KR102456521B1

KR102456521B1 - 인돌아민 2,3-디옥시게나제 및/또는 트립토판-2,3-디옥시게나제의 억제제로서의 신규 치환된 이미다조피리딘 화합물

Info

Publication number: KR102456521B1
Application number: KR1020187034045A
Authority: KR
Inventors: 필립 엠. 코울리; 메레데스 앤 맥고완; 토마스 제이. 브라운; 용신 한; 쿤 리우; 칭린 푸; 앨런 와이즈; 홍준 장; 후아 챠오
Original assignee: 아이오메트 파마 엘티디; 머크 샤프 앤드 돔 엘엘씨
Priority date: 2016-04-29
Filing date: 2017-04-24
Publication date: 2022-10-20
Also published as: WO2017189386A1; JP2019515923A; CN109069873B; EP3448522A1; KR20190003619A; RU2018140732A3; JP6948345B2; BR112018071602B1; MX2018013164A; BR112018071602A2; AU2017257377B2; EP3448522A4; US20200230117A1; CN109069873A; RU2741911C2; US11096930B2; AU2017257377A1; RU2018140732A; EP3448522B1; CA3021589A1

Abstract

인돌아민 2,3-디옥시게나제 (IDO) 및/또는 트립토판-2,3-디옥시게나제 (TDO) 효소의 억제제인 화학식 (I)의 치환된 이미다조피리딘 화합물이 본원에 기재된다:

또한, IDO- 및/또는 TDO-연관 질환 또는 장애의 잠재적 치료제 또는 예방에서의 화합물의 용도가 본원에 개시된다. 또한, 이들 화합물을 포함하는 조성물이 본원에 개시된다. 추가로, IDO- 및/또는 TDO-연관 질환 또는 장애의 잠재적 치료제 또는 예방에서의 조성물의 용도가 본원에 개시된다.

Description

인돌아민 2,3-디옥시게나제 및/또는 트립토판-2,3-디옥시게나제의 억제제로서의 신규 치환된 이미다조피리딘 화합물

키누레닌 경로 (KP)는 필수 아미노산 트립토판의 분해의 >95%의 원인이 된다. 트립토판 대사에 대한 키누레닌 경로는 필수 피리딘 뉴클레오티드 NAD+, 및 키누레닌 (KYN), 키누렌산 (KYNA), 신경독성 자유 라디칼 발생기 3-히드록시키누레닌 (3-HK), 안트라닐산, 3-HAA, 피콜린산 (PIC), 및 흥분성 N-메틸-D-아스파르테이트 (NMDA) 수용체 효능제 및 신경독소인 퀴놀린산 (QUIN)을 포함한 다수의 신경활성 대사물의 생산으로 이어진다. 트립토판의 나머지 5%는 트립토판 히드록실라제에 의해 5-히드록시트립토판으로 대사된 다음, 추가로 5-히드록시트립타민 (세로토닌) 및 멜라토닌으로 대사된다.

트립토판의 고갈 및 면역억제 트립토판 이화대사물의 축적 둘 다는 항원-특이적 T-세포 및 자연 킬러 세포 반응을 억제하고, 조절 T 세포의 형성을 유도하도록 작용한다. 트립토판 이화작용은 염증 매개체, 특히 IFN-γ에 의해 유도되기 때문에, 과도한 면역 반응을 제한하여 면역병리상태를 방지하는 내인성 메카니즘을 나타내는 것으로 여겨진다. 그러나, 질환 상태에서 이러한 피드백 루프는 유익하지 않을 수 있다는 증거가 존재한다 (문헌 [Munn 및 Mellor, 2013]에서 검토됨).

트립토판 이화작용의 제1 단계는 각각 트립토판-2,3-디옥시게나제 (TDO) 또는 인돌아민-2,3-디옥시게나제 (IDO)에 의해 촉매된다. 둘 다의 효소는 트립토판을 N-포르밀키누레닌으로 전환시키는, 인돌 고리에서의 2,3 이중 결합의 산화성 절단을 촉매한다. 이는 키누레닌 경로에 의한 트립토판 이화작용에서의 속도-제한 단계이다 (Grohmann et al., 2003; Stone 및 Darlington, 2002). TDO는 48 kDa의 분자 질량을 갖는 각각의 단량체와의 동형사량체인 반면에, IDO는 45 kDa의 분자 질량 및 단량체 구조를 갖는다 (Sugimoto et al., 2006; Thackray et al., 2008; Zhang et al., 2007). 동일한 반응을 매개함에도 불구하고, TDO 및 IDO는 주로 활성 부위 내에서 단지 10% 상동성을 공유하여 구조적으로 구별된다 (Thackray et al., 2008).

TDO는 간에서 높은 수준으로 발현되며, 전신 트립토판 수준을 조절하는 것을 담당한다. TDO는 면역계로부터의 신호에 의해 유도 또는 조절되지는 않지만, TDO 발현은 트립토판 또는 코르티코스테로이드에 의해 유도될 수 있다 (Miller et al., 2004; Salter 및 Pogson, 1985). 더 최근에, TDO는 뇌에서 발현되는 것으로 밝혀진 바 있으며, 여기서 이는 신경활성 트립토판 대사물 예컨대 키누렌산 및 퀴놀린산의 생산을 조절한다 (Kanai et al., 2009).

IDO는 간외로의 우세한 트립토판 이화 효소이며, 대식세포, 소교세포, 뉴런 및 성상세포를 포함한 수많은 세포에서 발견된다 (Guillemin et al., 2007; Guillemin et al., 2001; Guillemin et al., 2003; Guillemin et al., 2005). IDO 전사는 특이적 염증 매개체에 반응하여 엄격하게 제어된다. 마우스 및 인간 IDO 유전자 프로모터는 제I형 (IFN-α/β) 및 더 강력하게는 제II형 (IFN-γ) 인터페론에 대한 반응성을 부여하는 다중 서열 요소를 함유한다 (Chang et al., 2011; Dai 및 Gupta, 1990; Hassanain et al., 1993; Mellor et al., 2003). 특정 골수-계열 세포 (단핵구-유래 대식세포 및 DC), 섬유모세포, 내피 세포 및 일부 종양-세포주를 포함한 다양한 세포 유형은 IFN-γ에 대한 노출 후에 IDO를 발현한다 (Burke et al., 1995; Hwu et al., 2000; Mellor et al., 2003; Munn et al., 1999; Varga et al., 1996). 그러나, IDO 전사의 제어는 복잡하며, 세포-유형 특이적이다. IDO 활성은 인간 융모외 영양막 세포에 의해 발현되어 모체-태아 경계에서 구성적으로 발견된다 (Kudo and Boyd, 2000). 태반 외부에서, 기능적 IDO 발현은 마우스 부고환, 장 (원위 회장 및 결장), 림프절, 비장, 흉선 및 폐에서 가장 높은 것으로 보고되었다 (Takikawa et al., 1986).

IDO의 또 다른 최근 변이체 효소는 동일한 효소 단계를 촉매화하는 것을 나타내었다: 인돌아민-2,3-디옥시게나제 2 (IDO2). 그러나, 그의 생리학적 관련성은 그의 매우 낮은 활성, 모든 백인 및 아시아인의 대략 절반에서의 그의 효소적 활성을 비활성화시키는 공통 다형성의 존재, 및 다중 스플라이스 변이체의 존재로 인해, 명백하지 않은 채로 남아 있다 (Lob et al., 2008; Meininger et al., 2011; Metz et al., 2007).

IDO-결핍 마우스는 육안 수준에서 표현형 정상이지만 (Mellor et al., 2003), 이들은 자가면역의 유도 및 선천성 면역계의 자극에 대해 약간 더 큰 경향이 있다. IDO -/- 녹아웃 마우스는 또한 증진된 염증성-매개 결장 발암을 나타내며, 염증-유래 폐암 및 피부암에 대한 내성을 발휘한다 (Chang et al., 2011; Yan et al., 2010).

TDO -/- 녹아웃 마우스는 표현형으로 정상인 것으로 보인다. 그러나, TDO 녹아웃 마우스가 L-Trp의 혈장 농도의 9배 증가를 가지는 반면, IDO -/- 녹아웃 마우스는 L-Trp의 WT 수준을 가져, 이는 IDO가 아닌 TDO가 전신 Trp를 조절함을 시사한다. TDO 절제는 뇌에서의 Trp 뿐만 아니라 세로토닌 (5-HT)를 증가시키고, 따라서 불안 관련된 행동의 조정제이다 (Kanai et al., 2009). TDO -/- 마우스가 성체기 동안 해마 및 심실하 구역에서 증가된 신경발생을 나타내기 때문에, TDO는 또한 성체 마우스에서 뇌 형태의 유지에서 역할을 한다 (Funakoshi et al., 2011).

트립토판 대사에 의한 면역조절은 미세환경에서의 TDO/IDO 기질 (트립토판)의 고갈 및 산물 예컨대 키누레닌의 축적에 의해 면역계를 조정한다.

이펙터 T 세포는 낮은 트립토판 농도에 대해 특히 감수성이며, 따라서 국부 미세환경으로부터의 필수 아미노산 트립토판의 고갈은 이펙터 T-세포 무반응 및 아폽토시스를 유발한다. 트립토판의 고갈은 일반 제어 비-억제성-2 키나제 (GCN2)에 의해 검출된다 (Munn et al., 2005). GCN2의 활성화는 세포-주기 정지, 분화, 적응 또는 아폽토시스를 유발하는 스트레스-반응 프로그램을 촉발한다. 마우스에서 GCN2가 부족한 T 세포는 종양-배액 림프절에서의 수지상 세포를 포함한 골수 세포에 의한 IDO-매개 무반응에 대해 감수성이 아니다 (Munn et al., 2005).

트립토판 대사물 예컨대 키누레닌, 키누렌산, 3-히드록시-키누레닌, 및 3-히드록시-안트라닐산은 T-세포 기능을 억제하며, T-세포 아폽토시스를 유도할 수 있다. 최근 연구는 아릴 탄화수소 수용체 (AHR)가 키누레닌의 직접적 표적이라는 것을 제시한 바 있다 (Mezrich et al., 2010; Nguyen et al., 2010; Opitz et al., 2011). AHR은 염기성 헬릭스-루프-헬릭스 Per-Arnt-Sim (PAS) 패밀리 전사 인자이다. 키누레닌이 종양에서 축적됨에 따라, KYN은 AHR과 결합하고, 핵으로 전위하고, 디옥신-반응성 성분 (DRE)에 의해 조절되는 표적 유전자의 전사를 활성화시킨다. T-헬퍼-세포에서 키누레닌은 조절 T 세포 (Treg)의 생성을 유발한다.

IDO 및/또는 TDO의 약리학적 억제제는 감염성 질환, 암, 신경계 상태 및 많은 다른 질환을 포함한 광범위한 적응증에서 잠재적 유용성을 갖는다.

IDO 및/또는 TDO 효소의 억제제인 신규 화학식 (I)의 화합물이 본원에 기재된다. 또한, IDO- 및/또는 TDO-연관 질환 또는 장애의 잠재적 치료 또는 예방에서의 이들 화합물의 용도가 본원에 기재된다. 또한, 1종 이상의 화합물을 포함하는 조성물이 본원에 기재된다. 추가로, IDO- 및/또는 TDO-연관 질환 또는 장애의 잠재적 예방 또는 치료에서의 이들 조성물의 용도가 본원에 기재된다.

본원에 개시된 화합물은 IDO 및/또는 TDO 억제제이다. 한 실시양태에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 본원에 개시된다:

여기서

각각의 R¹ 및 R²는 독립적으로 (1) H 및 (2) NH₂로 이루어진 군으로부터 선택되고;

R³ 및 R⁶ 중 1개는 H이고, 다른 것은 Y¹이고;

각각의 R⁴ 및 R⁵는 독립적으로 (1) H, (2) 할로겐, (3) 1 내지 3개의 할로겐으로 임의로 치환된 C_1-6 알킬, (4) C_3-6 시클로알킬, (5) 1 내지 3개의 할로겐으로 임의로 치환된 C_1-6 알콕시, 및 (6) CN, 및 (7) -NR^gR^g'로 이루어진 군으로부터 선택되고, 각각의 R^g 및 R^g'는 독립적으로 H, C_1-6 알킬, -COH, 및 -COC_1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;

Y¹은 하기 화학식을 갖는 기이고,

파선 "

"는 임의적인 이중 결합을 나타내고;

Q는 -C(R^a)(R^a')-, -N(R^a)-, 또는 -O-이고;

T는 -C(R^a)(R^a')-, -N(R^a)-, 또는 -O-이고;

R^a는 (1) H, (2) C_1-10 알킬, (3) 아릴, (4) -C(O)-R^e, (5) -SO₂-NH₂, 및 (6) -SO₂-C_1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되며; 여기서 각각의 알킬 및 아릴은 할로겐 및 헤테로시클릴로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;

R^a'는 (1) H 및 (2) C_1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;

R^b는 C_1-6 알킬이고;

각각의 R^c 및 R^d는 독립적으로 (1) H, (2) C_1-6 알킬 및 (3) 옥소로 이루어진 군으로부터 선택되고;

R^e는 (1) C_1-6 알킬, (2) 아릴 및 (3) 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고;

m은 0, 1 또는 2이고;

n은 0, 1 또는 2이고;

p는 0 또는 1이다.

화학식 (I)의 한 실시양태에서, 각각의 R¹ 및 R²는 H이다.

화학식 (I)의 한 실시양태에서, m은 1이다.

화학식 (I)의 한 실시양태에서, 각각의 R⁴ 및 R⁵는 독립적으로 (1) H, (2) 할로겐, (3) 1 내지 3개의 할로겐으로 임의로 치환된 C_1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고; m은 1이다.

화학식 (I)의 한 실시양태에서, 각각의 R⁴ 및 R⁵는 독립적으로 (1) H, (2) 할로겐, (3) 1 내지 3개의 할로겐으로 임의로 치환된 C_1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택된다.

화학식 (I)의 한 실시양태에서, R³은 H이고, R⁶은 하기 화학식을 갖는 Y²이며,

여기서

파선 "

"는 임의적인 이중 결합을 나타내고;

Q는 -CH(R^a)- 또는 -N(R^a)-이고;

T는 -CH₂- 또는 -NH-이고;

R^a는 (1) H, (2) C_1-6 알킬, 및 (3) 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되며; 여기서 각각의 알킬 및 페닐은 할로겐, 및 산소, 황 및 질소로부터 선택된 1개의 헤테로 고리 원자를 함유하는 5- 또는 6-원 헤테로 모노시클릭 기로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;

R^b는 C_1-4 알킬이고;

각각의 R^c 및 R^d는 독립적으로 H 또는 옥소이고;

m은 1이다.

화학식 (I)의 한 실시양태에서, R³은 H이고, R⁶은 하기 화학식을 갖는 Y³이며,

여기서

Q는 -N(R^a)-이고;

T는 -CH₂- 또는 -NH-이고;

R^a는 (1) H, (2) 할로겐, 및 1개의 산소 고리 원자를 함유하는 5- 또는 6-원 헤테로 모노시클릭 기로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된 C_1-4 알킬, 및 (3) 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되고;

R^b는 메틸 또는 에틸이고;

n은 0, 1 또는 2이다.

화학식 (I)의 한 실시양태에서, Y¹은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:

화학식 (I)의 한 실시양태에서, 화합물은 화학식 (Ia)의 화합물이다:

여기서

R⁴는 (1) 할로겐 및 (2) 1 내지 3개의 할로겐으로 임의로 치환된 C_1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;

R⁶은 하기 화학식을 갖는 Y²이며,

여기서

파선 "

"는 임의적인 이중 결합을 나타내고;

Q는 -CH(R^a)- 또는 -N(R^a)-이고;

T는 -CH₂- 또는 -NH-이고;

R^a는 (1) H, (2) C_1-4 알킬, 및 (3) 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되며; 여기서 각각의 알킬 및 페닐은 할로겐 및 헤테로시클릴로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;

R^b는 C_1-4 알킬이고;

각각의 R^c 및 R^d는 독립적으로 H 또는 옥소이고;

m은 1이고;

n은 0, 1 또는 2이다.

화학식 (Ia)의 한 실시양태에서, R⁶은 하기 화학식을 갖는 Y³이며,

여기서

Q는 -N(R^a)-이고;

T는 -CH₂- 또는 -NH-이고;

R^b는 메틸이다.

화학식 (Ia)의 한 실시양태에서, R^a는 (1) H, (2) 할로겐 및 테트라히드로피라닐로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된 C_1-4 알킬, 및 (3) 페닐로 이루어진 군으로부터 선택된다.

화학식 (Ia)의 한 실시양태에서, Y³은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:

화학식 (I)의 한 실시양태에서, 화합물은 화학식 (Ib)의 화합물이다:

여기서

R⁵는 (1) 할로겐 및 (2) 1 내지 3개의 할로겐으로 임의로 치환된 C_1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;

R³은 하기 화학식을 갖는 Y²이며,

여기서

파선 "

"는 임의적인 이중 결합을 나타내고;

Q는 -CH(R^a)- 또는 -N(R^a)-이고;

T는 -CH₂- 또는 -NH-이고;

R^a는 (1) H, (2) C_1-6 알킬, 및 (3) 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되며; 여기서 각각의 알킬 및 페닐은 할로겐 및 헤테로시클릴로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;

R^b는 C_1-4 알킬이고;

각각의 R^c 및 R^d는 독립적으로 H 또는 옥소이고;

m은 1이고;

n은 0, 1 또는 2이다.

화학식 (Ib)의 한 실시양태에서, R³은 하기 화학식을 갖는 Y³이며,

여기서

Q는 -N(R^a)-이고;

T는 -CH₂- 또는 -NH-이고;

R^b는 메틸이다.

화학식 (Ib)의 한 실시양태에서, R^a는 (1) H, (2) 할로겐 및 테트라히드로피라닐로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된 C_1-4 알킬, 및 (3) 페닐로 이루어진 군으로부터 선택된다.

화학식 (Ib)의 한 실시양태에서, Y³은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:

한 실시양태에서, 본원에 개시된 화합물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:

8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

8-(7-브로모이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

8-(7-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

8-(6-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-8-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

6,6-디메틸-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

3-메틸-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

3-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

8-(7-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-6,6-디메틸-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

3-페닐-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

3,6,6-트리메틸-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

6,6-디메틸-8-(6-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-8-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-1,3-디온,

6,6-디메틸-3-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

6,6-디메틸-3-페닐-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

8-(7-브로모이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-6,6-디메틸-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,

8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-1-온,

2-메틸-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데스-1-엔-4-온,

1-(9-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)에탄-1-온, 및

8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-온;

또는 그의 제약상 허용되는 염.

또한, 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 담체를 포함하는 조성물이 본원에 기재된다.

또한, IDO를 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 접촉시키는 것을 포함하는, IDO 효소의 활성을 억제하는 방법이 본원에 기재된다.

또한, TDO를 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 접촉시키는 것을 포함하는, TDO 효소의 활성을 억제하는 방법이 본원에 기재된다.

또한, IDO 및 TDO를 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염과 접촉시키는 것을 포함하는, IDO 효소 및 TDO 효소 둘 다의 활성을 억제하는 방법이 본원에 기재된다.

또한 환자에게 유효량의 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 IDO 및/또는 TDO 활성과 연관된 면역억제를 억제하는 방법이 본원에 기재된다.

또한, 환자에게 유효량의 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 암, 바이러스 감염, 우울증, 신경변성 장애, 외상, 연령-관련 백내장, 기관 이식 거부 또는 자가면역 질환을 치료하는 잠재적 방법이 본원에 기재된다.

또한, 환자에게 유효량의 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 흑색종을 치료하는 잠재적 방법이 본원에 기재된다.

추가로, 요법에 사용하기 위한, 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 본원에 기재된다. 한 실시양태에서, 요법에 사용하기 위한 의약의 제조를 위한, 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도가 본원에 기재된다.

본원에 사용된 바와 같이, "알킬"은 1 내지 18개의 탄소 원자, 또는 보다 구체적으로, 1 내지 12개의 탄소 원자의 분지형- 및 직쇄형 둘 다의 포화 지방족 탄화수소기를 지칭한다. 이러한 기의 예는 메틸 (Me), 에틸 (Et), n-프로필 (Pr), n-부틸 (Bu), n-펜틸, n-헥실 및 그의 이성질체 예컨대 이소프로필 (i-Pr), 이소부틸 (i-Bu), sec-부틸 (s-Bu), tert-부틸 (t-Bu), 이소펜틸, 및 이소헥실을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 알킬 기는 본원에 정의된 바와 같이 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다. "C_1-6알킬"은 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 본원에 정의된 알킬 기를 지칭한다.

"아릴"은 6 내지 14개의 고리 탄소 원자, 또는 보다 구체적으로, 6 내지 10개의 고리 탄소 원자를 포함하는 방향족 모노시클릭 또는 멀티시클릭 고리 모이어티를 지칭한다. 모노시클릭 아릴 고리는 페닐을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 멀티시클릭 고리는 나프틸 및 비시클릭 고리를 포함하나, 이에 제한되지는 않으며, 여기서 페닐은 C_5-7시클로알킬 또는 C_5-7시클로알케닐 고리에 융합된다. 아릴 기는 본원에 정의된 바와 같이 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다. 결합은 임의의 고리의 임의의 탄소 원자를 통할 수 있다.

"시클로알킬"은 명시된 수의 탄소 원자를 갖는 모노시클릭 포화 카르보시클릭 고리를 지칭한다. 예를 들면, C_3-7 시클로알킬은 3 내지 7개의 탄소 원자를 갖는 본원에 정의된 바와 같은 시클로알킬 기를 지칭한다. 시클로알킬의 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실 및 시클로헵타닐을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 시클로알킬 기는 본원에 정의된 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다.

"할로" 또는 "할로겐"은 달리 나타내지 않는 한 플루오로, 클로로, 브로모 또는 아이오도를 지칭한다.

"헤테로사이클" 또는 "헤테로시클릴"은 적어도 1개의 고리 헤테로원자 및 적어도 1개의 고리 탄소 원자를 갖는 포화, 부분 불포화 또는 방향족 고리 모이어티를 지칭한다. 한 실시양태에서, 헤테로원자는 산소, 황 또는 질소이다. 1개 초과의 헤테로원자를 함유하는 헤테로사이클은 상이한 헤테로원자를 함유할 수 있다. 헤테로시클릴 모이어티는 모노시클릭 및 멀티시클릭 (예를 들어, 비시클릭) 둘 다의 고리 모이어티를 포함한다. 비시클릭 고리 모이어티는 융합, 스피로사이클 및 가교된 비시클릭 고리를 포함하고, 고리 중 어느 하나에 1개 이상의 헤테로원자를 포함할 수 있다. 분자의 나머지에 부착된 고리는 헤테로원자를 함유하거나 함유하지 않을 수 있다. 또한 비시클릭 헤테로사이클의 고리는 포화, 부분 불포화 또는 방향족일 수 있다. 헤테로사이클은 고리 탄소 원자, 고리 산소 원자 또는 고리 질소 원자를 통해 분자의 나머지에 부착될 수 있다. 헤테로사이클의 비제한적 예는 하기 기재된다.

한 실시양태에서, 부분 불포화 및 방향족 4-7원 모노시클릭 헤테로시클릴 모이어티는 2,3-디히드로-1,4-디옥시닐, 디히드로피라닐, 디히드로피라지닐, 디히드로피리다지닐, 디히드로피리디닐, 디히드로피리미디닐, 푸라닐, 이미다졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 옥사디아졸릴, 옥사졸릴, 피라닐, 피라지닐, 피라졸릴, 피리다지닐, 피리디닐, 피리미디닐, 피롤릴, 테트라히드로피라지닐, 테트라히드로피리다지닐, 테트라히드로피리디닐, 테트라히드로피리미디닐, 테트라졸릴, 티아디아졸릴, 티아졸릴, 티에닐, 티오페닐 및 트리아졸릴을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

한 실시양태에서, 포화 4-7원 모노시클릭 헤테로시클릴 모이어티는 아제티디닐, 1,4-디옥사닐, 헥사히드로아제피닐, 모르폴리닐, 1,4-옥사제파닐, 옥사졸리디닐, 옥세타닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 피리딘-2-오닐, 피롤리디닐, 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로피라닐, 티오모르폴리닐, 테트라히드로티에닐 및 테트라히드로티오페닐을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 한 실시양태에서, 포화 4-7원 모노시클릭 헤테로시클릴은 아제티디닐이다.

헤테로시클릭 기는 본원에 정의된 바와 같이 1개 이상의 치환기로 임의로 치환될 수 있다.

"임의로 치환된"은 "비치환 또는 치환된"을 지칭하고, 따라서, 본원에 기재된 일반적 구조 화학식은 명시된 임의적인 치환기(들)를 함유하는 화합물 뿐만 아니라 임의적인 치환기(들)을 함유하지 않는 화합물을 포괄한다. 각각의 치환기는 일반적 구조 화학식 정의 내에 존재할 때마다 독립적으로 정의된다.

다형성

화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 (그의 염 및 용매화물 포함)은 결정질 형태, 비-결정질 형태 또는 그의 혼합물로 존재할 수 있다. 화합물 또는 그의 염 또는 용매화물은 또한 다형성, 즉 상이한 결정질 형태를 발생시키는 능력을 나타낼 수 있다. 이들 다양한 결정질 형태는 전형적으로 "다형체"로 공지되어 있다. 다형체는 동일한 화학적 조성을 갖지만, 결정질 고체 상태의 패킹, 기하학적 배열 및 다른 서술적 특성이 상이하다. 따라서 다형체는 상이한 물리적 특성 예컨대 형상, 밀도, 경도, 변형성, 안정성, 및 용해 특성을 가질 수 있다. 다형체는 전형적으로 상이한 융점, IR 스펙트럼 및 X선 분말 회절 패턴을 나타내며, 이들 모두는 확인에 사용될 수 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는, 예를 들어 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물을 결정화/재결정화하는데 사용되는 조건을 변화시키거나 조정함으로써 상이한 다형체가 제조될 수 있음을 인지할 것이다.

광학 이성질체 - 부분입체이성질체 - 기하 이성질체 - 호변이성질체

화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물의 다양한 이성질체가 본원에 포함된다. 용어 "이성질체"는 동일한 조성 및 분자량을 갖지만, 물리적 및/또는 화학적 특성이 상이한 화합물을 지칭한다. 구조적인 차이는 구성 (기하 이성질체) 또는 편광면을 회전시키는 능력 (입체이성질체)에 있을 수 있다.

입체이성질체에 관해서, 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물은 1개 이상의 비대칭 탄소 원자를 가질 수 있고, 라세미 혼합물로서 또는 개별 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체로서 발생할 수 있다. 모든 이러한 이성질체 형태는 그의 혼합물을 포함하여 본원에 포함된다. 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물이 이중 결합을 함유하는 경우, 치환기는 E 또는 Z 배위로 존재할 수 있다. 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물이 이치환된 시클로알킬을 함유하는 경우, 시클로알킬 치환기는 시스- 또는 트랜스- 배위를 가질 수 있다.

화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물의 임의의 비대칭 원자 (예를 들면, 탄소)는 라세미 혼합물 또는 거울상이성질체적으로 풍부한, 예를 들어 (R)-, (S)- 또는 (R,S)-배위에 존재할 수 있다. 특정 실시양태에서, 각각의 비대칭 원자는 (R)- 또는 (S)- 배위로 적어도 50 % 거울상이성질체 과잉률, 적어도 60 % 거울상이성질체 과잉률, 적어도 70 % 거울상이성질체 과잉률, 적어도 80 % 거울상이성질체 과잉률, 적어도 90 % 거울상이성질체 과잉률, 적어도 95 % 거울상이성질체 과잉률 또는 적어도 99 % 거울상이성질체 과잉률을 갖는다. 불포화 이중 결합을 갖는 원자에서의 치환기는 가능한 경우에, 시스- (Z)- 또는 트랜스- (E)- 형태로 존재할 수 있다.

화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물은 가능한 이성질체, 회전이성질체, 회전장애이성질체, 호변이성질체 또는 그의 혼합물 중 하나의 형태로, 예를 들어 실질적으로 순수한 기하 (시스 또는 트랜스) 이성질체, 부분입체이성질체, 광학 이성질체 (대장체), 라세미체 또는 그의 혼합물로서 존재할 수 있다.

이성질체의 임의의 생성된 혼합물은 구성성분의 물리화학적 차이에 기초하여, 예를 들어 크로마토그래피 및/또는 분별 결정화에 의해, 순수한 또는 실질적으로 순수한 기하 또는 광학 이성질체, 부분입체이성질체, 라세미체로 분리될 수 있다.

실시예 또는 중간체의 최종 화합물의 임의의 생성된 라세미체는 공지된 방법에 의해, 예를 들어 광학 활성 산 또는 염기를 사용하여 수득된 그의 부분입체이성질체 염을 분리하고, 광학 활성 산성 또는 염기성 화합물을 유리시키는 것에 의해, 광학 대장체로 분해될 수 있다. 따라서, 특히, 예를 들어 광학 활성 산, 예를 들어 타르타르산, 디벤조일 타르타르산, 디아세틸 타르타르산, 디-O,O'-p-톨루오일 타르타르산, 만델산, 말산 또는 캄포르-10-술폰산을 사용하는 형성된 염의 분별 결정화에 의해, 본 발명의 화합물을 그의 광학 대장체로 분해하기 위해, 염기성 모이어티가 사용될 수 있다. 라세미 화합물은 또한 키랄 크로마토그래피, 예를 들어 키랄 흡착제를 사용하는 고압 액체 크로마토그래피 (HPLC)에 의해 분해될 수 있다.

본원에 기재된 화합물 중 일부는 상이한 수소의 부착 지점을 갖도록 존재할 수 있으며, 이는 호변이성질체로서 지칭된다. 예를 들어, 카르보닐 -CH₂C(O)- 기를 포함하는 화합물 (케토 형태)은 히드록실 -CH=C(OH)- 기 (엔올 형태)를 형성하기 위해 호변이성질현상을 경험할 수 있다. 개별적으로 케토 및 엔올 형태 둘 다 뿐만 이나라 그의 혼합물은 본 발명의 범위 내에 포함된다.

동위원소 변형

화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물은 비표지된 형태, 뿐만 아니라 동위원소 표지된 형태를 포함한다. 동위원소 표지된 화합물은 1개 이상의 원자가 선택된 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자에 의해 대체된 것을 제외하고는 본원에 주어진 화학식에 의해 도시된 구조를 갖는다. 본원에 개시된 화합물에 도입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 플루오린, 아이오딘 및 염소의 동위원소, 예컨대 ²H (즉, 중수소 또는 "D"), ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹³N, ¹⁵N, ¹⁵O, ¹⁷O, ¹⁸O, ³²P, ³⁵S, ¹⁸F, ¹²³I, ¹²⁵I 및 ³⁶Cl을 포함한다. 본 발명은 본원에 정의된 바와 같은 다양한 동위원소 표지된 화합물, 예를 들어 방사성 동위원소, 예컨대 ³H 및 ¹⁴C가 존재하는 화합물, 또는 비-방사성 동위원소, 예컨대 ²H 및 ¹³C이 존재하는 화합물을 포함한다. 이러한 동위원소 표지된 화합물은 대사 연구 (¹⁴C 사용), 반응 동역학 연구 (예를 들어 ²H 또는 ³H 사용), 검출 또는 영상화 기술, 예컨대 약물 또는 기질 조직 분포 검정을 포함한 양전자 방출 단층촬영 (PET) 또는 단일-광자 방출 컴퓨터 단층촬영 (SPECT), 또는 환자의 방사성 치료에 유용하다. 특히, 양전자 방출 동위원소, 예컨대 ¹¹C, ¹⁸F, ¹⁵O 및 ¹³N에 의한 치환은 PET 또는 SPECT 연구를 위해 특히 바람직할 수 있다.

화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 동위 원소 표지 화합물은 일반적으로 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 통상적인 기술에 의해 제조될 수 있다. 추가로, 보다 무거운 동위원소, 특히 중수소 (즉, ²H 또는 D)로의 치환은 보다 큰 대사 안정성으로부터 생성된 특정의 치료 이점, 예를 들어 생체내 반감기의 증가 또는 투여량 요건의 감소 또는 치료 지수의 개선을 제공할 수 있다.

제약상 허용되는 염

용어 "제약상 허용되는 염"은 무기 또는 유기 염기 및 무기 또는 유기 산을 포함하여, 제약상 허용되는 비-독성 염기 또는 산으로부터 제조된 염을 지칭한다. 무기 염기로부터 유도된 염은 알루미늄, 암모늄, 칼슘, 구리, 제2철, 제1철, 리튬, 마그네슘, 제2망가니즈 염, 제1망가니즈, 칼륨, 나트륨, 아연 등을 포함한다. 특정한 실시양태는 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 칼륨 및 나트륨 염을 포함한다. 고체 형태에서 염은 1종 초과의 결정 구조가 존재할 수 있고, 또한 수화물 형태로 존재할 수 있다. 제약상 허용되는 유기 비-독성 염기로부터 유도된 염은 1급, 2급, 및 3급 아민의 염, 자연 발생 치환된 아민을 포함하는 치환된 아민, 시클릭 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예컨대 아르기닌, 베타인, 카페인, 콜린, N,N'-디벤질에틸렌-디아민, 디에틸아민, 2-디에틸아미노에탄올, 2-디메틸아미노에탄올, 에탄올아민, 에틸렌디아민, N-에틸피페리딘 N-에틸-모르폴린, 글루카민, 글루코사민, 히스티딘, 히드라바민, 이소프로필아민, 리신, 메틸글루카민, 모르폴린, 피페라진, 피페리딘, 폴리아민 수지, 프로카인, 퓨린, 테오브로민, 트리에틸아민, 트리메틸아민, 트리프로필아민, 트로메타민 등을 포함한다.

화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물이 염기성인 경우, 염은 무기 및 유기 산을 포함하여, 제약상 허용되는 비-독성 산으로부터 제조될 수 있다. 이러한 산은 아세트산, 벤젠술폰산, 벤조산, 캄포르술폰산, 시트르산, 에탄술폰산, 푸마르산, 글루콘산, 글루탐산, 브로민화수소산, 염산, 이세티온산, 락트산, 말레산, 말산, 만델산, 메탄술폰산, 뮤신산, 질산, 파모산, 판토텐산, 인산, 숙신산, 황산, 타르타르산, p-톨루엔술폰산, 트리플루오로아세트산 (TFA) 등을 포함한다. 특정한 실시양태는 시트르산, 브로민화수소산, 염산, 말레산, 인산, 황산, 푸마르산, 타르타르산 및 트리플루오로아세트산을 포함한다. 본원에 사용된 바와 같이, 본원에 개시된 화합물에 대한 언급은 그의 제약상 허용되는 염을 또한 포함하도록 의도된 것으로 이해될 것이다.

사용 방법

본원에 개시된 이들 화합물은 IDO- 및/또는 TDO-연관 질환의 잠재적 치료 또는 예방에 유용할 수 있다. 한 실시양태에서, 이들 화합물은 IDO 효소, TDO 효소 또는 IDO 및 TDO 효소 둘 다의 활성을 잠재적으로 억제할 수 있다.

예를 들어, 본원에 개시된 화합물은 유효량의 화합물을 투여함으로써 효소의 조정을 필요로 하는 세포에서 또는 개체에서 IDO 및/또는 TDO의 활성을 억제하는데 잠재적으로 사용될 수 있다. IDO 및/또는 TDO를 발현하는 세포를 함유하는 시스템 예컨대 조직, 살아있는 유기체 또는 세포 배양물에서 트립토판의 분해를 억제하는 방법이 본원에 추가로 기재된다. 일부 실시양태에서, 본 발명은 유효량의 본원에 제공된 화합물 또는 조성물을 투여함으로써 포유동물에서 세포외 트립토판 수준을 변경 (예를 들어, 증가)시키는 방법을 제공한다. 트립토판 수준 및 트립토판 분해를 측정하는 방법은 관련 기술분야에서 상용적이다.

환자에게 유효량의 본원에 언급된 화합물 또는 조성물을 투여함으로써 환자에서 면역억제 예컨대 IDO- 및/또는 TDO-매개 면역억제를 억제하는 방법이 또한 본원에 기재된다. IDO- 및/또는 TDO-매개 면역억제는 예를 들어 암, 종양 성장, 전이, 바이러스 감염, 바이러스 복제, 등과 연관된 바 있다.

치료를 필요로 하는 개체에게 유효량 또는 용량의 본원에 개시된 화합물 또는 그의 제약 조성물을 투여함으로써 개체 (예를 들어, 환자)에서 IDO 및/또는 TDO의 비정상적 활성 및/또는 과다발현을 비롯한 활성 또는 발현과 연관된 질환의 잠재적 치료의 방법이 또한 본원에 기재된다. 예시적인 질환은 IDO 및/또는 TDO 효소의 발현 또는 활성 예컨대 과다 발현 또는 비정상적 활성에 직접적으로 또는 간접적으로 연관된 임의의 질환, 장애 또는 상태를 포함한다. IDO- 및/또는 TDO-연관 질환은 또한 효소 활성을 조정함으로써 예방, 호전 또는 치료될 수 있는 임의의 질환, 장애 또는 상태를 포함할 수 있다. IDO- 및/또는 TDO-연관 질환의 예는 암, 바이러스 감염 예컨대 HIV 및 HCV, 우울증, 신경변성 장애 예컨대 알츠하이머병 및 헌팅턴병, 외상, 연령-관련 백내장, 기관 이식 (예를 들어, 기관 이식 거부), 및 천식, 류마티스 관절염, 다발성 경화증, 알레르기성 염증, 염증성 장 질환, 건선 및 전신 홍반성 루푸스를 비롯한 자가면역 질환을 포함한다. 본원의 방법에 의해 잠재적으로 치료가능한 암의 예는 결장암, 췌장암, 유방암, 전립선암, 폐암, 뇌암, 난소암, 자궁경부암, 고환암, 신장암, 두경부암, 림프종, 백혈병, 흑색종 등의 암을 포함한다. 본 발명의 화합물은 또한 비만 및 허혈의 치료에 유용할 수 있다. 본원에 사용된 용어 "세포"는 시험관내, 생체외 또는 생체내에 있는 세포를 지칭하도록 의도된다. 일부 실시양태에서, 생체외 세포는 유기체 예컨대 포유동물로부터 절제된 조직 샘플의 일부일 수 있다. 일부 실시양태에서, 시험관내 세포는 세포 배양물 중 세포일 수 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 세포는 유기체 예컨대 포유동물 내의 살아있는 세포이다.

본원에 사용된 용어 "접촉시키는"은 시험관내 시스템 또는 생체내 시스템에서 제시된 모이어티를 함께 모으는 것을 지칭한다. 예를 들어, IDO 효소를 본원에 개시된 화합물과 "접촉시키는" 것은 개체 또는 환자, 예컨대 인간에게 본 발명의 화합물을 투여하는 것 뿐만 아니라 예를 들어 본 발명의 화합물을 IDO 및/또는 TDO 효소를 함유하는 세포 또는 정제된 제제를 함유하는 샘플에 도입하는 것을 포함한다.

본원에 개시된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 투여되는 대상체는 일반적으로 포유동물, 예컨대 인간, 남성 또는 여성이다. 대상체는 또한 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 마우스, 어류 및 조류를 지칭한다. 한 실시양태에서, 대상체는 인간이다.

본원에 사용된 용어 "치료" 및 "치료하는"은 IDO 및/또는 TDO 효소 활성과 연관될 수 있는 질환 또는 장애의 진행을 늦추거나, 중단시키거나, 중지시키거나, 제어하거나, 또는 정지시킬 수 있는 모든 방법을 지칭한다. 용어는 반드시 모든 질환 또는 장애 증상의 완전한 제거를 나타내는 것은 아니다. 용어는 또한 언급된 상태, 특히 이러한 질환 또는 장애에 소인이 있는 대상체에서의 잠재적 예방 요법을 포함한다.

용어 화합물"의 투여" 및 또는 "을 투여하는 것"은 본원에 기재된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 상기의 조성물을 대상체에게 제공하는 것을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

대상체에 투여되는 화합물의 양은 대상체에서 IDO 및/또는 TDO 효소 활성을 억제하기에 충분한 양이다. 한 실시양태에서, 화합물의 양은 대상 화합물이 연구원, 수의사, 의사 또는 다른 임상의에 의해 추구되는 조직, 시스템, 동물 또는 인간의 생물학적 또는 의학적 반응을 도출해 낼 양으로 투여되는 "유효량"일 수 있다. 유효량은 화합물의 투여와 관련된 독성 및 안전성의 고찰을 반드시 포함하지는 않는다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 유효량의 본원에 개시된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염으로 현재 장애를 앓는 대상체를 치료함으로써, 또는 장애를 앓을 가능성이 있는 대상체를 예방적으로 치료함으로써, IDO 및/또는 TDO 효소 활성과 연관된 생리학적 장애에 영향을 미칠 수 있을 것이다.

화합물의 유효량은 선택된 특정한 화합물 (예를 들어, 화합물의 효력, 효능 및 반감기를 고려함); 선택된 투여 경로, 치료할 상태; 치료할 상태의 중증도; 치료할 대상체의 연령, 사이즈, 체중 및 신체 상태; 치료할 대상체의 병력; 치료 지속기간; 공동 요법의 성질; 목적하는 치료 효과; 및 기타 인자에 따라 달라질 것이고, 통상의 기술자에 의해 상용적으로 결정될 수 있다.

본원에 개시된 화합물은 경구 및 비경구 투여를 포함한 임의의 적합한 경로에 의해 투여될 수 있다. 비경구 투여는 전형적으로 주사 또는 주입에 의하고, 정맥내, 근육내 및 피하 주사 또는 주입을 포함한다.

본원에 개시된 화합물은 1회, 또는 다수의 용량이 주어진 기간 동안 다양한 시간 간격으로 투여되는 투여 요법에 따라 투여될 수 있다. 예를 들어, 용량은 1일에 1, 2, 3, 또는 4회 투여될 수 있다. 용량은 목적하는 치료 효과가 달성될 때까지 또는 목적하는 치료 효과를 유지하기 위해 무기한으로 투여될 수 있다. 본원에 개시된 화합물에 적합한 투여 요법은 그 화합물의 약동학적 특성, 예컨대 흡수, 분포 및 반감기에 따라 달라지며, 이는 통상의 기술자에 의해 결정될 수 있다. 또한, 본원에 개시된 화합물에 적합한 투여 요법 (이러한 요법이 투여되는 지속시간 포함)은 통상의 기술자의 지식 및 숙련도 내에서 치료할 질환 또는 상태, 질환 또는 상태의 중증도, 치료할 대상체의 연령 및 신체 상태, 치료할 대상체의 병력, 공동 요법의 성질, 목적하는 치료 효과 및 기타 인자에 따라 달라진다. 추가로, 이러한 통상의 기술자는 적합한 투여 요법이 투여 요법에 대한 개별 대상체의 반응에 따라 또는 시간의 경과에 따라 개별 대상체가 변화를 요구함에 따라 조정을 필요로 할 수 있다는 것을 이해할 것이다. 전형적인 1일 투여량은 선택된 특정한 투여 경로에 따라 달라질 수 있다. 대략 체중 70 kg의 인간을 위한 경구 투여를 위한 전형적 1일 투여량은 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 약 0.1 mg 내지 약 2 g 또는 보다 구체적으로 0.1 mg 내지 500 mg, 또는 보다 더 구체적으로 0.2 mg 내지 100 mg의 범위에 있을 것이다.

본 발명의 한 실시양태는 IDO 및/또는 TDO 효소 활성과 연관된 질환 또는 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물의 투여를 포함하는 IDO 및/또는 TDO 효소 활성과 연관된 질환 또는 장애를 잠재적으로 치료하는 방법을 제공한다. 한 실시양태에서, IDO 및/또는 TDO 효소와 연관된 질환 또는 장애는 세포 증식 장애이다.

한 실시양태에서, 요법에서의 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물의 사용이 본원에 기재된다. 화합물은 억제를 필요로 하는 대상체, 예컨대 포유동물에게 유효량의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 IDO 및/또는 TDO 효소 활성을 억제하는 방법에 유용할 수 있다.

한 실시양태에서, IDO 및/또는 TDO 효소 활성과 연관된 장애 또는 질환의 잠재적 치료에 사용하기 위한, 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 제약 조성물이 본원에 기재된다.

조성물

본원에 사용된 용어 "조성물"은 명시된 화합물을 명시된 양으로 포함하는 투여 형태, 뿐만 아니라 명시된 화합물의 명시된 양으로의 조합으로부터 직접적으로 또는 간접적으로 생성되는 임의의 투여 형태를 포괄하는 것으로 의도된다. 이러한 용어는 화학식 (I) 또는 (Ia)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 1종 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 투여 형태를 포함하도록 의도된다. 따라서, 본 발명의 조성물은 본 발명의 화합물 및 1종 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 혼합하는 것에 의해 제조되는 임의의 조성물을 포괄한다. "제약상 허용되는"은 본원에 개시된 화합물 및 조성물의 다른 성분과 상용성인 담체 또는 부형제를 의미한다.

한 실시양태에서, 화학식 (I) 또는 (Ia)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 1종 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 조성물이 본원에 개시된다. 조성물은 벌크 형태로 제조 및 포장될 수 있고, 여기서 유효량의 본 발명의 화합물이 추출되고, 이어서 예컨대 분말 또는 시럽으로 대상체에게 주어질 수 있다. 대안적으로, 조성물은 단위 투여 형태로 제조 및 포장될 수 있으며, 여기서 각각의 물리적 개별 단위는 유효량의 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물을 함유한다. 단위 투여 형태로 제조되는 경우, 본 발명의 조성물은 전형적으로 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 약 0.1 mg 내지 2 g, 또는 보다 구체적으로 0.1 mg 내지 500 mg, 또는 보다 더 구체적으로 0.2 mg 내지 100 mg으로 포함한다.

본원에 개시된 화합물 및 제약상 허용되는 담체 또는 부형제(들)는 전형적으로 목적하는 투여 경로에 의해 대상체에게 투여하기 위해 적합화된 투여 형태로 제제화될 것이다. 예를 들어, 투여 형태는 (1) 경구 투여에 적합화된 것, 예컨대 정제, 캡슐, 캐플릿, 환제, 트로키, 분말, 시럽, 엘릭시르, 현탁액, 용액, 에멀젼, 사쉐 및 카쉐; 및 (2) 비경구 투여에 적합화된 것, 예컨대 멸균 용액, 현탁액 및 재구성용 분말을 포함한다. 적합한 제약상 허용되는 담체 또는 부형제는 선택된 특정한 투여 형태에 따라 달라질 것이다. 또한, 적합한 제약상 허용되는 담체 또는 부형제는 이들이 조성물 중에 제공할 수 있는 특정한 기능으로 인해 선택될 수 있다. 예를 들어, 특정의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제는 균일한 투여 형태의 제조를 용이하게 하는 그의 능력으로 인해 선택될 수 있다. 특정의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제는 안정한 투여 형태의 제조를 용이하게 하는 그의 능력으로 인해 선택될 수 있다. 특정의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제는 대상체에게 투여되었을 때 본원에 개시된 화합물을 한 기관 또는 신체의 한 부분으로부터 또 다른 기관 또는 신체의 또 다른 부분으로 운반 또는 수송하는 것을 용이하게 하는 그의 능력으로 인해 선택될 수 있다. 특정의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제는 환자 순응도를 증진시키는 그의 능력으로 인해 선택될 수 있다.

적합한 제약상 허용되는 부형제는 하기 유형의 부형제를 포함한다: 희석제, 윤활제, 결합제, 붕해제, 충전제, 활택제, 과립화제, 코팅제, 습윤제, 용매, 공-용매, 현탁화제, 유화제, 감미제, 향미제, 향미 차폐제, 착색제, 케이킹방지제, 함습제, 킬레이트화제, 가소제, 점도 증가제, 항산화제, 보존제, 안정화제, 계면활성제, 및 완충제.

통상의 기술자는 적합한 제약상 허용되는 담체 및 부형제를 본 발명에 사용하기에 적절한 양으로 선택하는 것에 관한 관련 기술분야의 지식 및 기술을 보유한다. 또한, 제약상 허용되는 담체 및 부형제가 기재되어 있고 적합한 제약상 허용되는 담체 및 부형제를 선택하는데 유용할 수 있는, 통상의 기술자가 이용가능한 수많은 자원이 존재한다. 예는 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company), The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited), and The Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)]을 포함한다.

본 발명의 조성물은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 기술 및 방법을 사용하여 제조된다. 기술분야에서 통상적으로 사용되는 일부 방법은 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)]에 기재되어 있다.

한 실시양태에서, 본 발명은 유효량의 본 발명의 화합물 및 희석제 또는 충전제를 포함하는 고체 경구 투여 형태, 예컨대 정제 또는 캡슐에 관한 것이다. 적합한 희석제 및 충전제는 락토스, 수크로스, 덱스트로스, 만니톨, 소르비톨, 전분 (예를 들어, 옥수수 전분, 감자 전분 및 예비젤라틴화 전분), 셀룰로스 및 그의 유도체 (예를 들어, 미세결정질 셀룰로스), 황산칼슘 및 이염기성 인산칼슘을 포함한다. 경구 고체 투여 형태는 결합제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 결합제는 전분 (예를 들어, 옥수수 전분, 감자 전분 및 예비젤라틴화 전분), 젤라틴, 아카시아, 알긴산나트륨, 알긴산, 트라가칸트, 구아 검, 포비돈, 및 셀룰로스 및 그의 유도체 (예를 들어, 미세결정질 셀룰로스)를 포함한다. 경구 고체 투여 형태는 붕해제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 붕해제는 크로스포비돈, 소듐 스타치 글리콜레이트, 크로스카르멜로스, 알긴산, 및 소듐 카르복시메틸 셀룰로스를 포함한다. 경구 고체 투여 형태는 윤활제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 윤활제는 스테아르산, 스테아르산마그네슘, 스테아르산칼슘 및 활석을 포함한다.

적절한 경우에, 경구 투여를 위한 투여 단위 제제는 마이크로캡슐화될 수 있다. 조성물은 또한 방출을 지연 또는 지속시키기 위해, 예를 들어 미립자 물질을 중합체, 왁스 등으로 코팅하거나 포매시킴으로써 제조될 수 있다.

본원에 개시된 화합물은 또한 표적화가능한 약물 담체로서 가용성 중합체와 커플링될 수 있다. 이러한 중합체는 폴리비닐피롤리돈, 피란공중합체, 폴리히드록시프로필메타크릴아미드페놀, 폴리히드록시에틸아스파르트아미드페놀, 또는 팔미토일 잔기로 치환된 폴리에틸렌옥시드폴리리신을 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물은 약물의 제어 방출을 달성하는데 유용한 한 부류의 생체분해가능한 중합체, 예를 들어 폴리락트산, 폴엡실론 카프롤락톤, 폴리히드록시 부티르산, 폴리오르토에스테르, 폴리아세탈, 폴리디히드로피란, 폴리시아노아크릴레이트, 및 히드로겔의 가교 또는 양친매성 블록 공중합체에 커플링될 수 있다.

한 실시양태에서, 본 발명은 액체 경구 투여 형태에 관한 것이다. 경구 액체 예컨대 용액, 시럽 및 엘릭시르는 주어진 양이 미리 결정된 양의 본원에 개시된 화합물을 함유하도록 투여 단위 형태로 제조될 수 있다. 시럽은 본 발명의 화합물을, 적합하게는 향미 수용액 중에 용해시켜 제조될 수 있으며; 한편 엘릭시르는 비-독성 알콜성 비히클의 사용을 통해 제조된다. 현탁액은 본원에 개시된 화합물을 비-독성 비히클 중에 분산시킴으로써 제제화될 수 있다. 가용화제 및 유화제, 예컨대 에톡실화 이소스테아릴 알콜 및 폴리옥시 에틸렌 소르비톨 에테르, 보존제, 향미 첨가제, 예컨대 페퍼민트 오일 또는 다른 천연 감미제 또는 사카린 또는 다른 인공 감미제 등이 또한 첨가될 수 있다.

한 실시양태에서, 본 발명은 비경구 투여를 위한 조성물에 관한 것이다. 비경구 투여에 적합한 조성물은 항산화제, 완충제, 정박테리아제, 및 제제를 의도된 수용자의 혈액과 등장성이도록 하는 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 주사 용액; 및 현탁화제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비-수성 멸균 현탁액을 포함한다. 조성물은 단위-용량 또는 다중-용량 용기, 예를 들어 밀봉된 앰플 및 바이알로 제공될 수 있고, 사용 직전에 멸균 액체 담체, 예를 들어 주사용수의 첨가만이 필요한 냉동 건조 (동결건조) 상태로 저장될 수 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁액은 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조될 수 있다.

조합물

본원에 개시된 화합물은 특정한 질환 또는 상태 (예를 들어, 세포 증식 장애)의 예방, 치료, 제어, 호전 또는 위험의 감소에 사용되는, 다른 항암제를 포함하나 이에 제한되지는 않는 1종 이상의 다른 활성제와 조합되어 사용될 수 있다. 한 실시양태에서, 본원에 개시된 화합물은 본원에 개시된 화합물이 유용한 특정한 질환 또는 상태의 예방, 치료, 제어, 호전 또는 위험의 감소에 사용하기 위한, 1종 이상의 다른 항암제와 조합된다. 이러한 다른 활성제는 이를 위해 통상적으로 사용되는 경로 및 양으로, 본 발명의 화합물과 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다.

본원에 개시된 화합물이 1종 이상의 다른 활성제와 동시에 사용되는 경우에, 본원에 개시된 화합물 뿐만 아니라 이러한 다른 활성제를 함유하는 조성물이 고려된다. 따라서, 본 발명의 조성물은 본원에 개시된 화합물 뿐만 아니라, 1종 이상의 다른 활성 성분을 또한 함유하는 것을 포함한다. 본원에 개시된 화합물은 1종 이상의 다른 치료제(들)와 동시에, 또는 그 전에 또는 그 후에 투여될 수 있다. 본원에 개시된 화합물은 다른 작용제(들)와 개별적으로, 동일하거나 상이한 투여 경로에 의해, 또는 동일한 제약 조성물로 함께 투여될 수 있다.

조합 제제로서 제공되는 생성물은 동일한 제약 조성물에서 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 및 1종 이상의 다른 활성제(들)를 함께 포함하는 조성물, 또는 개별 형태로, 예를 들어 키트 형태로 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 및 1종 이상의 다른 치료제(들)을 포함하는 조성물을 포함한다.

본원에 개시된 화합물 대 제2 활성제의 중량비는 달라질 수 있고, 각각의 작용제의 유효 용량에 좌우될 것이다. 일반적으로, 각각의 유효 용량이 사용될 것이다. 따라서, 예를 들어 본원에 기재된 화합물이 또 다른 작용제와 조합되는 경우에, 다른 작용제에 대한 본원에 기재된 화합물의 중량비는 일반적으로 약 1000:1 내지 약 1:1000의 범위, 예컨대 약 200:1 내지 약 1:200일 것이다. 본원에 개시된 화합물 및 다른 활성제의 조합물은 일반적으로 또한 상기 언급된 범위 내일 것이지만, 그러나 각각의 경우에, 각각의 활성제의 유효 용량이 사용되어야 한다. 이러한 조합물에서, 본원에 개시된 화합물 및 다른 활성제는 개별적으로 또는 함께 투여될 수 있다. 추가로, 1종의 요소의 투여는 다른 작용제(들)의 투여 전, 그와 동시, 또는 그 후일 수 있다.

한 실시양태에서, 본 발명은 요법에서의 동시, 개별 또는 순차적 사용을 위한 조합 제제로서 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물 및 적어도 1종의 다른 치료제를 포함하는 조성물을 제공한다. 한 실시양태에서, 요법은 IDO 및/또는 TDO 효소 활성과 연관된 질환 또는 장애의 치료이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 적어도 2종 이상의 개별 제약 조성물을 포함하는 키트를 제공하며, 이는 적어도 1종의 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물을 함유한다. 한 실시양태에서, 키트는 상기 조성물을 개별적으로 보유하기 위한 수단, 예컨대 용기, 분할된 병 또는 분할된 호일 패킷을 포함한다. 이러한 키트의 예는 정제, 캡슐 등의 포장에 전형적으로 사용되는 것과 같은 블리스터 팩이다.

본원에 개시된 키트는 다양한 투여 형태, 예를 들어, 경구 및 비경구로 투여하기 위해, 개별 조성물을 상이한 투여 간격으로 투여하기 위해, 또는 개별 조성물을 서로에 대해 적정하기 위해 사용될 수 있다. 순응도를 보조하기 위해, 본 발명의 키트는 전형적으로 투여 지침서를 포함한다.

의약이 또 다른 활성제와의 투여를 위해 제조되는, IDO 및/또는 TDO 효소 활성과 연관된 질환 또는 장애를 치료하기 위한 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물의 용도가 본원에 개시된다. 본 발명은 또한 의약이 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물과 투여되는, IDO 및/또는 TDO 효소와 연관된 질환 또는 장애를 치료하기 위한 또 다른 활성제의 용도를 제공한다.

본 발명은 또한 환자가 이전에 (예를 들어 24시간 내에) 또 다른 활성제로 치료된 바 있는, IDO 및/또는 TDO 효소 활성과 연관된 질환 또는 장애를 치료하기 위한 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물의 용도를 제공한다. 본 발명은 또한 환자가 이전에 (예를 들어 24시간 내에) 화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물로 치료된 바 있는, IDO 및/또는 TDO 효소 활성과 연관된 질환 또는 장애를 치료하기 위한 또 다른 치료제의 용도를 제공한다. 제2 작용제는 본원에 개시된 화합물을 투여하고 1주, 수주, 1개월 또는 수개월 후에 적용될 수 있다.

한 실시양태에서, 다른 활성제는 혈관 내피 성장 인자 (VEGF) 수용체 억제제, 토포이소머라제 II 억제제, 스무슨드 억제제, 알킬화제, 항종양 항생제, 항대사물, 레티노이드, 면역조정제 예컨대 비제한적으로 항암 백신, CTLA-4, LAG-3 및 PD-1 길항제로 이루어진 군으로부터 선택된다.

혈관 내피 성장 인자 (VEGF) 수용체 억제제의 예는 베바시주맙 (제넨테크(Genentech)/로슈(Roche)에 의해 상표명 아바스틴(AVASTIN) 하에 판매됨), 악시티닙, (N-메틸-2-[[3-[(파운드)-2-피리딘-2-일에테닐]-1H-인다졸-6-일]술파닐]벤즈아미드, 또한 AG013736으로 공지되고, PCT 공개 번호 WO 01/002369에 기재됨), 브리바닙 알라니네이트 ((S)-((R)-1-(4-(4-플루오로-2-메틸-1H-인돌-5-일옥시)-5-메틸피롤로[2,1-f][1,2,4]트리아진-6-일옥시)프로판-2-일)2-아미노프로파노에이트, 또한 BMS-582664로 공지됨), 모테사닙 (N-(2,3-디히드로-3,3-디메틸-1H-인돌-6-일)-2-[(4-피리디닐메틸)아미노]-3-피리딘카르복스아미드 및 PCT 공개 번호 WO 02/068470에 기재됨), 파시레오티드 (또한 SO 230으로 공지되고, PCT 공개 번호 WO 02/010192에 기재됨) 및 소라페닙 (상표명 넥사바르(NEXAVAR) 하에 판매됨)을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

토포이소머라제 II 억제제의 예는 에토포시드 (또한 VP-16 및 에토포시드 포스페이트로 공지되고 상표명 토포사르(TOPOSAR), 베페시드(VEPESID) 및 에토포포스(ETOPOPHOS) 하에 판매됨) 및 테니포시드 (또한 VM-26으로 공지되고, 상표명 부몬(VUMON) 하에 판매됨)를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

알킬화제의 예는 5-아자시티딘 (상표명 비다자(VIDAZA) 하에 판매됨), 데시타빈 (데코겐(DECOGEN)의 상표명 하에 판매됨), 테모졸로미드 (쉐링-플라우(Schering-Plough)/머크(Merck)에 의해 상표명 테모다르(TEMODAR) 및 테모달(TEMODAL) 하에 판매됨), 닥티노마이신 (또한 악티노마이신-D로 공지되고, 상표명 코스메겐(COSMEGEN) 하에 판매됨), 멜팔란 (또한 L-PAM, L-사르코리신 및 페닐알라닌 머스타드로 공지되고, 상표명 알케란(ALKERAN) 하에 판매됨), 알트레타민 (또한 헥사메틸멜라민 (HMM)으로 공지되고, 상표명 헥살렌(HEXALEN) 하에 판매됨), 카르무스틴 (상표명 BCNU 하에 판매됨), 벤다무스틴 (상표명 트레안다(TREANDA) 하에 판매됨), 부술판 (상표명 부술펙스(BUSULFEX) 및 밀레란(MYLERAN) 하에 판매됨), 카르보플라틴 (상표명 파라플라틴(PARAPLATIN) 하에 판매됨), (또한 CCNU로 공지되고, 상표명 세뉴(CeeNU) 하에 판매됨)로무스틴, 시스플라틴 (또한 CDDP로 공지되고, 상표명 플라티놀(PLATINOL) 및 플라티놀-AQ 하에 판매됨), 클로람부실 (상표명 류케란(LEUKERAN) 하에 판매됨), 시클로포스파미드 (상표명 시톡산(CYTOXAN) 및 네오사르(NEOSAR) 하에 판매됨), 다카르바진 (또한 DTIC, DIC 및 이미다졸 카르복스아미드로 공지되고, 상표명 DTIC-돔(DTIC-DOME) 하에 판매됨), (또한 헥사메틸멜라민 (HMM)으로 공지되고, 상표명 헥살렌(HEXALEN) 하에 판매됨)알트레타민, 프로카르바진 (상표명 이펙스(IFEX) 하에 판매됨)이포스파미드, (상표명 마툴란(MATULANE) 하에 판매됨), 메클로레타민 (또한 질소 머스타드, 무스틴 및 메클로로에타민 히드로클로라이드로 공지되고, 상표명 머스타르겐(MUSTARGEN) 하에 판매됨), 스트렙토조신 (상표명 자노사르(ZANOSAR) 하에 판매됨), 티오테파 (또한 티오포스포아미드, 테스파 및 TSPA로 공지되고, 상표명 티오플렉스(THIOPLEX) 하에 판매됨)를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

항종양 항생제의 예는 독소루비신 (상표명 아드리아마이신(ADRIAMYCIN) 및 루벡스(RUBEX) 하에 판매됨), 블레오마이신 (상표명 블레녹산(BLENOXANE) 하에 판매됨), 다우노루비신 (또한 다우오루비신 히드로클로라이드, 다우노마이신 및 루비도마이신 히드로클로라이드로 공지되고, 상표명 세루비딘(CERUBIDINE) 하에 판매됨), 다우노루비신 리포솜 (다우노루비신 시트레이트 리포솜, 상표명 다우녹솜(DAUNOXOME) 하에 판매됨), 미톡산트론 (또한 DHAD로 공지되고, 상표명 노반트론(NOVANTRONE) 하에 판매됨), 에피루비신 (상표명 엘렌스(ELLENCE) 하에 판매됨), 이다루비신 (상표명 이다마이신(IDAMYCIN), 이다마이신 PFS 하에 판매됨) 및 미토마이신 C (상표명 뮤타마이신(MUTAMYCIN) 하에 판매됨)를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

항대사물의 예는 클라드리빈 (2-클로로데옥시아데노신, 상표명 류스타틴(LEUSTATIN) 하에 판매됨), 5-플루오로우라실 (상표명 아드루실(ADRUCIL) 하에 판매됨), 6-티오구아닌 (상표명 퓨린톨(PURINETHOL) 하에 판매됨), 페메트렉세드 (상표명 알림타(ALIMTA) 하에 판매됨), 시타라빈 (또한 아라비노실시토신 (Ara-C)으로 공지되고, 상표명 시토사르(CYTOSAR)-U 하에 판매됨), 시타라빈 리포솜 (또한 리포솜 Ara-C로 공지되고, 상표명 데포사이트(DEPOCYT) 하에 판매됨), 데시타빈 (상표명 다코겐(DACOGEN) 하에 판매됨), 히드록시우레아 (상표명 히드레아(HYDREA), 드록시아(DROXIA) 및 밀로셀(MYLOCEL) 하에 판매됨), 플루다라빈 (상표명 플루다라(FLUDARA) 하에 판매됨), 플록수리딘 (상표명 FUDR 하에 판매됨), 클라드리빈 (또한 2-클로로데옥시아데노신 (2-CdA)으로 공지되고, 상표명 류스타틴 하에 판매됨), 메토트렉세이트 (또한 아메토프테린, 메토트렉세이트 소듐 (MTX)으로 공지되고, 상표명 류마트렉스(RHEUMATREX) 및 트렉살(TREXALL) 하에 판매됨) 및 펜토스타틴 (상표명 니펜트(NIPENT) 하에 판매됨)를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

레티노이드의 예는 알리트레티노인 (상표명 판레틴(PANRETIN) 하에 판매됨), 트레티노인 (모두 트랜스 레티노산, 또한 ATRA로 공지되고, 상표명 베사노이드(VESANOID) 하에 판매됨), 이소트레티노인 (13-c/s-레티노산, 상표명 아큐탄(ACCUTANE), 암네스팀(AMNESTEEM), 클라라비스(CLARAVIS), 클라루스(CLARUS), 데쿠탄(DECUTAN), 이소탄(ISOTANE), 이조텍(IZOTECH), 오라탄(ORATANE), 이소트레트(ISOTRET), 및 소트레트(SOTRET) 하에 판매됨) 및 벡사로텐 (상표명 탈그레틴(TARGRETIN) 하에 판매됨)을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

"PD-1 길항제"는 암 세포 상에서 발현되는 PD-L1이 면역 세포 (T 세포, B 세포 또는 NKT 세포) 상에서 발현되는 PD-1에 결합하는 것을 차단하고, 바람직하게는 암 세포 상에서 발현되는 PD-L2가 면역 세포 발현된 PD-1에 결합하는 것을 또한 차단하는 임의의 화학적 화합물 또는 생물학적 분자를 의미한다. PD-1 및 그의 리간드에 대한 대체 명칭 또는 동의어는 하기를 포함한다: PD-1에 대하여 PDCD1, PD1, CD279 및 SLEB2; PD-L1에 대하여 PDCD1L1, PDL1, B7H1, B7-4, CD274 및 B7-H; 및 PD-L2에 대하여 PDCD1L2, PDL2, B7-DC, Btdc 및 CD273. 인간 개체를 치료하는 본 발명의 임의의 치료 방법, 의약 및 용도에서, PD-1 길항제는 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1의 결합을 차단하고, 바람직하게는 인간 PD-1에 대한 인간 PD-L1 및 PD-L2 둘 다의 결합을 차단한다. 인간 PD-1 아미노산 서열은 NCBI 로커스 번호 NP_005009에서 찾아볼 수 있다. 인간 PD-L1 및 PD-L2 아미노산 서열은 각각 NCBI 로커스 번호 NP_054862 및 NP_079515에서 찾아볼 수 있다.

본 발명의 치료 방법, 의약 및 용도 중 임의의 것에서 유용한 PD-1 길항제는 PD-1 또는 PD-L1에 특이적으로 결합하고, 바람직하게는 인간 PD-1 또는 인간 PD-L1에 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체 (mAb) 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다. mAb는 인간 항체, 인간화 항체 또는 키메라 항체일 수 있고, 인간 불변 영역을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서 인간 불변 영역은 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4 불변 영역으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 바람직한 실시양태에서, 인간 불변 영역은 IgG1 또는 IgG4 불변 영역이다. 일부 실시양태에서, 항원 결합 단편은 Fab, Fab'-SH, F(ab')2, scFv 및 Fv 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된다. PD-1 길항제의 예는 펨브롤리주맙 (상표명 키트루다(KEYTRUDA) 하에 판매됨) 및 니볼루맙 (상표명 옵디보(OPDIVO) 하에 판매됨)을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

인간 PD-1에 결합하고, 본 발명의 치료 방법, 의약 및 용도에서 유용한 mAb의 예는 US7488802, US7521051, US8008449, US8354509, US8168757, WO2004/004771, WO2004/072286, WO2004/056875, 및 US2011/0271358에 기재되어 있다.

인간 PD-L1에 결합하고, 본 발명의 치료 방법, 의약 및 용도에서 유용한 mAb의 예는 WO2013/019906, W02010/077634 A1 및 US8383796에 기재되어 있다. 본 발명의 치료 방법, 의약 및 용도에서 PD-1 길항제로서 유용한 특정 항-인간 PD-L1 mAb는 MPDL3280A, BMS-936559, MEDI4736, MSB0010718C, 및 WO2013/019906의 각각 서열식별번호: 24 및 서열식별번호: 21의 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 포함하는 항체를 포함한다.

임의의 본 발명의 치료 방법, 의약 및 용도에서 유용한 다른 PD-1 길항제는 PD-1 또는 PD-L1에 특이적으로 결합하고, 바람직하게는 인간 PD-1 또는 인간 PD-L1에 특이적으로 결합하는 이뮤노어드헤신, 예를 들어, 이뮤노글로불린 분자의 불변 영역 예컨대 Fc 영역에 융합된 PD-L1 또는 PD-L2의 세포외 또는 PD-1 결합 부분을 함유하는 융합 단백질을 포함한다. PD-1에 특이적으로 결합하는 면역부착 분자의 예는 WO2010/027827 및 WO2011/066342에 기재되어 있다. 본 발명의 치료 방법, 의약 및 용도에서 PD-1 길항제로서 유용한 특정 융합 단백질은 PD-L2-FC 융합 단백질이고 인간 PD-1에 결합하는 AMP-224 (또한 B7-DCIg로 공지됨)를 포함한다.

다른 세포독성제의 예는 삼산화비소 (상표명 트리세녹스(TRISENOX) 하에 판매됨), 아스파라기나제 (또한 L-아스파라기나제 및 에르위니아 L-아스파라기나제로 공지되고, 상표명 엘스파르(ELSPAR) 및 키드롤라제(KIDROLASE) 하에 판매됨)를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

실험

하기 실시예는 단지 예시하고자 하는 것이며, 어떠한 방식으로도 제한하려는 것은 아니다. 사용된 약어는 관련 기술분야에 통상적인 것들이거나 또는 하기와 같다.

ACN 아세토니트릴

℃ 섭씨 온도

DCM 디클로로메탄

DIPEA 디-이소프로필에틸아민

DMF N,N-디메틸포름아미드

DMSO 디메틸술폭시드

EtOAc 에틸 아세테이트

EtOH 에탄올

g 그램

h 시간

HPLC 고압 액체 크로마토그래피

kg 킬로그램

L 리터

LC 액체 크로마토그래피

LCMS 액체 크로마토그래피 및 질량 분광측정법

MeOH 메탄올

MS 질량 분광측정법

MTBE 메틸 tert-부틸 에테르

min 분

mL 밀리리터

m/z 질량 대 전하 비

nm 나노미터

nM 나노몰

N 노르말

NMP N-메틸-2-피롤리돈

NMR 핵 자기 공명

RT 실온

sat. 포화

TFA 트리플루오로아세트산

TLC 박층 크로마토그래피

화학식 (I), (Ia) 또는 (Ib)의 화합물은 하기 합성 반응식 및 합성 절차 및 예시적 중간체 및 실시예를 위한 조건에 의해 부분적으로 기재된 바와 같이 유기 합성의 관련 기술분야에 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다.

하기 기재된 반응식에서, 일반적 원리 또는 화학에 따라 필요한 경우에 감수성 또는 반응성 기에 대한 보호기가 사용된다는 것이 널리 이해된다. 보호기는 유기 합성의 표준 방법에 따라 조작된다 (문헌 [T. W. Greene and P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", Third edition, Wiley, New York 1999]). 이들 기는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 용이하게 명백한 방법을 사용하여 화합물 합성의 편리한 단계에서 제거된다.

본원에 기재된 화합물은 상업적으로 이용가능한 출발 물질로부터 제조되거나 또는 공지된 유기, 무기 및/또는 효소적 방법을 이용하여 합성될 수 있다.

¹H NMR 스펙트럼은 내부 참조로서 테트라메틸실란을 사용하여 300 MHz에서의 브루커 아반스 300 분광계 또는 400 MHz에서의 브루커 아반스 400 분광계에서 획득되었다. 박층 크로마토그래피 (TLC)는 와트만 넘버 4500-101 (다이아몬드 넘버 MK6F 실리카-겔 60Å) 플레이트를 사용하여 수행되었다. TLC 플레이트의 시각화는 UV 광 (254 nm)을 사용하여 수행되었다. 질량 스펙트럼은 전기분무 이온화를 사용하여 피니간 LCQ-듀오 분광계에서 획득되었다. HPLC 분석은 애질런트 1100 시리즈 기기에서 수행되었다. 불순물은 HPLC에 의한 %AUC로 나타내고, 비-인증된다.

실시예

실시예 1: 8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-1,3-디온

실시예 1의 제조: NMP (1.0 mL) 중 I-26 (80.0 mg, 0.36 mmol) 및 I-51 (60.0 mg, 0.36 mmol)의 용액을 마이크로웨이브 하에 150℃에서 30분 동안 조사하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (20 mL)로 희석하고, 염수 (3 x 20 mL)로 세척하였다. 유기 층을 수집하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉(redisep)® 칼럼 (12 g, 100% EtOAc)을 사용하여 정제하여 실시예 1을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 354.1 [M + H]⁺.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ 10.77 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 6.25 (s, 1H), 3.40 - 3.24 (m, 2H), 3.12 (t, J = 10.8 Hz, 2H), 2.21 - 2.13 (m, 2H), 1.77 (d, J = 13.5 Hz, 2H).

실시예 2

8-(7-브로모이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

NMP (1.0 mL) 중 화합물 I-3 (150 mg, 0.54 mmol) 및 화합물 I-5 (68.0 mg, 0.4 mmol)의 용액을 마이크로웨이브로 150℃에서 30분 동안 조사하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 콤비플래쉬 칼럼에 로딩하고, 레디셉® 칼럼 (12 g, CH₂Cl₂/CH₃OH, 9:1)을 사용하여 정제하여 표제 화합물을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 364.0 [M + H]⁺

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ 10.77 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.22 (s, 1H), 3.41 - 3.32 (m, 2H), 3.08 (t, J = 11.4 Hz, 2H), 2.19 - 2.11 (m, 2H), 1.75 (d, J = 13.5 Hz, 2H).

실시예 3

8-(7-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

I-72의 제조: CH₃OH (200 mL) 중 I-71 (20.0 g, 104.1 mmol)의 교반 용액에 실온에서 진한 H₂SO₄ (1.0 mL)을 채웠다. 반응 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, EtOAc (100 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO₃ 용액 (80 mL)에 부었다. 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc (2 x 150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 I-72를 액체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 207.1 [M + H]⁺.

I-73의 제조: CH₃OH (80 mL) 중 I-72 (20.0 g, 97 mmol)의 교반 용액에 NaBH₄ (14.35 g, 388 mmol)를 0℃에서 15분 동안 조금씩 채웠다. 반응 혼합물을 70℃에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시키고, 물 (200 mL)과 EtOAc (3 x 300 mL) 사이에 분배하였다. 합한 유기 층을 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 I-73을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 179.1 [M + H]⁺.

I-74의 제조: 0℃에서 CH₂Cl₂ (80 mL) 중 I-73 (18.5 g, 103.9 mmol)의 용액에 Et₃N (28 mL, 207.8 mmol)에 이어서 MsCl (12 mL, 155.8 mmol)을 채웠다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 200 mL)로 추출하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 I-74 [20.0 g (조 물질)]를 고체로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

MS (MM) m/z 256.1 [M + H]⁺.

I-75의 제조: DMF (80 mL) 중 I-74 (20.0 g, 78 mmol)의 용액에 NaN₃ (15.2 g, 235 mmol)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉수 (100 mL)로 희석하고, MTBE (3 x 200 mL)로 추출하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 I-75를 액체로서 수득하였다.

I-76의 제조: THF (90 mL) 및 물 (9.0 mL) 중 I-75 (11.0 g, 54.4 mmol)의 교반 용액에 PPh₃ (17.0 g, 65.3 mmol) 실온에서 5분 동안 조금씩 채웠다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 물 (80 mL)로 희석하고, CH₂Cl₂ (2 x 50 mL)로 추출하였다. 수성 층을 분리하고, HCl (2 N, 20 mL)로 산성화시키고, 진공 하에 농축시켜 I-76의 HCl 염을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 177.1 [M + H]⁺.

I-77의 제조: HCO₂H (100 mL) 중 I-76 (6.00 g, 34 mmol)의 교반 용액에 Ac₂O (20 mL)를 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 톨루엔 (2 x 30 mL)과 공증발시켜 I-77을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 205.1 [M + H]⁺.

I-78의 제조: 톨루엔 (10 mL) 중 I-77 (1.20 g, 5.8 mmol)의 교반 용액에 POCl₃ (1.2 mL)을 0℃에서 채웠다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 물 (50 mL) 로 희석하고, 수성 NaOH 용액 (6 N, 20 mL)으로 염기성화시키고, EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (12 g, 헥산/EtOAc, 8:2)을 사용하여 정제하여 I-78을 고체로서 수득하였다.

실시예 3의 제조: NMP (1.0 mL) 중 I-78 (60.0 mg, 0.32 mmol) 및 I-51 (548 mg, 3.2 mmol)의 용액을 마이크로웨이브 하에 150℃에서 2시간 동안 조사하였다. 반응 혼합물을 냉수 (3.0 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 8.0 mL)로 추출하였다. 유기 층을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (4 g, EtOAc/헥산, 9:1)을 사용하여 정제하여 실시예 3을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 320.1 [M + H]⁺.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 10.77 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.14 (s, 1H), 3.08 (t, J = 12.0 Hz, 4H), 2.15 (t, J = 11.6 Hz, 2H), 1.76 (d, J = 13.2 Hz, 2H).

실시예 4

8-(6-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-8-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

I-56의 제조: HCO₂H (50 mL) 중 I-55 (5.00 g, 23.91 mmol)의 교반 용액에 Ac₂O (50 mL)를 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 톨루엔 (2 x 100 mL)과 공증발시켜 I-56을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 239.1 [M + H]⁺.

I-57의 제조: 톨루엔 (25 mL) 중 I-56 (5.00 g, 20.99 mmol)의 교반 용액에 POCl₃ (2.5 mL)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, EtOAc (500 mL)로 희석하고, 수성 NaOH 용액 (6 N, 10 mL)에 부었다. 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (200 mL) 및 염수 (200 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 I-57을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 221.1 [M + H]⁺.

I-62의 제조: 톨루엔 (10 mL) 중 I-57 (1.00 g, 4.5 mmol)의 교반 용액에 I-61 (700 mg, 4.9 mmol) 및 t-BuONa (864 mg, 9.0 mmol)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 아르곤으로 20분 동안 퍼징하였다. Pd₂(dba)₃ (823 mg, 0.89 mmol) 및 JohnPhos (40.0 mg, 0.13 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고, 110℃에서 16시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 슬러리를 EtOAc (100 mL)로 희석하고, 염수 (2 x 75 mL)로 세척하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (12 g, EtOAc/헥산, 4:1)을 사용하여 정제하여 I-62를 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 328.1 [M + H]⁺.

I-63의 제조: THF (10 mL) 중 I-62 (180 g, 5.5 mmol)의 교반 용액에 HCl (2 M, 5.0 mL)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 동일한 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, EtOAc (2 x 30 mL)로 추출하였다. 수성 층을 분리하고, 수성 NaOH (6 N, 10 mL)로 염기성화시키고, EtOAc (2 x 30 mL)로 추출하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 I-63을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 284.1 [M + H]⁺

실시예 4의 제조: EtOH (5.0 mL) 및 H₂O (3.0 mL)의 혼합물 중 I-63 (110 mg, 0.38 mmol)의 교반 용액에 NaCN (75.0 mg, 1.57 mmol) 및 (NH₄)₂CO₃ (754 mg, 7.67 mmol)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 밀봉된 튜브 내에서 90℃에서 24시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (20 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. 유기 상을 분리하고, 염수 (5 x 20 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 화합물을 MTBE (20 mL)와 함께 교반하고, 여과하여 실시예 4를 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 354.1 [M + H]⁺.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 10.74 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.48(s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 3.66 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 3.16 (t, J = 8.1 Hz, 2H), 2.09 - 2.03 (m, 2H), 1.72 (d, J = 10.2 Hz, 2H).

실시예 5

6,6-디메틸-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

실시예 5의 제조: NMP (1.0 mL) 중 I-26 (150 mg, 0.90 mmol), I-52 (166 mg, 0.99 mmol) 및 DIPEA (340 mg, 2.7 mmol)의 용액을 마이크로웨이브 하에 150℃에서 1.5시간 동안 조사하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (30 mL)로 희석하였다. 유기 층을 염수 (3 x 50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 물질을 수득하였다. 잔류물을 추가로 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (4 g, CH₂Cl₂/MeOH, 9:1)을 사용하여 정제하여 실시예 5를 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 382.1 [M + H]⁺.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 10.74 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 3.28 - 3.24 (m, 3H), 3.03 (d, J =11.6 Hz, 2H), 2.17 - 2.06 (m, 2H), 1.07 (s, 6H).

실시예 6

3-메틸-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

I-21의 제조: CH₂Cl₂ (100 mL) 중 I-20 (5.00 g, 2.5 mmol)의 교반 용액에 m-클로로퍼벤조산 (25.0 g, 12.5 mmol)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 CH₂Cl₂ (50 mL)로 희석하고, 포화 NaHCO₃ 용액 (250 mL)에 부었다. 층을 분리하고, 수성 층을 CH₂Cl₂ (3 x 150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 25℃에서 농축시켰다. 생성된 조 잔류물을 Ac₂O (50 mL)에 첨가하고, 환류 하에 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 농축시켜 잔류물을 수득하였다.

잔류물을 CH₃OH (50 mL) 중에 용해시키고, 수성 NaOH 용액 (6 N, 50 mL)으로 처리하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 층을 분리하였다. 수성 층을 EtOAc (3 x 150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 I-21을 검으로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 212.1 [M + H]⁺.

I-22의 제조: 0℃에서 CH₂Cl₂ (25 mL) 중 I-21 (1.30 g, 5.8 mmol)의 용액에 PBr₃ (1.40 g, 6.5 mmol)을 10분에 걸쳐 채웠다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 CH₂Cl₂ (25 mL)로 희석하고, 용액의 pH를 포화 NaHCO₃ 용액 (100 mL)을 사용하여 8로 조정하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 CH₂Cl₂ (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 I-22를 검으로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 275.1 [M + H]⁺.

I-23의 제조: DMF (20 mL) 중 I-22 (1.25 g, 4.5 mmol)의 용액에 NaN₃ (2.90 g, 4.5 mmol)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (25 mL)에 이어서 물 (100 mL)로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 I-23을 검으로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 237.1 [M + H]⁺.

I-24의 제조: EtOH (20 mL) 및 H₂O (20 mL) 중 I-23 (1.05 g, 4.6 mmol)의 용액에 Zn 분말 (3.00 g, 4.6 mmol)에 이어서 NH₄Cl (2.47 g, 4.6 mmol)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트(celite)® 층을 통해 여과하고, CH₂Cl₂ (100 mL)로 세척하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 CH₂Cl₂ (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 I-24를 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 211.1 [M + H]⁺.

I-25의 제조: HCO₂H (25 mL) 중 I-24 (900 mg, 4.2 mmol)의 교반 용액에 Ac₂O (5.0 mL)를 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시킨 다음, 톨루엔 (2 x 50 mL)과 공증발시켜 I-25를 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 239.1 [M + H]⁺.

I-26의 제조: 톨루엔 (10 mL) 중 I-25 (1.00 g, 4.2 mmol)의 교반 용액에 POCl₃ (0.5 mL)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 65℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, EtOAc (50 mL)로 희석하고, 수성 NaOH 용액 (1 N, 50 mL)에 부었다. 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 I-26을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 221.1 [M + H]⁺.

I-35의 제조: 0℃에서 DMSO (10 mL) 중 I-34 (500 mg, 1.85 mmol)의 교반 용액에 메틸 아이오다이드 (0.29 mg, 2.04 mmol) 및 K₂CO₃ (765 mg, 5.55 mmol)을 채웠다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 3시간 동안 교반하였다. 물 (20 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기 상을 수집하고, 염수 (3 x 20 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 생성물을 MTBE (10 mL)와 함께 교반하고, 여과하여 I-35를 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 284.1 [M + H]⁺.

I-36의 제조: 1,4-디옥산 (4 M, 5.0 mL) 중 I-35 (170 mg, 6.2 mmol) 및 HCl의 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 증발시켜 I-36을 고체로서 수득하였다.

실시예 6의 제조: NMP (1.0 mL) 중 I-36 (100 mg, 0.45 mmol), I-26 (82.0 mg, 0.45 mmol) 및 DIPEA (250 mg, 0.9 mmol)의 용액을 마이크로웨이브 하에 150℃에서 30분 동안 조사하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (30 mL)로 희석하고, 염수 (3 x 50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 수집하고, 무수 Na₂SO₄, 상에서 건조시키고, 농축하고, 감압 하에 건조시켰다. 생성된 조 화합물을 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (4 g, 100% EtOAc)을 사용하여 정제하여 실시예 6을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 368.1 [M + H]⁺

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8.86 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 6.36 (s, 1H), 3.44 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 3.15 (t, J = 11.6 Hz, 2H), 2.22 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 1.77 (d, J = 13.2 Hz, 2H).

실시예 7

3-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

I-38의 제조: DMSO (10 mL) 중 I-34 (500 mg, 1.85 mmol)의 교반 용액에 I-37 (0.29 mg, 2.04 mmol) 및 K₂CO₃ (765 mg, 5.55 mmol)을 0℃에서 채웠다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (20 mL)로 처리하고, EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기 상을 수집하고, 염수 (3 x 20 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 생성된 조 잔류물을 MTBE (10 mL)와 함께 교반하고, 여과하여 I-38을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 368.1 [M + H]⁺.

I-39의 제조: 1,4-디옥산 (4 M, 5.0 mL) 중 I-38 (170 mg, 6.2 mmol) 및 HCl의 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 증발시켜 I-39를 고체로서 수득하였다.

실시예 7의 제조: NMP (1.0 mL) 중 I-26 (100 mg, 0.45 mmol), I-39 (130 mg, 0.45 mmol) 및 DIPEA (250 mg, 0.9 mmol)의 용액을 마이크로웨이브 하에 150℃에서 30분 동안 조사하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (30 mL)로 희석하고, 염수 (3 x 50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 수집하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 조 화합물을 MTBE (20 mL)와 함께 교반하고, 여과하여 실시예 7을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 452.1 [M+H]⁺.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ 8.91 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 3.83 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 3.45 (t, J = 12.3 Hz, 2H), 3.30 - 3.11 (m, 6H), 2.23 (t, J = 14.7 Hz, 2H), 1.92 - 1.80 (m, 1H), 1.78 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 1.49 (d, J = 11.1 Hz, 2H), 1.24 - 1.16 (m, 2H).

실시예 8

8-(7-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-6,6-디메틸-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

실시예 8의 제조: NMP (0.8 mL) 중 I-78 (150 mg, 0.80 mmol), I-49 (238 mg, 1.2 mmol) 및 DIPEA (412 mg, 2.4 mmol)의 용액을 110℃에서 48시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 냉수 (3.0 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 10 mL)로 추출하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 추가로 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (4 g, EtOAc/헥산, 7:3)을 사용하여 정제하여 실시예 8을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 346.1 [M - H]^-.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ 8.17 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.17 (s, 1H), 3.38 - 3.30 (m, 3H), 2.87 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.16 - 2.05 (m, 2H), 1.14 (s, 3H), 1.02 (s, 3H).

실시예 9

3-페닐-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

I-41의 제조: 아세토니트릴 (20 mL) 및 DMF (20 mL)의 혼합물 중 I-34 (500 mg, 1.85 mmol)의 교반 용액에 I-40 (483 mg, 0.33 mmol), K₂CO₃ (765 mg, 2.2 mmol), N,N'-디메틸에탄-1,2-디아민 (93.0 mg, 0.55 mmol) 및 CuI (200 mg, 0.55 mmol)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 희석하고, EtOAc (5 x 20 mL)로 추출하였다. 유기 상을 수집하고, 염수 (5 x 20 mL)로 세척하였다. 유기 상을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 생성된 잔류물을 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (12 g, 100% EtOAc)을 사용하여 정제하여 I-41을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 368.1 [M + H]⁺.

I-42의 제조: 1,4-디옥산 (4 M, 5.0 mL) 중 I-41 (170 mg, 6.2 mmol) 및 HCl의 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 증발시켜 I-42를 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 346.1 [M + H]⁺.

실시예 9의 제조: NMP (1.0 mL) 중 I-26 (100 mg, 0.45 mmol), I-42 (130 mg, 0.45 mmol) 및 DIPEA (250 mg, 0.9 mmol)의 용액을 120℃에서 24시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (30 mL)로 희석하고, 염수 (3 x 50 mL)로 세척하였다. 반응 혼합물을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축시키고, 감압 하에 건조시켰다. 생성된 잔류물을 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (4 g, CH₂Cl₂/MeOH, 9:1)을 사용하여 정제하여 실시예 9를 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 430.1 [M + H]⁺.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 9.15 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.52 - 7.48 (m, 2H), 7.43 - 7.39 (m, 3H), 6.30 (s, 1H), 3.51 - 3.50 (m, 2H), 3.21 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 2.35 - 2.28 (m, 2H), 1.99 (m, 2H).

실시예 10

3,6,6-트리메틸-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

I-44의 제조: EtOH (140 mL) 및 H₂O (40 mL) 중 I-43 (7.00 g, 30.8 mmol)의 교반 용액에 NaCN (3.00 g, 61.6 mmol) 및 탄산암모늄 (59.1 g, 616 mmol)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 밀봉된 튜브 중에서 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (200 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 150 mL)로 추출하였다. 유기 상을 염수 (5 x 20 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 I-44를 고체로서 수득하였다.

I-45의 제조: CH₃OH (140 mL) 중 I-44 (1.00 g, 3.3 mmol)의 교반 용액에 메틸 토실레이트 (1.37 g, 7.4 mmol) 및 NaOH (230 mg, 5.94 mmol)를 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (30 mL)로 처리하고, CH₂Cl₂ (3 x 30 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 증발시켜 I-45를 고체로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

I-46의 제조: 1,4-디옥산 (4 M, 10 mL) 중 I-45 (350 mg, 6.2 mmol) 및 HCl의 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 증발시켜 I-46을 고체로서 수득하였다.

실시예 10의 제조: NMP (1.0 mL) 중 I-26 (200 mg, 0.45 mmol), I-46 (178 mg, 0.49 mmol) 및 DIPEA (348 mg, 1.35 mmol)의 용액을 120℃에서 24시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (30 mL)로 희석하고, 염수 (3 x 50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 수집하고, 무수 Na₂SO₄, 농축 상에서 건조시키고, 감압 하에 건조시켰다. 생성된 잔류물을 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (12 g, CH₂Cl₂/MeOH, 9:1)을 사용하여 정제하여 실시예 10을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 396.1 [M + H]⁺.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ 8.57 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 6.29 (s, 1H), 3.40 - 3.25 (m, 3H), 3.05 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.11 - 2.07 (m, 2H), 1.05 (s, 6H).

실시예 11

8-(6-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-6,6-디메틸-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

I-84의 제조: HCO₂H (370 mL) 중 I-83 (15.0 g, 71.0 mmol)의 교반 용액에 Ac₂O (750 mL)를 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 100℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 톨루엔 (2 x 100 mL)과 공증발시켜 I-84를 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 249.1 [M + H]⁺.

I-85의 제조: 톨루엔 (100 mL) 중 I-84 (13.0 g, 54.0 mmol)의 교반 용액에 POCl₃ (6.0 mL)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 100℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, EtOAc (300 mL)로 희석하고, 수성 NaOH 용액 (1 N, 300 mL)에 부었다. 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc (3 x 300 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (2 x 200 mL) 및 염수 (200 mL)로 세척하였다. 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 I-85를 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 230.4 [M + H]⁺.

I-88의 제조: 톨루엔 (20 mL) 중 I-85 (800 mg, 3.45 mmol)의 교반 용액에 I-68 (590 mg, 3.45 mmol) 및 분말 t-BuONa (662 mg, 6.9 mmol)를 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 아르곤으로 20분 동안 퍼징하였다. Pd₂(dba)₃ (315 mg, 0.345 mmol) 및 BINAP (214 mg, 0.345 mmol)를 혼합물에 첨가하고, 100℃로 3시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 슬러리를 EtOAc (100 mL)로 희석하고, 염수 (2 x 75 mL)로 세척하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (24 g, 헥산/EtOAc, 1:1)을 사용하여 정제하여 I-88을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 322.0 [M + H]⁺.

I-89의 제조: THF (3.0 mL) 중 I-88 (600 mg, 1.86 mmol)의 교반 용액에 HCl (2 M, 3.0 mL)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO₃ 용액 (20 mL)으로 염기성화시키고, EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 I-89를 고체로서 수득하였다.

실시예 11의 제조: EtOH (8.0 mL) 및 물 (4.0 mL) 중 I-89 (380 mg, 1.3 mmol)의 용액을 밀봉된 튜브에 두고, 실온에서 NaCN (134 mg, 2.73 mmol) 및 탄산암모늄 (2.10 g, 27.2 mmol)을 채웠다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)에 붓고, EtOAc (2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 물 (2 x 50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 실시예 11을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 348.1 [M + H]⁺.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ 10.70 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.06 (s, 1H), 3.45 - 3.42 (m, 1H), 3.39 - 3.30 (m, 2H), 3.17 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 2.01 - 1.95 (m, 2H).

실시예 12

6,6-디메틸-8-(6-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-8-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

I-65의 제조: CH₂Cl₂ (20 mL) 중 I-43 (5.00 g, 22.02 mmol)의 용액에 1,4-디옥산 중 HCl (4 M, 20 mL)을 0℃에서 15분에 걸쳐 채웠다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 농축시켜 과량의 HCl을 제거하고, MTBE (3 x 200 mL)와 공증류시키고, 진공 하에 건조시켜 I-65를 HCl 염으로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 128.1 [M + H]⁺.

I-66의 제조: CH₂Cl₂ (80 mL) 중 I-65 (4.20 g, 33.07 mmol)의 용액에 벤질 클로로포르메이트 (6.70 g, 39.68 mmol)에 이어서 트리에틸 아민 (5.00 g, 49 mmol)을 0℃에서 20분에 걸쳐 채웠다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 유기 층을 포화 NaHCO₃ 용액 (50 mL), 물 (100 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 감압 하에 농축시켜 I-66을 액체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 262.1 [M + H]⁺.

I-67의 제조: 톨루엔 (70 mL) 중 I-66 (7.00 g, 26.7 mmol)의 교반 용액에 에틸렌 글리콜 (1.98 g, 32 mmol)에 이어서 p-TSA (28.0 mg, 1 mmol)를 실온에서 채우고, 혼합물을 130℃로 16시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 슬러리를 EtOAc (100 mL)로 희석하고, 염수 (2 x 500 mL)로 세척하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (80 g, 헥산/EtOAc, 8:2)을 사용하여 정제하여 I-67을 액체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 172.0 [M + H]⁺.

I-68의 제조: 2,2,2-트리플루오로에탄올 (60 mL) 중 I-67 (6.00 g, 305 mmol)의 교반 용액에 Pd(OH)₂ (600 mg, 10 wt%)을 아르곤 분위기 하에 실온에서 채웠다. 수소 분위기를 풍선을 사용하여 도입하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트® 층을 통해 여과하고, CH₃OH (50 mL)로 세척하고, 감압 하에 농축시켜 I-68을 오일로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 172.0 [M + H]⁺.

I-69의 제조: 톨루엔 (20 mL) 중 I-57 (1.00 g, 4.54 mmol)의 교반 용액에 I-68 (261 mg, 4.54 mmol) 및 분말 t-BuONa (872 mg, 9.0 mmol)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 아르곤으로 20분 동안 퍼징하였다. Pd₂(dba)₃ (415 mg, 0.45 mmol) 및 BINAP (282 mg, 0.45 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고, 110℃로 3시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 슬러리를 EtOAc (100 mL)로 희석하고, 염수 (2 x 75 mL)로 세척하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 추가로 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (24 g, 헥산/EtOAc, 1:1)을 사용하여 정제하여 I-69를 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 356.1 [M + H]⁺.

I-70의 제조: THF (3.0 mL) 중 I-69 (500 mg, 1.40 mmol)의 교반 용액에 HCl (2 N, 3.0 mL)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO₃ 용액 (20 mL)으로 염기성화시키고, EtOAc (3 x 50 mL)로 추출하였다. 유기 층을 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 I-70을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 312.1 [M + H]⁺.

실시예 12의 제조: EtOH:H2O의 혼합물 (2:1, 12 mL) 중 I-70 (100 mg, 0.32 mmol)의 용액에 탄산암모늄 (500 mg, 6.42 mmol)에 이어서 NaCN (31.0 mg, 0.642 mmol)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 밀봉된 튜브 중에서 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (50 mL)로 희석하였다. 유기 층을 물 (2 x 30 mL) 및 염수 (20 mL)로 세척하였다. 유기 상을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 암갈색 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 추가로 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (12 g, DCM/MeOH, 9.7:0.3)을 사용하여 정제하여 실시예 12를 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 382.1 [M + H]⁺.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 10.72 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 3.50 - 3.45 (m, 1H), 3.39 - 3.30 (m, 2H), 3.17 (d, J = 12.4, 1H), 2.08 - 1.97 (m, 2H), 1.05 (d, J = 1.2 Hz, 6H)

실시예 13

8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

실시예 13의 제조: NMP (2.0 mL) 중 I-26 (100 mg, 0.45 mmol), I-53 (139 mg, 0.68 mmol) 및 DIPEA (175 mg, 1.36 mmol)의 용액을 마이크로웨이브 하에 150℃에서 1.5시간 동안 조사하였다. 반응 혼합물을 냉수 (10 mL)로 희석하고, EtOAc (2 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (20 mL), 염수 (20 mL)로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 추가로 정제용 TLC에 의해 (CH₂Cl₂/CH₃OH, 98:2)을 사용하여 정제하여 실시예 13을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 353[M + H]⁺.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8.44 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 6.30 (s, 1H), 3.42 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 2.91 (t, J = 11.2 Hz, 2H), 2.69 (s, 2H), 2.16 - 2.08 (m, 2H), 1.79 (d, J = 13.2 Hz, 2H).

실시예 14

6,6-디메틸-3-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

I-44의 제조: EtOH (140 mL) 및 H₂O (40 mL) 중 I-43 (7.00 g, 30.8 mmol)의 교반 용액에 NaCN (3.00 g, 61.6 mmol) 및 탄산암모늄 (59.1, 616 mmol)을 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 밀봉된 튜브 중에서 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (200 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 150 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (5 x 20 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 I-44를 고체로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

MS (MM) m/z 368.1 [M + H]⁺.

I-47의 제조: DMSO (10 mL) 중 I-44 (1.00 g, 3.35 mmol)의 교반 용액에 I-37 (660 mg, 2.04 mmol) 및 K₂CO₃ (1.38 g, 10.05 mmol)을 0℃에서 채웠다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 12시간 동안 교반하였다. 물 (20 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (3 x 20 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 생성된 잔류물을 MTBE (10 mL)와 함께 교반하고, 여과하여 I-47을 고체로서 수득하였다.

I-48의 제조: 1,4-디옥산 (4 M, 20 mL) 중 I-47 (1.20 g, 3.03 mmol) 및 HCl의 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 증발시켜 I-48을 고체로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

실시예 14의 제조: NMP (1.0 mL) 중 I-26 (150 mg, 0.68 mmol), I-48 (240 mg, 0.81 mmol) 및 DIPEA (260 mg, 2.04 mmol)의 용액을 120℃에서 24시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (30 mL)로 희석하고, 염수 (3 x 50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 수집하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 잔류물을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 실시예 14 (12.0 mg, 4%)을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 480.1 [M + H]⁺.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ 8.66 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 6.36 (s, 1H), 3.89 (br d, J = 9.3 Hz, 2H), 3.34 - 3.10 (m, 7H), 3.12 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.22 - 2.14 (m, 2H), 1.97 - 1.92 (m, 1H), 1.54 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 1.29 - 1.23 (m, 3H), 1.13 (s, 6H).

실시예 15

6,6-디메틸-3-페닐-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

I-49의 제조: 1,4-디옥산 (4 M, 15 mL) 중 I-44 (1.00 g, 3.3 mmol) 및 HCl의 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 증발시켜 I-49를 고체로서 수득하였다.

I-50의 제조: NMP (1.0 mL) 중 I-26 (200 mg, 0.90 mmol), I-49 (166 mg, 0.99 mmol) 및 DIPEA (340 mg, 2.7 mmol)의 용액을 120℃에서 24시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (30 mL)로 희석하고, 염수 (3 x 50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 수집하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 I-50을 고체로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

실시예 15의 제조: 아세토니트릴 (20 mL) 및 DMF (20 mL)의 혼합물 중 I-50 (100 mg, 0.26 mmol)의 교반 용액에 I-40 (69.0 mg, 0.33 mmol), K₂CO₃ (115 mg, 0.84 mmol), N,N'-디메틸에탄-1,2-디아민 (7.00 mg, 0.08 mmol) 및 CuI (15.0 mg, 0.08 mmol)를 실온에서 채웠다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (15 mL)로 처리하고, EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (5 x 20 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켰다. 조 화합물을 정제용 TLC (100% EtOAc)에 의해 정제하여 실시예 15를 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 458.2 [M + H]⁺.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8.81 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.44 - 7.41 (m, 2H), 7.36 - 7.28 (m, 2H), 6.24 (s, 1H), 3.35 - 3.32 (m, 1H), 3.20 - 3.10 (m, 2H), 3.05 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.28 - 2.25 (m, 1H), 2.20 - 2.10 (m, 1H), 1.10 (s, 6H).

실시예 16

8-(7-브로모이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-6,6-디메틸-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온

실시예 16의 제조: NMP (3.0 mL) 중 화합물 I-3 (300 mg, 0.365 mmol), 화합물 I-6 (85.0 mg, 0.434 mmol) 및 DIPEA (94.0 mg, 0.730 mmol)의 용액을 마이크로웨이브 하에 120℃에서 2시간 동안 조사하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (50 mL)로 희석하고, 물 (2 x 50 mL) 및 염수 (20 mL)로 세척였다. 유기 층을 분리하고, 무수 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 콤비플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 레디셉® 칼럼 (12 g, 헥산/EtOAc, 1:1)을 사용하여 정제하여 표제 화합물을 고체로서 수득하였다.

MS (MM) m/z 392.0 [M + H]⁺.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆): δ 10.72 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.24 (s, 1H), 3.32 (s, 1H), 3.19 - 3.15 (m, 2H), 2.98 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.08 - 2.06 (m, 2H), 1.07 (s, 6H).

실시예 1-16 중 화합물의 화학 구조, 명칭 및 분자 질량은 하기 표에 요약된다.

실시예 17

8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-1-온

바이알에 5-클로로-7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘 (I-26) (22 mg, 0.10 mmol), 2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-1-온 히드로클로라이드 (엔아민 빌딩 블록스(Enamine Building Blocks)로부터 상업적으로 입수가능함)(38 mg, 0.20 mmol), NMP (300 ul) 및 Et₃N (100 ul, 0.72 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 150℃에서 20시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 역상 정제용 HPLC (0.1% NH₄OH 함유 물 중 15% - 70% ACN)을 사용하여 정제하여 8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-1-온 (실시예 17)을 수득하였다.

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8.44 (s, 1 H), 7.88 (s, 1 H), 7.72 (s, 1 H), 6.32 (s, 1 H), 4.40-4.30 (m, 2 H), 3.50-3.25 (m, 2 H), 2.99 (t, J = 10 Hz, 1 H), 2.60-2.40 (m, 1 H), 2.35-2.25 (m, 2 H), 2.10-1.95 (m, 2 H), 1.85-1.75 (m, 2H);

MS (EI) 계산치 C₁6H₁7F₃N₃O₂ [M+H]⁺ 340.

실시예 18

이 화합물을, 2-메틸-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데스-1-엔-4-온 (아크 팜, 인크.(Ark Pharm, Inc.)로부터 상업적으로 입수가능함)을 2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-1-온 히드로클로라이드 대신에 사용한 것을 제외하고는 실시예 17와 유사한 방식으로 합성하였다.

실시예 19

이 화합물을, 2,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-온 히드로클로라이드 (아크 팜, 인크.으로부터 상업적으로 입수가능함)를 2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-1-온 히드로클로라이드 대신에 사용한 것을 제외하고는 실시예 17와 유사한 방식으로 합성하였다.

실시예 20

1-(9-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)에탄-1-온

tert-부틸 3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (아크 팜, 인크.로부터 상업적으로 입수가능함) (100 mg, 0.40 mmol)을 DCM (1 ml) 중에 용해시키고, TEA (200 ul, 1.4 mmol)를 첨가하였다. 용액을 0℃로 냉각시키고, 이 후, 아세틸 클로라이드 (31 mg, 0.4 mmol)를 DCM (0.1 ml) 중의 용액으로서 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온이 되도록 하고, 18시간 동안 교반하였다. 이어서, 용매를 진공 하에 제거하여 tert-부틸 9-아세틸-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (I-51)를 수득하였으며, 이를 추가로 정제 없이 사용하였다. 이어서, tert-부틸 9-아세틸-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-카르복실레이트 (I-51)를 디옥산 (1 ml) 중에 용해시키고, 디옥산 중 HCl (4M, 1 ml, 4.0 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반되도록 하고, 이 후, 용매를 진공 하에 제거하여 1-(3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)에탄-1-온 히드로클로라이드 (I-52)를 수득하였으며, 이를 추가로 정제 없이 사용하였다. 이어서, 1-(3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)에탄-1-온 히드로클로라이드 (I-52)를 NMP (1 ml) 중에 용해시키고, 이 후, 5-클로로-7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘 (I-26) (25 mg, 0.11 mmol) 및 Et₃N (800 ul, 5.7 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 150℃로 가열하고, 20시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하고, 역상 질량-트리거 HPLC (0.1% TFA 함유 물 중 10% - 100% ACN)를 통해 직접 정제하여 1-(9-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)에탄-1-온 (실시예 20)을 수득하였다.

MS (EI) 계산치 C₁₉H₂₄F₃N_4O [M+H]⁺ 381.

¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 8.59 (s, 1 H), 7.91 (s, 1 H), 7.83 (s, 1 H), 6.41 (s, 1 H), 3.30-3.00 (m, 4 H), 2.65-2.30 (m, 4 H), 2.01 (s, 3 H), 1.85-1.65 (m, 4 H), 1.65-1.40 (m, 4 H)

실시예 17-21의 화합물의 화학 구조, 명칭 및 분자 질량은 하기 표에 요약된다.

생물학적 검정

본원에 기재된 예시적인 화합물을 제조하고, IDO 및/또는 TDO 억제제로서의 그의 효과를 결정하기 위해 시험하였다. 2종의 상이한 검정을 사용하였다: 1. 2종의 상이한 암 세포 유형에서의 키누레닌 생성에 대한 시험 화합물의 효과를 검출하기 위한 세포-기반 검정. 본 검정은 TDO 또는 IDO가 발현되는 암 세포를 사용하고, 이와 같이 세포-기반 환경에서 이들 2종의 효소에서의 화합물 활성을 시험하는 수단으로서 사용하였다. 2. 재조합적으로 생성하고 정제한 TDO 및 IDO 효소를 효소 포름아미다제와 조합하여 사용한 TDO 및 IDO 생화학적 커플링된 검정. 이 커플링된 효소 시스템은 TDO 또는 IDO 활성에 의해 생성된 N-포르밀키누레닌을 키누레닌으로 전환시키고, 이어서 이를 에를리히 (Ehrlich) 시약의 첨가 후에 형광에 의해 정량화하였다. 이들의 프로토콜이 하기에 기재된다.

TDO 및/또는 IDO에 의해 생성된 키누레닌의 검출을 위한 A172 및 SKOV3 세포 기반 검정

A172 (인간 교모세포종) 및 SKOV3 (인간 난소 선암종) 세포를 10% FCS, 2 mM L-글루타민 및 500 μM L-트립토판이 보충된 페놀 레드-무함유 RPMI에서 각각 웰당 30,000 또는 40,000개의 세포로 96 웰 플레이트에 시딩하였다. IDO 발현을 500 ng/mL IFN-γ의 첨가에 의해 SKOV3 세포에서 유도하였다. 시험 화합물을 첨가하거나 또는 첨가하지 않고서 세포를 37℃에서 배양하였다. 48시간 후에, 세포를 원심분리에 의해 제거하고 에를리히 시약을 상청액에 첨가하였다. 에를리히 시약을 5분 동안 인큐베이션한 후, 490 nm에서 흡광도를 판독하였다.

TDO 및 IDO 생화학적 결합 검정

재조합 인간 IDO 또는 TDO를 50 mM KPO₄ (pH 7.0), 0.5 mM EGTA, 0.5 mM EDTA, 0.05 % 트리톤(Triton)™ X100, 20 mM 아스코르베이트, 10 μM 메틸렌 블루, 500 U/mL 카탈라제, 50 μg/mL KynB (키누레닌 포름아미다제) 중에서 인큐베이션하였다. TDO 검정을 330 μM L-트립토판의 존재 하에 수행하는 반면, IDO 검정은 45 μM L-트립토판의 첨가를 가졌다. 실온에서 17분 동안 인큐베이션한 후, 반응을 에를리히 시약의 첨가에 의해 정지시키고, 5분 동안 실온에서 인큐베이션한 후, 형광을 판독하였다.

다양한 시험 화합물의 pIC₅₀ 값은 하기 표에 제시된다.

상기 검정 뿐만 아니라, 특정한 예시적인 화합물의 활성은 하기 IDO1 효소 및 IDO1 세포 검정을 사용하여 결정하였다.

IDO1 효소 검정

시험될 화합물을 10 mM DMSO 스톡으로부터 시작하여 DMSO 중에 10회의 3배 단계로 연속적으로 희석하였다. 이어서, 화합물 희석액 또는 DMSO 단독을 에코(Echo) 555 음향 액체 핸들러 (랩사이트(Labcyte))를 사용하여 희석 플레이트로부터 그라이너(Greiner) 흑색 384-웰 검정 플레이트 (카탈로그 #781086) 내로 분배하였다.

HIS-태그부착 IDO1 단백질을 500 μM 델타 아미노레불린산이 보충된 ZYP5052 자가유도 배지를 사용하여 16℃에서 48시간 동안 에스케리키아 콜라이(Escherichia coli)에서 재조합적으로 발현시켰다. IDO1 단백질을 Ni²⁺-친화도 수지 및 크기 배제 크로마토그래피를 사용하여 정제하였다. 이어서, 정제된 단백질을 검정 완충제 중에 희석하였다 (40 nM의 최종 IDO1 농도를 수득하기 위한 50 mM 트리스 pH 7.0, 1% 글리세롤, 20 μM 메틸렌 블루, 0.05% 트윈(Tween)-20, 20 mM 아스코르브산나트륨, 100 유닛/mL 카탈라제). IDO1 용액 (30 μM) 및 완충제 단독 (30 μM)을 바이오RAPTR(BioRAPTR) 액체 분배기 (베크만 쿨터(Beckman Coulter))를 사용하여 검정 플레이트의 웰에 분배하였다. 화합물 및 IDO1 효소를 함유하는 검정 플레이트를 실온에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 이후에, 검정 완충제 중의 400 μM 트립토판 10μL를 바이오RAPTR 액체 분배기를 사용하여 검정 플레이트의 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 실온에서 60분 동안 배양하고, 반응은 디메틸 술폭시드 중 0.5 M 메틸 이소니페코테이트 10 μL의 첨가에 의해 켄칭하였다. 플레이트를 밀봉하고 37℃에서 4시간 동안 또는 50℃에서 2시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 냉각되게 한 다음, 1000xg에서 1분 동안 원심분리하였다. 생성된 형광을 400/25 nm 여기 필터 및 510/20 nm 방출 필터를 갖는 엔비전(Envision) 플레이트 판독기 (퍼킨 엘머(Perkin Elmer))로 측정하였다.

각 웰의 형광 강도를 IDO1을 수용하지 않은 웰에서 관찰된 배경값에 대해 보정하고, 이를 IDO1 효소 및 DMSO 단독을 수용한 웰에서 관찰된 강도의 분율로서 표현하였다. 효력을 4 파라미터 로지스틱 IC₅₀ 방정식에 대한 선형 최소 제곱 피팅에 의해 계산하였다.

IDO1 HEK293 세포 검정

시험될 화합물을 10 mM DMSO 스톡으로부터 시작하여 DMSO 중에 10회의 3배 단계로 연속적으로 희석하였다. 이어서, 화합물 희석액 또는 DMSO 단독을 에코 550 음향 액체 핸들러 (랩사이트)를 사용하여 희석 플레이트로부터 그라이너 흑색 384-웰 검정 플레이트 (카탈로그 #781086) 내로 분배하였다.

HEK293 세포 펠릿을 완전 HEK293 인큐베이션 배지 (89% DMEM, 10% FBS, 1% 페니실린/스트렙토마이신) 중에 5 x 10⁵개 세포/mL로 재현탁시켰다. 현탁된 세포 (2 mL)를 6-웰 코닝(Corning) 플레이트 (카탈로그# 3516)의 각 웰 내로 분배하였다. 세포를 부착되게 하고, 5% CO₂ 인큐베이터에서 37℃에서 20시간 동안 인큐베이션하였다. 옵티-MEM 배지 150 uL 중 Flag-IDO1 벡터 (젠스크립트 트루 ORF 골드(Genscript True ORF Gold), 2 ug)를 코닝 24 웰 플레이트 (Cat# 3527)의 각 웰에 첨가하고, 실온에서 5분 동안 인큐베이션하였다. 24-웰 플레이트의 각 웰에 150 μL 리포펙타민(Lipofectamine) 2000 (깁코(Gibco))을 첨가하고, 플레이트를 실온에서 20-30분 동안 인큐베이션하였다. 6-웰 플레이트 중의 부착된 세포의 각 웰에, 24-웰 플레이트로부터의 형질감염 믹스 250 μL를 서서히 각 웰에 첨가하고, IDO1 단백질을 5% CO₂ 인큐베이터에서 37℃에서 24-30시간 동안 발현되게 하였다.

배지를 세포로부터 제거한 다음, 이를 2 mL 둘베코(Dulbecco)의 포스페이트-완충 염수 (DPBS)로 세척하였다. DPBS의 제거 후에, TrypLE (깁코) 0.5 mL를 첨가하고, 세포가 웰의 표면으로부터 들어 올려질 때까지 5분 인큐베이션하였다. 완전 HEK293 배양 배지 (4 mL)를 각 웰에 첨가하고, 세포를 수집하고 원추형 튜브 내로 풀링하였다. 세포를 5분 동안 200xg에서 펠릿화하고 동등 부피의 완전 DMEM 배지 중에 재현탁시켰다. 세포를 완전 HEK293 배지 중에 mL당 4x10⁵개 세포로 희석하였다. L-트립토판을 첨가하여 200 μM의 최종 농도를 제공하였다. 희석된 형질감염된 세포 (50 μL) 또는 비형질감염된 세포 (50 μL)를 이전에 희석된 화합물을 함유한 그라이너 흑색 384-웰 검정 플레이트 (카탈로그 #781086)의 웰 내로 분배하였다. 플레이트를 간략하게 혼합하고, 10초 동안 200xg에서 원심분리하여 플레이트의 하부에서 세포를 수집하였다. 플레이트를 덮고, 5% CO₂ 인큐베이터에서 37℃에서 20-24시간 동안 인큐베이션하였다. 이후에 디메틸 술폭시드 중 0.5 M 메틸 이소니페코테이트 10 μL를 각 웰에 첨가하고, 혼합하고, 밀봉하고, 10초 동안 500 rpm에서 원심분리하였다. 플레이트를 5% CO₂ 인큐베이터 중에서 37℃에서 밤새 인큐베이션하여 형광을 발생시켰다. 플레이트를 냉각되게 한 다음, 1000xg에서 1분 동안 원심분리하였다. 생성된 형광을 400/25 nm 여기 필터 및 510/20 nm 방출 필터를 갖는 엔비전(Envision) 플레이트 판독기 (퍼킨 엘머(Perkin Elmer))로 측정하였다.

각 웰의 형광 강도를, 비-형질감염된 세포를 갖는 웰에서 관찰된 배경값에 대해 보정하고, IDO1 형질감염된 세포 및 DMSO 단독의 웰들에서 관찰된 강도의 분율로서 표현하였다. 효력을 4 파라미터 로지스틱 IC₅₀ 방정식에 대한 선형 최소 제곱 피트에 의해 계산하였다.

다양한 시험 화합물의 pIC₅₀ 값은 하기 표에 제시된다.

상기 활성 데이터에서 나타낸 바와 같이, 본원에 개시된 화합물은 IDO 및/또는 TDO 효소의 억제제이다.

본 발명은 그의 특정 특정한 실시양태를 참조하여 기재 및 예시되었지만, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 본 발명의 취지 및 범주로부터 벗어나지 않으면서 절차 및 프로토콜의 다양한 적합화, 변화, 변형, 치환, 삭제 또는 추가가 이루어질 수 있음을 인지할 것이다.

Claims

화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:

여기서
각각의 R¹ 및 R²는 독립적으로 (1) H 및 (2) NH₂로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R³ 및 R⁶ 중 1개는 H이고, 다른 것은 Y¹이고;
각각의 R⁴ 및 R⁵는 독립적으로 (1) H, (2) 할로겐, (3) 1 내지 3개의 할로겐으로 임의로 치환된 C_1-6 알킬, (4) C_3-6 시클로알킬, (5) 1 내지 3개의 할로겐으로 임의로 치환된 C_1-6 알콕시, 및 (6) CN, 및 (7) -NR^gR^g'로 이루어진 군으로부터 선택되고, 각각의 R^g 및 R^g'는 독립적으로 H, C_1-6 알킬, -COH, 및 -COC_1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
Y¹은 하기 화학식을 갖는 기이며,

여기서
파선 "
"는 임의적인 이중 결합을 나타내고;
Q는 -C(R^a)(R^a')-, -N(R^a)-, 또는 -O-이고;
T는 -C(R^a)(R^a')-, -N(R^a)-, 또는 -O-이고;
R^a는 (1) H, (2) C_1-10 알킬, (3) 아릴, (4) -C(O)-R^e, (5) -SO₂-NH₂, 및 (6) -SO₂-C_1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되며; 여기서 각각의 알킬 및 아릴은 할로겐 및 헤테로시클릴로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
R^a'는 (1) H 및 (2) C_1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R^b는 C_1-6 알킬이고;
각각의 R^c 및 R^d는 독립적으로 (1) H, (2) C_1-6 알킬 및 (3) 옥소로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R^e는 (1) C_1-6 알킬, (2) 아릴 및 (3) 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되고;
m은 0, 1 또는 2이고;
n은 0, 1 또는 2이고;
p는 0 또는 1이다.
제1항에 있어서, 각각의 R¹ 및 R²는 H인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서, 각각의 R⁴ 및 R⁵는 독립적으로 (1) H, (2) 할로겐, (3) 1 내지 3개의 할로겐으로 임의로 치환된 C_1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서, 각각의 R⁴ 및 R⁵는 독립적으로 (1) H, (2) 할로겐, (3) -CF₃으로 이루어진 군으로부터 선택되고; m은 1인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서,
R³은 H이고;
R⁶은 하기 화학식을 갖는 Y²이며,

여기서
파선 "
"는 임의적인 이중 결합을 나타내고;
Q는 -CH(R^a)- 또는 -N(R^a)-이고;
T는 -CH₂- 또는 -NH-이고;
R^a는 (1) H, (2) C_1-6 알킬, 및 (3) 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되며; 여기서 각각의 알킬 및 페닐은 할로겐, 및 산소, 황 및 질소로부터 선택된 1개의 헤테로 고리 원자를 함유하는 5- 또는 6-원 헤테로 모노시클릭 기로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
R^b는 C_1-4 알킬이고;
각각의 R^c 및 R^d는 독립적으로 H 또는 옥소이고;
m은 1인
화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서,
R³은 H이고;
R⁶은 하기 화학식을 갖는 Y³이며,

여기서
Q는 -N(R^a)-이고;
T는 -CH₂- 또는 -NH-이고;
R^a는 (1) H, (2) 할로겐, 및 1개의 산소 고리 원자를 함유하는 5- 또는 6-원 헤테로 모노시클릭 기로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된 C_1-6 알킬, 및 (3) 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R^b는 메틸 또는 에틸이고;
n은 0, 1 또는 2인
화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서,
Y¹은

로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서, 화학식 (Ia)를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:

여기서
R⁴는 (1) 할로겐 및 (2) 1 내지 3개의 할로겐으로 임의로 치환된 C_1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R⁶은 하기 화학식을 갖는 Y²이며,

여기서
파선 "
"는 임의적인 이중 결합을 나타내고;
Q는 -CH(R^a)- 또는 -N(R^a)-이고;
T는 -CH₂- 또는 -NH-이고;
R^a는 (1) H, (2) C_1-4 알킬, 및 (3) 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되며; 여기서 각각의 알킬 및 페닐은 할로겐 및 헤테로시클릴로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
R^b는 C_1-4 알킬이고;
각각의 R^c 및 R^d는 독립적으로 H 또는 옥소이고;
m은 1이고;
n은 0, 1 또는 2이다.
제8항에 있어서,
R⁶은 하기 화학식을 갖는 Y³이며,

여기서
Q는 -N(R^a)-이고;
T는 -CH₂- 또는 -NH-이고;
R^a는 (1) H, (2) 할로겐 및 테트라히드로피라닐로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된 C_1-4 알킬, 및 (3) 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R^b는 메틸인
화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서, 화학식 (Ib)를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염:

R⁵는 (1) 할로겐 및 (2) 1 내지 3개의 할로겐으로 임의로 치환된 C_1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R³은 하기 화학식을 갖는 Y²이며,

여기서
파선 "
"는 임의적인 이중 결합을 나타내고;
Q는 -CH(R^a)- 또는 -N(R^a)-이고;
T는 -CH₂- 또는 -NH-이고;
R^a는 (1) H, (2) C_1-6 알킬, 및 (3) 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되며; 여기서 각각의 알킬 및 페닐은 할로겐 및 헤테로시클릴로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
R^b는 C_1-4 알킬이고;
각각의 R^c 및 R^d는 독립적으로 H 또는 옥소이고;
m은 1이고;
n은 0, 1 또는 2이다.
제10항에 있어서,
R³은 하기 화학식을 갖는 Y³이며,

여기서
Q는 -N(R^a)-이고;
T는 -CH₂- 또는 -NH-이고;
R^a는 (1) H, (2) 할로겐 및 테트라히드로피라닐로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된 C_1-4 알킬, 및 (3) 페닐로 이루어진 군으로부터 선택되고;
R^b는 메틸인
화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
제1항에 있어서,
8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
8-(7-브로모이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
8-(7-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
8-(6-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-8-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
6,6-디메틸-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
3-메틸-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
3-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
8-(7-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-6,6-디메틸-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
3-페닐-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
3,6,6-트리메틸-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
8-(6-클로로이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-6,6-디메틸-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
6,6-디메틸-8-(6-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-8-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-1,3-디온,
6,6-디메틸-3-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
6,6-디메틸-3-페닐-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
8-(7-브로모이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-6,6-디메틸-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데칸-2,4-디온,
8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-1-온,
2-메틸-8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-1,3,8-트리아자스피로[4.5]데스-1-엔-4-온,
1-(9-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-3,9-디아자스피로[5.5]운데칸-3-일)에탄-1-온, 및
8-(7-(트리플루오로메틸)이미다조[1,5-a]피리딘-5-일)-2,8-디아자스피로[4.5]데칸-1-온
으로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
유효량의 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는, 포유동물 대상체에서 암, 바이러스 감염, HCV 감염, 우울증, 신경변성 장애, 외상, 연령-관련 백내장, 기관 이식 또는 자가면역 질환을 치료 또는 예방하기 위한 제약 조성물.
유효량의 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 또 다른 항암제와 조합하여 포함하는, 포유동물 대상체에서 암, 바이러스 감염, HCV 감염, 우울증, 신경변성 장애, 외상, 연령-관련 백내장, 기관 이식 또는 자가면역 질환을 치료하기 위한 제약 조성물.
제13항에 있어서, 암을 치료 또는 예방하기 위한 제약 조성물이며, 상기 암이 결장암, 췌장암, 유방암, 전립선암, 폐암, 뇌암, 난소암, 자궁경부암, 고환암, 신장암, 두경부암, 림프종, 백혈병 및 흑색종 암으로부터 선택된 것인 제약 조성물.
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