KR102491196B1 - 헬리코박터 파일로리균 감염증 개선, 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

헬리코박터 파일로리균 감염증 개선, 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 헬리코박터 파일로리 (Helicobacter pylori) 균 감염증 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는, 비쑥 (Artemisia scoparia) 추출물을 유효성분으로 포함하는 헬리코박터 파일로리균 감염증 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

Description

헬리코박터 파일로리균 감염증 개선, 예방 또는 치료용 조성물 {Composition for Improving, Preventing or Treating Helicobacter pylori Infection}
본 발명은 헬리코박터 파일로리 (Helicobacter pylori) 균 감염증 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는, 비쑥 (Artemisia scoparia) 추출물을 유효성분으로 포함하는 헬리코박터 파일로리균 감염증 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
헬리코박터 (Helicobacter) 균은 그람음성균으로 위점막과 점액 사이에서 기생하는 세균으로서, 전 세계 위염 및 소화성 궤양 질환의 원인이 되는 균이다. 세계보건기구 (WHO)는 헬리코박터 파일로리 (Helicobacter pylori) 감염을 발암 인자로 1994년에 규정하였다. 헬리코박터균은 전 세계 인구 반 이상이 감염이 되어 있을 정도로 흔하며, 우리나라도 예외는 아니다. 전 국민의 47%, 성인에서는 대략 70%의 감염률을 보인다. 또한 십이지장궤양 환자의 90-95%, 위궤양 환자의 60-80%에서 헬리코박터균이 발견된다.
헬리코박터균 감염증 증상은 숙주의 감수성과 균주의 다양성에 따라 다르게 나타난다. 균에 감염되더라도 증상이 없는 경우가 많고, 일부의 경우에서만 소화 불량, 급성 위염, 만성 위염, 위궤양, 십이지장 궤양, 위암 등의 증상이 나타난다. 헬리코박터균 감염증은 위내시경, 혈액검사, 요소호기 검사를 통해 진단할 수 있다.
위궤양, 십이지장 궤양, 위 점막연관 림프조직 림프종, 조기위암 환자의 경우 내시경 절제술 후, 만성 특발성 혈소판 감소성 자반증 환자의 경우 반드시 치료가 필요하다. 이 외에도 위암의 직계 가족력이 있는 경우, 원인이 뚜렷하지 않은 철분 결핍성 빈혈이 있는 경우 치료가 요구된다.
일반적으로 제균 치료를 위해 아목시실린, 클라리스로마이신, 위산분비억제제를 복용하게 되는데, 치료를 받은 사람 중 약 70-80%가 제균에 성공한다. 그러나 제균에 실패하게 되는 경우가 있을 수 있고, 항생제에 대한 내성균이 발생하기도 한다. 또한, 제균 치료 시 설사, 미각이상, 피부이상 등 부작용이 나타나기도 한다. 헬리코박터균 치료 후 국내에서의 재감염율은 2-4% 정도 된다.
한편, 천연물로부터 질병을 예방 또는 억제할 수 있는 생리활성 물질에 대한 연구가 증대되고 있고, 특히 생리활성물질의 보고 알려진 해양식물의 탐색에 관한 연구 및 해조류로부터 질병을 억제하거나 개선시킬 수 있는 소재를 찾으려는 연구가 활발히 진행되고 있다.
비쑥 (Artemisia scoparia)은 국화과에 속하는 다년초로 바닷가 모래땅에서 자라는 식용 및 약용 염생식물이다. 비쑥에 관한 연구는 항산화 효능, 항염증, 항비만 효과가 있음이 과학적으로 입증되고 있으나, 헬리코박터균에 대한 비쑥 추출물의 항균 효과에 대한 연구는 알려진 바가 없는 실정이다.
본 발명자들은 헬리코박터 파일로리 (Helicobacter pylori) 균 감염증 개선, 예방 또는 치료용 조성물을 개발하고자 예의 연구 노력하였다. 그 결과, 비쑥 (Artemisia scoparia) 추출물이 헬리코박터 파일로리균 감염증에 효과가 있음을 확인하였다.
이에, 본 발명의 목적은 비쑥 추출물을 유효성분으로 포함하는 헬리코박터 파일로리균 감염증 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 비쑥 추출물을 유효성분으로 포함하는 헬리코박터 파일로리균 감염증 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 비쑥 추출물의 헬리코박터 파이로리균 감염증 개선, 예방 또는 치료 용도를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 비쑥 추추출물을 이용한 헬리코박터 파이로리균 감염증 치료 방법에 관한 것이다.
본 발명은 비쑥 (Artemisia scoparia) 추출물을 유효성분으로 포함하는 헬리코박터 파일로리 (Helicobacter pylori) 균 감염증 예방 또는 치료용 약제학적 조성물, 및 헬리코박터 파일로리균 감염증 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
이하 본 발명을 더욱 자세히 설명하고자 한다.
본 발명의 일 양태는 비쑥 추출물을 유효성분으로 포함하는 헬리코박터 파일로리균 감염증 예방 또는 치료용 약학제적 조성물에 관한 것이다.
본 명세서상 용어 “비쑥”은 국화과 (Compositae)의 쑥속 (Artemisia)에 속하는 다년초 식물로서, 바닷가 모래땅에서 자라는 다년초로서 사철쑥과 닮았으나 냄새가 다르다. 사철쑥은 줄기가 나무처럼 되어 있어 겨울철에도 죽지 않지만 비쑥은 겨울철에 줄기가 완전히 말라 죽는 것이 특징이다. 비쑥은 한방에서는 거의 쓰지 않는 희귀한 풀이다.
본 발명에 있어서 비쑥은 비쑥의 잎, 줄기, 열매, 뿌리 및 꽃으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것일 수 있으며, 예를 들어, 잎일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "추출물"은 당업계에서 조추출물 (crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로는 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다. 즉, 비쑥 추출물은 추출용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제과정을 추가적으로 적용하여 얻은 것도 포함한다. 예를 들어, 상기 추출물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 비쑥 추출물에 포함되는 것이다. 또한, 비쑥 추출물은 용액, 농축물 또는 분말 상태일 수 있다.
본 발명에 있어서 비쑥 추출물은 비쑥을 극성 용매, 비극성 용매 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 얻어진 조추출물일 수 있다.
본 발명에 있어서 극성 용매는 물, 알코올, 아세트산, 디메틸 포름아미드 (dimethyl formamide; DMFO), 디메틸 술폭시드 (dimethyl sulfoxide; DMSO) 또는 이들의 혼합물인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 알코올은 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올, 예를 들어, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 노말-프로판올, 이소-프로판올, 노말-부탄올, 1-펜탄올, 2-부톡시에탄올, 에틸렌글리콜 또는 이들의 혼합물인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 용매는 알코올 함량이 10 이상 내지 100 %(v/v) 미만, 20 이상 내지 100% (v/v) 미만, 30 이상 내지 100% (v/v) 미만, 40 이상 내지 100% (v/v) 미만, 50 이상 내지 100% (v/v) 미만, 50 이상 내지 95% (v/v) 미만, 50 이상 내지 92% (v/v) 미만, 60 이상 내지 100% (v/v) 미만, 60 이상 내지 95% (v/v) 미만, 60 이상 내지 92% (v/v) 미만, 70 이상 내지 100% (v/v) 미만, 70 이상 내지 95% (v/v) 미만, 70 이상 내지 92% (v/v) 미만, 80 이상 내지 100% (v/v) 미만, 80 이상 내지 95% (v/v) 미만, 80 이상 내지 92% 미만, 예를 들어, 90% (v/v)의 알코올 수용액인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 용매는 무수 알코올인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 분획물은 용매로 추출한 조추출물을 노멀헥산으로 용매분획하여 얻은 노멀헥산 획분, 용매로 추출한 조추출물을 노멀헥산으로 용매분획 후 남은 수용액 획분에 클로로포름으로 용매분획하여 얻은 클로로포름 획분, 용매로 추출한 조추출물을 노멀헥산으로 용매분획 후 남은 수용액 획분에 클로로포름으로 용매분획 후 남은 수용액 획분에 에틸아세테이트로 용매분획하여 얻은 에틸아세테이트 획분, 용매로 추출한 조추출물을 노멀헥산으로 용매분획 후 남은 수용액 획분에 클로로포름으로 용매분획 후 남은 수용액 획분에 에틸아세테이트로 용매분획 후 남은 수용액 획분에 수포화부탄올로 용매분획하여 얻은 수포화부탄올 획분, 및 이들의 혼합으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 분획물일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 헬리코박터 파일로리균 감염증은 위염, 위십이지장궤양, 위암, 위말트림프종, 빈혈, 자반병, 동맥경화증, 편두통, 불임, 및 만성두드러기로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 명세서상 용어 “위염”은 소화가 안되고 상복부가 불편한 상태를 총칭하며, 소화성 궤양, 좁은 의미의 위염과 같은 기질적 병변이 있는 경우뿐만 아니라 과민성대장, 비궤양성 소화불량과 같은 기능성 위장 장애도 모두 포함한다. 증상은 소화불량, 속쓰림, 신물, 복부 불쾌감의 가벼운 증상부터 극심한 복통, 구토, 두통, 발열의 중한 증상까지 다양하게 나타난다. 위염의 원인은 매우 다양한데, 과식, 청결하지 못한 조리 음식, 맵거나 자극적인 음식, 여러 약물에 의한 점막 자극도 원인이다. 특히, 급성위염은 세균, 바이러스, 헬리코박터 파일로리균에 감염되어 발생하는 경우가 많다.
본 명세서상 용어 “위십이지장궤양”은 위 또는 십이지장 점막이 마치 삽으로 땅을 팠을 때처럼 패인 것을 말하며, 이때 점막근육판을 넘어 패이면 궤양, 점막근육판을 넘지 않으면 미란이라 한다. 소화성 궤양이 발생하는 가장 중요한 원인은 크게 헬리코박터 파일로리균, 비스테로이드성 진통소염제의 복용으로 알려져 있으며, 증상은 환자마다 개인차가 심하고, 전형적인 궤양의 증상 없이 비특이적인 복부불편감이나 소화불량을 호소하거나, 심지어 전혀 증상이 없는 경우도 많이 관찰된다.
본 명세서상 용어 “위암”은 위에 생기는 모든 암을 일컫는 말이지만, 주로 위점막의 선세포(샘세포)에서 발생한 위선암(adenocarcinoma)을 말한다. 위암은 어느 한가지 요인에 의해서 발생하기 보다는 여러 요인들이 복합적으로 작용해 발생한다. 현재 알려진 바로는 헬리코박터 파일로리균, 위암 관련 질병, 식생활, 흡연, 음주, 그리고 가족력 등과 관련이 있는데, 가족력에 있어서는 유전적 요인과 환경적 요인이 동시에 작용하는 것으로 알려져 있다.
본 명세서상 용어 “위말트림프종”은 위말프 림프종은 위선암에 이어서 두 번째로 흔한 위장의 악성 종양으로,　점막 연관 림프조직(mucosa associated lymphoid tissue, MALT)의 B세포에서 유래한 저악성도 림프종이 위장에 발생한다. 인체에서는 헬리코박터 파일로리균 감염과 자가면역 상태가 위 점막에 반응성 MALT를 생성하며, 헬리코박터 파일로리균을 박멸하면 이 MALT 림프종이 소멸된다고 알려져 있다.　임상적으로 특이한 증상이 없으나, 암이 진행된 경우에는 복통, 출혈, 종괴, 체중 감소, 식욕 부진 등이 나타날 수 있다.
본 명세서상 용어 “빈혈”은　혈액이 인체 조직의 대사에 필요한 산소를 충분히 공급하지 못해 조직의　저산소증을 초래하는 경우를 말하며, 적혈구 내의 혈색소(헤모글로빈)를 기준으로 하여 빈혈을 진단한다. 최근 연구에 따르면 헬리코박터 파일로리균이 빈혈 및 녹내장 위험을 높이는 것으로 알려져 있다.
본 명세서상 용어 “자반병”은 신의 피하나 점막에 출혈이 일어나서 자색의 작은 반점[紫斑]이 생기는 병으로, 혈소판의 감소와 관계가 깊으며, 혈액응고능력이 저하되고 피부, 점막의 모세혈관에　출혈이 생긴다. 증상으로는 낮은 혈소판 수치는 부상 후 출혈 증가, 잇몸 또는 코 출혈, 소변 또는 배변 시 출혈 증가, 스꺼움, 구토, 설사, 단백뇨 등이 나타난다. 헬리코박터 파일로리균이 발병기전의 하나로 알려져 있다.
본 명세서상 용어 “동맥경화증”은 혈관에 지방이 가라앉아 들어붙어 동맥이 좁아지고 탄력성을 잃게 되는 현상을 의미한다. 주로 콜레스테롤이나 중성지방이 침착(沈着)하여 혈관의 탄력이 떨어지고, 혈전이 생기는 등 동맥이 좁아지는 현상으로 일종의 노화현상으로 볼 수 있다. 원인으로는 지질대사이상, 호르몬대사이상, 유전적 소질, 식생활 문제, 운동 부족 등으로 알려져 있으며, 증상으로는　동맥이 좁아지므로 혈액이 조직말단까지 충분히 도달하지 않아 조직이 괴사하기도 하며, 운동시 통증, 무감각, 마비 등의 다양한 증상이 나타난다. 특히, 헬리코박터 파일로리균은 염증 매개 물질을 만들어 혈액을 타고 돌아다니면서 혈관벽을 손상시켜 동맥경화증의 초기 단계인 죽상반을 만드는 것으로 알려져 있다.
본 명세서상 용어 “편두통”은 머리 혈관의 기능 이상으로 인해 발작적이며 주기적으로 나타나는 두통의 일종으로 주로 머리의 한쪽에서만 통증이 나타난다. 편두통이 발생하는 기전은 아직 명확하게 밝혀지지 않았지만, 뇌의 기능적인 변화, 신경전달물질 농도의 변화 및 삼차신경과 그 주변혈관의 염증반응을 중요한 편두통의 발병기전으로 알려져 있다. 증상은 머리에 통증이 생기고, 소화가 안되고 울렁거리기도 하며, 소리나 빛에 대해 민감해지고, 어지럼증을 많이 호소합니다. 최근 헬리코박터 파일로리균이 편두통등의 원인이 된다는 연구 결과가 있다.
본 명세서상 용어 “불임”은 피임을 시행하지 않은 부부가 정상적인 부부관계에도 불구하고 1년 이내에 임신에 도달하지 못한 경우로 정의되며, 그 원인은 남성 요인(male　factor), 난소 기능 저하(decreased　ovarian　reserve), 배란 장애(ovulatory　disorder), 난관 손상, 결찰(매듭), 또는 난관주위 유착(tubal　injury,　blockage,　or　paratubal　adhesions), 자궁경관 또는 면역학적 요인(cervical　and　immunologic　factors) 등으로 다양하다. 최근 헬리코박터 파일로리균이 불임의 원인이 된다는 연구 결과가 있다.
본 명세서상 용어 “만성두드러기”는 피부나 점막의 혈관의 투과성(물질분자의 통과나 침입을 허용하는 성질)이 증가되면서 일시적으로 혈액의 혈장 성분이 조직 내에 축적되어 피부가 붉거나 흰색으로 부풀어 오르고 심한 가려움증이 동반되는 피부질환이다. 그 정확한 원인을 찾을 수 없는 경우가 많으며, 급격하게 피부가 부어오르면서 심한 가려움증을 동반하고, 피부의 증상이 3~4시간 이내에 사라졌다가 다시 다른 자리에 생기는 경우가 많다. 미국 질병통제센터(CDC)는　헬리코박터 파일로리균에 감염되면 두드러기가 나타날 수 있다고 밝히고 있다.
본 명세서에서 용어 "치료"는 본 발명에 따른 조성물의 투여로 헬리코박터 파일로리균 감염증의 증상이 호전되거나 완치되는 모든 행위를 의미한다.
본 명세서에서 용어 "예방"은 본 발명에 따른 조성물의 투여로 헬리코박터 파일로리균 감염증의 증상을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 명세서에서 용어 "개선"은 본 발명에 따른 조성물의 투여로 헬리코박터 파일로리균 감염증의 증상이 호전되거나 완치되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 조성물에 포함된 비쑥 추출물은 천연식물재료로서 세포 독성이 없다.
본 발명의 조성물에 포함된 비쑥 추출물의 양적 상한은 당업자가 적절한 범위 내에서 선택하여 실시할 수 있다.
본 발명의 다른 양태는 비쑥 추출물을 제조하는 방법에 관한 것이다.
상기 비쑥 추출물은 비쑥의 용매 추출물을 포함하며, 상술한 바와 같다.
본 발명에 따른 비쑥 추출물의 제조 과정을 보다 상세하게 설명하면 다음과 같다: 비쑥 분말의 중량에 대하여 약 8 내지 50배 중량의 추출용매로 상온 추출한다. 추출 후 여과하여 여과액을 모은다. 추출 온도는 특별한 제한은 없지만 15 내지 110℃바람직하게는 20 내지 90℃인 것이 좋다.
추출공정은 1회 또는 수회 반복할 수 있으며, 본 발명의 한 바람직한 예에서는 1차 추출 후 다시 재추출하는 방법을 채택할 수 있는데, 이는 추출물을 대량 생산하는 경우 효과적으로 여과를 한다 하더라도 자체의 수분 함량이 높기 때문에 손실이 발생하게 되어 1차 추출만으로는 추출효율이 떨어지므로 이를 방지하기 위함이다. 또한, 각 단계별 추출효율을 검증한 결과 2차 추출에 의해 전체 추출량의 80 내지 90% 정도가 추출되는 것으로 밝혀졌다.
본 발명의 일 예에서, 추출공정을 2회 바람직하게는 8 내지 12 부피배로 환류 추출한다. 추출 후 여과하고 이전에 얻어진 반복하는 경우, 상기 얻어진 잔사에 다시 추출용매, 약 5 내지 15 부피배, 여과액과 합쳐서 감압 농축을 하여 비쑥 추출물을 제조한다. 이와 같이 2차에 걸친 추출 및 각각의 추출 후 얻어진 여과액을 혼합함으로써 추출 효율을 높일 수 있으나, 본 발명의 추출물이 추출 회수에 한정되는 것은 아니다.
상기 비쑥 추출물 제조 시에 사용되는 용매의 양이 너무 적으면 교반이 어렵게 되고 추출물의 용해도가 낮아져 추출효율이 떨어지게 되고, 지나치게 많은 경우는 다음의 정제단계에서 사용되는 용매의 사용량이 많아져 경제적이지 못하여 취급상 문제가 발생할 수 있으므로, 용매의 사용량은 상기 범위로 하는 것이 좋다.
이와 같이 얻어진 여과된 추출물은 의약품 원료로 사용하기에 적합하도록 잔존하는 저급 알코올의 함량을 조절하기 위하여 농축물 총량의 약 10 내지 30배, 바람직하게는 15 내지 25배, 보다 바람직하게는 약 20 중량배의 물로 1 내지 5회, 바람직하게는 2 내지 3회 공비 농축하고 재차 동량의 물을 가하여 균질 하게 현탁시킨 후 동결 건조하여 분말상태의 비쑥 추출물로 제조될 수 있다.
본 발명에 사용된 추출 방법은 통상적으로 사용되는 모든 방법일 수 있으며, 예컨대, 냉침, 열수추출, 초음파 추출, 또는 환류 냉각 추출법일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 약제학적 조성물은 비쑥 추출물의 약제학적 유효량 및/또는 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물로 이용될 수 있다.
본 명세서상의 용어 “약제학적 유효량”은 상술한 비쑥 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는데 충분한 양을 의미한다.
본 명세서에서 용어 “유효성분으로 포함하는”이란, 비쑥 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다.
본 발명의 약제학적 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 약제학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물은 인간을 포함하는 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여 방식은 통상적으로 사용되는 모든 방식일 수 있으며, 예컨대, 경구, 피부, 정맥, 근육, 피하 등의 경로로 투여될 수 있으며, 바람직하게는 경구로 투여될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여방식, 환자의 연령, 체중, 성별, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다.
본 발명의 조성물은 상기 혼합 추출물 이외에 약제학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 담체, 부형제 및 희석제 등의 보조제를 추가로 함유하는 것일 수 있다.
본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용할 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로스 (sucrose) 또는 락토오스 (lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다.
경구를 위한 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 연고제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제, 경피제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌 글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.
좌제의 제제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물을 인간에게 적용하는 구체예에 있어서, 본 발명의 생약 추출물 조성물은 단독으로 투여될 수 있으나, 일반적으로 투여방식과 표준 약제학적 관행 (standard phamaceutical practice)을 고려하여 선택된 약제학적 담체와 혼합되어 투여될 수 있다.
예를 들면, 본 발명의 생약 추출물 함유 조성물은 전분 또는 락토오즈를 함유하는 정제 형태로, 또는 단독 또는 부형제를 함유하는 캡슐 형태로, 또는 맛을 내거나 색을 띄게 하는 화학 약품을 함유하는 엘릭시르 또는 현탁제 형태로 경구, 구강 내 또는 혀 밑 투여될 수 있다. 이러한 액체 제제는 현탁제 (예를 들면, 메틸셀룰로오즈, 위텝솔 (witepsol)과 같은 반합성 글리세라이드 또는 행인유 (apricot kernel oil)와 PEG-6 에스테르의 혼합물 또는 PEG-8과 카프릴릭/카프릭 글리세라이드의 혼합물과 같은 글리세라이드 혼합물)와 같은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제와 함께 제형화 될 수 있다.
본 발명의 추출물 함유 조성물의 투여 용량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정 시간간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.
본 발명에 있어서 약제학적 조성물은 비쑥 추출물의 함량을 체중 1 kg 당 5 내지 500 mg/day, 5 내지 400 mg/day, 5 내지 300 mg/day, 5 내지 200 mg/day, 5 내지 100 mg/day, 10 내지 500 mg/day, 10 내지 400 mg/day, 10 내지 300 mg/day, 10 내지 200 mg/day, 10 내지 100 mg/day, 20 내지 500 mg/day, 20 내지 400 mg/day, 20 내지 300 mg/day, 20 내지 200 mg/day, 20 내지 100 mg/day, 50 내지 500 mg/day, 50 내지 400 mg/day, 50 내지 300 mg/day 또는 50 내지 200 mg/day, 예를 들어, 50 내지 100 mg/day 범위로 하여 투여되는 것일 수 있다.
본 발명의 비쑥 추출물 함유 조성물의 1일 투여량이 상기 투여 용량 미만이면 유의성 있는 효과를 얻을 수 없으며, 그 이상을 초과하는 경우 비경제적일 뿐만 아니라 상용량의 범위를 벗어나므로 바람직하지 않은 부작용이 나타날 우려가 발생할 수 있으므로, 상기 범위로 하는 것이 좋다.
본 발명의 또 다른 양태는 비쑥을 유효성분으로 포함하는 헬리코박터 파일로리균 감염증 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 있어서 비쑥은 비쑥의 잎, 줄기, 열매, 뿌리 및 꽃으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것 일 수 있으며, 예를 들어, 잎일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 비쑥 추출물은 비쑥을 극성 용매, 비극성 용매 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 얻어진 조추출물일 수 있다.
본 발명에 있어서 극성 용매는 물, 알코올, 아세트산, 디메틸 포름아미드 (dimethyl formamide; DMFO), 디메틸 술폭시드 (dimethyl sulfoxide; DMSO) 또는 이들의 혼합물인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 알코올은 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올, 예를 들어, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 노말-프로판올, 이소-프로판올, 노말-부탄올, 1-펜탄올, 2-부톡시에탄올, 에틸렌글리콜 또는 이들의 혼합물인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 용매는 알코올 함량이 10 이상 내지 100 %(v/v) 미만, 20 이상 내지 100% (v/v) 미만, 30 이상 내지 100% (v/v) 미만, 40 이상 내지 100% (v/v) 미만, 50 이상 내지 100% (v/v) 미만, 50 이상 내지 95% (v/v) 미만, 50 이상 내지 92% (v/v) 미만, 60 이상 내지 100% (v/v) 미만, 60 이상 내지 95% (v/v) 미만, 60 이상 내지 92% (v/v) 미만, 70 이상 내지 100% (v/v) 미만, 70 이상 내지 95% (v/v) 미만, 70 이상 내지 92% (v/v) 미만, 80 이상 내지 100% (v/v) 미만, 80 이상 내지 95% (v/v) 미만, 80 이상 내지 92% 미만, 예를 들어, 90% (v/v)의 알코올 수용액인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 용매는 무수 알코올인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 용매는 에탄올, 부탄올, 에틸에테르 및 아세트산에틸로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 분획물은 용매로 추출한 조추출물을 노멀헥산으로 용매분획하여 얻은 노멀헥산 획분, 용매로 추출한 조추출물을 노멀헥산으로 용매분획 후 남은 수용액 획분에 클로로포름으로 용매분획하여 얻은 클로로포름 획분, 용매로 추출한 조추출물을 노멀헥산으로 용매분획 후 남은 수용액 획분에 클로로포름으로 용매분획 후 남은 수용액 획분에 에틸아세테이트로 용매분획하여 얻은 에틸아세테이트 획분, 용매로 추출한 조추출물을 노멀헥산으로 용매분획 후 남은 수용액 획분에 클로로포름으로 용매분획 후 남은 수용액 획분에 에틸아세테이트로 용매분획 후 남은 수용액 획분에 수포화부탄올로 용매분획하여 얻은 수포화부탄올 획분, 및 이들의 혼합으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 분획물일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.본 발명에 있어서 헬리코박터 파일로리균 감염증은 위염, 위십이지장궤양, 위암, 위말트림프종, 빈혈, 자반병, 동맥경화증, 편두통, 불임, 및 만성두드러기로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 식품조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시에 본 발명의 식품조성물은 원료에 대하여 15 중량% 이하, 바람직하게는 10 중량% 이하의 양으로 첨가될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다.
상기 음료는 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 당업자의 선택에 의해 적절하게 결정될 수 있다.
상기 외에 본 발명의 식품조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 식품조성물은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율 또한 당업자에 의해 적절히 선택될 수 있다.
상기 식품 조성물에 있어서, 상기 약제학적 조성물과 중복되는 내용은 본 명세서의 복잡성을 고려하여 생략한다.
본 발명은 헬리코박터 파일로리 (Helicobacter pylori) 균 감염증 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는, 비쑥 (Artemisia scoparia) 추출물을 유효성분으로 포함하는 헬리코박터 파일로리균 감염증 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
도 1a는 비쑥 열수 추출물의 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 OD값으로 나타낸 그래프이다.
도 1b는 비쑥 에탄올 수용액 추출물의 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 OD값으로 나타낸 그래프이다.
도 2a는 비쑥 에탄올 수용액 추출물의 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 OD값으로 나타낸 그래프이다.
도 2b는 비쑥 에탄올 수용액 추출물의 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 CFU값으로 나타낸 그래프이다.
도 3a는 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 분획한 노멀헥산 획분에서 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 OD값으로 나타낸 그래프이다.
도 3b는 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 분획한 클로로포름 획분에서 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 OD값으로 나타낸 그래프이다.
도 3c는 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 분획한 에틸아세테이트 획분에서 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 OD값으로 나타낸 그래프이다.
도 3d는 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 분획한 수포화부탄올 획분에서 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 OD값으로 나타낸 그래프이다.
도 3e는 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 용매분획 후 남은 수용액 획분에서 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 OD값으로 나타낸 그래프이다.
도 4a는 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 분획한 노멀헥산 획분에서 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 OD값으로 나타낸 그래프이다.
도 4b는 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 분획한 클로로포름 획분에서 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 OD값으로 나타낸 그래프이다.
도 4c는 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 분획한 에틸아세테이트 획분에서 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 OD값으로 나타낸 그래프이다.
도 5a는 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 분획한 노멀헥산 획분에서 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 CFU값으로 나타낸 그래프이다.
도 5b는 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 분획한 클로로포름 획분에서 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 CFU값으로 나타낸 그래프이다.
도 5c는 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 분획한 에틸아세테이트 획분에서 헬리코박터 파일로리 배양 시 균의 성장 억제 효과를 CFU값으로 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.
본 명세서 전체에 걸쳐, 특정 물질의 농도를 나타내기 위하여 사용되는 “%”는 별도의 언급이 없는 경우, 고체/고체는 (중량/중량) %, 고체/액체는 (중량/부피) %, 및 액체/액체는 (부피/부피) %이다.
제조예 1. 비쑥 열수 추출물의 제조
비쑥 지상부는 2020년 6월에 전라남도 신안군 증도면에서 채취하여 음건한 다음 분쇄기로 분쇄하여 비쑥 분말을 제조하였다. 비쑥 지상부 분말 200 g에 90℃의 열수 2 L를 가하여 홈모게나이저로 분쇄한 다음 15분 동안 90℃을 유지하면서 열수 추출하였으며, 이후 부직포로 여과하여 열수 추출여액을 얻었다. 또한 잔사에 90℃이상의 열수 1 L를 가하여 동일 방법으로 재차 추출 및 여과하였다. 2회에 걸쳐 얻어진 비쑥 열수 추출여액은 아스피레이터가 장착된 진공농축기 (A-3S, Eyela, Tokyo, Japan)를 사용하여 45℃에서 감압 농축하여 비쑥 열수 추출물을 제조하였다.
제조예 2. 비쑥 에탄올 수용액 추출물의 제조
비쑥 지상부는 2020년 6월에 전라남도 신안군 증도면에서 채취하여 음건한 다음 분쇄기로 분쇄하여 비쑥 분말을 제조하였다. 비쑥 지상부 분말 140 g를 95% (V/V)의 에탄올 2.2 L를 가하여 호모게나이저로 분쇄한 다음 상온에서 24시간 동안 추출하였으며, 여과지 (No. 2, Whatman)로 여과를 행하여 에탄올 수용액 추출여액을 얻었다. 또한 잔사에 에탄올 1 L를 가하여 상기와 동일 방법으로 재차 추출 및 여과하였다. 얻어진 에탄올 수용액 추출 여액은 아스피레이터가 장착된 진공농축기 (A-3S, Eyela, Tokyo, Japan)를 사용하여 45℃에서 감압 농축하여 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 제조하였다.
제조예 3. 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 이용한 용매분획물 제조
제조예 2에서 얻어진 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 2차 증류수 (1.2 L)로 현탁시킨 다음 노멀헥산 (1.2 L)으로 3회 반복 용매분획하여 노멀헥산 획분을 얻은 다음, 수용액 획분에 클로로포름 (CHCl3, 1.2 L)으로 3회 반복 용매분획하여 클로로포름 획분을 얻었다. 이어 상기 수용액 획분에 에틸아세테이트 (EtOAc, 1.2 L)로 3회 반복 용매분획하여 에틸아세테이트 획분을 얻고, 수용액 획분에 수포화부탄올 (BuOH, 0.9 L)로 3회 반복 용매분획하여 수포화부탄올 획분 및 수용액 획분을 얻었다. 얻어진 각 획분을 진공농축기를 이용하여 45℃에서 감압 농축하여 노멀헥산 분획물, 클로로포름 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 및 수포화부탄올 분획물을 제조하였다.
실험예 1. 비쑥 열수 또는 에탄올 수용액 추출물의 헬리코박터 파일로리 성장 억제에 대한 평가
헬리코박터 파일로리 P1WT 스트레인 (strain)을 1x106CFU/ml의 농도로 6 웰 플레이트 (well plate)에 2ml/well씩 분주하고 비쑥 열수 또는 에탄올 수용액 추출물을 0, 12.5, 25, 50 또는 100 μg/ml의 농도로 처리한 후 24 시간 또는 48 시간 동안 37°C, 5% CO 2 조건에서 배양시켰다. 배양전, 배양 후 24 시간 또는 48 시간 후의 OD값을 측정하여 헬리코박터 파일로리 성장 억제 효과를 확인하였다.
비쑥 열수 또는 에탄올 수용액 추출물을 0, 12.5, 25, 50 또는 100 μg/ml 처리한 각 실험군의 헬리코박터 파일로리 배양시 균의 성장 억제 효과 (OD)를 아래와 같이 분류하여 표 1에 표기하고, 그 결과를 도 1a 및 1b에 나타냈다.
열수 추출물 에탄올 수용액 추출물
24시간 48시간 24시간 48시간
0 (μg/ml) 0.114 (O.D, 600nm) 0.564 0.160 0.554
12.5 0.109 0.560 0.097 0.554
25 0.109 0.602 0.088 0.555
50 0.111 0.560 0.075 0.517
100 0.097 0.563 0.050 0.303
표 1에서 확인할 수 있듯이, 세균의 생장률을 확인하기 위하여 OD 600nm로 생장률을 측정한 결과, 처리 후 24시간이 경과시에는 각 시료 처리에 따른 유의적인 차이는 없었다. 그러나 48시간이 경과된 후에는 에탄올 수용액 추출물 100 μg/ml를 처리한 실험군이 0.303의 OD 값을 가져, 에탄올 수용액 추출물이 100 μg/ml이상의 농도에서 헬리코박터 파일로리 성장을 효과적으로 억제한 것을 확인하였다.
실험예 2. 비쑥 에탄올 수용액 추출물의 헬리코박터 파일로리 성장 억제에 대한 평가
헬리코박터 파일로리 P1WT 스트레인을 1x106CFU/ml의 농도로 6 웰 플레이트에 2ml/well씩 분주한 후 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 0, 50, 100, 또는 200 μg/ml의 농도로 처리한 후 24 시간 또는 48 시간 동안 37°C, 5% CO2 조건에서 배양시켰다. 배양전, 배양 후 24 시간 또는 48 시간 후의 OD 값을 측정하여 헬리코박터 파일로리 성장 억제를 확인하였다.
또한 배양전, 배양 후 24 시간 또는 48 시간 후의 CFU 값을 확인하고자 헬리코박터 선택배지인 브루셀라 고체배지 (Brucella agar)에 도말하여 CFU 값을 측정함으로써 헬리코박터 파일로리 성장 억제를 확인하였다.
비쑥 에탄올 수용액 추출물을 0, 50, 100 또는 200μg/ml 처리한 각 실험군의 헬리코박터 파일로리 배양시 세균의 생장률을 확인하기 위하여 흡광도를 측정하고 집락형성단위 (Colony-forming Unit; CFU)를 확인하였으며, 그 결과를 도 2a (OD), 2b (CFU) 및 표 2에 나타냈다.
O.D (600nm) CFU/ml
24시간 48시간 24시간 48시간
0 (μg/ml) 0.130 O.D (600nm) 0.481 O.D (600nm) 7392000 (CFU/ml) 7800000 (CFU/ml)
50 0.082 0.540 5405000 8400000
100 0.048 0.157 12740 4312000
200 0.047 0.050 0 0
표 2에서 확인할 수 있듯이, 에탄올 수용액 추출물을 처리한 후 24시간 경과시에는 50μg/ml를 처리한 실험군보다 100μg/ml 또는 200μg/ml를 처리한 실험군에서 낮은 OD값이 측정되었으나, 100μg/ml를 처리한 실험군과 200μg/ml를 처리한 실험군의 차이는 없었다. 그러나 48시간 경과시에는 200μg/ml를 처리한 실험군에서 100μg/ml를 처리한 실험군보다 낮은 OD값이 측정되었다.
CFU값을 측정한 결과, 24시간 경과시에는 100μg/ml 이상을 처리한 실험군에서 CFU값이 현저하게 감소한 것을 확인할 수 있었고, 100μg/ml를 처리한 실험군은 48시간을 경과시 CFU값이 증가한 것을 알 수 있었다. 200μg/ml를 처리한 실험군에서는 CFU값이 0으로 측정되어 헬리코박터 파일로리 균이 생존할 수 없음이 확인되었다.
실험예 3. 비쑥 에탄올 수용액 추출물 분획시료의 헬리코박터 파일로리 성장 억제에 대한 평가
비쑥 에탄올 수용액 추출물을 수포화부탄올, 클로로포름, 에틸아세테이트, 수용액, 또는 노멀헥산층으로 분획하여 헬리코박터 파일로리 성장 억제를 확인하고자 하였다. 헬리코박터 파일로리 P1WT 스트레인을 1x106CFU/ml의 농도로 6 웰 플레이트에 2ml/well씩 분주한 후 비쑥 에탄올 수용액 추출물 분획시료 0, 12.5, 25, 50 또는 100 μg/ml의 농도로 처리한 후 24 시간 또는 48 시간 동안 37°C, 5% CO2 조건에서 배양시켰다. 배양전, 배양 후 24 시간 또는 48 시간 후의 OD 값을 측정함으로써 헬리코박터 파일로리 성장 억제를 확인하였다. 또한 배양전, 배양 후 24 시간 또는 48 시간 후의 헬리코박터 파일로리 성장 억제를 확인하고자 헬리코박터 선택배지인 브루셀라 고체배지에 도말하여 CFU 값을 측정하였다.
비쑥 에탄올 수용액 추출물을 분획한 노멀헥산 획분, 클로로포름 획분, 에틸아세테이트 획분, 수포화부탄올 획분 또는 용매분획 후 남은 수용액 획분을 0, 12.5, 25, 50 또는 100μg/ml 처리한 각 실험군의 헬리코박터 파일로리 배양시 균의 성장 억제 효과(O.D, 600nm)를 측정한 실험결과를 아래와 같이 분류하여 표 3에 표기하고, 그 결과를 도 3a 내지 3e에 나타냈다.
노멀헥산 클로로포름 에틸아세테이트
24시간 48시간 24시간 48시간 24시간 24시간
0 (μg/ml) 0.070
O.D (600nm)		 0.524 0.077 0.597 0.082 0.054
12.5 0.043 0.044 0.043 0.044 0.045 0.046
25 0.046 0.047 0.044 0.045 0.047 0.049
50 0.050 0.054 0.050 0.049 0.048 0.050
100 0.055 0.057 0.062 0.061 0.056 0.059
수포화부탄올 수용액
24시간 48시간 24시간 48시간
0 (μg/ml) 0.086 0.609 0.074 0.511
12.5 0.065 0.588 0.073 0.498
25 0.057 0.593 0.075 0.481
50 0.048 0.326 0.075 0.540
100 0.049 0.050 0.073 0.513
표 3에서 확인할 수 있듯이, 12.5, 25, 50 또는 100 μg/ml농도에서의 수포화부탄올 획분 또는 수용액 획분에서는 시료를 처리하지 않은 대조군과 비슷한 OD값이 측정되었다. 그러나 12.5, 25, 50 또는 100 μg/ml농도에서의 노멀헥산 획분, 클로로포름 획분 또는 에틸아세테이트 획분에서는 OD값이 시료를 처리하지 않은 대조군 대비 낮은 OD값이 측정되었다.
더 정밀한 실험결과를 위하여, 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 분획한 노멀헥산 획분, 클로로포름 획분 또는 에틸아세테이트 획분을 2.5, 5 또는 10 μg/ml의 노멀헥산 획분, 클로로포름 획분 또는 에틸아세테이트 획분을 처리한 각 실험군에서 헬리코박터 파일로리 배양시 균의 성장 억제 효과 (OD)를 측정하고 아래와 같이 분류하여 표 4에 표기하고, 그 결과를 도 4a 내지 4c에 나타냈다.
노멀헥산 클로로포름 에틸아세테이트
24시간 48시간 24시간 48시간 24시간 24시간
0 (μg/ml) 0.144
O.D (600nm)		 0.574 0.144 0.574 0.144 0.574
2.5 0.092 0.605 0.094 0.634 0.123 0.591
5 0.063 0.600 0.052 0.586 0.103 0.621
10 0.045 0.049 0.044 0.047 0.067 0.592
표 4에서 확인할 수 있듯이, 에틸아세테이트 획분에서는 10μg/ml이상 처리시부터 헬리코박터 파일로리 균의 성장 억제 효과가 나타났고, 노멀헥산 획분 및 클로로포름 획분에서는 5μg/ml이상 처리시부터 헬리코박터 파일로리 균의 성장 억제 효과가 나타났음을 확인할 수 있었다.
더욱 정밀한 실험결과를 위하여, 비쑥 에탄올 수용액 추출물을 분획한 노멀헥산 획분, 클로로포름 획분 또는 에틸아세테이트 획분을 2.5, 5 또는 10 μg/ml을 처리한 각 실험군에서 헬리코박터 파일로리 배양시 세균의 생장률을 확인하기 위한 집락형성단위 (Colony-forming Unit; CFU)를 측정하였으며, 그 결과를 아래와 같이 분류하여 표 5에 표기하고, 그 결과를 도 5a 내지 5c에 나타냈다.
노멀헥산 클로로포름 에틸아세테이트
24시간 48시간 24시간 48시간 24시간 24시간
0 (μg/ml) 281000
(CFU/ml)		 2700000 281000 2700000 281000 2700000
2.5 95200 484000 73200 129000 422000 401000
5 1300 278000 12300 251000 224000 276000
10 0 0 300 0 200000 160000
표 5에서 확인할 수 있듯이, 노멀헥산 획분에 대해서는 24시간 경과 시 5 μg/ml이상을 처리한 실험군에서 CFU값이 유의적으로 감소했고, 클로로포름에 대해서는 24시간 경과 시 10 μg/ml이상을 처리한 실험군에서 CFU값이 유의적으로 감소했으며, 에틸아세테이트 획분에 대해서는 10 μg/ml를 처리한 실험군에서도 CFU값이 크게 감소하지 않았다.
결과적으로, 비쑥 에탄올 수용액 추출물의 노멀헥산 획분 또는 클로로포름 획분에서 헬리코박터 파일로리 배양시 균의 성장 억제 효과가 가장 뛰어난 것으로 확인되었다.

Claims (10)

  1. 비쑥 (Artemisia scoparia)을 에탄올로 추출한 조추출물을 노멀헥산, 클로로포름 및 에틸아세테이트로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매로 분획한, 노멀헥산 분획물, 클로로포름 분획물 및 에틸아세테이트 분획물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 분획물을 포함하는, 헬리코박터 파일로리 (Helicobacter pylori) 균 감염증 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서, 상기 비쑥은 비쑥의 잎, 줄기, 열매, 뿌리 및 꽃으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 헬리코박터 파일로리균 감염증 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 헬리코박터 파일로리균 감염증은 위염, 위십이지장궤양, 위암, 위말트림프종, 빈혈, 자반병, 동맥경화증, 편두통, 불임 및 만성두드러기로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 헬리코박터 파일로리균 감염증 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
  6. 비쑥 (Artemisia scoparia)을 에탄올로 추출한 조추출물을 노멀헥산, 클로로포름 및 에틸아세테이트로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매로 분획한, 노멀헥산 분획물, 클로로포름 분획물 및 에틸아세테이트 분획물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 분획물을 포함하는, 헬리코박터 파일로리 (Helicobacter pylori) 균 감염증 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  7. 삭제
  8. 삭제
  9. 제6항에 있어서, 상기 비쑥은 비쑥의 잎, 줄기, 열매, 뿌리 및 꽃으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 헬리코박터 파일로리균 감염증 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  10. 제6항에 있어서, 상기 헬리코박터 파일로리균 감염증은 위염, 위십이지장궤양, 위암, 위말트림프종, 빈혈, 자반병, 동맥경화증, 편두통, 불임 및 만성두드러기로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것인, 헬리코박터 파일로리균 감염증 예방 또는 개선용 식품 조성물.
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