KR102617110B1 - 항산화기능이 우수하고, 콜라겐 흡수를 증진하여 우수한 탄력 개선 및 주름 개선 기능을 갖는 히비스커스 기능성 추출물 및 그의 제조방법 - Google Patents

항산화기능이 우수하고, 콜라겐 흡수를 증진하여 우수한 탄력 개선 및 주름 개선 기능을 갖는 히비스커스 기능성 추출물 및 그의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 히비스커스 기능성 추출물 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 히비스커스 꽃과 스테비아를 포함한 제1혼합물을 유산균으로 발효한 제1발효추출물; 및/또는 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐과 스테비아를 포함한 제2혼합물을 유산균으로 발효한 제2발효추출물을 포함하는 히비스커스 기능성 추출물 및 그의 제조방법, 그를 포함하는 화장료 조성물, 식품 조성물에 관한 것이다.

Description

항산화기능이 우수하고, 콜라겐 흡수를 증진하여 우수한 탄력 개선 및 주름 개선 기능을 갖는 히비스커스 기능성 추출물 및 그의 제조방법{Hibiscus functional extract having excellent antioxidant function and improving collagen absorption to improve elasticity and wrinkle, and method for manufacturing the same}
본 발명은 히비스커스 기능성 추출물 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로는 화장료, 식품에 함유되어 인체에 유익한 기능을 발현할 수 있는 히비스커스 기능성 추출물 및 그의 제조방법에 관한 것이다.
히비스커스는 쌍떡잎식물 아욱목 아욱과 무궁화속에 속한 식물로 붉은색 꽃잎의 형상을 가진다. 히비스커스의 붉은 빛을 내는 성분인 '안토시아닌'은 강력한 항산화물질로 원활한 신진대사와 노폐물 배출에 도움을 주는 것으로 알려져 있으며, 이 외에도 히비스커스는 인체에 유익한 다양한 유효성분들을 포함하고 있어 화장료, 식음료, 식품 등에 주요 성분으로 많이 활용되고 있다. 특히, 히비스커스에 포함된 하이드록시시트릭산(HCA)은 지방 활성 감소 물질로서 식품의약품안전처에서 다이어트 기능성 원료로 인정받아 젊은 연령층뿐만 아니라 중장년층으로부터 이너뷰티식품, 건강기능식품의 원재료로 각광을 받고 있다.
최근 인기있는 이너뷰티식품은 콜라겐 제품으로, 다양한 제품에 히비스커스를 포함하고 있다. 일반적으로 사용되는 콜라겐 제품의 분자량, 분자크기(달톤, Da)는 체내로 흡수되기에는 다소 큰 사이즈여서 다수의 기업들은 콜라겐 분자의 흡수를 높이는 방향으로 많은 연구를 진행하고 있다. 원재료에서 추출 또는 합성되는 콜라겐의 사이즈를 물리적으로 줄이거나, 또는 비타민 C와 같은 콜라겐의 흡수를 도와주는 보조인자를 함께 사용하여 흡수를 높이는 방법을 활용하고 있다. 히비스커스 또한 다양한 유효성분을 포함하고 있어 콜라겐의 흡수를 높이기 위한 성분으로 활용되고 있다.
이처럼 히비스커스가 화장료 조성물 또는 식품 등에 유효성분으로 각광받음에 따라 히비스커스의 유효성분을 고농도로 추출할 수 있는 공정의 개발과 체내에서 항산화 기능, 콜라겐 합성 등 다양한 기능을 할 수 있는 고성능의 히비스커스 기능성 추출물의 개발이 필요하다. 나아가 동물성 콜라겐, 생선콜라겐, 식물성 콜라겐 등의 콜라겐 흡수율을 높이고, 체내 콜라겐 합성을 증진할 수 있는 고효율의 히비스커스 기능성 추출물 개발도 필요하다.
한국공개특허 제10-2020-0090628호 한국등록특허 제10-2299846호
본 발명은 유효성분의 함유량이 높은 히비스커스 기능성 추출물 및 히비스커스의 유효성분 추출이 우수한 히비스커스 기능성 추출물 제조방법을 제공하고자 한다.
또한, 본 발명은 콜라겐의 합성과 흡수를 증진하는 히비스커스 기능성 추출물 및 그의 제조방법을 제공하고자 한다.
또한, 본 발명은 항산화 기능이 우수하고, 탄력 및 주름개선 기능이 우수한 히비스커스 기능성 추출물 및 그의 제조방법을 제공하고자 한다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 ① 히비스커스 꽃과 스테비아를 혼합하여 제1혼합물을 형성하는 단계; ② 상기 제1혼합물을 유산균을 이용하여 발효 후 제1발효추출물을 형성하는 단계;를 포함하는, 히비스커스 기능성 추출물 제조방법을 제공한다.
상기 ①은 ⅰ) 히비스커스 꽃과 스테비아를 40 내지 100℃로 가온 후 건조하는 단계; ⅱ) 건조 후 분쇄하는 단계; ⅲ) 분쇄 후 추출하여 제1혼합물을 형성하는 단계;로 구성되는 것을 특징으로 하는, 히비스커스 기능성 추출물 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 ③ 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐과 스테비아를 혼합하여 제2혼합물을 형성하는 단계; ④ 상기 제2혼합물을 유산균을 이용하여 발효 후 제2발효추출물을 형성하는 단계;를 더 포함하는, 히비스커스 기능성 추출물 제조방법을 제공한다.
본 발명은 히비스커스 꽃과 스테비아를 포함한 제1혼합물을 유산균으로 발효한 제1발효추출물; 및/또는 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐과 스테비아를 포함한 제2혼합물을 유산균으로 발효한 제2발효추출물을 포함하는 히비스커스 기능성 추출물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 히비스커스 기능성 추출물을 포함하는 화장료를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 히비스커스 기능성 추출물을 포함하는 식품을 제공한다.
상기 히비스커스 기능성 추출물을 포함하는 식품은 혼합유당, 생선콜라겐, 포도당, 결정과당, 구연산, 로즈힙추출분말, 이산화규소, 효소처리스테비아, 니코틴산아미드, 타트체리, 히알루론산, 엘라스틴, 알로에겔, 비타민 B, 비타민 C, 비타민 D로 이루어진 군에서 선택된 1이상을 더 포함하는 건강기능성 식품을 제공한다.
본 발명에 의한 히비스커스 기능성 추출물은 항산화 기능이 우수한 효과가 있고, 콜라겐의 합성을 증진하는 효과가 있다.
또한, 본 발명에 의한 히비스커스 기능성 추출물은 콜라겐의 흡수를 증진하는 효과가 있어 화장료 조성물에 콜라겐과 함께 혼용하는 경우 콜라겐 성분이 잘 흡수되도록 하는 효과가 있고, 식품에 콜라겐과 함께 혼용하는 경우 콜라겐 성분이 체내에 잘 흡수되고, 체내에서 잘 합성될 수 있도록 도모하는 효과가 있다.
또한, 본 발명에 의한 히비스커스 기능성 추출물은 히비스커스 유래 식물성 콜라겐을 함유하고 있어 동물성 콜라겐, 생선 콜라겐보다 흡수율이 우수하고, 피부 탄력 개선, 주름 완화, 노화 방지 등의 효과가 있다.
아래에서는 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시 예를 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시 예에 한정되지 않는다.
본 발명의 명세서 및 청구범위에 사용된 용어 또는 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정 해석되지 아니하며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
발명의 명세서 전체에 있어서, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본 발명의 명세서 전체에 있어서, "A 및/또는 B"는, A 또는 B, 또는 A 및 B를 의미한다.
이하에서 본 발명을 구체적으로 설명하였으나, 본 발명이 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명은 히비스커스 기능성 추출물 및 그의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 일 예는 ① 히비스커스 꽃과 스테비아를 혼합하여 제1혼합물을 형성하는 단계; ② 상기 제1혼합물을 유산균을 이용하여 발효 후 제1발효추출물을 형성하는 단계;를 포함하는, 히비스커스 기능성 추출물 제조방법이다.
히비스커스는 꽃 또는 꽃잎을 이용하여 제1혼합물을 형성한다. 히비스커스 꽃은 붉은색을 띄고, 항산화 활성이 우수한 안토시아닌, 프로토카테규산 등의 성분을 다량 함유하고 있다. 히비스커스 사브다리파 추출물내 피루브산(pyruvic acid)은 DHA(dihydroxyacetone)과 같이 음용하면 지방분해가 체중감소효과를 가지고 있을뿐만 아니라 단백질 용해 작용을 지니는 것으로 알려져 있다. 또한 피부 첩포시 단백질을 용해하여 각질을 제거, 피부 재생율을 높인다.
스테비아는 잎과 줄기에 단맛을 내는 스테비오사이드 성분이 있어 상기 제1혼합물을 형성함에 있어 스테비아 잎 또는 줄기를 사용할 수 있고, 일 예로 스테비아 잎을 사용할 수 있다. 또한, 스테비아 잎 또는 줄기로부터 스테비오사이드 성분을 추출한 추출물을 사용할 수도 있고, 스테비아의 쓴 맛을 제거하기 위해 효소처리 과정을 거친 효소처리 스테비아를 사용할 수도 있다. 또한, 이에 제한되지 않고, 화장료 조성물 또는 식품에 활용될 수 있는 다양한 형태의 스테비아를 사용할 수 있다. 스테비아는 항산화 작용이 우수하고, 항바이러스 작용으로 면역력을 향상시키는 등의 유효한 기능을 가져 히비스커스와 함께 우수한 항산화 효과를 발휘할 수 있다.
상기 제1혼합물은 히비스커스 꽃과 스테비아를 혼합한 형태로, 원재료 자체의 혼합일 수 있고, 또는 원재료 혼합 후 추출한 추출물 형태일 수 있고, 또는 원재료 추출물의 혼합 형태일 수도 있다.
상기 추출법은 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건하에서, 통상적인 용매를 사용하여(예컨대, 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올(예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 1,3-부틸렌글리콜 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출 용매를 사용하여 얻을 수 있으며, 바람직하게는 에탄올, 70%(v/v) 에탄올 수용액 또는 물을 사용하여 얻어진 것이고, 가장 바람직하게는 70% 에탄올 수용액을 이용하여 얻어진 것이다.
유산균의 발효는 통상의 방법으로 실시될 수 있고, 일반적으로 종균으로 활용될 수 있는 유산균의 종을 활용하여 발효 과정을 실시할 수 있다.
일 예로 발효균주는 Lactobacillus paracasei, Lactobacillus bifidus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus confusus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus brevis 중 어느 하나 또는 어느 하나 이상일 수 있고, 이에 제한되지 않고 식물의 발효에 활용되는 모든 발효균주를 활용할 수도 있다.
히비스커스 꽃과 스테비아를 유산균으로 발효한 경우, 발효하지 않은 경우와 비교하여 히비스커스 꽃과 스테비아의 유효성분이 더 용이하게 추출되어 항산화 기능이 더 우수하고, 콜라겐 흡수와 체내 콜라겐 합성 효율을 더욱 향상시키는 효과가 있다. 또한, 히비스커스 꽃을 단독으로 유산균 발효한 경우보다 스테비아를 혼합하여 유산균으로 발효한 경우 히비스커스의 유효성분 추출이 더욱 효과적일 수 있다. 스테비아의 스테비오사이드 성분 또는 기타 성분이 히비스커스 꽃의 유효성분, 구체적으로는 콜라겐과 상호작용하여 콜라겐의 흡수, 합성을 보조하는 유효성분의 추출을 더욱 용이하게 할 수 있다.
본 발명의 다른 일 예는 상기 ①은 ⅰ) 히비스커스 꽃과 스테비아를 40 내지 100℃로 가온 후 건조하는 단계; ⅱ) 건조 후 추출하여 제1혼합물을 형성하는 단계; 로 구성되는 것을 특징으로 하는, 히비스커스 기능성 추출물 제조방법이다.
일 예로 상기 히비스커스 꽃과 스테비아 잎을 40 내지 80℃ 온도의 물에서 2~4시간 동안 둔 뒤 이를 건조 또는 동결건조하고, 통상의 추출법에 따라 추출물을 형성할 수도 있다.
다른 일 예로 상기 히비스커스 꽃과 스테비아 잎을 60 내지 100℃ 온도의 수분이 없는 상태에서 덖은 뒤 이를 건조 또는 동결건조하여 통상의 추출법에 따라 추출물을 형성하여 실시할 수도 있다. 상기 덖는 시간은 20~30분 소요될 수 있고, 원료(히비스커스 꽃, 스테비아 잎)의 상태에 따라 이는 조정될 수 있다.
상기 가온단계를 거친 경우, 가온단계를 거치지 않은 경우와 대비하여 추출단계에서 유효성분의 추출 효율을 더 높일 수 있는 효과가 있고, 유산균 발효과정에서 발효 효율을 더 높일 수 있는 효과가 있다.
상기 언급한 바와 같이 가온의 범위는 수분을 가한 상태에서 일정 온도(40 내지 80℃)를 가할 수 있고, 또는 수분이 없는 상태에서 일정 온도(60 내지 100℃)를 가할 수도 있다. 수분을 가한 상태에서는 유효성분이 주변 수분으로 빠져나갈 수 있기 때문에, 수분을 가하지 않은 상태에서 가온을 하는 것이 그 다음 추출 단계에서 유효성분 추출 효율을 상대적으로 더 높일 수 있다.
상기 ⅰ)에서 히비스커스 꽃과 스테비아는 각각 원재료 그대로 실시할 수도 있고, 또는 분말의 형태로 실시할 수도 있다. 상기 제1혼합물을 형성함에 있어서, 히비스커스 꽃과 스테비아를 분말 형태를 활용하는 것이 유효성분 추출에는 더욱 바람직하다. 상기 분말의 형태는 원재료를 기계적으로 분쇄한 형태일 수 있고, 또는 시중에 파는 분말을 사용할 수도 있다.
일 예로 상기 히비스커스 꽃의 분말은 히비스커스 꽃잎 원재료를 그대로 분쇄, 또는 건조 후 분쇄, 또는 동결건조 후 분쇄한 형태일 수 있다. 히비스커스 꽃의 단면적을 최대한 넓혀 추출되는 유효성분의 함량을 높일 수 있다.
일 예로 상기 스테비아 분말은 스테비아 잎 또는 줄기 원재료를 건조 후 분쇄한 형태일 수 있고, 또는 동결건조 후 분쇄한 형태일 수 있다. 또는 시중에서 판매하는 스테비아 분말, 효소처리 스테비아 분말을 이용할 수도 있다. 스테비아의 단면적을 최대한 넓혀 추출되는 유효성분의 함량을 높일 수 있다.
상기 추출은 앞에서 언급한대로 통상의 추출방법으로 실시될 수 있다.
본 발명의 다른 일 예는 상기 ①은 ⅰ) 히비스커스 꽃과 스테비아를 40 내지 100℃로 가온 후 건조하는 단계; ⅱ) 건조 후 분쇄하는 단계; ⅲ) 분쇄 후 추출하여 제1혼합물을 형성하는 단계; 로 구성되는 것을 특징으로 하는, 히비스커스 기능성 추출물 제조방법이다.
일 예로 상기 히비스커스 꽃과 스테비아 잎을 40 내지 80℃ 온도의 물에서 2~4시간 동안 둔 뒤 이를 건조 또는 동결건조하고, 분쇄한 후 통상의 추출법에 따라 추출물을 형성할 수도 있다.
일 예로 상기 히비스커스 꽃과 스테비아 잎을 60 내지 100℃ 온도의 수분이 없는 상태에서 덖은 뒤 이를 건조 또는 동결건조하고, 분쇄한 후 통상의 추출법에 따라 추출물을 형성하여 실시할 수도 있다. 상기 덖는 시간은 20~30분 소요될 수 있고, 원료(히비스커스 꽃, 스테비아 잎)의 상태에 따라 이는 조정될 수 있다.
상기 가온단계를 거친 경우, 가온단계를 거치지 않은 경우와 대비하여 추출단계에서 유효성분의 추출 효율을 더 높일 수 있는 효과가 있고, 유산균 발효과정에서 발효 효율을 더 높일 수 있는 효과가 있다.
상기 언급한 바와 같이 가온의 범위는 수분을 가한 상태에서 일정 온도(40 내지 80℃)를 가할 수 있고, 또는 수분이 없는 상태에서 일정 온도(60 내지 100℃)를 가할 수도 있다. 수분을 가한 상태에서는 유효성분이 주변 수분으로 빠져나갈 수 있기 때문에, 수분을 가하지 않은 상태에서 가온을 하는 것이 그 다음 추출 단계에서 유효성분 추출 효율을 상대적으로 더 높일 수 있다.
상기 분쇄는 물리적 분쇄 또는 기계적 분쇄를 의미하고, 나노 분쇄를 포함한 통상의 물리적 분쇄를 모두 포함한다.
상기 추출은 앞에서 언급한대로 통상의 추출방법으로 실시될 수 있다.
상기 제1혼합물을 형성함에 있어 히비스커스 꽃과 스테비아를 일정 온도에서 가온한 후 건조과정을 거쳐 추출하는 경우, 또는 건조과정 이후 분쇄과정까지 거친 경우, 그러한 과정없이 추출하는 것과 비교하여 원재료 유효성분의 추출이 더욱 우수한 효과가 있다.
본 발명의 다른 일 예는 ③ 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐과 스테비아를 혼합하여 제2혼합물을 형성하는 단계; ④ 상기 제2혼합물을 유산균을 이용하여 발효 후 제2발효추출물을 형성하는 단계;를 더 포함하는, 히비스커스 기능성 추출물 제조방법이다.
콜라겐은 동물성 콜라겐과 생선 콜라겐이 대표적이나 식물에도 콜라겐이 함유되어 있고, 히비스커스는 식물성 콜라겐을 추출할 수 있는 대표적인 식물 중의 하나이다.
상기 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐은 시중에 판매하는 성분을 사용할 수도 있고, 또는 공지의 기술로 활용되는 방법을 이용하여 히비스커스 꽃으로부터 콜라겐 성분을 얻어낼 수도 있다.
히비스커스 유래 식물성 콜라겐 추출의 공지 방법으로는, 히비스커스에 물을 가하여 고온에서 열처리한 후 산성용액을 투입하고, 단백질분해효소를 첨가하여 가수분해 과정을 통해 콜라겐을 얻는 방법이 있다. 또 다른 방법으로는 알코올추출 및 열수추출 이후 원심분리기를 이용한 분리정제과정을 거쳐 콜라겐을 얻는 방법도 있다.
히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐은 중량평균분자량이 1500~1000달톤(Da) 이하로, 피부 침투율 및 흡수율이 높아 우수한 노화개선, 주름개선, 미백 활성을 나타낸다.
상기 제2혼합물을 형성함에 있어 사용되는 스테비아는 제1혼합물에서 언급한 스테비아와 동일하게 실시될 수 있다.
제2발효추출물을 형성함에 있어 사용되는 유산균도 제1발효추출물에서 언급한 방법과 동일하게 실시될 수 있다.
상기 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐을 기능성 추출물에 더 포함함으로써, 콜라겐의 합성 및 흡수를 더욱 증진하는 효과가 있다.
또한, 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐을 유산균으로 발효하는 과정을 거쳐 실시함에 따라 그러한 과정없이 실시한 경우와 비교하여 유효성분 함량이 더 높고 흡수율을 높일 수 있는 효과가 있다.
또한, 발효과정에서 스테비아를 혼합하여 실시함으로써 발효율을 높여 유효성분 추출율 및 유효성분 흡수율을 향상시키는 효과도 있다.
상기 제1발효추출물을 단독으로 사용하는 경우보다, 제2발효추출물을 병용하여 사용하였을 때 탄력개선, 주름개선의 기능이 우수한 효과가 있다. 또한, 제2발효추출물을 단독으로 사용하는 경우보다, 제1발효추출물을 병용하여 사용하였을 때 제2발효추출물의 흡수를 증진하여 콜라겐 흡수 및 합성을 더욱 우수하게 하는 효과가 있다.
본 발명의 일 예는 히비스커스 꽃과 스테비아를 포함한 제1혼합물을 유산균으로 발효한 제1발효추출물; 및/또는 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐과 스테비아를 포함한 제2혼합물을 유산균으로 발효한 제2발효추출물을 포함하는 히비스커스 기능성 추출물이다.
본 발명의 일 예는 상기 히비스커스 기능성 추출물을 포함하는 화장료 또는 화장료 조성물이다.
상기 화장료 조성물은 다양한 형태로 제조될 수 있는데, 예컨대, 에멀젼, 로션, 크림(수중유적형, 유중수 적형, 다중상), 용액, 현탁액(무수 및 수계), 무수 생성물(오일 및 글리콜계), 젤, 마스크, 팩 또는 분말 등의 제형으로 제조될 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물은 그 유효성분 이외에 화장료 제제에 있어서 수용가능한 담체를 포함할 수 있다. 여기서 "화장료 제제에 있어서 수용가능한 담체"란 화장료 제제에 포함될 수 있는 이미 공지되어 사용되고 있는 화합물 또는 조성물이거나 앞으로 개발될 화합물 또는 조성물로서 피부와의 접촉시 인체가 적응 가능한 독성 이상의 독성이 없는 것을 말한다. 상기 담체는 본 발명의 조성물에 그것의 전체 중량에 대하여 약 1~99.99 중량%로 포함될 수 있다.
본 발명의 일 예는 상기 히비스커스 기능성 추출물을 포함하는 식품, 기능성 식품, 건강기능식품 또는 이너뷰티 식품 또는 식품 조성물이다.
상기 식품 조성물의 일 예는 히비스커스 기능성 추출물, 혼합유당, 생선콜라겐, 포도당, 결정과당, 구연산, 로즈힙추출분말, 이산화규소, 효소처리스테비아, 니코틴산아미드, 타트체리, 히알루론산, 엘라스틴, 알로에겔, 비타민 B, 비타민 C, 비타민 D로 이루어진 군에서 선택된 2이상을 포함할 수 있다.
본 발명에 의한 히비스커스 기능성 추출물은 생선콜라겐의 흡수를 보조하는 역할로, 흡수율을 높이는 효과가 있다. 또한, 비타민 C도 콜라겐의 흡수를 돕는 유용한 효과가 있다.
본 발명에 의한 히비스커스 기능성 추출물의 일 예는 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐을 포함하고 있고, 상기 식물성 콜라겐은 생선콜라겐과 비교하여 그 흡수율이 상대적으로 우수하고, 특히 발효한 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐은 그 흡수율이 더욱 우수하다.
이하, 본 발명의 실시예로 구체적으로 설명한다.
실시예 1. 제1발효추출물 제조
실시예 1-1.
히비스커스(Hibiscus sabdariffa) 꽃 100g과 스테비아 잎 20g의 시료를 혼합하여 제1혼합물을 형성한다.
락토바실러스 람노서스 유산균 2g을 고체 배지에서 실온에서 24시간 활성화시킨 후, 멸균된 액체 배지에 접종하여 실온에서 24시간 진탕배양시킨 후 종균으로 사용한다.
제1혼합물이 함유된 액체 배지에 미리 배양한 락토바실러스 람노서스 유산균을 첨가하고 실온에서 5일동안 배양하여 발효를 시킨 후 제1발효추출물을 제조하였다.
실시예 1-2.
히비스커스 (Hibiscus sabdariffa) 꽃 100g과 스테비아 잎 20g을 증류수 1L에 투입하여 50℃의 온도에서 2시간 동안 가온한 후, 수분을 제거하고 동결건조한다. 건조 후 기계로 분쇄하여 얻은 분쇄물을 증류수 1L에 투입하고, 가온 후(60~80℃, 2시간, 3회 반복) 열수 추출하여 얻은 추출물을 여과지로 여과하여, 제1혼합물을 형성한다.
락토바실러스 람노서스 유산균 2g을 고체 배지에서 실온에서 24시간 활성화시킨 후, 멸균된 액체 배지에 접종하여 실온에서 24시간 진탕배양시킨 후 종균으로 사용한다.
제1혼합물이 함유된 액체 배지에 미리 배양한 락토바실러스 람노서스 유산균을 첨가하고 실온에서 5일동안 배양하여 발효를 시킨 후 제1발효추출물을 제조하였다.
실시예 1-3.
히비스커스 (Hibiscus sabdariffa) 꽃 100g과 스테비아 잎 20g을 78℃의 온도에서 10분동안 3차례 덖어서 수분을 날려준다. 동결건조 후 기계로 분쇄하여 얻은 분쇄물을 증류수 1L에 투입하고, 가온 후(60~80℃, 2시간, 3회 반복) 열수 추출하여 얻은 추출물을 여과지로 여과하여, 제1혼합물을 형성한다.
락토바실러스 람노서스 유산균 2g을 고체 배지에서 실온에서 24시간 활성화시킨 후, 멸균된 액체 배지에 접종하여 실온에서 24시간 진탕배양시킨 후 종균으로 사용한다.
제1혼합물이 함유된 액체 배지에 미리 배양한 락토바실러스 람노서스 유산균을 첨가하고 실온에서 5일동안 배양하여 발효를 시킨 후 제1발효추출물을 제조하였다.
실시예 2. 제2발효추출물 제조
히비스커스 꽃으로부터 추출된 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐을 준비한다. 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐 10g과 효소처리스테비아 1g을 혼합하여 제2혼합물을 형성한다.
락토바실러스 람노서스 유산균 2g을 고체 배지에서 실온에서 24시간 활성화시킨 후, 멸균된 액체 배지에 접종하여 실온에서 24시간 진탕배양시킨 후 종균으로 사용한다.
제2혼합물이 함유된 액체 배지에 미리 배양한 락토바실러스 람노서스 유산균을 첨가하고 실온에서 5일동안 배양하여 발효를 시킨 후 제2발효추출물을 제조하였다.
실시예 3. 제1발효추출물 및 제2발효추출물의 혼합발효추출물 제조
실시예 3-1.
상기 실시예 1-1의 제1발효추출물과 실시예 2의 제2발효추출물을 10:1의 중량비로 혼합한다.
실시예 3-2.
상기 실시예 1-2의 제1발효추출물과 실시예 2의 제2발효추출물을 10:1의 중량비로 혼합한다.
실시예 3-3.
상기 실시예 1-3의 제1발효추출물과 실시예 2의 제2발효추출물을 10:1의 중량비로 혼합한다.
실시예 4. 화장수 제조
실시예 1, 실시예 2 또는 실시예 3의 발효추출물 8~12중량부, 글리세린 2~5 중량부, 부틸렌글리콜 1~3중량부, 프로필렌글리콘 1~3중량부, 카복시비닐폴리머 0.1~0.5중량부, 피이지-12 노닐페닐에테르 0.1~0.5중량부, 폴리솔베이트 0.1~0.5중량부, 에탄올 8~12중량부, 트리에탄올아민 0.1~0.5중량부, 정제수 100~120중량부를 함유하는 화장수를 통상의 방법에 따라 제조한다.
실시예 5. 이너뷰티 식품 제조
실시예 1, 실시예 2 또는 실시예 3의 발효추출물 4~5중량부, 혼합유당 30~40중량부, 생선콜라겐 20~30중량부, 포도당 20~30중량부, 결정과당 3~10중량부, 비타민C 1~3중량부, 천연라즈베리향 1~3중량부, 구연산 0.5~1중량부, 로즈힙추출분말 0.5~1중량부, 이산화규소 0.5~1중량부, 효소처리스테비아 0.5~1중량부, 니코틴산아미드(나이아신) 0.01~0.1중량부, 비타민B1염산염 0.01~0.1중량부, 비타민B6염산염 0.01~0.1중량부, 락토바실러스 람노서스 0.01~0.1중량부, 비피도박테리움 롱검 0.01~0.1중량부, 비피도박테리움 브레베 0.01~0.1중량부, 비피도박테리움 락티스 0.01~0.1중량부, 비피도박테리움 비피덤 0.01~0.1중량부, 락토바실러스 플란타룸 0.01~0.1중량부, 알로에베라겔 0.01~0.1중량부, 엘라스틴펩타이드 0.01~0.1중량부, 비타민B2 0.01~0.1중량부를 함유하는 분말형 이너뷰티 식품을 통상의 방법에 따라 제조한다.
비교예 1. 스테비아 잎 무첨가 제1발효추출물 제조
히비스커스(Hibiscus sabdariffa) 꽃 100g의 시료를 준비한다.
락토바실러스 람노서스 유산균 2g을 고체 배지에서 실온에서 24시간 활성화시킨 후, 멸균된 액체 배지에 접종하여 실온에서 24시간 진탕배양시킨 후 종균으로 사용한다.
시료가 함유된 액체 배지에 미리 배양한 락토바실러스 람노서스 유산균을 첨가하고 실온에서 5일동안 배양하여 발효를 시킨 후 발효추출물을 제조하였다.
비교예 2. 스테비아 잎 무첨가 제2발효추출물 제조
히비스커스 꽃으로부터 추출된 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐을 준비한다.
락토바실러스 람노서스 유산균 2g을 고체 배지에서 실온에서 24시간 활성화시킨 후, 멸균된 액체 배지에 접종하여 실온에서 24시간 진탕배양시킨 후 종균으로 사용한다.
시료가 함유된 액체 배지에 미리 배양한 락토바실러스 람노서스 유산균을 첨가하고 실온에서 5일동안 배양하여 발효를 시킨 후 발효추출물을 제조하였다.
비교예 3. 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐 준비
히비스커스 꽃으로부터 추출된 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐을 준비한다.
실험예 1. 항산화 활성 측정 비교 실험
DPPH(2.2-diphenyl-1-picryl hydrezyl) 라디칼 소거능을 사용하여 항산화 활성을 측정하였다. Ethyl-alcohol에 녹여 여과한 DPPH 용액과 실시예 1 또는 3의 발효추출물을 1:1로 혼합 후 상온 암소에 10분간 방치한 후 Microplate reader (BioTek, USA)를 이용하여 515 nm에서 흡광도를 측정하여 DPPH 라디칼 제거율(%)을 산출하였다. 라디칼을 제거하는 양성 대조군(positive control)으로 0.1 mg/ml의 아스코르브산(ascorbic acid)을 사용하였다.
[DPPH 라디칼 제거율 측정법]
DPPH 라디칼 제거율(scavenging, %) = (A - B) / A x 100
(A는 공시험액에서 얻은 흡광도, B는 검액에서 얻은 흡광도)
총 5번의 측정을 하였고, 이에 대한 평균 값을 반올림하여 하기 표 1에 나타내었다.
대조군 실시예 1-1 실시예 1-2 실시예 1-3
항산화력(%) 92.6 64.4 76.2 78.1
실시예 3-1 실시예 3-2 실시예 3-3 비교예 1
항산화력(%) 62.6 74.1 76.2 49.8
실험예 2. 콜라겐 합성율 측정 비교 실험
Fibroblast 세포주를 젠타미이신과 10% FBS를 포함한 DMEM에 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 배양하였다. Fibroblast 세포를 well plate에 접종하여 배양한 후 UV 312nm 파장에서 12.5mJ로 조사하였다. 그 후 DMEM 배지에 실시예 1, 2, 3 및 비교예 1, 2, 3을 처리하여 5일 간 추가 배양하고, 배양이 끝난 후 배지를 수거하여 Procollagen Type-I C-Peptide(PIP) EIA kit(Takara Bio Inc. MK101)를 이용하여 생성된 콜라겐 양을 측정하였다. microplate reader(BioTek, USA)를 이용하여 450nm에서 흡광도를 측정한 후 표준 농도곡선을 작성하여 콜라겐 양을 산정하였다. UV 조사전의 콜라겐 양을 100으로 기준 값을 설정하였다. 총 5번의 측정을 하였고, 이에 대한 평균 값을 반올림하여 나타내었다.
UV 조사전 UV 조사후 실시예 1-1 실시예 1-2 실시예 1-3 실시예 2
콜라겐 양 100 43.9 62.2 67.3 68.1 60.8
실시예 3-1 실시예 3-2 실시예 3-3 비교예 1 비교예 2 비교예 3
콜라겐 양 70.2 74.2 76.3 56.8 54.6 50.3
본 발명에 의한 실시예는 자외선에 의한 자극으로부터 우수한 콜라겐 합성능을 보여주어 항노화 효과가 우수한 것을 확인할 수 있다.
실험예 3. 자외선에 의한 MMP-1 활성저해도 측정 비교 실험
Fibroblast 세포주를 젠타미이신(50ug/mL)과 10% FBS를 포함한 DMEM 배지에 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 배양하였다. Fibroblast 세포를 well plate에 접종하여 배양한 후 UV 312nm 파장에서 12.5mJ로 조사하였다. 그 후 DMEM 배지에 실시예 1, 2, 3 및 비교예 1, 2, 3을 처리하여 5일 간 추가 배양하고, 배양이 끝난 후 배지를 수거하여 MMP-1 측정 키트(RPN 2610, Amersham Bioscience, UK)를 이용하여 ELISA reader로 450nm에서 흡광도를 측정하였다. UV 조사후의 MMP-1의 양을 100으로 기준 값을 설정하였다. 총 5번의 측정을 하였고, 이에 대한 평균 값을 반올림하여 나타내었다.
UV 조사후 실시예 1-1 실시예 1-2 실시예 1-3 실시예 2
MMP-1 양 100 53.5 48.6 47.4 44.6
실시예 3-1 실시예 3-2 실시예 3-3 비교예 1 비교예 2 비교예 3
MMP-1 양 48.7 43.9 42.8 60.7 50.6 56.8
본 발명에 의한 실시예는 콜라겐 합성을 저해하는 MMP-1의 발현량을 억제하는 성능이 우수함을 확인할 수 있다.

Claims (7)

  1. ① 히비스커스 꽃과 스테비아 잎을 혼합하여 제1혼합물을 형성하는 단계;
    ② 상기 제1혼합물을 유산균을 이용하여 발효 후 제1발효추출물을 형성하는 단계;
    를 포함하는, 히비스커스 추출물 제조방법.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 ①은
    ⅰ) 히비스커스 꽃과 스테비아 잎을 40 내지 100℃로 가온 후 건조하는 단계;
    ⅱ) 건조 후 분쇄하는 단계; 및
    ⅲ) 분쇄 후 추출하여 제1혼합물을 형성하는 단계;
    로 구성되는 것을 특징으로 하는, 히비스커스 추출물 제조방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    ③ 히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐과 효소처리된 스테비아를 혼합하여 제2혼합물을 형성하는 단계;
    ④ 상기 제2혼합물을 유산균을 이용하여 발효 후 제2발효추출물을 형성하는 단계;
    를 더 포함하는, 히비스커스 추출물 제조방법.
  4. 히비스커스 꽃과 스테비아 잎을 포함한 제1혼합물을 유산균으로 발효한 제1발효추출물; 및
    히비스커스 꽃 유래 식물성 콜라겐과 효소처리된 스테비아를 포함한 제2혼합물을 유산균으로 발효한 제2발효추출물을 포함하는 히비스커스 추출물.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 히비스커스 추출물을 포함하는 화장료 조성물.
  6. 제4항에 있어서,
    상기 히비스커스 추출물을 포함하는 식품 조성물.
  7. 제6항에 있어서,
    혼합유당, 생선콜라겐, 포도당, 결정과당, 구연산, 로즈힙추출분말, 이산화규소, 효소처리스테비아, 니코틴산아미드, 타트체리, 히알루론산, 엘라스틴, 알로에겔, 비타민 B, 비타민 C, 비타민 D로 이루어진 군에서 선택된 1이상을 더 포함하는 식품 조성물.
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KR1020230184493A KR20230175163A (ko) 2021-10-12 2023-12-18 히비스커스 기능성 추출물을 포함하는 식품 조성물

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