KR102455051B1 - 혈청내 Daxx 단백질의 측정을 통한 만성 간질환의 진단 - Google Patents

혈청내 Daxx 단백질의 측정을 통한 만성 간질환의 진단 Download PDF

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Abstract

본 발명은 만성간질환 진단용 바이오마커 Daxx 및 이의 용도에 관한 것으로, 보다 상세하게는 Daxx(Death Domain Associated Protein) 유전자의 mRNA 또는 이의 단백질 발현정도를 측정할 수 있는 제제를 포함하는 만성간질환 진단용 조성물, 이를 이용한 만성간질환 진단방법 및 만성간질환 진단 키트에 관한 것이다. 본 발명에서는 만성간질환 환자들의 혈청을 분석한 결과, Daxx의 발현이 증가하는 것을 확인하였다. 또한 만성간질환에서 간 손상을 반영하는 AST, ALT와 간 섬유화의 진행을 반영하는 혈소판수 그리고 AST 농도와 혈소판 비를 이용하여 계산한 APRI를 통해 만성 간질환에서 Daxx의 혈중농도는 간 섬유화가 진행되면서 높아지는 경향을 보인다는 것을 확인하였으므로, Daxx는 만성간질환 진단을 위한 바이오마커로 적용할 수 있는 것을 확인하였다.

Description

혈청내 Daxx 단백질의 측정을 통한 만성 간질환의 진단 {Diagnosis of chronic liver disease by measuring Daxx protein in serum}
본 발명은 만성간질환 진단용 바이오마커 Daxx 및 이의 용도에 관한 것으로, 보다 상세하게는 Daxx(Death Domain Associated Protein) 유전자의 mRNA 또는 이의 단백질 발현정도를 측정할 수 있는 제제를 포함하는 만성간질환 진단용 조성물, 이를 이용한 만성간질환 진단방법 및 만성간질환 진단 키트에 관한 것이다.
만성 간 질환이란 다양한 원인에 의해 간섬유화, 간경변과 간암으로 진행되는 질환을 말한다. 대표적인 만성 간 질환으로 바이러스성 간염(B형, C형 간염), 알코올성 간 질환, 비 알코올성 지방간 질환 등이 있다. 바이러스성 간염인 B형간염과 C형간염은 치료하지 않고 방치할 경우 높은 확률로 간경변, 간암 등의 중증 간질환으로 이행해 막대한 사회 경제적 비용을 초래한다. 우리나라는 간 관련 질환 사망률이 높은 나라 중 하나로, 간질환은 특히 사회적으로 가장 생산력이 왕성한 40~50대 남성들의 주요 사망 원인으로 꼽힌다. 건강보험심사평가원의 통계에 따르면 2019년에 만성 간 질환으로 병원을 찾은 환자는 195만 4981명으로 2015년 대비 31.9%(47만 3345명) 증가했다. 환자는 대부분 40~60대로, 30대도 13.0%를 차지했다.
간섬유화는 만성 간질환으로 간세포가 파괴되고 염증세포가 침윤되며 광범위한 섬유화에 의해 두꺼운 섬유질이 형성되고, 살아남은 간세포들에 의해 재생결절이 형성되면서 나타나는 결과이다. 이는 독성 물질 또는 다양한 감염성, 면역성, 대사성 질환에 수반되는 생체 적응 반응의 일부로서, 손상된 간 조직이 정상적으로 복구되지 않고 섬유 조직과 같이 콜라겐 축적 등이 일어나는 상태를 말한다. 세포 외 기질인 콜라겐, 피브로넥틴 및 라미닌과 같은 당단백질 및 프로테오글리칸 등의 과도한 축적을 특징으로 하며, 상기 축적물 중 주된 성분은 콜라겐, 특히 제1형 콜라겐이다 (Olaso E 등, Molecular regulation of hepatic fibrogenesis, J Hepatol 29:836-847-, 1998) 이러한 간섬유화는 만성적인 간손상에 수반되는 불가피한 간의 병리학적 결과로써, 생체 물질의 대사 또는 담즙분비 등 간의 고유 기능을 수행할 수 없는 섬유 조직으로 간이 대체된다는 점에서 간 기능의 저하(간 기능부전)가 필연적으로 나타난다. 간섬유증은 가역적이고, 가느다란 소섬유(thin fibril)로 구성되며 결절(nodule) 형성이 없는 것으로 알려져 있어, 간의 손상 원인이 소실되면 정상으로 회복되는 것이 가능할 수 있다. 그러나, 섬유화 과정이 반복적으로 지속되면 ECM (extracellular matrix) 간의 교환, 결합이 증가하여 굵은 소섬유(thick fibril) 및 재생성 결절이 생성되는 비가역적인 간경화로 진행될 수 있다.
또한, 간섬유화 및 간경화는 간암의 중요한 위험인자로서, 간암의 약 80%는 간 경화로 진행된 후에 발생하며, 섬유화 진행 정도에 따라 암 발병률이 최대 6배 이상 높아진다는 연구 결과가 보도된 바 있다. 이와 같이, 간섬유화는 간 기능부전 및 말기 간질환에서 빈발하는 합병증의 근본 원인이 되며, 나아가 간암의 발생위험을 현저하게 증가시킨다. 상기와 같이 간손상과 관련하여 간섬유화 또는 간경화가 진행되고 있는지에 따라 질환의 심각성, 예후의 진단이 달라지고, 간암의 예방에도 매우 중요한 역할을 하게 되므로, 간섬유화 또는 간경화를 조기에 정확히 진단하는 것이 매우 중요하다.
현재 간섬유화를 진단하는 표준 방법으로 간생검(liver biopsy) 표본의 조직학적 검사를 사용하고 있는데, 이는 침습적 방법이라는 단점을 갖고 있다. 계속해서 증가하는 간 질환 환자들을 대상으로 모두 조직검사를 수행하는 것은 여러 가지 한계가 있고, 간생검은 통증, 출혈 및 아주 드문 경우 사망에 이를 수도 있는 부작용이 있어, 항바이러스 치료 혹은 항섬유화 치료를 받고 있는 환자에 있어서 간섬유화의 변화를 생검법으로 모니터링 하는 것은 적절하지 않다. 따라서 침습적인 간생검을 대체할 수 있는 신뢰할 만하고, 기관 특이적인 간섬유화 진단 방법의 개발이 시급한 실정이다.
이에 본 발명에서는 비침습적으로 만성간질환을 정확하게 진단할 수 있는 바이오마커를 선별하기 위해 예의 노력한 결과, 만성간질환 환자들의 혈청에서 Daxx의 발현이 증가하는 것을 확인하였고, 만성간질환에서 간 손상을 반영하는 AST, ALT와 간 섬유화의 진행을 반영하는 혈소판수 그리고 AST 농도와 혈소판 비를 이용하여 계산한 APRI를 통해 만성 간질환에서 Daxx의 혈중농도는 간 섬유화가 진행되면서 높아지는 경향을 보인다는 것을 확인하였으므로, Daxx는 만성간질환 진단을 위한 바이오마커로 사용될 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 Daxx를 포함하는 만성간질환 진단용 바이오마커 및 Daxx 유전자의 mRNA 또는 이의 단백질의 발현 정도를 측정하는 제제를 포함하는 만성간질환 진단용 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 만성간질환 진단용 조성물을 포함하는 만성간질환 진단용 키트를 제공하는 데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 만성간질환 진단용 조성물을 이용한 만성간질환 진단을 위한 정보를 제공하는 방법을 제공하는 데 있다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 Daxx를 포함하는 만성간질환 진단용 바이오마커를 제공한다.
또한, 본 발명은 Daxx 유전자의 mRNA 또는 단백질 수준을 측정하는 제제를 포함하는 만성간질환 진단용 조성물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 상기 mRNA 수준을 측정하는 제제는 상기 Daxx 유전자에 특이적으로 결합하는 프라이머쌍, 프로브 또는 안티센스 뉴클레오타이드일 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 있어서, 상기 단백질 수준을 측정하는 제제는 상기 Daxx 단백질 또는 펩타이드 단편에 특이적으로 결합하는 항체, 상호작용 단백질, 리간드, 나노입자(nanoparticles) 또는 압타머(aptamer)를 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 만성간질환 진단용 조성물을 포함하는 만성간질환 진단용 키트를 제공한다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 있어서, 상기 키트는 RT-PCR(Reverse transcription polymerase chain reaction) 키트, DNA 칩 키트, ELISA(enzyme linked immunosorbent assay) 키트, 단백질 칩 키트, 래피드(rapid) 키트 또는 MRM(Multiple reaction monitoring) 키트일 수 있다.
또한, 본 발명은 (a) 환자의 생물학적 시료로부터 Daxx 유전자의 mRNA 또는 이의 단백질 발현 수준을 측정하는 단계; 및
(b) 상기 mRNA 또는 단백질 발현 수준을 대조군 시료와 비교하는 단계를 포함하는 만성간질환 진단에 대한 정보 제공방법을 제공한다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 상기 만성간질환 진단에 대한 정보 제공방법은 Daxx 유전자의 mRNA 또는 이의 단백질의 발현 정도가 대조군에 비해 증가하면 만성간질환인 것으로 정보를 제공하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 있어서, 상기 mRNA 발현 정도 측정은 역전사효소 중합효소반응, 경쟁적 역전사효소 중합효소반응, 실시간 역전사효소 중합효소반응, RNase 보호 분석법, 노던 블랏팅 또는 DNA 칩을 이용하여 수행할 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 있어서, 상기 단백질 발현 정도 측정은 단백질 칩 분석, 면역측정법, 리간드 바인딩 어세이, MALDI-TOF(Matrix Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry)분석, SELDI-TOF(Sulface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry)분석, 방사선 면역분석, 방사 면역 확산법, 오우크테로니 면역 확산법, 로케트 면역전기영동, 조직면역 염색, 보체 고정 분석법, 2차원 전기영동 분석, 액상 크로마토그래피-질량분석(liquid chromatography-Mass Spectrometry, LC-MS), LC-MS/MS(liquid chromatography-Mass Spectrometry/ Mass Spectrometry), 웨스턴 블랏 및 ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)를 이용하여 수행할 수 있다.
본 발명에서는 만성간질환 환자들의 혈청에서 Daxx의 발현이 증가하는 것을 확인하였으며, 또한 만성간질환에서 간 손상을 반영하는 AST, ALT와 간 섬유화의 진행을 반영하는 혈소판수 그리고 AST 농도와 혈소판 비를 이용하여 계산한 APRI를 통해 만성 간질환에서 Daxx의 혈중농도는 간 섬유화가 진행되면서 높아지는 경향을 보인다는 것을 확인하였으므로, Daxx는 만성간질환 진단을 위한 바이오마커로 적용할 수 있는 것을 확인하였다.
도 1은 간 섬유화 단계별 환자의 혈청에서 Daxx의 발현을 확인한 결과이다.
도 2는 간 섬유화 예측 인자와 Daxx의 연관성을 확인한 결과이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명은 일관점에서, Daxx를 포함하는 만성간질환 진단용 바이오마커에 관한 것이다.
본 발명에서 사용된 용어 "진단"은 병리 상태의 존재 또는 특징을 확인하는 것을 의미한다. 본 발명의 목적상, 진단은 만성간질환, 더 자세하게는 간섬유화, 간섬유증 또는 간경화 여부를 확인하는 것이다.
본 발명에서 사용된 용어 "진단용 바이오마커"란 정상 대조군에 비해 만성 간 질환이 진행된 개체에 비해, 특정 유전자 발현 수준 또는 단백질 발현 수준의 유의적인 증가 또는 감소 양상을 보이는 폴리펩티드 또는 핵산(예: mRNA 등), 지질, 당지질, 당단백질, 당(단당류, 이당류, 올리고당류 등) 등과 같은 유기 생체 분자 등을 포함하며, 바람직하게는 Daxx(Death Domain Associated Protein)이다.
본 발명의 구체적인 일구현예에서, 만성간질환 환자의 조직 검사를 바탕으로 간 섬유화 정도에 따라 F0~F2 (early stage fibrosis)와 F3~F4(late stage fibrosis)로 섬유증을 단계별로 분류 하였고, 이를 바탕으로 만성간질환의 혈액에서 Daxx의 발현을 확인한 결과, 섬유화가 진행될수록 Daxx의 농도 또한 유의미하게 증가하는 것을 확인하였다 (도 1).
본 발명의 구체적인 일구현예에서, 만성 간질환에서 간 손상을 반영하는 AST, ALT와 간 섬유화의 진행을 반영하는 혈소판수 (Platelet) 그리고 AST 농도와 혈소판 비를 이용해 계산한 APRI를 통해 만성 간질환에서 섬유화정도와 Daxx의 연관성을 확인한 결과, 혈소판수가 감소할수록 혈중 Daxx의 농도가 유의미하게 낮아졌고, APRI가 높아질수록 Daxx가 유의미하게 높아지는 것을 확인하였다. 하지만 AST와 ALT는 Daxx의 혈중 농도와 연관성이 없었다. Daxx 의 혈중농도는 간 섬유화가 진행되면서 높아지는 경향을 보인다는 것을 확인하였다 (도 2).
따라서, 본 발명은 다른 관점에서, Daxx 유전자의 mRNA 또는 단백질 수준을 측정하는 제제를 포함하는 만성간질환 진단용 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 사용된 용어 "mRNA 발현수준 측정"이란 생물학적 시료에서 만성 간질환 진단을 위한 바이오마커의 mRNA 존재 여부와 발현 정도를 확인하는 과정으로 mRNA의 양을 측정한다. 이를 위한 분석 방법으로는 역전사 중합효소반응(RT-PCR), 경쟁적 역전사 중합효소반응(Competitive RT-PCR), 실시간 역전사 중합효소반응(Real-time RT-PCR), RNase 보호 분석법(RPA; RNase protection assay), 노던 블랏팅(Northern blotting), DNA 칩 등이 있으나 이로 제한되는 것은 아니다.
상기 Daxx의 mRNA 수준을 측정하는 제제는 상기 Daxx의 유전자에 특이적으로 결합하는 프라이머쌍, 프로브 또는 안티센스 뉴클레오타이드인 것을 특징으로 하며, 상기 유전자들의 핵산 정보가 GeneBank 등에 알려져 있으므로 당업자는 상기 서열을 바탕으로 이들 프라이머쌍, 프로브 또는 안티센스 뉴클레오타이드를 디자인할 수 있다.
본 발명에서 사용된 용어 "프라이머"는 표적 유전자 서열을 인지하는 단편으로서, 정방향 및 역방향의 프라이머 쌍을 포함하나, 바람직하게는, 특이성 및 민감성을 가지는 분석 결과를 제공하는 프라이머 쌍이다.
본 발명에서 사용된 용어 "프로브"란 시료 내의 검출하고자 하는 표적 물질과 특이적으로 결합할 수 있는 물질을 의미하며, 상기 결합을 통하여 특이적으로 시료 내의 표적 물질의 존재를 확인할 수 있는 물질을 의미한다. 프로브의 종류는 당업계에서 통상적으로 사용되는 물질로서 제한은 없으나, 바람직하게는 PNA(peptide nucleic acid), LNA(locked nucleic acid), 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질, RNA 또는 DNA 일 수 있으며, 가장 바람직하게는 PNA이다.
본 발명에서 사용된 용어 "안티센스"는 안티센스 올리고머가 왓슨-크릭 염기쌍 형성에 의해 RNA 내의 표적 서열과 혼성화되어, 표적서열 내에서 전형적으로 mRNA와 RNA:올리고머 헤테로이중체의 형성을 허용하는 뉴클레오티드 염기의 서열 및 서브유닛간 백본을 갖는 올리고머를 의미한다. 올리고머는 표적 서열에 대한 정확한 서열 상보성 또는 근사 상보성을 가질 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 Daxx의 단백질 수준을 측정하는 제제는 상기 단백질 또는 펩타이드 단편에 특이적으로 결합하는 항체, 상호작용 단백질, 리간드, 나노입자(nanoparticles) 또는 압타머(aptamer)인 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명에 사용된 용어 "단백질 발현수준 측정"이란 생물학적 시료에서 만성 간질환 진단을 위한 바이오마커로부터 발현본 발명에 있어서, 상기 Daxx의 단백질 수준을 측정하는 제제는 상기 단백질 또는 펩타이드 단편에 특이적으로 결합하는 항체, 상호작용 단백질, 리간드, 나노입자(nanoparticles) 또는 압타머(aptamer)인 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명에 사용된 용어 "단백질 발현수준 측정"이란 생물학적 시료에서 만성 간질환 진단을 위한 바이오마커로부터 발현된 단백질의 존재 여부와 발현 정도를 확인하는 과정이다. 상기 유전자의 단백질 또는 펩타이드 단편에 특이적으로 결합하는 항체, 상호작용 단백질, 리간드, 나노입자 (nanoparticles) 또는 압타머(aptamer)를 이용하여 단백질의 양을 확인할 수 있다.
상기 단백질 발현 수준 측정 또는 비교 분석 방법으로는 단백질 칩 분석, 면역측정법, 리간드 바인딩 어세이, MALDI-TOF(Matrix Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry)분석, SELDI-TOF(Sulface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry)분석, 방사선 면역분석, 방사 면역 확산법, 오우크테로니 면역 확산법, 로케트 면역전기영동, 조직면역 염색, 보체 고정 분석법, 2차원 전기영동 분석, 액상 크로마토그래피-질량분석(liquid chromatography-Mass Spectrometry, LC-MS), LC-MS/MS(liquid chromatography-Mass Spectrometry/ Mass Spectrometry), 웨스턴 블랏 및 ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)등이 있으나 이로 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 사용된 용어 "항체"는 항원과 특이적으로 결합하여 항원-항체 반응을 일으키는 물질을 가리킨다. 본 발명의 목적상, 항체는 본 발명의 바이오마커에 대해 특이적으로 결합하는 항체를 의미한다. 본 발명의 항체는 다클론 항체, 단클론 항체 및 재조합 항체를 모두 포함한다.
본 발명은 또 다른 관점에서, 상기 만성간질환 진단용 조성물을 포함하는 만성간질환 진단용 키트에 관한 것이다.
상기 키트는 당업계에 알려져 있는 통상의 제조방법에 의해 제조될 수 있다. 상기 키트는 예를 들면, 동결 건조 형태의 항체와 완충액, 안정화제, 불활성 단백질 등을 포함할 수 있다.
상기 키트는 검출 가능한 표지를 더 포함할 수 있다. 용어 "검출 가능한 표지"는 표지가 없는 동일한 종류의 분자들 중에서 표지를 포함하는 분자를 특이적으로 검출하도록 하는 원자 또는 분자를 의미한다. 상기 검출 가능한 표지는 상기 단백질 또는 그의 단편에 특이적으로 결합하는 항체, 상호작용 단백질, 리간드, 나노입자, 또는 압타머에 부착된 것일 수 있다. 상기 검출 가능한 표지는 방사종(radionuclide), 형광원(fluorophore), 효소(enzyme)를 포함할 수 있다.
상기 키트는 당업계에 알려진 다양한 면역분석법 또는 면역염색법에 따라 이용될 수 있다. 상기 면역분석법 또는 면역염색법은 방사능면역분석, 방사능면역침전, 면역침전, ELISA, 캡처-ELISA, 억제 또는 경쟁 분석, 샌드위치 분석, 유세포 분석, 면역형광염색 및 면역친화성 정제를 포함할 수 있다. 바람직하게, 상기 키트는 RT-PCR(reverse transcription polymerase chain reaction) 키트, DNA 칩 키트, ELISA(enzyme linked immunosorbent assay) 키트, 단백질 칩 키트, 래피드(rapid) 키트 또는 MRM(multiple reaction monitoring)인 것일 수 있다.
본 발명은 또 다른 관점에서, (a) 환자의 생물학적 시료로부터 Daxx의 mRNA 또는 단백질 수준을 측정하는 단계; 및
(b) 상기 mRNA 또는 단백질 발현 수준을 대조군 시료와 비교하는 단계를 포함하는 만성간질환 진단에 대한 정보 제공방법에 관한 것이다.
상기 방법에서 "생물학적 시료(biological sample)"란 조직, 세포, 혈액, 혈청, 혈장, 타액, 뇌척수액 또는 뇨와 같은 시료 등을 의미하며, 바람직하게는 혈액, 혈장, 혈청을 의미한다.
상기 만성간질환 진단에 대한 정보 제공방법에서 Daxx 유전자의 mRNA 또는 이의 단백질의 발현 수준 측정 방법은 상술한 바와 같다.
상기 만성간질환 진단에 대한 정보 제공방법은 Daxx 유전자의 mRNA 또는 이의 단백질의 발현 정도가 대조군에 비해 증가하면 만성간질환인 것으로 정보를 제공하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 자세하게는 간섬유화, 간섬유증 또는 간경화인 것으로 정보를 제공하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다.
이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
[실시예 1] 만성 간질환 환자 혈청에서 DAXX의 혈중 농도 확인
액상생검을 통해 얻은 환자의 임상 시료에서 혈청 내 Daxx의 농도를 이용해 만성 간질환을 진단할 수 있는지 조사하였다. 상기 임상 시료는 가톨릭대학교 의과대학 서울성모병원에서 만성간질환 환자로 판단 받은 환자들로부터 수득한 혈액을 사용하였으며, 이 환자는 액상 생검과 동시에 조직 생검을 받은 환자로 병리학자의 조직병리학적 판별을 통해 간 섬유증 단계별로 분류를 하였다, 대조군으로 정상인으로부터 수득한 혈액을 사용하였고, 상기 조사는 각 환자들로부터 수득한 혈액에서 혈청을 분리한 다음, Daxx의 ELISA kit (Mybiosource, MBS2509879)를 이용하여 각 환자의 혈청에서 Daxx의 혈중 농도를 비교 분석하였다. 환자는 섬유화 정도에 따라 F0~F2 (early stage fibrosis)와 F3~F4(late stage fibrosis)로 분류 하였다.그 결과, 만성 간질환 환자에서 Daxx의 농도가 정상 대조군에 비해 증가한 것을 확인할 수 있었고, 섬유화 단계로 분류하였을 때, 섬유화가 진행될수록 Daxx의 농도 또한 유의미하게 증가하는 것을 확인하였다 (도 1).
[실시예 2] 섬유화를 예측하는 인자와 Daxx의 연관성 검증
만성 간질환에서 간 손상을 반영하는 AST, ALT와 간 섬유화의 진행을 반영하는 혈소판수 (Platelet) 그리고 AST 농도와 혈소판 비를 이용해 계산한 APRI를 통해 만성 간질환에서 섬유화정도와 Daxx의 연관성을 확인했다. 흥미롭게도 혈소판수가 감소할수록 혈중 Daxx의 농도가 유의미 하게 낮아지는 것을 볼수있었고 (p<0.01, r=-0.36), APRI가 높아질수록 Daxx가 유의미하게 높아지는 것을 확인하였다 (p<0.001, r=0.39). 하지만, AST와 ALT는 Daxx의 혈중 농도와 연관성이 없었다. 따라서, Daxx 의 혈중농도는 만성간질환 환자에서 간 섬유화가 진행되면서 높아지는 경향을 보인다는 것을 알 수 있다.

Claims (7)

  1. Daxx 유전자의 mRNA 또는 단백질 수준을 측정하는 제제를 포함하는 간 섬유증 진단용 조성물로서,
    상기 Daxx 유전자의 mRNA 또는 단백질 수준은 환자에서 분리된 혈청에서 측정되는 것인, 간 섬유증 진단용 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 mRNA 수준을 측정하는 제제는 상기 Daxx 유전자에 특이적으로 결합하는 프라이머쌍, 프로브 또는 안티센스 뉴클레오타이드인 것인, 조성물.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 단백질 수준을 측정하는 제제는 상기 Daxx 단백질 또는 펩타이드 단편에 특이적으로 결합하는 항체, 상호작용 단백질, 리간드, 나노입자(nanoparticles) 또는 압타머(aptamer)인 것인, 조성물.
  4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 따른 간 섬유증 진단용 조성물을 포함하는 간 섬유증 진단용 키트.
  5. 제 4 항에 있어서,
    상기 키트는 RT-PCR(Reverse transcription polymerase chain reaction) 키트, DNA 칩 키트, ELISA(enzyme linked immunosorbent assay) 키트, 단백질 칩 키트, 래피드(rapid) 키트 또는 MRM(Multiple reaction monitoring) 키트인 것인, 키트.
  6. (a) 환자에서 분리된 혈청으로부터 Daxx 유전자의 mRNA 또는 이의 단백질 발현 수준을 측정하는 단계; 및
    (b) 상기 mRNA 또는 단백질 발현 수준을 대조군 시료와 비교하는 단계를 포함하는, 간 섬유증의 진단을 위한 정보제공 방법.
  7. 제 6 항에 있어서,
    상기 방법은 Daxx 유전자의 mRNA 또는 이의 단백질의 발현 정도가 대조군에 비해 증가하면 간 섬유증인 것으로 판단하는 단계를 추가로 포함하는 것인, 정보제공 방법.
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