KR102377537B1 - 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물 - Google Patents
효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 효소 특히, 비스코자임 처리 및 초고압 균질 공정을 통한 단풍취 추출물은 단풍취 에탄올 추출물보다 추출 수율이 증가하였고, 지방세포 분화 억제 및 지방 축적 억제 효과가 우수하였으므로, 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 항비만용 기능성 소재로 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물에 관한 것이다.
비만은 체내에 지방이 필요 이상으로 과도하게 쌓인 경우를 말하며, 국민건강 통계에 따르면, 비만 유병률은 1998년 26.0%에서 2011년 31.4%로, 증가 추이를 보인다. 특히 비만은 다양한 성인병의 합병증과 관련이 있는 것으로 밝혀지고 있다. 예를 들어, 비만환자는 정상 체중인 사람에 비하여 간경변증 질환의 경우 2배, 뇌혈관 질환의 경우 1.6배 및 관상동맥 질환의 경우 1.8배 정도 사망률이 높은 것으로 보고되어 있다.
현재, 비만에 대한 치료방법으로 식이요법, 운동요법 및 약물요법 등이 시도되고 있으며, 이 중 약물요법으로 사용되는 비만치료제는 식욕의 조절, 지방의 소화·흡수 방해, 에너지 소비의 증가 또는 지질대사의 조절 등을 타겟으로 개발되었으나, 다양한 부작용이 존재한다.
비만 치료제로 알려진 제니칼은 췌장 및 소화계에서 분리되는 리파아제 억제를 유도하여 지방흡수를 억제하지만, 2~3%의 낮은 체중감량 효과를 보이며, 잦은 설사, 지방변 등의 부작용을 동반한다. 또한, 리덕틸은 세로토닌과 노르아드레날린의 재흡수 억제를 통해 식욕을 억제시킴으로써, 5~10%의 체중감량효과가 있으나 뇌졸증과 심근경색 등 심혈관계 질환의 부작용이 있어, 2010년 유럽 의약품 안전청(EMA)과 미국 식품의약품안전청(FDA)이 처방과 사용중지 및 자발적 회수 권고조치를 내려 시장에서 퇴출되었으며, 국내에서도 2010년 10월경 식품의약품안전청에 의해 판매를 중단시켰다. 아미노필린은 탁월한 체지방 분해효과에도 불구하고 정신신경계, 순환기계, 소화기계에 걸쳐 폭넓은 부작용이 보고된 바 있고, 펜프루라민, 덱스펜플루라민, 토피라메이 또는 에피드린 등도 비만치료에 부적합한 약물로 판정되어 판매가 금지되었다. 이외에도 항비만 약제로 개발된 제품 중에서 심각한 부작용으로 인해 판매가 금지된 것들이 상당수에 이른다.
이와 같이 합성의약품의 부작용과 만성질환의 극복에 서양의학이 한계를 보임에 따라 항비만 효과를 가진 천연물 식·의약품에 대한 가치가 새롭게 부각되고 있다.
한편, 단풍취(Ainsliaea acerifolia)는 국화과(Compositae)에 속하는 다년초로서, 높이 35~80cm이고, 가지가 없으며, 긴 갈색 털이 드문드문 있다. 식용으로는 어린 순을 먹으며, 류마티스 관절염과 식중독을 치료하는데 사용하여 왔다.
한국등록특허 제1405429호는 단풍취를 포함하는 야생초 화장품에 대하여 개시하고 있으며, 한국공개특허 제2016-0027401호는 마가목 또는 단풍취 추출물을 포함하는 쌀국수 및 이의 제조방법을 개시하고 있으나, 본 발명의 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물에 대해서는 개시된 바 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로, 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 추출한 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물을 제공하고, 상기 효소, 특히 비스코자임(Viscozyme) 처리 및 초고압 균질 공정을 통해 추출한 단풍취 추출물이 전지방세포의 분화를 억제하는 효과가 우수하며, 추출 수율이 효소처리 및 초고압 균질 공정을 하지 않은 일반 단풍취 추출물보다 증가하여 항비만용 기능성 소재로 사용될 수 있다는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 탄수화물 가수분해 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 탄수화물 가수분해 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 효소 특히, 비스코자임 처리 및 초고압 균질 공정을 통한 단풍취 추출물은 단풍취 에탄올 추출물보다 추출 수율이 증가하였고, 지방세포 분화 억제 및 지방 축적 억제 효과가 우수하므로, 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 항비만용 기능성 소재로 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 추출 방법에 따라 제조된 단풍취 추출물의 세포독성을 확인한 결과이다. CON은 단풍취 추출물 무처리 음성대조군, 비교예 1은 단풍취 에탄올 추출물, 비교예 2는 비스코자임 효소처리 단풍취 추출물, 비교예 3은 펙티넥스 효소처리 단풍취 추출물, 비교예 4는 초고압 균질화 공정을 통한 단풍취 추출물, 비교예 5는 펙티넥스 효소처리 및 초고압 균질화 공정을 통한 단풍취 추출물 및 실험예 1은 비스코자임 효소처리 및 초고압 균질화 공정을 통한 단풍취 추출물이다.
도 2는 본 발명의 추출 방법에 따라 제조된 단풍취 추출물의 지방세포 분화 저해효과 및 지방 축적 저해효과를 확인한 결과이다. MDI(IBMX(3-isobutyl-1-methylxanthine), 덱사메타손(dexamethasone), 인슐린(insulin)의 혼합물)는 분화 유도 물질로, 지방전구세포인 3T3-L1의 분화를 유도하기 위해 사용하였다. CON은 단풍취 추출물 무처리 음성대조군, 비교예 1은 단풍취 에탄올 추출물, 비교예 2는 비스코자임 효소처리 단풍취 추출물, 비교예 3은 펙티넥스 효소처리 단풍취 추출물, 비교예 4는 초고압 균질화 공정을 통한 단풍취 추출물, 비교예 5는 펙티넥스 효소처리 및 초고압 균질화 공정을 통한 단풍취 추출물 및 실험예 1은 비스코자임 효소처리 및 초고압 균질화 공정을 통한 단풍취 추출물이다. 도면 내 서로 다른 문자 a~f는 서로 통계적으로 유의미한 차이가 있다는 것을 의미하며, p<0.05이다.
도 2는 본 발명의 추출 방법에 따라 제조된 단풍취 추출물의 지방세포 분화 저해효과 및 지방 축적 저해효과를 확인한 결과이다. MDI(IBMX(3-isobutyl-1-methylxanthine), 덱사메타손(dexamethasone), 인슐린(insulin)의 혼합물)는 분화 유도 물질로, 지방전구세포인 3T3-L1의 분화를 유도하기 위해 사용하였다. CON은 단풍취 추출물 무처리 음성대조군, 비교예 1은 단풍취 에탄올 추출물, 비교예 2는 비스코자임 효소처리 단풍취 추출물, 비교예 3은 펙티넥스 효소처리 단풍취 추출물, 비교예 4는 초고압 균질화 공정을 통한 단풍취 추출물, 비교예 5는 펙티넥스 효소처리 및 초고압 균질화 공정을 통한 단풍취 추출물 및 실험예 1은 비스코자임 효소처리 및 초고압 균질화 공정을 통한 단풍취 추출물이다. 도면 내 서로 다른 문자 a~f는 서로 통계적으로 유의미한 차이가 있다는 것을 의미하며, p<0.05이다.
본 발명은 탄수화물 가수분해 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 단풍취는 전체 지상부 및 지하부를 사용할 수 있으며, 바람직하게는 단풍취의 지상부를 사용하는 것이 바람직하다.
상기 탄수화물 가수분해 효소는 비스코자임(viscozyme)인 것이 바람직하지만, 이에 한정하는 것은 아니다.
상기 비스코자임(Viscozyme)은 상용 효소로서, 아스퍼질러스 아큘레아투스(Aspergillus aculeatus) 유래 아라비나아제(arabinase), 셀룰라아제(Cellulase), 베타-글루카나아제(Beta-glucanase), 헤미셀룰라아제(hemicellulase), 자일라나아제(xylanase)를 포함하는 복합 효소이다.
상기 초고압 균질 공정은 100~130MPa의 압력하에서 수행하는 것일 수 있고, 바람직하게는 100~120MPa의 압력하에 수행하는 것이며, 더 바람직하게는 110MPa의 압력하에 수행하는 것이지만, 이에 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현 예에서,
상기 탄수화물 가수분해 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물은
(1) 단풍취를 건조한 후 분쇄하여 단풍취 분말을 제조하는 단계;
(2) 상기 (1)단계에서 제조한 단풍취 분말에 물과 탄수화물 가수분해 효소를 첨가한 후 가수분해하는 단계;
(3) 상기 (2)단계에서 획득한 가수분해물에 C1~C4의 저급 알코올 또는 물을 첨가한 후 추출하는 단계; 및
(4) 상기 (3)단계 이후에, 상기 가수분해물을 초고압 균질화하는 단계;를 포함하는 제조방법에 의해 제조될 수 있고,
바람직하게는
(1) 단풍취를 건조한 후 분쇄하여 단풍취 분말을 제조하는 단계;
(2) 상기 (1)단계에서 제조한 단풍취 분말 1 중량부에 대하여, pH 4.5로 조절된 물 12 중량부와 비스코자임을 첨가하여 가수분해하는 단계;
(3) 상기 (2)단계에서 획득한 가수분해물에 100%(v/v) 에탄올을 3:7의 부피비가 되도록 첨가한 후 추출하는 단계; 및
(4) 상기 (3)단계 이후에, 상기 가수분해물을 110MPa의 압력으로 초고압 균질화하는 단계;를 포함하는 제조방법에 의해 제조하는 것이지만, 이에 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 건강기능식품 조성물은 음료, 환, 정제(tablet), 캡슐제(capsule) 및 산제 중에서 선택된 어느 하나로 제조하거나, 다른 식품 또는 식품의 성분에 첨가하여 제조될 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 적절하게 제조될 수 있다.
본 발명의 건강기능식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 일례로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 중에서 선택된 어느 하나의 형태일 수 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
상기 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 및 천연 풍미제, 착색제 및 증진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알킨산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 천연 과일 주스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
본 발명의 건강기능식품 조성물은 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은 탄수화물 가수분해 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 약학 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 조성물의 약학적 투여 형태는 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 포함한 다양한 화합물 혹은 혼합물을 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로오스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이 외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
본 발명의 추출물은 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
이하, 제조예 및 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 제조예 및 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.
제조예 1. 단풍취 추출물의 제조
(1) 비스코자임 효소처리 및 초고압 균질화 병행처리 단풍취 추출물의 제조
건조하여 분쇄한 단풍취 2.5g에 pH 4.5로 조절한 증류수 30㎖와 50unit/㎖의 비스코자임(Viscozyme)을 넣고, 50℃에서 10시간 동안 180rpm으로 교반하였다. 그 후, 100%(v/v) 에탄올 70㎖를 첨가하고 상온에서 180rpm으로 2시간 추출 후 12,000rpm에서 15분 동안 원심 분리한 뒤 여과하여 여과액을 제조한 후, 110MPa의 압력으로 2회 오리피스관을 통과시켜 비스코자임 효소처리 및 초고압 균질화 병행처리 단풍취 추출물을 제조하여 실험예 1의 시료로 사용하였다.
(2) 단풍취 에탄올 추출물의 제조
건조하여 분쇄한 단풍취 2.5g에 pH 4.5로 조절한 증류수를 이용하여 제조한 70%(v/v) 에탄올을 100㎖ 넣고, 상온에서 180rpm으로 2시간 동안 교반하여 추출한 후, 12,000rpm에서 15분간 원심 분리한 뒤 여과하여 비교예 1의 시료로 사용하였다.
(3) 효소처리 단풍취 추출물의 제조
건조하여 분쇄한 단풍취 2.5g에 pH 4.5로 조절한 증류수 30㎖와 효소인 50unit/㎖의 비스코자임(Viscozyme) 또는 500unit/㎖의 펙티넥스(Pectinex)를 넣고, 각각 50℃에서 10시간, 37℃에서 2시간 동안 180rpm으로 교반하였다. 그 후, 100%(v/v) 에탄올 70㎖를 첨가하여 상온에서 180rpm으로 2시간 동안 추출하고, 12,000rpm에서 15분간 원심 분리한 뒤 여과하여 효소처리 단풍취 추출물을 제조하였다. 비스코자임 효소처리 단풍취 추출물은 비교예 2, 펙티넥스 효소처리 단풍취 추출물은 비교예 3의 시료로 사용하였다.
(4) 초고압 균질화 처리 단풍취 추출물의 제조
건조하여 분쇄한 단풍취 2.5g에 pH 4.5로 조절한 증류수를 이용하여 제조한 70%(v/v) 에탄올을 100㎖ 첨가한 후, 상온에서 180rpm으로 3시간 동안 교반하여 추출하였다. 추출된 추출액은 12,000rpm에서 15분 동안 원심 분리하고, 여과하여 여과액을 제조한 후, 110MPa의 압력으로 2회 오리피스관을 통과시켜 비교예 4의 시료로 사용하였다.
(5) 펙티넥스 효소처리 및 초고압 균질화 병행처리 단풍취 추출물의 제조
건조하여 분쇄한 단풍취 2.5g에 pH 4.5로 조정한 증류수 30㎖와 500unit/㎖의 펙티넥스(Pectinex)를 첨가하여, 37℃에서 2시간 동안 180rpm으로 교반하였다. 그 후, 100%(v/v) 에탄올 70㎖를 첨가하고 상온에서 180rpm으로 교반하며 2시간 동안 추출한 후, 12,000rpm에서 15분간 원심 분리한 뒤 여과하여 여과액을 제조하고, 그 후, 110MPa의 압력으로 2회 오리피스관을 통과시켜 펙티넥스 효소처리 및 초고압 균질화 병행처리 단풍취 추출물을 제조하여 비교예 5의 시료로 사용하였다.
실시예 1. 추출 방법에 따른 단풍취 추출 수율 비교
상기 제조예 1에서 각 조건별로 추출한 단풍취 추출물의 추출 수율을 비교하였다.
추출 수율은 하기 식 1로 계산하였다.
[식 1]
추출 수율(%)=(추출 분말의 무게(g)/초기 시료의 무게(g))×100
그 결과, 표 1에 나타난 바와 같이 단풍취 에탄올 추출물인 비교예 1에 비해 효소 단독 처리군은 수율의 변화가 거의 없거나 오히려 수율이 줄어들었으나, 초고압 균질화 또는 효소처리와 초고압 균질화를 병행하였을 경우 추출 수율이 증가하였다.
| 처리군 | 수율(%) |
| 비교예 1(에탄올 추출) | 16.82 |
| 비교예 2(비스코자임 처리) | 16.86 |
| 비교예 3(펙티넥스 처리) | 13.03 |
| 비교예 4(초고압 균질화) | 23.89 |
| 비교예 5(펙티넥스 처리+초고압 균질화) | 20.76 |
| 실험예 1(비스코자임 처리+초고압 균질화) | 20.27 |
실시예 2. 세포생존율(cell viability) 측정
제조예 1의 단풍취 추출물이 세포생존에 미치는 영향을 확인하고, 실험에 사용될 농도의 범위를 정하기 위하여 Mosmann(1983)의 방법을 이용하여 MTT(3-(4,5-dimeth-ylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 분석을 실시하였다.
3T3-L1 지방전구세포는 미국세포주은행(ATCC)으로부터 구매하여 실험에 사용하였다. 3T3-L1은 지방세포의 대사과정을 연구하는 데에 널리 이용되는 세포주로서, 상기 세포의 분화가 활발할수록 지방세포 내의 지방 축적이 활발하여 비만을 유도하게 된다. 따라서 항비만 효과를 가질 것으로 생각되는 물질을 상기 세포에 처리하였을 때, 세포의 분화가 적을수록 항비만 효과가 큰 물질인 것으로 볼 수 있다.
3T3-L1 지방전구세포를 100㎕의 10%(v/v) 우아혈청(Bovine calf serum, BCS)을 포함한 DMEM 배지가 담긴 96-웰 플레이트에 1일 동안 배양한 후, 다양한 농도(100, 200 및 400㎍/㎖)의 단풍취 추출물을 처리하여 24시간 배양하였다. 그런 다음에, 각 웰에 5㎎/㎖의 MTT 용액을 10㎕씩 분주한 후 3시간 동안 배양하면서 환원반응을 유도하였으며, 100㎕의 DMSO(dimethyl sulfoxide) 용액을 첨가하여 보라색의 포르마잔(formazan) 결정을 완전히 용해시켰다. 분광광도계를 이용하여 570㎚에서 흡광도를 측정하였으며, 시료 무처리 군의 생존율 100%를 기준으로 시료 처리군의 상대적 세포 생존율을 계산하였다. 그 결과, 도 1에 개시된 바와 같이 제조예 1의 모든 추출물들은 400㎍/㎖ 농도까지 세포 독성이 나타나지 않는 것을 확인하였다.
실시예 3. 3T3-L1 지방전구세포를 이용한 항비만 효과
1) 3T3-L1 지방전구세포의 지방세포로의 분화 유도
마우스 지방전구세포인 3T3-L1에 10%(v/v) 우아혈청(Bovine calf serum, BCS)을 포함한 DMEM 배지를 넣고 37℃, 5% CO2의 조건에서 배양하였다. 3T3-L1 지방전구세포를 24 웰 플레이트에 웰당 5×104개의 세포 수로 분주한 후, 웰이 지방전구세포로 100% 채워지는 시점이 된 이후에, 2일 동안 더 유지시켰다. 지방전구세포는 MDI(0.5mM IBMX(3-isobutyl-1-methylxanthine), 1μM 덱사메타손, 1μM 인슐린)가 첨가된 10%(v/v) 소 태아 혈청(fetal bovine serum, FBS)을 포함하는 DMEM 배지로 지방세포 분화를 2일 동안 유도하였고, 배양 48시간 후, 2μM 인슐린이 함유된 10%(v/v) FBS DMEM으로 이틀 동안 배양하였다. 그 후 2일 마다, 총 4일 동안 10% FBS DMEM 배양액으로 교체하였다. 지방세포 분화를 유도하는 동안 본 발명에 따른 제조예 1의 시료를 400㎍/㎖ 농도로 처리하였고, 분화가 완성되는 시점인 8일째에 지방세포 분화 정도를 관찰하였다.
2) 오일 레드 O(Oil red O) 염색 및 분석
지방의 축적 정도를 확인하기 위해 오일 레드 O 염색을 하였다. 상기 실험에서 유도한 지방세포의 분화 정도를 오일 레드 O 염색을 통해 1차적으로 현미경을 통해 확인하였고, 염색된 염색 시료를 추출하여 지방세포 염색 정도를 500nm 흡광도에서 세포의 분화된 지방의 양으로 측정하였다.
그 결과, 도 2에 나타나는 것과 같이 본 발명의 제조예 1의 모든 시료는 3T3-L1 지방전구세포의 분화를 억제하였고, 결과적으로 지방의 양도 감소시킴을 확인하였으며, 특히 비스코자임 효소처리 후 초고압 균질화 공정을 거친 실험예 1의 시료가 에탄올 추출물, 효소 단독 처리군, 초고압 균질화 단독 처리군 및 펙티넥스 효소처리 후 초고압 균질화 공정을 거친 시료 처리군에 비해 지방전구세포의 분화를 억제하고 지방의 양을 감소시키는 효과가 현저하였다.
Claims (5)
- 비스코자임(viscozyme) 처리 및 100~130MPa의 압력으로 초고압 균질화하는 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 건강기능식품 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 제1항에 있어서, 상기 비스코자임(viscozyme) 처리 및 100~130MPa의 압력으로 초고압 균질화하는 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물은
(1) 단풍취를 건조한 후 분쇄하여 단풍취 분말을 제조하는 단계;
(2) 상기 (1)단계에서 제조한 단풍취 분말에 물과 비스코자임(viscozyme)을 첨가한 후 가수분해하는 단계;
(3) 상기 (2)단계에서 획득한 가수분해물에 C1~C4의 저급 알코올 또는 물을 첨가한 후 추출하는 단계; 및
(4) 상기 (3)단계 이후에, 상기 가수분해물을 100~130MPa의 압력으로 초고압 균질화하는 단계;를 포함하는 제조방법에 의해 제조된 것을 특징으로 하는 항비만용 건강기능식품 조성물. - 비스코자임(viscozyme) 처리 및 100~130MPa의 압력으로 초고압 균질화하는 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020200000797A KR102377537B1 (ko) | 2020-01-03 | 2020-01-03 | 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
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| KR1020200000797A KR102377537B1 (ko) | 2020-01-03 | 2020-01-03 | 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20210087725A KR20210087725A (ko) | 2021-07-13 |
| KR102377537B1 true KR102377537B1 (ko) | 2022-03-23 |
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| KR1020200000797A KR102377537B1 (ko) | 2020-01-03 | 2020-01-03 | 효소처리 및 초고압 균질 공정을 통해 얻은 단풍취 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물 |
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| KR101900244B1 (ko) * | 2016-08-03 | 2018-09-19 | 안동대학교 산학협력단 | 단풍취 추출물로부터 분리한 신규 화합물을 유효성분으로 포함하는 항비만용 조성물 |
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-
2020
- 2020-01-03 KR KR1020200000797A patent/KR102377537B1/ko active IP Right Grant
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| Publication number | Publication date |
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| KR20210087725A (ko) | 2021-07-13 |
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