KR102459512B1 - Method for preparing complex extracts of neungi, chrysanthemum, and magnolia using Cyclodextrin Glucanotransferas and cosmetic composition containing the same - Google Patents

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Abstract

본 발명은 CGTase(Cyclodextrin Glucanotransferase)를 이용한 능이, 국화 및 목련 복합추출물의 유효성분을 함유하는 항산화, 피부미백 및 보습 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이며, CGTase(Cyclodextrin Glucanotransferase)를 이용한 능이, 국화 및 목련 복합추출물의 유효성분으로 화장료 총중량에 대하여 0.01 내지 20.0중량% 함유한다.
본 발명의 항산화, 피부미백 및 보습 화장료 조성물은 피부에 안전하면서도 효소에 의한 능이, 국화 및 목련의 복합성분에 의한 상승작용으로 우수한 멜라닌생성 억제, 및 항산화 활성을 나타내므로 피부 미백, 주름개선과 탄력증진 및 보습력에 따른 효과가 우수하다.
The present invention relates to an antioxidant, skin whitening and moisturizing cosmetic composition containing active ingredients of a complex extract of Neungyi, chrysanthemum and magnolia using CGTase (Cyclodextrin Glucanotransferase) and a method for manufacturing the same, and Neungyi, Chrysanthemum and As an active ingredient of the magnolia complex extract, it contains 0.01 to 20.0% by weight based on the total weight of the cosmetic.
The antioxidant, skin whitening and moisturizing cosmetic composition of the present invention is safe for the skin and exhibits excellent melanin production inhibition and antioxidant activity due to enzymatic activity, synergistic action by complex components of chrysanthemum and magnolia, and thus skin whitening, wrinkle improvement and elasticity The effect is excellent according to the enhancement and moisturizing power.

Description

싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제를 이용한 능이, 국화, 목련 복합 추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물{Method for preparing complex extracts of neungi, chrysanthemum, and magnolia using Cyclodextrin Glucanotransferas and cosmetic composition containing the same}Method for preparing complex extracts of neungi, chrysanthemum, and magnolia using Cyclodextrin Glucanotransferas and cosmetic composition containing the same

본 발명은 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제(CGTase)를 이용한 능이, 국화 및 목련의 복합추출물 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 항산화, 피부미백 및 보습 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing a complex extract of Neungyi, chrysanthemum and magnolia using cyclodextrin glucanotransferase (CGTase), and an antioxidant, skin whitening and moisturizing cosmetic composition containing the same as an active ingredient.

최근 산업이 급속도로 발전하고 소득 수준이 향상되면서 외모의 아름다움 등의 유지와 함께 피부노화의 방지 내지 개선을 위한 관심이 높아지고 있으며, 이러한 이유로 바이오벤처 및 화장품, 생명공학 업계에서는 피부노화를 억제하기 위하여 천연소재의 고기능성을 활용하는 연구 개발이 활발하게 이루어지고 있다.Recently, as the industry develops rapidly and the income level improves, interest in preventing or improving skin aging along with maintaining the beauty of appearance is increasing. Research and development utilizing the high functionality of natural materials is being actively carried out.

피부노화 현상의 지연 내지 개선을 위해서는 콜라겐합성 촉진 또는 세포재생 기능을 부여하거나 활성산소를 제거할 수 있는 항산화제의 사용이 필요하며, 대표적인 항산화제로서는 수퍼옥사이드디스뮤타제(SOD) 라는 효소와 비타민 C, 비타민 E(토코페롤), 플라보노이드 등이 있고 또한 콜라겐합성 촉진물질로는 비타민C, 비타민 A(retinoic acid), 피부성장인자(EGF) 등이 있지만, 이러한 항산화제들은 불안정하기 때문에 장기간의 유통기간을 갖는 화장품에 적용이 쉽지 않고, 과량 사용 시 피부에 부작용을 일으킬 수 있는 문제점이 있으며, 상기한 문제점을 개선하기 위하여 여러 종류의 천연물질을 유효성분으로 한 화장용 조성물이 개발되고 있으나, 대부분의 경우에 항산화작용, 안정성 등의 효과가 미흡한 것으로 알려져 있다.In order to delay or improve skin aging, it is necessary to use an antioxidant that can promote collagen synthesis or give cell regeneration functions or remove free radicals. Representative antioxidants include enzymes called superoxide dismutase (SOD) and vitamins There are C, vitamin E (tocopherol), flavonoids, etc., and collagen synthesis promoting substances include vitamin C, vitamin A (retinoic acid), and skin growth factor (EGF). It is not easy to apply to cosmetics with In some cases, it is known that the effects such as antioxidant action and stability are insufficient.

화장품을 이용한 피부의 노화 지연을 위한 노력에 있어서 화장품 성분의 안정화 기술은 그 기능을 극대화 시키는데 있어서 중요하며, 마이크로캡슐화, 리포좀, 액정공법 등에 의해 화장료 유효성분의 안정성을 개선하고 있다.In the effort to delay skin aging using cosmetics, the stabilization technology of cosmetic ingredients is important in maximizing its function, and the stability of cosmetic active ingredients is improved by microencapsulation, liposome, liquid crystal method, etc.

한편, 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제는 환상의 사이클로덱스트린을 생성하는 효소이며, 환상의 사이클로덱스트린(cyclodextrin)은 그 구조적 특성을 이용하여 분자내 소수성 부위에 각종 소수성 화합물을 포접시켜 포접 복합체를 형성시켜 포접된 물질의 용해성 및 안정성 증진, 서방형(徐放型) 성질을 향상시켜 생체 이용률을 증가시키는 연구가 다양하게 진행되고 있다.On the other hand, cyclodextrin glucanotransferase is an enzyme that produces a cyclic cyclodextrin, and the cyclic cyclodextrin uses its structural properties to enclose various hydrophobic compounds in the hydrophobic site in the molecule to form an inclusion complex. Various studies are being conducted to increase the bioavailability by improving the solubility and stability of the encapsulated material and improving the sustained-release properties.

효소를 이용한 화장품 조성물의 제조방법과 관련한 선행기술로 예를 들면, 특허문헌1에 단백질 분해효소인 아라자임 0.01 내지 10중량%, 천연 한방식물 추출물 20 내지 30중량%, 양성계면활성제 5 내지 15중량% 및 정제수 20 내지 55중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 두발용 화장품 조성물을 개시하고 있으며, 특허문헌2에 백부자, 백지, 영릉향, 향부자, 백복령 및 감송향의 혼합생약재를 용매 추출하여 혼합생약재 조추출물을 제조한 다음, 상기 혼합생약재 조추출물을 탄수화물 가수분해효소와 펙틴 가수분해효소로 처리하여 얻는 것을 특징으로 하는 피부 주름개선용 혼합생약재 추출물을 개시하고 있다.As a prior art related to a method for manufacturing a cosmetic composition using an enzyme, for example, in Patent Document 1, 0.01 to 10% by weight of arazyme, a proteolytic enzyme, 20 to 30% by weight of a natural herbal extract, 5 to 15% by weight of amphoteric surfactant % and 20 to 55% by weight of purified water is disclosed, and in Patent Document 2, mixed herbal medicines of Baekbuja, Baekji, Youngneunghyang, Hyangbuja, Baekbokryeong and Gamsonghyang are solvent-extracted and mixed herbal medicine. Disclosed is a mixed herbal medicine extract for skin wrinkle improvement, which is obtained by preparing a crude extract and then treating the crude extract with a carbohydrate hydrolase and a pectin hydrolase.

또 특허문헌3에는 당가수분해 효소 처리 홍삼 및 천마 추출물을 유효성분으로 포함하되, 상기 효소 처리 홍삼 추출물은 홍삼 물 추출물을 셀룰라아제 효소로 당가수분해한 홍삼 추출물이고, 상기 효소처리 천마 추출물은 천마 에탄올 추출물을 수용성 전분과 CGTase(Cyclodextrin glycosyltransferase)효소를 이용하여 말토올리고실글루코시드(maltooligosylglucoside)로 변환한 후, 글루코아밀라아제 효소를 이용하여 당가수분해된 천마 추출물이며, 상기 홍삼 및 천마 추출물은 1 : 9 내지 11의 중량비로 혼합된 것을 특징으로 하는 피부 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 개시하고 있다.In addition, Patent Document 3 includes a sugar hydrolytic enzyme-treated red ginseng and Chunma extract as active ingredients, wherein the enzyme-treated red ginseng extract is a red ginseng extract obtained by glycolysis of a red ginseng water extract with a cellulase enzyme, and the enzyme-treated Chunma extract is Chunma ethanol After converting the extract into maltooligosylglucoside using water-soluble starch and CGTase (Cyclodextrin glycosyltransferase) enzyme, it is a chonma extract that is hydrolyzed by sugar using a glucoamylase enzyme, and the red ginseng and cheonma extracts are 1: 9 Disclosed is a cosmetic composition for preventing or improving skin wrinkles, characterized in that it is mixed in a weight ratio of 11 to 11.

본 발명의 발명자는 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제(CGTase)를 이용하여 능이, 국화 및 목련의 생리활성물질의 생성을 향상시키면서 안정성이 높은 항산화, 피부미백 및 보습 효과가 우수한 화장품을 개발하고 본 발명을 완성하게 되었다.The inventor of the present invention uses cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) to improve the production of physiologically active substances of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia while developing a cosmetic with high stability and excellent antioxidant, skin whitening and moisturizing effects, and the present invention was completed.

KRUS 10-082837910-0828379 B1B1 KRUS 10-114254110-1142541 B1B1 KRUS 10-213915610-2139156 B1B1

본 발명에서 해결하고자 하는 과제는 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제를 이용한 능이, 국화 및 목련의 복합추출물 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 항산화, 피부미백 및 보습 화장료 조성물의 제공에 관한 것이다.The problem to be solved in the present invention relates to a method for producing a complex extract of Neungyi, chrysanthemum and magnolia using cyclodextrin glucanotransferase, and to providing an antioxidant, skin whitening and moisturizing cosmetic composition containing the same as an active ingredient.

보다 구체적으로는 능이, 국화 및 목련 복합추출물에 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제(Cyclodextrin glycosyltransferase; CGTase)를 첨가하여 유효성분인 복합추출물을 고농도로 함유시키면서 안정성을 향상시킨 항산화, 피부미백 및 보습 화장료 조성물의 제공을 목적으로 하는 것이다.More specifically, by adding Cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase) to the complex extract of Neungyi, Chrysanthemum, and Magnolia, the active ingredient, the complex extract, is contained at a high concentration while improving the stability of the antioxidant, skin whitening and moisturizing cosmetic composition is intended to provide

본 발명에서 과제의 해결수단으로 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제(CGTase)를 이용한 능이, 국화, 목련 복합 추출물의 제조방법은 능이, 국화, 및 목련의 복합 추출물을 얻는 공정 및 상기 복합 추출물에 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제를 첨가하여 유효성분인 능이, 국화, 및 목련의 복합 추출물을 포접시켜 복합추출물이 포접된 포접물을 제조하는 공정을 포함하는 것으로 이루어진다.As a means of solving the problems in the present invention, the method for producing a complex extract of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia using cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) is a process of obtaining a complex extract of Neungi, Chrysanthemum, and Magnolia, and cyclodextrin in the complex extract By adding glucanotransferase to inclusion complex extracts of neungyi, chrysanthemum, and magnolia, which are active ingredients, it comprises a step of preparing a clathrate in which the complex extract is included.

상기한 능이는 향이 매우 진해서 향이(향버섯)라고도 부르고 있으며, 본래 이름은 웅이(熊茸)이고 방언으로는 능이(能耳)라고 한다고 19세기 중엽의 문헌인 이규경(李圭景)의 『오주연문장전산고(五洲衍文長箋散稿)』에 기록되어 있으며 피부노화를 늦춰주며, 혈액을 맑게 해주는 효능이 있다. 능(能)도 곰이라는 뜻이 있으므로 결국 우리말로 곰버섯이었던 버섯이 한자식으로 웅이 또는 능이로 불리다가 능이로 정착된 것으로 보인다.The above-mentioned Neungi has a very strong scent, so it is also called Hyanghyang (incense mushroom). Its original name is Ungi (熊茸), and in dialect it is called Neungi (能耳). It is recorded in the Go (五洲衍文長箋散稿), and it has the effect of slowing down skin aging and purifying the blood. Neung (能) also means bear, so it seems that the mushroom, which was a bear mushroom in Korean, was called ungi or neungi in Chinese, and then settled as neungi.

국화에는 인체에 유용한 성분인 쿠산테논과 같은 정유와 아데닌, 프린, 베아틴, 황색색소인 크리사세민 등이 많이 함유되어 있어 해열, 해독, 감기로 인한 두통, 현기증, 귀울음, 눈의 충혈, 종기 등을 해소하는 효과가 있어 주로 한방 약재나 차로 많이 애용되어 오고 있다.Chrysanthemum contains a lot of essential oils such as cusanthenone, adenine, prine, beatin, and chrysacemin, a yellow pigment, which are useful for the human body. It has the effect of relieving the back, and has been frequently used as a herbal medicine or tea.

목련은 우리나라를 비롯하여 일본 등지에 서식하는 낙엽활엽교목으로 주로 정원수로 사용되고 목련에 대한 추출성분으로는 α-pinene, β-pinene, cineol, limonene 등이 있으며, 성분 중에는 신미성인 것, 방향성인 것, 진통작용을 갖는 것 등 그 작용이 다양하며, 현재까지 알려진 약리작용은 혈압을 낮추어 주는 성분이 있고 휘발성 성분 중에는 국소수렴의 효과도 있는 것으로 알려져 있다.Magnolia is a deciduous broad-leaved arboreous tree that lives in Korea and Japan, and is mainly used as a garden tree. Its action is diverse, such as having an analgesic action, and the pharmacological action known to date is a component that lowers blood pressure, and among the volatile components, it is known that there is a local astringent effect.

본 발명에 따른 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제(CGTase)를 이용한 능이, 국화, 목련 복합 추출물의 제조방법의 일 실시형태는 a). 능이, 국화 및 목련을 정제수 또는 온천수로 가온 추출하여 능이, 국화 및 목련의 복합추출물을 얻는 제1공정, b). 상기 제1공정의 복합추출물에 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제을 함유하는 덱스트린을 첨가하여 상기 복합추출물을 포접시켜 능이, 국화, 목련의 복합추출물이 포접된 사이클로 덱스트린을 제조하는 제2공정을 포함하는 것으로 이루어진다.One embodiment of a method for producing a complex extract of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia using cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) according to the present invention is a). The first step of obtaining a complex extract of Neungi, chrysanthemum and magnolia by warming and extracting neungi, chrysanthemum and magnolia with purified water or hot spring water, b). A second step of manufacturing cyclodextrin in which the complex extract of Neungyi, Chrysanthemum, and Magnolia is encapsulated by adding dextrin containing cyclodextrin glucanotransferase to the complex extract of the first step to include the complex extract. is done

본 발명에 따른 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제(CGTase)를 이용한 능이, 국화, 목련 복합 추출물의 제조방법의 또 다른 실시형태는 a) 능이 1 ~ 10중량부, 국화 1 ~ 10중량부 및 목련 1 ~ 10중량부를 온천수로 가온 추출하여 능이, 국화 및 목련의 복합추출물을 얻는 제1공정, b) 상기 제1공정의 복합추출물 100중량부에 대하여 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제 0.01 ~ 1.0W/V% 농도로 함유하는 덱스트린 1.0 ~ 5.0중량부를 첨가하여 상기 제1 공정의 복합추출물을 포접시켜 능이, 국화 및 목련의 복합추출물이 포접된 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 제조하는 제2공정을 포함하는 것으로 이루어진다.Another embodiment of the method for producing a complex extract of Neungyi, chrysanthemum and magnolia using cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) according to the present invention is a) 1 to 10 parts by weight of Neungyi, 1 to 10 parts by weight of chrysanthemum, and 1 part by weight of magnolia 1st step of obtaining a complex extract of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia by warming and extracting ~10 parts by weight with hot spring water, b) Cyclodextrin glucanotransferase 0.01 ~ 1.0W/V with respect to 100 parts by weight of the complex extract of the first step % concentration of dextrin containing 1.0 to 5.0 parts by weight to include the complex extract of the first step to produce a cyclodextrin containing the complex extracts of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia .

상기 본 발명의 온천수는 대전광역시 유성구에서 관리하는 유성온천의 온천수가 바람직하며, 유성온천의 온천수 수질은 수온 31 ~ 35℃, pH 7.95의 약알칼리성으로 수질유형은 Na-HCO3 형이며, 대장균 등 오염물에 노출되지 않은 것으로 조사되고 있으며 대한온천학회 자료에 따르면 우리나라 온천성분을 평균이상으로 함유하고 있어 온천수화장품을 연구개발하기에 최적의 상태라고 발표하고 있다.The hot spring water of the present invention is preferably the hot spring water of Yuseong hot spring managed by Yuseong-gu, Daejeon, and the quality of the hot spring water is slightly alkaline with a water temperature of 31 to 35 ℃, pH 7.95, and the water quality type is Na-HCO 3 type, E. coli, etc. It is being investigated as not being exposed to pollutants, and according to the data of the Korean Onsen Association, it contains more than average Korean hot spring ingredients, so it is announcing that it is in an optimal state for research and development of hot spring water cosmetics.

그리고 본 발명의 또 다른 과제의 해결수단으로 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제(CGTase)를 이용한 능이, 국화, 목련의 복합추출물을 유효성분으로 하는 화장품 조성물은 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제의 효소작용에 의해 생성되는 사이클로덱스트린의 구조적 특성을 이용하여 유효성분인 능이, 국화 및 목련의 복합추출물을 포접시킨 사이클로덱스트린을 화장료의 유효성분으로 조성하는 것으로 이루어진다.And as a means of solving another problem of the present invention, a cosmetic composition using a complex extract of Neungi, Chrysanthemum, and Magnolia using cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) as an active ingredient is effective for the enzymatic action of cyclodextrin glucanotransferase. By using the structural characteristics of the cyclodextrin produced by

본 발명에 따른 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제(CGTase)를 이용한 능이, 국화, 목련의 복합추출물을 유효성분으로 하는 화장품 조성물의 일 실시형태는 상기 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제(CGTase)를 이용한 능이, 국화, 목련 복합 추출물의 제조방법에 따라 제조된 능이, 국화 및 목련의 복합추출물이 포접된 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 유효성분으로 하여 화장료 전체 중량에 대하여 0.01 ~ 20중량% 함유하는 화장료 조성물로 이루어진다.One embodiment of the cosmetic composition using the complex extract of Neungyi, Chrysanthemum, and Magnolia using cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) according to the present invention as an active ingredient is the use of the cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) , chrysanthemum, magnolia complex extract prepared according to the manufacturing method, cyclodextrin (cyclodextrin) containing the complex extract of chrysanthemum and magnolia as an active ingredient It consists of a cosmetic composition containing 0.01 to 20% by weight based on the total weight of the cosmetic. .

상기 환상의 사이클로덱스트린을 생성하는 효소인 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제는 잘 알려진 공지물질이며, 본 발명에서는 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제에 의해 생성되는 사이클로덱스트린의 구조적 특성을 이용하여 유효성분인 능이, 국화 및 목련의 복합추출물을 포접시킨 사이클로덱스트린을 화장료의 유효성분으로 조성함으로써 화장료에 상대적으로 유효성분의 함량 증가와 함께 안정화시킬 수 있으며 또 유효성분의 용해도를 향상시키는 것으로 이루어진다.Cyclodextrin glucanotransferase, which is an enzyme that produces the cyclic cyclodextrin, is a well-known substance, and in the present invention, the ability to be an active ingredient is improved by using the structural characteristics of cyclodextrin produced by cyclodextrin glucanotransferase. By composing a cyclodextrin containing complex extracts of chrysanthemum, chrysanthemum and magnolia as an active ingredient in a cosmetic, it can be stabilized with an increase in the content of the active ingredient relative to the cosmetic, and the solubility of the active ingredient is improved.

상기 본 발명에 따른 화장료 조성물은 화장료 제조의 통상의 방법에 따라 제조되는 것으로 이루어지며, 예를 들면 약학적, 화장학적 또는 피부학적으로 허용 가능한 부형제와 함께 화장수, 유액, 크림, 에센스, 팩, 마스크, 파운데이션, 자외선차단제, BB크림, 샴푸, 트리트먼트, 바디워시, 바디로션, 핸드로션 또는 피부 세정제 제형 등에 적용될 수 있다.The cosmetic composition according to the present invention is made according to a conventional method of manufacturing a cosmetic, and for example, a lotion, emulsion, cream, essence, pack, mask together with a pharmaceutically, cosmetic or dermatologically acceptable excipient. , foundation, sunscreen, BB cream, shampoo, treatment, body wash, body lotion, hand lotion or skin cleanser formulation.

본 발명의 화장료 조성물은 능이, 국화 및 목련의 복합추출물을 포접시킨 사이클로덱스트린을 유효성분으로 조성하여 화장료에 유효성분의 함량을 상대적으로 증가시킬 수 있는 효과와 함께 유효성분의 안정성과 용해도를 향상시키는 특징을 나타낸다.The cosmetic composition of the present invention comprises cyclodextrin containing complex extracts of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia as an active ingredient, thereby improving the stability and solubility of the active ingredient with the effect of relatively increasing the content of the active ingredient in the cosmetic. indicate the characteristics.

또한 피부에 안전하면서도 고농도로 함유된 유효성분에 의한 상승작용으로 우수한 멜라닌생성 억제 및 항산화 활성을 나타내므로 우수한 피부미백, 노화지연 및 보습 효과를 나타낸다.In addition, it shows excellent skin whitening, aging delay and moisturizing effects because it is safe for the skin and exhibits excellent melanin production inhibition and antioxidant activity due to the synergistic action of active ingredients contained in high concentrations.

도 1은 본 발명에 따른 CGTase(Cyclodextrin Glucanotransferase)를 이용한 능이, 국화 및 목련 복합추출물의 Tyrosinase 저해 활성을 나타내는 그래프1 is a graph showing the Tyrosinase inhibitory activity of a complex extract of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia using CGTase (Cyclodextrin Glucanotransferase) according to the present invention;

이하에서는 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용, 실시예 및 시험예를 통하여 본 발명을 구체적으로 설명하지만 아래 기재에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail through specific contents, examples and test examples for carrying out the invention, but the present invention is not limited by the description below.

본 발명에 따른 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제(CGTase)를 이용한 능이, 국화, 목련 복합 추출물의 제조방법은 a). 능이 1 ~ 10중량부, 국화 1 ~ 10중량부 및 목련 1 ~ 10중량부를 정제수 또는 온천수로 가온 추출하여 능이, 국화 및 목련의 복합추출물을 얻는 제1공정, b). 상기 제1공정의 복합추출물 100중량부에 대하여 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제 0.01 ~ 1.0W/V% 농도로 함유하는 덱스트린 1.0 ~ 5.0중량부를 첨가하여 상기 제1 공정의 복합추출물을 포접시켜 능이, 국화 및 목련의 복합추출물이 포접된 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 제조하는 제2공정을 포함하는 것으로 이루어진다.The method for producing a complex extract of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia using cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) according to the present invention is a). 1 to 10 parts by weight of neungi, 1 to 10 parts by weight of chrysanthemum, and 1 to 10 parts by weight of magnolia by heating and extracting with purified water or hot spring water to obtain a complex extract of neungi, chrysanthemum and magnolia, b). By adding 1.0 to 5.0 parts by weight of dextrin containing cyclodextrin glucanotransferase at a concentration of 0.01 to 1.0 W/V% with respect to 100 parts by weight of the complex extract of the first process, the complex extract of the first process is included, It consists in including a second step of producing a cyclodextrin in which the complex extract of chrysanthemum and magnolia is included.

본 발명에 따른 상기 제1공정은 능이, 국화 및 목련의 복합추출물을 얻는 추출공정이며, 능이 1 ~ 10중량부, 국화 1 ~ 10중량부 및 목련 1 ~ 10중량부로 조합하여 추출하며, 능이, 국화 및 목련을 동일 중량비로 조합 사용하는 것이 바람직하다.The first process according to the present invention is an extraction process for obtaining a complex extract of Neungyi, chrysanthemum, and magnolia, and extracts by combining 1 to 10 parts by weight of Neungyi, 1 to 10 parts by weight of chrysanthemum, and 1 to 10 parts by weight of magnolia, It is preferable to use a combination of chrysanthemum and magnolia in the same weight ratio.

상기 제1공정의 추출공정은 능이, 국화 및 목련의 혼합물을 정제수 또는 온천수로 10 ~ 100℃의 온도에서 8시간 ~ 1일, 보다 바람직하게는 10시간 ~ 18시간, 가장 바람직하게는 12시간 ~ 16시간 동안 추출하며, 상기 추출시간이 12시간 미만이면 원하는 성분의 추출이 미흡하고, 추출시간이 1일을 넘게 되면 추출성분에 변화가 없고 추출물이 변색되는 문제가 발생하기 때문에 바람직하지 못하다.The extraction process of the first step is 8 hours ~ 1 day, more preferably 10 hours ~ 18 hours, most preferably 12 hours ~ Extraction is performed for 16 hours, and if the extraction time is less than 12 hours, the extraction of the desired component is insufficient, and when the extraction time exceeds 1 day, there is no change in the extraction component and a problem of discoloration of the extract occurs.

상기 온천수는 대전광역시 유성구에서 관리하는 유성온천의 온천수가 바람직하며, 유성온천의 온천수 수질은 수온 31 ~ 35℃, pH 7.95의 약알칼리성으로 수질유형은 Na-HCO3 형이며, 대장균 등 오염물에 노출되지 않은 것으로 조사되고 있어 온천수화장품을 제조를 위한 추출용매로 특히 적합하다.The hot spring water is preferably the hot spring water of Yuseong Hot Springs managed by Yuseong-gu, Daejeon, and the quality of the hot spring water is slightly alkaline at a water temperature of 31 to 35 ℃ and pH 7.95, and the water quality type is Na-HCO 3 , exposed to contaminants such as E. coli. It has been investigated as not being used, so it is particularly suitable as an extraction solvent for the manufacture of hot spring water cosmetics.

본 발명에 따른 제2공정은 제1공정에서 얻은 능이, 국화 및 목련의 복합추출물에 0.01 ~ 1.0W/V% 농도의 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제(CGTase)를 함유하는 덱스트린을 첨가하여 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제(CGTase)의 효소작용에 의해 생성되는 싸이클로덱스트린에 능이, 국화 및 목련의 복합추출물 포접시키는 공정이다.In the second process according to the present invention, dextrin containing cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) at a concentration of 0.01 to 1.0 W/V% is added to the complex extract of Neungyi, chrysanthemum, and magnolia obtained in the first process to obtain cyclodextrin. It is a process of enclosing complex extracts of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia with cyclodextrin generated by the enzymatic action of glucanotransferase (CGTase).

상기 제2공정은 온도 30 ~ 80℃, pH 3.0 ~ 8.0의 반응조건에서 5시간 ~ 24시간 반응시키는 것으로 이루어지며, 바람직하게는 온도 40 ~ 60℃, pH 4.5 ~ 6.5의 반응조건에서 8시간 ~ 12시간 반응시키며, 반응 조건이 상기 범위에 미치지 못하면 원하는 성분의 안정성과 포접이 미흡하고, 상기 범위를 초과하면 사이클로덱스트린의 제조가 높아 유효성분의 효율성이 떨어지는 문제가 발생기 때문에 바람직하지 못하다.The second process consists of reacting for 5 hours to 24 hours at a reaction condition of a temperature of 30 to 80° C. and pH 3.0 to 8.0, preferably 8 hours to a reaction condition of a temperature of 40 to 60° C. and pH 4.5 to 6.5. The reaction is carried out for 12 hours, and if the reaction conditions are not within the above range, stability and inclusion of the desired component are insufficient.

또 상기 제2공정에서 첨가하는 전분의 가수분해물인 덱스트린은 DE 1 ~ DE 60 덱스트린을 선택하는 것으로 이루어지며, 바람직하게는 DE 5 ~ DE 30 덱스트린, 보다 바람직하게는 DE 7 ~ DE 12 덱스트린을 첨가하는 것으로 이루어진다.In addition, the dextrin, which is a hydrolyzate of starch added in the second step, consists of selecting DE 1 to DE 60 dextrin, preferably DE 5 to DE 30 dextrin, more preferably DE 7 to DE 12 dextrin. done by doing

상기 제2공정으로부터 생성되는 반응생성물은 감압농축하고, 동결건조, 분무건조, 냉풍건조 또는 열풍건조 등의 방법으로 건조하여 건조물 형태의 능이, 국화 및 목련의 복합추출물로 제조하여 화장료의 유효성분으로 준비하는 것이 바람직하다.The reaction product generated from the second process is concentrated under reduced pressure and dried by a method such as freeze drying, spray drying, cold air drying or hot air drying to prepare a complex extract of neungyi, chrysanthemum and magnolia in the form of a dried product as an active ingredient in cosmetics. It is advisable to prepare

그리고 본 발명에 따른 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제를 이용한 능이, 국화, 목련 복합 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 상기한 제1공정 내지 제2공정에 의해 제조된 능이, 국화 및 목련의 복합추출물이 포접된 싸이클로덱스트린을 유효성분으로 함유하는 것으로 이루어진다.And the cosmetic composition containing the complex extract of Neungyi, chrysanthemum, and magnolia using cyclodextrin glucanotransferase according to the present invention includes the complex extract of Neungi, chrysanthemum and magnolia prepared by the first to second processes described above. It consists of containing cyclodextrin as an active ingredient.

상기 유효성분인 능이, 국화 및 목련의 복합추출물이 포접된 싸이클로덱스트린은 화장료 조성물 총 중량을 기준으로 0.01 ~ 20중량%로 함유하는 것으로 이루어지며, 0.1 ~ 10중량% 함유하는 것이 바람직하며, 1 ~ 5중량%로 함유하는 것이 보다 바람직하다.Cyclodextrin containing the compound extract of Neungi, Chrysanthemum and Magnolia as the active ingredient is contained in an amount of 0.01 to 20% by weight based on the total weight of the cosmetic composition, preferably 0.1 to 10% by weight, and 1 to It is more preferable to contain it at 5 weight%.

상기 유효성분이 화장료 조성물 총 중량의 0.01중량% 미만에서는 만족할 만한 효능을 제공하기 어렵고, 20중량% 이상에서는 조성물의 냄새와 색상에 영향을 미쳐서 상품성이 떨어지고 추가적인 효능을 기대하기도 어렵다.If the active ingredient is less than 0.01% by weight of the total weight of the cosmetic composition, it is difficult to provide satisfactory efficacy, and if it is more than 20% by weight, it affects the odor and color of the composition, so that it is difficult to expect commercial properties and additional efficacy.

본 발명에 따른 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제를 이용한 능이, 국화, 목련 복합 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 항산화용, 피부미백용 또는 보습용의 화장료 조성물에 적용될 수 있다.The cosmetic composition containing the complex extract of Neungyi, Chrysanthemum, and Magnolia using cyclodextrin glucanotransferase according to the present invention can be applied to a cosmetic composition for antioxidant, skin whitening or moisturizing.

또 본 발명에 따른 화장료 조성물은 화장료 제조의 통상의 방법에 따라 제조되는 것으로 이루어지며, 예를 들면 약학적, 화장학적 또는 피부학적으로 허용 가능한 부형제와 함께 화장수, 유액, 크림, 에센스, 팩, 마스크, 파운데이션, 자외선차단제, BB크림, 샴푸, 트리트먼트, 바디워시, 바디로션, 핸드로션 또는 피부 세정제 제형 등에 적용될 수 있다. In addition, the cosmetic composition according to the present invention is prepared according to a conventional method of manufacturing a cosmetic, for example, a lotion, emulsion, cream, essence, pack, mask together with pharmaceutically, cosmetically or dermatologically acceptable excipients. , foundation, sunscreen, BB cream, shampoo, treatment, body wash, body lotion, hand lotion or skin cleanser formulation.

이하에서는 <실시예> 및 <시험예>를 통하여 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기로 한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through <Examples> and <Test Examples>.

<실시예 1><Example 1>

1. 능이, 국화 및 목련의 복합 추출물의 제조1. Preparation of complex extracts of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia

시판하는 능이 500g, 국화 500g 및 목련 500g을 혼합된 상태에서 분쇄기로 미세하게 절단한 다음, 준비된 추출기에 투입하고 15,000g의 유성온천수를 가한 후, 50℃에서 12시간 동안 추출하였다. 추출이 완료된 후 고형분을 제거하고 여액을 수득하였다.500 g of commercially available Neungyi, 500 g of chrysanthemum, and 500 g of magnolia were finely cut with a grinder in a mixed state, put into a prepared extractor, 15,000 g of oily hot spring water was added, and then extracted at 50° C. for 12 hours. After the extraction was completed, the solid was removed and a filtrate was obtained.

준비된 반응용기에 상기 수득한 여액 15,000g, 말토덱스트린(DE 12) 10g 및 CGTase 1g을 투입한 다음, 50℃, pH 5.5에서 8시간 반응 후 90℃에서 30분 가온하여 효소를 실활시켰다.15,000 g of the obtained filtrate, 10 g of maltodextrin (DE 12), and 1 g of CGTase were added to the prepared reaction vessel, and after 8 hours of reaction at 50° C., pH 5.5, the enzyme was inactivated by heating at 90° C. for 30 minutes.

반응이 종료된 여액은 감압농축 및 동결건조하여 능이, 국화 및 목련의 복합추출물이 포접된 포접물(효소복합추출물) 건조분말 12.5g을 얻었다.After the reaction was completed, the filtrate was concentrated under reduced pressure and freeze-dried to obtain 12.5 g of dry powder of a clathrate (enzyme complex extract) containing complex extracts of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia.

<비교예 1><Comparative Example 1>

비교를 위하여 능이, 국화 및 목련을 각각 500g씩 혼합 분쇄하여 사용하고 상기 <실시예 1>와 동일한 추출조건에서 추출한 복합추출물을 건조시켜 건조분말 4.7g을 얻었다.For comparison, 500 g each of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia were mixed and pulverized, and the complex extract extracted under the same extraction conditions as in <Example 1> was dried to obtain 4.7 g of dry powder.

<시험예 1> 폴리페놀 함량 측정 시험<Test Example 1> Polyphenol content measurement test

상기 <실시예 1> 및 <비교예 1> 을 통하여 제조한 각각을 시료로 하여 폴리페놀 함량을 측정하였다.The polyphenol content was measured using each of the samples prepared in <Example 1> and <Comparative Example 1>.

총 폴리페놀 함량 측정은 상기 각각의 방법으로 수득한 추출물 시료를 5mg/㎖로 희석한 후 48well에 시료 25ul을 넣고 Folin & ciocaltean 50ul를 첨가하고, 3분간 반응 시킨 다음 2% sodium carbonate 1㎖를 첨가하여 혼합한 후 750nm에서 흡광도를 측정하여 아래 [표 1]에 나타내었다.To measure the total polyphenol content, after diluting the extract sample obtained by each method to 5 mg/ml, 25ul of the sample was put in 48well, 50ul of Folin & ciocaltean was added, reacted for 3 minutes, and then 1ml of 2% sodium carbonate was added After mixing, absorbance was measured at 750 nm and shown in [Table 1] below.

시료명Sample name 총 폴리페놀 함량(mg GA eq/g)Total polyphenol content (mg GA eq/g) 실시예1Example 1 효소 복합 추출물Enzyme Complex Extract 101.17±1.56101.17±1.56 비교예1Comparative Example 1 단순 복합 추출물simple complex extract 69.81±2.3169.81±2.31

상기 [표 1]에 나타낸 바와 같이 <실시예 1>의 CGTase 효소를 이용한 능이, 국화 및 목련의 복합 추출물이 <비교예 1>의 단순 복합 추출물보다 폴리페놀 함량이 더 높다는 것을 확인할 수 있다.As shown in [Table 1], it can be confirmed that the complex extract of chrysanthemum and magnolia using the CGTase enzyme of <Example 1> has a higher polyphenol content than the simple complex extract of <Comparative Example 1>.

<시험예 2> 피부세포 독성 시험<Test Example 2> Skin cell toxicity test

상기 <실시예 1> 및 <비교예 1> 를 통하여 제조한 각각을 시료로 하여 피부세포에 대한 독성을 측정하였다.Toxicity to skin cells was measured using each of the samples prepared in <Example 1> and <Comparative Example 1>.

본 시험을 위해 사용된 세포주는 인간 진피 섬유아세포(human dermal fibroblast; Lonza, Basel, Switzerland) 등 3종의 세포를 사용하였다. 상기의 세포들은 Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM; Gibco-BRL, Invitrogen; Life Technologies, Gaithersburg, MD, USA)에 10% 소태아혈청(FBS; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), 1% 페니실린/스트렙토마이신(penicillin 100 IU/㎖, streptomycin 100μg/㎖; Life Technologies)를 함유한 배지를 사용하여, 5% CO2 세포배양기 내에서 37℃의 온도 조건 하에서 배양하였다. The cell line used for this test was 3 types of cells including human dermal fibroblast (Lonza, Basel, Switzerland). The cells were prepared in Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM; Gibco-BRL, Invitrogen; Life Technologies, Gaithersburg, MD, USA) in 10% fetal bovine serum (FBS; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), 1% Using a medium containing penicillin / streptomycin (penicillin 100 IU / ml, streptomycin 100 μg / ml; Life Technologies), 5% CO 2 In a cell incubator, cultured under a temperature condition of 37 ° C.

WST-1(Water-soluble tetrazolium salt) 어세이는 세포 내 미토콘드리아성 NADH-탈수소화효소(mitochondrial NADH-dehydrogenase)의 활성을 측정하여 알아보는 방법으로써 테트라졸륨염(tetrazolium salt)을 살아있는 세포에 처리하게 되면 미토콘드리아에 있는 탈수소화효소에 의하여 유색의 포마잔(formazan)이 형성되게 된다. 형성된 포마잔을 450nm 파장의 흡광도로 확인하면 살아있는 세포의 농도를 확인할 수 있다. 세포를 96-well plate에 2×103 cells/well의 세포를 분주하고 24시간 배양 후 시료를 적정농도에 맞게 처리하여 다시 24시간 동안 배양하였다. 그 후 WST-1 어세이 용액을 배지양의 10%씩 처리하여 추가적으로 0.5 ~ 1시간 37°C에서 반응 후, iMark microplate reader(Bio-Rad, Hercules, CA, USA)를 이용하여, 450nm에서 흡광도를 측정하였으며 참조 흡광도는 650nm에서 측정하여 결과값을 보정하였다. 결과값은 세 번의 독립적 실험으로부터 평균값± 표준편차로 나타내었으며, 아래 [표 2]에 나타내었다. P<0.05는 Student's t-test를 통해 검증하였으며 결과값의 유의성을 나타낸다. The WST-1 (Water-soluble tetrazolium salt) assay is a method to measure and investigate the activity of mitochondrial NADH-dehydrogenase in cells. Then, the colored formazan is formed by the dehydrogenase in the mitochondria. If the formed formazan is confirmed by the absorbance at a wavelength of 450 nm, the concentration of living cells can be confirmed. Cells were seeded in a 96-well plate at 2×10 3 cells/well and cultured for 24 hours. After that, the WST-1 assay solution was treated by 10% of the amount of the medium and reacted at 37°C for additional 0.5 to 1 hour, and then absorbance at 450 nm using an iMark microplate reader (Bio-Rad, Hercules, CA, USA). was measured and the reference absorbance was measured at 650 nm to correct the result. The results were expressed as mean ± standard deviation from three independent experiments, and are shown in [Table 2] below. P<0.05 was verified through Student's t-test and indicates the significance of the results.

시료명Sample name 농도(ppm)Concentration (ppm) 세포생존율(%)Cell viability (%) 실시예1Example 1 효소 복합 추출물Enzyme Complex Extract 100100 101.5101.5 150150 104.2104.2 200200 110.0110.0 비교예1Comparative Example 1 단순 복합
추출물
simple compound
extract
100100 100.9100.9
150150 102.8102.8 200200 108.9108.9

상기 [표 2]에 나타낸 바와 같이 CGTase 효소를 이용한 능이, 국화 및 목련의 복합 추출물은 피부세포에 독성을 주지 않는 안전한 성분임을 알 수 있다.As shown in [Table 2], it can be seen that the complex extract of chrysanthemum and magnolia using the CGTase enzyme is a safe ingredient that does not cause toxicity to skin cells.

<시험예 3> 멜라닌 합성 저해 효과 시험<Test Example 3> Melanin synthesis inhibitory effect test

<실시예 1>과 <비교예 1>을 통하여 제조한 복합추출물을 시료로 하여 멜라닌 합성 저해 효과를 시험하였다.The melanin synthesis inhibitory effect was tested by using the composite extract prepared in <Example 1> and <Comparative Example 1> as a sample.

B16F10 세포를 60mm culture dish에 3x105개로 분주 후 <실시예 1>과 <비교예 1>의 시료1 ~ 5의 배지에 200㎍/㎖ 농도로 처리하였다. 양성대조를 위해 멜라닌 합성을 촉진하는 호르몬인 α-MSH(Sigma-Aldrich)를 200nM의 농도로 동일세포에 처리하였다.B16F10 cells were divided into 3x10 5 cells in a 60 mm culture dish, and then treated at a concentration of 200 μg/ml in the medium of Samples 1 to 5 of <Example 1> and <Comparative Example 1>. For a positive control, α-MSH (Sigma-Aldrich), a hormone that promotes melanin synthesis, was treated in the same cell at a concentration of 200 nM.

시료와 α-MSH를 B16F10 멜라노마 세포에 처리한 후 실온에서 48시간 세포를 배양시킨 뒤에 세포를 수확하여 PBS로 2회 세척 후 각 시료별로 멜라닌합성 저해율을 측정하였으며 결과를 아래 [표 3]에 나타내었다.After the sample and α-MSH were treated in B16F10 melanoma cells, the cells were cultured for 48 hours at room temperature, the cells were harvested, washed twice with PBS, and the inhibition of melanin synthesis was measured for each sample. The results are shown in Table 3 below. indicated.

시료명Sample name 멜라닌 합성 저해율(%)Melanin synthesis inhibition rate (%) 실시예1Example 1 효소 복합 추출물Enzyme Complex Extract 63.463.4 비교예1Comparative Example 1 단순 복합 추출물simple complex extract 41.041.0

상기 [표 3]에서 알 수 있는 바와 같이 멜라닌합성 저해율에 있어서, <실시예1>에 해당하는 능이, 국화 및 목련 효소 복합 추출물이 <비교예 1> 단순 복합추출물에 비해 훨씬 우수함을 알 수 있다.As can be seen from [Table 3], in the inhibition rate of melanin synthesis, it can be seen that the ability corresponding to <Example 1>, the chrysanthemum and magnolia enzyme complex extract is much superior to that of the <Comparative Example 1> simple complex extract. .

<시험예 4> 항산화력 효과 시험<Test Example 4> Antioxidant effect test

<실시예 1>, <비교예 1>을 통하여 제조한 복합추출물을 시료로 하여 항산화력을 DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl)라디칼 소거 활성으로 측정하였다.<Example 1> and <Comparative Example 1> were used as a sample to measure the antioxidant activity by DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) radical scavenging activity.

DPPH 라디칼 소거능은 Mensor 등의 방법을 참고하였다. 80㎕의 0.2mM DPPH 에탄올 용액을 제조예 1 내지 제조예 6의 발효액 시료에 20㎕ 가한 후 1분간 교반한 후 25℃ 인큐베이터에서 10분간 반응시켜 ELISA reader를 사용하여 517nm에서 흡광도를 측정하였다. For the DPPH radical scavenging ability, the method of Mensor et al. was referred. After 20 μl of 80 μl of 0.2 mM DPPH ethanol solution was added to the fermentation broth samples of Preparation Examples 1 to 6, stirred for 1 minute, reacted in an incubator at 25° C. for 10 minutes, and absorbance was measured at 517 nm using an ELISA reader.

DPPH 라디칼 소거활성은 아래 [계산식 1]에 따라 백분율로 나타내었으며 그 결과를 아래 [표 4]로 나타내었다.DPPH radical scavenging activity was expressed as a percentage according to [Formula 1] below, and the results are shown in [Table 4] below.

[계산식 1]

Figure 112020117320763-pat00001

시료명 항산화효과(DPPH소거 활성율,%) 실시예1 효소 복합 추출물 87.3 비교예1 단순 복합 추출물 64.5 DPPH 라디칼 소거활성의 수치가 높다는 것은 항산화 효과가 높다는 것을 의미하며, 이는 멜라닌 생합성 과정의 산화반응의 억제를 통한 멜라닌 생성을 억제하여 미백효과를 나타내는 것이다.
DPPH 라디칼 소거활성의 수치가 높다는 것은 항산화 효과가 높다는 것을 의미하며, 이는 멜라닌 생합성 과정의 산화반응의 억제를 통한 멜라닌 생성을 억제하여 미백효과를 나타내는 것이다.
<시험예 5> Tyrosinnase 저해 효과 시험
<실시예 1>와 <비교예 1>을 통하여 제조한 각각의 추출물을 시료로 하여 Tyrosinase 저해 활성(Tyrosinase inhibitation activity)을 측정하였다.
Tyrosinase 저해 활성은 농도 별 시료 100㎕에 0.2M potassium phosphate buffer(pH6.5) 50㎕, 2mM L-tyrosine 50㎕, mushroom tyrosinase(110U/ml) 10㎕를 혼합하여 37℃에서 20분간 반응시킨 후 490nm에서 Multiplate Reader를 사용하여 흡광도를 측정하였다. Tyrosinase 저해활성(Tyrosinase inhibition activity)은 아래 [계산식 2]와 같이, 시료 무첨가구에 대한 시료 첨가구의 흡광도비로 계산하였으며 그 결과 [도 1]에 나타내었다.
[계산식 2]
Tyrosinnase 저해활성 = {1-(A-B)/(C-D)}×100
상기 식에서 A: 시료 첨가구의 흡광도, B: 공시료의 흡광도, C: 대조군 흡광도, D: 대조군 공시료 흡광도이다.
첨부한 [도 1]에 나타난 바와 같이 <실시예 1>과 <비교예 1>의 경우 타이로시나제 억제제의 함량이 많아 우수한 미백 효과를 나타낸다는 것을 확인할 수 있었으며, 특히 <실시예 1>의 경우 매우 많은 타이로시나제 억제제의 함량에 의해 매우 우수한 미백효과를 보인다는 것을 확인할 수 있다.
<실시예 2>
상기 <실시예 1>에서 제조된 능이, 국화 및 목련의 복합추출물이 포접된 포접물을 유효성분으로 하여 아래 [표 5]에 나타낸 조성성분 및 비율에 따라 수중유형 유화(O/W emulsion) 타입의 크림 제형의 화장품을 제조하였다.
조성성분 실시예 2 조성비(중량%) 세토스테아릴알코올 3.0 글리세릴스테이레이트 2.0 세테아릴올리베이트, 솔비탄올리베이트 1.0 폴리글리세릴-3 메틸글루코스디스테아레이트 1.5 스큐알렌 5.0 에틸헥실올리베이트, 소듐아크릴레이트코폴리머, 폴리글리세릴-4올리에이트 0.5 아크릴레이트/C10-30알킬아크릴레이트크로스폴리머 0.3 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0 세틸에칠헥사노에이트 5.0 디메치콘 0.5 부틸렌글리콜 5.0 글리세린 8.0 1,2헥산디올 2.0 암모니움아크롤로일디메틸타우레이트/브이피코폴리머 0.3 알지닌 0.3 소듐아크릴레이트,폴리솔베이트80 0.3 효소 복합 추출물(실시예 1) 5.0 정제수 To 100 <실시예 3>
상기 <실시예 1>에서 제조된 능이, 국화 및 목련의 복합추출물이 포접된 포접물을 유효성분으로 하여 아래 [표 6]에 나타낸 조성성분 및 비율에 따라 샴푸 제형의 화장품을 제조하였다.
조성성분 실시예 3 조성비(중량%) 세토스테아릴알코올 3.0 소듐글루코네이트 0.50 소듐라우로일글루타메이트 0.10 클로페네신 0.20 소듐코코일이세티오네이트 3.30 폴리쿼터늄-10 0.20 다이소듐라우레스설포석시네이트,소듐라우릴설포아세테이트, 소듐클로라이드, 정제수 23.00 바바수아미도프로필베타인, 글리세린, 정제수 5.00 라우릴글루코사이드, 정제수 5.00 코코-베타인, 정제수 7.00 하이드롤라이즈드실크 0.10 폴리쿼터늄-7 0.30 하이드롤라이즈드케라틴 0.01 시트릭애씨드 0.10 소듐클로라이드 0.70 향료 0.50 에틸헥실글리세린 0.05 효소 복합 추출물(실시예 1) 5.00 정제수 To 100 <비교예 2>
<비교예 1>을 통하여 제조한 단순 복합 추출물을 유효성분으로 하여 수중유형 유화(O/W emulsion) 타입의 크림 제형의 화장품을 제조하였으며, 조성성분 및 비율은 <실시예 2>와 동일하게 하였다.
<비교예 3>
<비교예 1>을 통하여 제조한 단순 복합 추출물을 유효성분으로 하여 샴푸 제형의 화장품을 제조하였으며, 조성성분 및 비율은 <실시예 3>과 동일하게 하였다.
<시험예 6>
상기 <실시예 2>, <실시예 3>, <비교예 2> 및 <비교예 3> 의 수중유형 유화(O/W emulsion) 타입의 크림과 샴푸 제형의 화장품에 피부자극성 정도를 비교하기 위하여 인체에 대한 폐쇄첩포 시험(closed patch test)을 실시하였다.
건강한 성인 남녀 20명을 대상으로 하박부 안쪽에 각각의 시료를 0.2g씩 첩포하고 24시간 후 핀챔버를 제거한 후 4시간 경과한 다음 육안으로 피부상태를 확인하고, 그 결과를 아래 [표 7]에 나타내었다. 피부자극도는 하기 [계산식 3]에 의해 계산하였다.
[계산식 3]
피부자극도 = {(+-)수×1}+{(+)수×2}+{(++)수×3}/피험자수
시료명 피시험자수 판정결과 자극도 - + - + + + 실시예2 20명 20 0 - - 0.00 실시예3 20 0 - - 0.00 비교예2 20 0 - - 0.00 비교예3 20 0 - - 0.00 -:홍반이나 특이사항 없음, +-:주위보다 약간 붉어짐, +:주위보다 현저히 붉어짐
++:주위보다 심히게 붉어지고 부풀어 오름
상기 [표 7]에 나타낸 바와 같이, <실시예 2>, <실시예 3>, <비교예 2> 및 <비교예 3>의 화장품 조성물은 피부자극도가 매우 낮은 것으로 확인할 수가 있었다.
<시험예 7>
상기 <실시예 2>와 <비교예 2>에 대하여 실제 사용 시 피부 미백효과 및 보습효과를 알아보기 위하여 건강한 30 ~ 55세 성인여성 100명에 대하여 각각 <실시예 2>, <비교예 2>의 2그룹으로 나누어 인체 사용성 시험을 실시하였다.
상기 <실시예 2>와 <비교예 2>의 조성으로 제조된 시험품 50g씩을 설문지와 함께 나눠주고 아침과 저녁에 하루 2회씩 총 8주간 사용하게 한 후 설문지를 회수하여 분석하였다.
총 100명의 시험대상자 중 <실시예 2> 그룹의 50명, <비교예 2> 그룹의 50명의 설문지를 회수하여 분석한 결과를 아래 [표 8]에 나타내었다.
구분 응답자 수 매우 악화됨 약간 악화됨 변화없음 약간 좋아짐 매우 좋아짐 피부색 변화정도 실시예2 - - 8 12 30 비교예2 - - 19 21 10 피부 보습감 정도 실시예2 - - 10 23 17 비교예2 - - 8 28 14 상기 [표 8]에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 <실시예 2>의 크림 제형 화장료 조성물이 <비교예 2>의 크림에 비하여 피부색 변화, 피부 보습감개선 효능에 대한 사용자의 만족도가 높은 것을 확인할 수가 있다.[Formula 1]
Figure 112020117320763-pat00001

Sample name Antioxidant effect (DPPH scavenging activity,%) Example 1 Enzyme Complex Extract 87.3 Comparative Example 1 simple complex extract 64.5 A high level of DPPH radical scavenging activity means that it has a high antioxidant effect, which shows a whitening effect by inhibiting melanin production through inhibition of the oxidation reaction of the melanin biosynthesis process.
A high level of DPPH radical scavenging activity means that it has a high antioxidant effect, which shows a whitening effect by inhibiting melanin production through inhibition of the oxidation reaction of the melanin biosynthesis process.
<Test Example 5> Tyrosinnase inhibitory effect test
Tyrosinase inhibition activity (Tyrosinase inhibition activity) was measured for each extract prepared in <Example 1> and <Comparative Example 1> as a sample.
Tyrosinase inhibitory activity was obtained by mixing 50 μl of 0.2M potassium phosphate buffer (pH 6.5), 50 μl of 2mM L-tyrosine, and 10 μl of mushroom tyrosinase (110U/ml) in 100 μl of each concentration sample and reacting at 37° C. for 20 minutes. Absorbance was measured at 490 nm using a Multiplate Reader. Tyrosinase inhibition activity was calculated as the absorbance ratio of the sample-added group to the non-sample-added group, as shown in Equation 2 below, and the results are shown in [FIG. 1].
[Formula 2]
Tyrosinnase inhibitory activity = {1-(AB)/(CD)}×100
In the above formula, A: the absorbance of the sample addition port, B: the absorbance of the blank sample, C: the control absorbance, D: the absorbance of the control blank sample.
As shown in the attached [FIG. 1], in the case of <Example 1> and <Comparative Example 1>, it was confirmed that the content of the tyrosinase inhibitor was high and thus an excellent whitening effect was exhibited, especially in <Example 1> In this case, it can be confirmed that a very good whitening effect is exhibited by the content of a very large amount of tyrosinase inhibitor.
<Example 2>
Oil-in-water emulsion (O/W emulsion) type according to the composition components and ratios shown in [Table 5] below, using the inclusion product containing the complex extract of Neungi, chrysanthemum, and magnolia prepared in <Example 1> as an active ingredient of cream formulations were prepared.
composition Example 2 Composition ratio (wt%) cetostearyl alcohol 3.0 glyceryl stearate 2.0 cetearyl olivate, sorbitan olivate 1.0 Polyglyceryl-3 methylglucose distearate 1.5 squalene 5.0 Ethylhexyl olivate, sodium acrylate copolymer, polyglyceryl-4 oleate 0.5 Acrylate/C10-30 alkyl acrylate crosspolymer 0.3 Caprylic/Capric Triglycerides 5.0 Cetylethylhexanoate 5.0 dimethicone 0.5 butylene glycol 5.0 glycerin 8.0 1,2 hexanediol 2.0 Ammonium acroloyl dimethyl taurate/vpicopolymer 0.3 Arginine 0.3 Sodium acrylate, polysorbate 80 0.3 Enzyme Complex Extract (Example 1) 5.0 Purified water To 100 <Example 3>
Using the inclusion product containing the complex extract of Neungyi, chrysanthemum, and magnolia prepared in <Example 1> as an active ingredient, cosmetics of a shampoo formulation were prepared according to the compositional components and ratios shown in [Table 6] below.
composition Example 3 Composition ratio (wt%) cetostearyl alcohol 3.0 sodium gluconate 0.50 Sodium Lauroyl Glutamate 0.10 Clofenesin 0.20 Sodium Cocoyl Cethionate 3.30 Polyquaternium-10 0.20 Disodium laureth sulfosuccinate, sodium lauryl sulfoacetate, sodium chloride, purified water 23.00 Barbasuamidopropyl betaine, glycerin, purified water 5.00 Lauryl Glucoside, Purified Water 5.00 Coco-betaine, purified water 7.00 Hydrolyzed Silk 0.10 Polyquaternium-7 0.30 Hydrolyzed Keratin 0.01 Citric Acid 0.10 sodium chloride 0.70 Spices 0.50 Ethylhexylglycerin 0.05 Enzyme Complex Extract (Example 1) 5.00 Purified water To 100 <Comparative Example 2>
A cosmetic of an oil-in-water emulsion (O/W emulsion) type cream formulation was prepared using the simple complex extract prepared in <Comparative Example 1> as an active ingredient, and the composition and ratio were the same as in <Example 2>. .
<Comparative Example 3>
Cosmetics in a shampoo formulation were prepared using the simple complex extract prepared in <Comparative Example 1> as an active ingredient, and the composition and ratio were the same as in <Example 3>.
<Test Example 6>
In order to compare the degree of skin irritation to the cosmetics of the oil-in-water emulsion (O/W emulsion) type cream and shampoo formulation of <Example 2>, <Example 3>, <Comparative Example 2> and <Comparative Example 3> A closed patch test was performed on the human body.
For 20 healthy adult males and females, 0.2 g of each sample was applied to the inside of the lower arm, 24 hours later, the pin chamber was removed, and 4 hours later, the skin condition was visually checked. shown in The degree of skin irritation was calculated by the following [Equation 3].
[Formula 3]
Skin irritation = {(+-) number×1}+{(+) number×2} + {(++) number×3}/number of subjects
Sample name number of subjects Judgment result stimulus degree - + - + + + Example 2 20 people 20 0 - - 0.00 Example 3 20 0 - - 0.00 Comparative Example 2 20 0 - - 0.00 Comparative Example 3 20 0 - - 0.00 -: No erythema or unusual, +-: Slightly reddened from the surrounding area, +: Remarkably reddened from the surrounding area.
++: Reddens and swells more than the surrounding area
As shown in [Table 7], the cosmetic compositions of <Example 2>, <Example 3>, <Comparative Example 2> and <Comparative Example 3> were confirmed to have very low skin irritation.
<Test Example 7>
<Example 2> and <Comparative Example 2> for 100 healthy 30-55 year old adult women, respectively, in order to examine the skin whitening effect and moisturizing effect during actual use for <Example 2> and <Comparative Example 2> was divided into 2 groups and tested for human usability.
50 g each of the test article prepared in the composition of <Example 2> and <Comparative Example 2> was distributed with the questionnaire, and the questionnaire was collected and analyzed after allowing it to be used twice a day in the morning and evening for a total of 8 weeks.
[Table 8] shows the results of collecting and analyzing questionnaires from 50 people in the <Example 2> group and 50 people in the <Comparative Example 2> group out of a total of 100 test subjects.
division number of respondents very bad slightly worse no change slightly better very good degree of skin color change Example 2 - - 8 12 30 Comparative Example 2 - - 19 21 10 level of skin moisture Example 2 - - 10 23 17 Comparative Example 2 - - 8 28 14 As shown in [Table 8], it is confirmed that the cream-formed cosmetic composition of <Example 2> according to the present invention has higher user satisfaction with respect to the skin color change and skin moisturizing effect than the cream of <Comparative Example 2>. can be

Claims (7)

a) 능이 1 ~ 10중량부, 국화 1 ~ 10중량부 및 목련 1 ~ 10중량부를 정제수 또는 유성온천수로 가온 추출하여 능이, 국화 및 목련의 복합추출물을 얻는 제1공정,
b) 상기 제1공정의 복합추출물 100중량부에 대하여 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제 0.01 ~ 1.0W/V% 농도로 함유하는 덱스트린 1.0 ~ 5.0중량부를 첨가하고 온도 30 ~ 80℃, pH 3.0 ~ 8.0의 반응조건에서 5시간 ~ 24시간 반응시켜 상기 제1공정의 복합추출물을 포접시켜 능이, 국화 및 목련의 복합추출물이 포접된 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 제조하는 제2공정 및
c). 상기 제2공정의 능이, 국화 및 목련의 복합추출물이 포접된 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 유효성분으로 하는 화장료 조성물을 제조하는 제3공정을 포함하는 것을 특징으로 하는 항산화용, 피부미백용 또는 보습용에 적용되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물의 제조방법.
a) 1 to 10 parts by weight of Neungyi, 1 to 10 parts by weight of chrysanthemum, and 1 to 10 parts by weight of magnolia by warming and extracting with purified water or oily hot spring water to obtain a complex extract of Neungi, Chrysanthemum and Magnolia;
b) 1.0 to 5.0 parts by weight of dextrin containing cyclodextrin glucanotransferase at a concentration of 0.01 to 1.0 W/V% with respect to 100 parts by weight of the complex extract of the first step, temperature 30 to 80° C., pH 3.0 to 8.0 A second process of producing a cyclodextrin containing the complex extract of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia by inclusion of the complex extract of the first process by reacting for 5 to 24 hours under the reaction conditions of
c). For antioxidant, skin whitening, or moisturizing, characterized in that the second step includes a third step of preparing a cosmetic composition containing cyclodextrin containing a complex extract of chrysanthemum and magnolia as an active ingredient Method for producing a cosmetic composition, characterized in that applied to.
청구항 1에 있어서, 덱스트린은 DE 1 ~ DE 60 덱스트린을 선택하는 것을 특징으로 하는 항산화용, 피부미백용 또는 보습용에 적용되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물의 제조방법.The method according to claim 1, wherein the dextrin is applied to antioxidation, skin whitening, or moisturizing, characterized in that DE 1 to DE 60 dextrin is selected. 삭제delete 능이 1 ~ 10중량부, 국화 1 ~ 10중량부 및 목련 1 ~ 10중량부로부터 추출한 능이, 국화 및 목련의 복합추출물 100중량부를 싸이클로덱스트린글루카노트란스퍼라제 0.01 ~ 1.0W/V% 농도로 함유하는 덱스트린 1.0 ~ 5.0중량부와 반응시켜 능이, 국화 및 목련의 복합추출물이 포접된 사이클로덱스트린(cyclodextrin)을 유효성분으로 하여 유효성분이 화장료 총 중량을 기준으로 0.01 ~ 20중량% 함유하는 것을 특징으로 하는 항산화용, 피부미백용 또는 보습용에 적용되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.Contains 100 parts by weight of a complex extract of Neungyi, chrysanthemum and magnolia extracted from 1 to 10 parts by weight of chrysanthemum, 1 to 10 parts by weight of chrysanthemum, and 1 to 10 parts by weight of magnolia at a concentration of 0.01 to 1.0 W/V% of cyclodextrin glucanotransferase. A dextrin containing 1.0 to 5.0 parts by weight of dextrin and cyclodextrin containing complex extracts of Neungyi, Chrysanthemum and Magnolia as an active ingredient, characterized in that the active ingredient contains 0.01 to 20% by weight based on the total weight of the cosmetic. A cosmetic composition, characterized in that it is applied for antioxidant, skin whitening or moisturizing. 삭제delete 삭제delete 청구항 4에 있어서, 화장료 조성물이 화장수, 유액, 크림, 에센스, 팩, 마스크, 파운데이션, 자외선차단제, BB크림, 샴푸, 트리트먼트, 바디워시, 바디로션, 핸드로션 및 피부 세정제 제형 중에서 선택되는 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.The method according to claim 4, wherein the cosmetic composition is a lotion, emulsion, cream, essence, pack, mask, foundation, sunscreen, BB cream, shampoo, treatment, body wash, body lotion, hand lotion and any one selected from skin cleanser formulations Cosmetic composition, characterized in that the formulation of.
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