KR102592971B1 - 장내 미생물에 대한 박테리오파지를 포함하는 피부 보습 및 주름 개선용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 장내 미생물에 대한 박테리오파지를 포함하는 피부 보습 및 주름 개선용 조성물에 관한 것으로, 상기 조성물은 콜라겐 생성을 증가시키고, 수분 함유량을 증가시키며, 안전성이 높고, 발림성, 흡수력, 향 등의 사용감 평가도 우수하여 피부 보습 및 주름 개선용 화장료 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

장내 미생물에 대한 박테리오파지를 포함하는 피부 보습 및 주름 개선용 조성물{Composition for moisturizing skin and improving wrinkles containing bacteriophages against intestinal microbes}
본 발명은 장내 미생물에 대한 박테리오파지를 함유하는 피부 보습 및 주름 개선용 조성물에 관한 것이다.
박테리오파지는 세균을 감염시키는 바이러스의 일종으로 보통 파지라고 부르기도 한다. 박테리오파지는 핵산으로 이루어진 유전물질 중심부를 단백질 외피가 싸고 있는 단순한 구조의 유기체이며 핵산은 단일 사슬이거나 이중 사슬인 DNA 또는 RNA로 되어 있다. 박테리오파지는 생존에 숙주가 반드시 필요하며, 모든 세균에는 특정 파지가 존재한다고 알려져 있다.
박테리오파지는 숙주에 침투하여 복제 과정을 끝낸 다음, 숙주인 세균의 세포벽을 분해하기 위해 필요한 일군의 효소를 발현시킨다. 이들 효소는 세포벽의 경직성(rigidity) 및 기계적 강성(mechanical strength)을 담당하는 세포벽의 뮤레인(murein) 또는 펩티도글리칸(peptidoglycan) 층을 공격하여 세포벽을 파괴한다.
박테리오파지는 1915년 영국의 세균학자 Twort가 포도상구균(Micrococcus) 집락이 어떤 것에 의해 투명하게 녹는 현상에 대한 연구에서 발견되었다. 또한, 1917년에는 프랑스의 세균학자 d'Herelle이 이질환자 변의 여과액 중에 적리균(Shigella disentriae)을 녹이는 작용을 가진 것이 있다는 것을 발견하고, 이에 대한 연구를 통해 독립적으로 박테리오파지를 발견하였으며, 세균을 잡아먹는다는 뜻에서 박테리오파지라고 명명하였다.
이후, 이질균, 장티푸스균, 콜레라균 등 여러 병원균에 대한 박테리오파지가 계속적으로 발견되었고, 캘리포니아 공과대학의 Delbruck와 제2차 세계대전 중에 미국으로 건너간 유럽의 과학자들에 의해 대장균의 박테리오파지에 대한 연구가 집중되었다. 1950년 Flemming에 의해 페니실린이 발견된 이후, 항생제 사용의 보급화로 인해 일부 동유럽 국가에 한정되어서만 박테리오파지에 대한 연구가 계속되었다. 그러나, 2000년 이후에는 지속적인 항생제 오남용으로 인해 다제 내성(multi-drug resistant)을 지닌 병원성 세균의 출현 빈도가 높아져 항생제 대체 물질로의 개발 가능성 때문에 다시 박테리오파지에 대한 연구가 선진국들을 중심으로 진행되고 있다.
그러나, 지금까지의 박테리오파지 기술은 감염질환에 대한 세균을 타깃으로 하는 항생물질에 대한 적용이었다면, 본 발명자들은 박테리오파지를 이용하여 피부 보습 및 주름 개선용 조성물을 제공하기 위해 예의 노력하였다.
이러한 배경 하에, 본 발명자들은 장내 미생물에 대한 박테리오파지를 함유하는 피부 보습 및 주름개선용 조성물을 제조하고, 상기 조성물이 콜라겐 생성을 증가시키고, 피부 수분함유량을 증가시키며, 안전성이 우수하고, 발림성, 흡수력, 향 등의 사용감 평가도 우수하여 피부 보습 및 주름 개선을 위해 유용하게 사용될 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
대한민국 등록특허 KR10-1993575호
본 발명의 목적은 수탁번호 KCTC 15445BP로 기탁된 박테리오파지, 박테리오파지 대사산물 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는, 피부 보습 및 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 조성물을 대상체의 피부에 적용하는 단계를 포함하는, 피부 보습 개선 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 조성물을 대상체의 피부에 적용하는 단계를 포함하는, 피부 주름 개선 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나, 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 제한되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 수 있으며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 기술자에게 본 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
본 명세서에서 사용된 용어는 실시예들을 설명하기 위한 것이며 본 발명을 제한하고자 하는 것은 아니다. 본 명세서에서, 단수형은 문구에서 특별히 언급하지 않는 한 복수형도 포함한다. 명세서에서 사용되는 "포함한다 (comprises)" 및/또는 "포함하는 (comprising)"은 언급된 구성요소 외에 하나 이상의 다른 구성요소의 존재 또는 추가를 배제하지 않는다. 명세서 전체에 걸쳐 동일한 도면 부호는 동일한 구성 요소를 지칭하며, "및/또는"은 언급된 구성요소들의 각각 및 하나 이상의 모든 조합을 포함한다. 비록 "제1", "제2" 등이 다양한 구성요소들을 서술하기 위해서 사용되나, 이들 구성요소들은 이들 용어에 의해 제한되지 않음은 물론이다. 이들 용어들은 단지 하나의 구성요소를 다른 구성요소와 구별하기 위하여 사용하는 것이다. 따라서, 이하에서 언급되는 제1 구성요소는 본 발명의 기술적 사상 내에서 제2 구성요소일 수도 있음은 물론이다.
다른 정의가 없다면, 본 명세서에서 사용되는 모든 용어(기술 및 과학적 용어를 포함)는 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 기술자에게 공통적으로 이해될 수 있는 의미로 사용될 수 있을 것이다. 또한, 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 용어들은 명백하게 특별히 정의되어 있지 않는 한 이상적으로 또는 과도하게 해석되지 않는다.
본 발명은 수탁번호 KCTC 15445BP로 기탁된 박테리오파지, 박테리오파지 대사산물 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는, 피부 보습 및 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 박테리오파지(bacteriophage)는 특정 세균에 감염하여 당해 세균의 성장을 억제하고 저해하는 세균 특이적 바이러스로, 단일 혹은 이중 사슬의 DNA 또는 RNA를 유전 물질로 포함하는 바이러스를 의미한다.
본 발명의 박테리오파지는 장내 미생물인 속 균주에 대해 용균 활성이 탁월하다.
본 발명의 박테리오파지는 본 발명자들에 의해 2023년 5월 18일자로 한국생명공학연구원 생물자원센터에 기탁번호 KCTC 15445BP로 기탁되었다. 본 발명의 구체적인 일 실시예에서, 본 발명자들은 장내 미생물을 용균하는 박테리오파지를 선별하였고, 분리된 박테리오파지를 한국생명공학연구원에 기탁하였다.
상기 장내 미생물은 Escherichia coli, Aeromonas hydrophila, Bacillus cereus, Lactobacillus sp., Bifidobacterium sp., Clostridium sp., Staphylococcus sp., Acinobacterium sp., Enterococcus faecium, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosaEnterobacter sp.로 이루어진 군 중에서 선택되는 균주일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 용균은 박테리아의 세포벽 또는 세포질막이 파괴되어 박테리아가 용해되는 현상을 의미하며, 박테리아가 사멸되는 현상을 말한다.
본 발명의 조성물은 세포 독성이 없는 것을 확인하였다.
본 발명의 조성물은 콜라겐 생성을 증가시킬 수 있고, 피부의 수분함유량을 증가시킬 수 있다. 상기 조성물은 피부 주름 및 보습 효과를 개선시킬 수 있다.
본 발명의 개선은 본 발명의 조성물을 이용하여 피부의 노화, 건조 또는 염증 증상을 완화시키는 것을 의미한다.
본 발명의 조성물의 유효성분은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 90 중량%로 포함될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 유효성분은 0.01 내지 80중량%, 0.01 내지 70중량%, 0.01 내지 60중량%, 0.01 내지 50중량%, 0.01 내지 40중량%, 0.01 내지 30중량%, 0.01 내지 20중량%, 0.01 내지 15중량%, 0.01 내지 10중량%, 0.01 내지 5중량%일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군 중에서 선택되는 제형을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 화장료 조성물은 화장료 조성물에 통상적으로 첨가되는 성분, 예컨대 안정화제, 가용화제, 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 추가적으로 포함할 수 있다.
이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한제, 정제수 등을 들 수 있다. 상기 첨가해도 되는 배합 성분은 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.01 내지 5중량%, 보다 구체적으로 0.01 내지 3중량%로 배합될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 대상체의 피부에 적용하는 단계를 포함하는, 피부 보습 개선 방법을 제공한다.
본 발명의 보습 또는 피부 보습은 피부에 수분감을 증가시켜주고, 촉촉한 상태를 유지시키는 것을 의미한다. 피부 보습 효과는 피부의 주름개선, 탄력도 증가에 도움을 줄 수 있다.
본 발명의 구체적인 일 실시예에서는, 본 발명의 조성물은 피부의 수분함량을 60A.U 이상으로 증가시킴을 확인하였다(도 2).
본 발명의 대상체는 인간을 포함한 포유동물 또는 가축류를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 상기 가축류는 인간에 의해 순화, 개량되어 사람과 함께 공동생활을 하는 유용한 동물을 지칭하며, 예를 들어, 돼지, 소, 닭, 말, 오리 또는 개 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 적용은 손가락, 브러쉬, 솜뭉치, 패드, 스프레이, 스폰지, 면봉, 롤-온(roll-on) 등에 의한 적용과 같이, 대상체의 피부에 투여 또는 도포하는 방법을 포함한다. 해당 분야의 통상의 기술자는 적용하는 적절한 방법을 용이하게 결정할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 대상체의 피부에 적용하는 단계를 포함하는, 피부 주름 개선 방법을 제공한다.
본 발명의 용어인 조성물, 대상체 및 적용은 상기 기재된 바와 같다.
본 발명의 주름 개선은 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 것을 의미한다.
본 발명의 구체적인 일 실시예에서, 본 발명의 조성물은 양성 대조물질인 L-ascorbic acid를 처리한 것보다 콜라겐 생성을 더 많이 증가시킨 것을 확인하였다(도 1).
본 발명의 콜라겐은 피부의 섬유아세포(Fibroblast)에서 생성되는 주요 기질 단백질로서 세포외 간질에 존재하고, 중요한 기능으로는 피부의 기계적 견고성, 결합조직의 저항력과 조직의 결합력, 세포접착의 지탱, 세포분할과 분화(유기체의 성장 혹은 상처 치유시)의 유도 등이 알려져 있다.
상기 콜라겐은 연령 및 자외선 조사에 의한 광 노화에 의해 감소하며, 콜라겐을 분해하는 콜라게나제 효소 활성으로 콜라겐 감소가 촉진된다. 이는 피부의 주름 형성과 밀접한 연관이 있다고 알려져 있다.
본 발명의 장내 미생물에 대한 박테리오파지를 유효성분으로 포함하는 조성물은 콜라겐 생성을 증가시켜 피부 주름을 개선시키고, 수분 함량을 증가시켜 피부 보습 효과를 개선시킬 수 있다.
본 발명은 장내 미생물에 대한 박테리오파지를 포함하는 피부 보습 및 주름 개선용 조성물을 제공하고, 상기 조성물은 콜라겐 생성을 증가시키고, 수분 함유량을 증가시키며, 안전성이 높고, 발림성, 흡수력, 향 등의 사용감 평가도 우수하여 피부 보습 및 주름 개선용 화장료 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 SHC-100을 사용한 후 콜라겐 함량을 측정한 도이다.
도 2는 SHC-100을 사용한 후 피부 보습 개선을 확인하기 위해 수분함유량을 측정한 도이다.
도 3은 SHC-100을 사용한 후 피부 보습 변화율을 측정한 도이다.
이하, 본 발명의 내용을 하기의 실시예 및 실험예를 통해 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예 및 실험예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
실시예 1. 시험물질의 제조
박테리오파지를 유효성분으로 함유한 시험물질 SHC-100을 0.01 내지 10% 농도로 희석하여 시험물질로서 실험에 사용하였다.
1-1. 대상 박테리아 및 파지의 샘플링
자연계로부터 채취한 시료와 장내 미생물 배양액을 1/100~1,000 비율로 함께 첨가하여 30 내지 37℃에서 3 내지 4시간 동안 진탕 배양하였다. 원심 분리한 상등액에서 장내 미생물 배양액을 1/100 비율로 접종하여 진탕 배양을 하였다. 이 상등액으로 소프트 아가 오버레이 (soft agar overlay) 방법을 수행하였다.
상기 소프트 아가 오버레이 방법은 탑 아가 (top agar, 0.4% 한천을 이용하여 고체 배지 위에 붙이는 것)에서 성장하는 숙주세포를 이용하여 박테리오파지가 용균하는 것을 관찰하는 방법으로, 스크리닝하였다.
1-2. 박테리오파지의 동정
1-2-1. 박테리오파지의 형태학적 분석
박테리오파지의 DNA 패턴분석을 위해, 박테리오파지의 genomic DNA를 추출하여 제한효소로 자른 다음 전기영동법으로 분석하였다.
또한, 박테리오파지의 구조 단백질 분석을 위해, 1x109 PFU/ml 농도의 정제된 박테리오파지 용액과 5X SDS 시료 용액을 혼합하여 95℃에서 5분 동안 끓인 다음, 10% SDS-PAGE를 수행하였다.
실시예 2. 세포 내 콜라겐 생성 평가 방법
2-1. 세포주 준비
세포주 정보는 하기와 같다. 세포주는 인간 섬유아세포 CCD-986SK이고, 공급원은 ATCC CRL-1947이며, Lot No.는 70016637이다.
2-2. 세포주 보관
10%(v/v) DMSO가 포함된 배양배지(culture medium)에 풀어서 약 1mL씩 분주하고, 동결한 후에 액체질소 보존용기에 옮겨서 보존하였다.
시험 전에 세포(cell)를 풀어서 사용하였으며, 시험 적용과 관련하여 해동 및 배양은 다른 시험과 공동으로 사용하였다.
2-3. 세포 배양 조건
37 ± 1 ℃의 온도, 5%의 CO2 농도, 90% 이상의 가습 조건의 습도 및 CO2 세포배양기에서 세포를 배양하였다.
2-4. 세포 배양액
2-4-1. 완전 배지
완전 배지 조성은 하기 표 1과 같다.
2-4-2. 무혈청 배지
무혈청 배지 조성은 하기 표 2와 같다.
2-5. 세포독성시험
2-5-1. 군 구성
시험물질은 5개의 농도로 희석하여 하기 표 3과 같이 수행되었다.
2-5-2. 세포 분주
96 웰 플레이트(well plate)에 세포를 1 x 104 (100 μL/well)로 분주하고, 37℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다.
2-5-3. 시험물질 처리
시험물질이 농도별로 포함된 무혈청 배지로 교체하여 37℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다.
2-5-4. MTT assay
MTT 용액을 200 μL/well 분주하고, 37℃, 5% CO2 배양기에서 2시간 동안 배양하였다. 배양이 끝나면 배지를 제거하고, DMSO 용액을 150 μL/well 넣고, 플레이트 쉐이커(plate shaker)에서 20분 추출하였다.
2-5-5. 세포 생존율 결과 분석
ELISA 리더기(reader)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였고, 세포 생존율은 하기 식에 따라 산출하였다.
2-6. 세포 내 콜라겐 생성 시험
2-6-1. 군 구성
시험물질은 3개의 농도로 희석하여 하기 표 4와 같이 수행하였다.
2-6-2. 세포 분주
48 웰 플레이트(well plate)에 세포를 5 x 104 (1mL/well) 분주하고, 37 ℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다.
2-6-3. 시험물질 처리
시험물질 및 양성대조물질이 첨가된 무혈청 배지로 교체하고, 37 ℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다.
2-6-4. 단백질 정량
세포배양액을 회수하여 BCA protein assay reagent kit(Thermo scientific PIERCE, USA)에 따라 수행한 후 BSA 표준 곡선에 따라 단백질 함량을 측정하였다.
2-6-5. 콜라겐 정량
세포배양액을 회수하여 Procollagen type I Peptide EIA kit (TAKARA, Japan)에 따라 수행한 후 콜라겐 표준 곡선에 따라 함량을 측정하였다.
2-7. 결과 산출
세포 내 콜라겐 생성율은 단백질 함량에 대한 콜라겐 함량으로 환산하였으며, 하기 식에 따라 산출되었다.
2-8. 통계 처리
각 실험 결과는 SPSS 통계 프로그램(ver. 19.0)을 이용하여 통계분석을 수행하였다. 먼저, 레빈의 검정(Levene's test)를 수행한 후, 일원배치 분산분석(one way ANOVA test)를 실시하여 실험군 간의 유의성이 확인되면 분산의 동질성 유무에 따라 사후검정(분산이 동질한 경우 던컨의 다중검정(Duncan's new multiple range test), 분산이 이질인 경우 던넷의 T3 검정(Dunnett's T3))을 실시하였다. 신뢰구간은 95%로 설정하였다.
실시예 3. 피부 보습의 측정 및 평가 방법
3-1. 환경 조건
20 내지 22℃의 온도 및 42 내지 51%의 습도가 일정하게 유지되는 항온·항습 조건에서 실험을 수행하였다.
3-2. 측정 부위 및 절차
측정 부위는 대상자의 안면부로 지정하여 측정하였다. 대상자 방문 시 센터의 동일한 세정제로 시험 부위(측정 부위)를 세정한 후, 상기 항온·항습 조건에서 30분간 안정을 취하도록 하였다. 객관적이고 정확한 측정을 위해 매 측정시 동일한 시험자가 측정하였다.
3-3. 피부 보습의 측정 방법
대상자의 안면부의 볼 부위의 수분 함유량 평가를 위해 코니오미터 (Corneometer)를 이용하여 측정하였다. 코니오미터는 전기용량 (capacitance)을 측정 원리로 하며, 물과 측정 물질의 유전상수 (dielectric constant) 차이 값을 측정값으로 나타낸다. 코니오키터 프로브(Corneometer probe)를 피부에 접촉시켜 센서(Sensor)를 이용하여 연속적으로 3회 측정한 평균값을 측정값으로 하였다.
단위는 임의단위인 A.U (Arbitrary Unit)이며, 결과 값이 증가할수록 피부 보습이 개선됨을 의미한다.
3-4. 설문 평가
대상자는 시험제품(시험물질)을 사용하고 4주 후에 의뢰사에서 요청한 항목에 대해 유효성 설문평가를 진행하였다.
3-5. 순응도 평가
순응도 평가는 대상자에게 제품과 순응일지를 배포함으로써, 대상자가 시험제품에 대한 사용 여부를 직접 기입하도록 하였다.
이에 대하여, 하기와 같은 식으로 순응도를 평가하였다. 순응도가 80% 미만인 경우에는 시험 데이터에서 제외하였다.
3-6. 안전성 평가
시험제품을 사용하는 동안, 모든 대상자에게서 보고되는 이상반응 증상의 유무를 확인하였다.
3-7. 부작용 평가
모든 이상반응을 기록하고, 매회 대상자가 방문할 때마다 문진과 전문가의 육안평가로 피부를 진찰하여 개인별 증례기록서 (Case Report Form)에 기록하였다.
중증도, 인과관계, 관련 조치, 결과에 따라 각 범주에 해당하는 이상반응 대상자 수, 발현율, 발현 양상을 기재하였다. 시험 중지 또는 탈락 사유가 발생하는지 점검하여 증례기록서에 기재하였다.
실험예 1. 세포독성 평가
SHC-100(시험물질)을 0.65%, 1.25%, 2.5%, 5% 및 10%의 농도로 처리한 결과, 각각의 농도에서 96.98 ± 0.34%, 92.45 ± 1.61%, 8.00 ± 0.52%, 7.45 ± 0.13% 및 7.78 ± 0.20%의 세포 생존율이 관찰되었다.
세포독성 시험 결과, 1.25% 이하 농도에서 70% 이상의 세포 생존율이 관찰되었으며, CCD-986SK 세포를 이용한 세포 내 콜라겐 생성 시험에서 사용되는 시료의 최고 농도는 1.25%로 선택하였다.
실험예 2. 세포 내 콜라겐 생성 평가
SHC-100(시험물질)을 0.5%, 1% 및 1.25% 농도로 처리한 결과, 각각의 농도에서 192.90 ± 7.07%, 181.45 ± 3.02%, 119.81 ± 9.09%의 콜라겐 함량이 측정되었다. 한편, 양성 대조물질인 L-ascorbic acid를 200 μM을 처리한 결과, 대조군에 비해 138.58 ± 4.11%로 세포 내 콜라겐 생성이 증가되는 것을 관찰하였다(도 1).
이를 통해, 세포 내 콜라겐 생성 시험에서 SHC-100(시험물질)은 콜라겐 생성을 현저하게 증가시킴을 확인하였다.
실험예 3. 피부 순응도 및 보습 평가
3-1. 테스트 대상자 정보
시험물질 SHC-100의 적용 테스트에 참여한 대상자의 정보는 하기 표 5 내지 표 7과 같다.
표 5에 나타낸 바와 같이, 테스트 대상자는 22명의 여성이고, 나이는 41.6 ± 11.2세이다. 표 6에 대상자 연령대를 나타낸 바와 같이, 20대는 5명으로 22.7%, 30대는 5명으로 22.7%, 40대는 6명으로 27.3% 및 50대는 6명으로 27.3%의 비율로 구성되었다. 표 7은 각 대상자의 피부 타입을 나타낸 것이다.
3-2. 순응도 평가
테스트를 종료한 모든 대상자가 시험제품(SHC-100)을 사용한 순응도가 90% 이상으로 평가되었다(표 8).
3-3. 보습 평가
코니오미터(Corneometer)를 이용하여 시험제품 사용 전, 사용 2주 후 및 사용 4주 후 수분함유량을 측정한 결과는 표 9, 도 2 및 도 3에 나타낸 바와 같다.
정규성 검정에 따라 비모수적 방법인 Friedman test 및 모수적 방법인 Repeated measures ANOVA로 확인한 결과, A.U 값은 사용 전과 비교하여 사용 2주 및 4주 후에 통계학적으로 유의하게 증가하였다.
이를 통해, 시험제품(SHC-100)을 사용한 후, 피부 보습이 시간이 지남에 따라 개선됨을 시사한다.
실험예 4. 유효성 및 사용감 평가
시험제품 사용 후 유효성 평가를 위해 등록 시험대상자 22명에게 설문 평가를 수행하였다(표 10).
그 결과, 시험제품 사용 후 피부 주름이 개선되고, 피부 톤도 맑아지는 등 피부 개선에 효과가 있음을 확인하였다.
또한, 제품 사용감 평가를 위해 등록 시험대상자 22명에게 설문 평가를 수행하였다(표 11).
그 결과, 시험제품은 발림성, 촉촉함 및 흡수력이 우수하고, 향에 대한 선호도도 높아 전반적인 사용감이 매우 좋은 것을 확인하였다.
실험예 5. 안전성 평가
시험제품(SHC-100)을 사용하는 동안 발생된 이상반응의 증상은 없었다.
5-1. 피부과 전문의에 의한 이상반응 평가
시험 대상자들은 시험제품을 사용한 후, 알레르기성 접촉 피부염(allergic contact dermatitis)이나 자극성 접촉 피부염(irritant contact dermatitis)에 대한 이상반응 증상은 나타나지 않음을 확인하였다.
5-2. 시험 대상자에 의한 피부이상반응 보고
시험 대상자를 대상으로 확인한 결과, 시험제품 사용 후 피부 이상반응과 관련된 특이 증상발생은 보고되지 않았다.
5-3. 부작용 발생사례
시험제품 사용 후 부작용 발생사례는 없었다.
이를 통해, 본 발명의 장내 미생물에 대한 박테리오파지를 함유하는 조성물을 포함하는 시험제품 SHC-100은 콜라겐 생성을 증가시켜 주름을 개선시키고, 피부 보습의 평가 결과 제품 사용 후 유의하게 증가되며, 안전성도 우수함을 확인하였다.
이상 본 발명의 실시예들을 설명하였으나, 본 발명은 상기 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 제조될 수 있으며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.
한국생명공학연구원 KCTC15445BP 20230518

Claims (10)

  1. 수탁번호 KCTC 15445BP로 기탁된 박테리오파지, 박테리오파지 대사산물 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는, 화장료 조성물로서,
    상기 조성물은 피부 보습 및 주름을 개선시키는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 콜라겐 생성을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 수분 함유량을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
  6. 삭제
  7. 제1항에 있어서,
    상기 유효성분은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 90 중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군 중에서 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
  9. 제1항의 조성물을 인간을 제외한 대상체의 피부에 적용하는 단계를 포함하는, 피부 보습 개선 방법.
  10. 제1항의 조성물을 인간을 제외한 대상체의 피부에 적용하는 단계를 포함하는, 피부 주름 개선 방법.
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