KR102556261B1 - 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물 및 그 제조방법 - Google Patents

발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물 및 그 제조방법 Download PDF

Info

Publication number
KR102556261B1
KR102556261B1 KR1020220082959A KR20220082959A KR102556261B1 KR 102556261 B1 KR102556261 B1 KR 102556261B1 KR 1020220082959 A KR1020220082959 A KR 1020220082959A KR 20220082959 A KR20220082959 A KR 20220082959A KR 102556261 B1 KR102556261 B1 KR 102556261B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
extract
noni
fermented
fermented noni
polysaccharide
Prior art date
Application number
KR1020220082959A
Other languages
English (en)
Inventor
박은영
김용덕
김수진
김은민
최지수
권희연
나임정
이재연
최선일
한웅호
먼시아오
이세정
오건
이옥환
김승형
성금수
Original Assignee
(주)엔에스티바이오
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by (주)엔에스티바이오 filed Critical (주)엔에스티바이오
Priority to KR1020220082959A priority Critical patent/KR102556261B1/ko
Priority to TW112124165A priority patent/TW202402317A/zh
Priority to KR1020230083269A priority patent/KR20240007068A/ko
Priority to US18/343,692 priority patent/US20240008518A1/en
Application granted granted Critical
Publication of KR102556261B1 publication Critical patent/KR102556261B1/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/125—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/065—Microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12G—WINE; PREPARATION THEREOF; ALCOHOLIC BEVERAGES; PREPARATION OF ALCOHOLIC BEVERAGES NOT PROVIDED FOR IN SUBCLASSES C12C OR C12H
    • C12G3/00—Preparation of other alcoholic beverages
    • C12G3/02—Preparation of other alcoholic beverages by fermentation
    • C12G3/026—Preparation of other alcoholic beverages by fermentation with health-improving ingredients, e.g. flavonoids, flavones, polyphenols or polysaccharides, added before or during the fermentation stage; with flavouring ingredients added before or during the fermentation stage
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/324—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the immune system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/20—Natural extracts
    • A23V2250/21—Plant extracts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2300/00—Processes
    • A23V2300/10—Drying, dehydrating
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2300/00—Processes
    • A23V2300/18—Fractionation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/125—Casei
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/143—Fermentum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/169—Plantarum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/175—Rhamnosus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/21—Streptococcus, lactococcus
    • A23V2400/231—Lactis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/51—Bifidobacterium
    • A23V2400/519—Breve
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/51—Bifidobacterium
    • A23V2400/531—Lactis
    • A23Y2220/17—
    • A23Y2220/35—
    • A23Y2220/67—
    • A23Y2220/73—
    • A23Y2300/49—

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Microbiology (AREA)

Abstract

본 발명은 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다. 본 발명은 발효 노니 추출물로부터 제조된 다당체 추출물을 제공할 수 있다. 본 발명은 농도가 200㎍/mL인 상기 다당체 추출물 수용액을 RAW264.7 대식세포에 공급하였을 때 NO 생산량은, 상기 다당체 추출물 용액을 공급하지 않은 RAW264.7 대식세포 대비 200% 내지 500%인 것을 특징으로 하는 발효 노니 다당체 추출물을 제공할 수 있다.

Description

발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물 및 그 제조방법{FOOD COMPOSITION FOR ENHANCING IMMUNE FUNCTION COMPRISING POLYSACCHARIDES FROM FERMENTED NONI AND METHOD FOR PREPARING THE SAME}
본 발명은 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.
면역은 체내에 존재하는 자기방어체계로서 인체가 외부로부터 침입해오는 각종 물질이나 생명체를 자기 자신에 대한 이물질로 인식하여 제거하고 대사시키는 과정이다.
산업화, 환경의 오염, 고령화 등으로 면역력 저하에 따른 질병치료를 위해서는 약학적 치료제보다는 사전 관리가 가능하도록 섭취가 용이한 식품 또는 건강기능식품으로의 개발이 필요하다.
현재 식품의약품안전처에 등록된 ‘면역기능 증진’ 기능성인정 원료에는 인삼, 홍삼을 비롯하여 L-글루타민, 게르마늄효모, 표고버섯균사체, 효모 베타글루칸, 인삼다당체 추출 등이 있다. 이러한 연구들은 단순하게 조성물에 대한 면역 증진 연구만이 진행되어 있을 뿐, 생물전환능이 우수한 미생물(유산균)을 이용하여 생체 이용률을 증진시키기 위한 소재 개발 및 면역효능이 우수한 다당체 추출공정 최적화 연구는 미흡한 실정이다.
최근 건강에 대한 관심이 증대됨에 따라 체내 생리활성이 우수하며 부작용 위험이 적은 천연물을 이용한 다양한 건강기능식품개발에 관한 연구가 활발히 진행되고 있다. 또한, COVID-19의 대확산으로 면역 기능에 대하여 전세계적 관심이 크게 증가하여 관련 연구가 많이 진행되고 있다.
본 발명은 노니(Morinda citrifolia)를 발효시켜 면역 기능을 효과적으로 증진시키는 다당체 추출물을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 면역 기능을 효과적으로 증진시키는 발효 노니 다당체 추출물의 제조방법을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.
상술한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 발효 노니 추출물로부터 제조된 다당체 추출물을 제공할 수 있다. 본 발명은 농도가 200㎍/mL인 상기 다당체 추출물 수용액을 RAW264.7 대식세포에 공급하였을 때 NO 생산량은, 상기 다당체 추출물 용액을 공급하지 않은 RAW264.7 대식세포 대비 200% 내지 500%인 것을 특징으로 하는 발효 노니 다당체 추출물을 제공할 수 있다.
일 실시 예에 있어서, 상기 발효 노니는 노니에 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum), 비피도박테리움 락티스 (Bifidobacterium lactis), 락토바실러스 람노수스 (Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 카제이 (Lactobacillus casei), 락토바실러스 퍼멘텀 (Lactobacillus fermentum), 비피도박테리움 브레브 (Bifidobacterium breve) 및 락토코커스 락티스 서브스피셔스 락티스 (Lactococcus lactis subsp. lactis) 중 적어도 하나의 균주를 접종하여 제조된 것이고, 상기 다당체 추출물은 상기 발효 노니 추출물에 주정용 에탄올을 혼합한 후 생성된 침전물을 건조시켜 제조된 것일 수 있다.
일 실시 예에 있어서, 상기 발효 노니는 기탁번호가 KCCM12965P인 균주를 접종하여 제조된 것이고, 상기 다당체 추출물은, 상기 발효 노니 추출물에 주정용 에탄올을 혼합한 후 생성된 침전물을 건조시켜 제조된 것일 수 있다.
일 실시 예에 있어서, 상기 발효 노니 추출물의 고형분함량은 5 내지 40brix일 수 있다.
일 실시 예에 있어서, 상기 주정용 에탄올의 농도는 90 내지 97%이고, 상기 발효 노니 추출물과 상기 주정용 에탄올의 혼합 부피 비율은 1:3 내지 1:7일 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명은 노니에 유산균을 접종하여 발효 및 숙성시키는 단계, 상기 발효 및 숙성시켜 얻은 발효 노니로부터 발효 노니 추출물을 제조하는 단계, 상기 발효 노니 추출물에 주정용 에탄올을 혼합한 후 다당체 침전물을 수득하는 단계 및 상기 다당체 침전물을 활용하여 발효 노니 다당체 추출물 건조 분말을 획득하는 단계를 포함하는 발효 노니 다당체 추출물의 제조 방법을 제공할 수 있다.
본 발명에 따른 발효 노니 다당체 추출물은 발효 홍삼, 일반 노니 추출물, 발효 노니 추출물보다 우수한 면역증강 활성을 나타낸다. 특히, 발효 노니 추출물에서 추출한 다당체는 발효 노니 추출물 대비 200% 이상 높은 면역활성을 나타낸다.
도 1은 실험 예1에 따른 NO production 측정 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2는 실험 예3에 따른 세포 독성 평가 결과를 나타내는 그래프이다.
도 3은 실험 예2에 따른 NO production 측정 결과를 나타내는 그래프이다.
도 4는 주정용 에탄올 혼합 비율에 따른 생산 수율을 나타내는 그래프이다.
도 5는 주정용 에탄올 혼합 비율에 따른 총당 함량을 나타내는 그래프이다.
도 6은 주정용 에탄올 혼합 비율에 따른 세포 독성을 나타내는 그래프이다.
도 7은 주정용 에탄올 혼합 비율에 따른 NO production을 나타내는 그래프이다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 명세서에 개시된 실시 예를 상세히 설명하되, 도면 부호에 관계없이 동일하거나 유사한 구성요소에는 동일한 참조 번호를 부여하고 이에 대한 중복되는 설명은 생략하기로 한다. 또한, 본 명세서에 개시된 실시 예를 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 명세서에 개시된 실시 예의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다. 또한, 첨부된 도면은 본 명세서에 개시된 실시 예를 쉽게 이해할 수 있도록 하기 위한 것일 뿐, 첨부된 도면에 의해 본 명세서에 개시된 기술적 사상이 제한되지 않으며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
제1, 제2 등과 같이 서수를 포함하는 용어는 다양한 구성요소들을 설명하는데 사용될 수 있지만, 상기 구성요소들은 상기 용어들에 의해 한정되지는 않는다. 상기 용어들은 하나의 구성요소를 다른 구성요소로부터 구별하는 목적으로만 사용된다.
단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다.
본 명세서에서, "포함한다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
본 발명은 발효 노니 다당체 추출물의 제조방법 및 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물에 관한 것이다.
본 명세서에서 ‘발효 노니’는 노니에 유산균을 접종한 후 소정 기간 발효 및 숙성시킨 것을 의미한다.
본 명세서에서 ‘발효 노니 추출물’은 상기 발효 노니의 착즙액 또는 상기 착즙액에 농축 및 희석 중 적어도 하나의 과정을 수행하여 수득한 액체를 의미한다.
본 명세서에서 ‘발효 노니 다당체 추출물’은 상기 발효 노니 추출물에 물리적, 화학적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 적용하여 수득한 조성물을 의미한다.
본 명세서에서, ‘면역기능 증진용 식품 조성물’이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 가지는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체내조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미한다.
본 명세서에서, 면역기능 증진용 식품 조성물로는 각종 식품류, 음료, 껌, 차 비타민 복합체, 기능성 식품 등이 있다. 나아가, 본 발명은 여러가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있으며, 상기 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 상기 성분은 본 발명에 따른 발효 노니 다당체 추출물의 면역 증진 기능을 저해하지 않는 범위 내에서 적정량 첨가될 수 있다. 예를 들어, 상기 성분은 상기 면역기능 증진용 식품 조성물 전체 중량을 기준으로 0.1 내지 1중량%로 포함될 수 있다.
또한, 상기 면역기능 증진용 식품 조성물에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 면역 증진용 식품 조성물의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
이러한 음료, 과립, 정제, 파우더, 환, 캡슐 제형을 갖는 면역 증진용 조성물은 휴대가 간편하고 언제 어디서나 수시로 섭취하기가 용이하다.
이하, 본 발명에 따른 발효 노니 다당체 추출물 제조방법에 대하여 구체적으로 설명한다.
본 발명에 따른 제조 방법은, (S1) 노니 열매에 유산균을 접종하여 발효 및 숙성시키는 단계, (S2) 상기 발효 및 숙성시켜 얻은 발효 노니로부터 발효 노니 추출물을 제조하는 단계, (S3) 상기 발효 노니 추출물에 주정용 에탄올을 혼합한 후 다당체 침전물을 수득하는 단계, (S4) 상기 다당체 침전물을 활용하여 발효 노니 다당체 추출물 건조 분말을 획득하는 단계를 포함할 수 있다.
(S1) 단계
S1 단계에서는, 노니 열매에 유산균을 접종하여 발효 및 숙성시킬 수 있다. 상기 노니 열매를 발효시키기 위해 사용되는 유산균은 하기 7종의 유산균 중 적어도 하나를 포함하는 복합 유산균일 수 있다.
(1) 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum)
(2) 비피도박테리움 락티스 (Bifidobacterium lactis)
(3) 락토바실러스 람노수스 (Lactobacillus rhamnosus)
(4) 락토바실러스 카제이 (Lactobacillus casei)
(5) 락토바실러스 퍼멘텀 (Lactobacillus fermentum)
(6) 비피도박테리움 브레브 (Bifidobacterium breve)
(7) 락토코커스 락티스 서브스피셔스 락티스 (Lactococcus lactis subsp. lactis)
이때, 상기 7종의 유산균의 혼합비는 락토바실러스 플란타럼 60 내지 65 중량%, 비피도박테리움 락티스 10 내지 15 중량%, 락토바실러스 카제이 1 내지 10 중량%, 락토바실러스 퍼멘텀 1 내지 10 중량%, 비피도박테리움 브레브 1 내지 10 중량% 및 락토코커스 락티스 서브스피셔스 락티스 1 내지 10 중량%일 수 있다.
상기 7종의 유산균의 혼합비 중 하나라도 상기 범위를 만족하지 않는다면, 노니 열매의 발효가 제대로 이루어지지 않을 수 있다.
또한, 상기 혼합 비에 의해 혼합된 7종의 유산균을 포함하는 복합 유산균에 의해 발효된 노니 열매는 발효 과정에서 생성되는 효소 및 천연 방부제 역할을 하는 물질에 의해 소화 흡수율이 좋아지고 보관성이 좋아져 장기간 저장할 수 있는 장점이 있으나, 상기 복합 유산균이 상기 혼합비를 벗어날 경우, 이와 같은 장점들이 발현되지 않을 수 있다.
한편, 상기 노니 열매의 발효 과정에는 기탁번호가 KCCM12965P인 균주(Lactobacillus brevis NST707)가 활용될 수 있다. 상기 기탁번호가 KCCM12965P인 균주로 노니 열매를 발효시킬 경우, 상기 7종의 유산균으로 노니 열매를 발효시킨 경우와 유사한 결과를 얻을 수 있다.
상기 유산균은 유산균액, 바람직하게는 유산균 수용액의 형태로 노니 열매에 접종될 수 있다. 이때, 상기 노니 열매 100 중량부에 대하여 상기 유산균액 0.1 내지 0.5 중량부를 접종시킬 수 있다. 이와 같은, 유산균액의 접종량을 만족시킬 경우, 상술한 바와 같은 생물 전환이 원활하게 이루어져, 면역증강에 유의적인 효과를 나타내는 성분을 포함하는 발효 노니를 얻을 수 있다.
한편, 유산균 생균수는 1×109 내지 5×109cfu/g이며, 바람직하게는 2.4×109cfu/g일 수 있다.
한편, 상기 발효 및 숙성은 35 내지 40℃에서 600시간 이상 이루어질 수 있다. 구체적으로, 상기 발효는 발효 시작일로부터 600시간 이상 발효 숙성함으로써, 곰팡이의 생성을 방지하고 발효액을 균질화시킬 수 있다.
상기 발효 및 숙성 온도는 35 내지 40℃일 수 있다. 발효 및 숙성 온도가 30℃ 미만이면 발효가 정상적으로 이루어지지 않을 수 있고, 40℃가 초과되면 발효 및 숙성 시간이 길어져, 유산균이 죽을 수 있다.
일 실시 예에 있어서, 상기 숙성은 발효 과정에서 생성되는 발효액을 일정 시간 간격으로 발효물의 상부에 끼얹는 방식으로 실시할 수 있다. 바람직하게는 5일 내지 10일 간격으로 발효액을 발효물의 상부에 끼얹는 방식으로 숙성시킬 수 있다.
(S2) 단계
S2 단계에서는 상기 발효 및 숙성시켜 얻은 발효 노니로부터 농축된 발효 노니 추출물을 제조할 수 있다.
먼저, 상기 발효 및 숙성시켜 얻은 발효 노니를 착즙시킬 수 있다.
이때, 발효 및 숙성 과정을 거친 발효 노니에는 노니 열매와 발효액이 함께 포함될 수 있다. 한편, 상기 착즙 단계 이전에, 상기 발효 노니를 예열하는 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 예열은 발효 노니를 저온에서 가온 방식으로 실시할 수 있으며, 예열로 인하여 발효 노니의 섬유질을 연화하게 하여 착즙 수율을 높일 수 있고, 발효 노니로부터 영양소가 잘 추출되도록 할 수 있다.
이때, 상기 예열 온도는 70 내지 80℃가 바람직하다. 상기 예열 온도가 상기 60℃ 미만이면 발효 노니 내의 섬유질 상태의 변화가 없어 착즙 수율의 향상 효과를 기대할 수 없고, 상기 80℃ 초과이면 발효 노니가 변성되거나, 발효 노니 내의 유산균이 멸균될 수 있다.
특히, 상기 예열 온도가 90℃ 이상이 될 경우 유산균의 90% 이상이 멸균되는 문제가 있다. 또한, 상기 예열 시간은 1시간 내지 2시간이 바람직하다. 상기 예열 시간이 상기 30분 미만이면 발효 노니 내의 섬유질 상태의 변화가 없어 착즙 수율의 향상 효과를 기대할 수 없고, 상기 2시간을 초과이면 발효 노니가 변성되거나, 발효 노니 내의 유산균일 죽을 수 있다.
상기 착즙은 상기 발효 노니 내에 포함된 노니 열매와 발효액으로부터 착즙하여 발효 노니 추출물을 제조할 수 있다. 이때, 착즙은 상기 발효 노니에 압력을 가하여 실시할 수 있으며, 상기 착즙시 적정 압력은 0.05 내지 7bar가 바람직하다. 상기 착즙식 압력이 상기 0.05bar 미만이면 착즙이 제대로 이루어지지 않아 수율이 저하되고, 상기 7bar 초과이면 노니 열매의 부산물까지 함께 혼합되어 추출물의 순도가 저하될 수 있다.
또한, 상기 착즙 이후, 여과 및 살균 공정을 더 실시하여, 순도를 향상시켜 제품의 신뢰성을 강화할 수 있다.
상기 여과는 기공의 직경 크기가 10 내지 30 mesh 여과망을 이용하여 실시될 수 있다. 상기 여과망의 기공 직경 크기가 상기 10 mesh 미만이면 공정 효율이 저하될 수 있고, 상기 30 mesh 초과이면 여과된 발효 노니 추출물에 여전히 부산물이 포함되어 있을 수도 있다.
상기 살균은 당업계에서 일반적인 살균 방법이라면 제한되지 않고 광범위하게 사용할 수 있다.
착즙 이후, 발효 노니 추출물에 포함된 수분을 증발시켜 발효 노니 추출물을 농축시킬 수 있다. 일 실시 예로, 발효 노니 추출물은 70 brix까지 농축시킬 수 있다.
보다 구체적으로, 상기 발효 노니 추출물을 60 내지 65 ℃ 온도에서 70(±2) Brix가 되도록 농축하여 농축액을 제조할 수 있다. 이때, Brix 값은 ATAGO 사의 당도계(PAL-3)를 사용하여 측정할 수 있다.
이후, 농축한 발효 노니 농축액을 증류수와 혼합하여 희석액(발효 노니 추출물)을 제조한다.
여기서, 발효 노니 추출물의 고형분함량은 5 내지 40brix일 수 있다. 발효 노니 추출물의 고형분함량이 5brix 미만일 경우, 후술할 다당체 추출물의 수득량이 현저히 떨어지며, 발효 노니 추출물의 고형분함량이 40brix를 초과하는 경우, 후술할 다당체 추출물의 면역증진 기능이 현저하게 감소한다.
(S3) 단계
S3 단계에서는 발효 노니 추출물에 에탄올을 혼합하여 다당체 침전물을 수득할 수 있다.
구체적으로, 5 내지 40brix의 발효 노니 추출물에 주정용 에탄올을 혼합한 후 정치반응을 통해 다당체 침전물을 수득할 수 있다.
여기서, 상기 주정용 에탄올의 농도는 90 내지 97%일 수 있다. 바람직하게는, 상기 주정용 에탄올의 농도는 95%일 수 있다.
한편, 발효 노니 추출물과 주정용 에탄올은 1:3 내지 1:7의 부피비로 혼합될 수 있다.
한편, 정치반응은 24시간 이상 수행될 수 있다.
정치반응이 완료된 후, 상층액을 제거하여, 다당체 추출물을 수득할 수 있다.
(S4) 단계
S4 단계에서는 상기 다당체 침전물을 활용하여 발효 노니 다당체 추출물 건조 분말을 획득한다.
구체적으로, 상기 상층액을 제거한 후 증류수를 혼합하여 다당체 추출물을 용해시킨다. 이후, 농축 및 감압건조를 실시하여 다당체 건조 분말을 획득할 수 있다.
상기 다당체 건조 분말에 상술한 첨가제를 혼합하고, 가공하여 다양한 형태의 면역기능 증진용 식품 조성물로 제조할 수 있다.
이하 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시하나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범주 및 기술사상 범위 내에서 다양한 변경 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변경 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속하는 것도 당연한 것이다.
실시예
노니 열매 100kg에 유산균액(0.3kg)을 접종하여, 37℃에서 4주 동안 발효시켰다.
상기 유산균액은 복합 유산균(NST 7종 복합유산균 100, (주)락토메이슨)을 포함한다. 발효 시작일로부터 7일마다 발효액을 10L씩 받아 노니 열매 위쪽으로 옮겨 뿌려주면서, 발효 및 숙성을 실시하여, 발효 노니를 제조하였다.
이때, 사용한 복합 유산균(NST 7종 복합유산균 100)의 조성은 하기 표 1과 같다.
NO. 복합 유산균 성분 배합비율
1 Lactobacillus plantarum KCCM11821P 63%
2 Bifidobacterium lactis 12%
3 Lactobacillus rhamnosus 5%
4 Lactobacillus casei 5%
5 Lactobacillus fermentum 5%
6 Bifidobacterium breve 5%
7 Lactococcus lactis subsp. lactis 5%
상기 발효 노니를 78℃에서 1시간 30분 동안 예열한 후 착즙 설비를 이용하여 4 bar의 압력으로 착즙시켰다.
그 후, 20mesh 여과망을 이용하여 여과 및 살균 처리하고, 농축시켜 70brix의 발효 노니 농축액을 제조하였다.
이후, 발효 노니 농축액에 하기 표 2와 같이 증류수를 혼합하여 희석액을 제조하였다.
NO. 70 brix 발효 노니 농축액 사용량 (mL) 증류수 사용량(mL) 최종 고형분량(Brix)
제조예 1 5 65 5
제조예 2 10 60 10
제조예 3 20 50 20
제조예 4 30 40 30
제조예 5 50 30 40
제조예 6 60 10 60
제조예 7 70 0 70
표 2에 기재된 제조예 1 내지 7 각각을 활용하여 다당체 건조 분말을 제조하였다.
구체적으로, 제조예 1 내지 7에 따른 발효 노니 추출물 10mL와 95% 주정용 에탄올 50mL를 첨가하여 24시간동안 정치 반응을 수행하였다.
이후, 상층액을 제거한 후, 증류수 10mL를 첨가하여 다당체 침전물을 용해 시켰다.
이후, 다당체 침전물이 용해된 액체를 농축 및 감압건조하여 다당체 건조 분말을 획득하였다. 다당체 건조 분말 획득 결과는 하기 표 3과 같다. 하기 표 3은 제조 예1 내지 7에 따른 발효 노니 추출물로부터 다당체 건조 분말을 획득하는 실험을 각각 3회씩 반복한 결과를 나타낸다.
NO. 발효 노니 추출물 침전물 수득량 (g) 수율(%)
실시 예1 제조 예1 0.06 ± 0.1 10.97 ± 2.58
실시 예2 제조 예2 0.22 ± 0.04 21.09 ± 3.42
실시 예3 제조 예3 0.59 ± 0.04 29.96 ± 1.83
실시 예4 제조 예4 1.00 ± 0.08 32.24 ± 2.59
실시 예5 제조 예5 1.65 ± 0.14 43.90 ± 3.66
비교 예1 제조 예6 4.56 ± 0.22 80.28 ± 3.84
비교 예2 제조 예7 6.78 ± 0.12 97.30 ± 1.69
실험 예1: 건강 증진 식품 조성물에 대한 NO production 측정
발효 홍삼, 노니 추출물, 발효 노니 추출물, 발효 노니 다당체 추출물(실시 예5)의 면역 증강 효과를 비교하였다.
구체적으로, 실험 예2에서는 RAW264.7 대식세포에서 각 시료의 NO 생산 효과를 측정하였다.
NO production 측정 실험 방법은 아래와 같다.
1) RAW264.7 cell을 1×106 cells/mL이 되도록 96well-plate에 분주하고 24시간 동안 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양한다.
2) 각 시료를 처리하여 48시간동안 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양한다. 여기서, 모든 시료는 200 ㎍/mL 농도로 처리하였다.
3) 100 ㎕의 상층액을 취하여 96-well plate에 옮긴 후 100㎕의 griess reagent (1% sulfanilamide in 5% phosphoric acid and 1% α-naphthylamide in H2O)와 혼합하여 실온에서 10분간 반응한다.
4) Microplate reader를 이용하여 540 nm의 흡광도에서 측정한다.
한편, 상기 2) 단계의 각 시료 제조 방법은 아래와 같다.
- FME 시료 제조방법: 노니 100 g을 500 mL의 distilled water 및 2% (8×1011 CFU/g) NST 7종 복합유산균 100(표 1에 기재)과 함께 30℃에서 72시간 동안 발효시켰다. 그 후 여과와 동결건조를 하여 발효노니 추출물(FME)를 수득하였다.
- MCE 시료 제조방법: FME 제조방법에서 NST 7종 복합유산균 100 처리를 제외한 동일한 방법을 통해 노니 추출물(MCE)를 수득하였다.
- FRG 시료 제조방법: 시중에서 구입된 홍삼농축액 100 g을 1L의 distilled water 및 2% Lactobacillus plantarum과 함께 37℃에서 24시간 발효시켰으며, 여과와 동결건조를 하여 발효홍삼 추출물 (FRE)를 수득하였다.
모든 시료는 멸균된 2차 증류수에 넣고 10분간 초음파처리 후 0.22 μm PVDF filter (Millex-HV, Millipore, Bedford, MA, USA)로 여과하여 사용하였다.
도 1은 실험 예1에 따른 NO production 측정 결과를 나타내는 그래프이다.
도 1에 도시된 각 물질은 아래와 같다.
- LPS: lipopolysaccharide
- FRG: 발효홍삼(Fermented red ginseng extracts)
- MCE: 노니 추출물(Morinda citrifolia extracts)
- FME: 발효 노니 추출물(Fermented Morinda citrifolia extracts)
- VB001: 발효 노니 다당체 추출물(Fermented Morinda citrifolia polysaccharide extract)
도 1를 참조하면, 본 발명에 따른 발효 노니 다당체 추출물은 발효 노니의 착즙을 통해 수득한 발효 노니 추출물 및 발효되지 않은 노니 추출물 대비 높은 NO production 값을 가지는 것을 확인할 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 발효 노니 다당체 추출물은 리포 다당류, 발효 홍삼 대비 높은 NO production 값을 가지는 것을 확인할 수 있다.
체내 면역세포에서 생성되는 Nitric Oxide(NO)는 면역계에서 방어작용을 하는 중요한 신견 전달 물질로 nitric oxide synthetase(NOS)에 의해 L-arginine이 L-citruline으로 변환되는 과정에서 생성된다. NO는 비특이적 숙주방어기작인 대식작용, 세균 및 암세포의 증식억제 활성, 면역세포간 신호전달을 통해 cytokine의 분비를 촉진시키는 역할을 한다. 따라서 RAW264.7 대식세포주를 이용한 시험관 실험에서 NO 생성량의 증가는 1차 면역체계의 활성화를 의미한다.
상기 실험 결과를 바탕으로, 본 발명에 따른 발효 노니 다당체 추출물이 우수한 면역 증진 효능이 있는 것을 확인할 수 있다. 특히, 본 발명에 따른 발효 노니 다당체 추출물은 발효 노니를 착즙하여 수득한 발효 노니 추출물보다 우수한 면역 증진 효능이 있는 것을 확인할 수 있다.
이하에서는, 본 발명에 따른 발효 노니 추출물의 효과를 확인할 수 있는 추가적인 실험 예에 대하여 서술한다.
실험 예2: 실시 예1 내지 5, 비교 예 1 및 2에 대한 세포 독성 평가
RAW264.7 대식세포에서 발효 노니 다당체 추출물의 세포생존율을 측정하였다.
세포 독성 평가 실험 방법은 아래와 같다.
1) RAW264.7 cell을 1×106 cells/mL이 되도록 96well-plate에 분주하고 24시간 동안 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양한다.
2) 각 실시 예 및 비교 예에 따른 시료를 처리하여 48시간동안 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양한다. 여기서, 모든 시료는 200 mg/mL 농도가 되도록 멸균된 2차 증류수에 넣고 10분간 초음파처리 후 0.22 μm PVDF filter (Millex-HV, Millipore, Bedford, MA, USA)로 여과하여 사용하였다.
3) 배지 부피의 10%에 해당하는 MTS cell viability assay reagent (Promega, G3580)을 처리하고 CO2 incubator에서 2시간 반응시킨다.
4) Microplate reader를 이용하여 490 nm의 흡광도에서 측정한다.
도 2는 실험 예2에 따른 세포 독성 평가 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2에 도시된 그래프에서, x축에는 다당체 추출물 제조 시 사용된 발효 노니 추출물의 고형분함량(brix) 및 상기 실시 예에 기재된 정치 반응 수행 시간이 기재되어 있다.
도 2를 참조하면, 실시 예1 내지 5, 비교 예 1 및 2 각각의 세포독성은 확인되지 않았다.
실험 예3: 실시 예1 내지 5, 비교 예 1 및 2에 대한 NO production 측정
상기 표 3에 기재된 실시 예1 내지 5, 비교 예 1 및 2에 대한 NO production을 측정하였다.
NO production 측정 실험 방법은 아래와 같다.
1) RAW264.7 cell을 1×106 cells/mL이 되도록 96well-plate에 분주하고 24시간 동안 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양한다.
2) 각 실시 예 및 비교 예에 따른 시료를 처리하여 48시간동안 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양한다. 여기서, 모든 시료는 200 mg/mL 농도가 되도록 멸균된 2차 증류수에 넣고 10분간 초음파처리 후 0.22 μm PVDF filter (Millex-HV, Millipore, Bedford, MA, USA)로 여과하여 사용하였다.
3) 100 ㎕의 상층액을 취하여 96-well plate에 옮긴 후 100 ㎕의 griess reagent (1% sulfanilamide in 5% phosphoric acid and 1% α-naphthylamide in H2O)와 혼합하여 실온에서 10분간 반응한다.
4) Microplate reader를 이용하여 540 nm의 흡광도에서 측정한다.
도 3은 실험 예1에 따른 NO production 측정 결과를 나타내는 그래프이다.
도 3에 도시된 그래프에서, x축에는 다당체 추출물 제조 시 사용된 발효 노니 추출물의 고형분함량(brix) 및 상기 실시 예에 기재된 정치 반응 수행 시간이 기재되어 있다.
또한, 도 3에서 각 데이터는 평균±표준편차로 나타내었으며, 대조군과 통계적으로 다중 비교하여 유의성의 차이를 *p<0.05, **p<0.01, and ***p<0.001 등으로 나타내었다.
한편, 10 brix의 발효 노니 추출물과 무처리 대조군(Control) 만을 상호 T-TEST로 서로 비교하였을 때, 유의적 차이가 ###p<0.001 로 나타났다.
한편, 비교 예1 및 2의 경우, 상대적으로 면역 증강 효과가 떨어지는 것을 확인할 수 있다.
도 3을 참조하면, 실시 예 1 및 2와 같이, 고형분 함량이 낮은 조건에서 획득한 발효 노니 다당체 추출물의 면역 증진 효능이 가장 우수하였다. 이러한 결과는 고형분함량이 낮은 조건에서 면역 증강을 억제시키는 물질이 감소되어 나타나는 현상으로 예상된다.
실험 예4: 주정용 에탄올 혼합 비율에 따른 수율, NO production 및 세포 독성 평가
발효 노니 추출물(고형분함량 10 brix)와 95% 주정용 에탄올의 혼합 비율을 달리하여 다당체 추출물을 제조한 후, 생산 수율, 총당 함량, NO production 및 세포 독성을 측정하였다.
주정용 에탄올의 혼합 비율을 제외한 나머지 제조 방법은 상술한 실시 예와 같으며, NO production 및 세포 독성 측정 방법은 실험 예 1 내지 3에 기재된 방법과 같다.
총당 함량 측정은 아래와 같다.
1) 1.5 mL tube에 0.5 mg/mL농도로 제조한 다당체 시료 및 농도별 glucose standard 용액 0.1 mL을 각각 첨가한다.
2) 5% Phenol 시약 0.1 mL을 넣어 voltexing 한다.
3) 진한 황산 0.5 mL을 넣고 voltexing 한다 (탈수과정)
4) 20분간 정치시키며 tube가 식을때까지 기다린다.
5) 96-well microplate에 반응용액을 0.2 mL씩 첨가하여 490 nm에서 흡광도를 측정한다.
6) Glucose 표준용액 standard curve를 이용하여 샘플 내 총 당 함량을 계산한다.
도 4는 주정용 에탄올 혼합 비율에 따른 생산 수율을 나타내는 그래프이고, 도 5는 주정용 에탄올 혼합 비율에 따른 총당 함량을 나타내는 그래프이고, 도 6은 주정용 에탄올 혼합 비율에 따른 세포 독성을 나타내는 그래프이다. 도 7은 주정용 에탄올 혼합 비율에 따른 NO production을 나타내는 그래프이고,
한편, 주정용 에탄올 혼합 비율에 따른 생산 수율 측정 결과는 하기 표 4와 같다.
발효노니추출물: 95% 주정 생산수율(%)
1:3 13.49 ±0.89
1:4 26.97 ±3.60
1:5 17.99 ±0.31
1:6 26.49 ±1.49
1:7 20.83 ±3.99
도 4 및 표 4를 참조하면, 발효 노니 추출물과 주정용 에탄올의 비율이 1:4일 때, 생산 수율이 가장 높았다.
한편, 주정용 에탄올 혼합 비율에 따른 총당 함량 측정 결과는 하기 표 5와 같다.
발효노니추출물: 95% 주정 총당함량(mg/g, 건조중량)
1:3 342.28 ±3.66
1:4 352.69 ±5.26
1:5 351.73 ±3.80
1:6 332.86 ±4.08
1:7 336.60 ±2.39
도 5 및 표 5를 참조하면, 발효 노니 추출물과 주정용 에탄올의 비율이 1:4일 때, 총당 함량이 가장 높았다.
한편, 주정용 에탄올 혼합 비율에 따른 세포 독성 측정 결과는 하기 표 6과 같다.
발효노니추출물 : 95% 주정 세포독성 (%)
무처리구 100.0 ±5.5
1:3 처리구 103.4 ±5.4
1:4 처리구 99.5 ±4.4
1:5 처리구 97.9 ±6.8
1:6 처리구 102.2 ±8.2
1:7 처리구 99.5 ±7.7
도 6 및 표 6을 참조하면, 모든 다당체 추출물의 세포 독성은 확인되지 않았다.
한편, 주정용 에탄올 혼합 비율에 따른 NO production 측정 결과는 하기 표 7과 같다.
발효노니추출물 : 95% 주정 NO production (% control)
무처리구 100.0 ±12.2
LPS 처리구 110.4 ±11.9
1:3 처리구 341.1 ±26.9
1:4 처리구 371.9 ±17.8
1:5 처리구 336.8 ±17.7
1:6 처리구 358.3 ±17.0
1:7 처리구 319.7 ±27.2
도 7 및 표 7을 참조하면, 발효 노니 추출물과 주정용 에탄올의 비율이 1:4일 때, NO production 값이 가장 높았다.
실험 예4의 결과에 따르면, NO 생성능은 1:4 비율 추출물에서 Control군 대비 371.9%로 가장 높았으며, 1:6, 1:3이 뒤를 이어 높았다.
다당체 추출 수율 및 면역증진 효능 측면에서, 에탄올 비율 1:4로 추출했을 때 발효 노니 다당체 추출물이 가장 효율적으로 획득되는 것을 확인할 수 있다.
상술한 바와 같이, 본 발명에 따른 발효 노니 다당체 추출물은 발효 홍삼, 일반 노니 추출물, 발효 노니 추출물보다 우수한 면역증강 활성을 나타낸다. 특히, 발효 노니 추출물에서 추출한 다당체는 발효 노니 추출물 대비 200% 이상 높은 면역활성을 나타낸다.
이상, 첨부된 도면을 참조로 하여 본 발명의 실시예를 설명하였지만, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 기술자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며, 제한적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

Claims (10)

  1. 발효 노니 추출물로부터 제조된 다당체 추출물에 있어서,
    상기 발효 노니는,
    전체 유산균 중량을 기준으로 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) 60 내지 65 중량%, 비피도박테리움 락티스 (Bifidobacterium lactis) 10 내지 15 중량%, 락토바실러스 카제이 (Lactobacillus casei) 1 내지 10 중량%, 락토바실러스 퍼멘텀 (Lactobacillus fermentum) 1 내지 10 중량%, 비피도박테리움 브레브 (Bifidobacterium breve) 1 내지 10 중량% 및 락토코커스 락티스 서브스피셔스 락티스 (Lactococcus lactis subsp. lactis) 1 내지 10 중량%로 혼합된 유산균 혼합물을 접종하여 제조되거나,
    기탁번호가 KCCM12965P인 균주를 접종하여 제조된 것이고,
    상기 다당체 추출물은,
    상기 발효 노니 추출물에 주정용 에탄올을 혼합한 후 생성된 침전물을 건조시켜 제조된 것이고,
    농도가 200㎍/mL인 상기 다당체 추출물 수용액을 RAW264.7 대식세포에 공급하였을 때 NO 생산량은, 상기 다당체 추출물 용액을 공급하지 않은 RAW264.7 대식세포 대비 200% 내지 500%인 것을 특징으로 하는 발효 노니 다당체 추출물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서,
    상기 발효 노니 추출물의 고형분함량은 5 내지 40brix인 것을 특징으로 하는 발효 노니 다당체 추출물.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 주정용 에탄올의 농도는 90 내지 97%이고,
    상기 발효 노니 추출물과 상기 주정용 에탄올의 혼합 부피 비율은 1:3 내지 1:7인 것을 특징으로 하는 발효 노니 다당체 추출물.
  6. 제1항, 제4항 및 제5항 중 어느 한 항에 따른 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물.
  7. 노니에 유산균을 접종하여 발효 및 숙성시키는 단계;
    상기 발효 및 숙성시켜 얻은 발효 노니로부터 발효 노니 추출물을 제조하는 단계;
    상기 발효 노니 추출물에 주정용 에탄올을 혼합한 후 다당체 침전물을 수득하는 단계; 및
    상기 다당체 침전물을 활용하여 발효 노니 다당체 추출물 건조 분말을 획득하는 단계를 포함하고,
    상기 유산균은,
    전체 유산균 중량을 기준으로 락토바실러스 플란타럼 (Lactobacillus plantarum) 60 내지 65 중량%, 비피도박테리움 락티스 (Bifidobacterium lactis) 10 내지 15 중량%, 락토바실러스 카제이 (Lactobacillus casei) 1 내지 10 중량%, 락토바실러스 퍼멘텀 (Lactobacillus fermentum) 1 내지 10 중량%, 비피도박테리움 브레브 (Bifidobacterium breve) 1 내지 10 중량% 및 락토코커스 락티스 서브스피셔스 락티스 (Lactococcus lactis subsp. lactis) 1 내지 10 중량%로 혼합된 유산균 혼합물이거나,
    기탁번호가 KCCM12965P인 균주이고,
    상기 발효 노니 추출물의 고형분 함량은 5 내지 40brix인 것을 특징으로 하는 발효 노니 다당체 추출물의 제조 방법.
  8. 삭제
  9. 삭제
  10. 제7항에 있어서,
    상기 발효 노니 추출물과 상기 주정용 에탄올의 혼합 부피 비율은 1:3 내지 1:7인 것을 특징으로 하는 발효 노니 다당체 추출물의 제조 방법.
KR1020220082959A 2022-07-06 2022-07-06 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물 및 그 제조방법 KR102556261B1 (ko)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220082959A KR102556261B1 (ko) 2022-07-06 2022-07-06 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물 및 그 제조방법
TW112124165A TW202402317A (zh) 2022-07-06 2023-06-28 包含發酵諾麗多糖提取物的用於增強免疫功能的食品組合物及其製備方法
KR1020230083269A KR20240007068A (ko) 2022-07-06 2023-06-28 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용식품 조성물 및 그 제조방법
US18/343,692 US20240008518A1 (en) 2022-07-06 2023-06-28 Food composition for enhancing immune function including fermented noni polysaccharide extract and method of preparing the same

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220082959A KR102556261B1 (ko) 2022-07-06 2022-07-06 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물 및 그 제조방법

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020230083269A Division KR20240007068A (ko) 2022-07-06 2023-06-28 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용식품 조성물 및 그 제조방법

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR102556261B1 true KR102556261B1 (ko) 2023-07-19

Family

ID=87425621

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020220082959A KR102556261B1 (ko) 2022-07-06 2022-07-06 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물 및 그 제조방법
KR1020230083269A KR20240007068A (ko) 2022-07-06 2023-06-28 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용식품 조성물 및 그 제조방법

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020230083269A KR20240007068A (ko) 2022-07-06 2023-06-28 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용식품 조성물 및 그 제조방법

Country Status (3)

Country Link
US (1) US20240008518A1 (ko)
KR (2) KR102556261B1 (ko)
TW (1) TW202402317A (ko)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220071718A (ko) * 2020-11-24 2022-05-31 (주)엔에스티바이오 발효 노니를 포함하는 아토피 예방 및 개선용 식품 조성물 및 그 제조방법

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220071718A (ko) * 2020-11-24 2022-05-31 (주)엔에스티바이오 발효 노니를 포함하는 아토피 예방 및 개선용 식품 조성물 및 그 제조방법

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Anne Hirazumi 외 1명, ‘An immunomodulatory polysaccharide-rich substance from the fruit juice of Morinda citrifolia (noni) with antitumour activity’, Phytotherapy Research 제13권 제5호, 380-387쪽, 1999년 08월 18일. 사본 1부.* *
FOODS 제11권 1925, 1_15쪽, 2022년 06월 28일. 사본 1부.* *
Sun-iL 외 10명, ‘Development and Validation of an Analytical Method for Deacetylasperulosidic Acid, Asperulosidic Acid, Scopolin, Asperuloside and Scopoletin in Fermented Morinda citrifolia L. (Noni)’, Seperation 제8권 제6호, 80, 1-11쪽, 2021년 06월 05일. 사본 1부.* *

Also Published As

Publication number Publication date
US20240008518A1 (en) 2024-01-11
TW202402317A (zh) 2024-01-16
KR20240007068A (ko) 2024-01-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104921222B (zh) 一种提高免疫力的菌菇酵素饮料的制备方法
CN102318806B (zh) 一种益生菌发酵南瓜、胡萝卜蔬菜粉的制备方法
KR101330864B1 (ko) 펙티나아제를 이용한 진세노사이드 Rd가 강화된 발효인삼 또는 발효홍삼의 제조방법
CN109717340A (zh) 一种结合复合酶解的两步式蛹虫草酵素的发酵制备方法
KR101423100B1 (ko) 진세노사이드 Ｒｇ3 및 Ｒｂ1의 함량을 증폭시키는 발효홍삼의 제조방법
CN101544945B (zh) 杨梅果醋及其制备方法
CN106387652B (zh) 灵芝益生菌发酵产品的制备方法
CN106367250B (zh) 一种乳酸菌和酵母菌共同发酵的红枣啤酒的制备方法
KR101690779B1 (ko) 홍삼농축분말 및 복분자완숙과추출물을 함유하는 발효물의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 발효물
CN108030097B (zh) 一种增进儿童食欲的益生菌冻干粉
KR101091833B1 (ko) 유산균을 이용한 ｓａｃ 고함량 마늘 발효물의 제조방법
KR101131069B1 (ko) 가바 생성능을 가진 식물성 유산균을 이용한 가바 함유 토마토 발효물의 제조방법
KR20160126591A (ko) 인삼류 발효 추출물의 제조방법, 이의 방법으로 제조된 인삼류 발효 추출물 및 이를 포함하는 건강기능식품
KR102350102B1 (ko) 항산화 활성이 증진된 발효 홍삼 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증용 조성물
KR102556261B1 (ko) 발효 노니 다당체 추출물을 포함하는 면역기능 증진용 식품 조성물 및 그 제조방법
KR101428682B1 (ko) 커피 발효물 및 이의 추출물을 유효성분으로 포함하는 기능성 커피 음료 조성물 및 이의 제조방법
KR100899844B1 (ko) 오미자 식초 제조방법
CN101589827B (zh) 一种含壳低聚糖的果醋饮品及其制备方法
KR101485575B1 (ko) 발아현미의 수용성 gaba성분 추출 방법 및 이를 이용한 당뇨환자용 건강기능 조성물
KR102314639B1 (ko) 항산화 활성이 증진된 발효 죽순껍질 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증용 조성물
KR101609130B1 (ko) 항산화 활성과 기호도가 우수한 천마 발효 추출액 및 그 제조 방법
CN112522053A (zh) 一种针叶樱桃果酒的制备方法
TWI690267B (zh) 可提升花青素活性含量之葡萄發酵飲品
KR101749990B1 (ko) 병행복 발효 인삼 흑초 및 이의 제조방법
CN112655956B (zh) 一种用于体重管理的芸香科植物酵素及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
A107 Divisional application of patent
GRNT Written decision to grant