KR102299687B1 - 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물 - Google Patents

호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR102299687B1
KR102299687B1 KR1020210002411A KR20210002411A KR102299687B1 KR 102299687 B1 KR102299687 B1 KR 102299687B1 KR 1020210002411 A KR1020210002411 A KR 1020210002411A KR 20210002411 A KR20210002411 A KR 20210002411A KR 102299687 B1 KR102299687 B1 KR 102299687B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
sorafenib
extract
administration
enhancing
spp
Prior art date
Application number
KR1020210002411A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20210049029A (ko
Inventor
임우종
김영선
이민경
이상윤
이윤미
Original Assignee
임우종
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from KR1020190133074A external-priority patent/KR102261589B1/ko
Application filed by 임우종 filed Critical 임우종
Priority to KR1020210002411A priority Critical patent/KR102299687B1/ko
Publication of KR20210049029A publication Critical patent/KR20210049029A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102299687B1 publication Critical patent/KR102299687B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/70—Polygonaceae (Buckwheat family), e.g. spineflower or dock
    • A61K36/704—Polygonum, e.g. knotweed
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4412—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/308—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on cancer prevention
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/30—Other Organic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

본 발명은 호장근 추출물을 포함하는 소라페니브(sorafenib)의 암치료 효과 증강용 조성물에 관한 것으로, 소라페니브와 병용 투여하는 경우, 호장근 추출물과 소라페니브를 각각 단독 투여한 경우에 비하여 암세포 성장 저해 효과가 현저히 우수하고, 또한 소라페니브의 사용량을 기존의 적정 처리 농도보다 저농도로 줄일 수 있어 항암제 내성에 따른 문제점을 극복할 수 있다.

Description

호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물{Composition for improving anticancer efficacy of sorafenib containing polygonum cuspidatum extract as an active ingredient}
본 발명은 호장근(polygonum cuspidatum) 추출물을 포함하는 소라페니브(sorafenib)의 암 치료 효과 증강용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는 소라페니브의 간암 치료 효과 증강용 조성물 또는 소라페니브와 함께 병용 투여할 수 있는 새로운 항암 보조제에 관한 것이다.
현재 암치료율을 높이기 위해 환자의 특성에 따라 여러 약물을 혼합하여 사용하는 개인 맞춤형 병용 요법이 여러 국가에서 연구되고 있으며, 한국에서도 서울 아산병원에서 급성 백혈병 치료에 기존의 항암제와 글리벡을 병용 투여하여 완치율을 높이고 있음을 보고하였다.
제2세대 표적 항암제는 기존의 1세대 화학 항암제의 부작용을 극복하고자 개발된 암 특이적 유전자 돌연변이를 표적화하고 제어하는 특수한 항암제이다. 제2세대 표적항암제인 소라페니브[Sorafenib, 넥사바(Nexavar)®]는, 약 50% 이상의 간암, 신장암, 갑상선암 환자에게서 공통적으로 활성화되는 세포성장 신호체계 Ras-Raf-Mek-Erk 및 신생혈관작용을 제어함으로써 암세포의 성장을 억제하는 사멸기전을 가지고 있다. 간암 치료에서 소라페니브는 인체의 정상 세포 및 조직에 독성이 없이 암세포만을 선택적으로 제어할 수 있으나, 의료비가 매우 높다는 단점이 있다. 소라페니브의 경우, 간암 환자의 평균 생존율을 약 3개월 연장시킨다고 알려져 있으나, 종양 성장을 촉진하는 유전자 및 세포 신호전달 체계의 재활성으로 인해, 장기 투여 시 소라페니브의 치료효과 제한성과 소라페니브 내성이 나타난다고 보고되었다.
최근에는 소라페니브(Sorafenib) 저항성 극복을 통한 치료효과 개선을 위해 기존의 1세대 항암제와 2세대 표적항암제를 이용한 결합 치료기술이 개발되고 있다. 현재 대부분의 기술이 임상시험 중에 있으나, 세포독성을 유발하는 항암제의 과다사용으로 부작용이 심하다고 알려지고 있다. 따라서, 소라페니브 치료효과 개선을 위한 결합 치료기술은 부작용을 최소화할 수 있는 소재로의 변화가 필요한 시점이라 할 수 있다. 따라서, 표적항암제의 사용을 줄이면서 효과를 증대시키고 항암제 저항성을 극복할 수 있는 연구가 천연물에서 유래한 추출물 또는 정제 분리된 물질을 중심으로 이루어지고 있다.
한편, 호장근(Polygonum cuspidatum)은 동아시아권에 널리 분포하는 천연식물로 전통 중국 약초에 사용된다. 호장근은 페놀성분이 풍부하며 무월경, 관절통, 황달, 농양, 화상 및 타박상 치료에 효과가 있음이 보고되어 있으며(Lin et al., 2012), 호장근의 주요 활성 성분은 에피카테킨(epicatechin) 및 레스베라트롤(resveratrol) 등을 함유하고 있다고 보고되어 있다.
현재까지 호장근에 의한 2세대 표적항암제의 간암세포 성장억제 강화 및 치료보조제로서의 가능성에 대한 연구는 보고된 바 없다. 이에 본 발명자들은 호장근 추출물이 소라페니브의 항암효과를 증가시킬 수 있는지 간암세포 및 간암세포(SK-HEP-1, HepG2, PLC/PRF5)를 주입한 동물모델을 이용해 조사한 결과 호장근 추출물은 소라페니브의 항암효과를 유효한 수준으로 증가시키는 것을 확인하였으며, 특히, 간암세포(SK-HEP-1)를 주입한 동물모델에서 생물전환 호장근 추출물과 소라페니브를 병행 투여한 결과 간암조직의 성장이 약 75%까지 억제됨을 확인하고, 또한 저농도의 소라페니브의 항암효과를 크게 증가시킬 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
KR 10-1833036
이연리 외. 환삼덩굴 메탄올 추출물의 in vitro 항산화 및 항암 활성. Korean J. Fod & Nutr. 2012, Vol. 25(2), p. 357-361
본 발명은 상기와 같은 문제를 해결하기 위해, 호장근(polygonum cuspidatum) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한 본 발명은 상기와 같은 문제를 해결하기 위해, 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 개선 효과 증강용 건강기능성식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
마지막으로 본 발명은 상기와 같은 문제를 해결하기 위해, 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 항암 보조제를 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기한 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 호장근(polygonum cuspidatum) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브(sorafenib)와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 호장근(polygonum cuspidatum) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브(sorafenib)와의 병용 투여를 통한 암 개선 효과 증강용 건강기능성식품 조성물을 제공한다.
마지막으로, 본 발명은 호장근(polygonum cuspidatum) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브(sorafenib)와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 항암 보조제를 제공한다.
본 발명은 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물에 관한 것으로, 상기 호장근 추출물을 소라페니브와 병용 투여하는 경우, 호장근 추출물과 소라페니브를 각각 단독 투여한 경우에 비하여 암세포 성장 저해 효과가 현저히 우수하고, 또한 소라페니브의 사용량을 기존의 적정 처리 농도보다 저농도로 줄일 수 있어 항암제 내성에 따른 문제점을 극복할 수 있어 항암 보조제로 활용될 수 있다.
도 1은 생물전환용 호장근 추출물의 간암세포 성장 저해 효과를 확인한 도이다.
도 2는 해조류 배양 원균 생물전환된 호장근과 소라페니브의 간암세포 성장억제 효과를 확인한 도이다.
도 3은 2차배양균 생물전환 호장근과 소라페니브의 간암세포 성장억제 효과를 확인한 도이다.
도 4는 동물모델에서 생물전환된 호장근 추출물과 소라페니브의 병행투여에 의한 간암의 성장억제 효과를 확인한 도이다.
본 발명은 호장근(polygonum cuspidatum) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브(sorafenib)와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 본 발명의 ‘조성물의 암 치료 효과 증강’에서 암은 간암, 신장암, 갑상선암, 폐암, 악성 흑색종 및 대장암으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 1종인 것을 특징으로 할 수 있고, 바람직하게는 간암일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 본 발명의 ‘조성물’은 소라페니브와 병용 투여 시 소라페니브와 별도로, 동시에, 또는 순차로 병용 투여되는 것을 특징으로 할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 본 발명의 ‘조성물’은 호장근 추출물:소라페니브의 투여 용량비가 중량비로 1:1 내지 50:1인 것을 특징으로 할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 개선 효과 증강용 건강기능성식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
마지막으로, 본 발명은 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 항암 보조제를 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 본 발명의 ‘항암 보조제’는 항암제의 암 세포 성장 억제 효과를 증진시키는 것을 특징으로 할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 본 발명의 ‘항암 보조제’는 소라페니브의 암 세포 성장 억제 효과를 증진시키는 것을 특징으로 할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 본 발명의 ‘항암 보조제’는 소라페니브와 병용 투여 시 소라페니브와 별도로, 동시에, 또는 순차로 병용 투여되는 것을 특징으로 할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 구현예로 본 발명을 상세히 설명하기로 한다. 다만, 하기 구현 예는 본 발명에 대한 예시로 제시되는 것으로, 당업자에게 주지 저명한 기술 또는 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명을 생략할 수 있고, 이에 의해 본 발명이 제한되지는 않는다. 본 발명은 후술하는 특허 청구범위의 기재 및 그로부터 해석되는 균등 범주 내에서 다양한 변형 및 응용이 가능하다.
또한, 본 명세서에서 사용되는 용어(terminology)들은 본 발명의 바람직한 실시 예를 적절히 표현하기 위해 사용된 용어들로서, 이는 사용자, 운용자의 의도 또는 본 발명이 속하는 분야의 관례 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서 본 용어들에 대한 정의는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 “포함”한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본 명세서 전체에 걸쳐, 특정 물질의 농도를 나타내기 위하여 사용되는 '%'는 별도의 언급이 없는 경우, 고체/고체는(w/w) %, 고체/액체는(w/v) %, 그리고 액체/액체는(v/v) %이다.
일 측면에서, 호장근(polygonum cuspidatum) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브(sorafenib)와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 추출물은 당업계에 공지된 추출 및 분리방법을 사용하여 천연으로부터 추출 및 분리하여 수득한 것을 사용할 수 있으며, 본 발명에서 정의된 “추출물”은 적절한 용매를 이용하여 호장근으로부터 추출한 것이며, 예를 들어, 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함한다. 상기 호장근으로부터 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 약학적으로 허용되는 유기용매라면 어느 것을 사용해도 무방하며, 물 또는 유기용매를 사용할 수 있으며, 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어, 정제수, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등을 포함하는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 혹은 혼합하여 사용할 수 있다. 추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다.
본 발명의 추출물의 제조방법에는 제한이 없으며, 공지되어 있는 어떠한 방법도 이용될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 조성물에 포함되는 추출물은 상기한 열수 추출 또는 용매 추출법으로 추출된 1차 추출물을, 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말상태로 제조할 수 있다. 또한 상기 1차 추출물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획을 얻을 수도 있다. 따라서 본 발명에 있어서 추출물은 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분리된 화합물, 분획 및 정제물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.
본 발명의 암 치료 효과 증강용 조성물이 약학적 조성물인 경우, 유효성분 이외에 보조제(adjuvant)를 추가로 포함할 수 있다. 상기 보조제는 당해 기술분야에 알려진 것이라면 어느 것이나 제한 없이 사용할 수 있으나, 예를 들어 프로인트(Freund)의 완전 보조제 또는 불완전 보조제를 더 포함하여 그 면역성을 증가시킬 수 있다.
본 발명에 따른 “약학적 조성물”은 유효성분을 약학적으로 허용된 담체에 혼입시킨 형태로 제조될 수 있다. 여기서, 약학적으로 허용된 담체는 제약 분야에서 통상 사용되는 담체, 부형제 및 희석제를 포함한다. 본 발명의 약학적 조성물에 이용할 수 있는 약학적으로 허용된 담체는 이들로 제한되는 것은 아니지만, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀전, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
제제화할 경우에는 통상 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 그러한 고형 제제는 유효성분에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면 전분, 칼슘 카르보네이트, 수크로스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 일반적으로 사용되는 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수용성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수용성용제, 현탁제로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브유와 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물은 개체에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식이 예상될 수 있는데, 예를 들면 경구, 정맥, 근육, 피하, 복강내 주사에 의해 투여될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 다양한 경구 또는 비경구 투여 형태로 제형화될 수 있다.
경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경질, 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및/또는 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및/또는 폴리에틸렌 글리콜)를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 정제는 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및/또는 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제를 함유할 수 있다. 상기 제형은 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다.
또한, 비경구 투여용 제형의 대표적인 것은 주사용 제제이며, 주사용 제제의 용매로서 물, 링거액, 등장성 생리식염수 또는 현탁액을 들 수 있다. 상기 주사용 제제의 멸균 고정 오일은 용매 또는 현탁 매질로서 사용할 수있으며 모노-, 디-글리세라이드를 포함하여 어떠한 무자극성 고정오일도 이러한 목적으로 사용될 수 있다.
또한, 상기 주사용 제제는 올레산과 같은 지방산을 사용할 수 있다.
일 측면에서, 호장근(polygonum cuspidatum) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브(sorafenib)와의 병용 투여를 통한 암 개선 효과 증강용 건강기능성식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 “건강기능성식품 조성물”은 유효성분인 호장근 추출물을 함유하는 것 외에 통상의 식품 조성물과 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨,소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 상술한 향미제는 천연 향미제(타우마틴), 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 상기 약학적 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등이 있다.
또한 상기 식품 조성물은 유효성분인 추출물 외에 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
본 발명의 건강기능성식품 조성물은, 정제,캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공될 수 있다. 본 발명에서 건강기능성식품 조성물이라 함은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능성식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전처(식약처)에 승인된 식품 및 식품첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다. 상기 '식품 첨가물 공전'에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료 제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 들 수 있다. 예를 들어, 정제 형태의 건강 기능성 식품은 본 발명의 유효성분을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강 기능성 식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다. 캅셀 형태의 건강 기능성 식품 중 경질 캅셀제는 통상의 경질 캅셀에 본 발명의 유효성분을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캅셀제는 본 발명의 유효성분을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다. 환 형태의 건강 기능성 식품은 본 발명의 유효성분과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다. 과립 형태의 건강 기능성 식품은 본 발명의 유효성분의 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.
일 측면에서, 호장근(polygonum cuspidatum) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브(sorafenib)와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 항암 보조제에 관한 것이다.
본 발명의 용어, “항암 보조제”는 항암제의 항암효과를 개선, 향상 또는 증대시킬 수 있는 제제로서, 그 자체로는 항암활성을 나타내지 않으나 항암제와 함께 사용될 경우, 상기 항암제의 항암효과를 개선, 향상 또는 증대시킬 수 있는 제제일 수 있다. 또한, 농도의존적인 항암활성을 나타내는 제제를 그 자체로는 항암활성을 나타내지 않은 수준으로 항암제와 함께 사용할 경우, 상기 항암제의 항암효과를 개선, 향상 또는 증대시킬 수 있는 제제일 수 있다.
항암 보조제의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 본 발명의 항암 보조제는 목적하는 바에 따라 복강 내 투여, 정맥 내 투여, 근육 내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구 투여, 비 내 투여, 폐 내 투여, 직장 내 투여될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 또한, 상기 항암 보조제는 활성 물질이 표적 세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 용어, “항암제 내성(drug-resistance)”은 항암제 치료 요법에 대하여 극히 낮은 감수성을 나타내어 상기 치료 요법에 의하여 암의 증세가 호전, 완화, 경감 또는 치료증상을 나타내지 않는 증상을 말한다. 항암제 내성은 암이 특정 항암제 치료 요법에 대하여 처음부터 내성을 가질 수 있고, 최초에는 내성을 나타내지 않았으나 긴 시간의 치료로 인하여 암세포의 성질이 변하여 동일한 치료제에 대해 더 이상 감수성을 나타내지 않게 되어 나타날 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 자세히 설명한다. 다만, 상기 실시예 및 실험예는 본 발명에 대한 예시로 제시되는 것으로, 당업자에게 주지 저명한 기술 또는 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명을 생략할 수 있고, 이에 의해 본 발명이 제한되지는 않는다. 본 발명은 후술하는 특허청구범위의 기재 및 그로부터 해석되는 균등 범주 내에서 다양한 변형 및 응용이 가능하다.
실시예 1. 재료 및 방법
1.1 실험재료
본 실험에 사용한 cell culture plate는 SPL사의 제품을 사용하였으며, 세포 생존률 분석을 위한 크리스탈바이올렛(crystal violet) solution은 Sigma aldrich korea 제품을 이용하였다.
1.2 호장근 추출물의 제조
건조된 호장근 500 g을 5 L의 증류수(D.W.; distilled water)에 100 ℃에서 2시간 추출하였다. 30분 휴지 후, 5 L의 D.W.를 추가하여 100 ℃에서 3시간 추출 후, 추출한 시료를 1시간 가량 휴지시킨 후, 여과하여 200 mL까지 농축하여 수득하였다.
실시예 2. 기능성 신소재를 활용한 호장근의 생물전환
2.1 락토바실러스 플란타륨( Lactobacillus plantarum )을 이용한 액상발효
건조된 호장근을 2 ~ 3cm로 절단하여 용매 DW에 넣고 압력상태에서 100℃로 약 4시간 동안 추출·농축하였다. 그 후, 호장근 농축액을 10배 희석하여 MRS배지를 넣고 Auto clave에서 125℃로 15분간 멸균시켜 액상배지를 만들었다. 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum)(1.0x1010 cfu/g)를 MRS 액체배지에서 28℃, 24시간동안 배양하고, 멸균된 액상배지에 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum)(1.0x1010 cfu/g)를 접종하여 쉐이킹 인큐베이터에서 28℃, 100rpm 으로 10일간 생물전환 시켰다.
2.2 단계적 공서배양 배양액을 이용한 액상발효
(1) 실험 방법
항균 활성을 가진 호장근의 섬유소 분해와 유효성분 추출 그리고 자체적 항염 기능을 보강하기 위해 단일 균주가 아닌 하기의 단계적 공서 배양을 통해 호장근 생물전환을 시도하였다.
(2) 해조류의 추출 및 회수
해조류 중 톳과 다시마 50 g을 적당한 크기로 절단 및 수세한 다음, 20배액 정제수에서 10시간 이상 침지하여 알긴 등을 용출 제거하였다. 그 후, 정제수 또는 80% 알코올(Alcohol) 1500 ㎖를 추출용매로 사용하여 80℃에서 2 ~ 10시간 추출하였다.
추출물을 여과하고, 진공농축 과정을 통하여 정제수 또는 알코올(Alcohol)을 분리 회수하고, 1차 추출 및 용매 회수과정을 통하여 300 ㎖의 1차 추출물을 수득하였다. 2차 추출과정으로 정제수 700㎖를 투입하여 90°c에서 3시간 추출 한 후, 여과하고 진공 농축하여 300㎖의 2차 추출물을 수득하였다.
(3) 올리브 잎의 추출 및 회수
건조 올리브 잎 50 g을 절단하여 50 ~ 80% 알코올(Alcohol) 용매 2000 ㎖를 투입 후 70 ~ 100℃ 에서 3 ~ 12시간 추출하였다. 그 후, 추출물을 진공 농축하여 용매 제거 후, 450 ㎖의 1차 추출액을 수득하고, 2차 추출과정으로 정제수 1000 ㎖ 투입하고 90℃에서 3시간 추출하였다. 추출물을 550 ㎖ 볼륨으로 진공농축하고, 여과하여, 잔여 알코올(Alcohol)을 회수 및 제거한 다음 1차 추출물과 혼합하여 1000 ㎖로 제조하였다.
(4) 해조류 배양 원균과 2차 배양균 생성을 위한 단계적 공서배양 발효 과정
상기 (2)의 1차 및 2차 추출물 각 300 ㎖ 용액과 정제수 400 ㎖, 알코올당 15 g, 과당 5 g을 혼합하여 1000 ㎖ 로 조제한 다음, 121℃ 로 30분 이상 멸균하였다. 효모균주 사카로마이세스(Saccharomyces spp.) 균종을 접종하고, 25℃ ~ 37℃에서 2 ~ 3일 간 1차 배양 후, 다시 락토바실러스(Lactobacillus spp.), 스트렙토코커스(Streptococcus sp.), 바실러스(Bacillus spp.) 및 로도슈도모나스(Rhodopseudomonas sp.)를 15℃ ~ 30℃로 10 ~ 30일 간 2차 공서배양 하였다(해조류 배양 원균).
위의 배양물에 상기 (3)의 추출물 1000 ㎖과 현미배아분말 200 g을 투입하여 15℃ ~ 25℃에서 10일 간 공서배양 하였다(2차 배양균). 배양 완료 후 Filter press에 여과하여 발효물을 제조하였다. 이때 공서배양을 위해 사용한 균주는 사카로마이세스로는 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스 엘립소이데우스(Saccharomyces ellipsoideus) 또는 사카로마이세스 코레아누스(Saccharomyces coreanus)을 사용하였고, 스트렙토코커스 속 균주로는 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)을 사용하였으며, 로도슈도모나스 균주로는 로도슈도모나스 캡술레이트(Rhodopseudomonas capsulate)을 사용하였다. 또한, 바실러스 속 균주로는 바실러스 리체니포르미스(Bacillus licheniformis), 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 바실러스 아밀로리퀴파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens)를 사용하였고, 락토바실러스 속 균주로는 락토바실러스 아시도필루스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 불가리쿠스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei) 을 사용하였다.
2.3 해조류 배양 원균을 이용한 액상발효
건조된 호장근을 2 ~ 3cm로 절단하여 용매 DW에 넣고 압력상태에서 100℃로 약 4시간 동안 추출 및 농축하여 호장근 농축액을 10배 희석하여 LB배지를 넣고 Auto clave에서 125℃로 15분간 멸균시켜 액상배지를 만들었다. 해조류 배양 원균 배양액(1.0x1010 cfu/g)을 LB 액체배지에서 28℃, 24시간동안 배양하였다. 멸균된 액상배지에 해조류 배양 원균 배양액(1.0x1010 cfu/g)을 접종하여 쉐이킹 인큐베이터에서 28℃, 100rpm 으로 10일간 생물전환 시켰다.
2.4 2차배양균을 이용한 액상발효
건조된 호장근을 2 ~ 3cm로 절단하여 용매 DW에 넣고 압력상태에서 100℃로 약 4시간 동안 추출 및 농축하여 호장근 농축액을 10배 희석하여 LB배지를 넣고 Auto clave에서 125℃로 15분간 멸균시켜 액상배지를 만들었다. 2차 배양균 배양액(1.0x1010 cfu/g)을 LB 액체배지에서 28℃, 24시간동안 배양하였다. 멸균된 액상배지에 2차 배양균 배양액(1.0x1010 cfu/g)을 접종하여 쉐이킹 인큐베이터에서 28℃, 100rpm 으로 10일간 생물전환 시켰다.
실시예 3. 간암세포 배양 및 간암세포 생존율 분석
3.1 실험방법
(1) 3종의 간암 세포주(HepG2, SK-Hep-1, PLC/PRF5)는 한국세포주은행(서울대학교 의과대학)에서 구입하였다. 세포배양에 필요한 FBS(fetal bovine serum)은 ATCC사의 제품을 사용하였다. 각각의 암세포는 heat inactivated FBS 10%와 penicillin/streptomycin을 첨가한 DMEM 배지에서 37℃, 5% CO2 의 Incubator에서 배양하였다.
(2) 세포 생존율 측정은 크리스탈바이올렛(crystal violet)(Sigma aldrich) solution을 이용하여 측정하였다. 각각의 암세포는 96 well plate에 3 x 105/ml로 well 당 0.1ml씩 분주하여 24 시간 동안 plate에 안정화 시킨 후 대조군에는 DMSO(dimethylsurfoxide), 실험군(생물전환 호장근 추출물, 소라페니브, 생물전환 호장근 추출물과 소라페니브 병행처리)에 적절한 약물을 처리하였다. 각각의 약물은 DMSO(dimethylsurfoxide)를 이용하여 녹였으며, 세포에 처리할 경우 최종 약물의 농도가 생물전환 호장근 추출물 12 ug/ml, 소라페니브 2 uM가 되도록 처리하였다. 약물을 처리한 세포는 2일 또는 3일 간 37℃와 5% CO2 조건에서 배양하였다. 배양된 세포는 PBS를 이용해 세척 후 4% Paraformaldehyde solution에서 10분 간 고정과정을 거쳤으며, 최종적으로 0.5% 크리스탈바이올렛(crystal violet) solution을 이용하여 10분 간 염색을 진행하였다. 염색된 세포를 하루 동안 실온에서 건조한 후 1% SDS(sodium dodecyl sulfate) solution을 이용하여 녹였으며, 세포성장률을 정량화하기 위해 absorbance reader를 이용하여 570nm의 흡광도로 분석하였다.
3.2 호장근 추출물의 간암세포 성장 저해 효과
생물전환용 호장근 추출물은 50, 100, 200, 300, 400 ug/ml농도로 48시간 동안 처리하였으며, 세포성장율의 분석은 크리스탈바이올렛(Crystal violet) 기법을 통해 분석하였다. 그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, 호장근 추출물에 의한 간암세포(HepG2, SK-HEP-1, PLC/PRF5)의 성장이 억제되는 것을 확인하였다. 상기 결과에서 100 ug/ml 이상 농도의 호장근 추출물에 의해 간암세포의 성장이 농도 의존적으로 억제되는 것을 확인하였다.
3.3 해조류 배양 원균 호장근과 소라페니브의 간암세포 성장억제 효과
3종의 간암세포는 ①대조군, ②소라페니브(4uM), ③해조류 배양 원균 호장근(400 ug/ml), ④소라페니브(4uM)와 해조류 배양 원균 호장근(400 ug/ml)의 병행처리 군으로 나누었으며, 각 물질은 간암세포에 2일 간 처리한 후 세포생존율을 분석하였다.
그 결과 도 2에 나타낸 바와 같이, 해조류 배양 원균 호장근(400 ug/ml)에 의해 간암세포(SK-HEP-1, HepG2, PLC/PRF5)의 성장이 억제되지 않는 것을 확인하였으며, 더욱이 소라페니브(넥사바, 4uM)에 의해 간암세포의 성장저해가 나타나지 않는다는 것을 확인하였다. 하지만 소라페니브(4uM)와 해조류 배양 원균 호장근(400 ug/ml)을 병행투여한 결과 3종의 간암세포 모두에서 약 20~30% 정도 간암세포의 성장이 억제되는 것을 확인하였다. 상기 실험결과를 통해 생물전환된 호장근 추출물과 소라페니브의 병행투여에 의해 간암세포 성장억제 효과가 있음을 확인하였다.
3.4 2차배양균 호장근과 소라페니브의 간암세포 성장억제 효과
2종의 간암세포(HepG2, PLC/PRF5)는 ①대조군, ②소라페니브(2uM), ③2차배양균 호장근(12 ug/ml), ④소라페니브(2uM)와 2차배양균 호장근(12 ug/ml)의 병행처리 군으로 나누었으며, 각 물질은 간암세포에 48 시간 동안 처리한 후 세포생존율을 분석하였다.
그 결과 도 3에 나타낸 바와 같이, 2차배양균 호장근(12 ug/ml)과 소라페니브(2 uM)를 단독으로 처리하였을 경우에는 간암세포(HepG2, PLC/PRF5)의 성장 억제 효과가 크지 않은 것을 확인하였다. 하지만, 소라페니브(2uM)와 2차배양균 호장근(12 ug/ml)을 병행처리한 결과 2종의 간암세포 모두에서 약 40-50% 정도 간암세포 성장이 억제되는 것을 확인하였다. 상기 결과를 통해 저농도의 2차배양균 생물전환된 호장근 추출물과 소라페니브의 병행투여에 의해 간암세포 성장억제 효과가 나타난다는 것을 확인하였다.
실시예 4. 동물실험 및 이종이식 모델
4.1 실험방법
동물실험을 위한 실험용 생쥐는 수컷의 NCr athymic nude mice(4 ~ 5주령)를 이용하였으며, 동물은 Charles River(Shin-Yokohama, Japan)사로부터 구입하였다. 인간유래 간암 세포주(SK-HEP-1)를 3X106세포수 만큼 NCr athymic nude mice의 옆구리 피하조직에 주입하였다. 종양이 적절한 크기로 자랄 수 있도록 동물을 3주 간 사육하였으며, 종양의 크기가 300 mm3가 되었을 때부터 대조군(Vehicle, n=7), 소라페니브 단독처리군(Sorafenib, n=7), 생물전환 호장근 추출물 단독처리군(P.C, n=7), 생물전환 호장근 추출물과 소라페니브 병행투여군(P.C+Sorafenib, n=7)으로 실험군을 나누어 약물투여를 시작하였다.
약물투여는 복강 내 주사를 통해 투여하였으며, 주입되는 용액의 전체양은 200 ul로 하였고, 약물 투여기간은 총 10일 간 투여하였다. 종양의 크기(볼륨)는 약물투여 후 매일 caliper를 이용하여 측정하였다. 종양의 크기(부피)는 아래 수식을 이용하여 계산되었다. [Volume = ab2/2; a = 최대 넓이, b = 직교 넓이]
4.2 생물전환 호장근 추출물(2차배양균 호장근)과 소라페니브 병행투여에 의한 간암의 성장억제 효과
인간유래 간암세포주(SK-HEP-1)를 피하조직에 이식한 동물 종양모델을 이용하였으며, 종양의 크기가 300 mm3 정도 되었을 때 동물을 각 7마리씩 4그룹(①대조군, ②소라페니브, ③생물전환 호장근 추출물, ④소라페니브와 생물전환 호장근 추출물 병행투여 군)으로 암맹분류 하였다. 분류된 4그룹의 실험용 쥐에게 생물전환 호장근 추출물(50 mg/kg)과 소라페니브(10 mg/kg)를 표시한 농도로 10일 간 복강 내 주사를 통해 투여하였다.
그 결과 도 4에서와 같이, 생물전환 호장근 추출물(50 mg/kg)과 소라페니브(10 mg/kg)를 단독으로 처리하였을 경우에는 대조군에 비해 SK-HEP-1세포 유래 간암조직의 성장이 약 5~10% 정도 억제되는 것을 확인하였으나, 소라페니브(10 mg/kg)와 생물전환 호장근 추출물(50 mg/kg)을 병행 투여한 결과 간암조직의 성장이 약 75% 정도 억제되는 것을 확인하였다.
따라서, 본 결과를 통해 생물전환된 호장근 추출물과 소라페니브의 병행투여가 간암성장 저해에 효과적이라는 것을 동물실험을 통해 확인하였으며, 더욱이, 본 결과를 통해 생물전환된 호장근이 저농도의 소라페니브(10 mg/kg)의 항암효과를 증가시킬 수 있다는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (10)

  1. 호장근 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 약학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 호장근 발효 추출물은 해조류 배양 원균 또는 2차배양균을 이용한 발효 추출물이며,
    상기 해조류 배양 원균은 톳 및 다시다 추출물에 사카로마이세스(Saccharomyces spp.), 락토바실러스(Lactobacillus spp.), 스트렙토코커스(Streptococcus sp.), 바실러스(Bacillus spp.) 및 로도슈도모나스(Rhodopseudomonas sp.) 중 어느하나 이상의 균종을 이용하여 공서배양한 것이고,
    상기 2차배양균은 상기 해조류 배양 원균을 이용한 발효물에 올리브 추출물 및 현미배아분말을 추가로 투입하여, 사카로마이세스(Saccharomyces spp.), 락토바실러스(Lactobacillus spp.), 스트렙토코커스(Streptococcus sp.), 바실러스(Bacillus spp.) 및 로도슈도모나스(Rhodopseudomonas sp.) 중 어느하나 이상의 균종을 이용하여 공서배양한 것인, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 약학적 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 암은 간암인 것을 특징으로 하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 약학적 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 조성물이 소라페니브와 병용 투여 시 소라페니브와 별도로, 동시에, 또는 순차로 병용 투여되는 것을 특징으로 하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 약학적 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    호장근 발효 추출물:소라페니브의 투여 용량비가 중량비로 1:1 내지 50:1인 것을 특징으로 하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 약학적 조성물.
  6. 제1항에 있어서,
    약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제 및 희석제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 약학적 조성물.
  7. 호장근 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 개선 효과 증강용 건강기능성식품 조성물에서,
    상기 호장근 발효 추출물은 해조류 배양 원균 또는 2차배양균을 이용한 발효 추출물이며,
    상기 해조류 배양 원균은 톳 및 다시다 추출물에 사카로마이세스(Saccharomyces spp.), 락토바실러스(Lactobacillus spp.), 스트렙토코커스(Streptococcus sp.), 바실러스(Bacillus spp.) 및 로도슈도모나스(Rhodopseudomonas sp.) 중 어느하나 이상의 균종을 이용하여 공서배양한 것이고,
    상기 2차배양균은 상기 해조류 배양 원균을 이용한 발효물에 올리브 추출물 및 현미배아분말을 추가로 투입하여, 사카로마이세스(Saccharomyces spp.), 락토바실러스(Lactobacillus spp.), 스트렙토코커스(Streptococcus sp.), 바실러스(Bacillus spp.) 및 로도슈도모나스(Rhodopseudomonas sp.) 중 어느하나 이상의 균종을 이용하여 공서배양한 것인,
    소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 개선 효과 증강용 건강기능성식품 조성물.
  8. 호장근 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 항암 보조제에서,
    상기 호장근 발효 추출물은 해조류 배양 원균 또는 2차배양균을 이용한 발효 추출물이며,
    상기 해조류 배양 원균은 톳 및 다시다 추출물에 사카로마이세스(Saccharomyces spp.), 락토바실러스(Lactobacillus spp.), 스트렙토코커스(Streptococcus sp.), 바실러스(Bacillus spp.) 및 로도슈도모나스(Rhodopseudomonas sp.) 중 어느하나 이상의 균종을 이용하여 공서배양한 것이고,
    상기 2차배양균은 상기 해조류 배양 원균을 이용한 발효물에 올리브 추출물 및 현미배아분말을 추가로 투입하여, 사카로마이세스(Saccharomyces spp.), 락토바실러스(Lactobacillus spp.), 스트렙토코커스(Streptococcus sp.), 바실러스(Bacillus spp.) 및 로도슈도모나스(Rhodopseudomonas sp.) 중 어느하나 이상의 균종을 이용하여 공서배양한 것인,
    소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 항암 보조제.
  9. 제8항에 있어서,
    항암제의 암 세포 성장 억제 효과를 증진시키는 것을 특징으로 하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 항암 보조제.
  10. 제8항에 있어서,
    상기 항암 보조제는 소라페니브와 병용 투여 시 소라페니브와 별도로, 동시에, 또는 순차로 병용 투여되는 것을 특징으로 하는, 소라페니브와의 병용 투여를 통한 암 치료 효과 증강용 항암 보조제.
KR1020210002411A 2019-10-24 2021-01-08 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물 KR102299687B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020210002411A KR102299687B1 (ko) 2019-10-24 2021-01-08 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020190133074A KR102261589B1 (ko) 2019-10-24 2019-10-24 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물 및 이의 제조방법
KR1020210002411A KR102299687B1 (ko) 2019-10-24 2021-01-08 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020190133074A Division KR102261589B1 (ko) 2019-10-24 2019-10-24 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물 및 이의 제조방법

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20210049029A KR20210049029A (ko) 2021-05-04
KR102299687B1 true KR102299687B1 (ko) 2021-09-08

Family

ID=75913977

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020210002411A KR102299687B1 (ko) 2019-10-24 2021-01-08 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102299687B1 (ko)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101833036B1 (ko) * 2017-09-05 2018-02-28 재단법인 통합의료진흥원 금은화 추출물을 포함하는 간암 또는 신장암 치료 또는 예방용 조성물

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100239879B1 (ko) * 1997-11-05 2000-02-01 김상조 간암 예방 및 치료용 생약제
KR20190111592A (ko) * 2018-03-23 2019-10-02 삼일제약주식회사 호장근을 함유하는 식품 조성물 및 그의 새로운 제조방법

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101833036B1 (ko) * 2017-09-05 2018-02-28 재단법인 통합의료진흥원 금은화 추출물을 포함하는 간암 또는 신장암 치료 또는 예방용 조성물

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Do, Jeong-Ryong 외. 생약재의 항균, 항고혈압 및 항암 활성. Korean Journal of Food Science and Technology. 2005, Vol. 37(2), pp. 206-213
이연리 외. 환삼덩굴 메탄올 추출물의 in vitro 항산화 및 항암 활성. Korean J. Food & Nutr. 2012, Vol. 25(2), pp. 357-361*

Also Published As

Publication number Publication date
KR20210049029A (ko) 2021-05-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101374026B1 (ko) 곰팡이와 유산균으로 동시 발효하여 생물전환 사포닌이증가된 삼 발효물
US7645465B2 (en) Method of preparing a pharmaceutical composition comprising fermented ginseng
KR101851195B1 (ko) 발효 뽕잎, 발효 뽕잎 추출물 및 이의 용도
TWI679980B (zh) 肥胖抑制組成物
KR20140130286A (ko) 포공영 추출물을 포함하는 우울증 예방 또는 치료용 조성물
KR20120134166A (ko) 미량 진세노사이드를 고농도로 함유하는 인삼 추출물의 제조방법
US20030190377A1 (en) Novel use of the extract of processed Panax genus plant and saponin compound isolated therefrom
KR101909999B1 (ko) 신규 류코노스톡 메센테로이데스 균주 및 이를 이용한 암 예방 또는 치료용 조성물
KR101651082B1 (ko) 갈근엑스 발효물을 함유한 간손상 보호용 조성물
KR100848686B1 (ko) 유산균으로 감마-아미노부틸산과 생물전환 사포닌을 동시에강화한 발효 인삼 조성물
KR102299687B1 (ko) 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물
KR102261589B1 (ko) 호장근 추출물을 유효성분으로 포함하는 소라페니브의 암 치료 효과 증강용 조성물 및 이의 제조방법
KR20110093477A (ko) 발효 홍삼을 포함하는 항암 조성물
KR20200012363A (ko) 어수리 지하부 및 사상자 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR101470347B1 (ko) 황금엑스 발효물을 함유한 간손상 보호용 조성물
KR101683030B1 (ko) 발효 울금 추출물의 제조방법 및 이의 추출방법에 의해 얻어진 추출물을 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물
KR101816601B1 (ko) 오가피 열매 유래 물질이 포함된 혈관노화 예방 또는 억제용 약학적 조성물 및 그의 제조방법
KR101514284B1 (ko) 땃두릅나무 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 암 예방 및 치료용 약학적 조성물
KR20160082824A (ko) 복분자와 홍삼 발효 추출물의 혼합액을 유효성분으로 하는 지질대사 개선 및 항비만용 조성물
KR101624293B1 (ko) 동과자 추출물 또는 동과자 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역증강용 조성물
KR101728593B1 (ko) 간 숙취해소용 건강기능식품 조성물
KR102624035B1 (ko) 비트 및 양배추 추출물의 발효물을 포함하는 항암 조성물
KR100538983B1 (ko) 생약추출물이 함유된 간기능 개선용 약학 조성물
KR101209646B1 (ko) 야베스 추출물을 포함하는 면역세포증가 또는 암세포 전이 억제 또는 간염 바이러스 증식 억제용 약학적 조성물
KR20110080678A (ko) 팥꽃나무에서 분리한 아피게닌을 유효성분으로 함유하는 치주인대세포에서 항염 효과를 나타내는 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant