KR102419397B1 - 항암바이러스 유래 단백질을 표적으로 하는 키메라 항원 수용체, 이를 발현하는 면역세포 및 이들의 용도 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 항암바이러스 유래 단백질을 표적으로 하는 키메라 항원 수용체, 이를 발현하는 면역세포 및 이들의 용도에 관한 것으로서, 본 발명은 특히 백시니아 바이러스로 감염된 암세포의 세포 표면에 발현되는 A56 단백질을 표적으로 하는 키메라 항원 수용체, 및 이를 발현하는 면역세포 및 이들의 용도에 관한 것이다. 본 발명의 키메라 항원 수용체를 발현하는 면역세포는 암세포의 세포 표면에 특이적으로 발현되는 A56 단백질을 효과적으로 표적화함으로써 항암바이러스에 감염되었음에도 잔존하는 암세포에 대한 표적 치료를 가능케 하여 효과적인 항암 요법을 제공할 수 있다. 본 발명의 키메라 항원 수용체를 발현하는 면역세포는 A56 단백질에 특이적으로 활성화 및 증식 능력을 높이고 우수한 세포독성 효과를 발휘하여 A56 단백질을 발현하는 암세포에 대해 효과적인 항암요법을 제공할 수 있다. 바람직하게는, 항암바이러스와 병용되며, 항암바이러스의 항암효과를 증진시킬 수 있는 약제(예: 히드록시유레아, 림프구 제거 조절을 위한 화학요법제(예: 사이클로포스파미드, 플루다라빈 등), 또는 면역치료제)가 추가로 병용될 수 있다.
Description
본 발명은 항암바이러스 유래 단백질을 표적으로 하는 키메라 항원 수용체, 이를 발현하는 면역세포 및 이들의 용도에 관한 것으로서, 본 발명은 특히 백시니아 바이러스로 감염된 암세포의 세포 표면에 발현되는 A56 단백질을 표적으로 하는 키메라 항원 수용체, 및 이를 발현하는 면역세포 및 이들의 용도에 관한 것이다.
암은 종양이라고도 불리며, 신체 조직의 자율적인 과잉 성장에 의해 비정상적으로 자라난 세포를 의미한다. 현대사회의 인구 고령화, 흡연 인구의 증가, 음주량의 증가, 식습관의 서구화 및 환경오염으로 인해 암 발병률이 지속적으로 증가하고 있다.
암의 치료방법으로는 외과요법, 방사선요법, 화학요법 등이 있다. 구체적으로, 외과요법은 암 조직을 체내에서 제거하는 치료방법으로서, 조기 암 또는 병소가 일부에 국한되어 있는 암에 대해서는 매우 효과적이다. 하지만, 병소 주위의 조직 속에 침윤하거나 림프선으로 전이된 암은 제거하기 힘들며, 이러한 암은 재발병할 확률이 높다. 이런 경우 방사선 요법 또는 화학요법을 병용하여 치료한다. 방사선요법이나 화학요법은 진행 암 또는 말기 암의 치료에 주로 쓰이지만, 정상 세포들에도 영향을 미쳐 심각한 부작용을 초래한다.
한편, 유전자 재조합 기술이 본격적으로 사용되면서 종양 선택성과 항암 효능이 증가된 항암바이러스를 이용한 임상연구가 시작되었다. 문헌적으로 보고된 최초의 유전자 재조합 항암바이러스는 허피스 심플렉스 바이러스(Herpes simplex virus)이다. 그 이후 다른 바이러스를 이용한 종양 용해에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다.
그 중 백시니아 바이러스를 이용하여 TK(Thymidine kinase) 유전자가 결실된 백시니아 바이러스에 대한 연구가 진행된 바 있으나, 임상적 유용성에 비해 협소한 치료 범위(narrow therapeutic window)로 인하여 임상적인 효과를 극대화시키기에 한계가 있었다. TK 유전자가 결손된 백시니아 바이러스의 치료범위가 좁다는 것은, 고용량의 바이러스가 임상적 효능은 큰 반면, 바이러스의 독성으로 인한 임상적 위험이 따른다는 것을 의미한다. 이와 같은 문제점을 극복하기 위해 TK 유전자 결실과 함께 A56 단백질과 같은 비필수적인 단백질을 암호화하고 있는 유전자 영역을 결실시켜 치료 효능을 증가시키고 독성을 감소시키려는 연구가 진행된 바 있다(Izmailyan R, Chang W. Journal of virology. 2008 Oct;82(20):10079-87.).
최근 암의 치료방법으로서 면역세포 치료제가 활발히 연구되고 있다. 면역세포치료제는 암세포를 죽이는데 환자의 면역세포를 이용한다는 점에서 기존의 치료방법과 차이가 있다. 구체적으로, 면역세포 치료제는 환자의 면역세포를 수득하고, 이를 증식 또는 암세포에 특이적으로 공격하게 작용하도록 활성화시킨 후 다시 환자의 체내에 넣어주는 방식으로, 약물로 인한 부작용을 최소화하면서 항암 효과를 극대화한 방법이다.
지난 5년간 암을 치료하는 면역 요법으로써 면역 체크포인트 억제제(Immune checkpoint inhibitor)가 활발히 연구되었다. 특히, CTLA-4(cytotoxic T-lymphocyte-associated protein 4), PD-1(Programmed cell death protein 1) 및 PD-L1과 같은 면역 체크포인트에 대한 억제제가 연구되어 왔다. 이필리무맙(ipilimumab, anti-CTLA-4), 니볼루맙(nivolumab, anti-PD-1) 및 펨브롤리주맙(pembrolizumab, anti-PD-1)과 같은 면역 체크포인트 억제제는 여러 종류의 암 치료에 대한 규제 기관의 승인을 받았다. 하지만, 면역 체크포인트 억제제는 흑색종, 폐암, 두경부암, 신장암, 방광암과 같은 특정 유형의 암을 가진 환자의 치료에 제한된다.
또한, 키메라 항원 수용체를 발현하는 T 세포(이하, CAR-T 세포)는 여러 종류의 혈액암에 대해 우수한 치료 효능을 보였다. 하지만, 고형암의 경우, 임상 성공 사례가 거의 보고되지 않고 있다. 그 이유로써 CAR-T 세포의 종양으로의 이동(trafficking)과 침투의 어려움, CAR-T 세포의 지속성과 증식 문제, 그리고 적대적인 종양미세환경으로 인해 치료 효과로 이어지지 못하는 한계도 있지만, 가장 큰 한계는 종양에만 특이적으로 발현되어 있는 적합한 표적 항원이 부재하여 심각한 안전성 문제가 발생한다는 것이다. 실제로 대부분의 고형암 CAR-T 임상 개발에 사용되는 표적 항원은 종양에서 과발현되는 동시에 정상세포에도 소량 발현함으로 인해, CAR-T 세포가 정상세포에도 결합하여 심각한 독성 문제를 일으킨 사례가 보고된 바 있다. 이러한 on-target off-tumor 독성 문제를 극복하기 위해서는 종양 특이성 (specificity), 높고 균일한 발현율(coverage), 발현의 안정성(stability)을 갖춘 표적 항원이 요구되나, 이 세 가지 조건을 모두 충족하는 고형암 표적 항원은 현재 거의 전무한 상황이다. 따라서, 안전하고 고형암에도 효과적으로 표적화시킬 수 있는 암세포 표적화 방법에 대한 지속적인 연구개발이 필요한 실정이다.
Izmailyan R, Chang W. Journal of virology. 2008 Oct;82(20):10079-87.
Anthony K. Park et al., Science Translational Medicine. 2020 Sep; 12(559)
본 발명의 발명자들은 안전하고 효과적으로 CAR-T 치료제를 이용하여 고형암을 표적화 또는 치료하는 방법을 개발하기 위해 연구한 결과, 종양 선택성을 가지는 항암바이러스(벡터)를 이용하여 고형암 표면에 CAR-T가 표적 가능한 바이러스 유래 단백질을 발현시킨 후 이에 결합하는 CAR-T 치료제를 주입함으로써 항암 효과를 유도하고자 하였다. 본 발명 이전에, 항암바이러스에 CD19 유전자를 삽입함으로써 고형암 세포의 표면에 CD19 단백질이 발현되게 한 후 CD19에 특이적인 CAR-T 세포를 투여하는 방식의 면역요법이 제안되었지만(Anthony K. Park et al., Science Translational Medicine. 2020 Sep; 12(559)), 항암바이러스가 본래 갖고 있는 단백질을 이용하여 고형암을 표적화하는 방법은 종래 제안된 적은 전혀 없었다. CD19과 같이 인체가 본래 가지고 있는 단백질은 다른 기관 혹은 정상세포에도 분포되어 있으나, 이처럼 항암바이러스가 본래 갖고 있는 단백질을 이용하게 되면, 항암바이러스는 종양 선택적으로 증식되도록 유전자 조작을 하였기 때문에 이를 표적으로 하였을 때 CAR-T가 정상세포에 있는 항원에 결합할 위험이 줄어든다.
본 발명의 발명자들은 예의 연구 결과, 백시니아 바이러스의 A56 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산을 포함하는 벡터를 주입하여 암세포에 처리하는 경우, 암세포의 세포 표면에 A56 단백질이 다양한 암종에서 종양 특이적이면서 안정적으로 발현되는 것을 확인하였다. 또한, A56 단백질 또는 이의 단편에 결합하는 복수 개의 항체들의 A56에 대한 결합을 분석한 결과, 독특하게도, 에피토프 서열이 완전히 일치하지 않음에도 불구하고 A56에 대한 결합을 서로 저해하는 것으로 확인되었다. 이에, A56와의 결합을 결정짓는 입체 에피토프를 규명하였으며, 그러한 입체 에피토프에 결합하는 CAR-T 세포가 암세포의 부하를 감소시킴에 있어 우수한 효과를 발휘함을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명의 일 측면은, 암세포의 세포 표면에 존재하고 정상세포의 세포 표면에는 존재하지 않는 항원에 특이적으로 결합하는 (i) 세포외 항원 결합 도메인, (ii) 막관통 도메인 및 (iii) 세포내 신호전달 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 유전적으로 조작된 면역세포로서, 상기 항원은 암세포가 본래 발현하지 않는 단백질인 유전적으로 조작된 면역세포를 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, (i) 세포외 항원 결합 도메인, (ii) 막관통 도메인 및 (iii) 세포내 신호전달 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체(CAR)로서, 암세포의 세포 표면에 노출된 A56 단백질 또는 이의 단편에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 키메라 항원 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 벡터를 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 벡터가 도입된 유전적으로 조작된 면역세포를 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 벡터를 면역세포에 도입하는 단계를 포함하는 유전적으로 조작된 면역세포를 제조하는 방법을 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 유전적으로 조작된 면역세포를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 유전적으로 조작된 면역세포를 투여하는 단계를 포함하는 암세포의 부하를 감소시키는 방법을 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 유전적으로 조작된 면역세포 및 항암바이러스를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 키트를 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은, i) 항암바이러스; 및 ii) 상기 중 어느 한 항의 유전적으로 조작된 면역세포를 개체에 투여하는 단계를 포함하는 암을 치료하는 방법을 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 암을 예방 또는 치료하기 위한 상기 유전적으로 조작된 면역세포의 용도를 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 암의 예방 또는 치료용 약제를 제조하기 위한 상기 유전적으로 조작된 면역세포의 용도를 제공한다.
본 발명의 키메라 항원 수용체를 발현하는 면역세포는 암세포의 세포 표면에 특이적으로 발현되는 A56 단백질을 효과적으로 표적화함으로써 항암바이러스에 감염되었음에도 잔존하는 암세포에 대한 표적 치료를 가능케 하여 효과적인 항암 요법을 제공할 수 있다. 본 발명의 키메라 항원 수용체를 발현하는 면역세포는 A56 단백질에 특이적으로 활성화 및 증식 능력을 높이고 우수한 세포독성 효과를 발휘하여 A56 단백질을 발현하는 암세포에 대해 효과적인 항암요법을 제공할 수 있다. 바람직하게는, 항암바이러스와 병용되며, 항암바이러스의 항암효과를 증진시킬 수 있는 약제(예: 히드록시유레아, 림프구 제거 조절을 위한 화학요법제(예: 사이클로포스파미드, 플루다라빈 등), 또는 면역치료제)가 추가로 병용될 수 있다.
도 1은 인간 폐암 세포주(A549), 인간 대장암 세포주(HCT-116), 인간 흑색종 세포주(SK-MEL-5)를 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스로 감염시킨 후, 각 세포주의 세포 표면에서의 A56 단백질 발현 유무를 면역형광염색을 통해 확인한 도면이다.
도 2는 인간 대장암 세포주(HCT-116)를 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스로 감염시킨 후, 감염된 HCT-116 세포주의 세포 표면에서의 A56 단백질 발현 유무를 면역형광염색을 통해 확인한 도면이다.
도 3은 인간 대장암 세포주(HCT-116)를 식립한 마우스에 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스를 복강내 투여한 후, 각 조직 표면에서 A56 단백질의 발현을 확인한 도면이다.
도 4는 정상 토끼에 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스를 혈관 내 투여한 후, 각 조직 표면에서의 A56 단백질의 발현을 확인한 도면이다.
도 5는 마우스 신장암 세포주(Renca)를 식립한 마우스에 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스를 종양내 투여한 후, 7일, 10일 및 14일째에 종양 조직의 표면에서 A56 단백질의 발현을 확인한 도면이다.
도 6은 마우스 신장암 세포주(Renca)를 식립한 마우스에 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스 및 히드록시유레아를 종양내 투여한 후, 7일, 10일 및 14일째에 종양 조직의 표면에서 A56 단백질의 발현을 확인한 도면이다.
도 7은 마우스 신장암 세포주(Renca)를 식립한 마우스에 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스를 2차 투여한 후, 21일, 24일 및 28일째에 종양 조직의 표면에서 A56 단백질의 발현을 확인한 도면이다.
도 8은 마우스 신장암 세포주(Renca)를 식립한 마우스에 히드록시유레아와 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스를 2차 투여한 후, 21일, 24일 및 28일째에 종양 조직의 표면에서 A56 단백질의 발현을 확인한 도면이다.
도 9는 A56 단백질 및 이의 단편의 일 구체예를 표기한 도면이다.
도 10은는 A56 단백질 및 이의 단편이 세포 내 및 표면에 발현되는 것을 확인한 도면이다.
도 11은 Fc가 융합된 A56 융합 단백질의 발현량을 확인한 도면이다.
도 12 내지 도 17은 본 발명의 일 실시예에서 제조한 항-A56 항체들과 A56 간의 친화도를 측정한 도면이다.
도 18a는 A56-01A02 내지 A56-02B06의 항체 생산량을 확인한 도면이다.
도 18b는 A56-01A02 내지 A56-02B06의 항체 생산량을 나타낸 그래프이다.
도 18c는 A56-02D04 내지 A56-59E12의 항체 생산량을 확인한 도면이다.
도 19 내지 도 35는 본 발명의 일 실시예에서 제조한 항-A56 항체를 정제한 후, SDS-PAGE를 통해 확인한 도면이다.
도 36은 백시니아 바이러스 종에 따른 A56 단백질의 아미노산 서열의 상동성을 비교한 도면이다.
도 37은 A56 단백질에 대한 항-A56 항체 10종(Ab18, Ab19, Ab01, Ab13, Ab14, Ab08, Ab03, Ab51, Ab55, Ab16)의 결합력을 측정한 값을 나타낸 도면이다.
도 38은 A56 단백질과 상업용 항-A56 항체를 반응시킨 후, 웨스턴 블랏한 사진으로서, 항-A56 항체들이 입체 에피토프를 갖는지를 확인하는데 있어 대조군으로 사용된 것이다.
도 39는 A56 단백질과 항-A56 항체 10종(Ab18, Ab19, Ab01, Ab13, Ab14, Ab08, Ab03, Ab51, Ab55, Ab16)을 각각 반응시킨 후, 웨스턴 블랏한 사진이다.
도 40은 항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab13)를 High-Mass MALDI로 분석한 결과이다.
도 41은 항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab16)를 High-Mass MALDI로 분석한 결과이다.
도 42는 항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab18)를 High-Mass MALDI로 분석한 결과이다.
도 43은 항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab01)를 High-Mass MALDI로 분석한 결과이다.
도 44는 항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab19)를 High-Mass MALDI로 분석한 결과이다.
도 45는 5종의 단백질 분해효소(트립신, 키모트립신, ASP-N, 엘라스테아제, 서모리신)를 A56 단백질에 처리한 후, LTQ-Orbitrap MS(mass spectrometry) 분석한 결과이다.
도 46은 항-A56 항체(Ab13)이 결합하는 A56-C-His의 에피토프 위치와 A56-C-His 단백질의 구조를 모델링한 도면이다. 여기에 표시된 A56의 아미노산 넘버링은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 30번 세린은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 46번 세린에 해당함).
도 47은 항-A56 항체(Ab16)이 결합하는 A56-C-His의 에피토프 위치와 A56-C-His 단백질의 구조를 모델링한 도면이다. 여기에 표시된 A56의 아미노산 넘버링은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 30번 세린은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 46번 세린에 해당함).
도 48은 항-A56 항체(Ab18)이 결합하는 A56-C-His의 에피토프 위치와 A56-C-His 단백질의 구조를 모델링한 도면이다. 여기에 표시된 A56의 아미노산 넘버링은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 30번 세린은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 46번 세린에 해당함).
도 49는 항-A56 항체(Ab01)이 결합하는 A56-C-His의 에피토프 위치와 A56-C-His 단백질의 구조를 모델링한 도면이다. 여기에 표시된 A56의 아미노산 넘버링은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 30번 세린은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 46번 세린에 해당함).
도 50은 항-A56 항체(Ab19)이 결합하는 A56-C-His의 에피토프 위치와 A56-C-His 단백질의 구조를 모델링한 도면이다. 여기에 표시된 A56의 아미노산 넘버링은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 40번 이소류신은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 56번 이소류신에 해당함).
도 51은 A56 단백질에 대한 항체 5종(Ab13, Ab16, Ab18, Ab01, Ab19)에피토프 매핑 결과를 정리한 도면이다. 여기에 표시된 A56의 아미노산 넘버링은 서열번호 1038로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 30번 세린은 서열번호 1038로 표시된 아미노산 서열 중 46번 세린에 해당함).
도 52는 A56 단백질을 3D 단백질 구조로 모델링한 후 iCn3D로 구조분석한 도면이다.
도 53은 항-A56 항체(Ab13)의 파라토프 위치와 상기 항체와 A56-C-His 단백질 결합 구조를 모델링한 도면이다.
도 54는 항-A56 항체(Ab16)의 파라토프 위치와 상기 항체와 A56-C-His 단백질 결합 구조를 모델링한 도면이다.
도 55는 항-A56 항체(Ab18)의 파라토프 위치와 상기 항체와 A56-C-His 단백질 결합 구조를 모델링한 도면이다.
도 56은 항-A56 항체(Ab01)의 파라토프 위치와 상기 항체와 A56-C-His 단백질 결합 구조를 모델링한 도면이다.
도 57은 항-A56 항체(Ab19)의 파라토프 위치와 상기 항체와 A56-C-His 단백질 결합 구조를 모델링한 도면이다.
도 58a는 A56 단백질의 K91와 Ab13의 중쇄의 T52의 수소결합 형성 및 결합 간격을 측정한 도면이다.
도 58b는 A56 단백질의 S62와 Ab13의 중쇄의 K57의 수소결합 형성 및 결합 간격을 측정한 도면이다.
도 59a는 A56-C-His 항원을 고정시킨 바이오센서(NTA)에 1차 항체(SA2038, Ab13, A56-02A02)를 포화상태로 결합시킨 후, 9종의 항체를 처리하여 추가적으로 결합하는지를 SPR(Surface Plasmon Resonance) 방법으로 분석한 결과이다.
도 59b는 A56 단백질과 Ab13의 결합친화도(KD)를 OCTET(SPR)과 ELISA로 측정한 도면이다.
도 60은 A56 단백질과 Ab16의 결합 및 이의 간격을 측정한 도면이다.
도 61a는 A56-C-His 항원을 고정시킨 바이오센서(NTA)에 1차 항체(SA2041, Ab16, A56-02B08)를 포화상태로 결합시킨 후, 9종의 항체를 처리하여 추가적으로 결합하는지를 SPR 방법으로 분석한 결과이다.
도 612b는 A56 단백질과 Ab16의 결합친화도(KD)를 OCTET(SPR)과 ELISA로 측정한 도면이다.
도 62a는 A56 단백질의 S62와 Ab18의 중쇄의 R98의 수소결합 형성 및 결합 간격을 측정한 도면이다.
도 62b는 A56 단백질의 K91와 Ab18의 경쇄의 Y32의 수소결합 형성 및 결합 간격을 측정한 도면이다.
도 63a는 A56-C-His 항원을 고정시킨 바이오센서(NTA)에 1차 항체(SA2043, Ab18, A56-02C06)를 포화상태로 결합시킨 후, 9종의 항체를 처리하여 추가적으로 결합하는지를 SPR 방법으로 분석한 결과이다.
도 63b는 A56 단백질과 Ab18의 결합친화도(KD)를 OCTET(SPR)과 ELISA로 측정한 도면이다.
도 64는 A56 단백질과 Ab01의 결합 및 이의 간격을 측정한 도면이다.
도 65a는 A56-C-His 항원을 고정시킨 바이오센서(NTA)에 1차 항체(SA2026, Ab01, A56-01A02)를 포화상태로 결합시킨 후, 9종의 항체를 처리하여 추가적으로 결합하는지를 SPR 방법으로 분석한 결과이다.
도 65b는 A56 단백질과 Ab01의 결합친화도(KD)를 OCTET(SPR)과 ELISA로 측정한 도면이다.
도 66은 A56 단백질과 Ab19의 결합 및 이의 간격을 측정한 도면이다.
도 67a는 A56-C-His 항원을 고정시킨 바이오센서(NTA)에 1차 항체(SA2044, Ab19, A56-02C07)를 포화상태로 결합시킨 후, 9종의 항체를 처리하여 추가적으로 결합하는지를 SPR 방법으로 분석한 결과이다.
도 67b는 A56 단백질과 Ab19의 결합친화도(KD)를 OCTET(SPR)과 ELISA로 측정한 도면이다.
도 68은 본 발명의 일 실시예에서 제작한 키메라 항원 수용체의 구조를 도식화한 도면이다.
도 69는 HeLa 세포주 및 HCT-116 세포주에 5종의 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(OTS-412)와 병용 투여하였을 때의 세포 생존율을 나타낸 도면이다.
도 70은 HeLa 세포주에 5종의 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(OTS-412)와 병용 투여하였을 때의 세포독성을 비교한 도면이다.
도 71은 NCI-H522 세포주에 5종의 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(OTS-412)와 병용 투여하였을 때의 세포독성을 비교한 도면이다.
도 72는 HCT-116 세포주에 5종의 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(OTS-412)와 병용 투여하였을 때의 세포독성을 비교한 도면이다.
도 73은 5종의 CAR-T 세포의 형질도입 효율을 유세포분석기(FACS)로 측정한 도면이다.
도 74는 여러 농도의 항암바이러스(OTS-412)로 감염시킨 HCT-116 세포주에 UTD, Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포를 투여한 경우의 세포 생존율을 나타낸 도면이다.
도 75는 항암바이러스(OTS-412)로 감염시킨 A546 세포주 및 HCT-116 세포주에 UTD, Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포를 투여한 경우의 사멸된 세포를 염색한 사진이다.
도 76은 A546 세포주 및 HCT-116 세포주에 UTD, Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(OTS-412)와 병용 투여한 경우의 세포독성을 나타낸 도면이다.
도 77은 HeLa 세포주, MCF7 세포주, A549 세포주 및 PC-3 세포주에 UTD, Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(OTS-412)와 병용 투여한 경우의 세포독성을 나타낸 도면이다.
도 78는 Ab16 CAR-T 세포의 활성화를 확인하기 위해, Ab16 CAR-T 세포, 암세포주와 공배양한 Ab16 CAR-T 세포, 항암바이러스(OTS-412)로 감염시킨 암세포주와 공배양한 Ab16 CAR-T 세포들의 CD3/CD25를 발현하는 T 세포의 비율이 유세포분석기(FACS)로 측정한 도면이다.
도 79는 Ab18 CAR-T 세포의 증식능을 확인하기 위해, UTD(Mock-T) 세포, Ab18 CAR-T 세포, 항암바이러스(OTS-412)로 감염시킨 암세포주와 공배양한 UTD((Mock-T) 세포, 항암바이러스(OTS-412)로 감염시킨 암세포주와 공배양한 Ab18 CAR-T 세포들의 CD8을 발현하는 T 세포의 비율이 유세포분석기(FACS)로 측정한 도면이다.
도 80은 HCT-116 세포주-식립 마우스에 항암바이러스(OTS-412), Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포 및 히드록시유레아(HU)를 투여한 후, 0일, 3일, 8일, 10일, 14일, 17일 및 21일째에 마우스의 체중을 측정한 도면이다. "mOV"는 항암바이러스와 HU를 병용투여한 것을 의미한다. 본 명세서에 첨부된 도면에서 사용된 "mOV" 또는 "mOTS-412"는 달리 표시되지 않는 한, HU와의 병용투여를 의미한다.
도 81은 HCT-116 세포주-식립 마우스에 항암바이러스(OTS-412), Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포 및 HU를 투여한 후, 0일, 3일, 8일, 10일, 14일, 17일 및 21일째에 마우스의 종양 크기를 측정한 도면이다.
도 82는 HCT-116 세포주-식립 마우스에 항암바이러스(OTS-412), UTD 또는 Ab16 CAR-T 세포 및 HU를 투여한 후, 0일, 3일, 8일, 10일, 14일, 17일 및 21일째에 마우스의 체중을 측정한 도면이다.
도 83은 HCT-116 세포주-식립 마우스에 항암바이러스(OTS-412), UTD 또는 Ab16 CAR-T 세포 및 HU를 투여한 후, 0일, 3일, 8일, 10일, 14일, 17일 및 21일째에 마우스의 종양 크기를 측정한 도면이다.
도 84는 MCF7 세포주 및 A549 세포주에 UTD, Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(WOTS-418)와 병용 투여한 경우의 세포독성을 나타낸 도면이다.
도 85는 항암바이러스(OTS-412)로 감염시킨 HCT-116 세포주에 UTD, 5종의 CAR-T 세포(Ab13 CAR-T, Ab16 CAR-T, Ab18 CAR-T, Ab01 CAR-T, Ab19 CAR-T)를 투여한 경우의 사멸된 세포를 염색한 사진이다.
도 86은 항암바이러스(WOTS-418)로 감염시킨 HCT-116 세포주에 UTD, 5종의 CAR-T 세포(Ab13 CAR-T, Ab16 CAR-T, Ab18 CAR-T, Ab01 CAR-T, Ab19 CAR-T)를 투여한 경우의 사멸된 세포를 염색한 사진이다.
도 2는 인간 대장암 세포주(HCT-116)를 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스로 감염시킨 후, 감염된 HCT-116 세포주의 세포 표면에서의 A56 단백질 발현 유무를 면역형광염색을 통해 확인한 도면이다.
도 3은 인간 대장암 세포주(HCT-116)를 식립한 마우스에 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스를 복강내 투여한 후, 각 조직 표면에서 A56 단백질의 발현을 확인한 도면이다.
도 4는 정상 토끼에 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스를 혈관 내 투여한 후, 각 조직 표면에서의 A56 단백질의 발현을 확인한 도면이다.
도 5는 마우스 신장암 세포주(Renca)를 식립한 마우스에 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스를 종양내 투여한 후, 7일, 10일 및 14일째에 종양 조직의 표면에서 A56 단백질의 발현을 확인한 도면이다.
도 6은 마우스 신장암 세포주(Renca)를 식립한 마우스에 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스 및 히드록시유레아를 종양내 투여한 후, 7일, 10일 및 14일째에 종양 조직의 표면에서 A56 단백질의 발현을 확인한 도면이다.
도 7은 마우스 신장암 세포주(Renca)를 식립한 마우스에 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스를 2차 투여한 후, 21일, 24일 및 28일째에 종양 조직의 표면에서 A56 단백질의 발현을 확인한 도면이다.
도 8은 마우스 신장암 세포주(Renca)를 식립한 마우스에 히드록시유레아와 A56 단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암바이러스를 2차 투여한 후, 21일, 24일 및 28일째에 종양 조직의 표면에서 A56 단백질의 발현을 확인한 도면이다.
도 9는 A56 단백질 및 이의 단편의 일 구체예를 표기한 도면이다.
도 10은는 A56 단백질 및 이의 단편이 세포 내 및 표면에 발현되는 것을 확인한 도면이다.
도 11은 Fc가 융합된 A56 융합 단백질의 발현량을 확인한 도면이다.
도 12 내지 도 17은 본 발명의 일 실시예에서 제조한 항-A56 항체들과 A56 간의 친화도를 측정한 도면이다.
도 18a는 A56-01A02 내지 A56-02B06의 항체 생산량을 확인한 도면이다.
도 18b는 A56-01A02 내지 A56-02B06의 항체 생산량을 나타낸 그래프이다.
도 18c는 A56-02D04 내지 A56-59E12의 항체 생산량을 확인한 도면이다.
도 19 내지 도 35는 본 발명의 일 실시예에서 제조한 항-A56 항체를 정제한 후, SDS-PAGE를 통해 확인한 도면이다.
도 36은 백시니아 바이러스 종에 따른 A56 단백질의 아미노산 서열의 상동성을 비교한 도면이다.
도 37은 A56 단백질에 대한 항-A56 항체 10종(Ab18, Ab19, Ab01, Ab13, Ab14, Ab08, Ab03, Ab51, Ab55, Ab16)의 결합력을 측정한 값을 나타낸 도면이다.
도 38은 A56 단백질과 상업용 항-A56 항체를 반응시킨 후, 웨스턴 블랏한 사진으로서, 항-A56 항체들이 입체 에피토프를 갖는지를 확인하는데 있어 대조군으로 사용된 것이다.
도 39는 A56 단백질과 항-A56 항체 10종(Ab18, Ab19, Ab01, Ab13, Ab14, Ab08, Ab03, Ab51, Ab55, Ab16)을 각각 반응시킨 후, 웨스턴 블랏한 사진이다.
도 40은 항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab13)를 High-Mass MALDI로 분석한 결과이다.
도 41은 항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab16)를 High-Mass MALDI로 분석한 결과이다.
도 42는 항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab18)를 High-Mass MALDI로 분석한 결과이다.
도 43은 항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab01)를 High-Mass MALDI로 분석한 결과이다.
도 44는 항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab19)를 High-Mass MALDI로 분석한 결과이다.
도 45는 5종의 단백질 분해효소(트립신, 키모트립신, ASP-N, 엘라스테아제, 서모리신)를 A56 단백질에 처리한 후, LTQ-Orbitrap MS(mass spectrometry) 분석한 결과이다.
도 46은 항-A56 항체(Ab13)이 결합하는 A56-C-His의 에피토프 위치와 A56-C-His 단백질의 구조를 모델링한 도면이다. 여기에 표시된 A56의 아미노산 넘버링은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 30번 세린은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 46번 세린에 해당함).
도 47은 항-A56 항체(Ab16)이 결합하는 A56-C-His의 에피토프 위치와 A56-C-His 단백질의 구조를 모델링한 도면이다. 여기에 표시된 A56의 아미노산 넘버링은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 30번 세린은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 46번 세린에 해당함).
도 48은 항-A56 항체(Ab18)이 결합하는 A56-C-His의 에피토프 위치와 A56-C-His 단백질의 구조를 모델링한 도면이다. 여기에 표시된 A56의 아미노산 넘버링은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 30번 세린은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 46번 세린에 해당함).
도 49는 항-A56 항체(Ab01)이 결합하는 A56-C-His의 에피토프 위치와 A56-C-His 단백질의 구조를 모델링한 도면이다. 여기에 표시된 A56의 아미노산 넘버링은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 30번 세린은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 46번 세린에 해당함).
도 50은 항-A56 항체(Ab19)이 결합하는 A56-C-His의 에피토프 위치와 A56-C-His 단백질의 구조를 모델링한 도면이다. 여기에 표시된 A56의 아미노산 넘버링은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 40번 이소류신은 서열번호 1로 표시된 아미노산 서열 중 56번 이소류신에 해당함).
도 51은 A56 단백질에 대한 항체 5종(Ab13, Ab16, Ab18, Ab01, Ab19)에피토프 매핑 결과를 정리한 도면이다. 여기에 표시된 A56의 아미노산 넘버링은 서열번호 1038로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 30번 세린은 서열번호 1038로 표시된 아미노산 서열 중 46번 세린에 해당함).
도 52는 A56 단백질을 3D 단백질 구조로 모델링한 후 iCn3D로 구조분석한 도면이다.
도 53은 항-A56 항체(Ab13)의 파라토프 위치와 상기 항체와 A56-C-His 단백질 결합 구조를 모델링한 도면이다.
도 54는 항-A56 항체(Ab16)의 파라토프 위치와 상기 항체와 A56-C-His 단백질 결합 구조를 모델링한 도면이다.
도 55는 항-A56 항체(Ab18)의 파라토프 위치와 상기 항체와 A56-C-His 단백질 결합 구조를 모델링한 도면이다.
도 56은 항-A56 항체(Ab01)의 파라토프 위치와 상기 항체와 A56-C-His 단백질 결합 구조를 모델링한 도면이다.
도 57은 항-A56 항체(Ab19)의 파라토프 위치와 상기 항체와 A56-C-His 단백질 결합 구조를 모델링한 도면이다.
도 58a는 A56 단백질의 K91와 Ab13의 중쇄의 T52의 수소결합 형성 및 결합 간격을 측정한 도면이다.
도 58b는 A56 단백질의 S62와 Ab13의 중쇄의 K57의 수소결합 형성 및 결합 간격을 측정한 도면이다.
도 59a는 A56-C-His 항원을 고정시킨 바이오센서(NTA)에 1차 항체(SA2038, Ab13, A56-02A02)를 포화상태로 결합시킨 후, 9종의 항체를 처리하여 추가적으로 결합하는지를 SPR(Surface Plasmon Resonance) 방법으로 분석한 결과이다.
도 59b는 A56 단백질과 Ab13의 결합친화도(KD)를 OCTET(SPR)과 ELISA로 측정한 도면이다.
도 60은 A56 단백질과 Ab16의 결합 및 이의 간격을 측정한 도면이다.
도 61a는 A56-C-His 항원을 고정시킨 바이오센서(NTA)에 1차 항체(SA2041, Ab16, A56-02B08)를 포화상태로 결합시킨 후, 9종의 항체를 처리하여 추가적으로 결합하는지를 SPR 방법으로 분석한 결과이다.
도 612b는 A56 단백질과 Ab16의 결합친화도(KD)를 OCTET(SPR)과 ELISA로 측정한 도면이다.
도 62a는 A56 단백질의 S62와 Ab18의 중쇄의 R98의 수소결합 형성 및 결합 간격을 측정한 도면이다.
도 62b는 A56 단백질의 K91와 Ab18의 경쇄의 Y32의 수소결합 형성 및 결합 간격을 측정한 도면이다.
도 63a는 A56-C-His 항원을 고정시킨 바이오센서(NTA)에 1차 항체(SA2043, Ab18, A56-02C06)를 포화상태로 결합시킨 후, 9종의 항체를 처리하여 추가적으로 결합하는지를 SPR 방법으로 분석한 결과이다.
도 63b는 A56 단백질과 Ab18의 결합친화도(KD)를 OCTET(SPR)과 ELISA로 측정한 도면이다.
도 64는 A56 단백질과 Ab01의 결합 및 이의 간격을 측정한 도면이다.
도 65a는 A56-C-His 항원을 고정시킨 바이오센서(NTA)에 1차 항체(SA2026, Ab01, A56-01A02)를 포화상태로 결합시킨 후, 9종의 항체를 처리하여 추가적으로 결합하는지를 SPR 방법으로 분석한 결과이다.
도 65b는 A56 단백질과 Ab01의 결합친화도(KD)를 OCTET(SPR)과 ELISA로 측정한 도면이다.
도 66은 A56 단백질과 Ab19의 결합 및 이의 간격을 측정한 도면이다.
도 67a는 A56-C-His 항원을 고정시킨 바이오센서(NTA)에 1차 항체(SA2044, Ab19, A56-02C07)를 포화상태로 결합시킨 후, 9종의 항체를 처리하여 추가적으로 결합하는지를 SPR 방법으로 분석한 결과이다.
도 67b는 A56 단백질과 Ab19의 결합친화도(KD)를 OCTET(SPR)과 ELISA로 측정한 도면이다.
도 68은 본 발명의 일 실시예에서 제작한 키메라 항원 수용체의 구조를 도식화한 도면이다.
도 69는 HeLa 세포주 및 HCT-116 세포주에 5종의 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(OTS-412)와 병용 투여하였을 때의 세포 생존율을 나타낸 도면이다.
도 70은 HeLa 세포주에 5종의 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(OTS-412)와 병용 투여하였을 때의 세포독성을 비교한 도면이다.
도 71은 NCI-H522 세포주에 5종의 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(OTS-412)와 병용 투여하였을 때의 세포독성을 비교한 도면이다.
도 72는 HCT-116 세포주에 5종의 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(OTS-412)와 병용 투여하였을 때의 세포독성을 비교한 도면이다.
도 73은 5종의 CAR-T 세포의 형질도입 효율을 유세포분석기(FACS)로 측정한 도면이다.
도 74는 여러 농도의 항암바이러스(OTS-412)로 감염시킨 HCT-116 세포주에 UTD, Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포를 투여한 경우의 세포 생존율을 나타낸 도면이다.
도 75는 항암바이러스(OTS-412)로 감염시킨 A546 세포주 및 HCT-116 세포주에 UTD, Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포를 투여한 경우의 사멸된 세포를 염색한 사진이다.
도 76은 A546 세포주 및 HCT-116 세포주에 UTD, Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(OTS-412)와 병용 투여한 경우의 세포독성을 나타낸 도면이다.
도 77은 HeLa 세포주, MCF7 세포주, A549 세포주 및 PC-3 세포주에 UTD, Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(OTS-412)와 병용 투여한 경우의 세포독성을 나타낸 도면이다.
도 78는 Ab16 CAR-T 세포의 활성화를 확인하기 위해, Ab16 CAR-T 세포, 암세포주와 공배양한 Ab16 CAR-T 세포, 항암바이러스(OTS-412)로 감염시킨 암세포주와 공배양한 Ab16 CAR-T 세포들의 CD3/CD25를 발현하는 T 세포의 비율이 유세포분석기(FACS)로 측정한 도면이다.
도 79는 Ab18 CAR-T 세포의 증식능을 확인하기 위해, UTD(Mock-T) 세포, Ab18 CAR-T 세포, 항암바이러스(OTS-412)로 감염시킨 암세포주와 공배양한 UTD((Mock-T) 세포, 항암바이러스(OTS-412)로 감염시킨 암세포주와 공배양한 Ab18 CAR-T 세포들의 CD8을 발현하는 T 세포의 비율이 유세포분석기(FACS)로 측정한 도면이다.
도 80은 HCT-116 세포주-식립 마우스에 항암바이러스(OTS-412), Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포 및 히드록시유레아(HU)를 투여한 후, 0일, 3일, 8일, 10일, 14일, 17일 및 21일째에 마우스의 체중을 측정한 도면이다. "mOV"는 항암바이러스와 HU를 병용투여한 것을 의미한다. 본 명세서에 첨부된 도면에서 사용된 "mOV" 또는 "mOTS-412"는 달리 표시되지 않는 한, HU와의 병용투여를 의미한다.
도 81은 HCT-116 세포주-식립 마우스에 항암바이러스(OTS-412), Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포 및 HU를 투여한 후, 0일, 3일, 8일, 10일, 14일, 17일 및 21일째에 마우스의 종양 크기를 측정한 도면이다.
도 82는 HCT-116 세포주-식립 마우스에 항암바이러스(OTS-412), UTD 또는 Ab16 CAR-T 세포 및 HU를 투여한 후, 0일, 3일, 8일, 10일, 14일, 17일 및 21일째에 마우스의 체중을 측정한 도면이다.
도 83은 HCT-116 세포주-식립 마우스에 항암바이러스(OTS-412), UTD 또는 Ab16 CAR-T 세포 및 HU를 투여한 후, 0일, 3일, 8일, 10일, 14일, 17일 및 21일째에 마우스의 종양 크기를 측정한 도면이다.
도 84는 MCF7 세포주 및 A549 세포주에 UTD, Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포를 단독으로 투여하거나, 또는 항암바이러스(WOTS-418)와 병용 투여한 경우의 세포독성을 나타낸 도면이다.
도 85는 항암바이러스(OTS-412)로 감염시킨 HCT-116 세포주에 UTD, 5종의 CAR-T 세포(Ab13 CAR-T, Ab16 CAR-T, Ab18 CAR-T, Ab01 CAR-T, Ab19 CAR-T)를 투여한 경우의 사멸된 세포를 염색한 사진이다.
도 86은 항암바이러스(WOTS-418)로 감염시킨 HCT-116 세포주에 UTD, 5종의 CAR-T 세포(Ab13 CAR-T, Ab16 CAR-T, Ab18 CAR-T, Ab01 CAR-T, Ab19 CAR-T)를 투여한 경우의 사멸된 세포를 염색한 사진이다.
이하, 본 발명에 대하여 상세히 설명하도록 한다.
본 발명의 일 측면은, 암세포의 세포 표면에 존재하고 정상세포의 세포 표면에는 존재하지 않는 항원에 특이적으로 결합하는 (i) 세포외 항원 결합 도메인, (ii) 막관통 도메인 및 (iii) 세포내 신호전달 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체(CAR)로서, 를 발현하는 유전적으로 조작된 면역세포로서, 상기 항원은 암세포가 본래 발현하지 않는 단백질인, 유전적으로 조작된 면역세포를 제공한다.
상기 항원은 A56 단백질 또는 이의 단편일 수 있다.
상기 세포외 항원 결합 도메인은 A56 또는 이의 단편의 입체 에피토프에 특이적으로 결합하고, 상기 입체 에피토프는 서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질의 아미노산 서열 중 60번째 아미노산부터 63번째 아미노산까지의 영역에 존재하는 염기성 아미노산 또는 친핵성 아미노산을 포함하고, (i) 상기 A56 단백질의 44번째 아미노산부터 50번째 아미노산까지의 영역에 존재하는 친핵성 아미노산, (ii) 상기 A56 단백질의 53번째 아미노산부터 59번째 아미노산까지의 영역에 존재하는 친핵성 아미노산, (iii) 상기 A56 단백질의 85번째 아미노산부터 90번째 아미노산까지의 영역에 존재하는 친핵성 아미노산, 또는 (iv) 상기 A56 단백질의 91번째 아미노산부터 94번째 아미노산까지의 영역에 존재하는 염기성 아미노산 및 친핵성 아미노산을 추가로 포함하는 것일 수 있다.
본 발명에서 사용하는 용어 "A56"이란, 폭스비리데 계열(poxviridae)의 바이러스가 숙주세포를 감염시킨 후 바이러스 유전자에 코딩되어 있는 A56, A56R 또는 HA로 표현되는 유전자(예: GeneID: 3707652)의 해독(解讀) 단백질을 말한다. 상기 A56 단백질 또는 이의 단편은 서열번호 1038, 1040, 1042, 1044, 1046, 1048, 1050, 1052, 1054, 1056, 1058, 1060, 1073, 1075, 1077, 또는 1079로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 것일 수 있다. 상기 A56 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산이 서열번호 1039, 1041, 1043, 1045, 1047, 1049, 1051, 1053, 1055, 1057, 1059, 1061, 1072, 1074, 1076, 1078로 표시되는 염기서열을 포함하는 것일 수 있다. 본 발명에서 상기 A56 단백질은 "UTTA"로 혼용되어 사용될 수 있다.
구체적으로, 상기 A56 단백질은 야생형 A56 단백질 또는 이의 변이체일 수 있다. 상기 야생형 A56 단백질은 서열번호 1038 또는 1073으로 표시되는 아미노산 서열을 갖는 것일 수 있다. 또한, 상기 야생형 A56 단백질을 코딩하는 핵산은 서열번호 1039 또는 1072로 표시되는 염기서열일 수 있다.
또한, 상기 A56 단백질의 변이체는 A56 단백질과 같이 암세포의 세포 표면에 위치할 수 있는 한, 하나 이상의 아미노산이 치환, 결실, 또는 부가될 수 있다. 상기 A56 단백질 변이체를 코딩하는 염기서열은 서열번호 1038 또는 1073으로 표시되는 아미노산 서열과 적어도 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상의 서열 상동성을 가지는 아미노산 서열을 암호화하는 염기서열일 수 있으며, 가장 바람직하게는 95% 이상의 서열 상동성을 가지는 아미노산 서열을 암호화하는 염기서열일 수 있다. 구체적으로, 상기 A56 단백질의 변이체는 서열번호 1075 또는 1079로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 것일 수 있다. 상기 A56 단백질의 변이체를 코딩하는 핵산은 서열번호 1074 또는 1078로 표시되는 염기서열을 포함하는 것일 수 있다.
상기 A56 단백질의 단편은 서열번호 1040, 1042, 1044, 1046, 1048, 1050, 1052, 1054, 1056, 1058, 1060 또는 1077로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드일 수 있다. 또한, 상기 단편을 코딩하는 핵산은 서열번호 1040, 1042, 1044, 1046, 1048, 1050, 1052, 1054, 1056, 1058, 1060 또는 1077로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코딩하는 염기서열일 수 있다. 구체적으로, 서열번호 1040, 1042, 1044, 1046, 1048, 1050, 1052, 1054, 1056, 1058, 1060 또는 1077로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩티드를 코딩하는 염기서열은 각각 순서대로 서열번호 1041, 1043, 1045, 1047, 1049, 1051, 1053, 1055, 1057, 1059, 1061 또는 1076으로 표시될 수 있다.
또한, 상기 A56 단백질의 단편을 코딩하는 염기서열은 1040, 1042, 1044, 1046, 1048, 1050, 1052, 1054, 1056, 1058, 1060 또는 1077로 표시되는 아미노산 서열과 적어도 60% 이상, 70% 이상, 80% 이상, 90% 이상의 서열 상동성을 가지는 아미노산 서열을 암호화하는 염기서열일 수 있으며, 가장 바람직하게는 95% 이상의 서열 상동성을 가지는 아미노산 서열을 암호화하는 염기서열일 수 있다.
본 발명에 따른 결합 분자는 A56에 특이적으로 결합할 수 있는 능력을 보유한 생물학적 분자를 의미하며, 대표적인 예로써 항체 또는 키메라 항원 수용체일 수 있다. 보다 구체적으로, 본 발명에 따른 결합 분자는 암세포의 세포 표면에 노출된 A56에 특이적으로 결합할 수 있으며, 이러한 능력을 통해 암세포의 항암치료, 특히 항암바이러스에 감염되었음에도 잔존하는 암세포의 2차 항암치료를 위한 효과적인 표적화를 가능케 하고, CAR-T와 같은 면역 항암요법으로 사용되는 경우 그 자체로도 우수한 세포독성 효과를 발휘하는 바, 암을 효과적으로 치료할 수 있다.
상기 입체 에피토프는 인접하고 있는 아미노산, 또는 단백질의 3차원 접힘(folding)으로 인해 인접하고 있지 않는 아미노산을 포함하는 것일 수 있다. 구체적으로, 입체 에피토프는 독자적인 공간의 입체 구조에서 적어도 2, 5, 8, 10 또는 11 개의 아미노산을 포함하는 것일 수 있다.
항원/항체 결합에 관여하는 항원의 일부 아미노산 잔기를 에피토프(epitope)라고 하며, 에피토프를 인식하는 항체의 특정한 부분을 파라토프(paratope)라고 하는데, 에피토프는 파라토프와의 결합 방식에 따로 크게 약 4개 내지 약 12개의 연속된 아미노산 배열로 구성된 선형 에피토프(linear epitope)와 불연속적인 아미노산 배열로 구성된 입체 에피토프(conformational epitope)로 나뉜다. 상기 입체 에피토프는 3차원 상에서 항원/항체 결합이 폴딩(folding) 구조로 이루어지므로 결합에 관여하는 아미노산 잔기의 범위가 상대적으로 넓고 복잡하다. 따라서, 항원의 구조나 일부 서열이 알려져 있었다 하더라도 이에 입체적으로 결합하는 단일클론항체를 예측하거나 모방하는 것이 어렵다. 선형 또는 입체 에피토프의 구분은 웨스턴 블랏(Western blot) 분석을 통해 해당 항원을 변성시킨 뒤 항체를 결합시켜 봄으로써 확인이 가능하다. 선형 에피토프의 경우 샘플(항원)을 변성시키더라도 항체가 결합할 수 있으나, 입체 에피토프의 경우 항원이 변성되면 항체가 입체적으로 결합하는 것이 어려워지거나 불가능하기 때문에 예상되는 분자량에 해당하는 밴드가 검출되지 못한다.
서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질은 바람직하게는, 총 8개의 시트(green)와 4개의 헬릭스(red) 및 7개의 루프(blue)로 구성되는 다음과 같은 2차 구조 배열을 취할 수 있지만, 구조 배열이 반드시 이와 같지는 않을 수 있다:
41번째 아미노산부터 43번째 아미노산까지의 영역: 헬릭스 1/2
44번째 아미노산부터 50번째 아미노산까지의 영역: 시트 3
51번째 아미노산부터 52번째 아미노산까지의 영역: 루프
53번째 아미노산부터 59번째 아미노산까지의 영역: 시트 4
60번째 아미노산부터 63번째 아미노산까지의 영역: 루프
64번째 아미노산부터 66번째 아미노산까지의 영역: 시트 5
67번째 아미노산부터 74번째 아미노산까지의 영역: 루프
75번째 아미노산부터 78번째 아미노산까지의 영역: 시트 6
79번째 아미노산부터 80번째 아미노산까지의 영역: 루프
81번째 아미노산부터 83번째 아미노산까지의 영역: 헬릭스 3
84번째 아미노산: 루프
85번째 아미노산부터 90번째 아미노산까지의 영역: 시트 7
91번째 아미노산부터 94번째 아미노산까지의 영역: 루프
95번째 아미노산부터 97번째 아미노산까지의 영역: 헬릭스 4
98번째 아미노산: 루프
99번째 아미노산부터 105번째 아미노산까지의 영역: 시트 8
(시트 1 및 2는 표시하지 않음)
친핵성 아미노산은 친전자성 곁사슬과의 공유 반응에 감수성인 친핵성 곁사슬을 갖는 아미노산으로서, 예를 들어 시스테인(cysteine, C), 리신(lysine, K), 세린(serine, S), 트레오닌(threonine, T) 또는 티로신(tyrosine, Y)일 수 있다. 염기성 아미노산은 곁사슬이 염기성을 나타내는 아미노산으로서, 중성 pH 영역에서 해리하여 곁사슬이 (+)전하를 갖는 아미노산이며, 예를 들어 히스티딘(histidine, H), 아르기닌(arginine, R) 또는 리신(lysine, K)일 수 있다.
상기 입체 에피토프는 서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질의 아미노산 서열 중 60번째 아미노산부터 63번째 아미노산까지의 영역에 존재하는 염기성 아미노산 또는 친핵성 아미노산을 포함하고, (i) 상기 A56 단백질의 44번째 아미노산부터 50번째 아미노산까지의 영역에 존재하는 친핵성 아미노산 및 (ii) 상기 A56 단백질의 53번째 아미노산부터 59번째 아미노산까지의 영역에 존재하는 친핵성 아미노산을 포함하는 것일 수 있다.
구체적으로, 상기 입체 에피토프는 서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질의 아미노산 서열 중 46번째의 친핵성 아미노산인 세린(S46), 54번째 아미노산인 세린(S54), 61번째인 리신(K61)을 포함하는 것일 수 있다. 보다 구체적으로는, 상기 입체 에피토프는 서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질의 아미노산 서열 중 46번째(S46), 54번째(S54), 61번째(K61), 91번째(K91) 및 100번째(T100) 아미노산을 포함하는 것일 수 있다. 또한, 상기 입체 에피토프는 서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질의 아미노산 서열 중 46번째(S46), 49번째(Y49), 54번째(S54), 61번째(K61), 62번째(S62) 및 71번째(T71) 아미노산을 포함하는 것일 수 있다.
상기 입체 에피토프는 서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질의 아미노산 서열 중 60번째 아미노산부터 63번째 아미노산까지의 영역에 존재하는 염기성 아미노산 또는 친핵성 아미노산을 포함하고, (iii) 상기 A56 단백질의 85번째 아미노산부터 90번째 아미노산까지의 영역에 존재하는 친핵성 아미노산, 및 (iv) 상기 A56 단백질의 91번째 아미노산부터 94번째 아미노산까지의 영역에 존재하는 염기성 아미노산 및 친핵성 아미노산을 포함하는 것일 수 있다.
구체적으로, 상기 입체 에피토프는 서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질의 아미노산 서열 중 62번째의 친핵성 아미노산인 세린(S62), 66번째(Y66) 및 87번째의 트레오닌(T87), 91번째의 리신(K91) 및 92번째의 세린(S92)을 포함하는 것일 수 있다. 보다 구체적으로는, 상기 입체 에피토프는 서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질의 아미노산 서열 중 54번째(S54), 62번째(S62), 66번째(Y66), 86번째(T86), 87번째(T87), 91번째(K91), 92번째(S92), 94번째(T94), 96번째(arginine, R96), 100번째(T100) 및 101번째(Y101) 아미노산을 포함하는 것일 수 있다. 또한, 상기 입체 에피토프는 서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질의 아미노산 서열 중 62번째(S62), 66번째(Y66), 71번째(T71), 72번째(K72), 76번째(S76), 87번째(T87), 91번째(K91), 92번째(S92) 아미노산을 포함하는 것일 수 있다.
또한, 상기 입체 에피토프는 서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질의 아미노산 서열 중 61번째(K61) 및 62번째(S62) 아미노산을 포함하는 것일 수 있다.
A56에 높은 친화력으로 결합하는 복수개의 서로 다른 항체들이 보이는 A56과의 결합 특성을 분석한 결과, 공통적으로 A56의 61번째 또는 91번째 위치의 염기성 아미노산(K61, K91)이 결합에 있어 중요한 역할을 수행하는 것으로 밝혀졌는데, 구체적으로 K61 또는 K91이 A56 항체의 파라토프에 위치하는 친핵성 아미노산들과의 사이에서 강력한 수소결합을 형성하고 그러한 결합이 진행됨에 따라 항체의 중쇄와 경쇄가 접혀지면서 shrink folding이 일어나 나머지 항원-항체 결합이 이루어지게 된다. 이와 별도로, K61과 K91은 또한, 바로 옆에 위치한 친핵성 아미노산인 세린(S62, S92)에 영향을 주어 항원-항체 결합에 기여할 수도 있는데, 구체적으로 K61 또는 K91이 바로 옆 잔기인 S62 또는 S92의 히드록실 그룹을 여기시켜 정전기력을 발생시키게 되고 그에 따라 S62 또는 S92이 주도적으로 항체와의 강력한 결합에 기여하기도 하는 것으로 여겨진다.
상기 세포외 항원 결합 도메인은 하기 항원 결합 분자들 중 하나 이상의 항원 결합 분자가 A56 결합에 결합하는 것을 방해함으로써 A56 결합에 대해 경쟁하는 것일 수 있다. 이러한 경쟁적 결합은 A56에 대한 결합 부위(에피토프)를 공유함을 의미한다. 상기 세포외 항원 결합 도메인은 하기 항원 결합 분자들 중 하나 이상의 항원 결합 분자와 A56 결합에 대해 경쟁하는 것일 수 있다:
서열번호 222의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 223의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 224의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 225의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 226의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 227의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는 A56 결합 분자(예를 들어, Ab13);
서열번호 290의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 291의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 292의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 293의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 294의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 295의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는 A56 결합 분자(예를 들어, Ab16);
서열번호 324의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 325의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 326의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 327의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 328의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 329의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는 A56 결합 분자(예를 들어, Ab18);
서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 3의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 4의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는 A56 결합 분자(예를 들어, Ab01);
서열번호 341의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 342의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 343의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 344의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 345의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 346의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는 A56 결합 분자(예를 들어, Ab19);
서열번호 35의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 36의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 37의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 38의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 39의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 40의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는 항체(예를 들어, Ab03)
서열번호 120의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 121의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 122의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 123의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 124의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 125의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는 항체(예를 들어, Ab08)
서열번호 239의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 240의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 241의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 242의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 243의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 244의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는 항체(예를 들어, Ab14)
서열번호 851의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 852의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 853의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 854의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 855의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 856의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는 항체(예를 들어, Ab51) 및
서열번호 919의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 920의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 921의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 922의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 923의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 924의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는 항체(예를 들어, Ab55).
상기 "결합에 대해 경쟁한다"는 표준 경쟁 결합 검정에서, 특정 항원으로의 다른 항체 또는 항원-결합 모이어티의 결합을 방해하는 항체 또는 다른 항원-결합 모이어티의 능력을 의미한다. 항체 또는 다른 항원-결합 모이어티가 특정 항원으로의 다른 항체 또는 항원-결합 모이어티의 결합을 방해할 수 있는 능력 또는 정도와, 이에 따라, 그것이 본 발명에 따라 상호 경쟁하는 것으로 지칭될 수 있는 지는 표준 경쟁 결합 검정을 사용하여 결정될 수 있다. 하나의 적절한 검정은 표면 플라스몬 공명 기술을 사용하여 상호작용의 정도를 측정할 수 있는 비아코어 기술의 사용을 포함한다. 상호-경쟁을 측정하기 위한 다른 검정은 ELISA-기반의 방법을 사용한다. 그들의 상호-경쟁에 기초한 "에피토프 비닝(binning)" 항체를 위한 고효율 과정은 국제 특허 출원 WO 2003/48731호 등에 기재되어 있다.
상기 A56 항체들은 A56 상의 에피토프 서열이 완전히 일치하지 않음에도 불구하고 A56에 대한 결합을 서로 저해하는 것으로 확인되었다. 이는, A56에의 결합은 A56 결합 분자와 A56 사이에 형성되는 특이적인 형태(conformation), 즉 A56의 입체 에피토프가 중요함을 의미한다. 특히, Ab19 항체는 다른 A56 항체들에 비해 A56에 대한 결합을 비교적 덜 저해하였지만 여전히 다른 A56 항체들이 A56에 결합하는 것을 상당히 저해하였는데, Ab19 항체와 A56의 결합을 분석한 결과, A56의 K61 및 S62에서만 강한 항원-항체 결합이 확인되었다. 이는 A56의 K61 및 S62(또는 그와 유사한 정전기적 특성을 제공하는 K91 및 K92)와 같은 아미노산 배열이 A56과의 특이적 결합에 중요하고, 그 외에 추가적인 입체 에피토프가 A56과의 보다 강한 결합에 기여함을 보여준다.
상기 세포외 항원 결합 도메인은 서열번호 1038, 18, 35, 52, 69, 86, 103, 120, 137, 154, 171, 188, 205, 222, 239, 256, 273, 290, 307, 324, 341, 358, 375, 392, 409, 426, 443, 460, 477, 494, 511, 528, 545, 562, 579, 596, 613, 630, 647, 664, 681, 698, 715, 732, 749, 766, 783, 800, 817, 834, 851, 868, 885, 902, 919, 936, 953, 970, 987, 1004, 1021, 1062 및 1063으로 이루어진 군에서 선택된 중쇄 CDR1;
서열번호 2, 19, 36, 53, 70, 87, 104, 121, 138, 155, 172, 189, 206, 223, 240, 257, 274, 291, 308, 325, 342, 359, 376, 393, 410, 427, 444, 461, 478, 495, 512, 529, 546, 563, 580, 597, 614, 631, 648, 665, 682, 699, 716, 733, 750, 767, 784, 801, 818, 835, 852, 869, 886, 903, 920, 937, 954, 971, 988, 1005, 1022 및 1064로 이루어진 군에서 선택된 중쇄 CDR2;
서열번호 3, 20, 37, 54, 71, 88, 105, 122, 139, 156, 173, 190, 207, 224, 241, 258, 275, 292, 309, 326, 343, 360, 377, 394, 411, 428, 445, 462, 479, 496, 513, 530, 547, 564, 581, 598, 615, 632, 649, 666, 683, 700, 717, 734, 751, 768, 785, 802, 819, 836, 853, 870, 887, 904, 921, 938, 955, 972, 989, 1006, 1023 및 1065로 이루어진 군에서 선택된 중쇄 CDR3;
서열번호 4, 21, 38, 55, 72, 89, 106, 123, 140, 157, 174, 191, 208, 225, 242, 259, 276, 293, 310, 327, 344, 361, 378, 395, 412, 429, 446, 463, 480, 497, 514, 531, 548, 565, 582, 599, 616, 633, 650, 667, 684, 701, 718, 735, 752, 769, 786, 803, 820, 837, 854, 871, 888, 905, 922, 939, 956, 973, 990, 1007, 1024 및 1066으로 이루어진 군에서 선택된 경쇄 CDR1;
서열번호 5, 22, 39, 56, 73, 90, 107, 124, 141, 158, 175, 192, 209, 226, 243, 260, 277, 294, 311, 328, 345, 362, 379, 396, 413, 430, 447, 464, 481, 498, 515, 532, 549, 566, 583, 600, 617, 634, 651, 668, 685, 702, 719, 736, 753, 770, 787, 804, 821, 838, 855, 872, 889, 906, 923, 940, 957, 974, 991, 1008, 1025 및 1067로 이루어진 군에서 선택된 경쇄 CDR2; 및
서열번호 6, 23, 40, 57, 74, 91, 108, 125, 142, 159, 176, 193, 210, 227, 244, 261, 278, 295, 312, 329, 346, 363, 380, 397, 414, 431, 448, 465, 482, 499, 516, 533, 550, 567, 584, 601, 618, 635, 652, 669, 686, 703, 720, 737, 754, 771, 788, 805, 822, 839, 856, 873, 890, 907, 924, 941, 958, 975, 992, 1009, 1026 및 1068로 이루어진 군에서 선택된 경쇄 CDR3을 포함하는 것일 수 있다.
구체적으로, 상기 세포외 항원 결합 도메인은 서열번호 1, 35, 120, 222, 239, 290, 324, 341, 851, 919, 1062 또는 1063의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1;
서열번호 2, 36, 121, 223, 240, 291, 325, 342, 852, 920 또는 1064의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2;
서열번호 3, 37, 122, 224, 241, 292, 326, 343, 853, 921 또는 1065의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3;
서열번호 4, 38, 123, 225, 242, 293, 327, 344, 854, 922 또는 1066의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1;
서열번호 5, 39, 124, 226, 243, 294, 328, 345, 855, 923 또는 1067의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2; 및
서열번호 6, 40, 125, 227, 244, 295, 329, 346, 856, 924 또는 1068의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3을 포함하는 것일 수 있다.
본 명세서에서 사용하는 용어 "항체"란, 항원과 결합하여 항원의 작용을 방해하거나, 항원을 제거하는 면역단백질을 의미한다. 항체에는 IgM, IgD, IgG, IgA 및 IgE의 5종류가 있으며, 각각 중쇄 불변영역 유전자 μ, δ, γ, α, ε로부터 만들어진 중쇄를 포함한다. 항체기술에서는 주로 IgG가 사용되는데 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4의 4종류의 동종(isotype)이 있으며, 각각의 구조 및 기능적 특성은 상이할 수 있다.
상기 IgG는 중쇄(heavy chain, 약 50 kDa) 단백질 2개와 경쇄(light chain, 약 25 kDa) 단백질 2개로 만들어진 Y자 모양의 매우 안정된 구조(분자량, 약 150 kDa)를 형성하고 있다. 항체의 경쇄와 중쇄는 아미노산 서열이 항체들마다 서로 다른 가변영역(variable region)과 아미노산 서열이 같은 불변영역(constant region)으로 나뉘어져 있다. 중쇄 불변영역에는 CH1, H(hinge), CH2, CH3 도메인이 존재한다. 각 도메인은 두 개의 β-시트(sheet)로 구성되어 있고 분자 내 이황화결합(disulfide bond)으로 연결되어 있다. 중쇄와 경쇄의 가변영역 두 개가 합쳐져 항원 결합 부위(antigen binding site)가 형성된다. 상기 부위는 Y자 모양의 두 개의 팔에 각각 한 개씩 존재하는데 이러한 항원과 결합할 수 있는 부분을 Fab(antibody binding fragment)이라 하고, 항원과 결합하지 못하는 부분을 Fc(crystalizable fragment)라고 한다. Fab과 Fc은 유연한 경첩 부위(hinge region)로 연결되어 있다.
본 명세서에서 사용하는 용어 "CDR"이란, 항체의 중쇄 및 경쇄 가변영역 안에 항체마다 다른 아미노산 서열을 가지는 부위인 초가변영역(hypervariable region)으로서, 항원과 결합하는 부위를 의미한다. 항체의 입체구조를 살펴보면, CDR은 항체의 표면에서 고리(loop) 모양을 하고 있고 고리 아래에는 이를 구조적으로 지지해주는 FR(framework region)이 존재한다. 중쇄와 경쇄에는 각각 세 개씩의 고리구조가 존재하며, 이들 여섯 개의 고리 지역 구조는 서로 합쳐져서 항원과 직접적으로 접촉한다. 상기 여섯 개의 고리 지역 구조의 항원 결합 부위 각각을 편의상 CDR1, CDR2, CDR3, CDR4, CDR5 및 CDR6라고 지칭한다.
또한, 상기 항체 단편은 Fab, scFv, F(ab)2 및 Fv로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있다. 항체 단편은 항원과의 결합 자극을 세포나 보체 등에 전달하는 기능(effector function)을 하는 결정가능 영역(Fc region)을 제외한 항원결합 도메인들을 말하며, 단일 도메인 항체(single domain antibody)나 소형 항체(minibody) 등과 같은 3세대 항체 단편을 포함할 수 있다.
또한, 상기 항체 단편은 완전한 구조의 IgG에 비하여 크기가 작기 때문에 조직이나 종양으로의 침투율이 좋고, 박테리아에서 생산할 수 있으므로 생산 비용이 적게 드는 장점이 있다. 또한, 상기 항체 단편은 Fc가 없기 때문에 항원과의 결합 자극을 세포나 보체 등에 전달하는 기능을 원하지 않는 경우에 사용한다. 항체 단편은 인체 내에서의 반감기가 짧아 생체 진단용으로 적합하지만, 항체를 이루고 있는 아미노산 중 일부 염기성, 산성 혹은 중성 아미노산을 상호 교체할 경우 그 항체만의 고유한 등전점(isoelectric point, pI)이 바뀔 수 있다. 이러한 항체의 등전점 변화가 항체의 생체 내 독성 부작용을 경감한다거나 수용성을 증가시키는 등의 변화를 유도할 수 있으므로 치료용 항체의 경우 친화도나 구조적 형태를 고려하여 완전한 구조의 IgG를 사용할 수 있다.
상기 항체는 공지의 단일클론 항체 제조기술로 용이하게 제조될 수 있다. 단일클론항체를 제조하는 방법은 면역된 동물로부터 얻은 B 림프구를 사용하여 하이브리도마를 제조함으로써 수행되거나, 파지 디스플레이(phage display) 기술을 이용함으로써 수행될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 항체 또는 그의 단편는 키메라 항원 수용체(chimeric antigen receptor, CAR)의 일부 구성으로 사용될 수 있다. 구체적으로, 상기 키메라 항원 수용체는 항원 결합 도메인(antigen binding domain), 막관통 도메인(trans membrane domain) 및 세포내 신호전달 도메인를 포함하는데, 상기 항체 또는 이의 단편은 항원 결합 도메인으로 사용될 수 있다.
상기 세포외 항원 결합 도메인은 항원과 결합하는 항체의 부위를 의미한다. 상기 세포외 항원 결합 도메인은 항체 또는 이의 항원 결합 단편일 수 있다. 바람직하게는, 상기 세포외 항원 결합 도메인은 항원 결합 단편일 수 있다. 또한, 상기 항원 결합 단편은 항체에서 하나의 중쇄와 하나의 경쇄가 이황화 결합으로 연결되어 하나의 항원 결합 부위를 갖는 단편일 수 있다. 상기 항원 결합 단편은 scFv, Fab 및 Fab'로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있으며, 바람직하게는, 상기 항원 결합 단편은 scFv일 수 있다. 즉, 상기 세포외 항원 결합 도메인은 scFv일 수 있다.
상기 세포외 항원 결합 도메인이 서열번호 229, 297, 331, 8, 및 348로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 서열과 90% 이상 상동성인 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변영역 및 서열번호 230, 298, 332, 9, 및 349로 이루어진 군으로부터 선택되는 아미노산 서열과 90% 이상 상동성인 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변영역을 포함하는 것일 수 있다.
상기 (i) 세포외 항원 결합 도메인이 서열번호 1081 내지 1085 중 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어진 것일 수 있다.
상기 막관통 도메인(trans membrane domain)은 세포막에 위치하는 단백질의 구조 중에서 항원이 결합하는 도메인과 세포내 신호를 전달하는 도메인을 연결하며 세포막을 관통하고 있는 부위를 의미하며, 상기 세포막에 위치하는 단백질이 세포막에 고정될 수 있도록 한다. 상기 막관통 도메인은 T-세포 수용체, CD3δ, CD3ε, CD3γ, CD3ζ, CD4, CD5, CD8α, CD9, CD16, CD22, CD27, CD28, CD33, CD37, CD45, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137, CD152, CD154, AMN 및 PD-1으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나로부터 유래되는 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 막관통 도메인은 CD8α로부터 유래된 것일 수 있다.
상기 막관통 도메인은 서열번호 1086로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 것일 수 있다. 또한, 상기 막관통 도메인을 암호화하는 염기서열은 서열번호 1096으로 표시되는 염기서열일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는, CD8α로부터 유래된 서열번호 1086로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 막관통 도메인을 사용하였다.
상기 세포내 신호전달 도메인은 세포 표면에 존재하는 항원 수용체(항원 결합 도메인)가 세포외 항원을 인지하면 세포의 활성화, 세포독성 인자 방출, 사이토카인 생산, 증식 등의 반응을 유도하기 위하여 세포 내부로 신호를 전달하는 부위를 의미한다. 또한, 일반적으로, 하나의 항원 수용체(항원 결합 도메인)를 통해 전달되는 신호로는 세포의 활성화에 불충분하므로, 2차 또는 공동 자극 신호가 필요하다. 따라서, 상기 세포내 신호전달 도메인은 1차 신호전달 도메인과 2차 신호전달 도메인 및/또는 공동 자극 도메인을 포함할 수 있다. 구체적으로, 상기 세포내 신호전달 도메인은 공동 자극 도메인 및 1차 신호전달 도메인을 포함할 수 있다.
상기 공동 자극 도메인은 TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLR10, CARD11, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CD54(ICAM), CD83, CD134(OX40), CD137(4-1BB), CD278(ICOS), DAP10, LAT, NKD2C, SLP76, TRIM 및 ZAP70으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 분자로부터 유래된 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 공동 자극 도메인은 CD137(4-1BB)로부터 유래된 것일 수 있다.
상기 공동 자극 도메인은 서열번호 1087로 이루어진 아미노산 서열로 이루어진 것일 수 있다. 또한, 상기 공동 자극 도메인을 암호화하는 염기서열은 서열번호 1096으로 표시되는 염기서열일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는, CD137(4-1BB)로부터 유래된 서열번호 1087로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 공동 자극 도메인을 사용하였다.
상기 1차 신호전달 도메인은 FcRγ, FcR, CD3γ, CD3δ, CD3ε, CD3ζ, CD22, CD79a, CD79b 또는 CD66d으로부터 유래된 것일 수 있다. 특히, T 세포의 경우 CD3의 γ, δ, ε, ζ 사슬을 통해 세포 내에 신호를 전달하며, CAR-T 세포(Chimeric antigen receptor T cell)를 제작하는 경우, 1차 신호전달 도메인으로 CD3의 γ, δ, ε, ζ 사슬을 이용할 수 있다. 구체적으로, 상기 1차 신호전달 도메인은 CD3ζ로부터 유래된 것일 수 있다.
상기 1차 신호전달 도메인은 서열번호 1088로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 것일 수 있다. 또한, 상기 1차 신호전달 도메인을 암호화하는 염기서열은 서열번호 1097로 표시되는 염기서열일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는, CD3ζ로부터 유래된 서열번호 1088로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 1차 신호전달 도메인을 사용하였다.
상기 면역세포는 T 세포, 자연살해세포, 세포독성 T 림프구(CTL), 조절 T 세포, 대식세포, 인간 배아 줄기 세포, 림프구 선조 세포, T 세포-전구 세포 및 림프구 세포가 이로부터 분화될 수 있는 다능성 줄기 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 면역세포는 T 세포, 자연살해세포 또는 대식세포일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는 면역세포로 T 세포를 사용하였다.
상기 유전적으로 조작된 면역세포는 항암바이러스와 함께 투여되어 암세포의 부하를 감소시키는데 사용되는 것일 수 있다. 암세포의 부하는 암세포의 무게, 부피 또는 개수를 의미할 수 있다. 항암바이러스에 감염되었음에도 잔존하는 암세포는 세포 표면에 A56 단백질을 발현하고 있으므로, 그러한 A56에 특이적으로 결합하는 유전적으로 조작된 면역세포는 2차 항암치료를 위한 표적화 또는 치료가 가능하다. 상기 유전적으로 조작된 면역세포는 항암바이러스보다 먼저, 동시에, 또는 나중에 투여될 수 있다.
상기 항암바이러스는 백시니아 바이러스(vaccinia virus)일 수 있다. 상기 백시니아 바이러스는 웨스턴 리저브(Western Reserve, WR), NYVAC(New York Vaccinia Virus), Wyeth(The New York City Board of Health; NYCBOH), LC16m8, 리스터(Lister), 코펜하겐(Copenhagen), 티안탄(Tian Tan), USSR, 타쉬켄트(TashKent), 에반스(Evans), IHD-J(International Health Division-J) 또는 IHD-W(International Health Division-White) 백시니아 바이러스 주(strain)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 항암바이러스는 티미딘 키나아제(Thymidine kinase, TK) 유전자를 결손시킨 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 항암바이러스는 티미딘 키나아제 유전자를 결손시킨 재조합 백시니아 바이러스일 수 있다.
본 발명에서 사용하는 용어 "TK(thymidine kinase)"란, 티미딘 키나아제로 불리며, 뉴클레오티드의 생합성에 관여하는 효소를 의미한다. 상기 TK는 세포 및 바이러스의 뉴클레오티드의 생합성에 모두 쓰이는 효소이다. 이때, 세포의 경우 정상세포는 더 이상 분열하지 않아 TK가 존재하지 않으며, 모근세포처럼 빠르게 분열하는 세포라 하더라도 TK의 양이 바이러스가 이용할 만큼 충분하지 않다. 이러한 점을 이용해 바이러스에서 TK 유전자를 결손 시킴으로써 바이러스가 암세포의 TK가 존재하는 경우에만 증식할 수 있게 함으로써, 암세포만을 선택적으로 사멸시킬 수 있다.
상기 항암바이러스는 A56 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산을 포함하는 것일 수 있다. A56 단백질 또는 이의 단편은 상술한 바와 동일하다. 상기 A56 단백질은 야생형 A56 단백질 또는 A56 단백질의 변이체일 수 있다. 상기 A56 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산은 야생형 A56 단백질 또는 A56 단백질의 변이체를 코딩하는 핵산일 수 있다. 상기 항암바이러스는 히드록시유레아와 동시에, 순차적으로 또는 역순으로 병용 투여될 수 있다.
본 명세서에서 "병용"이라는 표현은 달리 표시되지 않는 한, 해당 요법/약제들이 임의의 순서로 시차를 두고 투여되거나, 동시에 투여되는 것을 모두 포함한다.
본 발명의 다른 측면은, (i) 세포외 항원 결합 도메인, (ii) 막관통 도메인 및 (iii) 세포내 신호전달 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체(CAR)로서, 암세포의 세포 표면에 노출된 A56 단백질 또는 이의 단편에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체를 제공한다.
상기 (i) 내지 (iii)은 유전적으로 조작된 면역세포에서 기재된 설명을 참조한다. 상기 키메라 항원 수용체는 서열번호 1081 내지 1085 중 선택되는 어느 하나로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서는 항원 결합 도메인(anti-UTTA scFv), CD8 막관통 도메인(H+TM) 및 세포내 신호전달 도메인(4-1BB 및 CD3Z)를 포함하도록 설계하였으며, 항원 결합 도메인에 따라, "Ab13 CAR-T", "Ab16 CAR-T", "Ab18 CAR-T", "Ab01 CAR-T", "Ab19 CAR-T"로 명명하였다. 상기 항원 결합 도메인을 암호화하는 서열은 서열번호 1090 내지 서열번호 1094 중 선택되는 어느 하나로 표시되는 염기서열을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 키메라 항원 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 제공한다. 상기 키메라 항원 수용체는 상술한 바와 동일하다.
상기 폴리뉴클레오타이드는 데옥시리보핵산(DNA), 리보핵산(RNA) 및 DNA/RNA 혼성체를 의미한다. 폴리뉴클레오타이드는 단일 가닥 또는 이중 가닥이고 재조합, 합성이거나, 또는 단리될 수 있다. 폴리뉴클레오타이드는 전-전령 RNA(전-mRNA), 전령 RNA(mRNA), RNA, 게놈 RNA(gRNA), 플러스 가닥 RNA(RNA(+)), 마이너스 가닥 RNA(RNA(-)), 합성 RNA, 합성 mRNA, 게놈 DNA(gDNA), PCR 증폭된 DNA, 상보성 DNA(cDNA), 합성 DNA 또는 재조합 DNA를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
상기 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 1090 내지 서열번호 1094 중 선택되는 어느 하나로 표시되는 염기서열로 이루어진 것일 수 있다. 또한, 상기 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 1090 내지 서열번호 1094 중 선택되는 어느 하나로 표시되는 아미노산을 포함하는 키메라 항원 수용체를 암호화할 수 있는 한, 서열번호 1090 내지 서열번호 1094 중 선택되는 어느 하나의 염기서열과 약 80%, 90%, 95% 또는 99% 이상의 상동성을 가지는 것일 수 있다.
상기 폴리뉴클레오타이드는 코돈-최적화될 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "코돈-최적화된"란, 폴리펩타이드의 발현, 안정성 및/또는 활성을 증가시키기 위해 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 내 코돈을 치환하는 것을 의미한다. 코돈 최적화에 영향을 미치는 인자는 (i) 둘 이상의 유기체 사이의 코돈 편향의 변형 또는 유전자 또는 합성으로 작제된 편향 표, (ii) 유기체, 유전자 또는 유전자 세트 내에서 코돈 편향 정도의 변형, (iii) 맥락을 포함하는 코돈의 체계적 변형, (iv) 그들의 탈암호 tRNA에 따른 코돈의 변형, (v) 전반적으로 또는 삼중 중 하나의 위치에서 GC%에 따른 코돈의 변형, (vi) 기준 서열, 예를 들어 천연 유래 서열과의 유사성 정도의 변형, (vii) 코돈 빈도 컷오프에서의 변형, (viii) DNA 서열로부터 전사된 mRNA의 구조적 특성, (ix) 코돈 치환 세트의 설계에 기반한 DNA 서열의 기능에 관한 사전 지식, (x) 각각의 아미노산에 대한 코돈 세트의 체계적 변형, 및/또는 (xi) 비논리적 번역 개시 부위의 단리된 제거를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 벡터를 제공한다. 이때, 상기 폴리뉴클레오타이드는 상술한 바와 동일하다
상기 폴리뉴클레오타이드는 당업계에 공지되고 이용가능한 임의의 다양한 확립된 기법을 이용하여 제조되거나, 조작되고, 발현되어 전달될 수 있다. 목적으로 하는 융합단백질을 발현시키기 위해, 융합단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 적절한 벡터 내로 삽입될 수 있다.
상기 벡터는 당 분야에 공지된 벡터를 다양하게 사용할 수 있고, 상기 항원 수용체를 생산하고자 하는 숙주세포의 종류에 따라 프로모터(promoter), 종결자(terminator), 인핸서(enhancer) 등과 같은 발현조절 서열, 막 표적화 또는 분비를 위한 서열 등을 적절히 선택하고 목적에 따라 다양하게 조합할 수 있다. 본 발명의 벡터는 플라스미드 벡터, 코즈미드 벡터, 박테리오 파아지 벡터 및 바이러스 벡터 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 적합한 벡터는 프로모터, 오퍼레이터, 개시코돈, 종결코돈, 폴리아데닐화 시그널 및 인핸서 같은 발현 조절 엘리먼트 외에도 막 표적화 또는 분비를 위한 시그널 서열 또는 리더 서열을 포함하며 목적에 따라 다양하게 제조될 수 있다.
바람직하게는, 상기 벡터는 바이러스 벡터일 수 있으며, 상기 바이러스 벡터는 레트로바이러스, 렌티바이러스, 아데노바이러스, 아데노-연관바이러스, 헤르페스바이러스, 폭스바이러스, 바큘로바이러스, 유두종바이러스 및 파보바이러스로부터 유래된 것일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는, 렌티 바이러스 벡터를 이용하였다.
상기 벡터는 항원 결합 도메인의 세포막 바깥쪽에 노출시키기 위해 신호 펩타이드를 암호화하는 서열을 더 포함할 수 있으며, 이때, 상기 신호 펩타이드를 암호화하는 서열은 항원 결합 도메인을 암호화하는 서열 앞에 삽입될 수 있다. 상기 신호 펩타이드는 서열번호 1080으로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 것일 수 있으며, 이를 암호화하는 염기서열은 서열번호 1089로 표시되는 염기서열일 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 벡터가 도입된 유전적으로 조작된 면역세포를 제공한다. 본 발명의 또 다른 측면은, 상기 벡터를 면역세포에 도입하는 단계를 포함하는 유전적으로 조작된 면역세포를 제조하는 방법을 제공한다. 상기 벡터 및 면역세포는 상술한 바와 동일하다.
상기 벡터를 면역세포 내로 도입하는 방법은 당해 분야에서 공지된 방법을 이용할 수 있으며, 예를 들면, 일시적 형질감염(transient transfection), 미세주사, 형질도입(transduction), 세포융합, 칼슘 포스페이트 침전법, 리포좀 매개된 형질감염(liposome-mediated transfection), DEAE 덱스트란-매개된 형질감염(DEAE Dextran-mediated transfection), 폴리브렌-매개된 형질감염(polybrene-mediated transfection), 전기침공법(electroporation), 유전자 총(gene gun) 또는 세포 내로 핵산을 유입시키기 위한 다른 공지의 방법에 의해 세포 내로 도입할 수 있다(Wu et al., J. Bio. Chem., 267:963-967, 1992; Wu and Wu, J. Bio. Chem., 263:14621-14624, 1988). 하지만, 이에 제한하는 것은 아니다.
형질도입된 또는 형질감염된 면역세포는 벡터 도입 후, 탈체(ex vivo)에서 증식된다. 일 구체예에서, 형질감염된 면역세포는 증식하도록 최소한 약 1일, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 7일, 8일, 9일, 10일, 11일, 12일, 13일 또는 14일 동안 배양될 수 있으며, 바람직하게는 12일 내지 14일 동안 배양될 수 있다.
상기 면역세포에서 벡터가 잘 도입되었는지 확인하는 방법은 예로서, 당업자에게 널리 공지된 분자 생물학적 검정, 예를 들면, 서던 및 노던 블로팅, RT-PCR 및 PCR; 생화학적 검정, 예를 들면, 예로서 면역학적 방법(가령, ELISAs 및 웨스턴 블롯)에 의한 특정 펩티드의 존재 또는 부재의 검출을 포함한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 유전적으로 조작된 면역세포를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 약학 조성물의 투여량은 질환의 종류, 질환의 중증도, 조성물에 포함된 유효성분 및 다른 성분의 종류 및 함량, 제형의 종류 및 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자에 따라 조절될 수 있다.
또한, 상기 약학 조성물은 당업계에 공지된 다양한 방법으로 개체에 투여될 수 있다. 상기 투여 경로는 투여 방법, 체액의 부피, 점성도 등을 고려하여 통상의 기술자가 적절히 선택할 수 있다.
상기 암은 폐암, 대장암, 전립선암, 갑상선암, 유방암, 뇌암, 두경부암, 식도암, 피부암, 흉선암, 위암, 결장암, 간암, 난소암, 자궁암, 방광암, 직장암, 담낭암, 담도암, 췌장암 및 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 유전적으로 조작된 면역세포를 투여하는 단계를 포함하는 암세포의 부하를 감소시키는 방법을 제공한다.
상기 개체는 인간을 포함하는 포유류일 수 있으며, 인간이 아닌 동물일 수 있다. 상기 "인간이 아닌 동물"이라는 용어는 모든 척추동물로서, 인간이 아닌 영장류, 양, 개, 고양이, 말, 소, 닭, 양서류, 파충류 등과 같은 포유동물 및 비(非) 포유동물을 포함할 수 있다. 또한, 상기 개체는 상기 항암바이러스를 투여하여 질환이 경감, 억제 또는 치료될 수 있는 상태이거나 암 질환을 앓고 있는 개체를 의미한다.
상기 유전적으로 조작된 면역세포의 투여량은 개체의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르며, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
상기 유전적으로 조작된 면역세포는 비경구적으로 투여될 수 있는데, 종양 내(intratumoral), 복강내(intraperitoneal), 피하(sub-cutaneous), 피내(intra-dermal), 림프절내(intra-nodal) 및 정맥 내(intra-venous) 등에 적당한 방법에 의해서 투여될 수 있다. 바람직하게는, 종양 내 투여, 복강 투여 또는 정맥 투여 일 수 있다.
상기 유전적으로 조작된 면역세포의 투여경로, 투여량 및 투여횟수는 환자의 상태 및 부작용의 유무에 따라 다양한 방법 및 양으로 대상에게 투여될 수 있고, 최적의 투여방법, 투여량 및 투여횟수는 통상의 기술자가 적절한 범위로 선택할 수 있다. 또한, 상기 유전적으로 조작된 면역세포는 치료하고자 하는 질환에 대하여 치료효과가 공지된 다른 약물 또는 생리학적 활성물질과 병용하여 투여되거나, 다른 약물과의 조합 제제 형태로 제형화될 수 있다. 구체적으로, 상기 유전적으로 조작된 면역세포는 주사제 형태로 제공될 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 유전적으로 조작된 면역세포 및 항암바이러스를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 키트를 제공한다. 상기 키트는 히드록시유레아를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 또 다른 측면은, i) 항암바이러스; 및 ii) 상기 중 어느 한 항의 유전적으로 조작된 면역세포를 개체에 투여하는 단계를 포함하는 암을 치료하는 방법을 제공한다. 이때, 유전적으로 조작된 면역세포 및 항암바이러스는 상술한 바와 동일하다.
상기 항암바이러스의 투여량은 개체의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르며, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 환자에게 1×105 내지 1×1018의 바이러스 입자(virus particle), 감염능을 가지는 바이러스 단위(TCID50) 또는 플라크 형성 단위(pfu)의 항암바이러스를 투여할 수 있다. 구체적으로는, 1×105, 2×105, 5×105, 1×106, 2×106, 5×106, 1×107, 2×107, 5×107, 1×108, 2×108, 5×108, 1×109, 2×109, 5×109, 1×1010, 5×1010, 1×1011, 5×1011, 1×1012, 1×1013, 1×1014, 1×1015, 1×1016, 1×1017 또는 그 이상의 바이러스 입자, 감염능을 가지는 바이러스 단위 또는 플라크 형성 단위의 항암바이러스를 투여하는 것으로써, 상기 사이에 다양한 수 및 범위를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 상기 항암바이러스는 1×105 내지 1×1010 pfu 용량으로 투여될 수 있다. 보다 바람직하게는, 상기 항암바이러스는 1×105 이상, 1×109 pfu 미만의 용량으로 투여될 수 있다.
상기 항암바이러스는 비경구적으로 투여될 수 있는데, 종양 내(intratumoral), 복강내(intraperitoneal), 피하(sub-cutaneous), 피내(intra-dermal), 림프절내(intra-nodal) 및 정맥 내(intra-venous) 등에 적당한 방법에 의해서 투여될 수 있다. 바람직하게는, 종양 내 투여, 복강 투여 또는 정맥 투여 일 수 있다.
상기 항암바이러스의 투여경로, 투여량 및 투여횟수는 환자의 상태 및 부작용의 유무에 따라 다양한 방법 및 양으로 대상에게 투여될 수 있고, 최적의 투여방법, 투여량 및 투여횟수는 통상의 기술자가 적절한 범위로 선택할 수 있다. 또한, 상기 항암바이러스는 치료하고자 하는 질환에 대하여 치료효과가 공지된 다른 약물 또는 생리학적 활성물질과 병용하여 투여되거나, 다른 약물과의 조합 제제 형태로 제형화될 수 있다. 구체적으로, 상기 항암바이러스는 주사제 형태로 제공될 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은, 암을 예방 또는 치료하기 위한 상기 유전적으로 조작된 면역세포의 용도를 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 암의 예방 또는 치료용 약제를 제조하기 위한 상기 유전적으로 조작된 면역세포의 용도를 제공한다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
I. A56 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산을 포함하는 벡터 제조 및 종양 세포 표면에서의 발현 확인
제조예 1.1. A56 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산을 포함하는 벡터 제조
야생형 A56 단백질 및 이의 단편을 코딩하는 플라스미드 제작을 위해 특정영역(signal, IgV-like, tandem repeat, stalk, transmembrane domain, cytoplasmic tail)을 제거하기 위한 프라이머를 제작하고 GFP와 겹쳐주는 영역을 형성시켜 중복 PCR을 진행하였다.
제조예 1.2. A56 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암 백시니아 바이러스 생산
A56 단백질을 포함하는 항암 백시니아 바이러스를 생산하기 위하여, HeLaS3(ATCC) 세포주를 6-웰 플레이트에 4×105 세포/웰 조건 및 10% 우태아 혈청이 포함된 EMEM 배지 상태로 준비하였다. Wyeth 종 및 Western Reserve 종의 야생형 백시니아 바이러스 0.05 MOI를 각각 처리하고, 2시간 후, 2% 우태아 혈청이 포함된 EMEM 배지로 교체한 후 리포터 유전자 및 삽입 유전자 벡터를 Xfect reagent buffer를 이용하여 형질주입하였다. 4시간 배양 후, 세포를 2% 우태아 혈청이 포함된 EMEM 배지로 교체한 후 72시간 추가 배양하였다. 최종적으로, 감염된 세포를 회수한 다음 동결 및 해동을 3회 반복과 초음파분쇄로 세포를 용해시키고, 수크로스 쿠션법(sucrose cushion method)으로 분리된 A56 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암 백시니아 바이러스(OTS-412, WOTS-418)를 확보하였다.
참고예 1. 백시니아 바이러스의 종에 따른 A56 단백질 서열 비교
ATCC(American Type Culture Collection)에서 입수한 야생형 백시니아 바이러스(NYC Department of Health strain, VR-1536)에서 TK 부위를 결실시킨 Wyeth 종의 OTS-412 및 Western Reserve 종의 WOTS-418의 A56 단백질을 마크로젠사에 유전자 시퀀싱을 의뢰하여 서열을 분석하였다. OTS-412 및 WOTS-418의 A56 단백질에 대한 각각의 서열을 NCBI Blast 및 Uniprot를 통해 정렬(alignment)한 결과, 100% 일치하는 서열은 찾지 못하였으며, 특히 245번째 내지 250번째 아미노산이 결실되어 있는 것을 확인하였다. 서열 상동성이 높은 4종과 비교하였다.
실험예 1. 암세포 표면에서의 A56 단백질 발현
제조예 1.2에서 제조한 A56 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암 백시니아 바이러스를 인간 폐암 세포주(A549), 인간 대장암 세포주(HCT-116) 또는 인간 흑색종 세포주(SK-MEL-5)에 감염시켜 암세포 표면에 A56 단백질이 발현되었는지를 확인하였다.
구체적으로, A549(lung carcinoma, ATCC, 미국), HCT-116(colorectal carcinoma, 한국세포주은행) 세포주, SK-MEL-5(human melanoma, 한국세포주은행)세포주를 12-웰-플레이트 내의 커버글라스 상에 각 웰당 3.5×104 세포수가 되도록 접종하였다. 그 후, 0.1 MOI의 항암 백시니아 바이러스로 감염시킨 후, 37℃ O2 조건에서 30시간 동안 배양하였다. 배양이 끝난 각각의 세포주들을 수확한 후, 4%(v/v) PFA(paraformaldehyde), 1%(v/v) BSA, 1:500 비율로 희석시킨 항-A56 1차 항체(Cat no. ABIN1606294, Antibodies-Online) 및 1:200 비율로 희석시킨 2차 항체(Alexa 594, Cat no. A21205, Invitrogen)를 처리하였다. DAPI 염색을 한 후, 슬라이드 글라스에 각각의 세포주 샘플을 올려놓고 공초점현미경(Olympus, FV1000)을 이용하여 관찰하였다.
그 결과, 항암 백시니아 바이러스로 감염시킨 A549 및 HCT-116 세포주의 세포 표면에서 A56 단백질의 발현을 확인하였다(도 1 및 도 2).
실험예 2. 마우스의 종양 조직 표면에서의 A56 단백질 발현 확인 I
제조예 1.2에서 제조한 A56 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암 백시니아 바이러스를 암을 유발시킨 마우스 모델에 복강내 투여하여 조직 표면에 A56 단백질이 발현되었는지를 확인하였다.
구체적으로, BALB/c 누드 마우스에 6.3×106 세포수의 HCT-116 대장암 세포주(한국세포주은행, KCLB)를 피하 이식하여 암을 유발하였다. 종양의 평균 부피가 150 ㎜3 내지 200 ㎜3이 되었을 때, 제조예 1.2에서 제조한 2×107 pfu 용량의 항암 백시니아 바이러스를 복강 내 투여하였다. 그 후, 4일째에 마우스를 희생하여 종양 조직과 뇌, 심장, 폐, 근육, 신장, 간 및 비장 조직을 수집하였다.
상기 실험예 1과 동일한 방법으로 A56 단백질에 대한 면역형광염색을 수행하였다. DAPI 염색을 한 후, 슬라이드 글라스에 각 조직 샘플을 올려 놓고 형광현미경을 이용하여 관찰하였다.
그 결과, 항암 백시니아 바이러스를 투여한 마우스의 종양 조직의 표면에서 A56 단백질의 발현을 확인하였다. 반면, 뇌, 심장, 폐, 근육, 신장, 간 및 비장 조직에서는 A56 단백질이 발현되지 않는 것을 확인하였다(도 3). 이를 통해, 항암 백시니아 바이러스를 투여한 후 종양조직 표면에 발현된 A56 단백질을 타겟으로 하는 결합분자를 제작하여 항암면역치료제로 활용할 수 있음을 확인하였다.
실험예 3. 토끼의 조직 표면에서의 A56 단백질 발현 확인
제조예 1.2에서 제조한 A56 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암 백시니아 바이러스를 정상 토끼에 정맥 내로 투여하여 조직 표면에 A56 단백질이 발현되었는지를 확인함으로써 독성 위험을 분석하였다..
구체적으로, 뉴질랜드 토끼에 제조예 1.2에서 제조한 1×108 pfu 또는 1×109 pfu 용량의 항암 백시니아 바이러스를 혈관 내로 투여하였다. 그 후, 3주차 또는 8주차에 토끼를 희생하여 뇌, 심장, 폐, 근육, 신장, 간 및 비장 조직을 수집하였다.
상기 실험예 1과 동일한 방법으로 A56 단백질에 대한 면역형광염색을 수행하였다. DAPI 염색을 한 후, 슬라이드 글라스에 각 조직 샘플을 올려 놓고 형광현미경을 이용하여 관찰하였다.
그 결과, 항암 백시니아 바이러스를 투여한 토끼의 심장, 폐, 근육, 신장, 간 및 비장 조직에서는 A56 단백질이 발현되지 않는 것을 확인하였다.
한편, 항암 백시니아 바이러스를 투여한 토끼의 뇌 조직에서 형광 반응이 검출되었다. 검출된 형광 반응이 항-A56 항체의 비특이적인 반응인지를 확인하기 위해, 항암 백시니아 바이러스를 투여하지 않은 정상 토끼의 뇌 조직을 상기와 동일한 방법으로 면역형광염색한 후 형광현미경을 이용하여 형광 반응을 확인하였다.
그 결과, 항암 백시니아 바이러스를 투여하지 않은 토끼의 뇌 조직에서도 형광 반응이 검출되었으며, 이를 통해 비특이적인 반응인 것을 확인하였다(도 4).
또한, 항암 백시니아 바이러스를 투여하지 않은 정상 인간의 뇌 조직(양산부산대학교병원)을 상기와 동일한 방법으로 면역형광염색한 후 형광현미경을 이용하여 형광 반응이 미약하게 검출되었으나, 항체의 경우 혈액 뇌 장벽(blood brain barrier)을 통과하지 않으므로, 뇌실 내 직접 투여하지 않는 이상, 항-A56 항체의 비특이적인 반응이 일어나지 않을 것으로 판단된다.
실험예 4. 마우스의 종양 조직 표면에서의 A56 단백질 발현 확인 II
제조예 1.2에서 제조한 A56 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산을 포함하는 항암 백시니아 바이러스와 히드록시유레아를 암을 유발시킨 마우스 모델에 병용 투여하여 조직 표면에 A56 단백질이 발현되었는지를 확인하였다.
구체적으로, BALB/c 누드 마우스에 6.3×106 세포수의 Renca 암세포주(한국세포주은행)를 피하 이식하여 암을 유발하였다. 종양의 평균 부피가 150 ㎜3 내지 200 ㎜3이 되었을 때, 제조예 1.2에서 제조한 2×107 pfu 용량의 항암 백시니아 바이러스를 종양 내 투여하였으며, 히드록시유레아는 30 ㎎/㎏ 용량으로 투여하였다.
상기 제작한 마우스 신장암세포 식립 마우스를 3개 그룹(n=4)으로 분류하였다. 식염수를 종양 내 투여받는 그룹을 대조군으로 설정하였으며, 항암 백시니아 바이러스(1×107 pfu)만 투여받는 그룹 및 항암 백시니아 바이러스(1×107 pfu)와 히드록시유레아(30 ㎎/㎏)를 병용투여받는 그룹을 실험군으로 설정하였다. 항암 백시니아 바이러스는 0일째 및 14일째에 종양 내 2회 투여하였고, 히드록시유레아는 항암 백시니아 바이러스 투여 1일 전부터 투여 후 21일까지 항암 백시니아 바이러스를 투여하는 날을 제외하고 6회/주 복강 내 투여하였다.
1차 항암 백시니아 바이러스 투여 후, 7일, 10일 및 14일째에 마우스를 희생시켜 종양 조직을 수집하였으며, 2차 항암 백시니아 바이러스 투여 후 21일, 24일 및 28일째에 마우스를 희생시켜 종양 조직을 수집하였다. 상기 실험예 1과 동일한 방법으로 A56 단백질에 대한 면역형광염색을 수행하였다. DAPI 염색을 한 후, 슬라이드 글라스에 각 조직 샘플을 올려 놓고 형광현미경을 이용하여 관찰하였다.
그 결과, 1차 항암 백시니아 바이러스를 투여한 후 7일, 10일, 14일째까지 항암 백시니아 바이러스만을 투여한 그룹 및 항암 백시니아 바이러스와 히드록시유레아를 병용투여 받은 그룹의 마우스 종양 표면에 A56 단백질이 뚜렷하게 발현되고 있는 것을 확인하였다(도 5 및 도 6).
또한, 1차 항암 백시니아 바이러스 투여하고 14일째 되는 날에 2차 항암 백시니아 바이러스를 투여한 후, 그로부터 7일, 10일, 14일째까지 A56 단백질이 종양 표면에 발현되는 것을 확인하였다(도 7 및 도 8). 특히, 24일(D10)째 죽어있는 세포와 살아있는 세포 모두 A56 단백질이 발현되어 있는 것이 확인되었다.
실험예 5. 세포 표면에서의 A56 단백질 또는 이의 단편 발현
A56 단백질 또는 이의 단편을 코딩하는 플라스미드를 HeLa 세포주에 처리하여 세포 내 혹은 표면에 A56 단백질이 발현되었는지를 확인하였다.
구체적으로, HeLa(cervical cancer cell, ATCC, 미국) 세포주를 12-웰-플레이트 내의 커버글라스 상에 각 웰당 3.5×104 세포수가 되도록 시딩하였다. 그 후, Xfect reaction buffer와 Xfect polymer와 혼합하여 희석된 A56 단편 플라스미드를 HeLa 세포주와 함께, 37℃ O2 조건에서 30시간 동안 배양하였다. 배양이 끝난 각각의 세포주들을 수확한 후, 4%(v/v) PFA(paraformaldehyde), 1%(v/v) BSA, 1:500 비율로 희석시킨 항-A56 항체(Cat no. ABIN1606294, Antibodies-Online) 및 1:200 비율로 희석시킨 2차 항체(Alexa 594, Cat no. A21205, Invitrogen)를 처리하였다. DAPI로 핵을 염색을 하였으며, 형광염료를 사용하여 골지체를 염색하였다. 그 후, 슬라이드 글라스에 세포주 샘플을 올려놓고 공초점현미경(Olympus, FV1000)을 이용하여 관찰하였다. 그 결과를 도 9, 도 10 및 표 1에 나타내었다.
Nucleus | Golgi Apparatus | ER | Cytosol(broad) | Plasma Membrane | |
A56-G | --- | + | + | + | +++ |
A56-121 | --- | ++ | + | + | + |
A56-17 | --- | --- | +++ | --- | --- |
A56-121S | + | + | + | --- | |
A56-170 | --- | --- | + | ++ | --- |
A56-240 | --- | --- | ++ | + | --- |
A56-276 | --- | --- | ++ | + | --- |
BNX A56-LTC | --- | + | ++ | + | --- |
야생형 A56 (A56-G)과 A56의 6개의 영역이 일부 절단된 단편을 세포 표면에 발현시킨 결과, 야생형 A56 (A56-G)과 IgV 유사 도메인(IgV-like domain)이 절단된 A56-121만이 세포 표면에 도달하여 발현되는 것을 확인하였다. IgV 유사 도메인을 제외한 A56 변이체에서 시그널 펩타이드(signal peptides), 막통과 도메인(transmembrane domain), 스토크 영역(Stalk region), 텐덤 반복(Tandem repeats) 영역이 각각 또는 함께 절단된 변이체의 경우 세포막(plasma membrane)에 발현되지 않음을 확인하였다. 또한, IgV 유사 도메인이 포함된 상태에서 막통과 도메인만 포함된 변이체의 경우도 세포막에 발현되지 않는 것을 확인하였다. 즉, IgV 유사 도메인을 제외한 5개의 영역이 포함하는 변이체가 세포막에서 발현되는 것을 확인하였다.
II. A56 단백질 또는 이의 단편에 결합하는 항체 제조
제조예 2. A56 단백질 정제 및 생산
벡터 DNA(N293F-A56-C-HIS)를 증폭하고 HEK293F 세포에 도입하여 과발현시킨 후, 친화크로마토그래피(Ni-NTA)로 1차 정제한 후, 양이온 교환 크로마토그래피(CEX)로 2차 정제를 수행하고, 최종적으로 A56-C-HIS 단백질을 생산하였다(도 11).
제조예 3. A56 단백질 또는 이의 단편에 결합하는 항체 제조 I
A56 단백질, 이의 변이체 또는 이의 단편에 특이적으로 결합하는 항-A56 항체를 Ybiologics사에 의뢰하여 파지 라이브러리 기법을 통해 61종의 항체를 제조 및 CDR 분석하였다. A56 항원을 코팅한 튜브에 파지 라이브러리를 넣어주어 결합하는 힛(hit)을 찾는 바이오패닝을 실시하였다. 평균 3번에 걸쳐 세척을 하여 특이적 결합을 이루어지는 파지를 선별하였다. 3번의 패닝 과정을 거친 후, 친화력(affinity)을 테스트하고 높은 친화력을 보이는 콜로니를 소량 피킹하여 실제 항원에 대한 친화력이 나타나는지 확인하였다. 상대적으로 힛이 많이 나오는 세트를 골라 자동화 시스템을 이용해 피킹을 하고 힛을 선별하였다.
이와 같이 생산한 항-A56 항체와 A56 단백질 간의 친화도를 측정한 결과를 도 12 내지 도 17에 나타내었다. 또한, 도 18a 내지 도 18c에 항-A56 항체의 생산량을 나타내었다. 또한, 도 19 내지 도 35에는 생산된 항-A56 항체를 SDS-PAGE를 통해 확인한 결과를 나타내었다.
실험예 6. 항-A56 항체의 친화도 측정
Immuno-tube의 각 웰마다 A56 단백질을 코팅시켜준 후, 블로킹(blocking) 과정을 수행하였다. 블로킹 과정 후에 각 웰마다 100 nM부터 three-fold serial dilution을 거친 항체를 상온에서 소정의 시간 동안 반응을 시켜주었다. 그 후, PBS로 3회 세척한 후, 2차 항체도 상온에서 소정의 시간 동안 처리한 후에 농도 별로 A56 단백질과 항-A56 항체의 친화도를 측정하였다.
실험예 7. 백시니아 바이러스 종에 따른 A56 단백질의 아미노산 서열 상동성 비교
백시니아 바이러스 코펜하겐(Copenhagen), Ankara, 웨스턴 리저브(Western Reserve, WR), IHD-J(International Health Division-J), 티안탄(Tian Tan) 및 Wyeth(The New York City Board of Health; NYCBOH)의 바이러스 종별 A56 단백질의 아미노산 서열 상동성을 비교한 결과, 도 36에 나타난 바와 같이, 모든 종의 A56 단백질의 아미노산 서열 중 30번째 내지 90번째까지 동일한 것을 확인하였다.
III. A56 단백질의 입체 에피토프 확인
실시예 1. A56 단백질의 선형 및 입체구조 에피토프 구별
A56 단백질에 결합하는 항-A56 항체 10종(Ab18, Ab19, Ab01, Ab13, Ab14, Ab08, Ab03, Ab51, Ab55, Ab16)에 대하여 선형 에피토프와 입체구조 에피토프 구분을 위해 웨스턴블랏 분석을 수행하였다. 상기 10종의 항-A56 항체는 휴먼파아지(human phage) 라이브러리에서 A56 단백질에 특이적으로 결합하면서 대표성 있는 항체로 선별된 61종의 항체 중 결합력(binding affinity) 기준으로 상위 10종을 선별한 것이다(도 37).
구체적으로, HeLa 세포주에 OTS-412를 감염시키고 24시간 후 HeLa 세포를 수집하여 용해시켜 총 단백질 추출하였다. 상기 단백질을 변성(denature)과정을 거친 후 SDS-PAGE 겔에 로딩하여 전기영동하였다. 전기영동 후 PVDF(Polyvinylidene difluoride) 막으로 이동시켜 1차 항체인 10종의 항-A56 항체를 각각 반응시키고 난 후, PBST(PBS, 동인바이오텍, Tween 20, Sigma)로 세척하였다. 그 후, 2차 항체(Goat Anti-human IgG Fc cross-absorbed, HRP(Abcam, Cat no. ab98624)와 반응시켰다. 다시 PBST로 세척한 후, 발광 시약(ECL, Amersham Biosciences)을 처리하고, 이미징 시스팀(chemiluminescent imaging system)을 이용하여 확인하였다. 이때, 재조합한 A56 단백질(A56-C-His, 1.56 mg/㎖)과 상업용 항-A56 항체(Immune Technology Corp., Cat no. IT-012-006M1)를 양성대조군으로 사용하였다.
그 결과, 먼저, 도 38에 나타난 바와 같이, 양성대조군에서 A56 단백질의 분자량이 85kD 내지 100kD의 밴드를 갖는 것으로 나타난 반면, 상기 10종의 항-A56 항체들은 대부분 양성대조군보다 밴드의 크기나 강도가 약하게 나타났다(도 39). 특히, Ab03, Ab08, Ab13, Ab19, Ab51, Ab55 및 Ab16에서는 밴드의 크기가 다수의 약한 밴드가 관찰되거나 어떠한 밴드도 나타나지 않는 것으로 나타났다. 밴드가 나타나지 않거나 밴드의 크기와 강도가 강하지 않은 것은 에피토프가 입체적으로 형성되어 있음을 의미한다.
나아가, 상기 7종의 항-A56 항체에 대한 에피토프 매핑을 위해, Ab18, Ab13, 및 Ab16를 우선적으로 매핑하였으며, 그 후 추가로 결합력이 높은 2종의 항체(Ab01 및 Ab19)에 대한 에피토프를 규명하였다.
실시예 2. A56 단백질과 anti-A56 항체의 원형(intact) 단백질 분석 및 결합 복합체(complex)의 특성 분석
에피토프 매핑에 앞서, 각각의 샘플(A56-C-His, 3종의 항체 Ab13, Ab16, Ab18)과 항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab13, A56-C-His/Ab16, A56-C-His/Ab18)의 특성 분석을 통해 샘플의 무결성과 결합 복합체의 응집 정도를 분석하였다.
구체적으로, 대조군의 원형 질량 분석을 위해 A56 단백질과 각각의 항-A56 항체(Ab13, Ab16, Ab18)를 5 ㎕씩 혼합한 후, 10 ㎕에서 1 ㎕의 혼합물을 1:1 비율의 아세토니트릴/물(acetonitrile/water)과 0.1%의 TFA(K200 MALDI Kit)에 re-crystallized sinapinic acid matrix(10 ㎎/㎖)에 섞고 MALDI 플레이트(SCOUT 384)에 위치시켜 상온에서 결정화 시켰다. 그 후, MALDI-MS(mass spectrometer)로 3회에 걸쳐 분자량을 측정하였다.
이때, 복합체(A56-C-His/항-A56 항체)의 질량 분석은 MALDI-TOF MS 분석(Cross-linking High-Mass Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry, Autoflex II MALDI ToF mass spectrometer, Bruker)법으로 수행하였다. 상기 원형 질량 분석에 사용하고 남은 9 ㎕의 항원-항체 결합 복합체를 1 ㎕의 교차 결합 시약(K200 Stabilizer, 2 ㎎/㎖)과 혼합하여 상온에서 180분 반응시킨 후, 표준 질소(standard nitrogen) 레이저를 사용하여 MALDI ToF MS 분석을 진행하였다(MS: Linear and Positive mode, Ion Source 1:20 KV, 2:17 kV, Lens: 12kV, Pulse Ion Extraction: 400ns; HM4: Gain Voltage: 3.14kV, Acceleration Voltage: 20kV).
그 결과, 교차 결합으로 확인한 샘플에서 대조군의 피크 값과 거의 유사한 분자량이 검출되었으며(표 2), 어떠한 비공유 복합체도 탐지되지 않았으므로 분석에 사용될 샘플의 상태가 응집되거나 손상되지 않았음을 확인하였다.
A56-C-His | Ab13 | Ab16 | Ab18 | Ab01 | Ab19 | |
Control | 60.627 | 147.872 | 149.841 | 151.684 | 149.102 | 151.192 |
Cross-Link | 62.921 | 153.432 | 154.374 | 157.272 | 155.922 | 154.921 |
나아가, 항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab13, A56-C-His/Ab16, A56-C-His/Ab18, A56-C-His/Ab01, A56-C-His/Ab19)를 비공유 단백질 복합체 교차 결합 전용 시약을 처리하여 안정화시킨 후 High-Mass MALDI 분석한 결과, 두 종류의 피크가 관찰되었으며, 이러한 데이터를 complex tracker 소프트웨어로 평가함으로써 A56·Ab, 2A56·Ab 복합체의 존재를 확인하였다(도 40 내지 도 44). 또한, 하기 표 3에 각각의 샘플과 복합체의 분자량을 나타내었다.
Ab13 | Ab16 | Ab18 | ||||
Control | A56-C-His Ab13 |
67.058 147.594 |
A56-C-His Ab16 |
56.010 149.219 |
A56-C-His Ab18 |
57.924 151.312 |
Cross-Link | [A56-C-His·b13][2A56-C-His·b13] | 222.042 285.676 |
[A56-C-His·b16] [2A56-C-His·b16] |
222.876 282.933 |
[A56-C-His·b18] [2A56-C-His·b18] |
225.532 286.974 |
Complex Tracker | [A56-C-His·b13] [2A56-C-His·b13] |
217.748 280.152 |
[A56-C-His·b16] [2A56-C-His·b16] |
218.682 277.609 |
[A56-C-His·b18] [2A56-C-His·b18] |
217.988 277.374 |
Control | Ab01 | Ab19 | ||||
Cross-Link | A56-C-His Ab01 |
66.493 146.919 |
A56-C-His Ab19 |
68.380 149.382 |
||
Complex Tracker | [A56-C-His·b01][2A56-C-His·b01] | 221.722 283.925 |
[A56-C-His·b19] |
228.468 |
||
[A56-C-His·b01][2A56-C-His·b01] | 211.179 270.424 |
[A56-C-His·b19] | 217.765 |
실시예 3. 항-A56 항체 5종에 대한 A56 단백질의 에피토프 매핑(Epitope Mapping)
하기 실시예 3.2 내지 실시예 3.7 및 해당 실시예에 언급된 도면들에 표시된 A56의 아미노산 서열의 넘버링은 서열번호 1038로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 30번 세린은 서열번호 1038로 표시된 아미노산 서열 중 46번 세린에 해당함).
실시예 3.1. A56 단백질의 서열 분석
A56 단백질의 에피토프 매핑을 위해 먼저 A56 단백질의 서열을 확인하였다. 5종의 단백질 분해효소(트립신, 키모트립신, ASP-N, 엘라스테아제, 서모리신)를 처리하여 펩타이드로 단편화 시킨 후, 분해된 펩타이드를 LTQ-Orbitrap MS(mass spectrometry)를 이용하여 질량 지문(mass fingerprint) 정보를 얻어서 기존의 A56 단백질의 서열정보와 일치하는지 여부를 비교 분석하였다.
그 결과, 도 45에 나타난 바와 같이, 트립신으로 분해한 A56 단백질의 아미노산 단편의 서열 커버리지는 38.76%, 키모트립신으로 분해한 A56 단백질의 아미노산 단편의 서열 커버리지는 66.28%, ASP-N으로 분해한 A56 단백질의 아미노산 단편의 서열 커버리지는 43.80%, 엘라스테아제로 분해한 A56 단백질의 아미노산 단편의 서열 커버리지는 94.57%, 서모리신으로 분해한 A56 단백질의 아미노산 단편의 서열 커버리지는 83.33%로 확인되었고, 5종의 단백질 분해효소로 확인한 서열을 종합하면 기존의 A56 단백질의 서열정보와 99.61% 일치하는 것으로 확인되었다.
실시예 3.2. 항-A56 항체(Ab13)에 대한 A56 단백질의 에피토프 매핑
항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab13)의 샘플을 중수소화(deuterated) 교차 결합과 다양한 단백질 분해효소를 함께 처리하여 알킬화(alkylation) 및 환원(reduction) 과정을 거친 후, High-Mass MALDI MS와 nLC-LTQ-Orbitrap MS를 이용하여 분자량 데이터를 얻은 뒤 소프트웨어(XQuest, Stavrox)를 사용하여 분석하였다.
그 결과, 교차 결합을 사용하여 A56 단백질과 각각의 항-A56 항체(Ab13)가 직접 접촉하여 결합되어 있는 부위의 서열을 확인하였고, 이를 통해 하기 표 4에 나타난 것과 같은 에피토프와 파라토프를 아래와 같이 규명하였다.
상기 표 4에 나타난 바와 같이, A56-C-His와 항-A56 항체(Ab13)가 결합하는 부위의 에피토프는 A56-C-His의 아미노산 서열 38번째, 46번째, 50번째, 70번째, 71번째, 75번째, 76번째, 78번째, 80번째, 84번째 및 85번째로 확인되었다.
구체적으로, 도 46에 나타난 바와 같이, A56-C-His 아미노산 서열 중 30번째 내지 90번째 아미노산 잔기에서 에피토프의 위치가 붉은색(38, 46, 50, 70, 71, 75, 76, 78, 80, 84, 85)으로 표시되어 있으며, Swiss-Model 소프트웨어를 이용하여 A56-C-His 단백질 구조(아미노산 서열 2번째 내지 148번째)를 인실리코(in silico)상으로 나타내었을 때, Ab13과 A56-C-His가 결합하는 부위가 파란색으로 표시되어 있다. A56-C-His의 아미노산 서열 중에서 결합부위로 확인된 부위는 38번째 내지 50번째(SIILLAAKSDVLY)와 70번째 내지 85 번째(TTITIKSLTARDAGTY)에 해당하는 것을 확인하였다.
실시예 3.3. 항-A56 항체(Ab16)에 대한 A56 단백질의 에피토프 매핑
항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab16)의 샘플을 중수소화(deuterated) 교차 결합과 다양한 단백질 분해효소를 함께 처리하여 알킬화(alkylation) 및 환원(reduction) 과정을 거친 후, High-Mass MALDI MS와 nLC-LTQ-Orbitrap MS를 이용하여 분자량 데이터를 얻은 뒤 소프트웨어(XQuest, Stavrox)를 사용하여 분석하였다.
교차 결합을 사용하여 A56 단백질과 각각의 항-A56 항체(Ab16)가 직접 접촉하여 결합되어 있는 부위의 서열을 확인하였고, 이를 통해 하기 표 5에 나타난 것과 같은 에피토프와 파라토프를 아래와 같이 규명하였다.
상기 표 5에 나타난 바와 같이 A56-C-His와 항-A56 항체(Ab16)가 결합하는 부위의 에피토프는 A56-C-His의 아미노산 서열 중 30번째, 33번째, 38번째, 45번째, 46번째, 55번째, 56번째, 58번째, 60번째로 확인되었다.
구체적으로, 도 47에 나타난 바와 같이, A56-C-His 아미노산 서열 중 30번째 내지 90번째 아미노산 잔기에서 에피토프의 위치를 붉은색(30, 33, 38, 45, 46, 55, 56, 58, 60)으로 표시되어 있으며, Swiss-Model 소프트웨어를 이용하여 A56-C-His 단백질 구조(아미노산 서열 2번째 내지 148번째)를 인실리코상으로 나타내었을 때, Ab16과 A56-C-His가 결합하는 부위가 파란색으로 표시되어 있다. A56-C-His의 아미노산 서열 중에서 결합부위는 30번째 내지 46번째(SAWYKEPNSIILLAAKS) 및 55번째 내지 60번째(TKDKIS)에 해당하는 것을 확인하였다.
실시예 3.4. 항-A56 항체(Ab18)에 대한 A56 단백질의 에피토프 매핑
항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab18)의 샘플을 중수소화(deuterated) 교차 결합과 다양한 단백질 분해효소를 함께 처리하여 알킬화(alkylation) 및 환원(reduction) 과정을 거친 후, High-Mass MALDI MS와 nLC-LTQ-Orbitrap MS를 이용하여 분자량 데이터를 얻은 뒤 소프트웨어(XQuest, Stavrox)를 사용하여 분석하였다.
교차 결합을 사용하여 A56 단백질과 각각의 항-A56 항체(Ab18)가 직접 접촉하여 결합되어 있는 부위의 서열을 확인하였고, 이를 통해 하기 표 6에 나타난 것과 같은 에피토프와 파라토프를 아래와 같이 규명하였다.
상기 표 6에 나타난 바와 같이, A56-C-His와 항-A56 항체(Ab18)가 결합하는 부위의 에피토프는 A56-C-His 아미노산 서열에서 46번째, 50번째, 55번째, 56번째, 60번째, 71번째, 75번째, 76번째로 확인되었다.
구체적으로, 도 48에 나타난 바와 같이, A56-C-His의 아미노산 서열 중 30번째 내지 90번째 아미노산 잔기에서 에피토프의 위치를 붉은색(46, 50, 55, 56, 60; 71, 75, 76)으로 표시되어 있으며, Swiss-Model 소프트웨어를 이용하여 A56-C-His 단백질 구조(아미노산 서열 2번째 내지 148번째)를 인실리코상으로 나타내었을 때, Ab18과 A56-C-His가 결합하는 부위가 파란색으로 표시되어 있다. A56-C-His의 아미노산 서열 중에서 결합부위는 46번째 내지 60번째(SDVLYTKDKIS)와 71번째 내지 76번째(TITIKS)에 해당하는 것을 확인하였다.
실시예 3.5. 항-A56 항체(Ab01)에 대한 A56 단백질의 에피토프 매핑
항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab01)의 샘플을 중수소화(deuterated) 교차 결합과 다양한 단백질 분해효소를 함께 처리하여 알킬화(alkylation) 및 환원(reduction) 과정을 거친 후, High-Mass MALDI MS와 nLC-LTQ-Orbitrap MS를 이용하여 분자량 데이터를 얻은 뒤 소프트웨어(XQuest, Stavrox)를 사용하여 분석하였다.
교차 결합을 사용하여 A56 단백질과 각각의 항-A56 항체(Ab01)가 직접 접촉하여 결합되어 있는 부위의 서열을 확인하였고, 이를 통해 하기 표 7에 나타난 것과 같은 에피토프와 파라토프를 아래와 같이 규명하였다.
상기 표 7에 나타난 바와 같이, A56-C-His와 항-A56 항체(Ab01)가 결합하는 부위의 에피토프는 A56-C-His 아미노산 서열에서 30번째, 38번째, 45번째, 75번째, 84번째로 확인되었다.
구체적으로, 도 49에 나타난 바와 같이, A56-C-His 아미노산 서열 중 30번째 내지 90번째에서 에피토프 위치가 붉은색(30, 38, 45, 75, 84)으로 표시되어 있으며, Swiss-Model 소프트웨어를 이용하여 A56-C-His 단백질 구조(아미노산 서열 2번째 내지 148번째)를 인실리코상으로 나타내었을 때, Ab01과 A56-C-His가 결합하는 부위가 파란색으로 표시되어 있다. A56-C-His의 아미노산 서열 중에서 결합부위는 30번째 내지 45번째(SAWYKEPNSIILLAAK) 및 75번째 내지 84번째 (KSLTARDAGT)에 해당하는 것을 확인하였다.
실시예 3.6. 항-A56 항체(Ab19)에 대한 A56 단백질의 에피토프 매핑
항원-항체 결합 복합체(A56-C-His/Ab19)의 샘플을 중수소화(deuterated) 교차 결합과 다양한 단백질 분해효소를 함께 처리하여 알킬화(alkylation) 및 환원(reduction) 과정을 거친 후, High-Mass MALDI MS와 nLC-LTQ-Orbitrap MS를 이용하여 분자량 데이터를 얻은 뒤 소프트웨어(XQuest, Stavrox)를 사용하여 분석하였다.
교차 결합을 사용하여 A56 단백질과 각각의 항-A56 항체(Ab19)가 직접 접촉하여 결합되어 있는 부위의 서열을 확인하였고, 이를 통해 하기 표 8에 나타난 것과 같은 에피토프와 파라토프를 아래와 같이 규명하였다.
상기 표 8에 나타난 바와 같이, A56-C-His와 항-A56 항체(Ab19)가 결합하는 부위의 에피토프는 A56-C-His 아미노산 서열에서 45번째 및 46번째로 확인되었다.
구체적으로, 도 50에 나타난 바와 같이, A56-C-His 아미노산 서열 중 30번째 내지 90번째에서 에피토프 위치가 붉은색(45, 46)으로 표시되어 있으며, Swiss-Model 소프트웨어를 이용하여 UTTA-C-His 단백질 구조(아미노산 서열 2번째 내지 148번째)를 인실리코상으로 나타내었을 때, Ab19과 A56-C-His가 결합하는 부위가 파란색으로 표시되어 있다. A56-C-His의 아미노산 서열 중에서 결합부위는 45번째 및 46번째(KS)에 해당하는 것을 확인하였다.
실시예 3.7. 항-A56 항체(Ab13, Ab16, Ab18, Ab01, Ab19)에 대한 A56 단백질의 에피토프 매핑 비교
상기 실시예 3.2 내지 실시예 3.6에서 에피토프 매핑한 결과를 비교하여 도 51 및 도 52에 나타내었다. 그 결과, A56 단백질의 아미노산 서열에서 IgG L-like domain 부위에 해당하는 30번째 내지 85번째에 에피토프가 매핑되는 것을 확인하였다.
또한, A56 단백질의 IgG Like domain을 SWISS-MODEL로 1차 3D 단백질 구조 모델링하고 iCn3D로 구조분석한 결과, 총 8개의 시트(green)와 4개의 헬릭스(red), 7개의 루프(blue)로 구성되어 있는 것을 확인하였다. 특히, 헬릭스 1, 2는 헬릭스 3에 구조적으로 바로 옆에 접혀 있는 것을 확인하였다
항-A56 항체(Ab13, Ab16, Ab18, Ab01, Ab19)들과의 결합에 관여하는 A56의 에피토프를 구조적으로 분석해 보면, 양전하(positive charge)를 갖는 염기성 아미노산 잔기인 리신(K/Lys), 아르기닌(R/Arg), 친핵성인 아미노산 잔기인 세린(S/Ser), 트레오닌(T/Thr), 그리고 방향족인 타이로신(Y/Tyr)으로 구성되어 있는 것을 확인하였다. 염기성 아미노산은 양전위화(positive)된 곁사슬에 의해 수소결합을 쉽게 형성하며, 친핵성 아미노산과 방향족의 아미노산은 주위에 위치한 아미노산에 의해 부분적으로 음전위화(negative)되어 수소결합을 형성할 수 있다. A56 단백질과 항-A56 항체에서 상호 결합하는 아미노산 잔기의 주요 물리화학적 성질을 정리하여 나타내었다.
실시예 4. 항-A56 항체 5종에 대한 A56 단백질의 파라토프 분석
하기 실시예 4.1 내지 4.5 및 해당 실시예에 언급된 도면들에 표시된 A56의 아미노산 서열의 넘버링은 서열번호 1038로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 30번 세린은 서열번호 1038로 표시된 아미노산 서열 중 46번 세린에 해당함).
실시예 4.1. 항-A56 항체(Ab13)에 대한 A56 단백질의 파라토프 분석
Ab13을 Swiss-Model 소프트웨어를 이용하여 1차 3D 단백질 구조 모델링하고 iCn3D로 결합에 참여하는 아미노산에 대한 구조분석한 결과, 중쇄(Heavy chain)의 말단 노출부에 친핵성 아미노산인 세린(S/Ser), 트레오닌(T/Thr), 및 방향족인 타이로신(Y/Tyr)이 분포되어 A56 단백질의 강력한 양전하(positive charge)를 가지는 리신(K91)과 아르기닌(R96)에 대해 결합력을 가지고, 경쇄(light chain)의 CDR1에 강력한 양전하(positive charge)를 가지는 리신(K26)과 시트5(S5)와 시트6(S6) 사이의 루프에 리신(K57)이 위치하고 있으며, A56 단백질의 친핵성 아미노산인 세린(S), 타이로신(Y/Tyr)이 리신(K26, K57)과 결합력을 가지고 있는 것으로 분석되었다(도 53).
실시예 4.2. 항-A56 항체(Ab16)에 대한 A56 단백질의 파라토프 분석
Ab16을 Swiss-Model 소프트웨어를 이용하여 1차 3D 단백질 구조 모델링하고 iCn3D로 결합에 참여하는 아미노산에 대한 구조분석한 결과, 중쇄의 말단 노출부인 시트5(S5)와 시트6(S6) 사이의 루프에 위치한 CDR2 부위의 아르기닌(R56)과 리신(K58)이 두 아미노산 사이에 위치한 친행성 아미노산인 세린(S57)에 의해 더욱 강력한 양전하를 가지게 되어(도 58의 blue mash) A56 단백질의 친핵성 아미노산인 세린(S46, S54)과 결합이 우선적으로 진행되는데 유리하고, 경쇄의 FR3의 시트6(s6)에 위치한 강력한 양전하를 가지는 리신(K60)과 친핵성 아미노산인 세린(S)에 의해 A56 단백질의 친핵성 아미노산인 세린(S62)과 리신(K61)과 높은 수준의 결합력을 가지고 있을 것으로 분석 예측되었다(도 54).
실시예 4.3. 항-A56 항체(Ab18)에 대한 A56 단백질의 파라토프 분석
Ab18을 Swiss-Model 소프트웨어를 이용하여 1차 3D 단백질 구조 모델링하고 iCn3D로 결합에 참여하는 아미노산에 대한 구조분석한 결과, 중쇄의 CDR1 헬릭스 노출부에 친핵성 아미노산인 세린(S/Ser), 트레오닌(T/Thr), 및 방향족인 타이로신(Y/Tyr)이 분포되어 있어 상대적으로 음전하(negative charge)를 가지게 되어 A56 단백질의 강력한 양전하를 가지는 리신(K72)과 결합하는 것으로 예측되었고, CDR3에는 강력한 양전하를 가지는 아르기닌(R98)이 위치하고 있는 것을 확인하였다. 또한, 경쇄의 CDR1에 친핵성 아미노산인 세린(S30)은 A56 단백질의 강력한 양전하를 가지는 리신(K91)과 시트5(S5)와 루프 사이에 위치한 리신(K50)은 A56 단백질의 타이로신(Y/Tyr, T71)에 결합하는 것으로 분석되었다(도 55).
실시예 4.4. 항-A56 항체(Ab01)에 대한 A56 단백질의 파라토프 분석
Ab01을 Swiss-Model 소프트웨어를 이용하여 1차 3D 단백질 구조 모델링하고 iCn3D로 결합에 참여하는 아미노산에 대한 구조분석한 결과, 중쇄의 말단 노출부에 친핵성 아미노산인 세린(S/Ser), 트레오닌(T/Thr), 및 방향족인 타이로신(Y106)이 분포되어 A56 단백질의 강력한 양전하를 가지는 리신(K91)과 결합력을 가지고, 경쇄의 CDR에 주로 친핵성 아미노산인 세린(S), 트레오닌(T102)이 위치하고 있으며, 특히, 트레오닌(T102)이 A56 단백질의 강력한 양전하를 가지는 리신(K61)과 결합력을 가지고 있는 것으로 분석되었다(도 56).
실시예 4.5. 항-A56 항체(Ab19)에 대한 A56 단백질의 파라토프 분석
Ab19를 Swiss-Model 소프트웨어를 이용하여 1차 3D 단백질 구조 모델링하고 iCn3D로 결합에 참여하는 아미노산에 대한 구조분석한 결과, 세린(S93, S94)의 단순한 수소결합에 의해 결합력이 상대적으로 낮고 A56 단백질의 시트4(S4)와 시트5(S5)에 위치한 루프에 존재하는 결합부위(K61, S62)에 의해 다른 항-56 항체가 가지는 에피토프와 중복되지 않을 수 있는 것으로 분석되었다(도 57).
실시예 5. 항-A56 항체와 A56 단백질의 결합 분석
하기 실시예 5.1.1. 내지 실시예 5.5.3 및 해당 실시예에 언급된 도면들에 표시된 A56의 아미노산 서열의 넘버링은 서열번호 1038로 표시된 아미노산 서열 중 N 말단 1-16번 아미노산이 제외된 서열을 기준으로 한 것이다(예를 들어, 30번 세린은 서열번호 1038로 표시된 아미노산 서열 중 46번 세린에 해당함).
실시예 5.1.1. 항-A56 항체(Ab13)와 A56 단백질 결합의 정전기력 분석
항-A56 항체(Ab13)와 A56 단백질 결합의 정전기력을 분석하기 위해, 거대분자 내부 및 주변의 정전기 전위와 해당 정전기 에너지를 계산하는 과학적 응용 프로그램인 DelPhi potential을 이용하였다. DelPhi potential은 3차원 격자 상자 내의 유한 수의 점에서 Poisson-Boltzmann 방정식을 평가하여 이온강도 매개 스크리닝의 효과를 통합하여 일반적으로 단백질 또는 기타 거대 분자 표면을 따라 정전기의 변화를 시각화하고 다양한 에너지의 정전기 성분을 계산하는데 사용하는 분석방법이다. 이때, 파란색과 빨간색은 각각 양극과 음극을 나타내고 필드라인은 단백질을 둘러싼 정전기력의 방향 및 세기를 나타낸다.
구체적으로, A56 단백질의 강력한 surface DelPhi potential electrostatics의 양전하(positive charge)를 가지는 염기성 아미노산인 리신(K61)이 바로 옆 잔기인 serine(S92)의 바로 옆 잔기인 세린(S62)의 히드록시기를 여기시켜 정전기력을 발생시키고 상대적으로 낮은 수준의 surface DelPhi potential electrostatics가 강력한 양전하를 띠게 하였다. 그 후, Ab13의 경쇄의 K26과 K57가 주위의 음전하의 D25와 D55에 의해 상대적으로 강력한 양전하의 surface DelPhi potential electrostatics가 형성되도록 하였다.
또한, Ab13의 중쇄의 T52와 T58은 주위에 있는 소수성 잔기인, I51(Isoleucine)과 친수성 반응기가 없는 방향족(aromatic)인 F54(phenylalanine)에 의해 외부로 많이 노출이 되고 음전하의 D56에 의해 높은 수준의 surface DelPhi potential electrostatics에 의해 강력한 수준의 음전하를 띠게 하였다.
그 결과, 하기 표 9와 같은 정전기적 특성을 확인하였다.
상기 표에서, 가장 오른쪽 컬럼에 표시된 아미노산 위치를 나타내는 번호 다음의 문자(H 또는 L)는 중쇄(H) 또는 경쇄(L)임을 의미한다.
실시예 5.1.2. 항-A56 항체(Ab13)와 A56 단백질 결합 간격 분석
항-A56 항체(Ab13)와 A56 단백질 결합 간격을 분석하기 위해, Swiss-PdbViewer(4.1.0)를 이용하여 A56 단백질과 Ab01의 구조적 정렬을 추론하고 활성 부위 또는 기타 관련 부분을 비교하여 H-결합, 각도 및 원자 사이의 거리를 예측하였다.
그 결과, A56 단백질의 강력한 양전하로 양전위화된 K91의 말단 기능기인 NH 잔기가 Ab13의 중쇄의 적정 수준의 음전하로 음전위화된 T52의 O-와 수소결합을 형성하고 사이의 거리는 4.88 Å인 것으로 측정되었다(도 58a). 또한, Ab13의 중쇄의 강력한 양전하로 양전위화된 K57의 말단 기능기인 NH 잔기가 A56 단백질의 적정 수준의 음전하로 음전위화된 S62의 O-와 수소결합을 형성하고 사이의 거리는 3.73 Å인 것으로 측정되었다(도 58b).
상기 2개의 수소결합이 진행되면서 A56 단백질의 음전위화된 Y66의 O-는 Ab13의 경쇄의 강력한 양전하로 양전위화된 K26과 결합을 하게 되는 것으로 예측되었다. 또한, 상기 2개의 수소결합이 진행되면서 중쇄와 경쇄가 접히면서(shrink folding) 나머지 결합(S54(A56)↔항체 중쇄), R96(A56)↔항체 중쇄)이 정전기적(electrostatic)으로 결합되는 것으로 예측되었다.
실시예 5.1.3. 항-A56 항체(Ab13)와 A56 단백질 결합 경쟁 분석: 비닝 테스트(binning test)
10종의 항-A56 항체((Ab18, Ab19, Ab01, Ab13, Ab14, Ab08, Ab03, Ab51, Ab55, Ab16)들이 A56 단백질에 대해서 동일한 에피토프를 가지고 있는지 또는 다른 에피토프를 가지고 있는지를 확인하기 위해, Octet 장비를 이용하여 SPR(Surface Plasmon Resonance) 방법으로 분석하였다.
구체적으로, A56-C-His 항원을 바이오센서(NTA)에 고정시키고, 1차 항체(SA2038, Ab13, A56-02A02)를 포화상태로 결합시킨 후, 나머지 9종의 항체를 2차 항체로 추가 결합시켰다. 이때, 항체 간에 동일한 에피토프를 갖는다면 경쟁이 일어나서 추가적인 결합이 어렵고, 서로 다른 에피토프를 보유하고 있다면 추가적인 결합이 일어날 것이다. 또한, A56-C-His 항원에 대한 2차 항체와 1차 항체의 결합 순서를 바꾸어 추가 실험을 수행하여 결과를 재확인 하였다
그 결과, 도 59a에 나타난 바와 같이, 추가 결합이 일어나지 않았으며, 상기 항체들 간에 동일한 에피토프를 갖고 있음을 확인하였다.
아울러, PAGE(polyacrylamide gel electrophoresis)를 이용한 2차원적인 구조에서의 결합력을 확인하기 위해서 웨스턴 블랏을 시행하였고, 선형의 A56 단백질 상에서는 결합하지 않음을 확인하였다. 이를 통해, 상기 항-A56 항체(Ab13)은 입체적인 A56 단백질 구조만을 인식하여 결합함을 확인하였다. 또한, OCTET(SPR)과 ELISA에 의해 계산된 결합친화도(KD)를 도 59b에 나타내었다.
실시예 5.2.1. 항-A56 항체(Ab16)와 A56 단백질 결합의 정전기력 분석
항-A56 항체(Ab16)와 A56 단백질 결합의 정전기력을 분석하기 위해, DelPhi potential을 이용하였다. 구체적으로, A56 단백질의 강력한 surface DelPhi potential electrostatics의 양전하를 가지는 염기성 아미노산인 리신(K61)이 바로 옆 잔기인 세린(S62)의 히드록시기를 여기시켜 정전기력을 발생시키고 상대적으로 낮은 수준의 surface DelPhi potential electrostatics가 강력한 양전하를 띠게 하였다. 이때, Ab16의 경쇄의 S59과 K60은 상기 A56 단백질의 물리화학적 성질에 의해 양전하의 surface DelPhi potential electrostatics가 형성되었다.
또한, Ab16의 중쇄의 말단 노출부인 시트5(S5)와 시트6(S6) 사이의 루프에 위치한 CDR2 부위의 아르기닌(R56)과 리신(K58)이 두 아미노산 사이에 위치한 친핵성 아미노산인 세린(S57)에 의해 더욱 강력한 양전하를 가지게 되어 A56 단백질의 친핵성인 아미노산인 세린(S46, S54)과 결합이 우선적으로 진행되는 것으로 예측되었으며, 하기 표 10과 같은 정전기적 특성을 확인하였다.
상기 표에서, 가장 오른쪽 컬럼에 표시된 아미노산 위치를 나타내는 번호 다음의 문자(H 또는 L)는 중쇄(H) 또는 경쇄(L)임을 의미한다.
실시예 5.2.2. 항-A56 항체(Ab16)와 A56 단백질 결합 간격 분석
항-A56 항체(Ab16)와 A56 단백질 결합 간격을 분석하기 위해, Swiss-PdbViewer(4.1.0)를 이용하여 A56 단백질과 Ab16의 구조적 정렬을 추론하고 활성 부위 또는 기타 관련 부분을 비교하여 H-결합, 각도 및 원자 사이의 거리를 예측하였다.
그 결과, 도 60에 나타난 바와 같이, A56 단백질의 강력한 양전하로 양전위화된 K61의 말단 기능기인 NH 잔기가 Ab16 경쇄의 적정 수준의 음전하로 음전위화된 S59의 O-와 수소결합을 형성하고 사이의 거리는 4.78 Å인 것으로 측정되었다. 동시에 Ab16 경쇄의 강력한 양전하로 양전위화된 K60의 말단 기능기인 NH 잔기가 A56 단백질의 적정 수준의 음전하로 음전위화된 S62의 O-와 수소결합을 형성하고 사이의 거리는 5.07 Å인 것으로 측정되었다.
상기 2개의 수소결합이 진행되면서 A56 단백질의 음전위화된 S46/S54의 O-는 Ab16 중쇄의 강력한 양전하로 양전위화된 R56/K58과 결합을 하게 되는 것으로 예측되었다. 또한, 상기 결합이 진행되면서 중쇄와 경쇄가 접히면서 나머지 결합이 정전기적(electrostatic)으로 강력하게 결합되는 것으로 예측되었다.
실시예 5.2.3. 항-A56 항체(Ab16)와 A56 단백질 결합 경쟁 분석: 비닝 테스트
10종의 항-A56 항체((Ab18, Ab19, Ab01, Ab13, Ab14, Ab08, Ab03, Ab51, Ab55, Ab16)들이 A56 단백질에 대해서 동일한 에피토프를 가지고 있는지 또는 다른 에피토프를 가지고 있는지를 확인하기 위해, Octet 장비를 이용하여 SPR(Surface Plasmon Resonance) 방법으로 분석하였다.
구체적으로, A56-C-His 항원을 바이오센서(NTA)에 고정시키고, 1차 항체(SA2041, Ab16, A56-02B08)를 포화상태로 결합시킨 후, 나머지 9종의 항체를 2차 항체로 추가 결합시켰다. 이때, 항체 간에 동일한 에피토프를 갖는다면 경쟁이 일어나서 추가적인 결합이 어렵고, 서로 다른 에피토프를 보유하고 있다면 추가적인 결합이 일어날 것이다. 또한, A56-C-His 항원에 대한 2차 항체와 1차 항체의 결합 순서를 바꾸어 추가 실험을 수행하여 결과를 재확인 하였다
그 결과, 도 61a에 나타난 바와 같이, 추가 결합이 일어나지 않았으며, 상기 항체들 간에 동일한 에피토프를 갖고 있음을 확인하였다.
아울러, PAGE를 이용한 2차원적인 구조에서의 결합력을 확인하기 위해서 웨스턴 블랏을 시행하였고, 선형의 다중밴드를 확인하였다. 이는 A56 단백질의 2차원적 구조에 대한 단순한 선형의 아미노산 서열에 대해서는 특이적인 1대1 결합이 이루어지지 않고 변별력이 없음을 나타낸다. 또한, OCTET(SPR)과 ELISA에 의해 계산된 결합친화도(KD)를 도 61b에 나타내었다.
실시예 5.3.1. 항-A56 항체(Ab18)와 A56 단백질 결합의 정전기력 분석
항-A56 항체(Ab18)와 A56 단백질 결합의 정전기력을 분석하기 위해, DelPhi potential을 이용하였다. 구체적으로, A56 단백질의 강력한 surface DelPhi potential electrostatics의 양전하를 가지는 염기성 아미노산인 리신(K61)이 바로 옆 잔기인 세린(S62)의 히드록시기를 여기시켜 정전기력을 발생시키고 상대적으로 낮은 수준의 surface DelPhi potential electrostatics가 강력한 양전하를 띠게 하였다. 이때, Ab18의 중쇄의 R98은 주위에 있는 A97의 짧은 잔기인 메틸기(CH3) 친수성 반응기가 없는 방향족인 W99(tryptophan)에 의해 외부로 많이 노출이 되고 높은 수준의 surface DelPhi potential electrostatics에 의해 강력한 수준의 양전하를 띠게 된다. 또한, Ab18 경쇄의 K50가 주위의 음전하의 Y49와 S52에 의해 상대적으로 강력한 양전하의 surface DelPhi potential electrostatics가 형성되도록 하였다.
그 결과, 하기 표 11과 같은 정전기적 특성을 확인하였다.
상기 표에서, 가장 오른쪽 컬럼에 표시된 아미노산 위치를 나타내는 번호 다음의 문자(H, L 또는 U)는 항체 중쇄(H), 항체 경쇄(L) 또는 UTTA(또는 A56)(U)임을 의미한다.
실시예 5.3.2. 항-A56 항체(Ab18)와 A56 단백질 결합 간격 분석
항-A56 항체(Ab18)와 A56 단백질 결합 간격을 분석하기 위해, Swiss-PdbViewer(4.1.0)를 이용하여 A56 단백질과 Ab18의 구조적 정렬을 추론하고 활성 부위 또는 기타 관련 부분을 비교하여 H-결합, 각도 및 원자 사이의 거리를 예측하였다.
그 결과, A56 단백질의 강력한 양전하로 양전위화된 K91의 말단 기능기인 NH 잔기가 Ab18의 경쇄의 적정 수준의 음전하로 음전위화된 Y32L과 수소결합을 형성하고 사이의 거리는 3.46 Å인 것으로 측정되었다(도 62b). 또한, Ab18 경쇄의 적정 수준의 음전하로 음전위화된 S30을 정전기력에 의해 당기면서 구조가 접히게(folding) 되는 것으로 예측되었다. 또한, Ab18 중쇄의 강력한 양전하로 양전위화된 R98의 말단 기능기인 NH 잔기가 A56 단백질의 적정 수준의 음전하로 음전위화된 S62의 O-와 수소결합을 형성하고 사이의 거리는 3.77 Å인 것으로 측정되었다(도 62a).
상기 2개의 수소결합이 진행되면서 Ab18 경쇄의 강력한 양전하로 양전위화된 K50는 접히면서 A56 단백질의 음전위화된 S30의 O-와 결합을 하게 되는 것으로 예측되었다.
실시예 5.3.3. 항-A56 항체(Ab18)와 A56 단백질 결합 경쟁 분석: 비닝 테스트
10종의 항-A56 항체((Ab18, Ab19, Ab01, Ab13, Ab14, Ab08, Ab03, Ab51, Ab55, Ab16)들이 A56 단백질에 대해서 동일한 에피토프를 가지고 있는지 또는 다른 에피토프를 가지고 있는지를 확인하기 위해, Octet 장비를 이용하여 SPR 방법으로 분석하였다.
구체적으로, A56-C-His 항원을 바이오센서(NTA)에 고정시키고, 1차 항체 (SA2043, Ab18, A56-02C06)를 포화상태로 결합시킨 후, 나머지 9종의 항체를 2차 항체로 추가 결합시켰다. 이때, 항체 간에 동일한 에피토프를 갖는다면 경쟁이 일어나서 추가적인 결합이 어렵고, 서로 다른 에피토프를 보유하고 있다면 추가적인 결합이 일어날 것이다. 또한, A56-C-His 항원에 대한 2차 항체와 1차 항체의 결합 순서를 바꾸어 추가 실험을 수행하여 결과를 재확인 하였다
그 결과, 도 63a에 나타난 바와 같이, 추가 결합이 일어나지 않았으며, 상기 항체들 간에 동일한 에피토프를 갖고 있음을 확인하였다.
아울러, PAGE를 이용한 2차원적인 구조에서의 결합력을 확인하기 위해서 웨스턴블랏을 시행하였고, 선형의 다중밴드를 확인하였다. 이를 통해, A56 단백질의 2차원 구조의 아미노산 서열뿐 아니라 3차원의 입체적인 모티프(motif)도 인식하여 결합함을 확인하였다. 또한, OCTET(SPR)과 ELISA에 의해 계산된 결합친화도(KD)를 도 63b에 나타내었다.
실시예 5.4.1. 항-A56 항체(Ab01)와 A56 단백질 결합의 정전기력 분석
항-A56 항체(Ab01)와 A56 단백질 결합의 정전기력을 분석하기 위해, DelPhi potential을 이용하였다. 구체적으로, A56 단백질의 강력한 surface DelPhi potential electrostatics의 양전하(positive charge)를 가지는 염기성 아미노산인 리신(K61)이 바로 옆 잔기인 세린(S62)의 히드록시기를 여기시켜 정전기력을 발생시키고 상대적으로 낮은 수준의 surface DelPhi potential electrostatics가 강력한 양전하를 띠게 하였다. 그 후, Ab01의 경쇄 S32과 T102는 상대적으로 surface DelPhi potential electrostatics가 적정 수준의 음전하를 띠게 하였다.
또한, Ab01의 중쇄의 S103과 Y106의 주위에 있는 소수성 잔기인 L107과 친수성 반응기가 없는 방향족인 F101에 의해 외부로 많이 노출이 되고 친핵성 아미노산인 S103에 의해 높은 수준의 surface DelPhi potential electrostatics에 의해 강력한 수준의 음전하를 띠게 하였다.
그 결과, 하기 표 12와 같은 정전기적 특성을 확인하였다.
상기 표에서, 가장 오른쪽 컬럼에 표시된 아미노산 위치를 나타내는 번호 다음의 문자(H 또는 L)는 중쇄(H) 또는 경쇄(L)임을 의미한다.
실시예 5.4.2. 항-A56 항체(Ab01)와 A56 단백질 결합 간격 분석
항-A56 항체(Ab01)와 A56 단백질 결합 간격을 분석하기 위해, Swiss-PdbViewer(4.1.0)를 이용하여 A56 단백질과 Ab01의 구조적 정렬을 추론하고 활성 부위 또는 기타 관련 부분을 비교하여 H-결합, 각도 및 원자 사이의 거리를 예측하였다.
그 결과, 도 64에 나타난 바와 같이, A56 단백질의 강력한 양전하로 양전위화된 K61의 말단 기능기인 NH 잔기가 Ab01의 경쇄의 적정 수준의 음전하로 음전위화된 T102의 O-와 수소결합을 형성하고 사이의 거리는 3.69 Å인 것으로 측정되었다. 또한, A56 단백질의 강력한 양전하로 양전위화된 K91의 말단 기능기인 NH 잔기가 Ab01의 중쇄의 적정 수준의 음전하로 음전위화된 Y106의 O-와 수소결합을 형성하고 사이의 거리는 3.12 Å인 것으로 측정되었다.
상기 2개의 수소결합이 진행되면서 A56 단백질의 S54는 Ab01의 중쇄의 T57과 T100, S103 및 경쇄의 S32와 결합을 하게 되는 것으로 예측되었다. 또한, 상기 2개의 수소결합이 진행되면서 중쇄와 경쇄가 접히면서(shrink folding) 나머지 결합이 정전기적(electrostatic)으로 결합되는 것으로 예측되었다.
실시예 5.4.3. 항-A56 항체(Ab01)와 A56 단백질 결합 경쟁 분석: 비닝 테스트
10종의 항-A56 항체((Ab18, Ab19, Ab01, Ab13, Ab14, Ab08, Ab03, Ab51, Ab55, Ab16)들이 A56 단백질에 대해서 동일한 에피토프를 가지고 있는지 또는 다른 에피토프를 가지고 있는지를 확인하기 위해, Octet 장비를 이용하여 SPR 방법으로 분석하였다.
구체적으로, A56-C-His 항원을 바이오센서(NTA)에 고정시키고, 1차 항체 (SA2026, Ab01, A56-01A02)를 포화상태로 결합시킨 후, 나머지 9종의 항체를 2차 항체로 추가 결합시켰다. 이때, 항체 간에 동일한 에피토프를 갖는다면 경쟁이 일어나서 추가적인 결합이 어렵고, 서로 다른 에피토프를 보유하고 있다면 추가적인 결합이 일어날 것이다. 또한, A56-C-His 항원에 대한 2차 항체와 1차 항체의 결합 순서를 바꾸어 추가 실험을 수행하여 결과를 재확인 하였다
그 결과, 도 65a에 나타난 바와 같이, 추가 결합이 일어나지 않았으며, 상기 항체들 간에 동일한 에피토프를 갖고 있음을 확인하였다.
아울러, PAGE를 이용한 2차원적인 구조에서의 결합력을 확인하기 위해서 웨스턴블랏을 시행하였고, 선형의 단일밴드를 확인하였다. 또한, OCTET(SPR)과 ELISA에 의해 계산된 결합친화도(KD)를 도 65b에 나타내었다.
실시예 5.5.1. 항-A56 항체(Ab19)와 A56 단백질 결합의 정전기력 분석
항-A56 항체(Ab19)와 A56 단백질 결합의 정전기력을 분석하기 위해, DelPhi potential을 이용하였다. 구체적으로, A56 단백질의 강력한 surface DelPhi potential electrostatics의 양전하(positive charge)를 가지는 염기성 아미노산인 리신(K61)이 바로 옆 잔기인 세린(S62)의 히드록시기를 여기시켜 정전기력을 발생시키고 상대적으로 낮은 수준의 surface DelPhi potential electrostatics가 강력한 양전하를 띠게 하였다. 이때, Ab19의 경쇄의 90번째 내지 95번째 아미노산(DSSSD)의 음전하의 산성 아미노산인 아스파르트산(D90과 D95)의 강력한 음전하에 의해 93번째 및 94번째 세린(S93, S94)이 상대적으로 surface DelPhi potential electrostatics가 강력한 수준의 음전하를 띠게 된다.
또한, Ab19의 중쇄의 Y32의 주위에 있는 소수성 아미노산인 V(valine), L(leucine)과 친수성 반응기가 없는 방향족인 F(phenylalanine)에 의해 외부로 많이 노출이 되고 친핵성 아미노산인 S(seline)에 의해 낮은 수준의 surface DelPhi potential electrostatics에 의해 낮은 수준의 음전하를 띠게 하였다.
그 결과, 하기 표 13과 같은 정전기적 특성을 확인하였다.
실시예 5.5.2. 항-A56 항체(Ab19)와 A56 단백질 결합 간격 분석
항-A56 항체(Ab19)와 A56 단백질 결합 간격을 분석하기 위해, Swiss-PdbViewer(4.1.0)를 이용하여 A56 단백질과 Ab19의 구조적 정렬을 추론하고 활성 부위 또는 기타 관련 부분을 비교하여 H-결합, 각도 및 원자 사이의 거리를 예측하였다.
그 결과, 도 66에 나타난 바와 같이, A56 단백질의 K61과 S62의 말단 기능기인 K61과 S62가 이온화하여 NH+(K61)와 O-(S62)로 되고, Ab19 경쇄의 S93 및 S94가 주위의 아스파르트산(D91과 D95)에 의해 강력한 음전하를 가지는 O-(S93, S94)의 electrostatic surface DelPhi potential을 가지게 되어 결합을 하게 되는 것으로 예측되었다. A56 단백질의 9.9 Å의 NH2+(K61)와 O-(S62)가 19.5 Å의 Ab19 경쇄의 O-(S93)과 중쇄의 Y32의 O-의 사이에 위치하여 A56 단백질의 K61는 Ab19의 S93과 결합하며 이때 결합거리는 4.59 Å인 것으로 측정되었다(분홍색 원 표시 부분). A56 단백질의 S62는 Ab19의 Y32와 결합하며 이때 결합거리는 6.08 Å인 것으로 측정되었다(흰색 원 표시 부분).
또한, A56 단백질과 Ab19와의 결합은 두 분자가 수평으로 결합하는 형태를 보여 결합 부위 이외의 특이적인 파라포트(paratope)를 가지는 다른 항체가 상보적인 electrostatic surface DelPhi potential을 가지면 A56 단백질은 다른 에피토프가 존재하여 다중결합(multi binding)이 가능할 것으로 예측되었다.
실시예 5.5.3. 항-A56 항체(Ab19)와 A56 단백질 결합 경쟁 분석: 비닝 테스트
10종의 항-A56 항체(Ab18, Ab19, Ab01, Ab13, Ab14, Ab08, Ab03, Ab51, Ab55, Ab16)들이 A56 단백질에 대해서 동일한 에피토프를 가지고 있는지 또는 다른 에피토프를 가지고 있는지를 확인하기 위해, Octet 장비를 이용하여 SPR 방법으로 분석하였다.
구체적으로, A56-C-His 항원을 바이오센서(NTA)에 고정시키고, 1차 항체 (SA2044, Ab19, A56-02C07)를 포화상태로 결합시킨 후, 나머지 9종의 항체를 2차 항체로 추가 결합시켰다. 이때, 항체 간에 동일한 에피토프를 갖는다면 경쟁이 일어나서 추가적인 결합이 어렵고, 서로 다른 에피토프를 보유하고 있다면 추가적인 결합이 일어날 것이다. 또한, A56-C-His 항원에 대한 2차 항체와 1차 항체의 결합 순서를 바꾸어 추가 실험을 수행하여 결과를 재확인 하였다
그 결과, 도 67a에 나타난 바와 같이, 2차 항체를 결합시는 단계에서 2개의 항체(SA2041(Ab16), SA2043(Ab18))가 미세하지만 추가적으로 결합하는 것으로 분석이 되었다. 이를 통해, 상기 2개의 항체(SA2041(Ab16), SA2043(Ab18))가 Ab19의 에피토프 이외의 다른 에피토프를 갖고 있음을 확인하였다.
아울러, PAGE를 이용한 2차원적인 구조에서의 결합력을 확인하기 위해서 웨스턴블랏을 시행하였고, 선형의 단일밴드를 확인하였다. 또한, OCTET(SPR)과 ELISA에 의해 계산된 결합친화도(KD)를 도 67b에 나타내었다.
III. 항-A56 항체의 항원 결합 영역을 이용한 CAR-T 세포 제작
실시예 6.1. 키메라 항원 수용체의 구조 설계
키메라 항원 수용체의 구조는 신호 펩타이드, 항원 결합 도메인, 막관통 도메인, 세포내 신호전달 도메인을 포함하도록 설계하였다. 일 실시예로서, 도 68에 나타난 바와 같이, 항원 결합 도메인(anti-UTTA scFv), CD8 막관통 도메인(H+TM) 및 세포내 신호전달 도메인(4-1BB 및 CD3Z)를 포함하도록 설계하였다.
실시예 6.2. 키메라 항원 수용체를 암호화하는 벡터 제작
벡터는 pLVX-EF1α-IRES-mCherry vector (Spel/Notl) 벡터를 사용하였다. 상기 벡터 내에 신호 펩타이드(sp), A56에 특이적으로 결합하는 단일 사슬 가변 단편(anti-UTTA scFv), 인간 CD8의 막 통과 도메인(H+TM)과, 세포내 신호전달 도메인(4-1BB 및 CD3ζ)를 포함하는 키메라 항원 수용체를 암호화하는 유전자를 삽입하였다.
실험에 사용된 키메라 항원 수용체의 아미노산 서열 및 염기서열을 하기 표 14에 나타내었다.
UTTA-CAR | 도메인 | 서열정보 | 서열번호 | |
Amino Acid Sequence | CD8 signal sequence | MALPVTALLLPLALLLHAARP | 1080 | |
anti-UTTA scFv (Ab13) |
VH | QMQLVESGAEVKKTGSSVKVSCKASGDTLTYRFLHWVRQAPGQAPEWMGWITPFNDNTNYAQKFQDRVTITRDRSMSTAYMELSSLRSEDTAVYYCATGGGNNYYGMEVWGQGTPITVSS | 1081 | |
Spacer | GLGGLGGGGSGGGGSGGSSGVGS | |||
VL | SYELTQPLSLSVSPGQTASITCSGDKLGDKFTSWYQQQPGQSPVLVIYQDAKRPSGIPERFSGSNSGSTATLTISGTQSMDEADYYCQAWDSSSVVFGGGTKLTVL | |||
anti-UTTA scFv (Ab16) |
VH | QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYYRSKWYNDYAVSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTAVDTAVYYCAKSYAGPISYYYYGLDVWGQGTTVTVSS | 1082 | |
Spacer | GLGGLGGGGSGGGGSGGSSGVGS | |||
VL | QSALTQPASVSGSPGQSVTISCTGTSSDIGRYNLVSWYQQHPGKAPKLMIYGGSKRPSGVSNRFSGSNSDNTASLTISGLRAEDEADYYCSSYASSSTPYVFGTGTKVTVL | |||
anti-UTTA scFv (Ab18) |
VH | QVQLVESGGGLVQPGKSLRLSCAASGFTFSTYGMTWVRQAPGKGLEWVSGISGGGSSTNYADSVKGRFIISRDNSNNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARWGVMLSFDYWGQGTPVTVSS | 1083 | |
Spacer | GLGGLGGGGSGGGGSGGSSGVGS | |||
VL | DIQMTQSPSTLPASVGDRVTITCRASYSVSPWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASTLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQFNSYMMYTFGQGTKLEIK | |||
anti-UTTA scFv (Ab01) |
VH | QMQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLKSEDTAVYYCARFVFGSGTYLDSWGQGTLVTVSS | 1084 | |
Spacer | GLGGLGGGGSGGGGSGGSSGVGS | |||
VL | DIVMTQTPLSLPVTPGESASISCRSSQSLLYSNGNNYLDWYLQKPGQSPQLLIYLGSNRASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQALQTPLTFGGGTKVDIK | |||
anti-UTTA scFv (Ab19) |
VH | QVQLVESGAEVRRPGSSVKVSCKTSGVTFSGYVLSWVRQAPGHGLEWMGRIIPLIDVENYAREFQGRMKITADKSTNTVYMELNNLRSEDTAVYYCAKSVVRGLDYYYYGFDVWGQGTTVTVSS | 1085 | |
Spacer | GLGGLGGGGSGGGGSGGSSGVGS | |||
VL | SYELTQPPSLSVAPGKTARITCGGNNIGSKSVHWYQQKPGQAPRLVTYYDGNRPSGIPERFSGSNSGNTATLIISRVEAGDEADYYCQVWDSSSDQGVFGTGTKVTVL | |||
CD8 TM |
Hinge(H) | TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACD | 1086 | |
TM | IYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYC | |||
4-1BB Signaling Domain | KRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL | 1087 | ||
CD3Z Signaling Domain | RVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR | 1088 | ||
Nucleotide Sequence | CD8 signal sequence | ATGGCTCTGCCTGTGACAGCTCTGCTGCTGCCTCTGGCTCTGCTTCTGCATGCTGCTAGACCT | 1089 | |
anti-UTTA scFv (Ab13) |
VH | CAGATGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGACTGGGTCCTCAGTGAAGGTTTCCTGCAAGGCTTCCGGAGACACCCTCACCTACCGCTTCCTGCACTGGGTGCGACAGGCCCCCGGACAAGCGCCTGAGTGGATGGGATGGATCACACCTTTCAATGATAACACCAACTACGCACAGAAATTCCAGGACAGAGTCACCATTACCAGGGACAGGTCTATGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGACTGGAGGTGGGAACAATTATTACGGCATGGAGGTCTGGGGCCAAGGGACCCCGATCACCGTCTCCTCA | 1090 | |
Spacer | GGCCTCGGGGGCCTCGGAGGAGGAGGTAGTGGCGGAGGAGGCTCCGGTGGATCCAGCGGTGTGGGTTCC | |||
VL | TCCTATGAGCTGACTCAGCCACTCTCACTGTCCGTGTCCCCAGGACAGACAGCCAGCATCACCTGCTCTGGAGATAAATTGGGAGATAAATTTACTTCCTGGTATCAACAGCAGCCAGGCCAGTCCCCTGTACTGGTCATCTATCAAGATGCCAAGCGACCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAGCACAGCCACTCTGACCATCAGCGGGACCCAGTCTATGGATGAGGCTGACTATTACTGTCAGGCGTGGGACAGCAGCAGTGTGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA | |||
anti-UTTA scFv (Ab16) |
VH | CAGGTGCAGCTGCAGCAGTCAGGTCCAGGACTGGTGAAGCCCTCGCAGACCCTCTCACTCACCTGTGCCATCTCCGGGGACAGTGTCTCTAGCAACAGTGCTGCTTGGAACTGGATCAGGCAGTCCCCATCGAGAGGCCTTGAGTGGCTGGGAAGGACATACTACAGGTCCAAGTGGTATAATGATTATGCAGTATCTGTGAAAAGTCGAATAACCATCAACCCAGACACATCCAAGAACCAGTTCTCCCTGCAGCTGAACTCTGTGACCGCCGTGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAAATCCTATGCGGGGCCTATCTCTTATTACTACTACGGTCTGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA | 1091 | |
Spacer | GGCCTCGGGGGCCTCGGAGGAGGAGGTAGTGGCGGAGGAGGCTCCGGTGGATCCAGCGGTGTGGGTTCC | |||
VL | CAGTCTGCCCTGACTCAGCCTGCCTCCGTGTCTGGGTCTCCTGGACAGTCGGTCACCATCTCCTGCACTGGAACCAGCAGTGACATTGGTCGTTATAACCTTGTCTCCTGGTACCAACAGCACCCAGGCAAAGCCCCCAAACTCATGATTTATGGGGGCAGTAAGCGGCCCTCAGGGGTTTCTAATCGCTTCTCTGGCTCCAACTCTGACAACACGGCCTCCCTGACAATCTCTGGGCTCCGGGCTGAGGACGAGGCTGATTATTACTGCAGTTCATATGCAAGCAGCAGCACCCCTTATGTCTTCGGAACTGGGACCAAGGTCACCGTCCTA | |||
anti-UTTA scFv (Ab18) |
VH | CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGAAATCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGCACCTATGGCATGACTTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGGGATTAGTGGTGGGGGTTCTAGCACAAACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGCTTCATCATTTCTAGAGACAACTCTAACAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGTGGGGAGTTATGCTTTCCTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCCGGTCACCGTCTCC | 1092 | |
Spacer | TCAGGCCTCGGGGGCCTCGGAGGAGGAGGTAGTGGCGGAGGAGGCTCCGGTGGATCCAGCGGTGTGGGTTCC | |||
VL | GACATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGCCTGCATCTGTAGGGGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCCAGTTACAGTGTCAGTCCCTGGTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAACTCCTGATCTATAAGGCATCTACTTTAGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAACAGTTTAATAGTTATATGATGTACACTTTTGGCCAGGGGACCAAGCTGGAAATCAAA | |||
anti-UTTA scFv (Ab01) |
VH | CAGATGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTACAGCAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCAGGGACACGTCCACGAGCACAGTCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAAATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGATTCGTCTTTGGTTCGGGGACTTATCTTGACTCCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA | 1093 | |
Spacer | GGCCTCGGGGGCCTCGGAGGAGGAGGTAGTGGCGGAGGAGGCTCCGGTGGATCCAGCGGTGTGGGTTCC | |||
VL | GATATTGTGATGACCCAGACTCCACTCTCCCTGCCCGTCACCCCTGGAGAGTCGGCCTCCATCTCCTGCAGGTCTAGTCAGAGCCTCCTGTATAGTAATGGGAACAACTATTTGGATTGGTACCTGCAGAAGCCAGGGCAGTCCCCACAGCTCCTGATCTATTTGGGTTCTAATCGGGCCTCCGGGGTCCCTGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGCACAGATTTTACACTGAAAATCAGCAGAGTGGAGGCTGAGGATGTTGGGGTTTATTACTGCATGCAAGCTCTACAAACTCCTCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGATATCAAA | |||
anti-UTTA scFv (Ab19) |
VH | CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGCTGAGGTGAGGAGGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGACTTCGGGAGTCACCTTCAGCGGCTATGTTCTGAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACACGGCCTTGAGTGGATGGGACGGATCATCCCTTTAATTGACGTGGAAAACTATGCACGGGAGTTCCAGGGTAGAATGAAGATCACCGCAGACAAGTCCACGAATACAGTCTACATGGAACTGAACAACCTGAGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAAATCGGTCGTACGGGGTCTTGACTACTACTACTACGGTTTCGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA | 1094 | |
Spacer | GGCCTCGGGGGCCTCGGAGGAGGAGGTAGTGGCGGAGGAGGCTCCGGTGGATCCAGCGGTGTGGGTTCC | |||
VL | TCCTATGAGCTGACACAACCACCCTCACTGTCAGTGGCCCCAGGAAAGACGGCCAGGATTACCTGTGGGGGAAACAACATTGGAAGTAAAAGTGTGCACTGGTACCAGCAGAAGCCAGGCCAGGCCCCTAGACTGGTCACTTATTATGATGGCAACCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGAAACACGGCCACCCTAATCATCAGCAGGGTCGAAGCCGGGGATGAGGCCGACTATTACTGTCAGGTGTGGGATAGTAGTAGTGATCAGGGGGTCTTCGGAACTGGGACCAAGGTCACCGTCCTA | |||
CD8 TM |
Hinge(H) | ACCACAACACCCGCTCCTAGACCTCCAACACCAGCTCCAACAATCGCCAGCCAGCCTCTGTCTCTGAGGCCTGAAGCTTGTAGACCTGCTGCAGGCGGAGCCGTGCATACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGAC | 1095 | |
TM | ATCTACATCTGGGCCCCTCTGGCTGGAACATGTGGCGTTCTGCTGCTCAGCCTGGTCATCACCCTGTACTGC | |||
4-1BB Signaling Domain | AAGCGGGGCAGAAAGAAGCTGCTGTACATCTTCAAGCAGCCCTTCATGCGGCCCGTGCAGACAACCCAAGAGGAAGATGGCTGCTCCTGCAGATTCCCCGAGGAAGAAGAAGGCGGCTGCGAGCTG | 1096 | ||
CD3Z Signaling Domain | AGAGTGAAGTTCAGCAGATCCGCCGACGCTCCCGCCTATAAGCAGGGACAGAACCAGCTGTACAACGAGCTGAACCTGGGGAGAAGAGAAGAGTACGACGTGCTGGACAAGCGGAGAGGCAGAGATCCTGAGATGGGCGGCAAGCCCAGACGGAAGAATCCTCAAGAGGGCCTGTATAATGAGCTGCAGAAAGACAAGATGGCCGAGGCCTACTCCGAGATCGGAATGAAGGGCGAGCGCAGAAGAGGCAAGGGACACGATGGACTGTACCAGGGCCTGAGCACCGCCACCAAGGATACCTATGATGCCCTGCACATGCAGGCCCTGCCTCCAAGA | 1097 |
실시예 6.3. CAR-T 세포 제작
CAR-T 세포는 양산부산대학교 병원으로부터 인체유래물 연구 하에 IRB 승인을 받아 제공받은 혈액으로부터 MACS Cell Separation 시스템을 이용하여 T세포를 제외한 모든 혈액세포에 대한 마커를 붙여 negative selection 하여 제작하였다. 그 후, MACS Pan T cell Ab를 이용하여 CD3+ T 세포(≥97%)를 분리하였다. 그 후, 1×106 CD3+ T 세포를 20 IU/㎖의 rhIL-2 및 TransAct(CD3/CD28 agonist)가 포함된 배지에서 24시간 동안 배양하여 T 세포의 활성화를 유도하였다.
실시예 6.2에서 제조한 벡터로 클로닝된 5종류의 렌티 바이러스를 각각 50 MOI로 활성화된 T 세포에 처리하고 48시간 동안 동일 배지에 추가로 배양하였다. 그 후, T 세포를 20 IU/㎖의 rhIL-2를 함유하는 배지에 1×106 세포/㎖로 재현탁 시켰다. 2일 또는 3일마다 세포계수하여 rhIL-2를 포함하는 새로운 배지로 바꿔주면서 세포를 증식시켰다. 이때, Ab13의 항원 결합 도메인에 대한 렌티바이러스를 이용하여 제조한 CAR-T 세포를 "Ab13 CAR-T"로 명명하였으며, Ab16의 항원 결합 도메인에 대한 렌티바이러스를 이용하여 제조한 CAR-T 세포를 "Ab16 CAR-T"로 명명하였다. Ab18의 항원 결합 도메인에 대한 렌티바이러스를 이용하여 제조한 CAR-T 세포를 "Ab18 CAR-T"로 명명하였으며, Ab01의 항원 결합 도메인에 대한 렌티바이러스를 이용하여 제조한 CAR-T 세포를 "Ab01 CAR-T"로 명명하였다. Ab19의 항원 결합 도메인에 대한 렌티바이러스를 이용하여 제조한 CAR-T 세포를 "Ab19 CAR-T"로 명명하였다. 또한, 대조군으로 CAR를 형질 도입시키기 않은 T 세포(UTD, untransduced)를 이용하였다.
실험예 8. 항암 백시니아 바이러스(OTS-412) 및 CAR-T 세포의 항암효과 확인:
in vitro
I
HCT-116 세포주(5×103 cells/well) 및 HeLa 세포주(5×103 cells/well) 를 96-웰-플레이트에 분주한 후, 37℃ 온도에서 배양시키면서 제조예 1.1의 OTS-412를 처리하지 않거나 1 MOI의 용량으로 감염시켜 암세포 표면에 A56 단백질을 발현시켰다. 2시간 후 2% FBS가 포함된 배지로 교체하고, 4시간 후, UTD 세포, 5종의 CAR-T 세포(Ab13 CAR-T, Ab16 CAR-T, Ab18 CAR-T, Ab01 CAR-T, Ab19 CAR-T)를 각각 T 세포: 암세포의 비율이 1:1이 되도록 투여하였다. 48시간 후에 CCK-8 Kit를 이용하여 세포독성을 측정하였다.
그 결과, OTS-412로 감염시킨 HCT-116 세포주 및 HeLa 세포주에서 5종의 CAR-T 세포 중 Ab01 CAR-T 세포를 제외한 Ab13 CAR-T, Ab16 CAR-T, Ab18 CAR-T 및 Ab19 CAR-T 세포를 처리한 군과 UTD 세포를 처리한 군을 비교하였을 때, 통계적으로 유의미한 CAR-T 세포 특이적인 세포독성 효과가 나타났다(도 69).
실험예 9. 항암 백시니아 바이러스(OTS-412) 및 CAR-T 세포의 항암효과 확인:
in vitro
II
5종의 CAR-T 세포의 항암효과를 형광 기반 세포 이미지 분석 시스템 (Incucyte® Live-Cell Analysis System, Sartorius)을 사용하여 실시간으로 세포 사멸을 측정하여 분석하였다.
구체적으로, 3종의 암세포주 HeLa (3×103 cells/well), NCI-H522 (6×103 cells/well) 및 HCT-116 (9×103 cells) 세포주를 96-웰-플레이트에 접종한 후, 37℃ 온도에서 배양시키면서 제조예 1.1의 OTS-412 (1.55×108 pfu/㎖)를 0.05 MOI의 용량으로 감염시켜 암세포 표면에 A56 단백질을 발현시켰다. 2시간 후 2% FBS가 포함된 배지로 교체하고, 4시간 후, UTD 세포, 5종의 CAR-T 세포(Ab13 CAR-T, Ab16 CAR-T, Ab18 CAR-T, Ab01 CAR-T, Ab19 CAR-T)를 각각 T 세포: 암세포의 비율이 3:1이 되도록 투여하였다. T 세포를 붉은 형광 염색 시약이 포함된 배지(10% FBS)와 함께 투여한 후, Incucyte 시스템을 이용하여 5일 동안 30분 간격으로 세포 사멸 이미지 데이터를 획득하여 소프트웨어를 통해 분석하였다.
그 결과, OTS-412로 감염시킨 HeLa 세포주의 경우, 5종의 CAR-T 세포를 각각 처리한 군과 UTD 세포를 처리한 군을 비교할 때, 통계적으로 유의미한 특이적인 세포독성 효과가 나타났다(도 70, *은 UTD 그룹 대비 p<0.033, **은 p<0.002, ***<0.001을 의미하고, ##은 동일 scFv Car-T 그룹내 T-세포 단독처리 대비 p<0.002를 나타냄). 특히, 그 중에서도 Ab16 CAR-T 및 Ab18 CAR-T 세포에서 OTS-412로 감염시키지 않은 그룹의 세포독성과 대비하여 통계적으로 유의미하게 A56 단백질 특이적 세포독성 차이가 나타났다
OTS-412로 감염시킨 NCI-H522 세포주의 경우, 5종의 CAR-T 세포 중 Ab01 CAR-T, Ab13 CAR-T, Ab16 CAR-T 및 Ab19 CAR-T 세포를 처리한 군과 UTD 세포를 처리한 군을 비교하였을 때, 통계적으로 유의미한 특이적인 세포독성 효과가 나타났다(도 71, *은 UTD 그룹 대비 p<0.033, **은 p<0.002, ***<0.001을 의미하고, ##은 동일 scFv Car-T 그룹내 T-세포 단독처리 대비 p<0.002를 나타냄). 특히, 그 중에서도 Ab16 CAR-T 세포에서 OTS-412로 감염시키지 않은 그룹의 세포독성과 대비하여 통계적으로 유의미하게 A56 단백질 특이적 세포독성 차이가 나타났다.
OTS-412로 감염시킨 HCT-116 세포주의 경우, 5종의 CAR-T 세포를 각각 처리한 군과 UTD 세포를 처리한 군을 비교하였을 때, 통계적으로 유의미한 CAR-T 세포 특이적인 세포독성 효과가 나타났다(도 72, *은 UTD 그룹 대비 p<0.033, **은 p<0.002, ***<0.001을 의미하고, ##은 동일 scFv Car-T 그룹내 T-세포 단독처리 대비 p<0.002를 나타냄). 특히, 그 중에서도 Ab01 CAR-T, Ab16 CAR-T, Ab18 CAR-T 및 Ab19 CAR-T 세포에서 OTS-412로 감염시키지 않은 그룹의 세포독성과 대비하여 통계적으로 유의미하게 A56 단백질 특이적 세포독성 차이가 나타났다.
나아가, 5종의 CAR-T 세포의 형질도입 효율을 유세포분석기(FACS)로 측정하였을 때, Ab13 CAR-T, Ab16 CAR-T 및 Ab19 CAR-T 세포의 경우 뚜렷한 피크가 관찰되는 반면, Ab01 CAR-T 및 Ab18 CAR-T 세포의 경우 T세포 표면에 CAR가 발현되는 강도가 낮아 네거티브 피크와 구별되는 피크가 뚜렷하게 관찰되지 않은 것으로 보이며, 형질도입 효율 또한 낮았다(도 73). 5종의 CAR 간의 형질도입 효율의 차이는 다른 연령과 성별의 대상자로부터 제공받은 혈액에서도 유사하게 나타났다. 형질도입 효율은 Ab13 CAR, Ab16 CAR 및 Ab19 CAR가 Ab01 CAR 및 Ab18 CAR에 비해 일관되게 높았으며, 특히 그 중에서도 Ab16 CAR의 형질도입 효율이 일관되게 가장 높았다.
실험예 10. 항암 백시니아 바이러스(OTS-412) 및 CAR-T 세포의 항암효과 확인:
in vitro
III
5종의 CAR-T 세포 중에서 다양한 암세포종에서 항원 특이적 세포독성 효과가 나타나며, A56 단백질을 발현하지 않는 암세포에 대해 세포독성이 비교적 적게 나타나는 Ab16 CAR-T 및 Ab18 CAR-T 세포에 대해서 OTS-412 용량을 달리하여 A56 단백질의 발현 정도에 따른 CAR-T 세포의 세포독성 효과를 분석하였다.
구체적으로, HCT-116 세포주(1×104 cells/well)를 96-웰-플레이트에 분주한 후, 37℃ 온도에서 배양시키면서 제조예 1.1의 OTS-412를 처리하지 안거나 0, 0.0625, 0.0125, 0.25, 0.5 및 1 MOI의 용량으로 각각 감염시켜 암세포 표면에 A56 단백질을 발현시켰다. 2시간 후 2% FBS가 포함된 배지로 교체하고, 4시간 후, UTD 세포, Ab16 CAR-T 및 Ab18 CAR-T 세포를 각각 T 세포: 암세포의 비율이 1:1이 되도록 투여하였다. 48시간 후에 CCK-8 Kit를 이용하여 세포독성을 측정하였다. OTS-412 및 CAR-T 세포를 처리하지 않은 암세포주를 대조군으로 이용하였다.
그 결과, OTS-412로 감염시킨 HCT-116 세포주에서 Ab16 CAR-T 및 Ab18 CAR-T 세포를 처리한 군과 UTD 세포를 처리한 군을 비교하였을 때, 0.0625, 0.0125, 0.25, 0.5 및 1 MOI의 용량에서 모두 통계적으로 유의미한 CAR-T 세포 특이적인 세포독성 효과가 나타났다(도 74).
실험예 11. 항암 백시니아 바이러스(OTS-412) 및 CAR-T 세포의 항암효과 확인:
in vitro
IV
CAR-T 세포의 항암효과를 형광 기반 세포 이미지 분석 시스템 (Incucyte® Live-Cell Analysis System, Sartorius)을 사용하여 실시간으로 세포 사멸을 측정하여 분석하였다.
구체적으로, 암세포주 A546(1×104 cells) 및 HCT-116 (3×104 cells) 세포주를 96-웰-플레이트에 접종한 후, 37℃ 온도에서 배양시키면서 제조예 1.1의 OTS-412(1.55×108 pfu/㎖)을 0.05 MOI의 용량으로 감염시켜 암세포 표면에 A56 단백질을 발현시켰다. 2시간 후 2% FBS가 포함된 배지로 교체하고, 4시간 후, UTD 세포, Ab16 CAR-T 및 Ab18 CAR-T 세포를 각각 T 세포: 암세포의 비율이 1:1이 되도록 투여하였다. T 세포를 붉은 형광 염색 시약이 포함된 배지(10% FBS)와 함께 투여한 후, Incucyte 시스템을 이용하여 5일 동안 30분 간격으로 세포 사멸 이미지 데이터를 획득하여 소프트웨어를 통해 분석하였다.
그 결과, 도 75에 나타난 바와 같이 OTS-412로 감염시킨 A549 및 HCT-116, 세포주의 경우, Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포를 각각 처리한 군에서 UTD 세포를 처리한 군보다 사멸된 세포가 더 많이 염색되는 것을 확인하였다. 또한, OTS-412로 감염시킨 A549 및 HCT-116, 세포주의 경우, Ab16 CAR-T 및 Ab18 CAR-T 세포를 처리한 군과 UTD 세포를 처리한 군을 비교하였을 때, 모두 통계적으로 유의미한 CAR-T 세포 특이적인 세포독성 효과가 나타났다(도 76).
실험예 12. 항암 백시니아 바이러스(OTS-412) 및 CAR-T 세포의 항암효과 확인:
in vitro
V
HeLa 세포주(5×103 cells/well), MCF7 세포주(5×103 cells/well), A549 세포주(5×103 cells/well) 및 PC-3 세포주(5×103 cells/well)를 96-웰-플레이트에 분주한 후, 37℃ 온도에서 배양시키면서 제조예 1.1의 OTS-412를 0.05 MOI의 용량으로 감염시켜 암세포 표면에 A56 단백질을 발현시켰다. 2시간 후 2% FBS가 포함된 배지로 교체하고, 4시간 후, UTD 세포, Ab16 CAR-T 세포 및 Ab18 CAR-T 세포를 각각 T 세포: 암세포의 비율이 1:1이 되도록 투여하였다. 그 후 HeLa 세포주는 44시간 후, 나머지 세포주들은 72시간 후에 CCK-8 Kit를 이용하여 세포독성을 측정하였다. 이때, 항암 백시니아 바이러스를 처리하지 않은 T 세포만을 처리한 암세포주를 대조군으로 설정하였다.
그 결과, 모든 암세포주에서 T 세포만을 처리하는 경우보다 OTS-412와 Ab16 CAR-T 세포 또는 Ab18 CAR-T 세포를 병용처리하는 경우에 세포독성이 유의미하게 증가하는 것을 확인하였다(도 77).
실험예 13. CAR-T 세포의 활성 확인
CAR-T 세포의 활성 여부를 확인하기 위해, T 세포 표면에 발현되는 지표 CD25를 이용하여 유세포 분석기(FACS)로 측정하였다.
구체적으로, HCT-116 세포주(4×105 cells/well)를 1 MOI 용량으로 OTS-412로 감염시킨 후, 4시간 후, Ab16 CAR-T 세포를 각각 T 세포: 암세포의 비율이 1:1이 되도록 투여하였다. 48시간 후, 유세포 분석기(FACS)를 이용하여 측정하였다.
그 결과, 도 78에 나타난 바와 같이, HCT-116 세포주와 공배양하지 않은 Ab16 CAR-T 세포의 경우 CD3+CD25+를 발현하는 T 세포의 비율이 16.03%인 반면, HCT-116 세포주와 공배양시킨 Ab16 CAR-T 세포의 경우 CD3+CD25+를 발현하는 T 세포의 비율이 24.83%로 증가하였다. 특히, OTS-412로 감염시킨 HCT-116 세포주와 공배양시킨 Ab16 CAR-T 세포의 경우 CD3+CD25+를 발현하는 T 세포의 비율이 39.39%로 증가하였다.
실험예 14. CAR-T 세포의 증식능 확인
CAR-T 세포의 증식능을 확인하기 위해, T 세포 표면에 발현되는 지표 CD8을 이용하여 유세포 분석기(FACS)로 측정하였다.
구체적으로, HCT-116 세포주(4×105 cells/well)를 1 MOI 용량으로 OTS-412로 감염시킨 후, 4시간 후, UTD(Mock-T) 세포, Ab18 CAR-T 세포를 각각 T 세포: 암세포의 비율이 1:1이 되도록 투여하였다. 1일째 및 5일째 유세포 분석기(FACS)를 이용하여 측정하였다.
그 결과, 도 79에 나타난 바와 같이, 1일째에는 CD+을 발현하는 T 세포의 비율이 UTD 세포(32.15%)가 Ab18 CAR-T 세포(28.03%)보다 높았으나, 5일째에는 일째에는 CD+을 발현하는 T 세포의 비율이 Ab18 CAR-T 세포(49.70%)가 UTD 세포(37.21%)보다 높은 것을 확인하였다. 이를 통해, Ab18 CAR-T 세포가 A56 단백질을 발현하는 암세포에 대해 특이적으로 증식능이 증가되는 것을 확인하였다.
실험예 15. HCT-116 세포주 식립 마우스에서의 항암 백시니아 바이러스(OTS-412) 및 CAR-T 세포의 항암효과 확인 I
암컷 NOD SCID 마우스(NOD.CB17-Prkdcs scid /NCrKoat, 7주령)를 일주일의 적응기간을 거친 후에 2.5×106 세포수의 HCT-116 세포주(한국세포주은행)로 동종이식을 수행하였다. 종양의 크기가 150 ㎜3에 도달할 때까지 관찰한 뒤 1×105 pfu 용량의 OTS-412를 투여하였고, OTS-412를 투여한지 3일째가 되었을 때, Ab16 CAR-T 및 Ab18 CAR-T 세포를 각각 5×106 세포수/100 ㎕ 용량으로 종양 내 투여하였다. 식염수를 종양 내 투여한 그룹을 대조군으로 설정하였다. 이때, OTS-412를 투여한 후 6일까지 OTS-412를 투여한 날을 제외하고 6회/주 30 mg/kg/day 용량으로 복강 내 투여하였다.
각 그룹의 마우스를 3일째, 8일째, 10일째, 14일째, 17일째 및 21일째에 마우스의 체중을 측정한 결과, 모든 그룹에서 체중이 감소하는 경향이 나타나지 않는 것을 확인하였다(도 80). 또한, 각 그룹의 마우스를 3일째, 8일째, 10일째, 14일째, 17일째 및 21일째에 희생시켜 종양의 크기를 측정한 결과, OTS-412와 Ab16 CAR-T 또는 Ab18 CAR-T 세포를 병용투여한 그룹의 마우스 종양의 성장이 현저하게 억제되는 것을 확인하였다(도 81).
실험예 16. HCT-116 세포주 식립 마우스에서의 항암 백시니아 바이러스(OTS-412) 및 CAR-T 세포의 항암효과 확인 II
암컷 NOD SCID 마우스(NOD.CB17-Prkdcs scid /NCrKoat, 7주령)를 일주일의 적응기간을 거친 후에 2.5×106 세포수의 HCT-116 세포주(한국세포주은행)로 동종이식을 수행하였다. 종양의 크기가 100 ㎜3에 도달할 때까지 관찰한 뒤 1×106 pfu 용량의 OTS-412를 투여하였고, OTS-412를 투여한지 3일째가 되었을 때, UTD 및 Ab16 CAR-T 세포를 각각 5×106 세포수/100 ㎕ 용량으로 종양 내 투여하였다. 식염수를 종양 내 투여한 그룹을 대조군으로 설정하였다. 이때, OTS-412를 투여한 후 6일까지 OTS-412를 투여한 날을 제외하고 6회/주 30 mg/kg/day 용량으로 복강 내 투여하였다.
각 그룹의 마우스를 3일째, 8일째, 10일째, 14일째, 17일째 및 21일째에 마우스의 체중을 측정한 결과, 모든 그룹에서 체중이 감소하는 경향이 나타나지 않는 것을 확인하였다(도 82). 또한, 각 그룹의 마우스를 3일째, 8일째, 10일째, 14일째 및 17일째에 희생시켜 종양의 크기를 측정한 결과, OTS-412와 UTD 또는 Ab16 CAR-T 세포를 병용투여한 그룹의 마우스 종양의 성장이 현저하게 억제되는 것을 확인하였고, OTS-412와 Ab16 CAR-T 세포를 병용투여한 그룹의 마우스 종양과 OTS-412와 UTD 세포를 병용투여한 그룹의 마우스 종양을 비교하였을 때, 통계적으로 유의미한 차이가 나타났다(도 83).
실험예 17. 항암 백시니아 바이러스(WOTS-418) 및 CAR-T 세포의 항암효과 확인
MCF7 세포주(5×103 cells/well) 및 A549 세포주(5×103 cells/well)를 96-웰-플레이트에 분주한 후, 37℃ 온도에서 배양시키면서 제조예 1.1의 WOTS-418을 0.05 MOI의 용량으로 감염시켜 암세포 표면에 A56 단백질을 발현시켰다. 2시간 후 2% FBS가 포함된 배지로 교체하고, 4시간 후, UTD 세포, Ab16 CAR-T 세포 및 Ab18 CAR-T 세포를 각각 T 세포: 암세포의 비율이 1:1이 되도록 투여하였다. 72시간 후에 CCK-8 Kit를 이용하여 세포독성을 측정하였다. 이때, 항암 백시니아 바이러스를 처리하지 않은 T 세포만을 처리한 암세포주를 대조군으로 설정하였다.
그 결과, 모든 암세포주에서 T 세포만을 처리하는 경우보다 WOTS-418과 Ab16 CAR-T 세포 또는 Ab18 CAR-T 세포를 병용처리하는 경우에 세포독성이 유의미하게 증가하는 것을 확인하였다(도 84).
실험예 18. 항암 백시니아 바이러스(OTS-412, WOTS-418) 및 CAR-T 세포의 항암효과 확인
CAR-T 세포의 항암효과를 형광 기반 세포 이미지 분석 시스템 (Incucyte® Live-Cell Analysis System, Sartorius)을 사용하여 실시간으로 세포 사멸을 측정하여 분석하였다.
구체적으로, 암세포주 HCT-116 (1×104 cells) 세포주를 96-웰-플레이트에 접종한 후, 37℃ 온도에서 배양시키면서 제조예 1.1의 OTS-412 및 WOTS-418을 각각 0.05 MOI의 용량으로 감염시켜 암세포 표면에 A56 단백질을 발현시켰다. 2시간 후 2% FBS가 포함된 배지로 교체하고, 4시간 후, UTD 세포, 5종의 CAR-T 세포(Ab13 CAR-T, Ab16 CAR-T, Ab18 CAR-T, Ab01 CAR-T, Ab19 CAR-T)를 각각 T 세포: 암세포의 비율이 3:1이 되도록 투여하였다. T 세포를 붉은 형광 염색 시약이 포함된 배지(10% FBS)와 함께 투여한 후, Incucyte 시스템을 이용하여 5일 동안 30분 간격으로 세포 사멸 이미지 데이터를 획득하여 소프트웨어를 통해 분석하였다.
그 결과, OTS-412 또는 WOTS-418로 감염시킨 HCT-116 세포주에서 5종의 CAR-T 세포(Ab13 CAR-T, Ab16 CAR-T, Ab18 CAR-T, Ab01 CAR-T, Ab19 CAR-T)를 각각 처리한 군에서 UTD 세포를 처리한 군보다 사멸된 세포가 더 많이 염색되는 것을 확인하였다(도 85 및 도 86).
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<170> KopatentIn 3.0
<210> 1
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-01A02
<400> 1
Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 2
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-01A02
<400> 2
Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala
1 5
<210> 3
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-01A02
<400> 3
Ala Arg Phe Val Phe Gly Ser Gly Thr Tyr Leu Asp Ser
1 5 10
<210> 4
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-01A02
<400> 4
Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asn Gly Asn Asn Tyr
1 5 10
<210> 5
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-01A02
<400> 5
Leu Gly Ser
1
<210> 6
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-01A02
<400> 6
Met Gln Ala Leu Gln Thr Pro Leu Thr
1 5
<210> 7
<211> 765
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-01A02
<400> 7
cagatgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accagggaca cgtccacgag cacagtctac 240
atggagctga gcagcctgaa atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagattcgtc 300
tttggttcgg ggacttatct tgactcctgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360
ggcctcgggg gcctcggagg aggaggtagt ggcggaggag gctccggtgg atccagcggt 420
gtgggttccg atattgtgat gacccagact ccactctccc tgcccgtcac ccctggagag 480
tcggcctcca tctcctgcag gtctagtcag agcctcctgt atagtaatgg gaacaactat 540
ttggattggt acctgcagaa gccagggcag tccccacagc tcctgatcta tttgggttct 600
aatcgggcct ccggggtccc tgacaggttc agtggcagtg gatcaggcac agattttaca 660
ctgaaaatca gcagagtgga ggctgaggat gttggggttt attactgcat gcaagctcta 720
caaactcctc tcactttcgg cggagggacc aaggtggata tcaaa 765
<210> 8
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-01A02
<400> 8
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Phe Val Phe Gly Ser Gly Thr Tyr Leu Asp Ser Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 9
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-01A02
<400> 9
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala
85 90 95
Leu Gln Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105 110
<210> 10
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-01A02
<400> 10
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 11
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-01A02
<400> 11
Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Gly
<210> 12
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-01A02
<400> 12
Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr
1 5 10 15
Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 13
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-01A02
<400> 13
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 14
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-01A02
<400> 14
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser
20 25
<210> 15
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-01A02
<400> 15
Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 16
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-01A02
<400> 16
Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 17
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-01A02
<400> 17
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
1 5 10
<210> 18
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-01A03
<400> 18
Gly Tyr Thr Phe Thr Pro Tyr Tyr
1 5
<210> 19
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-01A03
<400> 19
Ile Ile Pro Leu Leu Gly Lys Ala
1 5
<210> 20
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-01A03
<400> 20
Ala Arg Glu Ala Arg Gly Val Asn Tyr Tyr Gly Met Asp Val
1 5 10
<210> 21
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-01A03
<400> 21
Gln Gly Ile Ser His Ser
1 5
<210> 22
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-01A03
<400> 22
Val Ala Ser
1
<210> 23
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-01A03
<400> 23
Gln Gln Thr Asn Asn Phe Pro Tyr Thr
1 5
<210> 24
<211> 753
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-01A03
<400> 24
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gttaggaagc ctggggcctc cgtgaagatt 60
tcctgcatgg catctggata caccttcacc ccctactata tccactgggt gcggcaggcc 120
cctggccaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatccctc tccttggtaa agcgacctac 180
gcacagaagt tccagggcag aatcacggtt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240
atggaactga gcagtctaag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagaagcc 300
cggggagtta actactacgg tatggacgtc tggggccaag ggaccacggt caccgtctcc 360
tcaggcctcg ggggcctcgg aggaggaggt agtggcggag gaggctccgg tggatccagc 420
ggtgtgggtt ccgacatcca gatgacccag tctccatctt ctgtgtctgc atctgtggga 480
gacagagtca ccatcagttg tcgggcgagt caggggatca gccactcgtt agcctggtat 540
cagcagaaac cagggaaagc ccctaaactc ctgatcgatg ttgcatccag attgcaaagt 600
ggggtcccgt taagattcag cggcagtgga tctgggacag atttcactct cactatcaac 660
agcctgcagc ctgaagattc tgcaacttat tactgtcaac agactaacaa tttcccgtac 720
acttttggcc aggggaccaa gctggaaatc aaa 753
<210> 25
<211> 121
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-01A03
<400> 25
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Met Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Pro Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Leu Leu Gly Lys Ala Thr Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Ile Thr Val Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Ala Arg Gly Val Asn Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 26
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-01A03
<400> 26
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser His Ser
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Asp Val Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Leu Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ser Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn Asn Phe Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 27
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-01A03
<400> 27
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Met Ala Ser
20 25
<210> 28
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-01A03
<400> 28
Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Gly
<210> 29
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-01A03
<400> 29
Thr Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Ile Thr Val Thr Ala Asp Glu
1 5 10 15
Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 30
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-01A03
<400> 30
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 31
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-01A03
<400> 31
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 32
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-01A03
<400> 32
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Asp
<210> 33
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-01A03
<400> 33
Ile Asp Val Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Leu Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln
20 25 30
Pro Glu Asp Ser
35
<210> 34
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-01A03
<400> 34
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 35
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-01A04
<400> 35
Gly Gly Thr Phe Ser Tyr Arg Tyr
1 5
<210> 36
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-01A04
<400> 36
Ile Thr Pro Phe Asn Gly Tyr Thr
1 5
<210> 37
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-01A04
<400> 37
Val Thr Gly Leu Gly Lys Thr Asn Leu Asp Ser
1 5 10
<210> 38
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-01A04
<400> 38
Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 39
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-01A04
<400> 39
Gln Ile Ser
1
<210> 40
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-01A04
<400> 40
Met Gln Leu Thr Gln Phe Pro Leu Thr
1 5
<210> 41
<211> 759
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-01A04
<400> 41
caggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggagg caccttcagt taccgctacc tgcactgggt gcgacaggcc 120
tccggacagg cgcttgagtg gatggggtgg atcacacctt tcaatggtta caccaactac 180
gcacagaaat tccaggacag agtcaccatt accagggaca ggtctatgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgt cacaggcctc 300
ggaaaaacga accttgactc ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc ctcaggcctc 360
gggggcctcg gaggaggagg tagtggcgga ggaggctccg gtggatccag cggtgtgggt 420
tccgatattg tgatgaccca gactccactc tcctcacctg tcacccttgg acagccggcc 480
tccatctcct gcaggtctag tcagagcctc gtacacagta atggaaacac ctacttgagt 540
tggcttcagc agaggccagg ccagcctcca agactcctaa tttatcagat ttctaagcgg 600
ttctctgggg tcccagacag attcagtggc agtggggcag ggacagattt cacactgaaa 660
atcagcaggg tggaagctga ggatgtcggg gtttattact gcatgcaact tacacaattt 720
cctctcactt tcggcggagg gaccaaggtg gagatcaaa 759
<210> 42
<211> 118
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-01A04
<400> 42
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Tyr Arg
20 25 30
Tyr Leu His Trp Val Arg Gln Ala Ser Gly Gln Ala Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Thr Pro Phe Asn Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Arg Ser Met Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Val Thr Gly Leu Gly Lys Thr Asn Leu Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 43
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-01A04
<400> 43
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Ser Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Leu Gln Gln Arg Pro Gly Gln Pro
35 40 45
Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gln Ile Ser Lys Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Leu
85 90 95
Thr Gln Phe Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 44
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-01A04
<400> 44
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 45
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-01A04
<400> 45
Leu His Trp Val Arg Gln Ala Ser Gly Gln Ala Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Trp
<210> 46
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-01A04
<400> 46
Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Arg
1 5 10 15
Ser Met Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 47
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-01A04
<400> 47
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
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<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-01A04
<400> 48
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Ser Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser
20 25
<210> 49
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-01A04
<400> 49
Leu Ser Trp Leu Gln Gln Arg Pro Gly Gln Pro Pro Arg Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
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<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-01A04
<400> 50
Ile Tyr Gln Ile Ser Lys Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 51
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-01A04
<400> 51
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 52
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-01A05
<400> 52
Gly Asp Thr Leu Thr Tyr Arg Phe
1 5
<210> 53
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-01A05
<400> 53
Ile Thr Pro Phe Asn Gly Asn Thr
1 5
<210> 54
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-01A05
<400> 54
Ala Thr Gly Gly Gly Asn Asn Tyr Tyr Gly Met Glu Val
1 5 10
<210> 55
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-01A05
<400> 55
Gln Gly Ile Gly Ser Trp
1 5
<210> 56
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-01A05
<400> 56
Gly Ala Ser
1
<210> 57
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-01A05
<400> 57
Gln Lys Ala Asn Asn Phe Pro Tyr Thr
1 5
<210> 58
<211> 750
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-01A05
<400> 58
caggtgcagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaaga ctgggtcctc agtgaaggtt 60
tcgtgcaagg cttccggaga cacccttacc taccgcttcc tgcactgggt gcgacaggcc 120
cccggacaag cgcctgagtg gattggatgg atcacacctt tcaatggtaa caccaactac 180
gcacagaaat tccaggacag agtcaccatt accagggaca ggtctatgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gactggaggt 300
gggaacaatt attacggcat ggaggtctgg ggccaaggga ccccgatcac cgtctcctca 360
ggcctcgggg gcctcggagg aggaggtagt ggcggaggag gctccggtgg atccagcggt 420
gtgggttccg acatccagat gacccagtct ccatcttccg tgtctgcatc tgtaggagac 480
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cagaaaccag gggaagcccc taacctcctg atctatggtg catccaattt ggcaagtggg 600
gtcccatcaa ggttcagtgg cggtggatct gggacagatt tcagtctcac catcagcagc 660
ctgcagcctg aagattttgc aacttactat tgtcaaaagg caaataattt cccgtacact 720
tttggccagg ggaccaagct ggatatcaaa 750
<210> 59
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-01A05
<400> 59
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Thr Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Asp Thr Leu Thr Tyr Arg
20 25 30
Phe Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Ala Pro Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Trp Ile Thr Pro Phe Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Arg Ser Met Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Gly Gly Gly Asn Asn Tyr Tyr Gly Met Glu Val Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Pro Ile Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 60
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-01A05
<400> 60
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Ala Pro Asn Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Gly Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Ala Asn Asn Phe Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Asp Ile Lys
100 105
<210> 61
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-01A05
<400> 61
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Thr Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 62
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-01A05
<400> 62
Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Ala Pro Glu Trp Ile Gly
1 5 10 15
Trp
<210> 63
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-01A05
<400> 63
Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Arg
1 5 10 15
Ser Met Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 64
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-01A05
<400> 64
Trp Gly Gln Gly Thr Pro Ile Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 65
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-01A05
<400> 65
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 66
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-01A05
<400> 66
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Ala Pro Asn Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 67
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-01A05
<400> 67
Ile Tyr Gly Ala Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
20 25 30
Pro Glu Asp Phe
35
<210> 68
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-01A05
<400> 68
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Asp Ile Lys
1 5 10
<210> 69
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-01B01
<400> 69
Gly Phe Thr Ile Ser Asn Tyr Ala
1 5
<210> 70
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-01B01
<400> 70
Val Ser Gly Ser Gly Val Thr Thr
1 5
<210> 71
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-01B01
<400> 71
Val Arg Met Thr Gly Gly Pro Leu
1 5
<210> 72
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-01B01
<400> 72
Gln Gly Val Arg Asn Asp
1 5
<210> 73
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-01B01
<400> 73
Gly Ala Ser
1
<210> 74
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-01B01
<400> 74
Leu Gln Asp Phe Ile Tyr Pro Tyr Thr
1 5
<210> 75
<211> 735
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-01B01
<400> 75
cagatgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtacag cctctggatt caccattagc aactacgcca tgagctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtcgcaact gttagtggta gtggtgttac cacacactac 180
gcagcctccg tgaaggaccg gttcaccgtc tccagtgaca gttccaagaa cacacttttt 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgt aaggatgact 300
gggggcccac tttggggcca gggaaccctg atcaccgtct cctcaggcct cgggggcctc 360
ggaggaggag gtagtggcgg aggaggctcc ggtggatcca gcggtgtggg ttccgacatc 420
cagatgaccc agtctccatc ctccctgtct gcatctgtag gagacagagt caccatcact 480
tgccgggcaa gtcagggcgt tagaaatgat ttaggctggt atcagcagaa accagggaaa 540
gccccgaagc tcctgatcta tggtgcatcc actttacaaa gtggggtccc atcaaggttc 600
agcggcagtg gatctggcac agatttcact ctcaccatca gcagtctgca gcctgaagat 660
tttgcaactt attactgtct acaagatttc atttacccgt acacttttgg ccaggggacc 720
aagctggaga tcaaa 735
<210> 76
<211> 115
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-01B01
<400> 76
Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Val Ser Gly Ser Gly Val Thr Thr His Tyr Ala Ala Ser Val
50 55 60
Lys Asp Arg Phe Thr Val Ser Ser Asp Ser Ser Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Arg Met Thr Gly Gly Pro Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Ile Thr
100 105 110
Val Ser Ser
115
<210> 77
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-01B01
<400> 77
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 78
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-01B01
<400> 78
Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser
20 25
<210> 79
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-01B01
<400> 79
Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala
1 5 10 15
Thr
<210> 80
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-01B01
<400> 80
His Tyr Ala Ala Ser Val Lys Asp Arg Phe Thr Val Ser Ser Asp Ser
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Leu Phe Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 81
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-01B01
<400> 81
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Ile Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 82
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-01B01
<400> 82
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 83
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-01B01
<400> 83
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 84
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-01B01
<400> 84
Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
20 25 30
Pro Glu Asp Phe
35
<210> 85
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-01B01
<400> 85
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 86
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-01C08
<400> 86
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Asn Trp
1 5
<210> 87
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-01C08
<400> 87
Ile Asn Arg Asp Gly Ser Glu Arg
1 5
<210> 88
<211> 21
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-01C08
<400> 88
Val Arg Asp Ser Leu Ile Ile Tyr Asp Asn Ser Trp Tyr Pro Tyr Tyr
1 5 10 15
His Gly Met Ala Val
20
<210> 89
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-01C08
<400> 89
Ser Leu Arg Lys Tyr His
1 5
<210> 90
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-01C08
<400> 90
Gly Lys Asn
1
<210> 91
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-01C08
<400> 91
Asn Ser Arg Asp Ser Ser Pro Asn His Leu Val
1 5 10
<210> 92
<211> 777
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-01C08
<400> 92
caggtgcagc tggtagagtc tgggggacgg ttggtccagc ctgggggatc cctgagactc 60
tcctgcgtaa cttctggatt cacttttagt aacaattgga tgacttgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtggccacc ataaaccgag atggaagtga gaggtattat 180
gtggactctg tgaaggaccg gttcaccatc tccagagaaa acagcaaaaa ctccctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgt gagagacagt 300
ctaataatat acgataatag ttggtatccc tattaccacg gtatggccgt ctggggccaa 360
gggaccacgg tcaccgtctc ctcaggcctc gggggcctcg gaggaggagg tagtggcgga 420
ggaggctccg gtggatccag cggtgtgggt tcctcctatg agctgacaca ggaccctgct 480
gtgtctgtgg ccttgggaca gacagtcagg atcacatgcc aaggagacag cctcagaaaa 540
tatcatgcaa gctggtacca gcagaagcca ggacaggccc ctgtacttgt catctatggt 600
aaaaacaacc ggccctcagg gatcccaggc cgattctctg gctccagctc aggaaacaca 660
gcttccttga ccatcactga agctcaggcg gaagatgagg ctgactatta ctgtaactcc 720
cgggacagca gtcctaacca tctggttttc ggcggaggga ccaagctgac cgtccta 777
<210> 93
<211> 128
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-01C08
<400> 93
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Thr Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Asn
20 25 30
Trp Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Asn Arg Asp Gly Ser Glu Arg Tyr Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Glu Asn Ser Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Arg Asp Ser Leu Ile Ile Tyr Asp Asn Ser Trp Tyr Pro Tyr Tyr
100 105 110
His Gly Met Ala Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 94
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-01C08
<400> 94
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Lys Tyr His Ala
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Gly Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Glu Ala Gln Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Pro Asn His
85 90 95
Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 95
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-01C08
<400> 95
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Thr Ser
20 25
<210> 96
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-01C08
<400> 96
Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala
1 5 10 15
Thr
<210> 97
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-01C08
<400> 97
Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Glu Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 98
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-01C08
<400> 98
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 99
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-01C08
<400> 99
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp
20 25
<210> 100
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-01C08
<400> 100
Ala Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 101
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-01C08
<400> 101
Ile Tyr Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Gly Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Glu Ala Gln
20 25 30
Ala Glu Asp Glu
35
<210> 102
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-01C08
<400> 102
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
1 5 10
<210> 103
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-01C12
<400> 103
Gly Phe Arg Ser Ser Thr Phe Trp
1 5
<210> 104
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-01C12
<400> 104
Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Ile
1 5
<210> 105
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-01C12
<400> 105
Ala Arg Thr Arg Gly Ala Thr Ile Tyr Asp His Tyr Tyr Gly Met Asp
1 5 10 15
Val
<210> 106
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-01C12
<400> 106
Ser Ser Asn Ile Gly Ser Tyr Ser
1 5
<210> 107
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-01C12
<400> 107
Gly His Asn
1
<210> 108
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-01C12
<400> 108
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Val Asp Gly Trp Val
1 5 10
<210> 109
<211> 771
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-01C12
<400> 109
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgtag cctctggatt caggtctagt actttttgga tgagttggat ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtggcccac ataaagcaag atggaagtga gatatactat 180
gtggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acagcaaaaa ctccctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaacgagg 300
ggggctacga tttacgacca ctactatggt atggacgtct ggggccaagg gaccgcggtc 360
accgtctcct caggcctcgg gggcctcgga ggaggaggta gtggcggagg aggctccggt 420
ggatccagcg gtgtgggttc ccagtctgcc ctgactcagc ctccctcaag gtctgtgacc 480
cccgggcaga gggtcaccat ttcttgttct ggaagcagct caaatatcgg aagttactct 540
gtaaattggt accagcaact cccaggaacg gcccccaagc tcctcatcta cgggcataat 600
cagcggccct caggggtccc tgaccgattc tctggctcca agtctggcac ctcagcctcc 660
ctggccatca gtgggctcca gtctgcggat gagggtgatt attactgtgc agcatgggat 720
gacagtgtgg atggttgggt gttcggcgga gggaccaagc tgaccgtcct a 771
<210> 110
<211> 124
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-01C12
<400> 110
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Arg Ser Ser Thr Phe
20 25 30
Trp Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala His Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Ile Tyr Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Thr Arg Gly Ala Thr Ile Tyr Asp His Tyr Tyr Gly Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Ala Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 111
<211> 110
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-01C12
<400> 111
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Arg Ser Val Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Tyr
20 25 30
Ser Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Gly His Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln
65 70 75 80
Ser Ala Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Val
85 90 95
Asp Gly Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 112
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-01C12
<400> 112
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser
20 25
<210> 113
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-01C12
<400> 113
Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala
1 5 10 15
His
<210> 114
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-01C12
<400> 114
Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 115
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-01C12
<400> 115
Trp Gly Gln Gly Thr Ala Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 116
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-01C12
<400> 116
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro Ser Arg Ser Val Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser
20 25
<210> 117
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-01C12
<400> 117
Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 118
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-01C12
<400> 118
Ile Tyr Gly His Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln
20 25 30
Ser Ala Asp Glu
35
<210> 119
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-01C12
<400> 119
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
1 5 10
<210> 120
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-01F12
<400> 120
Gly Gly Ser Phe Ser Thr Tyr Ala
1 5
<210> 121
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-01F12
<400> 121
Ile Ile Pro Ile Ser Asp Ile Arg
1 5
<210> 122
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-01F12
<400> 122
Ala Lys Gly Gly Arg Leu Leu Ser Thr His Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 123
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-01F12
<400> 123
Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn Tyr
1 5
<210> 124
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-01F12
<400> 124
Asp Asp Asp
1
<210> 125
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-01F12
<400> 125
Gly Thr Trp His Ser Gly Leu Ser Ala Gly Val Val
1 5 10
<210> 126
<211> 763
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-01F12
<400> 126
caggtgcagc tggtggagtc tgggggtgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggagg cagcttcagc acctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaagg atcatcccca tctctgatat cagaaactac 180
gcacagaaat tccagggcag agtcacgtta accgcggaca gagccacgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gaaaggggga 300
cgactgctat ctactcactt tgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360
ggcctcgggg gcctcggagg aggaggtagt ggcggaggag gctccggtgg atccagcggt 420
gtgggttccc agctcgtgct gactcagccg ccctcagtgt ctgcggcccc cggacagaag 480
gtcaccatct cctgctctgg aagcagctcc aacattggga ataattatgt atcctggtac 540
cagcaactcc caggaacagc ccccaaactc ctcatttatg acgatgataa gcgaccctca 600
gggattcctg accgattctc tggctccaag tctggcacgt cagccaccct gggcatcacc 660
ggactccaga ctggggacga ggccgattat tactgcggaa catggcatag cggcctgagt 720
gctggcgtgg ttttcggcgg agggaccaag ctgaccgtcc taa 763
<210> 127
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-01F12
<400> 127
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Ser Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Ile Pro Ile Ser Asp Ile Arg Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Arg Ala Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Gly Gly Arg Leu Leu Ser Thr His Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 128
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-01F12
<400> 128
Gln Leu Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Ala Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Lys Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn
20 25 30
Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Asp Asp Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Thr Leu Gly Ile Thr Gly Leu Gln
65 70 75 80
Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Trp His Ser Gly Leu
85 90 95
Ser Ala Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 129
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-01F12
<400> 129
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 130
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-01F12
<400> 130
Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Arg
<210> 131
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-01F12
<400> 131
Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Arg
1 5 10 15
Ala Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 132
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-01F12
<400> 132
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 133
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-01F12
<400> 133
Gln Leu Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Ala Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Lys Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser
20 25
<210> 134
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-01F12
<400> 134
Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 135
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-01F12
<400> 135
Ile Tyr Asp Asp Asp Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Thr Leu Gly Ile Thr Gly Leu Gln
20 25 30
Thr Gly Asp Glu
35
<210> 136
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-01F12
<400> 136
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
1 5 10
<210> 137
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-01G06
<400> 137
Gly Gly Thr Leu Ser Ser Tyr Pro
1 5
<210> 138
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-01G06
<400> 138
Ile Ile Pro Ile Val Gly Arg Ala
1 5
<210> 139
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-01G06
<400> 139
Ala Arg Glu Asn Pro Ser Ser Tyr Ala Pro Phe Ala Leu Asp Ile
1 5 10 15
<210> 140
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-01G06
<400> 140
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 141
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-01G06
<400> 141
Asp Val Thr
1
<210> 142
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-01G06
<400> 142
Ser Ser Tyr Ser Ser Ser Thr Phe Tyr Val
1 5 10
<210> 143
<211> 766
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-01G06
<400> 143
caggtgcagc tggtacagtc tggggctgaa gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcgtgcaagg cttctggagg caccctcagc agctatccca tcagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaagg atcattccta ttgttggtag agcaaactac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt aacgcggaca catccacgaa cacagtccac 240
atggagttga gtagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgcgc gagagagaac 300
ccctccagtt atgctccctt tgctcttgat atctggggcc aagggacagc ggtcaccgtc 360
tcctcaggcc tcgggggcct cggaggagga ggtagtggcg gaggaggctc cggtggatcc 420
agcggtgtgg gttccaattt tatgctgact cagcccgcct ccgtgtctgg gtcccctgga 480
cagtcgatca ccatctcctg cactggaagc agcagcgacg ttggtggtta taactatgtc 540
tcctggtacc aacagcacca aggcaaagcc ccccaactca tcatttatga tgtcactaag 600
cggccctcag gggtttctaa tcgcttctcc ggctccaagt ctggcaactc ggcctccctg 660
accatctctg gactccaggc tgaggacgag gctgattatt actgcagctc atacagcagc 720
agcacttttt acgtcttcgg aactgggacc aaggtcaccg tcctaa 766
<210> 144
<211> 122
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-01G06
<400> 144
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Leu Ser Ser Tyr
20 25 30
Pro Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Ile Pro Ile Val Gly Arg Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Asn Ala Asp Thr Ser Thr Asn Thr Val His
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Asn Pro Ser Ser Tyr Ala Pro Phe Ala Leu Asp Ile Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Ala Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 145
<211> 110
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-01G06
<400> 145
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Gln Gly Lys Ala Pro Gln Leu
35 40 45
Ile Ile Tyr Asp Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ser Ser Ser
85 90 95
Thr Phe Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 146
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-01G06
<400> 146
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 147
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-01G06
<400> 147
Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Arg
<210> 148
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-01G06
<400> 148
Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Asn Ala Asp Thr
1 5 10 15
Ser Thr Asn Thr Val His Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 149
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-01G06
<400> 149
Trp Gly Gln Gly Thr Ala Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
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<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-01G06
<400> 150
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser
20 25
<210> 151
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-01G06
<400> 151
Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Gln Gly Lys Ala Pro Gln Leu Ile Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 152
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-01G06
<400> 152
Ile Tyr Asp Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Lys Ser Gly Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln
20 25 30
Ala Glu Asp Glu
35
<210> 153
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-01G06
<400> 153
Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
1 5 10
<210> 154
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-01G11
<400> 154
Gly Phe Asn Phe Asp Asp His Ala
1 5
<210> 155
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-01G11
<400> 155
Ile Ser Trp Asn Gly Arg Ser Ile
1 5
<210> 156
<211> 18
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-01G11
<400> 156
Ala Arg Asp Leu Ala His Ala Ser Gly Ser Leu Arg Arg Pro Phe Phe
1 5 10 15
Asp Tyr
<210> 157
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-01G11
<400> 157
Gln Asp Ile Ser Thr Tyr
1 5
<210> 158
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-01G11
<400> 158
Ser Thr Ser
1
<210> 159
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-01G11
<400> 159
Gln Gln Leu Lys Ser Tyr Pro Arg Phe Thr
1 5 10
<210> 160
<211> 768
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-01G11
<400> 160
caggtgcagc tggtggagtc tggaggaggc ttgatccagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctccggatt caactttgat gatcatgcca tgcactgggt ccggcaagct 120
ccagggaagg gcctggagtg ggtctccggt attagttgga atggacgtag catatactat 180
gcggactctg tgaggggccg attcaccatc tccagagaca acgccaggaa ctccctgcat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagatttg 300
gcccatgcct cggggagtct taggcgacct ttttttgact actggggcca gggaaccctg 360
gtcaccgtct cctcaggcct cgggggcctc ggaggaggag gtagtggcgg aggaggctcc 420
ggtggatcca gcggtgtggg ttccgacatc cagatgaccc agtctccatc cttcctgtct 480
gcatctgtag gagacagagt caccatcact tgccgggcaa gtcaggacat tagcacctat 540
ttaaattggt atcagcagaa accagggaaa gcccctaagc tcctgatcta ttctacatcc 600
actttggaaa gtggggtccc atcgcgattc agcggcagtg gatctgggac aaatttcact 660
ctcacaatca acaacctgca gcctgaagat tttgcaactt attactgtca acaacttaag 720
agttaccctc gattcacttt cggccctggg accaaagtgg atatcaaa 768
<210> 161
<211> 125
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-01G11
<400> 161
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Ile Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Phe Asp Asp His
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Gly Arg Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Ser Leu His
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Leu Ala His Ala Ser Gly Ser Leu Arg Arg Pro Phe Phe
100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 162
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-01G11
<400> 162
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Thr Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Thr Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asn Phe Thr Leu Thr Ile Asn Asn Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Lys Ser Tyr Pro Arg
85 90 95
Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 163
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-01G11
<400> 163
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Ile Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
<210> 164
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-01G11
<400> 164
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser
1 5 10 15
Gly
<210> 165
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-01G11
<400> 165
Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ala Arg Asn Ser Leu His Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 166
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-01G11
<400> 166
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 167
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-01G11
<400> 167
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 168
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-01G11
<400> 168
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 169
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-01G11
<400> 169
Ile Tyr Ser Thr Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asn Phe Thr Leu Thr Ile Asn Asn Leu Gln
20 25 30
Pro Glu Asp Phe
35
<210> 170
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-01G11
<400> 170
Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
1 5 10
<210> 171
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-01H01
<400> 171
Gly Phe Lys Phe Glu Asp His Ala
1 5
<210> 172
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-01H01
<400> 172
Ile Ser Gly Asn Gly Asp Asp Thr
1 5
<210> 173
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-01H01
<400> 173
Ala Arg Asp Arg Gly Pro Gly
1 5
<210> 174
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-01H01
<400> 174
Gln Ser Val Leu Ser Ser Ser Asn Asn Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 175
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-01H01
<400> 175
Trp Ala Ser
1
<210> 176
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-01H01
<400> 176
Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Pro Ser Thr
1 5
<210> 177
<211> 750
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-01H01
<400> 177
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60
acctgtgtgg gctctggatt caagttcgaa gatcacgcca tccactgggt ccgtcaacgt 120
ccagggaagg gtctggagtg ggtctccgtt ataagtggca atggcgatga cacatactat 180
gcagattctg cgaagggccg attcaccatt tccagagaca acagcaaaaa ctccctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagatagg 300
ggccctggcc tgggccaggg aaccctggtc accgtctcct caggcctcgg gggcctcgga 360
ggaggaggta gtggcggagg aggctccggt ggatccagcg gtgtgggttc cgacatccag 420
atgacccagt ctccatcctc cctggctgtg tctctgggcg agagggccac catcaactgc 480
aagtccagcc agagtgtttt atccagctcc aacaataaga actacttagc ttggtaccag 540
cagagaccag gacagtctcc taagctgctc atttactggg catctacccg ggaatccggg 600
gtccctgacc gattcagtgg cagcgggtct gggacagatt tcactctcac catcaacagc 660
ctgcaggctg aagatgtggc ggtttattac tgtcagcaat attatagtac tccctctacg 720
ttcggccaag ggaccaaggt ggagatcaaa 750
<210> 178
<211> 114
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-01H01
<400> 178
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Thr Cys Val Gly Ser Gly Phe Lys Phe Glu Asp His
20 25 30
Ala Ile His Trp Val Arg Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Val Ile Ser Gly Asn Gly Asp Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Ala
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Arg Gly Pro Gly Leu Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 179
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-01H01
<400> 179
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Ser Ser
20 25 30
Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Asn Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Tyr Tyr Ser Thr Pro Ser Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile
100 105 110
Lys
<210> 180
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-01H01
<400> 180
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Thr Cys Val Gly Ser
20 25
<210> 181
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-01H01
<400> 181
Ile His Trp Val Arg Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser
1 5 10 15
Val
<210> 182
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-01H01
<400> 182
Tyr Tyr Ala Asp Ser Ala Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 183
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-01H01
<400> 183
Leu Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 184
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-01H01
<400> 184
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser
20 25
<210> 185
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-01H01
<400> 185
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 186
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-01H01
<400> 186
Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 187
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-01H01
<400> 187
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 188
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-01H02
<400> 188
Gly Phe Thr Phe Gly Asp Tyr Ala
1 5
<210> 189
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-01H02
<400> 189
Ile Arg Ser Lys Ala Tyr Gly Gly Thr Thr
1 5 10
<210> 190
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-01H02
<400> 190
Ala Arg Asp Pro Ala Lys Glu Arg Ser Arg Asn Trp Phe Ala Pro
1 5 10 15
<210> 191
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-01H02
<400> 191
Gln Ser Ile Gly Ser Trp
1 5
<210> 192
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-01H02
<400> 192
Lys Ala Ser
1
<210> 193
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-01H02
<400> 193
Gln Gln Tyr Lys Leu Tyr Pro Trp Thr
1 5
<210> 194
<211> 762
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-01H02
<400> 194
caggtgcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtaaagc cagggcggtc cctgagactc 60
tcctgtacag cttctggatt cacctttggt gattatgcta tgagctggtt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtaggtttc attagaagca aagcttatgg tgggacaaca 180
gaatacgccg cgtctgtgaa aggcagattc accatctcaa gagatgattc caaaagcatc 240
gcctatctgc aaatgaacag tctgagagcc gaggacacgg ccgtgtatta ctgtgcgaga 300
gatcctgcga aagagcgaag tcgcaactgg ttcgccccct ggggccaggg aaccctggtc 360
accgtctcct caggcctcgg gggcctcgga ggaggaggta gtggcggagg aggctccggt 420
ggatccagcg gtgtgggttc cgacatccag atgacccagt ctccttccac cctgtctgct 480
tctgtaggcg acagagtcac catcacttgc cgggccagcc agagtattgg tagttggttg 540
gcctggtatc agcagaaacc agggaaagcc cctaagctcc tgatctacaa ggcgtctagt 600
ttagagagtg gggtcccatc aaggttcagc ggcagtggat ctgggacaga attcactctc 660
accatcagca gcctgcagcc tgatgatttt gcaacttatt actgccaaca gtataaacta 720
tatccgtgga cgttcggcca agggaccaag gtggatatca aa 762
<210> 195
<211> 124
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-01H02
<400> 195
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Phe Ile Arg Ser Lys Ala Tyr Gly Gly Thr Thr Glu Tyr Ala Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Ile
65 70 75 80
Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Arg Asp Pro Ala Lys Glu Arg Ser Arg Asn Trp Phe Ala
100 105 110
Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 196
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-01H02
<400> 196
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Lys Leu Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 197
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-01H02
<400> 197
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser
20 25
<210> 198
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-01H02
<400> 198
Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly
1 5 10 15
Phe
<210> 199
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-01H02
<400> 199
Glu Tyr Ala Ala Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp
1 5 10 15
Ser Lys Ser Ile Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 200
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-01H02
<400> 200
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 201
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-01H02
<400> 201
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 202
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-01H02
<400> 202
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 203
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-01H02
<400> 203
Ile Tyr Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
20 25 30
Pro Asp Asp Phe
35
<210> 204
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-01H02
<400> 204
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
1 5 10
<210> 205
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-01H11
<400> 205
Gly Tyr Thr Phe Ser Arg His Trp
1 5
<210> 206
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-01H11
<400> 206
Ile His Pro Ala Asp Ser Asp Thr
1 5
<210> 207
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-01H11
<400> 207
Ile Thr Glu Asp Ser Gly Arg Phe Asn
1 5
<210> 208
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-01H11
<400> 208
Gln Ser Ile Gly Asn Tyr
1 5
<210> 209
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-01H11
<400> 209
Ala Ser Ser
1
<210> 210
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-01H11
<400> 210
Gln Gln Thr Tyr Asn Thr Pro Pro Ile Thr
1 5 10
<210> 211
<211> 741
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-01H11
<400> 211
caggtgcagc tggtgcagtc tggagcagaa gtgaaaaagc ccggtgactc tctgaaaatc 60
tcttgtgagg cttctggcta cacgtttagt aggcattgga tcgtttgggt gcgccagatg 120
cccggaaaag gcctggagtg gatggggatg atccaccctg ctgactctga caccagatat 180
agcccgtcat tcggaggcca ggtcaccatg tcagtcgaca agtcagccac caccgcctac 240
ctgcagtgga gcagcctgaa ggcctcggac accgccatgt attactgtat tacagaagac 300
agtggtcgct tcaactgggg ccagggaacc ctggtcacag tctcctcagg cctcgggggc 360
ctcggaggag gaggtagtgg cggaggaggc tccggtggat ccagcggtgt gggttccgac 420
atccagatga cccagtctcc atcctccctc tctgcatctg taggagacag agtgaccatc 480
acttgccggg caagtcagag cattggcaac tatttaaatt ggtatcagca gaaacccggg 540
aaatccccta aactcctgat ctatgcttcg tccagtttac aaagtggaat tccatcaagg 600
ttcagtggca gtggatctgg gacagatttc aatctcacca tcagcaatct gcaacctgaa 660
gattttggaa cttattattg tcaacagact tacaataccc ctccgatcac cttcggccaa 720
gggacacgac tagaaatcaa a 741
<210> 212
<211> 116
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-01H11
<400> 212
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Glu Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Arg His
20 25 30
Trp Ile Val Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Met Ile His Pro Ala Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gly Gly Gln Val Thr Met Ser Val Asp Lys Ser Ala Thr Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ile Thr Glu Asp Ser Gly Arg Phe Asn Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 213
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-01H11
<400> 213
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ser Ser Ser Leu Gln Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Asn Leu Thr Ile Ser Asn Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Gly Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Tyr Asn Thr Pro Pro
85 90 95
Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 214
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-01H11
<400> 214
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Glu Ala Ser
20 25
<210> 215
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-01H11
<400> 215
Ile Val Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Met
<210> 216
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-01H11
<400> 216
Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Gly Gly Gln Val Thr Met Ser Val Asp Lys
1 5 10 15
Ser Ala Thr Thr Ala Tyr Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp
20 25 30
Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
35
<210> 217
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-01H11
<400> 217
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 218
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-01H11
<400> 218
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 219
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-01H11
<400> 219
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 220
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-01H11
<400> 220
Ile Tyr Ala Ser Ser Ser Leu Gln Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Asn Leu Thr Ile Ser Asn Leu Gln
20 25 30
Pro Glu Asp Phe
35
<210> 221
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-01H11
<400> 221
Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 222
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-02A02
<400> 222
Gly Asp Thr Leu Thr Tyr Arg Phe
1 5
<210> 223
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-02A02
<400> 223
Ile Thr Pro Phe Asn Asp Asn Thr
1 5
<210> 224
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-02A02
<400> 224
Ala Thr Gly Gly Gly Asn Asn Tyr Tyr Gly Met Glu Val
1 5 10
<210> 225
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-02A02
<400> 225
Lys Leu Gly Asp Lys Phe
1 5
<210> 226
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-02A02
<400> 226
Gln Asp Ala
1
<210> 227
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-02A02
<400> 227
Gln Ala Trp Asp Ser Ser Ser Val Val
1 5
<210> 228
<211> 747
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-02A02
<400> 228
cagatgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaaga ctgggtcctc agtgaaggtt 60
tcctgcaagg cttccggaga caccctcacc taccgcttcc tgcactgggt gcgacaggcc 120
cccggacaag cgcctgagtg gatgggatgg atcacacctt tcaatgataa caccaactac 180
gcacagaaat tccaggacag agtcaccatt accagggaca ggtctatgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gactggaggt 300
gggaacaatt attacggcat ggaggtctgg ggccaaggga ccccgatcac cgtctcctca 360
ggcctcgggg gcctcggagg aggaggtagt ggcggaggag gctccggtgg atccagcggt 420
gtgggttcct cctatgagct gactcagcca ctctcactgt ccgtgtcccc aggacagaca 480
gccagcatca cctgctctgg agataaattg ggagataaat ttacttcctg gtatcaacag 540
cagccaggcc agtcccctgt actggtcatc tatcaagatg ccaagcgacc ctcagggatc 600
cctgagcgat tctctggctc caactctggg agcacagcca ctctgaccat cagcgggacc 660
cagtctatgg atgaggctga ctattactgt caggcgtggg acagcagcag tgtggtgttc 720
ggcggaggga ccaagctgac cgtccta 747
<210> 229
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-02A02
<400> 229
Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Thr Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Asp Thr Leu Thr Tyr Arg
20 25 30
Phe Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Ala Pro Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Thr Pro Phe Asn Asp Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Arg Ser Met Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Gly Gly Gly Asn Asn Tyr Tyr Gly Met Glu Val Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Pro Ile Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 230
<211> 106
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-02A02
<400> 230
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Thr Ala Ser Ile Thr Cys Ser Gly Asp Lys Leu Gly Asp Lys Phe Thr
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Gln Pro Gly Gln Ser Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Gln Asp Ala Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Ser Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Thr Gln Ser Met
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ala Trp Asp Ser Ser Ser Val Val
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 231
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-02A02
<400> 231
Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Thr Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 232
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-02A02
<400> 232
Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Ala Pro Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Trp
<210> 233
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-02A02
<400> 233
Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Arg
1 5 10 15
Ser Met Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 234
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-02A02
<400> 234
Trp Gly Gln Gly Thr Pro Ile Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 235
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-02A02
<400> 235
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Leu Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Thr Ala Ser Ile Thr Cys Ser Gly Asp
20 25
<210> 236
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-02A02
<400> 236
Thr Ser Trp Tyr Gln Gln Gln Pro Gly Gln Ser Pro Val Leu Val Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 237
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-02A02
<400> 237
Ile Tyr Gln Asp Ala Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Asn Ser Gly Ser Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Thr Gln
20 25 30
Ser Met Asp Glu
35
<210> 238
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-02A02
<400> 238
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
1 5 10
<210> 239
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-02B01
<400> 239
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Gly
1 5
<210> 240
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-02B01
<400> 240
Ile Trp Phe Asp Gly Ser Asn Lys
1 5
<210> 241
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-02B01
<400> 241
Ala Lys Ala Ala His Leu Trp Gly Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 242
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-02B01
<400> 242
Gln Ser Val Ser Ser Tyr
1 5
<210> 243
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-02B01
<400> 243
Gly Ala Ser
1
<210> 244
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-02B01
<400> 244
Gln Gln Tyr Ala Thr Ser Pro Leu Ser
1 5
<210> 245
<211> 747
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-02B01
<400> 245
caggtgcagc tggtgcagtc tgggggaggt gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cgtctggatt caccttcagt aactatggca tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggaatg gatggcattt atatggtttg atggaagtaa taaattctat 180
gcagactccg tgaagggccg attcaccgtc tccagagaca attccaagaa caccctgttt 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gaaagcggcc 300
catttgtggg gggcttttga tatctggggc caagggacaa tggtcaccgt ctcctcaggc 360
ctcgggggcc tcggaggagg aggtagtggc ggaggaggct ccggtggatc cagcggtgtg 420
ggttccgaca tccagatgac ccagtctcca gacaccctgt ctttgtctcc aggggaaaga 480
gccaccctct cctgcagggc cagtcagagt gttagcagct acttagcctg gtaccaacag 540
aaacctggcc aggctcccag gctcctcatc tatggtgcat ccaacagggc cactggcatc 600
ccagccaggt tcagtggcag tgggtctggg acagacttcg ctctcaccat cggcagactg 660
gagcctgaag attttgcagt ttattactgt cagcagtatg ctacctcacc actcagtttc 720
ggcggaggga ccaaggtgga aatcaaa 747
<210> 246
<211> 119
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-02B01
<400> 246
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Ala Phe Ile Trp Phe Asp Gly Ser Asn Lys Phe Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ala Ala His Leu Trp Gly Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 247
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-02B01
<400> 247
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Asp Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ala Leu Thr Ile Gly Arg Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ala Thr Ser Pro Leu
85 90 95
Ser Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 248
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-02B01
<400> 248
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
<210> 249
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-02B01
<400> 249
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met Ala
1 5 10 15
Phe
<210> 250
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-02B01
<400> 250
Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Leu Phe Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 251
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-02B01
<400> 251
Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 252
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-02B01
<400> 252
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Asp Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 253
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-02B01
<400> 253
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 254
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-02B01
<400> 254
Ile Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ala Leu Thr Ile Gly Arg Leu Glu
20 25 30
Pro Glu Asp Phe
35
<210> 255
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-02B01
<400> 255
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 256
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-02B02
<400> 256
Gly Phe Thr Phe Asn Arg His Val
1 5
<210> 257
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-02B02
<400> 257
Ile Ser Asn Asp Gly Ser Lys Gln
1 5
<210> 258
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-02B02
<400> 258
Ala Ser Asp Lys Arg Gly Trp Thr Leu Asn Gly Met Asp Val
1 5 10
<210> 259
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-02B02
<400> 259
Ser Ser Asp Val Gly Ser Tyr Asn Leu
1 5
<210> 260
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-02B02
<400> 260
Glu Val Thr
1
<210> 261
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-02B02
<400> 261
Phe Ser Tyr Ala Gly Arg Gly Val Val
1 5
<210> 262
<211> 759
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-02B02
<400> 262
caggtgcagc tggtagagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaagtc cctgagactc 60
tcatgtgaag tcgctggatt caccttcaat agacatgtta tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg gatggctttt atttcaaatg atggaagtaa gcaagtctac 180
gcagactccg tgaagggacg cttcaccatc tccagagaca attccaagaa cactctgtat 240
ctgcagatga ccgacctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagtgataaa 300
agggggtgga ccctcaacgg tatggacgtc tggggccaag ggaccacggt caccgtctcc 360
tcaggcctcg ggggcctcgg aggaggaggt agtggcggag gaggctccgg tggatccagc 420
ggtgtgggtt cccagtctgc cctgactcag cctgcctccg tgtctgggtc tcctggacag 480
tcgatcacca tctcctgcac tggaaccagt agtgatgttg ggagttataa ccttgtctcc 540
tggtaccaac agcacccagg caaagccccc aaactcataa tttatgaggt cactaagcgg 600
ccctcagggg tttctgatcg cttctctgcc tccaagtctg ccaacacggc ctccctcaca 660
atctctgggc tccaggttga ggacgaggct gattattact gcttctcata tgcaggtcgt 720
ggcgtggtat tcggcggagg gaccaagctg accgtccta 759
<210> 263
<211> 121
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-02B02
<400> 263
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Lys
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Val Ala Gly Phe Thr Phe Asn Arg His
20 25 30
Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Ala Phe Ile Ser Asn Asp Gly Ser Lys Gln Val Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Thr Asp Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Asp Lys Arg Gly Trp Thr Leu Asn Gly Met Asp Val Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 264
<211> 109
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-02B02
<400> 264
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Ser Tyr
20 25 30
Asn Leu Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Ile Ile Tyr Glu Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Ala Ser Lys Ser Ala Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Val Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Phe Ser Tyr Ala Gly Arg
85 90 95
Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 265
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-02B02
<400> 265
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Lys
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Val Ala
20 25
<210> 266
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-02B02
<400> 266
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met Ala
1 5 10 15
Phe
<210> 267
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-02B02
<400> 267
Val Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Thr Asp Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 268
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-02B02
<400> 268
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 269
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-02B02
<400> 269
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr
20 25
<210> 270
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-02B02
<400> 270
Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Ile Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 271
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-02B02
<400> 271
Ile Tyr Glu Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Ala Ser Lys Ser Ala Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln
20 25 30
Val Glu Asp Glu
35
<210> 272
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-02B02
<400> 272
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
1 5 10
<210> 273
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-02B06
<400> 273
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 274
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-02B06
<400> 274
Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys
1 5
<210> 275
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-02B06
<400> 275
Met Arg Asp Arg Ser Thr Gly Glu Ile Pro His
1 5 10
<210> 276
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-02B06
<400> 276
Gln Thr Val Leu Asn Ser Phe Asn Asn Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 277
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-02B06
<400> 277
Trp Ala Ser
1
<210> 278
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-02B06
<400> 278
Gln Gln Tyr Ser Ser Thr Pro Pro Ile Thr
1 5 10
<210> 279
<211> 765
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-02B06
<400> 279
caggtgcagc tggtacagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatgcta tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagcaa caaatactat 180
gcaaactccg tgaagggccg attcatcatc tccagagaca attccaacaa tacggtgtat 240
ctgcaaatga acgccctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtat gagagatcgg 300
tcaacaggtg aaattcccca ctggggccag ggcaccctga tcaccgtctc ctcaggcctc 360
gggggcctcg gaggaggagg tagtggcgga ggaggctccg gtggatccag cggtgtgggt 420
tccgacatcc agatgaccca gtccccagac tccctggctg tgtctctggg cgagagggcc 480
actatcaact gcaagtccag ccagactgtt ttaaacagct tcaacaataa gaactactta 540
gcttggtacc agcagaaacc aggacagcct cctaaactgc tcatttactg ggcatctacc 600
cgggaatccg gggtccctga ccgattcagt ggcagcgggt ctgggacaga tttcactctc 660
accatcagca gcctgcaggc tgaagatgtg gcagtttatt actgtcagca atattctagt 720
actcctccga tcaccttcgg cccagggaca cgactggaaa tcaaa 765
<210> 280
<211> 118
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-02B06
<400> 280
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asn Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Ser Asn Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Met Arg Asp Arg Ser Thr Gly Glu Ile Pro His Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Ile Thr Val Ser Ser
115
<210> 281
<211> 114
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-02B06
<400> 281
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Thr Val Leu Asn Ser
20 25 30
Phe Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Tyr Ser Ser Thr Pro Pro Ile Thr Phe Gly Pro Gly Thr Arg Leu Glu
100 105 110
Ile Lys
<210> 282
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-02B06
<400> 282
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
<210> 283
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-02B06
<400> 283
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala
1 5 10 15
Val
<210> 284
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-02B06
<400> 284
Tyr Tyr Ala Asn Ser Val Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Asn Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ala Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 285
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-02B06
<400> 285
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Ile Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 286
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-02B06
<400> 286
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser
20 25
<210> 287
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-02B06
<400> 287
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 288
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-02B06
<400> 288
Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 289
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-02B06
<400> 289
Phe Gly Pro Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 290
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-02B08
<400> 290
Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn Ser Ala Ala
1 5 10
<210> 291
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-02B08
<400> 291
Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn
1 5
<210> 292
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-02B08
<400> 292
Ala Lys Ser Tyr Ala Gly Pro Ile Ser Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp
1 5 10 15
Val
<210> 293
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-02B08
<400> 293
Ser Ser Asp Ile Gly Arg Tyr Asn Leu
1 5
<210> 294
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-02B08
<400> 294
Gly Gly Ser
1
<210> 295
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-02B08
<400> 295
Ser Ser Tyr Ala Ser Ser Ser Thr Pro Tyr Val
1 5 10
<210> 296
<211> 784
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-02B08
<400> 296
caggtgcagc tgcagcagtc aggtccagga ctggtgaagc cctcgcagac cctctcactc 60
acctgtgcca tctccgggga cagtgtctct agcaacagtg ctgcttggaa ctggatcagg 120
cagtccccat cgagaggcct tgagtggctg ggaaggacat actacaggtc caagtggtat 180
aatgattatg cagtatctgt gaaaagtcga ataaccatca acccagacac atccaagaac 240
cagttctccc tgcagctgaa ctctgtgacc gccgtggaca cggccgtgta ttactgtgcg 300
aaatcctatg cggggcctat ctcttattac tactacggtc tggacgtctg gggccaaggg 360
accacggtca ccgtctcctc aggcctcggg ggcctcggag gaggaggtag tggcggagga 420
ggctccggtg gatccagcgg tgtgggttcc cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg 480
tctgggtctc ctggacagtc ggtcaccatc tcctgcactg gaaccagcag tgacattggt 540
cgttataacc ttgtctcctg gtaccaacag cacccaggca aagcccccaa actcatgatt 600
tatgggggca gtaagcggcc ctcaggggtt tctaatcgct tctctggctc caactctgac 660
aacacggcct ccctgacaat ctctgggctc cgggctgagg acgaggctga ttattactgc 720
agttcatatg caagcagcag caccccttat gtcttcggaa ctgggaccaa ggtcaccgtc 780
ctaa 784
<210> 297
<211> 127
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-02B08
<400> 297
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Ser Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala
50 55 60
Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp Thr Ser Lys Asn
65 70 75 80
Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Ala Val Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Lys Ser Tyr Ala Gly Pro Ile Ser Tyr Tyr Tyr Tyr
100 105 110
Gly Leu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 298
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-02B08
<400> 298
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Arg Tyr
20 25 30
Asn Leu Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Asn Ser Asp Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Arg Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Pro Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 299
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-02B08
<400> 299
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser
20 25
<210> 300
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-02B08
<400> 300
Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly
1 5 10 15
Arg
<210> 301
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-02B08
<400> 301
Asp Tyr Ala Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp Thr
1 5 10 15
Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Ala Val Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 302
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-02B08
<400> 302
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 303
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-02B08
<400> 303
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr
20 25
<210> 304
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-02B08
<400> 304
Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 305
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-02B08
<400> 305
Ile Tyr Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Asn Ser Asp Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Arg
20 25 30
Ala Glu Asp Glu
35
<210> 306
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-02B08
<400> 306
Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
1 5 10
<210> 307
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-02B10
<400> 307
Gly Gly Thr Phe Ser Arg Asn Thr
1 5
<210> 308
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-02B10
<400> 308
Ile Ile Pro Ile Phe His Ile Thr
1 5
<210> 309
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-02B10
<400> 309
Ala Arg Gly Ser Thr Thr Phe Pro Arg Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 310
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-02B10
<400> 310
Gln Ser Val Gly Ser Tyr
1 5
<210> 311
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-02B10
<400> 311
Asp Ala Ser
1
<210> 312
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-02B10
<400> 312
Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro Phe Thr
1 5
<210> 313
<211> 750
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-02B10
<400> 313
caggtgcagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agaaatactt tcagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttcatat aacaaattac 180
gcacagaaga tgcagggcag agtcacgatt tccgcggacg agtccacggg cacagtctag 240
atggagctga gcaggctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc aagaggatcg 300
actacttttc ccagatactt tgactactgg ggtcagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360
ggcctcgggg gcctcggagg aggaggtagt ggcggaggag gctccggtgg atccagcggt 420
gtgggttccg acatccagat gacccagtct ccagccaccc tgtctttgtc tccaggggaa 480
agagccaccc tctcctgcag ggccagtcag agtgttggca gctacttagc ctggtaccag 540
cagagacctg gccagcctcc caggctcctc gtctatgatg catccaacag ggccactggc 600
atcccagcca ggttcagtgg cagtgggtct gggacagact tcactctcac catcagcaga 660
ctggagcctg aagattttgc agtgtatttc tgtcagcagt atggtaggtc accattcact 720
ttcggccctg ggaccaaagt ggatatcaaa 750
<210> 314
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-02B10
<400> 314
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Arg Asn
20 25 30
Thr Phe Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe His Ile Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Met
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Ser Ala Asp Glu Ser Thr Gly Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Ser Thr Thr Phe Pro Arg Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 315
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-02B10
<400> 315
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Gly Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Pro Pro Arg Leu Leu Val
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Gly Arg Ser Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 316
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-02B10
<400> 316
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 317
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-02B10
<400> 317
Phe Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Gly
<210> 318
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-02B10
<400> 318
Asn Tyr Ala Gln Lys Met Gln Gly Arg Val Thr Ile Ser Ala Asp Glu
1 5 10 15
Ser Thr Gly Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 319
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-02B10
<400> 319
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 320
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-02B10
<400> 320
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 321
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-02B10
<400> 321
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Pro Pro Arg Leu Leu Val
1 5 10 15
Tyr
<210> 322
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-02B10
<400> 322
Val Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
20 25 30
Pro Glu Asp Phe
35
<210> 323
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-02B10
<400> 323
Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
1 5 10
<210> 324
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-02C06
<400> 324
Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr Gly
1 5
<210> 325
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-02C06
<400> 325
Ile Ser Gly Gly Gly Ser Ser Thr
1 5
<210> 326
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-02C06
<400> 326
Ala Arg Trp Gly Val Met Leu Ser Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 327
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-02C06
<400> 327
Tyr Ser Val Ser Pro Trp
1 5
<210> 328
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-02C06
<400> 328
Lys Ala Ser
1
<210> 329
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-02C06
<400> 329
Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Met Met Tyr Thr
1 5 10
<210> 330
<211> 747
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-02C06
<400> 330
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctgggaaatc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagc acctatggca tgacttgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggg attagtggtg ggggttctag cacaaactac 180
gcagactccg tgaagggccg cttcatcatt tctagagaca actctaacaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc aaggtgggga 300
gttatgcttt cctttgacta ctggggccag ggaaccccgg tcaccgtctc ctcaggcctc 360
gggggcctcg gaggaggagg tagtggcgga ggaggctccg gtggatccag cggtgtgggt 420
tccgacatcc agatgaccca gtctccttcc accctgcctg catctgtagg ggacagagtc 480
accatcactt gccgggccag ttacagtgtc agtccctggt tggcctggta tcagcagaaa 540
ccagggaaag cccctaaact cctgatctat aaggcatcta ctttagaaag tggggtccca 600
tcaaggttca gcggcagtgg atctgggaca gaattcactc tcaccatcag cagcctgcag 660
cctgatgatt ttgcaactta ttactgccaa cagtttaata gttatatgat gtacactttt 720
ggccagggga ccaagctgga aatcaaa 747
<210> 331
<211> 118
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-02C06
<400> 331
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Lys
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Gly Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Gly Gly Gly Ser Ser Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Ser Asn Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Val Met Leu Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Pro Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 332
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-02C06
<400> 332
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Pro Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Tyr Ser Val Ser Pro Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Met Met
85 90 95
Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 333
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-02C06
<400> 333
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Lys
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
<210> 334
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-02C06
<400> 334
Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser
1 5 10 15
Gly
<210> 335
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-02C06
<400> 335
Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Asn Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 336
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-02C06
<400> 336
Trp Gly Gln Gly Thr Pro Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 337
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-02C06
<400> 337
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Pro Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 338
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-02C06
<400> 338
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 339
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-02C06
<400> 339
Ile Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
20 25 30
Pro Asp Asp Phe
35
<210> 340
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-02C06
<400> 340
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 341
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-02C07
<400> 341
Gly Val Thr Phe Ser Gly Tyr Val
1 5
<210> 342
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-02C07
<400> 342
Ile Ile Pro Leu Ile Asp Val Glu
1 5
<210> 343
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-02C07
<400> 343
Ala Lys Ser Val Val Arg Gly Leu Asp Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Phe Asp
1 5 10 15
Val
<210> 344
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-02C07
<400> 344
Asn Ile Gly Ser Lys Ser
1 5
<210> 345
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-02C07
<400> 345
Tyr Asp Gly
1
<210> 346
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-02C07
<400> 346
Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp Gln Gly Val
1 5 10
<210> 347
<211> 765
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-02C07
<400> 347
caggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaggaggc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaaga cttcgggagt caccttcagc ggctatgttc tgagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacacg gccttgagtg gatgggacgg atcatccctt taattgacgt ggaaaactat 180
gcacgggagt tccagggtag aatgaagatc accgcagaca agtccacgaa tacagtctac 240
atggaactga acaacctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gaaatcggtc 300
gtacggggtc ttgactacta ctactacggt ttcgacgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct caggcctcgg gggcctcgga ggaggaggta gtggcggagg aggctccggt 420
ggatccagcg gtgtgggttc ctcctatgag ctgacacaac caccctcact gtcagtggcc 480
ccaggaaaga cggccaggat tacctgtggg ggaaacaaca ttggaagtaa aagtgtgcac 540
tggtaccagc agaagccagg ccaggcccct agactggtca cttattatga tggcaaccgg 600
ccctcaggga tccctgagcg attctctggc tccaactctg gaaacacggc caccctaatc 660
atcagcaggg tcgaagccgg ggatgaggcc gactattact gtcaggtgtg ggatagtagt 720
agtgatcagg gggtcttcgg aactgggacc aaggtcaccg tccta 765
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Val Leu Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Met
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Gly Arg Ile Ile Pro Leu Ile Asp Val Glu Asn Tyr Ala Arg Glu Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Met Lys Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
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Ala Lys Ser Val Val Arg Gly Leu Asp Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Phe Asp
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Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Ile Gly Ser Lys Ser Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Val Thr Tyr
35 40 45
Tyr Asp Gly Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Ile Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp Gln
85 90 95
Gly Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
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<213> Artificial Sequence
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Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Arg Arg Pro Gly Ser
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<213> Artificial Sequence
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Arg
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<213> Artificial Sequence
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Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
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<223> L-FR2 of A56-02C07
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Tyr
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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gtcaccgtct cctcaggcct cgggggcctc ggaggaggag gtagtggcgg aggaggctcc 420
ggtggatcca gcggtgtggg ttcccagtct gccctgactc agcctgcctc cgtgtctggg 480
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aaccttgtct cctggtacca acaacaccca ggcaaagccc ccaaactcat gatttatgag 600
gtcactaagc ggccctcagg ggtttctaat cgcttctctg gctccaagtc tggcaacacg 660
gcctccctga ccatctctgg gctccaggct gaggacgagg ctgattatta ctgcagctca 720
tatacaagca gcagcactta tgtcttcgga actgggacca aggtcaccgt ccta 774
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Asn Leu Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
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65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
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100 105 110
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<213> Artificial Sequence
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<223> H-FR3 of A56-02C09
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<223> L-FR3 of A56-02C09
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<223> L-CDR3 of A56-02D04
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gatacagcca ccctctcctg cagggccagt cagagtgtta ccagcaccta cttagcctgg 540
tatcagcaga aacctggcca ggctcccagg ctcctcatct ctggtgcatc cagcagggcc 600
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-02D04
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1 5 10 15
Arg
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-02D04
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-02D04
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Asp Thr Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser
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<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-02D04
<400> 389
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1 5 10 15
Ser
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-02E01
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Ile Thr Pro Phe Asn Gly Asn Thr
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-02E01
<400> 394
Ala Ser Ser Arg Gly Arg Phe Gln Trp Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 395
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-02E01
<400> 395
Gln Ser Val Lys Asn Asn Asp
1 5
<210> 396
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-02E01
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Gly Thr Ser
1
<210> 397
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-02E01
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Gln Gln Phe Gly Gly Ser Pro Pro Trp Thr
1 5 10
<210> 398
<211> 753
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-02E01
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caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
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ctcgggggcc tcggaggagg aggtagtggc ggaggaggct ccggtggatc cagcggtgtg 420
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cagaaacctg gccaggctcc caggctcctc atctatggta cgtccaccag ggccactggc 600
atccccgaca ggttcagtgg cagtgggtct gggacagact tcactctcac catcagcagc 660
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acgttcggcc aagggaccaa ggtggatatc aaa 753
<210> 399
<211> 119
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-02E01
<400> 399
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Ser Ser Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Thr Pro Phe Asn Gly Asn Thr Ser Tyr Ala Gln Ile Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Arg Ser Met Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Ser Arg Gly Arg Phe Gln Trp Phe Asp Tyr Trp Gly Pro Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 400
<211> 109
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-02E01
<400> 400
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Thr Ser Gln Ser Val Lys Asn Asn
20 25 30
Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Gly Thr Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Gly Gly Ser Pro
85 90 95
Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 401
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-02E01
<400> 401
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 402
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-02E01
<400> 402
Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Trp
<210> 403
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-02E01
<400> 403
Ser Tyr Ala Gln Ile Phe Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Arg
1 5 10 15
Ser Met Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 404
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-02E01
<400> 404
Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 405
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-02E01
<400> 405
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Thr Ser
20 25
<210> 406
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-02E01
<400> 406
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 407
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-02E01
<400> 407
Ile Tyr Gly Thr Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu
20 25 30
Pro Glu Asp Phe
35
<210> 408
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-02E01
<400> 408
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
1 5 10
<210> 409
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-02E05
<400> 409
Gly Phe Thr Ser Gly Asp Tyr Ala
1 5
<210> 410
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-02E05
<400> 410
Ile Gly Ser Ser Gly Tyr Gly Gly Pro Thr
1 5 10
<210> 411
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-02E05
<400> 411
Ala Arg Asp Leu Gly Phe Gly Tyr Ser Gly Tyr Arg Asn Ala Phe Asp
1 5 10 15
Ser
<210> 412
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-02E05
<400> 412
Gly Gly Thr Phe Ala Ser Asp Ser
1 5
<210> 413
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-02E05
<400> 413
Glu Gly Asp
1
<210> 414
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-02E05
<400> 414
Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Asn Gln Val
1 5
<210> 415
<211> 777
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-02E05
<400> 415
caggtgcagc tggtagagtc tgggggaggc tgggtacagc cagggcggtc cctgagactc 60
tcctgtacag tctctggatt cacgtctggt gattatgctg tgagttgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtaggtgtc attggaagca gcggttatgg tgggccaaca 180
aaatatgctg cgtctgtgga aggcagattc accatctcaa gagatgattc caaagacatc 240
gcctatctgc aaatgaacag tctgagagcc gaggacacgg ccgtgtatta ctgtgcgaga 300
gacttagggt tcggatatag tggctacagg aatgcttttg atagttgggg ccaagggaca 360
atggtcaccg tctcctcagg cctcgggggc ctcggaggag gaggtagtgg cggaggaggc 420
tccggtggat ccagcggtgt gggttcccag ctcgtgctga ctcagcccca ctctgtgtcg 480
gagtctccgg ggaagacggt aaccatctcc tgcaccggca gtggtggcac ctttgccagc 540
gactcggtgc agtggtaccg gcagcgcccg ggcagtgccc ccaccactgt gatctatgag 600
ggtgaccgaa gagcctctgg ggtccctggt cggttctctg gctccatcga cagctcctcc 660
aactctgcct ccctcaccat ctctggactg aaggctgaag acgaggctga ctactactgt 720
cagtcttatg atagcagcaa tcaggtcttc ggaactggga ccaaggtcac cgtccta 777
<210> 416
<211> 126
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-02E05
<400> 416
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Trp Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Val Ser Gly Phe Thr Ser Gly Asp Tyr
20 25 30
Ala Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Val Ile Gly Ser Ser Gly Tyr Gly Gly Pro Thr Lys Tyr Ala Ala
50 55 60
Ser Val Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asp Ile
65 70 75 80
Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Arg Asp Leu Gly Phe Gly Tyr Ser Gly Tyr Arg Asn Ala
100 105 110
Phe Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 417
<211> 110
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-02E05
<400> 417
Gln Leu Val Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Glu Ser Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Gly Gly Thr Phe Ala Ser Asp
20 25 30
Ser Val Gln Trp Tyr Arg Gln Arg Pro Gly Ser Ala Pro Thr Thr Val
35 40 45
Ile Tyr Glu Gly Asp Arg Arg Ala Ser Gly Val Pro Gly Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Ile Asp Ser Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly
65 70 75 80
Leu Lys Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser
85 90 95
Ser Asn Gln Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 418
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-02E05
<400> 418
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Trp Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Val Ser
20 25
<210> 419
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-02E05
<400> 419
Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly
1 5 10 15
Val
<210> 420
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-02E05
<400> 420
Lys Tyr Ala Ala Ser Val Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp
1 5 10 15
Ser Lys Asp Ile Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 421
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-02E05
<400> 421
Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 422
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-02E05
<400> 422
Gln Leu Val Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Glu Ser Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser
20 25
<210> 423
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-02E05
<400> 423
Val Gln Trp Tyr Arg Gln Arg Pro Gly Ser Ala Pro Thr Thr Val Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 424
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-02E05
<400> 424
Ile Tyr Glu Gly Asp Arg Arg Ala Ser Gly Val Pro Gly Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Ile Asp Ser Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly
20 25 30
Leu Lys Ala Glu
35
<210> 425
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-02E05
<400> 425
Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
1 5 10
<210> 426
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-02F05
<400> 426
Gly Phe Ser Phe Ser Gly Tyr Ala
1 5
<210> 427
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-02F05
<400> 427
Ile Trp Phe Asp Gly Ser Thr Lys
1 5
<210> 428
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-02F05
<400> 428
Ala Arg Met Phe Arg Gly Ser Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 429
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-02F05
<400> 429
Gln Ser Leu Val His Arg Asp Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 430
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-02F05
<400> 430
Lys Ile Ser
1
<210> 431
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-02F05
<400> 431
Met Gln Ala Thr Arg Leu Trp Thr
1 5
<210> 432
<211> 753
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-02F05
<400> 432
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggt gtggtccagc ctggggcgtc cctgaaactc 60
tcctgtgcag cgtccggatt cagcttcagt ggctatgcca tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcatgg ggctggagtg ggtggcagtt atctggtttg atggaagtac taaatactat 180
gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tcccgagaca attccaagaa tacacttttt 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaatgttt 300
aggggttcct ttgactactg gggccaggga gccctggtca ccgtctcctc aggcctcggg 360
ggcctcggag gaggaggtag tggcggagga ggctccggtg gatccagcgg tgtgggttcc 420
gatattgtga tgacccagac tccactctcc tcacctgtca cccttggaca gccggcctcc 480
atctcctgta ggtctagtca gagcctcgta caccgtgatg gaaacacata cttgagttgg 540
tttcaacaga ggccaggcca gtctccaaga ctcctgattt ctaagatttc taaccgctcc 600
tctgaagtct cagacaggtt cagtggcagt ggggcaggga cagaattcac gctgaagatc 660
agcagggtgg aagctgagga tgtcggaatt tattactgca tgcaggctac acgattgtgg 720
accttcggcc aagggaccaa ggtggagatc aaa 753
<210> 433
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-02F05
<400> 433
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Met Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Phe Asp Gly Ser Thr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Met Phe Arg Gly Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Ala Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 434
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-02F05
<400> 434
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Ser Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Arg
20 25 30
Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Arg Leu Leu Ile Ser Lys Ile Ser Asn Arg Ser Ser Glu Val Ser
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Glu Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile Tyr Tyr Cys Met Gln Ala
85 90 95
Thr Arg Leu Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 435
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-02F05
<400> 435
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
<210> 436
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-02F05
<400> 436
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Met Gly Leu Glu Trp Val Ala
1 5 10 15
Val
<210> 437
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-02F05
<400> 437
Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Leu Phe Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 438
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-02F05
<400> 438
Trp Gly Gln Gly Ala Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 439
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-02F05
<400> 439
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Ser Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser
20 25
<210> 440
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-02F05
<400> 440
Leu Ser Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Arg Leu Leu Ile
1 5 10 15
Ser
<210> 441
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-02F05
<400> 441
Ile Ser Lys Ile Ser Asn Arg Ser Ser Glu Val Ser Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ala Gly Thr Glu Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 442
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-02F05
<400> 442
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 443
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-03A09
<400> 443
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Ala
1 5
<210> 444
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-03A09
<400> 444
Ile Ser Ser Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 445
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-03A09
<400> 445
Ala Arg Leu Arg Pro Phe Ser Lys Ala Asp Ser Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 446
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-03A09
<400> 446
Gln Ser Val Leu Ser Ser Ser Ser Asn Lys Asn Phe
1 5 10
<210> 447
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-03A09
<400> 447
Trp Ala Ser
1
<210> 448
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-03A09
<400> 448
Gln Gln Tyr Tyr Ser Ser Pro Leu Thr
1 5
<210> 449
<211> 771
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-03A09
<400> 449
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60
tcctgcagtg cctctggatt cacctttagt gactatgcca tgagctgggt ccgccaggcc 120
ccagggaagc ggctggagtg ggtctcagcg attagtagta gtggtggtag cacacactac 180
gcagacttcg tgaagggccg gttcaccatt tccagagaca aatccaagaa cacactcttt 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagactgaga 300
cctttttcta aggccgattc ttttgactac tggggccttg gaaccctgat caccgtctcc 360
tcaggcctcg ggggcctcgg aggaggaggt agtggcggag gaggctccgg tggatccagc 420
ggtgtgggtt ccgacatcca gatgacccag tctccagact ccctggctgt gtctctgggc 480
gagagggcca ccatcaactg caagtccagt cagagtgttt tatccagctc tagcaataag 540
aacttcttag cttggtacca gcaaaaacca ggacagcctc ctaagctgct catttactgg 600
gcatctgccc gggaatccgg ggtccctgac cgattcagtg gcagcgggtc tgggacagat 660
ttcactctca ccatcagcag cctgcaggct gaagatgtgg cagtttatta ctgtcagcaa 720
tattatagta gtccgctcac tttcggcgga gggaccaagg tggagatcaa a 771
<210> 450
<211> 121
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-03A09
<400> 450
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ser Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Ser Ser Gly Gly Ser Thr His Tyr Ala Asp Phe Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Lys Ser Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Leu Arg Pro Phe Ser Lys Ala Asp Ser Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Leu Gly Thr Leu Ile Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 451
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-03A09
<400> 451
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Ser Ser
20 25 30
Ser Ser Asn Lys Asn Phe Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Ala Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Tyr Tyr Ser Ser Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile
100 105 110
Lys
<210> 452
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-03A09
<400> 452
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ser Ala Ser
20 25
<210> 453
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-03A09
<400> 453
Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Arg Leu Glu Trp Val Ser
1 5 10 15
Ala
<210> 454
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-03A09
<400> 454
His Tyr Ala Asp Phe Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Lys
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Leu Phe Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 455
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-03A09
<400> 455
Trp Gly Leu Gly Thr Leu Ile Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 456
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-03A09
<400> 456
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser
20 25
<210> 457
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-03A09
<400> 457
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 458
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-03A09
<400> 458
Ile Tyr Trp Ala Ser Ala Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 459
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-03A09
<400> 459
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 460
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-03B03
<400> 460
Gly Gly Asn Phe Asn Ser Tyr Ala
1 5
<210> 461
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-03B03
<400> 461
Ile Ile Pro Phe Phe Thr Thr Pro
1 5
<210> 462
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-03B03
<400> 462
Val Thr Arg Gly Ala
1 5
<210> 463
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-03B03
<400> 463
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 464
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-03B03
<400> 464
Asp Val Thr
1
<210> 465
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-03B03
<400> 465
Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp His Tyr Val
1 5 10
<210> 466
<211> 738
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-03B03
<400> 466
caggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggttaaagtc 60
tcctgcaaga cttctggcgg caacttcaac agctatgcta tcaactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaagc atcatcccat tctttactac accaaactac 180
gcacagaaat tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgaa cacagccttc 240
atggaattga gcagtctggg atctgaggac acggccgtgt attactgtgt gactagaggc 300
gcgcagggcc ggggaaccct ggtcaccgtc tcctcaggcc tcgggggcct cggaggagga 360
ggtagtggcg gaggaggctc cggtggatcc agcggtgtgg gttccaattt tatgctgact 420
caacccgcct ccgtgtctgg gtcccctgga cagtcgatca ccatctcctg cactggaagc 480
agcagcgacg ttggtggtta taactatgtc tcctggtacc aacagcaccc aggcaaagcc 540
ccccaactca tcatttatga tgtcactaag cggccctcag gggtttctaa tcgcttctct 600
ggctccaact ctggaaacac ggccaccctg accatcagca gggtcgaagc cggggatgag 660
gccgactatt actgccaggt gtgggatagt agtagtgatc actatgtctt cggaactggg 720
accaaggtca ccgtccta 738
<210> 467
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-03B03
<400> 467
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Gly Asn Phe Asn Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ser Ile Ile Pro Phe Phe Thr Thr Pro Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Asn Thr Ala Phe
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Gly Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Thr Arg Gly Ala Gln Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
100 105 110
<210> 468
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-03B03
<400> 468
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Gln Leu
35 40 45
Ile Ile Tyr Asp Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val
65 70 75 80
Glu Ala Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser
85 90 95
Ser Asp His Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 469
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-03B03
<400> 469
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser
20 25
<210> 470
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-03B03
<400> 470
Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Ser
<210> 471
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-03B03
<400> 471
Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu
1 5 10 15
Ser Thr Asn Thr Ala Phe Met Glu Leu Ser Ser Leu Gly Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 472
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-03B03
<400> 472
Gln Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 473
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-03B03
<400> 473
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser
20 25
<210> 474
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-03B03
<400> 474
Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Gln Leu Ile Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 475
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-03B03
<400> 475
Ile Tyr Asp Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu
20 25 30
Ala Gly Asp Glu
35
<210> 476
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-03B03
<400> 476
Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
1 5 10
<210> 477
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-03D02
<400> 477
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 478
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-03D02
<400> 478
Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys
1 5
<210> 479
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-03D02
<400> 479
Ala Arg Asp Ala Ala Ala Met Ile Ser Pro His Gly Met Asp Val
1 5 10 15
<210> 480
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-03D02
<400> 480
Gln Ser Leu Val His Ser Asp Gly Asn Ile Tyr
1 5 10
<210> 481
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-03D02
<400> 481
Lys Val Ser
1
<210> 482
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-03D02
<400> 482
Met Gln Gly Thr Gln Trp Pro Pro Thr
1 5
<210> 483
<211> 771
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-03D02
<400> 483
cagatgcagc tggtggagtc tggaggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatgcta tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactac 180
gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagatgcg 300
gctgcgatga taagtccgca cggtatggac gtctggggcc aagggaccac ggtcaccgtc 360
tcctcaggcc tcgggggcct cggaggagga ggtagtggcg gaggaggctc cggtggatcc 420
agcggtgtgg gttccgatat tgtgatgacc cagtctccac tctccctgcc cgtcaccctt 480
ggacagccgg cctccatctc ctgcaggtct agtcaaagcc tcgtacacag tgatggaaac 540
atctacttga attggtttca acagaggcca ggccagtctc ccaggcgcct aatttataag 600
gtttctaaca ggggctctgg ggtcccagac agattcagcg gcagtgggtc aggcactgat 660
ttcacactgg aaatcagcag ggtggaggct gaggatgtag cggtttatta ctgcatgcaa 720
ggtacacagt ggcctccgac ttttggccag gggaccaagc tggaaatcaa a 771
<210> 484
<211> 122
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-03D02
<400> 484
Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Ala Ala Ala Met Ile Ser Pro His Gly Met Asp Val Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 485
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-03D02
<400> 485
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Asp Gly Asn Ile Tyr Leu Asn Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Gly Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Glu Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Met Gln Gly
85 90 95
Thr Gln Trp Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 486
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-03D02
<400> 486
Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
<210> 487
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-03D02
<400> 487
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala
1 5 10 15
Val
<210> 488
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-03D02
<400> 488
Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 489
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-03D02
<400> 489
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 490
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-03D02
<400> 490
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser
20 25
<210> 491
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-03D02
<400> 491
Leu Asn Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Arg Arg Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 492
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-03D02
<400> 492
Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Gly Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Glu Ile Ser Arg Val Glu
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 493
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-03D02
<400> 493
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 494
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-03H11
<400> 494
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 495
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-03H11
<400> 495
Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys
1 5
<210> 496
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-03H11
<400> 496
Thr Pro Phe Gln His Asp Ser Val Pro Arg Arg Gly Ala Phe Asp Leu
1 5 10 15
<210> 497
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-03H11
<400> 497
Gln Ser Leu Leu Ser Ser Ser Asn Asn Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 498
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-03H11
<400> 498
Trp Ala Ser
1
<210> 499
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-03H11
<400> 499
Gln Gln Tyr Tyr Thr Ser Pro Arg Thr
1 5
<210> 500
<211> 777
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-03H11
<400> 500
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatgcta tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactac 180
gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtac tccatttcaa 300
catgatagtg ttccgcgccg tggtgctttt gatctctggg gccaagggac aaagatcacc 360
gtctcctcag gcctcggggg cctcggagga ggaggtagtg gcggaggagg ctccggtgga 420
tccagcggtg tgggttccga catccagatg acccagtctc catcctccct ggctgtgtct 480
ctgggcgaga gggccaccat caactgcaag tccagccaga gtcttttatc cagctccaac 540
aataagaact acttagcttg gtaccaacac aagccaggac agcctcctaa gcttctcatt 600
tactgggcat ctacccggga atccggggtc cctgaccgat tcagtggcag cgggtctggg 660
acagatttca ctctcaccat cagcagcctg caggctgaag atgtggcagt ttattactgt 720
cagcaatatt atacttctcc tcggacgttc ggccaaggga ccaaggtgga aatcaaa 777
<210> 501
<211> 123
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-03H11
<400> 501
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Pro Phe Gln His Asp Ser Val Pro Arg Arg Gly Ala Phe Asp Leu
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Lys Ile Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 502
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-03H11
<400> 502
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Ser Ser
20 25 30
Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Tyr Tyr Thr Ser Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile
100 105 110
Lys
<210> 503
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-03H11
<400> 503
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
<210> 504
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-03H11
<400> 504
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala
1 5 10 15
Val
<210> 505
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-03H11
<400> 505
Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 506
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-03H11
<400> 506
Trp Gly Gln Gly Thr Lys Ile Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 507
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-03H11
<400> 507
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser
20 25
<210> 508
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-03H11
<400> 508
Leu Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 509
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-03H11
<400> 509
Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 510
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-03H11
<400> 510
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 511
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-07A09
<400> 511
Gly Gly Thr Phe Thr Arg Asp Ala
1 5
<210> 512
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-07A09
<400> 512
Ile Ile Pro Leu Ile Asp Thr Ala
1 5
<210> 513
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-07A09
<400> 513
Ala Arg Gly Glu Met Tyr Ser Arg Ser Trp Tyr Trp Gly Ala Phe Asp
1 5 10 15
Leu
<210> 514
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-07A09
<400> 514
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 515
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-07A09
<400> 515
Asp Val Thr
1
<210> 516
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-07A09
<400> 516
Ser Ser Tyr Ser Ser Ser Thr Phe Tyr Val
1 5 10
<210> 517
<211> 771
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-07A09
<400> 517
caggtgcagc tggtagagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcttc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg tttctggagg caccttcacc agggatgcta tcagttgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaagg atcatccctc tcattgatac agcaaattac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240
atgagtctaa gcagcctggg atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaggcgag 300
atgtatagca ggagctggta ctggggggct tttgatctct ggggccaagg gacaatggtc 360
accgtctcct caggcctcgg gggcctcgga ggaggaggta gtggcggagg aggctccggt 420
ggatccagcg gtgtgggttc caattttatg ctgactcagc ccgcctccgt gtctgggtcc 480
cctggacagt cgatcaccat ctcctgcact ggaagcagca gcgacgttgg tggttataac 540
tatgtctcct ggtaccaaca gcacccaggc aaagcccccc aactcatcat ttatgatgtc 600
actaagcggc cctcaggggt ttctaatcgc ttctccggct ccaagtctgg caactcggcc 660
tccctgacta tctctggact ccaggctgag gacgaggctg attattactg cagctcatac 720
agcagcagca ctttttacgt cttcggaact gggaccaagg tcaccgtcct a 771
<210> 518
<211> 124
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-07A09
<400> 518
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Gly Thr Phe Thr Arg Asp
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Ile Pro Leu Ile Asp Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Ser Leu Ser Ser Leu Gly Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Glu Met Tyr Ser Arg Ser Trp Tyr Trp Gly Ala Phe Asp
100 105 110
Leu Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 519
<211> 110
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-07A09
<400> 519
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Gln Leu
35 40 45
Ile Ile Tyr Asp Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ser Ser Ser
85 90 95
Thr Phe Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 520
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-07A09
<400> 520
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser
20 25
<210> 521
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-07A09
<400> 521
Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Arg
<210> 522
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-07A09
<400> 522
Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Ser Leu Ser Ser Leu Gly Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 523
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-07A09
<400> 523
Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 524
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-07A09
<400> 524
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser
20 25
<210> 525
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-07A09
<400> 525
Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Gln Leu Ile Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 526
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-07A09
<400> 526
Ile Tyr Asp Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Lys Ser Gly Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln
20 25 30
Ala Glu Asp Glu
35
<210> 527
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-07A09
<400> 527
Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
1 5 10
<210> 528
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-08A01
<400> 528
Gly Phe Ser Phe Ser Asn Tyr Gly
1 5
<210> 529
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-08A01
<400> 529
Val Ser Phe Asp Gly Ile Lys Lys
1 5
<210> 530
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-08A01
<400> 530
Ala Lys Ala Pro Val Tyr Cys Ser Gly Asp Cys Arg Phe Ala Phe Asp
1 5 10 15
Phe
<210> 531
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-08A01
<400> 531
Gln Ser Leu Leu His Ser Asp Gly Lys Thr Tyr
1 5 10
<210> 532
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-08A01
<400> 532
Glu Val Ser
1
<210> 533
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-08A01
<400> 533
Met Gln Gly Ser Tyr Thr
1 5
<210> 534
<211> 768
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-08A01
<400> 534
caggtgcagc tggtggagtc agggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cagtttcagt aattatggca tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctgcagtg ggtggcaacc gtctcttttg atggaataaa aaaacattat 180
tcagactccg tgaagggccg tttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctccaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gaaagctccc 300
gtctattgta gtggtgactg ccgttttgca tttgatttct ggggcctagg gacaacggtc 360
accgtctcct caggcctcgg gggcctcgga ggaggaggta gtggcggagg aggctccggt 420
ggatccagcg gtgtgggttc cgatattgtg atgacccaga ctccactctc tctgtccgtc 480
acccctggac agtcggcctc catctcctgc aagtctagtc agagcctcct gcatagtgat 540
ggaaagacct atttgtattg gtacttgcag aggccaggcc agtctccaca actcctgatc 600
tatgaagttt ccaaccggtt ctctggagtg ccagataggt tcagtggcag cgggtcaggg 660
acagatttca cactgaatat cagccgggtg gaggctgagg atgttgggat ttattactgc 720
atgcaaggtt cgtacacttt tggccagggg accaaggtag atatcaaa 768
<210> 535
<211> 124
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-08A01
<400> 535
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Gln Trp Val
35 40 45
Ala Thr Val Ser Phe Asp Gly Ile Lys Lys His Tyr Ser Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ala Pro Val Tyr Cys Ser Gly Asp Cys Arg Phe Ala Phe Asp
100 105 110
Phe Trp Gly Leu Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 536
<211> 109
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-08A01
<400> 536
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Ser Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile Tyr Tyr Cys Met Gln Gly
85 90 95
Ser Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 537
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-08A01
<400> 537
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
<210> 538
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-08A01
<400> 538
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Gln Trp Val Ala
1 5 10 15
Thr
<210> 539
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-08A01
<400> 539
His Tyr Ser Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 540
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-08A01
<400> 540
Trp Gly Leu Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 541
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-08A01
<400> 541
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Ser Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser
20 25
<210> 542
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-08A01
<400> 542
Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 543
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-08A01
<400> 543
Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile Ser Arg Val Glu
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 544
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-08A01
<400> 544
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
1 5 10
<210> 545
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-10A01
<400> 545
Gly Tyr Thr Phe Thr His Tyr Asp
1 5
<210> 546
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-10A01
<400> 546
Met Asn Pro Asn Lys Gly Asn Thr
1 5
<210> 547
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-10A01
<400> 547
Ala Arg Glu Arg Val Pro Asn Ala Met Val Gly Tyr Phe Ser Phe Tyr
1 5 10 15
Gly Met Asp Val
20
<210> 548
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-10A01
<400> 548
Asp Ile Thr Arg Lys Ser
1 5
<210> 549
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-10A01
<400> 549
Tyr Asp Arg
1
<210> 550
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-10A01
<400> 550
Gln Val Trp Asp Thr Asn Ser Val Val
1 5
<210> 551
<211> 768
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-10A01
<400> 551
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaaga cctctggata caccttcacc cattatgata tcaactgggt gcgacaggcc 120
tctggacaag ggcttgagtg gatgggacgg atgaacccga ataagggaaa cacaggctat 180
gctcagaagt tccagggcag agtcaccatg accagggacg cctcgacaga cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgagaaaga 300
gtaccgaatg ctatggtggg ttacttctcc ttctacggga tggacgtctg gggccaaggg 360
accacggtca ccgtctcctc aggcctcggg ggcctcggag gaggaggtag tggcggagga 420
ggctccggtg gatccagcgg tgtgggttcc tcctatgagc tgactcaggc accctcattg 480
tcagtggccc caggagagac ggccactatt acctgtgggg gaaacgacat tacaagaaag 540
agtgtgcact ggtaccagca gaggccaggc caggcccctg tgctggtcat ctattatgat 600
agagcccggc cctcagggat ccctgagcga ttctctggct ccaactctga gaacacggcc 660
agcctgacca tcagcagggt cgaggccggg gatgaggccg actattactg tcaggtgtgg 720
gatactaata gtgtggtttt tggcggaggg accaagctga ccgtccta 768
<210> 552
<211> 127
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-10A01
<400> 552
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Thr His Tyr
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Ser Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Met Asn Pro Asn Lys Gly Asn Thr Gly Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Ala Ser Thr Asp Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Arg Val Pro Asn Ala Met Val Gly Tyr Phe Ser Phe Tyr
100 105 110
Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 553
<211> 106
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-10A01
<400> 553
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Ala Pro Ser Leu Ser Val Ala Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Ala Thr Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asp Ile Thr Arg Lys Ser Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Tyr Asp Arg Ala Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
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65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Thr Asn Ser Val Val
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 554
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-10A01
<400> 554
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser
20 25
<210> 555
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-10A01
<400> 555
Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Ser Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Arg
<210> 556
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-10A01
<400> 556
Gly Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Ala
1 5 10 15
Ser Thr Asp Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 557
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-10A01
<400> 557
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 558
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-10A01
<400> 558
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Ala Pro Ser Leu Ser Val Ala Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Ala Thr Ile Thr Cys Gly Gly Asn
20 25
<210> 559
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-10A01
<400> 559
Val His Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 560
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-10A01
<400> 560
Ile Tyr Tyr Asp Arg Ala Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Asn Ser Glu Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu
20 25 30
Ala Gly Asp Glu
35
<210> 561
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-10A01
<400> 561
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
1 5 10
<210> 562
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-11B10
<400> 562
Gly Phe Thr Phe Ala Asn Ala Trp
1 5
<210> 563
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-11B10
<400> 563
Ile Tyr Ser Thr Ser Asp Gly Gly Ala Thr
1 5 10
<210> 564
<211> 24
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-11B10
<400> 564
Ala Lys Asp Arg Gly Met Asp Asn Ile His Thr Gly Gln Asn Ser Gly
1 5 10 15
Trp Ser Phe Gly Trp Phe Asp Pro
20
<210> 565
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-11B10
<400> 565
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 566
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-11B10
<400> 566
Asp Val Thr
1
<210> 567
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-11B10
<400> 567
Ser Ser Tyr Ala Gly Ser Tyr Thr Ser Val
1 5 10
<210> 568
<211> 798
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-11B10
<400> 568
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtaaagc ctggggagtc tcttagactc 60
tcctgtgaag cctctggttt cactttcgct aacgcctgga tgagttggtt ccgccaggcg 120
ccagggaagg ggctggagtg ggttggccgt atttatagca catctgatgg tggagccaca 180
gactacgctg ctcccgttga gggccgattt accatctcca gagatgactc aaaaaacacg 240
ctgtttctgc aaatgaacag tctgagagcc gaggacacgg ccgtgtatta ctgtgcgaaa 300
gatcggggca tggataacat tcacacgggt cagaacagtg gctggtcgtt tggttggttc 360
gacccctggg gccagggaac cctggtcacc gtctcctcag gcctcggggg cctcggagga 420
ggaggtagtg gcggaggagg ctccggtgga tccagcggtg tgggttccca gtctgccctg 480
actcagcctc gctcagtgtc cgggtctcct ggacagtcag tcaccatctc ctgcactgga 540
accagcagtg atgttggtgg ttataactat gtctcctggt accaacagca cccaggcaaa 600
gcccccaaac tcatgattta tgatgtcact aagcggccct caggggtccc tgatcgcttc 660
tctggctcca agtctggcaa cacggcctcc ctgaccatct ctgggctcca ggctgaggat 720
gaggctgatt attactgcag ctcatatgca ggcagctaca cttctgtctt cggaactggg 780
accaaggtca ccgtccta 798
<210> 569
<211> 133
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-11B10
<400> 569
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ala Asn Ala
20 25 30
Trp Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Ile Tyr Ser Thr Ser Asp Gly Gly Ala Thr Asp Tyr Ala Ala
50 55 60
Pro Val Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr
65 70 75 80
Leu Phe Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Lys Asp Arg Gly Met Asp Asn Ile His Thr Gly Gln Asn
100 105 110
Ser Gly Trp Ser Phe Gly Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu
115 120 125
Val Thr Val Ser Ser
130
<210> 570
<211> 110
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-11B10
<400> 570
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Arg Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Ser
85 90 95
Tyr Thr Ser Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 571
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-11B10
<400> 571
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser
20 25
<210> 572
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-11B10
<400> 572
Met Ser Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly
1 5 10 15
Arg
<210> 573
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-11B10
<400> 573
Asp Tyr Ala Ala Pro Val Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Leu Phe Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 574
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-11B10
<400> 574
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 575
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-11B10
<400> 575
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Arg Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr
20 25
<210> 576
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-11B10
<400> 576
Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 577
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-11B10
<400> 577
Ile Tyr Asp Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln
20 25 30
Ala Glu Asp Glu
35
<210> 578
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-11B10
<400> 578
Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
1 5 10
<210> 579
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-11C04
<400> 579
Gly Phe Thr Val Ser Asn Ala Trp
1 5
<210> 580
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-11C04
<400> 580
Ile Lys Ser Lys Thr Asp Gly Gly Thr Thr
1 5 10
<210> 581
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-11C04
<400> 581
Ala Lys Asp Pro Asp Ala Glu Asn Thr Gly Ala
1 5 10
<210> 582
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-11C04
<400> 582
Asp Ile Gly Ser Lys Ser
1 5
<210> 583
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-11C04
<400> 583
Ser Asp Ser
1
<210> 584
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-11C04
<400> 584
Gln Val Trp Asp Asn Gly Ser Asp His Pro Gly Val
1 5 10
<210> 585
<211> 756
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-11C04
<400> 585
caggtgcagc tggtacagtc ggggggaggc ttggtaaagc ctggggggtc ccttagactc 60
tcctgtgcag tcagtggatt cactgtcagt aatgcctgga tgatgtggtt ccgccaggta 120
ccagggaagg ggctggagtg ggttggccgt attaaaagca aaactgatgg tgggacaaca 180
gagtacgctg cacccgtgaa aggcagattc agcatctcag gagacgactc aaaaaacaca 240
ctgtatctcc aaatgaacag tctgagagcc gaggacacgg ccgtgtatta ctgtgcaaaa 300
gatccagacg ccgagaatac aggggcactg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360
ggcctcgggg gcctcggagg aggaggtagt ggcggaggag gctccggtgg atccagcggt 420
gtgggttcca attttatgct gactcagccc ccctcagtgt cagtggcccc aggaaagacg 480
gccgggatta cctgtggggg agacgacatt ggaagtaaaa gtgtgcattg gtaccagcag 540
aggccaggcc aggcccctgt cctggtcatc tcttccgata gcgaccggcc ctcagggatc 600
cctgagcgat tctctggctc caattctggg aacacggcca ccctgaccat caccagagtc 660
gaagacgggg atgaggccga ctattactgt caggtgtggg ataatggtag tgatcatccc 720
ggggtcttcg gaactgggac caaggtcacc gtccta 756
<210> 586
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-11C04
<400> 586
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Val Ser Asn Ala
20 25 30
Trp Met Met Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Ile Lys Ser Lys Thr Asp Gly Gly Thr Thr Glu Tyr Ala Ala
50 55 60
Pro Val Lys Gly Arg Phe Ser Ile Ser Gly Asp Asp Ser Lys Asn Thr
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Lys Asp Pro Asp Ala Glu Asn Thr Gly Ala Leu Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 587
<211> 109
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-11C04
<400> 587
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Ala Gly Ile Thr Cys Gly Gly Asp Asp Ile Gly Ser Lys Ser Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Ser
35 40 45
Ser Asp Ser Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Thr Arg Val Glu Asp Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Asn Gly Ser Asp His
85 90 95
Pro Gly Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105
<210> 588
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-11C04
<400> 588
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser
20 25
<210> 589
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-11C04
<400> 589
Met Met Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly
1 5 10 15
Arg
<210> 590
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-11C04
<400> 590
Glu Tyr Ala Ala Pro Val Lys Gly Arg Phe Ser Ile Ser Gly Asp Asp
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 591
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-11C04
<400> 591
Leu Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 592
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-11C04
<400> 592
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Ala Gly Ile Thr Cys Gly Gly Asp
20 25
<210> 593
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-11C04
<400> 593
Val His Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile
1 5 10 15
Ser
<210> 594
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-11C04
<400> 594
Ile Ser Ser Asp Ser Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Thr Arg Val Glu
20 25 30
Asp Gly Asp Glu
35
<210> 595
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-11C04
<400> 595
Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
1 5 10
<210> 596
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-15A01
<400> 596
Gly Phe Thr Phe Thr Lys Tyr Thr
1 5
<210> 597
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-15A01
<400> 597
Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys
1 5
<210> 598
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-15A01
<400> 598
Thr Pro Phe Gln His Asp Ser Val Pro Arg Arg Gly Ala Phe Asp Leu
1 5 10 15
<210> 599
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-15A01
<400> 599
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 600
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-15A01
<400> 600
Asp Val Asp
1
<210> 601
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-15A01
<400> 601
Ser Ser Ser Arg Pro Ser Ser Thr Pro Arg Val
1 5 10
<210> 602
<211> 771
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-15A01
<400> 602
cagatgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcact aaatatacta tgctctgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcactt atatcatatg atggaagcaa caaaaattac 180
gcagattccg tgaagggccg attcaccatt tcccgagacg attccaagag cacgctattt 240
ctgcaaatga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtac tccatttcaa 300
catgatagtg ttccgcgccg tggtgctttt gatctctggg gccaagggac aatggtcacc 360
gtctcctcag gcctcggggg cctcggagga ggaggtagtg gcggaggagg ctccggtgga 420
tccagcggtg tgggttccca gtctgccctg actcagcctg cctccgtgtc tgggtctcct 480
ggacagtcga tcgccatctc ctgcactggg actagcagtg acgttggtgg ttataactat 540
gtctcctggt accaacaaca cccaggcaaa gcccccaaac tcgtgattta tgatgttgat 600
aagcggccct caggggtttc taatcgcttc tctggctcca agtctgccaa cacggcctcc 660
ctgaccatct ctgggctcca ggctgacgac gaggctgatt attactgcag ctcatctaga 720
cccagcagca ctcctcgggt cttcggaact gggaccaagg tcaccgtcct a 771
<210> 603
<211> 123
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-15A01
<400> 603
Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Lys Tyr
20 25 30
Thr Met Leu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Leu Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Asn Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Pro Phe Gln His Asp Ser Val Pro Arg Arg Gly Ala Phe Asp Leu
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 604
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-15A01
<400> 604
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Ala Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Val Ile Tyr Asp Val Asp Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Ala Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Asp Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Ser Arg Pro Ser
85 90 95
Ser Thr Pro Arg Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 605
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-15A01
<400> 605
Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
<210> 606
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-15A01
<400> 606
Met Leu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala
1 5 10 15
Leu
<210> 607
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-15A01
<400> 607
Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp
1 5 10 15
Ser Lys Ser Thr Leu Phe Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 608
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-15A01
<400> 608
Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 609
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-15A01
<400> 609
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Ala Ile Ser Cys Thr Gly Thr
20 25
<210> 610
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-15A01
<400> 610
Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Val Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 611
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-15A01
<400> 611
Ile Tyr Asp Val Asp Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Lys Ser Ala Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln
20 25 30
Ala Asp Asp Glu
35
<210> 612
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-15A01
<400> 612
Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
1 5 10
<210> 613
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-16E02
<400> 613
Gly Ile Ala Phe Ser Arg Tyr Ala
1 5
<210> 614
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-16E02
<400> 614
Ile Gly Ser Thr Gly Thr Thr
1 5
<210> 615
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-16E02
<400> 615
Ala Thr His Phe Gly Phe Phe Ser Lys
1 5
<210> 616
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-16E02
<400> 616
Gln Ser Leu Leu His Arg Asn Gly Tyr Asn Tyr
1 5 10
<210> 617
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-16E02
<400> 617
Leu Gly Ser
1
<210> 618
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-16E02
<400> 618
Met Gln Ala Leu Glu Thr Arg Trp Thr
1 5
<210> 619
<211> 750
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-16E02
<400> 619
caggtgcagc tggtggagtc tgggggagac ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgtag actctggaat cgcctttagc agatatgcca tgaactgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaagt attggtagta ctggtaccac atactacgca 180
gactccgtga agggccggtt caccatctcc agagacagat ccaagaacac gctgtatctg 240
caaatgaaca gtctgagagc cgaggacacg gccgtgtatt actgtgccac acactttgga 300
ttctttagca agtggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctcaggcct cgggggcctc 360
ggaggaggag gtagtggcgg aggaggctcc ggtggatcca gcggtgtggg ttccgatatt 420
gtgatgaccc agactccact ctccctgccc gtcacccctg gagagccggc ctccatctcc 480
tgcaggtcta gtcagagcct cctgcataga aatggataca attatttgga ttggtacctg 540
cagaagccag ggcagtctcc acagctcctg atctatctgg gttctaatcg ggcctccggg 600
gtccctgaca ggttcagtgg cagtggatca ggcacagatt tcacactgaa tatcagcaga 660
gtggaggctg aggatgttgg ggtttattat tgcatgcaag cccttgaaac tcggtggacg 720
ttcggccaag ggaccaaggt ggatatcaaa 750
<210> 620
<211> 115
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-16E02
<400> 620
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Asp Ser Gly Ile Ala Phe Ser Arg Tyr
20 25 30
Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Gly Ser Thr Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Arg Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Thr His Phe Gly Phe Phe Ser Lys Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser
115
<210> 621
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-16E02
<400> 621
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Arg
20 25 30
Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala
85 90 95
Leu Glu Thr Arg Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105 110
<210> 622
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-16E02
<400> 622
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Asp Ser
20 25
<210> 623
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-16E02
<400> 623
Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser
1 5 10 15
Ser
<210> 624
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-16E02
<400> 624
Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Arg
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 625
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-16E02
<400> 625
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 626
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-16E02
<400> 626
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser
20 25
<210> 627
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-16E02
<400> 627
Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 628
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-16E02
<400> 628
Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile Ser Arg Val Glu
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 629
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-16E02
<400> 629
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
1 5 10
<210> 630
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-18C03
<400> 630
Gly Gly Thr Leu Ser Ser Tyr Pro
1 5
<210> 631
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-18C03
<400> 631
Ile Asn Pro Asn Gly Gly Ala Thr
1 5
<210> 632
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-18C03
<400> 632
Ala Gln Leu Gly Ser Ser Gly Gly Gly
1 5
<210> 633
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-18C03
<400> 633
Ser Leu Arg Lys Tyr His
1 5
<210> 634
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-18C03
<400> 634
Gly Lys Asn
1
<210> 635
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-18C03
<400> 635
Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn Asp Leu Arg Val
1 5 10
<210> 636
<211> 744
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-18C03
<400> 636
caggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaaga cttctggagg cactttaagc agttatccca tcacctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcctgagtg gatgggaatt atcaacccca atggtggcgc cacaaactac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accagggaca cgtccacggg cacagtctac 240
atggaactga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcagttgggt 300
agcagtggag ggggtttggg ccagggaacc ctggtcaccg tctcctcagg cctcgggggc 360
ctcggaggag gaggtagtgg cggaggaggc tccggtggat ccagcggtgt gggttcctcc 420
tatgagctga cacaggaccc tgctgtgtct gtggccttgg gacagacagt caggatcaca 480
tgccaaggag acagcctcag aaaatatcat gcaagctggt accagcagaa gccaggacag 540
gcccctgtac ttgtcatcta tggtaaaaac aaccggccct cagggatccc aggccgattc 600
tctggctcca gctcaggaaa cacagcttcc ttgaccatca ctggggctca ggcggaagat 660
gaggctgact attactgtaa ctcccgggac agcagtggta acgatctcag ggtgttcggc 720
ggagggacca agctgaccgt ccta 744
<210> 637
<211> 116
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-18C03
<400> 637
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Gly Thr Leu Ser Ser Tyr
20 25 30
Pro Ile Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Pro Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Asn Pro Asn Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Gly Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Gln Leu Gly Ser Ser Gly Gly Gly Leu Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 638
<211> 109
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-18C03
<400> 638
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Lys Tyr His Ala
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Gly Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn Asp
85 90 95
Leu Arg Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 639
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-18C03
<400> 639
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser
20 25
<210> 640
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-18C03
<400> 640
Ile Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Pro Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Ile
<210> 641
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-18C03
<400> 641
Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr
1 5 10 15
Ser Thr Gly Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 642
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-18C03
<400> 642
Leu Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 643
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-18C03
<400> 643
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp
20 25
<210> 644
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-18C03
<400> 644
Ala Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 645
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-18C03
<400> 645
Ile Tyr Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Gly Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln
20 25 30
Ala Glu Asp Glu
35
<210> 646
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-18C03
<400> 646
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
1 5 10
<210> 647
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-18G02
<400> 647
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly
1 5
<210> 648
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-18G02
<400> 648
Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys
1 5
<210> 649
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-18G02
<400> 649
Ala Arg Met Arg Trp Ala Val Ala Gly Met Gly Ala Phe Glu Ile
1 5 10 15
<210> 650
<211> 7
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-18G02
<400> 650
Gln Ser Val Thr Ser Ser Tyr
1 5
<210> 651
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-18G02
<400> 651
Gly Ala Ser
1
<210> 652
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-18G02
<400> 652
Gln Gln Arg Ser Ser Trp Pro Pro Leu Thr
1 5 10
<210> 653
<211> 762
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-18G02
<400> 653
cagatgcagc tggtgcagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatggca tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactat 180
gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gaggatgcga 300
tgggccgtgg ctgggatggg ggcttttgaa atctggggcc aagggaccac ggtcaccgtc 360
tcctcaggcc tcgggggcct cggaggagga ggtagtggcg gaggaggctc cggtggatcc 420
agcggtgtgg gttccgacat ccagatgacc cagtctccag gcaccctgtc tttgtctcca 480
ggggaaagcg ccaccctctc ctgcagggcc agtcagagtg ttaccagtag ttacttagcc 540
tggtatcagc agaaacctgg ccaggctccc aaagtcctca tctatggtgc atccggcagg 600
gccactggca ccccagccag gttcagtggc ggtgggtctg ggacagactt cactctcacc 660
atcagcagcc tagagcctga agattttgca gtttattact gtcagcagcg tagcagctgg 720
cctccgctca ctttcggccc tgggtccaaa gtggagatca aa 762
<210> 654
<211> 122
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-18G02
<400> 654
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Met Arg Trp Ala Val Ala Gly Met Gly Ala Phe Glu Ile Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 655
<211> 109
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-18G02
<400> 655
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Ser Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Thr Ser Ser
20 25 30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Lys Val Leu
35 40 45
Ile Tyr Gly Ala Ser Gly Arg Ala Thr Gly Thr Pro Ala Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Gly Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ser Trp Pro
85 90 95
Pro Leu Thr Phe Gly Pro Gly Ser Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 656
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-18G02
<400> 656
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
<210> 657
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-18G02
<400> 657
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala
1 5 10 15
Val
<210> 658
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-18G02
<400> 658
Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 659
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-18G02
<400> 659
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 660
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-18G02
<400> 660
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Ser Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 661
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-18G02
<400> 661
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Lys Val Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 662
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-18G02
<400> 662
Ile Tyr Gly Ala Ser Gly Arg Ala Thr Gly Thr Pro Ala Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu
20 25 30
Pro Glu Asp Phe
35
<210> 663
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-18G02
<400> 663
Phe Gly Pro Gly Ser Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 664
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-20A05
<400> 664
Gly Gly Ser Phe Arg Ser Asn Ala
1 5
<210> 665
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-20A05
<400> 665
Ile Ile Pro Leu Ala Asn Arg Ser
1 5
<210> 666
<211> 13
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-20A05
<400> 666
Ala Arg Leu Asp Asp Asn Val Ser Trp Gly Leu Asp Pro
1 5 10
<210> 667
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-20A05
<400> 667
Gln Asp Ile Ser Arg Arg
1 5
<210> 668
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-20A05
<400> 668
Ala Ala Ser
1
<210> 669
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-20A05
<400> 669
Gln Gln Ser Ser Asn Val Pro Leu Thr
1 5
<210> 670
<211> 750
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-20A05
<400> 670
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtggtgaagc ccgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgtaagg cttctggagg cagcttcaga agcaatgctg tcagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag gtcttgagtg gataggaggc atcatccctc tggctaatag gtcagtctac 180
gcacagaagt tccagggcag actcaccatt accgcggaca aatccacggg tacagcctac 240
atggagttga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc cagattggat 300
gacaatgtct cttggggact cgacccctgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360
ggcctcgggg gcctcggagg aggaggtagt ggcggaggag gctccggtgg atccagcggt 420
gtgggttccg acatccagat gacccagtct ccatccttcc tgtctgcttc tgtgggagac 480
agagtcaaca tcacttgccg ggccagtcag gacattagca gacgtttagc ctggtatcag 540
cagaaaccag ggaaagcccc taagctcctg atctctgctg catccagttt gcaaagtggg 600
gtcccatcaa ggttcagcgg cagtggatct gggacagatt tcaccctcac catcagcagt 660
ctgcaacctg aagattttgc aacttactac tgtcaacaga gttccaatgt ccccctcact 720
ttcggcggag ggaccaaggt ggaaatcaaa 750
<210> 671
<211> 120
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-20A05
<400> 671
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Ser Phe Arg Ser Asn
20 25 30
Ala Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Leu Ala Asn Arg Ser Val Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Leu Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Gly Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Leu Asp Asp Asn Val Ser Trp Gly Leu Asp Pro Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 672
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-20A05
<400> 672
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Asn Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Arg Arg
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Ser Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Val Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 673
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-20A05
<400> 673
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 674
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-20A05
<400> 674
Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly
1 5 10 15
Gly
<210> 675
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-20A05
<400> 675
Val Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Leu Thr Ile Thr Ala Asp Lys
1 5 10 15
Ser Thr Gly Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 676
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-20A05
<400> 676
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 677
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-20A05
<400> 677
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Asn Ile Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 678
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-20A05
<400> 678
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Ser
<210> 679
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-20A05
<400> 679
Ile Ser Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
20 25 30
Pro Glu Asp Phe
35
<210> 680
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-20A05
<400> 680
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 681
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-20G03
<400> 681
Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 682
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-20G03
<400> 682
Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala
1 5
<210> 683
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-20G03
<400> 683
Ala Thr Lys Gly Gly Gly Asn Ser Arg Ser Phe Leu Arg Tyr Phe Tyr
1 5 10 15
Gly Leu Asp Val
20
<210> 684
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-20G03
<400> 684
Gln Ser Leu Val His Ser Asp Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 685
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-20G03
<400> 685
Lys Val Ser
1
<210> 686
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-20G03
<400> 686
Met Gln Gly Thr His Trp Pro Trp Thr
1 5
<210> 687
<211> 786
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-20G03
<400> 687
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgaa cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc aacaaaaggg 300
ggcggcaaca gccggagttt tcttcggtac ttttacggtt tggacgtctg gggccaaggg 360
accacggtca ccgtctcctc aggcctcggg ggcctcggag gaggaggtag tggcggagga 420
ggctccggtg gatccagcgg tgtgggttcc gatattgtga tgacccagac tccactctcc 480
ctgcccgtcg cccttggaca gccggcctcc atctcctgca ggtctagtca aagcctcgta 540
cacagtgatg gaaacaccta cttgaattgg tttcagcaga ggccaggcca atctccaagg 600
cgcctgattt ataaggtttc taaccgggac tctggggtcc cagacagatt cagcggcagt 660
gggtcaggca ctgatttcac actgaaaatc agcagggtgg aggctgagga tgttggggtt 720
tattactgca tgcaaggtac acactggccg tggacgttcg gccaagggac caaggtagaa 780
atcaaa 786
<210> 688
<211> 127
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-20G03
<400> 688
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Lys Gly Gly Gly Asn Ser Arg Ser Phe Leu Arg Tyr Phe Tyr
100 105 110
Gly Leu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 689
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-20G03
<400> 689
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ala Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Asn Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Asp Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Gly
85 90 95
Thr His Trp Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 690
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-20G03
<400> 690
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 691
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-20G03
<400> 691
Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Gly
<210> 692
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-20G03
<400> 692
Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu
1 5 10 15
Ser Thr Asn Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 693
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-20G03
<400> 693
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 694
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-20G03
<400> 694
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ala Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser
20 25
<210> 695
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-20G03
<400> 695
Leu Asn Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Arg Arg Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 696
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-20G03
<400> 696
Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 697
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-20G03
<400> 697
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 698
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-20G12
<400> 698
Gly Phe Asn Phe Asn Thr Tyr Ala
1 5
<210> 699
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-20G12
<400> 699
Ile Gly Gly Gly Gly Gly Asn Thr
1 5
<210> 700
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-20G12
<400> 700
Ala Thr Arg Gly Gly Trp Tyr Val Asn Asp
1 5 10
<210> 701
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-20G12
<400> 701
Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Ala
1 5
<210> 702
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-20G12
<400> 702
Ser Asn Thr
1
<210> 703
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-20G12
<400> 703
Gln Ser Tyr Asp Asn Ser Leu Ser Asp Ser Val Val
1 5 10
<210> 704
<211> 756
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-20G12
<400> 704
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggg ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60
tcctgtacag cctctggatt caactttaat acctatgcca tgagctgggt ccgccagcct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaact attgggggtg gtggtgggaa cacattttac 180
gcagattccg tgaggggccg gttcaccatc tccagagaca attccgagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gactcgaggt 300
ggctggtacg tcaatgactg gggccgcgga accctggtca ccgtctcctc aggcctcggg 360
ggcctcggag gaggaggtag tggcggagga ggctccggtg gatccagcgg tgtgggttcc 420
cagctcgtgc tgactcagcc gccctcagtg tctggggccc caggacagag ggtcaccatc 480
tcctgcactg ggagtagctc caacatcggg gcaggttatg ctgtacactg gtaccagcag 540
attccaggaa cagcccccaa actcctcatc tatagtaaca ccaataggcc ctcaggggtc 600
cctgaccgat tctctggctc caagtctggc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 660
caggctgagg atgaggctga ttattactgc cagtcctatg acaacagcct gagtgattct 720
gtggtattcg gcggagggac caagctgacc gtccta 756
<210> 705
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-20G12
<400> 705
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Phe Asn Thr Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Thr Ile Gly Gly Gly Gly Gly Asn Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Glu Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Arg Gly Gly Trp Tyr Val Asn Asp Trp Gly Arg Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 706
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-20G12
<400> 706
Gln Leu Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Ala Val His Trp Tyr Gln Gln Ile Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Ser Asn Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Asn Ser
85 90 95
Leu Ser Asp Ser Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 707
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-20G12
<400> 707
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser
20 25
<210> 708
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-20G12
<400> 708
Met Ser Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser
1 5 10 15
Thr
<210> 709
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-20G12
<400> 709
Phe Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Glu Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 710
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-20G12
<400> 710
Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 711
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-20G12
<400> 711
Gln Leu Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser
20 25
<210> 712
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-20G12
<400> 712
Val His Trp Tyr Gln Gln Ile Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 713
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-20G12
<400> 713
Ile Tyr Ser Asn Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Gln
20 25 30
Ala Glu Asp Glu
35
<210> 714
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-20G12
<400> 714
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
1 5 10
<210> 715
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-21B10
<400> 715
Gly Asp Thr Phe Ser Thr Tyr Ala
1 5
<210> 716
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-21B10
<400> 716
Ile Ile Pro Arg Leu Gly Ile Ala
1 5
<210> 717
<211> 19
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-21B10
<400> 717
Ala Ala Asp Pro Leu Trp Phe Gly Asp Phe Ile Arg Gly Gly Arg Ala
1 5 10 15
Phe Asn Ile
<210> 718
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-21B10
<400> 718
Gln Ser Ile Ser Thr Trp
1 5
<210> 719
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-21B10
<400> 719
Lys Ala Ser
1
<210> 720
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-21B10
<400> 720
Gln Gln Tyr Tyr Asn Tyr Pro Tyr Thr
1 5
<210> 721
<211> 768
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-21B10
<400> 721
cagatgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgagaaagc ctgggtcttc ggtgacggtc 60
tcctgcaagg ctcctggaga caccttcagt acttatgcta tcagttgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgactg gatggggagg atcatccctc gccttggtat tgcaaaaaat 180
gcaccggagt tccaggacag agtctcgatc accgcggaca aatccacgaa tacagtgcat 240
atggagttga gaaacctcag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc agcagacccc 300
ctatggttcg gggactttat tcgaggggga cgtgctttca atatctgggg ccaagggaca 360
atgatcaccg tctcctcagg cctcgggggc ctcggaggag gaggtagtgg cggaggaggc 420
tccggtggat ccagcggtgt gggttccgac atccagatga cccagtctcc ttccaccctg 480
tctgcatcta taggagacag agtcaccatc acttgccggg ccagtcagag tattagtacc 540
tggttggcct ggtatcagca gaaaccaggg aaagccccaa agctcctgat ctataaggcg 600
tctactatag aaagtggggt cccatcaagg ttcagcggca gcggatctga cacagaattc 660
actctcacca tcaccaacct gcagcctgat gactctgcaa cttattactg ccaacaatat 720
tataattatc cgtacacttt tggccagggg accaagctgg agatcaaa 768
<210> 722
<211> 126
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-21B10
<400> 722
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Thr Val Ser Cys Lys Ala Pro Gly Asp Thr Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Asp Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Ile Pro Arg Leu Gly Ile Ala Lys Asn Ala Pro Glu Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Ser Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Asn Thr Val His
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Asn Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Pro Leu Trp Phe Gly Asp Phe Ile Arg Gly Gly Arg Ala
100 105 110
Phe Asn Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Ile Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 723
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-21B10
<400> 723
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Ile Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Thr Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Thr Ile Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Asp Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Thr Asn Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Ser Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Tyr Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 724
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-21B10
<400> 724
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Thr Val Ser Cys Lys Ala Pro
20 25
<210> 725
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-21B10
<400> 725
Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Asp Trp Met Gly
1 5 10 15
Arg
<210> 726
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-21B10
<400> 726
Lys Asn Ala Pro Glu Phe Gln Asp Arg Val Ser Ile Thr Ala Asp Lys
1 5 10 15
Ser Thr Asn Thr Val His Met Glu Leu Arg Asn Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 727
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-21B10
<400> 727
Trp Gly Gln Gly Thr Met Ile Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 728
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-21B10
<400> 728
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Ile Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 729
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-21B10
<400> 729
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
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<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-21B10
<400> 730
Ile Tyr Lys Ala Ser Thr Ile Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Asp Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Thr Asn Leu Gln
20 25 30
Pro Asp Asp Ser
35
<210> 731
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-21B10
<400> 731
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 732
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-21F02
<400> 732
Gly Phe Thr Phe Asp Tyr Ser Ala
1 5
<210> 733
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-21F02
<400> 733
Ile Ser Gly Asp Gly Gly Thr Ala
1 5
<210> 734
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-21F02
<400> 734
Ala Arg Asp Arg Trp Arg Trp Met Asp Asp Tyr Tyr Gly Met Asp Val
1 5 10 15
<210> 735
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-21F02
<400> 735
Gln Gly Ile Thr Gly Tyr
1 5
<210> 736
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-21F02
<400> 736
Lys Ser Ser
1
<210> 737
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-21F02
<400> 737
Gln Gln Tyr Asp Ser Tyr Pro Trp Thr
1 5
<210> 738
<211> 759
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-21F02
<400> 738
cagatgcagc tggtgcagtc ggggggaacc gtggtacagc ctggggagtc cctgagactc 60
tcctgtgcaa cctctggatt cacctttgat tattctgcca tgcactgggt ccgtcaagct 120
ccagggaagg gtctggagtg ggtctctctc atcagtgggg atggtggtac cgcatattat 180
gcagactctg tgaagggccg attcaccgtc tccagagaca acagcaaaaa ctccctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagacagg 300
tggcgctgga tggacgacta ctacggtatg gacgtctggg gccaagggac cacggtcacc 360
gtctcctcag gcctcggggg cctcggagga ggaggtagtg gcggaggagg ctccggtgga 420
tccagcggtg tgggttccga catccagatg acccagtctc catcctccct gtctacttct 480
gtaggagaca gagtcaccat cacttgccgg gccagtcagg gcattaccgg ttattttgcc 540
tggtatcagc agaaaccagg gaaagcccct aacctcctcc tctataagtc atctatctta 600
caaagtggag tcccatctag attcagcggc agtggatctg ggacagaatt cactctcacc 660
atcaacagcc tgcaggctga tgattttgca acttattact gccaacagta tgatagttat 720
ccgtggacgt tcggccaagg gaccaaggtg gatatcaaa 759
<210> 739
<211> 123
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-21F02
<400> 739
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Thr Val Val Gln Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Thr Ser Gly Phe Thr Phe Asp Tyr Ser
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Leu Ile Ser Gly Asp Gly Gly Thr Ala Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Arg Trp Arg Trp Met Asp Asp Tyr Tyr Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 740
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-21F02
<400> 740
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Thr Gly Tyr
20 25 30
Phe Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Asn Leu Leu Leu
35 40 45
Tyr Lys Ser Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Ala
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Ser Tyr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 741
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-21F02
<400> 741
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Thr Val Val Gln Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Thr Ser
20 25
<210> 742
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-21F02
<400> 742
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser
1 5 10 15
Leu
<210> 743
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-21F02
<400> 743
Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 744
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-21F02
<400> 744
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 745
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-21F02
<400> 745
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 746
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-21F02
<400> 746
Phe Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Asn Leu Leu Leu
1 5 10 15
Tyr
<210> 747
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-21F02
<400> 747
Leu Tyr Lys Ser Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln
20 25 30
Ala Asp Asp Phe
35
<210> 748
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-21F02
<400> 748
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
1 5 10
<210> 749
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-21H04
<400> 749
Gly Phe Thr Phe Asn Phe Tyr Gly
1 5
<210> 750
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-21H04
<400> 750
Ile Ser Tyr Glu Gly Ser Lys Lys
1 5
<210> 751
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-21H04
<400> 751
Ala Arg Gly Phe Asp Pro Asp Tyr Leu Arg Gly Asn Asn Arg Tyr Phe
1 5 10 15
Gly Leu Asp Val
20
<210> 752
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-21H04
<400> 752
Glu Asp Ile Ser Arg Gln
1 5
<210> 753
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-21H04
<400> 753
Gly Ala Ser
1
<210> 754
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-21H04
<400> 754
Gln Lys Ala Asn Asn Phe Pro Tyr Thr
1 5
<210> 755
<211> 771
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-21H04
<400> 755
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggt gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcaat ttctatggta tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggtaagg ggctagagtg gctggcagct atatcatatg aaggaagtaa gaagtactac 180
gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgccggat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaggcttc 300
gatcccgatt accttcgggg taataatcgt tacttcggtc tggacgtctg gggccaaggg 360
accacggtca ccgtctcctc aggcctcggg ggcctcggag gaggaggtag tggcggagga 420
ggctccggtg gatccagcgg tgtgggttcc gacatccaga tgacccagtc tccatcttcc 480
gtgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc atcacttgtc gggcgagtga ggacattagt 540
aggcagttag cctggtatca gcagaaacca gggaaagccc ctaaactcct gatctatggt 600
gcttctagtt tgcaaagtgg agtcccatca aggttcagcg gcagtggatt tgggacagaa 660
ttcactctta ccatcaacag cctgcagcct gaagattttg caacttacta ttgtcaaaag 720
gctaataatt tcccgtacac ttttggccaa gggaccaagg tggatatcaa a 771
<210> 756
<211> 127
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-21H04
<400> 756
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Phe Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Tyr Glu Gly Ser Lys Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Pro Asp
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Phe Asp Pro Asp Tyr Leu Arg Gly Asn Asn Arg Tyr Phe
100 105 110
Gly Leu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 757
<211> 107
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-21H04
<400> 757
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asp Ile Ser Arg Gln
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Phe Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Ala Asn Asn Phe Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 758
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-21H04
<400> 758
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
<210> 759
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-21H04
<400> 759
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Ala
1 5 10 15
Ala
<210> 760
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-21H04
<400> 760
Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Pro Asp Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 761
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-21H04
<400> 761
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 762
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-21H04
<400> 762
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 763
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-21H04
<400> 763
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 764
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-21H04
<400> 764
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Phe Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln
20 25 30
Pro Glu Asp Phe
35
<210> 765
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-21H04
<400> 765
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
1 5 10
<210> 766
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-22G10
<400> 766
Gly Phe Met Phe Lys Asn Tyr Ala
1 5
<210> 767
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-22G10
<400> 767
Val Ser Gly Ser Gly Asp Thr Thr
1 5
<210> 768
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-22G10
<400> 768
Ala Lys Val Gly Val Ala Val Ala Gln Gly Asp Tyr
1 5 10
<210> 769
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-22G10
<400> 769
Gln Ser Val Leu Ser Ser Ser Asn Asn Lys Asn Tyr
1 5 10
<210> 770
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-22G10
<400> 770
Trp Ala Ser
1
<210> 771
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-22G10
<400> 771
Gln Gln Tyr Tyr Gly Thr Pro Leu Thr
1 5
<210> 772
<211> 765
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-22G10
<400> 772
cagatgcagc tggtggagtc ggggggaggc ttcgtacagc ctggggggtc ccggagactc 60
tcctgtgcag gctctggatt catgtttaag aattatgcca tgacttggtt tcgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct gtcagtggtt ctggtgacac cacatactac 180
acagactccg tgaagggccg gttcatcatc tccagagaca attccaacaa caccgtctat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gaaagtgggt 300
gtagcagtgg cccaagggga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctcaggc 360
ctcgggggcc tcggaggagg aggtagtggc ggaggaggct ccggtggatc cagcggtgtg 420
ggttccgaca tccagatgac ccagtctcca gactccctgg ctgtgtctct gggcgagagg 480
gccaccatca actgcaagtc cagccagagt gttttatcca gctccaacaa taagaactac 540
ttagcttggt accagcagaa accgggacag cctcctaaac tgctcattta ctgggcatct 600
acccgggaat ccggggtccc tgaccgattc agtggcagcg ggtctgggac agatttcact 660
ctcaccatca gcagcctgca ggctgaagat gtggcagttt attactgtca gcaatattat 720
ggtactcccc tcactttcgg cggagggacc aaggtggaaa tcaaa 765
<210> 773
<211> 119
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-22G10
<400> 773
Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Phe Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Arg Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Met Phe Lys Asn Tyr
20 25 30
Ala Met Thr Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Val Ser Gly Ser Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Thr Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Ser Asn Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Val Gly Val Ala Val Ala Gln Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 774
<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-22G10
<400> 774
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Ser Ser
20 25 30
Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Tyr Tyr Gly Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile
100 105 110
Lys
<210> 775
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-22G10
<400> 775
Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Phe Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Arg Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser
20 25
<210> 776
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-22G10
<400> 776
Met Thr Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser
1 5 10 15
Ala
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<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-22G10
<400> 777
Tyr Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Asn Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 778
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-22G10
<400> 778
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 779
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-22G10
<400> 779
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser
20 25
<210> 780
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-22G10
<400> 780
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 781
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-22G10
<400> 781
Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 782
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-22G10
<400> 782
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 783
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-24A05
<400> 783
Arg Tyr Thr Phe Thr Tyr Arg Tyr
1 5
<210> 784
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-24A05
<400> 784
Ile Gln Pro Phe Asn Gly Asn Thr
1 5
<210> 785
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-24A05
<400> 785
Ala Lys Asp Ile Arg Ile Glu Asp Ile Val Val Val Pro Ala Ala Ile
1 5 10 15
<210> 786
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-24A05
<400> 786
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 787
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-24A05
<400> 787
Glu Val Asn
1
<210> 788
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-24A05
<400> 788
Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Phe Asp
1 5 10
<210> 789
<211> 768
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-24A05
<400> 789
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaaga ctgggtcctc agtgaaagtt 60
tcctgcaaga cttccagata caccttcacc taccgttatc tgcactgggt gcgacaggcc 120
cccggacaag cgcttgagtg gttggggtgg atccaacctt tcaatggtaa taccaactac 180
gcacagaaat tccaagacag agtcaccatt acccgggaca ggtctatgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc aaaagatatc 300
cgaatcgagg atattgtagt agtaccagct gctatttggg gccagggaac cctggtcacc 360
gtctcctcag gcctcggggg cctcggagga ggaggtagtg gcggaggagg ctccggtgga 420
tccagcggtg tgggttccca gtctgccctg actcagcctg cctccgtgtc tgggtctcct 480
ggacagtcga tcaccatctc ctgcactgga accagcagtg acgttggtgg ttataactat 540
gtctcctggt accaacagca cccaggcaaa gcccccaaac tcatgattta tgaggtcaat 600
aagcggccct caggggtttc taatcgcttc tctggctcca agtctggcaa cacggccttc 660
ctgaccatct ctgggctcca gtctgaggac gaggctgatt attactgcag ctcatataca 720
agcagcagta ctttcgactt cggaactggg accaaggtca ccgtccta 768
<210> 790
<211> 123
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-24A05
<400> 790
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Thr Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Arg Tyr Thr Phe Thr Tyr Arg
20 25 30
Tyr Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Ala Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Trp Ile Gln Pro Phe Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Arg Ser Met Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Ile Arg Ile Glu Asp Ile Val Val Val Pro Ala Ala Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 791
<211> 110
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-24A05
<400> 791
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Glu Val Asn Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Phe Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Phe Asp Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 792
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-24A05
<400> 792
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Thr Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser
20 25
<210> 793
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-24A05
<400> 793
Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Ala Leu Glu Trp Leu Gly
1 5 10 15
Trp
<210> 794
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-24A05
<400> 794
Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Arg
1 5 10 15
Ser Met Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 795
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-24A05
<400> 795
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 796
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-24A05
<400> 796
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr
20 25
<210> 797
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-24A05
<400> 797
Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 798
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-24A05
<400> 798
Ile Tyr Glu Val Asn Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Phe Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln
20 25 30
Ser Glu Asp Glu
35
<210> 799
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-24A05
<400> 799
Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
1 5 10
<210> 800
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-30H01
<400> 800
Gly Phe Thr Phe Lys Thr Tyr Ser
1 5
<210> 801
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-30H01
<400> 801
Ile Asn Asn Asn Gly Asp Ala Thr
1 5
<210> 802
<211> 28
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-30H01
<400> 802
Ala Arg Asp Leu Ile Ala His Glu Gln Pro Lys Phe Ser Leu Arg Tyr
1 5 10 15
Phe Asp Trp Leu Ser Ser Arg Lys Gly Met Asp Val
20 25
<210> 803
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-30H01
<400> 803
Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr
1 5
<210> 804
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-30H01
<400> 804
Asp Val Thr
1
<210> 805
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-30H01
<400> 805
Ser Ser Tyr Ser Ser Ser Thr Phe Tyr Val
1 5 10
<210> 806
<211> 804
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-30H01
<400> 806
caggtgcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgaaactc 60
tcctgttcag cctctggatt caccttcaaa acctattcta tgcactgggt ccgccaggct 120
ccggggaagg gactggaata tgtttcagct attaataata atggggatgc cacatactac 180
gcagactccg tgaagggcag attcaccatc tccagagaca attccaagga cacgctgtat 240
cttcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagatctt 300
atagcccatg aacagccgaa attctcctta cgatattttg actggttatc aagcaggaag 360
ggtatggacg tctggggcca agggaccacg atcaccgtct cctcaggcct cgggggcctc 420
ggaggaggag gtagtggcgg aggaggctcc ggtggatcca gcggtgtggg ttccaatttt 480
atgctgactc agcccgcctc cgtgtctggg tcccctggac agtcgatcac catctcctgc 540
actggaagca gcagcgacgt tggtggttat aactatgtct cctggtacca acagcaccca 600
ggcaaagccc cccaactcat catttatgat gtcactaagc ggccctcagg ggtttctaat 660
cgcttctccg gctccaagtc tggcaactcg gcctccctga ccatctctgg actccaggct 720
gaggacgagg ctgattatta ctgcagctca tacagcagca gcacttttta cgtcttcgga 780
actgggacca aggtcaccgt ccta 804
<210> 807
<211> 135
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-30H01
<400> 807
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ser Ala Ser Gly Phe Thr Phe Lys Thr Tyr
20 25 30
Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Asn Asn Gly Asp Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asp Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Leu Ile Ala His Glu Gln Pro Lys Phe Ser Leu Arg Tyr
100 105 110
Phe Asp Trp Leu Ser Ser Arg Lys Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly
115 120 125
Thr Thr Ile Thr Val Ser Ser
130 135
<210> 808
<211> 110
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-30H01
<400> 808
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Gln Leu
35 40 45
Ile Ile Tyr Asp Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ser Ser Ser
85 90 95
Thr Phe Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 809
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-30H01
<400> 809
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ser Ala Ser
20 25
<210> 810
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-30H01
<400> 810
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Val Ser
1 5 10 15
Ala
<210> 811
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-30H01
<400> 811
Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asp Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 812
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-30H01
<400> 812
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Ile Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 813
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-30H01
<400> 813
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser
20 25
<210> 814
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-30H01
<400> 814
Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Gln Leu Ile Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 815
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-30H01
<400> 815
Ile Tyr Asp Val Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Lys Ser Gly Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln
20 25 30
Ala Glu Asp Glu
35
<210> 816
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-30H01
<400> 816
Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
1 5 10
<210> 817
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-32H08
<400> 817
Ser Gly Phe Lys Phe Glu Asp His Ala
1 5
<210> 818
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-32H08
<400> 818
Ile Ser Gly Asn Gly Asp Asp Thr
1 5
<210> 819
<211> 5
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-32H08
<400> 819
Val Thr Arg Gly Ala
1 5
<210> 820
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-32H08
<400> 820
Gln Ser Val Gly Thr Trp
1 5
<210> 821
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-32H08
<400> 821
Ala Ala Ser
1
<210> 822
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-32H08
<400> 822
Gln Gln Ala Asp Ser Phe His Ser
1 5
<210> 823
<211> 723
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-32H08
<400> 823
cagatgcagc tggtggagtc agggggaggc gtggtacagc ctggggggtc cctaagactc 60
gcctgtgtag gctctggatt caagtttgaa gatcatgcca tacactgggt ccgtcaacgt 120
ccagggaagg gtctggagtg ggtcgccgtt ataagtggca atggcgatga cacatactat 180
gcagactctg cgaagggccg attcaccatt tccagagaca acagcaaaaa ctccctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgt gactagaggc 300
gctcagggcc ggggaaccct ggtcaccgtc tcctcaggcc tcgggggcct cggaggagga 360
ggtagtggcg gaggaggctc cggtggatcc agcggtgtgg gttccgacat ccagatgacc 420
cagtctccat cttccgtgtc tgcatctgta ggagacagag tcaccatcac ttgtcgggcg 480
agtcagagtg ttggcacctg gttagcctgg tatcagcaga aaccagggag ggcccctaaa 540
ctcctgatct ctgctgcatc cagtttgcac cctggggtcc catcaaggtt cagcggcagt 600
ggatctggga cagaattcac tctcaccatc agcagcctgc agcctgagga tattgcaact 660
tactattgtc aacaggctga cagtttccat tctttcggcc ctgggaccaa agtggatatc 720
aaa 723
<210> 824
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-32H08
<400> 824
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1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ala Cys Val Gly Ser Gly Phe Lys Phe Glu Asp His
20 25 30
Ala Ile His Trp Val Arg Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Gly Asn Gly Asp Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Ala
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Thr Arg Gly Ala Gln Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
100 105 110
<210> 825
<211> 106
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-32H08
<400> 825
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Gly Thr Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Ser Ala Ala Ser Ser Leu His Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asp Ser Phe His Ser
85 90 95
Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
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<211> 24
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-32H08
<400> 826
Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ala Cys Val Gly
20
<210> 827
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-32H08
<400> 827
Ile His Trp Val Arg Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala
1 5 10 15
Val
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-32H08
<400> 828
Tyr Tyr Ala Asp Ser Ala Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-32H08
<400> 829
Gln Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
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<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-32H08
<400> 830
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 831
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-32H08
<400> 831
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu Leu Ile
1 5 10 15
Ser
<210> 832
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-32H08
<400> 832
Ile Ser Ala Ala Ser Ser Leu His Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
20 25 30
Pro Glu Asp Ile
35
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<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-32H08
<400> 833
Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
1 5 10
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-35A06
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Gly Asp Thr Phe Arg Lys Phe Thr
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-35A06
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Leu Ile Pro Ile Phe Gly Thr Pro
1 5
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<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-35A06
<400> 836
Val Arg Glu Asn Tyr Glu Phe Leu Thr Gly Ala Thr Arg Tyr Phe Asp
1 5 10 15
Leu
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-35A06
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Ser Ser Asn Leu Gly Ala Pro Asn Asp
1 5
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-35A06
<400> 838
Gly Ser Thr
1
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-35A06
<400> 839
Gln Ser Tyr Asp Asn Arg Leu Ser Gly Phe Val Val
1 5 10
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
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<223> SCFV of A56-35A06
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cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg ctcatcccga tctttggtac acctaaatac 180
tcacagaagt tccaggacag attcacaata accgcggacg aatcaacgag cacagcctac 240
atggagctac gtcgcctggg atctgaggac acggccgtgt attactgtgt gagagagaat 300
tatgagttct tgactggcgc cactcgctac ttcgatctct ggggccgcgg caccctgatc 360
accgtctcct caggcctcgg gggcctcgga ggaggaggta gtggcggagg aggctccggt 420
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accaatcgcc cttcaggagt ccctgaccga ttctctggtt ccatgtctgg cgcctccgca 660
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gacaacagac tgagtggttt tgtggttttc ggcggaggga ccaagctgac cgtccta 777
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-35A06
<400> 841
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
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20 25 30
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35 40 45
Gly Gly Leu Ile Pro Ile Phe Gly Thr Pro Lys Tyr Ser Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Phe Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
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Val Arg Glu Asn Tyr Glu Phe Leu Thr Gly Ala Thr Arg Tyr Phe Asp
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Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Ile Thr Val Ser Ser
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-35A06
<400> 842
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Gly Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Leu Gly Ala Pro
20 25 30
Asn Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Thr Ala Pro Arg Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Ser Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Met Ser Gly Ala Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Leu Pro Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Asn Arg
85 90 95
Leu Ser Gly Phe Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
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<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-35A06
<400> 843
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Thr Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
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<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-35A06
<400> 844
Phe Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Gly
<210> 845
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-35A06
<400> 845
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20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-35A06
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Trp Gly Arg Gly Thr Leu Ile Thr Val Ser Ser
1 5 10
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-35A06
<400> 847
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Gly Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser
20 25
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<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-35A06
<400> 848
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1 5 10 15
Tyr
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-35A06
<400> 849
Ile Tyr Gly Ser Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Met Ser Gly Ala Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu Leu
20 25 30
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35
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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1 5 10
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-35G07
<400> 851
Gly Asp Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-35G07
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Thr Ile Pro Arg Leu Gly Ala Thr
1 5
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-35G07
<400> 853
Ala Arg Tyr Ile Pro Leu Val Arg Gly Val Arg Gln Pro Arg Asp Asp
1 5 10 15
Phe Glu Ile
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-35G07
<400> 854
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1 5
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<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-35G07
<400> 855
Gly Ala Ser
1
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<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-35G07
<400> 856
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1 5 10
<210> 857
<211> 777
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-35G07
<400> 857
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cctctggttc ggggagtccg acagccaaga gatgattttg aaatttgggg cccagggaca 360
atgatcaccg tctcctcagg cctcgggggc ctcggaggag gaggtagtgg cggaggaggc 420
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gcatccagca gggccactgg catcccagac aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac 660
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-35G07
<400> 858
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Asp Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Leu Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Thr Ile Pro Arg Leu Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Gln Asn Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Ser Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Gly Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Arg Tyr Ile Pro Leu Val Arg Gly Val Arg Gln Pro Arg Asp Asp
100 105 110
Phe Glu Ile Trp Gly Pro Gly Thr Met Ile Thr Val Ser Ser
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 859
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20 25 30
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35 40 45
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50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu
65 70 75 80
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85 90 95
Pro Gly Ala Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105 110
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 861
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-35G07
<400> 861
Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Leu Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Arg
<210> 862
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-35G07
<400> 862
Ser Tyr Ala Gln Asn Phe Gln Gly Arg Val Ser Ile Thr Ala Asp Lys
1 5 10 15
Ser Thr Asn Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Gly Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 863
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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1 5 10
<210> 864
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-35G07
<400> 864
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 865
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-35G07
<400> 865
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 866
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-35G07
<400> 866
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu
20 25 30
Pro Glu Asp Phe
35
<210> 867
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-35G07
<400> 867
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 868
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1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-36B11
<400> 869
Ile Ile Pro Phe Phe Gly Ser Pro
1 5
<210> 870
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-36B11
<400> 870
Thr Arg Ser Arg Asp Tyr Gly Met Asp Val
1 5 10
<210> 871
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-36B11
<400> 871
Gln Ser Leu Val Asp Asn Asp Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 872
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-36B11
<400> 872
Arg Val Ser
1
<210> 873
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-36B11
<400> 873
Met Gln Thr Thr His Trp Pro Pro Leu
1 5
<210> 874
<211> 756
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-36B11
<400> 874
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ggcctcggag gaggaggtag tggcggagga ggctccggtg gatccagcgg tgtgggttcc 420
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gtctcctgca ggtctagtca aagcctcgta gacaatgatg gaaataccta cttgcattgg 540
tttcagcaga ggccaggcca atctccaagg cgcctaattt atagggtttc taaccgggac 600
tctggggtcc cggacagatt cagcggcagt gggtcaggca ctgatttcac actcaaaatc 660
agcagggtgg aggctgagga tgttggggtt tattactgca tgcaaactac acactggcct 720
ccccttttcg gcggagggac caaggtggat atcaaa 756
<210> 875
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-36B11
<400> 875
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Arg Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Glu Thr Ser Gly Gly Asn Phe Asn Ala Tyr
20 25 30
Ala Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Phe Phe Gly Ser Pro Asn Tyr Ala Gln Arg Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Leu Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Arg Thr Thr Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Ser Arg Asp Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr
100 105 110
Ile Thr Val Ser Ser
115
<210> 876
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-36B11
<400> 876
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ile Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Val Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val Asp Asn
20 25 30
Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Arg Val Ser Asn Arg Asp Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Thr
85 90 95
Thr His Trp Pro Pro Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105 110
<210> 877
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-36B11
<400> 877
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Arg Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Glu Thr Ser
20 25
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<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-36B11
<400> 878
Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10 15
Gly
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-36B11
<400> 879
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1 5 10 15
Ser Thr Arg Thr Thr Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
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1 5 10
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-36B11
<400> 881
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1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Val Ser Cys Arg Ser Ser
20 25
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<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-36B11
<400> 882
Leu His Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Arg Arg Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-36B11
<400> 883
Ile Tyr Arg Val Ser Asn Arg Asp Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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1 5
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<213> Artificial Sequence
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 887
Ala Ser Gln Arg Ser Asp Gly Ser Leu Asp Tyr
1 5 10
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-41C01
<400> 888
Gln Ser Leu Leu Asp Ser Asp Asp Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-41C01
<400> 889
Glu Val Ser
1
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<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-41C01
<400> 890
Met Gln Arg Ile Glu Phe Pro Tyr Thr
1 5
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence
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<223> SCFV of A56-41C01
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acctgcactg tctccggtgg ctccatcagt agtcactact ggagctgggt ccggcagccc 120
ccagggaaga gaccggagtg gattgggtac atctctaaca gtgggaacac gatctacaac 180
ccctccctca agagtcgagt caccatatca ttaaacacgt ccaggaacca attctccctg 240
cagctgaggt ctgtgaccgc cgtggacacg gccgtgtatt actgtgcgag tcaaaggagc 300
gacggatccc ttgactaccg gggccctgga accctggtca ccgtctcctc aggcctcggg 360
ggcctcggag gaggaggtag tggcggagga ggctccggtg gatccagcgg tgtgggttcc 420
gatattgtga tgacccagac tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga ggcggcctcc 480
atctcctgca ggtctagtca gagcctcttg gatagtgatg atggaaacac ctatttggac 540
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ttctctggag tgccagatag gttcagtggc agcgggtcag ggacagactt cacactgaaa 660
atcagcaggg tggaggctga ggatgttgga gtttattact gcatgcaacg tatagagttt 720
ccttatactt ttggccaagg gaccaaggtg gaaatcaaa 759
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-41C01
<400> 892
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
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50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Leu Asn Thr Ser Arg Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Gln Leu Arg Ser Val Thr Ala Val Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
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Ser Gln Arg Ser Asp Gly Ser Leu Asp Tyr Arg Gly Pro Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
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<211> 113
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-41C01
<400> 893
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1 5 10 15
Glu Ala Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser
20 25 30
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35 40 45
Pro Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys
65 70 75 80
Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln
85 90 95
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100 105 110
Lys
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-41C01
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Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
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Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-41C01
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1 5 10 15
Tyr
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-41C01
<400> 896
Ile Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Leu Asn Thr
1 5 10 15
Ser Arg Asn Gln Phe Ser Leu Gln Leu Arg Ser Val Thr Ala Val Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
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<213> Artificial Sequence
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<223> H-FR4 of A56-41C01
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Arg Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-41C01
<400> 898
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Ala Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser
20 25
<210> 899
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-41C01
<400> 899
Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Gln Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-41C01
<400> 900
Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu
20 25 30
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35
<210> 901
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-41C01
<400> 901
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-42H07
<400> 902
Gly Asp Thr Phe Ser Arg Tyr Ala
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-42H07
<400> 903
Ile Ile Pro Val Leu Gly Ala Ala
1 5
<210> 904
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-42H07
<400> 904
Ala Arg Asp Leu Val Arg Gly Val Thr Pro His Tyr Gly Met Asp Val
1 5 10 15
<210> 905
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-42H07
<400> 905
Gln Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr
1 5 10
<210> 906
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-42H07
<400> 906
Leu Gly Ser
1
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<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-42H07
<400> 907
Met Gln Ala Arg Gln Thr Pro Leu Thr
1 5
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<211> 774
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-42H07
<400> 908
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gcacggaagt tccaggacag agtcacgatc acagcggaca aatccacgac tacagcctac 240
atggaactga ccagtctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagattta 300
gttcggggag ttactccaca ctacggtatg gacgtctggg gccaagggac cacggtcacc 360
gtctcctcag gcctcggggg cctcggagga ggaggtagtg gcggaggagg ctccggtgga 420
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tacaattatt tggattggta cctgcagaag ccagggcagt cccctcagct cctgatctat 600
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<211> 123
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-42H07
<400> 909
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
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Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Asp Thr Phe Ser Arg Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Pro Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Ile Pro Val Leu Gly Ala Ala Asn Tyr Ala Arg Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Thr Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Thr Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Leu Val Arg Gly Val Thr Pro His Tyr Gly Met Asp Val
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Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-42H07
<400> 910
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser
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Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Ser Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala
85 90 95
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100 105 110
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-42H07
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1 5 10 15
Arg
<210> 913
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-42H07
<400> 913
Asn Tyr Ala Arg Lys Phe Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys
1 5 10 15
Ser Thr Thr Thr Ala Tyr Met Glu Leu Thr Ser Leu Arg Ser Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 914
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-42H07
<400> 914
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 915
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-42H07
<400> 915
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1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser
20 25
<210> 916
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-42H07
<400> 916
Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 917
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-42H07
<400> 917
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1 5 10 15
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35
<210> 918
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-42H07
<400> 918
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1 5 10
<210> 919
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-44G01
<400> 919
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 920
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-44G01
<400> 920
Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys
1 5
<210> 921
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-44G01
<400> 921
Ala Lys Asp Leu Trp Gly Arg Val Gly Ala Leu Val Gly Ala Leu Asp
1 5 10 15
Leu
<210> 922
<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-44G01
<400> 922
Asn Leu Arg Thr Lys Tyr
1 5
<210> 923
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-44G01
<400> 923
Gln Asp Thr
1
<210> 924
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-44G01
<400> 924
Gln Ala Trp Asp Ser Gly Asn Tyr Val
1 5
<210> 925
<211> 759
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-44G01
<400> 925
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggt gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatgcta tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactac 180
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ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gaaagatctc 300
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accgtctcct caggcctcgg gggcctcgga ggaggaggta gtggcggagg aggctccggt 420
ggatccagcg gtgtgggttc ctcctatgag ctgacacagg gaccctcact gtccgtgtcg 480
ccaggacaga cagccaacat catctgctct ggagataact tgcgtactaa atatgtttct 540
tggtaccagc agaagccagg ccagtcccct atattggtca tctatcagga caccaggcgg 600
ccctcaggca tccctgcgcg attctctggc tccaactctg ggaacacagc cactctgacc 660
atcagcggga cccaggctat ggatgaggct gactattact gtcaggcgtg ggacagcggc 720
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<211> 124
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-44G01
<400> 926
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
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Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Leu Trp Gly Arg Val Gly Ala Leu Val Gly Ala Leu Asp
100 105 110
Leu Trp Gly Gln Gly Thr Met Ile Thr Val Ser Ser
115 120
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<211> 106
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-44G01
<400> 927
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Gly Pro Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Thr Ala Asn Ile Ile Cys Ser Gly Asp Asn Leu Arg Thr Lys Tyr Val
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Ile Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Gln Asp Thr Arg Arg Pro Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Thr Gln Ala Met
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ala Trp Asp Ser Gly Asn Tyr Val
85 90 95
Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-44G01
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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 929
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1 5 10 15
Val
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 930
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20 25 30
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35
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<213> Artificial Sequence
<220>
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Thr Ala Asn Ile Ile Cys Ser Gly Asp
20 25
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-44G01
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1 5 10 15
Tyr
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-44G01
<400> 934
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1 5 10 15
Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Thr Gln
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<223> L-CDR3 of A56-46A07
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<223> VL2 of A56-46A07
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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1 5 10 15
Tyr
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<213> Artificial Sequence
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<223> L-FR3 of A56-46A07
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35
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<213> Artificial Sequence
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<223> H-CDR1 of A56-50A09
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-50A09
<400> 954
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1 5
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-50A09
<400> 955
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1 5 10 15
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<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-50A09
<400> 956
Gln Val Ile Asn Asn Tyr
1 5
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<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-50A09
<400> 957
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1
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-50A09
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<213> Artificial Sequence
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<223> SCFV of A56-50A09
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-50A09
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Ser Leu Ile Ser Gly Asp Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
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<213> Artificial Sequence
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<223> VL2 of A56-50A09
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35 40 45
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<213> Artificial Sequence
<220>
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Leu
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-50A09
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35
<210> 965
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<213> Artificial Sequence
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<210> 967
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 967
Leu Ile Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Arg Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-50A09
<400> 968
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1 5 10 15
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-50A11
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1 5 10
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-50A11
<400> 971
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1 5 10 15
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<211> 6
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-50A11
<400> 973
Gln Asn Ile Gly Ser Ile
1 5
<210> 974
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-50A11
<400> 974
Tyr Ala Ser
1
<210> 975
<211> 9
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<223> L-CDR3 of A56-50A11
<400> 975
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1 5
<210> 976
<211> 759
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
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<223> SCFV of A56-50A11
<400> 976
caggtcacct tgagggagtc tggtcctgtg ctggtgaaac ccacagagac cctcacgctg 60
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cagcccccag ggaaggccct ggagtggctc gcccacattt tttcgagcga cgaaaaatct 180
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tccagcggtg tgggttccga tattgtgatg acccagactc cagactttcg gtctgtggct 480
ccagcggaga cagtcaccat cacctgccgg gccagtcaga acattggtag tattttacac 540
tggtaccagc agaaaccaaa tcagtctcca gtcctcctca tcaagtatgc ttcccagtcc 600
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cctcagactt ttggccaggg gaccaagctg gaggtcaaa 759
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-50A11
<400> 977
Gln Val Thr Leu Arg Glu Ser Gly Pro Val Leu Val Lys Pro Thr Glu
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Asn Ala
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35 40 45
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-50A11
<400> 978
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85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Val Lys
100 105
<210> 979
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-50A11
<400> 979
Gln Val Thr Leu Arg Glu Ser Gly Pro Val Leu Val Lys Pro Thr Glu
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser
20 25
<210> 980
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-50A11
<400> 980
Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu Trp Leu Ala
1 5 10 15
His
<210> 981
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-50A11
<400> 981
Ser Phe Arg Ala Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr
1 5 10 15
Ser Lys Ser Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp
20 25 30
Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
35
<210> 982
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-50A11
<400> 982
Trp Gly Gln Gly Thr Val Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 983
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-50A11
<400> 983
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Asp Phe Arg Ser Val Ala Pro Ala
1 5 10 15
Glu Thr Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
20 25
<210> 984
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-50A11
<400> 984
Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asn Gln Ser Pro Val Leu Leu Ile
1 5 10 15
Lys
<210> 985
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-50A11
<400> 985
Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Tyr Ser Leu Glu
20 25 30
Ala Glu Asp Ala
35
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<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-50A11
<400> 986
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Val Lys
1 5 10
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-54C01
<400> 987
Gly Phe Thr Phe Val Val Phe Pro
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-54C01
<400> 988
Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
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<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-54C01
<400> 989
Ala Ile Gly Gly Pro Leu Thr Ser His Asn Trp Phe Asp Pro
1 5 10
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<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-54C01
<400> 990
Ser Gly Ser Ile Gly Ser Ser Tyr
1 5
<210> 991
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-54C01
<400> 991
Glu Asp Ala
1
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<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-54C01
<400> 992
Gln Ser Tyr Asp Gly Ser Asn His Phe Val
1 5 10
<210> 993
<211> 765
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-54C01
<400> 993
caggtgcagc tggtagagtc ggggggaggc gtggtccagc ctggggggtc cctgaaactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcgtt gtctttccta tgcgctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180
tcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa caccctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gattgggggt 300
cctttgactt cccacaactg gttcgacccc tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc 360
tcaggcctcg ggggcctcgg aggaggaggt agtggcggag gaggctccgg tggatccagc 420
ggtgtgggtt ccaattttat gctgactcag ccccactctg tgtcggagtc tccggggaag 480
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taccagcagc gcccgggcag tgcccccacc actgtgatgt atgaagatgc cgaaagaccc 600
tctggcgtcc ctgatcggtt ctctggctcc atcgacagct cctccaactc tgcctccctc 660
accatctctg gactgaagac tgaggacgag gctgactact actgtcagtc ttatgatggc 720
agcaatcatt tcgtgttcgg cggagggacc aagctgaccg tccta 765
<210> 994
<211> 121
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-54C01
<400> 994
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Val Val Phe
20 25 30
Pro Met Arg Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ser Asp Ser Val
50 55 60
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65 70 75 80
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Ala Ile Gly Gly Pro Leu Thr Ser His Asn Trp Phe Asp Pro Trp Gly
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Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 995
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-54C01
<400> 995
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1 5 10 15
Thr Val Thr Ile Ser Cys Thr Arg Ser Ser Gly Ser Ile Gly Ser Ser
20 25 30
Tyr Ile Gln Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Ser Ala Pro Thr Thr Val
35 40 45
Met Tyr Glu Asp Ala Glu Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Ile Asp Ser Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly
65 70 75 80
Leu Lys Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Gly
85 90 95
Ser Asn His Phe Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
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<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-54C01
<400> 996
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
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<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-54C01
<400> 997
Met Arg Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser
1 5 10 15
Ala
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-54C01
<400> 998
Tyr Tyr Ser Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 999
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-54C01
<400> 999
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
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<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-54C01
<400> 1000
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Glu Ser Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Val Thr Ile Ser Cys Thr Arg Ser
20 25
<210> 1001
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-54C01
<400> 1001
Ile Gln Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Ser Ala Pro Thr Thr Val Met
1 5 10 15
Tyr
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<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-54C01
<400> 1002
Met Tyr Glu Asp Ala Glu Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Ile Asp Ser Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly
20 25 30
Leu Lys Thr Glu
35
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<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-54C01
<400> 1003
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
1 5 10
<210> 1004
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-59A11
<400> 1004
Gly Phe Ser Leu Ser Asn Tyr Gly
1 5
<210> 1005
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-59A11
<400> 1005
Ile Ser Ala Ser Ser Ser Tyr Lys
1 5
<210> 1006
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-59A11
<400> 1006
Ala Arg Asp Arg Tyr Phe Tyr Gly Ser Gly Ser Tyr Pro Pro Ala
1 5 10 15
<210> 1007
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-59A11
<400> 1007
Gln Ser Leu Leu Gln Thr Asn Gly Tyr Asn Tyr
1 5 10
<210> 1008
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-59A11
<400> 1008
Leu Gly Ser
1
<210> 1009
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-59A11
<400> 1009
Met His Ser Leu Gln Thr Pro Thr
1 5
<210> 1010
<211> 768
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-59A11
<400> 1010
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cgtctggatt cagcctcagt aactatggca tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtatcatat attagtgcta gtagtagtta caagaagtac 180
gcagactcag tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctccctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagatcga 300
tatttctatg gttcggggag ttatcccccc gccttgggcc ggggaaccct ggtcaccgtc 360
tcctcaggcc tcgggggcct cggaggagga ggtagtggcg gaggaggctc cggtggatcc 420
agcggtgtgg gttccgatat tgtgatgacc cagactccac tctccctgcc cgttacccct 480
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aactatttgg attggtacct gcagaagcca gggcagactc cacagctcct gatctatttg 600
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tctctacaaa ctccgacttt cggccctggg accaaagtag aaatcaaa 768
<210> 1011
<211> 122
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-59A11
<400> 1011
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Asn Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Tyr Ile Ser Ala Ser Ser Ser Tyr Lys Lys Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Arg Tyr Phe Tyr Gly Ser Gly Ser Tyr Pro Pro Ala Leu
100 105 110
Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 1012
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-59A11
<400> 1012
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Gln Thr
20 25 30
Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Thr
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met His Ser
85 90 95
Leu Gln Thr Pro Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 1013
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-59A11
<400> 1013
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
20 25
<210> 1014
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-59A11
<400> 1014
Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser
1 5 10 15
Tyr
<210> 1015
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-59A11
<400> 1015
Lys Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn
1 5 10 15
Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 1016
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-59A11
<400> 1016
Leu Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 1017
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-59A11
<400> 1017
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser
20 25
<210> 1018
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-59A11
<400> 1018
Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Thr Pro Gln Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 1019
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-59A11
<400> 1019
Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 1020
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-59A11
<400> 1020
Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 1021
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of A56-59E12
<400> 1021
Gly Phe Asn Phe Gly Asp Tyr Ala
1 5
<210> 1022
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of A56-59E12
<400> 1022
Thr Ser Ser Lys His Tyr Gly Gly Thr Ile
1 5 10
<210> 1023
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of A56-59E12
<400> 1023
Ala Lys Gly Lys Trp Leu Arg Phe Asp Ser Pro Phe Asp Ser
1 5 10
<210> 1024
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of A56-59E12
<400> 1024
Gln Ser Leu Leu His Asn Asn Gly Asn Lys Phe
1 5 10
<210> 1025
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of A56-59E12
<400> 1025
Leu Gly Ser
1
<210> 1026
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of A56-59E12
<400> 1026
Met Gln Ala Leu Arg Thr Pro Trp Thr
1 5
<210> 1027
<211> 774
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> SCFV of A56-59E12
<400> 1027
caggtgcagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtaaagc cagggcggtc ccagagactc 60
tcctgtacag gttctggatt caactttggt gattatgcca tcagttggat ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtcggcttc actagcagca aacattatgg tgggacaata 180
gactacgccg cgtctgtgaa aggcagattc atcatctcaa gagatgattc gaaaagcacc 240
gcctatctgc aaatgaacag tctgagagcc gaggacacgg ccgtgtatta ctgcgcgaaa 300
ggaaagtggc tacgattcga ttcgccattt gactcctggg gccagggaac cctggtcacc 360
gtctcctcag gcctcggggg cctcggagga ggaggtagtg gcggaggagg ctccggtgga 420
tccagcggtg tgggttccga tattgtgatg acccagactc cactctccct gcccgtcacc 480
cttggagagc cggcctccat ctcctgcagg tctagtcaga gcctcctgca taataatgga 540
aacaagtttt tcgattggta cctgcagaag ccagggcagt ctccacagct cctgatctat 600
ttgggttcta atcgggcctc cggggtccct gacaggttca gtggcagtgg atcaggcaca 660
gattttgcac tgaagatcag tagagtggag gctgaggatg ttgggcttta ttattgcatg 720
caagctctcc gaactccgtg gacgttcggc caagggacca aggtggaaat caaa 774
<210> 1028
<211> 123
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH2 of A56-59E12
<400> 1028
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Gln Arg Leu Ser Cys Thr Gly Ser Gly Phe Asn Phe Gly Asp Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Phe Thr Ser Ser Lys His Tyr Gly Gly Thr Ile Asp Tyr Ala Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Thr
65 70 75 80
Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Lys Gly Lys Trp Leu Arg Phe Asp Ser Pro Phe Asp Ser
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 1029
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL2 of A56-59E12
<400> 1029
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Asn
20 25 30
Asn Gly Asn Lys Phe Phe Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ala Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Leu Tyr Tyr Cys Met Gln Ala
85 90 95
Leu Arg Thr Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 1030
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR1 of A56-59E12
<400> 1030
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Gln Arg Leu Ser Cys Thr Gly Ser
20 25
<210> 1031
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR2 of A56-59E12
<400> 1031
Ile Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly
1 5 10 15
Phe
<210> 1032
<211> 38
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR3 of A56-59E12
<400> 1032
Asp Tyr Ala Ala Ser Val Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asp
1 5 10 15
Ser Lys Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp
20 25 30
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
35
<210> 1033
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-FR4 of A56-59E12
<400> 1033
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 1034
<211> 26
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR1 of A56-59E12
<400> 1034
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser
20 25
<210> 1035
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR2 of A56-59E12
<400> 1035
Phe Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
1 5 10 15
Tyr
<210> 1036
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR3 of A56-59E12
<400> 1036
Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
1 5 10 15
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ala Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu
20 25 30
Ala Glu Asp Val
35
<210> 1037
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-FR4 of A56-59E12
<400> 1037
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 1038
<211> 310
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for A56 protein
<400> 1038
Met Thr Arg Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Ile Ser Leu Val Tyr Ala
1 5 10 15
Thr Pro Phe Pro Gln Thr Ser Lys Lys Ile Gly Asp Asp Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Cys Asn Arg Asn Asn Thr Asn Asp Tyr Val Val Met Ser Ala Trp
35 40 45
Tyr Lys Glu Pro Asn Ser Ile Ile Leu Leu Ala Ala Lys Ser Asp Val
50 55 60
Leu Tyr Phe Asp Asn Tyr Thr Lys Asp Lys Ile Ser Tyr Asp Ser Pro
65 70 75 80
Tyr Asp Asp Leu Val Thr Thr Ile Thr Ile Lys Ser Leu Thr Ala Arg
85 90 95
Asp Ala Gly Thr Tyr Val Cys Ala Phe Phe Met Thr Ser Pro Thr Asn
100 105 110
Asp Thr Asp Lys Val Asp Tyr Glu Glu Tyr Ser Thr Glu Leu Ile Val
115 120 125
Asn Thr Asp Ser Glu Ser Thr Ile Asp Ile Ile Leu Ser Gly Ser Thr
130 135 140
His Ser Pro Glu Thr Ser Ser Glu Lys Pro Glu Asp Ile Asp Asn Phe
145 150 155 160
Asn Cys Ser Ser Val Phe Glu Ile Ala Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp
165 170 175
Asn Val Glu Asp His Thr Asp Thr Val Thr Tyr Thr Ser Asp Ser Ile
180 185 190
Asn Thr Val Ser Ala Ser Ser Gly Glu Ser Thr Thr Asp Glu Thr Pro
195 200 205
Glu Pro Ile Thr Asp Lys Glu Glu Asp His Thr Val Thr Asp Thr Val
210 215 220
Ser Tyr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ser Gly Ile Val Thr Thr Lys Ser
225 230 235 240
Thr Thr Asp Asp Ala Tyr Asn Asp Asn Asp Thr Val Pro Ser Thr Thr
245 250 255
Val Gly Ser Ser Thr Thr Ser Ile Ser Asn Tyr Lys Thr Lys Asp Phe
260 265 270
Val Glu Ile Phe Gly Ile Thr Ala Leu Ile Ile Leu Ser Ala Val Ala
275 280 285
Ile Phe Cys Ile Thr Tyr Tyr Ile Cys Asn Lys Arg Ser Arg Lys Tyr
290 295 300
Lys Thr Glu Asn Lys Pro
305 310
<210> 1039
<211> 930
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein
<400> 1039
atgacacgat taccaatact tttgttacta atatcattag tatacgctac accttttcct 60
cagacatcta aaaaaatagg tgatgatgca actctatcat gtaatcgaaa taatacaaat 120
gactacgttg ttatgagtgc ttggtataag gagcccaatt ccattattct tttagctgct 180
aaaagcgacg tcttgtattt tgataattat accaaggata aaatatctta cgactctcca 240
tacgatgatc tagttacaac tatcacaatt aaatcattga ctgctagaga tgccggtact 300
tatgtatgtg cattctttat gacatcacct acaaatgaca ctgataaagt agattatgaa 360
gaatactcca cagagttgat tgtaaataca gatagtgaat cgactataga cataatacta 420
tctggatcta cacattcacc agaaactagt tctgagaaac cagaggatat agataatttt 480
aattgctcgt cggtattcga aatcgcgact ccggaaccaa ttactgataa tgtagaagat 540
catacagaca ccgtcacata cactagtgat agcattaata cagtaagtgc atcatctgga 600
gaatccacaa cagacgagac tccggaacca attactgata aagaagaaga tcatacagtc 660
acagacactg tctcatacac tacagtaagt acatcatctg gaattgtcac tactaaatca 720
accaccgatg atacgtacaa tgataatgat acagtaccac caactactgt aggcagtagt 780
acaacctcta ttagcaatta taaaaccaag gactttgtag aaatatttgg tattaccgca 840
ttaattatat tgtcggccgt ggcaatattc tgtattacgt attatatatg taataaacgt 900
tcacgtaaat acaaaacaga gaacaagccg 930
<210> 1040
<211> 270
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for A56 protein fragment (BN-A56-S)
<400> 1040
Met Thr Arg Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Ile Ser Leu Val Tyr Ala
1 5 10 15
Thr Pro Phe Pro Gln Thr Ser Lys Lys Ile Gly Asp Asp Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Cys Asn Arg Asn Asn Thr Asn Asp Tyr Val Val Met Ser Ala Trp
35 40 45
Tyr Lys Glu Pro Asn Ser Ile Ile Leu Leu Ala Ala Lys Ser Asp Val
50 55 60
Leu Tyr Phe Asp Asn Tyr Thr Lys Asp Lys Ile Ser Tyr Asp Ser Pro
65 70 75 80
Tyr Asp Asp Leu Val Thr Thr Ile Thr Ile Lys Ser Leu Thr Ala Arg
85 90 95
Asp Ala Gly Thr Tyr Val Cys Ala Phe Phe Met Thr Ser Pro Thr Asn
100 105 110
Asp Thr Asp Lys Val Asp Tyr Glu Glu Tyr Ser Thr Glu Leu Ile Val
115 120 125
Asn Thr Asp Ser Glu Ser Thr Ile Asp Ile Ile Leu Ser Gly Ser Thr
130 135 140
His Ser Pro Glu Thr Ser Ser Glu Lys Pro Glu Asp Ile Asp Asn Phe
145 150 155 160
Asn Cys Ser Ser Val Phe Glu Ile Ala Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp
165 170 175
Asn Val Glu Asp His Thr Asp Thr Val Thr Tyr Thr Ser Asp Ser Ile
180 185 190
Asn Thr Val Ser Ala Ser Ser Gly Glu Ser Thr Thr Asp Glu Thr Pro
195 200 205
Glu Pro Ile Thr Asp Lys Glu Glu Asp His Thr Val Thr Asp Thr Val
210 215 220
Ser Tyr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ser Gly Ile Val Thr Thr Lys Ser
225 230 235 240
Thr Thr Asp Asp Ala Tyr Asn Asp Asn Asp Thr Val Pro Ser Thr Thr
245 250 255
Val Gly Ser Ser Thr Thr Ser Ile Ser Asn Tyr Lys Thr Lys
260 265 270
<210> 1041
<211> 810
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein fragment (BN-A56-S)
<400> 1041
atgacacgat taccaatact tttgttacta atatcattag tatacgctac accttttcct 60
cagacatcta aaaaaatagg tgatgatgca actctatcat gtaatcgaaa taatacaaat 120
gactacgttg ttatgagtgc ttggtataag gagcccaatt ccattattct tttagctgct 180
aaaagcgacg tcttgtattt tgataattat accaaggata aaatatctta cgactctcca 240
tacgatgatc tagttacaac tatcacaatt aaatcattga ctgctagaga tgccggtact 300
tatgtatgtg cattctttat gacatcacct acaaatgaca ctgataaagt agattatgaa 360
gaatactcca cagagttgat tgtaaataca gatagtgaat cgactataga cataatacta 420
tctggatcta cacattcacc agaaactagt tctgagaaac cagaggatat agataatttt 480
aattgctcgt cggtattcga aatcgcgact ccggaaccaa ttactgataa tgtagaagat 540
catacagaca ccgtcacata cactagtgat agcattaata cagtaagtgc atcatctgga 600
gaatccacaa cagacgagac tccggaacca attactgata aagaagaaga tcatacagtc 660
acagacactg tctcatacac tacagtaagt acatcatctg gaattgtcac tactaaatca 720
accaccgatg atacgtacaa tgataatgat acagtaccac caactactgt aggcagtagt 780
acaacctcta ttagcaatta taaaaccaag 810
<210> 1042
<211> 300
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for A56 protein fragment (BN-A56-17)
<400> 1042
Thr Pro Phe Pro Gln Thr Ser Lys Lys Ile Gly Asp Asp Ala Thr Leu
1 5 10 15
Ser Cys Asn Arg Asn Asn Thr Asn Asp Tyr Val Val Met Ser Ala Trp
20 25 30
Tyr Lys Glu Pro Asn Ser Ile Ile Leu Leu Ala Ala Lys Ser Asp Val
35 40 45
Leu Tyr Phe Asp Asn Tyr Thr Lys Asp Lys Ile Ser Tyr Asp Ser Pro
50 55 60
Tyr Asp Asp Leu Val Thr Thr Ile Thr Ile Lys Ser Leu Thr Ala Arg
65 70 75 80
Asp Ala Gly Thr Tyr Val Cys Ala Phe Phe Met Thr Ser Pro Thr Asn
85 90 95
Asp Thr Asp Lys Val Asp Tyr Glu Glu Gly Gly Gly Gly Gly Gly Tyr
100 105 110
Ser Thr Glu Leu Ile Val Asn Thr Asp Ser Glu Ser Thr Ile Asp Ile
115 120 125
Ile Leu Ser Gly Ser Thr His Ser Pro Glu Thr Ser Ser Glu Lys Pro
130 135 140
Glu Asp Ile Asp Asn Phe Asn Cys Ser Ser Val Phe Glu Ile Ala Thr
145 150 155 160
Pro Glu Pro Ile Thr Asp Asn Val Glu Asp His Thr Asp Thr Val Thr
165 170 175
Tyr Thr Ser Asp Ser Ile Asn Thr Val Ser Ala Ser Ser Gly Glu Ser
180 185 190
Thr Thr Asp Glu Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp Lys Glu Glu Asp His
195 200 205
Thr Val Thr Asp Thr Val Ser Tyr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ser Gly
210 215 220
Ile Val Thr Thr Lys Ser Thr Thr Asp Asp Ala Tyr Asn Asp Asn Asp
225 230 235 240
Thr Val Pro Ser Thr Thr Val Gly Ser Ser Thr Thr Ser Ile Ser Asn
245 250 255
Tyr Lys Thr Lys Asp Phe Val Glu Ile Phe Gly Ile Thr Ala Leu Ile
260 265 270
Ile Leu Ser Ala Val Ala Ile Phe Cys Ile Thr Tyr Tyr Ile Cys Asn
275 280 285
Lys Arg Ser Arg Lys Tyr Lys Thr Glu Asn Lys Pro
290 295 300
<210> 1043
<211> 900
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein fragment (BN-A56-17)
<400> 1043
acaccttttc ctcagacatc taaaaaaata ggtgatgatg caactctatc atgtaatcga 60
aataatacaa atgactacgt tgttatgagt gcttggtata aggagcccaa ttccattatt 120
cttttagctg ctaaaagcga cgtcttgtat tttgataatt ataccaagga taaaatatct 180
tacgactctc catacgatga tctagttaca actatcacaa ttaaatcatt gactgctaga 240
gatgccggta cttatgtatg tgcattcttt atgacatcac ctacaaatga cactgataaa 300
gtagattatg aagaaggcgg cggcggcggc ggctactcca cagagttgat tgtaaataca 360
gatagtgaat cgactataga cataatacta tctggatcta cacattcacc agaaactagt 420
tctgagaaac cagaggatat agataatttt aattgctcgt cggtattcga aatcgcgact 480
ccggaaccaa ttactgataa tgtagaagat catacagaca ccgtcacata cactagtgat 540
agcattaata cagtaagtgc atcatctgga gaatccacaa cagacgagac tccggaacca 600
attactgata aagaagaaga tcatacagtc acagacactg tctcatacac tacagtaagt 660
acatcatctg gaattgtcac tactaaatca accaccgatg atacgtacaa tgataatgat 720
acagtaccac caactactgt aggcagtagt acaacctcta ttagcaatta taaaaccaag 780
gactttgtag aaatatttgg tattaccgca ttaattatat tgtcggccgt ggcaatattc 840
tgtattacgt attatatatg taataaacgt tcacgtaaat acaaaacaga gaacaagccg 900
900
<210> 1044
<211> 267
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for A56 protein fragment (BN-A56-170)
<400> 1044
Met Thr Arg Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Ile Ser Leu Val Tyr Ala
1 5 10 15
Thr Pro Phe Pro Gln Thr Ser Lys Lys Ile Gly Asp Asp Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Cys Asn Arg Asn Asn Thr Asn Asp Tyr Val Val Met Ser Ala Trp
35 40 45
Tyr Lys Glu Pro Asn Ser Ile Ile Leu Leu Ala Ala Lys Ser Asp Val
50 55 60
Leu Tyr Phe Asp Asn Tyr Thr Lys Asp Lys Ile Ser Tyr Asp Ser Pro
65 70 75 80
Tyr Asp Asp Leu Val Thr Thr Ile Thr Ile Lys Ser Leu Thr Ala Arg
85 90 95
Asp Ala Gly Thr Tyr Val Cys Ala Phe Phe Met Thr Ser Pro Thr Asn
100 105 110
Asp Thr Asp Lys Val Asp Tyr Glu Glu Gly Gly Gly Gly Gly Gly Pro
115 120 125
Glu Pro Ile Thr Asp Asn Val Glu Asp His Thr Asp Thr Val Thr Tyr
130 135 140
Thr Ser Asp Ser Ile Asn Thr Val Ser Ala Ser Ser Gly Glu Ser Thr
145 150 155 160
Thr Asp Glu Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp Lys Glu Glu Asp His Thr
165 170 175
Val Thr Asp Thr Val Ser Tyr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ser Gly Ile
180 185 190
Val Thr Thr Lys Ser Thr Thr Asp Asp Ala Tyr Asn Asp Asn Asp Thr
195 200 205
Val Pro Ser Thr Thr Val Gly Ser Ser Thr Thr Ser Ile Ser Asn Tyr
210 215 220
Lys Thr Lys Asp Phe Val Glu Ile Phe Gly Ile Thr Ala Leu Ile Ile
225 230 235 240
Leu Ser Ala Val Ala Ile Phe Cys Ile Thr Tyr Tyr Ile Cys Asn Lys
245 250 255
Arg Ser Arg Lys Tyr Lys Thr Glu Asn Lys Pro
260 265
<210> 1045
<211> 801
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein fragment (BN-A56-170)
<400> 1045
atgacacgat taccaatact tttgttacta atatcattag tatacgctac accttttcct 60
cagacatcta aaaaaatagg tgatgatgca actctatcat gtaatcgaaa taatacaaat 120
gactacgttg ttatgagtgc ttggtataag gagcccaatt ccattattct tttagctgct 180
aaaagcgacg tcttgtattt tgataattat accaaggata aaatatctta cgactctcca 240
tacgatgatc tagttacaac tatcacaatt aaatcattga ctgctagaga tgccggtact 300
tatgtatgtg cattctttat gacatcacct acaaatgaca ctgataaagt agattatgaa 360
gaaggcggcg gcggcggcgg cccggaacca attactgata atgtagaaga tcatacagac 420
accgtcacat acactagtga tagcattaat acagtaagtg catcatctgg agaatccaca 480
acagacgaga ctccggaacc aattactgat aaagaagaag atcatacagt cacagacact 540
gtctcataca ctacagtaag tacatcatct ggaattgtca ctactaaatc aaccaccgat 600
gatacgtaca atgataatga tacagtacca ccaactactg taggcagtag tacaacctct 660
attagcaatt ataaaaccaa ggactttgta gaaatatttg gtattaccgc attaattata 720
ttgtcggccg tggcaatatt ctgtattacg tattatatat gtaataaacg ttcacgtaaa 780
tacaaaacag agaacaagcc g 801
<210> 1046
<211> 197
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for A56 protein fragment (BN-A56-240)
<400> 1046
Met Thr Arg Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Ile Ser Leu Val Tyr Ala
1 5 10 15
Thr Pro Phe Pro Gln Thr Ser Lys Lys Ile Gly Asp Asp Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Cys Asn Arg Asn Asn Thr Asn Asp Tyr Val Val Met Ser Ala Trp
35 40 45
Tyr Lys Glu Pro Asn Ser Ile Ile Leu Leu Ala Ala Lys Ser Asp Val
50 55 60
Leu Tyr Phe Asp Asn Tyr Thr Lys Asp Lys Ile Ser Tyr Asp Ser Pro
65 70 75 80
Tyr Asp Asp Leu Val Thr Thr Ile Thr Ile Lys Ser Leu Thr Ala Arg
85 90 95
Asp Ala Gly Thr Tyr Val Cys Ala Phe Phe Met Thr Ser Pro Thr Asn
100 105 110
Asp Thr Asp Lys Val Asp Tyr Glu Glu Gly Gly Gly Gly Gly Gly Thr
115 120 125
Thr Asp Asp Ala Tyr Asn Asp Asn Asp Thr Val Pro Ser Thr Thr Val
130 135 140
Gly Ser Ser Thr Thr Ser Ile Ser Asn Tyr Lys Thr Lys Asp Phe Val
145 150 155 160
Glu Ile Phe Gly Ile Thr Ala Leu Ile Ile Leu Ser Ala Val Ala Ile
165 170 175
Phe Cys Ile Thr Tyr Tyr Ile Cys Asn Lys Arg Ser Arg Lys Tyr Lys
180 185 190
Thr Glu Asn Lys Pro
195
<210> 1047
<211> 591
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein fragment (BN-A56-240)
<400> 1047
atgacacgat taccaatact tttgttacta atatcattag tatacgctac accttttcct 60
cagacatcta aaaaaatagg tgatgatgca actctatcat gtaatcgaaa taatacaaat 120
gactacgttg ttatgagtgc ttggtataag gagcccaatt ccattattct tttagctgct 180
aaaagcgacg tcttgtattt tgataattat accaaggata aaatatctta cgactctcca 240
tacgatgatc tagttacaac tatcacaatt aaatcattga ctgctagaga tgccggtact 300
tatgtatgtg cattctttat gacatcacct acaaatgaca ctgataaagt agattatgaa 360
gaaggcggcg gcggcggcgg caccaccgat gatacgtaca atgataatga tacagtacca 420
ccaactactg taggcagtag tacaacctct attagcaatt ataaaaccaa ggactttgta 480
gaaatatttg gtattaccgc attaattata ttgtcggccg tggcaatatt ctgtattacg 540
tattatatat gtaataaacg ttcacgtaaa tacaaaacag agaacaagcc g 591
<210> 1048
<211> 167
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for A56 protein fragment (BN-A56-276)
<400> 1048
Met Thr Arg Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Ile Ser Leu Val Tyr Ala
1 5 10 15
Thr Pro Phe Pro Gln Thr Ser Lys Lys Ile Gly Asp Asp Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Cys Asn Arg Asn Asn Thr Asn Asp Tyr Val Val Met Ser Ala Trp
35 40 45
Tyr Lys Glu Pro Asn Ser Ile Ile Leu Leu Ala Ala Lys Ser Asp Val
50 55 60
Leu Tyr Phe Asp Asn Tyr Thr Lys Asp Lys Ile Ser Tyr Asp Ser Pro
65 70 75 80
Tyr Asp Asp Leu Val Thr Thr Ile Thr Ile Lys Ser Leu Thr Ala Arg
85 90 95
Asp Ala Gly Thr Tyr Val Cys Ala Phe Phe Met Thr Ser Pro Thr Asn
100 105 110
Asp Thr Asp Lys Val Asp Tyr Glu Glu Gly Gly Gly Gly Gly Gly Asp
115 120 125
Phe Val Glu Ile Phe Gly Ile Thr Ala Leu Ile Ile Leu Ser Ala Val
130 135 140
Ala Ile Phe Cys Ile Thr Tyr Tyr Ile Cys Asn Lys Arg Ser Arg Lys
145 150 155 160
Tyr Lys Thr Glu Asn Lys Pro
165
<210> 1049
<211> 501
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein fragment (BN-A56-276)
<400> 1049
atgacacgat taccaatact tttgttacta atatcattag tatacgctac accttttcct 60
cagacatcta aaaaaatagg tgatgatgca actctatcat gtaatcgaaa taatacaaat 120
gactacgttg ttatgagtgc ttggtataag gagcccaatt ccattattct tttagctgct 180
aaaagcgacg tcttgtattt tgataattat accaaggata aaatatctta cgactctcca 240
tacgatgatc tagttacaac tatcacaatt aaatcattga ctgctagaga tgccggtact 300
tatgtatgtg cattctttat gacatcacct acaaatgaca ctgataaagt agattatgaa 360
gaaggcggcg gcggcggcgg cgactttgta gaaatatttg gtattaccgc attaattata 420
ttgtcggccg tggcaatatt ctgtattacg tattatatat gtaataaacg ttcacgtaaa 480
tacaaaacag agaacaagcc g 501
<210> 1050
<211> 205
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for A56 protein fragment (A56-121)
<400> 1050
Met Thr Arg Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Ile Ser Leu Val Tyr Ala
1 5 10 15
Tyr Ser Thr Glu Leu Ile Val Asn Thr Asp Ser Glu Ser Thr Ile Asp
20 25 30
Ile Ile Leu Ser Gly Ser Thr His Ser Pro Glu Thr Ser Ser Glu Lys
35 40 45
Pro Glu Asp Ile Asp Asn Phe Asn Cys Ser Ser Val Phe Glu Ile Ala
50 55 60
Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp Asn Val Glu Asp His Thr Asp Thr Val
65 70 75 80
Thr Tyr Thr Ser Asp Ser Ile Asn Thr Val Ser Ala Ser Ser Gly Glu
85 90 95
Ser Thr Thr Asp Glu Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp Lys Glu Glu Asp
100 105 110
His Thr Val Thr Asp Thr Val Ser Tyr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ser
115 120 125
Gly Ile Val Thr Thr Lys Ser Thr Thr Asp Asp Ala Tyr Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Thr Val Pro Ser Thr Thr Val Gly Ser Ser Thr Thr Ser Ile Ser
145 150 155 160
Asn Tyr Lys Thr Lys Asp Phe Val Glu Ile Phe Gly Ile Thr Ala Leu
165 170 175
Ile Ile Leu Ser Ala Val Ala Ile Phe Cys Ile Thr Tyr Tyr Ile Cys
180 185 190
Asn Lys Arg Ser Arg Lys Tyr Lys Thr Glu Asn Lys Pro
195 200 205
<210> 1051
<211> 615
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein fragment (A56-121)
<400> 1051
atgacacgat taccaatact tttgttacta atatcattag tatacgctta ctccacagag 60
ttgattgtaa atacagatag tgaatcgact atagacataa tactatctgg atctacacat 120
tcaccagaaa ctagttctga gaaaccagag gatatagata attttaattg ctcgtcggta 180
ttcgaaatcg cgactccgga accaattact gataatgtag aagatcatac agacaccgtc 240
acatacacta gtgatagcat taatacagta agtgcatcat ctggagaatc cacaacagac 300
gagactccgg aaccaattac tgataaagaa gaagatcata cagtcacaga cactgtctca 360
tacactacag taagtacatc atctggaatt gtcactacta aatcaaccac cgatgatacg 420
tacaatgata atgatacagt accaccaact actgtaggca gtagtacaac ctctattagc 480
aattataaaa ccaaggactt tgtagaaata tttggtatta ccgcattaat tatattgtcg 540
gccgtggcaa tattctgtat tacgtattat atatgtaata aacgttcacg taaatacaaa 600
acagagaaca agccg 615
<210> 1052
<211> 189
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for A56 protein fragment (A56-17)
<400> 1052
Tyr Ser Thr Glu Leu Ile Val Asn Thr Asp Ser Glu Ser Thr Ile Asp
1 5 10 15
Ile Ile Leu Ser Gly Ser Thr His Ser Pro Glu Thr Ser Ser Glu Lys
20 25 30
Pro Glu Asp Ile Asp Asn Phe Asn Cys Ser Ser Val Phe Glu Ile Ala
35 40 45
Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp Asn Val Glu Asp His Thr Asp Thr Val
50 55 60
Thr Tyr Thr Ser Asp Ser Ile Asn Thr Val Ser Ala Ser Ser Gly Glu
65 70 75 80
Ser Thr Thr Asp Glu Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp Lys Glu Glu Asp
85 90 95
His Thr Val Thr Asp Thr Val Ser Tyr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ser
100 105 110
Gly Ile Val Thr Thr Lys Ser Thr Thr Asp Asp Ala Tyr Asn Asp Asn
115 120 125
Asp Thr Val Pro Ser Thr Thr Val Gly Ser Ser Thr Thr Ser Ile Ser
130 135 140
Asn Tyr Lys Thr Lys Asp Phe Val Glu Ile Phe Gly Ile Thr Ala Leu
145 150 155 160
Ile Ile Leu Ser Ala Val Ala Ile Phe Cys Ile Thr Tyr Tyr Ile Cys
165 170 175
Asn Lys Arg Ser Arg Lys Tyr Lys Thr Glu Asn Lys Pro
180 185
<210> 1053
<211> 567
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein fragment (A56-17)
<400> 1053
tactccacag agttgattgt aaatacagat agtgaatcga ctatagacat aatactatct 60
ggatctacac attcaccaga aactagttct gagaaaccag aggatataga taattttaat 120
tgctcgtcgg tattcgaaat cgcgactccg gaaccaatta ctgataatgt agaagatcat 180
acagacaccg tcacatacac tagtgatagc attaatacag taagtgcatc atctggagaa 240
tccacaacag acgagactcc ggaaccaatt actgataaag aagaagatca tacagtcaca 300
gacactgtct catacactac agtaagtaca tcatctggaa ttgtcactac taaatcaacc 360
accgatgata cgtacaatga taatgataca gtaccaccaa ctactgtagg cagtagtaca 420
acctctatta gcaattataa aaccaaggac tttgtagaaa tatttggtat taccgcatta 480
attatattgt cggccgtggc aatattctgt attacgtatt atatatgtaa taaacgttca 540
cgtaaataca aaacagagaa caagccg 567
<210> 1054
<211> 165
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for A56 protein fragment (A56-121S)
<400> 1054
Met Thr Arg Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Ile Ser Leu Val Tyr Ala
1 5 10 15
Tyr Ser Thr Glu Leu Ile Val Asn Thr Asp Ser Glu Ser Thr Ile Asp
20 25 30
Ile Ile Leu Ser Gly Ser Thr His Ser Pro Glu Thr Ser Ser Glu Lys
35 40 45
Pro Glu Asp Ile Asp Asn Phe Asn Cys Ser Ser Val Phe Glu Ile Ala
50 55 60
Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp Asn Val Glu Asp His Thr Asp Thr Val
65 70 75 80
Thr Tyr Thr Ser Asp Ser Ile Asn Thr Val Ser Ala Ser Ser Gly Glu
85 90 95
Ser Thr Thr Asp Glu Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp Lys Glu Glu Asp
100 105 110
His Thr Val Thr Asp Thr Val Ser Tyr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ser
115 120 125
Gly Ile Val Thr Thr Lys Ser Thr Thr Asp Asp Ala Tyr Asn Asp Asn
130 135 140
Asp Thr Val Pro Ser Thr Thr Val Gly Ser Ser Thr Thr Ser Ile Ser
145 150 155 160
Asn Tyr Lys Thr Lys
165
<210> 1055
<211> 495
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein fragment (A56-121S)
<400> 1055
atgacacgat taccaatact tttgttacta atatcattag tatacgctta ctccacagag 60
ttgattgtaa atacagatag tgaatcgact atagacataa tactatctgg atctacacat 120
tcaccagaaa ctagttctga gaaaccagag gatatagata attttaattg ctcgtcggta 180
ttcgaaatcg cgactccgga accaattact gataatgtag aagatcatac agacaccgtc 240
acatacacta gtgatagcat taatacagta agtgcatcat ctggagaatc cacaacagac 300
gagactccgg aaccaattac tgataaagaa gaagatcata cagtcacaga cactgtctca 360
tacactacag taagtacatc atctggaatt gtcactacta aatcaaccac cgatgatacg 420
tacaatgata atgatacagt accaccaact actgtaggca gtagtacaac ctctattagc 480
aattataaaa ccaag 495
<210> 1056
<211> 156
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for A56 protein fragment (A56-170)
<400> 1056
Met Thr Arg Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Ile Ser Leu Val Tyr Ala
1 5 10 15
Pro Glu Pro Ile Thr Asp Asn Val Glu Asp His Thr Asp Thr Val Thr
20 25 30
Tyr Thr Ser Asp Ser Ile Asn Thr Val Ser Ala Ser Ser Gly Glu Ser
35 40 45
Thr Thr Asp Glu Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp Lys Glu Glu Asp His
50 55 60
Thr Val Thr Asp Thr Val Ser Tyr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ser Gly
65 70 75 80
Ile Val Thr Thr Lys Ser Thr Thr Asp Asp Ala Tyr Asn Asp Asn Asp
85 90 95
Thr Val Pro Ser Thr Thr Val Gly Ser Ser Thr Thr Ser Ile Ser Asn
100 105 110
Tyr Lys Thr Lys Asp Phe Val Glu Ile Phe Gly Ile Thr Ala Leu Ile
115 120 125
Ile Leu Ser Ala Val Ala Ile Phe Cys Ile Thr Tyr Tyr Ile Cys Asn
130 135 140
Lys Arg Ser Arg Lys Tyr Lys Thr Glu Asn Lys Pro
145 150 155
<210> 1057
<211> 468
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein fragment (A56-170)
<400> 1057
atgacacgat taccaatact tttgttacta atatcattag tatacgctcc ggaaccaatt 60
actgataatg tagaagatca tacagacacc gtcacataca ctagtgatag cattaataca 120
gtaagtgcat catctggaga atccacaaca gacgagactc cggaaccaat tactgataaa 180
gaagaagatc atacagtcac agacactgtc tcatacacta cagtaagtac atcatctgga 240
attgtcacta ctaaatcaac caccgatgat acgtacaatg ataatgatac agtaccacca 300
actactgtag gcagtagtac aacctctatt agcaattata aaaccaagga ctttgtagaa 360
atatttggta ttaccgcatt aattatattg tcggccgtgg caatattctg tattacgtat 420
tatatatgta ataaacgttc acgtaaatac aaaacagaga acaagccg 468
<210> 1058
<211> 86
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for A56 protein fragment (A56-240)
<400> 1058
Met Thr Arg Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Ile Ser Leu Val Tyr Ala
1 5 10 15
Thr Thr Asp Asp Ala Tyr Asn Asp Asn Asp Thr Val Pro Ser Thr Thr
20 25 30
Val Gly Ser Ser Thr Thr Ser Ile Ser Asn Tyr Lys Thr Lys Asp Phe
35 40 45
Val Glu Ile Phe Gly Ile Thr Ala Leu Ile Ile Leu Ser Ala Val Ala
50 55 60
Ile Phe Cys Ile Thr Tyr Tyr Ile Cys Asn Lys Arg Ser Arg Lys Tyr
65 70 75 80
Lys Thr Glu Asn Lys Pro
85
<210> 1059
<211> 258
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein fragment (A56-240)
<400> 1059
atgacacgat taccaatact tttgttacta atatcattag tatacgctac caccgatgat 60
acgtacaatg ataatgatac agtaccacca actactgtag gcagtagtac aacctctatt 120
agcaattata aaaccaagga ctttgtagaa atatttggta ttaccgcatt aattatattg 180
tcggccgtgg caatattctg tattacgtat tatatatgta ataaacgttc acgtaaatac 240
aaaacagaga acaagccg 258
<210> 1060
<211> 56
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for A56 protein fragment (A56-276)
<400> 1060
Met Thr Arg Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Ile Ser Leu Val Tyr Ala
1 5 10 15
Asp Phe Val Glu Ile Phe Gly Ile Thr Ala Leu Ile Ile Leu Ser Ala
20 25 30
Val Ala Ile Phe Cys Ile Thr Tyr Tyr Ile Cys Asn Lys Arg Ser Arg
35 40 45
Lys Tyr Lys Thr Glu Asn Lys Pro
50 55
<210> 1061
<211> 168
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein fragment (A56-276)
<400> 1061
atgacacgat taccaatact tttgttacta atatcattag tatacgctga ctttgtagaa 60
atatttggta ttaccgcatt aattatattg tcggccgtgg caatattctg tattacgtat 120
tatatatgta ataaacgttc acgtaaatac aaaacagaga acaagccg 168
<210> 1062
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH-CDR1 (LakePharma variant3)
<400> 1062
Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr Thr
1 5
<210> 1063
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR1 of LakePharma variant4
<400> 1063
Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr Thr
1 5
<210> 1064
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR2 of LakePharma variant3
<400> 1064
Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Gly Thr
1 5
<210> 1065
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-CDR3 of LakePharma variant 3,4
<400> 1065
Ala Arg Ser His Tyr Arg Tyr Asp Tyr Trp Tyr Phe Asp Val
1 5 10
<210> 1066
<211> 11
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR1 of LakePharma variant 3,4
<400> 1066
Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 1067
<211> 3
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR2 of LakePharma variant 3,4
<400> 1067
Lys Val Ser
1
<210> 1068
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> L-CDR3 of LakePharma variant 3,4
<400> 1068
Ser Gln Ser Thr His Val Pro Pro Phe Thr
1 5 10
<210> 1069
<211> 445
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH of LakePharma variant 3,4
<400> 1069
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Met Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Thr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Asn Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Leu Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Gly Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Leu Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser His Tyr Arg Tyr Asp Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly
100 105 110
Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser
115 120 125
Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val
130 135 140
Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145 150 155 160
Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
165 170 175
Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Thr Trp Pro Ser Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro
195 200 205
Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly
210 215 220
Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile
225 230 235 240
Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys
245 250 255
Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln
260 265 270
Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln
275 280 285
Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu
290 295 300
Pro Ile Met His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg
305 310 315 320
Val Asn Ser Ala Ala Phe Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys
325 330 335
Thr Lys Gly Arg Pro Lys Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro
340 345 350
Lys Glu Gln Met Ala Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr
355 360 365
Asp Phe Phe Pro Glu Asp Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln
370 375 380
Pro Ala Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Gln Pro Ile Met Asp Thr Asp Gly
385 390 395 400
Ser Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu
405 410 415
Ala Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn
420 425 430
His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
435 440 445
<210> 1070
<211> 445
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VH of LakePharma variant 4
<400> 1070
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Met Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Thr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Asn Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Leu Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Gly Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Leu Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser His Tyr Arg Tyr Asp Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly
100 105 110
Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser
115 120 125
Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val
130 135 140
Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145 150 155 160
Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
165 170 175
Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Thr Trp Pro Ser Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro
195 200 205
Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly
210 215 220
Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile
225 230 235 240
Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys
245 250 255
Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln
260 265 270
Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln
275 280 285
Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu
290 295 300
Pro Ile Met His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg
305 310 315 320
Val Asn Ser Ala Ala Phe Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys
325 330 335
Thr Lys Gly Arg Pro Lys Ala Pro Gln Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro
340 345 350
Lys Glu Gln Met Ala Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr
355 360 365
Asp Phe Phe Pro Glu Asp Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln
370 375 380
Pro Ala Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Gln Pro Ile Met Asp Thr Asp Gly
385 390 395 400
Ser Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu
405 410 415
Ala Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn
420 425 430
His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys
435 440 445
<210> 1071
<211> 220
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> VL of LakePharma variant 3, 4
<400> 1071
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile
100 105 110
Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser
115 120 125
Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn
130 135 140
Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu
145 150 155 160
Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp
165 170 175
Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr
180 185 190
Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr
195 200 205
Ser Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
210 215 220
<210> 1072
<211> 945
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein
<400> 1072
atgacacgat taccaatact tttgttacta atatcattag tatacgctac accttttcct 60
cagacatcta aaaaaatagg tgatgatgca actctatcat gtaatcgaaa taatacaaat 120
gactacgttg ttatgagtgc ttggtataag gagcccaatt ctattattct tttagctgct 180
aaaagcgacg tcttgtattt tgataattat accaaggata aaatatctta cgactctcca 240
tacgatgatc tagttacaac tatcacaatt aaatcattga ctgctagaga tgccggtact 300
tatgtatgtg cattctttat gacatcgcct acaaatgaca ctgataaagt agattatgaa 360
gaatactcca cagagttgat tgtaaataca gatagtgaat cgactattga cataatacta 420
tctggatcta cacattcacc ggaaactagt tctgagaaac cagaggatat agataatttt 480
aattgctcgt cggtattcga aatcgcgact ccggaaccaa ttactgataa tgtagaagat 540
catacagaca ccgtcacata cactagtgat agcattaata cagtaagtgc atcatctgga 600
gaatccacaa cagacgagac tccggaacca attactgata aagaagaaga tcatacagtc 660
acagacactg tctcatacac tacagtaagt acatcatctg gaattgtcac tactaaatca 720
accaccgatg atgcggatct ttatgatacg tacaatgata atgatacagt accatcaact 780
actgtaggta gtagtacaac ctctattagc aattataaaa ccaaggactt tgtagaaata 840
tttggtatta ccgcattaat tatattgtcg gccgtggcaa tattctgtat tacgtattat 900
atatgtaata aacgttcacg taaatacaaa acagagaaca aagtc 945
<210> 1073
<211> 315
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for A56 protein
<400> 1073
Met Thr Arg Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Ile Ser Leu Val Tyr Ala
1 5 10 15
Thr Pro Phe Pro Gln Thr Ser Lys Lys Ile Gly Asp Asp Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Cys Asn Arg Asn Asn Thr Asn Asp Tyr Val Val Met Ser Ala Trp
35 40 45
Tyr Lys Glu Pro Asn Ser Ile Ile Leu Leu Ala Ala Lys Ser Asp Val
50 55 60
Leu Tyr Phe Asp Asn Tyr Thr Lys Asp Lys Ile Ser Tyr Asp Ser Pro
65 70 75 80
Tyr Asp Asp Leu Val Thr Thr Ile Thr Ile Lys Ser Leu Thr Ala Arg
85 90 95
Asp Ala Gly Thr Tyr Val Cys Ala Phe Phe Met Thr Ser Pro Thr Asn
100 105 110
Asp Thr Asp Lys Val Asp Tyr Glu Glu Tyr Ser Thr Glu Leu Ile Val
115 120 125
Asn Thr Asp Ser Glu Ser Thr Ile Asp Ile Ile Leu Ser Gly Ser Thr
130 135 140
His Ser Pro Glu Thr Ser Ser Glu Lys Pro Glu Asp Ile Asp Asn Phe
145 150 155 160
Asn Cys Ser Ser Val Phe Glu Ile Ala Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp
165 170 175
Asn Val Glu Asp His Thr Asp Thr Val Thr Tyr Thr Ser Asp Ser Ile
180 185 190
Asn Thr Val Ser Ala Ser Ser Gly Glu Ser Thr Thr Asp Glu Thr Pro
195 200 205
Glu Pro Ile Thr Asp Lys Glu Glu Asp His Thr Val Thr Asp Thr Val
210 215 220
Ser Tyr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ser Gly Ile Val Thr Thr Lys Ser
225 230 235 240
Thr Thr Asp Asp Ala Asp Leu Tyr Asp Thr Tyr Asn Asp Asn Asp Thr
245 250 255
Val Pro Ser Thr Thr Val Gly Ser Ser Thr Thr Ser Ile Ser Asn Tyr
260 265 270
Lys Thr Lys Asp Phe Val Glu Ile Phe Gly Ile Thr Ala Leu Ile Ile
275 280 285
Leu Ser Ala Val Ala Ile Phe Cys Ile Thr Tyr Tyr Ile Cys Asn Lys
290 295 300
Arg Ser Arg Lys Tyr Lys Thr Glu Asn Lys Val
305 310 315
<210> 1074
<211> 930
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein(OTS-412-A56)
<400> 1074
atgacacgat taccaatact tttgttacta atatcattag tatacgctac accttttcct 60
cagacatcta aaaaaatagg tgatgatgca actctatcat gtaatcgaaa taatacaaat 120
gactacgttg ttatgagtgc ttggtataag gagcccaatt ctattattct tttagctgct 180
aaaagcgacg tcttgtattt tgataattat accaaggata aaatatctta cgactctcca 240
tacgatgatc tagttacaac tatcacaatt aaatcattga ctgctagaga tgccggtact 300
tatgtatgtg cattctttat gacatcgcct acaaatgaca ctgataaagt agattatgaa 360
gaatactcca cagagttgat tgtaaataca gatagtgaat cgactattga cataatacta 420
tctggatcta cacattcacc ggaaactagt tctgagaaac cagaggatat agataatttt 480
aattgctcgt cggtattcga aatcgcgact ccggaaccaa ttactgataa tgtagaagat 540
catacagaca ccgtcacata cactagtgat agcattaata cagtaagtgc atcatctgga 600
gaatccacaa cagacgagac tccggaacca attactgata aagaagaaga tcatacagtc 660
acagacactg tctcatacac tacagtaagt acatcatctg gaattgtcac tactaaatca 720
accaccgatg atgcgtacaa tgataatgat acagtaccat caactactgt aggtagtagt 780
acaacctcta ttagcaatta taaaaccaag gactttgtag aaatatttgg tattaccgca 840
ttaattatat tgtcggccgt ggcaatattc tgtattacgt attatatatg taataaacgt 900
tcacgtaaat acaaaacaga gaacaaagtc 930
<210> 1075
<211> 310
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce of A56 protein (OTS-412-A56)
<400> 1075
Met Thr Arg Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Ile Ser Leu Val Tyr Ala
1 5 10 15
Thr Pro Phe Pro Gln Thr Ser Lys Lys Ile Gly Asp Asp Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Cys Asn Arg Asn Asn Thr Asn Asp Tyr Val Val Met Ser Ala Trp
35 40 45
Tyr Lys Glu Pro Asn Ser Ile Ile Leu Leu Ala Ala Lys Ser Asp Val
50 55 60
Leu Tyr Phe Asp Asn Tyr Thr Lys Asp Lys Ile Ser Tyr Asp Ser Pro
65 70 75 80
Tyr Asp Asp Leu Val Thr Thr Ile Thr Ile Lys Ser Leu Thr Ala Arg
85 90 95
Asp Ala Gly Thr Tyr Val Cys Ala Phe Phe Met Thr Ser Pro Thr Asn
100 105 110
Asp Thr Asp Lys Val Asp Tyr Glu Glu Tyr Ser Thr Glu Leu Ile Val
115 120 125
Asn Thr Asp Ser Glu Ser Thr Ile Asp Ile Ile Leu Ser Gly Ser Thr
130 135 140
His Ser Pro Glu Thr Ser Ser Glu Lys Pro Glu Asp Ile Asp Asn Phe
145 150 155 160
Asn Cys Ser Ser Val Phe Glu Ile Ala Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp
165 170 175
Asn Val Glu Asp His Thr Asp Thr Val Thr Tyr Thr Ser Asp Ser Ile
180 185 190
Asn Thr Val Ser Ala Ser Ser Gly Glu Ser Thr Thr Asp Glu Thr Pro
195 200 205
Glu Pro Ile Thr Asp Lys Glu Glu Asp His Thr Val Thr Asp Thr Val
210 215 220
Ser Tyr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ser Gly Ile Val Thr Thr Lys Ser
225 230 235 240
Thr Thr Asp Asp Ala Tyr Asn Asp Asn Asp Thr Val Pro Ser Thr Thr
245 250 255
Val Gly Ser Ser Thr Thr Ser Ile Ser Asn Tyr Lys Thr Lys Asp Phe
260 265 270
Val Glu Ile Phe Gly Ile Thr Ala Leu Ile Ile Leu Ser Ala Val Ala
275 280 285
Ile Phe Cys Ile Thr Tyr Tyr Ile Cys Asn Lys Arg Ser Arg Lys Tyr
290 295 300
Lys Thr Glu Asn Lys Val
305 310
<210> 1076
<211> 774
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein (WOTS-418-A56)
<400> 1076
acaccttttc ctcagacatc taaaaaaata ggtgatgatg caactctatc atgtaatcga 60
aataatacaa atgactacgt tgttatgagt gcttggtata aggagcccaa ttctattatt 120
cttttagctg ctaaaagcga cgtcttgtat tttgataatt ataccaagga taaaatatct 180
tacgactctc catacgatga tctagttaca actatcacaa ttaaatcatt gactgctaga 240
gatgccggta cttatgtatg tgcattcttt atgacatcgc ctacaaatga cactgataaa 300
gtagattatg aagaatactc cacagagttg attgtaaata cagatagtga atcgactatt 360
gacataatac tatctggatc tacacattca ccggaaacta gttctgagaa accagaggat 420
atagataatt ttaattgctc gtcggtattc gaaatcgcga ctccggaacc aattactgat 480
aatgtagaag atcatacaga caccgtcaca tacactagtg atagcattaa tacagtaagt 540
gcatcatctg gagaatccac aacagacgag actccggaac caattactga taaagaagaa 600
gatcatacag tcacagacac tgtctcatac actacagtaa gtacatcatc tggaattgtc 660
actactaaat caaccaccga tgatgcgtac aatgataatg atacagtacc atcaactact 720
gtaggtagta gtacaacctc tattagcaat tataaaacca aggactttgt agaa 774
<210> 1077
<211> 258
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid sequence of A56 protein fragment (WOTS-418-A56)
<400> 1077
Thr Pro Phe Pro Gln Thr Ser Lys Lys Ile Gly Asp Asp Ala Thr Leu
1 5 10 15
Ser Cys Asn Arg Asn Asn Thr Asn Asp Tyr Val Val Met Ser Ala Trp
20 25 30
Tyr Lys Glu Pro Asn Ser Ile Ile Leu Leu Ala Ala Lys Ser Asp Val
35 40 45
Leu Tyr Phe Asp Asn Tyr Thr Lys Asp Lys Ile Ser Tyr Asp Ser Pro
50 55 60
Tyr Asp Asp Leu Val Thr Thr Ile Thr Ile Lys Ser Leu Thr Ala Arg
65 70 75 80
Asp Ala Gly Thr Tyr Val Cys Ala Phe Phe Met Thr Ser Pro Thr Asn
85 90 95
Asp Thr Asp Lys Val Asp Tyr Glu Glu Tyr Ser Thr Glu Leu Ile Val
100 105 110
Asn Thr Asp Ser Glu Ser Thr Ile Asp Ile Ile Leu Ser Gly Ser Thr
115 120 125
His Ser Pro Glu Thr Ser Ser Glu Lys Pro Glu Asp Ile Asp Asn Phe
130 135 140
Asn Cys Ser Ser Val Phe Glu Ile Ala Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp
145 150 155 160
Asn Val Glu Asp His Thr Asp Thr Val Thr Tyr Thr Ser Asp Ser Ile
165 170 175
Asn Thr Val Ser Ala Ser Ser Gly Glu Ser Thr Thr Asp Glu Thr Pro
180 185 190
Glu Pro Ile Thr Asp Lys Glu Glu Asp His Thr Val Thr Asp Thr Val
195 200 205
Ser Tyr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ser Gly Ile Val Thr Thr Lys Ser
210 215 220
Thr Thr Asp Asp Ala Tyr Asn Asp Asn Asp Thr Val Pro Ser Thr Thr
225 230 235 240
Val Gly Ser Ser Thr Thr Ser Ile Ser Asn Tyr Lys Thr Lys Asp Phe
245 250 255
Val Glu
<210> 1078
<211> 942
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of A56 protein (WOTS-418-A56)
<400> 1078
atgacacgat taccaatact tttgttacta atatcattag tatacgctac accttttcct 60
cagacatcta aaaaaatagg tgatgatgca actctatcat gtaatcgaaa taatacaaat 120
gactacgttg ttatgagtgc ttggtataag gagcccaatt ccattattct tttagctgct 180
aaaagcgacg tcttgtattt tgataattat accaaggata aaatatctta cgactctcca 240
tacgatgatc tagttacaac tatcacaatt aaatcattga ctgctagaga tgccggtact 300
tatgtatgtg cattctttat gacatcaact acaaatgaca ctgataaagt agattatgaa 360
gaatactcca cagagttgat tgtaaataca gatagtgaat cgactataga cataatacta 420
tctggatcta cacattcacc ggaaactagt tctaagaaac ctgattatat agataattct 480
aattgctcgt cggtattcga aatcgcgact ccggaaccaa ttactgataa tgtagaagat 540
catacagaca ccgtcacata cactagtgat agcattaata cagtaagtgc atcatctgga 600
gaatccacaa cagacgagac tccggaacca attactgata aagaagatca tacagttaca 660
gacactgtct catacactac agtaagtaca tcatctggaa ttgtcactac taaatcaacc 720
accgatgatg cggatcttta tgatacgtac aatgataatg atacagtacc accaactact 780
gtaggcggta gtacaacctc tattagcaat tataaaacca aggactttgt agaaatattt 840
ggtattaccg cattaattat attgtcggcc gtggcaattt tctgtattac atattatata 900
tataataaac gttcacgtaa atacaaaaca gagaacaaag tc 942
<210> 1079
<211> 314
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce of A56 protein (WOTS-418-A56)
<400> 1079
Met Thr Arg Leu Pro Ile Leu Leu Leu Leu Ile Ser Leu Val Tyr Ala
1 5 10 15
Thr Pro Phe Pro Gln Thr Ser Lys Lys Ile Gly Asp Asp Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Cys Asn Arg Asn Asn Thr Asn Asp Tyr Val Val Met Ser Ala Trp
35 40 45
Tyr Lys Glu Pro Asn Ser Ile Ile Leu Leu Ala Ala Lys Ser Asp Val
50 55 60
Leu Tyr Phe Asp Asn Tyr Thr Lys Asp Lys Ile Ser Tyr Asp Ser Pro
65 70 75 80
Tyr Asp Asp Leu Val Thr Thr Ile Thr Ile Lys Ser Leu Thr Ala Arg
85 90 95
Asp Ala Gly Thr Tyr Val Cys Ala Phe Phe Met Thr Ser Thr Thr Asn
100 105 110
Asp Thr Asp Lys Val Asp Tyr Glu Glu Tyr Ser Thr Glu Leu Ile Val
115 120 125
Asn Thr Asp Ser Glu Ser Thr Ile Asp Ile Ile Leu Ser Gly Ser Thr
130 135 140
His Ser Pro Glu Thr Ser Ser Lys Lys Pro Asp Tyr Ile Asp Asn Ser
145 150 155 160
Asn Cys Ser Ser Val Phe Glu Ile Ala Thr Pro Glu Pro Ile Thr Asp
165 170 175
Asn Val Glu Asp His Thr Asp Thr Val Thr Tyr Thr Ser Asp Ser Ile
180 185 190
Asn Thr Val Ser Ala Ser Ser Gly Glu Ser Thr Thr Asp Glu Thr Pro
195 200 205
Glu Pro Ile Thr Asp Lys Glu Asp His Thr Val Thr Asp Thr Val Ser
210 215 220
Tyr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ser Gly Ile Val Thr Thr Lys Ser Thr
225 230 235 240
Thr Asp Asp Ala Asp Leu Tyr Asp Thr Tyr Asn Asp Asn Asp Thr Val
245 250 255
Pro Pro Thr Thr Val Gly Gly Ser Thr Thr Ser Ile Ser Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Lys Asp Phe Val Glu Ile Phe Gly Ile Thr Ala Leu Ile Ile Leu
275 280 285
Ser Ala Val Ala Ile Phe Cys Ile Thr Tyr Tyr Ile Tyr Asn Lys Arg
290 295 300
Ser Arg Lys Tyr Lys Thr Glu Asn Lys Val
305 310
<210> 1080
<211> 21
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for CD8 signal sequence
<400> 1080
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro
20
<210> 1081
<211> 774
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for anti-UTTA scFv (Ab13)
<400> 1081
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
1 5 10 15
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
20 25 30
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
35 40 45
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
50 55 60
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
65 70 75 80
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
85 90 95
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
100 105 110
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
115 120 125
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
130 135 140
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
145 150 155 160
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
165 170 175
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
180 185 190
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
195 200 205
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
210 215 220
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
225 230 235 240
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
245 250 255
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
260 265 270
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
275 280 285
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
290 295 300
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
305 310 315 320
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
325 330 335
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
340 345 350
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
355 360 365
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
370 375 380
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
385 390 395 400
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
405 410 415
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
420 425 430
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
435 440 445
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
450 455 460
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
465 470 475 480
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
485 490 495
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
500 505 510
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
515 520 525
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
530 535 540
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
545 550 555 560
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
565 570 575
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
580 585 590
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
595 600 605
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
610 615 620
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
625 630 635 640
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
645 650 655
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
660 665 670
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
675 680 685
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
690 695 700
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
705 710 715 720
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
725 730 735
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
740 745 750
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
755 760 765
Ala Ala Ala Ala Ala Ala
770
<210> 1082
<211> 261
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for anti-UTTA scFv (Ab16)
<400> 1082
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Ser Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala
50 55 60
Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp Thr Ser Lys Asn
65 70 75 80
Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Ala Val Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Lys Ser Tyr Ala Gly Pro Ile Ser Tyr Tyr Tyr Tyr
100 105 110
Gly Leu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly
115 120 125
Leu Gly Gly Leu Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Ser Ser Gly Val Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val
145 150 155 160
Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser
165 170 175
Ser Asp Ile Gly Arg Tyr Asn Leu Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro
180 185 190
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ser
195 200 205
Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Asn Ser Asp Asn Thr Ala Ser
210 215 220
Leu Thr Ile Ser Gly Leu Arg Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys
225 230 235 240
Ser Ser Tyr Ala Ser Ser Ser Thr Pro Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr
245 250 255
Lys Val Thr Val Leu
260
<210> 1083
<211> 249
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for anti-UTTA scFv (Ab18)
<400> 1083
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Lys
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Gly Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Gly Gly Gly Ser Ser Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Ser Asn Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Gly Val Met Leu Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Pro Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Gly Gly Leu Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Ser Ser Gly Val Gly Ser Asp Ile Gln
130 135 140
Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Pro Ala Ser Val Gly Asp Arg Val
145 150 155 160
Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Tyr Ser Val Ser Pro Trp Leu Ala Trp
165 170 175
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ala
180 185 190
Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser
195 200 205
Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp Asp Phe
210 215 220
Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Met Met Tyr Thr Phe
225 230 235 240
Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
245
<210> 1084
<211> 255
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for anti-UTTA scFv (Ab01)
<400> 1084
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Phe Val Phe Gly Ser Gly Thr Tyr Leu Asp Ser Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Gly Gly Leu Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Ser Ser Gly Val Gly Ser Asp
130 135 140
Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu
145 150 155 160
Ser Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asn
165 170 175
Gly Asn Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro
180 185 190
Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp
195 200 205
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser
210 215 220
Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala Leu
225 230 235 240
Gln Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
245 250 255
<210> 1085
<211> 255
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for anti-UTTA scFv (Ab19)
<400> 1085
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Arg Arg Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Val Thr Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Val Leu Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Ile Pro Leu Ile Asp Val Glu Asn Tyr Ala Arg Glu Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Met Lys Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Asn Asn Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ser Val Val Arg Gly Leu Asp Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Phe Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Gly Gly
115 120 125
Leu Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Ser Ser Gly
130 135 140
Val Gly Ser Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Leu Ser Val Ala
145 150 155 160
Pro Gly Lys Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Ile Gly Ser
165 170 175
Lys Ser Val His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu
180 185 190
Val Thr Tyr Tyr Asp Gly Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe
195 200 205
Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Ile Ile Ser Arg Val
210 215 220
Glu Ala Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser
225 230 235 240
Ser Asp Gln Gly Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
245 250 255
<210> 1086
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for CD8 TM
<400> 1086
Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala
1 5 10 15
Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly
20 25 30
Gly Ala Val His Thr Arg Gly Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro
35 40 45
Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu
50 55 60
Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp
65 70 75 80
Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly
85 90 95
Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys
100 105
<210> 1087
<211> 42
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for 4-1BB Signaling Domain
<400> 1087
Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met
1 5 10 15
Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe
20 25 30
Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu
35 40
<210> 1088
<211> 112
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> amino acid seqeunce for CD3Z Signaling Domain
<400> 1088
Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly
1 5 10 15
Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr
20 25 30
Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys
35 40 45
Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys
50 55 60
Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg
65 70 75 80
Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala
85 90 95
Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
100 105 110
<210> 1089
<211> 63
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of CD8 signal sequence
<400> 1089
atggctctgc ctgtgacagc tctgctgctg cctctggctc tgcttctgca tgctgctaga 60
cct 63
<210> 1090
<211> 747
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of anti-UTTA scFv (Ab13)
<400> 1090
cagatgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaaga ctgggtcctc agtgaaggtt 60
tcctgcaagg cttccggaga caccctcacc taccgcttcc tgcactgggt gcgacaggcc 120
cccggacaag cgcctgagtg gatgggatgg atcacacctt tcaatgataa caccaactac 180
gcacagaaat tccaggacag agtcaccatt accagggaca ggtctatgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gactggaggt 300
gggaacaatt attacggcat ggaggtctgg ggccaaggga ccccgatcac cgtctcctca 360
ggcctcgggg gcctcggagg aggaggtagt ggcggaggag gctccggtgg atccagcggt 420
gtgggttcct cctatgagct gactcagcca ctctcactgt ccgtgtcccc aggacagaca 480
gccagcatca cctgctctgg agataaattg ggagataaat ttacttcctg gtatcaacag 540
cagccaggcc agtcccctgt actggtcatc tatcaagatg ccaagcgacc ctcagggatc 600
cctgagcgat tctctggctc caactctggg agcacagcca ctctgaccat cagcgggacc 660
cagtctatgg atgaggctga ctattactgt caggcgtggg acagcagcag tgtggtgttc 720
ggcggaggga ccaagctgac cgtccta 747
<210> 1091
<211> 783
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of anti-UTTA scFv (Ab16)
<400> 1091
caggtgcagc tgcagcagtc aggtccagga ctggtgaagc cctcgcagac cctctcactc 60
acctgtgcca tctccgggga cagtgtctct agcaacagtg ctgcttggaa ctggatcagg 120
cagtccccat cgagaggcct tgagtggctg ggaaggacat actacaggtc caagtggtat 180
aatgattatg cagtatctgt gaaaagtcga ataaccatca acccagacac atccaagaac 240
cagttctccc tgcagctgaa ctctgtgacc gccgtggaca cggccgtgta ttactgtgcg 300
aaatcctatg cggggcctat ctcttattac tactacggtc tggacgtctg gggccaaggg 360
accacggtca ccgtctcctc aggcctcggg ggcctcggag gaggaggtag tggcggagga 420
ggctccggtg gatccagcgg tgtgggttcc cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg 480
tctgggtctc ctggacagtc ggtcaccatc tcctgcactg gaaccagcag tgacattggt 540
cgttataacc ttgtctcctg gtaccaacag cacccaggca aagcccccaa actcatgatt 600
tatgggggca gtaagcggcc ctcaggggtt tctaatcgct tctctggctc caactctgac 660
aacacggcct ccctgacaat ctctgggctc cgggctgagg acgaggctga ttattactgc 720
agttcatatg caagcagcag caccccttat gtcttcggaa ctgggaccaa ggtcaccgtc 780
cta 783
<210> 1092
<211> 747
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of anti-UTTA scFv (Ab18)
<400> 1092
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctgggaaatc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagc acctatggca tgacttgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggg attagtggtg ggggttctag cacaaactac 180
gcagactccg tgaagggccg cttcatcatt tctagagaca actctaacaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc aaggtgggga 300
gttatgcttt cctttgacta ctggggccag ggaaccccgg tcaccgtctc ctcaggcctc 360
gggggcctcg gaggaggagg tagtggcgga ggaggctccg gtggatccag cggtgtgggt 420
tccgacatcc agatgaccca gtctccttcc accctgcctg catctgtagg ggacagagtc 480
accatcactt gccgggccag ttacagtgtc agtccctggt tggcctggta tcagcagaaa 540
ccagggaaag cccctaaact cctgatctat aaggcatcta ctttagaaag tggggtccca 600
tcaaggttca gcggcagtgg atctgggaca gaattcactc tcaccatcag cagcctgcag 660
cctgatgatt ttgcaactta ttactgccaa cagtttaata gttatatgat gtacactttt 720
ggccagggga ccaagctgga aatcaaa 747
<210> 1093
<211> 747
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of anti-UTTA scFv (Ab01)
<400> 1093
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctgggaaatc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagc acctatggca tgacttgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggg attagtggtg ggggttctag cacaaactac 180
gcagactccg tgaagggccg cttcatcatt tctagagaca actctaacaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc aaggtgggga 300
gttatgcttt cctttgacta ctggggccag ggaaccccgg tcaccgtctc ctcaggcctc 360
gggggcctcg gaggaggagg tagtggcgga ggaggctccg gtggatccag cggtgtgggt 420
tccgacatcc agatgaccca gtctccttcc accctgcctg catctgtagg ggacagagtc 480
accatcactt gccgggccag ttacagtgtc agtccctggt tggcctggta tcagcagaaa 540
ccagggaaag cccctaaact cctgatctat aaggcatcta ctttagaaag tggggtccca 600
tcaaggttca gcggcagtgg atctgggaca gaattcactc tcaccatcag cagcctgcag 660
cctgatgatt ttgcaactta ttactgccaa cagtttaata gttatatgat gtacactttt 720
ggccagggga ccaagctgga aatcaaa 747
<210> 1094
<211> 765
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of anti-UTTA scFv (Ab19)
<400> 1094
caggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaggaggc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaaga cttcgggagt caccttcagc ggctatgttc tgagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacacg gccttgagtg gatgggacgg atcatccctt taattgacgt ggaaaactat 180
gcacgggagt tccagggtag aatgaagatc accgcagaca agtccacgaa tacagtctac 240
atggaactga acaacctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gaaatcggtc 300
gtacggggtc ttgactacta ctactacggt ttcgacgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct caggcctcgg gggcctcgga ggaggaggta gtggcggagg aggctccggt 420
ggatccagcg gtgtgggttc ctcctatgag ctgacacaac caccctcact gtcagtggcc 480
ccaggaaaga cggccaggat tacctgtggg ggaaacaaca ttggaagtaa aagtgtgcac 540
tggtaccagc agaagccagg ccaggcccct agactggtca cttattatga tggcaaccgg 600
ccctcaggga tccctgagcg attctctggc tccaactctg gaaacacggc caccctaatc 660
atcagcaggg tcgaagccgg ggatgaggcc gactattact gtcaggtgtg ggatagtagt 720
agtgatcagg gggtcttcgg aactgggacc aaggtcaccg tccta 765
<210> 1095
<211> 207
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of CD8 TM
<400> 1095
accacaacac ccgctcctag acctccaaca ccagctccaa caatcgccag ccagcctctg 60
tctctgaggc ctgaagcttg tagacctgct gcaggcggag ccgtgcatac cagaggactg 120
gatttcgcct gcgacatcta catctgggcc cctctggctg gaacatgtgg cgttctgctg 180
ctcagcctgg tcatcaccct gtactgc 207
<210> 1096
<211> 126
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of 4-1BB Signaling Domain
<400> 1096
aagcggggca gaaagaagct gctgtacatc ttcaagcagc ccttcatgcg gcccgtgcag 60
acaacccaag aggaagatgg ctgctcctgc agattccccg aggaagaaga aggcggctgc 120
gagctg 126
<210> 1097
<211> 336
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> nucleotide seqeunce of CD3Z Signaling Domain
<400> 1097
agagtgaagt tcagcagatc cgccgacgct cccgcctata agcagggaca gaaccagctg 60
tacaacgagc tgaacctggg gagaagagaa gagtacgacg tgctggacaa gcggagaggc 120
agagatcctg agatgggcgg caagcccaga cggaagaatc ctcaagaggg cctgtataat 180
gagctgcaga aagacaagat ggccgaggcc tactccgaga tcggaatgaa gggcgagcgc 240
agaagaggca agggacacga tggactgtac cagggcctga gcaccgccac caaggatacc 300
tatgatgccc tgcacatgca ggccctgcct ccaaga 336
Claims (41)
- 암세포의 세포 표면에 존재하고 정상세포의 세포 표면에는 존재하지 않는 항원에 특이적으로 결합하는 (i) 세포외 항원 결합 도메인, (ii) 막관통 도메인 및 (iii) 세포내 신호전달 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 유전적으로 조작된 T 세포로서, 상기 항원은 암세포가 본래 발현하지 않는 단백질이고,
상기 세포외 항원 결합 도메인은 A56 또는 이의 단편의 입체 에피토프에 특이적으로 결합하고,
상기 입체 에피토프는 서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질의 아미노산 서열의 위치 46번, 49번, 54번, 61번, 62번, 71번, 72번, 74번 및 76번 아미노산이 각각 세린(S), 티로신(Y), 세린(S), 리신(K), 세린(S), 트레오닌(T), 리신(K), 리신(K) 및 세린(S)인 점을 특징으로 하며,
상기 세포외 항원 결합 도메인은 서열번호 290의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 291의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 292의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 293의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 294의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 295의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 222의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 223의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 224의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 225의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 226의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 227의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 324의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 325의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 326의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 327의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 328의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 329의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 3의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 4의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 341의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 342의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 343의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 344의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 345의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 346의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 35의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 36의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 37의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 38의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 39의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 40의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 120의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 121의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 122의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 123의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 124의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 125의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 239의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 240의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 241의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 242의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 243의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 244의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 851의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 852의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 853의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 854의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 855의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 856의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 또는
서열번호 919의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 920의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 921의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 922의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 923의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 924의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 세포외 항원 결합 도메인이 서열번호 290의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 291의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 292의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 293의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 294의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 295의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 제1항에 있어서,
상기 (i) 세포외 항원 결합 도메인이 서열번호 1081 내지 1085 중 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 제1항에 있어서,
상기 세포외 항원 결합 도메인이 서열번호 222의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 223의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 224의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 225의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 226의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 227의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 제1항에 있어서,
상기 세포외 항원 결합 도메인이 서열번호 324의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 325의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 326의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 327의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 328의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 329의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 제1항에 있어서,
상기 세포외 항원 결합 도메인이 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 3의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 4의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 제1항에 있어서,
상기 세포외 항원 결합 도메인이 서열번호 341의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 342의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 343의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 344의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 345의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 346의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 제1항에 있어서,
상기 세포내 신호전달 도메인이 공동 자극 도메인 및 1차 신호전달 도메인을 포함하는 것인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 제15항에 있어서,
상기 공동 자극 도메인이 CD137(4-1BB), CD28 및 CD134(OX40)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 분자로부터 유래된 것인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 제15항에 있어서,
상기 공동 자극 도메인이 서열번호 1087로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 것인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 제15항에 있어서,
상기 1차 신호전달 도메인이 FcRγ, FcRβ, CD3γ, CD3δ, CD3ε, CD3ζ, CD22, CD79a, CD79b 또는 CD66d으로부터 유래된 것인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 제15항에 있어서,
상기 1차 신호전달 도메인이 CD3ζ로부터 유래된 것인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 제15항에 있어서,
상기 1차 신호전달 도메인이 서열번호 1088로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 것인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 삭제
- 제1항에 있어서,
항암바이러스와 함께 투여되어 암세포의 부하를 감소시키는데 사용되는 것을 특징으로 하며, 상기 항암바이러스보다 먼저, 동시에, 또는 나중에 투여되는 것인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 제22항에 있어서,
상기 항암바이러스는 백시니아 바이러스인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 제23항에 있어서,
상기 백시니아 바이러스는 웨스턴 리저브(Western Reserve, WR), NYVAC(New York Vaccinia Virus), Wyeth(The New York City Board of Health; NYCBOH), LC16m8, 리스터(Lister), 코펜하겐(Copenhagen), 티안탄(Tian Tan), USSR, 타쉬켄트(TashKent), 에반스(Evans), IHD-J(International Health Division-J) 또는 IHD-W(International Health Division-White) 백시니아 바이러스인, 유전적으로 조작된 T 세포. - 암세포의 세포 표면에 존재하고 정상세포의 세포 표면에는 존재하지 않는 항원에 특이적으로 결합하는 (i) 세포외 항원 결합 도메인, (ii) 막관통 도메인 및 (iii) 세포내 신호전달 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하는 유전적으로 조작된 T 세포로서, 상기 항원은 암세포가 본래 발현하지 않는 단백질이고,
상기 세포외 항원 결합 도메인은 A56 또는 이의 단편의 입체 에피토프에 특이적으로 결합하고,
상기 입체 에피토프는 서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질의 아미노산 서열의 위치 46번, 49번, 54번, 61번, 62번, 71번, 72번, 74번 및 76번 아미노산이 각각 세린(S), 티로신(Y), 세린(S), 리신(K), 세린(S), 트레오닌(T), 리신(K), 리신(K) 및 세린(S)인 점을 특징으로 하며,
상기 세포외 항원 결합 도메인은 서열번호 290의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 291의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 292의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 293의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 294의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 295의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이고,
상기 막 관통 도메인은 막관통 도메인이 서열번호 1086으로 표시되는 아미노산 서열로 이루어지고,
상기 세포 내 신호 전달 도메인은 서열번호 1087로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 공동 자극 도메인 및 서열번호 1088로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 1차 신호전달 도메인을 포함하는, 유전적으로 조작된 T 세포. - (i) 세포외 항원 결합 도메인, (ii) 막관통 도메인 및 (iii) 세포내 신호전달 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체(CAR)로서, 암세포의 세포 표면에 노출된 A56 단백질 또는 이의 단편에 특이적으로 결합하는 키메라 항원 수용체로서,
상기 세포외 항원 결합 도메인은 A56 또는 이의 단편의 입체 에피토프에 특이적으로 결합하고,
상기 입체 에피토프는 서열번호 1038로 표시되는 A56 단백질의 아미노산 서열의 위치 46번, 49번, 54번, 61번, 62번, 71번, 72번, 74번 및 76번 아미노산이 각각 세린(S), 티로신(Y), 세린(S), 리신(K), 세린(S), 트레오닌(T), 리신(K), 리신(K) 및 세린(S)인 점을 특징으로 하며,
상기 세포외 항원 결합 도메인은 서열번호 290의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 291의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 292의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 293의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 294의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 295의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 222의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 223의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 224의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 225의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 226의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 227의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 324의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 325의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 326의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 327의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 328의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 329의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 3의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 4의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 341의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 342의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 343의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 344의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 345의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 346의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 35의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 36의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 37의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 38의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 39의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 40의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 120의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 121의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 122의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 123의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 124의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 125의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 239의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 240의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 241의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 242의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 243의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 244의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편;
서열번호 851의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 852의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 853의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 854의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 855의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 856의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 또는
서열번호 919의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 920의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 서열번호 921의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 서열번호 922의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 923의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 924의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3를 포함하는, A56에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편인,
키메라 항원 수용체. - 제26항에 있어서,
상기 키메라 항원 수용체의 세포외 항원 결합 도메인이 서열번호 1081 내지 1085 중 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 키메라 항원 수용체. - 제26항의 키메라 항원 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
- 제28항에 있어서,
상기 폴리뉴클레오타이드가 서열번호 1090 내지 1094 중 선택되는 어느 하나의 염기서열을 포함하는 것인, 폴리뉴클레오타이드. - 제28항의 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 벡터.
- 제30항에 있어서,
상기 벡터가 신호 펩타이드를 암호화하는 서열을 더 포함하는 것인, 벡터. - 제31항에 있어서,
상기 신호 펩타이드를 암호화하는 서열이 세포외 항원 결합 도메인을 암호화하는 서열 앞에 삽입되는 것인, 벡터. - 제30항의 벡터가 도입된 유전적으로 조작된 T 세포.
- 제30항의 벡터를 T 세포에 도입하는 단계를 포함하는 유전적으로 조작된 T 세포의 제조 방법.
- 제1항, 제9항 내지 제20항 및 제22항 내지 제25항 중 어느 한 항의 유전적으로 조작된 T 세포를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제35항에 있어서,
상기 암은 폐암, 대장암, 전립선암, 갑상선암, 유방암, 뇌암, 두경부암, 식도암, 피부암, 흉선암, 위암, 결장암, 간암, 난소암, 자궁암, 방광암, 직장암, 담낭암, 담도암, 췌장암 및 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것인, 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물. - 삭제
- 제1항, 제9항 내지 제20항 및 제22항 내지 제25항 중 어느 한 항의 유전적으로 조작된 T 세포 및 항암바이러스를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 키트.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
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WO2020011754A1 (en) * | 2018-07-09 | 2020-01-16 | Transgene | Chimeric vaccinia viruses |
WO2021046653A1 (en) * | 2019-09-13 | 2021-03-18 | Centre For Drug Research And Development | Anti-oncolytic virus antigen antibodies and methods of using same |
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2021
- 2021-04-02 KR KR1020210043451A patent/KR102419397B1/ko active IP Right Grant
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