및 90~110℃의 온도에서 50~70분 동안 추출하고 여과할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 인삼 씨앗 발효물을 분쇄한 후 물을 20배(v/w) 첨가하고, 8~10 bar의 압력 및 100℃의 온도에서 60분 동안 추출하고 여과할 수 있다.
본 발명의 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법은, 보다 구체적으로는
(1) 홍차잎, 여뀌잎 및 고욤나무 열매를 0.8~1.2:0.4~0.6:0.4~0.6 중량비율로 혼합한 혼합물에 물 13~17배(v/w)를 첨가한 후 70~90℃에서 20~40분 동안 추출하고 여과하여 식물 추출액을 제조하는 단계;
(2) 인삼열매를 20~30℃에서 2~4시간 동안 건조한 후, 상기 (1)단계의 제조한 식물 추출액에 18~22℃에서 5~10시간 동안 침지한 후 꺼내는 단계;
(3) 상기 (1)단계의 제조한 식물 추출액을 찜기에 넣고 상기 (2)단계의 꺼낸 인삼열매를 찜기의 채반에 올려놓고 90~110℃에서 50~70분 동안 증숙한 후, 꺼내어 40~50℃에서 6~10시간 동안 건조하는, 상기 증숙 및 건조하는 과정을 3~5회 반복하여 증숙 인삼열매를 제조하고, 상기 제조한 증숙 인삼열매로부터 인삼열매 과육과 인삼열매 씨앗을 분리하는 단계;
(4) 상기 (3)단계의 분리한 인삼열매 씨앗을 110~130℃에서 50~70분 동안 멸균하고 냉각하는 단계;
(5) 상기 (4)단계의 냉각한 인삼열매 씨앗에 곡물 곡립 고체 종균을 도포하고, 18~22℃에서 30~40일 동안 배양하여 인삼 씨앗 발효물을 제조하는 단계;
(6) 상기 (5)단계의 제조한 인삼 씨앗 발효물로부터 곡물 곡립 고체 종균을 분리한 후, 건조하는 단계; 및
(7) 상기 (6)단계의 건조한 인삼 씨앗 발효물을 분쇄한 후 물을 18~22배(v/w) 첨가하고, 8~10 bar의 압력 및 90~110℃의 온도에서 50~70분 동안 추출하고 여과하는 단계를 포함할 수 있으며,
더욱 구체적으로는
(1) 홍차잎, 여뀌잎 및 고욤나무 열매를 1:0.5:0.5 중량비율로 혼합한 혼합물에 물 15배(v/w)를 첨가한 후 80℃에서 30분 동안 추출하고 여과하여 식물 추출액을 제조하는 단계;
(2) 인삼열매를 25℃에서 3시간 동안 건조한 후, 상기 (1)단계의 제조한 식물 추출액에 20℃에서 5~10시간 동안 침지한 후 꺼내는 단계;
(3) 상기 (1)단계의 제조한 식물 추출액을 찜기에 넣고 상기 (2)단계의 꺼낸 인삼열매를 찜기의 채반에 올려놓고 100℃에서 60분 동안 증숙한 후, 꺼내어 45℃에서 8시간 동안 건조하는, 상기 증숙 및 건조하는 과정을 4회 반복하여 증숙 인삼열매를 제조하고, 상기 제조한 증숙 인삼열매로부터 인삼열매 과육과 인삼열매 씨앗을 분리하는 단계;
(4) 상기 (3)단계의 분리한 인삼열매 씨앗을 121℃에서 60분 동안 멸균하고 냉각하는 단계;
(5) 상기 (4)단계의 냉각한 인삼열매 씨앗에 곡물 곡립 고체 종균을 도포하고, 18~22℃에서 35일 동안 배양하여 인삼 씨앗 발효물을 제조하는 단계;
(6) 상기 (5)단계의 제조한 인삼 씨앗 발효물로부터 곡물 곡립 고체 종균을 분리한 후, 건조하는 단계; 및
(7) 상기 (6)단계의 건조한 인삼 씨앗 발효물을 분쇄한 후 물을 20배(v/w) 첨가하고, 8~10 bar의 압력 및 100℃의 온도에서 60분 동안 추출하고 여과하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 발효 인삼씨앗 추출물을 제공한다.
이하, 본 발명의 제조예 및 실시예를 들어 상세히 설명한다. 단, 하기 제조예 및 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실시예에 한정되는 것은 아니다.
제조예 1. 발효 인삼씨앗 추출물
(1) 덜익은 베리상태의 인삼열매를 수확하여 흐르는 물에 세척하였다.
(2) 홍차잎, 여뀌잎 및 고욤나무 열매를 1:0.5:0.5 중량비율로 혼합한 혼합물에 혼합물 대비 정제수 15배(v/w) 첨가한 후 80℃에서 30분 동안 추출한 후 여과하여 식물 추출액을 제조하였다.
(3) 상기 (1)단계의 세척한 인삼열매를 25℃ 정도에서 3시간 동안 자연건조한 후 20℃의 상기 (2)단계의 제조한 식물 추출액에 5~10시간 동안 침지한 후 꺼내었다.
(4) 상기 (2)단계의 제조한 식물 추출액을 찜기에 넣고 상기 (3)단계의 침지한 후 꺼낸 인삼열매를 찜기의 채반에 올려놓고 100℃에서 1시간 동안 증숙한 후, 꺼내어 열풍건조기로 45℃에서 8시간 동안 건조하는, 상기 증숙 및 건조하는 과정을 4회 반복(4증4포)하여 증숙 인삼열매를 제조하고, 상기 제조한 증숙 인삼열매로부터 인삼열매 과육과 인삼열매 씨앗(종자) 부분을 분리하였다.
(5) 상기 (4)단계의 분리한 인삼열매 씨앗을 400 g PP 전용 용기에서 수분 함량을 25~50%(v/w)로 조절하고 121℃에서 60분 동안 멸균하고 20℃의 냉각실에서 냉각하였다.
(6) 상기 (5)단계의 냉각한 인삼열매 씨앗의 최상단부에 현미 곡립 고체 종균을 15 mL를 골고루 도포하고, 18~22℃에서 35일 동안 배양실에서 배양하여 인삼 씨앗 발효물을 제조하였다. 상기 배양 시 접종 10일 후 용기부 아래쪽과 전체 배양이 골고루 잘 되도록 용기를 흔들어 공극을 발생시켰다. 상기 현미 곡립 고체 종균은 물에 침지한 후 멸균한 현미에 표고버섯 균사체를 접종한 후 25℃에서 20일 동안 배양한 것을 의미한다.
(7) 상기 (6)단계의 제조한 인삼 씨앗 발효물로부터 현미 곡립 고체 종균을 분리한 후, 인삼 씨앗 발효물을 10~13%(v/w)의 수분 함량이 되도록 건조하였다.
(8) 상기 (7)단계의 건조한 인삼 씨앗 발효물을 분쇄한 후 정제수를 20배(v/w) 첨가한 후 고압추출장치로 8~10 bar의 압력 및 100℃의 온도에서 1시간 동안 고압 추출한 후 여과하였다.
비교예 1. 발효 인삼씨앗 추출물
(1) 덜익은 베리상태의 인삼열매를 수확하여 흐르는 물에 세척하였다.
(2) 상기 (1)단계의 세척한 인삼열매를 25℃ 정도에서 3시간 동안 자연건조한 후 20℃의 정제수에 5~10시간 동안 침지한 후 꺼내었다.
(3) 정제수를 찜기에 넣고 상기 (2)단계의 침지한 후 꺼낸 인삼열매를 찜기의 채반에 올려놓고 100℃에서 1시간 동안 증숙한 후, 꺼내어 열풍건조기로 45℃에서 8시간 동안 건조하는, 상기 증숙 및 건조하는 과정을 4회 반복(4증4포)하여 증숙 인삼열매를 제조하고, 상기 제조한 증숙 인삼열매로부터 인삼열매 과육과 인삼열매 씨앗(종자) 부분을 분리하였다.
(4) 상기 (3)단계의 분리한 인삼열매 씨앗을 이용하여 제조예 1의 (5) 내지 (8)단계와 동일한 방법으로 발효 인삼씨앗 추출물을 제조하였다.
비교예 2. 발효 인삼씨앗 추출물
(1) 덜익은 베리상태의 인삼열매를 수확하여 흐르는 물에 세척하였다.
(2) 홍차잎에 홍차잎 대비 정제수 15배(v/w) 첨가한 후 80℃에서 30분 동안 추출한 후 여과하여 식물 추출액을 제조하였다.
(3) 상기 (1)단계의 세척한 인삼열매와 상기 (2)단계의 제조한 식물 추출액을 이용하여, 제조예 1의 (3) 내지 (8)단계와 동일한 방법으로 발효 인삼씨앗 추출물을 제조하였다.
비교예 3. 발효 인삼씨앗 추출물
(1) 덜익은 베리상태의 인삼열매를 수확하여 흐르는 물에 세척하였다.
(2) 여뀌잎에 여뀌잎 대비 정제수 15배(v/w) 첨가한 후 80℃에서 30분 동안 추출한 후 여과하여 식물 추출액을 제조하였다.
(3) 상기 (1)단계의 세척한 인삼열매와 상기 (2)단계의 제조한 식물 추출액을 이용하여, 제조예 1의 (3) 내지 (8)단계와 동일한 방법으로 발효 인삼씨앗 추출물을 제조하였다.
비교예 4. 발효 인삼씨앗 추출물
(1) 덜익은 베리상태의 인삼열매를 수확하여 흐르는 물에 세척하였다.
(2) 고욤나무 열매에 고욤나무 열매 대비 정제수 15배(v/w) 첨가한 후 80℃에서 30분 동안 추출한 후 여과하여 식물 추출액을 제조하였다.
(3) 상기 (1)단계의 세척한 인삼열매와 상기 (2)단계의 제조한 식물 추출액을 이용하여, 제조예 1의 (3) 내지 (8)단계와 동일한 방법으로 발효 인삼씨앗 추출물을 제조하였다.
실시예 1. 발효 인삼씨앗 추출물의 베타글루칸(β-glucan) 함량
베타-글루칸(β-glucan) 함량 분석은 총 글루칸(total glucan)을 구한 후, 알파-글루칸(α-glucan) 함량을 빼서 베타-글루칸(β-glucan) 함량을 측정하였다. 0.1 g의 시료를 1.5 mL의 37%(v/v) HCl을 튜브에 넣고 30℃의 항온수조(water bath)에서 40분간 반응시켜 총 글루칸을 분해하였다. 그 후 10 mL의 증류수를 넣어 볼텍스(vortex)하고, 100℃에서 2시간 반응시켰으며, 실온에서 10 mL의 2N KOH를 넣고 200mM 소듐 아세테이트 버퍼(Sodium acetate buffer)로 100 mL로 정용한 후 충분히 혼합하였다. 그 후 상기 정용한 혼합물의 0.1 ㎖에 200mM 소듐 아세테이트 버퍼에 녹인 엑소-1,3-베타-글루카나아제 플러스 베타-글루코시다아제(exo-1,3-β-glucanase plus β-glucosidase)를 0.1 mL를 넣고, 시약 블랭크(reagent blank)는 0.2 ㎖의 아세테이트 버퍼(acetate buffer)를 넣고, 0.1 mL의 D-글루코오스 스탠다드 및 0.12 mL의 아세테이트 버퍼를 넣고 혼합한 후 40℃에서 60분 동안 반응시켰다. 그런 다음, 3 mL의 GOPOD(Glucose oxidase/peroxidase mixture)를 넣고 40℃에서 20분 동안 반응시킨 후, 510 nm에서 흡광도를 측정하였다. 다음으로, 알파-글루칸은 0.1 mL의 시료와 2 mL의 2M KOH를 20분간 혼합하여 8 mL의 1.2M 소듐 아세테이트 버퍼를 넣고 섞은 후 0.2 mL의 아밀로글루코시다아제 플러스 인버타아제(amyloglucosidase plus invertase)를 넣고, 잘 섞어서 40℃의 항온수조에서 30분간 반응시켰다. 상기 반응시킨 혼합물의 0.1 mL에 0.1 ㎖의 200mM 소듐 아세테이트 버퍼 및 3 mL의 GOPOD를 넣고 40℃에서 20분간 반응시킨 후, 510 nm에서 흡광도를 측정하였다.
발효 인삼씨앗 추출물의 베타글루칸 함량(%)
발효 인삼씨앗 추출물의 종류 베타글루칸 함량(%)
제조예 1 13.8a
비교예 1 10.1b
그 결과, 비교예 1에 비해 제조예 1의 발효 인삼씨앗 추출물이 더 높은 베타글루칸 함량을 나타내었다.
실시예 2. 발효 인삼씨앗 추출물의 진세노사이드 함량
제조예 1 및 비교예 1의 발효 인삼씨앗 추출물의 진세노사이드의 함량 분석은 UVD(Ultra Visible Detector)가 장착된 HPLC(High Performance Liquid Chromatography)로 분석하였다.
발효 인삼씨앗 추출물의 진세노사이드 Re 함량(mg/g)
발효 인삼씨앗 추출물의 종류 진세노사이드 Re 함량(mg/g)
제조예 1 8.7a
비교예 1 6.9b
진세노사이드 Re 성분은 인삼 뿌리에 비해 인삼열매에서 더 높은 것으로 알려져 있으며, 비교예 1에 비해 제조예 1의 발효 인삼씨앗 추출물이 더 높은 Re 함량을 나타내었다.
실시예 3. 발효 인삼씨앗 추출물의 관능검사
상기 제조예 1과 비교예들의 발효 인삼씨앗 추출물을 가지고 관능검사를 실시하였다. 관능검사는 성인 남녀 30명을 대상으로 실시하였으며, 기호도를 구분하여 1점: 매우 나쁘다, 2점: 나쁘다, 3점: 보통이다, 4점: 좋다, 5점: 매우 좋다로 나타나는 5점 기호척도법을 사용하였다.
발효 인삼씨앗 추출물의 관능검사
구분 종합 기호도
제조예 1 4.4 4.5 4.4
비교예 1 3.6 3.7 3.6
비교예 2 4.0 4.0 4.0
비교예 3 3.8 3.9 3.9
비교예 4 3.9 3.8 3.8
그 결과, 제조예 1의 발효 인삼씨앗 추출물이 비교예들의 발효 인삼씨앗 추출물에 비해 모든 항목에서 높은 점수를 나타내었고, 비교예 1의 추출물이 모든 항목에서 가장 낮은 점수를 나타내었다. 따라서, 제조예 1의 조건으로 인삼열매를 전처리한 후 발효 및 추출하여 추출물을 제조하는 것이 가장 바람직함을 확인하였다.

Claims (5)

  1. (1) 홍차잎, 여뀌잎 및 고욤나무 열매를 0.8~1.2:0.4~0.6:0.4~0.6 중량비율로 혼합한 혼합물에 물 13~17배(v/w)를 첨가한 후 70~90℃에서 20~40분 동안 추출하고 여과하여 식물 추출액을 제조하는 단계;
    (2) 인삼열매를 20~30℃에서 2~4시간 동안 건조한 후, 상기 (1)단계의 제조한 식물 추출액에 18~22℃에서 5~10시간 동안 침지한 후 꺼내는 단계;
    (3) 상기 (1)단계의 제조한 식물 추출액을 찜기에 넣고 상기 (2)단계의 꺼낸 인삼열매를 찜기의 채반에 올려놓고 90~110℃에서 50~70분 동안 증숙한 후, 꺼내어 40~50℃에서 6~10시간 동안 건조하는, 상기 증숙 및 건조하는 과정을 3~5회 반복하여 증숙 인삼열매를 제조하고, 상기 제조한 증숙 인삼열매로부터 인삼열매 과육과 인삼열매 씨앗을 분리하는 단계;
    (4) 상기 (3)단계의 분리한 인삼열매 씨앗을 110~130℃에서 50~70분 동안 멸균하고 냉각하는 단계;
    (5) 물에 침지한 후 멸균한 현미에 표고버섯 균사체를 접종한 후 25℃에서 20일 동안 배양한 현미 곡립 고체 종균을 상기 (4)단계의 냉각한 인삼열매 씨앗에 도포하고, 18~22℃에서 30~40일 동안 배양하여 인삼 씨앗 발효물을 제조하는 단계;
    (6) 상기 (5)단계의 제조한 인삼 씨앗 발효물로부터 현미 곡립 고체 종균을 분리한 후, 건조하는 단계; 및
    (7) 상기 (6)단계의 건조한 인삼 씨앗 발효물을 분쇄한 후 물을 18~22배(v/w) 첨가하고, 8~10 bar의 압력 및 90~110℃의 온도에서 50~70분 동안 추출하고 여과하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 발효 인삼씨앗 추출물의 제조방법.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 제1항의 방법으로 제조된 발효 인삼씨앗 추출물.
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