KR102426869B1

KR102426869B1 - 비만 예방 또는 치료용 조성물

Info

Publication number: KR102426869B1
Application number: KR1020210043399A
Authority: KR
Inventors: 민복기; 김진태
Original assignee: (주)메디뉴트라; 크림슨파마 주식회사
Priority date: 2021-04-02
Filing date: 2021-04-02
Publication date: 2022-07-29

Abstract

본 출원은 서열번호 1(LQAR)의 아미노산 서열로 구성되는 펩타이드; 또는 하기 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하고, 서열번호 2(LEAK) 및 3(SAGIH)으로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 서열을 더 포함하여 구성되는 펩타이드; 를 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.

Description

비만 예방 또는 치료용 조성물{COMPOSITION FOR PREVENTING OR TREATMENTING OBESITY}

본 출원은 비만 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

최근 경제성장이나 라이프 스타일의 변화에 의해 식습관에도 여러 가지 변화가 생기고 있다. 특히, 현대인에게는 패스트푸드와 같은 고칼로리 식품이나 운동 부족에 의한 과체중 및 비만이 증가하고 있다. 세계 보건기구(World Health Organisation, WHO)에 의하면, 전 세계적으로 10억 명 이상의 성인이 과체중이며, 그 중 적어도 300만 명이 임상적으로 비만이며, 특히 유럽에서는 매년 25만 명, 전 세계에서 250만 명 이상이 과체중 관련으로 사망해 있다고 한다.

과체중 및 비만은 혈압과 콜레스테롤 값을 증가시켜 심장 질환, 당뇨, 관절염 등의 각종 질환을 발병시키거나 악화시키는 원인이 된다. 또한, 과체중 및 비만은 성인뿐만 아니고, 아이나 청소년에 있어서도, 동맥 경화, 고혈압, 지방질 이상증, 또는 심장 질환 등의 발병율을 증가시켜 문제가 되고 있다.

종래에는, 비만으로 인한 체중을 감소시키기 위한 약물로서는 식욕을 억제하는 약물인 시부트라민(sibutramine)과 체내의 리파제(lipase)를 억제하여 음식물에 포함된 지방질의 흡수를 감소시키는 올리스타트(orlistat)가 있으나,시부트라민의 경우 혈압상승, 불면증, 구강건조, 어지러움 등의 부작용이 비교적 흔하고, 심혈관질환 또는 조절되지 않는 고혈압을 가진 환자에게는 사용할 수 없는 단점이 있다. 또한, 올리스타트의 경우에는 설사, 지방변, 분실금 등의 부작용이 흔하고 한국인과 같이 지방 섭취가 서양인에 비해 적은 경우에는 약물의 효과가 뚜렷하지 않아 보다 안전하면서도 비만 예방 또는 치료 효과가 탁월한 약물 및 식품에 대한 꾸준한 연구의 필요성이 제기 되고 있다.

한편, 청대구는 대서양 북부(지중해, 노르웨이, 아프리카 북부, 그린랜드 및 미국 북동부 등)에 분포해 있으며, 등지느러미가 3개로 2번째와 3번째 사이는 1번째와 2번째 사이보다 다소 떨어져 있다. 가슴지느러미의 뒤끝은 제1 등지느러미가 끝나는 지점에 이른다. 등쪽은 청회색이며 배쪽으로 갈수록 희며, 가슴지느러미 기저부위에 검은 작은 반점이 나타나기도 한다.

글루카곤-유사 펩타이드-1(glucagon-like peptide-1, 이하 'GLP-1')은 당뇨 환자의 고혈당증을 감소시키는 치료제로 개발 중인 물질로서, 인슐린 합성과 분비 촉진, 글루카곤의 분비 저해, 공복 억제, 글루코오스 사용 증진과 더불어 음식물 섭취를 저해하는 기능을 가진다.

또한, 콜레시스토키닌(cholecystokinin, 이하 'CCK')은 점막세포에서 분비되는 호르몬으로 췌장액의 분비를 촉진시키며, 위산 분비를 억제하고, 뇌 속에서 포만감을 불러 일으켜 식욕을 억제하는 기능을 가진다.

따라서, 청대구의 가수분해물 또는 이로부터 분리된 아미노산을 이용하여 콜레시스토키닌 및 GLP-1의 분비를 촉진하여 음식물 섭취 저해 기능과 지방 산화 기능을 하는 비만 예방용 또는 치료 기술의 개발이 요구된다.

대한민국 공개특허공보 제10-2021-0000294호(2021.01.04.공개.)

본 출원의 하나의 실시예에 따른 식품 조성물은 상기한 바와 같은 종래 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로서, 비만 예방 또는 치료를 하기 위한 것이다.

본 출원은, 비만 예방 또는 치료용 조성물을 제공하고자 한다.

본 출원은, 비만 예방용 식품 조성물을 제공하고자 한다.

본 출원은, 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하고자 한다.

상술한 과제를 해결하기 위하여, 본 출원의 하나의 실시예는, 하기 서열번호 1의 아미노산 서열로 구성되는 펩타이드; 또는 하기 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하고, 서열번호 2 및 3으로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 서열을 더 포함하여 구성되는 펩타이드; 를 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.

i) LQAR(서열번호 1);

ii) LEAK(서열번호 2); 및

ⅲ) SAGIH(서열번호 3)
본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 펩타이드는, 하기 서열번호 4 내지 6으로 구성되는 군에서 선택되는 아미노산 서열로 구성되는 펩타이드일 수 있다.
ⅳ) LEAKLQAR(서열번호 4);
ⅴ) LQARSAGIH(서열번호 5); 및
ⅵ) LEAKLQARSAGIH(서열번호 6)

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 펩타이드는, 청대구 가수분해물 또는 이로부터 분리된 것일 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 청대구 가수분해물은, 청대구의 어육, 연육 또는 연제품의 가수분해물일 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 펩타이드는, 상기 서열번호 1 내지 3으로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 서열번호를 포함하고, 4개 내지 15개의 아미노산으로 합성된 것일 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 청대구 가수분해물을 펩타이드내부가수분해효소 및 펩타이드외부가수분해효소로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상으로 가수분해한 것일 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 펩타이드내부가수분해효소는 트립신 및 키모트립신일 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 펩타이드는, 콜레시스토키닌(Cholecystokinin, CCK) 및 글루카곤 유사 펩타이드(Glucagon like peptide-1, GLP-1) 호르몬을 촉진시킬 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 가수분해물은, 상기 서열번호 1, 서열번호 2 및 서열번호 3의 아미노산 서열을 모두 포함하고, 상기 서열번호 2의 아미노산 서열 농도 비율이 1인 것을 기준으로, 상기 서열번호 1의 아미노산 서열 : 서열번호 3의 아미노산 서열의 비율이 0.1 : 0.9 내지 0.2 : 0.5인 것일 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 조성물은 비만 예방용 식품 조성물일 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 식품 조성물은, 1인 1일 섭취량이 0.5g 내지 2g인 것일 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예는, 상기 조성물은 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물일 수 있다.

본 출원의 일실시예에 따른 비만 예방 또는 치료용 조성물은 소장에서 중성지방 분해효소 작용을 저해하여 지방 흡수를 억제하는 장점이 있다.

본 출원의 일실시예에 따른 비만 예방 또는 치료용 조성물은 미토콘드리아 내의 β 산화를 촉진하고, 지방세포에서 지방산화를 촉진하여 에너지 생산을 증가시키는 장점이 있다.

본 출원의 일실시예에 따른 비만 예방 또는 치료용 조성물은 지방 합성 관련 효소(ACC, FAS, ACL)의 활성을 저하시키는 장점이 있다.

본 출원의 일실시예에 따른 식품 조성물은 CCK, GLP 호르몬을 조절하여 식전 최적 섭취량 섭취시 포만감을 통해 식욕 억제를 하는 장점이 있다.

도 1은 실시예 1의 STC-1 세포에 대한 CCK 분비량을 나타낸 것이다.
도 2은 렛(Rat)의 음식 섭취 감소 효과를 나타낸 것이다.
도 3a는 본 출원의 일실시예에 따른 식품 조성물 섭취시 증가하는 CCK의 분비량을 나타낸 것이다. 도 3b는 본 출원의 일실시예에 따른 식품 조성물 섭취시 증가하는 GLP-1의 분비량을 나타낸 것이다.

이하, 본 출원을 보다 상세히 설명한다.

이하의 특정한 구조 내지 기능적 설명들은 단지 본 출원의 개념에 따른 실시예를 설명하기 위하여 예시된 것으로, 본 출원의 개념에 따른 실시예들은 다양한 형태로 실시될 수 있으며 본 명세서에 설명된 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 아니 된다.

본 출원의 개념에 따른 실시예는 다양한 변경을 가할 수 있고 여러가지 형태를 가질 수 있으므로 특정 실시예들은 본 명세서에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 출원의 개념에 따른 실시예들을 특정한 개시 형태에 한정하려는 것이 아니며, 본 출원의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

본 명세서에서 사용하는 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로 본 출원을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한 복수의 표현을 포함한다.

다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 출원이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 의미를 갖는 것으로 해석되어야 하며, 본 명세서에서 명백하게 정의하지 않는 한 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 하기 서열번호 1의 아미노산 서열로 구성되는 펩타이드; 또는 하기 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하고, 서열번호 2 및 3으로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 서열을 더 포함하여 구성되는 펩타이드; i) LQAR(서열번호 1); ii) LEAK(서열번호 2); 및 ⅲ) SAGIH(서열번호 3); 를 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 치료용 조성물.

본 출원의 용어 “비만 예방 및 치료” 는 체중 감소를 유도하는 것, 및 , 체중 증가를 제한 또는 억제하는 것은, 체중의 감소, 특히, 체지방량의 감소, 체지방량/제지방 체중의 비율의 개선, 비만의 경감, 신체 조성한 개선 및 지질대사의 조절을 포함하고, 보다 구체적으로, 지방질 산화 및 분해 촉진 및/또는 지방질 생성 억제, 지방 합성 관련 효소의 활성 저하도 포함한다.

상기 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열은 Leu-Gln-Ala-Arg(LQAR)이고, 상기 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열은 Leu-Glu-Ala-Lys(LEAK)이며, 상기 서열번호 3으로 표시되는 아미노산 서열은 Ser-Ala-Gly-Ile-His(SAGIH)이다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 펩타이드는, 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열 LQAR을 포함하는 4개 내지 15개의 아미노산으로 구성되는 펩타이드일 수 있다.

삭제

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 펩타이드는, 서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열 LQAR을 포함하고, LEAK(서열번호 2) 및 SAGIH(서열번호 3)로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 서열번호를 포함하여 구성되는 펩타이드일 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 펩타이드는, 서열번호 1 내지 3은 서로 연속적으로 구성되어 LEAKLQAR, LEAKSAGIH, LQARSAGIH, LEAKLQARSAGIH 또는 이들을 포함하는 15개 이내의 아미노산으로 구성되는 펩타이드일 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 펩타이드는, 청대구 가수분해물 또는 이로부터 분리된 것일 수 있으며, 상기 청대구 가수분해물은 청대구의 어육, 연육 또는 연제품의 가수분해물일 수 있다.

상기 청대구 가수분해물은 청대구를 트롤 어구에서 살코기만을 가공하고 펄프 생산하는 단계, 1℃ 내지 10℃의 물에서 가용성분 정화 후 정제하는 단계, 원심 분리 후 -30℃ 내지 -40℃에서 딥 프리징하는 단계 및 -20℃ 내지 -30℃에서 저온 보관하는 단계를 포함하는 제조 방법에 따라 얻어질 수 있다.

청대구 가수분해물의 가수분해는 상기 정제 과정에서 진행될 수 있으며, 원심 분리 시 2차 가수분해가 진행될 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 펩타이드는, 상기 청대구 가수분해물을 펩타이드내부가수분해효소(endopeptidase) 및 펩타이드외부가수분해효소(exopeptidase)로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상으로 가수분해한 것일 수 있다.

본 출원의 용어 “펩타이드내부가수분해효소”의 의미는, 단백질 분해 역할을 담당하는 펩티다제의 일종으로, 폴리펩타이드 또는 단백질에서 말단 부분 이외의 아미노산의 펩타이드 결합을 분해하는 것이다.

구체적으로, 상기 펩타이드내부가수분해효소는 세린단백질가수분해효소, 시스테인단백질가수분해효소, 아스파라긴산단백질가수분해효소, 메탈로단백질가수분해효소로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상일 수 있다.

더 구체적으로, 본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 펩타이드내부가수분해효소는 세린단백질가수분해효소인 트립신 및 키모트립신일 수 있다.

상기 트립신(trypsin)은 엔테로키나아제(enterokinase) 또는 엔테로펩티다아제(enteropeptidase) 효소에 의해 트립시노겐의 아미노 말단으로 부터 6개의 아미노산으로 이루어진 펩타이드(HN-Val · Asp · Asp · Asp · Asp · Lys)가 유리된 후, 트립신으로 활성화된 것일 수 있다. 상기 트립신은 리신, 또는 아르기닌의 카르복실기 옆의 펩티드 결합을 절단할 수 있으며, pH가 7.0 내지 9.0, 온도가 35℃ 내지 40℃의 용액에서 활성화될 수 있다.

또한, 키모트립신은 키모트립시노젠으로부터 합성된 것일 수 있고, 트립신에 의해 활성화 될 수 있다.

키모트립신(chymotrypsin)은 방향족 아미노산의 카르복실기 옆의 펩티드 결합을 절단할 수 있으며, pH가 7.5 내지 8.0, 온도가 35℃ 내지 40℃의 용액에서 활성화될 수 있다.

본 출원의 용어 “펩타이드외부가수분해효소”의 의미는, 단백질 분해 역할을 담당하는 펩티다제의 일종으로, 폴리펩타이드 또는 단백질에서 펩타이드 결합을 말단에서부터 분해하는 것이다.

구체적으로, 상기 펩타이드외부가수분해효소는 아미노산이 N 말단 또는 C 말단 중 어디에서 분리되는가에 따라 아미노펩티다제(aminopeptidase)와 카복시펩티다제(carboxypeptidase)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상일 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 펩타이드는, 콜레시스토키닌(Cholecystokinin, CCK) 및 글루카곤 유사 펩타이드(Glucagon like peptide-1, GLP-1) 호르몬 중 하나 이상을 촉진시킬 수 있다.

상기 CCK 및 GLP-1의 촉진은 소장에서 중성지방 분해효소 작용을 저해하여 지방 흡수를 억제하는 장점이 있고, 지방세포에서 지방산화를 촉진하여 에너지 생산을 증가시키는 장점이 있다.

상기 i) LQAR(서열번호 1)은 청대구 가수분해물 또는 이로부터 분리된 펩타이드 중 소량으로 구성되어 있으나, CCK 및 GLP-1을 농도 의존적으로 촉진 및 조절할 수 있다.

상기 i) LQAR(서열번호 1)의 비율이 0.1 미만이면, CCK 및 GLP-1의 조절 효과가 미미할 수 있고, 0.2를 초과할 경우, 식품 조성물 제조의 경제성이 떨어지는 문제점이 발생할 수 있다.

상기 ⅲ)SAGIH(서열번호 3)의 비율이 0.5 미만이면, CCK 및 GLP-1의 조절 효과가 미미할 수 있고, 0.9를 초과할 경우, 식품 조성물 제조의 경제성이 떨어지는 문제점이 발생할 수 있다.

더 구체적으로, 상기 LQAR(서열번호 1): LEAK(서열번호 2): SAGIH(서열번호 3)의 비율은 0.2 : 1 : 0.9일 수 있다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 비만 예방용 식품 조성물을 제공한다.

본 출원의 용어 “유효성분으로 포함하는”의 의미는, 식품 조성물로써 지방 산화 촉진용, 지방 합성 관련 효소(ACC, FAS, ACL)의 활성 저하용, 식욕 억제용 및 지방 흡수 억제용을 나타낼 수 있는 정도의 유효량을 함유하는 것을 의미한다.

상기 식품 조성물에는, 산화 방지제, 향료, 산미료, 착색료, 유화제, 저장료, 감미료, 향신료, pH 조정제, 안정제, 식물유, 동물유, 당 및 당 알코올류, 비타민, 유기산, 과즙 추출물류, 야채 추출물류, 곡류, 콩류, 야채류, 육류, 어개류 등의 식품 첨가물 및 식품 소재를 단독으로 또는 2종 이상 조합되거나 배합될 수 있다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 수프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료, 건강 음로 및 비타민 복합체 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.

본 출원의 용어 “건강기능식품”의 의미는 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.

본 발명의 건강기능식품 조성물은 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공할 수 있으며, 이에 본 출원의 범위가 제한되지 않는다.

상기 정제 형태의 건강기능식품 조성물은 본 출원의 일 실시예에 따른 비만 예방 또는 치료용 펩타이드를 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다.

본 발명의 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.

상기 식품 첨가물 공전에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료 제제, 타르색소 제제 등의 혼합 제제류 등을 들 수 있다.

본 출원의 조성물을 건강 음료로 사용할 경우, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 텍스트린, 사이클로텐스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당 알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100g당 일반적으로 약 0.01~0.04g, 바람직하게는 약 0.02~0.03g이다. 상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 중점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 출원의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물은 100 중량부 당 0.01~0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

본 출원의 하나의 실시예에서, 상기 식품 조성물은, 1인 1일 최적 섭취량이 0.5g 내지 2g인 것일 수 있다.

상기 1인 1일 기준 최적 섭취량은, 동물 실험 및 임상 시험을 통해 도출된 최적의 함유량이다. 1일 기준 최적 섭취량이 0.5g 미만인 경우에는 체중 감소 효과가 미미할 수 있으며, 2g을 초과하는 경우에는 식품 조성물 제조의 경제성이 떨어지는 문제점이 발생할 수 있다.

이상으로 본 출원의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당 업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 출원의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다.

따라서, 본 출원의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

이하, 본 출원의 이해를 돕기 위하여 바람직한 제조예 및 실시예(example)를 제시한다. 다만, 하기의 제조예 및 실시예는 본 출원의 이해를 돕기 위한 것일 뿐, 본 출원이 하기의 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.

[제조예 1] 펩타이드 합성

i) LQAR(서열번호 1), ii) LEAK(서열번호 2) 및 ⅲ) SAGIH(서열번호 3)를 합성하였다.

[제조예 2] 청대구 가수분해물 제조

청대구를 트롤 어구에서 살코기만을 가공하고 펄프 생산하는 단계, 1℃ 내지 10℃의 물에서 가용성분 정화 후 정제하는 단계, 원심 분리 후 -30℃ 내지 -40℃에서 딥 프리징하는 단계 및 -20℃ 내지 -30℃에서 저온 보관하는 단계로 청대구 가수분해물을 제조하였다.

[실시예 1]

제조예 1의 방법으로 제조한 펩타이드 중 i) LQAR(서열번호 1)를 포함하는 아미노산을 0.1% 포름산(D.W)에 녹여 vortex 한 후, 원심분리하여 상층액을 수득하여 0.45um CA(cellulose acetate) filter로 걸러 비만 예방 또는 치료용 펩타이드를 제조하였다.

[실시예 2]

제조예 1의 방법으로 제조한 펩타이드 중 ii) LEAK(서열번호 2)를 포함하는 아미노산을 0.1% 포름산(D.W)에 녹여 vortex 한 후, 원심분리하여 상층액을 수득하여 0.45um CA(cellulose acetate) filter로 걸러 비만 예방 또는 치료용 펩타이드를 제조하였다.

[실시예 3]

제조예 1의 방법으로 제조한 펩타이드 중 ⅲ) SAGIH(서열번호 3)를 포함하는 아미노산을 0.1% 포름산(D.W)에 녹여 vortex 한 후, 원심분리하여 상층액을 수득하여 0.45um CA(cellulose acetate) filter로 걸러 비만 예방 또는 치료용 펩타이드를 제조하였다.

[실시예 4]

제조예 2의 방법으로 제조한 청대구 가수분해물 중 i) LQAR(서열번호 1), ii) LEAK(서열번호 2) 및 ⅲ) SAGIH(서열번호 3)가 0.2: 1: 0.9의 비율로 포함하는 아미노산을 0.1% 포름산(D.W)에 녹여 vortex 한 후, 원심분리하여 상층액을 수득하여 0.45um CA(cellulose acetate) filter로 걸러 비만 예방 또는 치료용 펩타이드를 제조하였다.

[비교예 1 내지 비교예 3]

비교예 1은 상업적 가수분해물(AEH)을 1.0% 농도로 제조하였고, 비교예 2는 BSA(Bovine serum albumin)를 1.0% 농도로 제조하였으며, 비교예 3은AAM(Amino acid mixture)을 1.0% 농도로 제조하였다.

[실험예 1] STC-1 세포에 대한 CCK 분비 활성

실시예 4의 비만 예방 또는 치료용 펩타이드를 제조하여 비교예 1 내지 3과 STC-1 세포에 대한 CCK 분비 활성 변화를 관찰하였다.

실시예 4 및 비교예 1 내지 3의 농도 및 CCK의 분비 활성도는 하기 표 1에 나타내었다.

	실험농도 (질량/부피, mg/ml)	ES	CCK, pM	ES
실시예4	0.2%	21.89	49.48	19.14
	0.5%	3.14	87.90	2.75
	1.0%	11.40	122.03	9.97
비교예 1	1.0%	4.17	67.63	3.65
비교예 2	1.0%	0.00	31.24	3.78
비교예 3	1.0%	0.00	8.60	0.53

상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 실시예 4는 농도 의존적으로 STC-1 세포에 대한 CCK 분비량이 증가한 것을 알 수 있다. CCK 분비량의 증가로 중성지방 분해효소 작용을 저해하여 지방 흡수를 억제하는 장점이 있다.

그러나, 비교예 1 내지 3은 1.0%의 농도에서도 실시예 4의 0.5%의 농도보다 CCK 분비량이 낮은 것을 알 수 있다.

따라서, 실시예 4는 비만 예방 또는 치료 효과가 있다는 것을 확인하였다.

[실험예 2] STC-1 세포에 대한 CCK 분비 활성

실시예 1 내지 3의 비만 예방 또는 치료용 펩타이드를 제조하여 STC-1 세포에 대한 CCK 분비 활성 변화를 관찰하였다.

Sample(μg/ml)		CCK secretion
Sample(μg/ml)		(ng/ml)	(%)
Control		0.014±0.002	100.0±11.3
LQAR (서열번호 1) (실시예 1)	1	0.018±0.001	128.0±7.2*
	10	0.021±0.004	151.1±17.4*
	50	0.026±0.001	189.6±4.3*
	100	0.031±0.005	223.8±17.7*
LEAK (서열번호 2) (실시예 2)	1	0.023±0.002	165.9±9.1*
	10	0.025±0.003	184.9±9.9*
	50	0.021±0.002	156.2±7.5*
	100	0.018±0.002	132.7±8.6*
SAGIH (서열번호 3) (실시예 3)	1	0.013±0.003	97.0±20.5
	10	0.021±0.001	155.2±4.5*
	50	0.016±0.005	118.0±32.5
	100	0.014±0.002	103.1±15.0
*: p<0.05; control과 비교시

상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 실시예 1은 농도 의존적으로 STC-1 세포에 대한 CCK 분비량이 증가한 것을 알 수 있으며, 이를 도 1에 도시하였다. 실시예 3은 STC-1 세포에 대한 CCK 분비량이 증가한 것을 알 수 있다.

실시예 2 및 3은 STC-1 세포에 대한 CCK 분비량이 증가한 것을 알 수 있다. CCK 분비량의 증가로 중성지방 분해효소 작용을 저해하여 지방 흡수를 억제하는 장점이 있다.

실시예 1 내지 3 중 CCK 분비량이 가장 촉진된 펩타이드는 실시예 1로써, 실시예 1이 비만 예방 또는 치료 효과 우수하다는 것을 알 수 있다.

[실험예 3] 렛(Rat)의 음식 섭취 감소 효과

실시예 4의 비만 예방 또는 치료용 펩타이드 가수분해물을 제조하여 하루에 2번씩 2주 동안 렛(Rat)을 대상으로 경구 투여하였다.

그 결과, 실시예 4를 투여한 양(mg)에 따라 렛의 식이량/몸무게(%)을 계산하여 도 2에 나타내었다.

대조군이 2.18%일 때, 실시예 4를 50mg 투여시 1.91%, 100mg 투여시 1.85%, 250mg 투여시 1.77%를 나타내어 식이량 및 몸무게가 감소하는 것을 알 수 있다.

한편, 2주 경과 후, 렛(rat)의 CCK 및 GLP-1의 분비량을 도 3a 및 도 3b에 나타내었다.

CCK 분비량은 대조군이 2pM(피코미터)일 때, 실시예 4를 50mg 투여시 1.8pM, 100mg 투여시 5.4pM, 250mg 투여시 6pM를 나타내어 CCK가 농도 의존적으로 증가하였다는 것을 알 수 있다. 또한, GLP-1 분비량은 대조군이 8pM일 때, 실시예 4를 50mg 투여시 15pM, 100mg 투여시 16pM, 250mg 투여시 18pM를 나타내어 GLP-1이 농도 의존적으로 증가하였다는 것을 알 수 있다.

이상 본 출원의 실시예를 설명하였으나, 본 출원은 상기 실시예에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 제조될 수 있으며, 본 출원이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 출원의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예는 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

Claims

하기 서열번호 1의 아미노산 서열로 구성되는 펩타이드; 또는
하기 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하고, 서열번호 2 및 3으로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 서열을 더 포함하여 구성되는 펩타이드; 를 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 치료용 조성물:
i) LQAR(서열번호 1);
ii) LEAK(서열번호 2); 및
ⅲ) SAGIH(서열번호 3).
청구항 1에 있어서,
상기 펩타이드는,
하기 서열번호 4 내지 6으로 구성되는 군에서 선택되는 아미노산 서열로 구성되는 펩타이드인 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 치료용 조성물:
ⅳ) LEAKLQAR(서열번호 4);
ⅴ) LQARSAGIH(서열번호 5); 및
ⅵ) LEAKLQARSAGIH(서열번호 6).
청구항 1에 있어서,
상기 펩타이드는,
청대구 가수분해물 또는 이로부터 분리된 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 치료용 조성물.
청구항 3에 있어서,
상기 청대구 가수분해물은,
청대구의 어육, 연육 또는 연제품의 가수분해물인 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 치료용 조성물.
청구항 3에 있어서,
상기 펩타이드는,
상기 청대구 가수분해물을 펩타이드내부가수분해효소 및 펩타이드외부가수분해효소로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상으로 가수분해한 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 치료용 조성물.
청구항 5에 있어서,
상기 펩타이드내부가수분해효소는 트립신 및 키모트립신인 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 치료용 조성물.
청구항 1에 있어서,
상기 펩타이드는,
콜레시스토키닌(Cholecystokinin, CCK) 및 글루카곤 유사 펩타이드 호르몬(Glucagon like peptide-1, GLP-1) 중 하나 이상을 촉진시키는 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 치료용 조성물.
청구항 2에 있어서,
상기 펩타이드는,
상기 서열번호 1, 서열번호 2 및 서열번호 3의 아미노산 서열을 모두 포함하고,
상기 서열번호 2의 아미노산 서열 농도 비율이 1인 것을 기준으로,
상기 서열번호 1 아미노산 서열 : 서열번호 3 아미노산 서열의 비율이 0.1 : 0.9 내지 0.2 : 0.5인 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 치료용 조성물.
청구항 1 내지 8 중 어느 한 항의 조성물은 비만 예방용 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 치료용 조성물.
청구항 9에 있어서,
상기 식품 조성물은,
1인 1일 섭취량이 0.5g 내지 2g인 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 치료용 조성물.
청구항 1 내지 8 중 어느 한 항의 조성물은 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물인 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 치료용 조성물.