KR102304419B1 - Multifunctional cosmetic composition that contains amino acids and peptides derived from Moringa seeds, effective for skin moisturizing, skin whitening, maintaining and improving skin elasticity, and preventing skin wrinkles - Google Patents

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Abstract

The present invention provides a multifunctional cosmetic composition which is effective in skin moisturizing, skin whitening, maintaining and improving skin elasticity, and preventing skin wrinkles. More specifically, the multifunctional cosmetic composition according to the present invention is a hydrolysate obtained by hydrolyzing a protein extracted from moringa seeds with a proteolytic enzyme, the multifunctional cosmetic composition comprising 5-15 wt% of a free amino acid, 70-90 wt% of an oligopeptide, and 5-15 wt% of a polypeptide.

Description

모링가 종자 유래 아미노산 및 펩타이드를 함유하여 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 및 향상, 피부 주름 방지에 유효한 다 기능성 화장품 조성물{Multifunctional cosmetic composition that contains amino acids and peptides derived from Moringa seeds, effective for skin moisturizing, skin whitening, maintaining and improving skin elasticity, and preventing skin wrinkles}Multifunctional cosmetic composition that contains amino acids and peptides derived from Moringa seeds, effective for skin moisturizing, skin whitening, maintaining and improving skin elasticity, and preventing skin wrinkles by containing amino acids and peptides derived from Moringa seeds , skin whitening, maintaining and improving skin elasticity, and preventing skin wrinkles}

본 발명은 모링가 종자 유래 아미노산 및 펩타이드를 함유하여 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 및 향상, 피부 주름 방지에 유효한 다 기능성 화장품 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a multifunctional cosmetic composition containing amino acids and peptides derived from moringa seeds, which is effective for skin moisturizing, skin whitening, maintaining and improving skin elasticity, and preventing skin wrinkles.

모링가 속은 몇몇 14가지의 식물 종(모링가 페레그리나(Moringa peregrina), 엠. 압테라(M. aptera), 엠. 콘카넨시스(M. concanensis), 엠. 드로우하르디이(M. drouhardii), 엠. 힐데브란티이(M. hildebrandtii), 엠. 롱기투바(M. Longituba)를 포함함)을 포함하며, 이들 중 모링가 프테리고스페르마(Moringa pterygosperma)(모링가 올레이페라(Moringa oleifera)로도 칭해짐)가 가장 잘 알려져 있으며, 이들은 아시아, 아프리카 및 남미의 열대 지방 도처에서 자라는, 다양한 조건에 매우 잘 적응하는 빠르게 자라는 나무이다. 30~50cm 길이의 과일은 드럼 스틱처럼 매달리므로, 영어 이름은 "드럼스틱 트리(drumstick tree)"이며, 그의 녹색 꼬투리는 야채로 인정받고 있다. 결과적으로 종자는 오일 생산을 위해 익게 두는 것이 거의 없다.The genus Moringa has several 14 plant species (Moringa peregrina, M. aptera, M. concanensis, M. drouhardii). , including M. hildebrandtii, M. Longituba), among which Moringa pterygosperma (Moringa oleifera) ) are best known, these are fast-growing trees that are very well adapted to a variety of conditions, growing throughout the tropics of Asia, Africa and South America. The fruit, 30-50 cm long, hangs like a drumstick, hence its English name "drumstick tree", and its green pods are recognized as a vegetable. As a result, seeds are rarely left ripe for oil production.

이 나무의 다른 부분(잎, 뿌리, 뿌리껍질, 꽃 및 종자)은 이것이 자라는 국가에서 전통 의학에 사용된다.Other parts of this tree (leaf, root, root bark, flower and seed) are used in traditional medicine in the country where it is grown.

모링가 종자는 종자의 종과 성숙도에 따라 함량이 21~53%로 변하는 오일의 존재를 특징으로 한다. 모링가 올레이페라 종은 문헌에 언급된 함량은 21~34%의 범위이다.Moringa seeds are characterized by the presence of oils whose content varies between 21 and 53% depending on the species and maturity of the seed. The content of Moringa oleifera species mentioned in the literature ranges from 21 to 34%.

탁월한 산화 안정성과 향을 고정하는 우수한 특성으로 인해, 베헨(Bhen) 또는 벤(Ben) 오일로도 칭해지는 모링가 오일은 고대 문명에서 화장품 및 종교 용도로 가장 많이 사용한 오일이었다. 이 오일은 지난 세기까지 화장품 제조업자에 의해 사용되었으며 그 용도가 최근에는 "재발견"되었다.Due to its excellent oxidative stability and excellent flavor fixing properties, moringa oil, also called Bhen or Ben oil, was the most used oil in ancient civilizations for cosmetic and religious uses. This oil was used by cosmetic manufacturers until the last century, and its use has recently been "rediscovered".

최근에는 오일 외에도 모링가 종자는 단백질 추출물에 대하여 연구자들의 관심을 끌었다. 따라서, 유럽 특허 출원 제1064008호에는 모링가 종자 단백질 추출물을 그의 연화, 생리학적 컨디셔닝, 보습, 재구조화, 수복의 효과를 위하여, 그리고 주름 방지제 및 오염 방지제로서 피부 및 점막 상에 사용하는 것이 기술되어 있다.More recently, besides oil, moringa seeds have attracted researchers' attention for protein extracts. Accordingly, European Patent Application No. 1064008 describes the use of Moringa seed protein extract on the skin and mucous membranes for its softening, physiological conditioning, moisturizing, restructuring, restorative effects, and as an anti-wrinkle and anti-fouling agent. have.

또한, 대한민국 등록 특허 제10-191566호에는 발아된 모링가 종자의 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 피부 외용제 조성물 및 모링가 종자의 아임계 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 피부 외용제 조성물이 개시되어 있다.In addition, Republic of Korea Patent No. 10-191566 discloses a composition for external application for skin whitening containing an extract of germinated Moringa seeds as an active ingredient and a composition for external application for skin whitening containing a subcritical extract of Moringa seeds as an active ingredient This is disclosed.

그러나 모링가 종자에서 유래되는 아미노산, 폴리펩타이드, 올리고펩타이드의 함유 비율의 적절한 조정을 통한 피부 미용 효과를 향상시키는 것에 대해서는 어떠한 언급도 없다.However, there is no mention of improving the skin cosmetic effect through appropriate adjustment of the content ratio of amino acids, polypeptides and oligopeptides derived from Moringa seeds.

1. 대한민국 등록 특허 제10-191566호1. Republic of Korea Patent No. 10--191566

따라서, 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 본 발명은 모링가 종자 유래 아미노산, 올리고펩타이드, 폴리펩타이드를 적정 비율로 함유하여 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 및 향상, 피부 주름 방지에 유효한 다 기능성 화장품 조성물을 제공하는 것이다.Therefore, the problem to be solved by the present invention is a multifunctional cosmetic that contains moringa seed-derived amino acids, oligopeptides, and polypeptides in appropriate proportions to moisturize the skin, whiten the skin, maintain and improve skin elasticity, and prevent skin wrinkles to provide a composition.

상기 기술적 과제를 달성하기 위하여, 본 발명은In order to achieve the above technical problem, the present invention

모링가 종자로부터 추출된 단백질을 단백질 분해효소로 가수분해하여 얻어지는 가수분해물로서As a hydrolyzate obtained by hydrolyzing proteins extracted from Moringa seeds with proteolytic enzymes,

유리 아미노산 5 ~ 15중량%;5 to 15% by weight of free amino acids;

올리고펩타이드 70 ~ 90중량%; 및oligopeptide 70 to 90% by weight; and

폴리펩타이드 5 ~ 15중량% Polypeptide 5 to 15% by weight

함유하는 것을 특징으로 하여 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 및 향상, 피부 주름 방지에 유효한 다기능 화장품 조성물을 제공한다.It provides a multifunctional cosmetic composition effective for skin moisturizing, skin whitening, maintaining and improving skin elasticity, and preventing skin wrinkles by containing it.

상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물에 있어서, 상기 모링자 종자는 1중량% 풀빅산 수용액에 24시간 동안 침적 후 발아된 모링가 종자인 것을 특징으로 한다.In the composition according to the present invention as described above, the Moringa seeds are Moringa seeds germinated after immersion in 1 wt% fulvic acid aqueous solution for 24 hours.

상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물에 있어서, 상기 발아된 모링가 종자를 가수분해 전에 토르말린 분말과 1:1의 부피비로 혼합한 후 24시간 동안 유지하는 것을 특징으로 한다.In the composition according to the present invention as described above, the germinated Moringa seeds are mixed with tourmaline powder in a volume ratio of 1:1 before hydrolysis, and then maintained for 24 hours.

상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물에 있어서, 상기 올리고펩타이드는 분자량 300 ~ 1,500달톤(Da)이며, 상기 폴리펩타이드는 분자량이 3,000 ~ 15,000달톤(Da)인 것을 특징으로 한다.In the composition according to the present invention as described above, the oligopeptide has a molecular weight of 300 to 1,500 Daltons (Da), and the polypeptide has a molecular weight of 3,000 to 15,000 Daltons (Da).

또한, 본 발명은, 1중량% 풀빅산 수용액에 24시간 동안 침적 후 발아된 모링가 종자를 토르말린 분말과 1:1의 부피비로 혼합한 후 24시간 동안 유지한 후에 단백질 분해 효소로 가수분해한 가수분해물을 함유하는 것을 특징으로 하여 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 및 향상, 피부 주름 방지에 유효한 다기능 화장품 조성물을 제공한다.In addition, the present invention, after immersion in 1 wt% fulvic acid aqueous solution for 24 hours, the germinated Moringa seeds are mixed with tourmaline powder in a volume ratio of 1:1 and maintained for 24 hours, followed by hydrolysis with proteolytic enzyme Provided is a multifunctional cosmetic composition effective for skin moisturizing, skin whitening, maintaining and improving skin elasticity, and preventing skin wrinkles by containing decomposition products.

본 발명의 조성물은 모링가 종자 유래 아미노산, 올리고펩타이드, 폴리펩타이드를 적정 비율로 함유하여 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 및 향상, 피부 주름 방지에 유효한 다 기능성을 보여 화장품 원료로서 그 가치가 매우 높다.The composition of the present invention contains amino acids, oligopeptides, and polypeptides derived from moringa seeds in an appropriate ratio to show multifunctionality effective for skin moisturizing, skin whitening, maintaining and improving skin elasticity, and preventing skin wrinkles, so its value as a cosmetic raw material is very high. high.

이하 본 발명을 용이하게 실시하기 위한 구체적인 내용을 실시예 등을 통하여 상세하게 설명하기로 한다.Hereinafter, specific contents for easily carrying out the present invention will be described in detail through examples and the like.

본 발명의 조성물은 모링가 종자 유래 아미노산, 올리고펩타이드, 폴리펩타이드의 함량 비율을 적정하게 조정하여 피부 미용 효과를 최적화시키며, 이 최적화시킨 효과를 더욱 강화시키기 위하여, 전처리, 발아, 후처리를 거친 모링가 종자를 사용하는 것을 특징으로 하며, 이와 함께 전처리, 발아, 후처리를 거친 모링가 종자를 사용한 가수분해물을 유효성분으로 하는 것을 특징으로 한다.The composition of the present invention optimizes the skin cosmetic effect by appropriately adjusting the content ratio of amino acids, oligopeptides, and polypeptides derived from Moringa seeds. It is characterized by using linga seeds, and it is characterized in that the hydrolyzate using moringa seeds that have undergone pre-treatment, germination, and post-treatment is used as an active ingredient.

구체적으로 본 발명은Specifically, the present invention

본 발명은the present invention

모링가 종자로부터 추출된 단백질을 단백질 분해효소로 가수분해하여 얻어지는 가수분해물로서As a hydrolyzate obtained by hydrolyzing proteins extracted from Moringa seeds with proteolytic enzymes,

유리 아미노산 5 ~ 15중량%;5 to 15% by weight of free amino acids;

올리고펩타이드 70 ~ 90중량%; 및oligopeptide 70 to 90% by weight; and

폴리펩타이드 5 ~ 15중량% Polypeptide 5 to 15% by weight

함유하는 것을 특징으로 하여 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 및 향상, 피부 주름 방지에 유효한 다기능 화장품 조성물을 제공한다.It provides a multifunctional cosmetic composition effective for skin moisturizing, skin whitening, maintaining and improving skin elasticity, and preventing skin wrinkles by containing it.

상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물에 있어서, 상기 모링자 종자는 1중량% 풀빅산 수용액에 24시간 동안 침적 후 발아된 모링가 종자인 것을 특징으로 한다.In the composition according to the present invention as described above, the Moringa seeds are Moringa seeds germinated after immersion in 1 wt% fulvic acid aqueous solution for 24 hours.

상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물에 있어서, 상기 발아된 모링가 종자를 가수분해 전에 토르말린 분말과 1:1의 부피비로 혼합한 후 24시간 동안 유지하는 것을 특징으로 한다.In the composition according to the present invention as described above, the germinated Moringa seeds are mixed with tourmaline powder in a volume ratio of 1:1 before hydrolysis, and then maintained for 24 hours.

상술한 바와 같은 본 발명에 따른 조성물에 있어서, 상기 올리고펩타이드는 분자량 300 ~ 1,500달톤(Da)이며, 상기 폴리펩타이드는 분자량이 3,000 ~ 15,000달톤(Da)인 것을 특징으로 한다.In the composition according to the present invention as described above, the oligopeptide has a molecular weight of 300 to 1,500 Daltons (Da), and the polypeptide has a molecular weight of 3,000 to 15,000 Daltons (Da).

또한, 본 발명은 1중량% 풀빅산 수용액에 24시간 동안 침적 후 발아된 모링가 종자를 토르말린 분말과 1:1의 부피비로 혼합한 후 24시간 동안 유지한 후에 단백질 분해 효소로 가수분해한 가수분해물을 유효성분으로 하는 것을 특징으로 한다.In addition, the present invention is a hydrolyzate hydrolyzed with a proteolytic enzyme after mixing the germinated Moringa seeds with tourmaline powder in a volume ratio of 1:1 after immersion in 1 wt% fulvic acid aqueous solution for 24 hours and maintaining for 24 hours. It is characterized in that it uses as an active ingredient.

본 발명에서 사용되는 모링가 종자는 모링가 나무의 씨앗으로서, 모링가 나무는 모링가과(Moringaceae Family), 모링가속(Moringa Genus)의 식물로서 학명은 Moringa Oleifera(이명 Moringa Pterygosperma)이며, 학명이 유래한 타밀어로는 Murunggai라고도 한다. 모링가는 콩과식물로 나뭇잎과 열매는 물론 나무전체를 식용으로 하는 열대성 나무이며, 다량의 아미노산, 무기질, 비타민 등 90가지 이상의 영양소를 함유하고 있다.The Moringa seed used in the present invention is a seed of the Moringa tree, and the Moringa tree is a plant of the Moringa family (Moringaceae Family) and the genus Moringa (Moringa Genus), and the scientific name is Moringa Oleifera (synonym Moringa Pterygosperma), and the scientific name is derived. Also known as Murunggai in one Tamil language. Moringa is a legume plant and is a tropical tree that eats the whole tree as well as the leaves and fruits.

특히, 모링가 종자에 포함되어 있는 수용성 아미노산은 물에 있는 오염물질을 정화해 주는 역할을 한다. 이 아미노산들이 피부에 적용될 경우 피부에 있는 오염물질을 정화하여 피부를 깨끗하게 해 주는 디톡스 효능을 나타낸다. In particular, the water-soluble amino acids contained in Moringa seeds play a role in purifying contaminants in water. When these amino acids are applied to the skin, they show a detoxifying effect that purifies the skin of contaminants and makes the skin clean.

또한, 베타카로틴, 루틴 등의 카로티노이드 성분, 비타민 및 무기질 성분을 다량 포함하고 있어 칙칙한 피부를 환하게 개선하여 미백 효과를 구현할 수 있다.In addition, since it contains a large amount of carotenoids such as beta-carotene and rutin, as well as vitamins and minerals, it can brighten dull skin and realize a whitening effect.

본 발명에서는 발아된 모링가 종자를 이용하며, 발아 상태의 모링가 종자에는 발아 이전 상태와 비교하여 생명 현상에 필요한 효능 성분을 더욱 많이 포함하고 있어 더욱 강한 효능을 제공할 수 있기 때문이다.In the present invention, germinated Moringa seeds are used, and the germinated Moringa seeds contain more effective ingredients necessary for life phenomena compared to the pre-germination state, so that stronger efficacy can be provided.

모링가 종자의 발아 조건은 특별히 한정되는 것은 아니지만, 다음과 같은 방법으로 발아시켜 사용할 수 있는 그 예로는 24시간 정도 실온 물에 불린 후 배양기에 옮겨 48~72시간 배양하며, 이때 실내 온도는 25℃ 이상으로 따뜻하게 유지해야 한다.The germination conditions of Moringa seeds are not particularly limited, but examples that can be used by germinating in the following way include soaking in room temperature water for about 24 hours and then transferring them to an incubator and incubating them for 48 to 72 hours, in which case the room temperature is 25℃ It should be kept warmer than that.

다만, 본 발명은 종래의 모링가 종자 발아 단계에서와 달리 발아 전에 풀빅산 1.0중량% 포함된 풀빅산 수용액에 24시간 정도 불린 후에 실시하는 것을 특징으로 하여 효과가 증진된 신규하고 진보한 조성물을 제공할 수 있다.However, the present invention provides a novel and advanced composition with improved effect, characterized in that it is carried out after soaking for about 24 hours in an aqueous solution of fulvic acid containing 1.0 wt% of fulvic acid before germination, unlike in the conventional germinating stage of Moringa seeds can do.

또한, 상기 발아의 정도는 특별한 제한이 없으나 본 발명자의 다양한 시험에 의해 싹의 길이가 0.5 ~ 2 cm까지 발아하는 것이 가장 바람직하다.In addition, the degree of germination is not particularly limited, but it is most preferable to germinate up to 0.5 to 2 cm in length of shoots according to various tests of the present inventors.

상기 풀빅산은 천연 휴믹물질로부터 정제수를 이용하여 추출하는 정제수 추출법에 의해 추출된 것으로서, 더 자세히 언급하자면, 천연 휴믹 물질의 농도가 5-10%가 되도록 정제수를 부가한 다음 60-70℃의 온탕에서 교반하여 얻어진 상등액을 여과/농축하여 추출된다.The fulvic acid is extracted by a purified water extraction method of extracting using purified water from a natural humic substance. To be more specific, purified water is added so that the concentration of the natural humic substance is 5-10%, and then in a hot water of 60-70 ℃. The supernatant obtained by stirring is filtered/concentrated and extracted.

또한, 풀빅산은 국제적인 학회인 International Humic Substances Society (천연 휴믹 물질)에서 정한 일반적인 추출방법인 강산/강염기 처리에 의한 추출법으로 추출된 것일 수도 있다. 더 자세히 언급하자면, 천연 휴믹물질을 강산(0.1M HCl)으로 처리하여 추출되거나, 강염기(0.1M NaOH, pH 10)로 처리 후 강산 (6M HCl, pH 1)에서 휴믹산를 침전시켜 용존하고 있는 풀빅산을 분리 및 추출된다.In addition, fulvic acid may be extracted by an extraction method by strong acid/strong base treatment, which is a general extraction method set by the International Humic Substances Society, an international society. In more detail, natural humic material is extracted by treatment with strong acid (0.1M HCl), or dissolved fulvic acid by precipitation of humic acid in strong acid (6M HCl, pH 1) after treatment with strong base (0.1M NaOH, pH 10) is separated and extracted.

본 발명에서의 풀빅산은 상기한 방법 이외에도 다양한 방법으로 추출된 것일 수도 있으며, 분리된 풀빅산은 이물질을 제거하고 순도를 높이기 위해 필터레이션(filteration), 흡착크로마토그래피, 양이온교환수지 크로마토그래피 및 투석을 추가로 실시할 수도 있으며, 풀빅산의 농도를 더 높이기 위하여 동결건조 등을 실시할 수도 있다.In the present invention, the fulvic acid may be extracted by various methods other than the above methods, and the separated fulvic acid is added with filtration, adsorption chromatography, cation exchange resin chromatography and dialysis to remove foreign substances and increase the purity. It can also be carried out, and freeze-drying can be carried out to further increase the concentration of fulvic acid.

또한, 본 발명의 풀빅산은 시판되는 공지 물질을 구입해서 사용할 수도 있으며, 공지 물질이 순도가 낮을 경우, 상기 등의 추가적인 정제방법을 가미할 수도 있다.In addition, the fulvic acid of the present invention may be used by purchasing a commercially available known material, and if the known material has low purity, additional purification methods such as the above may be added.

또한, 상술한 효과를 더욱 향상시키기 위하여 본 발명은 발아된 모링가 종자를 가수분해하기 전에 토르말린 분말에 1:1 부피비로 하여 혼합한 후 24시간 동안 숙성하는 단계를 더 포함할 수 있다.In addition, in order to further improve the above-described effect, the present invention may further include the step of mixing the germinated Moringa seeds with tourmaline powder in a 1:1 volume ratio before hydrolysis and then aging for 24 hours.

상기 트로말린은 전기석이라고도 부르며 화학성분은 철, 마그네슘, 알칼리금속 등과 알루미늄이 포함되는 복잡한 붕소 규산염 광물로서 사용된 분말은 모링가 종자와의 접촉이 많으면 좋기 때문에 미세할수록 더욱 효과적이다.The tromaline is also called tourmaline, and the powder used as a complex borosilicate mineral containing iron, magnesium, alkali metals, and aluminum as a chemical component is more effective as it is finer because it is good if there is a lot of contact with Moringa seeds.

그리고 본 발명에서의 단백질 분해효소를 이용한 가수분해는 본 발명이 속하는 기술 분야에 널리 알려진 것이라면 특별한 제한 없이 사용 가능하다. 그 예로는 파파인(papain), 펩티다아제 R (peptidase R), 플라보자임(Flavourzyme), 프로테아스(ProteAX), 및 알칼라아제 (Alcalase) 등을 이용한 가수분해를 들 수 있다.In addition, hydrolysis using a protease in the present invention can be used without any particular limitation as long as it is widely known in the art to which the present invention pertains. Examples thereof include hydrolysis using papain, peptidase R, Flavozyme, ProteAX, and Alcalase.

또한, 가수분해를 통해 얻어지는 가수분해물에는 미분해 단백질, 폴리펩타이드, 올리고펩타이드, 유리 아미노산이 일정 비율로 혼합이 되어 있는데, 본 발명에서는 이들을 분자량에 따른 막분리법을 통하여 각각 분리한 후에 그 함량을 유리 아미노산 5 ~ 15중량%; 올리고펩타이드 70 ~ 90중량%; 및 폴리펩타이드 5 ~ 15중량% 함유하도록 조정하여 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 및 향상, 피부 주름 방지에 효과가 현저하게 증진된 다기능 화장품 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명의 상세한 시험에 상기 효과를 증진하기 위해서는 상기 올리고펩타이드는 분자량 300 ~ 1,500달톤(Da)이며, 상기 폴리펩타이드는 분자량이 3,000 ~ 15,000달톤(Da)인 것이 바람직하다.In addition, in the hydrolyzate obtained through hydrolysis, undigested proteins, polypeptides, oligopeptides, and free amino acids are mixed in a certain ratio. 5 to 15% by weight of amino acids; oligopeptide 70 to 90% by weight; And by adjusting to contain 5 to 15% by weight of the polypeptide, it provides a multifunctional cosmetic composition in which the effect of skin moisturizing, skin whitening, skin elasticity maintenance and improvement, and skin wrinkle prevention is significantly enhanced. In addition, in order to enhance the effect in the detailed test of the present invention, the oligopeptide preferably has a molecular weight of 300 to 1,500 Daltons (Da), and the polypeptide has a molecular weight of 3,000 to 15,000 Daltons (Da).

본 발명의 조성물은 화장품 총 중량에 대하여 0.01~95.0중량%, 바람직하게는 5.0~95.0중량%, 보다 바람직하게는 10.0~90.0중량%의 양으로 함유할 수 있다. 펩타이드의 함유량이 0.01중량% 미만일 경우에는 성분이 갖고 있는 피부 효능을 기대하기 어려우며 95.0중량%를 초과하는 경우에는 효능 증가가 크지 않아 효율성이 떨어지게 된다.The composition of the present invention may be contained in an amount of 0.01 to 95.0% by weight, preferably 5.0 to 95.0% by weight, more preferably 10.0 to 90.0% by weight based on the total weight of the cosmetic. If the content of the peptide is less than 0.01% by weight, it is difficult to expect the skin efficacy of the component, and if it exceeds 95.0% by weight, the efficacy is not increased, and the efficiency is lowered.

또한, 본 발명의 조성물은 미용 효과를 나타내는 공지의 물질을 더 함유할 수 있다. 구체적으로는 아스코빌 글루코사이드, 감초추출물, 알부틴, 아스코빅애씨드, 코직애씨드 및 나이아신아마이드로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 더 함유할 수 있으며, 이는 조성물 총 중량에 대하여 0.5~5.0중량%로 함유된다. 이는 0.5중량% 미만이면 피부에 흡수되어 효능을 나타내기 어렵고, 5.0중량% 초과이면 피부에 독성을 나타내거나 피부 끈적임이 크게 증가하여 화장품으로서의 가치를 나타내기 어렵기 때문이다.In addition, the composition of the present invention may further contain a known substance exhibiting a cosmetic effect. Specifically, it may further contain one or more selected from the group consisting of ascorbyl glucoside, licorice extract, arbutin, ascorbic acid, kojic acid and niacinamide, which is contained in an amount of 0.5 to 5.0% by weight based on the total weight of the composition. . This is because if it is less than 0.5% by weight, it is difficult to show efficacy by being absorbed into the skin, and if it is more than 5.0% by weight, it is difficult to show the value as a cosmetic because it is toxic to the skin or the stickiness of the skin is greatly increased.

본 발명의 조성물은 우수한 항산화력을 제공하고, 피부 미백, 피부 탄력 증대 또는 피부 주름 개선 등을 통한 피부 노화 방지 효과, 피부 보습력 개선 효과, 항염 효과, 여드름 및 아토피 등의 피부 트러블 개선 효과, 피지 조절 효과, 모공 수축효과, 각질 개선 효과, 피부 수렴 또는 정돈 효과, 혈행 개선을 통한 안색 개선, 피부 자극 완화 효과, 항상성 향상 효과 등의 전반적인 피부 상태의 전반적인 개선 효과를 제공할 수 있다.The composition of the present invention provides excellent antioxidant power, skin whitening, skin elasticity enhancement or skin wrinkle improvement, etc. skin aging prevention effect, skin moisturizing power improvement effect, anti-inflammatory effect, skin trouble improvement effect such as acne and atopy, sebum control It is possible to provide an overall improvement effect of the overall skin condition, such as effect, pore contraction effect, keratin improvement effect, skin convergence or preparation effect, complexion improvement by improving blood circulation, skin irritation alleviation effect, homeostasis improvement effect, and the like.

본 발명에 따른 조성물은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.The composition according to the present invention may be formulated containing a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base. These are all formulations suitable for topical application, for example, solutions, gels, solids, kneaded dry products, emulsions obtained by dispersing an oily phase in an aqueous phase, suspensions, microemulsions, microcapsules, microgranules or ionic (liposomes) and non It may be provided in the form of an ionic vesicle dispersant, or in the form of a cream, skin, lotion, powder, ointment, spray or concealer stick. In addition, it may be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant. These compositions can be prepared according to conventional methods in the art.

또한, 본 발명에 의한 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.In addition, the composition according to the present invention is a fatty substance, an organic solvent, a solubilizer, a thickening agent, a gelling agent, an emollient, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, a surfactant, water, an ionic or non Ionic emulsifiers, fillers, sequestering agents, chelating agents, preservatives, vitamins, blocking agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic actives, lipid vesicles or any other ingredients commonly used in cosmetics; It may contain adjuvants commonly used in the field of cosmetology or dermatology. The adjuvant is introduced in an amount generally used in the field of cosmetology or dermatology.

또한, 본 발명의 조성물은 피부 미용 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다.In addition, the composition of the present invention may contain a skin absorption promoting material in order to increase the skin cosmetic effect.

이하, 실시예 및 시험예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예 및 시험예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 하기 예에 의해 제한되는 것은 아니다.Hereinafter, the configuration and effect of the present invention will be described in more detail through Examples and Test Examples. However, these Examples and Test Examples are provided only for the purpose of illustration to help the understanding of the present invention, and the scope and scope of the present invention are not limited by the following examples.

<< 실시예Example : 조성물 제조>: Composition Preparation>

1. One. 실시예Example 1 One

모링가 올레이페라 종자를 분말로 한 다음 헥산을 사용하여 지방을 0.5중량% 정도로 제거하고, 지방이 제거된 분말을 상온에서 24시간 동안 건조하였다.Moringa oleifera seeds were powdered and then fat was removed to about 0.5 wt% using hexane, and the fat removed powder was dried at room temperature for 24 hours.

분말로부터 단백질을 추출하기 위한 0.4M의 NaCl 용액에 0.5g의 분말을 20:1 비율(v/w)로 1시간 동안 혼합한 후 원심분리기(6000g, 15분,실온)를 사용하여 현탁액과 불용성 물질을 분리하였다.0.5 g of the powder was mixed in a 0.4M NaCl solution for extracting protein from the powder at a 20:1 ratio (v/w) for 1 hour and then centrifuged (6000g, 15 minutes, room temperature) to dissolve the suspension and insoluble The material was isolated.

이어서 현탁액을 8 ~ 10℃의 차가운 물로 10배 희석한 후, 이 용액은 원심분리(12,000g, 10분, 10℃)하여 얻어진 단백질 침전물을 정제수에 혼합하여 25중량%의 농도로 제조하고, 파파인(papain), 펩티다아제 R (peptidase R), 플라보자임(Flavourzyme), 프로테아스(ProteAX), 및 알칼라아제 (Alcalase) 효소 각각에 대하여 1중량%씩 혼합하여 처리하였다.Then, the suspension is diluted 10-fold with cold water at 8 to 10 ° C., and the solution is prepared by mixing the protein precipitate obtained by centrifugation (12,000 g, 10 minutes, 10 ° C) with purified water to a concentration of 25 wt %, papain (papain), peptidase R (peptidase R), flavozyme (Flavourzyme), protease (ProteAX), and Alcalase (Alcalase) was treated by mixing 1% by weight of each enzyme.

처리한 용액을 1M NaOH를 사용하여 최종 pH는 6.0으로 조절하였으며, 50℃에서 40rpm 조건하에서 반응을 시키고 24시간 후 이 용액을 10분 동안 끓여서 효소 반응을 멈추도록 하고 현탁시킨 다음 원심분리 후 건조하여 분말 상태의 모링가 종자 가수분해물을 얻었다.The treated solution was adjusted to a final pH of 6.0 using 1M NaOH, and the reaction was carried out at 50 ° C. under 40 rpm conditions. After 24 hours, the solution was boiled for 10 minutes to stop the enzymatic reaction, suspended, and dried after centrifugation. A powdered moringa seed hydrolyzate was obtained.

상기 분말을 증류수를 이용하여 20mg/mL의 농도로 용해한 다음에 멤브레인 여과를 통하여 유리 아미노산, 올리고펩타이드, 폴리펩타이드로 분리하여 각각 건조하여 분말로 하였으며, 이때 올리고펩타이드는 분자량 300 ~ 1,500달톤(Da)이며, 상기 폴리펩타이드는 분자량이 3,000 ~ 15,000달톤(Da)이다.The powder was dissolved at a concentration of 20 mg/mL using distilled water, and then separated into free amino acids, oligopeptides, and polypeptides through membrane filtration, and dried to powder, respectively, wherein the oligopeptide had a molecular weight of 300 to 1,500 Daltons (Da). and the polypeptide has a molecular weight of 3,000 to 15,000 Daltons (Da).

이어서 상기 유리 아미노산 10중량%, 올리고펩타이드 85중량%; 및 폴리펩타이드 5중량%되도록 혼합하여 본 발명에 따른 조성물을 완성하였다.Then, 10% by weight of the free amino acid, 85% by weight of the oligopeptide; and 5% by weight of the polypeptide to complete the composition according to the present invention.

2. 2. 실시예Example 2 2

1중량% 풀빅산 수용액에 모링가 올레이페라 종자를 24시간 동안 침적한 후에 배양기에 옮겨 25℃ 이상으로 따뜻하게 유지하면서 배양하여 싹의 길이가 0.5 ~ 2 cm가 될 때까지 발아시킨 후 발아 상태의 모링가 올레이페라 종자를 동일 부피만큼의 토르말린 분말에 혼합하여 24시간 숙성 후에 사용하였다는 점에서 실시예 1과 차이가 있다.After immersing Moringa oleifera seeds in a 1% by weight aqueous solution of fulvic acid for 24 hours, transfer them to an incubator and incubate while keeping them warm at 25°C or higher. It is different from Example 1 in that linga oleifera seeds were mixed with the same volume of tourmaline powder and used after aging for 24 hours.

3. 3. 실시예Example 3 3

1중량% 풀빅산 수용액에 모링가 올레이페라 종자를 24시간 동안 침적한 후에 배양기에 옮겨 25℃ 이상으로 따뜻하게 유지하면서 배양하여 싹의 길이가 0.5 ~ 2 cm가 될 때까지 발아시킨 후 발아 상태의 모링가 올레이페라 종자를 동일 부피만큼의 토르말린 분말에 혼합하여 24시간 숙성 후 분말로 한 다음 헥산을 사용하여 지방을 0.5중량% 정도로 제거하고, 지방이 제거된 분말을 상온에서 24시간 동안 건조하였다.After immersing Moringa oleifera seeds in a 1% by weight aqueous solution of fulvic acid for 24 hours, transfer them to an incubator and incubate while keeping them warm at 25°C or higher. Ringa oleifera seeds were mixed with the same volume of tourmaline powder, aged for 24 hours, and then powdered. Then, about 0.5% by weight of fat was removed using hexane, and the fat removed powder was dried at room temperature for 24 hours.

분말로부터 단백질을 추출하기 위한 0.4M의 NaCl 용액에 0.5g의 분말을 20:1 비율(v/w)로 1시간 동안 혼합한 후 원심분리기(6000g, 15분,실온)를 사용하여 현탁액과 불용성 물질을 분리하였다.0.5 g of the powder was mixed in a 0.4M NaCl solution for extracting protein from the powder at a 20:1 ratio (v/w) for 1 hour and then centrifuged (6000g, 15 minutes, room temperature) to dissolve the suspension and insoluble The material was isolated.

이어서 현탁액을 8 ~ 10℃의 차가운 물로 10배 희석한 후, 이 용액은 원심분리(12,000g, 10분, 10℃)하여 얻어진 단백질 침전물을 정제수에 혼합하여 25중량%의 농도로 제조하고, 파파인(papain), 펩티다아제 R (peptidase R), 플라보자임(Flavourzyme), 프로테아스(ProteAX), 및 알칼라아제 (Alcalase) 효소 각각에 대하여 1중량%씩 혼합하여 처리하였다.Then, the suspension is diluted 10-fold with cold water at 8 to 10 ° C., and the solution is prepared by mixing the protein precipitate obtained by centrifugation (12,000 g, 10 minutes, 10 ° C) with purified water to a concentration of 25 wt %, papain (papain), peptidase R (peptidase R), flavozyme (Flavourzyme), protease (ProteAX), and Alcalase (Alcalase) was treated by mixing 1% by weight of each enzyme.

처리한 용액을 1M NaOH를 사용하여 최종 pH는 6.0으로 조절하였으며, 50℃에서 40rpm 조건하에서 반응을 시키고 24시간 후 이 용액을 10분 동안 끓여서 효소 반응을 멈추도록 하고 현탁시킨 다음 원심분리 후 건조하여 분말 상태의 모링가 종자 가수분해물을 얻어 실시예 3 조성물을 완성하였다.The treated solution was adjusted to a final pH of 6.0 using 1M NaOH, and the reaction was carried out at 50 ° C. under 40 rpm conditions. After 24 hours, the solution was boiled for 10 minutes to stop the enzymatic reaction, suspended, and dried after centrifugation. The composition of Example 3 was completed by obtaining a hydrolyzate of Moringa seeds in a powder state.

4. 4. 비교예comparative example

모링가 올레이페라 종자를 분말로 한 다음 헥산을 사용하여 지방을 0.5중량% 정도로 제거하고, 지방이 제거된 분말을 상온에서 24시간 동안 건조하였다.Moringa oleifera seeds were powdered and then fat was removed to about 0.5 wt% using hexane, and the fat removed powder was dried at room temperature for 24 hours.

분말로부터 단백질을 추출하기 위한 0.4M의 NaCl 용액에 0.5g의 분말을 20:1 비율(v/w)로 1시간 동안 혼합한 후 원심분리기(6000g, 15분,실온)를 사용하여 현탁액과 불용성 물질을 분리하였다.0.5 g of the powder was mixed in a 0.4M NaCl solution for extracting protein from the powder at a 20:1 ratio (v/w) for 1 hour and then centrifuged (6000g, 15 minutes, room temperature) to dissolve the suspension and insoluble The material was isolated.

이어서 현탁액을 8 ~ 10℃의 차가운 물로 10배 희석한 후, 이 용액은 원심분리(12,000g, 10분, 10℃)하여 얻어진 단백질 침전물을 정제수에 혼합하여 25중량%의 농도로 제조하고, 파파인(papain), 펩티다아제 R (peptidase R), 플라보자임(Flavourzyme), 프로테아스(ProteAX), 및 알칼라아제 (Alcalase) 효소 각각에 대하여 1중량%씩 혼합하여 처리하였다.Then, the suspension is diluted 10-fold with cold water at 8 to 10 ° C., and the solution is prepared by mixing the protein precipitate obtained by centrifugation (12,000 g, 10 minutes, 10 ° C) with purified water to a concentration of 25 wt %, papain (papain), peptidase R (peptidase R), flavozyme (Flavourzyme), protease (ProteAX), and Alcalase (Alcalase) was treated by mixing 1% by weight of each enzyme.

처리한 용액을 1M NaOH를 사용하여 최종 pH는 6.0으로 조절하였으며, 50℃에서 40rpm 조건하에서 반응을 시키고 24시간 후 이 용액을 10분 동안 끓여서 효소 반응을 멈추도록 하고 현탁시킨 다음 원심분리 후 건조하여 분말 상태의 모링가 종자 가수분해물을 얻어 비교예 조성물을 완성하였다.The treated solution was adjusted to a final pH of 6.0 using 1M NaOH, and the reaction was carried out at 50 ° C. under 40 rpm conditions. After 24 hours, the solution was boiled for 10 minutes to stop the enzymatic reaction, suspended, and dried after centrifugation. A composition of Comparative Example was completed by obtaining a hydrolyzate of Moringa seeds in a powder state.

<< 시험예test example 1: in-vitro 미백 효능 평가> 1: Evaluation of in-vitro whitening efficacy>

1) tyrosinase 저해 활성 측정1) Measurement of tyrosinase inhibitory activity

실험방법 Experimental method

0.175M sodium phosphate buffer(pH 6.8) 0.5㎖에 기질액인 10mM L-DOPA 0.2㎖ 과 시료용액 0.1㎖을 96 well plate에 넣고 혼합한다. 혼합액에 mushroom tyrosinase (110 U/㎖) 0.2㎖을 첨가하여 25℃에서 2분간 반응시켜 반응액 중에 생성된 DOPA chrome을 475nm에서 측정한다. Tyrosinase 저해활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타낸다. In 0.5 ml of 0.175M sodium phosphate buffer (pH 6.8), 0.2 ml of 10 mM L-DOPA, a substrate solution, and 0.1 ml of a sample solution are added to a 96 well plate and mixed. Add 0.2 ml of mushroom tyrosinase (110 U/ml) to the mixture, react at 25°C for 2 minutes, and measure the DOPA chrome generated in the reaction solution at 475 nm. Tyrosinase inhibitory activity is indicated by the decrease in absorbance of the group with and without the sample solution.

저해율(%)= 1-(시료첨가군의 흡광도/시료무첨가군의 흡광도) x 100Inhibition rate (%) = 1-(absorbance in the sample added group / absorbance in the non-sample group) x 100

실험결과 Experiment result

tyrosinase는 피부 멜라닌 생성에 있어서 매우 중요한 역할을 하고 있으며, melanosome 내에서 tyrosine을 산화시켜 DOPA를 만드는 tyrosine hydroxylase로 DOPA를 산화시켜 DOPA quinone을 만드는 DOPA oxidase로서 작용하여 멜라닌 중합체를 합성하는데 중요한 효소로 작용하므로 tyrosinase 저해 활성을 통하여 미백효과를 알 수 있으며, tyrosinase 저해 활성을 측정하여 그 결과를 표 1에 나타냈다. 양성 대조군으로는 Arbutin을 사용하였다. Tyrosinase plays a very important role in the production of melanin in the skin. It is a tyrosine hydroxylase that oxidizes tyrosine in melanosome to make DOPA. It oxidizes DOPA to make DOPA quinone and acts as an important enzyme for synthesizing melanin polymer. The whitening effect can be seen through the tyrosinase inhibitory activity, and the tyrosinase inhibitory activity was measured and the results are shown in Table 1. Arbutin was used as a positive control.

SampleSample Concentration (㎍/㎖)Concentration (μg/ml) 125125 250250 500500 10001000 20002000 비교예comparative example 29.1±2.229.1±2.2 37.7±1.237.7±1.2 40.4±1.540.4±1.5 47.5±0.647.5±0.6 55.5±2.555.5±2.5 실시예 1Example 1 55.2±0.855.2±0.8 63.9±0.963.9±0.9 81.1±0.781.1±0.7 87.6±0.887.6±0.8 90.2±2.190.2±2.1 실시예 2Example 2 60.2±2.560.2±2.5 72.3±0.872.3±0.8 87.1±1.287.1±1.2 92.5±1.792.5±1.7 95.4±2.395.4±2.3 실시예 3Example 3 69.4±2.269.4±2.2 70.2±0.470.2±0.4 84.3±0.884.3±0.8 90.2±0.990.2±0.9 92.1±2.192.1±2.1 ArbutinArbutin 53.2±1.053.2±1.0 60.3±1.560.3±1.5 78.7±0.678.7±0.6 84.6±1.284.6±1.2 88.7±2.588.7±2.5

표 1의 결과를 보면, 비교예의 tyrosinase 저해 활성을 측정한 결과 125㎍/㎖부터 2000㎍/㎖의 처리한 농도에 따른 tyrosinase 저해 활성이 농도 의존적인 것으로 나타났지만 양성 대조군인 Arbutin과 비교하였을 때 낮은 수준의 tyrosinase 저해 활성을 갖는 것으로 확인되었다. 그러나 실시예 1 및 실시예 2는 Arbutin 보다 높은 tyrosinase 저해 활성을 나타내었다.Looking at the results in Table 1, as a result of measuring the tyrosinase inhibitory activity of the comparative example, it was found that the tyrosinase inhibitory activity according to the concentration of 125 µg/ml to 2000 µg/ml was concentration-dependent, but lower than that of Arbutin, a positive control. It was confirmed to have a level of tyrosinase inhibitory activity. However, Examples 1 and 2 exhibited higher tyrosinase inhibitory activity than Arbutin.

그리고 실시예 1보다는 실시예 2와 실시에 3에서 더욱 우수한 효과를 확인할 수 있었다.And it was able to confirm the more excellent effect in Example 2 and Example 3 rather than Example 1.

2) melanin 생합성 저해 활성 측정 2) Measurement of melanin biosynthesis inhibitory activity

실험방법 Experimental method

melanoma cell line인 B16F10 cell을 한국 세포주 은행 (Korean Cell Line Bank)으로부터 구입하였으며, 1% antibiotic (Gibco, USA)과 10% fetal bovine serum (FBS; Gibco, Grand Island, USA)이 함유된 Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양하였으며, 2일에 한번씩 계대 배양을 실시하였다. The melanoma cell line, B16F10 cell, was purchased from the Korean Cell Line Bank, and Dulbecco's modified Eagle's containing 1% antibiotic (Gibco, USA) and 10% fetal bovine serum (FBS; Gibco, Grand Island, USA) medium (DMEM) medium was used at 37° C., 5% CO 2 Incubated in an incubator, and subculture was performed once every 2 days.

DMEM 배지로 배양된 B16F10 세포를 24 well plate에 2.0 X 104 cells/well로 접종한다. 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 배양 후 시료를 농도별로 준비한다. 각각의 농도별 시료와 cell에 자극하기 위하여 자극제인 α-MSH를 200nM로 혼합하여 첨가한다. 37℃, 5% CO2 incubator에서 48시간 동안 배양한 후에 배양액을 제거한 후 인산완충액(pH 7.4)으로 각 well을 세척한다. 1N NaOH를 100㎕ 씩 가하여 cell을 떼어낸 후 1.5㎖ tube에 옮겨준다. 80℃에서 1시간 반응시킨 후 분광광도계 405nm에서 흡광도를 측정한다. melanin 생합성 저해는 시료 용액의 첨가구와 무 첨가구의 흡광도 감소율로 나타낸다.B16F10 cells cultured in DMEM medium are inoculated in a 24-well plate at 2.0 X 10 4 cells/well. After incubation for 24 hours at 37°C, 5% CO 2 in an incubator, samples are prepared by concentration. In order to stimulate the samples and cells for each concentration, α-MSH, a stimulant, is mixed and added at 200 nM. After culturing for 48 hours at 37°C, 5% CO 2 in an incubator, remove the culture medium and wash each well with phosphate buffer (pH 7.4). Add 100 μl of 1N NaOH at a time to remove the cells and transfer them to a 1.5 ml tube. After reacting at 80° C. for 1 hour, absorbance is measured at 405 nm in a spectrophotometer. Inhibition of melanin biosynthesis is indicated by the decrease in absorbance in the group with and without the sample solution.

실험결과 Experiment result

melanin 생합성 저해 활성 측정 결과는 하기 표 2에 나타냈다.Melanin biosynthesis inhibitory activity measurement results are shown in Table 2 below.

samplesample Melanin contents (%)Melanin contents (%) α-MSH(-)α-MSH(-) -- α-MSH(+, 200nm)α-MSH (+, 200 nm) 100100 α-MSH(+, 200nM) + 비교예 50 ㎍/㎖α-MSH (+, 200 nM) + Comparative Example 50 μg/ml 44.2 ± 3.444.2 ± 3.4 α-MSH(+, 200nM) + 실시예 1 50 ㎍/㎖α-MSH (+, 200 nM) + Example 1 50 μg/ml 21.7 ± 1.821.7 ± 1.8 α-MSH(+, 200nM) + 실시예 2 50 ㎍/㎖α-MSH (+, 200 nM) + Example 2 50 μg/ml 14.1 ± 2.514.1 ± 2.5 α-MSH(+, 200nM) + 실시예 3 50 ㎍/㎖α-MSH (+, 200 nM) + Example 3 50 μg/ml 15.9 ± 1.215.9 ± 1.2

상기 표 2의 결과를 보면 α-MSH 단독 처리군에 비교하였을 때 비교예의 펩타이드보다 실시예의 펩타이드에서 2배 이상의 효과를 확인할 수 있었으며, 특히 실시예 1보다는 실시예 2와 3에서 더욱 우수한 효과를 확인할 수 있었다.Looking at the results of Table 2, when compared to the α-MSH alone treatment group, it was possible to confirm the effect of more than twice the effect of the peptide of Example than the peptide of Comparative Example, and in particular, more excellent effects were confirmed in Examples 2 and 3 than in Example 1. could

<< 시험예test example 2: in- 2: in- vivoin vivo 미백 효과> Whitening Effect>

실험방법 Experimental method

상기 실시예 및 비교예에 대하여 색소침착 저해효과에 대한 in vivo 실험을 하였다.An in vivo experiment was performed on the pigmentation inhibitory effect for the Examples and Comparative Examples.

6주령의 HRM2 hairless mouse를 중앙실험동물(주)로부터 분양받아 1주일 동안 SPF 동물 사육실에서 적응시킨 후 실험을 진행하였으며, 물과 사료는 자유롭게 공급하였다.After receiving a 6-week-old HRM2 hairless mouse from Central Laboratory Animals Co., Ltd. and acclimatizing it in the SPF animal breeding room for 1 week, the experiment was conducted, and water and feed were freely supplied.

실험군을 정상대조군(정제수 도포), UV 조사대조군(UV + 정제수 도포), 양성대조군(UV + Arbutin 도포), 실시예 1 도포군(UV + 실시예 1 도포), 실시예 2 도포군(UV + 실시예 2 도포), 실시예 3 도포군(UV + 실시예 3 도포) 및 비교예 도포군(UV + 비교예 도포)로 설정하여 3마리씩 6그룹으로 나누고 UV를 조사하기 3일 전부터 실험 종료 시까지 약물을 도포하였다.Experimental groups were normal control group (purified water application), UV irradiation control group (UV + purified water application), positive control group (UV + Arbutin application), Example 1 application group (UV + Example 1 application), Example 2 application group (UV + Example 2 application), Example 3 application group (UV + Example 3 application) and Comparative Example application group (UV + Comparative example application), divided into 6 groups of 3 animals each, from 3 days before UV irradiation until the end of the experiment The drug was applied.

동물의 통제를 위해 케타민(ip 2 ml/kg)으로 마취한 다음, 등 전체에 cream 100 mg을 도포한 후 30분간 흡수시켰으며, UV 조사는 도포 30분 뒤에 남아있는 cream을 제거한 뒤 306nm의 UVB를 방출하는 램프를 이용하여 실행하였으며, UV-meter로 자외선 양을 측정하여 100 mJ/cm, 150 mJ/cm, 200 mJ/cm로 조사량을 점차 증가시키면서 1일 1회 각 5일씩 조사하였다.After anesthesia with ketamine (ip 2 ml/kg) for animal control, 100 mg of cream was applied to the entire back and absorbed for 30 minutes. It was carried out using a lamp emitting light, and the amount of ultraviolet light was measured with a UV-meter, and the irradiation amount was gradually increased to 100 mJ/cm, 150 mJ/cm, and 200 mJ/cm, and irradiated once a day for 5 days each.

도포 물질에 따른 색소침착 정도는 색차계를 사용하여 동일부위를 L value 중심으로 측정하였으며, 시료 도포 1일 전부터 시작하여 실험 종료 시까지 1일 1회 시행하였다. 시료 도포 전 마취 후 측정하였다. The degree of pigmentation according to the coating material was measured using a colorimeter as the center of the L value in the same area, and it was performed once a day starting from 1 day before the sample application and until the end of the experiment. Measurements were made after anesthesia before sample application.

실험결과 Experiment result

정제수를 바르고 UVB를 조사하지 않은 control 그룹과 정제수를 바르고 UVB를 조사한 UVB 그룹을 대조군으로 설정하여 색차계로 측정한 L* value(lightness value)를 하기 수학식에 따라 계산하여 그 결과를 표 3으로 나타냈다.The L* value (lightness value) measured with a colorimeter was calculated according to the following equation by setting the control group to which purified water was applied and UVB was not irradiated and the UVB group to which purified water was applied and irradiated with UVB was set as a control group, and the results are shown in Table 3 .

<수학식><Equation>

Figure 112021054946645-pat00001
Figure 112021054946645-pat00001

samplesample L* value L* value 정상대조군(정제수 도포)Normal control group (purified water application) 1.2 ± 0.31.2 ± 0.3 UV 조사대조군(UV + 정제수 도포)UV irradiation control group (UV + purified water applied) -3.5 ± 0.5-3.5 ± 0.5 양성대조군(UV + Arbutin 도포)Positive control group (UV + Arbutin application) 0.3 ± 0.20.3 ± 0.2 비교예 도포군(UV + 비교예 도포)Comparative example application group (UV + comparative example application) -2.9 ± 0.3-2.9 ± 0.3 실시예 1 도포군(UV + 실시예 1 도포)Example 1 application group (UV + Example 1 application) 0.7 ± 0.20.7 ± 0.2 실시예 2 도포군(UV + 실시예 2 도포)Example 2 application group (UV + Example 2 application) 0.9 ± 0.40.9 ± 0.4 실시예 2 도포군(UV + 실시예 2 도포)Example 2 application group (UV + Example 2 application) 0.8 ± 0.20.8 ± 0.2

상기 표 3의 실험 결과, UV 조사대조군을 보면 UVB 조사 시 색소 침착으로 인하여 L* value가 낮아짐을 알 수 있었으며, 양성 대조군으로 사용한 Arbutin 도포 시 UV 조사대조군과 비교하여 유의적인 차이를 나타내어 색소 침착을 방지함을 확인할 수 있었으며, 그러나 정상대조군과는 조금 차이가 있어 완벽하게 색소 침착을 억제하지는 못한 것으로 알 수 있었다.As a result of the experiment in Table 3, when looking at the UV irradiation control group, it was found that the L* value was lowered due to pigmentation during UVB irradiation. It could be confirmed that the anti-pigmentation was prevented, but there was a slight difference from the normal control group, indicating that the pigmentation could not be completely suppressed.

그러나 본 발명에 따른 실시예를 도포한 경우 UV 조사대조군과 비교하여 차이를 나타내어 현저한 차이를 미백 효과를 확인할 수 있었으며 더더욱 양성 대조군으로 사용한 Arbutin 도포보다도 더 우수한 효과를 보여 상품화 가능성까지 확인한 수 있었다.However, when the Example according to the present invention was applied, it showed a difference compared with the UV irradiation control group, and a significant difference could be confirmed, and even more, it showed a better effect than the Arbutin application used as a positive control group, confirming the possibility of commercialization.

또한, 실시예 2 및 실시예 3에서 실시예 1보다 더욱 우수하였으며, 비교예에서는 in-vivo 효과를 거의 확인할 수 없었다. In addition, in Examples 2 and 3, it was more excellent than Example 1, and the in-vivo effect was hardly confirmed in the comparative example.

<< 시험예test example 3: 피부 보습> 3: Skin Moisturizing>

1. 세포 독성 실험1. Cytotoxicity experiments

세포독성 테스트는 Moseman의 방법(Moseman T J, Immuno Methods, 65, 55 (1983)) 및 Skaper 등의 방법(Skaper SD, et al, Cell Culture, 2, 17 (1990))을 이용한 MTT(3-4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) 측정법을 이용하여 수행하였다.The cytotoxicity test was performed by Moseman's method (Moseman TJ, Immuno Methods, 65, 55 (1983)) and Skaper et al. (Skaper SD, et al, Cell Culture, 2, 17 (1990)) using MTT (3-4). ,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) was measured.

인간의 각질형성세포 HaCaT는 한국세포주은행(Korean Cell Line Bank; Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다. HaCaT는 10% (V/V) FBS, 페니실린 100U/mL 및 스트렙토마이신 100g/mL의 항생제를 포함하는 DMEM 배지를 사용하여 실험실에서 37℃, 5% CO2 공급조건을 갖춘 동물세포 배양기에서 배양하였다.Human keratinocytes HaCaT were purchased from the Korean Cell Line Bank (Seoul, Korea) and used. HaCaT was cultured in an animal cell incubator at 37°C and 5% CO2 supply condition in a laboratory using DMEM medium containing antibiotics of 10% (V/V) FBS, penicillin 100U/mL, and streptomycin 100g/mL.

실시예와 비교예 조성물을 DMSO에 용해시켜 100g/mL로 배양액에 첨가하고, 상기 배양액에서 세포를 24시간 동안 배양하였다. MTT 용액(5mg/mL)을 처리하여 4시간 더 배양시킨 다음, 생성된 청색 결정인 포르마잔의 양을 ELISA 판독기를 이용하여 595nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포에 대한 독성은 각각의 대조군의 평균 흡광도 값에 대한 백분율로 나타냈다.The compositions of Examples and Comparative Examples were dissolved in DMSO and added to the culture medium at 100 g/mL, and the cells were cultured in the culture medium for 24 hours. After treatment with MTT solution (5 mg/mL) and further incubated for 4 hours, the amount of the produced blue crystal formazan was measured for absorbance at 595 nm using an ELISA reader. Toxicity to cells was expressed as a percentage of the average absorbance value of each control group.

HaCaT 각질세포에서 세포독성을 조사하기 위하여 100 g/mL 농도로 처리하였을 때, 대조군인 DMSO만을 처리한 것과 비교하여 세포증식의 변화 정도를 계산하여 세포독성을 조사하였다. To investigate cytotoxicity in HaCaT keratinocytes, when treated at a concentration of 100 g/mL, cytotoxicity was investigated by calculating the degree of change in cell proliferation compared to that treated only with DMSO, a control.

모든 결과에서 세포 생존율이 95 ~ 98%의 결과를 보여 실시예 및 비교예 조성물 모두 세포 독성은 없는 것으로 판명되었다.In all the results, cell viability showed a result of 95 to 98%, and it was found that both the compositions of Examples and Comparative Examples had no cytotoxicity.

2. 인체 적용시 수분 보유능의 평가2. Evaluation of water retention capacity when applied to the human body

실시예 및 비교예의 조성물에 대한 피부 보습 효과를 평가하기를 하기 위하여, 실시예와 비교예의 각 시험물질이 도포된 피부를 대상으로 하여 수분 보유능을 다음과 같이 측정하였다. 시험물질은 정제수에 15중량%로 녹인 것을 사용하였다.In order to evaluate the skin moisturizing effect of the compositions of Examples and Comparative Examples, the moisture retention ability was measured as follows for skin coated with each test substance of Examples and Comparative Examples. The test substance dissolved in purified water at 15% by weight was used.

수분 보유능의 측정은 실내온도 22℃ 및 상대습도 45%의 항온 항습실에서 20명의 피시험자 전박 안쪽에 일정량(0.1g/4㎠)을 도포하고, 도포 전, 도포 1시간 후 및 도포 2시간 후의 피부의 수분 함량을 측정하였다. 측정 기기는 피부의 수분 함량에 따른 피부의 전기 용량을 측정하여 보습력을 측정하는 수분 함량측정기(corneometer CM820, Courage + Khazaka, Cologne, 독일)를 사용하여 그 결과는 하기 표 4에 나타내었다. Moisture retention capacity was measured by applying a certain amount (0.1g/4cm2) to the inside of the forearms of 20 subjects in a constant temperature and humidity room with a room temperature of 22°C and a relative humidity of 45%, and the skin before, 1 hour after, and 2 hours after application. of the water content was measured. As the measuring device, a moisture content meter (corneometer CM820, Courage + Khazaka, Cologne, Germany) that measures the moisturizing power by measuring the electric capacity of the skin according to the moisture content of the skin was used, and the results are shown in Table 4 below.

전기전도도electrical conductivity 도포 전before application 도포 1시간 후1 hour after application 도포 2시간 후2 hours after application 실시예 1Example 1 5050 8383 7777 실시예 2Example 2 5050 9090 8585 실시예 3Example 3 5050 8888 8181 비교예 comparative example 5050 5656 5151

상기 표 4로부터 본 발명에 따른 조성물이 비교예의 조성물에 비하여 현저하게 우수한 수분 보유능을 확인할 수 있었으며, 이는 매우 뛰어난 보습효과를 갖는 소재임을 입증한 것이다. 특히 실시예 2 및 3의 결과를 보면 풀빅산과 트로마린에 의한 상승 효과를 확인할 수 있다. From Table 4, it was confirmed that the composition according to the present invention has a remarkably superior water retention ability compared to the composition of Comparative Example, which proves that it is a material having a very excellent moisturizing effect. In particular, looking at the results of Examples 2 and 3, the synergistic effect of fulvic acid and tromarin can be confirmed.

3. 아쿠아포린-3 및 인볼루크린 합성 촉진효과 실험3. Aquaporin-3 and involucrin synthesis promoting effect experiment

피부세포의 장벽 및 보습기능에 중요한 역할을 하는 인볼루크린과 물 이동에 중요한 역할을 하는 아쿠아포린-3의 합성을 증가시키는 효과를 확인하기 위하여 다음과 같이 세포에 실시예 및 비교예 조성물을 을 각각 처리한 후 웨스턴 블럿팅(western blotting)을 통해 확인하였다.In order to confirm the effect of increasing the synthesis of involucrin, which plays an important role in the barrier and moisturizing functions of skin cells, and aquaporin-3, which plays an important role in water movement, the compositions of Examples and Comparative Examples were applied to the cells as follows. After each treatment, it was confirmed by western blotting.

먼저, 인간의 각질형성세포 HaCaT를 접종하여 24시간 후 실시예 및 비교예 조성물을 각각 첨가하여 DMEM 배지, 37℃, 5% CO2에서 배양하였다. 24시간 배양 후 세포를 회수한 후 파쇄하여 단백질만을 추출하여 -40℃에 보관하였다. 추출된 단백질은 BCA saasy를 통해 단백질을 정량하였다. 각각의 시료의 단백질량 30g으로 희석한 후 12% SDS-겔에서 전기영동한 후 PVDF membrane으로 옮겼다. 1차 항체(rabbit anti-aquaporins-3 antibody)와 반응시킨 후 남은 항체를 세척하여 제거하고 2차 항체(rabbit HRP-coupled anti-IgG antibody)와 반응시켰다. First, human keratinocytes were inoculated with HaCaT, and after 24 hours, the compositions of Examples and Comparative Examples were added, respectively, and cultured in DMEM medium, 37° C., 5% CO 2 . After culturing for 24 hours, the cells were recovered, disrupted, and only proteins were extracted and stored at -40°C. The extracted protein was quantified by BCA saasy. After dilution with 30 g of protein amount of each sample, electrophoresis on 12% SDS-gel was carried out, and then it was transferred to PVDF membrane. After reacting with the primary antibody (rabbit anti-aquaporins-3 antibody), the remaining antibody was washed and removed and reacted with the secondary antibody (rabbit HRP-coupled anti-IgG antibody).

남은 항체를 제거한 후 항체와 반응하여 발색 반응을 일으키는 시약(peroxidase substrate and chromogen solution)을 첨가하였다. 발색된 밴드는 이미지 분석(BioRad, Universal Hood , USA )을 통해 측정하고 수치화하여 그 결과를 하기 표 5과 표 6에 나타냈다.After removing the remaining antibody, a reagent (peroxidase substrate and chromogen solution) that reacts with the antibody to cause a color reaction was added. The colored band was measured and quantified through image analysis (BioRad, Universal Hood, USA), and the results are shown in Tables 5 and 6 below.

구분division 아쿠아포린-3의 발현량(%)Aquaporin-3 expression level (%) 대조군control 100100 실시예 1Example 1 148148 실시예 2Example 2 163163 실시예 3Example 3 162162 비교예 comparative example 103103

상기 표 5에서 보는 바와 같이 비교예는 대조군에 비해 거의 효과를 보이지 않았으며, 본 발명에 따른 실시예는 50% 이상의 효과를 보였으며, 특히 실시예 2 및 실시예 3에서 현저한 상승효과를 확인할 수 있었다.As shown in Table 5, the comparative example showed little effect compared to the control, and the example according to the present invention showed an effect of 50% or more, and in particular, a significant synergistic effect could be confirmed in Examples 2 and 3 there was.

구분division 인볼루크린의 발현량(%)Expression level of involucrin (%) 대조군control 100100 실시예 1Example 1 149149 실시예 2Example 2 164164 실시예 3Example 3 158158 비교예 comparative example 102102

HaCaT 각질세포에 처리 했을 때 피부장벽기능과 보습에 중요한 역할을 하는 인볼루크린의 발현이 상기 표 6에서 보는 바와 같이 비교예는 대조군에 비해 거의 효과를 보이지 않았으며, 본 발명에 따른 실시예는 50% 이상의 효과를 보였으며, 특히 실시예 2 및 실시예 3에서 현저한 상승효과를 확인할 수 있었다.The expression of involucrin, which plays an important role in skin barrier function and moisturizing, when treated with HaCaT keratinocytes, as shown in Table 6, the comparative example showed little effect compared to the control, and the examples according to the present invention showed little effect. It showed an effect of 50% or more, and in particular, a significant synergistic effect was confirmed in Examples 2 and 3.

이상의 실험결과를 통하여 본 발명의 조성물은 피부 장벽 기능과 보습에 뛰어난 효과를 확인할 수 있었다.Through the above experimental results, the composition of the present invention was able to confirm the excellent effect on the skin barrier function and moisturizing.

<< 시험예test example 4: 피부 주름방지 및 탄력 유지> 4: Prevents skin wrinkles and maintains elasticity>

1. Elastase 저해율 측정1. Measurement of Elastase Inhibition Rate

엘라스틴(Elastin)을 분해하는 효소인 엘라스테이즈(Elastase)의 활성 저해 효과를 다음과 같이 확인하였다.The inhibitory effect on the activity of Elastase, an enzyme decomposing elastin, was confirmed as follows.

엘라스테이즈(Elastase)는 사람의 백혈구 세포로부터 유래한 엘라스테이즈를 사용하였고, 엘라스테이즈의 기질로 합성 기질인 MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-pNA를 사용하였다. 완충용액은 100mM의 Tris(pH 7.5) 용액을 사용하였다. 엘라스테이즈는 완충용액을 이용하여 최종적으로 0.2mU을 사용하였다. 또한, 엘라스테이즈의 합성 기질은 DMSO를 이용하여 100mM 용액을 만든 후 최종 농도가 05mM이 되도록 완충용액을 이용하여 희석하였다. Elastase used elastase derived from human leukocyte cells, and a synthetic substrate MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-pNA was used as a substrate for elastase. A buffer solution of 100 mM Tris (pH 7.5) was used. Elastase was finally used at 0.2 mU using a buffer solution. In addition, the synthetic substrate of elastase was diluted with a buffer solution to a final concentration of 05 mM after making a 100 mM solution using DMSO.

이때, 양성 대조군은 엘라스테이즈 저해 물질로 알려진 퀘르세틴(Quercetin)을 100ppm 농도로 넣은 것으로 설정하였다. 실시예 및 비교예의 시료 역시 100ppm이 되도록 첨가하였다. 반응은 96-웰플레이트에서진행하였으며, 상온에서 20분간 반응시켰다. 분광 광도계를 이용하여 1분 간격으로 405nm에서 흡광도를 측정하여 시간 대비 흡광도의 기울기를 구하여 효소의 활성도로 정하였다. 엘라스테이즈 저해율은 다음과 같이 계산하여 그 결과를 표 7에 나타냈다.At this time, the positive control was set to put quercetin (Quercetin) known as an elastase inhibitor at a concentration of 100ppm. Samples of Examples and Comparative Examples were also added so as to be 100 ppm. The reaction was carried out in a 96-well plate, and the reaction was carried out at room temperature for 20 minutes. The absorbance was measured at 405 nm at intervals of 1 minute using a spectrophotometer, and the slope of the absorbance versus time was obtained and determined as the enzyme activity. The elastase inhibition rate was calculated as follows and the results are shown in Table 7.

Figure 112021054946645-pat00002
Figure 112021054946645-pat00002

시료sample Elastase 저해율(%) Elastase inhibition rate (%) 양성대조군positive control 43.12%43.12% 실시예 1Example 1 77.29%77.29% 실시예 2Example 2 88.21%88.21% 실시예 3Example 3 84.25$84.25$ 비교예 comparative example 42.18%42.18%

상기 표 7의 결과에서 볼 수 있듯이, 본 발명의 조성물은 매우 우수한 엘라스타아제 저해능이 있음을 알 수 있었으며, 비교예에서도 어느 정도의 효과를 보였으나 본 발명 조성물보다는 미비하였으며, 특히 실시예 2 및 실시예 3조성물에서 현저한 상승효과를 확인할 수 있었다.As can be seen from the results of Table 7, it was found that the composition of the present invention had a very good elastase inhibitory ability, and although it showed some effect in the comparative example, it was inferior to the composition of the present invention, especially in Example 2 and A significant synergistic effect was confirmed in the composition of Example 3.

2. Collagenase 저해율 측정2. Measurement of Collagenase Inhibition Rate

콜라겐(Collagen)을 분해하는 효소인 콜라게나제의 활성 저해 효과를 다음과 같이 확인하였다.The inhibitory effect on the activity of collagenase, an enzyme that decomposes collagen, was confirmed as follows.

콜라게나제는 쥐의 이자에서 유래한 콜라게나제를 사용하였고, 콜라게나제의 기질로 합성 기질인 N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala을 사용하였다. 완충용액은 50mM Tricine, 10mM CaCl2·H2O, 400mM NaCl(pH7.5)이 녹아 있는 용액을 사용하였다. 합성 기질은 완충용액을 이용하여 10mM의 농도로 녹인 후 최종적으로 75μM이 되도록 희석하였다. 콜라게나제는 4도의 차가운 3차 증류수를 이용하여 1unit/ml 농도로 녹인 후 최종적으로 0.05unit/ml이 되도록 완충용액을 이용하여 희석하였다. Collagenase derived from mouse pancreas was used, and a synthetic substrate, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala, was used as the collagenase substrate. A buffer solution in which 50 mM Tricine, 10 mM CaCl 2 ·H 2 O, and 400 mM NaCl (pH7.5) were dissolved was used. The synthetic substrate was dissolved at a concentration of 10 mM using a buffer and finally diluted to 75 μM. Collagenase was dissolved in 4 degree cold tertiary distilled water to a concentration of 1 unit/ml and finally diluted with a buffer solution to 0.05 unit/ml.

실시예 및 비교예의 시료는 최종농도 100ppm에서 실험하였다. 이 때, 양성 대조군은 콜라게나제 저해 효과가 알려진 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG)를 최종농도 100ppm이 되도록 설정하였다. 반응은 96-웰플레이트에서 진행하였으며, 상온에서 10분간 반응시켰다. 분광 광도계를 이용하여 1분 간격으로 345 nm에서 흡광도를 측정하여 시간 대비 흡광도의 최대 기울기를 구하여 효소의 활성으로 정하였다. 콜라게나제 저해율은 다음과 같이 계산하여 그 결과를 표 8에 나타냈다.The samples of Examples and Comparative Examples were tested at a final concentration of 100 ppm. At this time, the positive control group was set to have a final concentration of 100 ppm of epigallocatechin gallate (EGCG), which is known to have a collagenase inhibitory effect. The reaction was carried out in a 96-well plate, and reacted at room temperature for 10 minutes. The absorbance was measured at 345 nm at intervals of 1 minute using a spectrophotometer, and the maximum slope of the absorbance versus time was obtained and determined as the activity of the enzyme. The collagenase inhibition rate was calculated as follows and the results are shown in Table 8.

Figure 112021054946645-pat00003
Figure 112021054946645-pat00003

시료sample Collagenase 저해율(%) Collagenase inhibition rate (%) 양성대조군positive control 42.12%42.12% 실시예 1Example 1 68.18%68.18% 실시예 2Example 2 80.12%80.12% 실시에 3run 3 78.42%78.42% 비교예 comparative example 39.15%39.15%

상기 표 8의 결과에서 볼 수 있듯이, 본 발명의 조성물은 매우 우수한 콜라게나제 저해능이 있음을 알 수 있었으며, 비교예에서도 어느 정도의 효과를 보였으나 본 발명 조성물보다는 미비하였으며, 특히 실시예 2 및 실시예 3 조성물에서 현저한 상승효과를 확인할 수 있었다.As can be seen from the results of Table 8, the composition of the present invention was found to have a very good collagenase inhibitory ability, and although it showed some effect in the comparative example, it was inferior to the composition of the present invention, especially in Example 2 and A significant synergistic effect was confirmed in the composition of Example 3.

3. 세포증식 효과 측정3. Measurement of cell proliferation effect

피부세포 증식 활성화에 대하여 확인하기 위해, 사람의 섬유아세포를 사용하여 세포증식 활성능을 측정하였다. To confirm the activation of skin cell proliferation, cell proliferation activity was measured using human fibroblasts.

10㎍/㎖의 실시예 및 비교예의 조성물을 배양액에 첨가한 후, 사람의 섬유아세포를 배양하여 MTT 환원법을 수행하고, 포르마잔(formazan) 생성물을 이소프로필 에탄올로 추출하여, 570nm에서 흡광도를 측정함으로써 세포증식 활성능을 상대비교하였다. 이때, 음성대조군으로는 시료는 넣지 않은 배양액을 사용하였다. 측정한 결과를 하기 식을 이용하여 수치로 계산하여 그 결과는 하기 표 9에 나타냈다.After adding the compositions of Examples and Comparative Examples at 10 μg/ml to the culture medium, the MTT reduction method was performed by culturing human fibroblasts, and the formazan product was extracted with isopropyl ethanol, and absorbance was measured at 570 nm. By doing so, the cell proliferation activity was compared. At this time, as a negative control, a culture medium without the sample was used. The measured results were numerically calculated using the following formula, and the results are shown in Table 9 below.

세포증식능(%) = 각 시료군에서의 흡광도/대조군에서의 흡광도Cell proliferative capacity (%) = absorbance in each sample group / absorbance in control group

시료sample 세포증식활성능(%) Cell proliferative activity (%) 실시예 1Example 1 137.28%137.28% 실시예 2Example 2 144.14%144.14% 실시예 3 Example 3 142.28%142.28% 비교예 comparative example 112.15%112.15%

상기 표 9의 결과에서 볼 수 있듯이, 처리하지 않은 대조군의 세포증식 활성능(100%)에 비하여 본 발명의 조성물은 매우 우수한 세포증식 활성을 보였으며, 비교예에서도 어느 정도의 효과를 보였으나 실시예 1보다도 미비하였으며, 특히 실시예 2 및 실시예 3에서 현저한 상승효과를 보였다.As can be seen from the results of Table 9, the composition of the present invention showed very excellent cell proliferation activity compared to the cell proliferation activity (100%) of the untreated control group, and showed some effect in the comparative example. It was less than that of Example 1, and in particular, in Examples 2 and 3, a significant synergistic effect was shown.

이상에서 살펴 본 결과 본 발명에 따른 화장품 조성물은 피부 탄력 유지 및 향상 효과, 피부 주름 방지 효과가 뛰어나 궁극적으로 피부 노화를 방지할 수 있는 최상의 화장품 조성물임을 알 수 있었다. As a result of the above examination, it was found that the cosmetic composition according to the present invention is excellent in maintaining and improving skin elasticity and preventing skin wrinkles, and is ultimately the best cosmetic composition capable of preventing skin aging.

상술한 시험예를 종합하여 보면 본 발명에 따른 조성물은 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 내지 향상, 피부 주름 방지 효과, 궁극적으로는 피부 항노화 효과가 현저하게 우수한 장점을 보유하고 있다.In summary of the above-described test examples, the composition according to the present invention has remarkably excellent advantages in skin moisturizing, skin whitening, maintaining or improving skin elasticity, skin wrinkle prevention effect, and ultimately skin anti-aging effect.

Claims (5)

모링가 종자로부터 추출된 단백질을 단백질 분해효소로 가수분해하여 얻어지는 가수분해물로서
유리 아미노산 5 ~ 15중량%;
올리고펩타이드 70 ~ 90중량%; 및
폴리펩타이드 5 ~ 15중량%
함유하며,
상기 모링가 종자는 1중량% 풀빅산 수용액에 24시간 동안 침적 후 발아된 모링가 종자인 것을 특징으로 하는 것을 특징으로 하여 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 및 향상, 피부 주름 방지에 유효한 다기능 화장품 조성물.
As a hydrolyzate obtained by hydrolyzing proteins extracted from Moringa seeds with proteolytic enzymes,
5 to 15% by weight of free amino acids;
oligopeptide 70 to 90% by weight; and
Polypeptide 5 to 15% by weight
contains,
The moringa seed is a multifunctional cosmetic effective for skin moisturizing, skin whitening, maintaining and improving skin elasticity, and preventing skin wrinkles, characterized in that the moringa seeds are germinated after being immersed in 1 wt% fulvic acid aqueous solution for 24 hours. composition.
제 1항에 있어서, 상기 발아된 모링가 종자를 가수분해 전에 토르말린 분말과 1:1의 부피비로 혼합한 후 24시간 동안 유지하는 것을 특징으로 하는 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 및 향상, 피부 주름 방지에 유효한 다기능 화장품 조성물.
According to claim 1, wherein the germinated Moringa seeds are mixed with tourmaline powder in a volume ratio of 1:1 before hydrolysis and maintained for 24 hours. Skin moisturizing, skin whitening, skin elasticity maintenance and improvement, skin A multifunctional cosmetic composition effective for anti-wrinkle.
제 1항에 있어서, 상기 올리고펩타이드는 분자량 300 ~ 1,500달톤(Da)이며, 상기 폴리펩타이드는 분자량이 3,000 ~ 15,000달톤(Da)인 것을 특징으로 하는 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 및 향상, 피부 주름 방지에 유효한 다기능 화장품 조성물.
The method of claim 1, wherein the oligopeptide has a molecular weight of 300 to 1,500 Daltons (Da), and the polypeptide has a molecular weight of 3,000 to 15,000 Daltons (Da). A multifunctional cosmetic composition effective in preventing skin wrinkles.
1중량% 풀빅산 수용액에 24시간 동안 침적 후 발아된 모링가 종자를 토르말린 분말과 1:1의 부피비로 혼합한 후 24시간 동안 유지한 후에 단백질 분해 효소로 가수분해한 가수분해물을 함유하는 것을 특징으로 하여 피부 보습, 피부 미백, 피부 탄력 유지 및 향상, 피부 주름 방지에 유효한 다기능 화장품 조성물.


Moringa seeds germinated after being immersed in 1 wt% fulvic acid aqueous solution for 24 hours are mixed with tourmaline powder in a volume ratio of 1:1 and maintained for 24 hours and then hydrolyzed with a proteolytic enzyme. Multifunctional cosmetic composition effective for skin moisturizing, skin whitening, maintaining and improving skin elasticity, and preventing skin wrinkles.


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