KR102540199B1

KR102540199B1 - 갈조류 배우체로부터의 추출물 수득, 및 미용적 항-노화 활성 주성분으로서의 상기 추출물의 용도

Info

Publication number: KR102540199B1
Application number: KR1020177025163A
Authority: KR
Inventors: 래티시아 캣투자토; 샌디 두몬트; 에르 레 겔레바트; 제롬 로우엘
Original assignee: 소시에떼 덱스플로와따시옹 더 쁘로뒤 뿌르 레 엥뒤스트리 쉬미끄, 에스. 에. 페. 페. 이. 세.; 비오테크마린
Priority date: 2015-02-24
Filing date: 2016-02-19
Publication date: 2023-06-02
Also published as: ES2742535T3; US20180028437A1; EP3261727A1; CN107427452B; US10206869B2; WO2016135400A1; KR20180003531A; AU2016225314A1; CN107427452A; JP6731425B2; FR3032879A1; FR3032879B1; AU2016225314B2; JP2018505913A; PT3261727T; EP3261727B1

Abstract

본 발명은 다음 연속 단계: - 갈조류 배우체 세포의 수성 현탁액을 1 내지 4개 탄소수를 포함하는 적어도 하나의 지방족 알코올과 혼합하여 배우체 세포의 수성-알코올계 현탁액을 제조하기 위한 단계 A); - 단계 A)에서 수득된, 조류 배우체 세포의 상기 수성-알코올계 현탁액을 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 지방산으로부터의 적어도 하나의 트리글리세라이드와 혼합하기 위한 단계 B); - 단계 B)에서 수득된 다중상 혼합물에 물을 첨가하기 위한 단계 C); 및 - 단계 C)에서 수득된 혼합물로부터 갈조류 배우체의 친지성 추출물을 단리하기 위한 단계 D)를 포함하는 방법에 의해 수득되는 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 상기 추출물의 미용적 및 약학적 용도에 관한 것이다.

Description

갈조류 배우체로부터의 추출물 수득, 및 미용적 항-노화 활성 주성분으로서의 상기 추출물의 용도

본 발명의 주제는 갈조류 배우체의 신규 추출물, 이의 제조 방법, 및 또한 인체 피부에 대한 항-노화제로서의 이의 용도, 그리고 인체 피부의 노화를 예방하기 위해, 이를 함유하는 국소적 용도를 위한 미용적, 약학적, 피부약학적 조성물이다.

인간 피부는 타인에 의해 가장 먼저 인지되는 부분이므로, 인간은 종종 이의 외관 개선에 집착한다. 피부는 종종 젊음과 연관되는 웰빙 상태, 또는 피로 및/또는 노화 상태를 반영한다. 따라서 미용 제품 소비자는 상기 노화와 연관되는 가시적 징후를 완화하고/하거나 예방하기 위한 해결책을 추구한다.

이러한 피부 노화는 상이한 피부 조직에서 관찰되며, 대사적, 기능적, 세포, 구조, 및 조직 변경을 특징으로 하여, 가시적인 외부적 효과, 예컨대 주름의 출현 및 성장, 칙칙한 안색 및/또는 상기 안색의 균일성 부재(변색증) 또는 다른 피부 텍스처 및 생체역학적 특성의 변형으로 이어진다.

이러한 피부 노화는 한 편으로는 각 개인에 고유한 요인(각 개인에 고유한 유전적 혈통의 특징)으로부터 그리고 다른 한 편으로는 환경적 요인으로부터 일어난다. 피부 노화를 유도할 수 있는 환경적 요인 중에는 자연적 또는 인공적 자외선(또는 광노화), 대기 오염 또는 담배 흡연에 대한 반복되고 지속된 노출, 및 다양한 산화적, 정신적, 감정적 및/또는 불안-관련 스트레스가 있다.

광노화는 다양한 수준으로 피부에 대한 변경, 특히 진피 탄성 섬유의 구조 및 조직에 대한 심각한 변형을 특징으로 하는 태양광 탄력섬유증을 유도하여, 매우 깊고 심한 주름 형성, 가죽 같은, 즉 거칠고, 갈라지고, 갈색인 피부 외관, 그리고 또한 이들 섬유의 기계적 특성의 변형을 유도한다.

이러한 외부적 공격에 직면하여, 피부는 그 고유한 방어 체계, 특히 상기 외부적 공격에 의해 DNA에 유도되는 손상을 보수하기 위한 체계를 갖는다. 보다 구체적으로, 이들은 항산화 체계 및 비-기능적 단백질을 분해하기 위한 체계이다. 항산화 체계 중에는, 2가지 유형의 항산화 요소: 비-효소적 요소, 예컨대 비타민 E 및 비타민 C, 그리고 효소적 요소, 예컨대 수퍼옥사이드 디스뮤타제 및 카탈라제가 유기체에 존재한다. 특히 일부 외부적 요소, 예컨대 자외선 A 및 만성 열 스트레스는 카탈라제를 감소시킴으로써 그 활성을 조절하며, 이것이 주름 출현과 연관이 있는 것으로 나타났다[Shin et al., "Chronic heat treatment causes skin wrinkle formation and oxidative damage in hairless mice", 2012, Mech Ageing Dev, 133(2-3):92-8], [Corstjens et al., “Prevention of oxidative damage that contributes to the loss of bioenergetic capacity in ageing skin”, 2007, Exp Gerontol, 42(9):924-9].

피부 노화는 또한 저산소증(산소 수준 감소) 현상에 직면하는 경우, 유기체의 반응성 부재와 연관되는 것으로 설명되었다. 저산소증에 대한 세포 반응에는 2 서브유닛: 유도성 서브유닛, 알파, 및 항상적으로 발현되는 서브유닛, 베타로 이루어지는, 전사 인자 HIF-1의 과발현이 관여된다. 상기 전사 인자는 저산소증에 대한 적응에 관여되는 다른 유전자의 발현을 가능하게 하여, 호기성 경로로부터 혐기성 경로로의 대사 변화를 일으키고, 혈관신생, 세포 생존, 그리고 특정한 구체적 경우에는 종양 유도까지 조직 산소량을 보존할 수 있게 한다. 따라서, HIF-1 발현은 노화 동안 감소하며, 세포 내에서 가-저산소증 상태가 일어난다. Sirtuin 1(SIRT-1)은 탈아세틸라제 기능을 갖는 효소로, 이는 전사 인자 HIF-1a의 활성을 제어하는 것으로 설명되었다. 그 활성을 통해, SIRT-1은 히스톤 및/또는 전사 인자의 아세틸화 정도를 변형함으로써 여러 생물학적 공정의 조절에 관여한다. 따라서, 항산화 보호에서(카탈라제 SOD의 유도를 통함) 그리고 세포 생존 및 수명에서의 그 관여가 널리 설명되었다.

이 결과는 전사 인자 HIF-1 및/또는 sirtuin 1의 과발현이 인체 피부의 노화 예방 및/또는 치료를 위한, 그리고 보다 구체적으로는 상기 노화의 가시적 효과, 예를 들어 자연적 노화에 의해 또는 태양광에 대한 연장된 노출, 보다 구체적으로는 자외선에 대한 노출, 또는 산화적 스트레스에 대한 노출에 의해 유도된 주름, 칙칙한 안색, 안색의 균일성 부재(변색증), 및 인체 피부의 거칠음의 예방 및/또는 치료를 위한 수단을 형성한다는 것이다.

패오파이세애(Phaeophyceae)로도 알려져 있는 갈조류 강은 오크로파이테스(Ochrophytes) 문의 일부이다. 상기 문은 그 세포가 엽록소 안료, 엽록소 a 및 c에 부가하여, "여분의" 카로티노이드 안료, 예컨대 푸콕산틴을 함유하는 조류를 포괄한다.

갈조류 강은 아스코세이랄레스(Ascoseirales), 아스테로클라달레스(Asterocladales), 데스마레스티알레스(Desmarestiales), 딕티오탈레스(Dictyotales), 딕티오토파이시대(Dictyotophycidae), 디스코스포란지알레스(Discosporangiales), 디스코스포란지오파이시대(Discosporangiophycidae), 엑토카르팔레스(Ectocarpales), 푸칼레스(Fucales), 푸코파이시대(Fucophycidae), 이시게알레스(Ishigeales), 이시게오파이시대(Ishigeophycidae), 라미나리알레스(Laminariales), 네모데르마탈레스(Nemodermatales), 온슬로위알레스(Onslowiales), 패오파이세애 오르도 인세르태 세디스(Phaeophyceae ordo incertae sedis), 패오시포니엘랄레스(Phaeosiphoniellales), 랄프시알레스(Ralfsiales), 사이토탐날레스(Scytothamnales), 스파셀라리알레스(Sphacelariales), 스포로크날레스(Sporochnales), 사이링고데르마탈레스(Syringodermatales), 및 틸로프테리달레스(Tilopteridales) 목을 포함한다.

모든 광합성 유기체는 광 에너지를 포획하기 위해 안료, 보통 엽록소 형태를 이용한다. 표준 엽록소는 엽록소 a이며, 이는 빛으로부터 포획된 에너지를 상기 에너지를 이용할 분자로 전달하기 위해 필수적이다. 대부분의 엽록소-함유 유기체는 더 많은 빛을 포획하기 위한 다른 안료를 갖지만, 에너지는 항상 엽록소 a 분자로 전달되어야 한다.

갈조류는 몇몇 유형의 여분의 안료, 예컨대 엽록소 c 및 카로티노이드를 이용한다. 패오파이세애는 이의 색소체에 다량의 카로티노이드를 가지며, 이는 이들에게 이의 특징적인 갈색 색상을 제공하는 갈색 및 노란색 안료이다. 갈조류에서 가장 중요한 카로티노이드 안료는 450 내지 580 nm 파장을 흡수하는 푸콕산틴이다.

카로티노이드 안료는 지방족 또는 지환족 구조를 갖는다. 이들은 특정 막 내로의 이의 직접적 통합을 촉진하는 지용성이다. 상기 이유로, 이들은 다른 분자에 결합되는 경우에만 수중 용해될 수 있다. 카로티노이드는 이들이 포획하는 에너지를 엽록소 a로 전달해야 하므로, 보조 안료로도 불린다. 이들 안료는 일반 대중들에게 카로틴이라는 이름으로 알려져 있으며, 이는 이러한 안료 패밀리에 부여된 이름이다.

비-프로비타민 A 카로티노이드 클래스에 속하는 푸콕산틴은 다음 화학식으로 나타난다:

이의 푸콕산틴 함량의 측면에서 가장 일반적으로 기재되는 조류는 사르가썸 호르네리(Sargassum horneri), 히지키아 푸시포르미스(Hizikia fusiformis), 라미나리아 자포니카(Laminaria japonica) 및 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida)[Kim and Pangestuti, “Biological activities and potential health benefits of fucoxanthin derived from marine brown algae”, Advances in Food and Nutrition Research, (2011) Chapter 9, 64 pp 111-128]이다. 갈조류에서, 푸콕산틴은 광합성을 가능하게 하는 안테나 수집에 있어서 산화적 스트레스에 대한 보호라는 중요한 생물학적 기능을 갖는다[D.Siefermann-Harms, "The light-harvesting and protective functions of carotenoids in photosynthetic membranes" in: Physiologia Plantarum, (1987) Vol. 69(3) pp 561-568]. 조류에서 상기 분자의 합성은 광 조건의 함수로서 엄격하게 조절된다[R. Goss, T. Jakob, "Regulation and function of xanthophyll cycle-dependent photoprotection in algae" in: Photosynthesis Research. (2010), Vol. 106(1-2) pp 103-122]. 푸콕산틴은 환원된 글루타치온, α-토코페롤, β-카로틴 및 플라보노이드에서와 동일한 방식으로, 전반적인 산화적 스트레스에 대한 반응이다[N. Mallick, F. Mohn, “Reactive oxygen species: response of algal cells” in: J. Plant Physiology. (2000) Vol. 157(2), pp 183-193]. 푸콕산틴은 다음 생물학적 효과: 항산화, 항-비만, 항-암, 항-당뇨, 항-광노화, 심혈관계의 보호, 항-염증, 신경보호, 항-혈관신생, 항-티로시나제(탈착색 효과를 암시함), 또는 골다공증-예방 효과를 갖는 것으로 널리 설명되었다[Kim and Pangestuti, “Biological activities and potential health benefits of fucoxanthin derived from marine brown algae”, Advances in Food and Nutrition Research, (2011) Chapter 9, 64 pp 111-128; D'Orazio et al., "Fucoxanthin : a treasure from the sea" in: Marine Drugs, (2012), 10, pp 604-616.]. 건강 및 피부에 대한 이러한 이점으로 인해, 푸콕산틴, 또는 푸콕산틴을 함유하는 추출물은 다양한 분야, 예컨대 영양제, 화장품 또는 약품에서 널리 이용된다.

번호 2 837 383 하에 공개된 프랑스 특허 출원은 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida)의 추출물이 피부가 겪는 공격(반응성 산소종, 중금속, 이산화탄소, 담배 연기, 화학적 오염 등)에 관해 시험관내에서 긍정적 효과를 가졌음을 개시한다; 상기 조류 추출물은 신선, 냉동, 건조, 전체, 단편화 또는 분쇄 형태의 엽상체 또는 엽상체의 임의 부분으로부터 수득된 수성 추출물이다. 그러나, 이러한 수성 추출물은 화장품 또는 약품에서 고성능 적용을 위해 충분히 만족스럽지 않은 효과를 일으킨다.

번호 2 880 803 하에 공개된 프랑스 특허 출원은 항-노화 효과를 수득하기 위한 갈조류의 용도를 개시한다. 그러나, 상기 특허 출원에서 이용된 추출물은 화장품 또는 약품에서 잠재적 적용을 위해 충분히 만족스럽지 않은 효과를 일으킨다. 또한, 상기 추출물은 미용 제형물, 예컨대 크림 내로 혼입하기 어려울 수 있다.

이것이 본 발명자들이 개선된 항-노화 효과를 가지며 크림 형태인 미용 제형물 내로 쉽게 혼입될 수 있는 신규 갈조류 추출물을 개발하려고 노력한 이유이다.

제1 양태에 따르면, 본 발명의 주제는 다음 연속 단계:

- 갈조류 배우체 세포의 수성 현탁액을 1 내지 4개 탄소수를 포함하는 적어도 하나의 지방족 알코올과 혼합하여 배우체 세포의 수성-알코올계 현탁액을 제조하는 단계 A);

- 단계 A)에서 수득된 조류 배우체 세포의 상기 수성-알코올계 현탁액을 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 적어도 하나의 지방산 트리글리세라이드와 혼합하는 단계 B);

- 단계 B)에서 수득된 다중상 혼합물에 물을 첨가하는 단계 C);

- 단계 C)에서 수득된 혼합물로부터 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물을 단리하는 단계 D)를 포함하는 방법에 의해 수득되는, 갈조류 배우체의 친지성 추출물이다.

본 발명의 주제인 갈조류 배우체의 친지성 추출물의 정의에서, 이를 수득하는 방법의 단계 A에서 이용되는 갈조류 배우체 세포의 수성 현탁액은 다음과 같이 제조될 수 있다:

- 단계 a)에 따르면, 발아할 준비가 된 성숙 포자체의 잎이 이용되는 갈조류로부터 회수된다. 성숙 포자체는 성장대를 포함하는 포자체이다.

- 단계 b)에 따르면, 단계 a)에서 회수된 성숙 포자체가 해수를 함유하는 탱크에 배열되고 이의 포자를 배지 내로 방출한다. 이렇게 방출된 포자가 이의 발아를 시작하여 배우체 세포를 생성한다.

- 단계 c)에 따르면, 단계 b) 동안 형성된 배우체가 단리된 후 적어도 하나의 질소원, 예컨대 50 내지 250 mg/l, 바람직하게는 150 mg/l 농도의 나트륨 니트레이트(NaNO₃) 및 인원, 예컨대 5 내지 75 mg/l, 바람직하게는 50 mg/l 농도의 나트륨 디하이드로겐 포스페이트(NaH₂PO₄)를 함유하는 해수 함유 용기에 배치된다. 상기 단계 c)의 특정 방식에 따르면, 이렇게 형성된 수성 현탁액은 또한 영양 배지, 예컨대 다음 조성을 갖는 Provasoli 배지의 첨가에 의해, 이에 첨가된 다른 미네랄 성분을 갖는다:

- 단계 d)에 따르면, 배우체가 상온에서 일정한 조명 하에, 선택적으로 이에 첨가된 이산화탄소와 함께, 공기 버블링 하의 반투명 배양 탱크에서 배양된다. 배양 14일 후, 세포가 증식하고, 바이오매스의 양이 증가한다. 이어서 그 표면에 배우체를 보유하는, 80 ㎛의 컷오프-역치를 갖는 여과 체에 걸쳐 탱크 내용물을 여과함으로써 배양 중 존재하는 배우체 세포를 회수하는 것이 적합하다. 그 뒤 수득된 갈조류 배우체는 해수 중에 헹궈진다.

- 단계 e)에 따르면, 이렇게 헹궈진 회수된 배우체가 수성 현탁액에 배치된다. 그 뒤, 상기 수성 현탁액이 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물 수득 방법의 단계 A)에서 이용된다.

상기 정의된 바와 같은 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물 수득 방법의 단계 A) 동안, 배우체 세포의 수성 현탁액은 바이오매스 1 kg 당 5 내지 30리터 알코올의 양으로, 보다 구체적으로 바이오매스 1 kg 당 대략 10리터 알코올의 양으로, 적어도 1시간 동안 20℃의 온도에서 알코올 또는 알코올의 혼합물과 혼합된다. 상기 정의된 바와 같은 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물 수득 방법의 단계 A)에서 이용되는, 1 내지 4개 탄소수를 포함하는 상기 적어도 하나의 지방족 알코올은 보다 구체적으로는 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 이소부탄올, 또는 이들 알코올의 혼합물로부터 선택되며; 가장 바람직하게는 에탄올이다.

상기 정의된 바와 같은 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물 수득 방법의 단계 B) 동안, 단계 A)에서 수득된 갈조류 배우체 세포의 상기 수성-알코올계 현탁액은 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 적어도 하나의 지방산 트리글리세라이드와 혼합된다. 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 상기 적어도 하나의 지방산 트리글리세라이드는 보다 구체적으로는 8 내지 10개 탄소수를 포함하는 지방산 트리글리세라이드의 혼합물이다. 상기 단계 B)에 따르면, 혼합물은 적어도 1시간 동안 교반된다.

또 다른 특정 양태에 따르면, 단계 A)에서 수득된 갈조류 배우체 세포의 상기 수성-알코올계 현탁액은 갈조류 배우체 세포의 중량 대 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 지방산 트리글리세라이드의 중량의 중량비가 2% 이상 10% 이하, 보다 구체적으로는 5% 이상이도록 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 상기 적어도 하나의 지방산 트리글리세라이드와 혼합된다. 가장 특정한 양태에 따르면, 상기 중량비는 대략 6%이다.

상기 정의된 바와 같은 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물 수득 방법의 단계 C) 동안, 단계 B)에서 수득된 다중상 혼합물은 교반 하에 20℃의 온도에서 여기에 첨가된 물을 갖는다.

또 다른 특정 양태에 따르면, 단계 B)에서 수득된 상기 다중상 혼합물은 갈조류 배우체 세포의 중량 대 물의 중량의 중량비가 0.5% 이상 내지 2% 이하이도록 여기에 첨가된 물을 갖는다. 가장 특정한 양태에 따르면, 상기 중량비는 대략 1%이다.

단계 C)에서 수득된 혼합물로부터의 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물의 단리 단계 D)는 일반적으로 다음 방식으로 수행된다: 이렇게 형성된 혼합물이 여과되어 바이오매스를 제거한다. 이어서 여액이 원심분리에 의해 분리되어 관심 친지성 추출물을 수득한다.

“갈조류”는 본 발명의 주제인 친지성 추출물에서, 아스코세이랄레스(Ascoseirales), 아스테로클라달레스(Asterocladales), 데스마레스티알레스(Desmarestiales), 딕티오탈레스(Dictyotales), 딕티오토파이시대(Dictyotophycidae), 디스코스포란지알레스(Discosporangiales), 디스코스포란지오파이시대(Discosporangiophycidae), 엑토카르팔레스(Ectocarpales), 푸칼레스(Fucales), 푸코파이시대(Fucophycidae), 이시게알레스(Ishigeales), 이시게오파이시대(Ishigeophycidae), 라미나리알레스(Laminariales), 네모데르마탈레스(Nemodermatales), 온슬로위알레스(Onslowiales), 패오파이세애 오르도 인세르태 세디스(Phaeophyceae ordo incertae sedis), 패오시포니엘랄레스(Phaeosiphoniellales), 랄프시알레스(Ralfsiales), 사이토탐날레스(Scytothamnales), 스패셀라리알레스(Sphacelariales), 스포로크날레스(Sporochnales), 사이링고데르마탈레스(Syringodermatales), 및 틸로프테리달레스(Tilopteridales) 목의 갈조류로 구성되는 군의 요소, 및 보다 구체적으로는 라미나리알레스(Laminariales), 푸칼레스(Fucales), 데스마레스티알레스(Desmarestiales), 엑토카르팔레스(Ectocarpales) 및 틸로프테리달레스(Tilopteridales) 목의 갈조류로 구성되는 군의 요소, 그리고 더욱 구체적으로는 라미나리알레스(Laminariales) 목의 갈조류를 표시한다.

본 발명의 주제인 친지성 추출물에서, "갈조류"는 보다 구체적으로는 알라리아세애(Alariaceae) 과 및 라미나리아세애(Laminariaceae) 과의 갈조류로부터 선택된 라미나리알레스(Laminariales) 목의 갈조류를 표시한다.

본 발명의 주제인 친지성 추출물에서, "갈조류"는 보다 구체적으로는 라미나리아 디지타타(Laminaria digitata), 라미나리아 사카리나(Laminaria saccharina), 라미나리아 하이퍼보레아(Laminaria hyperborea) 및 라미나리아 오크로류카(Laminaria ochroleuca)로 구성되는 군으로부터 선택되는, 라미나리알레스(Laminariales) 목 라미나리아세애(Laminariaceae) 과의 갈조류를 표시한다.

본 발명의 주제인 친지성 추출물에서, "갈조류"는 보다 구체적으로는 갈조류 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida)인 라미나리알레스(Laminariales) 목 알라리아세애(Alariaceae) 과의 갈조류를 표시한다.

선택적으로, 헹굼 후, 상기 정의된 바와 같은 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물 수득 방법의 단계 A)에서 이용되는 갈조류 배우체 세포의 수성 현탁액의 제조를 위해 단계 d)에서 수득되는 배우체는 일반적으로 트레이 냉동 건조기에서, 동결 건조된 후 분쇄되어 갈조류 배우체의 동결건조물 분말을 수득한다. 또 다른 특정한 양태에 따르면, 이는 상기 정의된 바와 같은 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물 수득 방법이 다음 단계:

- 갈조류 배우체 세포의 동결건조물 분말을 재수화함으로써 단계 A)에서 이용되는 갈조류 배우체 세포의 상기 수성 현탁액을 제조하는 단계 A ₀ )을 또한 포함하는 이유이다.

상기 정의된 바와 같은 단계 A₀은 일반적으로, 특히 5중량% 내지 50중량%의 고체, 보다 구체적으로는 15중량% 내지 45중량%의 고체 및 가장 구체적으로는 대략 35중량%의 고체를 함유하는 바이오매스를 수득하기 위해 분말을 물과 혼합함으로써 동결건조된 세포의 연마 직후 수행된다.

상기 정의된 바와 같은 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물 수득 방법의 단계 D)의 말기에 수득되는 갈조류 세포의 친지성 추출물은 또한 물을 함유할 수 있다; 이어서 탈수제 염, 예를 들어 무수 나트륨 설페이트(NaSO₄)의 첨가에 의해 상기 용액을 건조하는 것이 필요하다. 이어서 갈조류 세포의 건조 친지성 추출물은 셀룰로스 물질로 제조된 종이 필터에 걸쳐 여과된다. 또 다른 특정한 양태에 따르면, 이는 상기 정의된 바와 같은 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물 수득 방법이 또한 다음 단계:

- 단계 D)에서 수득된 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물을 건조하는 단계 E)를 포함하는 이유이다.

또 다른 보다 특정한 양태에 따르면, 상기 정의된 바와 같은 추출물은 수득 방법에서 이용되는 갈조류 배우체 세포가 알라리아세애(Alariaceae) 과 및 라미나리아세애(Laminariaceae) 과의 갈조류로부터 선택된 라미나리알레스(Laminariales) 목의 갈조류에서 유래되는, 보다 구체적으로는 라미나리아 디지타타(Laminaria digitata), 라미나리아 사카리나(Laminaria saccharina), 라미나리아 하이퍼보레아(Laminaria hyperborea), 라미나리아 오크롤류카(Laminaria ochroleuca) 및 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida)로 구성되는 군에서 유래되는 갈조류에서 유래되는 것을 특징으로 한다.

또 다른 보다 특정한 양태에 따르면, 상기 정의된 바와 같은 추출물은 수득 방법에서 이용되는 갈조류 배우체 세포가 조류 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida)에서 유래되는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 주제는 다음 연속 단계:

- 단계 A)에서 수득된, 조류 배우체 세포의 상기 수성-알코올계 현탁액을 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 적어도 하나의 지방산 트리글리세라이드와 혼합하는 단계 B);

- 단계 C)에서 수득된 혼합물로부터 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물을 단리하는 단계 D)를 포함하는, 상기 정의된 바와 같은 갈조류 배우체의 친지성 추출물의 수득 방법이다.

상기 정의된 바와 같은 방법의 보다 구체적인 방식에 따르면, 이는 다음 단계:

- 단계 D)에서 수득된 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물을 건조하는 단계 E);

- 갈조류 배우체 세포의 동결건조물을 재수화함으로써 단계 A)에서 이용되는 갈조류 배우체 세포의 상기 수성 현탁액을 제조하는 단계 A ₀ ) 중 하나 또는 다른 하나 또는 둘 다를 또한 포함한다.

상기 정의된 바와 같은 방법의 다른 구체적 방식에 따르면:

- 단계 A) 동안, 1 내지 4개 탄소수를 포함하는 상기 적어도 하나의 지방족 알코올은 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 이소부탄올, 또는 이들 알코올의 혼합물로부터 선택되며; 가장 구체적으로는 에탄올이고; 및/또는:

- 단계 B) 동안, 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 상기 적어도 하나의 지방산 트리글리세라이드는 8 내지 10개 탄소수를 포함하는 지방산 트리글리세라이드의 혼합물이고; 및/또는:

- 단계 B) 동안, 갈조류 배우체 세포의 중량 대 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 지방산 트리글리세라이드의 중량의 중량비는 2% 이상 10% 이하이고; 보다 구체적으로는 5% 이상이고; 및/또는:

- 이용되는 갈조류 배우체 세포는 알라리아세애(Alariaceae) 과 및 라미나리아세애(Laminariaceae) 과의 갈조류로부터 선택된 라미나리알레스(Laminariales) 목의 갈조류에서 유래되며, 보다 구체적으로는 라미나리아 디지타타(Laminaria digitata), 라미나리아 사카리나(Laminaria saccharina), 라미나리아 하이퍼보레아(Laminaria hyperborea), 라미나리아 오크롤류카(Laminaria ochroleuca) 및 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida)로 구성되는 군에서 유래되는 갈조류에서, 보다 구체적으로는 조류 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida)에서 유래된다.

본 발명의 또 다른 주제는 인간 피부 또는 입술의 노화 징후의 출현을 예방하거나 늦추거나 다르게는 상기 징후를 제거하기 위한 목표를 갖는 상기 정의된 바와 같은 갈조류 배우체의 친지성 추출물의 용도로서, 상기 용도가 미용 조성물에 있는 용도, 그리고 또한 인간 피부 또는 입술의 노화 징후의 출현을 예방하거나 늦추거나 다르게는 상기 징후를 제거하기 위한 목표를 갖는 방법으로서, 적어도 하나의 미용적으로 허용 가능한 부형제 및 상기 정의된 바와 같은 갈조류 배우체의 친지성 추출물의 유효량을 포함하는, 국소 이용을 위한 미용 조성물(C1)의 인간 피부 또는 입술에 대한 적어도 1회 적용 단계를 포함하는 방법이다.

본 발명의 또 다른 주제는 상기 정의된 바와 같은 조성물(C1)이다.

상기 정의된 방법에서, 상기 조성물(C1)이 일반적으로 치료받을 피부 표면 상으로 전개된 후 피부는 잠시 마사지를 받는다.

본 발명의 주제인 조성물(C1)의 정의에서 이용되는 "국소 이용을 위한"이라는 표현은 이것이 직접적 적용이건 또는 본 발명에 따른 상기 조성물(C1)이 피부와 접촉되기 위한 지지체(종이, 와이프, 직물, 경피 장치 등) 상으로 함침되는 간접적 적용이건 무관하게, 상기 조성물(C1)이 피부에 대한 적용에 의해 이용됨을 의미한다.

본 발명의 주제인 조성물(C1)의 정의에서 이용되는 "미용적으로 허용 가능한"이라는 표현은, 1976년 7월 27일 유럽 경제 공동체 위원회 지침, 번호 76/768/EEC(1993년 6월 14일 지침 번호 93/35/EEC에 의해 개정됨)에 따르면, 이것이 배타적이고 우선적으로, 이를 세정하기 위한, 이를 방향처리 하기 위한, 이의 외관을 변형하고/하거나 이의 체취를 교정하고/하거나 이를 보호하고/하거나 이의 우수한 상태를 유지하기 위한 관점에서, 인체의 다양한 부분(표피, 체모 및 모발계, 손발톱, 입술 및 성기) 또는 치아 및 구강 점막과 접촉하게 될 임의의 성분 또는 조제물을 포함함을 의미한다.

상기 정의된 바와 같은 갈조류 배우체의 친지성 추출물의 "유효량"은 상기 조성물(C1)의 중량 100% 당, 0.1중량% 내지 5중량%, 보다 구체적으로는 0.1중량% 내지 3중량%, 더욱 구체적으로는 0.5중량% 내지 2중량%인 양의 상기 갈조류 배우체의 친지성 추출물을 의미하려는 것이다.

본 발명의 주제인 조성물(C1)은 일반적으로 수성 또는 수성-알코올계 또는 수성-글리콜계 용액의 형태, 유중수, 수중유, 수중유중수 또는 유중수중유 유형인지 여부와 무관하게 현탁액, 에멀젼, 마이크로에멀젼 또는 나노에멀젼의 형태, 또는 분말의 형태이다.

본 발명의 주제인 조성물(C1)은 병, 펌프형 "병" 장치, 에어로졸 장치 내 가압된 형태, 개방세공 벽, 예컨대 그릴이 제공되는 장치, 또는 볼 적용장치가 제공되는("롤-온") 장치에 패키지화될 수 있다.

일반적으로 본 발명의 주제인 갈조류 배우체의 친지성 추출물은 국소 이용을 위해 제형 분야에서 통상적으로 이용되는 화학적 첨가제, 예컨대 발포 및/또는 세제 계면활성제, 증점 및/또는 겔화 계면활성제, 증점제 및/또는 겔화제, 안정화제, 막 형성 화합물, 용매 및 공용매, 굴수성 제제, 온천수 또는 광천수, 가소화제, 유화제 및 공-유화제, 불투명화제, 진주화제, 과지방화제, 격리제, 킬레이트화제, 오일, 왁스, 항산화제, 향료, 에센셜 오일, 보존제, 컨디셔닝제, 탈취제, 체모 및 피부 탈색을 위한 화이트닝제, 피부 또는 모발에 대한 치료 및/또는 보호 작용을 제공하기 위한 활성 제제, 자외선 차단제, 미네랄 충전제 또는 안료, 시각적 효과를 제공하거나 활성 제제를 캡슐화하기 위한 입자, 박리 입자, 텍스처화제, 형광 미백제, 및 곤충 퇴치제와 조합된다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 발포 및/또는 세제 계면활성제의 예로서, 음이온성, 양이온성, 양쪽성 또는 비이온성 발포 및/또는 세제 계면활성제를 언급할 수 있다.

음이온성 발포 및/또는 세제 계면활성제 중에서, 알킬 에테르 설페이트, 알킬 설페이트, 알킬아마이도 에테르 설페이트, 알킬아릴폴리에테르 설페이트, 모노글리세라이드 설페이트, 알파-올레핀 설포네이트, 파라핀 설포네이트, 알킬 포스페이트, 알킬 에테르 포스페이트, 알킬 설포네이트, 알킬아마이드 설포네이트, 알킬아릴 설포네이트, 알킬 카복실레이트, 알킬 설포숙시네이트, 알킬 에테르 설포숙시네이트, 알킬아마이드 설포숙시네이트, 알킬 설포아세테이트, 알킬사르코시네이트, 아실이세티오네이트, N-아실타우레이트, 아실 락틸레이트, 아미노산의 N-아실화 유도체, 펩타이드의 N-아실화 유도체, 단백질의 N-아실화 유도체, 또는 지방산의 N-아실화 유도체의 알칼리 금속 염, 알칼리 토금속 염, 암모늄 염, 아민 염 또는 아미노 알코올 염을 언급할 수 있다.

양쪽성 발포 및/또는 세제 계면활성제 중에서, 알킬 베타인, 알킬아마이도 베타인, 설타인, 알킬아마이도알킬 설포베타인, 이미다졸린 유도체, 포스포베타인, 암포폴리아세테이트 및 암포프로피오네이트를 언급할 수 있다.

양이온성 발포 및/또는 세제 계면활성제 중에서, 4원 암모늄 유도체를 특히 언급할 수 있다.

비이온성 발포 및/또는 세제 계면활성제 중에서, 8 내지 16개 탄소수를 포함하는, 선형 또는 분기형, 포화 또는 불포화 지방족 라디칼을 포함하는 알킬 폴리글리코사이드, 예컨대 옥틸폴리글루코사이드, 데실폴리글루코사이드, 운데실레닐폴리글루코사이드, 도데실폴리글루코사이드, 테트라데실폴리글루코사이드, 헥사데실폴리글루코사이드, 1,12-도데칸디일폴리글루코사이드; 수소화 피마자유의 에톡실화 유도체, 예컨대 INCI 명칭 “Peg-40 수소화 피마자유” 하에 판매되는 제품; 폴리소르베이트, 예컨대 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 40, 폴리소르베이트 60, 폴리소르베이트 70, 폴리소르베이트 80 또는 폴리소르베이트 85; 코코넛 아마이드; N-알킬아민을 특히 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 증점 및/또는 겔화 계면활성제의 예로서, 선택적으로 알콕실화 알킬 폴리글루코사이드 지방 에스테르, 예컨대 에톡실화 메틸폴리글루코사이드 에스테르, 예컨대 각각 명칭 Glucamate™ LT 및 Glumate™ DOE120 하에 판매되는 PEG 120 메틸 글루코스 트리올레에이트 및 PEG 120 메틸 글루코스 디올레에이트; 알콕실화 지방 에스테르, 예컨대 명칭 Crothix™ DS53 하에 판매되는 PEG 150 펜타에리트리틸 테트라스테아레이트, 명칭 Antil™ 141 하에 판매되는 PEG 55 프로필렌 글리콜 올레에이트; 지방쇄 폴리알킬렌 글리콜 카바메이트, 예컨대 명칭 Elfacos™ T211 하에 판매되는 PPG-14 라우레트 이소포릴 디카바메이트, 또는 명칭 Elfacos™ GT2125 하에 판매되는 PPG-14 팔메트-60 헥실 디카바메이트를 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 증점제 및/또는 겔화제의 예로서, 폴리전해질 유형의 선형 또는 분기형 또는 가교 중합체, 예컨대 부분 또는 전체 염화 아크릴산 단독중합체, 부분 또는 전체 염화 메타크릴산 단독중합체, 부분 또는 전체 염화 2-메틸-[(1-옥소-2-프로페닐)아미노]-1-프로판 설폰산(AMPS) 단독중합체, 아크릴산 및 AMPS의 공중합체, 아크릴아마이드 및 AMPS의 공중합체, 비닐피롤리돈 및 AMPS의 공중합체, AMPS 및 (2-하이드록시에틸) 아크릴레이트의 공중합체, AMPS 및 (2-하이드록시에틸) 메타크릴레이트의 공중합체, AMPS 및 하이드록시에틸아크릴아마이드의 공중합체, AMPS 및 N,N-디메틸아크릴아마이드의 공중합체, AMPS 및 트리스(하이드록시-메틸)아크릴아마이도메탄(THAM)의 공중합체, 아크릴산 또는 메타크릴산 및 (2-하이드록시에틸) 아크릴레이트의 공중합체, 아크릴산 또는 메타크릴산 및 (2-하이드록시에틸) 메타크릴레이트의 공중합체, 아크릴산 또는 메타크릴산 및 하이드록시에틸아크릴아마이드의 공중합체, 아크릴산 또는 메타크릴산 및 THAM의 공중합체, 아크릴산 또는 메타크릴산 및 N,N-디메틸아크릴아마이드의 공중합체, 아크릴산 또는 메타크릴산, AMPS 및 (2-하이드록시에틸) 아크릴레이트의 3원 중합체, 아크릴산 또는 메타크릴산, AMPS 및 (2-하이드록시에틸) 메타크릴레이트의 3원 중합체, 아크릴산 또는 메타크릴산, AMPS 및 THAM의 3원 중합체, 아크릴산 또는 메타크릴산, AMPS 및 N,N 디메틸아크릴아마이드의 3원 중합체, 아크릴산 또는 메타크릴산, AMPS 및 아크릴아마이드의 3원 중합체, 아크릴산 또는 메타크릴산 및 탄소계 사슬이 4 내지 30개 탄소수, 보다 구체적으로는 10 내지 30개 탄소수를 포함하는 알킬 아크릴레이트의 공중합체, AMPS 및 탄소계 사슬이 4 내지 30개 탄소수, 보다 구체적으로는 10 내지 30개 탄소수를 포함하는 알킬 아크릴레이트의 공중합체, 자유, 부분 염화 또는 전체 염화 강산 작용기를 갖는 적어도 하나의 단량체와 적어도 하나의 중성 단량체 및 화학식 VIII의 적어도 하나의 단량체의 선형, 분기형 또는 가교 3원 중합체를 언급할 수 있다:

[화학식 VIII]

CH₂=C(R'₃)-C(=O)-[CH₂-CH₂-O]_n-R'₄

식 중, R'₃은 수소 원자 또는 메틸 라디칼을 나타내며, R'₄는 8 내지 30개 탄소수를 포함하는 선형 또는 분기형 알킬 라디칼을 나타내고, n은 1 이상 50 이하의 수를 나타낸다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 다중전해질 유형의 선형 또는 분기형 또는 가교 중합체는 용액, 수성 현탁액, 유중수 에멀젼, 수중유 에멀젼, 또는 분말 형태일 수 있다. 조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 다중전해질 유형의 선형 또는 분기형 또는 가교 중합체는 명칭 Simulgel™ EG, Simulgel™ EPG, Sepigel™ 305, Simulgel™ 600, Simulgel™ NS, Simulgel™ INS 100, Simulgel™ FL, Simulgel™ A, Simulgel™ SMS 88, Sepinov™EMT 10, Sepiplus™400, Sepiplus™265, Sepiplus™S, Sepimax^TMZEN, Aristoflex™AVC, Aristoflex™AVS, Novemer™EC-1, Novemer^TMEC-2, Aristoflex™HMB, Cosmedia^TMSP, Flocare™ET 25, Flocare™ET 75, Flocare™ET 26, Flocare™ET 30, Flocare™ET 58, Flocare™PSD 30, Viscolam™AT 64, Viscolam™AT 100 하에 판매되는 제품으로부터 선택될 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 증점제 및/또는 겔화제의 예로서, 단당류로만 구성된 다당류, 예컨대 글루칸 또는 글루코스 단독중합체, 글루코만노글루칸, 자일로글리칸, D-만노스 주쇄 상 D-갈락토스 단위의 치환도(DS)가 0 내지 1, 보다 구체적으로는 1 내지 0.25인 갈락토만난, 예컨대 카시아 고무 유래(DS = 1/5), 로커스트 빈 고무 유래(DS = 1/4), 타라 고무 유래(DS = 1/3), 구아 고무 유래(DS = 1/2) 또는 페누그릭 고무 유래(DS = 1)의 갈락토만난을 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 증점제 및/또는 겔화제의 예로서, 단당류 유도체로 구성되는 다당류, 예컨대 설페이트화 갈락탄 및 보다 구체적으로 카라기난 및 한천, 유로난 및 보다 구체적으로 알긴, 알기네이트 및 펙틴, 단당류 및 우론산의 이종중합체 및 보다 구체적으로 잔탄 고무, 겔란 고무, 아라비아 고무 및 카라야 고무의 압출물, 및 글루코스아미노글리칸을 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 증점제 및/또는 겔화제의 예로서, 셀룰로스, 셀룰로스 유도체, 예컨대 메틸셀룰로스, 에틸셀룰로스, 하이드록시프로필셀룰로스, 실리케이트, 전분, 친수성 전분 유도체, 및 폴리우레탄을 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 안정화제의 예로서, 미세결정성 왁스, 및 보다 구체적으로 오조케라이트, 미네랄 염, 예컨대 나트륨 클로라이드 또는 마그네슘 클로라이드, 및 규소 중합체, 예컨대 폴리실록산 폴리알킬 폴리에테르 공중합체를 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 용매의 예로서, 물, 유기 용매, 예컨대 글리세롤, 디글리세롤, 글리세롤 올리고머, 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 부틸렌 글리콜, 1,3-프로판디올, 1,2-프로판디올, 헥실렌 글리콜, 디에틸렌 글리콜, 자일리톨, 에리트리톨, 소르비톨, 수용성 알코올, 예컨대 에탄올, 이소프로판올 또는 부탄올, 및 물 및 상기 유기 용매의 혼합물을 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 온천수 또는 광천수의 예로서, 적어도 300 mg/l의 미네랄화를 갖는 온천수 또는 광천수, 특히 Avene수, Vittel수, Vichy 분지수, Uriage수, la Roche Posay수, la Bourboule수, Enghien-les-bains수, Saint-Gervais-les-bains수, Neris-les-bains수, Allevard-les-bains수, Digne수, Maizieres수, Neyrac-les-bains수, Lons le Saunier수, Rochefort수, Saint Christau수, Fumades수 및 Tercis-les-bains수를 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 굴수성 제제의 예로서, 자일렌 설포네이트, 쿠멘 설포네이트, 헥실폴리글루코사이드, 2-에틸헥실폴리글루코사이드 및 n-헵틸폴리글루코사이드를 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 유화 계면활성제의 예로서, 비이온성 계면활성제, 음이온성 계면활성제 및 양이온성 계면활성제를 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 비이온성 유화 계면활성제의 예로서, 소르비톨의 지방산 에스테르, 예컨대 명칭 Montane™40, Montane™60, Montane™70, Montane™80 및 Montane™85 하에 판매되는 제품; 글리세릴 스테아레이트 및 5몰 내지 150몰의 에틸렌 옥사이드로 에톡실화된 스테아르산을 포함하는 조성물, 예컨대 135몰의 에틸렌 옥사이드로 에톡실화된 스테아르산 및 명칭 Simulsol™ 165 하에 판매되는 글리세릴 스테아레이트를 포함하는 조성물; 만니탄 에스테르; 에톡실화된 만니탄 에스테르; 수크로스 에스테르; 메틸글루코사이드 에스테르; 14 내지 36개 탄소수를 포함하는, 선형 또는 분기형, 포화 또는 불포화 지방족 라디칼을 포함하는 알킬 폴리글리코사이드, 예컨대 테트라데실폴리글루코사이드, 헥사데실폴리글루코사이드, 옥타데실폴리글루코사이드, 헥사데실폴리자일로사이드, 옥타데실폴리자일로사이드, 에이코실폴리글루코사이드, 도데코실폴리글루코사이드, 2-옥틸도데실폴리자일로사이드 또는 12-하이드록시스테아릴폴리글루코사이드; 14 내지 36개 탄소수를 포함하는 선형 또는 분기형, 포화 또는 불포화 지방 알코올, 및 상술된 바와 같은 알킬 폴리글리코사이드의 조성물, 예를 들어 상표명 Montanov™68, Montanov™14, Montanov™82, Montanov™202, Montanov™S, Montanov™WO18, Montanov™L, Fluidanov™20X 및 Easynov™ 하에 판매되는 조성물을 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 음이온성 게면활성제의 예로서, 글리세릴 스테아레이트 시트레이트, 세테아릴 설페이트, 비누, 예컨대 나트륨 스테아레이트 또는 트리에탄올암모늄 스테아레이트, 및 염화된 아미노산의 N-아실화 유도체, 예를 들어 스테아로일 글루타메이트를 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 양이온성 유화 계면활성제의 예로서, 아민 옥사이드, 쿼터늄-82 및 번호 WO 96/00719 하에 공개된 특허 출원에 기재된 계면활성제 그리고 주로 지방쇄가 적어도 16개 탄소수를 포함하는 것들을 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 불투명화제 및/또는 진주화제의 예로서, 나트륨 팔미테이트, 나트륨 스테아레이트, 나트륨 하이드록시스테아레이트, 마그네슘 팔미테이트, 마그네슘 스테아레이트, 마그네슘 하이드록시스테아레이트, 에틸렌 글리콜 모노스테아레이트, 에틸렌 글리콜 디스테아레이트, 폴리에틸렌 글리콜 모노스테아레이트, 폴리에틸렌 글리콜 디스테아레이트, 및 12 내지 22개 탄소수를 포함하는 지방 알코올을 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 텍스처화제의 예로서, 아미노산의 N-아실화 유도체, 예를 들어 명칭 Aminohope™LL 하에 판매되는 라우로일 라이신, 명칭 Dryflo™ 하에 판매되는 옥테닐 전분 숙시네이트, 명칭 Montanov™ 14 하에 판매되는 미리스틸 폴리글루코사이드, 셀룰로스 섬유, 면 섬유, 키토산 섬유, 활석, 세리사이트 및 운모를 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 탈취제의 예로서, 알칼리 금속 실리케이트, 아연 염, 예컨대 아연 설페이트, 아연 글루코네이트, 아연 클로라이드 또는 아연 락테이트; 사차 암모늄 염, 예컨대 세틸트리메틸암모늄염, 세틸피리디늄염; 글리세롤 유도체, 예컨대 글리세릴 카프레이트, 글리세릴 카프릴레이트, 폴리글리세릴 카프레이트; 1,2-데칸디올; 1,3-프로판디올; 살리실산; 나트륨 바이카보네이트; 사이클로덱스트린; 금속 제올라이트; Triclosan™; 알루미늄 브로모하이드레이트, 알루미늄 클로로하이드레이트, 알루미늄 클로라이드, 알루미늄 설페이트, 알루미늄 지르코늄 클로로하이드레이트, 알루미늄 지르코늄 트리클로로하이드레이트, 알루미늄 지르코늄 테트라클로로하이드레이트, 알루미늄 지르코늄 펜타클로로하이드레이트, 알루미늄 지르코늄 옥토클로로하이드레이트, 알루미늄 설페이트, 나트륨 알루미늄 락테이트, 알루미늄 클로로하이드레이트 및 글리콜의 복합체, 예컨대 알루미늄 클로로하이드레이트 및 프로필렌 글리콜의 복합체, 알루미늄 디클로로하이드레이트 및 프로필렌 글리콜의 복합체, 알루미늄 세스퀴클로로하이드레이트 및 프로필렌 글리콜의 복합체, 알루미늄 클로로하이드레이트 및 폴리에틸렌 글리콜의 복합체, 알루미늄 디클로로하이드레이트 및 폴리에틸렌 글리콜의 복합체, 및 알루미늄 세스퀴클로로하이드레이트 및 폴리에틸렌 글리콜의 복합체를 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 오일의 예로서, 미네랄 오일, 예컨대 파라핀 오일, 액체 바셀린, 이소파라핀 또는 백색 미네랄 오일; 동물 기원의 오일, 예컨대 스쿠알렌 또는 스쿠알란; 식물성 오일, 예컨대 피토스쿠알란, 스위트 아몬드 오일, 코코넛 오일, 피마자 오일, 호호바 오일, 올리브 오일, 평지씨 오일, 땅콩 오일, 해바라기 오일, 밀배아 오일, 옥수수 배아 오일, 대두 오일, 목화씨 오일, 알팔파 오일, 양귀비씨 오일, 호박 오일, 금달맞이꽃 오일, 기장 오일, 보리 오일, 호밀 오일, 잇꽃 오일, 캔들 너트 오일, 시계꽃 오일, 헤이즐넛 오일, 야자 오일, 셰아 버터, 살구핵 오일, 베텔 잎 오일, 시심브리엄(sysymbrium) 오일, 아보카도 오일, 칼렌둘라 오일, 꽃 유래 또는 야채 유래 오일, 에톡실화된 식물성 오일; 합성 오일, 예컨대 지방산 에스테르, 예컨대 부틸 미리스테이트, 프로필 미리스테이트, 이소프로필 미리스테이트, 세틸 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트, 옥틸 팔미테이트, 부틸 스테아레이트, 헥사데실 스테아레이트, 이소프로필 스테아레이트, 옥틸 스테아레이트, 이소세틸 스테아레이트, 도데실 올레에이트, 헥실 라우레이트, 프로필렌 글리콜 디카프릴레이트, 라놀린산-유래 에스테르, 예컨대 이소프로필 라놀레이트, 이소세틸 라놀레이트, 지방산 모노글리세라이드, 디글리세라이드 및 트리글리세라이드, 예컨대 글리세릴 트리헵타노에이트, 알킬 벤조에이트, 수소화된 오일, 폴리(알파-올레핀), 폴리올레핀, 예컨대 폴리(이소부탄), 합성 이소알칸, 예컨대 이소헥사데칸, 이소도데칸, 퍼플루오로 오일; 실리콘 오일, 예컨대 디메틸폴리실록산, 메틸페닐폴리실록산, 아민으로 변형된 실리콘, 지방산으로 변형된 실리콘, 알코올로 변형된 실리콘, 알코올 및 지방산으로 변형된 실리콘, 폴리에테르기로 변형된 실리콘, 에폭시-변형된 실리콘, 플루오로기로 변형된 실리콘, 고리형 실리콘 및 알킬기로 변형된 실리콘을 언급할 수 있다. "오일"이라는 용어는 본 출원에서, 수중 불용성이고 25℃의 온도에서 액체 외관을 갖는 화합물 및/또는 화합물의 혼합물을 의미하려는 것이다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 왁스의 예로서, 밀랍, 카르나우바 왁스, 칸델릴라 왁스, 아우리쿠리(ouricury) 왁스, 재팬 왁스, 코르크 섬유 왁스, 사탕수수 왁스, 파라핀 왁스, 리그나이트 왁스, 미소결정성 왁스, 라놀린 왁스; 오조케라이트; 폴리에틸렌 왁스; 실리콘 왁스; 식물성 왁스; 상온에서 고체인 지방 알코올 및 지방산; 상온에서 고체인 글리세라이드를 언급할 수 있다. "왁스"라는 용어는 본 출원에서, 수중 불용성이고 45℃ 이상의 온도에서 고체 외관을 갖는 화합물 및/또는 화합물의 혼합물을 의미하려는 것이다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 활성 제제의 예로서, 비타민 및 이의 유도체, 특히 이의 에스테르, 예컨대 레티놀(비타민 A) 및 이의 에스테르(예를 들어, 레티닐 팔미테이트), 아스코르브산(비타민 C) 및 이의 에스테르, 아스코르브산의 당 유도체(예컨대 아스코르빌 글루코사이드), 토코페롤(비타민 E) 및 이의 에스테르(예컨대 토코페릴 아세테이트), 비타민 B3 또는 B10(니아신아마이드 및 이의 유도체); 피부-라이트닝 또는 피부-탈색 작용을 나타내는 화합물, 예컨대 명칭 Sepiwhite™MSH, Sepicalm™VG 하에 판매되는 ω-운데실레노일 페닐알라닌, ω-운데셀리노일 페닐알라닌의 글리세롤 모노에스테르 및/또는 디에스테르, ω-운데실레노일 디펩타이드, 아르부틴, 코지산(kojic acid), 하이드로퀴논; 진정 작용을 나타내는 화합물, 특히 Sepicalm™ S, 알란토인 및 비스아볼롤; 소염제; 모이스처라이징 작용을 나타내는 화합물, 예컨대 요소, 하이드록시요소, 글리세롤, 폴리글리세롤, 글리세롤글루코사이드, 디글리세로글루코사이드, 폴리글리세릴글루코사이드, 자일리틸글루코사이드, 상표명 Aquaxyl™ 하에 판매되는 조성물, 상표명 Pro-xylane™ 하에 판매되는 조성물, C-글리코사이드 유도체 및 보다 구체적으로는 C-글루코사이드 또는 C-자일로사이드 유도체; 폴리페놀-풍부 식물 추출물, 예컨대 포도 추출물, 소나무 추출물, 와인 추출물, 올리브 추출물; 슬리밍 또는 지방용해 작용을 나타내는 화합물, 예컨대 카페인 또는 이의 유도체, Adiposlim™, Adipoless™, 푸콕산틴; N-아실화 단백질; N-아실화 펩타이드, 예컨대 Matrixil™; N-아실화 아미노산; N-아실화 단백질의 부분 가수분해물; 아미노산; 펩타이드; 전체 단백질 가수분해물; 대두 추출물, 예를 들어 Raffermine™; 밀 추출물, 예를 들어 Tensine™ 또는 Gliadine™; 식물 추출물, 예컨대 탄닌-풍부 식물 추출물, 이소플라본-풍부 식물 추출물 또는 테르펜-풍부 식물 추출물; 담수 또는 해수 조류의 추출물; 해양 식물 추출물; 일반적인 해양 추출물, 예컨대 산호; 에센셜 왁스; 박테리아 추출물; 세라마이드; 인지질; 항균 작용 또는 정화 작용을 나타내는 화합물, 예컨대 Lipacide™ C8G, Lipacide™ UG, Sepicontrol™ A5, Fluidipure™8G; Octopirox™ 또는 Sensiva™ SC50; 에너자이징 또는 자극 특성을 나타내는 화합물, 예컨대 Physiogenyl™, 판테놀 및 이의 유도체, 예컨대 Sepicap™ MP; 항-노화 활성 제제, 예컨대 Sepilift™ DPHP, Lipacide™ PVB, Sepivinol™, Sepivital™, Manoliva™, Phyto-Age™, Timecode™; Survicode™; 항-광노화 활성 제제; 진피표피 접합부의 온전성을 보호하기 위한 활성 제제; 세포외 기질 성분, 예컨대 콜라겐, 엘라스틴, 글리코스아미노글리칸의 합성을 증가시키기 위한 활성 제제; 화학적 세포 커뮤니케이션에서 유리하게 작용하는 활성 제제, 예컨대 사이토카인, 또는 물리적 세포 커뮤니케이션에서 유리하게 작용하는 활성 제제, 예컨대 인테그린; 피부에 "열감"을 생성하는 활성 제제, 예컨대 피부 미세순환 활성화제(예컨대 니코틴산 유도체) 또는 피부 상에 "냉감"을 생성하는 제품(예컨대 멘톨 및 유도체); 피부 미세순환을 개선하기 위한 활성 제제, 예를 들어 베이노토닉(veinotonics); 배수 활성 제제; 충혈완화 목적을 위한 활성 제제, 예컨대 은행나무(ginko biloba), 담쟁이, 마로니에, 대나무, 루스쿠스(ruscus), 부처스 브룸(butcher's broom), 센탈라 아시아티카(Centalla asiatica), 푸쿠스(focus), 로즈마리, 버드나무의 추출물; 피부 태닝 또는 갈변을 위한 제제, 예컨대 디하이드록시아세톤(DHA), 에리트룰로스, 메조타르타릭 알데하이드, 글루타르알데하이드, 글리세로알데하이드, 알록산, 닌하이드린, 식물 추출물, 예를 들어 프테로카르푸스(Pterocarpus) 속 및 바피아(Baphia) 속 삼나무, 예를 들어 프테로카르푸스 산탈리누스(Pterocarpus santalinus), 프테로카르푸스 오선(Pterocarpus osun), 프테로카르푸스 소야욱시이(Pterocarpus soyauxii), 프테로카르푸스 에리나세우스(Pterocarpus erinaceus), 프테로카르푸스 인디쿠스(Pterocarpus indicus) 또는 다르게는 바피아 니티다(Baphia nitida)의 추출물, 예컨대 유럽 특허 출원 EP 0 971 683에 기재된 것들; 인간 피부의 태닝 및/또는 갈변의 촉진 및/또는 가속화에서 이의 작용에 대해 및/또는 인간 피부의 염색에서 이의 작용에 대해 공지된 제제, 예를 들어 카로티노이드(및 보다 구체적으로는 베타-카로틴 및 감마-카로틴), 명칭 “당근 오일(carrot oil)”(INCI 명칭: 다우쿠스 캐로타(Daucus Carota), 헬리안티스 앤너스(helianthis annuus) 해바라기 오일) 하에 Provital에서 판매되는, 카로티노이드, 비타민 E 및 비타민 K를 함유하는 제품; 자외선 노출과 조합되어 인간 피부의 태닝을 가속화는데 있어서 이의 효과에 대해 알려져 있는 티로신 및/또는 이의 유도체, 예를 들어 상표명 “Sun Tan Accelerator™” 하에 Provital에서 판매되는, 티로신 및 리보플라빈(비타민 B)을 함유하는 제품, 상표명 “Zymo Tan Complex” 하에 Zymo Line에서 판매되는 티로신 및 티로시나제의 복합체, 상표명 MelanoBronze™(INCI 명칭: 아세틸 티로신, Monk의 후추 추출물(바이텍스 아그너스-카스투스(Vitex agnus-castus))) 하에 Mibelle에서 판매되는, 아세틸 티로신을 함유하는 제품, 상표명 Unipertan VEG-24/242/2002(INCI 명칭: 부틸렌 글리콜 및 아세틸 티로신 및 가수분해된 식물성 단백질 및 아데노신 트리포스페이트) 하에 UNIPEX에서 판매되는 제품, 상표명 “Try-Excell™”(INCI 명칭: 올레오일 티로신 및 루파 실린드리카(Luffa Cylindrica)(종자) 오일 및 올레산) 하에 Sederma에서 판매되는, 서양호박 종자 추출물(또는 수세미 오일)을 함유하는 제품, 상표명 “Actibronze™”(INCI 명칭: 가수분해된 밀 단백질 및 아세틸 티로신 및 구리 글루코네이트) 하에 Alban Muller에서 판매되는 제품, 상표명 Tyrostan™(INCI 명칭: 칼륨 카프로일 티로신) 하에 Synerga에서 판매되는 제품, 상표명 Tyrosinol(INCI 명칭: 소르비탄 이소스테아레이트, 글리세릴 올레에이트, 카프로일 티로신) 하에 Synerga에서 판매되는 제품, 상표명 InstaBronze™(INCI 명칭: 디하이드록시아세톤 및 아세틸 티로신 및 구리 글루코네이트) 하에 Alban Muller에서 판매되는 제품, 상표명 Tyrosilane(INCI 명칭: 메틸실라놀 및 아세틸 티로신) 하에 Exymol에서 판매되는 제품; 이의 멜라닌 생성 활성화 효과에 대해 알려져 있는 펩타이드, 예를 들어 상표명 Bronzing SF Peptide 분말(INCI 명칭: 덱스트란 및 옥타펩타이드-5) 하에 Infinitec Activos에서 판매되는 제품, 상표명 Melitane(INCI 명칭: 글리세린 및 아쿠아 및 덱스트란 및 아세틸 헥사펩타이드-1) 하에 판매되는, 그 알파-MSH 작용제 작용에 대해 알려져 있는 아세틸 헥사펩타이드-1을 포함하는 제품, 상표명 Melatimes Solutions™(INCI 명칭: 부틸렌 글리콜, 팔미토일 트리펩타이드-40) 하에 LIPOTEC에서 판매되는 제품, 당 및 당 유도체, 예를 들어 상표명 Tanositol™(INCI 명칭: 이노시톨) 하에 Provital에서 판매되는 제품, 상표명 Thalitan™(또는 Phycosaccharide™ AG)(INCI 명칭: 아쿠아 및 가수분해된 알긴(라미나리아 디지타타(Laminaria digitata) 및 마그네슘 설페이트 및 망간 설페이트) 하에 CODIF international에서 판매되는, 해양 유래 올리고당류(마그네슘 및 망간 이온으로 킬레이트화된 굴루론산 및 만누론산)를 함유하는 제품, 상표명 Melactiva™(INCI 명칭: 말토덱스트린, 무쿠나 프루리엔스(Mucuna Pruriens) 종자 추출물) 하에 Alban Muller에서 판매되는 제품, 플라보노이드-풍부 화합물, 예를 들어 상표명 “Biotanning”(INCI 명칭: 가수분해된 시트러스 아우란티움 덜시스(Aurantium dulcis) 과일 추출물) 하에 Silab에서 판매되며 레몬 플라보노이드(헤스페리딘 유형)가 풍부한 것으로 알려져 있는 제품; 모발 및/또는 체모 처리를 위한 제제, 예를 들어 모낭의 멜라닌 세포를 보호하는, 상기 멜라닌 세포의 노화 및/또는 아폽토시스에 관여되는 세포독성제에 대해 상기 멜라닌 세포를 보호하기 위한 제제, 예컨대 번호 EP 1 515 688 A2 하에 공개된 유럽 특허 출원에 기재된 것들로부터 선택되는, 도파크롬 토토머라제 활성의 모사체, 합성 SOD 모사 분자, 예를 들어 망간 복합체, 항산화 화합물, 예를 들어 사이클로덱스트린 유도체, 아스코르브산에서 유도되는 규소 함유 화합물, 라이신 또는 아르기닌 피롤리돈카복실레이트, 신남산의 모노- 및 디에스테르 및 비타민 C의 조합, 및 보다 일반적으로 번호 EP 1 515 688 A2 하에 공개된 유럽 특허 출원에서 언급된 것들을 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 항산화제의 예로서, EDTA 및 이의 염, 시트르산, 타르타르산, 옥살산, BHA(부틸하이드록시아니솔), BHT(부틸하이드록시톨루엔), 토코페롤 유도체, 예컨대 토코페롤 아세테이트, 항산화 화합물의 혼합물, 예컨대 Akzo Nobel에서 INCI 명칭: 테트라나트륨 글루타메이트 디아세테이트 하에 판매되는 Dissolvine™ GL 47S를 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 자외선차단제의 예로서, 개정된 미용 지침 76/768/EEC, 별첨 VII에 포함된 모든 것들을 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 유기 자외선차단제 중에서, 벤조산 유도체 패밀리, 예컨대 파라-아미노벤조산(PABA), 특히 PABA의 모노글리세릴 에스테르, N,N-프로폭시 PABA의 에틸 에스테르, N,N-디에톡시 PABA의 에틸 에스테르, N,N-디메틸-PABA의 에틸 에스테르, N,N-디메틸-PABA의 메틸 에스테르, N,N-디메틸-PABA의 부틸 에스테르; 안트라닐산 유도체 패밀리, 예컨대 호모멘틸-N-아세틸 안트라닐레이트; 살리실산 유도체 패밀리, 예컨대 아밀 살리실레이트, 호모멘틸 살리실레이트, 에틸헥실 살리실레이트, 페닐 살리실레이트, 벤질 살리실레이트, 또는 p-이소프로판올페닐 살리실레이트; 신남산 유도체 패밀리, 예컨대 에틸헥실 신나메이트, 에틸 4-이소프로필 신나메이트, 메틸 2,5-디이소프로필 신나메이트, 프로필 p-메톡시신나메이트, 이소프로필 p-메톡시신나메이트, 이소아밀 p-메톡시신나메이트, 옥틸 p-메톡시신나메이트, 2-에틸헥실 p-메톡시신나메이트, 2-에톡시에틸 p-메톡시신나메이트, 사이클로헥실 p-메톡시신나메이트, 에틸 α-시아노-β-페닐신나메이트, 2-에틸헥실 α-시아노-β-페닐신나메이트, 모노(2-에틸헥사노일)글리세릴 디(파라-메톡시신나메이트); 벤조페논 유도체 패밀리, 예컨대 2,4-디하이드록시벤조페논, 2,2'-디하이드록시-4-메톡시벤조페논, 2,2',4,4'-테트라하이드록시벤조페논, 2-하이드록시-4-메톡시벤조페논, 2-하이드록시-4-메톡시-4'-메틸벤조페논, 2-하이드록시-4-메톡시벤조페논-5-설포네이트, 4-페닐벤조페논, 2-에틸헥실-4'-페닐벤조페논-2-카복실레이트, 2-하이드록시-4-n-옥틸옥시벤조페논, 4-하이드록시-3-카복시벤조페논; 3-(4'-메틸벤질리덴)-d,l-캄포르, 3-(벤질리덴)-d,l-캄포르, 캄포르 벤잘코늄 메토설페이트; 유로칸산, 에틸 유로카네이트; 설폰산 유도체 패밀리, 예컨대 2-페닐벤즈이미다졸-5 설폰산 및 이의 염; 트리아진 유도체 패밀리, 예컨대 하이드록시페닐 트리아진, 에틸헥실옥시하이드록시페닐-4-메톡시페닐트리아진, 2,4,6-트리아닐리노-(p-카보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 벤조산 4,4-((6-(((1,1-디메틸에틸)아미노)카보닐)페닐)아미노)-1,3,5-트리아진-2,4-디일 디이미노) 비스(2-에틸헥실) 에스테르, 2-페닐-5-메틸벤족사졸, 2,2'-하이드록시-5'-메틸페닐벤조트리아졸, 2-(2'-하이드록시-5'-t-옥틸페닐)벤조트리아졸, 2-(2'-하이드록시-5'-메틸페닐)벤조트리아졸; 디벤즈아진; 디아니소일메탄, 4-메톡시-4"-t-부틸벤조일메탄; 5-(3,3-디메틸-2-노르보르닐리덴)-3-펜탄-2-온; 디페닐 아크릴레이트 유도체 패밀리, 예컨대 2-에틸헥실-2-시아노-3,3-디페닐-2-프로페노에이트, 에틸-2-시아노-3,3-디페닐-2-프로페노에이트; 폴리실록산 패밀리, 예컨대 벤질리덴 실록산 말로네이트를 언급할 수 있다.

조성물(C1)에서 갈조류 배우체의 친지성 추출물과 조합될 수 있는 "미네랄 차단제"로도 알려져 있는 무기 자외선차단제 중, 티타늄 옥사이드, 아연 옥사이드, 세륨 옥사이드, 지르코늄 옥사이드, 옐로우, 레드 또는 블랙 철 옥사이드, 및 크롬 옥사이드를 언급할 수 있다. 이들 미네랄 차단제는 마이크론화될 수도 있고 마이크론화되지 않을 수도 있으며, 표면 처리를 거칠 수도 있고 거치지 않을 수도 있고, 선택적으로 수성 또는 오일 사전분산물 형태 중에 존재할 수 있다.

본 발명의 또 다른 주제는 인체에 적용되는, 인간 피부 또는 입술의 노화 징후의 치료적 처리 방법에서 이의 이용을 위한, 상기 정의된 바와 같은 갈조류 배우체의 친지성 추출물이다.

하기 실시예는 본 발명을 예시하지만, 이를 제한하지 않는다.

평가된 추출물의 목록

추출물 A(본 발명에 따른 예): 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida) 배우체의 추출물.

추출물 B(선행 기술에 따른 예): 프랑스 특허 출원 FR 2 880 803 A1의 실시예 3의 추출물 BB.

추출물 C(선행 기술에 따른 예): 물 및 글리세롤의 혼합물에서 추출에 의해 수득된, 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida) 포자체의 추출물.

평가된 추출물의 생물학적 효과

시험관내 연구

본 발명에 따른 추출물의 기술적 효과를 나타내기 위해 선택된 모델은 인간 피부 외추출편 상에서 유전자 발현을 연구하기 위한 모델이다. 게놈 또는 트랜스크립톰 평가로 불리는 평가는 생물학적 유익을 나타내기 위해 다양한 분야, 예컨대 화장품에서 널리 이용된다. 인간 피부 외추출편을 이용한 작업은 단층 세포 배양을 이용해서 작업하는 경우보다 더욱 생리적인 조건 하에 작업할 수 있도록 한다.

복부 수술 폐기물에서 생성된, 2명의 여성 백인 공여체(49세 및 46세) 유래의, 약 10 mm 지름의 인간 피부 외추출편을 채취하였다. 이어서 이들을 5% CO₂ 함유 가습 분위기에서 37℃에서 특이적 BEM 배지(Bio-Ec의 외추출편 배지) 중에 살아있도록 유지하였다. 그 뒤, 표 1에 나타낸 제품을 24 h의 기간 동안 적용하였다.

[표 1]

제품의 적용 수단.

국소 적용을 위해 2.5% 에탄올, 그리고 용해되기 위해 배양 배지 중 1% 에탄올을 함유하는 수성-알코올계 겔 중에서 제품을 제조하였다. 이에 따라 조건 당 3개의 외추출편을 제조하였다. 24 h 후, 전체 RNA를 추출한 뒤 이로 증폭 단계를 거치기 전에 이의 농도 및 이의 순도 및 온전성 정도를 결정하기 위해, 정량적 및 정성적 분석을 수행하였다. 이어서 50 ng의 RNA를 이후에 이용한 뒤, 상보적 DNA를 수득하기 위해 역전사하였다. 이후 후자를 3개 유전자: GAPDH(하우스키핑 유전자, 대조군), HIF-1a 및 SIRT-1에 특이적인 탐침, 및 형광 염료, SYBR green에 의해 qPCR(정량적 폴리머라제 연쇄 반응)로 증폭하여, 실시간으로 증폭 반응을 모니터링할 수 있었다. 후자가 검출 가능하도록 하기 위해, 사이클에서의 PCR 수행, 및 각각의 표적에 대해 수행된 사이클의 수(Cq)를 보고한다. 이어서, 수득된 효과를 표준화하기 위해 상기 사이클 값을 GAPDH의 값에서 감산한 뒤, 담체 조건 대비 발현 비를 계산한다(RQ).

평가된 각각의 추출물에 있어서, 그리고 각각의 관심 유전자에 있어서, 하기 값을 계산한다:

ΔCq(추출물 i) = Cq(관심 유전자)-Cq(참조 유전자)

식 중,

- Cq(관심 유전자)는 주어진 추출물 및 주어진 관심 유전자에 대한 신호를 수득하기 위해 필요하고 수행된 사이클의 평균 수를 나타내며;

- Cq(참조 유전자)는 주어진 추출물 및 참조 유전자(이 경우 GAPDH)에 대한 신호를 수득하기 위해 필요하고 수행된 사이클의 평균 수를 나타냄.

각각의 관심 유전자 및 평가된 각각의 추출물에 있어서, 하기 계산을 수행한다:

ΔΔCq = ΔCq(추출물 i) - 담체의 ΔCq

평가된 각각의 추출물에 있어서, 그리고 각각의 관심 유전자에 있어서, 하기 식에 따라 RQ값을 계산한다:

RQ = 2^- ^ΔΔCq

변이 결과를 아래 표 2에 나타낸다.

[표 2]

수득된 유전자 발현 결과

(a): 화합물 A로 수행된 실험

(b): 다른 화합물로 수행된 실험

추출물 A(운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida) 배우체의 추출물)는 담체 조건에 비해 유전자 HIF-1a 및 SIRT-1의 과발현을 유도할 수 있게 한다. 다른 화합물은 이들 유전자의 발현을 유도할 수 있도록 하지 않는다. 본 결과는 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida) 포자체의 수성 추출물(추출물 C)에 의해 및 특허 출원 FR 2 880 803 A1(추출물 B)로부터의 추출물 BB에 의해 나타낸 가장 가까운 선행 기술에 비해 본 발명의 추가적인 기술적 효과를 나타낼 수 있도록 한다.

생체내 연구

대표 대상체 패널(25명의 여성) 상에서 수행된 임상 실험은 2개월 동안, 상기 추출물 A를 포함하지 않는 "위약" 미용 제형물의 동일한 피부 영역에 대한 적용에 비해, 본 발명에 따른 추출물 A의 유효량을 포함하는 미용 제형물의 관심 피부 영역에 대한 적용과 연관된 피부 미세-완화의 홍조 및 "눈가 잔주름" 영역에서 주름의 평균 깊이의 감소 효과를 나타낼 수 있도록 했다.

대표 대상체 패널(20명을 포함하는 혼합 패널) 상에서 수행된 또 다른 임상 실험은 적용 14일 및 28일 후, 상기 추출물 A를 포함하지 않는 "위약" 미용 제형물의 피부에 대한 적용에 비해, 본 발명에 따른 추출물 A의 유효량을 포함하는 미용 제형물의 피부에 대한 적용과 연관된 피부의 항산화 능력의 개선 효과를 나타낼 수 있도록 했다. 상기 효과는 항산화력의 제2철 환원력 평가(FRAP 방법으로 불림)를 이용함으로써 입증되었다.

또 다른 임상 평가를 상기 동일한 대표 대상체 패널 상에서 수행하였고 적용 14일 및 28일 후, 상기 추출물 A를 포함하지 않는 "위약" 미용 제형물의 피부에 대한 적용에 비해, 본 발명에 따른 추출물 A의 유효량을 포함하는 미용 제형물의 피부에 대한 적용과 연관된 자외선 A에 대한 노출에 의해 유도된 스트레스에 대한 피부의 내성 개선 효과를 나타낼 수 있도록 했다. 상기 효과는 45℃ 및 산 pH에서 발색원, NMPI(N-메틸-2-페닐인돌)가 MDA와 반응하여 586 nm에서 흡광도 피크를 갖는 안정한 발색단을 생성하는 능력에 기반하여 문헌[Erdelmeier et al., 1998]의 방법에 의해, 말론디알데하이드(MDA) 검정 방법을 이용해서 입증되었으며, MDA는 지질 과산화의 주요 산물이다.

Claims

갈조류 배우체의 친지성 추출물의 수득 방법으로서, 다음 연속 단계:
- 갈조류 배우체 세포의 수성 현탁액을 1 내지 4개 탄소수를 포함하는 적어도 하나의 지방족 알코올과 혼합하여 배우체 세포의 수성-알코올계 현탁액을 제조하는 단계 A);
- 단계 A)에서 수득된, 조류 배우체 세포의 상기 수성-알코올계 현탁액을 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 적어도 하나의 지방산 트리글리세라이드와 혼합하는 단계 B);
- 단계 B)에서 수득된 다중상 혼합물에 물을 첨가하는 단계 C);
- 단계 C)에서 수득된 혼합물로부터 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물을 단리하는 단계 D)를 포함하는 방법.
제1항에 있어서,
단계 A) 동안, 1 내지 4개 탄소수를 포함하는 상기 적어도 하나의 지방족 알코올이 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 이소부탄올 또는 이들 알코올의 혼합물로부터 선택되는 방법.
제2항에 있어서,
단계 A) 동안, 1 내지 4개 탄소수를 포함하는 상기 적어도 하나의 지방족 알코올이 에탄올인 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
단계 B) 동안, 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 상기 적어도 하나의 지방산 트리글리세라이드가 8 내지 10개 탄소수를 포함하는 지방산 트리글리세라이드의 혼합물인 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
단계 B) 동안, 갈조류 배우체 세포의 중량 대 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 지방산 트리글리세라이드의 중량의 중량비가 2% 이상 10% 이하인 방법.
제5항에 있어서,
단계 B) 동안, 갈조류 배우체 세포의 중량 대 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 지방산 트리글리세라이드의 중량의 상기 중량비가 5% 이상인 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
갈조류 배우체 세포의 동결건조물의 재수화에 의해, 단계 A)에서 이용되는 갈조류 배우체 세포의 상기 수성 현탁액을 제조하는 단계 A₀)을 또한 포함하는 방법.
제1항에 있어서,
단계 D)에서 수득된 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물을 건조하는 단계 E)를 또한 포함하는 방법.
제7항에 있어서,
단계 D)에서 수득된 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물을 건조하는 단계 E)를 또한 포함하는 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
이용되는 갈조류 배우체 세포가 조류 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida)에서 유래되는 방법.
조류 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida)에서 유래되는 갈조류 배우체의 친지성 추출물로서, 하기 연속 단계:
- 갈조류 배우체 세포의 동결건조물 분말을 재수화함으로써 단계 A)에서 이용되는 갈조류 배우체 세포의 수성 현탁액을 제조하는 단계 A₀);
- 갈조류 배우체 세포의 수성 현탁액을 에탄올과 혼합하여 배우체 세포의 수성-알코올계 현탁액을 제조하는 단계 A);
- 갈조류 배우체 세포의 중량 대 8 내지 22개 탄소수를 포함하는 지방산 트리글리세라이드의 중량의 중량비가 5% 이상 10% 이하이도록, 단계 A)에서 수득된 조류 배우체 세포의 상기 수성-알코올계 현탁액을 8 내지 18개 탄소수를 포함하는 지방산 트리글리세리드의 적어도 하나의 혼합물과 혼합하는 단계 B);
- 단계 B)에서 수득된 다중상 혼합물에 물을 첨가하는 단계 C);
- 단계 C)에서 수득된 혼합물로부터 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물을 단리하는 단계 D);
- 단계 D)에서 수득된 갈조류 배우체의 상기 친지성 추출물을 건조하는 단계 E)를 포함하는 방법에 의해 수득되는 추출물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에서 정의된 방법에 의해 수득되는 또는 제11항에서 정의된 갈조류 배우체의 친지성 추출물의 유효량 및 적어도 하나의 미용적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 미용 조성물.
제7항에 있어서,
이용되는 갈조류 배우체 세포가 조류 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida)에서 유래되는 방법.