KR102438028B1 - 휴대용 성분 추출 스포이트 및 성분 추출 방법 - Google Patents
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Abstract
휴대용 성분 추출 스포이트 및 성분 추출 방법을 개시한다.
본 실시예의 일 측면에 의하면, 시료를 유출·입시키며 시료 내 포함된 유전자를 추출하는 성분 추출 스포이트에 있어서, 음압을 제공하여, 시료가 빨아들여지도록 하는 피펫부 및 상기 피펫부가 내부에 유입되어 고정되도록 하며, 상기 피펫부로부터 제공되는 음압을 시료로 공급하고, 상기 피펫부에 의해 빨아들여지는 시료 내에서 유전자를 추출하는 팁부를 포함하는 것을 특징으로 하는 성분 추출 스포이트를 제공한다.
본 실시예의 일 측면에 의하면, 시료를 유출·입시키며 시료 내 포함된 유전자를 추출하는 성분 추출 스포이트에 있어서, 음압을 제공하여, 시료가 빨아들여지도록 하는 피펫부 및 상기 피펫부가 내부에 유입되어 고정되도록 하며, 상기 피펫부로부터 제공되는 음압을 시료로 공급하고, 상기 피펫부에 의해 빨아들여지는 시료 내에서 유전자를 추출하는 팁부를 포함하는 것을 특징으로 하는 성분 추출 스포이트를 제공한다.
Description
본 발명은 사용자가 휴대하여 현장에서 바로 특정 성분을 추출할 수 있도록 하는 스포이트 및 그것의 추출 방법에 관한 것이다.
이 부분에 기술된 내용은 단순히 본 실시예에 대한 배경 정보를 제공할 뿐 종래기술을 구성하는 것은 아니다.
SARS(Severe Acute Respiratory Syndrome), MERS(Middle East Respiratory Syndrome) 또는 최근 유행 중인 코로나 바이러스(COVID) 등의 바이러스 감염 질환은 치사율이 높으면서도 호흡기를 통한 전염성이 매우 높기 때문에, 이를 조기에 진단하여 추가적 전염과 피해를 예방하는 것이 중요하다.
현재 바이러스 검출을 위해 주로 사용되는 방법은 분자진단 방법(Molecular diagnostics)으로, 질병의 원인이 되는 박테리아, 바이러스 등의 핵산(Nucleic Acid, DNA/RNA 또는 그들의 변형체)을 검출하여 병의 원인과 감염 여부를 검출하는 방법이다. 이러한 분자 진단 방법은 체액, 객담 또는 조직 샘플 등으로부터 샘플을 채취하고, 채취된 샘플 내에서 유전자를 추출하여, 중합효소 연쇄반응(PCR: Polymerase Chain Reaction)을 이용한 유전자의 증폭, 분석에 이르는 총 4단계로 구성된다.
이때, 종래의 추출 방법 중 하나는 채취된 샘플 내에서 유전자를 추출함에 있어, 반드시 원심분리를 수행하여야만 했다. 그러나 원심분리는 바이러스 검사 현장에 비치되기는 어려운 장비로서 특정 장소에 비치되어 있기 때문에, 종래의 유전자 추출 방법은 현장에서 유전자를 온전히 추출하는 것은 곤란한 문제가 존재해왔다.
이러한 문제는 종래의 다른 추출방법인 자성분리 기술에서도 마찬가지로 존재한다. 자성분리 기술은 세포 혼합물에 자성 입자를 첨가해줌으로써, 핵산 또는 단백질과 자성 입자 사이에 결합을 유도하여 결합체를 형성시킨 후 외부 자기장을 이용하여 자성 입자와 결합된 핵산 또는 단백질만을 선택적으로 분리시키는 방법이다. 다만 이 방법 역시, 핵산을 분리하기 위해서는 외부에서 자기장이 제공되어야 하는 점에서 현장에서 즉각적으로 유전자를 추출하기 곤란한 문제가 있다.
본 발명의 일 실시예는, 유전자 등의 특정 성분을 현장에서 온전히 추출할 수 있는 휴대용 성분 추출 스포이트 및 성분 추출 방법을 제공하는 데 일 목적이 있다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 시료를 유출·입시키며 시료 내 포함된 유전자를 추출하는 성분 추출 스포이트에 있어서, 음압을 제공하여, 시료가 빨아들여지도록 하는 피펫부 및 상기 피펫부가 내부에 유입되어 고정되도록 하며, 상기 피펫부로부터 제공되는 음압을 시료로 공급하고, 상기 피펫부에 의해 빨아들여지는 시료 내에서 유전자를 추출하는 팁부를 포함하는 것을 특징으로 하는 성분 추출 스포이트를 제공한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 상기 피펫부는 음압 제공부 및 개방부를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 상기 음압 제공부는 외부로부터 외력을 받아 내부에 있는 공기를 외부로 배출하거나, 형상이 다시 복원되며 음압을 형성하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 상기 팁부는 충진재, 제1 개방부 및 제2 개방부를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 상기 충진재는 상기 피펫부로부터 제공되는 음압에 의해 시료가 내부로 유입되는 경우, 유입되는 시료 내에 포함된 유전자만을 필터링하여 흡착하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 상기 충진재는 시료 내 포함된 유전자를 추출하는 추출부 및 상기 추출부의 양 끝에 배치되어 상기 추출부를 고정시키는 고정부를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 상기 추출부는 40 내지 60㎛ 또는 75 내지 150㎛의 입도를 갖는 실리카 비드로 구현되는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 상기 유전자는 핵산인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 시료를 유출·입시키며 시료 내 포함된 유전자를 추출하는 성분 추출 스포이트에 있어서, 서로 다른 크기의 음압을 제공하여, 시료 또는 시료 이외의 용액이 빨아들여지도록 하는 피펫부 및 상기 피펫부가 내부에 유입되어 고정되도록 하며, 상기 피펫부로부터 제공되는 음압을 시료 또는 시료 이외의 용액으로 공급하고, 상기 피펫부에 의해 빨아들여지는 시료 내에서 유전자를 추출하는 팁부를 포함하는 것을 특징으로 하는 성분 추출 스포이트를 제공한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 상기 피펫부는 제1 음압 제공부, 제2 음압 제공부 및 개방부를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 상기 제1 음압 제공부 및 상기 제2 음압 제공부는 서로 다른 양의 음압과 배출공기를 제공하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 상기 피펫부는 시료를 포함한 용액 또는 세척 용액에 제공하는 음압의 양과 용출 용엑에 제공하는 음압의 양을 달리하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 성분 추출 스포이트 내에서 유출·입하는 시료 내 유전자를 추출하는 충진재에 있어서, 시료 내 포함된 유전자를 추출하는 추출부 및 상기 추출부의 양 끝에 배치되어 상기 추출부를 고정시키는 고정부를 포함하는 것을 특징으로 하는 충진재를 제공한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 상기 추출부는 40 내지 60㎛ 또는 75 내지 150㎛의 입도를 갖는 실리카 비드로 구현되는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 성분 추출 스포이트가 시료 내에서 유전자를 추출하는 방법에 있어서, 시료와 혼합된 파쇄용액을 빨아들여 시료 내 포함된 유전자만을 분리하는 분리과정과 세척 용액을 빨아들여, 잔존하는 파쇄 용액 성분을 세척하는 세척과정 및 용출 용액을 빨아들여, 분리된 유전자를 배출시키는 배출과정을 포함하는 것을 특징으로 하는 유전자 추출 방법을 제공한다.
본 발명의 일 측면에 의하면, 상기 유전자는 핵산인 것을 특징으로 한다.
이상에서 설명한 바와 같이, 본 발명의 일 측면에 따르면, 유전자 등의 특정 성분을 현장에서 온전히 추출할 수 있어, 검사 속도와 편의성을 향상시킬 수 있는 장점이 있다.
도 1은 본 발명의 제1 실시예에 따른 휴대용 성분 추출 스포이트의 구성을 도시한 도면이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 팁 내 충진재의 구성을 도시한 도면이다.
도 3은 본 발명의 제2 실시예에 따른 휴대용 성분 추출 스포이트의 구성을 도시한 도면이다.
도 4는 본 발명의 제2 실시예에 따른 팁 내 피펫 고정부의 구성을 도시한 도면이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 휴대용 성분 추출 스포이트가 성분을 추출하는 방법을 도시한 순서도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 팁 내 충진재의 구성을 도시한 도면이다.
도 3은 본 발명의 제2 실시예에 따른 휴대용 성분 추출 스포이트의 구성을 도시한 도면이다.
도 4는 본 발명의 제2 실시예에 따른 팁 내 피펫 고정부의 구성을 도시한 도면이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 휴대용 성분 추출 스포이트가 성분을 추출하는 방법을 도시한 순서도이다.
본 발명은 다양한 변경을 가할 수 있고 여러 가지 실시 예를 가질 수 있는 바, 특정 실시 예들을 도면에 예시하고 상세하게 설명하고자 한다. 그러나 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 각 도면을 설명하면서 유사한 참조부호를 유사한 구성요소에 대해 사용하였다.
제1, 제2, A, B 등의 용어는 다양한 구성요소들을 설명하는데 사용될 수 있지만, 상기 구성요소들은 상기 용어들에 의해 한정되어서는 안 된다. 상기 용어들은 하나의 구성요소를 다른 구성요소로부터 구별하는 목적으로만 사용된다. 예를 들어, 본 발명의 권리 범위를 벗어나지 않으면서 제1 구성요소는 제2 구성요소로 명명될 수 있고, 유사하게 제2 구성요소도 제1 구성요소로 명명될 수 있다. 및/또는 이라는 용어는 복수의 관련된 기재된 항목들의 조합 또는 복수의 관련된 기재된 항목들 중의 어느 항목을 포함한다.
어떤 구성요소가 다른 구성요소에 "연결되어" 있다거나 "접속되어" 있다고 언급된 때에는, 그 다른 구성요소에 직접적으로 연결되어 있거나 또는 접속되어 있을 수도 있지만, 중간에 다른 구성요소가 존재할 수도 있다고 이해되어야 할 것이다. 반면에, 어떤 구성요소가 다른 구성요소에 "직접 연결되어" 있다거나 "직접 접속되어" 있다고 언급된 때에서, 중간에 다른 구성요소가 존재하지 않는 것으로 이해되어야 할 것이다.
본 출원에서 사용한 용어는 단지 특정한 실시 예를 설명하기 위해 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 출원에서 "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해서 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다.
일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
또한, 본 발명의 각 실시예에 포함된 각 구성, 과정, 공정 또는 방법 등은 기술적으로 상호 간 모순되지 않는 범위 내에서 공유될 수 있다.
도 1은 본 발명의 제1 실시예에 따른 휴대용 성분 추출 스포이트의 구성을 도시한 도면이다.
도 1을 참조하면, 본 발명의 제1 실시예에 따른 휴대용 성분 추출 스포이트(100)는 팁부(110, Tip) 및 피펫부(120, Pipette)를 포함한다.
휴대용 성분 추출 스포이트(100, 이하에서 스포이트로 약칭함)는 검출하고자 하는 바이러스의 유전자가 포함된 시료 내에서 유전자, 특히, 핵산으로서 DNA 또는 RNA를 추출할 수 있는 기구이다. 스포이트(100)는 시료를 채취하는 현장에서 바로 별도의 기구 없이 유전자를 추출할 수 있기에, 검사를 위해 유전자를 추출하는 검사에서 신속성과 편의성을 확보할 수 있다.
스포이트(100)는 팁부(110)와 피펫부(120)를 포함한다.
팁부(110)는 충진재(116) 및 개방부(113, 119)를 포함하여, 피펫부(120)가 팁부(110) 내부로 유입되어 음압을 시료로 공급할 수 있도록 하며, 피펫부(120)에 의해 빨아들여지는 시료 내에서 유전자를 추출한다.
팁부(110)는 내부가 비어 있으며 양 끝단에 각각 개방부(113, 119)를 포함하여, 내부로 바이러스의 유전자가 포함된 시료(시료를 포함한 용액)가 유입되거나 피펫부(120)가 유입되어 안착될 수 있도록 한다. 피펫부(120)가 유입되는 방향의 일 끝단에 개방부(119)가 형성되어, 피펫부(120)가 팁부(110) 내부로 유입될 수 있도록 한다. 다른 일 끝단에 개방부(113)가 형성되어, 피펫부(120)에 의해 공급되는 음압 또는 배출공기가 시료(시료를 포함한 용액)로 전달되고, 시료(시료를 포함한 용액)가 팁부(110) 내부로 유입될 수 있도록 한다.
특히, 팁부(110)의 일 끝단에 위치한 개방부(119)로부터 다른 일 끝단에 개방부(113)까지 팁부(110)의 직경은 지속적으로 감소하거나 또는 일정 구간에서 집중적으로 감소하는 형태를 가질 수 있다. 이처럼, 팁부(110)가 개방부(113, 119)를 포함하며 직경이 감소하는 형태를 가짐에 따라, 피펫부(120)가 (직경이 보다 넓은) 개방부(119)를 거쳐 팁부(110) 내부로 유입될 수 있으며, 팁부(110)의 직경 감소에 의해 팁부(110) 내부에서 온전히 밀착되어 고정될 수 있다.
팁부(110)는 개방부(113)와 근접한 위치(개방부(113)에서 기 설정된 거리 내)에 충진재(116)를 포함한다. 충진재(116)는 팁부(110) 내부에 배치된 피펫부(120)가 시료로 음압을 공급하여 시료를 (개방부(113)를 거쳐) 팁부(110) 내부로 빨아들일 경우, 시료 내 포함된 유전자만을 필터링하여 흡착한다. 충진재(116)에 대한 구체적인 구조는 도 2에 도시되어 있다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 팁 내 충진재의 구성을 도시한 도면이다.
도 2를 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 충진재(116)는 고정부(210) 및 추출부(220)를 포함한다.
고정부(210)는 추출부(220)의 양 끝에 배치되어, 추출부(220)를 고정시킨다. 고정부(210)는 유체에 대한 저항이 낮아 고정부(210) 사이로 시료가 원활히 승·하강할 수 있도록 하며, 시료의 승·하강에도 정위치에 고정될 수 있는 성분으로 구현되며, 그것의 일 예로서, 유리섬유일 수 있다. 고정부(210)는 피펫부(120)의 동작에 의해 시료가 팁부(110) 내부로 빨아들여지더라도 이동하지 않아 추출부(220)를 고정시키면서, 추출부(220)로 시료가 전달될 수 있도록 시료를 원활히 통과시킨다.
추출부(220)는 고정부(210)의 사이에 배치되어, 시료 내 포함된 유전자를 추출한다. 추출부(220)는 실리카 비드 등과 같이 표면적과 저항이 커, 최대한 많은 표면적으로 시료와 접촉하며 시료 내 특정 성분을 추출할 수 있는 성분으로 구현된다. 예를 들어, 추출부(220)는 입도가 40 내지 150㎛인 실리카 비드로 구현될 수 있으며, 보다 구체적으로는 입도가 40 내지 60㎛ 또는 75 내지 150㎛일 수 있다. 추출부(220)가 상대적으로 입도가 작은 실리카 비드로 구현될 경우, 저항이 커지며 추출량이 상대적으로 많아질 수 있다. 추출부(220)가 상대적으로 입도가 큰 실리카 비드로 구현될 경우, 저항이 작아지며 상대적으로 속도가 빨라질 수 있다. 이와 같이 용도에 따라 적절한 사이즈를 갖는 실리카 비드들이 추출부(220)에 배치됨에 따라, 고정부(210) 사이에서 추출부(220)가 이동하지 않으면서 고정부(210)를 거친 시료 내에서 추출하고자 하는 유전자만이 추출부(220)에 의해 추출될 수 있다.
추출부(220)가 고정부(210) 사이에 배치될 경우, 전술한 이유에 의해 상대적으로 유전자의 추출량이 증가할 수 있다. 아래의 표는 본 발명의 일 실시예에 따른 충진재를 포함한 스포이트와 종래의 고정부없이 추출부만이 존재하는 충진재를 포함한 스포이트로 샘플을 추출하였을 때의 결과값을 나타낸다.
위의 표에서 확인할 수 있듯이 추출부(220)가 고정부(210) 사이에 배치될 경우, 추출속도도 빨라지며(Cq.의 감소) 추출량도 현저히 증가(End point 수치의 증가)함을 확인할 수 있다.
다시, 도 1을 참조하면, 피펫부(120)는 음압 제공부(124) 및 개방부(128)를 포함하여, 음압 제공부(124)로부터 음압을 제공하여 시료(시료를 포함한 용액)가 팁부(110)로 빨아들여지도록 한다. 피펫부(120)는 팁부(110)와 마찬가지로 내부가 빈 형태로 구현되며, 외력이 공급되면 형상이 변화하나 다시 복원될 수 있는 성분으로 구현된다. 음압 제공부(124)는 피펫부(120)의 다른 부위보다 부피가 크게 구현되어, 사용자가 음압 제공부(124)로 압력을 가하는데 용이하도록 구현된다. 사용자가 음압 제공부(124)로 압력을 가할 경우, 피펫부(120) 내부가 빈 상태이기 때문에 피펫부(120) 내부에 있는 공기는 개방부(128)로 배출된다. 이후, 음압 제공부(124)의 형상이 다시 복원되며, 피펫부(120) 내부에서 음압이 형성된다. 이처럼 형성되는 음압이 시료로 전달되며, 시료(시료를 포함한 용액)가 팁부(110)로 유입된다.
개방부(128)는 피펫부(120) 내 일 끝단에 형성되며, 음압 제공부(124)는 개방부(128)와 떨어진 위치에 형성될 수 있다. 이때, 피펫부(120)의 직경은 개방부(128)로 가까워질수록 작아진다. 피펫부(120)의 음압 제공부(124)에서 형성되는 음압이 시료까지 전달되기 위해서는, 적어도 피펫부(120)의 개방부(128)가 팁부(110)의 내부에 배치되어 개방부(113)로 음압이 전달될 수 있어야 한다. 이에, 피펫부(120)의 직경은 개방부(128)로 가까워질수록 작아지며, 적어도 개방부(128) 부근의 직경은 팁부(110)의 개방부(119)의 직경보다는 작아 개방부(128)가 팁부(110) 내로 유입될 수 있어야 한다. 또한, 개방부(128) 부근의 직경은 팁부(110) 내 충진재(116)의 상단부의 직경보다는 커야 한다. 개방부(128)의 직경이 충진재(116)의 상단부의 직경보다도 작게 된다면, 팁부(110) 내부로 유입된 피펫부(120)가 충진재(116)까지 도달하게 되여 충진재(116)를 훼손하는 문제가 발생하고, 음압이 충진재(116)를 거쳐 온전히 시료로 도달하지 못하게 되며, 피펫부(120)가 팁부(110) 내에서 온전히 고정되지 못하는 문제가 발생하게 된다. 따라서, 개방부(128)의 직경은 개방부(119)의 직경보다는 작고, 충진재(116)의 상단부(고정부(210b)로부터 상부로 기 설정된 거리만큼 떨어진 위치)의 직경보다는 크도록 형성된다. 이에 따라, 피펫부(120)의 개방부(128)는 팁부(110) 내 임의의 지점에서 온전히 밀착되어 고정되며, 음압을 팁부(110) 내 개방부(113)로 전달한다. 음압에 의해 개방부(113)로 시료가 유입되며, 유전자를 추출한다.
스포이트(100)는 이 같은 팁부(110)와 피펫부(120)를 포함하기 때문에, 시료 내 유전자의 추출을 위해 별도로 원심분리할 필요없이 간단하게 유전자를 추출할 수 있다. 스포이트(100)는 도 5에 도시된 방법으로 유전자를 추출할 수 있다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 휴대용 성분 추출 스포이트가 성분을 추출하는 방법을 도시한 순서도이다.
시료가 채취된다(S510). 시료는 예를 들어, 침이나 콧물과 같은 타액일 수 있다. 이와 같은 시료는 특정 채취기구에 의해 채취된다. 채취된 시료의 보유자가 보균자라면, 시료 내에 검사하고자 하는 바이러스의 유전자가 포함되어 있게 된다.
채취된 시료와 파쇄용액(Lysis buffer)이 혼합되며, 혼합된 용액을 빨아들이며 유전자만을 분리한다(S520). 채취된 시료와 파쇄용액이 혼합된다. 여기서, 파쇄용액이란 시료 내 포함된 유전자(핵산으로서 DNA 또는 RNA) 및 기타 단백질 등을 분리시키는 용액이다. 채취된 시료와 파쇄 용액이 혼합되며 기 설정된 시간(예를 들어, 10분) 동안 인큐베이션(Incubation)될 수 있다. 이에 의해, 채취된 시료 내 각 성분이 모두 파쇄된다.
스포이트(100)는 파쇄 용액에 의해 파쇄된 시료로 음압과 배출공기를 제공한다. 전술한 대로, 음압 제공부(124)는 외부로부터 압력을 받아 공기를 배출할 수도 있고, 그 후에 복원되며 음압을 제공할 수도 있다. 이처럼 제공되는 음압 또는 배출공기는 팁부(110) 내 개방부(113)를 따라 시료로 전달된다. 시료로 음압이 전달될 경우, 시료는 팁부(110) 내로 유입되며 충진재(116)를 거친다. 시료가 충진재(116)를 거치며, 시료 내 유전자가 추출부(220)에서 추출된다. 배출공기가 전달될 경우, 유입된 시료가 개방부(113)의 외부로 배출된다. 이러한 과정이 반복될 수 있으며, 충진재(116) 내 추출부(220)에서 시료 내 유전자가 추출된다. 피펫부(120)와 팁부(110)가 결합되어 고정될 수 있는 점, 피펫부(120)에 의해 시료로 음압이 전달되며 시료가 팁부(110) 내로 유입될 수 있는 점 및 충진재(116)에 의해 유전자가 추출될 수 있는 점에서, 스포이트(100)는 별도로 원심 분리를 수행하지 않더라도 시료 내 유전자가 추출될 수 있다.
종래의 방법에 의한다면, 시료가 혼합된 파쇄 용액이 유전자 분리 용기 내로 주입된 후, 용기가 원심분리되어야 비로소 시료 내 유전자가 추출될 수 있었다.
스포이트(100)는 세척용액(Washing Buffer)을 빨아들여, 파쇄용액을 세척한다(S530). 스포이트(100)가 충분한 시간 동안 유전자를 추출한 후, 스포이트(100)의 개방부(113)에는 세척용액이 공급된다. 세척용액은 파쇄 용액을 세척하는 용액으로서, 시료가 팁부(110)로 유입되며, 충진재(116) 내에 추출하고자 하는 유전자 뿐만 아니라 파쇄 용액 성분까지 잔존할 수 있다. 충진재(116) 내에 잔존하는 파쇄 용액 성분을 제거하고자, 스포이트(100)는 세척 용액을 빨아들인다. 전술한 과정(S520)과 마찬가지로, 피펫부(120) 내 음압 제공부(124)의 동작으로 세척 용액이 팁부(110) 내로 유입되고 배출된다. 세척 용액의 팁부(110) 내로의 유출·입에 의해 파쇄 용액이 세척된다.
종래의 방법에 의한다면, 유전자 분리 용기 내로 세척 용액이 주입된 후, 추가적으로 원심분리가 진행되어야 비로소 파쇄 용액이 세척될 수 있었다.
스포이트(100)는 용출 용액(Elution Buffer)을 빨아들여, 분리된 유전자를 배출한다(S540). 전술한 세척과정까지 완료한 후, 스포이트(100)는 피펫부(120)를 이용하여 용출 용액을 빨아들인다. 용출 용액은 충진재(116) 내에 추출된 유전자를 충진재(116)로부터 분리하여 용출시킨다. 용출 용액의 팁부(110) 내로의 유입에 의해 추출부(116)에서 추출된 유전자가 분리되며 배출된다.
이처럼 분리된 유전자는 중합효소 연쇄반응(PCR)을 이용한 증폭과정을 거치며 검사가 진행될 수 있다.
전술한 바와 같이, 스포이트(100)는 팁부(110)와 피펫부(120)를 포함하여, 간단히 각 용액들을 팁부(110) 내로 유출·입시켜 유전자를 추출할 수 있다.
도 3a는 본 발명의 제2 실시예에 따른 휴대용 성분 추출 스포이트의 구성을 도시한 도면이고, 도 4는 본 발명의 제2 실시예에 따른 팁 내 피펫 고정부의 구성을 도시한 도면이다.
도 3a 및 도 4를 참조하면, 본 발명의 제2 실시예에 따른 휴대용 성분 추출 스포이트(300a)는 팁부(310) 및 피펫부(320)를 포함한다.
팁부(310)는 팁부(110)의 모든 구성을 포함하며, 나아가 피펫 고정부(318)를 더 포함한다. 피펫 고정부(318)는 개방부(316) 부근에 배치되어, 유입되는 피펫부를 보다 온전히 고정시킨다.
도 4를 참조하면, 피펫 고정부(318)는 빗면(415) 및 관통공(440)을 포함한다.
피펫 고정부(318)는 팁부(310) 내에 배치되는 것이기 때문에, 팁부(310)와 동일한 형태로 구현된다. 전술한 바와 같이, 팁부(310)는 개방부(316)로부터 개방부(312)까지 직경이 지속적으로 또는 구간마다 감소할 수 있다. 이와 마찬가지로, 피펫 고정부(318)는 상면(410)의 직경이 하면(430)의 직경보다 크게 구현되어, 팁부(310) 내에 배치될 수 있도록 한다. 특히, 피펫 고정부(318)는 상면(410)으로부터 하면(430)까지 연속적으로 직경이 감소하는 구조를 가질 수 있다.
피펫 고정부(318)는 관통공(440)을 포함하여, 팁부(310) 내로 유입되는 피펫부(120)가 관통공(440) 내로 유입되도록 한다. 관통공(440)의 직경은 피펫부(320) 내 후술할 제2 음압 제공부(324)의 직경보다는 크게 구현되어 제2 음압 제공부(324)가 관통공(440)을 통과하여 피펫 고정부(318)의 하단에 배치될 수 있도록 한다.
피펫 고정부(318)의 상면(410)에는 빗면(415)이 구현될 수 있다. 빗면(415)은 상면(410)에서 관통공(440)을 향하는 방향으로 형성되어, 피펫부(120)가 피펫 고정부(318) 내 관통공(440)으로 보다 잘 유입될 수 있도록 한다.
다시 도 3을 참조하면, 피펫부(120)는 제1 음압 제공부(322), 제2 음압 제공부(324) 및 개방부(326)를 포함한다. 피펫부(120)는 음압 보조 제공부(328)를 더 포함할 수 있다.
피펫부(120)는 제1 음압 제공부(322) 및 제2 음압 제공부(324)를 포함할 수 있다. 제1 음압 제공부(322) 및 제2 음압 제공부(324)는 도 3에 도시된 바와 같이, 부피가 상이하여 제공할 수 있는 음압의 양이나 배출공기량이 상이하다. 이는 다음의 조건을 만족시킬 수 있다. 도 5를 참조하여 전술한 바와 같이, 팁부 내로 파쇄 용액, 세척 용액 및 용출 용액이 순차적으로 유입되는데, 유입되어야 할 파쇄 용액 및 세척 용액의 양과 유입되어야 할 용출 용액의 양은 서로 상이하다. 충분한 유전자가 추출될 수 있도록 파쇄 용액은 충분한 양이 팁부 내로 유입되어야 하며, 파쇄 용액을 충분히 세척할 수 있도록 세척 용액 역시 충분히 유입되어야 한다. 반면, 추출된 유전자가 용출될 수 있으면 되기에, 용출 용액은 상대적으로 적은 양만큼만 유입되어도 무방하다. 예를 들어, 파쇄 용액 및 세척 용액은 수십 내지 수천 ㎕가 유입될 수 있는 반면, 용출 용액은 수 내지 수십 ㎕가 유입되는데 그친다. 이와 같은 상황에서, 파쇄 용액 및 세척 용액이 유입되는 양만큼 음압을 공급할 경우, 지나치게 많은 음압이 공급되며 용출 용액에 더불어 공기 등 이물질이 추가적으로 유입되는 경우가 발생할 수 있다. 이와 같은 이물질은 추후 유전자의 분석 결과에 영향을 미칠 가능성도 존재하기에 유입되지 않아야 한다.
이러한 문제를 해소하고자, 피펫부(120)는 제공할 수 있는 음압의 양이나 배출공기량이 상이한 복수의 음압 제공부(322, 324)를 포함한다. 제1 음압 제공부(322)는 상대적으로 많은 양의 음압이나 배출공기를 공급함으로써, 충분한 파쇄용액 및 세척 용액이 유입될 수 있도록 한다. 반면, 제2 음압 제공부(324)는 상대적으로 적은 양의 음압이나 배출공기를 공급함으로써, 적절한 양의 용출 용액만이 유입될 수 있도록 한다.
피펫부(320)는 음압 보조 제공부(328)를 더 포함할 수 있다. 전술한 대로, 제2 음압 제공부(324)는 상대적으로 적은 부피를 갖는다. 이로 인해, 사용자가 음압이나 배출공기를 공급하기 위해 제2 음압 제공부(324)와 접촉함에 있어, 접촉면적이 상당히 적을 수 있다. 적은 접촉면적은 사용자가 제2 음압 제공부(324)를 이용해 음압이나 배출공기를 공급하는데 어려움으로 작용할 수 있다. 이러한 어려움을 해소하고자, 제2 음압 제공부(324)가 형성된 일부분에 음압 보조 제공부(328)가 배치될 수 있다. 음압 보조 제공부(328)는 사용자와 접촉면적을 증가시켜, 사용자가 원활히 제2 음압 제공부(324)로 배출공기 및 음압의 제공을 위해 외력을 가할 수 있도록 한다. 음압 보조 제공부(328)는 피펫부(320)와 탈착되는 형태로 구현될 수도 있고, 피펫부(320)에 고정된 상태로 구현될 수도 있다.
스포이트(300)는 스포이트(100)와 마찬가지로 원심분리 없이도 시료 내 유전자를 추출할 수 있으며, 보다 정밀하게 용액들로 음압을 제공하여 정확한 결과값을 도출할 수 있다.
본 발명의 제2 실시예에 따른 휴대용 성분 추출 스포이트는 도 3b와 같이 구현될 수도 있다.
도 3b를 참조하면, 휴대용 성분 추출 스포이트(300b)는 피펫 고정부(318)와 음압 보조 제공부(328)를 제외한 팁부(310)와 피펫부(320)의 구성을 포함하되, 제1 음압 제공부(342)와 제2 음압 제공부(344)의 형태가 제1 음압 제공부(322)와 제2 음압 제공부(324)의 그것과 상이하게 구현될 수 있다. 제1 음압 제공부(342)와 제2 음압 제공부(344) 모두 주변보다는 큰 부피를 가질 수 있으며, 상대적으로 하부에 위치한 제2 음압 제공부(344)가 보다 큰 부피를 가질 수 있다. 이에, 제2 음압 제공부(344)는 제1 음압 제공부(322)와 같이 상대적으로 많은 양의 음압이나 배출공기를 공급할 수 있다. 또한, 제1 음압 제공부(322)는 주변보다는 큰 부피를 갖기 때문에, 사용자가 음암 보조 제공부(328) 없이도 원활히 음압이나 배출공기를 공급할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 스포이트의 결과의 정확도는 다음으로부터 확인할 수 있다.
아래의 표는 인플루엔자 A(Influenza A) 표준 샘플을 토대로 농도별로 qPCR한 결과값이다.
전술한 표를 참조하면, 0.04 내지 400 PFU일 때, 15 내지 28 Cq. 만으로 PCR을 수행할 수 있음을 확인할 수 있다.
또한, 다음의 표는 본 발명의 일 실시예에 따른 스포이트와 종래의 추출용기로 각각 샘플을 추출하였을 때의 결과값이다.
여기서, 200㎕ 및 1000㎕는 각각 본 발명의 일 실시예에 따른 스포이트의 팁부의 용량(부피)을 의미한다. 전술한 표를 참조하면, 종래의 원심분리를 사용하는 방법과 본 발명의 일 실시예에 따른 스포이트의 Cq. 값이 0.8 내지 1 정도밖에 차이나지 않으며, End Point 역시 2000RFU 내외 값 정도밖에 차이나지 않는 것을 확인할 수 있다. 이는 종래의 방법의 결과값의 오차범위 이내의 수치로서, 본 발명의 일 실시예에 따른 스포이트는 원심분리를 거치지 않더라도 유전자를 충분히 추출할 수 있음을 확인할 수 있다.
도 5에서는 각 과정을 순차적으로 실행하는 것으로 기재하고 있으나, 이는 본 발명의 일 실시예의 기술 사상을 예시적으로 설명한 것에 불과한 것이다. 다시 말해, 본 발명의 일 실시예가 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 일 실시예의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 각 도면에 기재된 순서를 변경하여 실행하거나 각 과정 중 하나 이상의 과정을 병렬적으로 실행하는 것으로 다양하게 수정 및 변형하여 적용 가능할 것이므로, 도 5는 시계열적인 순서로 한정되는 것은 아니다.
한편, 도 5에 도시된 과정들은 컴퓨터로 읽을 수 있는 기록매체에 컴퓨터가 읽을 수 있는 코드로서 구현하는 것이 가능하다. 컴퓨터가 읽을 수 있는 기록매체는 컴퓨터 시스템에 의하여 읽힐 수 있는 데이터가 저장되는 모든 종류의 기록장치를 포함한다. 즉, 컴퓨터가 읽을 수 있는 기록매체는 마그네틱 저장매체(예를 들면, 롬, 플로피 디스크, 하드디스크 등) 및 광학적 판독 매체(예를 들면, 시디롬, 디브이디 등)와 같은 저장매체를 포함한다. 또한 컴퓨터가 읽을 수 있는 기록매체는 네트워크로 연결된 컴퓨터 시스템에 분산되어 분산방식으로 컴퓨터가 읽을 수 있는 코드가 저장되고 실행될 수 있다.
이상의 설명은 본 실시예의 기술 사상을 예시적으로 설명한 것에 불과한 것으로서, 본 실시예가 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본 실시예의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 다양한 수정 및 변형이 가능할 것이다. 따라서, 본 실시예들은 본 실시예의 기술 사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 실시예에 의하여 본 실시예의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 본 실시예의 보호 범위는 아래의 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 실시예의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.
100, 300: 휴대용 성분 추출 스포이트
110, 310, 330: 팁부
113, 119, 128, 312, 316, 326, 332, 336, 346: 개방부
116, 314, 334: 충진재
120, 320, 340: 피펫부
124, 322, 324, 342, 344: 음압 제공부
210: 고정부
220: 추출부
318: 피펫 고정부
328: 음압 보조 제공부
110, 310, 330: 팁부
113, 119, 128, 312, 316, 326, 332, 336, 346: 개방부
116, 314, 334: 충진재
120, 320, 340: 피펫부
124, 322, 324, 342, 344: 음압 제공부
210: 고정부
220: 추출부
318: 피펫 고정부
328: 음압 보조 제공부
Claims (16)
- 시료를 유출·입시키며 시료 내 포함된 유전자를 추출하는 성분 추출 스포이트에 있어서,
음압을 제공하여, 시료가 빨아들여지도록 하는 피펫부; 및
상기 피펫부가 내부에 유입되어 고정되도록 하며, 상기 피펫부로부터 제공되는 음압을 시료로 공급하고, 상기 피펫부에 의해 빨아들여지는 시료 내에서 유전자를 추출하는 팁부를 포함하고,
상기 피펫부는 외부로부터 외력을 받아 내부에 있는 공기를 외부로 배출하거나, 형상이 다시 복원되며 음압을 형성하는 음압 제공부 및 개방부를 포함하고,
상기 팁부는 충진재, 제1 개방부 및 제2 개방부를 포함하고,
상기 충진재는 시료 내 포함된 유전자를 추출하는 추출부 및 상기 추출부의 양 끝에 배치되어 상기 추출부를 고정시키는 고정부를 포함하여, 상기 피펫부로부터 제공되는 음압에 의해 시료가 내부로 유입되는 경우, 유입되는 시료 내에 포함된 유전자만을 필터링하여 흡착하며,
상기 추출부는 40 내지 60㎛ 또는 75 내지 150㎛의 입도를 갖는 실리카 비드로, 상기 고정부는 유리섬유로 구현되는 것을 특징으로 하는 성분 추출 스포이트. - 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 유전자는,
핵산인 것을 특징으로 하는 성분 추출 스포이트. - 시료를 유출·입시키며 시료 내 포함된 유전자를 추출하는 성분 추출 스포이트에 있어서,
서로 다른 크기의 음압을 제공하여, 시료 또는 시료 이외의 용액이 빨아들여지도록 하는 피펫부; 및
상기 피펫부가 내부에 유입되어 고정되도록 하며, 상기 피펫부로부터 제공되는 음압을 시료 또는 시료 이외의 용액으로 공급하고, 상기 피펫부에 의해 빨아들여지는 시료 내에서 유전자를 추출하는 팁부를 포함하고,
상기 피펫부는 외부로부터 외력을 받아 내부에 있는 공기를 외부로 배출하거나, 형상이 다시 복원되며 음압을 형성하는 음압 제공부 및 개방부를 포함하고,
상기 팁부는 충진재, 제1 개방부 및 제2 개방부를 포함하고,
상기 충진재는 시료 내 포함된 유전자를 추출하는 추출부 및 상기 추출부의 양 끝에 배치되어 상기 추출부를 고정시키는 고정부를 포함하여, 상기 피펫부로부터 제공되는 음압에 의해 시료가 내부로 유입되는 경우, 유입되는 시료 내에 포함된 유전자만을 필터링하여 흡착하며,
상기 추출부는 40 내지 60㎛ 또는 75 내지 150㎛의 입도를 갖는 실리카 비드로, 상기 고정부는 유리섬유로 구현되는 것을 특징으로 하는 성분 추출 스포이트.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
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